第一篇：Beclin1基因研究論文（共）

Beclin1基因也稱BECN1基因，是一種自噬相關(guān)基因，它與Bcl-2基因相互拮抗調(diào)控自噬。自噬是細(xì)胞中初級(jí)溶酶體處理內(nèi)源性底物的重要過(guò)程，同時(shí)參與維持細(xì)胞內(nèi)蛋白代謝平衡及內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的維持，在清除廢物、結(jié)構(gòu)重建以及細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育中起重要作用。近來(lái)Ⅱ型程序性細(xì)胞死亡-自噬性細(xì)胞死亡研究迅速受到人們的關(guān)注。自噬曾被Science評(píng)為全球科技領(lǐng)域6個(gè)研究熱點(diǎn)之一。然而自噬性細(xì)胞死亡研究主要集中在腫瘤學(xué)領(lǐng)域，在寄生蟲(chóng)學(xué)領(lǐng)域還很少得以開(kāi)展，目前已有關(guān)于自噬在弓形蟲(chóng)感染致病中的作用的研究報(bào)道，其中一種觀點(diǎn)認(rèn)為細(xì)胞自噬通過(guò)降解作能清除進(jìn)入胞內(nèi)的弓形蟲(chóng)保護(hù)正常細(xì)胞不被感染，另一種觀點(diǎn)認(rèn)為自噬參與弓形蟲(chóng)感染復(fù)制過(guò)程，抑制了宿主細(xì)胞自噬就抑制了弓形蟲(chóng)的增殖。然而關(guān)于細(xì)胞自噬在弓形蟲(chóng)感染致病過(guò)程中的具體作用，自噬途徑能否成為抗弓形蟲(chóng)治療的新靶點(diǎn)等還有待于深入研究。

本研究擬構(gòu)建Beclin1基因的真核表達(dá)載體并通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法將外源性Beclin1基因?qū)?93T細(xì)胞，再以Western blot的方法驗(yàn)證其在真核細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)，為進(jìn)一步探索外源性Beclin1基因?qū)蜗x(chóng)生長(zhǎng)、增殖及新的致病機(jī)制等提供基礎(chǔ)資料。

材料與方法

1.材料

1.1 細(xì)胞和載體

293T細(xì)胞和真核表達(dá)載體pEGFP均由安徽醫(yī)科大學(xué)病原生物學(xué)教研室保存。

1.2 主要試劑及儀器

質(zhì)粒小量提取試劑盒為美國(guó)Axygen公司產(chǎn)品，Trizol試劑和Lipo2000為美國(guó)Invitrogen公司產(chǎn)品;BamHⅠ、EcoRⅠ和rTaq mix為日本TaKaRa公司產(chǎn)品;逆轉(zhuǎn)錄試劑盒為美國(guó)Fermentas公司產(chǎn)品;DNA 膠回收試劑盒為德國(guó)QIAGEN公司產(chǎn)品;鼠抗pEGFP為英國(guó)Abcam 公司產(chǎn)品;HRP標(biāo)記山羊抗鼠IgG為北京全式金公司產(chǎn)品。

2.方法

2.1 RT-PCR擴(kuò)增目的基因

根據(jù)Trizol試劑說(shuō)明書(shū)提取293T細(xì)胞的總RNA，按照逆轉(zhuǎn)錄試劑盒步驟將RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。以cDNA 為模板，以beclin1基因編碼區(qū)全長(zhǎng)擴(kuò)增引物Beclin1-F(5′-CGGAATTCTATGGAAGGGTCTAAGACGTCC-3′)和Beclin1-R(5′-CGGGATCCTCATTTGTTATAAAATTGTGAGGACA-3′)，進(jìn)行PCR 反應(yīng)。取PCR產(chǎn)物5μl，用含EB的1%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳，分析PCR擴(kuò)增結(jié)果，按DNA膠回收試劑盒的說(shuō)明進(jìn)行目的片段的回收和純化。

2.2 PCR 產(chǎn)物和載體pEGFP的酶切及純化

取PCR產(chǎn)物10μl，用限制性內(nèi)切酶BamHⅠ和EcoRⅠ進(jìn)行雙酶切反應(yīng)，根據(jù)DNA 膠回收試劑盒說(shuō)明進(jìn)行酶切片段的回收和純化。

2.3 Beclin1基因與pEGFP的重組與鑒定

將雙酶切后膠回收的Beclin1和pEGFP按摩爾比3～10︰1的比例用1μl T4連接酶于16℃連接過(guò)夜，將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸埃希菌DH5α并進(jìn)行培養(yǎng)，從培養(yǎng)12h～16h的卡那抗性培養(yǎng)平板上挑取若干單克隆，分別放入3ml含卡那霉素的LB液體培養(yǎng)基中，于37℃以200r/min振搖過(guò)夜，按照質(zhì)粒提取試劑盒說(shuō)明提取質(zhì)粒。采用雙內(nèi)切酶切法和PCR法鑒定重組基因，雙酶切、PCR鑒定正確的重組表達(dá)質(zhì)粒送上海生工公司測(cè)序，并進(jìn)行Blast比對(duì)分析。

2.4 Beclin1基因在真核細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)

通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法分別將空載體pEGFP和pEGFP-Beclin1重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到293T細(xì)胞內(nèi)，24h后用熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染情況，提取轉(zhuǎn)染后細(xì)胞總蛋白，采用Westernblot檢測(cè)Beclin1基因編碼蛋白的表達(dá)情況。

結(jié) 果目的基因Beclin1PCR擴(kuò)增提取293T 細(xì)胞的總RNA，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，以cDNA為模板，用Beclin1基因全長(zhǎng)擴(kuò)增引物Primer-F和Primer-R擴(kuò)增得到Beclin1基因全長(zhǎng)編碼區(qū)片段，大小為1 353bp，與預(yù)期值一致。pEGFP-Beclin1重組載體pEGFP-Beclin1的鑒定pEGFP-Beclin1經(jīng)過(guò)限制性內(nèi)切酶BamHⅠ和EcoRⅠ雙酶切得到1 353bp目的基因片段和約4 700bp的載體pEGFP片段，經(jīng)上海生物工程試劑公司測(cè)序，測(cè)序結(jié)果經(jīng)Blast比對(duì)與beclin1基因序列同源性為100%。Beclin1蛋白在真核細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)用LiPo 2000分別介導(dǎo)pEGFP和pEGFP-Beclin1轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞，24h后在熒光顯微鏡下觀察到綠色熒光;Western blot檢測(cè)出目的蛋白，大小與預(yù)測(cè)一致。

討 論

弓形蟲(chóng)病是由專性細(xì)胞內(nèi)寄生的弓形蟲(chóng)引起的人獸共患寄生蟲(chóng)病，在世界各地普遍流行?；脊蜗x(chóng)病的孕婦可能將弓形蟲(chóng)傳染給胎兒，尤其當(dāng)感染發(fā)生在妊娠頭3個(gè)月，可引起流產(chǎn)，甚至死胎，或生下發(fā)育缺陷的患兒，已被列為感染性致畸(TORCH)綜合征主要原因之一。對(duì)于免疫功能嚴(yán)重?fù)p害或抑制者，弓形蟲(chóng)同樣是引起致死性病變的主要病原體之一。近年來(lái)隨著人們生活水平的提高，飲食習(xí)慣的改變，食物來(lái)源的多樣化，飼養(yǎng)寵物的人數(shù)的增多，弓形蟲(chóng)感染呈上升趨勢(shì)。傳統(tǒng)的抗弓形蟲(chóng)藥物包括乙胺嘧啶、磺胺嘧啶等毒副作用較大，用藥時(shí)間長(zhǎng)，只能殺死速殖子，停藥后易復(fù)發(fā)，因而限制了其應(yīng)用，至今仍缺少理想的治療弓形蟲(chóng)病藥物。

近年來(lái)，細(xì)胞自噬成為研究的熱點(diǎn)，Beclin1基因作為自噬相關(guān)基因倍受青睞。本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建了pEGFP-Beclin1重組載體并檢測(cè)到該基因編碼的蛋白在真核細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，為深入探索beclin1基因在弓形蟲(chóng)感染致病作用中的影響，了解弓形蟲(chóng)新的致病機(jī)制以及弓形蟲(chóng)病的預(yù)防和治療打下了基礎(chǔ)。

第二篇：基因美容論文

基因美容技術(shù)應(yīng)用

摘要：本文主要對(duì)基因美容技術(shù)應(yīng)用做了具體的分析和概述，使我們能夠更加深層次地認(rèn)識(shí)和理解基因美容技術(shù)，通過(guò)介紹基因美容需應(yīng)用到的技術(shù)，如基因工程、基因治療等以及基因美容的重要元素，如基因因子的作用，綜合地表達(dá)出基因美容的現(xiàn)況以及發(fā)展前景。

關(guān)鍵字：生物醫(yī)學(xué)美容；基因工程技術(shù)；應(yīng)用；展望

20世紀(jì)80代以來(lái)、由于生物技術(shù)尤其是基因工程技術(shù)的迅且也給相關(guān)或相鄰學(xué)科與產(chǎn)業(yè)帶來(lái)了變革的契機(jī)。由于多學(xué)科的交叉發(fā)展，現(xiàn)代美容模式已呈現(xiàn)出多元化、多層次、整體性的發(fā)展趨勢(shì)。尤其是現(xiàn)代生物工程技術(shù)的迅速發(fā)展，以及生物工程技術(shù)向醫(yī)學(xué)整形美容等領(lǐng)域的滲透和廣泛應(yīng)用，給整形科學(xué)、美容學(xué)、化妝品學(xué)都帶來(lái)了全新的發(fā)展機(jī)遇。美容學(xué)與生物工程技術(shù)、醫(yī)藥技術(shù)的緊密結(jié)合，逐漸發(fā)展為美容科學(xué)的一個(gè)嶄新分支——生物醫(yī)學(xué)美容，為美容行業(yè)注入了一股強(qiáng)勁的活力和蓬勃的生饑。

1、生物醫(yī)學(xué)美容技術(shù)的介紹

1.1美容的種類：美容學(xué)是一門(mén)研究并改善容貌形體美的科學(xué)，它一方面通過(guò)使用美容化妝品，保護(hù)、美化顏面皮膚，保持皮膚健康美麗；另一方面消除和改善身體的某些生理和病理缺陷；美容一般分為生活美容和醫(yī)學(xué)美容。（1）生活美容

是指通過(guò)生活化妝品和服飾佩戴來(lái)增進(jìn)容貌體形美，如皮膚護(hù)理、嚴(yán)發(fā)美發(fā)、化妝、服飾等。（2）醫(yī)學(xué)美容

醫(yī)學(xué)美容是通過(guò)醫(yī)學(xué)手段，包括藥物、儀器及手術(shù)等，以達(dá)到改變?nèi)梭w外部形態(tài)、色澤及部分改善其生理功能，進(jìn)而增強(qiáng)人體外在美感為目的的科學(xué)性、技術(shù)性與藝術(shù)性極強(qiáng)的醫(yī)學(xué)科學(xué)，包括文刺美容、中醫(yī)藥美容、激光美容及各種美容整形外科手術(shù)等。

且醫(yī)學(xué)美容區(qū)別于生活美容的根本點(diǎn)，即凡是有一定創(chuàng)傷的美容治療，一定是醫(yī)學(xué)美容的范疇，而醫(yī)學(xué)美容在我國(guó)要醫(yī)療機(jī)構(gòu)才能開(kāi)展。

2、基因工程應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)美容

將基因工程技術(shù)應(yīng)用于整形及美容方面，可以發(fā)揮神奇效果，主要應(yīng)用DNA重組技術(shù)，可以將—些在整形美容中起重要作用的蛋白質(zhì)(如各種細(xì)胞生長(zhǎng)因子)在真核及原核細(xì)腦中高效表達(dá)。使得適量補(bǔ)充某些外源性蛋白質(zhì)成為可能．真正解決了其他方法不能解決的問(wèn)題。

在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中，利用現(xiàn)代生物技術(shù)，既用某些目的基因與宿主細(xì)胞基因發(fā)生結(jié)合，由其表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮治療作用的基因治療方法稱為基因療法。基因美容也是利用上述概念，利用某些細(xì)胞生長(zhǎng)因子，即對(duì)多種細(xì)胞生理功能和代謝功能發(fā)揮生物調(diào)節(jié)作用生物活性因子，促進(jìn)細(xì)胞納生長(zhǎng)、分裂、分化、增殖和遷移，從而達(dá)到加速損傷細(xì)胞和組織的修復(fù)，控制和調(diào)節(jié)皮膚老化進(jìn)程，延緩皮膚老化等作用，對(duì)保持正常皮膚和組織的結(jié)構(gòu)和功能、維持機(jī)體的正常生理活動(dòng)和代謝也具有重要作用。2.1基因工程美容原理

（1）基因重組：利用基因工程使DNA重組，將—些在整形美容中起重要作用的蛋白質(zhì)，即細(xì)胞生長(zhǎng)因子高效表達(dá)出來(lái)。再將某些細(xì)胞生長(zhǎng)因子應(yīng)用于臨床，可以加速皮膚損傷過(guò)程中膠原合成的增加，增加血管內(nèi)皮細(xì)胞受體敏感性，加速破損組織的上皮愈合，減少繼發(fā)感染及愈合延遲的發(fā)生。對(duì)于各種整形美容手術(shù)，如磨削術(shù)、文刺術(shù)、植皮術(shù)及各種修復(fù)術(shù)等發(fā)揮積極作用。

（2）基因因子：在組織修復(fù)的整個(gè)過(guò)程中，細(xì)胞因子都起著關(guān)鍵作用，它們通過(guò)分泌和旁分泌途徑來(lái)觸發(fā)、控制和終止炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)、細(xì)胞增殖、基質(zhì)分泌和服痕形成。作用機(jī)制：

a.在表皮水平上：影響角化細(xì)胞的活性和生長(zhǎng)因素，刺激角化細(xì)腦遷移和上皮化，刺激表皮細(xì)胞分化和矯正，強(qiáng)烈促進(jìn)表皮修復(fù)和愈合。

b.在真皮水平上：刺激成纖維細(xì)胞活性，增強(qiáng)細(xì)胞外基質(zhì)收縮和構(gòu)造，提供皮膚養(yǎng)分促進(jìn)皮膚傷口愈合和功能再生。

c.在皮膚整體水平上：增強(qiáng)對(duì)環(huán)境侵襲、紫外線、污染物、刺激物、敏化劑、炎性細(xì)腦的抵抗力，鞏固、增強(qiáng)皮膚張力，增強(qiáng)皮膚彈性、刺激疤痕組織褪色，減少瘢痕形成，延緩皮膚衰老。

2.2基因治療的美容應(yīng)用

（1）基因治療：主要將生長(zhǎng)因子的基因轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)，使局部有效而穩(wěn)定的合成生長(zhǎng)因子來(lái)促進(jìn)組織修復(fù)。（2）途徑：

a.體內(nèi)法，即將載有目的基因的載體直接注入受損創(chuàng)面，從而將目的基因整合到基因組上，提高生長(zhǎng)因子等促創(chuàng)面愈合因子的分泌；

b.體外法，可克服體內(nèi)法的不足，將待轉(zhuǎn)染的細(xì)胞從機(jī)體中分離出來(lái)．在體外培養(yǎng)，擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)，然后再運(yùn)用多種轉(zhuǎn)基因方法將目的基因?qū)爰?xì)胞，經(jīng)篩選將載有目的基因的細(xì)胞回輸入機(jī)體，從而在機(jī)體中分泌該種生長(zhǎng)因子，促進(jìn)創(chuàng)面愈合。

3、基因重組制品

細(xì)胞調(diào)控因子是由蛋白質(zhì)和肪類不同成分組成的．對(duì)多種細(xì)胞生理功能及代謝活動(dòng)發(fā)揮生物調(diào)節(jié)作用的生物活性因子。它們能夠直接或間接地影響細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂、代謝及細(xì)胞活性物質(zhì)的分泌。生物學(xué)和醫(yī)學(xué)界把它們稱為生物活性多膚。細(xì)胞因子是通過(guò)高科技手段運(yùn)用生物工程方法從生物體內(nèi)提取的具有生物活性的物質(zhì)，把細(xì)胞因子作為化妝品的生物添加劑，投入于化妝品生產(chǎn)之中，顯示出良好的應(yīng)用效果．如將表皮生長(zhǎng)因子(EGF)加入化妝品之中，能促使表皮細(xì)胞分裂增殖，使衰老死亡的表皮細(xì)胞得以即時(shí)補(bǔ)充．使損傷的表皮得以即時(shí)修復(fù)，可用于對(duì)換膚、退紅、毛細(xì)血管外露等各種不良膚質(zhì)的調(diào)整。

將成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子加入化妝品中，能促進(jìn)中胚層和神經(jīng)外胚層來(lái)源的細(xì)胞生長(zhǎng)，有效恢復(fù)皮下結(jié)締組織的生長(zhǎng)，使新生表皮細(xì)胞取代衰老的角質(zhì)細(xì)胞，從而消除皮膚深度皺紋并促進(jìn)表皮細(xì)胞代謝，使皮膚更加光滑、飽滿、煥發(fā)天然魅力，能促進(jìn)成纖維細(xì)胞、膠原細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞等分裂、增殖．使深層次損傷皮膚組織迅速修復(fù)，加速傷口愈合(比正常愈合速度要快3—4倍)，對(duì)皮膚組織的各種創(chuàng)傷或去除座瘡、去痣后的小缺損，換膚后的脫皮，發(fā)紅、果酸等使用導(dǎo)致的皮膚灼傷及磨削后深層肌膚損傷修復(fù)具有突出效果。3.1三大基因美容因子介紹

（1）aFGF酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子

aFGF是一種有多種生物效應(yīng)的基本調(diào)節(jié)因子。它針對(duì)中層皮膚起作用，并且與皮膚和各種美容品常用的載體如膏、霜、乳、液、水等具有同樣的酸性特質(zhì)，不會(huì)

因?yàn)樗釅A中和的問(wèn)題，使功效受影響。能使皮膚得到充分的營(yíng)養(yǎng)，明顯改善膚色，使蠟黃、無(wú)光澤、不健康的皮膚呈現(xiàn)白里透紅、健康的光澤，能養(yǎng)發(fā)、護(hù)發(fā)，促進(jìn)頭發(fā)的再生，防止脫發(fā)并營(yíng)養(yǎng)發(fā)質(zhì)，避免頭發(fā)受機(jī)械和化學(xué)損傷．保持頭發(fā)光澤而富有彈性。

（2）bFGF堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子

bFGF是人體中一種微量而生理功能企業(yè)非常廣泛的物質(zhì)。它可促進(jìn)組織和神經(jīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)，令那些難愈的創(chuàng)面?zhèn)€受損的神經(jīng)得以修復(fù)、治愈。（3）hEGF表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子

HEGF在皮膚淺層即表皮的修護(hù)上有著極其顯著的效果。①能使損傷的表皮得以及時(shí)修復(fù)，可用于等于換膚、退紅后毛細(xì)血管外露等各種不良的調(diào)整②能平衡表皮曬斑嗎、，防止色素沉著活反彈③能減少皮膚皺紋、延緩衰老④對(duì)傷害刺激如紫外線、低溫、藥物等有極為顯著的防護(hù)作用⑤能改善皮膚色澤，平衡皮膚水分

“肽能”細(xì)胞調(diào)控因子(表

4、表5)不是單一的細(xì)胞因子．它主要是由天然營(yíng)養(yǎng)多肽、酪氨酸酶平衡多肽和混合修復(fù)多肪組成。將這種由多種因子組合而成的細(xì)胞調(diào)控因子添加入化妝品中．顯示出良好的應(yīng)用效果，可以同時(shí)發(fā)揮其各自的優(yōu)勢(shì)?；旌闲迯?fù)多肽是在表皮生長(zhǎng)因子(EGF)和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)組合的基礎(chǔ)上，又加入了新型具有不同層次修復(fù)作用的修復(fù)因子TGF、PDGF。其作用除具有EGF、FGF功能之外，還能從不同層次、多方位地作用于表皮和真皮細(xì)胞，通過(guò)與細(xì)胞膜表面的受體特異性結(jié)合，平衡衰老和損傷信號(hào)系統(tǒng)促進(jìn)細(xì)胞分裂、增殖，加速損傷的修復(fù)?；謴?fù)衰老細(xì)胞代謝活性，達(dá)到最佳生理狀態(tài)。

3.2細(xì)胞調(diào)控因子作用機(jī)理

3.3基因重組制品

(1)肽能口服液。系以天然生物為主要原料．采用現(xiàn)代生物技術(shù)精制而成，內(nèi)含有多種生物活性因子組成的細(xì)胞調(diào)控因子（CRF）和豐富的天然營(yíng)養(yǎng)多肽能激活人體自身的抗衰老體系，能促進(jìn)機(jī)體新陳代謝，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力，消除疲勞．增強(qiáng)耐力，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌，平衡色素代謝，排毒養(yǎng)顏，全方位調(diào)理肌膚，達(dá)到內(nèi)調(diào)外治、美容、健體、抗衰老功效

(2)細(xì)胞調(diào)控因子(CRF)導(dǎo)入型。CRF是由多種生物細(xì)胞因子有機(jī)組合而成，能不同層次、多方位作用于表皮和真皮細(xì)胞，有效地啟動(dòng)人體皮膚細(xì)胞的再生能力和修復(fù)功能

(3)細(xì)胞調(diào)控因子(CRF〕原液類?？裳杆傩迯?fù)組織缺損，尤其是整形手術(shù)后的快速恢復(fù)，以及 “換膚”后皮膚的恢復(fù)，效果甚佳。長(zhǎng)期使用能使皮膚保持細(xì)膩、光滑，提高彈性，延緩衰老

(4)法國(guó)其瑪：Dr細(xì)胞因子、Km細(xì)胞因子CAMP、B—ZHT、嘌呤核苷酸、其瑪特有的基因產(chǎn)品，其獨(dú)特的產(chǎn)物來(lái)源于法國(guó)其瑪科技集團(tuán)公司，采用最新的瓶頸效應(yīng)達(dá)到多因子合成。它的分子量極小，滲透吸收更快，內(nèi)調(diào)外治全面護(hù)理，從而在

美容，美體，抗衰老等方面實(shí)現(xiàn)了革命性突破(5)家庭護(hù)理程序。（適用于正常皮膚、下性皮膚）

(6)美容院、家庭護(hù)理程序。(適用于無(wú)光澤、暗黃粗糙的皮膚)3.3基因重組制品應(yīng)用注意事項(xiàng)

并非所有的基因工程產(chǎn)品均具有生物美容的效果，現(xiàn)代生物美容的基礎(chǔ)是受美容部位(主要是皮膚)與生物制劑之間的相互作用。因此，從理論上來(lái)講只有那些能與皮膚表皮細(xì)胞上生長(zhǎng)因子受體相互作用的因子才具有生物美容的效果。目前國(guó)內(nèi)外已開(kāi)發(fā)成功ECF、bFGF、aFGF、TNF等生長(zhǎng)因子中，有的經(jīng)證明有良好的美容效果，而有的因子的療效卻的在考察之中，有待進(jìn)—步確定。

4、基因美容的前景 4.1基因經(jīng)濟(jì)與基因美容

基因經(jīng)濟(jì)就是用基因產(chǎn)品賺錢(qián)。用基因掙錢(qián)當(dāng)然包括人們?cè)趥鹘y(tǒng)經(jīng)濟(jì)中的所有經(jīng)濟(jì)活動(dòng)，還有基因經(jīng)濟(jì)所特有的新的經(jīng)濟(jì)活動(dòng)，也就是熊·彼德所說(shuō)的創(chuàng)新[1]。“基因就是錢(qián)”的說(shuō)法來(lái)自人類基因組計(jì)劃國(guó)際組織中國(guó)協(xié)調(diào)人楊煥明教授，這也是許多人對(duì)基因經(jīng)濟(jì)的認(rèn)識(shí)。比如說(shuō)促紅細(xì)胞生成素EPO，不僅各類貧血病人要買(mǎi)它來(lái)治病，而且普通人也想買(mǎi)它來(lái)作為補(bǔ)品服用。生產(chǎn)和銷售這種產(chǎn)品就是一種經(jīng)濟(jì)形態(tài)和經(jīng)濟(jì)活動(dòng)。生產(chǎn)者用它來(lái)賺錢(qián)，消費(fèi)者用它來(lái)治病，生產(chǎn)者和消費(fèi)者在這一經(jīng)濟(jì)活動(dòng)中各得其所。生產(chǎn)和出售EPO的這個(gè)錢(qián)無(wú)論是誰(shuí)賺和流通到哪里，無(wú)疑是一種經(jīng)濟(jì)和市場(chǎng)效應(yīng)。

由此可見(jiàn)，基因經(jīng)濟(jì)是以基因產(chǎn)品滿足人們精神和物質(zhì)需求并能形成資本運(yùn)作、資本市楊、擴(kuò)大再生產(chǎn)和推動(dòng)整個(gè)社會(huì)經(jīng)濟(jì)創(chuàng)新和迅速增長(zhǎng)的一種經(jīng)濟(jì)。而以基因重組產(chǎn)品為主的基因美容經(jīng)濟(jì)，無(wú)疑是有大好的前景的。4.2基因美容的思考

生物基因工程技術(shù)的不斷發(fā)展,使得其對(duì)生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域都起到或多或少的推動(dòng)作用。人的壽命、衰老、體型、發(fā)育、人體各種組織狀態(tài)包括皺紋形成、色素沉著、表皮粗嫩、膚色好壞，無(wú)一不是由基因的調(diào)控。今日的生物基因工程技術(shù)盡管離徹底解決上述種種問(wèn)題還很遙遠(yuǎn) 但它卻已為美容學(xué)的發(fā)展提供了一個(gè)新的思路和方向。

參考文獻(xiàn)：

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第三篇：基因的論文

基因——生命的遺傳密碼

世界上沒(méi)有兩片相同的葉子，同樣也沒(méi)有兩個(gè)完全一模一樣的人?？纯次覀冎車娜?，為什么有的人是雙眼皮，有的人是單眼皮，有的人有酒窩，有的人沒(méi)有酒窩，當(dāng)左右手指嵌合時(shí)，有的人習(xí)慣于左手的拇指在上，有的人習(xí)慣于右手的拇指在上，而且這些性狀都是成對(duì)出現(xiàn)的。但是我們發(fā)現(xiàn)子女的外貌和父母很相似。這些現(xiàn)象究竟和什么有關(guān)呢？ 人們經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的研究得出了基因這一概念?；蚴沁z傳的物質(zhì)基礎(chǔ)，是DNA（脫氧核糖核酸）分子上具有遺傳信息的特定核苷酸序列的總稱，是具有遺傳效應(yīng)的DNA片段?；蛲ㄟ^(guò)復(fù)制把遺傳信息傳遞給下一代，使后代出現(xiàn)與親代相似的性狀。人類大約有幾萬(wàn)個(gè)基因，儲(chǔ)存著生命孕育生長(zhǎng)、凋亡過(guò)程的全部信息，通過(guò)復(fù)制、表達(dá)、修復(fù)，完成生命繁衍、細(xì)胞分裂和蛋白質(zhì)合成等重要生理過(guò)程?；蚴巧拿艽a，記錄和傳遞著遺傳信息，它同時(shí)也決定著人體健康的內(nèi)在因素，與人類的健康密切相關(guān)。

一、基因重組

基因重組是指非等位基因間的重新組合，能產(chǎn)生大量的變異類型，但只產(chǎn)生新的基因型，不產(chǎn)生新的基因?；蛑亟M是利用基因自由組合定律，在進(jìn)行減數(shù)分裂形成配子的過(guò)程中，同源染色體上的等位基因彼此分離的時(shí)候，非同源染色體上的非等位基因的自由組合和同源染色體的染色單體之間的交叉互換。根據(jù)基因自由組合定律，利用基因的獨(dú)立分配或連鎖基因之間的交換，使得后代中出現(xiàn)親代所沒(méi)有的基因組合?；蛑亟M是雜交育種的生物學(xué)基礎(chǔ)，現(xiàn)在人們可以有目的地使生物的某些基因重新組合，導(dǎo)致后代發(fā)生變異，從而產(chǎn)生出對(duì)人類有益的新品種，例如抗倒伏又抗銹的新型小麥，對(duì)生物圈的繁榮昌盛起重要作用，此外，這也是基因工程中的關(guān)鍵性內(nèi)容。

二、基因突變

基因突變是指基因的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，也就是在DNA分子的片段中發(fā)生了堿基對(duì)的增添、缺少或改變，從而導(dǎo)致遺傳信息的改變?；蛲蛔兺ǔ０l(fā)生在DNA復(fù)制時(shí)期，即細(xì)胞分裂間期，包括有絲分裂間期和減數(shù)分裂間期，因?yàn)槭艿絻?nèi)部因素和外界因素的干擾而發(fā)生差錯(cuò)。在自然界中，雖然生物突變的性狀隨處可見(jiàn)，但是對(duì)于每一種生物來(lái)說(shuō)，基因發(fā)生自然突變的頻率是非常低的，但能產(chǎn)生新的基因，對(duì)生物的進(jìn)化有重要意義。同時(shí)基因突變和脫氧核糖核酸的復(fù)制、DNA損傷修復(fù)、癌變和衰老都有關(guān)系，基因突變也是生物進(jìn)化的重要因素之一，所以研究基因突變除了本身的理論意義以外還有廣泛的生物學(xué)意義?；蛲蛔?yōu)檫z傳學(xué)研究提供突變型，為育種工作提供素材，所以它還有科學(xué)研究和生產(chǎn)上的實(shí)際意義。

三、基因突變導(dǎo)致的人類遺傳病

由基因突變引起的人類遺傳病有兩類情況，一類是由顯性致病基因引起的，一類是由隱性致病基因引起的。顯性遺傳病，是由位于常染色體上的顯性致病基因引發(fā)的，而它是由隱性正?；蛲蛔兌鴣?lái)的。患者一定有一個(gè)患同樣病的親屬，如軟骨發(fā)育不全（侏儒癥）、血膽固醇過(guò)多癥、多指（趾）畸形等；隱性遺傳病，是由于正?；蛲蛔?yōu)殡[性基因而造成的，雙親外表一切正常，但帶有疾病基因，如白化病、苯丙酮尿癥等；隔代遺傳病（X連鎖遺傳?。Ｅ缘膬蓷lX染色體中的一條在攜帶致病基因時(shí)發(fā)生了最普通的性連鎖異常，所生兒子有50%得到這個(gè)基因并有出現(xiàn)病癥的可能，所生女兒也有50%機(jī)會(huì)成為像母親一樣的攜帶者，通常女兒不患病但能將疾病再傳給她的兒子，例如色盲、蠶豆病、血友病等；多基因遺傳病，是由許多基因與別的基因或環(huán)境因素相互作用產(chǎn)生的，發(fā)生概率較低，如唇裂、先天畸形足、脊柱裂、腦積水等。

四、從系譜圖看遺傳類型

若

以上系譜圖依次是常染色體隱性遺傳、X染色體顯性遺傳、X染色體隱性遺傳、Y染色體遺傳

（一）若系譜圖中，患者全為男性，正常的全為女性，而且男性全為患者，女性都正常，則為伴Y遺傳。

（二）確定是否為母系遺傳

若系譜圖中，女患者的子女全部患病，正常女性的子女全部正常，即子女的表現(xiàn)型與母親相同，則為母系遺傳（細(xì)胞質(zhì)遺傳）。

（三）確定是顯性遺傳病還是隱性遺傳病

1、無(wú)病的雙親，所生的孩子中有患病，一定是隱性遺傳病。（1）若女患者的父親和兒子都患病，則為伴X隱性遺傳。（2）若女患者的父親和兒子中有正常的，則為常染色體隱性遺傳。

2、有病的雙親，所生的孩子中出現(xiàn)無(wú)病的，一定是顯性遺傳病。

（1）若男患者的母親和女兒都患病，則為伴X顯性遺傳。（2）若男患者的母親和女兒中有正常的，則為常染色體顯性遺傳。

第四篇：基因論文

表達(dá)載體和特殊用途的載體

摘要：目的基因能夠有效轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，并在其中維持高效表達(dá)，很大程度上取決于所采用的載體，載體的改進(jìn)和新載體的構(gòu)建是基因工程研究中十分重要的內(nèi)容。表達(dá)載體和特殊用途的載體是在克隆載體的基礎(chǔ)上不斷發(fā)展起來(lái)的，其構(gòu)建原理和構(gòu)建步驟各有特點(diǎn)，隨著載體的發(fā)展，表達(dá)載體和特殊用途的載體發(fā)揮著越來(lái)越大的作用。

關(guān)鍵詞：表達(dá)載體 特殊用途的載體 構(gòu)建原理 構(gòu)建步驟 應(yīng)用 1 表達(dá)載體

1.1 表達(dá)載體的概念

表達(dá)載體是可攜帶DNA片段進(jìn)入宿主細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制并進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、翻譯的載體。一般在克隆載體基礎(chǔ)上增加了基因表達(dá)的調(diào)控元件。表達(dá)載體的類型很多可分為質(zhì)粒表達(dá)載體、病毒表達(dá)載體、人工染色體和可轉(zhuǎn)移表達(dá)載體等類型。每種類型中的不同載體又有其不同的適用宿主。1.2表達(dá)載體構(gòu)建原理

1.21 質(zhì)粒表達(dá)載體構(gòu)建原理和步驟

質(zhì)粒表達(dá)載體組成：在以質(zhì)粒為基本骨架的克隆載體的基礎(chǔ)上，組裝啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄終止子和核糖體結(jié)合位點(diǎn)等表達(dá)元件而構(gòu)建成的。質(zhì)粒表達(dá)載體又可以分為原核表達(dá)載體和酵母表達(dá)載體。1.211 原核表達(dá)載體構(gòu)建原理和步驟

首先，原核表達(dá)載體的表達(dá)元件主要包括啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄終止子和核糖體結(jié)合位點(diǎn)。其中，啟動(dòng)子主要有l(wèi)ac，trp，tac，T7噬菌體啟動(dòng)子和1PL啟動(dòng)子。

根據(jù)其表達(dá)方式，可分為組成型表達(dá)，誘導(dǎo)型表達(dá)，融合型表達(dá)（表達(dá)載體的多克隆位點(diǎn)上有一段融合表達(dá)標(biāo)簽(tag)，表達(dá)為融合蛋白(N端融合或C端融合)，可方便后續(xù)的蛋白分離純化或檢測(cè)。GST（谷胱苷肽S轉(zhuǎn)移酶基因標(biāo)簽或6×His標(biāo)簽），分泌型表達(dá)。

原核表達(dá)載體構(gòu)建原理： 1.獲得目的基因

（1）通過(guò)PCR方法：以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板，按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物（在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)），PCR循環(huán)獲得所需基因片段。（2）通過(guò)RT-PCR方法：提取總RNA，以mRNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈，以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

構(gòu)建重組表達(dá)載體

（1）載體酶切：將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶（同引物的酶切位點(diǎn)）進(jìn)行雙酶切，酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后，用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。（2）PCR產(chǎn)物雙酶切后回收，在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

（1）將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌，根據(jù)重組載體的標(biāo)志（抗Amp或藍(lán)白斑）作篩選，挑取單斑，堿裂解法小量抽提質(zhì)粒，雙酶切初步鑒定。（2）測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆，重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn),（3）以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

典型的原核表達(dá)載體：pGEX-4T-1是pGEX系列載體之一，由pBR322基本骨架改造而來(lái)，帶ampr，在啟動(dòng)子tac和多克隆位點(diǎn)之間加入2個(gè)與表達(dá)蛋白分離純化和檢測(cè)有關(guān)的序列，其一是GST：其二是凝血蛋白酶切割位點(diǎn)的編碼序列，當(dāng)外源基因插入后，可在大腸桿菌BL21菌株中表達(dá)，產(chǎn)生融合蛋白。

pGEX-4T-1 原核表達(dá)載體

1.212 酵母表達(dá)載體構(gòu)建原理和步驟

由于原核生物和真核生物存在糖基化、?；确g后修飾反應(yīng)機(jī)制的差異，真核基因的原核表達(dá)難以獲得有活性的蛋白。酵母成為真核表達(dá)的首選系統(tǒng)。

第五篇：生命與基因論文

電氣工程學(xué)院

學(xué)號(hào)：0902100634

姓名：張炳鳳《生命與基因》課程論文

內(nèi)容概要:基因及基因工程的發(fā)展應(yīng)用和它們所帶來(lái)的負(fù)面影響。關(guān)鍵字：基因、基因工程、克隆。正文：

在人體生命科學(xué)探索的歷史中，沒(méi)有比“基因”二字更具有震撼力了。由于歷史的原因，我們對(duì)基因一直采取拒絕承認(rèn)的態(tài)度。直到70年代，經(jīng)過(guò)科學(xué)家的努力，“基因”二字才被寫(xiě)進(jìn)了科教書(shū)?，F(xiàn)在基因已經(jīng)被世界各國(guó)接受，人類基因組計(jì)劃與曼哈頓原子彈、阿波羅登月計(jì)劃并稱為人類自然科學(xué)史上的三大計(jì)劃?；蚓褪沁z傳信息的基本單位。一般指位于染色體上編碼一個(gè)特定功能產(chǎn)物（如蛋白質(zhì)或RNA分子等）的一段核苷酸序列。

人們對(duì)基因的認(rèn)識(shí)是不斷發(fā)展的。20世紀(jì)50年代以后，隨著分子遺傳學(xué)的發(fā)展，尤其是沃森和克里克提出雙螺旋結(jié)構(gòu)以后，人們才真正認(rèn)識(shí)了基因的本質(zhì)，即基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA片斷。研究結(jié)果還表明，每條染色體只含有1~2個(gè)DNA分子，每個(gè)DNA分子上有多個(gè)基因，每個(gè)基因含有成百上千個(gè)脫氧核苷酸。由于不同基因的脫氧核苷酸的排列順序（堿基序列）不同，因此，不同的基因就含有不同的遺傳信息?；蛴袃蓚€(gè)特點(diǎn)，一是能忠實(shí)地復(fù)制自己，以保持生物的基本特征；二是基因能夠“突變”，突變絕大多數(shù)會(huì)導(dǎo)致疾病，另外的一小部分是非致病突變。

人類研究基因主要應(yīng)用于基因工程。所謂基因工程（genetic engineering)是在分子水平上對(duì)基因進(jìn)行操作的復(fù)雜技術(shù)。是將外源基因通過(guò)體外重組后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)，使這個(gè)基因能在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯表達(dá)的操作?；蚬こ虒?duì)人類最大的好處可能就是其應(yīng)用于醫(yī)學(xué)了，我們知道基因作為機(jī)體內(nèi)的遺傳單位，不僅可以決定我們的相貌、高矮，而且它的異常會(huì)不可避免地導(dǎo)致各種疾病的出現(xiàn)。目前我們還無(wú)法對(duì)人類受損的基因進(jìn)行修復(fù)，但我們可以利用正常的人類基因在其他生物體內(nèi)進(jìn)行表達(dá)，生產(chǎn)出我們所需的激素或是蛋白質(zhì)等物質(zhì)，來(lái)治療那些不能自身合成此類物質(zhì)的病人。例如: 胰島素是治療糖尿病的特效藥，長(zhǎng)期以來(lái)只能依靠從豬、牛等動(dòng)物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰島素，其產(chǎn)量之低和價(jià)格之高可想而知。將合成的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌，每2000L培養(yǎng)液就能產(chǎn)生100g胰島素！大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)不但解決了這種比黃金還貴的藥品產(chǎn)量問(wèn)題，還使其價(jià)格降低了30%-50%!基因工程在農(nóng)業(yè)也有很大的應(yīng)用，在對(duì)農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)進(jìn)行的長(zhǎng)期防治實(shí)踐中，人們逐漸認(rèn)識(shí)到必須采取綜合治理的措施，才能有效的控制害蟲(chóng)的危害?；蚬こ碳夹g(shù)的發(fā)展，為防治農(nóng)林害蟲(chóng)提供了一種有效、減污的新技術(shù)手段，微生物農(nóng)藥也因此在世界范圍內(nèi)受到廣泛重視。微生物農(nóng)藥是指非化學(xué)合成、具有殺蟲(chóng)防病作用的微生物制劑，如微生物殺蟲(chóng)劑、殺菌劑、農(nóng)用抗生素，等等。這一類微生物包括殺蟲(chóng)防病的細(xì)菌、真菌和病毒。殺蟲(chóng)微生物是指其代謝產(chǎn)物或微生物本身對(duì)宿主昆蟲(chóng)有致死效 應(yīng)或致病的微生物類群，通常也稱為昆蟲(chóng)病原微生物。目前已知的殺蟲(chóng)防病微生物主要有芽孢桿菌科、假單胞菌科、腸桿菌科、鏈球菌科和桿狀病毒科等類群。盡管不同殺蟲(chóng)微生物引起昆蟲(chóng)致病的癥狀不盡相同，但殺蟲(chóng)微生物對(duì)害蟲(chóng)的作用方式主要是通過(guò)產(chǎn)生特異性的殺蟲(chóng)毒素來(lái)破壞害蟲(chóng)的代謝平衡，或者是通過(guò)營(yíng)養(yǎng)體在蟲(chóng)體內(nèi)的繁殖復(fù)制而引起昆蟲(chóng)死亡和發(fā)生流行病。

在基因工程的發(fā)展歷史上有一個(gè)名詞不得不提——克隆。1997年2月22日英國(guó)生物遺傳學(xué)家維爾穆特成功地克隆出一只羊，克隆羊“多莉”的誕生震驚了世界。在理論上，利用同樣方法，人可以復(fù)制“克隆人”，這意味著以往科幻小說(shuō)中的獨(dú)裁狂人克隆自己的想法是完全可以實(shí)現(xiàn)的。因此，“多莉”的誕生在世界各國(guó)科學(xué)界、政界乃至宗教界都引起了強(qiáng)烈反響，并引發(fā)了一場(chǎng)由克隆人所衍生的道德問(wèn)題的討論。各國(guó)政府有關(guān)人士、民間紛紛作出反應(yīng)：克隆人類有悖于倫理道德，現(xiàn)在幾乎所有的國(guó)家都立法禁止克隆人類。但是還是有少數(shù)科學(xué)家是支持克隆人研究的，他們的科學(xué)研究精神可嘉，但是違背倫理道德，所以他們要背負(fù)極大的輿論壓力。他們的研究之所以得以繼續(xù)進(jìn)行，主要是有極少數(shù)人的資金支持。這些人中很多是自己不能生育而想克隆自己的，還有一些就是想克隆自己已逝去的親人的，這些確實(shí)有他們不得已的苦衷。

但是基因工程也有其負(fù)面的影響，生態(tài)倫理學(xué)對(duì)于植物基因研究工作的規(guī)范和合理約束，主要是出于生物多樣性的考慮。近些年來(lái)，植物基因的研究取得了長(zhǎng)足進(jìn)步，這些進(jìn)步推動(dòng)了一系列農(nóng)業(yè)革命，而尤以糧食革命為重。但是，這種以植物基因優(yōu)化為基礎(chǔ)的革命，卻導(dǎo)致了物種多樣性的破壞。比如，它使人們食用的糧食從5000多種銳減到150多種。與此類似的是，化肥對(duì)增產(chǎn)和縮短生長(zhǎng)期起了舉足輕重的作用，但也造成了土壤板結(jié)和地表破壞。同樣的情況也發(fā)生在動(dòng)物基因的研究與應(yīng)用中。比如，試管牛和試管羊?yàn)槿藗兛刂粕镄詣e提供了基礎(chǔ)，這一技術(shù)使人類有可能實(shí)現(xiàn)對(duì)生物種群的控制。對(duì)某一種群來(lái)說(shuō)，雄性數(shù)量不需要很多，但雌性數(shù)量卻舉足輕重，根據(jù)自然法則，雄雌出生概率大致相當(dāng)，因此，如何在出生中盡量增大雌性數(shù)量和減少雄性數(shù)量就十分關(guān)鍵。但這樣一來(lái)，勢(shì)必造成種群雄雌比例的失衡，從而造成自然生態(tài)失衡。當(dāng)這種技術(shù)應(yīng)用于人類時(shí)，問(wèn)題更大。關(guān)于克隆技術(shù)的討論表明，基因的克隆技術(shù)一旦用于人類，可能帶來(lái)或引起的麻煩甚至不是我們能夠想象到的。