第一篇:血型原理,鑒定及交叉合血注意事項
血型原理,鑒定及交叉合血注意事項 醫(yī)訊網(wǎng) 凝集原和凝集素
A型血 紅細胞上只有凝集原A 血清里有凝集素B B型血 紅細胞上只有凝集原B 血清里有凝集素A AB型血 紅細胞上有凝集原A和B 血清里無凝集素 O型血 紅細胞上無凝集原 血清里有凝集素A和B
2.凝集反應
當B型的紅細胞(含B凝集原)與A型血清(含抗B凝集素)混合時,B型紅細胞就發(fā)生凝集反應;同樣,A型紅細胞可被B型血清所凝集;AB型紅細胞可被O、A和B血清所凝集;而O型紅細胞因不含凝集原,它與AB、A和B血清混合時,都不發(fā)生凝集。
你要記住的是,A凝集原和抗A凝集素在一起會溶血,B凝集原和抗B凝集素在一起會溶醫(yī)訊網(wǎng):http://004km.cn/
血,輸血輸?shù)氖羌t細胞,所以A型(A凝集原)不能輸給B型(抗A凝集素)和O型(抗A凝集素),B型(B凝集原)不能輸給O型(抗B凝集素)和A型(抗B凝集素),AB型的(A凝集原,B凝集原)不能輸給A型(抗B凝集素),B型(抗A凝集素),O型(抗A凝集素,抗B凝集素)。其實就是抗原不能和相同的凝集素在一起。
3.試題
用A型標準血清和B型標準血清對10人進行血型鑒定,其中6人與A型標準血清發(fā)生凝集反應,有2人與兩種標準血清都有凝集反應,有1人與良種標準血清都不發(fā)生凝集反應.那么,血型為A, B, AB,O 型的人數(shù)依次為???為什么? 4.分析:
當B型的紅細胞(含B凝集原)與A型血清(含抗B凝集素)混合時,B型紅細胞就發(fā)生凝集反應;同樣,A型紅細胞可被B型血清所凝集;AB型紅細胞可被O、A和B血清所凝集;而O型紅細胞因不含凝集原,它與AB、A和B血清混合時,都不發(fā)生凝集。有1人與良種標準血清都不發(fā)生凝集反應,就是有一個O 有2人與兩種標準血清都有凝集反應,就是有2個AB 6人與A型標準血清發(fā)生凝集反應,其中AB占2個,即剩余4個為B 除去以上7人,還剩3個,為A.5.交叉配血注意事項有哪些?(1)受血者配血試驗血樣必須是輸血前3天之內(nèi)的血,這樣才能代表患者當前的免疫狀況。(2)血庫要逐項核對輸血申請單,受血者和供血者血標本,復查受血者和供血者ABO血型(正、反定型)、Rh(D)血型,急診搶救患者緊急輸血時Rh(D)血型檢查可以除外。(3)要防止血標本的稀釋和溶血,以免影響交叉配血的判斷的準確性,其原因是溶血后的血紅蛋白可以掩蓋抗體引起的溶血。
(4)交叉配血不合時,對有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需要接受多次輸血者必須按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》有關(guān)規(guī)定作不規(guī)則抗體篩選試驗。
6.血型鑒定注意事項:
1.細胞自凝: 在冬天氣溫較低時,某些病人血清中含有冷凝集素而導致交叉配血假陽性;遇此現(xiàn)象可用37℃-40℃生理鹽水洗滌紅細胞并置37℃水溶中輕輕搖動,觀察結(jié)果。.若病人血清(血漿)含有肝素,如洗腎患者能影響配血,須多加4-6滴polybrene溶液以中和肝素。.紅細胞懸液為5%為宜,過濃或過淡可使抗原抗體比例不適當,反應不明顯易誤判。.各種原因引起的紅細胞溶解,誤判為不凝集,部分溶血時,可溶性血型物質(zhì)中和了相應的抗體。
5.方法局限性:
6.試管,滴管吸頭和玻片必須清潔干燥,防止溶血。
7.操作方法應按規(guī)定,先加血清,然后再加紅細胞懸液,以便容易核實是否漏加血清。
醫(yī)訊網(wǎng):http://004km.cn/
8.離心時間不宜過長或過短,速度不宜過快或過慢,以防假陽性或假陰性結(jié)果。
9.觀察時應注意紅細胞呈特異性凝集,繼發(fā)性凝固及線狀排列的區(qū)別。
, 交叉配血原則:
R 除非極為緊急情況,輸血前患者與獻血者必須進行交叉配血
R 受血者血清中無即刻或遲發(fā)性地凝集和(或)溶解所輸入的紅細胞的抗體 R 獻血者血清中無即刻或遲發(fā)性地凝集和(或)溶解受血者紅細胞的抗體
A:血型鑒定錯誤:出現(xiàn)問題最多的是受血者、獻血者紅細胞ABO血型不相容,其次才是技術(shù)錯誤。復查血型
(責任錯誤)
B:患者存在冷反應自身抗體:采用自身對照和37 ℃水浴以及遞增鹽水溫度洗滌患者紅細胞等方法排除非特異性凝集的干擾 C:患者存在溫反應自身抗體:采用吸收放散試驗后取患者的紅細胞與血清和同型的洗滌紅細胞進行交叉配血。
D:血清蛋白紊亂及白球蛋白比例倒置引起的假凝集:如多發(fā)性骨髓瘤、肺癌、肝癌患者等。多表現(xiàn)為主側(cè)凝集
E:ABO 以外的其它血型系統(tǒng)引起的交叉配血不合:常發(fā)生于有輸血史、妊娠史的患者,產(chǎn)生主側(cè)凝集。如抗-D、抗-E、抗-C、抗-c、抗-I、抗-e和抗-Fyb等,用經(jīng)篩選的不含相應抗原的血液進行交叉配血即可消除。
F:獻血者紅細胞DAT陽性:大約萬分之一健康人包被了IgG或補體的紅細胞,不應輸用此類細胞。
G: 獻血者紅細胞是多凝集紅細胞:正常人血清中可含有非紅細胞刺激而產(chǎn)生的自然發(fā)生的抗體,如抗-T、抗-Tn等。應篩選低水平抗-T、抗-Tn的血液
四、意外抗體篩選的意義和方法
意外抗體:是指除ABO血型系統(tǒng)抗體以外的其他抗體,如抗-D、抗-E等。主要經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生,人群檢出率為0.3%~2.0%,是引起遲發(fā)性免疫反應的主要原因。臨床有意義抗體:引起新生兒溶血病、溶血性輸血反應,或者使輸入的紅細胞存活期減少的、在37℃反應的同種異型抗體。(IAT陽性?。?/p>
臨床無意義抗體: 室溫或低溫反應的抗體,但抗-Vel,抗-P等,在體內(nèi)引起明顯的紅細胞破壞。
篩選方法要求:1.選擇敏感的技術(shù)檢測出受血者血清中非常低水平的臨床有意義抗體。高度注意!即使受血者血清中抗體對輸入的不相容紅細胞抗原呈弱反應,但也能夠發(fā)生快速的強的回憶反應,增加抗體產(chǎn)生,破壞紅細胞
2.每一試劑瓶中只能有一人份的試劑紅細胞,不可將多人份紅細胞混合,以避免紅細胞混合后對弱抗原紅細胞的稀釋。
醫(yī)訊網(wǎng):http://004km.cn/
附:交叉合血報告單
附: 什么是疑難交叉配血?
交叉配血是輸血前受血者與供血者抗原、抗體的相容性實驗,是臨床輸血的最后一道關(guān)口,分為主側(cè)配血、次側(cè)配血、自身對照三個實驗。主測為受血者血清+供血者紅細胞;次側(cè)為供血者血清+受血者紅細胞;自身對照為受血者血清+受血者紅細胞。當受血者、供血者ABO血型相符,而交叉配血主側(cè)或者次側(cè)出現(xiàn)凝集時,需要進一步查找原因及做有關(guān)實驗進行鑒定,這種情況通常稱之為疑難交叉配血。
大家都知道,血型與輸血有著密切的關(guān)系。血型除了可提供輸血和受血的依據(jù)之外,大量臨床實踐證明,不同血型的人,各種疾病的發(fā)生率也不一樣。下面是A、B、AB、O型血的人與一些常見疾病的關(guān)系。血型是飲食結(jié)構(gòu)決定的?
美國科學家皮特·達達莫博士認為,人類的血型是由進化決定的。
人類的4種血型——O型、A型、B型和AB型——并不是在所有的人身上同時出現(xiàn),而是由于不斷進化和人們在不同氣候地區(qū)定居下來后逐漸形成。在寒冷的年代,由于草原上可供吃用的東西匱乏,游牧部落不得不去適應新地形所能提供的新食物。由于新的飲食結(jié)構(gòu)出現(xiàn),人的消化系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)也會隨之有所變化,緊接著血型也會有所變化。
O型血的歷史最為悠久。它大約出現(xiàn)于公元前6萬至4萬年之間,當時的尼安德特人吃的是醫(yī)訊網(wǎng):http://004km.cn/
簡單的飯食:野草、昆蟲和從樹上掉下來猛獸吃剩下的果實。而4萬年前出現(xiàn)了克魯馬儂人,他們以狩獵為生。在獵光了所有的大野獸后,他們從非洲向歐洲和亞洲轉(zhuǎn)移。
A型血出現(xiàn)在公元前2.5萬年至1.5萬年之間。當時,我們的以果實為生的祖先逐漸變成雜食。隨著時間的推移,農(nóng)耕成為住在現(xiàn)今歐洲土地上的人們的主要生產(chǎn)式,野禽野獸開始接受馴養(yǎng),人的飲食結(jié)構(gòu)隨之發(fā)生變化。就是現(xiàn)在,絕大多數(shù)A型血的人都居住在西歐和日本。
B型血出現(xiàn)在約公元前1.5萬年至新紀元之間。當時東非的一部分人被迫從熱帶稀樹干草原遷徙到寒冷而貧瘠的喜馬拉雅山一帶。氣候的變化便成了催生B型血的主要因素。這種血型一開始出現(xiàn)在蒙古人種身上,隨著他們后來不斷向歐洲大陸遷徙,結(jié)果今天有很多東歐人都是這個血型。
人體的4種血型中最后出現(xiàn)的為AB型,它的出現(xiàn)還不到1000年的時間,是比較現(xiàn)代的血型。主要是由“攜帶”A型血的印歐語民族和“攜帶”B型血的蒙古人融合在一起后產(chǎn)生的。AB血型的人繼承了耐病的能力,他們的免疫系統(tǒng)更能抵抗細菌,但他們易患惡性腫瘤。
很快會出現(xiàn)第5種血型。完全有可能出現(xiàn)一種新血型,比如說C型。只有這種有新血型的人才能在人口過于稠密、自然資源所剩無幾的嚴重污染世界上生存下來,因為這時原先那4種血型,也就是說,有好幾十億甚至上百億的人將抵擋不住這種日益加劇的生態(tài)災難,他們會很快消失,這就是皮特血型的性格在幼兒期、少年期、青春期、中年期、老年期各有不同。
A型:忍耐力較強,但腦血管疾病發(fā)生率較高
A型人身體較靈巧,忍耐力較強,平時不常生病,但與腦血管疾病較有緣,尤其腦梗塞病人,為各血型之首。這是因為A型血對血液黏稠度升高有較大的易感染性,而血液黏稠度升高則是腦梗塞的重要發(fā)病因素之一。偏頭痛病患者中A型血的血小板黏附率也明顯高于正常對照組。此外,A型血的人較易患中風、癌癥等多種致命性疾病。另外,臨床資料統(tǒng)計,1/3的癌癥病人是A型血,A型血的人常易患的癌癥有肉瘤、胃癌、舌癌、食道癌等。特別是胃癌,A型血者明顯居多,且病變多發(fā)生在胃部,因此A型血的人,如有上腹痛、飽脹不適、消瘦、食欲減退、嘔吐、便血等癥狀,尤其是萎縮性胃炎者,應及早就醫(yī)診治。
B型:比其他血型更健康,但更容易患結(jié)核病
B型人動作靈活性頗佳,創(chuàng)造力強,具有好勝心。在疾病方面,除了容易患齲齒之外,其患結(jié)核病、口腔癌、乳腺癌和白血病的比例也普遍高于其他血型的人。但相比之下,B型血的人是人群中最健康的人,需要提醒的是,B型血的人器官移植的排異率比其他血型的人高2倍,與疾病相關(guān)的死亡率高達28%,為A型血者的2倍、O型血者的4倍。
AB型:反應比較敏捷,但患精神分裂癥幾率比其他血型高AB型人個性較冷靜沉著,神經(jīng)反應也較敏捷,據(jù)統(tǒng)計其患精神分裂癥幾率比其他血型高出3倍多,且有明顯的遺傳傾向,在缺血性心臟病病人中,也以AB型者居多。但AB型者患結(jié)核病、妊娠貧血的比率,則比其他血型的人低很多。
AB型血的人遭受癌癥及中風侵襲的可能性雖然小,但有人類“第一殺手”之稱的冠心病卻易光顧其身,而且一旦心臟受害,癥狀多較重,發(fā)生心肌梗塞的比例也明顯較高。此外,醫(yī)訊網(wǎng):http://004km.cn/
AB型血的女性最易患宮頸癌。
O型:新陳代謝旺盛,要學會控制自己的情緒
O型人強勁的生命力是你最大的資本,喜怒分明、個性率直導致新陳代謝旺盛,有如好勁動兒般的健康寶寶,可是過度的疲勞會慢慢的損耗你的健康??!必須試著讓自己沉穩(wěn)溫和一點,畢竟人只是血肉之軀,雖然運動有助于身體健康,但是適度的休息和睡眠一樣不可缺少。
以下內(nèi)容供研究專用:
血型鑒定和交叉配血中常見問題分析和處理包括:
一、血型相容性檢測
二、ABO血型正反定型型不一致的原因分析及處理
三、交叉配血中常見問題分析及處理
四、意外抗體篩選的意義和檢測方法
五、弱D檢測的的意義和檢測方法
一、血型相容性檢測
1、受血者和供血者AB0血型是否相容。
2、受血者和供血者RhD血型是否相容。
3、主次側(cè)交叉配血是否相容。
4、受血者血清中是否有臨床有意義的意外抗體。
二、ABO正反定型不符的原因分析和處理
(一)原因
1.實驗者操作技術(shù)的錯誤:
導致假陰性的有:①未加入抗體或血清。②未識別溶血。③血清與紅細胞比例不當 ④離心速度或時間不夠。⑤使用失效或錯誤試劑。⑥實驗結(jié)果記錄或解釋錯誤
導致假陽性的有:①離心速度過大或時間過長、②使用了受到細菌污染的試劑、③試驗器皿不干凈、④實驗結(jié)果記錄或解釋錯誤
2、紅細胞標本問題:①患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的紅細胞,如骨髓移植患者,或非O型人接受O型紅細胞
②某些ABO基因變異的個體或ABO亞型紅細胞,一些白血病或其他惡性疾病患者的紅細胞ABO抗原太弱,應用抗-A、抗-B試劑未能出現(xiàn)預期的凝集反應
③紅細胞獲得性或遺傳性的異常,如獲得性B抗原紅細胞或Tn/T多凝集紅細胞,人血清抗-A、抗-B試劑可能與這些異常的紅細胞反應
④使用未洗滌的紅細胞標本,其表面黏附的血漿或血清中含針對抗-A、抗-B試劑中染色劑或其他成分的抗體,出現(xiàn)假陽性反應
醫(yī)訊網(wǎng):http://004km.cn/
⑤患者血清中高活性、高濃度冷自身抗體嚴重致敏(包被)自身紅細胞,以至自發(fā)地發(fā)生凝集,而不是抗體試劑的特異性免疫反應所致 ⑥紅細胞表面包被IgG類抗體
3、血清標本的問題:①小的纖維蛋白凝集的紅細胞凝塊被誤認為是血液凝集,如使用血漿標本或未完全去除纖維蛋白的血清標本時。
②免疫抑制疾病患者血清中ABO抗體減少或消失。老年人ABO抗體減弱 ③4-6月齡內(nèi)嬰兒血清中ABO抗體陰性或很弱,一般只測正定型
④血清中不正常濃度和比例的蛋白質(zhì)成分或高分子蛋白增多可引起非特異凝集,如緡錢狀紅細胞的非特異凝集
⑤血清中含抗-A、抗-B以外的其他紅細胞抗體,如抗-M、抗-I等。⑥患者接受了ABO血型不同的骨髓移植 ⑦患者血清中含有針對紅細胞保護劑的抗體
⑧大量C 1分子由于異常高效價的補體結(jié)合抗體抗-A、抗-B作用,結(jié)合到紅細胞膜上,遮蔽了A、B抗原位點,不發(fā)生凝集
(二)、分析和處理
基本程序:1.重新采集標本,以避免采集、標記、污染等錯誤 2.查詢患者既往病史、輸血史、用藥史、骨髓移植史 3.徹底洗滌標本或試劑紅細胞
4.應用抗-AB、抗-A1、或抗-H檢測紅細胞
5.分析抗篩結(jié)果,確定結(jié)果是否受同種異型或自身冷抗體干擾 6.室溫孵育30min后,離心觀察結(jié)果,以檢測弱的抗原抗體反應 7.做自身紅細胞做對照,以確定自身抗體的干擾 ABO正反定型型不符的分類:
1.抗原表達減弱所致的ABO正反定型型不符
2.抗-A、抗-B血清的意外反應所致的ABO正反定型型不符 3.意外的血清學反應所致的ABO正反定型型不符 1.抗原表達減弱所致的ABO正反定型型不符: ①血型抗原表達減弱的常見原因: ↑ABO亞型紅細胞
↑白血病或其他惡性疾病患者的紅細胞ABO抗原太弱,應用抗-A、抗-B試劑未能出現(xiàn)預期的凝集反應 ↑新生兒
②抗原表達減弱所致ABO正反定型型不符的處理: ↑將抗-A、抗-B和抗-A,B試劑與洗滌過的紅細胞在室溫或4℃孵育30min,以增強抗原、抗體的結(jié)合
↑用木瓜酶、無花果酶和菠蘿蛋白酶處理紅細胞,以增強抗原、抗體的結(jié)合 ↑應用抗-AB、抗-A1、或抗-H檢測紅細胞
↑用人血清抗-A、抗-B進行吸收放散試驗,檢測弱A、B抗原,但不是所有單克隆抗體試劑都適宜做吸收放散試驗,單克隆抗-A、抗-B必須經(jīng)過系統(tǒng)驗證,且同時要做O型血吸收放散試驗作對照
↑檢測唾液中A、B和H血型抗原物質(zhì)
2.抗-A、抗-B血清的意外反應所致的ABO正反定型型不符 ①引起抗-A、抗-B血清意外反應的因素: 獲得性B紅細胞:獲得性B紅細胞(特征)醫(yī)訊網(wǎng):http://004km.cn/
↗常出現(xiàn)在有腸道細菌進入血循環(huán)的疾病,也可發(fā)生在正常人 ↗通常只有A 型人能出現(xiàn)獲得性B抗原
↗常伴有T和T n多凝集紅細胞出現(xiàn)(細菌感染時)↗自身抗-B不與自身獲得性B抗原反應(無自凝現(xiàn)象)獲得性B紅細胞(鑒定)↗調(diào)整人血清抗-B試劑pH至6.0時,即不與獲得性B細胞反應 ↗分泌型者唾液中無B血型物質(zhì)
↗乙酸酐處理能明顯減弱其反應,但正常B細胞不受影響
獲得性類A抗原
↗ 造血干細胞的體細胞突變可造成部分紅細胞持續(xù)性Tn抗原激活,類同A抗原
↗ Tn和T一樣屬隱蔽行院抗原,激活暴露后與所有血型的血清和人血清血型抗體出現(xiàn)凝集反應(全凝后多凝)↗蛋白酶能降解Tn分子,消除與抗A凝集反應性,而正常A抗原不受影響,也可通過AB血清證實
混合視野凝集
↗非O型人近期輸用O型血 ↗骨髓移植后
↗A3細胞與抗-A呈典型的混合視野凝集現(xiàn)象 ↗單合子的鑲嵌紅細胞后雙合子的交移體紅細胞 抗體包被紅細胞
↗患HDN嬰兒,存在自身免疫或同種異體免疫的成人,其紅細胞嚴重包被IgG抗體分子 ↗與含一定蛋白質(zhì)濃度的試劑(抗-D、抗-A、抗-B)產(chǎn)生凝集 ↗45 ℃放散后,抗體解離,即可準確定型
3.意外的血清學反應所致的ABO正反定型型不符 引起意外血清學反應的因素 ↑抗體太弱或消失
↑非正常高濃度的抗-A、抗-B可引起前帶現(xiàn)象 ↑A2、A2B或其他ABO亞型人血清中可能有抗-A1 ↑患者血漿蛋白濃度過高或靜脈輸用了大量大分子藥物等原因,可發(fā)生類似凝集現(xiàn)象,如緡錢狀凝集
↑冷自身抗體,如抗-I、抗-IH、抗-IA等 ↑自身免疫性溫型抗體 ↑同種抗體/意外抗體
意外的血清學反應所致的ABO正反定型型不符及其處理
▼抗體太弱或消失,如新生兒、老年人、免疫抑制患者,應注意患者的年齡和診斷
▼非正常高濃度的抗-A、抗-B可引起前帶現(xiàn)象,導致假陰性,將血清稀釋或用EDTA(2.5%)處理可消除
▼A2、A2B或其他ABO亞型人血清中可能有抗-A1, 抗-A1只凝集A1型紅細胞而不凝集A2、O型紅細胞
▼患者血漿蛋白濃度過高或靜脈輸用了大量大分子藥物等原因,可發(fā)生類似凝集現(xiàn)象,如緡錢狀凝集,將血清用生理鹽水稀釋3倍或用鹽水替換技術(shù)可消除 ▼冷自身抗體,如抗-I、抗-IH、抗-IA等(自凝),a.所有試劑及細胞37℃孵育,37℃下判讀結(jié)果 b.將冷自身抗體吸收
醫(yī)訊網(wǎng):http://004km.cn/
c.將血清用0.01mol/L DTT處理和再定型 ▼自身免疫性溫型抗體
↑自身免疫性溶血性貧血病人血清中可有溫型自身抗體 ↑37℃反應比室溫強
↑血清能凝集自身和其他各型紅細胞
↑若紅細胞上吸附有這種自身抗體,在自身或他人血清中均可出現(xiàn)凝集 ▼自身免疫性溫型抗體
↑正定型被誤認為AB型,反定型被誤認為O型:用遞增溫度(22℃,37℃,45℃)洗滌紅細胞后再做血型鑒定
▼同種抗體/意外抗體:室溫下抗-P、抗-M、抗E等,可能出現(xiàn)意外反應,干擾ABO血型鑒定,抗體特異性抗體鑒定,選擇抗原陰性的紅細胞做反定型 應用舉例
多發(fā)性骨髓瘤致ABO血型鑒定困難1例 多發(fā)性骨髓瘤(MM):一種惡性漿細胞疾病,大量分泌異常的單克隆免疫球蛋白(M 蛋白),影響紅細胞表面負電荷狀態(tài),血清蛋白濃度和比例異常, A/G比例失調(diào),紅細胞呈緡錢狀非特異性聚集,給血型鑒定帶來一定的困難。
病情簡介:患者,女,38歲,因骨痛、貧血 2個月入院;Hb 65 g/L ,WBC 6.4 ×109/L,PLT 90×109 /L, 尿本周蛋白陽性,BUN、Cr 均異常;骨髓象示:漿細胞37%。診斷:多發(fā)性骨髓瘤。有既往輸血史。
血型血清學檢查:正定型: A型,RhD(+),反定型: O型,直抗:(-),抗篩:(+)
處理:1.吸收試驗:6次洗滌后的患者RBC+等量的抗-A、抗-血清(1:128),4℃孵育1h →
離心,取上清,測吸收液的抗-A、抗-B效價
→
抗-A降低明顯,抗-B 1:128 2.放散試驗:吸收后的患者RBC用NS洗滌6次(徹底洗滌)+等量的NS56℃孵育10~15min →
放散液與5%標準 A、B型RBC反應
→
Ac:++,Bc:-
吸收放散試驗證明:患者RBC上有A抗原,無B抗原,為A型
3.將患者血清用O型標準RBC吸收:等份血清+等份O細胞,室溫 振蕩15~30min →
離心,取上清,轉(zhuǎn)移到另一等份O細胞中
→
吸收后的血清與標準A、B紅細胞反應
→
Ac:-,Bc: ++(患者血清中有抗-B,無抗-A)患者血型最終確定為A型 RhD(+),輸注2U 經(jīng)過篩選的A型懸浮RBC后,未見任何不良反應
三、交叉配血試驗中常見問題分析和處理 交叉配血原則:
R 除非極為緊急情況,輸血前患者與獻血者必須進行交叉配血
R 受血者血清中無即刻或遲發(fā)性地凝集和(或)溶解所輸入的紅細胞的抗體 R 獻血者血清中無即刻或遲發(fā)性地凝集和(或)溶解受血者紅細胞的抗體 交叉配血方法:
A:鹽水介質(zhì)交叉配血:只能檢出IgM類抗體(主為ABO血型系統(tǒng)抗體),無法檢出IgG,具有很大的危險性,只能在受血者血清中不含臨床有意義抗體的情況下進行。
B:檢測不完全抗體的交叉配血:
①臨床最常見的遲發(fā)型輸血反應——ABO系統(tǒng)以外的其他血型(如Rh)的IgG類抗體導致的血型不相容
②有輸血史、妊娠史或血清中有意外抗體的患者必須進行不完全抗體的交叉配血試驗 ③包括抗人球蛋白法、蛋白酶法、促凝劑法等
醫(yī)訊網(wǎng):http://004km.cn/
C:抗人球蛋白法: 鑒定不完全抗體最可靠的方法,傳統(tǒng)的抗人球法不能成為臨床輸血的常規(guī)檢驗。1986年, Lapierre發(fā)明的微柱凝膠抗球蛋白試驗準確、可靠、不需洗滌,可方便的應用于抗體篩檢和交叉配血試驗 交叉配血不相容的原因及解決辦法
A:血型鑒定錯誤:出現(xiàn)問題最多的是受血者、獻血者紅細胞ABO血型不相容,其次才是技術(shù)錯誤。復查血型
(責任錯誤)
B:患者存在冷反應自身抗體:采用自身對照和37 ℃水浴以及遞增鹽水溫度洗滌患者紅細胞等方法排除非特異性凝集的干擾 C:患者存在溫反應自身抗體:采用吸收放散試驗后取患者的紅細胞與血清和同型的洗滌紅細胞進行交叉配血。
D:血清蛋白紊亂及白球蛋白比例倒置引起的假凝集:如多發(fā)性骨髓瘤、肺癌、肝癌患者等。多表現(xiàn)為主側(cè)凝集
E:ABO 以外的其它血型系統(tǒng)引起的交叉配血不合:常發(fā)生于有輸血史、妊娠史的患者,產(chǎn)生主側(cè)凝集。如抗-D、抗-E、抗-C、抗-c、抗-I、抗-e和抗-Fyb等,用經(jīng)篩選的不含相應抗原的血液進行交叉配血即可消除。
F:獻血者紅細胞DAT陽性:大約萬分之一健康人包被了IgG或補體的紅細胞,不應輸用此類細胞。
G: 獻血者紅細胞是多凝集紅細胞:正常人血清中可含有非紅細胞刺激而產(chǎn)生的自然發(fā)生的抗體,如抗-T、抗-Tn等。應篩選低水平抗-T、抗-Tn的血液
四、意外抗體篩選的意義和方法
意外抗體:是指除ABO血型系統(tǒng)抗體以外的其他抗體,如抗-D、抗-E等。主要經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生,人群檢出率為0.3%~2.0%,是引起遲發(fā)性免疫反應的主要原因。臨床有意義抗體:引起新生兒溶血病、溶血性輸血反應,或者使輸入的紅細胞存活期減少的、在37℃反應的同種異型抗體。(IAT陽性?。?/p>
臨床無意義抗體: 室溫或低溫反應的抗體,但抗-Vel,抗-P等,在體內(nèi)引起明顯的紅細胞破壞。
篩選方法要求:1.選擇敏感的技術(shù)檢測出受血者血清中非常低水平的臨床有意義抗體。高度注意!即使受血者血清中抗體對輸入的不相容紅細胞抗原呈弱反應,但也能夠發(fā)生快速的強的回憶反應,增加抗體產(chǎn)生,破壞紅細胞
2.每一試劑瓶中只能有一人份的試劑紅細胞,不可將多人份紅細胞混合,以避免紅細胞混合后對弱抗原紅細胞的稀釋。
FDA對試劑紅細胞抗原表達的要求:D,C,E,c,e,M,N,S,s,PI,Le, Lea, Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka, Jkb.篩選方法實驗方法:1.鹽水直接凝集試驗: 是最簡單的血型血清學方法,緊急情況下可在室溫下立即離心??蓹z出室溫或低于室溫反應的臨床意義不大的抗體如抗-M、抗-N、抗-P、抗-Lea等
2.球蛋白試驗: 可檢出絕大部分臨床有意義的不完全抗體,抗球蛋白試劑要有多特異性抗球蛋白抗體,其中含有抗-IgG和抗-C3d。含抗補體的球蛋白也能夠檢出結(jié)合補體的無臨床意義的冷抗體,如抗-I、抗-HI等
3.其他試驗:蛋白酶試驗、聚乙二醇試驗、LISS和微柱凝膠試驗等
各種試驗都有其本身的特點,適用不同范圍,實驗室應根據(jù)自己的條件,建立實驗室常規(guī)試驗程序和規(guī)程
抗體特異性鑒定:血清標本,EDTA抗凝(避免補體體外致敏紅細胞)血漿標本 病史:輸血、妊娠、用藥
醫(yī)訊網(wǎng):http://004km.cn/
試劑:譜細胞、增強介質(zhì),抗人球蛋白試劑 自身對照
對譜細胞的要求A:不少于8人份的O型紅細胞 B:血型系統(tǒng)包括: Rh,Kell,Duffy,Kidd,P,Lewis,MNS 自身對照的意義:陰性:血清只與試劑紅細胞反應,只有同種抗體存在 陽性:有自身抗體存在,或與同種抗體并存 自身吸收后鑒定同種抗體!
抗體篩選的意義
A:發(fā)現(xiàn)臨床有意義的抗體 B:減少溶血性輸血反應的發(fā)生 C:有利于免疫溶血性疾病的診斷
D:有利于提前選擇和準備相合的血液 E:確保臨床輸血安全、及時、有效
1.抗體篩選陰性,鹽水介質(zhì)交叉配血不相容 A:供受血者ABO血型不相容
B:受血者A2或A2B亞型,血清中抗A1與供血者A1或AB型紅細胞凝集 C:存在室溫反應的同種抗體,如抗-M等
D:獻血者是多凝紅細胞,隱蔽抗原T、Tn等暴露
2.抗體篩選陰性,檢測不完全抗體的交叉配血不相容
獻血者是紅細胞DAT陽性 萬分之一健康人紅細胞表面包被IgG或補體,不應該輸此類紅細胞
??贵w與低頻抗原反應 人群1%血清中含有針對低頻抗原的抗體 篩選細胞一般缺少低頻抗原
3.抗體篩選陽性,交叉配血相容
A:自身抗-H,O型紅細胞含有大量H抗原,而A1、A1B含量很低。室溫反應,37℃無反應,無臨床意義
B:獻血者紅細胞正好不含對應的抗原
C:抗-Lebh 只與O型Le(a-b+)反應,不與A1、A1B Le(a-b+)反應,室溫反應,37℃無反應,臨床意義不大
4.抗體篩選陽性,交叉配血不相容
①、同種抗體存在,自身對照陰性 選擇對應抗原陰性的血做交叉。如抗體是抗-M、抗N、抗-P1、抗-Lea等就無須確認對應抗原缺失,但需37℃交叉配合 ②、同種抗體存在,自身對照陽性
↑近期(2-3月)接受過輸血的患者體內(nèi)的同種抗體可引起自身對照陽性 ↑循環(huán)中的自身抗體可引起自身對照陽性 ↑區(qū)別兩者很重要(很難),因選擇紅細胞程序不同
↑可用對應抗原陽性的細胞做吸收放散實驗來證實同種抗體存在 ↑患者血清中的同種抗體可與輸入的紅細胞起反應 ↑如是有意義的抗體,應選擇抗原陰性紅細胞輸血 ↑37度抗人球交叉配血相合是必須的 ③、冷反應自身抗體
↑強反應冷抗體(疾?。┮鹧丸b定和交叉配血困難,臨床意義不大 ↑37℃抗人球交叉配血相合是必須的
醫(yī)訊網(wǎng):http://004km.cn/
④、溫反應自身抗體
↑抗體篩選陽性,交叉配血不相容
↑必須分析血清中是否含有有意義的抗體 ↑造成輸血困難,可經(jīng)放散后配血
↑37度抗人球交叉配血最低血清學不相容原則
醫(yī)訊網(wǎng):http://004km.cn/
第二篇:血型鑒定與交叉配血制度
血型鑒定與交叉配血制度
1.病人急需鑒定血型或交叉配合時,醫(yī)生應在檢驗單上注明“急”字,并注明時間到分。
2.血型鑒定包括ABO血型和Rh(D)血型,兩人核對操作,正反定型相符,方可報告。
3.交叉配血試驗的血樣標本必須是輸血前3天之內(nèi)的。
4.輸血科工作人員必須認真核對申請單、受血者和供血者的血樣,復查受血者和供血者ABO血型,Rh(D)血型,正確無誤后再進行交叉配血。5.凡輸注全血、濃縮RBC、洗滌RBC、冰凍RBC、濃縮WBC、濃縮血小板、機采血小板,都應做交叉配血試驗,輸注血漿(普通漿、冰凍血漿)也應做次側(cè)配血試驗。
6.血庫必須嚴格按照實驗規(guī)程操作,認真仔細做好交叉配血試驗,兩人核對操作相符,方可報告,并詳細填寫好“交叉配血報告單”,報告單上必須雙人簽名,時間精確到分鐘。
7.交叉配血合格后,受血者與供血者的血樣及主側(cè)、次側(cè)管均應放入2~6℃專用冰箱內(nèi)至少保存7天,以備對輸血不良反應追查原因。
8.對于手術(shù)上或其他急診大輸血時,輸血科應先交叉配合1~2袋血并及時送往病室或手術(shù)室,然后再交叉配合剩下的血液。
第三篇:交叉配血和定血型的注意事項
交叉配血和定血型的注意事項
一、操作技術(shù)錯誤(最常見)
二、紅細胞標本問題
1、未加入抗體或血清
2、實驗溫度(37℃凝集會下降)
3、未識別溶血
4、血清與紅細胞比例不當
5、離心速度、時間不夠
6、使用失效或錯誤試劑
7、實驗結(jié)果記錄、解釋錯誤
8、離心速度過大、時間過長
9、使用了受到細菌污染的試劑
10、試驗器皿不干凈
11、實驗結(jié)果記錄、解釋錯誤
患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的紅細胞,如骨髓移植患者,或非O型人接受O型紅細胞
某些ABO基因變異的個體或ABO亞型紅細胞,一些白血病或其他惡性疾病患者的紅細胞ABO抗原太弱,應用抗-A、抗-B試劑未能出現(xiàn)預期的凝集反應
紅細胞獲得性或遺傳性的異常,如獲得性B抗原紅細胞或Tn/T多凝集紅細胞,人血清抗-A、抗-B試劑可能與這些異常的紅細胞反應 使用未洗滌的紅細胞標本,其表面黏附的血漿或血清中含針對抗-A、抗-B試劑中染色劑或其他成分的抗體,出現(xiàn)假陽性反應
患者血清中高活性、高濃度冷自身抗體嚴重致敏(包被)自身紅細胞,以至自發(fā)地發(fā)生凝集,而不是抗體試劑的特異性免疫反應所致
紅細胞表面包被IgG類抗體
三、血清標本的問題
小的纖維蛋白凝集的紅細胞凝塊被誤認為是血液凝集,如使用血漿標本或未完全去除纖維蛋白的血清標本時。
免疫抑制疾病患者血清中ABO抗體減少或消失。老年人ABO抗體減弱
4-6月齡內(nèi)嬰兒血清中ABO抗體陰性或很弱,一般只測正定 血清中不正常濃度和比例的蛋白質(zhì)成分或高分子蛋白增多可引起非特異凝集,如緡錢狀紅細胞的非特異凝集。
血清中含抗-A、抗-B以外的其他紅細胞抗體,如抗-M、抗-I等。
患者接受了ABO血型不同的骨髓移植 患者血清中含有針對紅細胞保護劑的抗體
大量C 1分子由于異常高效價的補體結(jié)合抗體抗-A、抗-B作用,結(jié)合到紅細胞膜上,遮蔽了A、B抗原位點,不發(fā)生凝集
四、分析和處理
1、重新采集標本,以避免采集、標記、污染等錯誤
2、查詢患者既往病史、輸血史、用藥史、骨髓移植史
3、徹底洗滌標本或試劑紅細胞
4、應用抗-AB、抗-A1、或抗-H檢測紅細胞
5、分析抗篩結(jié)果,確定結(jié)果是否受同種異型或自身冷抗體干擾
6、室溫孵育30min后,離心觀察結(jié)果,以檢測弱的抗原抗體反應
7、做自身紅細胞做對照,以確定自身抗體的干擾 意外的血清學反應所致的ABO正反定不符 抗體太弱或消失
非正常高濃度的抗-A、抗-B可引起前帶現(xiàn)象 A2、A2B或其他ABO亞型人血清中可能有抗-A1 患者血漿蛋白濃度過高或靜脈輸用了大量大分子藥物等原因,可發(fā)生類似凝集現(xiàn)象,如緡錢狀凝集
冷自身抗體,如抗-I、抗-IH、抗-IA等 自身免疫性溫型抗體 同種抗體/意外抗體
五、ABO正反定不符及其處理
1、抗體太弱或消失
如新生兒、老年人、免疫抑制患者,應注意患者的年齡和診斷
2、非正常高濃度的抗-A、抗-B可引起前帶現(xiàn)象,導致假陰性,將血清稀釋或用EDTA(2.5%)處理可消除
3、A2、A2B或其他ABO亞型人血清中可能有抗-A1, 抗-A1只凝集A1型紅細胞而不凝集A2、O型紅細胞
4、患者血漿蛋白濃度過高或靜脈輸用了大量大分子藥物等原因,可發(fā)生類似凝集現(xiàn)象,如緡錢狀凝集
將血清用生理鹽水稀釋3倍或用鹽水替換技術(shù)可消除
5、冷自身抗體,如抗-I、抗-IH、抗-IA等(自凝)(1)所有試劑及細胞37℃孵育,37℃下判讀結(jié)果(2)將冷自身抗體吸收
(3)將血清用0.01mol/L DTT處理和再定型
6、自身免疫性溫型抗體
自身免疫性溶血性貧血病人血清中可有溫型自身抗體,37℃反應比室溫強
血清能凝集自身和其他各型紅細胞,若紅細胞上吸附自這種自身抗體,在自身或他人血清中均可出現(xiàn)凝集,正定被誤認為AB型,反定被誤認為O型。
用遞增溫度(22℃,37℃,45℃)洗滌紅細胞后再做血型鑒定
7、同種抗體/意外抗體
室溫下抗-P、抗-M、抗E等,可能出現(xiàn)意外反應,干擾ABO血型鑒定
抗體特異性抗體鑒定,選擇抗原陰性的紅細胞做反定
六、應用舉例
多發(fā)性骨髓瘤致ABO血型鑒定困難1例 多發(fā)性骨髓瘤(MM):
一種惡性漿細胞疾病,大量分泌異常的單克隆免疫球蛋白(M 蛋白),影響紅細胞表面負電荷狀態(tài),血清蛋白濃度和比例異常,A/G比例失調(diào),紅細胞呈緡錢狀非特異性聚集,給血型鑒定帶來一定的困難。
血型血清學檢查
正定: A型,RhD(+)反定: O型 直抗:(-)抗篩:(+)處理
1、吸收試驗
6次洗滌后的患者壓積紅細胞加等量的抗-A、抗-B血清(1:128)4℃ 1h,離心,取上清,測吸收液的抗-A、抗-B效價
抗-A降低明顯,抗-B 1:128
2、放散試驗
吸收后的患者RBC用NS洗滌6次+等量的NS,56℃ 10~15min,放散液與5%標準 A、B RBC反應,Ac:++ Bc:Bc:++
說明患者血清中有抗-B,無抗-A 患者血型最終確定為A型 RhD(+),輸注2U 經(jīng)過篩選的A型懸浮RBC后,未見任何不良反應。
第四篇:血型及交叉配血檢驗
紅細胞血型
血型:是指各種血液成分的遺傳多態(tài)性,它受獨立的遺傳基因所控制。由若干個相互關(guān)聯(lián)的抗原抗體組成的血型體系稱血型系統(tǒng)。
目前已發(fā)現(xiàn)的紅細胞抗原有400余種,被歸納為27個血型系統(tǒng)。其中發(fā)現(xiàn)最早,且與人類輸血關(guān)系最密切的是ABO血型系統(tǒng),其次是Rh血型系統(tǒng)。
ABO血型系統(tǒng)
現(xiàn)知ABO遺傳座位在第9號染色體長臂上,A基因的產(chǎn)物是N-乙酰半乳糖轉(zhuǎn)移酶,它能把α-N-乙酰半乳糖分子接到一個前身物糖蛋白上,產(chǎn)生A抗原決定簇;B基因的產(chǎn)物是半乳糖轉(zhuǎn)換酶,它能把α-D-半乳糖接到前身物糖蛋白上并產(chǎn)生B抗原決定簇;O基因不編碼酶,因此是一個無效等位基因,故O型又被稱為缺失型(nun type);AB雜合子分別由A和B基因產(chǎn)生AB兩種酶。
不同個體紅細胞膜抗原經(jīng)上述某種遺傳基因作用,形成A、B、O、AB四種正常型別和許多亞型。它們的分型原則是:紅細胞上有A抗原,血清中有抗B抗體的為A型,紅細胞上有B抗原,血清中有抗A抗體的為B型;紅細胞上有A和B兩種抗原,血清中不含抗A和抗B的為AB型;紅細胞上沒有A和B抗原,血清中卻有抗A和抗B抗體者為O型,H抗原存在于ABO各型紅細胞上,稱為H物質(zhì)(基礎(chǔ)抗原),但以O(shè)型最多。ABO血型系統(tǒng)的共同特點是紅細胞上含有某種抗原,血清中就不存在對應的天然抗體。反之,血清中含有某種天然抗體,紅細胞上就不存在其對應抗原,此規(guī)律是Landsteiner在1900年首先發(fā)現(xiàn)的,故稱Landsteiner定律。根據(jù)此規(guī)律用標準抗血清檢測紅細胞上的抗原(正定血型),或用標準紅細胞檢測被檢者血清中抗體(反定血型)來判斷血型。
ABO血型鑒定的應用價值主要在于:
(1)在輸血中尋找合適供體;
(2)在皮膚及腎移植上的供體選擇;
(3)在不孕癥和新生兒溶血癥病因研究中的應用;
(4)ABO血型檢測還可用于親子鑒定、可疑血跡、精斑、毛發(fā)等的鑒定,以及與某些疾病相關(guān)的調(diào)查等。
另外,在ABO血型系統(tǒng)中尚存在一些變異型,簡稱之為亞型。如A型中的A2、A3、Ax、Am等;在B型中的B2、B3、Bx、Bm等。它們共同的規(guī)律是紅細胞上的抗原較弱,少數(shù)個體尚存在有不規(guī)則的同種抗體。有些亞型抗原甚至弱到與抗血清的反應難以用肉眼觀察的地步,必須用吸收和放散的方法證實其抗原抗體反應的存在。
了解亞型的重要性在于:
(1)易造成誤定血型,可使配血不合;
(2)有額外抗體(如抗A、抗B)者常使同型間配血發(fā)生困難;
(3)誤輸入不相合的亞型血(抗原),可使缺乏此抗原的受血者產(chǎn)生免疫性血型抗體,造成溶血的潛在威脅。Rh血型系統(tǒng)
Rh血型常見的抗原(又稱因子)有5種(理論上推測有6種),分別是D、C、E、c、e(d未能證實)。尚有一些變異型,如Du、Cw、En等。目前能識別的Rh系統(tǒng)抗原共4 3種。與ABO系統(tǒng)不同的是此系統(tǒng)很少有天然抗體,大部分抗體均由免疫刺激產(chǎn)生。
Rh系統(tǒng)中D抗原的免疫性最強,正常D陰性受血者接受一次D陽性紅細胞輸血后,產(chǎn)生抗體的機率>50%。因此,臨床上往往以D抗原的存在與否定為Rh陽性或陰性。我國漢族人D陰性的比率較低,約占人群的0.2%~0.4%。因而Rh系統(tǒng)抗D所致的溶血反應與新生兒溶血病的比率遠低于白種人,但輸血和妊娠中不相合抗原所致的抗E、抗C、抗Ce、抗cE并非少見,應引起臨床醫(yī)生的高度重視。
由免疫刺激而產(chǎn)生的抗體多為小分子IgG類,在鹽水介質(zhì)配血試驗中,與相應抗原的反應僅表現(xiàn)為“致敏”,肉眼見不到凝集現(xiàn)象,必須選用木瓜酶(菠蘿酶)或抗人球蛋白介質(zhì)等檢測手段才能發(fā)現(xiàn)不相合抗體。Rh血型檢測在臨床上的意義
1.Rh血型與輸血的關(guān)系
因為正常人血中一般不存在Rh天然抗體,所以在第一次輸血時,往往不會發(fā)現(xiàn)Rh血型的不合。Rh陰性的病人輸受了Rh陽性的血液后,可產(chǎn)生免疫的抗Rh抗體,當病人再次輸受Rh陽性的血液時,就可以出現(xiàn)溶血性輸血反應,如果將此病人的血液再輸給另外一個Rh陽性的人,由于免疫性抗體不能被中和,也可以致敏受血者的紅細胞而產(chǎn)生溶血,在西歐各國大部分輸血反應都是由抗D抗體引起。
2.與妊娠及新生兒溶血病的關(guān)系
Rh陰性的婦女如孕育Rh陽性的胎兒,胎兒的紅細胞可經(jīng)過有損傷的胎盤進人母體,刺激母體產(chǎn)生免疫性抗Rh抗體。此抗體可以通過胎盤進入胎兒血液循環(huán),與胎兒的Rh陽性紅細胞產(chǎn)生抗原抗體反應,破壞胎兒紅細胞,甚至毒害中樞神經(jīng)細胞(核黃疸),造成新生兒溶血性貧血、流產(chǎn)或死產(chǎn);如果孕婦需要輸血,又不慎輸給了Rh陽性血,也能造成嚴重的溶血反應。由于Rh系統(tǒng)存在天然抗體的機率很低,如果孕婦在受孕Rh陽性胎兒前,沒有輸過Rh陽性的血液,也沒有注射過含有Rh抗原的血清、全血或血液制品,在第一胎時由于體內(nèi)抗體效價不高,一般可以正常分娩、存活。如果孕前接受過含Rh抗原的注射或輸血,第一胎就可以出現(xiàn)新生兒溶血病(也有少數(shù)人沒有Rh抗原的接觸史,而第一胎就發(fā)病)。一般胎次越多,孕婦血中的免疫性抗體效價也越高,對胎兒的損害也越嚴重。但是也有Rh陰性婦女,妊娠多次,沒有一個胎兒出現(xiàn)新生兒溶血病。因此,母體在什么情況下才能產(chǎn)生免疫性抗體,至今還不完全明了。
3.Rh抗體可以出現(xiàn)在乳汁、腹水、羊水等體液中,如果羊水中抗體的滴度達到1:64時,說明胎兒有受到Rh抗體嚴重侵犯的危險,所以檢查羊水中的Rh抗體,可以作為了解胎兒現(xiàn)狀的一種指標。
血小板血型
血小板血型抗原有兩大類:一類主要存在于血小板膜糖蛋白上的特異性抗原;另一類是與其它血細胞所共有,包括HLA I類抗原和A、B、H、Le、I及P抗原。
已報道的血小板特異性同種抗原(血小板特異性抗原)系統(tǒng)至少有11個。按發(fā)現(xiàn)的時間順序排列如下:Duzo、PIA(ZW)、PIE、Ko(Sib)Bak(Lek)、Yuk(Perl)、Br(Hc、Zav)、PLT、Nak、GoV和Sr。其中Duzo自首次報道后未再有進一步研究。而PIE和Nak抗體的先證者已被發(fā)現(xiàn)分別是血小板糖蛋白(GP)Ib缺陷的巨血小板綜合征患者或GPⅣ缺陷者,因此這兩種抗原應列入同族抗原的范圍。PLA、Ko、Bak、Yuk、Br、GoV等系統(tǒng)都已被證實由常染色體雙等位基因以共顯性模式控制。其余抗原系統(tǒng)也為常染色顯性遺傳,但是否為雙等位共顯性模式有待證實。
檢測血小板抗原抗體反應的方法有血小板凝集試驗、補體結(jié)合試驗、抗人球蛋白消耗試驗、免疫熒光試驗等。
血小板抗體多為獲得性免疫抗體、這種抗體會導致許多免疫性血小板疾病的發(fā)生,如原發(fā)性血小板減少性紫癜、新生兒血小板減少性紫癜、自身免疫性貧血伴血小板減少癥綜合征)、輸血后紫癜、藥物免疫性血小板減少性紫癜等。多次輸注抗原不同血小板時所產(chǎn)生的抗血小板抗體,也可導致輸人血反應、血小板輸注無效和血小板減少癥等。
輸血前相容性檢查
血型是一個非常龐大而又復雜的系統(tǒng),加之某些疾病過程中還會出現(xiàn)血型暫時性變異,為了防止輸入血型不合的血液,在輸血前作相容性檢查,常規(guī)須作交叉配血試驗,即將供血
者的血球和血清分別與受血者血清和血球進行交容反應,觀察他們之間的相容性。交叉配血試驗的目的在于: 1.發(fā)現(xiàn)ABO血型鑒定的錯誤
如將A型或A亞型獻血員誤定為O型,當與O型病人交叉配血時,患者血清與獻血員紅細胞即可出現(xiàn)凝集,從而避免嚴重的溶血性輸血反應。
2.發(fā)現(xiàn)不規(guī)則凝集素
如含抗A 1不規(guī)則凝集素的A 2型血清,與A 1型獻血員紅細 胞配血時,可出現(xiàn)凝集,這種不規(guī)則凝集一般為冷凝素,如效價不高影響不大,但若為免疫性抗體,3 7℃條件下效價較高,就必須選用亞型相同的血液,否則可產(chǎn)生溶血性輸血反應。3.發(fā)現(xiàn)其他血型抗體
如抗P1、抗H等天然抗體和抗Rh等免疫性抗體,雖然輸人的血液ABO血型相同,但Rh或其他血型不同,同時能引起嚴重的溶血性輸血反應。交叉配血的方法:
1.無輸入史及異常妊娠史者,可只作鹽水配血。
2.凡有輸血反應史和原因不明的流產(chǎn)史或生育過有新生兒溶血病嬰兒的婦女,皆可有免疫性抗體。應用木瓜酶、抗人球蛋白法等不完全抗體配血法。
3.病人在48小時內(nèi)輸入5L或更多血時,叫做大量輸血,此時要多個獻血員供給血液,如果獻血員之間有不規(guī)則抗體或ABO系統(tǒng)以外的抗體,也能互相作用,引起不良輸血反應,此時應作大量輸血的平板配血法。
4.對多發(fā)性骨髓瘤、進行性結(jié)核病、肝病及輸受過右旋糖酐的病人,避免假陽性,最好也作抗人球蛋白配血。
同型之間交叉配血不合時的處理:
1.與個別同型獻血員不能配合,可另選同型獻血員進行配血。
2.當病人與多個獻血員配血不合時,如為鹽水介質(zhì)配血不合,應考慮到:
(1)ABO血型錯誤,須用正規(guī)方法復查血型;
(2)是否ABO亞型不合,并含有不規(guī)則凝集素,應作亞型和不規(guī)則抗體的檢定;
(3)是否有非特異性凝集,如紅細胞線串狀形成、寒冷凝集、自身免疫性溫性抗體凝集、T凝集與H凝集、類B抗原凝集等,用相應方法進行確證。如為不完全抗體配血法陽性,應考慮Rh血型不同或其他系統(tǒng)免疫性抗體的存在。
第五篇:血涂片制作和白細胞分類/ABO血型鑒定
姓名:
學號:
實驗報告
說明:
1、實驗報告務(wù)必獨完成,對抄襲者將按不及格處理;
2、實驗報告的格式請按下面的各項要求來填寫,不要改動;
3、正文字體統(tǒng)一用“仿宋-GB2312”、,小四號,單倍行距,小標題加黑;
4、下面的“替換這里”字體底紋在完成后去除;
5、實驗報告按時上傳,上傳時文件名統(tǒng)一按照網(wǎng)上說明來命名; 實驗名稱:血涂片制作和白細胞分類/ABO血型鑒定
同組姓名: 實驗日期:4.13 室 溫: 氣 壓: 成 績: 教 師:
一、實驗結(jié)果
(一)觀察到的紅細胞、白細胞
(1)單核細胞
(2)淋巴細胞
(3)嗜中性細胞
(4)嗜酸性細胞
(二)ABO血型鑒定結(jié)果
將本人血液加入到抗A凝集素和抗B凝集素中后均不發(fā)生凝集反應,加入到抗B凝集素中后顏色為血液原來的鮮紅顏色;加到抗A凝集素后顏色變深但無凝血反應。
二、分析與討論
(1)紅細胞、白細胞的觀察
血液由血漿和血細胞組成,而血細胞主要包括紅細胞、白細胞和血小板。其中紅細胞數(shù)量最多,約占全血體積的45%,成熟紅細胞沒有細胞核,呈中央凹的圓盤狀。在油鏡下觀察紅細胞,首先在數(shù)量上它占絕對優(yōu)勢,分布均勻,其次呈紅色的圓形或橢球形。圖片中數(shù)量最多的紅色圓球形細胞便是紅細胞。而白細胞和血小板所占體積不足1%。對白細胞進行瑞氏染色后根據(jù)細胞的染色特征,可將其分為兩大類:1.顆粒白細胞:嗜中性粒細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞;2.無顆粒細胞:淋巴細胞核單核細胞。其中嗜中性粒細胞細胞大小約10-12μm,核多分葉2-5葉或不分葉為桿狀,顆粒細小,紫紅色,約占白細胞的50%-70%;嗜酸性粒細胞細胞大小約10-15μm,核常分為2葉,顆粒粗大,分布均勻,桔紅色,約占白細胞的0.5%-3%;嗜堿性粒細胞10-12μm核常呈S形(十分肥大)或不規(guī)則顆粒大小不等,分布不勻, 紫藍色,約占白細胞的 0%-1%,數(shù)量極少,因此找到它需要運氣、知識和眼力;淋巴細胞分大中小6-12μm以6-8μm居多,核圓或隨圓形,很少,天藍色,約占白細胞的20%-30%;單核細胞染色質(zhì)致密,深紫色,大小約14-20μm,腎形或馬蹄形,胞質(zhì)多常染成淺灰藍色,染色質(zhì)疏松,著色較淺約占白細胞的3%-8%。白細胞的數(shù)量隨不同的生理狀態(tài)會有較大的波動,在實驗觀察中,以嗜中性粒細胞數(shù)最多,其次為淋巴細胞,單核細胞和嗜酸性細胞均只發(fā)現(xiàn)一個而嗜堿性細胞沒發(fā)現(xiàn)。在觀察白細胞類型時,首先觀察是否存在顆粒,若無顆粒主要根據(jù)核質(zhì)比,大的為淋巴細胞和核的形狀馬蹄型為單核細胞;若有顆粒則根據(jù)核的分葉數(shù)、形狀;顆粒大小、顏色、以及顏色深淺綜合來判斷嗜中性粒細胞(核分多葉、細小的紫色顆粒、顏色深)、嗜酸性粒細胞(核分兩葉、顆粒明顯較嗜中性粒細胞粗大且顆粒呈桔紅色,顯微鏡下看上去亮晶晶的)和嗜堿性粒細胞(沒觀察到)。
(2)ABO血型鑒定
人類紅細胞膜上存在不同的特異糖蛋白抗原—凝集原,也存在于其它血細胞和一般組織細胞上,而血漿中存在著不與自身凝集原發(fā)生反應的凝集素,凝集原會與相應的凝集素發(fā)生凝集反應,使紅細胞凝集成團,不能分開,紅細胞破裂產(chǎn)生溶血。因此可用標準血清鑒定未知血型。在白瓷板上滴加抗A和抗B凝集素,然后加入本人血液,若與抗A凝集素反應產(chǎn)生沉淀而與抗B凝集素不反應則血型為A型;若與抗B凝集素反應產(chǎn)生沉淀而與抗A凝集素不反應則血型為B型;若均與抗A、抗B凝集素發(fā)生反應產(chǎn)生沉淀則血型為AB型;若均不與抗A、抗B凝集素反應則血型為O型。實際實驗中,在加入本人血液后,血液與抗A、抗B凝集素反應均無沉淀,但加入到抗A凝集素中后呈深色,而加到抗B凝集素中呈鮮紅色。理論上不發(fā)生反應應呈鮮紅色,顏色變深可能與pH值有關(guān)。
三、結(jié)論
(1)本人找到了紅細胞、中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞。
(2)本人的血型為o型,是萬能供血者,可以幫助更多的人。