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      生化教案第五章

      時間:2019-05-12 17:38:50下載本文作者:會員上傳
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      第一篇:生化教案第五章

      第五章 核酸化學(xué) 第一節(jié) 概述

      一、染色體、基因和DNA

      1、染色體和基因----遺傳的基本單位

      染色體是細(xì)胞核內(nèi)能被堿性染料著色的物質(zhì)的螺旋集縮體,由核酸、組蛋白、非組蛋白等組成。

      經(jīng)典遺傳學(xué)認(rèn)為,染色體和基因間有平行現(xiàn)象,基因存在于染色體上,基因在遺傳中具有完整性和獨立性,隨染色體的分離、配對而進(jìn)行獨立的分配。

      2、核酸---遺傳信息的載體

      基因位于核酸分子上,所以核酸是遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ),是遺傳信息的載體,在蛋白質(zhì)生物合成中起十分重要的作用。

      二、核酸的化學(xué)組成

      1、分類---核酸分為RNA(mRNA、tRNA、rRNA)和DNA

      2、核酸中的糖---核糖和脫氧核糖

      3、含氮堿基---嘌呤和嘧啶衍生物

      4、核苷酸---核酸的基本結(jié)構(gòu)單位,由堿基、戊糖和磷酸組成。

      5、核苷酸的衍生物(1)ATP和GTP ATP:腺嘌呤核糖核苷三磷酸;GTP:鳥嘌呤核糖核苷三磷酸

      (2)cAMP和cGMP 主要功能是作為細(xì)胞之間傳遞信息的信使。

      6、核苷酸的重要作用

      (1)核苷酸是合成DNA和RNA的前體

      (2)在多糖合成中尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)是葡萄糖的活性形式,是合成糖原葡萄糖基的直接供體

      (3)ATP是生物體內(nèi)生物能生成、儲藏、轉(zhuǎn)運的中心

      (4)各種代謝反應(yīng)中所需要的NAD(H)、NADP(H)等都是腺苷酸的衍生物

      (5)cAMP為3‘,5`-環(huán)腺苷酸,它是由ATP轉(zhuǎn)變而來的,在生物體細(xì)胞內(nèi)具有傳遞生理信息的重要作用,被稱為第二信使。

      (6)鳥嘌呤-5‘-三磷酸(GTP)是生物大分子移位反應(yīng)的主要動力來源。

      第二節(jié) 核酸的結(jié)構(gòu)

      一、核酸的一級結(jié)構(gòu)

      指核苷酸的排列順序,包括核苷酸間的連接鍵

      1、磷酸二酯鍵----核苷酸間的基本連接 核苷酸之間通過3`,5 `-磷酸二酯鍵連接

      2、一級結(jié)構(gòu)----核苷酸的排列順序

      二、核酸的高級結(jié)構(gòu)

      1、DNA的二級結(jié)構(gòu)----雙螺旋結(jié)構(gòu)模型(1)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型提出的依據(jù)

      主要依賴于20世紀(jì)40年代X射線衍射技術(shù)的應(yīng)用,不少人 得到了

      大量核酸X的衍射圖譜。

      (2)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的特征

      主鏈:兩鏈均為右手螺旋,磷酸二酯鍵方向相反。

      堿基配對

      堿基參數(shù):雙螺旋直徑2nm,相鄰堿基對之間的高度即堿基垂直堆積距離為0.34nm.螺旋表面(形成大溝和小溝)(3)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定因素 氫鍵(AT間兩個,GC間3個氫鍵)堿基堆積力(兩個平行的堿基環(huán)之間)

      離子鍵(磷酸基團的解離,使DNA成為一種多電荷陰離子,有利于與帶正電荷的組蛋白或介質(zhì)中的陽離子形成靜電作用,利于雙螺旋的穩(wěn)定)

      2、tRNA二級結(jié)構(gòu)---三葉草結(jié)構(gòu)模型 四臂四環(huán) 氨基酸接受區(qū) 反密碼子區(qū) 二氫尿嘧啶區(qū)

      TΨC區(qū)(一臂一環(huán))可變區(qū)

      3、DNA的三級結(jié)構(gòu)---超螺旋

      DNA的三級結(jié)構(gòu)是指雙螺旋基礎(chǔ)上分子的進(jìn)一步扭曲或再次螺旋所形成的構(gòu)象。其中,超螺旋是最常見并且研究最多的DNA三級結(jié)構(gòu)。

      第三節(jié) 核酸的性質(zhì)及純度測定

      一、核酸的溶解性

      1、溶解性—堿基、核苷酸和核酸具有不同的溶解性

      DNA和RNA都是極性化合物,一般都微溶入水,不溶于乙醇、乙醚。核酸、核苷酸、堿基在水中的溶解度依次減小。2、0.14摩爾法---分離DNA蛋白質(zhì)和RNA蛋白質(zhì)

      DNA蛋白的溶解度在低濃度鹽溶液中隨鹽濃度的增加而增加,在1mol/LNaCI溶液中的溶解度比純水中高2倍,但在0.14mol/的NaCl溶液中溶解度最低(幾乎不溶),而RNA蛋白在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度較大,故可以在此鹽濃度條件下分離DNA蛋白和RNA蛋白。

      二、核酸的分離

      1、多價解離—體內(nèi)DNA呈多陰離子態(tài)(磷酸可解離成多價陰離子)。磷酸多級解離,多元酸;另外還含有含氮堿基,又呈堿性,所以核酸為兩性電解質(zhì)。

      2、帶電性—核酸和核苷酸可用離子交換分離

      由于核酸、核苷酸是兩性電解質(zhì),在一定pH條件下,如果核酸、核苷酸帶正電荷,可用陽離子交換樹脂進(jìn)行分離,帶電荷越多的核酸結(jié)合越牢固,最后被洗脫下來。

      三、紫外吸收

      1、紫外吸收—由堿基的共軛體系決定

      由于嘌呤堿和嘧啶堿、核苷、核苷酸、核酸都在240-290nm范圍內(nèi)有特征吸收。通常選用260nm處測定

      2、定量測定—核酸和核苷酸測定的基本方法

      定性測定的幾個數(shù)據(jù)判斷:最大吸收波長、最小吸收波長、在兩個吸收波長下吸光度比值(250/260、260/280>2.0,表示RNA樣品中蛋白質(zhì)含量低,>1.9表示DNA樣品中蛋白質(zhì)含量低。290/260)。

      定量測定公式:核苷酸%=[(Mr×A260)/(ξ260×C)]×100 Mr為核苷酸相對分子質(zhì)量; ξ260為在260nm處的吸收系數(shù),C為樣品濃度,mg/mL,A260為樣品在260nm波長下的吸光度值。

      對于大分子核酸的測定,常用比吸收系數(shù)法或摩爾磷原子吸收系數(shù)法。

      比吸收系數(shù)ε是指一定濃度(mg/mL或ug/mL)的核酸溶液在260nm處的吸光度值。摩爾磷原子吸收系數(shù)ε(P)是指含磷濃度為1mol/L時的核酸水溶液在260nm處的吸光度值。

      四、變性與復(fù)性

      1、DNA變性---DNA生物功能實現(xiàn)所必需

      變性:氫鍵、堿基堆積力等被破壞,雙鏈成為單鏈的過程,但一級結(jié)構(gòu)沒有被破壞。變性因素:加熱、極端的pH 條件、有機溶劑、尿素、甲酰胺等。

      變性后的表現(xiàn):由一定剛性變?yōu)闊o規(guī)則線團,DNA溶液的黏度降低,沉降速度加快,藏在內(nèi)部的堿基全部暴露出來,DNA的A260增大,即增色效應(yīng)。

      2、DNA復(fù)性—核酸研究中的常用手段 復(fù)性的概念:

      復(fù)性應(yīng)用:變成單鏈再形成雙鏈,用于DNA-DNA雜交。

      五、核酸的含量與純度測定

      1、定磷法、定糖法—測定核酸含量

      利用純的核酸含磷元素的量為9.5%左右。用強酸消化核酸成無機磷酸,然后磷酸與定磷試劑中的鉬酸銨反應(yīng)生成磷鉬酸銨,它在還原劑作用下被還原成鉬藍(lán)復(fù)合物,最后在650-660nm下比色測定,得出總含磷量,再減去無機磷(即不經(jīng)硝化直接測定)的量即為核酸磷的真實含量,此值乘以系數(shù)10.5即為核酸含量。(2)定糖法

      核酸分子含有核糖或脫氧核糖,這兩種糖具有特殊的呈色反應(yīng)。

      RNA 在濃鹽酸或濃硫酸作用下,RNA受熱發(fā)生降解,生成的核糖進(jìn)而脫水轉(zhuǎn)化成糖醛,糖醛與3,5-二羥甲苯(苔黑酚)反應(yīng)生成綠色物質(zhì),最后在670nm-680nm下比色測定。

      DNA DNA受熱酸解釋放出脫氧核糖,后者在濃硫酸或冰醋酸存在下可與二苯胺反應(yīng)生成藍(lán)色物質(zhì),在595-620nm波長下進(jìn)行比色測定。

      定糖法的測定范圍

      苔黑酚法為20-250ugRNA,二苯胺法為40-400ugDNA.2、凝膠電泳---DNA純度鑒定(1)紫外吸收法測定核酸純度

      利用測定260nm處和280nm處吸光度的比值來確定,純DNA比值為1.8,純RNA比值為2.0,在純化DNA時,通常用比值在1.8-2.0之間作為純度標(biāo)準(zhǔn),大于此值表示有RNA污染,如果小于此值,則有蛋白質(zhì)或酚等污染。(2)凝膠電泳法鑒定DNA純度

      瓊脂糖凝膠電泳,目前分離純化和鑒定核酸特別是DNA的標(biāo)準(zhǔn)方法。

      DNA在瓊脂糖凝膠中泳動率取決于:DNA分子大小、瓊脂糖濃度、DNA構(gòu)象及電流強度。

      六、核酸堿基序列的測定

      1、DNA堿基序列測定方法

      (1)DNA堿基序列測定的基本步驟

      DNA片段的制備(利用限制性內(nèi)切酶和PCR方法)

      DNA堿基序列測定

      (2)Maxam-Gilbert(化學(xué)降解法)

      原理是應(yīng)用一定化學(xué)試劑,選擇性的切斷某種特定核苷酸(A、G、T、C)所形成的磷酸二酯鍵,得到不同鏈長的DNA小片段,包括兩步:堿基選擇性水解;對水解產(chǎn)物DNA小片段進(jìn)行電泳分析和堿基序列的推測。(3)Sanger法(末端終止法)

      原理是以DNA的酶促合成為基礎(chǔ),以被測DNA單鏈為模板,通過特殊設(shè)計的“末端終止技術(shù)合成出一系列相差一個核苷酸長度的互補鏈,然后利用凝膠電泳分離這些不同長度的DNA小片段,據(jù)此推測確定待測DNA鏈的堿基序列。(4)DNA的自動測序法

      原理是以Sanger法為基礎(chǔ),主要改進(jìn)是以熒光標(biāo)記物代替同位素標(biāo)記,即以不同顏色的熒光分別代表A、T、G、C四種堿基,電泳結(jié)果經(jīng)激光束激發(fā)后,其最大的發(fā)射波長被轉(zhuǎn)換成四種堿基含義的電信號,再由儀器的檢測系統(tǒng)識別和記錄。

      2、RNA堿基序列測定方法 應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄法,以待測的RNA鏈為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶催化下,合成DNA,然后用Maxam-Gilbert 法或Sanger法測定DNA堿基序列,再得出RNA的堿基序列。第四節(jié)

      核酸的生物功能

      一、DNA的復(fù)制與生物遺傳信息的儲存

      DNA復(fù)制是保持生物種群遺傳性狀穩(wěn)定的基本分子機制。

      DNA復(fù)制理論為現(xiàn)代分子分子生物技術(shù)、如基因重組、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和基因突變技術(shù)等的發(fā)展奠定了理論基礎(chǔ)和實驗基礎(chǔ)。

      二、RNA是生物遺傳信息表達(dá)的媒介

      1、基因的轉(zhuǎn)錄—mRNA的合成

      是以DNA為模板合成與其堿基序列互補的mRNA的過程

      2、tRNA和rRNA的功能

      tRNA是將mRNA攜帶的遺傳密碼翻譯氨基酸信息,并將相應(yīng)的氨基酸活化后,帶到核糖體上進(jìn)行蛋白質(zhì)合成。

      rRNA是組成核糖體的主要組成,目前的作用機制還不清楚

      3、核酸與蛋白質(zhì)的生物合成關(guān)系

      (1)tRNA對氨基酸的識別、結(jié)合和活化

      tRNA在氨基酰-tRNA合成酶的作用下,能識別相應(yīng)的氨基酸,并通過tRNA氨基酸臂3‘-羥基與氨基酸的羧基形成活化酯-----氨基酰-tRNA(2)氨酰-tRNA在mRNA模板指導(dǎo)下組裝成蛋白質(zhì)

      氨基酰-tRNA通過反密碼子臂上的三聯(lián)體反密碼子識別mRNA上相應(yīng)的遺傳密碼,并將所攜帶的氨基酸按mRNA遺傳密碼的順序安置在特定的位置上,最后在核糖體中合成肽鏈。

      三、生物遺傳變異的化學(xué)本質(zhì)—DNA結(jié)構(gòu)變化

      堿基序列顛倒,某個堿基被調(diào)換,少了或多了一對或幾對堿基

      四、核酸的催化性質(zhì)

      1、核酶的組成和結(jié)構(gòu)

      核酶是具有特殊結(jié)構(gòu)的RNA,RNA是核酶的功能部分,有些核酶除含有RNA外,還含有蛋白質(zhì)等成分。

      2、核酶的催化作用

      核酶的催化反應(yīng)包括水解反應(yīng)、連接反應(yīng)和轉(zhuǎn)核苷酰反應(yīng)等。

      如核酶RNaseP在tRNA前體的5‘端部分水解切除一個特殊序列,生成tRNA.3、核酶的研究現(xiàn)狀與展望

      研究發(fā)現(xiàn),核酶在翻譯、表達(dá)和核糖體功能的實現(xiàn)中可能具有重要作用。

      存在的問題:核酶的催化效率太低;由于核酶本身是RNA,很容易被核酸水解酶所破壞。展望:定向分子進(jìn)化技術(shù)、PCR技術(shù)等的應(yīng)用為篩選特殊性質(zhì)的新型核酶開辟了新的途徑。

      第五節(jié) 核酸化學(xué)中的幾種重要技術(shù)

      一、核酸的分子雜交技術(shù)

      原理:利用核酸(DNA)的變性和復(fù)性的性質(zhì)。

      二、PCR技術(shù) 聚合酶鏈反應(yīng)的簡稱

      三、基因定點突變技術(shù)

      是應(yīng)用人工的方法,合成在某一點或某幾點上堿基序列改變的突變DNA,然后再通過突變DNA的轉(zhuǎn)錄、翻譯和表達(dá),獲得突變蛋白質(zhì)的技術(shù)?;蚨c突變技術(shù)的關(guān)鍵是合成一種特殊的引物DNA。

      四、定向分子進(jìn)化

      主要是通過DNA或RNA的突變、篩選和擴增的不斷循環(huán),從而獲得具有優(yōu)良性能的新品種分子。

      第五章

      重點

      1、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)的原理和操作步驟

      2、從tRNA的結(jié)構(gòu)上,如何理解它在蛋白質(zhì)翻譯過程中的作用?

      3、核酸的含量與純度測定的方法和原理如何?

      4、紫外吸收法測定核酸的原理是什么?

      第二篇:運動生化教案

      運動生物化學(xué)

      緒 論

      1.運動與身體化學(xué)組成(蛋白質(zhì)、核酸、糖、脂類、無機鹽和水)之間的相互適應(yīng)規(guī)律。

      2.運動過程中機體內(nèi)物質(zhì)和能量代謝及調(diào)節(jié)的規(guī)律。

      3.為增強體質(zhì)、提高競技運動能力提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)方法運動性疲勞的消除和恢復(fù),機能監(jiān)控和評定,制定運動處方。

      一、運動生物化學(xué)當(dāng)前的任務(wù)

      (一)運動與生物分子結(jié)構(gòu)和功能

      受體構(gòu)型變化與激素的調(diào)節(jié)能力;葡萄糖、脂肪酸和某些氨基酸吸收轉(zhuǎn)運與載體蛋白的關(guān)系等。

      (二)運動時物質(zhì)代謝的動力學(xué)研究 物質(zhì)代謝和能量代謝體系:

      無氧代謝過程磷酸原系統(tǒng)(ATP,CP);糖酵解系統(tǒng);有氧氧化系統(tǒng)

      (三)運動時代謝調(diào)控與運動能力 1.激素調(diào)節(jié)

      (1)運動與下丘腦-垂體-腎上腺軸(2)運動與下丘腦-垂體-性腺軸 反饋調(diào)節(jié)

      下丘腦—垂體—腎上腺軸(HPA軸)下丘腦—垂體—甲狀腺軸(HPT軸)下丘腦—垂體—性腺軸(HPG軸)2.神經(jīng)調(diào)節(jié) 神經(jīng)遞質(zhì)的作用 3.酶調(diào)節(jié)

      (1)激活或抑制細(xì)胞內(nèi)酶活性

      (2)影響酶分子的合成或降解,改變酶分子的含量 4.分子生物學(xué)與運動生物化學(xué)

      二、運動生物化學(xué)的發(fā)展及其與相關(guān)學(xué)科的關(guān)系

      (一)運動生物化學(xué)與運動生理學(xué)的關(guān)系

      (二)運動生物化學(xué)和運動醫(yī)學(xué)的關(guān)系

      (三)運動生物化學(xué)和運動營養(yǎng)學(xué)的關(guān)系

      (四)運動生物化學(xué)和運動心理學(xué)的關(guān)系

      (五)運動生物化學(xué)和運動訓(xùn)練學(xué)的關(guān)系

      第一篇

      生物分子概論

      第一章

      糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸的生物化學(xué)

      第一節(jié)

      一、概述

      (一)定義:糖類是一類含多羥基的醛類或酮類化合物的總稱。多羥基醛:葡萄糖

      多羥基酮:果糖

      (二)存在和分布

      碳水化合物是地球上最豐富的生物分子,每年全球植物和藻類光合作用可轉(zhuǎn)換1000億噸CO2和H2O成為纖維素和其他植物產(chǎn)物。

      如:?植物體85-90%的干重是糖。細(xì)菌、酵母的細(xì)胞壁糖 結(jié)締組織中的糖:肝素、透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素、硫酸皮膚素等 核酸的糖、脂多糖(糖脂)、糖蛋白(蛋白聚糖)中的糖 細(xì)胞膜及其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)中的糖 血型糖

      食用糖:蔗糖

      醫(yī)療用糖:葡萄糖及其衍生物,如葡萄糖酸的鈉、鉀、鈣、鋅鹽等 綠色植物的皮、桿等多糖:纖維素 糧食及塊根、塊莖中的多糖:淀粉。動物體內(nèi)的貯藏多糖:糖元

      昆蟲、蟹、蝦等外骨骼糖:幾丁質(zhì)

      食用菌中的糖:香菇多糖、茯苓多糖、靈芝多糖、昆布多糖等。

      (三)糖的化學(xué)組成

      ?主要由C、H、O三種元素組成,有些還有N、S、P等。? 單糖多符合結(jié)構(gòu)通式:(CH2O)n,?符合通式的不一定是糖:CH3COOH(乙酸),CH2O(甲醛),C3H6O3(乳酸)

      ?是糖的不一定都符合通式:如C5H10O4(脫氧核糖),C6H12O5(鼠李糖)。

      二、糖的分類

      (一)單糖:凡不能被水解為更小分子糖的糖。

      丙糖:甘油醛;

      丁糖:赤蘚糖

      戊糖:木酮糖、核酮糖、核糖等

      己糖:葡萄糖、果糖、半乳糖等。

      (二)寡糖(低聚糖)

      可以水解為其他糖的糖。一般由2~10個單糖分子縮合形成的糖

      二糖:

      蔗糖+水=葡萄糖+果糖;

      乳糖+水=葡萄糖+半乳糖;

      麥牙糖+水=葡萄糖+葡萄糖 三糖:棉籽糖

      (三)多糖:可水解為多個其他單糖或其衍生物的糖。

      淀粉、糖元、纖維素等。

      三、糖的生物學(xué)功能

      (一)概述

      ?供給能量:有氧氧化和無氧酵解

      ?機體的重要能源:糖代謝中間產(chǎn)物可轉(zhuǎn)化為氨基酸、脂肪酸、核苷 ?機體結(jié)構(gòu)的重要組分:蛋白聚糖和糖蛋白為結(jié)締組織、軟骨和骨的基質(zhì)的物質(zhì)基礎(chǔ),糖蛋白和糖脂組成細(xì)胞膜

      ?細(xì)胞間的信息傳遞:膜糖蛋白與細(xì)胞的免疫、識別作用有關(guān) ?特殊生理功能的物質(zhì):激素、酶、血型物質(zhì)為糖蛋白 ?保護(hù)與潤滑:粘膜與分泌物中含蛋白聚糖

      (二)運動中糖的生物學(xué)功能 1.糖可儲存和提供機體所需的能量 2.糖具有降低蛋白質(zhì)分解的作用 3.糖可調(diào)節(jié)脂肪代謝 第二節(jié)

      脂 類

      一、脂類概述

      生物脂類是一類范圍很廣的化合物,化學(xué)成分及結(jié)構(gòu)差異極大,脂類定義的特點就是水不溶性(water insoluble)(即脂溶性,fat-soluble),因此,多數(shù)脂類都易溶于乙醚、氯仿、己烷、苯等有機溶劑,而不溶于水。

      (一)存在與分布

      脂類廣泛存在于動植物體內(nèi)。脂肪廣泛分布于皮下組織、腸系膜、大網(wǎng)膜以及內(nèi)臟周圍和肌間組織中。類脂是生物膜的組成成分。

      (二)化學(xué)組成

      主要由碳、氫、氧組成,有些還含有氮和磷。

      二、脂類分類

      (一)單純脂:指由脂肪酸和醇類所形成的酯;包括脂肪、油和蠟。脂肪酸(Fatty acids):碳鏈為4-36碳的羧酸,這些碳鏈在一些脂肪酸中為飽和脂肪酸,而其他的則含有一個或多個雙鍵。必需脂肪酸:維持人體正常生長所需而體內(nèi)又不能合成的脂肪酸。其中的亞油酸、亞麻酸和花生四烯酸為人體必需脂肪酸。

      脂肪和油(Fats and Oils):含不飽和脂肪酸較多的甘油酯室溫下為液體,被稱為油(oil),多見于植物體,含飽和脂肪酸較多的甘油酯室溫下為固體,被稱為脂肪(fat),多見于動物體。

      (二)復(fù)合脂類:由脂肪酸、醇類和其它物質(zhì)組成的脂類物質(zhì)。包括磷脂(甘油磷脂和鞘磷脂)和糖脂(腦苷脂和神經(jīng)節(jié)苷脂)和脂蛋白等。

      磷脂:為一類含磷的復(fù)合脂,廣泛存在于動物的肝、腦、神經(jīng)組織和植物的種子里。磷脂是細(xì)胞膜的組成成分。

      糖脂:是糖、脂肪酸、含氮醇的復(fù)合脂,常與磷脂共存。是細(xì)胞膜及神經(jīng)髓鞘的組成成分,也是構(gòu)成血型物質(zhì)和細(xì)胞膜抗原的重要組分。

      脂蛋白:由蛋白質(zhì)、脂肪、膽固醇、鱗脂等組成。是血液中脂類物質(zhì)的轉(zhuǎn)運形式。

      (三)類脂:指一些理化性質(zhì)與脂肪相似,不含結(jié)合脂肪酸的脂類物質(zhì)。包括膽固醇、維生素D、類固醇激素等。

      膽固醇是動物組織中最主要的固醇,神經(jīng)組織及腎上腺中豐富,占腦固體物質(zhì)的17%,人體發(fā)現(xiàn)的膽石幾乎全是膽固醇,肝、腎、表面組織含量也相當(dāng)多;植物中發(fā)現(xiàn)有類似固醇物豆固醇真菌中有麥角甾醇,細(xì)菌中極少含有膽固醇;一些激素和幾乎所有的性激素都是固醇衍生物。

      膽固醇的作用:(1)細(xì)胞膜的組成成分

      (2)特殊生物活性物質(zhì)的前體: 膽汁酸在腸道內(nèi)作為乳化劑使食物脂肪易于被脂肪酶所作用;各種類固醇激素是通過膽固醇C17側(cè)鏈的氧化形成的;維生素D由膽固醇轉(zhuǎn)化而來;固醇類物質(zhì)還有一定的抗炎癥作用;固醇的衍生物強心苷有治療心臟病的作用。(3)維持生物膜的正常透過能力;(4)組成神經(jīng)髓鞘絕緣物質(zhì)(5)解毒

      三、脂類的生物學(xué)功能

      (一)概述.類脂是機體組織的組成成分

      生物膜中類脂占30~50%。主要是磷脂、膽固醇和糖脂。2.脂肪是人體能量的主要來源和最大儲能庫

      產(chǎn)能量為糖或蛋白質(zhì)的兩倍。儲存時所占體積為糖原的1/4。3.防震和隔熱保溫作用:水上運動。

      4.脂溶性維生素的載體:控體重時補充維生素。5.甘油三酯貯存能量和保溫

      (二)運動中脂肪的生物學(xué)功能

      1.提供長時間低強度運動(馬拉松)機體所需大部分能量。

      脂肪酸氧化時產(chǎn)生相同能量時耗氧量要比糖高出11%。2.脂肪氧化供能具有降低蛋白質(zhì)和糖消耗的作用

      高水平耐力性運動員對脂肪氧化分解的能力也高,運動時機體增大脂肪功能的比例,同樣可降低糖的消耗,有效的提高運動成績。第三節(jié)

      蛋白質(zhì)、核酸

      一、蛋白質(zhì)

      (一)蛋白質(zhì)的化學(xué)組成

      碳、氫、氧、氮和少量的硫。氮的平均含量為16%。蛋白質(zhì)含量=含氮量* 6.25(二)蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位:氨基酸

      必需氨基酸:人體不能自行合成,必需從外界攝取以完成營養(yǎng)需要的氨基酸。

      (三)蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu) 1.蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)

      指構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸種類、數(shù)量、排列順序和連接方式。肽鍵:由一個氨基酸的α-氨基與相鄰氨基酸的α-羧基脫去1分子水縮合而成的化學(xué)鍵。

      二、肽鍵與肽鏈

      1.概念: 肽鍵: 一個氨基酸的α-羧基與另一氨基酸的α-氨基脫水縮

      合形成的化學(xué)鍵

      肽:氨基酸通過肽鍵相連而形成的化合物 2 蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)

      蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu):指多肽鏈本身有規(guī)則的繞曲折疊,形成的重復(fù)性結(jié)構(gòu)(螺旋 折疊)。維持二級結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵為氫鍵。

      氫鍵:是非共價鍵中鍵能最弱,但卻是數(shù)目最多最重要的鍵。蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu):在二級結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上,蛋白質(zhì)多肽鏈借助各種次級鍵(氫鍵、鹽鍵、疏水鍵、范德華引力、二硫鍵)的相互作用,進(jìn)一步繞曲折疊,形成具有一定立體形狀的三級結(jié)構(gòu)。系指一條多肽鏈內(nèi)所有原子的空間排布,包括主鏈、側(cè)鏈構(gòu)象內(nèi)容,即整條多肽鏈的三維結(jié)構(gòu)。穩(wěn)定維系三級結(jié)構(gòu)的作用有:氫鍵、離子鍵、疏水鍵、二硫鍵和配位鍵。

      疏水鍵:非極性基團為避開水相而聚集在一起的作用力。鹽鍵:即離子鍵,生理情況下,Asp 和 Lys 間可形成鹽鍵。

      此外, 二硫鍵、配位鍵也是維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵由于多肽鏈中的各氨基酸殘基的性質(zhì)和排列順序不同, 天然蛋白質(zhì)可折疊、盤繞成一定的空間結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu):兩條以上具有獨立三級結(jié)構(gòu)的肽鏈通過非共價鍵聚合而成,每一條肽鏈稱為一個亞基或亞單位,各亞基在蛋白質(zhì)分子內(nèi)的空間排布及相互關(guān)系稱為蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)。亞基可相同或不同,其聚合或解聚可有調(diào)節(jié)活性的作用。蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)

      ?初級結(jié)構(gòu)或一級結(jié)構(gòu)——排列順序(蛋白和DNA)

      ?二級結(jié)構(gòu)——折疊和盤旋(氫鍵作用)蛋白質(zhì)有兩種二級結(jié)構(gòu):alpha螺旋和beta折疊;DNA為雙螺旋

      ?三級結(jié)構(gòu)——DNA為超螺旋;蛋白質(zhì)則是形成3D結(jié)構(gòu)(由側(cè)鏈決定)——大多數(shù)蛋白質(zhì)或多或少都是球形

      (四)蛋白質(zhì)在生命活動中的作用 ?1 酶的催化作用

      ?2 組成有機體的結(jié)構(gòu)成分 ?3 運載和儲存 ?4 激素的調(diào)節(jié)作用 ?5 免役保護(hù)作用 ?6 作為受體傳遞信息 ?7 調(diào)節(jié)基因的表達(dá) ?8 參與能量代謝

      運輸?shù)鞍撞皇敲福谢钚晕稽c,大部分在膜上,單細(xì)胞生物中,把營養(yǎng)運入,把廢物運出;多細(xì)胞生物中,攜帶物質(zhì)到處跑

      二、核酸

      (一)核酸概述 1.核酸的分布和含量

      存在于動植物和微生物細(xì)胞內(nèi)。核酸占細(xì)胞干重的5~15%。2.核酸的元素組成

      除碳、氫、氧、氮外,還有大量的磷。磷平均約為9~10%??捎糜跍y定核酸的含量。3.核酸的基本結(jié)構(gòu)單位

      一、堿基(base)

      腺嘌呤

      (adenine, A),鳥嘌呤

      (guanine, G),胞嘧啶

      (cytosine, C),胸腺嘧啶(thymine,T),尿嘧啶

      (uracil,U)

      二、戊糖

      兩類核酸的基本成分

      (二)核酸在生命活動中的作用

      1.DNA

      是遺傳信息的載體,在DNA分子上有很多基因,每個基因是決定是決定一個蛋白質(zhì)或RNA的DNA片段,DNA結(jié)構(gòu)上任一堿基的改變,都會導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變,從而引起生物遺傳的變異。所以,一切生物突變和進(jìn)化都可以說是由于DNA結(jié)構(gòu)改變而引起蛋白質(zhì)改變的結(jié)果。2.RNA

      第二章

      水、無機鹽和維生素的生物化學(xué)

      第一節(jié)

      一、概述

      水是地球上最豐富的無機化合物,也是生物組織中含量最多的成分。

      二、水平衡 水的攝入(來源)①

      飲水:

      1200ml/d ②

      食物:

      1000ml/d ③

      代謝水:

      300 ml/d

      (總量:

      2500ml/d)水的排出

      ⑴ 呼吸蒸發(fā): 350 ml/d ⑵ 皮膚蒸發(fā): 500 ml/d(非顯性)⑶ 糞便排出: 150 ml/d ⑷ 由腎排出: 1500ml/d

      (總量:

      2500ml/d)一次大強度、大運動量的訓(xùn)練的排汗量可高達(dá)2000~7000毫升,------所以,要特別注意運動員的水平衡問題。三 水的生物學(xué)功能

      (一)構(gòu)成體液

      體液(體重60%),細(xì)胞外液(20%),細(xì)胞內(nèi)液(40%),血漿(5%)

      組織間液(15%)

      (含量與性別、胖瘦、年齡有關(guān))

      (二)維持電解質(zhì)平衡

      分布和組成,滲透壓,酸堿平衡及電荷平衡。

      (三)促進(jìn)體內(nèi)化學(xué)反應(yīng)

      良好溶劑,促進(jìn)電離,營養(yǎng)物質(zhì)和代謝物的運輸。

      (四)調(diào)節(jié)和維持體溫的恒定

      比熱、蒸發(fā)熱和流動性

      (五)潤滑作用

      關(guān)節(jié)(滑液)、食管和腸道(唾液),眼球(眼房液)。

      (六)水與運動能力 第二節(jié) 無機鹽

      一、概述

      無機鹽約占體重的5%。

      常量元素:鈣、磷、鉀、硫、氯、鈉、鎂。十分之幾克到幾克。微量元素:鉻、銅、氟、碘、鐵、錳、鋁、硒、硅、和鋅等14種。微克到毫克。

      無機鹽的主要生物學(xué)功能 構(gòu)成機體組織的重要材料,如牙齒、骨骼; 2 維持機體的滲透壓平衡,維持細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交流; 3 維持體液的酸堿平衡,維護(hù)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定; 維持神經(jīng)肌肉的興奮性,保持其正常的應(yīng)激能力; 5 調(diào)節(jié)酶和激素的活性,維持機體正常代謝。

      二、人體無機鹽的分布和組成

      細(xì)胞內(nèi)外液中無機鹽的含量與分布有顯著差別(P39.表2-2),其特點如下:

      1、細(xì)胞內(nèi)外液中陰陽離子總量相等,呈電中性。

      2、細(xì)胞內(nèi)外液電解質(zhì)分布差異大:

      外液:陽離子:Na+最多,陰離子CI-、HCO3-最多

      內(nèi)液:陽離子K+最多,陰離子Pro-、HPO42-最多

      3、細(xì)胞內(nèi)液電解質(zhì)總量多于外液,但蛋白質(zhì)含量高,故細(xì)胞內(nèi)外液滲透壓相當(dāng)。

      4、細(xì)胞外液中,細(xì)胞間液與血漿的總離子濃度及電解質(zhì)含量很接近,差別在于血漿中蛋白含量高于細(xì)胞間液。

      三、酸堿平衡

      酸堿平衡:機體不斷地代謝產(chǎn)生并食入酸性和堿性物質(zhì),通過一系列的調(diào)節(jié)機制將多余的酸性或堿性物質(zhì)排出體外,使體液pH維持在恒定范圍內(nèi)的過程。

      血漿pH:7.35-7.45,平均7.4,體液略低。調(diào)節(jié)有三:

      1、血液的緩沖作用

      2、肺呼出CO2的調(diào)節(jié)

      3、腎排尿的酸度

      (一)體內(nèi)酸、堿性物質(zhì)的來源 1.酸性物質(zhì)的來源

      (1)揮發(fā)性酸(H2CO3):體內(nèi)物質(zhì)生物氧化產(chǎn)生CO2,經(jīng)肺排出,每日300-400L,相當(dāng)于15mol H2CO3,為體內(nèi)產(chǎn)生的最多的酸性物質(zhì)。(2)非揮發(fā)性酸(固定酸):體內(nèi)的硫酸、磷酸、乳酸、酮體等。

      (3)成酸食物—糖、脂肪、蛋白質(zhì)

      2、堿性物質(zhì)的來源

      體內(nèi)代謝產(chǎn)堿較少、多為食物(成堿食物:蔬菜、瓜果)中獲得的,外源性堿性物質(zhì)(蘋果酸鹽和檸檬酸鹽中的Na+、K+形成的碳酸氫鹽)。

      (二)緩沖系統(tǒng)在調(diào)節(jié)酸堿平衡中的作用

      1、血漿中主要的緩沖體系:

      2、紅細(xì)胞中主要的緩沖體系:

      其中,碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)含量最多,能力最強。在維持體液酸堿平衡中起著重要作用。血漿的酸堿度也直接取決于NaHCO3與H2CO3的濃度比值。正常情況下,NaHCO3與H2CO3的比例為20:1,此時血液PH為7.4,若比值改變,則pH隨之改變。另外,比值還說明:機體對酸的緩沖力較強。機體調(diào)節(jié)酸堿平衡的過程就是通過對血液緩沖系統(tǒng)、肺部和腎臟的調(diào)節(jié)而實現(xiàn)的。其中,血液緩沖系統(tǒng)作用最快,但不能持續(xù)作用;呼吸系統(tǒng)較快,但只能調(diào)節(jié)碳酸的濃度而且影響因素較多;腎臟作用反應(yīng)慢,但效能高、時間長,是最重要的緩沖系統(tǒng)。

      四、幾種重要的無機鹽

      (一)鈣

      占無機鹽總量40%,99%以磷酸鈣和碳酸鈣形式存在于骨骼和牙齒。成人含鈣總量約為1200克。

      1、調(diào)節(jié)肌肉的收縮和舒張

      2、維持神經(jīng)沖動的傳遞

      3、參與血液凝固

      4、調(diào)節(jié)酶的活性

      5、作為第二信使

      甲狀旁腺激素、維生素D使其上升;降鈣素使其下降。運動員(尤其控體重的女運動員)每日補充的鈣量應(yīng)比正常人略多。

      (二)鐵

      成人體內(nèi)含鐵量為3.5-4.0克,其中70%以血紅素形式存在于血紅蛋白、肌紅蛋白及細(xì)胞色素中,其余大部分以鐵蛋白的形式儲存在肝臟、脾臟和骨髓中。參與氧和二氧化碳的運輸及酸堿平衡的調(diào)節(jié)。2 為過氧化氫酶和過氧化物酶等的組成部分。運動員劇烈運動使鐵丟失量增加,故需注意補充鐵(三)氯和鈉

      成人體內(nèi)鈉總含量為克/每千克體重,機體對氯的需要量為鈉的一半。成人每天有1.1~3.3克食鹽即可滿足需要。鈉離子是胰液、膽汁、汗液和眼淚的組成成分,與肌肉收縮和神經(jīng)功能關(guān)系密切;氯離子被用于產(chǎn)生胃中鹽酸,有助于維生素B12和鐵的正常吸收。參與淀粉酶的激活,抑制微生物的生長。

      運動員運動時大量出汗,鹽分丟失較多,可致軟弱無力,易疲勞,嚴(yán)重時會發(fā)生肌肉痙攣、惡心、頭痛等。

      (四)鉀

      約占無機鹽總量的5%,2g/Kg BW;其中:98%在細(xì)胞內(nèi)液,2%在細(xì)胞外液。2-4g/天。維持細(xì)胞內(nèi)適宜的滲透壓、酸堿平衡和營養(yǎng)素出入細(xì)胞;參與糖原和蛋白質(zhì)代謝,維持細(xì)胞內(nèi)某些酶的活性。運動員在高溫下運動時,大量出汗可增加鉀的丟失,但正常膳食可滿足這一需求。第三節(jié)

      維生素

      一、概述

      脂溶性: A、D、E、K 水溶性: 維生素C、B1(硫胺素)、B2(核黃素)、PP(煙酸)B6(吡哆醇)、B12(鈷胺素)、生物素、泛酸、葉酸 水溶性維生素與輔酶

      維生素

      輔酶形式

      B1

      B2

      PP

      TPP FMN、FAD NAD、NADP

      輔酶的主要作用

      參與遞氫

      參與遞氫

      轉(zhuǎn)氨基等

      參與羧化反應(yīng)

      B6

      磷酸吡哆醛

      生物素

      與酶蛋白結(jié)合

      泛 酸

      HSCoA

      轉(zhuǎn)移?;?/p>

      葉 酸

      FH4

      一碳基團轉(zhuǎn)移

      B12

      甲基--B12

      轉(zhuǎn)甲基酶的輔酶

      二、與運動關(guān)系密切的維生素

      (一)維生素B1 作用機制:為糖代謝中丙酮酸脫氫酶的輔酶組成成分。參與已酰膽堿的合成與分解

      與運動的關(guān)系:當(dāng)充足時,可促進(jìn)運動時糖原有氧代謝,提高速度和耐力,加速運動后血乳酸消除。

      缺乏后果:運動時乳酸堆積增多,機體容易疲勞,并可能影響心臟功能。

      (二)維生素B2(FMN,F(xiàn)AD)

      作用機制:構(gòu)成體內(nèi)氧化還原酶輔基,為氫傳遞體。與細(xì)胞內(nèi)呼吸功能關(guān)系密切。

      與運動的關(guān)系:運動員缺乏此維生素時,直接影響骨骼肌代謝能力,引起肌收縮無力,耐久力下降。

      (三)維生素PP(NAD+,NADP+)

      作用機制:構(gòu)成體內(nèi)脫氫酶的輔酶,在生物氧化過程中起著傳遞氫的作用。參與有氧代謝和無氧代謝供能。

      與運動的關(guān)系:與運動員的有氧和無氧耐力有關(guān),在運動后參與合成代謝,與恢復(fù)能力有關(guān)。

      (四)維生素B6(磷酸吡哆醛)

      作用機制:氨基酸脫羧酶的輔酶,參與蛋白質(zhì)的合成和分解代謝。與運動的關(guān)系:與運動員的力量素質(zhì)有關(guān)。

      (五)維生素C 18 作用機制:維生素具有很強的還原性,有可逆的氧化還原作用,參與肌酸和蛋白質(zhì)的代謝。

      與運動的關(guān)系:長時間運動后,引起組織維生素C降低,并可能引起白細(xì)胞吞噬能力下降。維生素C有提高耐力,消除疲勞和促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的作用。

      (六)維生素A

      作用機制:是形成眼視網(wǎng)膜中視紫質(zhì)的原料,具有保護(hù)角膜上皮,防止角質(zhì)化的作用。

      與運動的關(guān)系:缺乏時,腎上腺皮質(zhì)發(fā)生萎縮和性功能紊亂,因此,要求視力集中的運動員適當(dāng)補充。否則會影響運動能力。

      (七)維生素E 具有抗氧化,防止肌肉萎縮等生物學(xué)作用,從而提高肌肉耐力。

      第三章

      生物化學(xué)過程的調(diào)節(jié)物質(zhì)

      第一節(jié)

      一、概述

      概念:酶是由生物細(xì)胞所產(chǎn)生的具有催化功能的蛋白質(zhì)。(一)

      酶催化反應(yīng)的特點 1.酶的高度催化效率 2.高度專一性

      (1)定義:酶只能催化一種或一類底物,發(fā)生一定的化學(xué)變化, 生成一定的產(chǎn)物。(2)類型:

      絕對特異性:作用于一種底物進(jìn)行專一反應(yīng),生成一種特定產(chǎn)物。相對特異性:作用于一類化合物或一種化學(xué)鍵。如脂肪酶、磷酸酯酶和蛋白水解酶等。

      立體異構(gòu)特異性:只能催化一種立體異構(gòu)體進(jìn)行反應(yīng),或產(chǎn)物是一種立體異構(gòu)體。3.不穩(wěn)定性

      強酸、強堿、重金屬鹽、有機溶劑、高溫、紫外線 4.酶的可調(diào)控性(1)激素的調(diào)節(jié)作用

      (2)底物與代謝產(chǎn)物的調(diào)節(jié)作用。

      酶活性的調(diào)節(jié):抑制和激活。

      酶含量的調(diào)節(jié):誘導(dǎo)、阻遏和降解

      二、酶的化學(xué)組成和活性

      (一)酶的化學(xué)組成 單純酶:僅由氨基酸組成 結(jié)合酶:蛋白部分,輔助因子

      (二)酶活性

      ? 酶活性:酶催化底物反應(yīng)的能力,以酶促反應(yīng)速度來衡量。? 酶活性單位:在酶作用的最適條件下,25C,1分鐘內(nèi)催化1.0微摩爾底物發(fā)生變化所需的酶量。

      ? 長期接受運動訓(xùn)練后,體內(nèi)某些酶的活性可隨之發(fā)生適應(yīng)性的變化,使代謝能力改善,運動能力得以提高。

      三、同工酶和限速酶

      (一)同工酶

      指催化同一個化學(xué)反應(yīng),但酶分子本身的結(jié)構(gòu)、組成有所不同的一組酶。

      (二)限速酶

      ?在代謝體系中活性最低,又易受某些特殊因素調(diào)控,造成整個代謝體系受影響的酶。

      四、人體的主要代謝酶系

      (一)物質(zhì)代謝和能量代謝的主要酶系 胞液:糖酵解酶系; 脂肪酸合成酶系

      胞液和線粒體內(nèi):糖異生酶系; 尿素合成酶系 線粒體內(nèi)膜:呼吸鏈酶系

      線粒體基質(zhì)內(nèi):三羧酸循環(huán)酶系; 脂肪酸氧化酶系;酮體生成酶系

      (二)血清酶 1.血清酶的來源

      功能性酶:脂蛋白脂肪酶、凝血酶等,在血液中發(fā)揮重要催化功能。非功能性酶:來源于機體各組織器官,在血液中不發(fā)揮催化功能,但可反映有關(guān)臟器細(xì)胞被破壞的情況。

      由于運動引起內(nèi)環(huán)境的急劇變化時,血清中多種酶的活性表現(xiàn)出相對提高。2.運動對血清酶的影響

      超長時間運動時血清酶升高,最明顯的是CK,可達(dá)正常值的5~10倍,訓(xùn)練水平較高者,峰值出現(xiàn)在運動后24~36小時。3.運動引起血清酶活性升高的機理

      (1)肌纖維收縮產(chǎn)生的牽拉能提高細(xì)胞膜的通透性;

      (2)運動時肌肉缺氧、鉀離子升高、乳酸增多,血糖含量下降和ATP水平降低均能加速細(xì)胞內(nèi)酶的代謝,促使酶分子入血。

      (三)酶對運動的適應(yīng) 1.酶催化功能的適應(yīng)

      受激素、底物或產(chǎn)物調(diào)節(jié),可在極短的時間內(nèi)完成,但維持時間較短。

      2.酶含量的適應(yīng)

      受激素、底物或產(chǎn)物可誘導(dǎo)酶的合成,所以,在運動后較晚出現(xiàn),但持續(xù)時間較長。第二節(jié) 激素

      一、概述:激素是內(nèi)分泌細(xì)胞合成的一類化學(xué)物質(zhì),這些物質(zhì)隨血液循環(huán)于全身,并對一定的組織或細(xì)胞發(fā)揮特有的效應(yīng)。激素發(fā)揮作用的時效性: 快速反應(yīng)類型:去甲腎上腺素和腎上腺素等。2 慢反應(yīng)類型:醛固酮、甲狀腺素、抗利尿激素等。3 滯后反應(yīng)類型:生長激素、胰高血糖素等。

      二、激素對運動時的代謝調(diào)節(jié)

      (一)腎上腺素和去甲腎上腺素 1.促進(jìn)心輸出量

      2.促進(jìn)肝糖原分解釋放葡萄糖入血,升高血糖。(1)對肌糖原分解的影響大于對肝糖原的影響;(2)抑制肌細(xì)胞吸收血糖,有利于肌細(xì)胞利用脂肪酸;(3)刺激胰高血糖素分泌,抑制胰島素分泌。

      (二)胰高血糖素

      (1)激活糖原分解和抑制糖原合成(2)抑制脂肪酸合成(3)激活糖異生

      (三)胰島素

      (1)促進(jìn)血糖進(jìn)入肌細(xì)胞,激活肌糖原合成代謝(2)抑制肝糖異生作用,促進(jìn)脂肪酸合成

      (3)促進(jìn)肌細(xì)胞吸收氨基酸和蛋白質(zhì)合成,抑制細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)降解。

      (四)生長激素(1)促使RNA合成;(2)促進(jìn)糖異生作用;

      (3)促進(jìn)氨基酸進(jìn)入肌細(xì)胞,加速蛋白質(zhì)合成。

      第二篇 運動時物質(zhì)代謝和能量代謝及其調(diào)節(jié)

      本篇主要介紹糖、脂肪和蛋白質(zhì)三大能源物質(zhì)氧化分解的一般途徑,人體內(nèi)能量代謝的基本規(guī)律,運動過程中骨骼肌內(nèi)供能系統(tǒng)的供 能特點及其相互間的關(guān)系,以及糖、脂肪、蛋白質(zhì)在運動中的代謝特點、供能地位和生物學(xué)作用及代謝調(diào)節(jié)。

      第四章 運動時物質(zhì)代謝和能量代謝

      ?人體生命活動過程是一個消耗能量的過程,物質(zhì)代謝和能量代謝是維持生命活動、保證運動供能的前提。

      ?運動時人體內(nèi)尤其是骨骼肌能量消耗增多,而骨骼肌的直接能源物質(zhì)是ATP。

      ?糖、脂肪和蛋白質(zhì)是人體的三大細(xì)胞燃料,經(jīng)生物氧化將儲存的能量釋放出來,轉(zhuǎn)換成三磷酸腺苷ATP,以保證ATP供能的連續(xù)性。?本章著重闡述骨骼肌利用ATP和合成ATP的代謝過程。第一節(jié) 能量代謝概述

      生物體的重要特征之一是不斷進(jìn)行新陳代謝活動。物質(zhì)代謝是指生物體內(nèi)進(jìn)行的各種化學(xué)反應(yīng)過程的總稱。能量代謝是指伴隨物質(zhì)代謝過程發(fā)生的能量吸收、儲存、轉(zhuǎn)移、釋放和利用的過程。?能量代謝的核心物質(zhì)是ATP。幾個重要基本概念的介紹:

      一、高能化合物:一般將水解時釋放的標(biāo)準(zhǔn)自由能高于20.92KJ/mol(5千卡/摩爾)的化合物稱為高能化合物。舉例:ATP、CP、ADP、磷酸烯醇式丙酮酸、1,3-二磷酸甘油酸、琥珀酰輔酶A等。

      二、生物氧化

      (一)概念

      營養(yǎng)物質(zhì)在生物體內(nèi)氧化成水和二氧化碳并釋放能量的過程稱為生物氧化。

      特點:1.40%的能量用于合成ATP,60%的能量以熱能的形式散發(fā)。

      2.主要在細(xì)胞的線粒體上進(jìn)行。3.能量逐級釋放。4.需要適宜的反應(yīng)條件。

      (二)生物氧化的途徑

      由許多酶促反應(yīng)有組織、有秩序、依次銜接起來的連續(xù)化學(xué)反應(yīng)。各種營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行生物氧化都有共同的規(guī)律,大體可分為三個階段: ? 第一階段:釋放能量很少,僅為其蘊藏能量的1%以下,且以熱能形式散失,不能儲存。

      ? 第二階段:能量釋放占總能量的1/3,且可以生成ATP。? 第三階段:是氧化分解代謝的最后通路,2/3的能量在此階段釋放,是生成ATP最多的環(huán)節(jié)。?1.生物氧化中水的生成

      ? 生物氧化中水的生成是通過呼吸鏈完成的。呼吸鏈指在線粒體內(nèi)膜上一系列遞氫、遞電子體按一定順序排列,構(gòu)成的一條連鎖反應(yīng)體系。此反應(yīng)體系與細(xì)胞攝取氧的呼吸過程有關(guān)。代謝物脫下的氫經(jīng)呼吸鏈與被激活的氧結(jié)合成水,在此過程中有能量的釋放。線粒體內(nèi)重要的呼吸鏈有兩條:NADH氧化呼吸鏈和琥珀酸氧化呼吸鏈。?2.生物氧化中ATP的生成

      ?

      生物氧化過程中ATP的生成有兩種方式:底物水平磷酸化和氧化磷酸化。

      底物水平磷酸化指直接由代謝物分子的高能磷酸鍵轉(zhuǎn)移給ADP生成ATP 的方式。如1,3二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸、琥珀酰輔酶A。

      氧化磷酸化指代謝物脫下的氫經(jīng)呼吸鏈過程氧化最后生成水同時伴有能量的釋放,使ADP生成ATP的過程。

      氧化磷酸化反應(yīng)中生成ATP的數(shù)量及氧化磷酸化的偶聯(lián)部位可由P/O比值來確定。P/O比值指在形成ATP時每消耗1摩爾氧原子所消耗無機磷的摩爾數(shù)。?NADH的P/O值是3,即生成3分子ATP,F(xiàn)ADH2的P/O值是2,即生成2分子ATP。3.生物氧化中二氧化碳的生成

      生物氧化中二氧化碳由有機酸脫羧反應(yīng)生成。第二節(jié) 三磷酸腺苷ATP 骨骼肌收縮時其能量來自ATP分子的分解反應(yīng),ATP是骨骼肌收縮的直接能源物質(zhì)。

      一、ATP的分子結(jié)構(gòu)生物學(xué)功能

      (一)ATP的分子組成和結(jié)構(gòu)

      ATP分子由一個腺嘌呤、一個核糖和三個磷酸基團組成,其末端的兩個磷酸酯鍵為高能磷酸鍵。(二)ATP的生物學(xué)功能 1.生命活動的直接能源

      ATP-ADP循環(huán)是人體內(nèi)能量轉(zhuǎn)換的基本方式,它維系著能量的釋放、儲存和利用。2.合成磷酸肌酸

      ATP+C→ADP+CP 3.參與構(gòu)成一些重要輔酶 4.提供物質(zhì)代謝時需要的能量

      二、運動時ATP的利用和再合成途徑

      (一)運動時肌肉ATP的利用途徑 運動時肌肉ATP利用的部位和作用:

      (1)肌動球蛋白ATP酶消耗ATP,引起肌絲相對滑動和肌肉收縮做功;

      (2)肌質(zhì)網(wǎng)膜上鈣泵消耗ATP轉(zhuǎn)運Ca2+,調(diào)節(jié)肌肉松弛;(3)肌膜上鈉泵消耗ATP轉(zhuǎn)運Na+/K+,調(diào)節(jié)膜電位。

      (二)ATP再合成途徑

      肌細(xì)胞有三條供能系統(tǒng),構(gòu)成運動肌能量供應(yīng)體系:(1)高能磷酸鹽如磷酸肌酸分解構(gòu)成磷酸原供能系統(tǒng);(2)糖無氧分解構(gòu)成糖酵解供能系統(tǒng);

      (3)糖、脂肪、蛋白質(zhì)有氧氧化構(gòu)成有氧代謝供能系統(tǒng)。第三節(jié) 運動時骨骼肌供能系統(tǒng)一、磷酸原供能系統(tǒng)

      ?

      ATP、CP分子內(nèi)均含有高能磷酸鍵,在代謝中均能通過轉(zhuǎn)移磷酸基團的過程釋放能量,故將ATP、CP合稱磷酸原。由ATP、CP分解反應(yīng)組成的供能系統(tǒng)稱為磷酸原供能系統(tǒng)。

      (一)磷酸肌酸的分子結(jié)構(gòu)與功能 1.磷酸肌酸的分子結(jié)構(gòu)

      磷酸肌酸CP是肌酸C的磷酸化形式。2.磷酸肌酸的功能

      高能磷酸鍵的儲存庫。?CP+ADP→C+ATP 組成肌酸-磷酸肌酸穿梭系統(tǒng)。

      將線粒體內(nèi)有氧代謝釋放的部分能量轉(zhuǎn)移到細(xì)胞質(zhì)內(nèi),即將能量從產(chǎn)能部位轉(zhuǎn)運到利用能量的部位。

      (二)運動時磷酸肌酸供能 1.磷酸原系統(tǒng)供能過程

      ATP+H2O→ADP+Pi+能量

      ADP+ADP→AMP+ATP

      CP+ADP→C+ATP 2.磷酸原系統(tǒng)供能特點

      ? 最早被啟動,最快被利用,具有快速供能和最高功率輸出的特點;最大功率輸出可達(dá).6-3.0mmol/kg干肌/s,可維持最大強度運動6-8秒,在短時間最大強度或最大用力運動中主要供能;與速度或爆發(fā)力運動關(guān)系密切,如短跑,投擲,柔道,舉重等運動項目 3.不同強度運動時磷酸原儲量的變化 ?

      極量強度運動至力竭時CP儲量接近耗盡,達(dá)安靜時的3%以下,ATP儲量不會低于安靜值的60%。75%最大攝氧量持續(xù)運動至疲勞時,CP儲量可降到安靜值的20%左右,ATP的儲量略低于安靜值。低于60%最大攝氧量強度運動時,CP儲量幾乎不下降。

      4.運動訓(xùn)練對磷酸原系統(tǒng)的影響

      運動訓(xùn)練可明顯提高ATP酶的活性,可加快ATP的利用和再合成的速度。速度訓(xùn)練可提高CK酶的活性,提高ATP的轉(zhuǎn)換速率和肌肉的最大功率輸出,有利于運動員提高速度素質(zhì)和恢復(fù)期CP的重新合成。運動訓(xùn)練可使骨骼?。茫袃α棵黠@增多,提高磷酸原供能時間。運動訓(xùn)練對骨骼肌內(nèi)ATP儲量影響不明顯。

      二、糖酵解供能系統(tǒng)

      糖原或葡萄糖無氧分解生成乳酸的過程,并合成ATP的過程稱為糖的無氧代謝,又稱為糖酵解。糖酵解供能的基本過程見下圖。糖酵解反應(yīng)在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)進(jìn)行,由12步連續(xù)的化學(xué)反應(yīng)組成。糖酵解中ATP的生成 有兩個部位。

      ATP生成方式:底物水平磷酸化?

      ATP生成數(shù)量:每分子葡萄糖經(jīng)糖酵解凈生成2分子ATP,每個葡萄糖單位肌糖原經(jīng)糖酵解凈獲3分子ATP。* 運動時糖酵解供能

      在以最大強度運動6-8秒時CP成為主要的供能物質(zhì),同時糖酵解被激活,肌糖原迅速分解參與供能。在全力運動30-60秒時 糖酵解可達(dá)最大速率,其輸出功率為1毫摩爾~P/千克干肌/秒,約是磷酸原的一半。糖酵解的主要基質(zhì)是肌糖原,當(dāng)以最大速率進(jìn)行短跑至力竭時肌糖原儲量消耗不足一半。糖酵解供能系統(tǒng)在運動中可維持的運動時間較長,是30秒至2分鐘以內(nèi)最大強度運動的主要供能系統(tǒng)。在速度和速度耐力項目中起主要供能作用。

      三、有氧代謝供能系統(tǒng)

      在氧氣的參與下,糖,脂肪和蛋白質(zhì)氧化生成CO2和H2O的過程稱為有氧代謝。糖有氧氧化供能指在氧存在的情況下,糖原,葡萄糖和乳酸的有氧氧化,終產(chǎn)物是二氧化碳和水。* 糖有氧氧化的基本過程 ?(1)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)反應(yīng)階段

      ?與糖酵解生成丙酮酸的完全相同。?(2)線粒體內(nèi)反應(yīng)階段

      丙酮酸→乙酰輔酶A(在丙酮酸脫氫酶系的作用下氧化脫羧)?

      乙酰輔酶A與草酸乙酸縮合成檸檬酸進(jìn)入三羧酸循環(huán)。三羧酸循環(huán)運轉(zhuǎn)一周的凈結(jié)果是氧化1分子的乙酰輔酶A生成12分子的ATP。每分子葡萄糖有氧氧化可凈獲得36或38分子ATP

      (二)脂肪酸氧化供能 1.脂肪水解

      ?1分子TG→甘油+3分子脂肪酸 2.甘油的分解代謝

      ?

      甘油只在腎臟,肝臟等少數(shù)組織被氧化利用,直接為肌肉供能的意義不大。

      3.脂肪酸的分解代謝 ?(1)脂肪酸活化

      ?在線粒體外膜脂肪酸與輔酶A結(jié)合生成脂肪酰輔酶A。?(2)脂肪輔酶A進(jìn)入線粒體

      ?借助于線粒體內(nèi)膜上肉堿轉(zhuǎn)運機制被轉(zhuǎn)運至線粒體內(nèi)。?(3)脂肪酰輔酶A的β-氧化

      每一次β-氧化,包括脫氫,水化,再脫氫,硫解四步連續(xù)的反應(yīng)過程,最終將β-碳原子氧化成一個新的羧基。脂肪酸氧化的ATP生成數(shù),以硬脂酸為例ATP的生成數(shù)是147。

      (三)蛋白質(zhì)氧化供能

      蛋白質(zhì)首先分解成氨基酸,氨基酸再脫去氨基生成相應(yīng)的酮酸。脫去氨基的方式是轉(zhuǎn)氨基和氧化脫氨基作用。

      轉(zhuǎn)氨基作用:由某一氨基酸與α-酮戊二酸進(jìn)行氨基轉(zhuǎn)移反應(yīng),生成相應(yīng)的α-酮酸和谷氨酸,催化轉(zhuǎn)氨基作用的酶是轉(zhuǎn)氨酶。?

      氧化脫氨基作用:由轉(zhuǎn)氨基作用生成的谷氨酸在谷氨酸脫氫酶的作用下經(jīng)脫氫,水化反應(yīng)生成氨和α-酮戊二酸的過程。

      聯(lián)合脫氨基作用:當(dāng)轉(zhuǎn)氨基作用與谷氨酸氧化脫氨基作用聯(lián)合進(jìn)行時,使氨基酸脫掉氨基生成相應(yīng)的α-酮酸和氨稱為聯(lián)合脫氨基作用。生成的α-酮酸可經(jīng)不同環(huán)節(jié)加入三羧酸循環(huán),進(jìn)而徹底氧化生成二氧化碳和水,同時生成ATP,這是氨基酸氧化分解中可提供能

      量的部分。聯(lián)合脫氨基作用主要在肝,腎組織中進(jìn)行。α-酮酸還可重新合成非必需氨基酸,并可轉(zhuǎn)變?yōu)樘呛椭?。骨骼肌,心肌?nèi)存在嘌呤核苷酸循環(huán)的脫氨基方式。

      (四)三大細(xì)胞燃料代謝的相互關(guān)系 1.分解代謝中的關(guān)系

      ?末端循環(huán)的共同途徑是三羧酸循環(huán) 2.三者之間的相互轉(zhuǎn)化

      在體內(nèi)糖極易轉(zhuǎn)化為脂,脂肪分子中僅甘油部分可經(jīng)糖異生作用轉(zhuǎn)換為糖。

      糖可經(jīng)氨基化合成非必需氨基酸,生糖氨基酸可轉(zhuǎn)變?yōu)樘恰?

      生酮氨基酸可合成脂肪酸,機體幾乎不利用脂肪合成蛋白質(zhì)。

      (五)運動時的有氧代謝供能

      糖的有氧代謝供能特點為最大輸出功率約為糖酵解的一半,可滿足1-2小時的大強度運動。脂肪氧化的最大功率輸出僅為糖有氧氧化的一半,儲量豐富,可供運動的時間理論上不受限制,是中低強度運動時的主要基質(zhì)。蛋白質(zhì)在長于30分鐘的激烈運動中參與供能,但最多不超過總供能的18%。

      有氧代謝供能是數(shù)分鐘以上耐力性運動項目的基本供能系統(tǒng),同時提高有氧代謝能力對改善運動肌代謝環(huán)境和加速疲勞消除起著重要作用,對速度和力量型項目運動員同樣重要。第四節(jié) 運動時能量的釋放和利用

      一、運動時供能系統(tǒng)的動用特點

      (一)人體骨骼肌細(xì)胞的能量儲備

      表 人骨骼肌細(xì)胞的能量儲備(70kg體重)

      供能物質(zhì)

      儲量(mmol/kg干?。┛衫玫哪芰?/p>

      ATP

      24.6

      9.8

      CP

      76.8

      61.4

      Gn

      365

      100/14200

      TG

      48.6

      24520

      (二)供能系統(tǒng)的輸出功率

      各種能源產(chǎn)生高能磷酸基團的最大速率

      能源利用

      最大輸出功率(mmol~p/kg干肌/秒)

      可供運動時間 CP

      1.6~3.0

      6~8秒

      Gn糖酵解

      1.0

      30~60秒達(dá)最大速率

      可維持運動2~3分鐘

      Gn有氧氧化

      0.1.5~2小時 FFA有氧氧化

      0.25

      不限時間

      (三)供能系統(tǒng)的相互關(guān)系

      運動中基本不存在一種能量單獨供能的情況,肌肉可以利用所有能量物質(zhì),只是時間,順序和相對比例隨運動狀況而異,不是同步利用。最大功率輸出的順序,由大到小是:?磷酸原系統(tǒng)>糖酵解系統(tǒng)>糖有氧氧化>脂肪酸有氧氧化,且分別以近50%的速率依次遞減。當(dāng)以最大輸出功率運動時,各系統(tǒng)能維持的運動時間是磷酸原供極量強度運動6-8秒,糖酵解系統(tǒng)供最大強度運動30-90秒,33 可維持2分鐘以內(nèi),3分鐘以上的運動能量需求主要依賴于有氧代途徑。在超過30分鐘的激烈運動中蛋白質(zhì)也參與供能,但供能量不超過總能量的18%。運動時間越長強度越小,脂肪氧化供能的比例越大。

      運動后ATP,CP的恢復(fù)和乳酸的清除要依靠有氧代謝系統(tǒng)才能完成,有氧代謝供能是運動后機體恢復(fù)的基本代謝方式。

      二、不同活動狀態(tài)下供能系統(tǒng)的相互關(guān)系 ?

      (一)安靜時

      骨骼肌內(nèi)能量消耗較少,ATP保持高水平,肌細(xì)胞內(nèi)以游離脂肪酸和葡萄糖的有氧氧化供能,且線粒體內(nèi)氧化脂肪酸的能力大于糖的氧化能力。

      (二)短時間激烈運動

      骨骼肌以無氧代謝供能為主,在極量運動時以ATP,CP供能為主,在超過10秒的運動中糖酵解供能的比例增加。?

      (三)大強度運動

      機體總體上基本依靠有氧代謝供能,部分骨骼肌由糖酵解合成ATP。

      (四)長時間低強度運動

      以脂肪酸供能為主,但運動開始時CP和糖酵解供能直到有氧代謝能力充分調(diào)動起來為止。

      總之,短時間激烈運動時(10秒以內(nèi))基本上依賴ATP,CP儲備供能,長時間中低強度運動時以糖和脂肪酸有氧代謝供能為

      主,運動時間在10秒-10分鐘以內(nèi)執(zhí)行全力運動時,所有的能源儲備都被動用,運動開始時ATP,CP被動用,然后糖酵解供能,最后糖原,脂肪酸和蛋白質(zhì)有氧代謝也參與供能。運動結(jié)束后的一段時間內(nèi),骨骼肌等組織細(xì)胞內(nèi)有氧代謝速率仍高于安靜時水平,它所產(chǎn)生的能量用于運動時消耗的能源物質(zhì)的恢復(fù)。

      第五章

      運動與糖代謝

      第一節(jié) 肌糖原與運動能力

      一、影響肌糖原儲量的因素

      肌肉部位:不同個體同一部位肌糖原儲量相同,同一個體不同部位肌糖原儲量不同。

      肌纖維類型:快肌略高于慢肌

      運動訓(xùn)練水平:訓(xùn)練水平越高,通常肌糖原也越高。飲食狀況:正常糖原含量的肌肉對飲食糖的敏感性較低。

      二、影響運動時肌糖原利用的因素

      運動強度、持續(xù)時間與肌糖原利用:運動強度增大,肌糖原消耗速率相應(yīng)增大

      1、在90%~95%最大攝氧量以上強度運動時,肌糖原消耗速率最大。

      2、在65%~85%最大攝氧量強度長時間運動時,肌糖原消耗總量最大。

      3、以30%最大攝氧量強度運動時,肌糖原很少利用。訓(xùn)練水平:

      耐力訓(xùn)練水平可以提高肌肉氧化糖和脂肪酸的能力。高訓(xùn)練水平的人,執(zhí)行定量負(fù)荷運動時,肌糖原氧化速率減慢。在進(jìn)行大強度亞極量運動時,肌糖原分解速率相對較快。肌纖維類型:

      I

      有氧化氧化型:肌糖原利用隨強度增大而減少 IIa 酵解氧化型:肌糖原利用隨強度增大而增大 IIb 酵解型:肌糖原利用隨強度增大而增大 飲食:

      賽前適量補糖:減少肌糖原的消耗,賽前增加脂肪酸的利用:節(jié)省肌糖原的消耗 環(huán)境溫度的影響:

      氣溫影響人體的代謝速率和代謝底物的選擇 低氧分壓:

      缺氧——糖酵解供能比例增加,高原訓(xùn)練初期,肌糖原利用增加

      三、肌糖原與運動能力的關(guān)系

      有氧運動能力與肌糖原儲量 無氧運動能力與肌糖原儲量

      第二節(jié)

      血糖與運動能力

      一、概述

      (一)血糖濃度

      血液中的葡萄糖含量稱為血糖。

      正??崭寡菨舛葹?.89~6.11mmol/L

      低血糖范圍:<3.8 mmol/L

      高血糖范圍:>7.2 mmol/L

      二、血糖的來源與去路

      三、血糖的生物學(xué)作用

      ?中樞神經(jīng)系統(tǒng)的主要供能物質(zhì)。?血糖是紅細(xì)胞的唯一能源。?血糖是運動肌的肌外燃料。

      四、血糖與運動能力的關(guān)系

      短時間激烈運動時,血糖在運動時供能的地位很??;長時間運動時,血糖可能成為重要的限制運動能力的因素;中樞神經(jīng)系統(tǒng)因血糖供能缺乏而出現(xiàn)中樞疲勞;影響紅細(xì)胞能量代謝,使氧的運輸能力下降;由于運動肌外源性糖供應(yīng)不足導(dǎo)致外周疲勞而使運動能力下降。第三節(jié)

      肝臟釋放葡萄糖與運動能力

      一、安靜時肝葡萄糖釋放

      (一)安靜時肝糖原分解:占肝葡萄糖釋放的70%

      (二)安靜時糖異生作用:占肝葡萄糖釋放的25~30% 糖異生:在肝臟中,有非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)變成葡萄糖和糖原的過程。區(qū)別糖異生和糖酵解

      二、運動時肝葡萄糖釋放

      (一)短時間大強度運動:以肝糖原分解為主,約占肝葡萄糖釋放的90%左右。

      (二)長時間大強度運動時:肝糖原分解速率增加,但時間越長,糖

      異生的比率逐漸增加。

      (三)運動時糖異生作用:不同時間糖異生基質(zhì)成分的變化:40分鐘以內(nèi):以乳酸為主;40分鐘左右:以生糖氨基酸為主;40分鐘以后:以甘油為主

      三、膳食對肝糖原貯備量的影響因素

      肝糖原主要受飲食糖含量的影響,一天低糖飲食,肝糖原含量可降到最低水平;而高糖飲食可使肝糖含量達(dá)大最高水平。攝取果糖在肝內(nèi)合成糖原的能力比葡萄糖高3~4倍。第四節(jié)

      乳酸與運動

      一、運動時乳酸生成的機理 1.安靜時乳酸的生成

      2.短時間極量運動乳酸的生成 3.亞極量運動時乳酸的生成

      4.中、低強度運動開始時乳酸的生成

      二、乳酸的消除

      (一)乳酸消除的基本途徑

      (二)運動時乳酸代謝 氧化占55%~70% 糖異生:Gn<20% 蛋白質(zhì)成分:5%~10% 其它:<10%

      (三)乳酸消除的生物學(xué)意義

      §提供氧化底物。

      §通過糖異生維持血糖濃度。

      §改善肌細(xì)胞內(nèi)環(huán)境,維持糖酵解反應(yīng)繼續(xù)繼續(xù)。

      三、乳酸與運動能力的關(guān)系 ?乳酸生成與運動能力 ?乳酸消除與運動能力

      第六章 運動與脂肪代謝

      運動時脂肪可以參加能量代謝,脂肪的供能地位主要與血漿游離脂肪酸的作用分不開。血漿游離脂肪酸可以為多種器官和組織供能,也是安靜與運動時骨骼肌的主要供能物質(zhì)之一。第一節(jié) 運動與脂肪代謝

      一、概述

      (一)長時間運動時骨骼肌細(xì)胞燃料的選擇 糖原的優(yōu)缺點:

      耗氧量少,缺氧時可進(jìn)行無氧代謝 分解速度快,輸出功率較高

      相同量的糖原釋放能量可合成的ATP比脂肪少 在體內(nèi)儲存時所占體積較大,儲量較少

      長時間運動時可維持運動時間受肌糖原儲量的影響 脂肪的優(yōu)缺點:

      耗氧量高,分解速度慢,輸出功率低

      可合成ATP的量多

      在體內(nèi)儲存時所占體積較小,儲量豐富

      長時間運動時可維持運動時間理論上不受脂肪儲量的影響

      (二)運動時脂肪的供能作用

      §短時間激烈運動時:肌肉基本不利用脂肪酸,磷酸肌酸和肌糖原是肌肉的主要供能物質(zhì)。

      §當(dāng)大于60%-65%最大攝氧量強度少于60分鐘的運動中:機體以糖的有氧和無氧代謝為運動肌的主要供能物質(zhì)。

      §當(dāng)?shù)陀冢叮埃ィ叮担プ畲髷z氧量強度的長時間運動中:機體以脂肪為運動肌的主要供能物質(zhì)。

      (三)運動時脂肪參與供能的形式和來源 運動時脂肪參與供能的形式主要有三種:

      完全氧化:在心肌,骨骼肌等組織中,脂肪酸完全氧化生成二氧化碳和水,這是脂肪供能的主要形式。

      不完全氧化:在肝臟中脂肪酸不完全氧化生成中間產(chǎn)物酮體,參與脂肪組織脂解的調(diào)節(jié)。

      糖異生:在肝,腎細(xì)胞中甘油作為非糖物質(zhì)經(jīng)過糖異生途徑轉(zhuǎn)變成葡萄糖,對維持血糖水平起重要作用。* 參與骨骼肌供能的脂肪酸來源

      有三個部位的脂肪經(jīng)水解途徑產(chǎn)生脂肪酸,并提供給運動肌氧化供能(1)脂肪組織儲存的脂肪

      (2)循環(huán)系統(tǒng)即血漿脂蛋白含有的脂肪

      40(3)肌細(xì)胞中的脂肪

      運動時人體基本上不利用肝臟內(nèi)儲存的脂肪

      二、運動時脂肪分解代謝

      (一)脂肪組織中脂肪分解 1.脂肪酸動員

      脂肪細(xì)胞內(nèi)儲存的脂肪經(jīng)脂肪酶水解釋放出脂肪酸,供給全身各組織攝取利用。2.脂肪分解

      脂肪細(xì)胞內(nèi)TG受一系列脂肪酶催化水解最終生成甘油和脂肪酸。甘油三酯脂肪酶所催化的過程是調(diào)節(jié)脂肪酸動員的限速步驟。3.脂肪組織釋放脂肪酸和甘油

      在脂肪細(xì)胞中脂肪水解所產(chǎn)生的甘油基本上全部被釋釋放入血,經(jīng)血液循環(huán)運輸?shù)礁闻K等組織進(jìn)一步代謝。脂肪酸只有部分被釋放入血,大部分在脂肪細(xì)胞內(nèi)直接參與再酯化過程,稱為甘油三酯-脂肪酸循環(huán)。釋放入血的脂肪酸水溶性較差,立即與血漿清蛋白結(jié)結(jié)合以增加水溶性。每分子清蛋白可結(jié)合10分子脂肪酸。

      (二)血漿甘油三酯分解 1.血漿脂蛋白與甘油三酯

      血漿中的TG是與磷脂,膽固醇,膽固醇酯和載脂蛋白以不同比例結(jié)合而存在,共同構(gòu)成脂蛋白。按密度可將脂蛋白分為四類:

      它們分別是乳糜微粒CM,極低密度脂蛋白VLDL,低密度脂蛋白LDL和高密度脂蛋白HDL。nCM中含TG比例最高,含蛋

      白質(zhì)量最少,nHDL中含蛋白質(zhì)含量最高,TG含量最少。2.血漿脂蛋白中TG的分解

      在LPL的催化作用下,血漿脂蛋白中的TG水解為脂肪酸和甘油,水解出的脂肪酸立即以血漿清蛋白為載體生成游離脂肪酸,被各組織器官攝取和利用。3.血漿甘油三酯的供能作用

      血漿甘油三酯的供能作用很小,訓(xùn)練可使人體血漿甘油三酯濃度降低。

      (三)肌細(xì)胞內(nèi)TG分解 1.肌內(nèi)TG含量

      主要分布在慢肌纖維中,以中性脂滴形式分三在線粒體附近,數(shù)量與線粒體容積成正相關(guān)。其含量可因肌纖維類型,營養(yǎng)和身體活動而改變。

      2.肌內(nèi)TG分解

      受骨骼肌內(nèi)LPL催化,受多種激素調(diào)節(jié)。訓(xùn)練可影響骨骼?。蹋校袒钚浴?/p>

      3.肌內(nèi)TG的供能作用

      長時間運動可引起肌內(nèi)脂肪含量明顯下降,且運動時肌內(nèi)TG的脂解強度比脂肪組織大得多。第二節(jié) 運動時脂肪酸的利用

      運動時骨骼肌氧化的脂肪酸依靠肌內(nèi)TG水解和攝取血漿FFA,隨運動時間延長,血漿FFA供能起主要作用。

      一、血漿游離脂肪酸濃度及其轉(zhuǎn)運率

      安靜空腹時血漿FFA相對較低,只有0.1毫摩爾每升左右,但血漿FFA的轉(zhuǎn)運率較快,半衰期大約為4分鐘。

      運動過程中血漿FFA的濃度升高,可以上升20倍,到接近2毫摩爾每升,且轉(zhuǎn)運率加快,并與運動強度的增大密切相關(guān),反映出血漿FFA無論在靜息狀態(tài),還是低,中強度運動時都能積極參與各組織器官的氧化供能。

      二、骨骼肌利用血漿游離脂肪酸

      (一)血漿FFA在骨骼肌內(nèi)的供能地位 1.安靜時的供能地位

      動脈血FFA是安靜肌的基本燃料,大約50%的血漿FFA在流經(jīng)肌肉的過程中被吸收利用。2.運動時的供能地位

      短時間極量或高強度運動中血漿FFA供能的意義不大;長時間運動開始的數(shù)分鐘內(nèi),血漿FFA?xí)霈F(xiàn)暫時下降,然后逐漸升高。原因:

      運動時肌肉吸收血漿FFA增多,但脂肪組織分解及脂肪酸釋放入血的量相對不足。進(jìn)入脂肪組織的血流量暫時下降,造成肌肉吸收血漿FFA速率與組織向循環(huán)系統(tǒng)釋放脂肪酸的速率之間暫時的不平衡。通過逐漸增強脂肪組織的脂肪酸動員速率,血漿FFA濃度逐漸上升到基礎(chǔ)水平或超過基礎(chǔ)水平。大約在運動后3-4小時達(dá)到最高值,接近2毫摩爾每升。運動終止時骨骼肌利用脂肪酸立即減弱,43 而脂肪組織內(nèi)由于代謝活動使肢解仍保持較高速率,運動后血漿FFA濃度將上升。大約經(jīng)過10-15分鐘血漿FFA達(dá)到最高水平然后下降,逐漸恢復(fù)到安靜時水平。

      (二)影響肌細(xì)胞內(nèi)血漿FFA供能的因素 運動強度和持續(xù)時間

      運動強度下降到60%-70%最大攝氧量,超過20-30分鐘的長時間運動中肌細(xì)胞吸收血漿FFA供能比例增大。血漿脂肪酸濃度

      運動肌攝取和利用血漿FFA與其濃度存在正比關(guān)系。飲食

      吃糖抑制脂肪組織的脂肪分解,服用咖啡因可促進(jìn)脂肪組織的脂解。耐力訓(xùn)練水平

      高水平耐力運動員運動時脂肪酸氧化供能比例相對較高,有利于運動時節(jié)省糖儲備。肌內(nèi)局部因素

      肌肉肉堿含量可影響脂肪酸的利用。環(huán)境溫度

      寒冷溫度消耗脂肪酸的數(shù)量增多。

      (三)不同組織利用血漿FFA供能的差異 心肌和肝臟具有較強的脂肪酸氧化能力。I型肌纖維具有高氧化脂肪酸的能力。

      ⅡB型肌纖維氧化脂肪酸的能力較差。

      (四)骨骼肌脂肪酸氧化與運動能力關(guān)系示例 1.促進(jìn)脂肪酸供能與最大耐力 2.抑制脂肪酸供能與大強度耐力

      (五)訓(xùn)練對骨骼肌脂肪酸氧化的影響

      每分心輸出量增大,HB,MB含量增多,骨骼肌毛細(xì)血管密度增大,對骨骼肌的供氧能力提高。使訓(xùn)練肌的細(xì)胞內(nèi)線粒體數(shù)目增多和體積增大,線粒體內(nèi)酶活性提高,骨骼肌代謝利用氧的能力提高。第三節(jié) 運動與甘油、酮體代謝

      一、運動與甘油代謝

      (一)甘油代謝

      甘油由相應(yīng)組織分解進(jìn)入血液直接運送到肝臟,腎臟和小腸等組織,主要在肝臟中進(jìn)一步代謝,因為肝臟有較高活性的甘油激酶。

      甘油生成α-磷酸甘油,然后脫氫生成磷酸二羥丙酮。根據(jù)肝臟內(nèi)供氧情況的不同,有三條可能代謝去路:徹底氧化為二氧化碳和水,每分子甘油產(chǎn)生22分子ATP;轉(zhuǎn)變成乳酸;n糖異生作用轉(zhuǎn)變?yōu)樘恰?/p>

      腎,小腸一定程度上可以利用甘油。

      (二)運動時甘油代謝的意義

      甘油糖異生生成葡萄糖,對長時間有氧運動中維持血糖的濃度有重要作用。甘油直接為骨骼肌供能的意義不大。當(dāng)肌糖原儲量充足時甘油氧化供能更少。

      二、運動與酮體代謝

      (一)酮體的生成

      在肝細(xì)胞內(nèi)脂肪酸氧化極不完全,生成乙酰乙酸,β-羥丁酸和丙酮,總稱為酮體。肝細(xì)胞線粒體內(nèi)含有合成酮體的酶類,但缺乏利用酮體的酶類。酮體生成后進(jìn)入血液成為血酮體運輸?shù)礁瓮獾囊恍┙M織,被進(jìn)一步氧化和利用。

      (二)酮體的氧化

      主要在心肌,骨骼肌,神經(jīng)系統(tǒng)和腎臟,可以將乙酰乙酸,β-羥丁酸轉(zhuǎn)變成乙酰輔酶A,然后通過三羧酸循環(huán)氧化成二氧化碳和水。

      (三)運動時血酮體動力學(xué)變化

      短時間激烈運動時血酮體濃度沒有明顯變化。長時間運動時,尤其是糖儲備低的運動過程中血酮體濃度明顯升高。在血酮體濃度低下時,隨著運動強度上升,血酮體代謝加快。在高血酮體水平時,酮體代謝清除速率不再加快。

      (四)酮體生成的意義

      酮體是聯(lián)系肝臟與肝外組織的一種能量特殊運輸形式 參與腦組織和肌肉能量代謝 參與脂肪酸動員的調(diào)節(jié)

      血、尿酮體濃度升高評定體內(nèi)糖儲備狀況 第七章 運動與蛋白質(zhì)和氨基酸代謝 蛋白質(zhì)的功能:

      構(gòu)成機體細(xì)胞組成的重要物質(zhì)。組織細(xì)胞的修復(fù)作用。調(diào)節(jié)各種生理功能。供能作用。

      第一節(jié) 運動和恢復(fù)期蛋白質(zhì)代謝

      一、概述

      氮平衡:在正常情況下,機體的蛋白質(zhì)攝入量和排出量 處于動態(tài)平衡。

      短時間激烈運動對蛋白質(zhì)代謝影響較小,蛋白質(zhì)基本不參與供能。長時間耐力運動時蛋白質(zhì)和氨基酸分解代謝加強。

      二、運動時蛋白質(zhì)代謝

      (一)運動時蛋白質(zhì)凈降解 由組織蛋白質(zhì)釋放或者轉(zhuǎn)換提供。

      長時間運動肝臟、肌肉非收縮蛋白分解代謝速率加快,肌肉收縮蛋白的分解速率減慢,整體蛋白質(zhì)代謝表現(xiàn)為分解代謝加強。

      (二)判斷機體蛋白質(zhì)分解代謝的強度指標(biāo) 尿素氮可反映整體蛋白質(zhì)的代謝情況。

      尿3-甲基組氨酸反映肌肉收縮蛋白分解代謝的情況。血清氨基酸濃度的變化。

      (三)運動使蛋白質(zhì)分解代謝增強的原因 訓(xùn)練狀態(tài)

      訓(xùn)練的類型,強度,頻率

      激素變化 酶活性變化

      三、運動后蛋白質(zhì)代謝

      (一)運動后蛋白質(zhì)凈合成

      運動后恢復(fù)1小時內(nèi),骨骼肌蛋白質(zhì)合成減弱。

      運動后第2小時內(nèi)蛋白質(zhì)合成速率上升,并在尚未明確的時間內(nèi)持續(xù)上升。

      (二)影響運動后肌肉蛋白質(zhì)合成的因素

      運動使細(xì)胞膜通透性增加,使進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的游離氨基酸數(shù)量增加,為蛋白質(zhì)合成提供了基本原料。

      在運動后30分鐘內(nèi)肌細(xì)胞內(nèi)ATP,CP迅速恢復(fù)到正常水平。機體內(nèi)對蛋白質(zhì)合成的阻遏作用解除。

      多胺含量增加,可從核糖體水平提高蛋白質(zhì)合成速率。激素濃度改變。

      (三)運動訓(xùn)練對蛋白質(zhì)代謝的影響

      耐力訓(xùn)練的作用:

      使骨骼肌線粒體的數(shù)目增多,體積增大,線粒體蛋白質(zhì)量和組成酶活性提高。

      力量訓(xùn)練的作用:

      使訓(xùn)練肌的體積增大,肌纖維增粗,力量增強,這種適應(yīng)性變化出現(xiàn)在快收縮肌纖維。

      肌肉粗大的主要原因是肌蛋白數(shù)量增多,包括收縮蛋白總量增多。

      此外肌纖維周圍的結(jié)締組織,肌腱,韌帶組織數(shù)量增長。第二節(jié) 運動與氨基酸代謝

      長時間運動時機體對氨基酸的利用加強,某些氨基酸氧化成二氧化碳和水直接參與供能,或者參與糖異生維持運動中血糖水平。

      一、氨基酸代謝庫

      (一)游離氨基酸庫

      骨骼肌和肝臟是重要的游離氨基酸庫。大約80%的游離氨基酸分布在骨骼肌內(nèi)。大約10%分布在肝臟內(nèi)。腎臟約含4%。

      血漿游離氨基酸比例較低。

      骨骼肌和肝臟是蛋白質(zhì)和氨基酸代謝旺盛的部位,血漿游離氨基酸的變化反映肌肉,肝臟蛋白質(zhì)代謝和氨基酸的變化。

      (二)運動時代謝利用的氨基酸 三個來源

      血漿和組織內(nèi)游離氨基酸。

      組織蛋白質(zhì)降解時釋放出的氨基酸。

      非氨基酸類物質(zhì),主要是糖分解的中間代謝產(chǎn)物轉(zhuǎn)變生成。組織蛋白質(zhì)分解釋放出的或生成的氨基酸是運動時可利用的主要部分,游離氨基酸庫在運動中的供能作用不大。血液氨基酸濃度的變化可以反映游離氨基酸庫動態(tài)平衡的改變,但不提供氨基酸代謝流通的情況。

      二、運動與氨基酸供能

      長時間的大強度運動時氨基酸氧化增強,參與氧化供能的氨基酸主要是丙氨酸,谷氨酸,門冬氨酸和支鏈氨基酸。

      (一)丙氨酸,谷氨酸,門冬氨酸

      在相應(yīng)轉(zhuǎn)氨酶的作用下,上述氨基酸直接轉(zhuǎn)變?yōu)楸?,?酮戊二酸和草酰乙酸,從不同途徑進(jìn)入三羧酸循環(huán)。

      (二)支鏈氨基酸

      支鏈氨基酸包括亮氨酸,異亮氨酸和纈氨酸。

      組織內(nèi)支鏈酮酸脫氫酶分布不均勻,肌肉內(nèi)含量約占總量的60%,其次是肝組織,所以肌肉是氧化支鏈氨基酸的主要組織。

      每分子亮氨酸,異亮氨酸和纈氨酸完全氧化分別產(chǎn)生42,43和32分子ATP。

      安靜時骨骼肌總能量消耗的14%由支鏈氨基酸氧化過程提供,屬于非糖的能量來源。

      (三)影響氨基酸供能的因素

      耐力訓(xùn)練能提高運動肌內(nèi)谷-丙轉(zhuǎn)氨酶活性。

      三、運動與氨基酸的糖異生作用

      在耐力運動期間,氨基酸的另一代謝途徑是合成葡萄糖。在各種生糖氨基酸中以丙氨酸為主,約占糖異生生成葡萄糖總量的20%-25%,占肝臟葡萄糖輸出量的5%-8%。

      (一)葡萄糖-丙氨酸循環(huán)的代謝途徑

      由肌內(nèi)葡萄糖,肌糖原分解生成的丙酮酸,與氨基酸之間經(jīng)轉(zhuǎn)氨

      第三篇:生化實驗教案

      生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生化實驗(下)

      生 物 化 學(xué) 實 驗(下)

      實驗三 離子交換柱層析法分離氨基酸

      生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生化實驗(下)

      華中科技大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 2012級生物化學(xué)小老師

      第三組

      離子交換柱層析法分離氨基酸

      【實驗?zāi)康摹?/p>

      1.學(xué)習(xí)離子交換樹脂分離氨基酸的基本原理。2.掌握離子交換柱層析的基本操作。3.掌握氨基酸和茚三酮顯色機理。

      【實驗原理】

      1.離子交換層析原理

      離子交換法是通過帶電的溶質(zhì)分子與離子交換劑中可交換的離子進(jìn)行交換而達(dá)到分離目的的方法。

      有些高分子物質(zhì)含有一些可以解離的基團,例如-SO3H,-COOH等,因此可以和溶液中的離子產(chǎn)生交換反應(yīng),如:

      這類高分子物質(zhì)統(tǒng)稱為離子交換劑,離子交換劑是一類具有離子交換功能的高分子材料。功能基團由固定在骨架上的帶電基團與可進(jìn)行交換的能移動離子兩部分組成,二者所帶電荷相反,以靜電作用結(jié)合??蛇M(jìn)行交換的離子稱為反離子或抗衡離子,這種反離子可與溶液中帶

      生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生化實驗(下)

      同種電荷的離子進(jìn)行交換反應(yīng)。因離子交換反應(yīng)是可逆的,在一定條件下被交換的離子也可以“解吸”,使離子交換劑又恢復(fù)到原來的離子形式,所以離子交換劑通過交換和再生可以反復(fù)使用。其中使用的最普遍的是離子交換樹脂。由于一定離子交換劑對于不同離子的靜電引力不同,因此在洗脫過程中,不同的離子在離子交換柱上的遷移速度也不同,最后完全分離。

      選擇適當(dāng)?shù)臈l件,可使一些溶質(zhì)分子變成離子態(tài),通過靜電作用結(jié)合到離子交換劑上,而另一些物質(zhì)則不能被交換,這兩類物質(zhì)即被分離。帶同種電荷的不同離子都可以結(jié)合到同一介質(zhì)上,但由于各自所帶電量不同,與介質(zhì)的結(jié)合牢度不同,可改變洗脫條件使它們依次先后被洗脫,從而達(dá)到分離目的。

      離子交換層析是一種基于氨基酸電荷行為的層析方法。本實驗采用磺酸型陽離子交換樹脂(732型)分離酸性氨基酸天冬氨酸(Asp,pI2.97)和堿性氨基酸賴氨酸(Lys,pI9.74)的混合液。氨基酸是兩性電解質(zhì),分子上所帶的凈電荷取決于氨基酸的等電點和溶液的pH值。在pH5.3條件下,因為pH值低于Lys的PI值,Lys可解離成陽離子結(jié)合在樹脂上;Asp可解離成陰離子,不被樹脂吸附而流出層析柱。在pH12條件下,因pH值高于Lys的pI值Lys可解離成陰離子從樹脂上被交換下來。這樣通過改變洗脫液的pH值可使它們被分別洗脫而達(dá)到分離的目的。2.茚三酮反應(yīng)機理

      茚三酮反應(yīng)是指在加熱條件下,氨基酸或肽與茚三酮反應(yīng)生成紫色(與羥脯氨酸或脯氨酸反應(yīng)生成(亮黃色)化合物的反應(yīng)。

      該紫色化合物在570nm處有最大光吸收,所以可以利用分光光度計測量其含量。

      由于該反應(yīng)靈敏度高,目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于氨基酸定性和定量的分析,國內(nèi)的大部分教材認(rèn)為其反應(yīng)機理為:

      生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生化實驗(下)

      但是大量實驗表明而且大部分的學(xué)者認(rèn)為茚三酮顯色反應(yīng)生成的有色物質(zhì)是混合物而不是單一組分。

      茚三酮顯色反應(yīng)受pH,茚三酮試劑的配制方法和濃度,氨基酸種類和濃度,反應(yīng)溫度,反應(yīng)時間,冷卻時間,離子強度等都有較大影響。特別要注意的是pH對顯色反應(yīng)的影響特別大,且該反應(yīng)在一個小時內(nèi)穩(wěn)定。

      【實驗器材和試劑】

      一、實驗器材

      層析柱(20cm*1cm);鐵架臺;恒流泵;部分收集器;分光光度計;移液槍;恒溫水浴鍋;試管;玻璃棒;燒杯;試管架。

      二、實驗試劑

      ①732型陽離子交換樹脂(100-200目)

      生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生化實驗(下)

      ②2mol/L氫氧化鈉溶液,1mol/L氫氧化鈉溶液; ③2mol/L鹽酸溶液,0.1mol/L鹽酸溶液; ④標(biāo)準(zhǔn)氨基酸溶液

      天冬氨酸、賴氨酸均配制成2mg/mL的0.1mol/L鹽酸溶液; ⑤洗脫液

      檸檬酸-氫氧化鈉-鹽酸緩沖溶液(pH5.3)

      取檸檬酸14.25g,氫氧化鈉9.30g和濃鹽酸5.25mL溶于少量水后,定容至500mL,冰箱保存

      注:在檸檬酸緩沖液中加入0.1%酚溶液可防止長霉。在室溫較高的夏季,配制緩沖溶液用的蒸餾水必須是新鮮蒸餾水,配前煮沸,配好后在4℃保存。0.01mol/LNaOH溶液(pH12)

      取0.4gNaOH固體用適量蒸餾水溶解后,定容至1L ⑥顯色劑

      取0.5g茚三酮溶于75mL乙二醇單甲醚中,加水定容至100mL。待測樣品

      混合氨基酸溶液:將2mg/mL天冬氨酸、賴氨酸溶液按1:2.5的比例混合,混合后再以1:1的比例用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋。

      【操作步驟】

      1.樹脂的處理

      對于市售干樹脂,先是經(jīng)水充分溶脹后,經(jīng)浮選得到顆粒大小合適的樹脂,然后加4倍量的2mol/LHCl溶液浸泡1小時,傾去酸液,用蒸餾水洗至中性,然后用2mol/LNaOH溶液處理,做法同上。以1mol/LNaOH溶液浸泡樹脂一小時轉(zhuǎn)化為鈉型,用蒸餾水洗至中性,最后用欲使用的檸檬酸緩沖液浸泡,過剩的樹脂浸入1mol/LNaOH溶液中保存,以防細(xì)菌生長。2 裝柱

      取層析柱一支,垂直固定在鐵架臺上,(實驗前需進(jìn)行檢漏,小老師會在實驗過程中進(jìn)行演示)用夾子夾緊柱底出口處橡膠管,在柱內(nèi)加2~3cm高的檸檬酸緩沖液。將攪拌成懸浮狀的樹脂沿柱內(nèi)壁緩慢倒入。待樹脂在柱底部逐漸沉降時,慢慢打開柱底出口處鐵夾,繼續(xù)加入樹脂懸浮液,直至樹脂高度到層析柱高度的3/4處。

      生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生化實驗(下)

      注意:要注意裝柱過程的連續(xù)性,裝好的層析柱應(yīng)均勻,防止產(chǎn)生氣泡,節(jié)痕或界面,否則會對實驗有較大的影響,必須重新裝柱。3平衡

      層析柱裝好后,再緩慢沿管壁加入 適量緩沖液至樹脂床面以上2~3cm處,接上橫流泵,用檸檬酸緩沖液以0.5mL/min的流速進(jìn)行平衡,用pH試紙測量流出液pH,直至流出液的pH與緩沖液的pH相等。

      注意:調(diào)節(jié)流速前要排除恒流泵與柱間連接管內(nèi)所有氣泡,以免影響流速,影響實驗效果。調(diào)節(jié)流速時統(tǒng)一將流速調(diào)節(jié)為10滴/min,平衡時間一般為15分鐘。4加樣

      關(guān)閉恒流泵,打開層析柱上端管口,緩慢打開柱底出口,小心放出層析柱內(nèi)的液體至柱內(nèi)液體的凹液面恰好與樹脂上液面相齊,立即關(guān)閉下端出口(注意:不要使液面下降至樹脂表面以下)。用移液槍吸取氨基酸混合樣品0.5ml,沿靠近樹脂表面的管壁緩慢加入,注意不要沖壞樹脂表面。加樣后打開柱底止水夾,使液體盡可能緩慢地流下至液體凹液面恰與樹脂表面相平,立即關(guān)閉止水夾。再用膠頭滴管吸取0.5ml緩沖液清洗柱內(nèi)壁,打開止水夾放出液體,使液體下表面與樹脂表面相平,按照此法清洗2次。然后小心加入緩沖液離柱頂部1cm為止,并將層析柱與恒流泵和部分收集器相連。

      注意:樣品體積不要過大,樣品的含量不能超過層析柱內(nèi)離子交換能力,否則影響分離效果。5.洗脫

      ① 緩沖液洗脫:用檸檬酸緩沖液(pH5.3)以6s/滴的流速開始洗脫,用試管收集洗脫液,每管收集1ml,收集1-10號管。(② 0.01mol/L NaOH溶液(pH12)洗脫:關(guān)閉恒流泵和止水夾,將檸檬酸緩沖液更換為0.01mol/L的NaOH溶液,打開止水夾進(jìn)行洗脫,同法收集11-40管。收集完畢后,關(guān)閉止水夾和恒流泵。

      注意:在整個實驗過程中要多注意層析柱,避免使柱內(nèi)液體流干,否則實驗即為失敗。6.測定

      分別向60管收集液中加入1.5ml檸檬酸緩沖液,混勻后再加入1ml茚三酮顯色劑,混勻。沸水浴15min后取出,冷卻至室溫,在1h內(nèi)用分光光度計在570nm下以蒸餾水為空白管進(jìn)行比色,測定各管的吸光度值。

      注意:比色時盡量避免將液體沾在手上或衣服上。7.樹脂再生

      生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院生化實驗(下)

      層析柱使用幾次后,需將樹脂取出用1mol/LNaOH溶液洗滌,再用蒸餾水洗至中性后可反復(fù)使用。

      注意:在本次實驗結(jié)束之后需將樹脂倒至指定燒杯中。

      【結(jié)果與分析】

      以吸光度值為縱坐標(biāo),收集的管數(shù)為橫坐標(biāo),繪制出洗脫曲線。以已知兩種氨基酸的純?nèi)芤簶悠?,按上述方法和條件分別操作,將得到的洗脫曲線與混合氨基酸的洗脫曲線對照,可確定2個峰的大致位置及各峰為何種氨基酸。

      【思考題】

      1.對于新樹脂我們做的處理是先用2mol/LHCl攪拌半小時,然后用蒸餾水洗至中性,再用2mol/LNaOH攪拌半小時,用蒸餾水洗至中性,最后用1mol/LHCl攪拌半小時,還用蒸餾水洗至中性。請分析原因。

      2.所加樹脂的高度為層析柱高度的3/4,請思考樹脂過高或過低對實驗結(jié)果有何影響,試分析原因。

      3.本實驗加的樣品為天冬氨酸和賴氨酸,若再加一個組氨酸,請估計其峰值的位置,說明理由。

      第四篇:生化教案第十章 脂代謝

      第十章 脂代謝

      第一節(jié) 概述

      類脂和脂肪總稱為脂肪。類脂是構(gòu)成機體組織的結(jié)構(gòu)成分,脂肪是動植物的重要能源,稱為儲存脂質(zhì)。

      一、脂肪的降解

      1、胰脂肪酶---在人和動物體消化道中降解脂肪

      胰脂肪酶分為酯酶和脂酶兩類。酯酶主要水解脂肪酸和一元醇構(gòu)成的酯。脂酶包括脂肪酶和磷脂酶,脂肪酶水解三酰甘油,產(chǎn)生甘油和脂肪酸。磷脂酶作用于磷脂,可產(chǎn)生甘油、脂肪酸、磷酸、膽堿等。

      2、微生物脂肪酶---具有雙向催化特性

      細(xì)菌的脂肪酶降解活性一般不高,但真菌的脂肪酶活性較高。脂肪酶能將脂肪降解生成脂肪酸和甘油。

      脂肪酶也能在一定條件下催化醇與酸縮合成酯。

      二、脂肪酸的吸收與轉(zhuǎn)運

      1、脂肪的吸收---吸收形態(tài)的多樣性 被吸收的形態(tài)

      一是完全水解成甘油和脂肪酸,脂肪酸再與膽汁鹽按比例結(jié)合成可溶于水的復(fù)合物,與甘油一起被小腸上皮細(xì)胞吸收并進(jìn)入血液。

      二是不完全水解,脂肪部分水解成脂肪酸、單酰甘油、二酰甘油,而被吸收。

      三是完全不水解,經(jīng)膽汁高度乳化成脂肪微粒,同樣能被小腸粘膜細(xì)胞吸收,經(jīng)淋巴系統(tǒng)再進(jìn)入血液循環(huán)。

      2、血脂---油脂的轉(zhuǎn)運

      血漿中的脂質(zhì)統(tǒng)稱為血脂。

      血脂與蛋白結(jié)合形成脂蛋白,根據(jù)密度,脂蛋白分為高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、極低密度脂蛋白、乳糜顆粒等,脂蛋白具有較強的親水性,便于隨血液循環(huán)被轉(zhuǎn)運至各器官組織。

      三、油脂的中間代謝概況

      第二節(jié)

      脂肪的代謝

      一、甘油代謝

      1、甘油的分解---從磷酸丙糖插入EMP

      2、甘油的合成---分解代謝的逆行

      二、脂肪酸的分解代謝

      1、β-氧化---分解代謝的主要途徑

      脂肪酸通過酶催化α碳原子與β碳原子間的斷裂、β碳原子上的氧化,相繼切下二碳單位而降解的方式稱為β氧化(是在線粒體中進(jìn)行的)。

      脂肪酸β氧化前必須活化形成脂酰輔酶A,然后才能進(jìn)一步分解。

      在線粒體基質(zhì)中進(jìn)行的脂肪酸β-氧化包括氧化、水化、再氧化、硫解4步化學(xué)反應(yīng)。

      (1)氧化

      進(jìn)入線粒體的脂酰輔酶A被脂酰輔酶A脫氫酶催化,脫去α、β碳兩個碳原子上的氫,生成FADH2和烯脂酰輔酶A。

      2、水化

      3、再氧化

      (4)硫解

      三、脂肪酸的合成代謝 1胞漿合成---全程合成途徑 全程合成途徑是指從二碳單位開始的脂肪酸合成過程。2 酰基轉(zhuǎn)換

      合成過程的中間產(chǎn)物都連接在一個酰基載體蛋白(ACP)分子上,并與其—SH以共價鍵相連。

      第三節(jié) 磷脂代謝和固醇代謝

      二、固醇代謝

      1、膽固醇的合成---關(guān)鍵酶是羥甲基戊二酰CoA還原酶

      第四節(jié) 脂質(zhì)代謝在工業(yè)上的應(yīng)用

      一、脂質(zhì)代謝在食品工業(yè)中的應(yīng)用

      1、脂酶水解食品中的脂肪----影響食品的風(fēng)味

      脂酶作用于食品材料中的油脂,產(chǎn)生游離脂肪酸,后者很容易進(jìn)一步氧化而產(chǎn)生一系列短碳鏈的脂肪酸、脂肪醛等,從而影響食品的風(fēng)味。

      2、脂酶催化的酯交換—生產(chǎn)新產(chǎn)品的一種手段

      脂酶作用于油和脂肪時,同時發(fā)生甘油酯的水解和再合成反應(yīng),于是酰基在甘油酯分子間移動和發(fā)生酯交換反應(yīng)。

      酯交換反應(yīng)從廉價的原料生產(chǎn)有價值的可可奶油。第十章 重點

      1、解釋β-脂肪酸氧化

      2、脂肪被吸收的形態(tài)有哪三種?分別解釋之。

      第五篇:生化教案第九章 糖代謝

      第九章

      糖代謝 第一節(jié) 概述

      一、多糖及寡糖的降解

      1、胞外降解---核苷酶的水解方式

      ? α-淀粉酶 水解淀粉的α(1,4)糖苷鍵,產(chǎn)物為麥芽糖、麥芽三糖和α糊精酶或消化酶

      ? β淀粉酶 水解淀粉的α(1,4)糖苷鍵,從水解淀粉的非還原性末端殘基開始,依次切下兩個葡萄糖單位,產(chǎn)物為麥芽糖,作用于支鏈淀粉。

      ? γ淀粉酶水解淀粉的α(1,4)糖苷鍵和α(1,6)糖苷鍵,終產(chǎn)物均為葡萄糖。? R酶能特異性作用于淀粉的α(1,6)糖苷鍵,將支鏈淀粉的分支切下 ? 纖維素酶水解纖維素的β(1,4)糖苷鍵,產(chǎn)物為纖維二糖和葡萄糖。

      2、胞內(nèi)降解---糖原的磷酸解

      ? 磷酸解:糖原在細(xì)胞內(nèi)的降解稱為磷酸解,即加磷酸分解。? 細(xì)胞內(nèi)糖原降解需要脫支酶和糖原磷酸化酶的催化。? 脫支酶水解糖原的α(1,6)糖苷鍵,切下糖原分支

      ? 糖原磷酸化催化的反應(yīng)不需水而需要磷酸參與磷酸解作用,從糖原的非還原末端依次切下葡萄糖殘基,產(chǎn)物為1-磷酸葡萄糖和少一個葡萄糖殘基的糖原。?

      二、糖的吸收與轉(zhuǎn)運

      ?

      1、糖的吸收---單糖同Na離子的同向協(xié)同運輸

      ? 葡萄糖跨膜運輸所需要的能量來自細(xì)胞兩側(cè)Na離子濃度梯度,小腸上皮細(xì)胞能吸收葡萄糖等單糖。

      2、糖的轉(zhuǎn)運---血糖的來源與去路

      ? 血糖:血液中的糖稱為血糖 ? 4.4—6.7mmol/L為正常范圍、高于8.8mmol/L為高血糖、低于3.8mmol/L為低血糖。? 正常機體可通過肝糖原或肌糖原的合成或降解來維持血糖恒定。?

      三、糖的中間代謝概念

      ?

      1、中間代謝---糖在細(xì)胞內(nèi)的分解與合成

      ? 從小腸吸收的甘露糖、果糖、半乳糖、葡萄糖可在各種酶的催化下,轉(zhuǎn)化成6-磷酸葡萄糖。

      2、糖的分解代謝類型----需氧分解占主導(dǎo)地位(1)不需氧分解

      ? 分解不完全,產(chǎn)生能量少于糖的有氧分解;

      ? 糖類物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行無氧呼吸生成乳酸的過程稱為酵解。? 糖經(jīng)酵母菌無氧呼吸作用產(chǎn)生乙醇的過程稱為發(fā)酵。(2)需氧分解

      將糖在有氧存在下徹底分解成CO2和H2O,同時釋放出能量的過程稱為有氧氧化或有氧呼吸。

      糖的有氧氧化與無氧氧化的區(qū)別:有氧氧化是以氧作為最終受氫體;糖的無氧分解,是以中間產(chǎn)物丙酮酸為受氫體,在發(fā)酵過程中以乙醛為受氫體。有氧呼吸在糖的分解過程中占主導(dǎo)地位,產(chǎn)生能量較多。

      第二節(jié) 糖的分解代謝

      一、糖酵解(EMP)---糖的無氧分解

      發(fā)酵與酵解起始物質(zhì)都是葡萄糖,從葡萄糖到丙酮酸的生成,二者相同。發(fā)酵和酵解都在細(xì)胞漿中進(jìn)行。

      1、糖的裂解---糖酵解的第一階段是耗能的

      2、醛氧化成酸---糖酵解的第二階段是產(chǎn)能的

      3、丙酮酸的去向---有氧和無氧條件下轉(zhuǎn)變成不同產(chǎn)物(1)丙酮酸轉(zhuǎn)變?yōu)橐掖?/p>

      第一步:丙酮酸脫羧酶催化下,脫去羧基并產(chǎn)生乙醛。

      第二步:在醇脫氫酶催化下,由NADH+H提供氫,使乙醛還原為乙醇。(2)丙酮酸轉(zhuǎn)變?yōu)槿樗幔o氧條件下)(3)丙酮酸轉(zhuǎn)變?yōu)橐阴]o酶A

      在有氧存在的條件下,丙酮酸轉(zhuǎn)變?yōu)橐阴]o酶A,再進(jìn)入三羧酸循環(huán),被徹底氧化成CO2、H2O并釋放出能量。二、三羧酸循環(huán)(TCA)---糖的需氧分解

      3、生理意義-----糖的無氧分解和需氧分解的能量轉(zhuǎn)換效率(1)為機體提供能量

      經(jīng)計算,葡萄糖的產(chǎn)能效率是40%,比發(fā)酵高12%,比酵解高9%,所以,糖的有氧氧化時生物機體獲取能量的主要途徑。

      (2)糖的需氧代謝是物質(zhì)代謝的總樞紐 在糖、脂肪、蛋白質(zhì)代謝中的作用如下圖(3)草酰乙酸在TCA循環(huán)中的作用

      草酰乙酸的濃度影響TCA循環(huán)的速度,必需保持一定的濃度,草酰乙酸可由下列3種途徑生成。

      三、磷酸己糖途徑(HMS)---糖需氧分解的代謝旁路

      2、生理意義---產(chǎn)生的NADPH為重要的還原力 HMS和EMP都存在于細(xì)胞漿中。從圖9-8可見:

      每1分子6-磷酸葡萄糖進(jìn)入HMS循環(huán)一次,可產(chǎn)生3分子CO2,6分子NADPH和1分子3-P-甘油醛。2分子3-P-甘油醛經(jīng)過EMP逆行,又可合成1分子6-P酸葡萄糖,因此,1分子6-磷酸葡萄糖經(jīng)HMS完全氧化,需循環(huán)2次,可產(chǎn)生12分子NADPH。此外,NADPH也可通過穿梭作用進(jìn)入呼吸鏈進(jìn)行氧化磷酸化產(chǎn)生ATP,若以每分子NADPH產(chǎn)生3分子ATP計算,每分子6-磷酸葡萄糖經(jīng)HMS可產(chǎn)生36分子ATP。

      第三節(jié) 糖的合成代謝

      一、光合作用

      1、概念---光合作用是合成糖的主要途徑

      2、能量轉(zhuǎn)換---光合作用分兩個階段進(jìn)行

      光反應(yīng):利用光能合成ATP,還原NADP,并釋放氧氣。

      暗反應(yīng):利用光反應(yīng)產(chǎn)生的NADP和ATP,通過1,5-二磷酸核酮糖固定CO2,生成3-磷酸甘油酸,然后在多種酶作用下生成3-磷酸甘油醛,最后通過3-磷酸甘油醛轉(zhuǎn)變成葡萄糖。

      二、糖原合成

      人和動物體內(nèi)合成糖原的過程包括糖原生成作用和糖異生作用

      1、糖原生成作用---由葡萄糖合成糖原

      2、糖異生作用---由非糖物質(zhì)合成糖原

      在EMP中,由激酶催化的反應(yīng)是不可逆的,需其他酶的參與丙酮酸羧化支路

      在EMP中,由磷酸烯醇式丙酮酸生成丙酮酸是不可逆的,所以,在糖異生過程中,丙酮酸先轉(zhuǎn)化為草酰乙酸后,再轉(zhuǎn)化成磷酸烯醇式丙酮酸。如圖 糖異生作用的3種主要原料是乳酸、甘油和某些氨基酸。乳酸在乳酸脫氫酶催化下生成丙酮酸,經(jīng)EMP逆行合成糖 氨基酸通過多種方式轉(zhuǎn)變成EMP的中間產(chǎn)物,再生成糖。糖氧化與糖異生作用的關(guān)系如圖9-11

      第九章 糖代謝

      重點

      1、敘述磷酸己糖途徑(HMS)的生理意義

      2、糖的需氧代謝是物質(zhì)代謝的總樞紐? 3、1分子葡萄糖徹底氧化分解后產(chǎn)生的ATP數(shù)目是多少?ATP產(chǎn)生的部位是

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