第一篇：ABO血型鑒定總結(jié)-臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試.

ABO 血型鑒定總結(jié)-臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試 1.AB0血型鑒定原理

常用鹽水凝集法檢測(cè)紅細(xì)胞上存在的血型抗原,以及血清中存在 的血型抗體,依據(jù)抗原抗體存在的情況判定血型。常規(guī)的方法有:① 正向定型:用已知抗體的標(biāo)準(zhǔn)血清檢查紅細(xì)胞上未知的抗原。②反向 定型:用已知血型的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查血清中未知的抗體。結(jié)果判定:凡紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集者為陽(yáng)性,呈散在游離狀態(tài)為陰性。

2.鑒定方法

(1生理鹽水凝集法:①玻片法:操作簡(jiǎn)單,適于大量標(biāo)本檢 查,但反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng);被檢查者如血清抗體效價(jià)低, 則不易引起紅細(xì)胞 凝集,因此,不適于反向定型。②試管法:由于離心作用可加速凝集 反應(yīng),故反應(yīng)時(shí)間短,而且,借助于離心力可以使紅細(xì)胞接觸緊密, 促進(jìn)凝集作用,適于急診檢查。

紅細(xì)胞亞型抗原性弱, 如抗 A 抗 B 標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)低時(shí), 易造成漏 檢或誤定。如加用 O 型(抗 A、B 血清和反向定型,可避免此類(lèi)錯(cuò) 誤醫(yī)學(xué) `教育網(wǎng)搜集整理。

玻片法凝集結(jié)果判斷:紅細(xì)胞呈均勻分布,無(wú)凝集顆粒,鏡下紅 細(xì)胞分散。在低倍鏡下凝集程度強(qiáng)弱判斷標(biāo)準(zhǔn):①呈一片或幾片凝塊, 僅有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為(++++。②呈數(shù)個(gè)大顆粒狀凝塊,有 少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為(+++。③數(shù)個(gè)小凝集顆粒和一部分微細(xì)凝

集顆粒,游離紅細(xì)胞約占 1/2為(++。④肉眼可見(jiàn)無(wú)數(shù)細(xì)沙狀小凝 集顆粒。于鏡下觀察, 每凝集團(tuán)中有 5~8個(gè)以上紅細(xì)胞凝集為(+。⑤可見(jiàn)數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起,周?chē)泻芏嗟挠坞x紅細(xì)胞(±。⑥ 可見(jiàn)極少數(shù)紅細(xì)胞凝集, 而大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布為混合凝集外 觀。⑦鏡下未見(jiàn)細(xì)胞凝集,紅細(xì)胞均勻分布為(-。

(2凝膠微柱法:是紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在凝膠微柱介質(zhì)中 發(fā)生凝集反應(yīng)的免疫學(xué)方法。血型抗體為單克隆抗體,加入試劑、標(biāo) 本, 用專(zhuān)用離心機(jī)離心后可直接用肉眼觀察結(jié)果或用血型儀分析。此 法操作標(biāo)準(zhǔn)化,定量加樣,確保結(jié)果準(zhǔn)確性。

3.抗 A、抗 B 和抗 AB 標(biāo)準(zhǔn)血清標(biāo)準(zhǔn)

準(zhǔn)血清均采自健康人, 并應(yīng)符合下述條件:醫(yī)學(xué)教 `育網(wǎng)搜集整理 ①特異性:只能與相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集,無(wú)非特異性凝集。② 效價(jià):我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)抗 A 和抗 B 血清效價(jià)均在 1:128以上。③親和力:我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)要求抗 A 對(duì) A1、A2及 A2B 發(fā)生反應(yīng)開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間 分別是 15s、30s 和 45s;抗 B 對(duì) B 型紅細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間為 15s.凝集強(qiáng)度為 3min 時(shí),凝塊不小于 1mm2.④冷凝集素效價(jià):在 1: 4以下。⑤無(wú)菌。⑥滅活補(bǔ)體。

4.血型鑒定操作時(shí)注意事項(xiàng)

一般注意事項(xiàng):①所用器材必須干燥清潔、防止溶血,凝集和溶 血的意義一樣。為避免交叉污染,建議使用一次性器材。標(biāo)準(zhǔn)血清從 冰箱取出后, 應(yīng)待其平衡至室溫后再用, 用畢后應(yīng)盡快放回冰箱保存。

②加試劑順序:一般先加血清,然后再加紅細(xì)胞懸液,以便核實(shí)是否 漏加血清。③雖然 IgM 抗 A 和抗 B 與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以 4℃ 最強(qiáng), 收集整理但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾, 一般在室溫 20℃~24℃ 內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn),而 37℃條件,可使反應(yīng)減弱。④幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā) 育完全、老年體弱者抗原性較弱,最好采用試管法鑒定血型。⑤玻片 法反應(yīng)時(shí)間不能少于 10min ,否則較弱凝集不能出現(xiàn),造成假陰性。⑥正、反定型結(jié)果一致才可發(fā)報(bào)告。⑦反定型法:先天性免疫球蛋白 缺陷,長(zhǎng)期大量應(yīng)用免疫抑制,血型抗體可減弱或消失;血清中存在 自身免疫性抗體、冷凝集素效價(jià)增高、多發(fā)性骨髓瘤、免疫球蛋白異 常均可造成反定型困難;新生兒體內(nèi)可存在母親輸送的血型抗體, 且 自身血型抗體效價(jià)又低,因而出生 6個(gè)月以?xún)?nèi)的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗 A 及(或 抗 B 抗體,可引起假陰性或血型鑒定錯(cuò)誤。

第二篇：abo血型鑒定

生理鹽水凝集法

①玻片法：操作簡(jiǎn)單，適于大量標(biāo)本檢查，但反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)；被檢查者如血清抗體效價(jià)低，則不易引起紅細(xì)胞凝集，因此，不適于反向定型。

②試管法：由于離心作用可加速凝集反應(yīng)，故反應(yīng)時(shí)間短，而且，借助于離心力可以使紅細(xì)胞接觸緊密，促進(jìn)凝集作用，適于急診檢查。

紅細(xì)胞亞型抗原性弱，如抗A抗B標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)低時(shí)，易造成漏檢或誤定。如加用O型（抗A、B）血清和反向定型，可避免此類(lèi)錯(cuò)誤。

玻片法凝集結(jié)果判斷：紅細(xì)胞呈均勻分布，無(wú)凝集顆粒，鏡下紅細(xì)胞分散。

在低倍鏡下凝集程度強(qiáng)弱判斷標(biāo)準(zhǔn)：

①呈一片或幾片凝塊，僅有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為（++++）。

②呈數(shù)個(gè)大顆粒狀凝塊，有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為（+++）。

③數(shù)個(gè)小凝集顆粒和一部分微細(xì)凝集顆粒，游離紅細(xì)胞約占1／2為（++）。

④肉眼可見(jiàn)無(wú)數(shù)細(xì)沙狀小凝集顆粒。于鏡下觀察，每凝集團(tuán)中有5～8個(gè)以上紅細(xì)胞凝集為（+）。

⑤可見(jiàn)數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起，周?chē)泻芏嗟挠坞x紅細(xì)胞（±）。

⑥可見(jiàn)極少數(shù)紅細(xì)胞凝集，而大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布為混合凝集外觀。

⑦鏡下未見(jiàn)細(xì)胞凝集，紅細(xì)胞均勻分布為（-）。凝膠微柱法

是紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在凝膠微柱介質(zhì)中發(fā)生凝集反應(yīng)的免疫學(xué)方法。血型抗體為單克隆抗體，加入試劑、標(biāo)本，用專(zhuān)用離心機(jī)離心后可直接用肉眼觀察結(jié)果或用血型儀分析。此法操作標(biāo)準(zhǔn)化，定量加樣，確保結(jié)果準(zhǔn)確性。

抗A、抗B和抗AB標(biāo)準(zhǔn)血清標(biāo)準(zhǔn)

準(zhǔn)血清均采自健康人，并應(yīng)符合下述條件：①特異性：只能與相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集，無(wú)非特異性凝集。②效價(jià)：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)抗A和抗B血清效價(jià)均在1：128以上。③親和力：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)要求抗A對(duì)A1、A2及A2B發(fā)生反應(yīng)開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間分別是15s、30s和45s；抗B對(duì)B型紅細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間為15s。凝集強(qiáng)度為3min時(shí)，凝塊不小于1mm2。④冷凝集素效價(jià)：在1：4以下。⑤無(wú)菌。⑥滅活補(bǔ)體。[3] 編輯本段注意事項(xiàng)

1、所用器材必須干燥清潔、防止溶血，凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染，建議使用一次性器材。標(biāo)準(zhǔn)血清從冰箱取出后，應(yīng)待其平衡至室溫后再用，用畢后應(yīng)盡快放回冰箱保存。

2、加試劑順序：一般先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便核實(shí)是否漏加血清。

3、雖然IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以4℃最強(qiáng)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)收集整理但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾，一般在室溫20℃～24℃內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，而37℃條件，可使反應(yīng)減弱。

4、幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱，最好采用試管法鑒定血型。

5、玻片法反應(yīng)時(shí)間不能少于10min，否則較弱凝集不能出現(xiàn)，造成假陰性。

6、正、反定型結(jié)果一致才可發(fā)報(bào)告。

7、反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，長(zhǎng)期大量應(yīng)用免疫抑制，血型抗體可減弱或消失；血清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價(jià)增高、多發(fā)性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難；新生兒體內(nèi)可存在母親輸送的血型抗體，且自身血型抗體效價(jià)又低，因而出生6個(gè)月以?xún)?nèi)的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗體，可引起假陰性或血型鑒定錯(cuò)誤。[4]

ABO血型系統(tǒng)

英文：ABO blood group system 根據(jù)紅細(xì)胞表面有無(wú)特異性抗原（凝集原）A和B來(lái)劃分的血液類(lèi)型系統(tǒng)。ABO血型系統(tǒng)是1900年奧地利蘭茨泰納發(fā)現(xiàn)和確定的人類(lèi)第一個(gè)血型系統(tǒng)。根據(jù)凝集原A、B的分布把血液分為A、B、AB、0四型。紅細(xì)胞上只有凝集原A的為A型血，其血清中有抗B凝集素；紅細(xì)胞上只有凝集原B的為B型血，其血清中有抗A的凝集素；紅細(xì)胞上A、B兩種凝集原都有的為AB型血，其血清中無(wú)抗A、抗B凝集素；紅細(xì)胞上A、B兩種凝集原皆無(wú)者為O型，其血清中抗A、抗B凝集素皆有。具有凝集原A的紅細(xì)胞可被抗A凝集素凝集；抗B凝集素可使含凝集原B的紅細(xì)胞發(fā)生凝集。輸血時(shí)若血型不合會(huì)使輸入的紅細(xì)胞發(fā)生凝集，引起血管阻塞和血管內(nèi)大量溶血，造成嚴(yán)重后果。所以在輸血前必須作血型鑒定。正常情況下只有ABO血型相同者可以相互輸血。在缺乏同型血源的緊急情況下，因O型紅細(xì)胞無(wú)凝集原，不會(huì)被凝集，可輸給任何其他血型的人。AB型的人，血清中無(wú)凝集素，可接受任何型的紅細(xì)胞。但是異型輸血輸入量大時(shí)，輸入血中的凝集素未能被高度稀釋?zhuān)锌赡苁故苎叩募t細(xì)胞凝集。所以大量輸血時(shí)仍應(yīng)采用同型血。臨床上在輸血前除鑒定ABO血型外，還根據(jù)凝集反應(yīng)原理，將供血者和受血者的血液作交叉配血實(shí)驗(yàn)，在體外確證兩者血液相混不發(fā)生凝集，方可進(jìn)行輸血以確保安全。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)存在于紅細(xì)胞上的凝集原（即血型抗原）也存在于其他血細(xì)胞和一般組織細(xì)胞。所有細(xì)胞表面血型抗原的特異性可作為機(jī)體免疫系統(tǒng)鑒別自身和異物的標(biāo)志。因此，在臨床實(shí)踐中血型鑒定也是組織器官移植成敗的關(guān)鍵。人類(lèi)血型有遺傳特性，決定血型的血型抗原即凝集原ABOA和B及其前身物H，分別受ABO三個(gè)等位基因控制。A、B基因?yàn)轱@性基因，O（H）基因?yàn)殡[性基因。它們的遺傳規(guī)律所顯示的父、母血型與子代血型間的關(guān)系，在法醫(yī)學(xué)上可作為否定親子關(guān)系的依據(jù)，若再配合其他血型系統(tǒng)的測(cè)定，則可判斷親子關(guān)系。

血型不僅在輸血上有重要意義，而且在人種學(xué)、遺傳學(xué)、法醫(yī)學(xué)、移植免疫、疾病抵抗力（或易感性）等方面都有應(yīng)用價(jià)值，在輸血前，一定要檢查病人(受血者)和輸血人（供血者）的血型，并且要進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。在臨床醫(yī)學(xué)中，除輸血、移植免疫外，對(duì)新生兒溶血病、自身免疫性溶血性貧血特異性抗體的檢查，也都需要血型知識(shí)和有關(guān)技術(shù)。ABO血型抗原具有種族差異。例如，中歐地區(qū)的人群中，約40％以上的人為A型，近40％的人為O型，10％的人為B型，6％的人為AB型；而90％的美洲土著人為O型。[5] 編輯本段舉例分析

通常只用兩種抗血清即抗A及抗B血清，就可將群體分為四種血型。

根據(jù)血型的遺傳規(guī)律，和臨床工作方例起見(jiàn)，配偶間所生子女的血型如下：

各種ABO配偶所生子女的血型:

婚配式 子女可能有的血型 子女不可能有的血型

A×A A、O B、AB

A×B A、B、O、AB 無(wú)

A×AB A、B、AB O

A×O A、O B、AB

B×B B、O A、AB

B×AB A、B、AB O

B×O B、O A、AB

AB×AB A、B、AB O

AB×O A、B AB、O

O×O O A、B、AB

婚配式 A型血的可能 B型血的可能

A*A 75% 0% 25% 0%

A*B 25% 25% 25% 25%

A*O 50% 0% 50% 0%

A*AB 50% 25% 0% 25%

B*B 0% 75% 25% 0%

B*O 0% 75% 25% 0%

O型血的可能AB型血的可能

B*AB 25% 50% 0% 25%

O*O 0% 0% 100% 0%

O*AB 50% 50% 0% 0%

AB*AB 25% 25% 0% 50% ABO血型鑒定總結(jié)

AB0血型鑒定原理

常用鹽水凝集法檢測(cè)紅細(xì)胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗體，依據(jù)抗原抗體存在的情況判定血型。常規(guī)的方法有：①正向定型：用已知抗體的標(biāo)準(zhǔn)血清檢查紅細(xì)胞上未知的抗原。②反向定型：用已知血型的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查血清中未知的抗體。結(jié)果判定：凡紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集者為陽(yáng)性，呈散在游離狀態(tài)為陰性。ABO血型定型原則見(jiàn)表1-5-2。

鑒定方法

（1）生理鹽水凝集法：①玻片法：操作簡(jiǎn)單，適于大量標(biāo)本檢查，但反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)；被檢查者如血清抗體效價(jià)低，則不易引起紅細(xì)胞凝集，因此，不適于反向定型。②試管法：由于離心作用可加速凝集反應(yīng)，故反應(yīng)時(shí)間短，而且，借助于離心力可以使紅細(xì)胞接觸緊密，促進(jìn)凝集作用，適于急診檢查。

紅細(xì)胞亞型抗原性弱，如抗A抗B標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)低時(shí)，易造成漏檢或誤定。如加用O型（抗A、B）血清和反向定型，可避免此類(lèi)錯(cuò)誤。

玻片法凝集結(jié)果判斷：紅細(xì)胞呈均勻分布，無(wú)凝集顆粒，鏡下紅細(xì)胞分散。在低倍鏡下凝集程度強(qiáng)弱判斷標(biāo)準(zhǔn)：①呈一片或幾片凝塊，僅有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為（++++）。②呈數(shù)個(gè)大顆粒狀凝塊，有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為（+++）。③數(shù)個(gè)小凝集顆粒和一部分微細(xì)凝集顆粒，游離紅細(xì)胞約占1／2為（++）。④肉眼可見(jiàn)無(wú)數(shù)細(xì)沙狀小凝集顆粒。于鏡下觀察，每凝集團(tuán)中有5～8個(gè)以上紅細(xì)胞凝集為（+）。⑤可見(jiàn)數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起，周?chē)泻芏嗟挠坞x紅細(xì)胞（±）。⑥可見(jiàn)極少數(shù)紅細(xì)胞凝集，而大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布為混合凝集外觀。⑦鏡下未見(jiàn)細(xì)胞凝集，紅細(xì)胞均勻分布為（-）。

（2）凝膠微柱法：是紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在凝膠微柱介質(zhì)中發(fā)生凝集反應(yīng)的免疫學(xué)方法。血型抗體為單克隆抗體，加入試劑、標(biāo)本，用專(zhuān)用離心機(jī)離心后可直接用肉眼觀察結(jié)果或用血型儀分析。此法操作標(biāo)準(zhǔn)化，定量加樣，確保結(jié)果準(zhǔn)確性。

抗A、抗B和抗AB標(biāo)準(zhǔn)血清標(biāo)準(zhǔn)

準(zhǔn)血清均采自健康人，并應(yīng)符合下述條件：①特異性：只能與相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集，無(wú)非特異性凝集。②效價(jià)：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)抗A和抗B血清效價(jià)均在1：128以上。③親和力：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)要求抗A對(duì)A1、A2及A2B發(fā)生反應(yīng)開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間分別是15s、30s和45s；抗B對(duì)B型紅細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間為15s。凝集強(qiáng)度為3min時(shí)，凝塊不小于1mm2。④冷凝集素效價(jià)：在1：4以下。⑤無(wú)菌。⑥滅活補(bǔ)體。血型鑒定操作時(shí)注意事項(xiàng)

一般注意事項(xiàng)：①所用器材必須干燥清潔、防止溶血，凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染，建議使用一次性器材。標(biāo)準(zhǔn)血清從冰箱取出后，應(yīng)待其平衡至室溫后再用，用畢后應(yīng)盡快放回冰箱保存。②加試劑順序：一般先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便核實(shí)是否漏加血清。③雖然IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以4℃最強(qiáng)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)收集整理但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾，一般在室溫20℃～24℃內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，而37℃條件，可使反應(yīng)減弱。④幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱，最好采用試管法鑒定血型。⑤玻片法反應(yīng)時(shí)間不能少于10min，否則較弱凝集不能出現(xiàn)，造成假陰性。⑥正、反定型結(jié)果一致才可發(fā)報(bào)告。⑦反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，長(zhǎng)期大量應(yīng)用免疫抑制，血型抗體可減弱或消失；血清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價(jià)增高、多發(fā)性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難；新生兒體內(nèi)可存在母親輸送的血型抗體，且自身血型抗體效價(jià)又低，因而出生6個(gè)月以?xún)?nèi)的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗體，可引起假陰性或血型鑒定錯(cuò)誤。[6]

第三篇：ABO血型操作

長(zhǎng)春博迅ABO、RhD血型定型檢測(cè)卡操作流程 【檢驗(yàn)原理】

本試驗(yàn)采用排阻層析原理，即在微柱凝膠介質(zhì)中，紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，形成紅細(xì)胞免疫復(fù)合物，在一定離心力下，該復(fù)合物不能通過(guò)凝膠間隙而浮于膠表面或懸于膠中；如無(wú)相應(yīng)抗體結(jié)合，則不能形成紅細(xì)胞免疫復(fù)合物，在一定的離心力下，分散的紅細(xì)胞可以通過(guò)凝膠間隙沉于微柱腔底部?！緲颖疽蟆?/p>

標(biāo)本采集：采集被檢對(duì)象靜脈血，將該同一人血液分別制備成紅細(xì)胞標(biāo)本和血清標(biāo)本。

紅細(xì)胞標(biāo)本的制備：配制成0.5％-0.8％紅細(xì)胞懸液。

血清標(biāo)本的制備：將被檢者靜脈血采入含兔腦粉或其它促凝劑的試管中，10分鐘后離心，2000rpm,10分鐘，取上清；或者將被檢者靜脈血采入無(wú)抗凝試管中，4℃放置12小時(shí)，或37℃放置2小時(shí)后離心，2000rpm,10分鐘，取上清。該上清不得有絮狀物或沉淀。標(biāo)本必須充分去纖維蛋白，否則血清標(biāo)本中析出的或紅細(xì)胞懸液中殘余的纖維蛋白可阻礙紅細(xì)胞沉降，使非凝集細(xì)胞離心后在膠表面形成一條紅線，呈假陽(yáng)性反應(yīng)。【操作步驟】

1.將微柱凝膠試劑卡的六支凝膠微管標(biāo)號(hào)。

2.將待檢者0.5％-0.8％紅細(xì)胞懸液分別加入第一至第四支微管中，每管50微升。3.將待檢者血清分別加入第五支和第六支

第四篇：試管法ABO血型鑒定

試管法ABO血型鑒定

1.檢驗(yàn)?zāi)康?/p>

鑒定供受血者ABO血型，保證臨床輸血安全。2．檢驗(yàn)方法 試管法 2.1.試管法 2.1.1.實(shí)驗(yàn)原理

ABO血型鑒定，是根據(jù)IgM類(lèi)特異性血型抗體與紅細(xì)胞膜上特異性抗原結(jié)合能出現(xiàn)凝集反應(yīng)的原理，用已知IgM類(lèi)特異性標(biāo)準(zhǔn)抗A和抗B血清來(lái)測(cè)定紅細(xì)胞上有無(wú)相應(yīng)的A抗原或（和）B抗原，同時(shí)用已知標(biāo)準(zhǔn)A型紅細(xì)胞和B型紅細(xì)胞來(lái)測(cè)定血清中有無(wú)相應(yīng)的天然IgM類(lèi)抗A或（和）抗B。2.1.2.標(biāo)本要求

靜脈EDTA抗凝血2.0～3.0ml，以3000r/min離心3分鐘，分離上清液。2.1.3.試劑

單克隆或多克隆抗A、抗B試劑，3-5% A、B及O型試劑標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液。2.1.4.器材

離心機(jī)，4℃冰箱、顯微鏡，12×70mm試管(以下稱(chēng)“小試管”),滴管，10mm×60mm透明的玻璃試管或塑料試管。2.1.5.操作步驟

2.1.5．1．正定型（查抗原）：取試管2支，分別標(biāo)明抗A、抗B，加入抗A和抗B分型血清各2滴于試管底部，再以滴管分別加入受檢者5%紅細(xì)胞鹽水懸液1滴，混勻。

2.1.5．2.反定型（查抗體）：取試管3支，分別標(biāo)明A型、B型和O型細(xì)胞。用滴管分別加入受檢者血清2滴于試管底部，再分別以滴管加入A、B、O型5%試劑紅細(xì)胞懸液1滴，混勻。

2.1.5．3.立即以3000r/min離心10秒。（離心時(shí)間為離心機(jī)校準(zhǔn)時(shí)間）。2.1.5．4.輕輕搖動(dòng)試管，使沉于管底的紅細(xì)胞浮起，先以肉眼觀察有無(wú)凝集（或溶血）現(xiàn)象,如肉眼觀察不見(jiàn)凝集，應(yīng)將反應(yīng)物倒于玻片上，再以低倍鏡下觀察有無(wú)凝集。2.1.5．5.凝集強(qiáng)度判斷標(biāo)準(zhǔn)

＋＋＋＋：紅細(xì)胞凝集成一大片或幾片，僅有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞，血清清晰透明。

＋＋＋：紅細(xì)胞凝集成數(shù)個(gè)大顆粒凝塊，有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞，血清透明。

＋＋：紅細(xì)胞凝成數(shù)個(gè)小顆粒凝塊，游離紅細(xì)胞＜1/2。＋：紅細(xì)胞凝成數(shù)個(gè)小顆粒凝塊，游離紅細(xì)胞＞1/2?！溃杭t細(xì)胞凝成數(shù)個(gè)微小顆粒凝塊，周?chē)泻芏嘤坞x紅細(xì)胞。MF：混合凝集外觀（mixed field，MF），鏡下可見(jiàn)少數(shù)紅細(xì)胞凝集，而絕大多數(shù)紅細(xì)胞呈分散分布。

－：陰性，鏡下未見(jiàn)紅細(xì)胞凝集，紅細(xì)胞均勻分布。HP：部分溶血（part hemolysis，HP），有些殘留紅細(xì)胞。H：完全溶血（hemolysis，H），無(wú)殘留紅細(xì)胞。2.1.5.6.報(bào)告受檢者紅細(xì)胞ABO血型（表1001-1）。

表1001-1 ABO血型鑒定結(jié)果判斷

分型血清＋受檢者紅細(xì)胞

抗A ＋ － － ＋ 抗B － ＋ － ＋

A B O AB 受檢者血型

A細(xì)胞 － ＋ ＋ －

B細(xì)胞 ＋ － ＋ －

O細(xì)胞 － － － －

受檢者血清＋試劑紅細(xì)胞

注：＋為凝集；－為不凝集

第五篇：淺談臨床檢驗(yàn)ABO血型鑒定的質(zhì)量控制方法

淺談臨床檢驗(yàn)ABO血型鑒定的質(zhì)量控制方法

【摘要】血型是人類(lèi)血液以血型抗原為表現(xiàn)形的遺傳性狀，ABO血型系統(tǒng)和Rh血型系統(tǒng)是紅細(xì)胞的兩大血型抗原抗體系統(tǒng)，在臨床輸血和血液遺傳學(xué)研究上有重要意義。血型鑒定(blood typing)是臨床輸血的首要問(wèn)題，正確的血型鑒定是保證輸血安全的前提條件。目的：總結(jié)探討血型鑒定的影響因素。方法：對(duì)418例學(xué)生采用玻片法和試管法進(jìn)行血型鑒定。結(jié)果：玻片法和試管法存在一定結(jié)果不符，其準(zhǔn)確率低于試管法。結(jié)論：血型鑒定存在一定的影響因素，血型鑒定時(shí)，需要綜合考慮。【關(guān)鍵詞】ABO血型；血型鑒定,遺傳

血型是人類(lèi)血液以血型抗原為表現(xiàn)形的遺傳性狀，ABO血型系統(tǒng)和Rh血型系統(tǒng)是紅細(xì)胞的兩大血型抗原抗體系統(tǒng)，在臨床輸血和血液遺傳學(xué)研究上有重要意義。血型鑒定(blood typing)是臨床輸血的首要問(wèn)題，正確的血型鑒定是保證輸血安全的前提條件。臨床常用的血型鑒定方法有鹽水凝集法和凝膠微柱法。鹽水凝集法因簡(jiǎn)單易行在臨床上廣泛應(yīng)用，其又分為玻片法和試管法，結(jié)果在實(shí)際操作中會(huì)受到諸多因素的影響。本文通過(guò)對(duì)418名學(xué)生的玻片法和試管法的血型鑒定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，探討ABO血型鑒定中的影響因素。資料和方法對(duì)象：我校檢驗(yàn)學(xué)院2004年8月 2009年10月間418名學(xué)生，年齡18～25歲，平均年齡21．4-t：2．5歲。每名學(xué)生同時(shí)用玻片法和試管法兩種方法進(jìn)行ABO血型鑒定。

標(biāo)本采集：抽取EDTA抗凝血，在2小時(shí)內(nèi)完成ABO血型鑒定操作。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：全部數(shù)據(jù)采用SPSS1 1．5統(tǒng)計(jì)軟件包處理，計(jì)量資料以 ±s表示。計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)和率表示，計(jì)數(shù)資料比較用 檢驗(yàn)。P<9．05有差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果

① 玻片法和試管法的血型鑒定結(jié)果見(jiàn)附圖：從圖中可以看出不論是玻片法還是試管法，418名學(xué)生的血型分布是一致的，即O型最多，之后依次為B、A、AB，即O>B>A>AB。② 玻片法和試管法的鑒定結(jié)果顯示AB型人數(shù)相同，而A型、B型和O型人數(shù)不完全一致，存在一定的差異，具體數(shù)據(jù)見(jiàn)附表。討論

血型由血型基因決定，是血細(xì)胞的主要特征之一，在臨床輸血和血液遺傳學(xué)研究上有重要意義。輸血安全是臨床輸血的首要問(wèn)題，正確的血型鑒定(blood typing)是保證輸血安全的前提條件。此文筆者就臨床血型鑒定的經(jīng)驗(yàn)和體會(huì)進(jìn)行簡(jiǎn)單交流。

3．1 醫(yī)務(wù)人員的問(wèn)題

臨床醫(yī)生在填寫(xiě)輸血申請(qǐng)時(shí)，沒(méi)有做血型檢測(cè)，單憑印象或聽(tīng)信患者的自訴血型而造成血型錯(cuò)誤；臨床護(hù)士在抽取血標(biāo)本時(shí)，未校對(duì)患者的姓名、床號(hào)，僅憑印象，抽了其他人的血液而造成血型報(bào)告錯(cuò)誤或交叉配血不合；檢驗(yàn)科人員沒(méi)有對(duì)報(bào)告核對(duì)正確，造成血型鑒定錯(cuò)誤。

3．2 被檢紅細(xì)胞

亞型更少。⑤ ABO血型抗體減弱：ABO血型規(guī)則抗體合成量的不足也是造成正反定型不符的重要因素。當(dāng)獻(xiàn)血者血清中抗一A和抗一B效價(jià)減弱，其反定型格局總表現(xiàn)為AB型。在這種情況下，可以通過(guò)增加血清用量，降低反應(yīng)溫度，延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，應(yīng)用低離子強(qiáng)度溶液等方法，檢出低效價(jià)的抗一A和抗一B。

3．3 實(shí)驗(yàn)器材

① 所用器材必須清潔、干燥，試管、滴管要專(zhuān)用，標(biāo)記清楚。②用試管法定型時(shí)，應(yīng)同時(shí)進(jìn)行正向和反向定型。每批測(cè)定均須設(shè)置對(duì)照。③紅細(xì)胞濃度按要求配制，紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體的比例適當(dāng)。④反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、離心時(shí)間是血型鑒定的重要影響因素，要按操作規(guī)程嚴(yán)格控制。

3．4 其它因素

① 經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生，在獻(xiàn)血者中常見(jiàn)的不規(guī)則抗體是抗一M、抗一N和抗一A等。在反定型試驗(yàn)中，不規(guī)則抗體可以和標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞上相應(yīng)的抗原發(fā)生凝集反應(yīng)，而這種反定型結(jié)果與A或B抗原無(wú)關(guān)，所以導(dǎo)致ABO血型鑒定時(shí)正反定型結(jié)果不一致。②類(lèi)B抗原某些受腸道革蘭氏陰性桿菌感染的病人，紅細(xì)胞獲得了類(lèi)B抗原，A型病人可誤定為AB型，O型誤定為B型。因此，感染體征病人配血不合時(shí)，應(yīng)考慮類(lèi)B。③磺胺類(lèi)藥物引起的凝集有人報(bào)道一個(gè)B型的獻(xiàn)血員闌尾術(shù)后用氨苯磺胺，3個(gè)月后，其血清能凝集A、AB型的紅細(xì)胞，也能凝集B型的紅細(xì)胞。另外，注射青霉素后，有些人的血清中含有青霉素抗體，而青霉素已吸附在紅細(xì)胞表面，當(dāng)此紅細(xì)胞