第一篇：組織培養(yǎng)課程感想

植物組織培養(yǎng)（Plant tissue culture）廣義上是指無菌條件下，在特定的培養(yǎng)基上對離體的植物器官、組織、細胞和原生質(zhì)體甚至包括完整植株進行培養(yǎng)的技術(shù)。外植體： 愈傷組織：

一、植物組織的主要特征：（1）在培養(yǎng)容器中進行；

（2）無菌培養(yǎng)環(huán)境，排除了微生物如真菌、細菌以及害蟲等的侵入；（3）各種環(huán)境因子如營養(yǎng)因子、激素因子以及光照、溫度等物理因子處于人工控制之下，并可達到最適條件。

（4）通常打破了正常的植物發(fā)育過程和格局；

（5）隨著單細胞和原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展，對植物顯微結(jié)構(gòu)進行操作成為可能。

二、植物組織培養(yǎng)類型：根據(jù)不同分類的依據(jù)可以分為不同類型。

1、根據(jù)培養(yǎng)材料不同分為：

（1）完整植株培養(yǎng)（Plant Culture）：對幼苗和較大植株等的培養(yǎng)。

（2）胚胎培養(yǎng)（Embryo Culture）：包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培養(yǎng)。

（3）器官培養(yǎng)（Organ Culture）：包括離體根、莖、葉、果實、種子、花器官的培養(yǎng)。

（4）組織培養(yǎng)（Tissue Culture）：如分生組織、薄壁組織、輸導(dǎo)組織培養(yǎng)。

（5）細胞培養(yǎng)（Cell Culture）：指對單細胞或較小的細胞團進行培養(yǎng)。

（6）原生質(zhì)體培養(yǎng)（Protoplast Culture）：指對去掉細胞壁后所獲得的原生質(zhì)體進行培養(yǎng)。

三．植物組培的應(yīng)用 1.植物離體快繁。2.無病毒苗木培養(yǎng)。

3.培育新品種或創(chuàng)制新物種。4.次生代謝物生產(chǎn)。

5.植物種質(zhì)資源的離體保存。6.人工種子。

1.）實驗室包括：準備室，無菌操作室，培養(yǎng)室，溫室。2.）器具的滅菌：

1、器具滅菌：培養(yǎng)皿、解剖刀、鑷子等用品。

（1）干熱滅菌：鋁箔包好后，放于恒溫干燥箱內(nèi)，150 ℃保溫2小時，成本較高。

（2）高壓蒸汽滅菌：高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)120 ℃ 15－20分鐘。

（3）灼燒滅菌：接種時，解剖刀及鑷子等浸入95％乙醇，然后取出在酒精燈火焰上灼燒殺菌。

2、培養(yǎng)基滅菌：采用高壓蒸汽滅菌。120℃ 15－20分鐘。培養(yǎng)基體積越大，滅菌時間越長。

3、不耐高溫化合物：采用過濾滅菌，如IAA等。

4、外植體的表面滅菌： 采用70－75％乙醇（10-30秒）、有效氯1％的次氯酸鈉（5-30分鐘）、0.1－0.2%的氯化汞（2-15分鐘）等。殺菌劑中加入幾滴吐溫－20或80（Tween－20或80）效果較好。3）無菌操作：

1、保持接種室的無污染環(huán)境，定期熏蒸或噴霧處理，進行消毒。接種前打開超凈工作臺及紫外燈照射20-30分鐘，關(guān)閉紫外等燈后使氣體散出后開始操作。

2、保持超凈工作臺的潔凈：接種前用70％乙醇擦拭臺面或用噴壺噴霧，操作前，將手和手臂用70％乙醇消毒，所需試驗用品用乙醇擦拭后放入超凈工作臺。

3、點燃酒精燈，進行操作，接種材料前后，灼燒瓶口，工具要灼燒徹底，防止交叉污染。

4、保持培養(yǎng)室的潔凈，發(fā)現(xiàn)污染及時挑出，并在滅菌后清洗，以減少污染源。

5、操作中穿工作服、戴口罩、工作帽，出入接種室換拖鞋以保持接種室的潔凈。4）通常植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基包括以下六大類成分，即礦質(zhì)營養(yǎng)、可以把植物必需元素分為大量元素和微量元素。國際植物生理學(xué)會建議將植物所需濃度大于0.5 mmol/l的的元素稱為大量元素。低于0.5 mmol/l的元素稱為微量元素。根據(jù)此規(guī)則大量元素種類包括C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S，微量元素包括Fe、B、Mn、Zn、Mo、Cu、Co、Cl等 有機成分、主要包括各種維生素和氨基酸，如硫胺素（VB1）、煙酸（VB3）、吡哆醇（VB6）、泛酸鈣（VB5）、生物素、鈷胺素（VB12）、葉酸等以及甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰氨、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰氨、丙氨酸等。有時添加水解乳蛋白或水解酪蛋白，為牛乳經(jīng)酶法加工的水解產(chǎn)物，含有20種氨基酸的混合物，用量10－1000mg/L, 通常用于原生質(zhì)體等培養(yǎng)。此外肌醇是另外一種重要的有機成分，又叫環(huán)己六醇，在糖類的轉(zhuǎn)化中起重要作用，此外還參與磷脂代謝及維持離子平衡等生理作用。植物生長調(diào)節(jié)劑、常用的植物激素及生長調(diào)節(jié)物涉及五大類植物激素：

1、生長素類：IAA、IBA、NAA、2，4-D

2、細胞分裂類：6-BA、KT（Kin）、ZT、2ip

3、赤霉素類：GA3、GA4、GA7

4、脫落酸：ABA

5、乙烯：ETH 碳源、碳源主要為細胞提供合成新化合物的骨架，為細胞的呼吸代謝提供底物與能源，此外還能維持一定的滲透壓。常用的碳源主要是蔗糖，使用濃度在2－5％，此外果糖、葡萄糖、麥芽糖、山梨糖、甘露糖及可溶性淀粉等也常用于植物組織培養(yǎng)。糖濃度高低直接影響形態(tài)建成。

瓊脂以及其他附加物等。瓊脂作為固化劑用于組織培養(yǎng)中，起支持植物的作用，不提供營養(yǎng)，為海藻中提取的一種高分子化合物，僅溶于熱水（90 oC以上），成為凝膠，冷卻后（40 oC以下）即凝固為凝膠。瓊脂的用量通常在4～10g/L.瓊脂是組織培養(yǎng)培養(yǎng)基中主要的成本支出，約占80％。

5）培養(yǎng)基的具體步驟：取出母液并按順序放好，將有機營養(yǎng)物質(zhì)貯液融化待用；取一只燒杯，放入三分之一左右純水，將母液按順序加入并不斷攪拌；加入植物生長調(diào)節(jié)劑和蔗糖，待糖溶解后定容；將定容的培養(yǎng)基倒入容器中，加入瓊脂，并加熱視其溶解；調(diào)ph；分裝封瓶；滅菌；冷卻取出待用。

1）植物細胞的全能性（Totipotency）即植物體細胞在適當(dāng)?shù)臈l件下，具有不斷分裂和繁殖、發(fā)育成完整植株的能力。

2）分化（differentiation）：是指植物體各個部分出現(xiàn)異質(zhì)性的現(xiàn)象，體現(xiàn)在細胞分化、組織分化、器官分化三個水平上。

3）脫分化（Dedifferentiation）：也稱去分化，指離體條件下生長的細胞、組織或器官經(jīng)過細胞分裂或不分裂逐漸失去原來的結(jié)構(gòu)和功能而恢復(fù)分生狀態(tài)，形成無組織結(jié)構(gòu)的細胞團或愈傷組織或不分化細胞的過程。

4）植物胚胎發(fā)生：植物離體培養(yǎng)的細胞、組織、器官產(chǎn)生類似胚的結(jié)構(gòu)，其形成也經(jīng)歷一個類似合子胚胎發(fā)生和發(fā)育過程，這種現(xiàn)象稱為植物體細胞胚胎發(fā)生，形成的類似胚的結(jié)構(gòu)稱為體細胞胚或胚狀體。1）植物離體培養(yǎng)中再生植株有哪些途徑？

根、莖或芽器官的發(fā)生可使植株重建。先誘導(dǎo)分化出芽，后形成根較好。（還有先根后芽，先愈傷再根芽）離體培養(yǎng)中再生植株的主要途徑有：

器官發(fā)生；器官型（直接由外植體的細胞形成器官原基），器官發(fā)生型（外植體先形成愈傷組織，再產(chǎn)生器官原基）

胚胎發(fā)生（與合子胚的發(fā)生過程類似，體細胞胚在形態(tài)和生化水平上和合子胚都相似。）2）愈傷組織是如何形成與生長的？

在細胞脫分化過程中，大多數(shù)情況下形成愈傷組織。愈傷組織的細胞往往是異質(zhì)性的，無明顯極性，其形成過程可分為誘導(dǎo)期、分裂期和分化期。誘導(dǎo)期（起動期）：是細胞準備分裂的時期。細胞大小幾不變，內(nèi)部發(fā)生生理生化變化，迅速合成蛋白質(zhì)和核酸。

分裂期：外層細胞分裂，中間細胞常不分裂，形成小芯。細胞分裂快，結(jié)構(gòu)疏松，缺少結(jié)構(gòu)，淺而透明。在原培養(yǎng)基上，細胞必分化，及時轉(zhuǎn)移，其可無限制地進行細胞分裂，維持不分化狀態(tài)。分化期：細胞在形態(tài)和生理功能上的分化，出現(xiàn)形態(tài)和功能各異的細胞。

生長：誘導(dǎo)期后，外植體外層細胞分裂，在組織受傷表面形成一層愈傷組織，細胞數(shù)目迅速增多，表層細胞平均重量下降，體積變??；降低溫度，可以使細胞生長速度減慢，平均大小可增加。質(zhì)地類型：松脆和致密兩種。高濃度生長素，可使Callus變得松脆；高濃度細胞分裂素，則可使致密。生理生化變化：次生物質(zhì)合成能力變化，對激素的需求變化等。3）植物體細胞胚胎發(fā)生有哪些途徑？

直接途徑：指從外植體某些部位的胚性細胞直接誘導(dǎo)分化出體細胞胚胎，如子葉、花序、珠心等外植體。間接途徑: 外植體先脫分化形成愈傷組織，再由愈傷組織的某些細胞重新“決定”為胚性細胞，進而分化出體細胞胚胎。多數(shù)體細胞胚胎通過該途徑形成的。通常包括2個階段：

（1）胚胎發(fā)生叢（Embryogenic clump）EC是由液泡小、細胞質(zhì)濃的小細胞構(gòu)成。（2）胚狀體的發(fā)育。將EC轉(zhuǎn)入降低或除去生長素、降低還原氮的培養(yǎng)基上培養(yǎng)即可。

4）影響植物離體形態(tài)發(fā)生的因素有哪些？

一、植物種類和基因型

1、植物種類不同難易程度不同；被子植物比裸子植物容易。

2、同一物種不同基因型間存在較大差別。

二、培養(yǎng)材料的生理狀態(tài)

1、發(fā)育年齡：一般幼態(tài)比老態(tài)組織形態(tài)發(fā)生能力高；

2、培養(yǎng)器官或組織類型：細胞分裂旺盛的器官較好；

3、培養(yǎng)時間和細胞倍性：一般取處于旺盛生長期的愈傷來誘導(dǎo)器官形成。

三、培養(yǎng)基

1、營養(yǎng)成分

一般認為，培養(yǎng)基中的銨態(tài)氮和K+有利于胚狀體形成，提高無機磷的含量可促進器官發(fā)生。

莖尖培養(yǎng)和芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基主要是MS及其修改的培養(yǎng)和B5培養(yǎng)基。

莖尖培養(yǎng)的起始培養(yǎng)基和芽增殖的培養(yǎng)基往往是不同。碳水化合物種類及濃度對胚狀體發(fā)育有重要作用。缺糖或低糖無法形成胚狀體。

2.植物激素及生長調(diào)節(jié)劑（起主導(dǎo)作用，通過影響內(nèi)源激素的平衡起作用）

（1）生長素：促進外植體生長、生根，并與細胞分裂素共同誘導(dǎo)不定芽分化及側(cè)芽萌發(fā)與生長。2，4 – D誘導(dǎo)體細胞胚胎發(fā)生。

（2）細胞分裂素：促進分化和芽形成，抑制根發(fā)育及衰老。

（3）赤霉素：GA3促進莖的伸長，打破休眠，對芽的誘導(dǎo)和形成有促進作用。（4）乙烯：對芽的誘導(dǎo)和形成有促進或抑制作用

（5）脫落酸：對體胚的發(fā)生及成熟很重要，可增加胚性愈傷組織的形成和體胚發(fā)生。

3、培養(yǎng)基的性質(zhì)

（1）愈傷組織誘導(dǎo)：在固體培養(yǎng)基上（胡蘿卜、石刁柏）。（2）細胞和胚狀體的誘導(dǎo)：在液體培養(yǎng)基上。

（3）誘導(dǎo)胚狀體或早期胚狀體培養(yǎng)：滲透壓，要求高.四、培養(yǎng)條件

1、光照培養(yǎng)條件下，光照的作用是影響細胞的狀態(tài)，而不是光合作用。連續(xù)光照有利于培養(yǎng)細胞維管組織的形成。晝夜光照有利于極性的建立及形態(tài)發(fā)生。光強一般要求1000-5000lx。植物間有所差別。光照周期為10~16h/日。不同波長光質(zhì)作用不同，藍光有利于芽的分化，紅光有利于根系發(fā)生。

2、溫度：大多數(shù)培養(yǎng)溫度為25±2℃.花藥培養(yǎng)低溫或高溫預(yù)備處理。

3、氣體：氧氣、二氧化碳以及乙烯等氣體的濃度和通氣狀況。

5）、體細胞胚胎發(fā)生的兩個特點：雙極性；母體組織或外植體的維管束系統(tǒng)無直接聯(lián)系，處于較為孤立的狀態(tài)，即存在生理隔離。

第二篇：學(xué)完《藥用植物組織培養(yǎng)》課程后的感想

學(xué)完《藥用植物組織培養(yǎng)》課程后的感想

班級：中草藥07

姓名：侯鋒

學(xué)號：

070901110225

摘要：高等植物離體組織培養(yǎng)是21世紀的重要研究內(nèi)容,它具有繁殖速度快、繁殖系數(shù)大、可獲得無毒苗、可進行周年工廠化生產(chǎn)等特點，是植物快速種植的一種手段。半夏的繁殖方式主要有種子繁殖、株芽繁殖和塊莖繁殖。由于這種繁殖方式慢，因此我們要探索一種適合半夏的快繁技術(shù)。關(guān)鍵詞：半夏

快繁技術(shù)

微球莖

實驗設(shè)計

Abstract: Higher plant tissue culture is an important content of the 21st century, it is capable of reproducing faster, propagation coefficient, can obtain non-toxic seedlings, can undertake anniversary factory production, etc, it is a kind of plant grow fast.“There are three ways of reproduction reproduce, plant seeds breeding and tubers.Shoot Due to the breeding way slowly, so we will explore a ”rapid propagation technique.Keywords: Pinellia ternta(Thunb.)Breit.Rapid propagation technique

tubemicro-bulbodium, TMB

Experimental design Content：高等植物離體組織培養(yǎng)是21世紀的重要研究內(nèi)容,它具有繁殖速度快、繁殖系數(shù)大、可獲得無毒苗、可進行周年工廠化生產(chǎn)等特點，是植物快速種植的一種手段。因此，這一方法在保護珍稀瀕危藥用植物資源上具有重要的意義和作用。它為中草藥保護與開發(fā)上起到了促進作用，其優(yōu)點表現(xiàn)在于：容易控制生長環(huán)境條件，且不受季節(jié)、區(qū)域的限制，便于大量繁殖藥用植物和工業(yè)化生產(chǎn)，可以消除植株的病毒感染，培養(yǎng)無病毒植株等[11]。因此，組織培養(yǎng)是一種擴大藥用植物資源，提高其產(chǎn)量和保護植物資源的一種新方法。

因此我們可以通過組織培養(yǎng)來快速繁殖優(yōu)良品種、優(yōu)良類型和珍貴種質(zhì)資源。脫除各類病毒，幼化復(fù)壯植物。有效的培養(yǎng)新品種，創(chuàng)造新型植物種類。保存種質(zhì)資源，避免基因的丟失和毀滅。提供加工原材料，生產(chǎn)次生代謝物。組織培養(yǎng)除了可以快速繁殖和生產(chǎn)藥用成分外，還具有下屬意義和用途[11]：

（1）可用于繁殖和保存去病原菌的植物，從而達到復(fù)壯原種，提高品質(zhì)和產(chǎn)量的效果。（2）加速引種與優(yōu)良品種的推廣進程，使一個新的栽培種能在短期內(nèi)適應(yīng)生產(chǎn)需要。（3）使原來不能進行無性繁殖的植物成為能進行無性繁殖的植物。

（4）能繁殖在自然條件下無法用種子繁殖與維持的雜種一代，以及三倍體、多倍體植物。（5）通過胚培養(yǎng)取得在自然條件下易敗育的雜種胚的愈傷組織或胚，然后進行大量繁殖。目前，我國科學(xué)工作者在植物組織培養(yǎng)方面做了大量的工作，據(jù)不完全統(tǒng)計，用組織培養(yǎng)形成試管苗獲得成功的藥用植物約有200種，如當(dāng)歸、白及、紫背天葵、黨參、菊花、山楂、延胡索、浙貝母等。組織培養(yǎng)的材料涉及幼小植株、器官、組織或愈傷組織、細胞、原生質(zhì)體等[11]。

正是有了這些寶貴的參考資料，我們就可以借鑒這些材料，通過組織培養(yǎng)的手段解決許多在中草藥栽培上的難題，比如種源問題。比如一些特殊的中藥材（例：天麻）的栽培問題，一些優(yōu)株的繁殖問題，因此組織培養(yǎng)走進中草藥發(fā)展領(lǐng)域是非常可觀的。

下面我們就繁殖方面以半夏為例，說說我自己對組織培養(yǎng)在半夏快繁技術(shù)上的一些想法（僅作參考）： 半夏： Pinellia ternta(Thunb.)Breit.[12]為天南星科半夏屬多年生草本植物，以塊莖人藥，是我國重要的傳統(tǒng)中藥材。由于長期過度采挖，其野生資源已近枯竭，遠不能滿足市場需求，現(xiàn)已進行人工種植。半夏人工種植中通常用塊莖作生產(chǎn)用種，產(chǎn)量品質(zhì)逐年下降[2]。而且種源退化嚴重，因此大量的人在尋求半夏的另一種繁殖方式。據(jù)報道，2009年11月張明生、李花通過組織培養(yǎng)得到半夏的人工種子[1]。但是人工種子在實際操作過程中卻有不少困難，而且人工種子還遠不能像天然種子那樣方便、實用和穩(wěn)定，要真正進人商業(yè)市場并與自然種子競爭，還有許多難關(guān)，如制備的成本應(yīng)逐漸降低，手工操作應(yīng)逐漸減少，培養(yǎng)時間要逐漸縮短，包埋等材料需不斷更新、改造，即培養(yǎng)及制作過程的自動化及機械化程度均應(yīng)不斷加強[3]。

因此我們另找途徑解決這一問題，以達到快速繁殖。既然細胞可以培養(yǎng)出完整的植株，那么就可以培養(yǎng)出它的球莖，所以我們進行了相關(guān)資料的查閱。2003年.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所報適了一種魔芋微球莖的繁育技術(shù)[6]。2006年6月謝慶華等對魔芋試管氣生球莖進行了誘導(dǎo)研究[5]；2008年8月吳金平等對魔芋微球莖進行了栽培試驗研究[4]等等。然半夏的組培苗栽培技術(shù)已有報到，但卻未見關(guān)于半夏微球莖誘導(dǎo)和栽培方面的報道。所以本文借鑒魔芋微球莖的誘導(dǎo)技術(shù)，通過半夏和魔芋同屬一個科，且生活習(xí)性相似的原理，對半夏微球莖的誘導(dǎo)實驗做出以下設(shè)想。

首先我先解釋微球莖的概念：試管微球莖是通過對培養(yǎng)基配方及培養(yǎng)條件的調(diào)整，在培養(yǎng)瓶內(nèi)誘導(dǎo)出與半夏球莖外形、結(jié)構(gòu)類似的培養(yǎng)物，在培養(yǎng)基及大田中均能較好的發(fā)育為完整的半夏植株，將這種培養(yǎng)物稱為試管微球莖。

1.微球莖形成的條件

在微球莖的形成過程中據(jù)王玲[9]等報道與培養(yǎng)基的生長調(diào)節(jié)劑和培養(yǎng)光、溫條件有著密切的關(guān)系，愈傷組織誘導(dǎo)光照時間為4 h/d,愈傷組織增殖光照時間8 h,微球莖誘導(dǎo)光照時間10 h,葉柄切段生長、誘導(dǎo)光照時間8 h。細胞分裂素6-BA在組培中對芽的誘導(dǎo)有著積極作用,但對微球莖的誘導(dǎo)卻有抑制作用;多效唑PP333在試管微球莖的誘導(dǎo)中對NAA的作用起著協(xié)同和增效的作用,促進微球莖形成、生長, NAA和PP333的最佳配比為NAA 1 mg/L+PP333 1 mg/L;形成試管微球莖的最佳光溫條件是:光照1 500~2 000 lx、溫度25~30℃[8]。

2.微球莖形成的過程

將葉片切條插入該培養(yǎng)基中，側(cè)脈或中脈與培養(yǎng)基接觸的部位膨大形成愈傷，隨著愈傷的膨大，在愈傷表面會形成不定芽，隨后在形成不定芽的部位，隨不定芽生長會形成一個凹陷，凹陷部位細胞分裂后向四周擴展將愈傷包裹，形成在形態(tài)上與半夏球莖外形一致的小球莖，試管微球莖誘導(dǎo)需要3周的時間，此時形成的微球莖直徑在1cm左右，微球莖的周皮色澤為白色泛綠，并在葉柄基部的莖上長出5~8條白色帶有根毛的不定根，4周后微球莖的周皮色澤為綠色轉(zhuǎn)褐色，收獲時將不定芽切出，即得到試管微球莖。

3.微球莖的缺點

3.1試管微球莖作為組織培養(yǎng)的產(chǎn)物由于其自身的特殊性,容易失水而影響整體的萌發(fā)能力[7]。3.2微球莖的組織結(jié)較為構(gòu)嫩弱,周皮較薄,在儲藏、運輸、栽培過程中易脫水、損傷、病原菌感染等,導(dǎo)致半夏規(guī)模化種植難于推廣[10]。

雖然微球莖有一定的缺點，但是這并不影響我們對它的開放與利用，正所謂利大于弊也。因此該技術(shù)還是可以廣泛應(yīng)用于半夏的種質(zhì)繁殖、物種保存方面。參考文獻：

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第三篇：關(guān)于植物組織培養(yǎng)技術(shù)感想

關(guān)于植物組織培養(yǎng)技術(shù)的感想

植物組織培養(yǎng)俗稱植物克隆，是當(dāng)今國際農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的一項高新植物育苗技術(shù)，是在無菌條件下，將植物器官、組織、花藥、體細胞甚至原生質(zhì)體等外植體接種到人工配制的培養(yǎng)基上培育成植株的技術(shù)。研究人員可以通過研究外植體其在不受植物體其他部分干擾的條件下的生長和分化規(guī)律，另一方面，研究植物體的器官、組織和細胞在改變培養(yǎng)條件，包括培養(yǎng)基的配方、光照和培養(yǎng)溫度等的生長、分化和發(fā)育規(guī)律，從而解決植物形態(tài)建成中的實際問題，為農(nóng)林、醫(yī)學(xué)等生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)及實踐指導(dǎo)。

一、植物組織培養(yǎng)的原理

植物細胞的全能性是指植物體的任何一個細胞都具有生長分化成為一個完整植株的能力，整個過程包括細胞的脫分化和再分化過程。植物組織培養(yǎng)是利用植物細胞全能性，將其從植物體中分離出來，這一過程稱細胞脫分化，然后在一定的培養(yǎng)條件下經(jīng)再分化，最后形成完整的植株的過程。

二、植物組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)條件

植物組織培養(yǎng)的技術(shù)條件主要包括培養(yǎng)基的配制、無菌條件和培養(yǎng)條件等。

（一）培養(yǎng)基的配制

植物組織培養(yǎng)中一個關(guān)鍵的步驟。對組織培養(yǎng)的外植體生長而言，培養(yǎng)基的組分是一個決定性的因素，不同的植物材料要求不同的培養(yǎng)基，適于誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基不一定適于器官分化，適于固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基不一定適于液體培養(yǎng)，因此要想獲得成功，必須精心選擇適宜的培養(yǎng)基。根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)，可將植物組織培養(yǎng)分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)。不同的外植體、不同的培養(yǎng)方法、不同的培養(yǎng)目的等，都要求采用不同的培養(yǎng)基。

一般來說植物體對土壤的pH值有一定的要求，所以外植體培養(yǎng)基也不例外。目前，在植物組織培養(yǎng)上常用的培養(yǎng)基有十幾種，其主要成分是大致如下：首先，培養(yǎng)基中含有大量的水分，可以滿足外植體生長對水分的需要。

其次，培養(yǎng)基中的礦質(zhì)元素包括植物必需的大量礦質(zhì)元素N、P、K、Ca、Mg、S和微量元素Fe、Mn、B、Cu、Zn、Mo、Cl以及非必需的Na等。糖除了給外植體提供碳源外，還可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透勢。碳源一般采用蔗糖，少量采用葡萄糖，濃度各有不同。

植物生長素和細胞分裂素要根據(jù)培養(yǎng)的目的適當(dāng)選用?？刹捎肐AA、IBA和NAA、KT、6-BA、ZT等。在誘導(dǎo)根和芽的等不同分化時段，還需根據(jù)要求調(diào)整培養(yǎng)基養(yǎng)分的比值。維生素B(硫胺素)是必需的，而煙酸、B16雖屬于不必需，但對生長有促進作用，所以一般也添加到培養(yǎng)基中。有些培養(yǎng)基中還包括氨基酸、水解酪蛋白、酵母汁、椰子乳等有機附加物，以促進細胞的分化。

（二）無菌條件

根據(jù)前面的配制可知，由于營養(yǎng)基的營養(yǎng)十分豐富，微生物極易滋生而造成污染，因此，在植物組織培養(yǎng)的整個過程中都必須保持嚴格的無菌條件。所以消毒顯得重要。外植體的消毒通常采用氯化汞、過氧化氫、次氯酸鈣、次氯酸鈉或70%的酒精等，消毒后需用無菌水充分沖洗。用具必須進行高溫高壓滅菌。培養(yǎng)室要盡量保持無菌狀態(tài)，定期用紫外燈照射和用殺菌劑熏蒸殺菌。

(三)培養(yǎng)條件

自然界中的植物體所需的光、溫、水、氣，植物組織培養(yǎng)時也同樣所需要。水分和氧氣條件一般容易得到滿足，而植物組織培養(yǎng)條件可通過人為控制光照和溫度，溫度一般控制在25~28℃之間，有的還要求有晝夜溫差，主要通過控制光強和光周期進行調(diào)節(jié)。人工光照一般采用日光燈，也可以透光的玻璃培養(yǎng)室利用自然光照。

三、植物組織培養(yǎng)的優(yōu)缺點

（一）植物組織培養(yǎng)技術(shù)優(yōu)點

植物可以不受生長季節(jié)限制地繁殖；不攜帶病毒，防止植物病毒的危害，極大的提高了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)效率；培養(yǎng)周期短，短時間內(nèi)大批量的培育出所需要的植物新個體；可用組培中的愈傷組織制取特殊的生化制品；可短時間大量繁殖，用于拯救瀕危植物；可誘導(dǎo)之分化成需要的器官，如根和芽；解決有些植物產(chǎn)種子少或無的難題，如將香蕉進行組培得到人工種以方便移種。

（二）植物組織培養(yǎng)的缺點

為了滿足人們生活需要，吃飯問題已經(jīng)與組培快繁密不可分了。由于培養(yǎng)基幾乎完全屬于人為調(diào)配獲得的，這就導(dǎo)致一個問題，調(diào)控的人是否理解植物的特性、是否熟悉培養(yǎng)基的理論和植物生理、是否有足夠的經(jīng)驗來駕馭組織培養(yǎng)技術(shù)，這幾點都決定了組培育苗的品質(zhì)。如果嚴格把關(guān)組培過程的話，那么組織培養(yǎng)或快速繁殖所獲得的苗，跟葉插、砍頭苗完全一樣，能最大程度的保留了植物的完整基因組。這是組培快繁的最大優(yōu)勢，這也就決定了目前重要的作物、名貴花卉的繁殖和保存也都是組培快繁的途徑實現(xiàn)的。

轉(zhuǎn)基因植物食品對我們來說已經(jīng)是一個公開的話題，也是借助組培快繁平臺來完成，我們生活中至少接觸30種轉(zhuǎn)基因植物的衍生產(chǎn)品。資料顯示這些衍生產(chǎn)品的缺點也比較明顯：1）表現(xiàn)為“硬化”不足，即從實驗室進入溫室后進行馴化栽培時間不夠，行內(nèi)稱作“硬化”。2）激素殘留明顯，或者對激素的敏感性變化，少部分苗會在后期發(fā)根后呈現(xiàn)出一些殘留激素效應(yīng)，這種效應(yīng)不會超過一年，表現(xiàn)為容易出側(cè)芽、大量畸形根、生長周期紊亂、開花增多等。但是這種情況并不是組培快繁苗所特有，用激素誘導(dǎo)的葉插和砍頭苗也會出現(xiàn)這種癥狀，甚至更夸張！因此這一點并不是鑒別組培苗的根本。3）對有性繁殖的影響，由于組培快繁獲得的苗都是小苗，需要經(jīng)過硬化和長期的溫室栽培才可能開花，所以一般存在對有性繁殖無影響。4）根原基異常，由于激素環(huán)境下會對導(dǎo)致根原基維管束的排列紊亂，這就導(dǎo)致了出根可能會受到抑制，正常的根無法順利萌發(fā)。

四、植物組織培養(yǎng)在生產(chǎn)實踐上的應(yīng)用

（一）植物體的無性快速繁殖及脫毒

用組織培養(yǎng)技術(shù)進行植物的無性快速繁殖，已廣泛應(yīng)用于一些花卉、果樹等園藝作物、農(nóng)作物以及林木的育苗。如廣東、廣西和海南島香蕉的種植已大多采用試管苗，甘蔗和蘭花試管苗也已大量應(yīng)用于生產(chǎn)，柑橘、菠蘿、草莓、桉樹以及其他許多花卉等也利用試管苗進行栽培。

受病毒感染的馬鈴薯植株，除了莖尖生長錐外，其他部位往往都帶有病毒。因此，繼續(xù)用塊莖作繁殖材料，必將導(dǎo)致后代植株染病。若利用莖尖生長錐作外植體進行無性快速繁殖，所生產(chǎn)出的幼苗將不帶病毒，從而達到脫毒的目的，可解決馬鈴薯品種的退化問題。利用組織培養(yǎng)技術(shù)進行無性快速繁殖具有許多優(yōu)缺點，在實際生產(chǎn)中應(yīng)該注意揚長避短，本著良心去做事，最好是建立相應(yīng)的法規(guī)并嚴格執(zhí)行。

（二）花粉培養(yǎng)和單倍體育種

利用花粉進行組織培養(yǎng)可以獲得單倍體植株。進行單倍體育種，可以加速育種的進程并可獲得純系。我國已培育出10多種花粉植株，如水稻、小麥、大黑麥、小黑麥、玉米、甜菜、茄子、煙草、辣椒、楊樹和橡膠樹等，其中小麥“花培一號”、煙草“單育一號”等優(yōu)良品種已廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)。

（三）人工種子

將植物組織培養(yǎng)中產(chǎn)生的體細胞胚包裹在含有養(yǎng)分的膠囊內(nèi)，可像種子一樣直接播種到大田用于生產(chǎn)，即所謂的人工種子。天然種子中的胚是合子胚，而人工種子中的胚是體胚，胚乳和種皮也是人工的。目前，已有胡蘿卜、芹菜、苜蓿、棉花、玉米、水稻、橡膠樹等幾十種植物的人工種子試種成功，但成本相對較高，美國己大規(guī)模生產(chǎn)樹木的人工種子。

（四）原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細胞雜交

采用酶法去除細胞壁的原生質(zhì)體培養(yǎng)，不僅是研究細胞生命活動機理的良好體系之一，還可以通過原生質(zhì)體培養(yǎng)開展原生質(zhì)體融合與體細胞雜交，獲得新品系、新品種。從理論上講，細胞雜交比有性雜交可得到更多的不同類型。

五、總結(jié)

目前，植物組培方式以固體培養(yǎng)基培養(yǎng)為主，液體培養(yǎng)基培養(yǎng)由于具有物質(zhì)交換快，生長速度快，產(chǎn)生的代謝物質(zhì)不會在組織周圍積累等優(yōu)點，值得大力研究與推廣。同時要有計劃、有步驟地引進先進的植物組培苗生產(chǎn)配套設(shè)施，建立健全培養(yǎng)室組培快繁與溫室栽培相配套的組培苗生產(chǎn)體系，確保培育出高質(zhì)量的商品化組培苗。

總之，植物組織培養(yǎng)技術(shù)仍處于發(fā)展階段，還存在許多問題，其潛力也沒有得到充分發(fā)揮，許多機理有待深入探索，相信但隨著科技的進步和社會的發(fā)展，問題可以逐步得以解決。希望在不久的將來，植物組織培養(yǎng)技術(shù)能夠我國開發(fā)西部、建設(shè)森林城市、綠化山川、防風(fēng)固沙、退耕還林、以及調(diào)整農(nóng)村產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)中發(fā)揮巨大作用，該項技術(shù)將會在我國甚至全世界將發(fā)揮舉足輕重的作用。

第四篇：課程感想（范文模版）

課程感想

陳瑜

1205030011 這門課我已經(jīng)上了兩次了，雖然是一樣的內(nèi)容，但是第一次的教學(xué)和學(xué)習(xí)跟第二次的教學(xué)是不同的感覺，它有種升華和熟練的準備。

首先是感謝，感謝師兄師姐的引導(dǎo)與培訓(xùn)，感謝他們的這十五周來的全情投入，感謝他們的認真準備和有效引導(dǎo)，讓我們真正投入其中，樂在其中，體驗其中，感悟其中。

第一接觸了這門課程的時候，自己還是懵懵懂懂的聽得一知半解，一是自己對有些內(nèi)容不感興趣，二是自己的專注度不夠高，導(dǎo)致對于這門課程沒一種自己的理解。課下也理所應(yīng)當(dāng)?shù)谋容^偷懶沒有認真的回憶上課的內(nèi)容，畢竟是學(xué)生自主課堂的內(nèi)容。但是課程慢慢的上了安排，自己也有在其中慢慢學(xué)到東西。

在編輯部授課的時候，校對對于一本雜志來說是很重要的，而我真的學(xué)到了怎樣用符號去改改病句，因為我是文院的，所以對我來說是很有用的一個知識。還有學(xué)到了校對的方法，原來簡簡單單的辦公軟件還可以用來校對啊，真的是學(xué)到了實用知識。感謝他們沒有藏私，而是拿出來跟大家分享。雖然授課的時間很短，但是我覺得他們是有用心去準備的，ppt也好，在教室上的講課雖然不是真的老是，但是他們上去講課的時候是閃著教師的光環(huán)的。

作為谷風(fēng)的一員。作為設(shè)計部的一員，最喜歡的應(yīng)該就是在設(shè)計部的部長上去講課的時候了，她在講臺上教授大家怎樣用ID軟件去排版，把一堆死氣沉沉的文字，用漂亮的排版方法排列的整整齊齊，配上文字和圖片，讓他們搭配得恰到好處，真是一種制造美的享受，也是一種技術(shù)人員的驕傲。在課堂上，看著他們學(xué)習(xí)著排版的過程，雖然笨拙，但是大家都很投入。兩節(jié)課的學(xué)習(xí)中，大家都基本掌握了排版的基礎(chǔ)要領(lǐng)，大家也對雜志的制造過程也更加明了。大家都是因為喜愛雜志所以才選擇聚在一起，決心要辦一本一流的雜志，所以各部門的工作無論清閑還是忙碌，但是大家心里應(yīng)該對這本雜志是具有責(zé)任感的吧，所以不會敷衍了之，不會抱著敷衍的態(tài)度去對待它...所以我愿意去上這門課，它是與雜志息息相關(guān)的一門課，從開始時的介紹雜志，到教授排版的過程，都是一種負責(zé)的態(tài)度。

第五篇：如何寫課程感想

生涯規(guī)劃那些事

要想有撥千斤之力，你至少要有八百斤——這是我聽完這學(xué)期的課后最大的一個感想。無論是IBM , Intel , 微軟還是google，他們之所以能夠在一段時期內(nèi)成為計算機某一領(lǐng)域的霸主，機遇或者其他的一些因素或許是一部分的原因，但最重要的還是他們擁有與霸主這一地位相符和的實力。跟他們同時期的公司都享受著同樣的機遇，但最后登頂?shù)膮s是他們，這不是單純的用“運氣”能夠解釋的。

所以我覺得要說是生涯規(guī)劃的話，歸結(jié)起來就是一點——你要準備干多大的事，就要先要讓自己具備多強的能力。不要總是企圖用自己的五兩撥千斤，撥動了那是你這次運氣好，那要撥的時候出點什么意外，那絕對是重創(chuàng)。這并不是說不允許失敗，只是你失敗所跌出的窟窿必須要在你所能承受的范圍之內(nèi)。并不是每個人都能像史玉柱那樣背負幾千萬的債務(wù)仍然能打個漂亮的翻身仗，因為不是每個人都有他那種魄力和定力。所以別人在享受鎂光燈的時候，不要嫉妒，那是別人的能力。當(dāng)你成長為廣告《1984》中那個向屏幕擲錘子的人時，鎂光燈也是你的了！

另外我個人認為成功人士非常突出的一點特質(zhì)是非凡的毅力和執(zhí)行力。很多時候我們過多的強調(diào)了創(chuàng)意的重要性，給人的錯覺是只要想出一個夠好的創(chuàng)意，成功就指日可待了。但事實并不是這樣——騰訊不是第一個即時聊天工具的發(fā)明者，甚至不是第一個將這種工具引入中國的公司，但最后最輝煌的卻是他；阿里巴巴不是中國的第一個電子商務(wù)公司，卻最終成為了這一領(lǐng)域的絕對霸主；百度開始做搜索引擎時，中國已有一些門戶開始涉足，但如今他絕對是中國這一領(lǐng)域的老大。創(chuàng)意固然重要，但這只是邁出了開始的一步。如果你沒有足夠的毅力把它付諸實踐，那么你的創(chuàng)意最終也只能成為服務(wù)那些更有毅力的人的工具。很多時候那些互聯(lián)網(wǎng)公司的輝煌掩蓋了他們創(chuàng)業(yè)早期的艱辛，而這些艱辛恰好體現(xiàn)了他們的毅力。李彥宏形容他去納斯達克敲鐘那段時期的心理狀態(tài)是瀕臨崩潰，壓力太大。喬布斯剛輟學(xué)時至不得不每星期走到另一個城市只吃一頓較好的飯菜。沒有能忍受高壓烹煮的毅力，失敗只是一個時間問題！這門課后也產(chǎn)生了一個疑惑——似乎人們提到計算機就是創(chuàng)業(yè)，似乎學(xué)完計算機后不創(chuàng)業(yè)就是“犯罪”。其實我覺得學(xué)了計算機之后可以干很多的事情，創(chuàng)業(yè)只是實現(xiàn)價值的一種方式。只不過這種方式更加刺激，得到的物質(zhì)回報也更加豐富。但創(chuàng)業(yè)畢竟只適合極少的一部分人。最后再拍幾句“馬屁”。這門課確實挺有意思的，有時候期待這門課就像高中期待體育課一樣。希望以后的選修課也能夠這么有意思！