第一篇：免疫學(xué)課程論文范文

免疫學(xué)課程論文

乙型肝炎疫苗的研究進展 摘要

本文綜述了近年來國外乙型肝炎疫苗的研究進展，對乙型肝炎疫苗在高危人群的保護、免疫保護期以及加強接種的策略，疫苗的聯(lián)合應(yīng)用，無（低）免疫應(yīng)答的原因以及對策，DNA疫苗等熱點問題進行了詳細(xì)的闡述。疫苗的介紹

疫苗是將病原微生物（如細(xì)菌、立克次氏體、病毒等）及其代謝產(chǎn)物，經(jīng)過人工減毒、滅活或利用基因工程等方法制成的用于預(yù)防傳染病的自動免疫制劑。疫苗保留了病原菌刺激動物體免疫系統(tǒng)的特性。當(dāng)動物體接觸到這種不具傷害力的病原菌后，免疫系統(tǒng)便會產(chǎn)生一定的保護物質(zhì)，如免疫激素、活性生理物質(zhì)、特殊抗體等；當(dāng)動物再次接觸到這種病原菌時，動物體的免疫系統(tǒng)便會依循其原有的記憶，制造更多的保護物質(zhì)來阻止病原菌的傷害。荊州市第二人民醫(yī)院肝病科朱剛劍

疫苗的發(fā)現(xiàn)可謂是人類發(fā)展史上意見具有里程碑意義的事件。因為從某種意義上來說人類繁衍生息的歷史就是人類不斷同疾病和自然災(zāi)害斗爭的歷史，控制傳染性疾病最主要的手段就是預(yù)防，而接種疫苗被認(rèn)為是最行之有效的措施。而事實證明也是如此，接種乙型肝炎疫苗就是預(yù)防乙肝肝炎病毒感染的最有效方法。其基礎(chǔ)原理是是采用乙肝表面抗原陽性攜帶者的血漿，經(jīng)過純化滅活而制備的疫苗。將其接種人體后可以產(chǎn)生特異性乙肝表面抗體，從而預(yù)防乙肝病毒感染。[1] 研究現(xiàn)狀

自從Krugman 1970年獲得最早的乙型肝炎（HB）疫苗后，各國相繼利用無癥狀HBsAg攜帶者的血漿，提取HBsAg制備乙型肝炎疫苗，但從感染者的血液獲得免疫原不是一種疫苗常規(guī)制備的途徑，其來源有一定的限制，制備成本高，且理論上有受不潔血液感染的可能，近年來漸被重組疫苗所代替，重組疫苗是與人無關(guān)的生物制品，是將編碼誘導(dǎo)保護性免疫應(yīng)答的結(jié)構(gòu)抗原決定簇的病毒基因插入作為表達載體的DNA分子中，然后將載體導(dǎo)入細(xì)胞，使之表達編碼病毒抗原的基因。重組乙肝疫苗1986年開始獲準(zhǔn)使用，由于其價廉、安全、制備容易且可大批量生產(chǎn)，至今已漸取代血源疫苗，多個現(xiàn)場試驗表明重組乙肝疫苗與血源疫苗的應(yīng)答率近似且其表面抗體幾何均數(shù)滴度（geometric mean titer, GMT）無明顯的差異性。目前，世界上常用的重組疫苗主要有：美國Merck sharp&Dohme(MSD)公司生產(chǎn)的Recombivax-B疫苗（YDV，HB-vax-DNA），比利時Smith kline Beecham（SKB）生物制品公司的Engerix-B疫苗，法國Pasteur-Merieux研究所的Gen-Hevac b疫苗等。雖然人群接種HB疫苗已獲得較好的免疫效果，有些問題仍有待探索，例如對高危人群的保護，免疫保護期以及加強接種的問題，疫苗聯(lián)合應(yīng)用，對無（低）應(yīng)答者如何處理、DNA疫苗等，現(xiàn)就以上熱點問題作一綜述。[2-3] 乙肝疫苗的研究進展

乙肝疫苗的研究始于1971年，而最早批準(zhǔn)生產(chǎn)的疫苗是美國Merck藥廠生產(chǎn)的疫苗，是采用無癥狀HBsAg攜帶者的血漿并提純，然后采用胃酶、尿素、甲醛三步化學(xué)滅活制備而成。因其來源于人血漿，故稱為血源性疫苗，為第一代疫苗。血源性乙肝疫苗免疫源性好且安全，但從感染者的血液獲得免疫原不是一種疫苗常規(guī)制備的途徑，其來源有一定的限制，制備成本高，且理論上有受不潔血液感染的可能，因此，不能滿足社會需要。

自20世紀(jì)70年代末，在弄清HBV基因序列的基礎(chǔ)上，應(yīng)用基因工程技術(shù)制成，把編碼HBSAg基因插入酵母菌基因組，制成基因重組乙肝疫苗。1986年用酵母表達的重組乙肝疫苗正式投產(chǎn)，這是第二代疫苗。

重組疫苗是與人無關(guān)的生物制品，是將編碼誘導(dǎo)保護性免疫應(yīng)答的結(jié)構(gòu)抗原決定簇的病毒基因插入作為表達載體的DNA分子中，然后將載體導(dǎo)入細(xì)胞，使之表達編碼病毒抗原的基因。，由于其價廉、安全、制備容易且可大批量生產(chǎn)，且與血源性疫苗具有相同的免疫源性，甚至更好，至今已漸取代血源疫苗。

目前國內(nèi)最常用的疫苗是重組酵母乙型肝炎疫苗和中國倉鼠卵母細(xì)胞(CHO)乙型肝炎疫苗，它們是利用重組酵母或重組CHO工程細(xì)胞表達的乙型肝炎表面抗原，經(jīng)純化、滅活及加入佐劑吸附制成。

現(xiàn)在市面上流行一種漢遜酵母乙肝疫苗，它又是什么來歷了。1995年，德國萊茵公司利用甲基營養(yǎng)型漢遜酵母表達系統(tǒng)研發(fā)了漢遜酵母重組乙肝疫苗。漢遜酵母適合于高密度發(fā)酵，可從發(fā)酵液中收獲大量細(xì)胞；乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的表達量高，提高了疫苗產(chǎn)量。1997年，大連高新生物技術(shù)公司引進重組漢遜酵母工程菌并進行疫苗開發(fā)。乙肝疫苗的發(fā)展為預(yù)防和治療乙肝起到了巨大的作用。從傳統(tǒng)的血源疫苗發(fā)展到重組乙肝疫苗,目前乙肝疫苗已發(fā)展到第三代的DNA 疫苗。

DNA疫苗是近年來免疫學(xué)和疫苗研究領(lǐng)域中的一個熱點。DNA 疫苗的本質(zhì)是含有病原體抗原基因的真核表達載體，當(dāng)它被導(dǎo)入動物機體后，可被動物細(xì)胞所攝取并表達病原體的抗原蛋白，從而誘導(dǎo)機體對該蛋白的免疫反應(yīng)。

乙肝DNA疫苗是將乙肝病毒部分蛋白抗原的基因克隆在真核表達載體（如質(zhì)粒）上，直接注入人體內(nèi)，使其抗原在體內(nèi)表達后激發(fā)機體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。由于它能克服傳統(tǒng)疫苗的缺陷，制備簡單，安全，有效。同時誘發(fā)持久的特異性細(xì)胞及體液免疫應(yīng)答,打破免疫耐受，并可兼作預(yù)防和治療性疫苗，是未來新型疫苗的發(fā)展方向，在乙肝的防治中有廣闊的應(yīng)用前景。然而，要使DNA疫苗從動物實驗轉(zhuǎn)為臨床使用，尚有許多工作要做。這是因為：1)對DNA疫苗的免疫機制還遠(yuǎn)未了解；2)DNA疫苗的效率有待加強，接種途徑需進一步簡化；3)DNA疫苗接種實質(zhì)上是將外源DNA引入宿主細(xì)胞，其安全性不容忽視。除形成抗DNA抗體、抗原持續(xù)表達引起耐受以及導(dǎo)致宿主細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化(有誘發(fā)原癌基因活化和抑制癌基因滅活的危險性)等可能性外，同時質(zhì)粒DNA中殘留微量抗生素對人體的潛在有害作用不可忽視。參考文獻

[1] 乙型肝炎疫苗的來歷和研究進展全網(wǎng)發(fā)布：2009-08-06 07:27 發(fā)表者：朱剛劍(訪問人次：1655)

[2] 乙型肝炎疫苗的研究進展來源：中國論文下載中心 [ 05-12-16 10:16:00 ] 作者：佚名 編輯：studa9ngns [3] 乙型肝炎疫苗的來歷和研究進展全網(wǎng)發(fā)布：2009-08-06 07:27 發(fā)表者：朱剛劍(訪問人次：1655)

[4] 乙型肝炎疫苗的研究進展來源：中國論文下載中心 [ 05-12-16 10:16:00 ] 作者：佚名 編輯：studa9ngns [5] 1 Belloni C, chirico G, Pistorio A et al.Acta Paediatr, 1998;87(3):336-336-338 [6] 2 Marchou R, excler JL, Bourderioux C et al.J Infect Dis, 1995;172(1):258-260 [7] Tega E, horton J, Norden HE et al.Can J Gastroenterol, 1998;12(1):57-60

第二篇：細(xì)胞免疫學(xué)論文

【摘要】 作為一種具有靶向性的生物大分子，單克隆抗體始終是人們關(guān)注的熱點之一，被廣泛用于治療腫瘤、病毒感染和抗移植排斥等。但鼠源單克隆抗體的臨床應(yīng)用受限于誘導(dǎo)產(chǎn)生人抗鼠抗體、腫瘤滲入量低、親和力低和半衰期短等。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展及其向各學(xué)科的滲透，通過基因操作技術(shù)對抗體進行改造，可使其適用于多種疾病的治療。抗體人源化已經(jīng)成為治療性抗體的發(fā)展趨勢，同時各種抗體衍生物也不斷涌現(xiàn)，它們從不同角度克服了抗體本身的應(yīng)用局限，也為治療人類疾病提供了利器。本文簡要介紹上述技術(shù)的基本原理、特點和治療性抗體的研究進展。

【關(guān)鍵詞】人--鼠嵌合抗體 生物導(dǎo)彈 人源化抗體 雙特異性抗體 【正文】

一、治療性抗體技術(shù)的研究背景 2000年前，人們將自白喉桿菌培養(yǎng)上清液中分離到的可溶性毒素注入馬體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)得到的抗血清可以治療白喉，這是第一個用抗體治療疾病的例子。隨著免疫學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，以及抗體基因結(jié)構(gòu)的闡明，DNA 重組技術(shù)開始被用于抗體的改造，人們可以根據(jù)需要對以往的鼠抗體進行相應(yīng)的改造，以消除抗體應(yīng)用的不利性狀或增加新的生物學(xué)功能，還可用新的技術(shù)重新制備各種形式的重組抗體，標(biāo)志著基因工程抗體時代的來臨。自第一個基因工程抗體———人--鼠嵌合抗體于1984 年誕生以來，新型基因工程抗體不斷出現(xiàn)，包括人源化抗體、單價小分子抗體（Fab、單鏈抗體、單域抗體等）、多價小分子抗體（雙鏈抗體、三鏈抗體、微型抗體等）、某些特殊類型的抗體（雙特異抗體、抗原化抗體、細(xì)胞內(nèi)抗體等）及抗體融合蛋白（免疫毒素、免疫黏連素等）等。用于制備新型抗體的噬菌體抗體庫技術(shù)成為繼雜交瘤技術(shù)之后生命科學(xué)研究中又一突破性進展。在噬菌體抗體庫的基礎(chǔ)上，近年來又發(fā)展了核糖體展示抗體庫技術(shù)，利用核糖體展示技術(shù)篩選抗體的整個過程均在體外進行，不經(jīng)過大腸桿菌轉(zhuǎn)化步驟，因此可以構(gòu)建高容量、高質(zhì)量的抗體庫，更易于篩選高親和力抗體和利用體外進行的方法對抗體性狀進行改造，核糖體展示抗體庫技術(shù)代表了抗體工程的未來發(fā)展趨勢。

二、各種抗體治療作用的機理與應(yīng)用 2.1 抗體的基本組成

抗體的基本單位是由4 條肽鏈組成的對稱結(jié)構(gòu)，包括2 條相同的重鏈和2 條相同的輕鏈。重鏈和輕鏈分別由可變區(qū)和恒定區(qū)組成?？勺儏^(qū)中的互補決定區(qū)與抗體和抗原結(jié)合的多樣性直接有關(guān)，而恒定區(qū)的結(jié)構(gòu)與抗體的生物學(xué)活性相關(guān)。在少數(shù)情況下，抗體與抗原結(jié)合后可以對機體直接起保護作用，如用抗體中和毒素的毒性，但在多數(shù)情況下需要通過效應(yīng)功能滅活或清除外來抗原?？贵w的效應(yīng)功能有2 類，一類是通過激活補體，產(chǎn)生多種生物學(xué)效應(yīng)，如細(xì)胞裂解、免疫黏附及調(diào)理作用，促進炎癥反應(yīng)；另一類是通過抗體分子中的Fc 段與細(xì)胞表面Fc 受體的相互作用，通過其Fc段分別介導(dǎo)調(diào)理作用或抗體依賴性細(xì)胞毒作用。此外，治療性抗體的效應(yīng)和作用機理直接取決于它所識別的抗原決定簇，例如治療非何杰金氏B細(xì)胞淋巴瘤的抗CD20 抗體能影響細(xì)胞膜上離子通道的功能，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化、增殖和凋亡。

由于多克隆抗體本身的局限性，所以直到單克隆抗體出現(xiàn)，抗體用于抗腫瘤治療才真正得以實現(xiàn)。自從1978 年成功制備出第一株抗黑色素瘤單抗以來，相繼出現(xiàn)了抗胃腸癌、肺癌、乳腺癌、白血病、淋巴瘤、胰腺癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤等的單克隆抗體。單克隆抗體殺傷腫瘤細(xì)胞的機制可能是抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞效應(yīng)（ADCC）及補體依賴性細(xì)胞溶解作用（CDC）。單克隆抗體與藥物、毒素或放射性物質(zhì)偶聯(lián)，成為一種全新的“生物導(dǎo)彈”，可用于導(dǎo)向治療，已越來越受到重視。另外，用單抗給予T 細(xì)胞所必需的重要表面信號分子交聯(lián)的刺激信號和生長信號，體外誘導(dǎo)腫瘤特異性細(xì)胞毒T 淋巴細(xì)胞，可用于特異性、被動性的免疫治療。

自身免疫病多與單或寡克隆抗體的異常增多有關(guān)。利用基因工程技術(shù)可制備針對這些異常抗體獨特型的抗抗體或與自身抗體結(jié)合并抑制其作用，或制備能模擬抗原的內(nèi)影像抗體用于中和體內(nèi)的自身抗體。目前針對不同的發(fā)病機制，治療方法趨于多樣化。許多變態(tài)反應(yīng)與IgE 有關(guān)。Fc 片段可與變應(yīng)原特異性IgE競爭結(jié)合嗜堿性粒細(xì)胞，封閉變應(yīng)原介導(dǎo)的組胺釋放。此外，還可生產(chǎn)出與患者IgE 競爭結(jié)合變應(yīng)原的Fab 樣分子。

2.2 免疫毒素

免疫毒素是一種毒素肽和細(xì)胞選擇性靶向配體連接的融合蛋白，它能通過靶向結(jié)構(gòu)域的特異結(jié)合功能使毒素傳遞到靶細(xì)胞并與之作用進而殺死腫瘤細(xì)胞。早期的免疫毒素是由無修飾生物毒素和鼠源抗體連接而成的，連接的方式常為化學(xué)偶聯(lián)法。由于非人源的毒素和鼠源抗體導(dǎo)致的免疫排斥反應(yīng)，以及低親和力和無靶向特異性，使免疫毒素?zé)o法在臨床中得到運用。

新型免疫毒素是將毒素肽和細(xì)胞選擇性靶向配體都進行改造后，再用工程菌或工程細(xì)胞實現(xiàn)高效表達。細(xì)胞選擇性靶向配體使用了工程抗體、轉(zhuǎn)鐵蛋白、表皮生長因子以及IL-2等。抗體的改造主要集中在降低免疫原性、提高親和力和增強實體腫瘤滲入率等方面，包括改用小分子工程抗體、人源化抗體、人源抗體和突變的高親和力抗體等。

2.3 抗體－細(xì)胞因子融合蛋白

細(xì)胞因子能激活某些免疫細(xì)胞，包括單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞、T細(xì)胞和B細(xì)胞等。應(yīng)用細(xì)胞因子治療癌癥能夠引起免疫應(yīng)答，但這種免疫反應(yīng)是非特異的，常產(chǎn)生全身毒性。有人嘗試使用抗體工程技術(shù)將細(xì)胞因子與抗體連接形成融合蛋白，通過靶向作用，細(xì)胞因子在腫瘤組織的靶細(xì)胞上聚集，在局部殺傷腫瘤細(xì)胞，而非特異性毒性將減少或消失。常用的細(xì)胞因子包括IL-

2、IL-12和GM-CSF 等，融合的部位可以是全長型抗體或ScFv的N端或C端?？贵w－細(xì)胞因子融合蛋白作為一種新型的腫瘤免疫治療藥物，其抗體功能域可引導(dǎo)細(xì)胞因子濃集在腫瘤組織的微環(huán)境中，之后抗體部分直接抑制腫瘤細(xì)胞活性，并誘導(dǎo)二次免疫應(yīng)答，多重作用的相加使抗體－細(xì)胞因子融合蛋白對腫瘤的抑制作用明顯強于單獨使用抗體或細(xì)胞因子。由于全長型抗體Fc上存在兩個效應(yīng)細(xì)胞結(jié)合位點，功能更為強大，其中一個位點與細(xì)胞因子結(jié)合，激活效應(yīng)細(xì)胞，另一個與FcγR結(jié)合，引發(fā)抗體依賴細(xì)胞的細(xì)胞毒作用(ADCC)。

三、治療性抗體的制備技術(shù)與研究意義

由識別一種抗原決定簇的細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的均一性抗體稱為單克隆抗體，可視為第二代抗體。由于其具有特異性高、親和力強、效價高、血清交叉反應(yīng)少等優(yōu)點，已經(jīng)在基礎(chǔ)研究、臨床診斷及治療、免疫預(yù)防等領(lǐng)域發(fā)揮了重要作用。在治療上，單克隆抗體主要用于抗腫瘤、抗器官移植排斥反應(yīng)、抗感染、解毒等。近年來將單抗與核素、各種毒素（如白喉外毒素或蓖麻毒素）或藥物通過化學(xué)偶聯(lián)或基因重組制備成導(dǎo)向藥物，用于腫瘤的治療成為研究的重點。制備單克隆抗體的常規(guī)方法是免疫小鼠，雜交瘤可在實驗動物中產(chǎn)生無限量單克隆抗體。對大多數(shù)雜交瘤來說，現(xiàn)已可用體外方法生產(chǎn)單克隆抗體而無需應(yīng)用動物。體外單克隆抗體生產(chǎn)系統(tǒng)已有多種，但大規(guī)模生產(chǎn)治療性單克隆抗體需用中空纖維系統(tǒng)，其成功與否取決于雜交瘤的固有特性，如細(xì)胞生長和單克隆抗體生產(chǎn)能力等。因此，大量生產(chǎn)以供臨床研究應(yīng)用還有困難，但有幾種方法可以解決這些問題，如嵌合單克隆抗體、人源化單克隆抗體和全人單克隆抗體的產(chǎn)生。其中，人源化抗體是一個重要的里程碑，并伴隨著一系列重大的技術(shù)革新，如PCR技術(shù)、抗體庫技術(shù)、轉(zhuǎn)基因動物等。人源化抗體的形式也從最初的嵌合抗體、改型抗體等逐步發(fā)展為今天的人抗體?？贵w人源化已經(jīng)成為治療性抗體的發(fā)展趨勢，同時各種抗體衍生物也不斷涌現(xiàn)，它們從不同角度克服了抗體本身的應(yīng)用局限，也為治療人類疾病提供了更多利器。

人源化抗體是從鼠源單抗到全人抗體的過渡形式，在鼠單抗的基礎(chǔ)上，用人抗體恒定區(qū)置換鼠抗體的相應(yīng)部位，形成人鼠嵌合抗體。利用DNA重組技術(shù)將鼠單抗的輕、重鏈可變區(qū)基因插入含有人抗體恒定區(qū)的表達載體中，轉(zhuǎn)化哺乳動物細(xì)胞表達人鼠嵌合抗體，其人源化程度可達到70%左右。嵌合抗體完整地保留了異源單抗的可變區(qū)，最大限度地保持了其親和性，降低了免疫原性。美國食品藥品管理局（FDA）批準(zhǔn)的抗體藥物中有4個是嵌合抗體。但由于其整個可變區(qū)都是異源的，所以嵌合抗體的異源性還很明顯，解決HAMA的效果并不理想。

由于天然抗體主要是通過調(diào)理作用、ADCC 或依賴補體的細(xì)胞毒效應(yīng)起到殺傷靶細(xì)胞的作用，因此天然抗體的細(xì)胞毒效應(yīng)有限。下列幾種途徑可以增加抗體對靶細(xì)胞的殺傷，如免疫結(jié)合物、抗體細(xì)胞因子融合蛋白、雙特異性抗體、細(xì)胞內(nèi)抗體等。

雙特異性抗體亦稱雙功能抗體，是同一抗體的3 個抗原結(jié)合部位分別針對3 個不同的抗原，在結(jié)構(gòu)上是雙價的，而與抗原結(jié)合的功能是單價的。雙特異性抗體可以用化學(xué)交聯(lián)、細(xì)胞融合和基因工程等方法獲得。由于它可以同時與3 種抗原發(fā)生反應(yīng)，并使之交聯(lián)，因而可介導(dǎo)標(biāo)記物與靶抗原的結(jié)合，或使某種效應(yīng)分子定位于靶細(xì)胞；此外，又由于它與抗原結(jié)合的單價性，不易引起靶抗原的調(diào)變，從而可提高抗體的某些生物學(xué)效應(yīng)。雙特異性抗體重鏈的異質(zhì)性使其FC 片段與FC受體結(jié)合的能力明顯減弱，減少了該抗體在體內(nèi)的非特異性分布。雙特異性抗體的這些特性使它在診斷和治療上有廣泛的應(yīng)用前景。目前，作為治療腫瘤用的雙功能抗體常采用抗腫瘤相關(guān)抗原（TAA）及CD3 或抗TAA 及CD16，這類雙特異性抗體在

荷瘤動物模型中無論是抑瘤試驗還是殺傷試驗均獲得了良好結(jié)果。無論采用何種免疫活性細(xì)胞的效應(yīng)分子，其殺傷均無MHC限制，這為臨床應(yīng)用提供了許多方便，目前已有一些雙功能抗體正在進行臨床試驗。

一般的抗體在細(xì)胞內(nèi)合成后分泌到胞外，如果在抗體的N端或C端加入引導(dǎo)序列，就能使抗體表達定位在亞細(xì)胞部位，如胞漿、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或細(xì)胞核部位。這種在細(xì)胞內(nèi)合成并作用于細(xì)胞內(nèi)組分的抗體稱為細(xì)胞內(nèi)抗體或內(nèi)抗體。細(xì)胞內(nèi)抗體可以提供一種獨有的研究分子功能的新方法，它可以在細(xì)胞內(nèi)抑制病毒復(fù)制、抑制生長因子受體或癌蛋白表達，因此有用于基因治療的前景，研究較多的是用細(xì)胞內(nèi)抗體抑制I型人類免疫缺損病毒I型（HIV-I）和抗腫瘤。

雙特異抗體是指具有兩種抗原結(jié)合特性的抗體，可同時結(jié)合兩個不同的抗原或抗原決定簇。與mAb相比，雙特異抗體具有以下優(yōu)點：(1)較低濃度即可殺傷或溶解腫瘤細(xì)胞；(2)對低表達或不表達腫瘤相關(guān)抗原的腫瘤細(xì)胞有殺傷或抑制作用；(3)激活結(jié)合的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)，協(xié)助殺傷腫瘤細(xì)胞。早期研制雙特異抗體的方法是采用細(xì)胞工程，即將兩株各自分泌不同特異性單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞再融合得到四源雜交瘤，或?qū)⒁恢觌s交瘤細(xì)胞與免疫的脾細(xì)胞融合得到三源雜交瘤，這兩種雜交瘤被稱為二次雜交瘤)。多倍雜交瘤細(xì)胞的穩(wěn)定性差，BsAb的產(chǎn)量少且活性低，費時費力，臨床應(yīng)用時存在人抗鼠抗體免疫反應(yīng)(HAMA)，因此不適用于臨床。20世紀(jì)90年代起，基因工程和蛋白質(zhì)工程在抗體生產(chǎn)和改造中得到了成功應(yīng)用，由此產(chǎn)生了抗體工程。應(yīng)用抗體工程生產(chǎn)BsAb，具有分子量小、方法穩(wěn)定、可大量生產(chǎn)、成本顯著降低和操作簡便等優(yōu)點。

四、治療性抗體的研究方向與存在問題

抗體應(yīng)用于人類疾病的治療已有很長的歷史，但其發(fā)展歷程是曲折的，自單克隆抗體;雜交瘤技術(shù)宣告誕生以來，歷經(jīng)多年反復(fù)。目前，F(xiàn)DA 已經(jīng)批準(zhǔn)21 個治療性單抗上市。近年來，科學(xué)界和醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界都對治療性抗體的研究表現(xiàn)出越來越多的關(guān)注。人源化抗體和人抗體的出現(xiàn)為治療性抗體的廣泛應(yīng)用帶來了新的希望。但人抗體是否可以解決鼠抗體臨床應(yīng)用中出現(xiàn)的所有問題，還有待大量臨床試驗的檢驗。影響抗體免疫原性的因素很多，如抗原呈遞方式、次級信號系統(tǒng)以及患者的個體差異性等，而抗體的人源化只能解決一個方面的問題。同樣，抗體衍生物也會面臨諸如免疫原性、毒副作用等自身固有的問題，所以可行的發(fā)展方向是在完善人抗體技術(shù)的同時，推進治療性小分子抗體衍生物的研究。根據(jù)臨床實際設(shè)計靈活的治療方案，使人源化抗體和抗體衍生物互為補充，達到最佳治療效果。從已上市的抗體藥物不難看出，未來的治療性抗體將朝著人源化和小型化發(fā)展，兩條途徑的結(jié)合將最大程度地克服鼠單抗的缺陷使抗體藥物得到更為深入和廣泛的應(yīng)用。

五、治療性抗體的發(fā)展前景

單克隆抗體技術(shù)的問世,使研究和生產(chǎn)治療性單抗藥物成為現(xiàn)實。隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展,新型的重組抗體技術(shù)也隨之而生。

人們可以利用DNA重組技術(shù)對鼠源抗體進行人源化改造、構(gòu)建合成或半合成抗體庫及噬菌體抗體庫,從中篩選獲得人源抗體,甚至利用轉(zhuǎn)基因小鼠直接獲得人源抗體?？贵w藥物發(fā)展的趨勢也從鼠源、人-鼠嵌合、人源化到全人源。近年獲得批準(zhǔn)的抗體藥物以全人源為主。1996年至2008年間進入臨床研究的人源化單克隆抗體中45%用于治療腫瘤,28%個用于治療免疫紊亂?？贵w藥物的發(fā)展進入研發(fā)、回報的良性循環(huán),成了國際制藥業(yè)爭奪的焦點。文章就治療性抗體發(fā)展的歷史、現(xiàn)狀、市場及未來展望作了簡要綜述。利用抗體工程研制更有效的治療性抗體的前景非常光明盡管還存在很多問題。實踐已經(jīng)證明，許多新型工程抗體可以在原核或真核細(xì)胞中實現(xiàn)高效表達，它們具有較長的半衰期和生物學(xué)效應(yīng)，大多為ScFv、Fab或它們的多聚體，能夠有效進入腫瘤細(xì)胞，具有比較理想的治療效果。新型抗體工程技術(shù)的不斷出現(xiàn)，將為抗體改造提供了強有力的技術(shù)平臺。相信不久的將來，治療性抗體會在人類疾病的治療中扮演重要的角色。

【參考文獻】

[1] JM沃克,R.拉普勒, 編;譚天偉, 黃留云, 蘇國富, 等譯.分子生物學(xué)與生物技術(shù)[M] 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社,2003.1 [2] 吳乃虎.基因工程原理（上冊）[M] 北京I 科學(xué)出版社,1998.3 [3] 盧圣棟，現(xiàn)代分子生物學(xué)實驗技術(shù)[M] 北京I 中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社,1999.9

第三篇：《臨床免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗》課程簡介

《臨床免疫學(xué)和免疫檢驗》課程簡介

課程名稱：《臨床免疫學(xué)和免疫檢驗》

英方名稱：《clinical immunology and immunological examinations 》 開課單位：遵義醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗系

課程性質(zhì)：必修課

總 學(xué) 時：90學(xué)時，其中理論：46學(xué)時，實驗：44學(xué)時

學(xué)分：5學(xué)分

適用專業(yè)：醫(yī)學(xué)檢驗

教學(xué)目的：通過教學(xué)使學(xué)生掌握臨床免疫學(xué)基本理論及免疫學(xué)檢驗的方法。對各種

疾病血清、體液、組織等標(biāo)本的免疫學(xué)檢驗原理及操作程序，依據(jù)抗原或抗體的變化規(guī)律，進而對疾病的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后做出診斷等。

內(nèi)容簡介：臨床免疫學(xué)檢驗是研究免疫學(xué)技術(shù)及其在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中應(yīng)用的一門學(xué)科。

重點闡述免疫學(xué)技術(shù)的原理、類型、技術(shù)要點、臨床應(yīng)用及其方法學(xué)評價。內(nèi)容包括：抗原抗體反應(yīng)、免疫原和抗血清的制備、凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、補體檢測及應(yīng)用、熒光免疫技術(shù)、酶免疫技術(shù)、流式細(xì)胞技術(shù)、免疫細(xì)胞的分離與檢測、細(xì)胞因子測定及應(yīng)用、超敏反應(yīng)及其檢測、自身免疫病及檢驗、免疫增殖病及檢驗、免疫缺陷病及其檢驗、腫瘤免疫及檢驗、移植免疫及檢驗、免疫學(xué)檢驗的質(zhì)量控制等。

考核形式：閉卷考試

教材：《臨床免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗》，人民衛(wèi)生出版社，王蘭蘭，3版，2003年。參考書目：

1.《現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)與臨床實踐》，上海科學(xué)技術(shù)文獻出版社，王鴻利，1999年。

2.《檢驗醫(yī)學(xué)自動化及臨床應(yīng)用》人民衛(wèi)生出版社，彭黎明，2003年。

3.《內(nèi)科學(xué)》，人民衛(wèi)生出版社，葉任高，6版，2004年。

主講教師：李樹仁教授

第四篇：基礎(chǔ)免疫學(xué)課程教學(xué)大綱

《基礎(chǔ)免疫學(xué)》課程教學(xué)大綱 課程組人員：張智紅、周煒、施華

一、課程名稱：基礎(chǔ)免疫學(xué) Basic Immunology

二、課程編碼：

三、學(xué)時與學(xué)分：32/2

四、先修課程：普通生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、解剖與生理學(xué)。

五、課程教學(xué)目標(biāo)

免疫學(xué)是研究機體免疫系統(tǒng)的組織結(jié)構(gòu)和生理功能的學(xué)科。它是生物醫(yī)學(xué)專業(yè)的重要基礎(chǔ)學(xué)科之一。通過課堂講授、自學(xué)等教學(xué)過程，使學(xué)生掌握和了解本學(xué)科的基本理論、基本知識及基本技能，為生物醫(yī)學(xué)分析與儀器專業(yè)方向的學(xué)生提供必要的醫(yī)學(xué)專業(yè)知識。

六、適用學(xué)科專業(yè)

生物醫(yī)學(xué)工程、生物信息技術(shù)、生物技術(shù)

七、基本教學(xué)內(nèi)容與學(xué)時安排

● 緒論—免疫學(xué)發(fā)展簡史（1學(xué)時）● 免疫器官和組織（1學(xué)時）

中樞免疫器官 外周免疫器官

● 免疫分子（8學(xué)時）

免疫球蛋白（2學(xué)時）：免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)；抗體的異質(zhì)性；免疫球蛋白的生物合成；免疫球蛋白的生物學(xué)活性；免疫球蛋白基因超家族 補體系統(tǒng)（2學(xué)時）：補體的激活；補體活化的調(diào)控；補體受體；補體的生物學(xué)功能；補體系統(tǒng)與疾病 細(xì)胞因子（2學(xué)時）：細(xì)胞因子及其受體；細(xì)胞因子的生物學(xué)作用；細(xì)胞因子與某些病理過程的關(guān)系

白細(xì)胞分化抗原（1學(xué)時）：參與T細(xì)胞抗原識別與活化的CD分子；參與B細(xì)胞抗原識別與活化的CD分子；免疫球蛋白Fc受體 粘附分子（1學(xué)時）：各類粘附分子的特性；粘附分子的生物學(xué)作用；粘附分子與臨床

● 主要組織相容性抗原（2學(xué)時）

概述

人類MHC—HLA復(fù)合體 HLA抗原系統(tǒng) MHC的功能

HLA與醫(yī)學(xué)的關(guān)系 ● 免疫細(xì)胞（2學(xué)時）

淋巴細(xì)胞

抗原提呈細(xì)胞及其他免疫細(xì)胞 ● 抗原與抗原提呈（4學(xué)時）

抗原概述（2學(xué)時）：抗原的性質(zhì)；抗原的特異性；抗原的種類；誘導(dǎo)免疫細(xì)胞增生的其他抗原 抗原提呈（2學(xué)時）：溶酶體提呈途徑；胞質(zhì)溶膠提呈途徑；非經(jīng)典MHC分子提呈途徑

● 免疫應(yīng)答（4學(xué)時）

Ｂ細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答（2學(xué)時）Ｔ細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答（2學(xué)時）● 免疫耐受與免疫調(diào)節(jié)（2學(xué)時）

免疫耐受：免疫耐受的機制；免疫耐受的維持與破壞；人工誘導(dǎo)免疫耐受 免疫調(diào)節(jié)：基因、分子和細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用；神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò) ● 超敏反應(yīng)（4學(xué)時）

Ⅰ型超敏反應(yīng)（1學(xué)時）Ⅱ型超敏反應(yīng)（1學(xué)時）Ⅲ型超敏反應(yīng)（1學(xué)時）Ⅳ型超敏反應(yīng)（1學(xué)時）

● 免疫學(xué)檢測方法與治療（4學(xué)時）

免疫細(xì)胞與分子的檢測（1學(xué)時）免疫相關(guān)基因的檢測（1學(xué)時）

免疫學(xué)檢測常用的標(biāo)記技術(shù)（1學(xué)時）免疫治療的概況（1學(xué)時）

八、教材及參考書

教材：《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》，龔非力 主編，科學(xué)出版社，2003年。

參考書：《基礎(chǔ)免疫學(xué)》第四版，William E.Paul主編，吳玉章等譯，科學(xué)出版社，2003年。《現(xiàn)代免疫學(xué)實驗技術(shù)》第二版，沈關(guān)心主編，湖北科學(xué)出版社出版，2001年。

九、考核方式

書面考試＋討論、作業(yè)＋實踐表現(xiàn)

第五篇：《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》課程簡介(臨床)

《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》課程簡介

課程名稱：《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》

英文名稱： 《Medical Immunology》

開課單位：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室

課程性質(zhì)：必修課

總 學(xué) 時：60學(xué)時，其中理論課40學(xué)時，實驗課20學(xué)時

學(xué)分：3.3學(xué)分

適用專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)、麻醉學(xué)、法醫(yī)學(xué)、口腔醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)影像學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗 教學(xué)目的：通過教學(xué)使學(xué)生掌握本學(xué)科重要的基本理論、基本知識和基本技能，為學(xué)生學(xué)習(xí)其它醫(yī)學(xué)課程及臨床課程奠定基礎(chǔ)。

內(nèi)容介紹：醫(yī)學(xué)免疫學(xué)是研究人體免疫系統(tǒng)的組成、結(jié)構(gòu)和功能；免疫應(yīng)答的發(fā)

生機制、規(guī)律及其效應(yīng)和調(diào)節(jié)機制；以及有關(guān)疾病的發(fā)生機理、診斷與防治的一門學(xué)科。醫(yī)學(xué)免疫學(xué)是臨床、預(yù)防、檢驗等醫(yī)學(xué)專業(yè)的基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)課程，其任務(wù)是通過教學(xué)使學(xué)生掌握免疫學(xué)的基礎(chǔ)知識，為學(xué)習(xí)其它基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)課程及臨床醫(yī)學(xué)課程奠定理論基礎(chǔ)，同時結(jié)合教學(xué)實踐、培養(yǎng)學(xué)生獨立思考、獨立工作的能力和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)。本課程以理論課和實驗課兩種方式授課。本門課程的預(yù)備課程為解剖學(xué)、組織學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)及細(xì)胞生物學(xué)?；緝?nèi)容分為理論教學(xué)與實驗教學(xué)。理論教學(xué)主要包括以下幾方面的內(nèi)容：醫(yī)學(xué)免疫學(xué)概論、抗原、免疫球蛋白、補體系統(tǒng)、細(xì)胞因子、白細(xì)胞分化抗原和粘附分子、MHC及其編碼分子、固有免疫應(yīng)答的組成細(xì)胞及其功能、抗原提呈細(xì)胞及其抗原提呈、T細(xì)胞、B細(xì)胞、免疫應(yīng)答（細(xì)胞免疫、體液免疫）、免疫調(diào)節(jié)、免疫耐受、超敏反應(yīng)、自身免疫性疾病、免疫缺陷性疾病、移植免疫、腫瘤免疫、免疫學(xué)防治。實驗教學(xué)主要內(nèi)容是免疫學(xué)基本實驗技術(shù)：淋巴細(xì)胞的分離、血清的分離、凝集實驗、沉淀實驗、吞噬實驗、熒光標(biāo)記技術(shù)、酶標(biāo)記技術(shù)、常見生物制品。醫(yī)學(xué)免疫學(xué)為臨床醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、法醫(yī)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)等專業(yè)學(xué)生進一步學(xué)習(xí)其他專業(yè)課程奠定了理論基礎(chǔ)，使學(xué)生更好地了解機體免疫系統(tǒng)的組成與功能，了解免疫系統(tǒng)在病理狀態(tài)下組成與功能的改變及其在發(fā)病機制中的作用，更好地將免疫學(xué)的基礎(chǔ)理論和實驗技術(shù)應(yīng)用到該專業(yè)其他各學(xué)科。

考核形式：閉卷考試

教材：《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》，人民衛(wèi)生出版社，陳慰峰，4版，2004年。參考書目：

1．《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，安云慶，1版，2004年。

2.《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》，科學(xué)出版社，龔非力，1版，2003年。

3．《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》，科學(xué)出版社，孫萬邦，2版，2002年。

4．《Roitt免疫學(xué)基礎(chǔ)》，高等教育出版社，Ivan.M,Roitt，10版，2002年。主講教師：孫萬邦 教授羅軍敏 副教授

姚新生 副教授湯賢英 講師