第一篇：2013年中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院基因工程概論考博試題

2013年中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院基因工程概論考博試題

一、名詞解釋（20分）：

尾部序列、分子伴侶、銜接體、重復(fù)基因、噬菌粒載體、RNA差異表達(dá)、啟動(dòng)子封堵、反式作用、拓?fù)洚悩?gòu)酶、選擇性剪接。

二、簡(jiǎn)答題（30分）：

1、寫(xiě)出原核生物和真核生物mRNA的序列和結(jié)構(gòu)；

2、基因剔除的概念和原理；

3、RNA編輯的概念和方式；

4、基因5’側(cè)翼序列的功能；

5、噬菌體展示載體的概念和在基因工程中的運(yùn)用。

三、論述題（50分）：

1、上世紀(jì)70年代基因工程的理論基礎(chǔ)和技術(shù)基礎(chǔ)是什么？

2、在大腸桿菌中表達(dá)真核基因的優(yōu)缺點(diǎn)和解決辦法？

3、mRNA差異顯示的原理和優(yōu)缺點(diǎn)？

4、解釋蛋白質(zhì)剪接、內(nèi)含肽、外顯肽的概念？

5、轉(zhuǎn)基因水稻產(chǎn)業(yè)化前景？

第二篇：2014年中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院分子生物學(xué)考博試題

2014年中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院分子生物學(xué)考博試題

一、名詞解釋（20分）：

1、Immunity of phage2、PrP SC3、3’-UTR4、VNTR5、Allele6、restriction map7、blue-white screening8、wobble hypothesis9、The stringent factor RelA10、siRNA

二、簡(jiǎn)答題（30分）：

1、如何添加Poly（A），Poly（A）的功能及其應(yīng)用？

2、DNA指紋分析技術(shù)

3、抗生素如何在蛋白質(zhì)合成的特殊階段抑制其合成？

4、舉例說(shuō)明限制位點(diǎn)多態(tài)性的遺傳規(guī)律符合孟德?tīng)柖伞?/p>

三、論述題（50分）：

1、繪制λ噬菌體的線狀圖譜，試陳述溶源狀態(tài)、裂解狀態(tài)的形成原因。

2、蛋白質(zhì)組學(xué)研究中所用的方法及原理。

3、何種因素負(fù)責(zé)T-DNA進(jìn)入、浸染植物？

4、決定人類血型的分子機(jī)制？

5、反義RNA的作用機(jī)理及其生物學(xué)意義。

第三篇：基因工程原理中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院究生院

《基因工程原理》復(fù)習(xí)題

一、名詞解釋

1.原核基因（Prokaryotic

gene）：由原核生物（如大腸桿菌）基因組編碼的基因，以及高等生物細(xì)胞器線粒體基因組和葉綠體基因組等編碼的基因，統(tǒng)稱原核基因。

2.真核基因（Eukaryotic

gene）：真核生物基因組DNA編碼的基因,以及感染

真核細(xì)胞的DNA病毒和反轉(zhuǎn)錄病毒基因組編碼的基因，統(tǒng)稱真核基因。

3..前導(dǎo)序列（Leader

sequence）：又叫前導(dǎo)序列區(qū)或5＇-非翻譯區(qū)（5＇-UTR），系指位于mRNA5＇-起始密碼子之前的一段長(zhǎng)數(shù)百個(gè)核苷酸的不翻譯的RNA區(qū)段。

4.尾隨序列（Tai1er

sequence）：又稱尾隨序列區(qū)或3＇-非翻譯區(qū)（3＇-UTR），系指位于mRNA3＇-終止密碼子之后一段100多核苷酸的不翻譯的RNA區(qū)段。

復(fù)制子（Replicon）：

指有一個(gè)復(fù)制起始區(qū)（oriC）和起始基因的DNA復(fù)制單元。例如細(xì)菌染色體、病毒基因組、質(zhì)粒基因組等，凡其DNA能夠進(jìn)行復(fù)制的遺傳單元，均稱復(fù)制子。真核細(xì)胞基因組的復(fù)制子是指含有一個(gè)復(fù)制起始位點(diǎn)的DNA（RNA）的復(fù)制子特稱復(fù)制單元。

6.增強(qiáng)子

（Enhancer）：又叫增強(qiáng)子序列或增強(qiáng)子元件，是真核基因中發(fā)現(xiàn)的一

種特異序列，能夠在距離目標(biāo)基因50kb以上的位置，從上游或下游的不同位置及方向增強(qiáng)該基因的轉(zhuǎn)錄活性。

7.沉默子（Silencer）在真核基因啟動(dòng)子中除了增強(qiáng)子之外，沉默子同樣也是一種可遠(yuǎn)距離調(diào)控相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄活性的順式元件。與增強(qiáng)子一樣，沉默子也能夠從啟動(dòng)子的上游、下游甚至是基因內(nèi)部三種不同的位置以及正向或反向，影響相關(guān)基因啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄起始效率。同時(shí)沉默子往往是以組織特異性或時(shí)間特異的作用方式，控制基因的表達(dá)作用。但與增強(qiáng)子的功能效應(yīng)相反，沉默子只能抑制而不能激活相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄起始活性。

8.絕緣子（Insulator）亦即是增強(qiáng)子活性的物理邊界元件（physical

boundary

element），它是一段能夠抑制或隔離增強(qiáng)子功能效應(yīng)的順式轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)序列。絕緣子的這種功能作用的發(fā)揮，取決于它所在的位置。如果它是位于增強(qiáng)子和啟動(dòng)子之間，便能夠阻斷增強(qiáng)子的功能效應(yīng)；但當(dāng)它是位于增強(qiáng)子-啟動(dòng)子區(qū)段的外側(cè)，便不能夠阻斷增強(qiáng)子的功能作用。因此也有的作者將絕緣子稱為隔離鄰近增強(qiáng)子對(duì)啟動(dòng)子激活作用的中間隔柵（neutral

barrier）。絕緣子的作用是與特異結(jié)合蛋白IBP的結(jié)合發(fā)揮作用。它的意義：能阻斷增強(qiáng)子超遠(yuǎn)距離的激活作用影響生物的發(fā)育順序；真核絕緣子能保護(hù)順序表達(dá)以防無(wú)義基因的表達(dá)。

9.調(diào)節(jié)子（Regulon）：指在大腸桿菌基因組中，其表達(dá)活性受同一種基因編碼的蛋白質(zhì)協(xié)同調(diào)節(jié)的，一組不連續(xù)相鄰排列的結(jié)構(gòu)基因。調(diào)節(jié)子與操縱子不同之處在于，后者的結(jié)構(gòu)基因是彼此相鄰排列的，而調(diào)節(jié)子的結(jié)構(gòu)基因則是分散于染色體的不同部位，甚至是位于不同染色體上

10.基因差異表達(dá)（Differential

expression

of

gene）：

真核生物在每一特定的發(fā)育階段，或是某一特定類型的細(xì)胞中，一般只有15%的基因進(jìn)行表達(dá)。這種在生物個(gè)體發(fā)育的不同階段，或是在不同組織和細(xì)胞中，發(fā)生不同基因按時(shí)間、空間進(jìn)行有序表達(dá)的方式，叫基因的差異表達(dá)。

11.基因內(nèi)互補(bǔ)（Intragenic

complementaion）：

系指編碼同樣的多肽序列，但又各具一個(gè)不同

突變的兩個(gè)基因聯(lián)合產(chǎn)生出一種有功能活性的蛋白質(zhì)多肽的生化過(guò)程。

12.基因圖（Gene

map）：描述染色體或DNA分子上不同基因的排列順序及其間隔距離的線性圖。它包括遺傳圖和物理圖兩種。

遺傳圖（genetic

map）：是根據(jù)遺傳重組實(shí)驗(yàn)繪制的，用來(lái)表示同一染色體上不同基因（或特定DNA序列區(qū)）之間的排列順序及其相對(duì)距離的線性圖。其圖距用厘摩(cM)表示。

物理圖（Physical

map）：以精確的物理長(zhǎng)度為單位，一般以核苷酸數(shù)表示不同基因在染色體或DNA分子上的排列順序及其間隔距離的實(shí)際長(zhǎng)度的線性圖。

13.基因簇（Gene

cluster）與基因家族（Gene

family）：系指原核生物基因組中，由不同或相關(guān)的一組相合基因組成的一種特殊的排列組合方式。同一基因簇的各個(gè)基因在遺傳上往往是緊密連鎖，它們可以是屬于同一操縱子的不同結(jié)構(gòu)基因，也可以是不同操縱子的不同結(jié)構(gòu)基因；它們可以是同一基因家族的不同成員，也可以是不同基因家族的不同成員。

基因家族（Gene

family：由同一生物中同一始祖基因經(jīng)過(guò)重復(fù)突變進(jìn)化而來(lái)，具相似的結(jié)構(gòu)、相似的產(chǎn)物和相似的功能。它們的特征：（1）多重姓；（2）緊密連鎖（3）表型及功能方面的相關(guān)性；（4）核苷酸序列的一致性。

14.基因克?。℅ene

cloning）：基因克隆又叫DNA克隆，它是指將外源基因插入到克隆載體上形成重組DNA分子群體，并轉(zhuǎn)化到大腸桿菌寄主細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制繁殖，以便從大分子DNA或DNA片段中分離純化目的基因或特定的DNA片段的實(shí)驗(yàn)操作，叫做基因克隆或DNA克隆。

15.融合基因（Fusion

gene）：亦稱重組基因、雜種基因或嵌合基因。通常是指通過(guò)自發(fā)突變形成或利用DNA重組技術(shù)構(gòu)建的。是一類具有來(lái)自兩個(gè)或兩個(gè)以上不同基因的核苷酸序列的新型基因。融合基因可以形成融合蛋白，但融合基因不一定都形成融合蛋白。

16.基因劑量

（Gene

dosage）：指的是一個(gè)細(xì)胞所擁有的同一種基因的拷貝數(shù)。

基因劑量實(shí)驗(yàn)是建立在局部二倍體菌株的基礎(chǔ)上，專門來(lái)檢測(cè)基因拷數(shù)的增加，對(duì)其編碼產(chǎn)物合成速率之影響的分子遺傳學(xué)的研究技術(shù)。

17.裂口（Gap）：雙鏈DNA分子上的某一條鏈丟失一個(gè)或連續(xù)數(shù)個(gè)核苷酸造成的單鏈斷裂。

缺口（Nick）：雙鏈DNA分子的某一條鏈的相鄰核苷酸之間丟失一個(gè)磷酸二酯鍵造成的單鏈斷裂。

18.切丁酶（Dicer）：亦有人譯為RNAi核酸酶。是一種RNaseⅢ樣（RNaseⅢ

like）的核酸內(nèi)切酶。能把雙鏈RNA（dsRNA）分子切割成21~23bp的小分子干擾RNA

。這是一種需要ATP的過(guò)程。

19.異裂酶（Neoschizomer）：

指一組來(lái)源不同，但具有相同的識(shí)別序列和不同的切割位點(diǎn)的一組核酸內(nèi)切限制酶稱異裂酶

20.同尾酶（Isocaudarner）：一組來(lái)源不同，識(shí)別序列各異，但能夠切割形成相同黏性末端的核酸內(nèi)切酶。

21.同裂酶

(Isoschizomer)

是一類來(lái)源不同，而識(shí)別序列相同，切割能產(chǎn)生相同的黏性末端的核酸內(nèi)切酶。

22.拓樸異構(gòu)酶（T0poisomerase）：在原核和真核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的，具有催化單鏈DNA或雙鏈DNA產(chǎn)生瞬時(shí)斷裂的功能。具有切割與連接的雙重功能，導(dǎo)致雙鏈構(gòu)型的改變。在抗癌研究中，發(fā)展抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶的活性的抗癌藥物好的開(kāi)發(fā)研制具有重要意義。

23.質(zhì)粒DNA遷移作用（Plasmid

mobilization）：指由共存的接合型質(zhì)粒引發(fā)的非接合型質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移過(guò)程。由于結(jié)合型質(zhì)粒的mob基因產(chǎn)生的遷移蛋白可作用于與其共存的非遷移型質(zhì)粒的nic位點(diǎn)所產(chǎn)生的遷移作用，稱質(zhì)粒DNA遷移作用。

24.柯斯載體（Cosmid）：是一類人工構(gòu)建的，含有λ噬菌體DNA的cos序列和質(zhì)粒復(fù)制子的特殊類型的質(zhì)粒載體。它既具有λ噬菌體的特性，也具有質(zhì)粒載體的特性。并且具有高容量的克隆能力，其DNA可以體外被包裝到噬菌體的外殼內(nèi)。

25.噬菌體展示載體（Phage

display

vector）：根據(jù)單鏈?zhǔn)删w表面表達(dá)的蛋白質(zhì)或多肽的噬菌體表面展示技術(shù)，當(dāng)把外源基因插入在該載體的基因Ⅲ或基因Ⅷ的編碼序列中，正確表達(dá)出融合蛋白的這類特殊用途的噬菌體載體。

26.穿梭質(zhì)粒載體（S

huttle

plasmid

vector）：

簡(jiǎn)稱穿梭載體，或叫雙功能載體。是一類人工構(gòu)建具有兩種不同的復(fù)制起點(diǎn)和選擇記號(hào)，因而可在兩種不同寄主細(xì)胞（如大腸桿菌和釀酒酵母）中進(jìn)行復(fù)制與存留的質(zhì)粒載體。

27.M13克隆體系的優(yōu)點(diǎn)：

a.可方便地產(chǎn)生外源單鏈DNA；

b.重組子可用組織化學(xué)方法檢測(cè)；

c.lacZ基因上具多克隆位點(diǎn)，便于外源DNA插入；

d.可定向克隆外源基因；

28.質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

a.具復(fù)制起點(diǎn)（ori）；

b.具抗生素抗性基因（選擇用）；

c.具若干核酸內(nèi)切酶的單切點(diǎn)；

d.較小的分子量和較高的拷貝數(shù)。

啟動(dòng)子封堵（Promoter

occlusion）：由一個(gè)上游啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的轉(zhuǎn)錄作用，當(dāng)其通讀過(guò)下游啟動(dòng)子時(shí)，便會(huì)使該啟動(dòng)子的功能受到抑制的現(xiàn)象，叫做啟動(dòng)子封堵。

30.Ⅱ型核酸內(nèi)切酶的特點(diǎn)：a.不具有多亞基結(jié)構(gòu)（單一切割功能）；b.能識(shí)別雙鏈DNA分子中靶子序列c.切割形成不同長(zhǎng)度的限制片段;

d由于不對(duì)稱切割，能形成粘性末端;

e

酶切反應(yīng)不需能量ATP。

31.表觀遺傳信息層（Epigenetic

layer

of

information）：它是貯藏在圍繞DNA分子周圍并與DNA分子結(jié)合的蛋白質(zhì)及化學(xué)物質(zhì)中。表觀遺傳信息如同RNA基因一樣令人困惑，甚至比RNA基因更為重要。

32.分子伴侶（Molecular

chaperone）：

專指一類多功能蛋白質(zhì)，它能促使某些蛋白質(zhì)按正確方式組裝或折疊，而它本身卻不是最終形成功能蛋白質(zhì)的組成部分，此類蛋白質(zhì)特稱為分子伴侶。

33.RNA干擾（RNAi）：近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)一些小分子量的外源雙鏈RNA進(jìn)入寄主細(xì)胞后，便可促進(jìn)與其同源的內(nèi)源mRNA發(fā)生特異性的降解作用，從而高效而特異地阻斷體內(nèi)相應(yīng)基因的活性，在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮基因的剔除作用。這種現(xiàn)象叫RNA干擾。

34.生命體遺傳信息的三個(gè)層次是：

第一層次是由編碼蛋白質(zhì)的基因組成，如人類基因組的基因編碼序列占總DNA序列的不到2%；

第二層次：僅由編碼RNA而不編碼蛋白質(zhì)的基因組DNA組成。這一部分DNA叫做非編碼的DNA，它的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物稱為非編碼的RNA（不包括tRNA、rRNA和snoRNA），其相應(yīng)的基因稱為RNA基因。這類基因隱藏在巨大的非編碼的染色體DNA序列當(dāng)中。因此過(guò)去亦被稱為隱藏基因（cryptic

gene）；

第三層次：表觀遺傳信息層（epigenetic

layer

of

information）。

它貯藏于圍繞在DNA分子周圍并與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)及其他化學(xué)物質(zhì)中。表觀遺傳信息如同RNA基因一樣令人興奮，甚至比RNA基因更為重要。

35.全局調(diào)節(jié)（Global

regulation

system）

原核生物如細(xì)菌細(xì)胞為了適應(yīng)環(huán)境條件的大范圍的重要變化，單靠一個(gè)操縱子作局部的調(diào)節(jié)顯然是不夠的，它還需一種能夠同時(shí)調(diào)節(jié)許多相關(guān)操縱子的，特殊調(diào)節(jié)體系。這種調(diào)節(jié)體系稱全局調(diào)節(jié)體系。它是由許多單一的調(diào)控途經(jīng)，交織組成的一種復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，來(lái)應(yīng)付外界環(huán)境的壓力的同時(shí)，能適時(shí)快速作出反應(yīng)。

共線性

（Collinearity）：所謂共線性包括如下4種不同的情況：

其一是指位于同一條染色體DNA分子或是同一條DNA分子上，不同基因的位置排列關(guān)系。這種情況有時(shí)特稱為同線性（Synteny）。

其二是指不同物種的相關(guān)染色體DNA分子之間，基因排列順序的一致性。

其三是指位于DNA分子與其轉(zhuǎn)錄本RNA分子之間，核苷酸堿基排列順序的一

致性。

其四是指位于DNA分子或mRNA分子上遺傳密碼子的排列順序，與相應(yīng)的蛋白質(zhì)多肽鏈上氨基酸排列順序之間的一致性。

37.基因工程誕生的理論基礎(chǔ)和技術(shù)基礎(chǔ)是什么？

（1）

理論基礎(chǔ)：

（a）

上世紀(jì)40年代明確了遺傳物質(zhì)攜帶者是DNA，而不是蛋白質(zhì);明確了基因的載體。

（b）上世紀(jì)50年代相繼揭示了DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型和半保留復(fù)制機(jī)理，從而解決了基因的復(fù)制。

（c）

上世紀(jì)50

世紀(jì)末和60年代初相繼提出了中心法則和操縱子學(xué)說(shuō)并成地破譯了遺傳密碼子，從而解決了遺傳信息的流向和基因表達(dá)問(wèn)題。

（2）

技術(shù)基礎(chǔ)：

（a）

DNA分子的體外切割與連接技術(shù);

（b）

DNA測(cè)序技術(shù);

（c）

基因克隆的載體的發(fā)展與應(yīng)用;

（d）大腸桿菌的轉(zhuǎn)化技術(shù);

（e）瓊酯糖凝膠電泳技術(shù);

（f）

核酸雜交技術(shù)。

38.RNA編輯（RNA

editing）：

在有些基因的轉(zhuǎn)錄后加工過(guò)程中，會(huì)有大量的尿嘧啶核苷酸（Us）加入到前體mRNA（pre-mRNA）的核苷酸序列中去，或是從pre-mRNA的核苷酸序列中刪除下來(lái)，甚至還會(huì)發(fā)生核苷酸堿基的取代反應(yīng)。這種在RNA轉(zhuǎn)錄本成熟、修飾過(guò)程中發(fā)生的核苷酸的加入、刪除或取代的現(xiàn)象，叫做RNA編輯（RNA

editing）。

如此堿基飾變的結(jié)果，使得RNA轉(zhuǎn)錄本的核苷酸序列與其對(duì)應(yīng)的DNA鏈的核苷酸編碼序列并不完全匹配。由此飾變的mRNA所轉(zhuǎn)譯的蛋白質(zhì)多肽鏈的氨基酸序列結(jié)構(gòu)，便與按照其基因的核苷酸序列推導(dǎo)出來(lái)的有所差別。

39（1）微小RNA(microRNA，miRNA)：

是在真核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一類調(diào)節(jié)型的、非編碼蛋白質(zhì)的、小分子量的單鏈RNA。miRNA是由內(nèi)源基因組編碼轉(zhuǎn)錄成的Pri-miRNA被果蠅酶切割生成70-80nt的pre-miRNA，經(jīng)自我折疊成雙鏈的發(fā)夾結(jié)構(gòu)，進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后被切丁酶進(jìn)一步切割并除去單鏈環(huán)，形成21～25bp雙鏈體(miRNA：miRNA*)分子，雙鏈體解離出單鏈的存留鏈miRNA同目標(biāo)mRNA結(jié)合阻止翻譯，另一條消失鏈miRNA*被降解。

39（2）miRNA與siRNA的比較

相似點(diǎn)：

（1）

分子結(jié)構(gòu)十分相似。長(zhǎng)度均為21～25的小分子量RNA、5，-端都具有P基團(tuán)、3，-端都具有0H-基團(tuán)；

（2）

都通過(guò)與RISC結(jié)合的方式發(fā)揮功能作用；

（3）

終極作用都是抑制mRNA的翻譯活性，而導(dǎo)致基因沉默。

不同點(diǎn)：

（1）

生物合成途徑不同；

siRNA主要是由外源導(dǎo)入的雙鏈(dsRNA)經(jīng)切割產(chǎn)生的、少數(shù)的是由內(nèi)源dsRNA切割產(chǎn)生。

miRNA則不然，它是由內(nèi)源基因組編碼轉(zhuǎn)錄成Pri-miRNA，被果蠅酶切割生成70-80nt的pre-miRNA，由于pre-miRNA存在回文結(jié)構(gòu)自我折疊成雙鏈的發(fā)夾結(jié)構(gòu)→由輸出蛋白的作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后被切丁酶進(jìn)一步切割加工成21～25bp小片段并除去單鏈環(huán)形成雙鏈miRNA，雙鏈體(miRNA：miRNA*)分子，解離出單鏈的存留鏈miRNA同目標(biāo)mRNA結(jié)合阻止翻譯，另一條消失鏈miRNA*被降解。

（2）抑制翻譯的方式不同；

siRNA是通過(guò)與目標(biāo)mRNA編碼區(qū)中的靶序列的結(jié)合引導(dǎo)RISC復(fù)合物中的切段酶，從靶序列的中間部位切割斷裂mRNA分子，從而抑制翻譯。

miRNA與此不同，它是通過(guò)與目標(biāo)基因mRNA的3，-UTR序列中的結(jié)合位點(diǎn)的序列互補(bǔ)作用，促使mRNA失去翻譯活性。因此在miRNA作用過(guò)程中，雖然目標(biāo)蛋白質(zhì)的數(shù)量減少了，但其mRNA的豐度卻沒(méi)有明顯的變化。

（3）堿基互補(bǔ)水平不同；

siRNA與靶序列之間核苷酸堿基的互補(bǔ)水平達(dá)百分之百的完全匹配。

但miRNA則依材料來(lái)源的差異而有兩種不同的情況。植物mRNA與靶序列核苷酸堿基也是百分之百完全匹配的、而動(dòng)物的miRNA與其結(jié)合位點(diǎn)的核苷酸堿基則不是完全互補(bǔ)的，兩者之間存在著若干非配對(duì)的堿基。

40.微量堿法分離純化質(zhì)粒DNA的原理有如下幾點(diǎn)：

（1）根據(jù)質(zhì)粒DNA與染色體線性

DNA在拓?fù)鋵W(xué)上的差異。質(zhì)粒DNA（cccDNA）是共價(jià)閉合雙鏈超盤旋構(gòu)型的小分子DNA，而細(xì)胞染色體DNA在細(xì)胞裂解分離過(guò)程中斷裂成線性DNA（LDNA），雖然在化學(xué)本質(zhì)上沒(méi)有本質(zhì)區(qū)別，但在高級(jí)結(jié)構(gòu)拓?fù)鋵W(xué)上存在差異。

（2）

差異堿變性，在pH

12.0-12.5高pH條件下，線性的DNA容易變性解鏈，而質(zhì)粒DNA不易變性或很少變性。

（3）

酸復(fù)性，在pH4.8條件下，cccDNA很快復(fù)性，而線性的染色體DNA不可逆的變性并與蛋白質(zhì)、RNA形成沉淀物，通過(guò)離心可以把LDNA與cccDNA分開(kāi)。cccDNA在上清液中。

（4）

酒精沉淀cccDNA,以2.5倍的95%

酒精沉淀質(zhì)粒DNA，(濃度為66%沉淀最好)。保存在TE（pH8.o）緩沖液中，放置在－20Co下保存?zhèn)溆谩?/p>

41.圖示λZAP載體的組成結(jié)構(gòu)及優(yōu)點(diǎn)：

T3-MCS-

T7

___________________________＼／____________________

cos_｜

｜

｜

pBluescriptSK噬菌粒

｜

｜

___｜

｜______｜____｜________________________｜______｜__｜c(diǎn)os

I

LacZ

T

結(jié)構(gòu)組成：（1）含有具內(nèi)刪除特性的pBluescriptSK噬菌粒；

（2）在pBluescriptSK噬菌粒兩端具有f1的起始子（I）和終止子（T）；

（3）在pBluescriptSK噬菌粒內(nèi)部具有兩端帶有T3和T7啟動(dòng)子的多克隆位點(diǎn)MCS；

（4）在pBluescript的內(nèi)部帶有缺陷的LacZ基因；

（5）在該載體的兩端具有cos末端。

λZAP的特點(diǎn)：

（1）是一種具有內(nèi)刪除特性的插入型λ噬菌體載體，（2）可克隆10kb大小的外源DNA。

（3）當(dāng)外源DNA插入取向和讀碼結(jié)構(gòu)正確，就能表達(dá)出融合蛋白質(zhì)，并可用抗體篩選。

（4）當(dāng)外源DNA插入在多克隆位點(diǎn)，使β半乳糖苷酶失活故可用Xgal顯色的組織化學(xué)篩選重組子（白色為重組子）；

（5）克隆的外源DNA可在體內(nèi)隨pBluescript噬菌粒刪除下來(lái)，省去了常規(guī)的亞克??；

（6）利用T3或T7噬菌體的RNA聚合酶，可方便地制備外源插入的DNA的任何一條鏈的mRNA。

內(nèi)刪除源理：當(dāng)含有外源DNA插入的重組λZAP載體，感染大腸桿菌F＋菌株，再用輔助噬菌體M13（或f1）

超感染。于是，在細(xì)胞內(nèi)由此輔助噬菌體基因Ⅱ提供的反式作用蛋白質(zhì)，便會(huì)識(shí)別位于λZAp載體上的f1起始子和終止子，并最終導(dǎo)致含有外源DNA插入的pBluescript噬菌粒在體內(nèi)從λZAP載體上刪除下來(lái)。最終被輔助噬菌體M13的蛋白質(zhì)包裝成單鏈DNA噬菌體顆粒，并被擠出寄主細(xì)胞。

42.M13克隆體系中β-半乳糖苷酶Xgal的顯色原理

M13克隆體系包括M13克隆載體和M13特殊的寄主菌株兩部分組成。β-半乳糖苷(LacZ)當(dāng)它為四聚體時(shí)具有活性，可把無(wú)色的X-gal切割成半乳糖和深藍(lán)色靛藍(lán)，因此Xgal可作為β-半乳糖苷酶活性的一種指示劑。由于LacZ基因分子量太大。依據(jù)基因內(nèi)互補(bǔ)作用的原理。利用基因工程的方法，即將編碼同樣的蛋白質(zhì)多肽鏈序列，但各自具突變的序列，當(dāng)這種載體轉(zhuǎn)入到特殊的寄主菌株中便組成具有功能活性的多肽的生化過(guò)程。根據(jù)這一原理，在M13克隆載體種上LacZ－HindⅡ片段具有β-半乳糖苷酶第2-92位氨基酸，大腸桿菌F，因子上帶有缺失了第11-42位氨基酸的缺陷性LacZ(簡(jiǎn)稱M15基因)。當(dāng)M13載體感染了這種M13特殊的寄主菌株如JM101后，便會(huì)產(chǎn)生具有功能活性的β-半乳糖苷酶，于是在含有指示劑Xgal和誘導(dǎo)物IPTG的培養(yǎng)基中，就會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色的噬菌斑。但當(dāng)外源基因插入到M13克隆載體時(shí)，無(wú)法形成四聚體的具活性的LacZ，就不能切割Xgal，故白色噬菌斑為重組子。

43.DNA標(biāo)簽法分離產(chǎn)物未知基因的原理及主要步驟

根據(jù)DNA插入突變作用原理，用已知的插入序列為探針，分離產(chǎn)物未知基因的方法。由于插入的DNA序列是己知的，人為地給目的基因加上標(biāo)簽，故稱DNA標(biāo)簽法。

主要步驟：（1）

當(dāng)一段特定的DNA標(biāo)簽序列插入到野生型的基因的內(nèi)部或其附近位點(diǎn)時(shí)，便會(huì)誘發(fā)該基因發(fā)生突變，形成突變體；（2）

用已知的標(biāo)簽序列作DNA分子探針，從突變體的基因組DNA文庫(kù)中篩選出突變的基因；（3）

再利用篩選到的突變基因除標(biāo)簽序列以外的序列作探針，再?gòu)囊吧偷幕蚪MDNA文庫(kù)中篩選出目的基因。

44.用于克隆真核基因的大腸桿菌表達(dá)體系的優(yōu)點(diǎn)和條件

大腸桿菌表達(dá)體系的優(yōu)點(diǎn)：

（1）

背景知識(shí)清楚，分子生物學(xué)、遺傳學(xué)的基礎(chǔ)研究，特別是表達(dá)調(diào)控知識(shí)豐富；

（2）

具有完善安全的基因工程體系。包括安全的寄主菌株和載體系統(tǒng)；

（3）

早期轉(zhuǎn)基因表達(dá)調(diào)控研究扎實(shí)，許多基因如胰島素基因、生長(zhǎng)素基因等，都能在大腸桿菌中高效的有效表達(dá)；

（4）

易工業(yè)化批量生產(chǎn)，培養(yǎng)方便、操作簡(jiǎn)單、成本低廉，特別對(duì)藥用蛋白

發(fā)酵生產(chǎn)。

實(shí)現(xiàn)真核基因在大腸桿菌中有效表達(dá)的條件：

（1）真核基因的編碼序列必須是連續(xù)的cDNA，因?yàn)樵思?xì)胞中不具備剪輯加工的酶；

（2）原核的啟動(dòng)子，最好是誘導(dǎo)型的強(qiáng)啟動(dòng)子；

（3）以融合蛋白質(zhì)的形式表達(dá)，穩(wěn)定性好。

45.酵母

雙雜交體系的原理及其用途是什么？

酵母雙雜交體系簡(jiǎn)稱Y2H。這是在上一世紀(jì)90年代初，在轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上發(fā)展出來(lái)的一種敏感的體內(nèi)鑒定基因的方法?？捎脕?lái)有效地分離與己知靶蛋白相互作的另一種蛋白質(zhì)編碼基因，也是分離與某種特定啟動(dòng)子調(diào)控元件結(jié)合的特異性轉(zhuǎn)錄因子的有效手段。

如同許多真核生物的轉(zhuǎn)錄因子一樣，酵母β-半乳糖苷酶的轉(zhuǎn)錄因子GAL4也含有兩個(gè)結(jié)構(gòu)上可分開(kāi)的、功能上相互獨(dú)立的結(jié)構(gòu)域，即DNA結(jié)合域(DNA_BD)和轉(zhuǎn)錄激活域(AD)。應(yīng)用DNA重組技術(shù)，可以把GAL4轉(zhuǎn)錄因子的這兩個(gè)結(jié)構(gòu)域分開(kāi)。如果把它們放置在同一個(gè)酵母細(xì)胞中，所產(chǎn)生的GAL4

DNA-BD和AD多肽，彼此之間不會(huì)直接發(fā)生相互作用，所以不具有轉(zhuǎn)錄因子的功能活性，無(wú)法激活相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄。但是應(yīng)用DNA重組技術(shù)，將兩個(gè)分開(kāi)的GAL4的DNA-BD和AD，甚至分別來(lái)自兩個(gè)不同的轉(zhuǎn)錄因子的DNA-BD和AD重組成一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子(使之在空間上彼此靠近)則又可重新獲得轉(zhuǎn)錄因子的功能活性，即可激活相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。酵母雙雜交體系就是根據(jù)這種原理建立的。

酵母雙雜交體系包括兩種大腸桿菌-酵母菌的穿梭載體；和一種特殊的己經(jīng)缺失了內(nèi)源GAL4轉(zhuǎn)錄因子的酵母寄主菌株。

第一種穿梭載體叫DNA-BD質(zhì)粒載體：

它具有色氨酸合成酶基因、把己知的靶基因按正確的讀碼結(jié)構(gòu)和取向插入在該載體的多克隆位點(diǎn)上，便可與GAL4

DNA-BD多肽形成第一種雜種蛋白(X)。

第二種穿梭載體叫AD質(zhì)粒載體：

它具有亮氨酸合成酶基因（leu）、是用于構(gòu)建cDNA表達(dá)文庫(kù)的專用載體?？寺〉腸DNA片段按正確的讀碼結(jié)構(gòu)和取向插入在該載體的多克隆位上（構(gòu)成cDNA文庫(kù)），cDNA編碼的蛋白質(zhì)便與GAL4的AD多肽融合成第二種雜種蛋白（Y）。

酵母寄主菌株：

將上述兩種雜種質(zhì)粒共轉(zhuǎn)化到酵母雙雜交體系專用的寄主菌株特點(diǎn)：（1）這種菌株己經(jīng)喪失了內(nèi)源GAL4轉(zhuǎn)錄因子的能力；（2）具有LacZ和his3的報(bào)告基因；（3）具有trp和leu的轉(zhuǎn)化標(biāo)記，即在缺少Trp和Leu的缺陷性培養(yǎng)基上無(wú)法生長(zhǎng)的。

將共轉(zhuǎn)化的酵母細(xì)胞涂布在缺少亮氨酸(Leu）和色氨酸（Trp）的SD培養(yǎng)基上，如果由笫一種質(zhì)粒表達(dá)的靶蛋白同第二種質(zhì)粒表達(dá)的cDNA文庫(kù)編碼的一種蛋白質(zhì)發(fā)生了相互作用，這樣DNA-BD與AD就會(huì)在空間上彼此靠近，而且它具有色氨酸和亮氨酸的編碼基因，因此在缺陷性的選擇培養(yǎng)上能生長(zhǎng)，于是便構(gòu)成了有功能活性的GAL4轉(zhuǎn)錄因子，從而啟動(dòng)下游報(bào)告基因LacZ的表達(dá)，在含X-gal和誘導(dǎo)物IPTG的條件下，β-半乳糖苷酶把X-gal切割，選擇出藍(lán)色陽(yáng)性克隆。這有可能分離到含有與靶蛋白相互作用的另一種蛋白編碼基因。

酵母雙雜交體系可以用于產(chǎn)物未知基因的分離、也可用于新基因功能的鑒定。

46.表達(dá)載體的組成：

（1）

原核啟動(dòng)子，最好是誘導(dǎo)型的強(qiáng)啟動(dòng)子，使外源基因蛋白表達(dá)量占總蛋白的10-30%。

如果表達(dá)的是毒蛋白，啟動(dòng)子應(yīng)呈現(xiàn)低限的基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄水平；

（2）

多克隆位點(diǎn)(MCS)，用于插入外源基因；

（3）

抗生素抗性基因，用作選擇標(biāo)記；

（4）

復(fù)制起點(diǎn)(ori)，決定外源基因的拷貝數(shù);

（5）

轉(zhuǎn)錄終止子，防止啟動(dòng)子通讀作用，提高蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性；

（6）

翻譯起始序列和轉(zhuǎn)譯增強(qiáng)子；

（7）

翻譯終止子，防止核糖體的跳躍(Skipping)。采用四聯(lián)核苷酸UAAU

效果更好。

47.簡(jiǎn)述構(gòu)建cDNA克隆的定義、主要步驟及其優(yōu)越性？

（1)

定義：cDNA克?。簭膍RNA出發(fā)，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄、與載體分子重組、轉(zhuǎn)化寄主細(xì)胞增殖，將目的基因克隆化的過(guò)程稱為cDNA克隆。從理論上講該生物的每一種mRNA都應(yīng)有一個(gè)克隆。故亦稱cDNA文庫(kù)

（2）

步驟：

第一步：提取處于特定發(fā)育階段的真核生物體的特定器官或組織中的總RNA，根據(jù)mRNA

poly(A)尾特點(diǎn)過(guò)Oligo(dT)柱，分離純化出mRNA；

第二步：利用適當(dāng)引物(一般用Oligo(dT)和反轉(zhuǎn)錄酶，獲得

cDNA/mRNA雜合分子。

第三步：，用堿處理降解，或用RNaseH酶切割cDNA/mRNA雜合分子中的mRNA鏈獲得cDNA第一鏈，再由第一鏈cDNA合成第二鏈cDNA。

第四步：雙鏈DNA與適當(dāng)?shù)妮d體重組，將重組體的群體導(dǎo)入大腸桿菌寄主細(xì)胞中增殖，從而構(gòu)成cDNA文庫(kù)。

（3）cDNA文庫(kù)的優(yōu)點(diǎn)：

（a）

以mRNA材料出發(fā)，對(duì)于RNA病毒特別適用；

（b）庫(kù)容量小（相當(dāng)DNA文庫(kù)的15％）篩選工作量?。?/p>

（c）

假陽(yáng)性比例小，因每一種mRNA就應(yīng)有一個(gè)克隆。

（d）

具特殊用途：①

克隆的真核基因在原核中表達(dá)需cDNA；

②

核苷酸序列測(cè)定；

③

發(fā)育過(guò)程中時(shí)空表達(dá)基因的研究分析。

48.何為柯斯質(zhì)粒載體，其結(jié)構(gòu)、特點(diǎn)是什么？

定義：柯斯質(zhì)粒載體是人工構(gòu)建帶有λ噬菌體的cos位點(diǎn)和E.coli質(zhì)粒的復(fù)制子的新型質(zhì)粒載體。它具有質(zhì)粒載體的特點(diǎn)和λ噬菌體的特點(diǎn)。

結(jié)構(gòu)：

（a）

具一個(gè)質(zhì)粒的復(fù)制起點(diǎn)（ori）;

（b）具若干來(lái)自質(zhì)粒載體的選擇記（1-2個(gè)）;

（c）具相當(dāng)數(shù)量的來(lái)自質(zhì)粒的核酸內(nèi)切酶的單切點(diǎn);

（d）具有λ噬菌體的cos位點(diǎn)。

特點(diǎn)：（1）λ噬菌體的特點(diǎn)：a.導(dǎo)入寄主細(xì)胞后，可以重新環(huán)化起來(lái)；

b.經(jīng)體外包裝后轉(zhuǎn)導(dǎo)效率大大提高;

c.無(wú)法進(jìn)入溶菌周期，也不能形成噬菌體顆粒。

（2）具質(zhì)粒載體特點(diǎn)：a.在寄主細(xì)胞內(nèi)可像質(zhì)粒DNA一樣復(fù)制；

b.在氯霉素作用下擴(kuò)增；

c.具有抗生素抗性記號(hào)。

（3）具有高容量的克隆能力：上限45kb，下限30kb；

（4）能與帶有同源序列的質(zhì)粒DNA重組。

49.分別敘述原核基因組和真核基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。

（1）原核基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

（a）高效的遺傳信息利用率；

①

既沒(méi)有不必要的額外重復(fù)序列，也極少存在無(wú)功能的冗余序列；

②

基因組９８％以上的核苷酸序列都是編碼基因

③

基因排列緊湊，同一個(gè)操縱子不同基因之間的間隔距離一般不超過(guò)

２０bp，而且其中還存在著轉(zhuǎn)錄起始信號(hào)和終止信號(hào)；

④

存在著編碼序列彼此重疊、編碼不同蛋白質(zhì)的重疊基因。

（b）雙鏈ＤＮＡ的編碼功能；

（c）多基因聚集排列成操縱子結(jié)構(gòu)形式；

（d）染色體基因組的拷貝數(shù)平均每細(xì)胞為1.1條，在富裕培養(yǎng)基中可高達(dá)3～4條。

（2）真核基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

（a）包裝成特定的染色體結(jié)構(gòu)；

（b）基因組的多倍性；

（c）具有大量的重復(fù)序列；

（d）

高比例的非編碼的DNA序列。以人為例，非編碼序列占基因組總長(zhǎng)的98%以上，而蛋白質(zhì)編碼基因的序列還不到基因組總長(zhǎng)的2%。包括基因與基因之間的非編碼的DNA序列，以及基因內(nèi)部的非編碼的DNA序列。

（e）

龐大的基因數(shù)量；

如擬南芥：25，000個(gè)左右、水稻：40，000個(gè)左右、小鼠：30，000個(gè)左右、人類：24，000個(gè)左右。

（f）基因分布密度不均一。如基因分布有富集區(qū)和荒漠區(qū)之分。

.何為基因克隆？其主要的實(shí)驗(yàn)步驟

定義：基因克隆又叫DNA克隆，它是指將外源基因插入到適當(dāng)?shù)目寺≥d體上，形成重組DNA分子群體轉(zhuǎn)化到大腸桿菌寄主細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制繁殖，以便從大分子DNA或DNA片段中分離純化出目的基因或特定的DNA片段的實(shí)驗(yàn)操作，叫做基因克隆或DNA克隆。

其主要步驟：

（1）

DNA片段化：從實(shí)驗(yàn)材料分離純化基因組DNA，經(jīng)機(jī)械方法或酶

消化、超聲波等方法獲得一定長(zhǎng)度的DNA片段。

（2）

體外重組：將片段化的DNA與適當(dāng)載體分子重組。

（3）

重組子轉(zhuǎn)化：將重組子轉(zhuǎn)入到適當(dāng)?shù)募闹骶曛羞M(jìn)行增殖。

（4）

重組子的篩選：從大量的轉(zhuǎn)化細(xì)胞中篩選陽(yáng)性克隆的重組子。

（5）

目的基因的分離：用多種酶切后走凝膠電泳，并用探針進(jìn)行雜交，分離出目的基因的DNA，并克隆在M13載體上進(jìn)行測(cè)序。

(6）

目的基因的表達(dá)與功能鑒定。

51.DNA轉(zhuǎn)錄與復(fù)制有哪些差別？

基因的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的過(guò)程，無(wú)論在生物化學(xué)還是酶學(xué)方面都是十分相似的。它們二者都是在各自特有的核酸酶，即RNA聚合酶和DNA聚合酶的催化下，合成出一條與DNA模板鏈互補(bǔ)的新的多核苷酸鏈。盡管如此，基因的轉(zhuǎn)錄（RNA合成）和基因的復(fù)制（DNA合成）之間，仍然存在著如下幾個(gè)方面的差別：

（1）對(duì)引物需求有別

。在基因復(fù)制中，需要同時(shí)存在模板鏈和引物，DNA聚合酶才能啟動(dòng)DNA新鏈的合成。而基因的轉(zhuǎn)錄則不同，它不需要引物，RNA聚合酶便能啟動(dòng)RNA新鏈的合成。

（2）使用的底物不一樣。由于DNA和RNA分子的核苷酸組成成分不同，因此基因復(fù)制與轉(zhuǎn)錄所用的底物也不一樣：前者是用脫氧核糖核苷三磷酸：dATP、dGTP、dTTP、dCTP；后者是用核糖核苷三磷酸：ATP、GTP、TTP和CTP。

（3）與模板的結(jié)合狀態(tài)有異。基因的復(fù)制是按照半保留方式進(jìn)行的，在新生成的兩條子代DNA分子中，新生鏈和模板鏈?zhǔn)冀K是結(jié)合在一起的。而基因的轉(zhuǎn)錄則不同，新合成的RNA鏈最終是要從模板上解離下來(lái)的。

（4）精確性程度差異懸殊。在基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程中錯(cuò)誤參入RNA鏈的核苷酸頻率是10－4，也就是說(shuō)每參入10，000個(gè)核苷酸，就會(huì)出現(xiàn)一個(gè)錯(cuò)誤（萬(wàn)分之一錯(cuò)誤率）。而在基

因的復(fù)制核苷酸錯(cuò)誤參入頻率是10－7，也就是說(shuō)每參入10，000，000個(gè)核苷酸，僅出現(xiàn)一次錯(cuò)誤（千萬(wàn)分之一錯(cuò)誤率）。這也就是說(shuō)DNA復(fù)制的精確度是超過(guò)轉(zhuǎn)錄的1000倍！

（5）涉及范圍不同?；驈?fù)制往往是整個(gè)基因組從頭至尾逐步進(jìn)行，涉及范圍包括整個(gè)基因組中的所有的DNA和基因。而基因轉(zhuǎn)錄則不同，它所涉及的范圍要比復(fù)制小得多，通常只是一個(gè)基因或一個(gè)操縱子。

52.何為基因擴(kuò)增，它有哪些方式？

基因擴(kuò)增是指某種基因拷貝數(shù)增多的現(xiàn)象。

其方式有：（1）利用PCR

技術(shù)使某基因拷貝數(shù)增多；

（2）隆基因?qū)爰闹骷?xì)胞內(nèi)使大量繁殖，使基因擴(kuò)增(單拷貝基因可擴(kuò)增到約1x106的拷貝)；

（3）環(huán)境壓力影響使某種基因適應(yīng)性的擴(kuò)增；

（4）程序性基因擴(kuò)增。如非洲爪蟾在形成卵發(fā)育過(guò)程中其rRNA大量擴(kuò)增；

（5）生物進(jìn)化過(guò)程中的某種基因得以擴(kuò)增。

53.真核基因與原核基因表達(dá)調(diào)解機(jī)理的差異

（1）源于細(xì)胞結(jié)構(gòu)水平的差異。真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄和翻譯分別在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中分開(kāi)進(jìn)行；沒(méi)有涉及mRNA運(yùn)送過(guò)程的調(diào)節(jié)。原核細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄和翻譯是在細(xì)胞質(zhì)中偶聯(lián)發(fā)生。

（2）源于染色體結(jié)構(gòu)水平的差異。真核細(xì)胞基因組被包裝成染色體，存在于細(xì)胞質(zhì)的有關(guān)蛋白質(zhì)因子（如TF）進(jìn)入細(xì)胞核必須克服染色體的層層屏障才能與順式元件結(jié)合。

（3）源于基因排列與結(jié)構(gòu)的差異。真核基因?yàn)閱雾樂(lè)醋樱蠖酁閿嗔鸦?。轉(zhuǎn)錄后加工復(fù)雜，而原核基因?yàn)槎囗樂(lè)醋?，轉(zhuǎn)錄后加工也簡(jiǎn)單得多。

54.說(shuō)明mRNA差別顯示分離產(chǎn)物未知基因的基本原理并評(píng)述其優(yōu)缺點(diǎn)。

答：（1）mRNA差別顯示：是建立在基因差別表達(dá)理論基礎(chǔ)上，通過(guò)比較不同個(gè)體，或同一個(gè)體的不同組織或不同發(fā)育階段之間mRNA種的差別，并應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)而發(fā)展出來(lái)的一種分離產(chǎn)物未知基因的方法。故又叫mRNA差別顯示反轉(zhuǎn)錄PCR，簡(jiǎn)稱DDRT-PCR。

（2）原理：根據(jù)真核基因3，-端的mRNA分子的poly（A）尾巴前2位堿基，可把mRNA分子分成12種類群，如1個(gè)堿基可分為3大類群;根據(jù)3，-端的錨定引物，和5，-端設(shè)計(jì)隨機(jī)引物。從數(shù)理統(tǒng)計(jì)推算和實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，3種錨定引物和80種隨機(jī)引物(3×80＝240）240組合,大體上涵蓋95%的mRNA。

（3）mRNA差別顯示優(yōu)點(diǎn)：

（a）簡(jiǎn)單方便，由于使用PCR擴(kuò)增和序列膠電泳技術(shù)，故簡(jiǎn)單快捷。

（b）靈敏度高，實(shí)驗(yàn)利用了PCR技術(shù)、序列電泳技術(shù)和同位素自

影技術(shù)，故具極高的靈敏度。

（c）多用性，可同時(shí)比較多個(gè)樣品間的基因表達(dá)差異。④直觀性，其每個(gè)步驟均可被直觀地檢測(cè)。

（4）mRNA差別顯示缺點(diǎn)：

（a）假陽(yáng)性比率高。

（b）擴(kuò)增的片段分子量較小。

（c）工作量大。

55.影響酶切反應(yīng)的因素：

答：（1）DNA分子的性質(zhì)：（a）酶切位點(diǎn)周圍的堿基成分；

（b）酶切位點(diǎn)的密度；

（c）DNA分子的構(gòu)型；

（d）NA分子的甲基化程度。

（2）酶切的溫度；

（3）DNA制劑的純度。

56.產(chǎn)生酶切星號(hào)活性的因素：

（1）每μg樣品酶切的用量不得超過(guò)10單位；

（2）酶切反應(yīng)體系中的甘油濃度不得超過(guò)5%；

（3）其他金屬離子取代二價(jià)Mg；

（4）金屬鎂離子不得低于25mmol/L；

（5）pH不得超過(guò)8；

（6）樣品中有機(jī)溶劑污染的影響。

57.一種基因產(chǎn)生多種蛋白質(zhì)的原因分析

答：（1）主要原因：（a）.許多基因都擁有多個(gè)啟動(dòng)子。在人類基因組中，至少有一半以上的基因都具有多個(gè)啟動(dòng)子。在真核斷裂基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程中，可變啟動(dòng)子的使用常常涉及到位于轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)的可變首位外顯子（alternative

first

exon）?？勺儐?dòng)子的不同成員，驅(qū)動(dòng)從相應(yīng)的可變首位外顯子開(kāi)始轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。已經(jīng)對(duì)有些基因的可變首位外顯子作了全陣列（whole

arrays）分析，結(jié)果證明每個(gè)可變首位外顯子都具有一個(gè)自身專有的啟動(dòng)子?？勺兊氖孜煌怙@子的不同產(chǎn)生的蛋白質(zhì)產(chǎn)物不同；

（b）

初級(jí)轉(zhuǎn)錄本的可變剪接可產(chǎn)生多種蛋白?？勺兗艚樱╝lternative

splicing）又稱為差異剪接（differential

splicing）或可變mRNA剪接。這是指真核斷裂基因初級(jí)轉(zhuǎn)錄本，在不同類型的或處于不同發(fā)育階段的細(xì)胞中發(fā)生的不同形式的剪接作用。結(jié)果生成具有不同序列結(jié)構(gòu)特征、并編碼不同蛋白質(zhì)異形體的成熟的mRNA分子。因此說(shuō)，可變剪接可以使同一個(gè)基因的初級(jí)轉(zhuǎn)錄本，最終翻譯出多種不同功能的蛋白質(zhì)分子。以果蠅Dscam基因?yàn)槔?，可形?8016種蛋白質(zhì)異形體?？梢?jiàn)可變剪接是造成一種基因多種蛋白質(zhì)現(xiàn)象的另一種重要原因。

（2）次要原因：（c）

RNA的編輯；致使mRNA分子核苷酸序列的結(jié)構(gòu)出現(xiàn)了變化。此種RNA編輯具有多種不同的效應(yīng)，諸如產(chǎn)生出新的起始密碼子、終止密碼子或是造成多肽鏈編碼序列出現(xiàn)變化。因此，RNA編輯的結(jié)果，改變了源自基因DNA模板鏈的遺傳信息，翻譯出不同于基因原來(lái)編碼的新的蛋白質(zhì)多肽。

（d）

基因重排均可產(chǎn)生不同的蛋白。由于基因區(qū)段轉(zhuǎn)位作用或隨機(jī)連接造成的基因可變區(qū)固有排列順序的改變的基因重排（gene

rearrangement）或DNA重排，可使基因產(chǎn)生不同的蛋白。

58.控制真核基因表達(dá)調(diào)節(jié)的主要方式：

（1）基因重排的調(diào)節(jié)方式；

（2）基因擴(kuò)增的調(diào)節(jié)方式；

（3）基因調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)方式；

（4）RNA加工的調(diào)節(jié)方式；

（5）核質(zhì)mRNA轉(zhuǎn)的調(diào)節(jié)方式；

（6）mRNA穩(wěn)定性的調(diào)節(jié)方式；

（7）mRNA翻譯的調(diào)節(jié)方式。

59.真核基因表達(dá)調(diào)節(jié)的主要特點(diǎn)：

（1）真核生物與原核生物在基因表達(dá)調(diào)節(jié)方面的相似性，已知有不少在大腸桿菌中出現(xiàn)的調(diào)節(jié)機(jī)理，原則上也適用于真核生物，例如：i.兩者的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)，都是通過(guò)DNA結(jié)合蛋白質(zhì)，同基因啟動(dòng)子中的特異性順式元件的結(jié)合作用進(jìn)行的。ii.兩者DNA結(jié)合蛋白質(zhì)的多肽基序，在序列結(jié)構(gòu)上也是相同的.（2）真核生物與原核生物在基因表達(dá)調(diào)節(jié)方面的差異性：i.真核生物細(xì)胞類型的多樣性，與原核相比，特別高等植物與動(dòng)物，都具有數(shù)百種功能各異的不同細(xì)胞類型；ii.真核生物具有細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，因此基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯是分別在細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)中分步進(jìn)行的；iii.真核生物具有龐大的基因組，其長(zhǎng)度要超過(guò)原核的700多倍；iii.真核生活物基因擁有大量的各種類型的基因，其總數(shù)可達(dá)數(shù)萬(wàn)種，相當(dāng)原核生物的20多倍.（3）真核基因表達(dá)調(diào)節(jié)方面與原核基因相比其復(fù)雜性或特殊性：i.發(fā)育調(diào)節(jié),基因表達(dá)的發(fā)育階段性調(diào)節(jié)，器官和組織特異性調(diào)節(jié)；ii.分化調(diào)節(jié)，同一受精卵究竟是如何分化出各具特定功能和形狀態(tài)特征的不同類的組織、器官和細(xì)胞？；iii.表達(dá)順序性，復(fù)雜的多細(xì)胞生命體中，不同基因表達(dá)的順序性的調(diào)節(jié)機(jī)理；iv.同一生命個(gè)體中，不同細(xì)胞之間的生命活活動(dòng)被此之間的協(xié)調(diào)和相對(duì)穩(wěn)定性是息怎樣維持的?；v.選擇性表達(dá)，相同基因組為什么在紅細(xì)胞前體中會(huì)選擇性表達(dá)編碼血紅蛋白的基因，而在胰腺細(xì)胞中卻是選擇性表達(dá)胰島素的基因。此種精確控制基因差異表達(dá)的分子機(jī)理又是如何解釋的呢？。

(2014.4.12由北京大學(xué)生命學(xué)院黃美娟提供)

第四篇：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院考博英語(yǔ)真題2004答案解析

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院考博英語(yǔ)真題2004答案解析

Part ⅡVocabulary

1.A 譯文：他在這個(gè)領(lǐng)域的成就的功勞必須歸于他的導(dǎo)師方教授

解析：credit榮譽(yù)，功勞；reputation名譽(yù)，聲望；respect尊敬；praise贊美。2.D 譯文：由于我們無(wú)法再等我們定的貨，所以不得不取消訂單。

解析：postpone推遲；refuse拒絕；accept接受；cancel取消。

3.C 譯文：年輕人中存在著很高的工作流動(dòng)性，因?yàn)樗麄兘裉燹o掉這個(gè)工作明天就會(huì)找一個(gè)新的。

解析：固定搭配，quit work 辭職，停止工作；depart離開(kāi)，出發(fā)；reject排斥；quit辭職，放棄；leave離開(kāi)。

4.C 譯文：由于天氣惡劣必須放棄尋找失蹤的船。

解析：release 釋放，發(fā)射；resign辭職；abandon 放棄，斷念；surrender使投降。5.B 譯文：人們開(kāi)的車可能是為了顯示他的身份或社會(huì)地位。

解析：curiosity好奇心；status身份，地位；importance重要性；reputation聲望。四個(gè)選項(xiàng)中與social position是一類詞的只有B。

6.A 譯文：創(chuàng)造力是指利用現(xiàn)存的資源產(chǎn)生獨(dú)創(chuàng)與有益的方案、思想和產(chǎn)品。

解析：creativity 創(chuàng)造力；productivity 生產(chǎn)力；application應(yīng)用；combination組合。7.D 譯文：有時(shí)藝術(shù)家發(fā)現(xiàn)讓他們的作品贏得大眾的欣賞很難。

解析：popular appetite 大眾口味，在題目中指的事“贏得大眾的喜愛(ài)”。Welcome歡迎；

applause喝彩；appetite愛(ài)好，喜愛(ài)，胃口；appreciation欣賞，感謝。

8.A 譯文：面臨著項(xiàng)目的失敗，投資商將忍受著高達(dá)三千萬(wàn)的損失。

解析：in the face of面對(duì)??；in time of??時(shí)期；in the event of如果??發(fā)生；in the course of在??期間。

9.D 譯文：為什么我們有些人擅長(zhǎng)數(shù)學(xué)或?qū)懽?，而其他人擅長(zhǎng)藝術(shù)和籃球。

解析：work at 致力于；gaze at凝視；aim at目的在于；excel at擅長(zhǎng)，突出。10.A 譯文：噴氣式飛機(jī)快速地升上天空，很快便消失在我們的視線中了。

解析：固定搭配，ascend into升上，升到；launch發(fā)射，在句中，若要用launch，則要用被動(dòng)語(yǔ)態(tài)；assess 評(píng)價(jià)；descend下降。

11.C 譯文：長(zhǎng)城是一個(gè)很好的觀光勝地，每年吸引著全球各地?zé)o數(shù)的人來(lái)觀光。

解析：tourist attraction觀光勝地。

12.B 譯文：現(xiàn)在殘疾人能夠關(guān)注他們的很多需求，上學(xué)和維持工作。

解析：pursue education 追求教育，上學(xué)。

13.A 譯文：當(dāng)他知道他發(fā)現(xiàn)了一個(gè)真正的真品時(shí)，湯姆難以掩飾自己的興奮。

解析：conceal掩飾，掩藏；reveal展現(xiàn)；show顯示；discover暴露。

14.B 譯文：男女之間，貧富之間的目標(biāo)和欲望大相徑庭。

解析：vary widely大不相同，大相徑庭；swing搖擺，轉(zhuǎn)向；distinguish區(qū)分，辨別；

transfer轉(zhuǎn)讓。

15.D 譯文：當(dāng)?shù)毓俜剿坪跻獮樯现馨l(fā)生的事故負(fù)責(zé)。

解析：to blame該受責(zé)備，承擔(dān)責(zé)任。

16.C 譯文：世貿(mào)中心遭遇的襲擊給那些目睹爆炸場(chǎng)面的人留下了持久的印象。

解析：固定搭配，leave a lasting impression 留下持久的印象，深刻的印象。17.B 譯文：計(jì)算機(jī)科技的全面影響在接下來(lái)的幾年將會(huì)讓人們感受到。

解析：固定短語(yǔ)考察，full impact 全面影響。18.C 譯文：自動(dòng)化的出現(xiàn)必然會(huì)帶來(lái)重大的社會(huì)影響。

解析：固定短語(yǔ)，be bound to 必然，一定會(huì)；frightful 可怕的；compelled 強(qiáng)迫的。19.A 譯文：通過(guò)和平手段實(shí)現(xiàn)統(tǒng)一是我們的一貫政策。

解析：固定搭配，consistent policy一貫的政策；considerate體貼的；certain確定的；decisive果斷的。

20.D 譯文：調(diào)查顯示相當(dāng)多數(shù)量的十五歲的孩子每周要吸二十根煙。

解析：substantial numbers of相當(dāng)數(shù)量的，很多很多的。21.C 譯文：化學(xué)與其他科目如物理生物等有著緊密的聯(lián)系。

解析：correspond with 符合，一致；be concerned with涉及到；be correlated with與?相互關(guān)聯(lián)或聯(lián)系；cooperate with與某人合作。

22.A 譯文：事故發(fā)生的幾分鐘內(nèi)警察就對(duì)緊急情況做出了反應(yīng)。

解析：respond to做出回應(yīng)、反應(yīng)； reply to回答，回復(fù)；adjust to 適應(yīng)于；appeal to 呼吁，上訴。

23.C 譯文：對(duì)熱帶雨林的破壞被譴責(zé)為環(huán)境的災(zāi)難。

解析：blame責(zé)備；declare聲明、宣稱，be declared as聲明為或稱為?；condemn譴責(zé)；appeal呼吁，請(qǐng)求。

24.B 譯文：害羞的人絕不會(huì)自發(fā)地去吸引別人的注意。

解析：willingly欣然地，樂(lè)意地；voluntarily 自愿地，自發(fā)地；decidedly斷然地；deliberately故意地，有意地。

25.A 譯文：最近的生產(chǎn)障礙導(dǎo)致銷售下滑，因而利潤(rùn)也下降了。

解析：decline下滑，下降；increase增加，上漲；break破壞；maintain維持。

26.B 譯文：參加世界常務(wù)委員會(huì)發(fā)起的演講的人數(shù)增加了，這讓廣大人民開(kāi)始關(guān)注國(guó)際事務(wù)了。

解析：develop開(kāi)發(fā)；sponsor贊助，發(fā)起；advance使前進(jìn)；promote促進(jìn)。27.D 譯文：還不是晚，但得采取及時(shí)的行動(dòng)。

解析：right對(duì)的，恰當(dāng)?shù)?；urgent緊急的；hurry匆忙，倉(cāng)促；prompt迅速的，及時(shí)的。28.B 譯文：他渴望支配其他人，這給他的家庭帶來(lái)了麻煩。

解析：please取悅；dominate支配，控制；force強(qiáng)迫，強(qiáng)加；urge催促，力勸。29.C 譯文：有關(guān)人士想將得癌癥的危險(xiǎn)減到最小

解析：take the risk of 冒著危險(xiǎn)；decrease減少；minimize the risk將風(fēng)險(xiǎn)減到最低；

claimed聲稱，宣稱。

30.A 譯文：受傷嚴(yán)重的士兵沒(méi)有優(yōu)先治療那些輕微的傷。

解析：take priority over 優(yōu)先于?；表示不優(yōu)先于over后面的內(nèi)容，而是take前面的內(nèi)容要優(yōu)先于over 后的內(nèi)容。

31.D 譯文：仍然不是很清楚到底是什么引起了他們之間的一系列爭(zhēng)論。

解析：contribute貢獻(xiàn)，出力；mark標(biāo)志；ignite 點(diǎn)燃，燃燒；trigger引發(fā)，引起。32.B 譯文：為了現(xiàn)在的生存和將來(lái)的繁榮興旺，所有的工作人員必須不斷地為你的公司的每一個(gè)方面創(chuàng)造出新的思想。

解析：maximize最大化；thrive繁榮，興旺；measure 估量，測(cè)量；remain保持，依然。

33.D 譯文：人類可能會(huì)破壞自然平衡，但有時(shí)，自然也會(huì)進(jìn)行可怕的報(bào)復(fù)。

解析：take a revenge報(bào)復(fù)，復(fù)仇。

34.A 譯文：她將高失業(yè)率作為政府政策失敗的證據(jù)。

解析：cite?as?將?作為?；cite 引用，引證；recite背誦；list列出；lift舉起。35.C 譯文：自從日本開(kāi)始重視教育和科技創(chuàng)新后，它的經(jīng)濟(jì)就有了高速發(fā)展。

解析：attach importance to重視，著重于。

36.C 譯文：這個(gè)政策為私人產(chǎn)業(yè)讓路，導(dǎo)致了貧富之間的差距。

解析：give way to讓路于，屈服于，讓步；give birth to生孩子，產(chǎn)生.37.C 譯文：人類不應(yīng)該以生態(tài)環(huán)境為代價(jià)發(fā)展經(jīng)濟(jì)。

解析：at the expense of 以?為代價(jià)；at the mercy of 任憑，受支配。38.D 譯文： 我們應(yīng)該為我的的孩子和孫子保持最好的道德觀念。

解析： replace代替；remain留下，保持，一般為不及物動(dòng)詞，后面不接賓語(yǔ)；generate 發(fā)生，產(chǎn)生；preserve保存，保留。

39.A 譯文：合適的穿衣在生意上關(guān)系重大，這就是為什么大多數(shù)生意人都穿得很正式的原因。

解析：count for價(jià)值；count for much關(guān)系重大；account for解釋，說(shuō)明；allow for顧及，考慮； care for照顧，關(guān)心

40.A 譯文：他在車禍中傷得很嚴(yán)重，而這場(chǎng)車禍的產(chǎn)生要?dú)w于踩錯(cuò)了剎車。

解析：be attributed to歸因于；contribute to有助于，貢獻(xiàn)；be to blame該受責(zé)備，承擔(dān)責(zé)任；be applied to 應(yīng)用到?。

Part ⅢReading Comprehension Passage 1 41.答案D

解析：文章第一段就說(shuō)明了，在以前秘書(shū)都是男性，因?yàn)槿藗冋J(rèn)為女性在辦公室的出現(xiàn)會(huì)影響其他員工的工作。42.答案C 解析：由第四段可以得到答案。43.答案B 解析：John Bowman得到這份秘書(shū)工作是因?yàn)椤癏e was the only applicant”。44.答案A 解析：參看文章倒數(shù)第四段最后一句話。45.答案A 解析：作者在文章最后一句話中指出，女性也將能勝任男性所從事的這項(xiàng)工作。

Passage 2 46.答案C 解析：文章介紹的就是商業(yè)競(jìng)爭(zhēng)的四種基本形式。47.答案D 解析：由文章第二段容易得到答案。48.答案A 解析：第四段中“tolerated”的意思是“允許”，所以答案為A。49.答案 A 解析：作者的意思是，雖然也會(huì)出現(xiàn)顧客受益的價(jià)格戰(zhàn)，但所有的公司聯(lián)合起來(lái)提高價(jià)格也是很常見(jiàn)的。50.答案B 解析：“serious competition?it would?in the group．”這句話中的“it”顯然指代前面的“serious competition”。

Passage 3 51.答案D 解析：第一段中作者介紹Rogers是一個(gè)拼命工作并對(duì)員工要求苛刻的老板，作者以最快的速度的離開(kāi)了那個(gè)家公司?？梢?jiàn)作者不喜歡在Rogers手下那份工作。52.答案C 解析：從第二段的前兩句話可以得到答案。53.答案A 解析：答案顯然是A。54.答案 C 解析：作者以為那個(gè)人是Rogers，即他曾經(jīng)的老板。55.答案D 解析：很顯然，根據(jù)作者的前同事所了解的情況，他認(rèn)為那個(gè)人很可能就是Rogers。

Passage 4 56.答案 C 解析：在第三段中作者表示：“I was going to be a complete engineer：technical genius and sensitive humanist all in one．”作者選擇藝術(shù)類院校讀書(shū)正是因?yàn)樗氤蔀橐粋€(gè)把工程技術(shù)和人文科學(xué)完美結(jié)合的優(yōu)秀人才。57.答案 A 解析：“I wanted to open my eyes?Science or engineering．”作者認(rèn)為同學(xué)藝術(shù)的人交往可以開(kāi)闊視野，增長(zhǎng)見(jiàn)識(shí)。58.答案B 解析：在作者看來(lái)，一個(gè)成功的工程類學(xué)生應(yīng)該不僅應(yīng)該具有技術(shù)才能，更需要有廣闊的視野。

59.答案 D 解析：故事的最后，作者的美好理想在現(xiàn)實(shí)中破滅。所以他的理想固然是好，但卻是不切實(shí)際的。60.答案 B 解析：結(jié)合上下文，很顯然這個(gè)“they”是指代前一句話中的“engineering and the liberal arts”。

Passage 5 61.答案C 解析：C最全面的概括了全文的主題。62.答案D 解析：第一段中作者已經(jīng)定義了slang：“refers to words and expressions understood by a large number of speakers but not accepted as appropriate formal usage by the majority”。63.答案A 解析：“but other slang expressions enjoy momentary popularity followed by obscurity．”這句話的意思是有些俚語(yǔ)只流行一時(shí)，隨后就會(huì)消失?！皁bscurity”在這里是“消隱，隱退”的意思。

64.答案 D 解析：D 在文章第三段介紹俚語(yǔ)產(chǎn)生的三個(gè)條件之中，并沒(méi)有大量的語(yǔ)言學(xué)家這一條件。

65.答案C 解析：從最后一段可以看出來(lái)作者是贊成在合適的場(chǎng)合使用slang和Colloquial speech的。

Passage 6 66.答案 A 解析：A項(xiàng)的意思是“一個(gè)人口袋里存不住錢”，當(dāng)然與原文不符；B選項(xiàng)的意思是“錢不會(huì)長(zhǎng)在樹(shù)上”，C選項(xiàng)意思是“錢要好好地花”，D選項(xiàng)意思是“錢能生錢”都與原文意思一致。

67.答案 C 解析：由第三段可以得到答案。68.答案A 解析：文章第四段講述的就是Awareness of their identity，從“But case histories repeatedly show that a sense of community is essential for long-term survival．”這句話可以得到答案。69.答案 D 解析：A、B、C都是W．R．Grace曾經(jīng)或正在經(jīng)營(yíng)的項(xiàng)目，文章說(shuō)W．R．Grace曾經(jīng)創(chuàng)立航空公司，但并非經(jīng)營(yíng)飛機(jī)。

70.答案 B 解析：文章倒數(shù)第二段講述的就是跨國(guó)公司的生存之道，段落最后一句話“Multinationals must be willing to change in order to succeed．”就是這段內(nèi)容的一個(gè)小結(jié)，意思是跨國(guó)公司要想成功就必須學(xué)會(huì)變通。

Part ⅣWriting

On College Admission

It is a hot topic in recent years whether to offer college admission to every high school graduate or to select excellent students by means of examinations.In my opinion, the answer to this argument depends on the purpose of college education.College is a special place in which students are trained to enrich their knowledge and develop the ability to reason and explore the world.Though it cannot be denied that college students should also learn to adapt themselves into the real society, mastering academic skills is still their chief task, for knowledge is the basis of the work we would take in the future.Since students will learn much more difficult knowledge in college, not every high school graduate could digest and assimilate what would be taught in college classes, not to mention putting these theories into practical application.Thus, my standpoint is that admission to college should be offered by examinations because educationists have still failed to devise anything more efficient and reliable than examinations and the methods of testing a person's knowledge and ability remain as primitive as ever they were.Here examination is not just examination itself, it could reveal a person's comprehensive capacities as well.Generally speaking, students getting high marks are also those with outstanding traits.However, I am not intending to put too much emphasis on examinations.College is at a unique stage of connecting school and society and examination is not the only way to prepare our students for the future.But in most cases, we have to admit that examination is indeed an effective and useful method of selecting persons with excellent abilities.

第五篇：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院考博英語(yǔ)真題2007答案解析

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院考博英語(yǔ)真題2007答案解析

Part ⅠVocabulary Section A 1.C 譯文：經(jīng)過(guò)數(shù)百年的自我實(shí)施專制后，中國(guó)已經(jīng)在國(guó)際事務(wù)上占有一席之地，并進(jìn)入了現(xiàn)代歷史的浪潮。

解析：cooperation合作；monopoly壟斷；dictatorship專政，專制；seclusion隱居。2.C 譯文：滿族人已經(jīng)和保證雙方地位的貴族階層形成了聯(lián)盟。貴族人與普通平民區(qū)分開(kāi)來(lái)，并且他們被給予政府部門中的專有職位特權(quán)。

解析：inclusive包含的；special 專用的，專門的；exclusive獨(dú)有的，專有的；especial特別的，尤其的。

3.C 譯文：理論科學(xué)是在物質(zhì)環(huán)境中產(chǎn)生的，而應(yīng)用則是思想的強(qiáng)力驅(qū)動(dòng)力。照這樣看，他便是一位偉大的思想傳播者。

解析：encouragement 鼓舞；spur鼓舞，刺激；drive驅(qū)動(dòng)，常用表達(dá) a drive to sth；driving force驅(qū)動(dòng)力，推動(dòng)力，常用表達(dá)driving force for sth。

4.C 譯文：他們用來(lái)建立維護(hù)追隨者的方法與完成這樣的活動(dòng)的展望也成為了現(xiàn)今中國(guó)政治行為的重要來(lái)源。

解析：precedents 引用單元；pioneer 先鋒；source來(lái)源；resource資源。

5.B 譯文：在他身上，有一個(gè)交匯點(diǎn)，一個(gè)斗爭(zhēng)的典型代表，因而他是一個(gè)真正的歷史人物。

解析：representation表現(xiàn)；representative代表，典型；symbol象征，標(biāo)志；sign符合，記號(hào)。

6.B 譯文：社會(huì)穩(wěn)定源于各種力量的微妙平衡。在這種連續(xù)的平衡中，可變因素已經(jīng)得到了暫時(shí)的平衡。改變一個(gè)因素便會(huì)發(fā)生一系列改變和調(diào)整。

解析：saturation飽和；continuum連續(xù)體；continuation繼續(xù)；melting point熔點(diǎn)。a continuum of 連續(xù)的。

7.B 譯文：成功人士如何處理一種新文化取決于很多因素，如一個(gè)人的原始教育和即將修正的具體行為

解析：固定搭配，be contingent on 取決于，依賴于。此外句子的主句是一個(gè)從句，即主語(yǔ)從句，所以謂語(yǔ)動(dòng)詞用單數(shù)。

8.D 譯文：因?yàn)橹袊?guó)的社會(huì)傳統(tǒng)強(qiáng)調(diào)個(gè)人與他的出生地和家庭的連接，所以那些公職人員對(duì)于將他們與他們的祖籍聯(lián)系在一起感到很懊喪。

解析：glue膠；feeling感覺(jué)；separation分離；attachment連接，聯(lián)系，attach to 連接到。

9.A 譯文：熟悉西方武器，歐洲官員的幫助以及蒸汽船的使用使得他的軍隊(duì)勝過(guò)當(dāng)時(shí)的包括政府軍隊(duì)在內(nèi)的其他軍隊(duì)。

解析：介詞固定搭配，be superior to優(yōu)于，勝過(guò)。

10.B 譯文：地方上，通過(guò)風(fēng)俗、禮儀、教育和組成社會(huì)行為的各種活動(dòng)形式所呈現(xiàn)出的傳統(tǒng)支持穩(wěn)定，阻止變化的趨勢(shì)。

解析：spell out 講清楚；manifest呈現(xiàn)，顯示；given 給予的；explain解釋。

11.B 譯文：通過(guò)對(duì)他成名階段的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)他用來(lái)加強(qiáng)自身實(shí)力的方法和為了維護(hù)其權(quán)利的體制改革幫助我們解釋了官僚主義占主導(dǎo)的社會(huì)中的權(quán)利因素和權(quán)利力量。

解析：think of 想起；account for 解釋，說(shuō)明；consider考慮；weigh權(quán)衡。

12.A 譯文：政府的失控源自于整個(gè)官僚機(jī)器的日漸無(wú)能，這正如一起的朝代循環(huán)一樣。這樣的能力下滑歸因于腐敗，腐敗在中國(guó)經(jīng)常被提及。

解析：be ascribed to歸因于；result from由于，起因于result in 導(dǎo)致；cause引起。根據(jù)空處的意思，此處為被動(dòng)，只有A在這里可以用被動(dòng)。

13.B 譯文：不停地爭(zhēng)論策略問(wèn)題后，李終于因?yàn)榫芙^為茨奧設(shè)計(jì)他不以為然的紀(jì)念物而耗盡了茨奧的耐心。

解析： 固定搭配，take exception to不以為然，反對(duì)。

14.A 譯文：他對(duì)這座城市感到厭惡因?yàn)檫@城市受外國(guó)人影響太嚴(yán)重了。而他眼中的外國(guó)人是墮落而又不講道德的。

解析：unscrupulous寡廉鮮恥，不講道德的； in principle 大體上，原則上；out of principle 背離原則。

15.B 譯文：常勝軍隊(duì)附屬于組織欠妥、訓(xùn)練不足、紀(jì)律不嚴(yán)的政府地方部隊(duì)。

解析：固定搭配，adjunct to 附屬于，部下。

Section B 16.D 譯文：美國(guó)專業(yè)學(xué)者和教授人問(wèn)批判思維獨(dú)立思維是一種很有價(jià)值的技能，他們通常會(huì)因現(xiàn)在的學(xué)生缺乏這種能力而傷感遺憾。

解析：題目中的lament表達(dá)的是“遺憾”的意思，所以D“ regret strongly 深表遺憾”與題目意思相符。

17.D 譯文：現(xiàn)在需要的不是同新加坡與馬老西亞對(duì)亞洲價(jià)值爭(zhēng)論的版本一致的某種令人不快的民族主義拍胸脯，現(xiàn)在需要的是一個(gè)解釋來(lái)說(shuō)明相同背景的文化價(jià)值既產(chǎn)生了發(fā)電機(jī)也產(chǎn)生了骰子。

解析：sober冷靜的；rhetoric花言巧語(yǔ)的；banal陳腐的； D very unpleasant 正是表達(dá)了題目中“不愉快的”的意思。

18.C 譯文： 非難指揮官的后果由他的弟弟承擔(dān)了。誹謗年輕的州長(zhǎng)在向君王報(bào)告他的繼承人的死訊時(shí)犯錯(cuò)了的謠言一出現(xiàn)時(shí)，南京戰(zhàn)場(chǎng)的硝煙便難以消散了。

解析：根據(jù)題目中的“voices arose”可知這個(gè)聲音就是指的后面的內(nèi)容，malign本意指的是“誹謗某人”，而在此處，題中的意思是“所出現(xiàn)的關(guān)于州長(zhǎng)的謠言”。所以答案為C“傳播謠言”。

19.B 譯文：雖然中央集權(quán)的武裝力量是他們連續(xù)執(zhí)政的保障，但是軍隊(duì)只是管理機(jī)構(gòu)的一部分，并且它易于腐敗墮落。

解析：根據(jù)題意，只有“ prone to 易于，傾向于”符合。A中“more likely to be corruption”才是正確的。

20.B 譯文：把全部力量放在南京在最早的可能時(shí)間里攻陷南京還是實(shí)現(xiàn)把力量用于解放上海的需要，這讓他很困擾。

解析：irritated生氣的；beset困擾的，表示某人因某事而困擾，符合題意；torn撕裂的；tortured折磨的。

21.D 譯文：當(dāng)中國(guó)傳統(tǒng)歷史的體制問(wèn)題與在西方影響下引入的新元素相融合時(shí)，由于處于帝國(guó)時(shí)期的末期，李的職業(yè)歷史便走向了一條特殊的道路。

解析：merged with 與?融合，結(jié)合。

22.D 譯文：在新的授權(quán)下通過(guò)王朝政權(quán)的新中央集權(quán)解決孔子思想的知識(shí)危機(jī)之前，西方?jīng)_擊所引起的孔子思想的知識(shí)危機(jī)破壞了社會(huì)秩序本身，這就讓社會(huì)秩序更容易受到政治體制瓦解的攻擊。

解析：functional功能的；malpractice 玩忽職守；integration集成，綜合；disintegration瓦解，崩潰。

23.B 譯文：政府所要求的質(zhì)量帶有實(shí)在、道德倫理的本質(zhì)，孔子傳統(tǒng)對(duì)于維持穩(wěn)定、認(rèn)可帝國(guó)統(tǒng)治是必不可少的，這便是保持孔子傳統(tǒng)的目的。

解析： useful有用的；essential 必不可少的；instrumental有幫助的；vital 極其重要的。雖然四個(gè)詞放在題目中均讀的通，但根據(jù)題意，我們選擇最合適的，即B。

24.C 譯文：學(xué)術(shù)準(zhǔn)備的過(guò)程很艱難，它要求系統(tǒng)地通過(guò)一系列考試?？荚囍械某晒Q定了學(xué)位的授予，這在中國(guó)被認(rèn)為是最可靠的財(cái)富和權(quán)利的來(lái)源。

解析：bestowal贈(zèng)與；giving 給予；conferring文憑、學(xué)位的授予；offering提供。25.B 譯文：他們幫助官員組織項(xiàng)目，負(fù)責(zé)項(xiàng)目的維護(hù)，處理組織、指導(dǎo)和廣大勞動(dòng)者的生計(jì)所涉及到的無(wú)數(shù)的細(xì)節(jié)。

解析：staff 職員；sustenance生計(jì)；ingredient原料，要素；component成分，組件。26.C 譯文：他完善了后來(lái)成為了李的武裝力量的模板的理論、哲學(xué)和模式。

解析：furnish提供；decorate 修飾；polish 使完美，完善；meditate冥想。27.A 譯文：當(dāng)他通過(guò)合并當(dāng)?shù)亓α縼?lái)建立軍隊(duì)時(shí)。

解析：incorporate合并，吸收?！癷ncorporate”這個(gè)動(dòng)作是直接由句子的主語(yǔ)“he”來(lái)執(zhí)行的，所以介詞by后面直接跟動(dòng)詞的進(jìn)行時(shí)。

28.D 譯文：這樣的情況符合有意教化的大部分模式。他強(qiáng)調(diào)把真誠(chéng)和忠實(shí)作為主要的美德，并試圖撫平李性格中的不公正的部分。

解析：smooth光滑的；rough艱苦的，粗糙的；even平坦的； uneven不平衡的，不公正的，不正直的。

29.C 譯文：宜人的氣候，進(jìn)入絲綢茶葉的主產(chǎn)地的便利以及鄰近國(guó)內(nèi)主要的商業(yè)圈，讓上海比中國(guó)其他地區(qū)更能引起外國(guó)的注意。

解析：proximity to 鄰近某段。

30.B 譯文：由于匯票、還盤以及各方面的壓力的攀升，他要去哪里的問(wèn)題又涌現(xiàn)出來(lái)了。

解析：固定搭配，come to the fore 出現(xiàn)。題中的句子只是只是一個(gè)普通的過(guò)去陳述句，所以選B。

Part Ⅱ Cloze Test 31.答案A

解析：固定詞組，commercial boom商業(yè)繁榮。32.答案B 解析：四個(gè)選項(xiàng)中的詞都有“過(guò)多，額外”的意思，又根據(jù)“production capacity生產(chǎn)能力”，可知此空表示的應(yīng)該是“生產(chǎn)力過(guò)?！?，即“surplus production capacity”，所以答案為B。33.答案C 解析：前面提到生產(chǎn)力過(guò)剩將會(huì)消失，后面又提到增長(zhǎng)率的下降，所以我們可知該空表達(dá)的是“勞動(dòng)力區(qū)域短缺”，即“shrinking labor force”，因?yàn)樯a(chǎn)力不足結(jié)合勞動(dòng)力不足，就會(huì)導(dǎo)致增產(chǎn)率的下降，甚至招來(lái)金融危機(jī)。34.答案A 解析：該空前面一句的意思是“國(guó)民債務(wù)已經(jīng)達(dá)到了GDP的160%”。所以該空的意思是“大量的勞動(dòng)力的即將退休將會(huì)加劇這個(gè)問(wèn)題”，四個(gè)選項(xiàng)中表示“加劇，惡化”的是A。D雖然也有此意，但形式不對(duì)，應(yīng)該用動(dòng)詞ing的形式。35.答案A 解析：如果要解決前面的問(wèn)題，就必須增收賦稅。四個(gè)選項(xiàng)中hike, go up表示“提高”，但是“go up”是不及物動(dòng)詞，只能表示“tax goes up”，所以答案為A。36.答案B 解析：warning signal 警告信號(hào)，warning sign通常表示警告牌，警告標(biāo)志。37.答案C 解析：固定搭配，involvement in the economy經(jīng)濟(jì)干預(yù)，經(jīng)濟(jì)參與。38.答案D 解析：固定詞組，real estate房地產(chǎn)。39.答案C 解析：固定搭配，hostile merger and acquisition惡意并購(gòu)，惡意收購(gòu)。該句子的意思是“阻止惡意兼并”。40.答案B 解析：前面提到了日本對(duì)外商采取的措施：阻止外商通過(guò)參與日本經(jīng)濟(jì)從中獲利；增加外商在日本房地產(chǎn)業(yè)的稅收；阻止惡意并購(gòu)。這些措施都會(huì)阻止外商在日本的直接投資，所以表示“阻止”的是“B discourage”。

Part Ⅲ Reading Comprehension Passage one 41.答案 A 解析：根據(jù)第四段“commission”一詞的后面一句“said in an interview that his group is examining the policy debate on global warming.他的團(tuán)體正在研究全球變暖的政治辯論”?？芍膫€(gè)選項(xiàng)中只有A的意思符合。42.答案 A 解析：根據(jù)“A Washington-based think tank has been soliciting critiques”可知“accuse the group of seeking to distort the latest evidence for global warming”中的“the group”指的是前面的“華盛頓智囊團(tuán)”。所以答案為A。43.答案D 解析：根據(jù)第二段“Advocacy groups such as Greenpeace and the Public Interest Research Group”可知答案為D。44.答案 D 解析：根據(jù)第三段“Greenpeace spokeswoman Jane Kochersperger”可知答案為D。45.答案 B 解析：第六段“both of whom have questioned the need for caps on emissions of carbon dioxide and other gasses linked to global warming 二者皆懷疑限制二氧化碳和其它與全球變暖有關(guān)的氣體的釋放的需要”根據(jù)此意可知Kenneth Green認(rèn)為沒(méi)有必要限制這些氣體的釋放，所以答案為B。46.答案C 解析：從文章的第一段我們便可知道文章的主題，第一段講到華盛頓的一群智囊團(tuán)質(zhì)疑新近發(fā)布的有關(guān)全球變暖的證據(jù)報(bào)告，這導(dǎo)致了一些學(xué)術(shù)家和環(huán)境主義者對(duì)此的反駁和與智囊團(tuán)的爭(zhēng)辯。所以文章就是圍繞有關(guān)全球變暖的爭(zhēng)論開(kāi)始的。

Passage two 47.答案 B 解析：“Their roots fix the soil in place, preventing it from being carried off with the fierce Sahelian winds and preserving arable land.”這句話的意思是：樹(shù)的根可以防止水土流失，阻止土壤被.薩赫勒地區(qū)的狂風(fēng)刮走以及保護(hù)耕地?！癮rable”在這句的意思是“可耕種的”，所以四個(gè)選項(xiàng)中符合此意的是B。48.答案 D 解析：第一段“Severe drought in the 1970s and ’80s, coupled with a population explosion and destructive farming and livestock practices, was denuding vast swaths of land.”這句話提到了大面積的土地被剝奪的原因是“Severe drought in the 1970s and ’80s, coupled with a population explosion and destructive farming and livestock practices,”，并未提到D的內(nèi)容。49.答案 D 解析：根據(jù)第二段“how relatively small changes in human behavior can transform the regional ecology, restoring its biodiversity and productivity.”可知答案為D。50.答案D 解析：根據(jù)第五段“in recent years the government has recognized the benefits of that outlook by allowing individuals to own trees”可知答案為D。51.答案 D 解析：根據(jù)倒數(shù)第四段“The farmers can sell the branches for money.They can feed the pods as fodder to their animals.They can sell or eat the leaves.They can sell and eat the fruits.”可知樹(shù)對(duì)農(nóng)民的好處不包括D的內(nèi)容。52.答案D 解析：根據(jù)倒數(shù)第三段“They also have extraordinary ecological benefits.Their roots fix the soil in place, preventing it from being carried off with the fierce Sahelian winds and preserving arable land”可知答案為D。

Passage three 53.答案 D 解析：文章開(kāi)頭就提到了文章是辯論賽的決賽，那么辯論賽的現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)該是興奮而又喧鬧的，所以boisterous指的應(yīng)該是“喧鬧的”，四個(gè)備選項(xiàng)中表示“喧鬧的”意思的是D“noisy”。54.答案 C 解析：文章第一段“the world turning their backs on injustice, losing sight of “our humanitarian obligation.The world is ”bickering over the terminology that is used to describe what Darfur is facing,”這是Cecile對(duì)整個(gè)世界的控訴，不是對(duì)美國(guó)的控訴。第二段的內(nèi)容才是對(duì)美國(guó)的控訴，即“It all comes down to “people neglecting people.”所以答案為C。55.答案 A 解析：根據(jù)第四段“Emoni draws parallels between the Holocaust and current events in Africa by citing a lack of guidance, understanding and compassion.”，可知答案為A。56.答案B 解析：根據(jù)第六段“The situation in Darfur has primarily been ignored because the world lacks a powerful leader to get that message out”這句話中“get that message out”的意思是“將這個(gè)信息曝光，讓人們知道”，等同于“bring sth to light”所以答案為B。57.答案 A 解析：根據(jù)第七段“I think if people learn about it and they hear about it...if they understood it, then we can make a difference,” Emoni said, getting to the heart of her argument.”可知答案為A。58.答C 解析：根據(jù)倒數(shù)第二段“He can feel happy that his work, like, what he left behind, is still going on as if he was here today”，可知答案為C。

Passage four 59.答案 D 解析：最后一段講到：人們以前認(rèn)為吃非季節(jié)性水果或蔬菜很奢侈，然而現(xiàn)在這些非季節(jié)性產(chǎn)品已經(jīng)適應(yīng)了供應(yīng)的需求，因?yàn)槿藗兪褂棉r(nóng)藥大量的生產(chǎn)非季節(jié)性水果或蔬菜。所以machine在這里的意思是表示“適應(yīng)”，所以答案為D“condition 使適應(yīng)”。60.答案 C 解析：根據(jù)第一段“It is what’s left after all the other criteria for a good commercial tomato have been met: disease resistance, regular shape, consistent ripening, the ability to withstand picking and packing and shipping, a long shelf life.”可知C不在此標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)。61.答案 C 解析：根據(jù)第二段“the UglyRipe may be a better tomato.After all, its growers have selected for better taste, not perfect shape.”可知答案為C。62.答案A 解析：根據(jù)第二段“but it still uses methyl bromide, a powerful, ozone-depleting pesticide to fumigate the soil.”可知答案為A。63.答案 C 解析：根據(jù)最后一段“the use of methyl bromide was supposed to be phased out completely by January 2005”，“be phased out 逐漸淘汰，逐漸停止”,可知答案為C。64.答案C 解析：文章從西紅柿的種植開(kāi)始，到最后一段講到農(nóng)藥的使用，才涉及到了文章的主題“the truth is that there is no luxury——nor critical use——in it”這里的it指的便是環(huán)境。這些關(guān)鍵性的使用和奢侈的代價(jià)絕沒(méi)有破換環(huán)境的代價(jià)大。所以答案為C。

Passage five 65.答案 C 解析：根據(jù)第一段“A type of cell that floats freely in the amniotic fluid of pregnant women has been found to have many of the same traits as embryonic stem cells, including an ability to grow into brain, muscle and other tissues that could be used to treat a variety of diseases,”可知A,B,C均是胚胎干細(xì)胞的特征，只有C沒(méi)有提到。66.答案 D 解析：根據(jù)第二段“The cells, shed by the developing fetus and easily retrieved during routine prenatal testing,”可知答案為D。67.答案 C 解析：根據(jù)第三段“because the cells are a genetic match to the developing fetus, tissues grown from them in the laboratory will not be rejected”，可知答案為C。68.答案D 解析：根據(jù)第五段“embryonic ones that can morph into virtually any kind of tissue but are difficult to tame”可知答案為D。69.答案 A 解析：根據(jù)“Atala and other scientists emphasized that they don't believe the cells will make embryonic stem cells irrelevant.”和“ “There's not going to be one shoe that fits all,” said Robert Lanza, ”，可知 Robert Lanza，Atala and other scientists 的觀點(diǎn)是一致的，他不認(rèn)為這種新型細(xì)胞是萬(wàn)能的，會(huì)代替胚胎干細(xì)胞的所有功能，使之變得不相干。所以題干中的這句話實(shí)際上是在支撐前面的科學(xué)家的那句話“they don't believe the cells will make embryonic stem cells irrelevant.”。所以答案為A。70.答案A 解析：“retrieve“這個(gè)詞出現(xiàn)在“easily retrieved during routine prenatal testing”，這句話表達(dá)的是“在常規(guī)產(chǎn)前檢查中容易取出這種細(xì)胞做檢查”。所以表達(dá)此意的是A。

Part Ⅳ Translation Section A 英譯中

當(dāng)然，一個(gè)民族質(zhì)疑它的方向，希望保存其很多傳統(tǒng)價(jià)值觀是沒(méi)有錯(cuò)的。此外，日本不可能恢復(fù)過(guò)去詭秘、反競(jìng)爭(zhēng)的政策。因?yàn)楦母锏倪M(jìn)程已經(jīng)很深，而企業(yè)行為也已發(fā)生了翻天覆地的變化。但考慮到前方巨大的財(cái)政和金融挑戰(zhàn)，政府管制工作和私企改組上的一絲怠慢便會(huì)造成永久性的災(zāi)難?，F(xiàn)在不是日本故步自封的時(shí)候。

Section B中譯英

During the eleven years between 1992 and 2003, scientist applied farmers’ method to the growing of rice and controlled all the possible factors that would have an influence on good harvest, exclusive of temperature and carbon dioxide.Average night temperature was 1.8 Fahrenheit higher than that outside on the farm of the institute.As a result, rice yield declined by 10% on average.Therefore, the scientists reached a conclusion that hotter night may speed up rice respiration and consume energy by increasing the activity of rice.Part Ⅴwriting

Agricultural Technology Plays an Important Part in the Building of the New Countryside.Nowadays, with advanced developments in technology, technology is broadly applied to every aspect of agriculture.It has been bringing the changes of agricultural management, production and distribution.thus to a great extent, technology facilitate the construction of new countryside.To be frank, technology is very important when it comes to scientific farming.Agricultural technology has become the most effective means and tools for enhancing agricultural productivity and for making use of full agricultural resources.Agricultural information technology had been developing fast in all countries of China.For example, long time ago, when farmers went to work in the field, they had to do farm work by the means of tools such as a spade, shovel and hoe.These tools are really ineffective.Thus usually it took much time for them to finish the work.Besides, when it came to killing insects on a farm, farmers had to bear a spraying box of agricultural chemical to kill pesticides.Actually it was time-consuming and dangerous, for farmers were easy to get poisoned by the agricultural chemical.However, now changes happen in agriculture.Farmers do not need to do the farm work by themselves with the advent of weeding machine and large spraying equipment.Farming work is becoming more and more time-saving and effective.At the same time, farmers can gain more from farming to live a better life.From the benefits farmers obtain, we can know that how important the use of technology in agriculture is and its facilitation to the construction of new countryside.Therefore, In order to facilitate the construction of new countryside and make rural citizens live prosperous, more technologies should be applied to agriculture.