第一篇：南方醫(yī)科大學(xué)研究生細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)考試重點(diǎn)總結(jié)

一.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的概念,簡(jiǎn)史

在體外對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)并進(jìn)行研究的技術(shù), 也叫細(xì)胞克隆技術(shù).細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物技術(shù)中最核心、最基礎(chǔ)的技術(shù)。

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)主要包括二大方面內(nèi)容: 1.微生物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

2.動(dòng), 植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) ：1)器官培養(yǎng)技術(shù) 2)組織培養(yǎng)技術(shù) 3)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 二.細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)

1.得到的是活細(xì)胞：能長(zhǎng)時(shí)間、直接觀(guān)察、研究活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng) 2.可控制：（1）可控制-選擇對(duì)象：類(lèi)型： 上皮？間質(zhì)？性質(zhì)：正常？腫瘤？（2）可控制-調(diào)節(jié)條件：各種因素:物理、化學(xué)、生物等因素（3）可控制-利用方法。采用各種研究技術(shù)、記錄方法：

研究：倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記--記錄：攝影照片、縮時(shí)電影、電視--3.應(yīng)用廣（1）學(xué)科多：（2）對(duì)象廣：各種動(dòng)物：低等動(dòng)物--高等動(dòng)物--人類(lèi)；一種動(dòng)物：不同年齡；不同組織: 正常或異常（腫瘤）

4.較經(jīng)濟(jì)：花錢(qián)較少但可得到大量、同時(shí)、重復(fù)性好的生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象 5.不易污染環(huán)境

三、細(xì)胞培養(yǎng)的缺點(diǎn)

1.現(xiàn)人工無(wú)法完全模擬體內(nèi)環(huán)境：

a.失去彼鄰關(guān)系b.失去神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞相互間的影響

2.細(xì)胞趨向單一化

3.失去原有組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)

4.分化減弱或不顯：要正確認(rèn)識(shí)體外培養(yǎng)細(xì)胞是一種特定條件下生長(zhǎng)的細(xì)胞群體。5.某些類(lèi)型細(xì)胞還很難培養(yǎng) 6.大規(guī)模培養(yǎng)難度大

四.體外細(xì)胞培養(yǎng)的方式

1.粘附型培養(yǎng): 附著在某一固相支持物表面才能生長(zhǎng)的細(xì)胞。

粘附是大多數(shù)有機(jī)體細(xì)胞在體內(nèi)外生存和生長(zhǎng)發(fā)育的基本存在方式

2.懸浮型培養(yǎng): 不必附著于固相支持物表面，而在懸浮狀態(tài)下即可生長(zhǎng)的細(xì)胞。來(lái)源:來(lái)自血，脾或骨髓，尤以血中白細(xì)胞.癌腫細(xì)胞也可以.特點(diǎn):在懸浮中生長(zhǎng)良好,細(xì)胞圓形，單個(gè)或小細(xì)胞團(tuán)

優(yōu)點(diǎn) : 生存空間大，提供數(shù)量大,傳代方便(不需消化),易于收獲可獲得穩(wěn)定狀態(tài).缺點(diǎn):觀(guān)察不方便, 很多細(xì)胞不能懸浮生長(zhǎng)(尤以正常細(xì)胞)五.體外培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)形態(tài)分類(lèi) 根據(jù)形態(tài)大致的不同，主要2類(lèi)：

1.上皮樣：來(lái)源：來(lái)源于外胚層，內(nèi)胚層細(xì)胞如：皮膚及其衍生物, 消化道，乳腺，肺泡, 上皮性腫瘤 形態(tài)：類(lèi)似體內(nèi)的上皮細(xì)胞，扁平，不規(guī)則多角形，中有圓形核易相連成片相靠—緊密相連—成薄層—鋪石狀

2.成纖維細(xì)胞樣：培養(yǎng)中形態(tài)與成纖維細(xì)胞類(lèi)似。來(lái)源：中胚層間充質(zhì)組織起源的組織如：真正的成纖維細(xì)胞：心肌，平滑肌，成骨細(xì)胞，血管內(nèi)皮

形態(tài)：似體內(nèi)成纖維細(xì)胞的形態(tài)，胞體梭形或不規(guī)則三角形，胞質(zhì)向外伸出2—3個(gè)長(zhǎng)短不等的突起，中有卵圓形核。3.其它，不定型 六.常用術(shù)語(yǔ)

1.細(xì)胞系（cell line）：原代培養(yǎng)物首次傳代后，就可以稱(chēng)細(xì)胞系。不能或有限傳代下去稱(chēng)有限細(xì)胞系。能連續(xù)傳代的稱(chēng)連續(xù)細(xì)胞系。

2.細(xì)胞株：某類(lèi)細(xì)胞經(jīng)傳代克隆并保持了該類(lèi)細(xì)胞理化特征的細(xì)胞群體。3.原代培養(yǎng)：直接取自生物體的組織細(xì)胞并進(jìn)行培養(yǎng)

4.傳代培養(yǎng)：將細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)物內(nèi)分散到另一個(gè)培養(yǎng)物的過(guò)程。5.轉(zhuǎn)染（transfection）：將某個(gè)基因轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)細(xì)胞核內(nèi)。

6.lipofection：常用細(xì)胞轉(zhuǎn)染劑（脂質(zhì)體），它搭載基因（DNA）后形成復(fù)合物可轉(zhuǎn)染到動(dòng)物細(xì)胞。

第二章 細(xì)胞培養(yǎng)的條件及設(shè)備

一、細(xì)胞培養(yǎng)室

二、常用設(shè)備 1.超凈工作臺(tái)； 2.純水裝置； 3.抽氣泵； 4.消毒裝置； 5.干燥裝置；

6.CO2培養(yǎng)箱(孵箱)； 7.液氮生物容器； 8.冰箱； 9.離心機(jī) 10.天平

11.顯微鏡 12.過(guò)濾裝置 13.空調(diào) 14.酸度計(jì) 15.干燥器

三、常用消耗器材

1.培養(yǎng)瓶及各種相關(guān)玻璃用品、塑料用品和棉制品 2.手術(shù)器材

四、培養(yǎng)用液

1.天然培養(yǎng)基（液）：血清、雞胚浸出液、鼠尾膠

2.人工合成培養(yǎng)液：合成培養(yǎng)基、平衡鹽溶液、緩沖液、蒸餾水、消化液和抗菌素等

五、消耗性器皿的清洗、包裝及消毒

第三章 細(xì)胞培養(yǎng)基本技術(shù)

一、原代培養(yǎng)基本技術(shù)：取材→漂洗→剪切→消化→計(jì)數(shù)→接種

二、傳代培養(yǎng)技術(shù)：去舊換新液→消化→分裝

三、細(xì)胞凍存及復(fù)蘇技術(shù)

培養(yǎng)液高度：2.5~3.0mm 第四章 每代細(xì)胞基本的生長(zhǎng)過(guò)程

一.游離期：細(xì)胞接種后最初一段時(shí)間, 細(xì)胞在培養(yǎng)基中呈懸浮狀, 胞體圓形 二.貼壁期：細(xì)胞附著于支持物上 三.潛伏期： 四.指數(shù)增長(zhǎng)期

影響因素

1.細(xì)胞種類(lèi)

(附著最強(qiáng))巨噬細(xì)胞(30’)一成纖維

細(xì)胞——上皮細(xì)胞——血細(xì)胞(最弱)2.生物因素

血清、培養(yǎng)液中的促附著因子 3.機(jī)械，物理等

離心：促進(jìn)附著

流動(dòng)：培養(yǎng)液流動(dòng)可阻止細(xì)胞附著

低溫：可抑制附著 增加細(xì)胞粘附的措施（因素）1.增加支持物粘附性

a.賴(lài)氨酸類(lèi) b.血清

c.某些生物活性物質(zhì),纖維性物質(zhì) d.減少接種時(shí)細(xì)胞懸液的量

待細(xì)胞粘附和貼壁之后，再補(bǔ)充足夠的培養(yǎng)液 e.減少培養(yǎng)液中血清的含量

使培養(yǎng)液黏度降低

f.培養(yǎng)液中離子成分及其濃度

如，培養(yǎng)液中的Ca含量過(guò)低時(shí)不利于

細(xì)胞的粘附、貼壁和鋪展 g.培養(yǎng)液的溫度

低溫會(huì)減低細(xì)胞的活動(dòng)，妨礙黏附和貼壁 伸展過(guò)程

細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)液中時(shí)，近似球體形狀

當(dāng)接觸堅(jiān)硬平面

即鋪展于底物上，扁平狀

與底物形成很多接觸點(diǎn)

伸展分幾個(gè)階段

(1)開(kāi)始階段

開(kāi)始附著鋪開(kāi)

細(xì)胞附著于底物

球形的細(xì)胞，下方表面與底物接觸成扁

但尚未形成新的偽足(2)放射狀鋪展階段

在球形細(xì)胞體的周?chē)纬珊芏鄠巫懵∑?偽足形狀

主要 柱形絲狀: 直徑0.2-0.5um 長(zhǎng)10-20 扁平片狀: 厚0.1-0.5 寬2-5 尚有: 小泡狀葉狀: 直徑1-2 開(kāi)始時(shí): 絲狀多

以后 片狀增加

許多偽足

形成薄的胞質(zhì)小片牢固貼于底物

胞體中央部分 扁

整亇細(xì)胞扁平(3)極化階段

細(xì)胞最后伸展附著的情況

實(shí)驗(yàn)：用多種細(xì)胞，以顯微操作及縮時(shí)電影

定位細(xì)胞附著于玻璃和聚苯乙烯情況

檢測(cè)--顯微針頭— 結(jié)果：附著規(guī)律 附著點(diǎn)： 附著規(guī)律

幾乎未見(jiàn)于細(xì)胞的中央?yún)^(qū)

(如不在核之下)總在邊緣，邊緣”擺動(dòng)”活動(dòng)的部位

凸的邊緣

在薄的邊緣

附著區(qū)：

約為細(xì)胞下面表面的15-35％ 附著、伸展的條件

底物

細(xì)胞能在很多固體表面附著

最終鋪展的程度，取決于底物的性質(zhì)

影響因素：

活性物質(zhì)(貼附、伸展因子):血清、培養(yǎng)液中，或細(xì)胞分泌的生物活性物質(zhì)被底物吸附后可利于細(xì)胞的鋪展

細(xì)胞借助這些分子,可附著于各種”非特異性”的底物上

如Fn，膠原，聚賴(lài)氨酸

機(jī)械，物理因素 三.潛伏期 細(xì)胞活著但無(wú)分裂.細(xì)胞株6—24h 原代24—96h ? 四.指數(shù)(對(duì)數(shù))增長(zhǎng)期

? 細(xì)胞增殖旺盛, 數(shù)量成倍增多, 最適合實(shí)驗(yàn)研究.3—5d以后來(lái)到.? 判斷方法: ? a.細(xì)胞群體倍增時(shí)間 ? B.細(xì)胞分裂指數(shù)

? 五.停止期(衰退期)

? 細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)瓶壁, 有活力, 不增殖, 能存活一段時(shí)間.如傳代進(jìn)入下一循環(huán).傳代培養(yǎng)到一定的代數(shù)時(shí)，細(xì)胞的生命活動(dòng)明顯減弱。即使及時(shí)傳代也無(wú)效 表明培養(yǎng)物已經(jīng)進(jìn)入衰退期，再向前發(fā)展，只有退化、死亡

接觸抑制和

密度依賴(lài)性生長(zhǎng)仰制 增殖的密度抑制 實(shí)驗(yàn)

方法：3T3細(xì)胞，接種105于6cm培養(yǎng)皿，5d細(xì)胞計(jì)數(shù)

于加入10％、20％、30％牛血清的培養(yǎng)液中，結(jié)果：

第二篇：細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)總結(jié)

血清使用問(wèn)題的總結(jié)

一、血清滅活問(wèn)題。

1、問(wèn)：加到培養(yǎng)基中的血清必須滅活嗎？ 答：不是必須的，看做什么實(shí)驗(yàn)了。

2、問(wèn)：四季青胎牛血清滅活是56℃30分鐘嗎？

答：如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞，血清一般是不需要滅活的，這樣可以有效保存血清中的生長(zhǎng)因子。但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補(bǔ)體受體的細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞，血清是需要滅活，一般是56℃，30min。

3、問(wèn)：我要做滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)，胎牛血清要滅活嗎？

答：進(jìn)口的一般都已滅活，國(guó)產(chǎn)的不一定，最好還是滅活一下再用較安全。

4、問(wèn)：我用病毒上清轉(zhuǎn)染細(xì)胞，培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎？因?yàn)檠逯锌赡苡行┭a(bǔ)體和抗體，是不是會(huì)影響轉(zhuǎn)染？我想未滅活的血清中含些抗體補(bǔ)體可能會(huì)和病毒相結(jié)合，影響轉(zhuǎn)染，正確嗎？細(xì)胞是單核細(xì)胞白血病細(xì)胞，病毒是病毒包裝細(xì)胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無(wú)血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí)，目的是什么？

答：血清一定要滅活，可以先用無(wú)血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí)以后再加血清。避免雜蛋白對(duì)病毒和宿主結(jié)合過(guò)程的干擾，一般是2-6小時(shí)，根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)決定。血清不一定需要滅活，滅活的目的是將血清中的補(bǔ)體滅活！這要根據(jù)實(shí)際情況而定，如果沒(méi)有把握那就滅活吧，也不麻煩56度半個(gè)小時(shí)。

5、問(wèn)：(1)我買(mǎi)的是杭州四季青的新生牛血清，要滅活嗎？有些說(shuō)法是需要，有些說(shuō)直接解凍后就可以加入到培養(yǎng)基中；我配制胰蛋白酶液，用的是D-PBS，有關(guān)系嗎？

答：關(guān)于血清的熱滅活，是很多人感興趣也存在一定爭(zhēng)議的話(huà)題。大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室將血清的熱滅活還是作為常規(guī)來(lái)執(zhí)行，因?yàn)橛袃蓚€(gè)作用，第一是滅活補(bǔ)體，第二是滅活血清中可能存在的支原體。但是實(shí)驗(yàn)者并沒(méi)有考慮熱處理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子、氨基酸等成分帶來(lái)的負(fù)面影響。

我在實(shí)驗(yàn)室處理血清的時(shí)候，有一次水浴箱在滅活過(guò)程中出現(xiàn)故障，溫度升高到80℃，血清變成了凝膠狀，我重新處理了另外一份血清，將兩份血清對(duì)比，發(fā)現(xiàn)高溫直接影響到血清所含的抗體蛋白。在56℃下滅活半小時(shí)以上，肯定也會(huì)對(duì)里面的蛋白起到破壞作用。下次有機(jī)會(huì)我做個(gè)延長(zhǎng)滅活時(shí)間的實(shí)驗(yàn)試試，看看到底有多大的影響。熱滅活之后，血清放在四度冰箱久了，就會(huì)有沉淀產(chǎn)生，這常常會(huì)被認(rèn)為是微生物污染或者是黑膠蟲(chóng)污染。為了驗(yàn)證到底有沒(méi)有污染，常常又會(huì)把血清放置37℃溫育，但是血清中的蛋白會(huì)進(jìn)一步析出，最后還是要做鏡檢，無(wú)菌培養(yǎng)試驗(yàn)，和革蘭氏染色試驗(yàn)，非常麻煩。

我看過(guò)一份資料，里面提到70%的實(shí)驗(yàn)者認(rèn)為滅活是理所當(dāng)然的。常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間，而時(shí)間則從15分鐘到60分鐘不等。其中最常用的手法是56℃熱處理30分鐘。隨著血清采集、處理、加工工藝的提高，許多早先認(rèn)為是熱滅活的原因已經(jīng)不再成立，只有少數(shù)對(duì)血清進(jìn)行熱滅活的研究者在實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了這一步驟的有效性和必要性。有人比較過(guò)11個(gè)不同細(xì)胞株，發(fā)現(xiàn)其中熱滅活對(duì)6 個(gè)細(xì)胞株(HBAE，MDBK，Vero，成纖維細(xì)胞，MRC-5)的生長(zhǎng)帶來(lái)負(fù)面影響，三個(gè)細(xì)胞株(FOX-NY，MDCK和CHO-K1)不受熱滅活的影響，而只有兩個(gè)細(xì)胞株(Balb/3T3，Sp2/0Ag14 hybrid)，在熱滅活之后，細(xì)胞生長(zhǎng)有輕微的改善。所以，在正常的操作下，熱滅活通常對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有明顯的促進(jìn)作用。

你可以摸索一下，血清從-20℃冰箱拿出來(lái)之后在常溫解凍，然后混勻分裝成兩份，一份滅活，一份不滅活，比較這兩種血清對(duì)細(xì)胞是否有影響。然后再確定是滅活還是不滅活。這個(gè)過(guò)程最多也就一個(gè)星期。同時(shí)你還要考慮血清滅活與否對(duì)你后續(xù)的實(shí)驗(yàn)有沒(méi)有影響。

問(wèn)：(2)分裝后的血清從-20℃取出放4℃讓其液化，卻見(jiàn)血清比較混濁，有沉淀產(chǎn)生，這屬正常嗎？ 答：正常。

二、血清滅活時(shí)溫度問(wèn)題。

1、問(wèn)：因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室水浴鍋失控，血清滅活時(shí)，溫度到了61.7℃，這血清還能用嗎？

答：多長(zhǎng)時(shí)間啊？短時(shí)間應(yīng)該可以吧，我有一次加熱了一個(gè)多小時(shí)，還照樣用。

2、問(wèn)：我滅活胎牛血清時(shí)，用的電磁爐，定在了70℃，本來(lái)說(shuō)調(diào)溫度到56℃再放血清的，后來(lái)忘了，就把血清放進(jìn)去了，所以滅活的溫度肯定超過(guò)56℃了，不知道這樣對(duì)血清有沒(méi)有影響？

答：常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間，而時(shí)間則從15分鐘到60分鐘不等，其中最常用的手法是56℃熱處理30分鐘。看看你養(yǎng)的細(xì)胞是什么，一般的話(huà)估計(jì)問(wèn)題不大，要是很珍貴的細(xì)胞還是慎重一點(diǎn)啊。熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì)，在對(duì)補(bǔ)體滅活以外，熱處理同時(shí)也對(duì)血清中可能存在的支原體具有滅活作用?，F(xiàn)在好像不主張熱滅活，熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來(lái)負(fù)面影響，對(duì)血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生，此外，有研究結(jié)果證實(shí)熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對(duì)細(xì)胞的促粘附作用。

三、血清的制備方法問(wèn)題。

1、問(wèn)：我的實(shí)驗(yàn)需要自己制備一些血清用于培養(yǎng)細(xì)胞，有沒(méi)有人知道用于培養(yǎng)細(xì)胞的血清需要怎樣的制備過(guò)程？

答：自己制備血清當(dāng)心污染啊。如果無(wú)菌條件好的話(huà)，用靜置析出方法就行。

2、問(wèn)：一般我們用得胎牛血清用前還要滅活，我想用大鼠的血，不知道要不要滅活？

答：你直接把采來(lái)的血液在離心管里4℃過(guò)夜，離心，取上清，在無(wú)菌過(guò)濾，也可滅活，然后分裝凍存，用時(shí)再配。

3、問(wèn)：如果滅活會(huì)不會(huì)對(duì)血清中的一些因子有損傷？

答：加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在進(jìn)行免疫學(xué)研究、培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。滅活一般不會(huì)對(duì)血清中的一些因子損傷的。

四、血清的保存問(wèn)題。

1、問(wèn)：2006年6月到期的GIBCO胎牛血清到2007年5月還能用嗎？ 答：只有試試了，如果一直在-20℃凍著來(lái)者，應(yīng)該還可以，先少用點(diǎn)看看。養(yǎng)細(xì)胞系應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題，原代不行。

2、問(wèn)：請(qǐng)問(wèn)我自然溶化好的胎牛血清和1640培養(yǎng)基今天用不上，明天用，我不想放到冰箱里，放在室溫下一晚行嗎？100毫升培養(yǎng)瓶加多少培養(yǎng)基呢？

答：可以放4℃。4-5ml。

3、問(wèn)：4℃冰箱內(nèi)保存3個(gè)月的胎牛血清，能否繼續(xù)使用？相關(guān)細(xì)胞和其它試劑的代價(jià)比較高，不敢輕易嘗試。

答：需要長(zhǎng)期保存的胎牛血清必須要保存在-20至-70℃的低溫冰箱中，4℃冰箱中保存時(shí)間不要超過(guò)1個(gè)月。

五、FBS可否代替人AB型血清？

問(wèn)：我現(xiàn)在在做人的外周血b淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)，文獻(xiàn)上要求用人的AB型血清，但是我覺(jué)得很多代理商都沒(méi)有。我想FBS代替，但不知道可否，我先是擔(dān)心免疫排斥之類(lèi)，但是我查了些資料后，應(yīng)該不會(huì)(我覺(jué)得)。但是我又不能夠TRY。因?yàn)榧?xì)胞因子確實(shí)太貴了，所以咨詢(xún)一下。謝謝！答：你最好照文獻(xiàn)的做。除非你系列實(shí)驗(yàn)證明你用代用品的結(jié)果與文獻(xiàn)的相同(你還是要用到文獻(xiàn)的試劑)。細(xì)胞培養(yǎng)的影響因素很多，特別是培養(yǎng)基的成分。

六、血清和培養(yǎng)基的種類(lèi)及品牌問(wèn)題。

1、問(wèn)：細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清用哪個(gè)公司的產(chǎn)品比較好呢？周?chē)腥擞肞AA或Hyclone的，這兩種跟Gibco或sigma出品的差別大嗎？ 答：如果是長(zhǎng)得非常快得細(xì)胞如pa317，293，c6等惡性腫瘤細(xì)胞，一般得國(guó)產(chǎn)血清就可以，如果是原代培養(yǎng)的細(xì)胞，最好應(yīng)用胎牛血清或類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，Hyclone公司血清的質(zhì)量不如GIBCO(同類(lèi)血清)。國(guó)產(chǎn)的杭州四季青和甘肅民海(中美和資)不錯(cuò)。有些細(xì)胞(如：sf9，293還有其他一些元代細(xì)胞)，用Gibco的比其他兩種好很多，會(huì)大大加速試驗(yàn)進(jìn)度。對(duì)于其他一些細(xì)胞(如：vero，MDCK，pk)四季青，Hyclone的小牛血清足矣！另外，Gibco的還要看產(chǎn)地。

2、問(wèn)：最近要訂一瓶胎牛血清，實(shí)驗(yàn)室之前都在用小牛血清，沒(méi)有買(mǎi)過(guò)胎牛血清。請(qǐng)問(wèn)哪個(gè)公司的好一些？問(wèn)過(guò)試劑公司，有兩種：一種是PAA的(分普通級(jí)和優(yōu)級(jí))，一種是Hyclone的(只有普通級(jí)，而且是新西蘭產(chǎn)的)。試劑公司推薦使用PAA優(yōu)級(jí)的，但看好多文獻(xiàn)都用Hyclone的，公司說(shuō)是因?yàn)楝F(xiàn)在Hyclone的都不是美國(guó)進(jìn)口的了。請(qǐng)問(wèn)用的哪種胎牛血清比較好？

答：民海的效果還不錯(cuò)，要是不放心國(guó)產(chǎn)的，那就買(mǎi)進(jìn)口的。進(jìn)口的好多公司都有，新西蘭產(chǎn)的效果一般。Hyclone和Gibco的都還可以。民海的似乎比四季青的要好些。復(fù)蒙的感覺(jué)也不錯(cuò)。

3、問(wèn)：四季青“無(wú)噬菌體、低內(nèi)毒素胎牛血清”與“無(wú)支原體胎牛血清”的區(qū)別？培養(yǎng)腫瘤傳代細(xì)胞用哪一個(gè)比較好些？ 答：用無(wú)支原體胎牛血清就可以啦。

4、問(wèn)：SKBR-3細(xì)胞培養(yǎng)用哪種型號(hào)的1640培養(yǎng)基及胎牛血清？ 答：我一直用GIBCO的1640，你可以買(mǎi)含HEPES的1*10L的包裝，胎牛血清也是用的GIBCO，10%就行。請(qǐng)查閱： 004km.cn

七、培養(yǎng)基血清濃度問(wèn)題。

問(wèn)：在1640里加血清時(shí)加多了，90ml里加了20ml血清，約為18%，以前都是加10ml的，查了網(wǎng)上多建議用10%-15%，有關(guān)系嗎？

答：我認(rèn)為一般來(lái)說(shuō)血清濃度的較大波動(dòng)對(duì)細(xì)胞的狀態(tài)影響較大，建議再加90ml1640調(diào)成10%。血清濃度大當(dāng)然細(xì)胞狀態(tài)感覺(jué)要好，但是高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。10%的濃度培養(yǎng)鼻煙癌細(xì)胞很好。

八、心肌細(xì)胞原代培養(yǎng)時(shí)血清的使用問(wèn)題。

1、問(wèn)：在進(jìn)行心肌細(xì)胞原代培養(yǎng)時(shí)，需要用含血清的培養(yǎng)基中止胰酶的消化作用，我現(xiàn)在使用的是含血清10%的培養(yǎng)液，但近日看北醫(yī)一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的課件發(fā)現(xiàn)，有用1%血清培養(yǎng)液進(jìn)行中止消化的，想問(wèn)一下，1%的是否可以，效果是否有保證？這樣確實(shí)能節(jié)省不少血清的。答：關(guān)于心肌細(xì)胞元代培養(yǎng)的FBS問(wèn)題：

(1)1%的血清完全培養(yǎng)基可不可以，得看你胰酶的用量。但是在心肌細(xì)胞元代培養(yǎng)就不行。10%的FBS完全培養(yǎng)基效果都不太好，開(kāi)始心肌細(xì)胞元代培養(yǎng)需要高濃度的FBS，20%左右，但這就有出現(xiàn)另一個(gè)問(wèn)題，在FBS完全培養(yǎng)基中，成纖維細(xì)胞呈優(yōu)勢(shì)細(xì)胞，須得在培養(yǎng)基加入適量的BrdU以抑制其生長(zhǎng)，純化心肌細(xì)胞。

(2)FBS的作用不僅僅是拿來(lái)中和胰酶，只是FBS中的一些蛋白質(zhì)如α-巨球蛋白等有抑制胰酶活性作用。

(3)元代心肌細(xì)胞培養(yǎng)的FBS使用，有講究：剛開(kāi)始使用20%左右的高濃度的FBS，后逐漸遞減為無(wú)血清的DMEM/F-12培養(yǎng)基培養(yǎng)。

2、問(wèn)：我胰酶的用量是0.08%，并混和了0.08%的膠原酶。FBS要高濃度遞減是否是說(shuō)的在細(xì)胞培養(yǎng)中啊，難道在消化時(shí)終止也需要如此高的濃度嗎，還有，我的BRDU只用到48小時(shí)就不用了，因?yàn)閾?dān)心其損傷太大，可以持續(xù)用多久呢？

答：我用10%FBS終止的，然后差速1h，然后還是用10%FBS的HG-dmem養(yǎng)的，沒(méi)有用brdu，心肌細(xì)胞還是比較多和穩(wěn)定的，我第3天就可以用，第2天晚上看就會(huì)有搏動(dòng)。

九、牛血清污染噬菌體的問(wèn)題。

1、問(wèn)：有誰(shuí)知道小牛血清制造過(guò)程中怎樣能夠避免噬菌體的污染，以及對(duì)已污染噬菌體的牛血清怎樣能夠除去噬菌體？

2、問(wèn)：我也想知道，我用的血清中大部分都有噬菌體，它對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)到底有什么影響？ 暫無(wú)回答。

十、問(wèn)：MTT加藥的時(shí)候加不加血清？加藥時(shí)要用無(wú)血清的培養(yǎng)基嗎？ 答：我的藥就是用含血清的培養(yǎng)基稀釋的，不含血清的培養(yǎng)基對(duì)細(xì)胞有毒性或抑制作用，無(wú)形中對(duì)細(xì)胞造了一個(gè)serum-free的模型，細(xì)胞在提內(nèi)本來(lái)就是有血清供應(yīng)，如果該藥物都不能對(duì)抗，那該藥物就沒(méi)有什么臨床價(jià)值了，這是我的理解。

十一、AB血清的制備問(wèn)題。

問(wèn)：本人想從人的外周血中分離AB血清的，用于B淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)。謝謝大家給點(diǎn)建議。人的血，來(lái)之不易啊。答：是AB血型人的血清嗎？這種血清即沒(méi)有抗A型抗原抗體，也沒(méi)有抗B型抗原抗體。分離血清時(shí)將采集的血液注入試管中，待血液凝固后離心分離血清?？蓪⒉杉难悍旁?7℃水浴箱中促進(jìn)血液凝固，減少凝固時(shí)間。離心可在2500～3000rpm，10min，足可以分離血清。分離后將血清吸出保存即可。分離血清的量可按采集血液的50%左右計(jì)算，因?yàn)榧t細(xì)胞占總血液的50%左右。當(dāng)然整個(gè)過(guò)程要注意無(wú)菌操作。

十二、PC12細(xì)胞培養(yǎng)所用血清問(wèn)題。

問(wèn)：我正準(zhǔn)備購(gòu)買(mǎi)上海細(xì)胞所的未分化的PC12細(xì)胞，需要滅活的馬血清，可現(xiàn)在買(mǎi)血清很困難，好像是海關(guān)有封鎖，代理商這么說(shuō)的，我原定購(gòu)買(mǎi)的Gibco的horse surum，現(xiàn)在無(wú)法買(mǎi)到了，好容易找到一個(gè)目前可以進(jìn)血清的公司Hyclone，有一種Donor Equine serum是馬血清嗎？

答：Hyclone的Donor Equine serum可以用，我以前用的就是這個(gè)。我當(dāng)時(shí)是在鼎國(guó)(重慶辦事處)買(mǎi)的，100ml大概140元，具體不記得了。當(dāng)時(shí)是看它比別的進(jìn)口的馬血清便宜。另外：我買(mǎi)了以后滅活的。

十三、血清或培養(yǎng)基產(chǎn)生了顏色或沉淀的問(wèn)題：

1、問(wèn)：我用的是四季青的胎牛血清，56℃30分鐘滅活后出現(xiàn)了白色少量絮狀沉淀，是不是污染？還能不能再用？血清的生產(chǎn)日期是2006年7月(現(xiàn)在是2007年6月11日)。

答：應(yīng)該問(wèn)題不大。你可以取少量血清放入培養(yǎng)皿中，37℃過(guò)夜培養(yǎng)看看就知道是否污染了。血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。

2、問(wèn)：我用MTT法測(cè)細(xì)胞的增殖，用DMSO裂解細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)把DMSO加入到孔中就會(huì)形成乳白色(用的含胎牛血清的1640培養(yǎng)基，由于沒(méi)有離板子的離心機(jī)，所以沒(méi)有去除培養(yǎng)基直接加的DMSO)。以前用含小牛血清的培養(yǎng)基沒(méi)有看到有這種情況。該怎么解決？

答：為什么要用離心機(jī)離心呢？難倒你養(yǎng)的是懸浮細(xì)胞嗎？如果是貼壁細(xì)胞的話(huà)直接將MTT倒掉，再加DMSO即可，我們就是這么做的，效果很好！并且測(cè)細(xì)胞的增殖的話(huà)如果不去掉MTT就加DMSO的話(huà)誤差應(yīng)該很大！有時(shí)不一定就是血清的原因，可能跟你的MTT放置的時(shí)間或以及其他成分有關(guān)！

3、問(wèn)：(1)GIBCO胎牛血清500ml，今天解凍后沒(méi)有混勻直接分裝，結(jié)果使得前面的幾管是清亮的，后面就帶有棕色的，不知有沒(méi)有影響？估計(jì)有什么影響？前面的成分好還是棕色的成分好??？

答：肯定有。最好還是重新混合重新分裝，我覺(jué)得有效成分會(huì)集中在棕顏色部分。

問(wèn)：(2)為什么會(huì)出現(xiàn)棕色呢？

答：血清中的棕色多一些可能是因?yàn)榧t蛋白的含量高些的緣故吧。問(wèn)：(3)血清滅活之后可以存放嗎？我的是前天滅活的，但是沒(méi)有加到培養(yǎng)基里，而是放在冰箱里，那下次可以直接用嗎？還是再次滅活??？ 答：當(dāng)然可以，如果多的話(huà)，分裝后最好放在－20℃，下次用時(shí)再解凍，也不用再滅活。最好用一管拿一管，少許血清可以放在4℃。分裝時(shí)還要注意不要裝得太滿(mǎn)，以免溢出污染。

十四、問(wèn)：懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)能否加血清？如果加了會(huì)有什么結(jié)果？為什么懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)就不能加血清？

答：血清是細(xì)胞培養(yǎng)基中重要的培養(yǎng)成份之一，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有廣泛影響。在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，我們通常會(huì)加入10%的血清。血清的質(zhì)量對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的成功至關(guān)重要。一般說(shuō)來(lái)，牛血清包括以下成分：生長(zhǎng)因子(如激素，白細(xì)胞介素等)，他們可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)；貼附因子，他們可以促進(jìn)細(xì)胞的貼壁，往往只有細(xì)胞貼壁才能增值(懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞除外)；蛋白質(zhì)(如血清白蛋白，球蛋白等)，既可以作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，又可以中止胰酶的作用；還有很多成分不明的物質(zhì)。血清還可以起到解毒作用，如脂肪酸、重金屬和某些蛋白酶的毒性。血清還可以是細(xì)胞免受機(jī)械損傷。因此，無(wú)論是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞，血清是必不可少的。除非因?qū)嶒?yàn)要求無(wú)血清培養(yǎng)時(shí)，例如：為使細(xì)胞同步化時(shí)，我們會(huì)采用無(wú)血清培養(yǎng)的。單純的說(shuō)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)不能加血清就沒(méi)有太多的道理了。

十五、Gibico的胎牛血清內(nèi)是否含糖？

問(wèn)：我想做糖誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的試驗(yàn)。細(xì)胞培養(yǎng)液里加入了20%的胎牛血清。因此胎牛血清里是否含有糖對(duì)我實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)液糖終濃度影響比較大。今天打電話(huà)問(wèn)GIBCO公司的技術(shù)顧問(wèn)，回答我糖濃度少于5μg/ml，因此基本可認(rèn)為是不含糖。但我今天把胎牛血清送到我們醫(yī)院檢液科，結(jié)果卻是：6.2mmmol/l(葡萄糖氧化酶法)。難道是檢測(cè)人血清的血糖濃度的方法不能用于檢查牛血清嗎？(另起茶水驗(yàn)?zāi)蚴录?檢驗(yàn)科沒(méi)有給我回答。答：應(yīng)該是不含糖的。請(qǐng)參照gibco的網(wǎng)站：http://004km.cn/content/sfs/brochures/B_08A00_0619_FBS_bro.pdf。第五頁(yè)我做了個(gè)記號(hào)。直接點(diǎn)擊鏈接就可以看到它的說(shuō)明書(shū)頁(yè)面。我想我們肯定要以公司的說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。至于為什么檢驗(yàn)科測(cè)起來(lái)有誤差，我想可能是樣本不一樣，需要用標(biāo)志品矯正有關(guān)。具體需要檢驗(yàn)科的戰(zhàn)友解釋了。

十六、關(guān)于中和消化液需要的血清量。

問(wèn)：用胰蛋白酶消化細(xì)胞后，需要用血清中和。具體這種中和作用所要求的胰蛋白酶和血清之間的比例是多少？

答：做了很久的試驗(yàn)，真的沒(méi)有想過(guò)胰酶和血清的對(duì)應(yīng)關(guān)系。不過(guò)細(xì)想下來(lái)，這個(gè)應(yīng)該也沒(méi)有固定的比值。血清的品種都是不同的，成分必然有差異，如何能確定其與胰酶的比值關(guān)系？我們消化細(xì)胞的時(shí)候，如果是傳代，細(xì)胞變形后，吸出胰酶直接加入適量的hanks液或者全培，這個(gè)量看自己的喜好和吹打細(xì)胞方便而定。一般都可以中止消化的。不會(huì)存在繼續(xù)消化的事情。如果是從組織上消化細(xì)胞做原代培養(yǎng)，我一般都使用全培進(jìn)行中止，而且加的很多，0.25%的胰酶，用10%血清，按1:2的比例應(yīng)該是足夠的。當(dāng)然全培是2，一般我養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候，會(huì)用國(guó)產(chǎn)的比較便宜的血清配制全培，專(zhuān)門(mén)用于中止消化，這樣有幾個(gè)好處：一是中止消化的效果應(yīng)該好于hanks液吧，再是也有利于維持細(xì)胞活性。而且這部分液體會(huì)被離心去掉，血清便宜，離心掉了不會(huì)心疼。而養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候用好血清。個(gè)人觀(guān)點(diǎn)，僅供參考。

十七、血清中的懸浮物問(wèn)題。

1、問(wèn)：發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的細(xì)胞瓶中背景有許多的小黑點(diǎn)，培養(yǎng)液中也有一些漂浮的物?？戳酥暗奶詾槭悄z原蟲(chóng)。本打算換液，換液前特意看了下前些天配的培養(yǎng)液，肉眼發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液中有懸浮的顆粒狀物質(zhì)(不多)，于是放在鏡下觀(guān)察，新鮮培養(yǎng)液中有一些懸浮的小顆粒，不多。(培養(yǎng)液是R1640+20%牛血清+1%雙抗)于是又將分裝在4℃保存的小牛血清拿出觀(guān)察，肉眼可見(jiàn)5、6個(gè)白色小小球狀的物質(zhì)，在血清瓶稍靠下的部位懸浮。鏡下觀(guān)察，也有少量的不知什么物質(zhì)的東西漂浮。小牛血清是Hyclone新西蘭的，標(biāo)簽上寫(xiě)已經(jīng)經(jīng)過(guò)2μm濾膜過(guò)濾處理。根據(jù)上述培養(yǎng)液的情況，是否說(shuō)明培養(yǎng)液已被污染？如果是正常的血清是不是在鏡下不應(yīng)該看到雜物，哪怕是極少量的？根據(jù)上述血清的描述，是不是說(shuō)明血清也存在問(wèn)題，還能用嗎？補(bǔ)充：細(xì)胞培養(yǎng)以來(lái)生長(zhǎng)狀態(tài)就不好。買(mǎi)血清的時(shí)候廠(chǎng)家說(shuō)明不用滅活，所以未滅活。

答：(1)血清應(yīng)該-20℃保存，解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。(2)血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白在血清解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦可造成沉淀物。(3)若您一次無(wú)法用完一瓶，建議您無(wú)菌分裝血清，再放回冷凍，若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月，儲(chǔ)存在2－8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白，可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。

(4)解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

(5)排出了血清的原因，在考慮實(shí)驗(yàn)用品和無(wú)菌操作的問(wèn)題。

(6)細(xì)菌病毒、衣原體、黑膠蟲(chóng)污染也很常見(jiàn)，如果細(xì)胞死的太多，影響較大建議更換培養(yǎng)液。

2、問(wèn)：今天在配培養(yǎng)液時(shí)，發(fā)現(xiàn)血清里面有小碎片樣的漂浮物，血清仍然清亮，不渾濁。不知道是什么，問(wèn)了實(shí)驗(yàn)室的學(xué)長(zhǎng)，說(shuō)仍然可以用，但還是不放心，沒(méi)有用血清。求助園子的各位達(dá)人，這可能是血清出了什么問(wèn)題？我的血清用了一個(gè)月不到，四季青的。

答：可能的原因：(1)培養(yǎng)液配置時(shí)Votex不夠，當(dāng)時(shí)是清亮的，但過(guò)一段時(shí)間會(huì)析出來(lái)；(2)真菌污染。

十八、污染和過(guò)濾的問(wèn)題。

1、問(wèn)：懷疑血清染菌，想用濾膜過(guò)濾一下，可否自己用0.22μm濾膜過(guò)濾？對(duì)血清性質(zhì)有多大影響？有做過(guò)的么？

答：可以過(guò)濾的，血清當(dāng)出廠(chǎng)時(shí)都是0.22μm或0.1μm過(guò)濾除菌。想證明有沒(méi)有染菌不用過(guò)濾這么麻煩，只要放置于37℃過(guò)夜就可以了，如果有微生物污染會(huì)變渾濁的，如果還是澄清的就說(shuō)明沒(méi)有問(wèn)題的。實(shí)驗(yàn)室中血清很難直接過(guò)濾，一般要加到培養(yǎng)基中再過(guò)濾。我們實(shí)驗(yàn)室制備培養(yǎng)基時(shí)，都使用濾膜過(guò)濾，一般而言如果制備1-2瓶培養(yǎng)基，一個(gè)濾膜及一支30ml注射器可以過(guò)濾50ml小牛血清。如果大量制備培養(yǎng)基也可以將血清加到培養(yǎng)基中，使用0.22微米的大濾膜一起過(guò)濾。

2、問(wèn)：我懷疑我用的完全1640培養(yǎng)液被污染了，準(zhǔn)備重新過(guò)濾消毒，過(guò)濾后是否需要補(bǔ)充胎牛血清？如需又如何補(bǔ)充？

答：完全1640培養(yǎng)液被污染了，如果是支原體的話(huà)，過(guò)濾沒(méi)有作用，支原體可以通過(guò)濾膜。我們用1640液，都是配液后保留500ml，然后其他的分裝100-200ml，現(xiàn)用現(xiàn)配因?yàn)檠灞?640要貴，如果你想過(guò)濾的話(huà)，建議你加原比例血清，因?yàn)檠宀粫?huì)很容易通過(guò)濾膜。最主要的還是找到可能污染的原因。

3、問(wèn)：加好了血清雙抗的培養(yǎng)基由于污染了再過(guò)濾后還能用嗎？ 答：建議不要用了。在加了雙抗的情況下已經(jīng)污染，那么細(xì)菌污染的可能性會(huì)較小了。一般的過(guò)濾除不能去除病毒或者部分真菌的污染的。

4、問(wèn)：我準(zhǔn)備把使用的完全1640培養(yǎng)液重新過(guò)濾一遍，不知道培養(yǎng)液中的血清成分是否能通過(guò)濾膜，過(guò)濾后是否還需要補(bǔ)充胎牛血清？如需又如何補(bǔ)充？

答：可以透過(guò)，但是隨著液體量的增多會(huì)很慢，如果不加壓會(huì)比較麻煩，還有最好用低蛋白吸附的，不然損失是比較大的。

十九、更換無(wú)血清培養(yǎng)基后細(xì)胞大量死亡的問(wèn)題。

問(wèn)：我使用Lipofectamine2000轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞，在轉(zhuǎn)染前要換上無(wú)血清的培養(yǎng)基。本來(lái)?xiàng)l件模的好好的，轉(zhuǎn)染效率也可以接受。但是寒假一回來(lái)就發(fā)生了怪事：細(xì)胞在有血清的培養(yǎng)基中長(zhǎng)的好好的，一換無(wú)血清的培養(yǎng)基就死亡。大概4個(gè)小時(shí)就能看到較多的細(xì)胞飄起來(lái)。但是原來(lái)我換無(wú)血清培養(yǎng)基，就算放那里10個(gè)小時(shí)都是沒(méi)問(wèn)題的啊。已經(jīng)換了不同批次的培養(yǎng)基，甚至吸管什么的都換過(guò)了，但是就是不行，是怎么回事？

答：(1)兩周后的培養(yǎng)液應(yīng)補(bǔ)加谷氨酰胺，或者重新配液，轉(zhuǎn)染時(shí)應(yīng)不含抗生素。

(2)確認(rèn)操作方法和環(huán)境，建議檢查一下。

(3)Lipofectamine2000，脂質(zhì)體的毒性很大，如果有質(zhì)粒參與對(duì)細(xì)胞損傷更大，如果Lipofectamine2000在常溫放置過(guò)，對(duì)細(xì)胞更大，假期冰箱是否斷過(guò)電。

(4)培養(yǎng)箱的溫度、c02濃度，濕度。

二十、完全培養(yǎng)液的相關(guān)定義。

問(wèn)：“完全培養(yǎng)液一詞”，是指加了血清的培養(yǎng)液?jiǎn)?？我在做含藥血清的?shí)驗(yàn)，涉及到血清添加量的問(wèn)題。所以想弄明白文中所指的“完全培養(yǎng)液”是否是含藥血清。

答：原液是指配置后過(guò)濾除菌。不完全培養(yǎng)液是指不含有血清的原液，其他成分已補(bǔ)充。完全培養(yǎng)液是指不完全培養(yǎng)液加入血清后稱(chēng)完全培養(yǎng)液。二

十一、血清相關(guān)知識(shí)總結(jié)。使用胎牛血清的注意事項(xiàng)：

血清是細(xì)胞培養(yǎng)中最重要的元素之一。下面是實(shí)驗(yàn)室里常會(huì)遇到的問(wèn)題，僅供大家參考：

1、保存血清最好的方法： 建議血清應(yīng)保存在-5℃ 至-2O ℃。然而，若存放于 4 ℃ 時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶，建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

2、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損：

建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃ 冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

3、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理：

血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但最普的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血渭解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。

若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜。

4、何謂熱滅活：

一般是以 56℃，30 分鐘來(lái)處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活化，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有 : 溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。

5、關(guān)于胎牛血清的滅活： 有必要做熱滅活嗎？ 實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或完全沒(méi)有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀(guān)察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在 37℃ 環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。

因此我們建議您，若非必須，您可以不需要做熱處理這一步。如此一來(lái)，不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間，更確保您血清的質(zhì)量！

6、血清相關(guān)知識(shí)： 如何避免沉淀物的產(chǎn)生？

我們建議您在使用血清的時(shí)候，注意下列的操作 :(1)解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。(2)解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

(3)請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。(4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。

(5)若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30 分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。

第三篇：個(gè)人總結(jié) - 南方醫(yī)科大學(xué)

述職報(bào)告

我于2010年1月?lián)沃嗅t(yī)藥學(xué)院學(xué)生工作辦公室主任，到現(xiàn)在試用期滿(mǎn)一年。一年以來(lái)，在學(xué)院黨委的正確領(lǐng)導(dǎo)下，同事們的熱情幫助和支持下，經(jīng)過(guò)自身的努力，我的思想覺(jué)悟、工作能力和水平都有所提高，較好地履行了工作職責(zé)。本著總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，找出差距，繼續(xù)努力的目的，把今年的工作情況向上級(jí)組織匯報(bào)如下：

一、聯(lián)系實(shí)際，注重實(shí)效，切實(shí)做好學(xué)生思想政治教育工作。

1、加強(qiáng)學(xué)生黨建工作，充分發(fā)揮學(xué)生黨員的先鋒模范作用。規(guī)范黨員發(fā)展制度，制定黨員發(fā)展統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，嚴(yán)把黨員“入口”關(guān)，確保黨員發(fā)展水平和質(zhì)量上一個(gè)新的臺(tái)階，2010年共發(fā)展學(xué)生黨員109名，發(fā)展入黨積極分子212名。充分發(fā)揮黨員的先鋒模范作用，開(kāi)展向“黨員看齊”的黨日活動(dòng)。

2、團(tuán)日活動(dòng)主題鮮明、形式新穎，內(nèi)容上緊緊地扣住“文化育人，豐富課余生活”的航標(biāo)，涉及到理想信念教育、思想道德修養(yǎng)、愛(ài)心教育、專(zhuān)業(yè)實(shí)踐、社會(huì)服務(wù)、環(huán)境保護(hù)、志愿者服務(wù)等多方面。在活動(dòng)中始終堅(jiān)持“立足基層、面向團(tuán)員，重在創(chuàng)新、注重實(shí)效”的原則，共開(kāi)展了12次團(tuán)日活動(dòng)。

3、做好學(xué)生干部的培養(yǎng)教育，學(xué)生干部是學(xué)生工作得以順利開(kāi)展的主力軍，一直以來(lái)把培養(yǎng)一支積極主動(dòng)、富有朝氣和創(chuàng)造力的得力、踏實(shí)的學(xué)生干部隊(duì)伍作為學(xué)生工作的重點(diǎn)。本人采取學(xué)生干部例會(huì)、學(xué)生干部培訓(xùn)、團(tuán)日活動(dòng)交流會(huì)、暑期實(shí)踐工作總結(jié)交流 1 會(huì)、班干部經(jīng)驗(yàn)交流會(huì)等形式進(jìn)行培訓(xùn)交流，同時(shí)做好對(duì)低年級(jí)的學(xué)生干部傳、幫、帶工作。

4、做好學(xué)生日常的思想政治工作，確保學(xué)生思想情緒、生活秩序的穩(wěn)定，及時(shí)化解學(xué)生矛盾，同時(shí)學(xué)院積極與心理咨詢(xún)中心聯(lián)系，第一時(shí)間對(duì)該生進(jìn)行了心理干預(yù)，一年來(lái)共與30多名存在心理問(wèn)題的學(xué)生談心。對(duì)3名重點(diǎn)人、難點(diǎn)人進(jìn)行了及時(shí)的思想疏導(dǎo)。

二、狠抓學(xué)風(fēng)建設(shè)，努力營(yíng)造良好的學(xué)習(xí)氛圍。

1、以班集體建設(shè)為核心，以評(píng)“優(yōu)良學(xué)風(fēng)班”和為切入點(diǎn)，緊緊圍繞上課報(bào)告等“五項(xiàng)制度”，推進(jìn)創(chuàng)建優(yōu)良學(xué)風(fēng)班級(jí)活動(dòng)，明確班級(jí)發(fā)展目標(biāo)，發(fā)動(dòng)全體學(xué)生爭(zhēng)創(chuàng)優(yōu)良學(xué)風(fēng)班級(jí)活動(dòng)。

2、圍繞學(xué)風(fēng)建設(shè)，積極開(kāi)展學(xué)術(shù)競(jìng)賽活動(dòng)。為了提高學(xué)生的科研能力，組織開(kāi)展學(xué)院學(xué)生科技論文選拔，調(diào)動(dòng)了學(xué)生科研的積極性。07中西醫(yī)專(zhuān)業(yè)趙曉華等同學(xué)組建的團(tuán)隊(duì)過(guò)關(guān)斬將，獲得了第七屆“挑戰(zhàn)杯”廣東大學(xué)生創(chuàng)業(yè)計(jì)劃競(jìng)賽金獎(jiǎng)和第七屆“挑戰(zhàn)杯”中國(guó)大學(xué)生創(chuàng)業(yè)計(jì)劃競(jìng)賽金獎(jiǎng)，李旭妍等同學(xué)獲得了第七屆“挑戰(zhàn)杯”南方醫(yī)科大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)業(yè)計(jì)劃競(jìng)賽銀獎(jiǎng)和第七屆“挑戰(zhàn)杯”廣東大學(xué)生創(chuàng)業(yè)計(jì)劃競(jìng)賽銀獎(jiǎng)。

三、做好考研、考公務(wù)員和就業(yè)指導(dǎo)，努力提高畢業(yè)班就業(yè)率。

1、指導(dǎo)畢業(yè)班研究生和公務(wù)員考試，邀請(qǐng)考研專(zhuān)家開(kāi)展講座，對(duì)考研學(xué)生進(jìn)行面對(duì)面的交流；在考研復(fù)習(xí)的不同階段，邀請(qǐng)研究生錄取學(xué)生、教師進(jìn)行指導(dǎo)；2010年全院共有72位學(xué)生考上了第四軍醫(yī)大學(xué)、中山大學(xué)、南方醫(yī)科大學(xué)等國(guó)內(nèi)大學(xué)。做好公務(wù)員報(bào) 考面試指導(dǎo)和參軍入伍的政治審查工作，全院共有3名學(xué)生順利參軍入伍。

2、抓好畢業(yè)就業(yè)指導(dǎo)和服務(wù)工作。高度重視畢業(yè)生就業(yè)指導(dǎo)工作，堅(jiān)持“早動(dòng)員、早開(kāi)展、早落實(shí)”的就業(yè)指導(dǎo)方針。成立學(xué)生黨員就業(yè)服務(wù)小組，學(xué)生黨員在努力完成自己應(yīng)聘就業(yè)的同時(shí)，廣泛收集就業(yè)信息，協(xié)助就業(yè)困難同學(xué)積極應(yīng)聘。通過(guò)努力我院2010屆畢業(yè)生就業(yè)率達(dá)到92.13%，超額完成學(xué)校下達(dá)指標(biāo)。

四、堅(jiān)持以學(xué)生為本，做好學(xué)生管理工作

1、加強(qiáng)教育、嚴(yán)格管理，確保學(xué)生的安全穩(wěn)定。安全是學(xué)校發(fā)展的底線(xiàn)，我院堅(jiān)持“安全第一、預(yù)防為主”的工作理念，積極開(kāi)展校紀(jì)校規(guī)和安全防范教育，不定時(shí)排查“重點(diǎn)人、難點(diǎn)人”。在平時(shí)工作中，利用點(diǎn)名加強(qiáng)安全宣傳力度，如：消防、防傳銷(xiāo)、防詐騙等知識(shí)宣講；在院內(nèi)衛(wèi)生檢查時(shí)，將安全檢查作為衛(wèi)生檢查的一個(gè)重點(diǎn)；受學(xué)生2號(hào)公寓樓發(fā)生火災(zāi)的觸動(dòng)，組織全體輔導(dǎo)員到學(xué)生寢室開(kāi)展安全大檢查，要求各班開(kāi)展安全定期自查活動(dòng)，共收繳大功率電器十余件。

2、及時(shí)處理學(xué)生的突發(fā)事件。九月十五日學(xué)院發(fā)生了學(xué)生跳樓事件、我們及時(shí)成立事故處理組，較好的與學(xué)生家人溝通，處理了后事。

3、做好后進(jìn)學(xué)生的教育工作。學(xué)生工作的重點(diǎn)不僅僅是要培養(yǎng)優(yōu)秀學(xué)生，更要重點(diǎn)關(guān)注后進(jìn)學(xué)生的教育工作，對(duì)于個(gè)別學(xué)生產(chǎn)生厭學(xué)情緒時(shí)，我耐心地與學(xué)生分析原因，化解心結(jié)，共同制定改進(jìn) 提高的途徑。對(duì)于違紀(jì)或處在違紀(jì)邊緣的學(xué)生，我抱著不放棄不拋棄的工作態(tài)度，努力扶正后進(jìn)學(xué)生的努力方向。

4、做好綜合測(cè)評(píng)和評(píng)獎(jiǎng)評(píng)優(yōu)工作。綜合測(cè)評(píng)直接關(guān)系到學(xué)生的個(gè)人利益，在遵循學(xué)校制定的測(cè)評(píng)制度下，召開(kāi)學(xué)生骨干會(huì)，制訂加減分細(xì)則，使綜合測(cè)評(píng)在加、扣分等學(xué)生敏感問(wèn)題上有更大的操作性和說(shuō)服力。在此基礎(chǔ)上公平、公開(kāi)地完成各類(lèi)獎(jiǎng)學(xué)金的評(píng)審、發(fā)放和表彰工作，一年來(lái)報(bào)學(xué)校表彰的優(yōu)秀學(xué)生155名、優(yōu)秀學(xué)生干部25名。

5、完善貧困生解困體系，關(guān)心家庭困難學(xué)生生活，做好校級(jí)特困生、貧困生評(píng)定工作，做好政府獎(jiǎng)、助學(xué)金評(píng)定工作。協(xié)助學(xué)校做好申請(qǐng)助學(xué)貸款學(xué)生的申請(qǐng)、審核、發(fā)放、還款、催款工作。做好臨時(shí)困難補(bǔ)助金的發(fā)放工作。本人帶的教班共有16名學(xué)生辦理了助學(xué)貸款。

五、豐富學(xué)生課余生活，活躍學(xué)生第二課堂。

1、積極推進(jìn)寒暑期社會(huì)實(shí)踐活動(dòng)。寒暑假社會(huì)實(shí)踐共有167名同學(xué)參加：三下鄉(xiāng)、地中海貧血宣傳、新農(nóng)村合作醫(yī)療調(diào)查等等，2、加強(qiáng)校園文化建設(shè)，開(kāi)展各類(lèi)文藝、體育等競(jìng)賽，豐富學(xué)生課余文化生活。

3、青年志愿者服務(wù)不斷深化。在亞運(yùn)志愿服務(wù)方面，07級(jí)共有142名同學(xué)參加志愿服務(wù)活動(dòng)，所屬的THS155和THS172的兩個(gè)小隊(duì)獲得了“16屆亞運(yùn)會(huì)組委會(huì)天河體育場(chǎng)優(yōu)秀團(tuán)隊(duì)”稱(chēng)號(hào)，還有一大批同學(xué)獲得了“微笑之星”、“優(yōu)秀志愿者”等榮譽(yù)稱(chēng)號(hào)。存在的不足和今后努力的方向

雖然我在工作中取得了一定的成績(jī)，但還存在一些問(wèn)題和不足：一是政治理論修養(yǎng)不足，思考問(wèn)題不夠深入，造成了工作中的局限性；二是主動(dòng)學(xué)習(xí)的意識(shí)還不夠，更多的是忙事務(wù)性工作，總結(jié)思考不多；三是工作繁忙時(shí)，有急躁的情緒，處理和化解工作中的矛盾方式方法還要更加細(xì)致深入。這些問(wèn)題反映出自己的主觀(guān)能動(dòng)性還發(fā)揮得不夠，以及還要加強(qiáng)個(gè)人修養(yǎng)，這些不足我將在以后的工作中認(rèn)真加以克服和改進(jìn)。以上匯報(bào)有不當(dāng)之處，請(qǐng)領(lǐng)導(dǎo)和同志們批評(píng)指正。

中醫(yī)藥學(xué)院學(xué)生工作辦：黃芳

2010年12月16日

第四篇：南方醫(yī)科大學(xué)2013級(jí)研究生畢業(yè)要求

南方醫(yī)科大學(xué)研究生發(fā)表學(xué)術(shù)論文

暫行規(guī)定

第一章 總 則

第一條 為進(jìn)一步規(guī)范和提高研究生發(fā)表學(xué)術(shù)論文要求，不斷提升學(xué)位授予質(zhì)量，特制定本規(guī)定。

第二條 本規(guī)定所指學(xué)術(shù)論文是指研究生在攻讀相應(yīng)學(xué)位期間，以學(xué)位論文相應(yīng)內(nèi)容為基礎(chǔ)公開(kāi)發(fā)表的學(xué)術(shù)論著。研究生為學(xué)術(shù)論著的第一作者，署名單位為南方醫(yī)科大學(xué)，導(dǎo)師應(yīng)為通訊作者，通訊作者單位為南方醫(yī)科大學(xué)。

第三條 導(dǎo)師為聯(lián)合培養(yǎng)單位者，第一作者單位可以為南方醫(yī)科大學(xué)附屬××醫(yī)院，也可以為1南方醫(yī)科大學(xué)和2××醫(yī)院（1、2為共同第一作者單位，但1、2的順序不得顛倒）；通訊作者單位署名要求同第一作者單位。

第四條 與國(guó)外單位聯(lián)合培養(yǎng)者，學(xué)?？梢詾榉桥琶谝坏牡谝蛔髡邌挝?，但導(dǎo)師必須為共同通訊作者。

第五條 學(xué)術(shù)論著有并列作者時(shí)，其后的作者排名按前面作者人數(shù)依次順延計(jì)算。

第六條 本規(guī)定所指的SCI（科學(xué)引文索引）以各檢索系統(tǒng)《期刊引用報(bào)告》為依據(jù)，SCI論文分區(qū)以中國(guó)科學(xué)院文獻(xiàn)情報(bào)中心提供的《JCR期刊影響因子及分區(qū)情況》為準(zhǔn)。中文核心期刊（北京大學(xué)版）、CSSCI來(lái)源期刊（中國(guó)社會(huì)科學(xué)引文索引來(lái)源期刊目錄，中國(guó)社會(huì)科學(xué)研究評(píng)價(jià)中心版）、中文統(tǒng)計(jì)源期刊（中國(guó)科技信息研究所版）、《南方醫(yī)科大學(xué)人文社科類(lèi)期刊目錄》以學(xué)校認(rèn)可、研究生學(xué)院網(wǎng)站上公布的為準(zhǔn)。

第二章 申請(qǐng)博士學(xué)位

第七條 各專(zhuān)業(yè)（公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué)一級(jí)學(xué)科下的公共衛(wèi)生政策與管理、心理衛(wèi)生學(xué)等兩個(gè)自主設(shè)置二級(jí)學(xué)科除外，中西醫(yī)結(jié)合、中藥學(xué)和藥學(xué)專(zhuān)業(yè)中進(jìn)行中藥研究的除外）學(xué)術(shù)學(xué)位博士研究生，應(yīng)以第一作者在本專(zhuān)業(yè)或相關(guān)專(zhuān)業(yè)SCI收錄期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論著1篇；或以共同第一作者（前二位）在本專(zhuān)業(yè)或相關(guān)專(zhuān)業(yè)SCI論文分區(qū)二區(qū)以上(含)期刊（或IF>5）發(fā)表學(xué)術(shù)論著1篇；或以共同第一作者（前三位）在本專(zhuān)業(yè)或相關(guān)專(zhuān)業(yè)SCI論文分區(qū)一區(qū)以上(含)期刊（或IF>10）發(fā)表學(xué)術(shù)論著1篇。

第八條 公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué)一級(jí)學(xué)科下的公共衛(wèi)生政策與管理、心理衛(wèi)生學(xué)等兩個(gè)自主設(shè)置二級(jí)學(xué)科專(zhuān)業(yè)的學(xué)術(shù)學(xué)位博士研究生，應(yīng)以第一作者在《南方醫(yī)科大學(xué)人文社科類(lèi)期刊目錄》一類(lèi)期刊發(fā)表1篇學(xué)術(shù)論著，或以第一作者在《南方醫(yī)科大學(xué)人文社科類(lèi)期刊目錄》二類(lèi)期刊至少發(fā)表2篇學(xué)術(shù)論著，或發(fā)表第二章第七條要求的學(xué)術(shù)論著。第九條 中西醫(yī)結(jié)合、中藥學(xué)專(zhuān)業(yè)及藥學(xué)專(zhuān)業(yè)中進(jìn)行中藥研究的學(xué)術(shù)學(xué)位博士研究生應(yīng)以第一作者在本專(zhuān)業(yè)中文核心期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論著至少3篇；或發(fā)表第二章第七條要求的學(xué)術(shù)論著。

第十條 各專(zhuān)業(yè)專(zhuān)業(yè)學(xué)位博士研究生（含在職博士研究生），其發(fā)表論文要求同本專(zhuān)業(yè)學(xué)術(shù)學(xué)位博士研究生。

第十一條 各專(zhuān)業(yè)學(xué)術(shù)學(xué)位碩博連讀研究生，應(yīng)以第一作者在本專(zhuān)業(yè)或相關(guān)專(zhuān)業(yè)SCI論文收錄期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論著至少2篇；或以第一作者在本專(zhuān)業(yè)或相關(guān)專(zhuān)業(yè)SCI論文分區(qū)三區(qū)以上(含)期刊（或IF>3）發(fā)表學(xué)術(shù)論著1篇；或以共同第一作者（前二位）在本專(zhuān)業(yè)或相關(guān)專(zhuān)業(yè)SCI論文分區(qū)二區(qū)前半?yún)^(qū)以上(含)期刊（或IF>7）發(fā)表學(xué)術(shù)論著1篇；或以共同第一作者（前三位）在本專(zhuān)業(yè)或相關(guān)專(zhuān)業(yè)SCI論文分區(qū)一區(qū)以上(含)期刊（或IF>10）發(fā)表學(xué)術(shù)論著1篇。

第十二條 各專(zhuān)業(yè)專(zhuān)業(yè)學(xué)位碩博連讀研究生，其發(fā)表論文要求同學(xué)術(shù)學(xué)位碩博連讀研究生。

第十三條 本章中未特別注明的第一作者均指排名第一的論文第一作者。

第十四條 博士研究生以第一作者在本專(zhuān)業(yè)或相關(guān)專(zhuān)業(yè)SCI論文分區(qū)一區(qū)期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論著者或以第一作者在本專(zhuān)業(yè)或相關(guān)專(zhuān)業(yè)SCI論文分區(qū)二區(qū)以上(含)期刊發(fā)表2篇學(xué)術(shù)論著者，可準(zhǔn)予提前答辯畢業(yè)，并申請(qǐng)相應(yīng)學(xué)位，但提前時(shí)間原則上不超過(guò)1年。

第三章 申請(qǐng)碩士學(xué)位

第十五條 各專(zhuān)業(yè)（馬克思主義理論、公共管理學(xué)一級(jí)學(xué)科下的社會(huì)醫(yī)學(xué)與衛(wèi)生事業(yè)管理、公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué)一級(jí)學(xué)科下的公共衛(wèi)生政策與管理除外）全日制學(xué)術(shù)學(xué)位碩士研究生應(yīng)以第一作者（排名第一）在中文核心期刊發(fā)表1篇學(xué)術(shù)論著；或符合以下條件的本專(zhuān)業(yè)或相關(guān)專(zhuān)業(yè)SCI論文分區(qū)論著：

（1）SCI論文分區(qū)四區(qū)以上(含)期刊的論著第一作者；（2）SCI論文分區(qū)三區(qū)以上(含)期刊（或IF>3）的論著前二作者；

（3）SCI論文分區(qū)二區(qū)以上(含)期刊（或IF>5）的論著前三作者；

（4）SCI論文分區(qū)一區(qū)以上(含)期刊（或IF>10）的論著前四作者。

第十六條 馬克思主義理論、公共管理學(xué)一級(jí)學(xué)科下的社會(huì)醫(yī)學(xué)與衛(wèi)生事業(yè)管理、公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué)一級(jí)學(xué)科下的公共衛(wèi)生政策與管理專(zhuān)業(yè)全日制學(xué)術(shù)學(xué)位碩士研究生，應(yīng)以第一作者（排名第一）在中文統(tǒng)計(jì)源（含）以上期刊或《南方醫(yī)科大學(xué)人文社科類(lèi)期刊目錄》期刊發(fā)表1篇學(xué)術(shù)論著。第十七條 各專(zhuān)業(yè)全日制專(zhuān)業(yè)學(xué)位碩士研究生，其發(fā)表論文要求同本專(zhuān)業(yè)全日制學(xué)術(shù)學(xué)位碩士研究生。

第十八條 在職人員申請(qǐng)碩士學(xué)位者應(yīng)以第一作者在中文統(tǒng)計(jì)源以上期刊發(fā)表1篇學(xué)術(shù)論著。

第十九條 為鼓勵(lì)我校碩士研究生延續(xù)和進(jìn)一步深入課題研究，爭(zhēng)取發(fā)表高水平學(xué)術(shù)論著，對(duì)于畢業(yè)當(dāng)年考取我校博士研究生的碩士研究生，如已達(dá)到學(xué)科專(zhuān)業(yè)碩士研究生培養(yǎng)方案的要求，通過(guò)碩士學(xué)位的課程考試、完成課題研究和碩士學(xué)位論文答辯，導(dǎo)師允許其不發(fā)表學(xué)術(shù)論文，可申請(qǐng)授予碩士學(xué)位。

第二十條 導(dǎo)師近三年內(nèi)曾以第一作者或通訊作者在本專(zhuān)業(yè)或相關(guān)專(zhuān)業(yè)的SCI論文分區(qū)二區(qū)以上期刊發(fā)表過(guò)學(xué)術(shù)論著的，其所指導(dǎo)的碩士研究生確因課題需要不便發(fā)表學(xué)術(shù)論著，并已達(dá)到學(xué)科專(zhuān)業(yè)碩士研究生培養(yǎng)方案的要求，通過(guò)碩士學(xué)位的課程考試、完成課題研究和碩士學(xué)位論文答辯，經(jīng)導(dǎo)師提出申請(qǐng)，由導(dǎo)師在兩級(jí)學(xué)位評(píng)定委員會(huì)陳述理由，經(jīng)學(xué)校學(xué)位評(píng)定委員會(huì)表決，通過(guò)后也可以不發(fā)表學(xué)術(shù)論文而授予碩士學(xué)位。

第二十一條 學(xué)術(shù)學(xué)位碩士研究生以第一作者（排名第一）在本專(zhuān)業(yè)及相關(guān)專(zhuān)業(yè)SCI論文分區(qū)三區(qū)以上(含)期刊（或IF>3）發(fā)表學(xué)術(shù)論著的，可提前申請(qǐng)畢業(yè)答辯和相應(yīng)學(xué)位，但提前時(shí)間原則上不超過(guò)1年。已完成住院醫(yī)師規(guī)范化培訓(xùn)的專(zhuān)業(yè)學(xué)位碩士研究生可申請(qǐng)?zhí)崆爱厴I(yè)答辯，否則不得申請(qǐng)?zhí)崆爱厴I(yè)答辯。

第四章 相關(guān)成果界定

第二十二條 為鼓勵(lì)研究生開(kāi)展技術(shù)創(chuàng)新，研究生學(xué)位論文研究成果以排名前二位獲得授權(quán)國(guó)家發(fā)明專(zhuān)利1項(xiàng)或成功申請(qǐng)國(guó)際發(fā)明專(zhuān)利1項(xiàng)，等同于以第一作者（排名第一）在本專(zhuān)業(yè)SCI論文分區(qū)第四區(qū)期刊發(fā)表學(xué)術(shù)論著1篇。

第二十三條 凡學(xué)位論文為保密課題的研究生，課題密級(jí)應(yīng)由下達(dá)課題主管部門(mén)批準(zhǔn)，經(jīng)學(xué)校保密委員會(huì)審核后交研究生學(xué)院培養(yǎng)科備案。承擔(dān)機(jī)密級(jí)（含）以上課題的博士研究生應(yīng)以第一作者（排名第一）在相應(yīng)的保密論文集發(fā)表3篇學(xué)術(shù)論著或向有關(guān)部門(mén)提供政策咨詢(xún)報(bào)告，碩士研究生應(yīng)在相應(yīng)保密論文集發(fā)表1篇學(xué)術(shù)論著或向有關(guān)部門(mén)提供政策咨詢(xún)報(bào)告，才可申請(qǐng)答辯。所發(fā)學(xué)術(shù)論著或政策咨詢(xún)報(bào)告須由學(xué)位評(píng)定委員分委員會(huì)辦公室組織專(zhuān)家組鑒定是否達(dá)到相應(yīng)學(xué)位申請(qǐng)要求。承擔(dān)秘密級(jí)課題的研究生，應(yīng)將學(xué)位論文的非保密內(nèi)容按相應(yīng)要求公開(kāi)發(fā)表，方能申請(qǐng)答辯。

開(kāi)題報(bào)告前，研究生必須填報(bào)《南方醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文涉密申請(qǐng)表》、《南方醫(yī)科大學(xué)研究生從事涉密課題研究保密承諾書(shū)》，經(jīng)校保密委員會(huì)或下達(dá)課題主管部門(mén)保密委員會(huì)審查同意并送研究生學(xué)院培養(yǎng)科備案，否則不予認(rèn)定。

第二十四條 研究生提交的學(xué)術(shù)論文只限定于在期刊正刊上發(fā)表的學(xué)術(shù)論著。

第二十五條 申請(qǐng)各類(lèi)博士學(xué)位、碩士學(xué)位的學(xué)術(shù)論文，不包含文獻(xiàn)綜述、病例分析報(bào)告。

第二十六條 對(duì)于導(dǎo)師排名第一、研究生排名第二的學(xué)術(shù)論文，且第一作者單位、第二作者單位、通訊作者單位均為南方醫(yī)科大學(xué)的，視同研究生為第一作者的學(xué)術(shù)論文。本條僅適用于碩士研究生。

第五章 其 他

第二十七條 學(xué)位申請(qǐng)人在提出學(xué)位申請(qǐng)前，應(yīng)按規(guī)定在學(xué)校研究生管理系統(tǒng)填報(bào)《研究生發(fā)表論文信息采集》，并提交發(fā)表論文的原件和復(fù)印件（包括封面、刊物目錄和論文全文），或提供發(fā)表學(xué)術(shù)論文出處的超鏈接（電子版）供審查。

第二十八條 提交的學(xué)術(shù)論文應(yīng)以正式刊出為準(zhǔn)，對(duì)于在國(guó)（境）外發(fā)表的SCI收錄的學(xué)術(shù)論文，也可以是清樣、校樣或錄用函，但需導(dǎo)師簽名擔(dān)保。對(duì)于未能如期正式發(fā)表的，取消導(dǎo)師以后的擔(dān)保資格。第二十九條 緩授學(xué)位研究生，如以中文學(xué)術(shù)論文申請(qǐng)學(xué)位，最遲應(yīng)在畢業(yè)1年內(nèi)申請(qǐng)補(bǔ)授學(xué)位；如以SCI收錄期刊學(xué)術(shù)論文申請(qǐng)學(xué)位，最遲應(yīng)在畢業(yè)3年內(nèi)申請(qǐng)補(bǔ)授學(xué)位。

第六章 附 則

第三十條 各學(xué)科專(zhuān)業(yè)、學(xué)位評(píng)定分委員會(huì)可根據(jù)本學(xué)科發(fā)展要求，制定不低于本規(guī)定的發(fā)表論文標(biāo)準(zhǔn)。

第三十一條 本規(guī)定從2013級(jí)研究生起嚴(yán)格執(zhí)行。第三十二條 本規(guī)定由研究生學(xué)院負(fù)責(zé)解釋。

第五篇：南方醫(yī)科大學(xué)2010年研究生推免

附件1

南方醫(yī)科大學(xué)關(guān)于推薦2011年優(yōu)秀應(yīng)屆本科畢業(yè)生

免試攻讀碩士學(xué)位研究生工作管理辦法（暫行）

推薦優(yōu)秀應(yīng)屆本科畢業(yè)生免試攻讀碩士學(xué)位研究生（以下簡(jiǎn)稱(chēng)推免生），是國(guó)家激勵(lì)本科學(xué)生勤奮學(xué)習(xí)、全面發(fā)展和培養(yǎng)選拔優(yōu)秀人才的重要措施，是我校全面加強(qiáng)素質(zhì)教育，促進(jìn)創(chuàng)造性人才培養(yǎng)和提高研究生質(zhì)量的重要舉措。為做好“推免生”工作，根據(jù)教育部教學(xué)?2006?14號(hào)文件及其附件《全國(guó)普通高等學(xué)校推薦優(yōu)秀應(yīng)屆畢業(yè)生免試攻讀碩士研究生管理辦法（試行）》的精神和規(guī)定，結(jié)合我校具體情況，特修訂本管理辦法。

第一章 推薦的范圍和比例

第一條 “推免生”的推薦范圍為我校應(yīng)屆畢業(yè)的全日制本科優(yōu)秀生；“免試”的涵義是免予參加全國(guó)統(tǒng)一的研究生入學(xué)考試（初試），但必須經(jīng)過(guò)面試（復(fù)試）；“應(yīng)屆”的涵義是指每年研究生招生報(bào)名階段開(kāi)始時(shí)已進(jìn)入本科最后一學(xué)年學(xué)習(xí)的本科生（不包括專(zhuān)升本學(xué)生）。

第二條 推薦的比例

1、各學(xué)院報(bào)送的推薦人數(shù)占應(yīng)屆畢業(yè)本科生人數(shù)的比例，視當(dāng)年教育部下達(dá)給我校的推薦免試研究生名額而定；

2、屬學(xué)校重點(diǎn)扶持的學(xué)科如符合推薦條件的學(xué)生數(shù)量特別多，或長(zhǎng)期以來(lái)正常招收的研究生生源特別短缺，因而需增加推薦免試生名額的，須另行申請(qǐng)。

第二章 推薦生的條件

第三條 基本條件

1、擁護(hù)黨的基本路線(xiàn)，有正確的世界觀(guān)、人生觀(guān)、價(jià)值觀(guān)，有為祖國(guó)、為人民、為社會(huì)主義現(xiàn)代化建設(shè)服務(wù)的志向和強(qiáng)烈的責(zé)任感；嚴(yán)格遵紀(jì)守法，道德品質(zhì)好，勤學(xué)敬業(yè)，富有上進(jìn)心和團(tuán)結(jié)合作精神；

2、文、理、工科類(lèi)本科一至三年級(jí)共六個(gè)學(xué)期的主干課程成績(jī)平均績(jī)點(diǎn)應(yīng)達(dá)到2.5以上，主干課程低于70分的不超過(guò)4門(mén)，醫(yī)科類(lèi)學(xué)生一至四年級(jí)的主干課程成績(jī)平均績(jī)點(diǎn)應(yīng)達(dá)到3.0以上，主干課程低于70分的不得超過(guò)3門(mén)；

3、必須獲得全國(guó)大學(xué)英語(yǔ)六級(jí)合格證書(shū)（憑六級(jí)考試成績(jī)單），必須 1

在本?？键c(diǎn)參加考試的證書(shū)方有效；

4、能較深入地分析、解決問(wèn)題，具備較強(qiáng)的研究能力和創(chuàng)新精神。文科學(xué)生要具有較強(qiáng)的研究能力和寫(xiě)作能力；理工科學(xué)生要具有較強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)能力和思維能力；

5、申報(bào) “思政系列”的學(xué)生必須是中國(guó)共產(chǎn)黨黨員。

第四條 優(yōu)先條件

1、凡獲 “挑戰(zhàn)杯”、“創(chuàng)業(yè)計(jì)劃競(jìng)賽”、“數(shù)學(xué)建模競(jìng)賽”、“電子設(shè)計(jì)競(jìng)賽”等全國(guó)性比賽第二獎(jiǎng)勵(lì)級(jí)別（即包括二等獎(jiǎng)和相當(dāng)于二等獎(jiǎng)）及其以上獎(jiǎng)勵(lì)的參賽者；

2、對(duì)有特殊學(xué)術(shù)專(zhuān)長(zhǎng)或具有突出培養(yǎng)潛質(zhì)者，經(jīng)三名以上本校本專(zhuān)業(yè)教授聯(lián)名推薦，經(jīng)學(xué)校推免生遴選工作領(lǐng)導(dǎo)小組審查，可不受綜合排名限制，學(xué)生有關(guān)說(shuō)明材料和教授推薦信要進(jìn)行公示；

3、對(duì)在國(guó)內(nèi)外大學(xué)生學(xué)術(shù)性比賽的獲獎(jiǎng)?wù)?、在?guó)內(nèi)外公開(kāi)出版物（需有CN或ISSN刊號(hào)）上發(fā)表有一定篇幅和質(zhì)量的學(xué)術(shù)論文者、在校學(xué)習(xí)期間取得具有一定理論價(jià)值和推廣價(jià)值的科研成果并獲獎(jiǎng)?wù)撸?/p>

4、已和相關(guān)研究生專(zhuān)業(yè)的導(dǎo)師合作科研，是該項(xiàng)目的主要骨干，該項(xiàng)目已在學(xué)校科技處、醫(yī)科處或社科處備案（其中教學(xué)研究項(xiàng)目在教務(wù)處備案），并有階段性成果，經(jīng)本專(zhuān)業(yè)導(dǎo)師組認(rèn)定者；

5、獲省級(jí)或以上“優(yōu)秀學(xué)生干部”、“優(yōu)秀共青團(tuán)員”等表彰的學(xué)生。

第五條 排序量化指標(biāo)

各專(zhuān)業(yè)在品學(xué)兼優(yōu)的畢業(yè)生中按量化指標(biāo)進(jìn)行排序，擇優(yōu)推薦。具體各項(xiàng)量化指標(biāo)和標(biāo)準(zhǔn)如下：

1、學(xué)習(xí)成績(jī)：以專(zhuān)業(yè)平均成績(jī)?yōu)榛A(chǔ)分；

2、學(xué)術(shù)、科研獲獎(jiǎng)加分：參加國(guó)家級(jí)比賽獲一等獎(jiǎng)，5分，二等獎(jiǎng)，4分，三等獎(jiǎng)3分；參加省級(jí)比賽獲一等獎(jiǎng)，3分，二等獎(jiǎng)，2分，三等獎(jiǎng)，1分（不累計(jì)加分）；在省級(jí)以上學(xué)術(shù)性刊物公開(kāi)發(fā)表論文1篇，1分（可累計(jì)加分）。集體獎(jiǎng)（5人以上）分值減半；

3、外國(guó)語(yǔ)水平：非外語(yǔ)專(zhuān)業(yè)英語(yǔ)通過(guò)國(guó)家大學(xué)英語(yǔ)六級(jí)成績(jī)達(dá)到良好（總分的75%）2分；

4、榮譽(yù)表彰：獲全國(guó)表彰，3分；獲省級(jí)表彰，2分；獲校級(jí)表彰，1分（不累計(jì)加分），集體表彰（5人以上）分值減半；

5、其它獲獎(jiǎng)：參加國(guó)家級(jí)比賽獲前三名，2分；省級(jí)前三名獎(jiǎng)，1分（不累計(jì)加分）；集體獎(jiǎng)（5人以上）分值減半。

第六條 身體素質(zhì)和心理素質(zhì)的基本要求：身體健康，符合報(bào)考研究生的體檢標(biāo)準(zhǔn)；體育成績(jī)和國(guó)家規(guī)定的體育鍛煉標(biāo)準(zhǔn)測(cè)驗(yàn)合格；心理素質(zhì)健全，有良好的心理承受能力和調(diào)節(jié)能力。

第七條 有關(guān)獎(jiǎng)懲方面的基本要求：

1、在本科前三學(xué)年或四學(xué)年中至少獲得一次學(xué)校學(xué)業(yè)獎(jiǎng)學(xué)金或單科獎(jiǎng)學(xué)金。

2、在校期間無(wú)任何違法違紀(jì)行為，未受過(guò)任何處分。

第三章 推薦工作的組織領(lǐng)導(dǎo)

第八條 學(xué)校成立推薦免試攻讀碩士學(xué)位研究生遴選工作領(lǐng)導(dǎo)小組，由主管教學(xué)的副校長(zhǎng)任組長(zhǎng)，成員包括教務(wù)處、校紀(jì)檢監(jiān)察部門(mén)、學(xué)生處、研究生學(xué)院負(fù)責(zé)人各一人，領(lǐng)導(dǎo)小組下設(shè)辦公室，辦公室設(shè)在教務(wù)處，教務(wù)處處長(zhǎng)任辦公室主任。

第九條 各學(xué)院需成立由主管教學(xué)的院負(fù)責(zé)人任組長(zhǎng)的推免工作小組，小組成員一般應(yīng)為5至7人，由黨政負(fù)責(zé)人和學(xué)科帶頭人組成。

第十條 各單位應(yīng)高度重視“推免生”工作，推薦工作應(yīng)貫徹德、智、體、美全面發(fā)展，以學(xué)業(yè)成績(jī)?yōu)橹骶€(xiàn)，注重對(duì)免試生的政治思想、道德品質(zhì)和創(chuàng)新思維、科研能力的綜合考核，保證免試生具備較高的綜合素質(zhì)和良好的培養(yǎng)潛力。

第十一條 推薦免試攻讀碩士學(xué)位研究生的工作，是一項(xiàng)政策性和紀(jì)律性很強(qiáng)的任務(wù)，必須嚴(yán)格按照規(guī)定辦理，堅(jiān)決反對(duì)并抵制營(yíng)私舞弊等不正之風(fēng)；學(xué)校推免工作遴選領(lǐng)導(dǎo)小組和各學(xué)院推薦工作小組必須認(rèn)真受理師生的投訴，確保推薦工作公開(kāi)、公平、公正地進(jìn)行，確保工作質(zhì)量。

第十二條 各單位要對(duì)申請(qǐng)推薦免試的學(xué)生做好具體的指導(dǎo)工作，包括動(dòng)員和答疑；協(xié)助學(xué)生及時(shí)與擬報(bào)讀的外單位聯(lián)系；指導(dǎo)學(xué)生填報(bào)志愿，避

免過(guò)于集中申報(bào)少數(shù)熱門(mén)專(zhuān)業(yè)或過(guò)于集中在原就讀的二級(jí)學(xué)科單位，免試生可以實(shí)行跨學(xué)科推薦。

第四章 推薦工作的程序

第十三條 動(dòng)員：各學(xué)院應(yīng)深入學(xué)習(xí)領(lǐng)會(huì)本辦法的精神，在每年的6月底以前，對(duì)三年級(jí)（四年制）或四年級(jí)（五年制）的本科生進(jìn)行申報(bào)推免生的動(dòng)員工作，有條件的申報(bào)者可在暑假前后向擬報(bào)讀的接收單位或?qū)W科點(diǎn)進(jìn)行初步聯(lián)系。

第十四條 申請(qǐng)：各本科生所在院系一般在每年9月中上旬完成申請(qǐng)學(xué)生的資格審查，有科研成果及相關(guān)證明材料的，須作為附件（可用復(fù)印件）連同申請(qǐng)書(shū)一并上交所在院系。

第十五條 初審：各學(xué)院推免審核小組應(yīng)由推薦免試攻讀碩士學(xué)位研究生工作小組主持，并可組織本單位教務(wù)員、該專(zhuān)業(yè)的政治輔導(dǎo)員、班主任和主要學(xué)生干部參加，在9月中旬對(duì)報(bào)名者有關(guān)條件進(jìn)行初審，按規(guī)定比例上報(bào)候選人名單，讓其按教務(wù)處要求準(zhǔn)備上報(bào)材料。

第十六條 筆試：推免生遴選工作領(lǐng)導(dǎo)小組認(rèn)真審核各學(xué)院上報(bào)的推薦名單，符合條件的學(xué)生可參加由教務(wù)處統(tǒng)一組織的英語(yǔ)筆試（考試難易程度參照研究生入學(xué)考試要求）。

第十七條 面試：推免生遴選工作領(lǐng)導(dǎo)小組根據(jù)每個(gè)學(xué)生的綜合得分及筆試成績(jī)確定參加統(tǒng)一面試的候選學(xué)生名單，根據(jù)學(xué)生所報(bào)專(zhuān)業(yè)確定面試組專(zhuān)家名單。面試內(nèi)容分為“基礎(chǔ)和專(zhuān)業(yè)綜合測(cè)試”與“外語(yǔ)口試”，其中基礎(chǔ)和專(zhuān)業(yè)綜合測(cè)試的內(nèi)容不宜太窄，一般應(yīng)掌握在一級(jí)學(xué)科領(lǐng)域，有的學(xué)科可擴(kuò)大到學(xué)科門(mén)類(lèi)，外語(yǔ)口試可兼顧公共外語(yǔ)和專(zhuān)業(yè)外語(yǔ)（其中“基礎(chǔ)和專(zhuān)業(yè)綜合測(cè)試”與“外語(yǔ)口試”任何一項(xiàng)平均成績(jī)不及格，不得推薦）。

第十八條 審批：學(xué)校推免生遴選工作領(lǐng)導(dǎo)小組在每年9月底完成對(duì)本推免生名額的最終審核確定工作，并即向全校公布擬正式推薦的名單，10月中旬正式發(fā)文予以確認(rèn)。

第十九條 經(jīng)學(xué)校同意推薦的免試生材料，凡推薦到我校各碩士點(diǎn)的，統(tǒng)一由教務(wù)處轉(zhuǎn)送研究生院；凡向外校推薦的，由學(xué)生所在學(xué)院負(fù)責(zé)寄送，有關(guān)單位應(yīng)及時(shí)與接收單位聯(lián)系，以便免試生在研究生報(bào)名期結(jié)束前能獲得接收單位的信息反饋。

第二十條 推薦免試研究生的錄取辦法由研究生學(xué)院另行擬定。

第五章 附則

第二十一條 本管理辦法第二章第三條中的“主干課程”指必修課與專(zhuān)業(yè)選修課。

第二十二條 已獲推薦免試攻讀碩士學(xué)位資格，但在本科畢業(yè)或研究生正式入學(xué)前有以下情況者，學(xué)校將中止或撤消其免試直接進(jìn)入研究生階段學(xué)習(xí)的資格：

1、不能按時(shí)完成本科階段學(xué)業(yè)或取得畢業(yè)資格但未獲得學(xué)士學(xué)位者；

2、本科畢業(yè)論文不能獲得良好以上成績(jī)者（醫(yī)科類(lèi)學(xué)生畢業(yè)綜合能力測(cè)評(píng)成績(jī)不合格者）；

3、因身心健康原因需要休學(xué)或停學(xué)者；

4．有違紀(jì)違法行為者。

第二十三條 本辦法由教務(wù)處負(fù)責(zé)解釋?zhuān)辉谕扑]工作進(jìn)行期間，由學(xué)校推免生遴選工作領(lǐng)導(dǎo)小組負(fù)責(zé)解釋。