第一篇:實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本處理
實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本處理、消毒和衛(wèi)生防護(hù)制度
檢驗(yàn)科集中了醫(yī)院患者送檢的人體血液、體液、分泌物、排泄物等標(biāo)本,這些標(biāo)本大多帶有不同種類的病原體,在檢驗(yàn)過程中極易引起對工作人員及環(huán)境的污染,并隨著檢驗(yàn)報(bào)告單進(jìn)一步傳播。而其中醫(yī)療廢棄物的排放更是污染環(huán)境的元兇。因此,在檢驗(yàn)科做好標(biāo)本處理、消毒和衛(wèi)生防護(hù),是控制醫(yī)院感染的一個(gè)重要環(huán)節(jié)
1環(huán)境
(1)工作場所布局合理。檢驗(yàn)科各室采光及通風(fēng)良好,以保證室內(nèi)與室外空氣對流。根據(jù)工作場所可能受污染的程度,分為清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū)。
(2)工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室須穿工作服,必要時(shí)戴工作帽、口罩,穿隔離衣。實(shí)驗(yàn)室不得存放生活用品,不得有生活垃圾。
(3)重點(diǎn)部門均配有紫外線燈管,定時(shí)進(jìn)行空氣消毒。專職消毒監(jiān)督員檢查落實(shí)情況,并予以記錄。
2做好培訓(xùn),提高認(rèn)識
(1)組織全科人員參加醫(yī)院主辦的各種醫(yī)院內(nèi)感染知識講座,重點(diǎn)學(xué)習(xí)醫(yī)院對檢驗(yàn)科預(yù)防感染管理的要求,從思想上和理論上提高對消毒、防護(hù)和醫(yī)院內(nèi)感染的認(rèn)識。掌握消毒、防護(hù)基本知識和技能,規(guī)范醫(yī)療行為,人人重視消毒、防護(hù)的每個(gè)環(huán)節(jié)。
(2)提高自我健康保護(hù)意識,掌握工作中的防護(hù)技術(shù)。
3落實(shí)消毒隔離制度,防止交叉感染
物體表面
工作臺面實(shí)驗(yàn)前、后用含氯消毒劑擦拭2次,地 面用含氯消毒液濕拖,上、下午各1次,并根據(jù)清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū)分別使用不同標(biāo)識的拖把。
工作人員的手
由于采血的需要,工作人員的手必須與患者接觸,并且所有標(biāo)本都要通過檢驗(yàn)師的雙手進(jìn)行檢測。因此要求所有人員在采集、檢測、處理標(biāo)本時(shí)戴一次性手套,操作完后按“六步法”正確洗手,并定期對工作人員的手、物體表面、空氣進(jìn)行微生物監(jiān)測,發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)糾正。
門診靜脈采血
堅(jiān)持一人一巾、一針、一管、一止血帶;微量采血,也做到一人一巾、一針、一管、一片。給每位患者采血前洗手或手消毒。采集標(biāo)本時(shí)不得污染容器外部,運(yùn)送過程中防止容器破碎和標(biāo)本外溢,以確保環(huán)境安全。
4醫(yī)療廢棄物的正確處理
(1)使用后的一次性針頭存放在利器盒中集中處理;一次性注射器和使用后的一次性采血管應(yīng)定點(diǎn)存放,由專職人員運(yùn)送到醫(yī)療垃圾回收站集中處理。
(2)醫(yī)療垃圾存放在無滲透、無破損的黃色塑料袋中,由專職人員存放到醫(yī)療垃圾回收站集中處理。
報(bào)告單的處理
為防止病原微生物隨著檢驗(yàn)報(bào)告單進(jìn)一步傳播,報(bào)告單要求采用微機(jī)遠(yuǎn)端打印,非打印報(bào)告單送出前用移動式的紫外線殺菌車進(jìn)行消毒。
第二篇:標(biāo)本處理
[QUOTE=錦瑟]
病 人 的 準(zhǔn) 備
有很多檢驗(yàn)項(xiàng)目,如果病人準(zhǔn)備不當(dāng),分析結(jié)果則無價(jià)值,甚至于造成臨床上的混亂。醫(yī)生、護(hù)士和檢驗(yàn)人員有責(zé)任將該項(xiàng)檢驗(yàn)病人準(zhǔn)備 的要點(diǎn),用有效的方法告知病人,囑病人遵照執(zhí)行。
(一)生理因素的影響:
1.運(yùn)動:強(qiáng)烈的肌肉運(yùn)動明顯影響體內(nèi)代謝,暫時(shí)的變化是血清非酯化脂肪酸迅速下降,繼而上升;丙酮酸、乳酸亦接著升高,后者可 高達(dá)300%(3倍)。由于呼吸急促,可使Pco2下降,而PH值升高。持續(xù)較長時(shí)間的變化,是由于肌細(xì)胞酶的釋放引起血清CK、AST、LDH、ALP的升高,CK的峰值在11小時(shí)后,可達(dá)運(yùn)動前的1倍,持續(xù)60小時(shí)后才恢復(fù)到原水平。運(yùn)動對RBC、W BC、Hb測定明顯影響,可造成假性升高。運(yùn)動對檢驗(yàn)結(jié)果的影響程度與個(gè)體平時(shí)有無體育鍛煉及有無疾病有關(guān)。
為減少運(yùn)動對檢驗(yàn)結(jié)果的影響,一般主張?jiān)谇宄砍檠≡翰∪丝稍谄鸫睬俺檠?,匆忙起床到門診的病人應(yīng)至少休息15分鐘后采血。
2.精神因素:緊張、情緒激動可影響神經(jīng)—內(nèi)分泌功能,致使血清非酯化脂肪酸、乳酸、血糖等升高。
3.飲食:進(jìn)食后對某些檢驗(yàn)項(xiàng)目有明顯影響,餐后對CHE、CK、GLU、TG等影響非常顯著,但對TP、Aib、ALT、AS T、ALP、r—GT、LDH、AMY、Ca2+、BuN、CRE、choI、TBiL、DbiL等指標(biāo)無明顯影響。建議最好在 早晨空腹抽血,必要時(shí)在進(jìn)食4—6小時(shí)后抽血,血脂檢查必須空腹12小時(shí)后抽血(而且檢查前三天禁食肉、蛋、奶),緊急及特殊病 人可根據(jù)需要隨時(shí)抽血。
4.體位及采血部位:體位或采血部位的改變可引起某些檢驗(yàn)項(xiàng)目指標(biāo)的顯著變化。站立(或用止血帶)時(shí)水分會從血管內(nèi)向組織間轉(zhuǎn)移,大分子物質(zhì)與大顆粒物質(zhì)(如細(xì)胞)不能濾過而有一定程度的濃縮,但不影響低分子量物質(zhì)(如GLU)。Staland(斯特蘭德)比較了不得17項(xiàng)生化指標(biāo)在立位與臥位的差別,其中有12項(xiàng)立位時(shí)高于臥位,具有顯著性差異(P〈0·05〉,這些項(xiàng)目是:K +、Ca2+、P3+、Fe2+、TP、Aib、AST、ALP、ACP、Tchol、總脂。Na、Cl、BuN、Cr、GLU 差別不明顯。國內(nèi)研究也證實(shí)了體位變化對血脂成分的明顯影響。為此建議,統(tǒng)一用坐位、不使用止血帶來采血,以減少對 某些項(xiàng)目的影響。另外,中國血液病研究所楊天楹教授就耳血和指血采血對血液細(xì)胞成分的變化進(jìn)行研究,認(rèn)為手指(以無名指)血細(xì)胞 成分與靜脈血接近,而耳垂血與靜脈血具有非常顯著差異(P〈0·01〉,差別最大可達(dá)2—3倍。建議進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)一律用手指 血。
5.時(shí)間:在一天之中,人的代謝總是波動的,其代謝率并非是一個(gè)水平。因此在一天中,不同時(shí)間對某些項(xiàng)目檢測要有明顯影響,如在 進(jìn)行RBC、WBC等計(jì)數(shù)時(shí),上午、下午波動范圍很大。因此,為了反映病人的臨床狀態(tài),建議下次復(fù)查時(shí)應(yīng)在上次檢查的同一時(shí)間進(jìn) 行。
(二)藥物的影響:
藥物進(jìn)入人體內(nèi)引起的物理和化學(xué)變化是臨床檢驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤(非病理性異常值)的主要因素之一。藥物本身或它的代謝產(chǎn)物,可以對化學(xué) 測定的任何步驟產(chǎn)生干擾。干擾可以由于藥物本身物理性質(zhì),如藥物本身有顏色或能發(fā)出熒光,或由于藥物的化學(xué)性質(zhì),如有強(qiáng)還原性、與蛋白質(zhì)結(jié)合成復(fù)合物及對酶的抑制作用等。藥物也可以通過它的生理作用、藥理及毒理作用改變生化參數(shù)。這類影響有的是治療上需要 的,但有的是不需要的,即通常所說的副作用。
任何試驗(yàn)都有其固定的化學(xué)反應(yīng)原理和條件。因藥物的參與使反應(yīng)和檢測條件發(fā)生了改變,直接影響了結(jié)果的準(zhǔn)確性。例如:先鋒霉素類 藥物可使血Cr比色測定時(shí)的最大吸收峰由505nm變?yōu)?35nm而干擾Cr的測定,且藥物的量與Cr的正誤差呈正相關(guān)(藥量越 大誤差越大)。Vit—c對AST為正向干擾,對CK、LDH為負(fù)向干擾,且隨Vit—c濃度的增高干擾越大。止血敏可使血清T G顯著降低。安乃近對血清LDH、Pi、Cr呈正向干擾,對TC、TG、GLU、UA則呈負(fù)干擾。Gascon研究認(rèn)為,病人給 予安乃近2h后血液中安乃近仍然干擾測定,因此建議在應(yīng)用安乃近6h后采血測定。長期口服避孕藥的婦女,由于肝酶的誘導(dǎo)合成增加,可使轉(zhuǎn)氨酶、轉(zhuǎn)肽酶及TG升高。近年來,利用氧化酶催化過氧化氫,以Tinder生成反應(yīng)檢測體內(nèi)多種代謝物質(zhì)濃度的方法已有 多種,如GLU、TC、TG、HDL—c等。由于某些藥物有較強(qiáng)的還原性,易于反應(yīng)中過氧化氫起作用,降低紅色醌亞胺生成致使測 定結(jié)果偏低。如:
(1)葡萄糖+H2O+O2葡萄糖氧化酶葡萄糖酸+H2O2
(2)2H2O2+4-AAP+酚過氧化物酶紅色醌+H2O
這類藥物有Vit-c、Vit-B6、V-E、巰甲丙脯酸、地奧心血康、安乃近、酚酸乙胺、鹽酸氯丙嗪、復(fù)方丹參、氨茶堿、左旋 多巴等。
日本學(xué)者研究認(rèn)為,藥物投給后,在血液中的最高濃度,可由尿中濃縮100-1000倍排出體外。目前常用的尿試紙?jiān)囼?yàn),一直是限 于一定區(qū)域內(nèi)的顏色變化來定性測定為陽性或陰性,異常著色尿?qū)Υ擞忻黠@干擾。臨床治療藥物所見的著色尿,常見的藥物有:苯妥英鈉、左旋多巴、核黃素、阿霉素、正定霉素、利福平、滅滴靈等。
青霉素對磺酸法、試紙法測定尿蛋白產(chǎn)生不同干擾,對于尿蛋白陰性可引起假陽性,而對于陽性者則可引起假陰性反應(yīng)
不同濃度的Vit-c對尿糖、潛血、尿膽原等也有不同程度的干擾作用。
長期靜脈點(diǎn)滴的病人留取標(biāo)本時(shí)可使標(biāo)本稀釋,造成某些項(xiàng)目結(jié)果偏低。又因靜點(diǎn)時(shí)高濃度的藥物進(jìn)入標(biāo)本中,使許多檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)生巨大 變化。入:K+、Na+、Cl-、Ca2+、CO2-cp、GLU等,可因靜點(diǎn)得到高出正常值1-10倍的結(jié)果。藥物還可影響某 些酶的活性,如非那西酊可引起ALP、r-GT活性升高。杜冷丁類藥物可引起唾液型淀粉酶活力上升,而致總淀粉酶活力升高。許多 藥物的副作用使肝、腎、造血功能發(fā)生改變而引起檢驗(yàn)結(jié)果異常。這種影響一旦出現(xiàn),即使停藥也不會很快使檢驗(yàn)結(jié)果恢復(fù)正常。如大量 使用慶大酶素及抗腫瘤化療藥物時(shí),常給腎臟造成損害,使尿中出現(xiàn)蛋白、管型等異常結(jié)果。有許多種藥物,如紅霉素、磺胺類、對氨基 水楊酸、性激素等50多種藥物可引起肝功能異常等。因此當(dāng)臨床醫(yī)生填寫檢驗(yàn)申請單時(shí),一定要了解病人的用藥種類和時(shí)間。用量較大,時(shí)間較短對檢驗(yàn)結(jié)果有干擾,個(gè)別藥物干擾時(shí)間還會更長。當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果與臨床癥狀不符時(shí),應(yīng)結(jié)合分析這種現(xiàn)象產(chǎn)生的原因及了解糾正 的辦法,特別應(yīng)了解的是藥物對哪些項(xiàng)目有影響。護(hù)士應(yīng)避免在靜點(diǎn)時(shí)和用藥4h以內(nèi)采取檢驗(yàn)標(biāo)本,必要時(shí)停藥后再查,以防藥物的干 擾作用。
[QUOTE=錦瑟] 標(biāo) 本 的 采 集
要想測得的檢驗(yàn)結(jié)果真實(shí)地反映病人的臨床狀態(tài),送檢標(biāo)本的正確與否是一個(gè)關(guān)鍵因素。如果標(biāo)本不符合要求,檢驗(yàn)儀器再先進(jìn),技術(shù)再 好,測得再準(zhǔn)確,其結(jié)果也是錯(cuò)誤的。據(jù)統(tǒng)計(jì),約有半數(shù)以上的異常結(jié)果,是由于標(biāo)本不符合要求造成的。其常見的原因有:
1.標(biāo)本采集不正確:
(1)應(yīng)當(dāng)空腹抽血但是實(shí)際上病人已經(jīng)進(jìn)食,這時(shí)候TG、CK、chE、GLU等檢驗(yàn)項(xiàng)目有明顯影響。
(2)病人輸液過程中,從同側(cè)肢體抽血,甚至從輸液管中取“血”,抽出來的有一半是輸進(jìn)的液體,嚴(yán)重影響檢驗(yàn)結(jié)果。
(3)抽血量不準(zhǔn)確,如ESR測定,按要求抗凝劑與血液比例為1:4,總量為2·0ml,但實(shí)際工作中,很多標(biāo)本不合格,不是未 加抗凝劑就是量不準(zhǔn)(最多見是血量不足),使結(jié)果波動很大。
(4)尿標(biāo)本留取不準(zhǔn)確。如留取24h尿標(biāo)本時(shí),不按要求留取,甚至估計(jì)尿量,對生化指標(biāo)定量及肌酐清除率影響較大。
(5)精液標(biāo)本應(yīng)全量收集于干燥、清潔的容器內(nèi),但經(jīng)常遇到的是收集在避孕套內(nèi),致使大量精子死亡,引起誤會等。
(6)血培養(yǎng)應(yīng)在發(fā)熱初期或發(fā)熱高峰期采血。一般要求選擇在應(yīng)用抗生素治療之前,對已用藥而不能終止的病人,也應(yīng)在下次用藥之前 采血。但實(shí)際工作中,時(shí)常遇到邊輸注抗生素邊采血的情況,造成血培養(yǎng)陽性率大大減低。
(7)尿培養(yǎng)一般主張導(dǎo)尿,但多次導(dǎo)尿易引起逆行感染,故目前常采用中段尿。但經(jīng)常遇到不按要求留取標(biāo)本,致使培養(yǎng)出多種雜菌生 長而無法報(bào)告結(jié)果。
當(dāng)然,還有其它不合要求的標(biāo)本,不一一列舉。
2.標(biāo)本溶血:
溶血是臨床生化檢驗(yàn)中最常見的一種干擾和影響因素。除了常見的紅細(xì)胞破壞外,血小板、白細(xì)胞等血細(xì)胞破 壞釋放的某種成分亦可干擾或影響生化指標(biāo)的測定。
溶血干擾的機(jī)理有三種:(1)血細(xì)胞內(nèi)高濃度物質(zhì)逸出,使血清(漿)分析物濃度增加。不難理解如果血細(xì) 胞中某一分析物濃度大大高于血清,則溶血無疑會導(dǎo)致血清中該成分濃度的增高。例如:RBC內(nèi)與血清某一成分的比值:精氨酸156 9·2/
1、LDH
139·9/
1、醛縮酶135/
1、AST38·3/
1、丙酮酸激酶205/
1、K+20/
1、Cr18/
1、葉酸16·7/1
CK15·5/
1、Zn2+10·7/
1、等。(2)Hb對分光光度法測定中吸光度的干擾。溶血能引起可見光譜的短波長段(30 0-500nm)的吸光度明顯增加,而影響測定結(jié)果。(3)某些細(xì)胞成分對化學(xué)反應(yīng)的干擾。如血清CK動力學(xué)法測定中因RBC來 源的腺苷酸激酶(AK)參與其指示反應(yīng)而使CK結(jié)果假性增高。溶血可滯血清中LDH、ACP、CK、ALT等酶隨溶血加重而升高 ;使ALP、r-GT的活性隨溶血加重而降低,但機(jī)理尚不清楚。溶血對酶以外的生化指標(biāo),除K+、BIL最受干擾外,對TP、A ib、Ca2+、Na+、Cl-、Fe2+、Pi3+、TC、TG、HDL-c、Cr、BuN、GLU、UA等無明顯影響。溶血 還可影響乙肝五項(xiàng)標(biāo)志物測定,對ELISA雙位點(diǎn)一步法易產(chǎn)生假陽性,對競爭抑制法易產(chǎn)生假陰性,但對經(jīng)典的兩步法影響不大。
標(biāo)本溶血多是由于注射器不干燥、不清潔,抽血后未拔去針頭直接注入試管內(nèi)等原因造成。由于血液內(nèi)某些化學(xué)物質(zhì)在血清(漿)與紅細(xì)胞內(nèi)分布不同,有的差別很大,因此采集 標(biāo)本時(shí)應(yīng)嚴(yán)防溶血。
三.標(biāo) 本 送 檢
有些標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,如血NH3、CO2-cp、血?dú)夥治龅龋⊙髴?yīng)該在30分鐘呢測定。目前最大的問題是GLU,取血 后室溫放置,由于糖酵解作用,每小時(shí)可降低6-11%,CK、BIL、URO、OB均可因分解或失活而明顯降低,而血清中的K+、Cl-、Pi3+、AcP、NH3、NiT等均可因細(xì)胞內(nèi)外的轉(zhuǎn)移代謝顯著增高。有時(shí)對不同的測定方法干擾方向可能相反,如T G抽提法隨放置時(shí)間結(jié)果 偏低,而酶法則增高,前者因TG分解所致,后者是由于磷酸分解產(chǎn)生甘油所致。
四.標(biāo) 本 處 理
許多檢驗(yàn)項(xiàng)目在正式分析前需進(jìn)行預(yù)處理。及時(shí)而適當(dāng)?shù)臉?biāo)本處理是每一個(gè)檢驗(yàn)者必須熟知和遵循的,如血GLU測定需要及時(shí)分離血清,防止細(xì)胞作用使塘發(fā)生酵解;電解質(zhì)測定亦需要及時(shí)分離血清,尤其是K+,防止K+從細(xì)胞內(nèi)向細(xì)胞外轉(zhuǎn)移;血氨、血?dú)夥治鰬?yīng)及時(shí) 操作,即使是及時(shí)放入冰瓶中也應(yīng)盡快分析。做CO2-cp時(shí),抽血后應(yīng)盡量避免與空氣接觸過久,防止血液中的二氧化碳向空氣中逸 散,以保證結(jié)果的可靠性。血性胸腹水、腦脊液等在測定蛋白質(zhì)等生化項(xiàng)目前,必須先行離心,細(xì)菌培養(yǎng)需根據(jù)不同要求和目的,選擇合 適的培養(yǎng)基及時(shí)接種,防止細(xì)菌污染,提高細(xì)菌檢出率(特別是厭氧菌)和準(zhǔn)確率。
抗凝劑的選擇是檢驗(yàn)質(zhì)量保證的重要環(huán)節(jié)。有資料表明,血清與血漿多個(gè)指標(biāo)的測定存在差異,甚至得到與實(shí)際相反的結(jié)果。凡需全血或 血漿檢驗(yàn)的項(xiàng)目標(biāo)本,要選擇合適的抗凝劑,如草酸鉀能抑制LDH、AcP、和AMY的活性,亦不能用于Ca2+、K的測定;ED TA不能用于Ca2+、Na+和含氮物質(zhì)的測定;肝素除了對個(gè)別項(xiàng)目如K+、LDH、r-GT、AMS有影響外,對其它項(xiàng)目影響 不大。[/QUOTE]
第三篇:實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本接收
實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本接收、登記、保存與使用制度
為了確保以病人為中心,以質(zhì)量為核心,根據(jù)檢驗(yàn)科工作性質(zhì),現(xiàn)對標(biāo)本管制做如下規(guī)定:
1、樣品接收程序 1.1、接收程序:
1.1.1正常白班標(biāo)本 每天7.30由護(hù)士工作人員接收服務(wù)中心送檢病房的樣本。通過lis系統(tǒng)逐個(gè)掃描標(biāo)本信息納入微機(jī)程序保存。納入結(jié)束后將其名單打印一份交給送檢人員雙簽備存。并按檢驗(yàn)項(xiàng)目直接擺放在各室的標(biāo)本框內(nèi)。
1.1.2急診白班標(biāo)本 送檢人員直接將急診標(biāo)本送采血室,并且親自在登記簿上填寫標(biāo)本信息,然后由采血室人員送到各室檢測。1.2、驗(yàn)證 :進(jìn)入各實(shí)驗(yàn)室的樣本在進(jìn)行操作前,工作人員應(yīng)再次認(rèn)真查對姓名,聯(lián)號,住院號,病區(qū)床號,項(xiàng)目等對不符合要求者應(yīng)作記錄,并及時(shí)通知采樣科室,正確及時(shí)地補(bǔ)采樣,以免延誤病人的檢測結(jié)果報(bào)告,對書寫不清楚的申請單, 當(dāng)事者要及時(shí)與病房聯(lián)系(可電話),明確受檢 者姓名,住院號,性別,年齡,病區(qū), 床號和檢驗(yàn)項(xiàng)目等。
1.3、轉(zhuǎn)送 :在查對過程中一旦發(fā)現(xiàn)有其他實(shí)驗(yàn)室(包括病理科)或本科各實(shí)驗(yàn)室的樣本,要提高責(zé)任性,及時(shí)地轉(zhuǎn)送(可電話通知)有關(guān)實(shí)驗(yàn)室(尤其是爭論急診項(xiàng)目)切勿延擱樣本,延誤檢測,影響檢驗(yàn)結(jié)果和報(bào)告時(shí)間,對人為造成的樣本遺失, 漏檢 和由之延誤檢測違反承諾限時(shí)報(bào)告引起病人糾紛和投訴, 將追究當(dāng)事者和當(dāng)事實(shí)驗(yàn)室責(zé)任。急診標(biāo)本及各病房零散標(biāo)本:由采血室人員登記并轉(zhuǎn)送相關(guān)實(shí)驗(yàn)室 1.4、外單位送檢 :外單位送檢的樣本,一律登記后,再轉(zhuǎn)交各實(shí)驗(yàn)室檢測, 報(bào)告結(jié)果由檢測者傳真發(fā)出或由服務(wù)臺人員轉(zhuǎn)發(fā)。
1.5、標(biāo)本放置 :接收后的樣本須統(tǒng)一放置在固定部位并有明顯標(biāo)志的樣本盒中, 以便其他實(shí)驗(yàn)室的同志來拿取各實(shí)驗(yàn)室對如何轉(zhuǎn)送和取樣本應(yīng)有明確的規(guī)定,包括定時(shí)定點(diǎn),由檢測實(shí)驗(yàn)室同志詢查收集, 對超時(shí)樣本要求(急診樣本除外),必要時(shí)通知和催促有關(guān)實(shí)驗(yàn)室的同志來拿取, 并作記錄。
1.6、多張檢驗(yàn)單標(biāo)本 :凡有兩張以上的檢驗(yàn)申請單(包括其他實(shí)驗(yàn)室或外送兄弟醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室作檢測以及本科不同實(shí)驗(yàn)室檢測的項(xiàng)目)原則上要分裝各管, 隨檢驗(yàn)申請單一起分別放置各樣本盒 ,對采樣困難者要主動跟蹤樣本,并作詳細(xì)記錄以免漏檢,分清責(zé)任。
1.7、特殊標(biāo)本處理 :對暫不檢測的項(xiàng)目和超規(guī)定時(shí)間的樣本,要隨時(shí)登記和交班,以免漏檢, 遺失和延誤檢驗(yàn),對沒有登記實(shí)驗(yàn)室和當(dāng)事者,一旦發(fā)現(xiàn)有此樣本的差錯(cuò)發(fā)生,一律追究責(zé)任。對特殊樣本或特殊病人的樣本,實(shí)行“首接”負(fù)責(zé)制, 所謂特殊樣本是指難于采集的樣本,以及特殊病人的樣本一律實(shí)行“首接”負(fù)責(zé)制,無論那位工作人員(包括進(jìn)修生和實(shí)習(xí)生,違者根據(jù)實(shí)際情況分別追查當(dāng)事者或帶教老師責(zé)任)一旦收到樣本后,均須負(fù)其責(zé)任,不得以任何借口推托, 及時(shí)和正確保管和轉(zhuǎn)送樣本到有關(guān)實(shí)驗(yàn)室或有關(guān)人員,同時(shí)作交班記錄和雙簽名。
2、樣品使用
2.1.將當(dāng)天送來的標(biāo)本,根據(jù)編號的基本原則,給當(dāng)天的標(biāo)本編好號,每個(gè)樣本的每個(gè)檢測項(xiàng)目對應(yīng)一個(gè)唯一的編號。2.2.每張單和對應(yīng)的樣品管上條碼號標(biāo)記相同。2.3.在lis上每個(gè)樣本的記錄都包括以下信息:接收時(shí)間、醫(yī)院、科室、醫(yī)生、病人信息、實(shí)驗(yàn)結(jié)果(當(dāng)天實(shí)驗(yàn)后填上)、發(fā)報(bào)告時(shí)間、樣本采集時(shí)間等。
2.4.微生物樣本將編號完畢的標(biāo)本,分別接種于血平板,營養(yǎng)平板,麥康凱平板、沙保弱氏平板,35度18-24小時(shí)孵育后,按衛(wèi)生部操作規(guī)程進(jìn)行系統(tǒng)鑒定。并將結(jié)果作好記錄,再一一把實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入相應(yīng)化驗(yàn)單。
3、樣品保管
血液樣本每天使用后不能立即處理,要留至該樣品報(bào)告結(jié)果以后,按編號擺放樣本儲存盒內(nèi),放入樣本儲存冰箱冷藏2-8℃7天后處理銷毀。尿液、痰液、腦脊液、胸腹水、糞便在結(jié)果報(bào)出后當(dāng)天銷毀。
4、樣品處理及銷毀
將各實(shí)驗(yàn)室所有廢棄物消毒后裝入垃圾袋,封口,在垃圾筐上套好新的垃圾袋,將垃圾帶出實(shí)驗(yàn)室交給醫(yī)院集中進(jìn)行無害化處理。
5、樣品運(yùn)送要求
對于各病房及門診需要送檢的標(biāo)本要嚴(yán)格按照無菌、安全、及時(shí)的原則由陪檢人員運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室。標(biāo)本應(yīng)置于被承認(rèn)的、本質(zhì)安全、防漏的容器中運(yùn)輸。
第四篇:處理病理標(biāo)本
怎樣處理病理標(biāo)本
制作時(shí)將部分有病變的組織或臟器經(jīng)過各種化學(xué)品和埋藏法的處理,使之固定硬化,在切片機(jī)上切成薄片,粘附在玻片上,染以各種顏色,供在顯微鏡下檢查,以觀察病理變化,作出病理診斷,為臨床診斷和治療提供幫助。
1.取材組織取材的方法是制作切片的一個(gè)重要程序,根據(jù)教學(xué)、科研及外檢的具體要求取自人體(外科手術(shù)切除標(biāo)本、活檢標(biāo)本、尸檢標(biāo)本)或動物,并確定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)的基本理論知識,還要掌握實(shí)際操作技術(shù),每個(gè)組織器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取組織作為制片材料,不然,無法達(dá)到教學(xué)、科研和臨床診斷的目的,具體要求如下:
(1)材料新鮮:取材組織愈新鮮愈好,人體組織一般在離體后,動物組織在處死后迅速固定,以保證原有的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。
(2)組織塊的大?。核〗M織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內(nèi)部,但根據(jù)制片材料和目的不同,組織塊的較理想體積也不同,如制作病理外檢、科研切片,其組織塊可以薄取0.1~0.2cm即可,這樣可以縮短固定脫水透明的時(shí)間,若制作教學(xué)切片厚取0.3 ~0.5cm,這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學(xué)切片。
(3)勿擠壓組織塊: 切取組織塊用的刀剪要鋒利,切割時(shí)不可來回銼動。夾取組織時(shí)切勿過緊,以免因擠壓而使組織、細(xì)胞變形。(4)規(guī)范取材部位: 要準(zhǔn)確地按解剖部位取材,病理標(biāo)本取材按照各病變部位、性質(zhì)的不同,根據(jù)要求規(guī)范化取材。
(5)選好組織塊的切面:根據(jù)各器官的組織結(jié)構(gòu),決定其切面的走向??v切或橫切往往是顯示組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵,如長管狀器官以橫切為好。
(6)保持材料的清潔:組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等,可用水沖洗干凈后再放入固定液中。
(7)保持組織的原有形態(tài):新鮮組織固定后,或多或少會產(chǎn)生收縮現(xiàn)象,有時(shí)甚至完全變形。為此可將組織展平,以盡可能維持原形。2.固定
(1)小塊組織固定法:這是最常用的方法,從人體或動物體取下的小塊組織,須立即置入液態(tài)固定劑中進(jìn)行固定,通常,標(biāo)本與固定液的比例為1:4~20,但組織塊不宜過大過厚,否則固定液不能迅速滲透。故取組織塊的大小一般為2.0cm×2.0cm×0.3cm。
(2)注射、灌注固定法:某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內(nèi)部,或需要對整個(gè)臟器或整個(gè)動物體進(jìn)行固定。這時(shí)宜采用注射固定或灌注固定法。將固定液注入血管,經(jīng)血管分支到達(dá)整個(gè)組織和全身,從而得到充分的固定。(3)蒸汽固定法:比較小而厚的標(biāo)本,可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片,則應(yīng)在血片未干燥前采用鋨酸或甲醛蒸汽接觸固定。最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。
3.脫水透明標(biāo)本經(jīng)過固定和沖洗后,組織中含有較多的水分,必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來,這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片,還是用火棉膠切片,都必須除去組織中所含水分,因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容,常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。脫水的步驟是:80%、90%、95%、100%各種濃度乙醇2小時(shí),此過程可用脫水機(jī)自控完成。
丙酮也是一種脫水能力很強(qiáng)的脫水劑,但因其脫水能力很強(qiáng),對組織有劇烈收縮作用,在制作科研、教學(xué)切片時(shí)一般不用該試劑。因乙醇、丙酮等不溶于石蠟,還要經(jīng)過一個(gè)能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。4.浸蠟、包埋
(1)使石蠟浸入組織中,取代組織中含有的透明劑。
(2)包埋:將浸蠟后的組織置于融化的固體石蠟中,石蠟?zāi)毯螅M織即被包在其中,稱蠟塊,此過程稱為包埋。5.切片和貼片(1)修整蠟塊:可視其組織的大小,在組織邊緣約0.1~0.2cm處,切去余蠟部分,否則易造成組織皺縮不平。
(2)準(zhǔn)備好切片用具:切片刀、毛筆、眼科鑷子(彎)、漂烘溫控儀(3)安裝蠟塊:將修好的蠟塊安裝在金屬或木制持蠟器上。
(4)安裝切片刀:將切片刀安裝在切片機(jī)的刀臺上,把刀臺上的緊固螺絲旋緊,使切片時(shí)不產(chǎn)生振動,能保持一定的切片厚度。
(5)切片的厚度:切片機(jī)的厚度調(diào)節(jié)器上刻有0~50μm或0~25μm,可任意選擇其厚度,石蠟切片的厚度一般在4~6μm。(6)切片
(7)鋪片:用眼科鑷子鑷起蠟帶輕輕平鋪在40~45℃的水面上,借水的張力和水的溫度,將略皺的蠟帶自然展平。
(8)貼片、烘片:待切片在恒溫水面上充分展平后,將蠟片撈到載玻片的中段處傾去載玻片上的余水,置入60~65℃恒溫箱內(nèi)或切片漂烘溫控儀的烘箱內(nèi)烤片15~30分鐘,脫去溶化組織間隙的石蠟。
6.染色和封片常用的染色方法是蘇木素-伊紅(Hematoxylin-Eosin)染色法,簡稱H.E染色法。這種方法對任何固定液固定的組織和應(yīng)用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質(zhì)染成藍(lán)色,如細(xì)胞核中的染色質(zhì)等;伊紅是一種酸性染料,可使組織中的嗜酸性物質(zhì)染成紅色,如多數(shù)細(xì)胞的胞質(zhì)、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。
H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固
常規(guī)蘇木素染色中的對比染色是用伊紅,近年來在英、美國家的一些實(shí)驗(yàn)室則采用焰紅(phloxine),此外也有用桔黃G(OrangeG)、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對比染色。伊紅為染胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。
第五篇:檢驗(yàn)標(biāo)本采集處理
一﹑臨床常用檢驗(yàn)項(xiàng)目的標(biāo)本采集和處理
(一)血常規(guī)檢驗(yàn)標(biāo)本
一般用EDTA-2K(EDTA-K2-2H2O)1.5~2.2mg/ml抗凝(EDTA抗凝管)采血。采血注意事項(xiàng)為:
1.采血后立即上下顛倒混勻(5-10次,不可用力震蕩);
2.應(yīng)按抗凝管刻度準(zhǔn)確采血至2ml;3.采血后應(yīng)盡快送檢(需顯微鏡觀察形態(tài)的標(biāo)本采血后 應(yīng)及時(shí)推片固定,因?yàn)槌^2h WBC形態(tài)會發(fā)生改變)。
(二)紅細(xì)胞沉降率(血沉,ESR)測定標(biāo)本
靜脈采集枸櫞酸鈉(109mmol/L,即32.06g/L)抗凝血(枸櫞酸鈉抗凝管采血)。注意事項(xiàng):
1.采血后立即上下顛倒混合5-10次;
2.單獨(dú)采1管血,準(zhǔn)確采血至2ml(抗凝劑:全血 = 0.4 :1.6); 3.采血后應(yīng)盡快送檢(必須2h內(nèi)檢測)。
(三)凝血檢測(PT、APTT、TT、FBG、DD)標(biāo)本
靜脈采集抗凝血(最好真空負(fù)壓系統(tǒng)采血),抗凝劑用枸櫞酸鈉(109mmol/L,即32.06g/L,抗凝劑:全血 = 0.2:1.8)。采血注意事項(xiàng):
1.空腹采靜脈血(餐后脂血影響檢測結(jié)果,使因子Ⅶ活化,導(dǎo)致PT延長);
2.采血時(shí)患者應(yīng)保持平靜狀態(tài)30min以上(劇烈活動可使因子Ⅷ活化,APTT明顯縮短); 3.應(yīng)單獨(dú)1管血;
4.必須準(zhǔn)確采血至刻度線2.0ml;
5.采血后應(yīng)立即上下顛倒混勻5-10次,不可有凝塊; 6.采血后應(yīng)盡快送檢(必須2h內(nèi)檢測)。
(四)血型 與 血交叉標(biāo)本
為EDTA-2K抗凝血。采血注意事項(xiàng):
1.最好血型與血交叉各采1管血(要求保留血樣); 2.采血量分別為1.0ml和1.0~2.0ml; 3.采血后立即上下顛倒混勻(5~10次)。
(五)尿液常規(guī)檢查標(biāo)本
1.尿液常規(guī)檢查標(biāo)本應(yīng)按以下原則進(jìn)行采集:
(1)新鮮晨尿最佳,門診病人亦可留隨機(jī)尿;
(2)尿液采集于干凈帶蓋容器中,不可使用未經(jīng)洗滌的裝藥物或試劑的器皿;
(3)避免混有經(jīng)血、白帶、精液和糞便;
(4)尿液標(biāo)本冰箱可保存6~8h,但細(xì)胞等有型成分會有破壞,會有結(jié)晶析出;
(5)尿液成分定量檢查應(yīng)留取24h防腐混合尿100~200ml(須記取24h尿液總量);
(6)根據(jù)不同檢測目的選擇不同的防腐劑:臨床最多用的尿液防腐劑為:①甲醛(formalin),用于尿液有形成分檢查,濃度為400mg/L尿液即40%;②甲苯(toluene),常用于尿糖和尿蛋白等化學(xué)成分的定性或定量檢查,5-20ml/L尿液;③濃鹽(hydrochloric acid),用于定量測定尿17-羥、17-酮、腎上腺素、兒茶酚胺和尿鈣等,濃度為1ml/L尿液。
2.尿液常規(guī)檢查標(biāo)本采集方法:
(1)晨尿最好(安靜狀態(tài)下留取清晨第一次尿,濃縮,無其他影響);
(2)隨機(jī)尿較常用(隨時(shí)留尿,適用于門診和急診病人,結(jié)果易受多種因素影響);
(3)清潔尿(中段尿、導(dǎo)管尿、膀胱穿刺尿,用于病原微生物學(xué)培養(yǎng)、堅(jiān)定和藥敏);
(4)24h尿(用于尿液成分24h定量檢查分析,一定要教會病人留取24h尿正確方法)。
(5)3h、12h等計(jì)時(shí)尿和餐后尿等特殊實(shí)驗(yàn)?zāi)?,則應(yīng)按醫(yī)囑要求進(jìn)行留尿。
(六)糞便常規(guī)檢查標(biāo)本
1.一般應(yīng)為新鮮的自然排出的糞便3~5g,必要時(shí)可肛拭子采??; 2.送檢糞便應(yīng)盛于潔凈帶蓋的塑料盒中送檢,要做好標(biāo)記;
3.要選取糞便的膿、血、黏液等異常成分進(jìn)行檢查,表面無異常時(shí)應(yīng)從糞便表面、深處及糞端多處取材;
4.檢查蟯蟲卵需用透明塑料薄膜于半夜12pm或早晨排便前,于肛門周圍皺襞處拭取標(biāo)本,并立即送檢;
5.檢查血吸蟲卵時(shí)應(yīng)取黏液、膿、血部分,如須孵化毛蚴應(yīng)留取不少于30g的糞便,并盡快送檢,必要時(shí)留取整份糞便送檢。
6.檢查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體時(shí),應(yīng)床邊留取新排出的糞便,從膿血和稀軟部分取材,并立即保溫送實(shí)驗(yàn)室,并且實(shí)驗(yàn)室接受標(biāo)本后應(yīng)立即進(jìn)行檢查。
7.做便隱血試驗(yàn)時(shí),應(yīng)囑病人檢查前3d內(nèi)禁食肉類、含動物血的食物及某些蔬菜,禁服鐵劑和維生素C等對實(shí)驗(yàn)有干擾作用的藥物。
(七)漿膜腔積液檢查標(biāo)本
(1)漿膜腔積液標(biāo)本一般由醫(yī)生無菌穿刺采?。?/p>
(2)送檢標(biāo)本量:理學(xué)檢查、化學(xué)檢查、細(xì)胞學(xué)檢查各留?。瞞l;細(xì)菌學(xué)檢查用 無菌管采集標(biāo)本,厭氧菌培養(yǎng)留取1ml,結(jié)核菌檢查留取10ml。
(3)標(biāo)本采集后必須立即送檢(否則可出現(xiàn)細(xì)胞變性,標(biāo)本凝集,細(xì)菌溶解);
(4)用于細(xì)胞學(xué)檢查時(shí),可在標(biāo)本中加適量EDTA鹽抗凝,但還須留?。惫懿患涌鼓齽┑臉?biāo)本用于觀察積液的凝固性;化學(xué)檢查標(biāo)本宜用肝素抗凝。
(八)臨床化學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本
臨床化學(xué)檢驗(yàn)多用非抗凝血標(biāo)本,有條件應(yīng)使用真空負(fù)壓采血管。臨床化學(xué)檢驗(yàn)血標(biāo)本采集主要注意事項(xiàng)是:
1.多項(xiàng)化學(xué)檢測一般可采1管血;
2.采血量視檢查項(xiàng)目多少不同而異,單通常為4.0~5.0ml; 3.如果檢測項(xiàng)目不是很多,生化和免疫也可以采1管血;
4.多項(xiàng)檢測同時(shí)采血時(shí)應(yīng)按下列順序采血:①血培養(yǎng);②無添加劑管;③凝血管;④有添加劑管的順序?yàn)椋篴櫞酸鹽管;b肝素管;cEDTA管;d草酸鹽/氟化鈉管。
5.不論是抗凝血還是非抗凝血,為了縮短血清或血漿與血細(xì)胞的接觸時(shí)間,以避免由此而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性,血液標(biāo)本收集后,都必須盡可能早地將血清或血漿從全血中分離出來。從血液標(biāo)本采集開始,必須在2h內(nèi)將全血處理為血清或血漿。
(1)血清(非抗凝血):采血后標(biāo)本必須顛倒混合5~10 次,22~25oC(室溫)15~30min后可自行(自發(fā))完全凝固,禁用木棍和玻棒等剝離凝塊;冷藏標(biāo)本凝集較慢,加促凝劑時(shí)凝集加快。
(2)血漿(抗凝血):應(yīng)采用抗凝管采血,采血后立即顛倒混合5~10次,采血后數(shù)min內(nèi)可離心分離血漿。
(3)冷藏標(biāo)本:用于穩(wěn)定血液中溫度依賴性成分的(抑制細(xì)胞代謝),標(biāo)本于2-8oC冷藏(標(biāo)本采集后立即置冰屑或冰水混合物中,冷藏必須充分);標(biāo)本需冷藏的測定項(xiàng)目有:兒茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH/血?dú)?、NH3、乳酸、丙酮酸等。,全血標(biāo)本一般不冷藏,血鉀測定標(biāo)本冷藏不得>2h(4)代謝抑制劑和防腐劑的應(yīng)用:用于抑制細(xì)胞代謝。血標(biāo)本中加入氟化鈉后,血細(xì)胞未分離情況下血標(biāo)本中Glu,22~25oC穩(wěn)定24h,2~8oC穩(wěn)定48h;氟化鈉不適用于新生兒及兒童的Glu測定(因兒童PCV高,細(xì)胞糖酵解難以控制);氟化鈉-麝香草酚混合劑不適合酶學(xué)檢測(因氟化鈉-麝香草酚混合劑能抑制酶活性);甲醛—草酸鉀抗凝保存劑不適用于血糖測定。
(5)實(shí)驗(yàn)室離心標(biāo)本的準(zhǔn)備:不主張用小棍強(qiáng)行剝離凝血塊(誘發(fā)溶血);必須剝離時(shí)應(yīng)動作輕柔;真空采血管應(yīng)一直保持封閉垂直位置直到離心取出血清或血漿。
(6)關(guān)于標(biāo)本離心(指標(biāo)本處于離心機(jī)里的一段時(shí)間)
①離心時(shí)間和相對離心力:離心時(shí)間為5~10min;相對離心力(RCF)為1000~1200×g;
②溫度控制離心:離心時(shí)產(chǎn)熱,不利于分析物穩(wěn)定。溫度依賴性分析物(ACTH﹑環(huán)腺苷酸﹑兒茶酚胺等)離心溫度應(yīng)控制在4oC;無特殊溫度要求的分析物離心溫度在20~22oC;冷藏運(yùn)送標(biāo)本應(yīng)利用溫度控制離心機(jī)離心。
③再離心:最好一次完成標(biāo)本離心。普通采血管二次離心時(shí)必須在首次離心后短時(shí)間內(nèi)完成;帶分離膠的采血管不可以二次離心。
(7)離心后標(biāo)本處理(指標(biāo)本離心后和用于檢測的血清或血漿被取出 一定量之前)(1)血清/血漿與接觸的細(xì)胞/凝塊應(yīng)于采集后2h內(nèi)盡快分離;(2)分離出的血清或血漿的儲存:
①8h內(nèi)可以儲藏于22oC,8h以上儲藏于2~8oC 48h以上儲藏于-20oC;
② 標(biāo)本不可反復(fù)凍融(只能一次,且不可儲藏于無霜冰箱);
③分離膠上面的血清或血漿,可保存2-5天;
④用非凝膠分離物質(zhì)時(shí),離心后必須立即移開血清或血漿;
⑤ 血清或血漿必須密閉保存(置于帶塞或封口的試管中)。
(九)血?dú)夥治鰳?biāo)本
血?dú)夥治鰳?biāo)本為動脈(股﹑肱﹑撓動脈)抗凝全血,抗凝劑為肝素鈉(0.05mg/ml,即1000u/ml,用9g/L的生理鹽水配制)。標(biāo)本采集注意事項(xiàng)為: 1.采血一定要用厭氧技術(shù)(讓血液盡量少的與空氣接觸);
2.采血前先吸入足夠量液體肝素抗凝劑于注射器內(nèi),使其盡可能濕潤注射器內(nèi)壁,然后排出液體肝素,留下注射器死區(qū)內(nèi)液體肝素約0.1ml即可; 3.采血量0.5~1.0ml(最好2.0ml);
4.抽出的血液不能有氣泡,如有氣泡應(yīng)立即排出;
5.標(biāo)本采好后立即封閉注射器針頭,用兩手挫動注射器針筒使標(biāo)本混勻后立即送檢。
(十)微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本
微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的正確采集﹑運(yùn)送及處理,與細(xì)菌的培養(yǎng)﹑鑒定結(jié)果有十分密切的關(guān)系;對可疑烈性呼吸道傳染?。ㄈ鏢ARS ﹑炭疽﹑肺鼠疫等)患者采集標(biāo)本時(shí),必須按國家規(guī)范化要求嚴(yán)格注意生物安全;醫(yī)生﹑護(hù)士﹑檢驗(yàn)人員均應(yīng)重視微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本正確采集的有關(guān)問題,并有責(zé)任向患者及其家屬進(jìn)行正確采集標(biāo)本的宣傳和指導(dǎo)。1.微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集、運(yùn)送、驗(yàn)收和處理注意事項(xiàng)
(1)標(biāo)本采集
1)申請單標(biāo)記必須清楚(姓名、性別、年齡、病例號、臨床診斷、標(biāo)本來源、采集時(shí)間、檢查項(xiàng)目、抗生素應(yīng)用情況等),以便實(shí)驗(yàn)室能夠合理選擇培養(yǎng)環(huán)境和培養(yǎng)基; 2)盡量在抗生素應(yīng)用前采集標(biāo)本,以避免漏檢和提高陽性檢出率; 3)標(biāo)本采集應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作;
4)咽拭、肛拭、傷口拭子等拭子標(biāo)本,應(yīng)插入運(yùn)送培養(yǎng)基送檢;
5)痰、尿液、傷口拭子等混有正常菌群的標(biāo)本,不可放入肉湯培養(yǎng)基內(nèi)送檢; 6)采集標(biāo)本的容器必須經(jīng)滅菌處理,但不可用消毒劑。
(2)標(biāo)本運(yùn)送
1)標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送到微生物實(shí)驗(yàn)室;
2)標(biāo)本采集后在室溫下超過2h未送達(dá)實(shí)驗(yàn)室,可視為不合格標(biāo)本。
(3)標(biāo)本驗(yàn)收
1)實(shí)驗(yàn)室只能接受和處理合格標(biāo)本;
2)實(shí)驗(yàn)室對不合格標(biāo)本退回必須說明原因,并應(yīng)及時(shí)與臨床聯(lián)
(4)處理
根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康慕Y(jié)合臨床資料選擇合適的培養(yǎng)基接種標(biāo)本;混有正常菌群的標(biāo)本應(yīng)做定量細(xì)菌培養(yǎng);不能精確定量或常規(guī)定量操作較困難的痰、傷口拭子等標(biāo)本,應(yīng)分離出優(yōu)勢菌做細(xì)菌鑒定和藥敏實(shí)驗(yàn),同時(shí)注明細(xì)菌量化指標(biāo);抗菌藥物治療的標(biāo)本,必要時(shí)應(yīng)加入某些物質(zhì)以中和藥物對細(xì)菌的抑制作用。2.微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集和處理
(1)尿液標(biāo)本采集和處理 通常留取晨起第一次尿液(此時(shí)尿液在膀胱內(nèi)儲存4h以上);尿液采集后要及時(shí)送檢,并保證2h內(nèi)接種;不能及時(shí)送檢和接種時(shí),尿液應(yīng)置4-8℃冰箱保存;冷藏標(biāo)本應(yīng)于8h內(nèi)接種;懷疑沙門氏菌感染時(shí),應(yīng)于發(fā)病2w左右采集尿液,懷疑鉤端螺旋體感染時(shí),應(yīng)于發(fā)病后2w采集尿液,上述時(shí)間此時(shí)陽性率高。尿液微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集方法如下。1)中段尿采集法:成年男性和女性分別用肥皂水清洗尿道口和外陰部,再用滅菌水沖洗尿道口,然后排尿棄去前段尿液,于帶蓋的無菌盛器中留取中段尿液5~10ml 2)導(dǎo)尿法:用導(dǎo)尿管導(dǎo)取10~15ml尿液,置滅菌容器中送檢;長期留置導(dǎo)尿管者應(yīng)更換新導(dǎo)尿管留尿;留置導(dǎo)尿時(shí),用無菌消毒法消毒導(dǎo)尿管外部及導(dǎo)尿管口,用無菌注射器通過導(dǎo)尿管抽取尿液送檢(不可采集尿液收集袋中的尿液送檢);
3)集尿法:懷疑結(jié)核分枝桿菌感染時(shí),于清潔盛器中留取24h尿液,取其沉渣10~15ml送檢;
4)恥骨上膀胱穿刺法:培養(yǎng)結(jié)果與臨床病情矛盾時(shí)可采用此法,一般較少應(yīng)用; 5)腎盂尿采集法:必須由臨床醫(yī)生采集。
(2)糞便標(biāo)本采集和處理 1)采集時(shí)間:
①腹瀉患者于急性期,盡量在用藥前采集糞便;
②傷寒患者于發(fā)病2w以后采集糞便;
③懷疑霍亂時(shí)立即采集糞便送檢。2)采集方法:
① 自然排便:取新鮮糞便的黏液、膿血、或絮狀物等有意義成分,2-3g或1-2ml,盛無菌容器內(nèi)或置于保存液或增菌液內(nèi)送檢;
②直腸拭子:用于難以獲得糞便或排便困難的患者和嬰幼兒,標(biāo)本采集后插入滅菌試管內(nèi)送檢。
(3)痰及下呼吸道標(biāo)本采集和處理 1)自然咳痰法:
① 晨痰為佳;
② 先冷開水漱口清潔口腔和牙齒;
③ 再用力咳出呼吸道深部的痰;
④ 痰量不得少于1ml;
⑤痰咳出困難時(shí)可先霧化吸入NaCl溶液(100g/L,加溫到45℃)使痰容易咳出。2)小兒取痰法:用彎壓舌板向后壓舌,將拭子深入咽部,小兒因壓舌板刺激引起咳嗽,噴出的肺或氣管分泌物粘在拭子上可送檢。
3)支氣管鏡、支氣管穿刺、支氣管肺胞灌洗等采集法:此采集方法必須由醫(yī)生操作。
(4)血液及骨髓培養(yǎng)標(biāo)本
1)抗生素治療前,嚴(yán)格無菌靜脈采血8~10ml(兒童1~4ml);
2)無菌注入專用培養(yǎng)瓶(成人、兒童、需氧菌、厭氧菌、L型菌不同培養(yǎng)瓶)中送檢; 3)如已用抗生素不能停用時(shí),可于48h內(nèi)分別于下次用抗生素之前,采取6份血液標(biāo)本送檢;
4)必要時(shí)可需氧菌、厭氧菌(占10%)和L型菌同時(shí)培養(yǎng);
5)疑為心內(nèi)膜炎時(shí),為提高陽性檢出率,可酌情不同部位、不同時(shí)間,多次采血或動脈采血進(jìn)行培養(yǎng);
6)必要時(shí)可取骨髓1~2ml,無菌注入專用培養(yǎng)瓶中送檢(5)腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本
1)采集時(shí)間:懷疑腦膜炎時(shí)應(yīng)立即采集腦脊液,最是在應(yīng)用抗生素之前采集腦脊液。2)采集方法:無菌腰穿采集腦脊液3~5ml,分裝到3個(gè)無菌小瓶中(各1~2ml)。用于細(xì)菌和病毒檢測時(shí)腦脊液量不少于1ml;用于真菌和抗酸桿菌檢測腦脊液量不少于2ml。
(6)穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本包括胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本。1)采集時(shí)間:一般在用抗生素等抗菌藥物治療之前,或在停止使用抗菌藥物之后2-3d采集標(biāo)本。2)采集方法:
①無菌操作穿刺抽取標(biāo)本或外科手術(shù)采集標(biāo)本;
② 標(biāo)本采集量應(yīng)>1ml(結(jié)核分支桿菌培養(yǎng)時(shí)應(yīng)為1~5ml);
③ 標(biāo)本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中送檢;
④可在盛器中先加入滅菌肝素然后再加入穿刺液,以防止穿刺液凝固(0.5ml肝素可抗凝5ml標(biāo)本)
(7)胃液及膽汁培養(yǎng)標(biāo)本
抽取空腹胃液5ml,置無菌管內(nèi)送檢;膽汁培養(yǎng)標(biāo)本由十二指腸引流法或膽囊穿刺法或手術(shù)中留取膽汁,采集膽汁量為5ml,置無菌管內(nèi)送檢;胃液和膽汁采集后必須立即送檢。
(8)膿汁和病灶分泌物培養(yǎng)標(biāo)本采集前局部消毒,然后無菌采取膿汁或病灶分泌物或組織。標(biāo)本采集后立即置無菌管內(nèi)送檢。
(9)眼.耳.鼻.咽拭子培養(yǎng)標(biāo)本用拭子常規(guī)采集各種標(biāo)本。標(biāo)本采集過程中應(yīng)注意避免被黏膜上的正常菌群污染,標(biāo)本采集后連同拭子一起置無菌管內(nèi)送檢。
(10)泌尿生殖道培養(yǎng)標(biāo)本
1)尿道分泌物:清洗尿道口采取尿道口溢出的膿性等分泌物,或用無菌拭子插入尿道2~4cm處輕輕轉(zhuǎn)動后取出,置無菌試管中送檢。
2)陰道、宮頸分泌物:通過陰道擴(kuò)張器,用滅菌拭子采取陰道口或?qū)m頸管1~2cm處分泌物,置無菌試管中送檢。
3)宮腔分泌物:在必要時(shí)用外套保護(hù)膜的滅菌導(dǎo)管抽取。
4)前列腺液:清洗尿道口沖洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液送檢。
5)精液:受檢者應(yīng)5d未排精,清洗尿道口后手淫或體外排精法,射精于無菌容器內(nèi)送檢。
6)潰瘍分泌物:滅菌生理鹽水溶液清洗患處,用無菌拭子取其邊緣或基底部的分泌物,置無菌試管中送檢。(11)燒傷感染培養(yǎng)標(biāo)本
燒傷12h后用無菌棉拭子無菌操做采集標(biāo)本;要注意從多個(gè)創(chuàng)面取樣;燒傷嚴(yán)重感染時(shí)易發(fā)生敗血癥,創(chuàng)面取樣的同時(shí)應(yīng)該采集血樣送做血培養(yǎng)(最好同時(shí)做需氧菌培養(yǎng)和厭氧菌培養(yǎng))。
(12)厭氧菌感染培養(yǎng)標(biāo)本 1)標(biāo)本采集
①要注意避免標(biāo)本污染和與空氣接觸,嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作;
②用注射器抽取胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、膽汁、腦脊液或無菌手術(shù)抽出膿液;
③抽出液體標(biāo)本后,要盡快排除注射器內(nèi)的空氣。2)標(biāo)本運(yùn)送
① 標(biāo)本采集后不得冰箱儲存,必須盡快(半小時(shí)內(nèi))送實(shí)驗(yàn)室;
② 運(yùn)送方法:
a注射器運(yùn)送(標(biāo)本抽取后盡快排除空氣)或接種到專門的運(yùn)送培養(yǎng)基中直接運(yùn)送; b含運(yùn)送培養(yǎng)基的無氧小瓶運(yùn)送; c厭氧罐運(yùn)送(組織塊);
d 大量液體標(biāo)本運(yùn)送時(shí)要裝滿標(biāo)本瓶并立即驅(qū)氧,加蓋運(yùn)送; e一般不采用棉拭子法。(13)真菌感染培養(yǎng)標(biāo)本 1)淺部真菌感染標(biāo)本采集
① 皮膚:常規(guī)消毒皮膚,從皮膚癬菌皮損邊緣刮取鱗屑,置無菌平皿內(nèi)送檢;皮膚潰瘍則采集病損邊緣膿汁或組織;
② 指(趾)指甲:消毒指(趾)指甲并去掉其表面部分,取可疑病變部分,用刀片修成小薄片5~6片,置無菌容器內(nèi)送檢;
③毛發(fā):采集根部斷折處,至少5~6根送檢。2)深部真菌感染標(biāo)本采集
① 血液:無菌采血8~10ml,注入未用過抗生素的或可中和抗生素的血培養(yǎng)瓶中,立刻送檢;如不能立刻送檢時(shí)血培養(yǎng)瓶應(yīng)放室溫,但不可超過8~9h;
② 腦脊液:采樣量不少于3~5ml,分別注入兩支無菌試管中送檢(一管做真菌培養(yǎng)和墨汁染色;一管測隱球菌抗原和其他培養(yǎng));③呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染標(biāo)本采集同一般菌培養(yǎng)標(biāo)本。
(14)病毒感染標(biāo)本
1)標(biāo)本采集原則:根據(jù)不同檢查目的采集不同的標(biāo)本,見表1。盡量于疾病早期采集標(biāo)本;尸檢標(biāo)本應(yīng)在患者死亡后6h內(nèi)采集標(biāo)本。2)標(biāo)本采集方法:
① 呼吸道病毒感染標(biāo)本用咽拭子采集;讓患者先咳嗽,再口服0.5%乳蛋白水解物15ml,反復(fù)含漱3~4次后吐到容器中立即送檢;兒童常應(yīng)用無菌棉拭子,先沾好0.5%乳蛋白水解物,再去涂拭扁桃體周圍組織,并立即泡在0.5%乳蛋白水解物中,立即送檢;
②乙腦病毒需采集血清或血漿,置無軍菌容器中盡快送檢;
③ 尿液則取其中段尿立即送檢(否則置4℃冰箱12h內(nèi)接種);
④腸道病毒和柯薩奇病毒則采集新鮮糞便,盡快送檢。
3)標(biāo)本運(yùn)送及保存:多數(shù)病毒對熱不穩(wěn)定,標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢接種;如48h內(nèi)接種,須置4℃冰箱保存;空運(yùn)標(biāo)本須置冰壺中48h內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室并接種。