第一篇：轉(zhuǎn)基因大豆制品半定量檢測方法研究

轉(zhuǎn)基因大豆制品半定量檢測方法研究

轉(zhuǎn)基因作物發(fā)展迅速，2004年總種植面積8100萬公頃，增長率為20%。估計2010年將達(dá)到1.5億公頃，并將有多達(dá)30個國家的1500萬農(nóng)民種植生物技術(shù)作物。

轉(zhuǎn)基因作物在帶來巨大經(jīng)濟(jì)效益、社會效益與環(huán)境效益的同時，也產(chǎn)生了許多認(rèn)識和觀念問題。各國政府紛紛制定相應(yīng)的法律和法規(guī)，轉(zhuǎn)基因的定性檢測國內(nèi)外已有很多報道。瑞典轉(zhuǎn)基因檢測方法即是檢測35S啟動子，歐盟則要求檢測35S啟動子和NOS終止子。隨著各國轉(zhuǎn)基因法律和法規(guī)越來越嚴(yán)格，定量檢測顯得日趨重要。Marc Va?tilingom等用Real-Time PCR定量檢測抗草甘膦大豆，能定量分析含轉(zhuǎn)基因成分僅為0.01％的樣品。實時PCR技術(shù)自動化程度高、快速、靈敏度極高，但所需儀器十分昂貴，檢測費用也高，方法的標(biāo)準(zhǔn)化程度不高。本研究旨在利用普通PCR擴(kuò)增，結(jié)合國內(nèi)的實際，建立一套經(jīng)濟(jì)、簡便的半定量檢測方法。

定性檢測了轉(zhuǎn)基因大豆制品中插入的具有抗除草劑特性的CP4－EPSPS目的基因。用普通PCR擴(kuò)增，以大豆凝集素（lectin）基因為內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)，利用已知轉(zhuǎn)基因成分標(biāo)準(zhǔn)含量樣品與未知含量樣品進(jìn)行擴(kuò)增對比。經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳后銀染、成像，用凝膠分析軟件（Quantity One 4.5）進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，從而確定未知樣品轉(zhuǎn)基因含量。

隨著各國有關(guān)轉(zhuǎn)基因成分(GMO)標(biāo)簽法的建立和不斷完善，建立適合我國的轉(zhuǎn)基因食品國家標(biāo)準(zhǔn)檢測方法是刻不容緩的課題。本研究通過普通PCR與凝膠分析軟件的結(jié)合，利用分辨率較高的聚丙烯酰胺凝膠電泳和銀染技術(shù)，建立了一套經(jīng)濟(jì)、簡單可行的轉(zhuǎn)基因成分半定量檢測方法。

實踐證明，該方法經(jīng)濟(jì)且具有較高的準(zhǔn)確性。

關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因大豆 PCR檢測 半定量檢測

第二篇：工業(yè)廢水中可生物降解COD定量檢測方法

工業(yè)廢水中可生物降解COD定量檢測方法

廢水的可生化性是指廢水中所含污染物可被微生物降解的性質(zhì)，即廢水中有機(jī)污染物被生物降解的難以程度。它是廢水的重要特性之一。廢水中所含有機(jī)物除一部分容易被微生物分解、利用外，還含有一部分不易被微生物降解甚至對微生物的成長產(chǎn)生抑制作用的有機(jī)物。確定污水處理工藝時這些有機(jī)物的相對含量十分重要，決定了廢水采用生物處理的可行性及難易程度。因此，確定污水的可生物降解性COD的含量，對選擇污水處理工藝、判斷出水能否達(dá)標(biāo)及制定污水治理規(guī)劃具有重大意義。COD（Chemical Oxygen Demand）（化學(xué)需氧量）是水中有機(jī)物消耗氧的含量，是反應(yīng)廢水污染程度的重要指標(biāo)之一，是水質(zhì)監(jiān)測的重中之重，與我們的生活息息相關(guān)。化學(xué)需氧量COD是在一定的條件下，采用一定的強(qiáng)氧化劑處理水樣時，所消耗的氧化劑量。它是表示水中還原性物質(zhì)多少的一個指標(biāo)。水中的還原性物質(zhì)有各種有機(jī)物、亞硝酸鹽、硫化物、亞鐵鹽等。但主要的是有機(jī)物。因此，化學(xué)需氧量（COD）又往往作為衡量水中有機(jī)物質(zhì)含量多少的指標(biāo)。

常規(guī)可生物降解性判斷，對于可生化性的判定方法，在實驗室條件下主要有BOD5/CODCr（B/C）比值法、耗氧速率法、瓦勃呼吸儀法、生化模型試驗法、脫氧酶活性法和三磷酸腺苷（ATP）含量測定法、微生物反應(yīng)動力學(xué)等。實際運用中可操作性較強(qiáng)的只有B/C比值法和好氧呼吸法。其中以B/C比值法最常見。傳統(tǒng)觀點認(rèn)為B/C體現(xiàn)了廢水中可生物降解的有機(jī)污染物占有機(jī)污染物總量的比例，可用該值評價廢水在好氧條件下的微生物可降解性。

廢水的可生物降解性判斷方法很多，但都是定性判斷，無法對生化出水的COD進(jìn)行準(zhǔn)確預(yù)估，尤其是成分復(fù)雜的工業(yè)廢水誤差更大。針對工業(yè)廢水提出了可生物降解性COD的定量檢測分析方法，將其細(xì)分為易降解、可降解、難降解和不可降解4類，同時給出了具體的分類方法及分類標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)具體實驗驗證，該方法可以彌補B/C判定廢水可生化性時工業(yè)廢水誤差較大的缺陷。

第三篇：【新聞】150706轉(zhuǎn)基因檢測

由揚州市人民政府、中國檢驗檢疫學(xué)會、江蘇省食品藥品監(jiān)督管理局、南京工業(yè)大學(xué)、太平洋國際展覽有限公司主辦的“第八屆中國國際食品安全技術(shù)論壇(CBIFS 2015)”(以下簡稱：CBIFS 2015)4月9日在揚州會議中心正式開幕。這個中國食品安全技術(shù)領(lǐng)域規(guī)模最大、學(xué)術(shù)水平最高、科研成果最新和專業(yè)性最強(qiáng)的行業(yè)盛會，吸引了來自政府單位、科研機(jī)構(gòu)、大專院校、儀器廠商等單位的官員、學(xué)者、專家、廠商、學(xué)生等800余人參加。

會上，揚州市市長朱民陽說，“民以食為天，食以安為先”。食品安全是基本民生問題，關(guān)系著億萬人的生命健康。加強(qiáng)食品監(jiān)管，強(qiáng)化食品安全技術(shù)研發(fā)，提高食品安全保障能力，一直是各級政府緊抓在手的重要職責(zé)。中國檢驗檢疫學(xué)會會長魏傳忠也致辭表示，食品安全是一個世界各國共同面臨的嚴(yán)峻問題，保障食品安全，中國政府高度重視，需要構(gòu)建共治格局，需要夯實國家質(zhì)量基礎(chǔ)，需要提升技術(shù)支撐能力。

會議期間，與會有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)、嘉賓、專家圍繞生命健康產(chǎn)業(yè)發(fā)展、食品安全檢驗檢測舉行專題研討會。在4月9日下午開展的食品快速檢測專題技術(shù)交流會上，國家“千人計劃”特聘專家、華南理工大學(xué)教授應(yīng)大會組委會的邀請，為大家?guī)砹恕缎滦涂焖俎D(zhuǎn)基因檢測方法在食品中的應(yīng)用》的專題報告。

轉(zhuǎn)基因技術(shù)關(guān)系到國家未來糧食生產(chǎn)技術(shù)的自主性和創(chuàng)新性，大力推進(jìn)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的自主研發(fā)，占領(lǐng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的制高點對于國家安全具有重大意義。但由于轉(zhuǎn)基因食品的安全性仍存在爭議，國家對于轉(zhuǎn)基因食品安全性有一套嚴(yán)格的安全評價體系，對市面上非法轉(zhuǎn)基因食品的監(jiān)管也在日益加強(qiáng)，如何充分合理的評估轉(zhuǎn)基因糧食可能帶來的風(fēng)險，并未雨綢繆提前做好防范和規(guī)避風(fēng)險的準(zhǔn)備，已成為生產(chǎn)者和決策者面臨的頭等大事。石磊教授表示，國外許多政府檢測機(jī)構(gòu)都在大量使用快速檢測方法，尤其是ATP法、免疫法、阻抗法和顯色培養(yǎng)基法在國外應(yīng)用相當(dāng)成功，國內(nèi)的許多政府檢測機(jī)構(gòu)也都已經(jīng)在使用或正在考慮使用國外先進(jìn)的快速檢測技術(shù)，而從長遠(yuǎn)發(fā)展趨勢來說，快速方法是檢測的大方向。目前常用的轉(zhuǎn)基因檢測方法有膠體金免疫層析檢測條、PCR—聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)、熒光PCR技術(shù)等。他說，熒光定量PCR（qPCR）技術(shù)是目前主流的分子檢測技術(shù)，相關(guān)產(chǎn)品占據(jù)全球分子診斷市場的一半。然而這種技術(shù)由于核酸檢測過程復(fù)雜、實現(xiàn)核酸擴(kuò)增信號檢測設(shè)備價格高、對實驗室硬件條件要求高等問題，只局限于高端市場，普及推廣困難，基層醫(yī)療和檢測機(jī)構(gòu)需求得不到滿足。

基于此種現(xiàn)狀，石磊教授帶領(lǐng)其團(tuán)隊開發(fā)了新型恒溫?zé)晒夂怂釘U(kuò)增分子檢測平臺，其設(shè)備簡便、快速準(zhǔn)確，將反應(yīng)全過程恒定63℃，操作簡單易于推廣，是分子檢測技術(shù)的又一次革命，突破了現(xiàn)有的技術(shù)瓶頸，真正為分子檢測方法在基層的應(yīng)用打開了市場。

最后教授介紹了目前已經(jīng)成功產(chǎn)業(yè)化的“分子檢測技術(shù)平臺”。一臺恒溫?zé)晒鈾z測儀、搭配一臺金屬浴、一臺混勻器、一臺小型離心機(jī)及移液器和檢測試劑盒即可成為一套可移動的轉(zhuǎn)基因檢測實驗室，不僅可以用于轉(zhuǎn)基因快速檢測，還可用于致病微生物檢測、動物源性食品檢測、畜禽水產(chǎn)病害檢測等。

第四篇：LECD半定量評價法

危險源辨識、評價半定量分析

LEC評價法

(Likelihood Exposure Consequenc

e)

這是一種評價具有潛在危險性環(huán)境中作業(yè)的危險性半定量評價方法。它是用與系統(tǒng)風(fēng)險率有關(guān)的3種因素指標(biāo)值之積來評價系統(tǒng)人員傷亡風(fēng)險大小，這3種因素是：

L（Likelihood）為發(fā)生事故的可能性大??； E（Exposure)為人體暴露在這種危險環(huán)境中的頻繁程度；

C(Consequence)為一旦發(fā)生事故會造成的損失后果。

取得這3種因素的科學(xué)準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)是相當(dāng)繁瑣的過程，為了簡化評價過程，采取半定量計值法，給3種因素的不同等級分別確定不同的分值，再以3個分值的乘積D來評價危險性的大??；即D＝LEC。D值越大，說明該系統(tǒng)危險性大，需要增加安全措施，或改變發(fā)生事故的可能性，或減少人體暴露于危險環(huán)境中的頻繁程度，或減輕事故損 失，直至調(diào)整到允許范圍內(nèi)。表1 L為發(fā)生事故的可能性大小 分?jǐn)?shù)值 完全可以預(yù)料 10 相當(dāng)可能 6 可能，但不經(jīng)常 3 可能性小，完全意外 1 很不可能，可以設(shè)想 0.5 極不可能 0.2 實際不可能 0.1

表2

E暴露于危險環(huán)境的頻繁程度連續(xù)暴露 10 每天工作時間內(nèi)暴露 6 每周一次或偶然暴露 3 每月一次暴露 2 每年幾次暴露 1 非常罕見暴露 0.5

分?jǐn)?shù)值

表3

C為發(fā)生事故產(chǎn)生的后果 分?jǐn)?shù)值

大災(zāi)難，10人以上死亡 100 或造成重大財產(chǎn)損失

災(zāi)難，3～9人死亡或 40 造成很大財產(chǎn)損失

嚴(yán)重，1～2人死亡或多人重傷 15 或造成一定財產(chǎn)損失 較重，一人重傷致殘或 7 造成較小財產(chǎn)損失

幾人輕傷或造成較小財產(chǎn)損失 3

輕傷，需要治療救護(hù)，1 不造成財產(chǎn)損失。

Ｄ(Danger)——危險性分值。根據(jù)公式就可以計算作業(yè)的危險程度，但關(guān)鍵是如何確定各個分值和總分的評價。根據(jù)經(jīng)驗，總分在20以下是被認(rèn)為低危險的，這樣的危險比日常生活中騎自行車去上班還要安全些；如果危險分值到達(dá)70～160之間，那就有顯著的危險性，需要及時整改；如果危險分值在160～320之間，那么這是一種必須立即采取措施進(jìn)行整改的高度危險環(huán)境；分值在320以上的高分值表示環(huán)境非常危險，應(yīng)立即停止生產(chǎn)直到環(huán)境得到改善為止。危險等級的劃分是憑經(jīng)驗判斷，難免帶有局限性，不能認(rèn)為是普遍適用的，應(yīng)用時需要根據(jù)實際情況予以修正。危險等級劃分如表4所示。表4 危險源危險程度（D）采用公式D=L×E×C分?jǐn)?shù)值確定，其危險程度和等級劃分如下： 分?jǐn)?shù)值 危險程度 危險等級 ＞320 極其危險 5 160～320 高度危險 4 70～160 顯著危險 3 20～70 一般危險 2 ＜20 稍有危險 1

第五篇：轉(zhuǎn)基因食品安全研究感想

關(guān)于轉(zhuǎn)基因食品安全研究的感想

前一段時間，崔永元和方舟子關(guān)于轉(zhuǎn)基因食品在網(wǎng)上抄得火熱，很多人通過這個事件了解了“轉(zhuǎn)基因食品”。當(dāng)看到這個課題時，我就很快做了決定。

我通過前期的論文資料搜索與整理環(huán)節(jié)，在網(wǎng)上看到了不同的觀點，和很多獨特的見解。有人說：“轉(zhuǎn)基因技術(shù)不是圣杯，但它們是重要的工具。如果使用恰當(dāng)，可以為種植者帶來全新的產(chǎn)品，使消費者長期受益?！?，當(dāng)然也有人舉出了轉(zhuǎn)基因食品危害的事例，給我印象最深的是：在18世紀(jì)60年代左右，美國一些農(nóng)民第一次使用轉(zhuǎn)基因種子，然而種出來的食物并不盡如人意，當(dāng)他們把轉(zhuǎn)基因玉米當(dāng)做豬飼料為給豬吃的時候，那些豬卻都死了。這在當(dāng)時引起了不小的轟動。

但是，我認(rèn)為：科學(xué)是把雙刃劍，轉(zhuǎn)基因也一樣，雖說它有缺陷，但同樣它也有著自己的優(yōu)勢。我們正處在面對人類最大挑戰(zhàn)的邊緣上。全球人口在持續(xù)增長，2050年之前人口將突破95億。將會有20到30億人步入中產(chǎn)階級。對食物的需求將會在2050年翻倍。我們在未來的36年需要生產(chǎn)的糧食要比全世界歷史上生產(chǎn)的糧食加起來更多。這是個艱巨的挑戰(zhàn)，并且我們還面臨著氣候變化和水資源短缺等問題。但轉(zhuǎn)基因技術(shù) 卻可以有效地避免這個問題，大幅度提高糧食產(chǎn)量。

最后，我想說，轉(zhuǎn)基因技術(shù)是完美的嗎？當(dāng)然不是。它們需要規(guī)范，它們需要完善，它們需要被合理地應(yīng)用，這點同任何其他技術(shù)都一樣。害蟲對轉(zhuǎn)基因作物的抗性會增強(qiáng)，這點對任何殺蟲劑都一樣。我們知道雜草會演化出對除草劑的抗性，無論是轉(zhuǎn)基因作物系統(tǒng)還是其他作物系統(tǒng)的除草劑都沒有區(qū)別。我承認(rèn)這些是合理的顧慮，但是我相信科學(xué)可以對利用這些技術(shù)起到巨大的作用。