第一章

微生物緒論常見考點(diǎn)

第一章?緒論

一、微生物的分類及命名

1、微生物的分類等級(jí)為界、門、綱、目、科、屬、種，種是最基本的分類單位。目前國際上普遍采用的分類系統(tǒng)是伯杰分類系統(tǒng)。

2、根據(jù)微生物的大小、結(jié)構(gòu)和組成不同，分為三大類型：

（1）非細(xì)胞型微生物：此類微生物無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，由一種核酸和蛋白衣殼組成，必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)才能生長繁殖。如病毒、類病毒和朊病毒（又稱朊粒）。

（2）原核細(xì)胞型微生物：此類微生物由單細(xì)胞組成，細(xì)胞核分化程度低，無核膜、核仁，染色體為裸露的DNA分子，缺乏完整的細(xì)胞器。如細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體和螺旋體。

（3）真核細(xì)胞型微生物：此類微生物細(xì)胞核分化程度高，有核膜、核仁、完整的細(xì)胞器。如真菌、單細(xì)胞藻類。

3、每種細(xì)菌DNA中的G（鳥嘌呤）+C（胞嘧啶）含量摩爾百分比有一定范圍，變化不大，DNA（G+C）mol%可以作為細(xì)菌分類的一個(gè)重要依據(jù)。

4、微生物命名由屬名和種名組成，中文命名種名在前，屬名在后。拉丁文則相反。

如：Mycobacterium

tuberculosis

中文名:

種名

+

屬名

例:

結(jié)核分枝桿菌

二、微生物的發(fā)展

1、荷蘭人列文虎克發(fā)明了顯微鏡，人類第一次觀察到微生物。

2、法國科學(xué)家巴斯德被稱為“微生物學(xué)之父”。

3、1929年，弗萊明發(fā)現(xiàn)了青霉素。1940年Florey和Chain將青霉素分離提純，應(yīng)用于臨床。

5、德國醫(yī)生郭霍證明了微生物是傳染病的致病因子。

第二章

細(xì)菌的基本性狀常見考點(diǎn)

一、細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)

（一）細(xì)菌的大小和形態(tài)

1、細(xì)菌個(gè)體微小，通常以微米作為測量單位。

2、細(xì)菌的基本形態(tài)有三類：球菌、桿菌、螺形菌。

（二）細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)

1、細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)由外向內(nèi)依次是細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)。

2、根據(jù)細(xì)胞壁的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)不同，用革蘭染色將細(xì)菌分為G＋和G－兩大類。

3、磷壁酸是革蘭陽性菌細(xì)胞壁特有的結(jié)構(gòu)，壁磷壁酸為革蘭陽性菌的重要表面抗原，膜磷壁酸為黏附因子。

4、外膜層是革蘭陰性菌特細(xì)胞壁的特殊成分，從外向內(nèi)依次是脂多糖、脂質(zhì)雙層、脂蛋白。其中脂多糖是革蘭陰性菌內(nèi)毒素，脂質(zhì)A是內(nèi)毒素的主要毒性部分。

5、由于革蘭陰性菌和革蘭陽性菌細(xì)胞壁組成成分的不同，兩者對(duì)藥物的敏感性也不一樣。革蘭陽性菌細(xì)胞壁有五肽交聯(lián)橋，是青霉素作用的部位。

6、中介體：又稱中間體，是細(xì)胞膜內(nèi)陷折疊而成的管狀囊狀結(jié)構(gòu)。其功能類似真核細(xì)胞的線粒體，故有人稱之為類線粒體。

7、質(zhì)粒：是細(xì)菌染色體（核質(zhì)）以外的遺傳物質(zhì)，為雙鏈閉環(huán)DNA分子，攜帶遺傳信息，控制細(xì)菌某些特定的遺傳性狀。F質(zhì)?？刂菩跃漠a(chǎn)生、R質(zhì)粒與細(xì)菌的耐藥性有關(guān)。

（二）細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)

1、鞭毛：細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官，是由細(xì)胞質(zhì)伸出的蛋白性絲狀物。

2、菌毛：主要出現(xiàn)在革蘭陰性菌中。分為性菌毛和普通菌毛。

僅少數(shù)革蘭陰性細(xì)菌具有性菌毛，較普通菌毛少，只有1～4根，比普通菌毛長且粗，呈中空管狀，是兩菌之間傳遞遺傳物質(zhì)的通道。帶有性菌毛的細(xì)菌稱為F+菌或雄性菌，無菌毛的細(xì)菌稱為F-菌或雌性菌。細(xì)菌的耐藥性及某些毒力因子均可通過這種方式轉(zhuǎn)移。

3、莢膜：通常在機(jī)體內(nèi)和營養(yǎng)物質(zhì)豐富的環(huán)境中形成，在細(xì)胞壁外包繞的一層界限分明，且不易被洗脫的黏稠性物質(zhì)。

4、芽胞：主要為革蘭陽性桿菌在一定條件下細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)濃縮脫水而形成的一個(gè)遮光性很強(qiáng)、具有多層膜狀結(jié)構(gòu)、通透性很低的圓形或卵圓形小體。

▲細(xì)菌L型即為細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型。在人工誘導(dǎo)（少量青霉素、頭孢菌素存在）或自然情況下，細(xì)菌L型在體內(nèi)或體外均可產(chǎn)生。

細(xì)菌L型在含血清的高滲低瓊脂培養(yǎng)基中能緩慢生長，可形成“油煎蛋”樣菌落（典型L型細(xì)菌）：菌落較小，中心致密并深陷人瓊脂中；四周較薄，由透明的顆粒組成，在低倍鏡下觀察菌落呈“油煎蛋”狀。

細(xì)菌L型保留了親代的遺傳特性，可返祖，可致病。

二、細(xì)菌的生理

1、細(xì)菌的基本化學(xué)組成：水、無機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類、脂類、核酸（細(xì)菌含有RNA和DNA兩種核酸）。

2、細(xì)菌有帶電現(xiàn)象，革蘭陽性菌的等電點(diǎn)約為pH2～3，革蘭陰性菌的等電點(diǎn)約為pH4～5。

（一）細(xì)菌的生長繁殖、控制、遺傳及變異

1、細(xì)菌根據(jù)營養(yǎng)類型的不同，分為自養(yǎng)菌（以無機(jī)物作為原料）和異養(yǎng)菌，異氧菌又根據(jù)所需營養(yǎng)物質(zhì)的不同分為腐生菌（以無生命的有機(jī)物作為原料）和寄生菌（以宿主體內(nèi)的有機(jī)物作為原料）。

2、細(xì)菌生長繁殖的主要條件有：

（1）充足的營養(yǎng)物質(zhì)：水、碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子。

（2）合適的pH：大多數(shù)細(xì)菌的最適pH為7.2～7.6，有個(gè)別例外，結(jié)核分支桿菌在pH6.4～6.8、霍亂弧菌在pH8.4～9.2的環(huán)境中生長最好。

（3）合適的溫度：

35～37℃

（4）必要的氣體

根據(jù)細(xì)菌對(duì)氧氣?需求不一，分為：

①需氧菌：必須在有氧（空氣）的情況下才能生長。

②微需氧菌：在5%～6%的低氧環(huán)境中才能生長。

③厭氧菌：必須在無氧的環(huán)境中才能生長。

④兼性厭氧菌：在有氧和無氧環(huán)境中均能生長。

3、細(xì)菌生長繁殖的規(guī)律

（1）細(xì)菌一般一無性二分裂的方式繁殖。

（2）大多數(shù)細(xì)菌20～30分鐘繁殖一代，結(jié)核需要18～20小時(shí)才繁殖一代。

（3）細(xì)菌的生長曲線分為四個(gè)時(shí)期：

①遲緩期：適應(yīng)階段，此階段細(xì)菌幾乎不繁殖。一般約1～4小時(shí)。

②對(duì)數(shù)期：細(xì)菌的形態(tài)、染色性、生理活性都較典型，可以用來觀察細(xì)菌的大小、形態(tài)、染色性、對(duì)抗菌藥物的敏感性等。一般約8～18小時(shí)。

③穩(wěn)定期：細(xì)菌繁殖數(shù)與死亡數(shù)大致平衡。

④衰亡期：細(xì)菌死亡逐漸增多，死菌數(shù)超過活菌數(shù)。

4、細(xì)菌合成代謝的產(chǎn)物主要有：熱原質(zhì)、毒素（革蘭陽性菌合成外毒素、革蘭陰性菌合成內(nèi)毒素）、侵襲性酶類、色素、抗生素、細(xì)菌素、維生素。

▲我國規(guī)定生活飲用水的標(biāo)準(zhǔn)是：1ml水中的細(xì)菌總數(shù)不超過100cfu；100ml水中不得檢出大腸埃希菌。

5、細(xì)菌的控制：

（1）消毒：殺死物體上的病原微生物但不一定殺死細(xì)菌芽胞的方法。

（2）滅菌：殺滅物體上所有的微生物，包括細(xì)菌芽孢。

（3）防腐：防止或抑制微生物生長繁殖的方法。

（4）無菌和無菌操作：無菌是指沒有活的微生物存在。防止微生物進(jìn)入機(jī)體或者其他操作對(duì)象的方法稱為無菌操作。

（5）高壓蒸汽滅菌法的壓力為103.4kPa，溫度為121.3℃，維持15-30分鐘。檢測高壓蒸汽滅菌效果的細(xì)菌是嗜熱枯草芽孢桿菌。

（6）用于牛奶等物品的消毒方法是巴氏消毒法。

（7）紫外線殺菌的主要機(jī)制是干擾DNA的復(fù)制。

6、正常情況下，人體與外界相同的器官都有細(xì)菌，機(jī)體的胃、骨骼、肌肉、血液、腦等無菌。濫用抗生素會(huì)導(dǎo)致菌群失調(diào)而發(fā)生一系列的病理反應(yīng)。

7、細(xì)菌常見的變異現(xiàn)象：

（1）形態(tài)與結(jié)構(gòu)變異：如細(xì)菌L型。①莢膜變異，從有到無；②鞭毛變異（H-O變異），從有到無；③芽胞變異，從有到無。

（2）菌落變異：S-R變異，細(xì)菌菌落光滑型與粗造型之間的變異。

（3）毒力變異：包括毒力加強(qiáng)和毒力減弱。

（4）抗原變異

（5）耐藥性變異：細(xì)菌對(duì)某種藥物從敏感變?yōu)椴幻舾小?/p>

（6）酶活性變異

（7）生化特性的變異

8、細(xì)菌的R質(zhì)粒是耐藥質(zhì)粒，可通過細(xì)菌間的接合或通過噬菌體進(jìn)行傳遞。

9、細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移與重組的方式有轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶原性轉(zhuǎn)換、原生質(zhì)融合等。

（1）轉(zhuǎn)化：是受體菌直接攝取供體菌提供的游離DNA片段整合重組，使受體菌的性狀發(fā)生變異的過程。

（2）轉(zhuǎn)導(dǎo)：是以噬菌體為媒介，將供體菌的基因轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)，導(dǎo)致受體菌基因改變的過程。

（3）接合：受體菌和供體菌直接接觸，供體菌通過性菌毛將所帶有的F質(zhì)?；蝾愃七z傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移至受體菌的過程。

（4）溶原性轉(zhuǎn)換：是噬菌體的DNA與細(xì)菌染色體重組，使宿主菌遺傳結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而引起的遺傳型變異。

（5）原生質(zhì)體融合：兩種經(jīng)過處理失去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體混和可發(fā)生融合，融合后的雙倍體細(xì)胞可發(fā)生細(xì)菌染色體間的重組。

10、細(xì)菌的主要遺傳物質(zhì)是染色體，為一條環(huán)狀閉合的雙螺旋DNA。質(zhì)粒也是細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。但不是主要遺傳物質(zhì)。

第三章

微生物致病性與感染常見考點(diǎn)

1、病原微生物能否致病與病原體的毒力、數(shù)量、侵入么戶、機(jī)體的免疫力、環(huán)境因素等密切相關(guān)。

2、細(xì)菌分泌的侵襲性酶類主要有：

（1）透明質(zhì)酸酶：分解結(jié)締組織的透明質(zhì)酸，易于細(xì)菌擴(kuò)散。

（2）膠原酶：分解細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白。

（3）神經(jīng)氨酸酶：分解腸黏膜上皮細(xì)胞的細(xì)胞間質(zhì)。

（4）磷脂酶：可水解細(xì)胞膜的磷脂，破壞組織細(xì)胞。

（5）卵磷脂酶：分解細(xì)胞膜的卵磷脂。

（6）激酶：將血纖維蛋白酶原激活為纖維蛋白酶，以分解纖維蛋白，防止形成血凝塊。

（7）凝固酶：使血漿發(fā)生凝固，保護(hù)細(xì)菌不被吞噬細(xì)胞吞噬和殺滅。

（8）IgA蛋白酶：與細(xì)菌的黏附有關(guān)。

3、細(xì)菌毒素根據(jù)來源、性質(zhì)和作用特點(diǎn)不同分為外毒素和內(nèi)毒素。

（1）外毒素的特性：①主要是革蘭陽性菌產(chǎn)生；②具有菌種特異性；③毒性作用強(qiáng)；④毒性作用有組織選擇性；⑤具有良好的免疫原性：外毒素經(jīng)過0.4%的甲醛處理可失去毒性但仍保持免疫原性變?yōu)轭惗舅?，可刺激幾天產(chǎn)生抗毒素；⑥不耐熱；⑦都是蛋白質(zhì)，易被酸及蛋白水解酶滅活。

（2）內(nèi)毒素的特性：①主要是革蘭陰性菌產(chǎn)生；②化學(xué)性質(zhì)是脂多糖；③抵抗力強(qiáng)，耐熱、耐酸、耐堿、耐強(qiáng)氧化劑；④細(xì)菌死亡溶解后釋放；⑤毒性及免疫原性均較外毒素弱，不能用甲醛處理成類毒素。

4、內(nèi)毒素的主要生物學(xué)活性有致熱作用、白細(xì)胞增多、感染性休克、DIC等。

5、細(xì)菌全身感染在臨床上常見以下幾種情況：

（1）毒血癥：致病菌不進(jìn)入血液循環(huán)，但其產(chǎn)生的外毒素入血。

（2）菌血癥：致病菌侵入血流，但不在其生長繁殖。

（3）敗血癥：致病菌侵入血流，在其中大量繁殖并產(chǎn)生毒性物質(zhì)。

（4）膿毒血癥：化膿性細(xì)菌侵入血流，并在其大量繁殖。

（5）內(nèi)毒素血癥：革蘭陰性細(xì)菌侵入血流，并在其大量繁殖，崩解后釋放大量內(nèi)毒素。

第四章

細(xì)菌檢驗(yàn)技術(shù)常見考點(diǎn)

一、細(xì)菌染色標(biāo)本鏡檢

▲染色標(biāo)本檢查的基本程序是涂片、干燥、固定、染色、鏡檢。

（一）革蘭染色

1、革蘭染色為兩種染料先后進(jìn)行染色，為復(fù)染色法。

2、染液：結(jié)晶紫、盧戈碘液、95%乙醇、稀釋苯酚復(fù)紅液或沙黃。

3、染色步驟：初染1min（結(jié)晶紫）→流水沖洗→媒染1min（盧戈碘液）→流水沖洗→脫色20-30s（95%乙醇）→流水沖洗→復(fù)染0.5-1min（稀釋苯酚復(fù)紅液或沙黃）→流水沖洗→干燥→鏡檢

4、意義：鑒別細(xì)菌、指導(dǎo)用藥、指導(dǎo)臨床治療。

5、結(jié)果判定：染紫色為革蘭陽性，染紅色為革蘭陰性。

（二）抗酸染色

1、抗酸染色也是兩種染料先后染色，也是復(fù)染色法。

2、染液：苯酚復(fù)紅、3%鹽酸酒精、呂氏堿性亞甲藍(lán)

3、染色步驟：初染5～8min（苯酚復(fù)紅加熱）→流水沖洗→脫色（3%鹽酸酒精）→流水沖洗→復(fù)染1min（呂氏亞甲藍(lán)）→流水沖洗→干燥→鏡檢

4、注意事項(xiàng)：①苯酚加熱冒氣即可，切勿煮沸或煮干；②脫色要脫到無紅色染液脫下為止。③痰標(biāo)本需要經(jīng)過酸或堿處理后，使痰液化后接種。

5、臨床意義：一般用于分枝桿菌屬的檢查，如結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)桿菌等。

6、結(jié)果判定：染成紅色為抗酸菌，染成藍(lán)色為非抗酸菌。

二、細(xì)菌不染色標(biāo)本鏡檢

▲壓滴法、懸滴法、暗視野聚光法均用于觀察細(xì)菌動(dòng)力。暗視野聚光法使用暗視野顯微鏡可觀察螺旋體及其動(dòng)力。

三、細(xì)菌接種與培養(yǎng)技術(shù)

1、液體培養(yǎng)基是在肉浸液中加入1%蛋白胨和0.5%NaCl，調(diào)pH至7.4，蛋白胨的作用為提供細(xì)菌生長繁殖所需的氮源。

2、半固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基中加入0.2%～0.5的瓊脂。

3、固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基中加入2%～3%的瓊脂。

4、細(xì)菌L型的培養(yǎng)基必須采用高滲（3%～5%NaC

l、10%～20%蔗糖等）低瓊脂培養(yǎng)基。

5、制備好的培養(yǎng)基放于4℃活冷暗處一般可以保存一周，最多不超過2周。

6、平板劃線接種法一般用于含有多種細(xì)菌的標(biāo)本，利用此接種法可以得到單個(gè)菌落，分為分區(qū)劃線法和連續(xù)劃線法。

7、分區(qū)劃線法下一區(qū)應(yīng)與上一區(qū)接觸3～4次，此方法多用于含菌量多的標(biāo)本，如糞便、濃汁、痰液等標(biāo)本。連續(xù)劃線法多用于含菌量少的標(biāo)本。

8、斜面接種法主要用于純種增菌及保留菌種或生化反應(yīng)。

9、穿刺接種法可用于觀察細(xì)菌動(dòng)力，有鞭毛的細(xì)菌可沿穿刺線擴(kuò)散生長。

10、液體接種法多用于普通肉湯、蛋白胨水等液體培養(yǎng)基接種。

11、細(xì)菌在液體培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象有三種，分別是：①混濁（大多數(shù)細(xì)菌）；②沉淀（鏈狀生長的細(xì)菌，如鏈球菌、炭疽芽孢桿菌等）；③菌膜（專性需氧菌，如銅綠假單胞菌等）。

12、血瓊脂上的溶血現(xiàn)象：

α溶血：又叫草綠色溶血，菌落周圍血培養(yǎng)基變?yōu)榫G色環(huán)狀。

β溶血：又稱完全溶血，菌落周圍形成一個(gè)完全清晰透明的環(huán)。

γ溶血：即不溶血，菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化；紅細(xì)胞沒有溶解或無缺損。

雙環(huán)：上層溶血環(huán)，內(nèi)層為θ溶血，外層為α溶血。如產(chǎn)氣莢膜梭菌。

13、傾注平板法用于水、牛乳、飲料及尿液等液體標(biāo)本的細(xì)菌計(jì)數(shù)。

14、常用的厭氧培養(yǎng)法有：①皰肉培養(yǎng)基法；②焦性沒食子酸法；③厭氧罐法；④氣袋法；⑤厭氧手套箱法，⑥氣體噴射法。

15、最常用的營養(yǎng)培養(yǎng)基：血平板和巧克力平板。

16、鑒別培養(yǎng)基：如糖發(fā)酵管、三糖鐵培養(yǎng)基、枸櫞酸鹽培養(yǎng)基、克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）、伊紅-美藍(lán)瓊脂和動(dòng)力-吲哚-尿素（MIU）等培養(yǎng)基。

17、選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分或抗生素以抑制某些細(xì)菌的生長，而有助于需要的細(xì)菌生長，此培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。如SS瓊脂，其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌，因而使沙門菌、志賀菌容易得到分離。

18、增菌培養(yǎng)基：如乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌的生長需含血液或血清的培養(yǎng)基；霍亂弧菌的增菌常用堿性蛋白胨水。

19、特殊培養(yǎng)基：包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基。巰基乙醇酸鈉是特殊培養(yǎng)基。厭氧培養(yǎng)基如皰肉培養(yǎng)基；細(xì)菌L型培養(yǎng)基是針對(duì)細(xì)胞壁缺陷的細(xì)菌L型，由于胞內(nèi)滲透壓較高，培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。

20、細(xì)菌血液培養(yǎng)使用的抗凝劑為聚苯乙烯磺酸鈉（SPS）。

四、細(xì)菌生化鑒定技術(shù)

（一）碳水化合物代謝試驗(yàn)

1、碳水化合物代謝試驗(yàn)包括：糖（醇、苷）類發(fā)酵試驗(yàn)、葡萄糖氧化/發(fā)酵試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)（MR）、V-P試驗(yàn)、β-半乳糖苷酶試驗(yàn)（ONPG）、七葉苷水解試驗(yàn)。

2、甲基紅試驗(yàn)的原理是細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基pH下降至4.5以下，加入甲基指示劑變紅為試驗(yàn)陽性。

3、V-P試驗(yàn)出現(xiàn)紅色為陽性，ONPG出現(xiàn)黃色為陽性，七葉苷水解試驗(yàn)出現(xiàn)黑色為陽性。V-P試驗(yàn)常與甲基紅試驗(yàn)一起使用，因?yàn)榍罢哧栃缘募?xì)菌，后者通常為陰性。

4、七葉苷水解試驗(yàn)主要用于D族鏈球菌與其他鏈球菌的鑒別，前者為陽性（黑色）。

（二）蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗(yàn)

1、蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗(yàn)包括：靛基質(zhì)（吲哚）試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)、氨基酸脫羧酶試驗(yàn)。

2、吲哚試驗(yàn)是由于細(xì)菌有色氨酸酶，可以分解色氨酸而產(chǎn)生吲哚，與對(duì)二甲基苯甲醛反應(yīng)生成紅色化合物，本試驗(yàn)呈現(xiàn)紅色為陽性。

3、硫化氫試驗(yàn)是細(xì)菌能分解含硫氨基酸，產(chǎn)生的H2S與Fe2+反應(yīng)呈黑色為陽性。主要用于腸桿菌科中屬及種的鑒別。如沙門菌屬、愛德華菌屬、亞利桑那菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬細(xì)菌，絕大多數(shù)硫化氫陽性，其他菌屬陰性。沙門菌屬中也有硫化氫陰性菌種。

4、尿素酶試驗(yàn)是細(xì)菌分解尿素生成氨，使培養(yǎng)基呈堿性，指示劑變紅為陽性。

5、苯丙氨酸脫氨酶的陽性結(jié)果為綠色，氨基酸脫羧酶的陽性結(jié)果為培養(yǎng)基從黃色變?yōu)樽仙?/p>

（三）碳源利用試驗(yàn)

1、碳源利用試驗(yàn)包括枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)和丙二酸鹽利用試驗(yàn)。

2、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)的陽性結(jié)果為深藍(lán)色，陰性為綠色。

3、丙二酸鹽利用試驗(yàn)的陽性結(jié)果為深藍(lán)色。

4、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)在腸桿菌科中埃希菌屬、志賀菌屬、愛德華菌屬和耶爾森菌屬均為陰性，沙門菌屬、克雷伯菌屬通常為陽性。

（四）酶類試驗(yàn)

1、觸酶試驗(yàn)：細(xì)菌能催化過氧化氫生成水和氧氣，出現(xiàn)氣泡為陽性。

2、氧化酶試驗(yàn)：某些細(xì)菌具有細(xì)胞色素氧化酶，能將二甲基對(duì)苯二胺或四甲基對(duì)苯二胺氧化成紅色的化合物，出現(xiàn)紅色為陽性。

3、凝固酶試驗(yàn)：主要用于金黃色葡萄球菌的鑒定。

4、DNA酶試驗(yàn)：細(xì)菌產(chǎn)生DNA酶分解DNA，是菌落周圍出現(xiàn)透明環(huán)。葡萄球菌、沙雷菌、變形桿菌均為陽性。

5、硝酸鹽還原試驗(yàn)：出現(xiàn)紅色為陽性。若加入試劑后無顏色反應(yīng)，可能是：①硝酸鹽沒有被還原，試驗(yàn)陰性；②硝酸鹽被還原為氨和氮等其他產(chǎn)物而導(dǎo)致假陰性結(jié)果，這時(shí)應(yīng)在試管內(nèi)加入少許鋅粉（還原劑），如出現(xiàn)紅色則表明試驗(yàn)確實(shí)為陰性。若仍不產(chǎn)生紅色，表示試驗(yàn)為假陰性。

（五）其他及藥敏鑒定試驗(yàn)

1、CAMP試驗(yàn)：B群鏈球菌能產(chǎn)生CAMP因子，可促進(jìn)葡萄球菌的β-溶血素溶解紅細(xì)胞的活性，因此在兩菌（B群鏈球菌和葡萄球菌）的交界處溶血力增加，出現(xiàn)箭頭狀或矢形（半月形）的溶血區(qū)。在鏈球菌中，只有B群鏈球菌CAMP試驗(yàn)陽性，故可作為特異性鑒定。

2、膽汁溶菌試驗(yàn)：膽汁或膽鹽可溶解肺炎鏈球菌，可能是由于膽汁降低細(xì)胞膜表面的張力，使細(xì)胞膜破損或使菌體裂解；或者是由于膽汁加速了肺炎鏈球菌本身自溶過程，促使細(xì)菌發(fā)生自溶。

3、O/129抑菌試驗(yàn)：O/129抑菌試驗(yàn)為藥敏試驗(yàn)，0／129（二氨基喋啶）對(duì)弧菌屬細(xì)菌有抑制作用，而對(duì)氣單胞菌屬細(xì)菌無抑制作用。

4、桿菌肽試驗(yàn)：A群鏈球菌對(duì)桿菌肽幾乎全部敏感，而其他群鏈球菌絕大多數(shù)對(duì)其耐藥。

5、奧普托欣（Optochin）試驗(yàn)：幾乎所有肺炎鏈球菌對(duì)奧普托欣試驗(yàn)敏感，而奧普托欣試驗(yàn)對(duì)其他鏈球菌則無抑制作用。

五、細(xì)菌毒力鑒定

▲內(nèi)毒素

常采用鱟試驗(yàn)——內(nèi)毒素激活鱟試劑中凝固酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟堂?，凝固蛋白原生成凝固蛋白?/p>

▲外毒素

常用體內(nèi)及體外毒力試驗(yàn)檢測，也用ELISA法測定。

第五章

細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感試驗(yàn)

一、臨床常用抗菌藥物

（一）β-內(nèi)酰胺類

1、常見藥物主要是青霉素類、頭孢菌素類和單環(huán)β-內(nèi)酰胺類（氨曲南和卡蘆莫南）。

2、作用機(jī)制：β-內(nèi)酰胺類抗生素的作用機(jī)制相似，均是與青霉素結(jié)合蛋白（PBP）結(jié)合，抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成，致使細(xì)菌死亡。

（二）氨基糖苷類

1、作用機(jī)制：①依靠離子的附作用，吸附在菌體表面，造成膜的損傷；②和細(xì)菌核糖體30S小亞基發(fā)生不可逆結(jié)合，抑制mRNA的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的合成，造成遺傳密碼的錯(cuò)讀，產(chǎn)生無意義的蛋白質(zhì)。

2、種類：①鏈霉菌屬：如鏈霉素、卡那霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龍霉素、新霉素；

②小單胞菌屬：如慶大霉素、福提霉素；

③半合成氨基苷類：阿米卡星、奈替米星、地貝卡星等，氨基苷類抗菌藥物對(duì)需氧G-桿菌有較強(qiáng)的抗菌活性，對(duì)G+球菌有一定的活性。

（三）喹諾酮類

1、作用機(jī)制：①通過外膜孔蛋白和磷脂滲透進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞；②作用于DNA旋轉(zhuǎn)酶，干擾細(xì)菌DNA復(fù)制、修復(fù)和重組。

2、種類：①第一代：為窄譜抗菌藥物，對(duì)G+球菌無作用；主要作用于大腸埃希菌，且迅速出現(xiàn)耐藥，較少應(yīng)用于臨床。

②第二代：對(duì)G-和G+細(xì)菌均有作用；比較這類藥的抗菌活性強(qiáng)度依次為環(huán)丙沙星、氧氟沙星、羅美沙星、氟羅沙星、培氟沙星、諾氟沙星；

③第三代：對(duì)G+菌作用高于第二代的4～8倍，對(duì)厭氧菌亦有作用；司帕沙星、妥舒沙星、左氧氟沙星、加替沙星、格帕沙星、莫西沙星等。

（四）大環(huán)內(nèi)酯類

1、作用機(jī)制：可逆結(jié)合細(xì)菌核糖體50S大亞基的23S單位，抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成和肽鏈延伸；

2、種類：國內(nèi)常用有紅霉素、吉他霉素、麥迪霉素、乙酰螺旋霉素。新一代大環(huán)內(nèi)酯類有克拉霉素、羅紅霉素、地紅霉素、氟紅霉素、阿奇霉素和乙酰麥迪霉素。

（五）其他抗菌藥物

▲磺胺類：競爭性第與二氫葉酸合成酶結(jié)合，阻止核酸形成。

▲四環(huán)素類：阻止酰胺基轉(zhuǎn)移酶RNA與mRNA核糖體的受體位點(diǎn)結(jié)合。分為短效（土霉素、四環(huán)素）、中效（地美環(huán)素、美他環(huán)素）和長效（多西環(huán)素、米諾環(huán)素）。

▲氯霉素類、林克霉素類：能與細(xì)菌核蛋白體50S亞基結(jié)合，使蛋白質(zhì)合成呈可逆性抑制。

▲糖肽類：屬于殺菌劑，能與一個(gè)或多個(gè)肽聚糖合成中間產(chǎn)物形成復(fù)合物，阻斷肽聚糖合成，阻止細(xì)胞壁合成。包括萬古霉素、去甲萬古霉素、替考拉寧、多粘菌素、桿菌肽等。

◆大環(huán)內(nèi)酯類的抗生素是抑菌劑。

二、抗菌藥物敏感試驗(yàn)方法

▲細(xì)菌多抗菌藥物的敏感分為三種現(xiàn)象：敏感（S）、耐藥（R）、中介（I）。

（一）擴(kuò)散法（K-B法）

1、目前常用的方法，是一種半定量的方法。采用的接種方法是平板涂布法。

2、抑菌圈的大小可以反映待檢菌對(duì)測定藥物的敏感程度，與該藥對(duì)待檢菌的最低抑菌濃度（MIC）呈負(fù)相關(guān)，即抑菌圈愈大，MIC愈小。

3、含藥紙片貼于含菌瓊脂表面時(shí)應(yīng)注意：①各紙片中心距離不小于24mm，紙片距平板內(nèi)緣應(yīng)大于15mm；②一旦碰觸培養(yǎng)基就不可再動(dòng)；③平板最好單獨(dú)平放，不超過兩個(gè)疊放。

4、采用標(biāo)準(zhǔn)菌株是進(jìn)行質(zhì)控的主要措施。

◆金黃色葡萄球菌ATCC25923，大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853，糞腸球菌ATCC29212或ATCC33186。

5、紙片擴(kuò)散法的培養(yǎng)基要求其pH值為7.2～7.4，過高或過低的pH值會(huì)影響藥物效能。堿性可擴(kuò)大氨基糖苷類藥物的抑菌圈，酸性可擴(kuò)大四環(huán)素類藥物的抑菌圈。

★其他高頻考點(diǎn)

1、MBC為最低殺菌濃度。

2、體外聯(lián)合藥物敏感試驗(yàn)的FIC（部分抑菌濃度指數(shù)）：FIC指數(shù)＜0.5

協(xié)同作用；FIC指數(shù)0.5～1相加作用；FIC指數(shù)1～2

無關(guān)作用；FIC指數(shù)＞2

拮抗作用。

3、抗結(jié)核分枝桿菌的首選一線藥物是異煙肼、利福平。

4、產(chǎn)ESBL菌株臨床上用β-內(nèi)酰胺類抗生素（青霉素類、頭孢菌素類及氨曲南）治療無效。

5、耐甲氧西林金葡菌(MRSA)用β-內(nèi)酰胺類抗生素治療無效。

6、產(chǎn)AmpC酶菌株對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素（青霉素類、頭孢菌素類及氨曲南）及含酶抑制劑復(fù)合制劑耐藥。治療有效的藥物主要有碳青霉烯類(亞胺培南)和第四代頭(頭孢吡肟、頭孢匹羅)以及某些喹酮類和氨基糖苷類抗生素。

7、藥敏試驗(yàn)時(shí)，采用的菌液濃度為0.5麥?zhǔn)媳葷岫?，相?dāng)于1.5×10^8/ml含菌量。

第六章

各菌屬特征匯總

●葡萄球菌屬

1、葡萄球均屬是一類觸酶試驗(yàn)陽性的革蘭陽性（G＋）球菌，無鞭毛和芽胞，某些菌株能形成莢膜。包括金黃色、表皮、腐生、溶血葡萄球菌。

2、葡萄球菌觸和鏈球菌鑒別用觸酶試驗(yàn)，葡萄球菌觸酶陽性，鏈球菌是陰性。

3、葡萄球菌的致病性用凝固酶試驗(yàn)，致病性葡萄糖球菌為陽性，還可以分解甘露醇產(chǎn)酸，耐熱DNA酶陽性。主要見于金黃色葡萄球菌。

4、葡萄球菌的細(xì)胞壁上有葡萄球菌A蛋白（SPA），可以與人類IgG的Fc段結(jié)合，可進(jìn)行協(xié)同凝集試驗(yàn)。

5、葡萄球菌抵抗力強(qiáng)，耐熱、耐干燥、耐高鹽，是抵抗力最強(qiáng)的無芽胞細(xì)菌。

6、耐甲氧西林的金葡菌（MRSA），耐甲氧西林的表葡菌（MRSE），耐萬古霉素的金黃色葡萄球菌（VRSA），耐萬古霉素的表皮葡萄球菌（VRSE），MRSA的首選抗生素為萬古霉素。

7、表皮葡萄球菌為醫(yī)院感染的重要病原菌，它是導(dǎo)致血培養(yǎng)污染的常見細(xì)菌之一。

8、腐生葡萄球菌是導(dǎo)致尿路感染的常見病原菌之一。

★看到凝固酶、耐熱DNA酶陽性，就選金黃色葡萄糖球菌。

●鏈球菌屬

1、鏈球菌屬是一大群觸酶試驗(yàn)陰性、在液體培養(yǎng)基上呈鏈狀排列的革蘭陽性（G＋）球菌，但在陳舊培養(yǎng)基或被吞噬細(xì)胞吞噬后常呈革蘭陰性（G－）。無鞭毛、無芽胞。

2、肺炎鏈球菌矛頭狀排列，由于其能產(chǎn)生自溶酶，菌落呈臍窩狀，鑒別試驗(yàn)：奧普托欣試驗(yàn)（Optochin），陽性、膽汁溶菌試驗(yàn)陽性、莢膜腫脹試驗(yàn)陽性、草綠色溶血圈。本菌是社區(qū)獲得性肺炎的最常見病原菌。

3、A群鏈球菌用桿菌肽試驗(yàn)鑒別，為陽性?？僧a(chǎn)生溶血素和紅疹毒素，前者在血平板上形成β-溶血環(huán)，后者引起猩紅熱。對(duì)人類有致病性的90%屬A群。

4、B群鏈球菌可以水解馬尿酸和CAMP試驗(yàn)陽性。

5、D群鏈球菌七葉苷試驗(yàn)陽性。

6、草綠色鏈球菌是引起亞急性心內(nèi)膜炎最常見的病原菌。

7、鏈球菌感染引起的變態(tài)反應(yīng)疾病為風(fēng)濕熱、腎小球腎炎，為Ⅲ。

8、化膿性鏈球菌產(chǎn)生的酶有脫氧核糖核酸酶（鏈道酶）、透明質(zhì)酸酶（擴(kuò)散因子）、鏈激酶（溶解纖維蛋白酶）。因?yàn)橛羞@幾種酶的的產(chǎn)生，化膿性鏈球菌感染的病灶范圍廣、膿液稀薄、邊界不清。

9、根據(jù)溶血現(xiàn)象的不同，將鏈球菌分為甲型溶血性鏈球菌（α溶血）、乙型溶血性鏈球菌（β溶血）、丙型溶血性鏈球菌（γ溶血）。

●腸球菌屬

1、腸球菌屬是腸道的正常棲居菌。G+，成雙或短鏈狀排列的卵圓形球菌，無芽胞，無莢膜，部分腸球菌有稀疏鞭毛。

2、腸球菌能在高鹽（6.5%NaCl）、高堿（pH9.6）、40%膽汁培養(yǎng)基上和10℃～45℃環(huán)境下生長；

●奈瑟菌屬

1、G-，呈腎形，坦面相對(duì)，雙球菌，存在于中性粒細(xì)胞內(nèi)（或胞外），無鞭毛，無芽胞，有菌毛。專性需氧，氧化酶陽性。

2、在血瓊脂平板、巧克力瓊脂或EPV瓊脂，置5%～10%C02環(huán)境中，35℃培養(yǎng)18～24h后可見圓形、灰褐色、濕潤、光滑、邊緣整齊、直徑1～2mm的小菌落。

3、淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌用麥芽糖發(fā)酵試驗(yàn)區(qū)別，前者不發(fā)酵乳糖，后者發(fā)酵乳糖。

4、奈瑟菌屬初次分離需要5%-10%二氧化碳。營養(yǎng)要求高，要用巧克力平板。

5、腦膜炎奈瑟菌定植于鼻咽部，引起流腦，少數(shù)還可引起敗血癥。

6、淋病奈瑟菌人類是唯一宿主。懷疑奈瑟菌感染，標(biāo)本需保溫保濕送檢。

◆卡他布蘭漢菌：氧化酶和觸酶陽性，產(chǎn)DNA酶，大部分菌株還原硝酸鹽和亞硝酸鹽，營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上18～20℃即可生長，借此可與奈瑟菌屬相鑒別。

●腸桿菌科

1、腸桿菌科共同特征：革蘭氏陰性桿菌、氧化酶陰性、觸酶和硝酸鹽還原試驗(yàn)為陽性。

2、腸桿菌中志賀、克雷伯、鼠疫耶爾菌屬、EIEC沒有鞭毛，也就是說它們的動(dòng)力陰性。

3、O抗原和H抗原是腸桿菌科分群及分型的依據(jù)，4、乳糖發(fā)酵是區(qū)別致病性與非致病性，致病性不發(fā)酵乳糖，非致病性發(fā)酵乳糖。

●埃希菌屬

1、G-，短桿菌，多數(shù)有周鞭毛，有菌毛，有莢膜或微莢膜。兼性厭氧菌。

2、大腸埃希菌在EMB平板上是帶有金屬光澤呈藍(lán)紫色的菌落，麥康凱和SS瓊脂上呈粉紅色菌落。雙糖鐵發(fā)酵管（KIA）產(chǎn)酸產(chǎn)氣，IMViC試驗(yàn)結(jié)果＋＋－－。

5、大腸埃希菌腸道外感染以尿系統(tǒng)感染為主，常見腎盂腎炎。

腸道內(nèi)感染：（1）產(chǎn)毒素性（ETEC）：主要引起旅游者腹瀉、嬰兒腹瀉。

（2）腸致病性（EPEC）：嬰兒腹瀉。

（3）腸侵襲性（EIEC）：類似志賀菌腸炎的癥狀。里急后重。

（4）腸出血性（EHEC）：常見血清型O157：H7，引起出血性腸炎，主要見于嬰幼兒，還可引起溶血性尿毒癥。

（5）腸粘附性（EaggEC）：嬰兒急性水樣腹瀉。

●志賀菌屬

1、G-，短小桿菌，無莢膜，無芽胞，無鞭毛，有菌毛。需氧或兼性厭氧。

2、志賀菌屬是細(xì)菌性痢疾最常見的病原菌，中國最常見的是福氏（B群）和宋氏（D群）。

3、志賀菌屬用SS培養(yǎng)基或中國藍(lán)（麥康凱）平板，菌落為紅色或粉紅色。

4、由于志賀菌沒有鞭毛，所以它沒有H抗原，有O抗原、K抗原。

5、志賀菌引起的腹瀉常為里急后重。

●沙門菌屬

1、G-，直桿菌，無芽胞，無莢膜，周鞭毛（除雞沙門菌），多數(shù)有菌毛。

2、SS瓊脂和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基：約2～4mm的透明或半透明菌落，對(duì)膽鹽耐受。產(chǎn)H2S者在SS瓊脂上形成黑色中心菌落。

3、傷寒沙門菌的抗原主要包括菌體（O）抗原、鞭毛（H）抗原和表面（Vi）抗原。

4、傷寒沙門菌檢測用肥達(dá)試驗(yàn)：用已知的傷寒沙門菌O、H抗原，副傷寒甲、乙H抗原稀釋后與被檢血清作定量凝集試驗(yàn)，以檢測患者血清中抗體的含量，來判斷機(jī)體是否受沙門菌感染而導(dǎo)致腸熱癥并判別沙門菌的種類。

5、菌體（O）抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體以IgM為主，H抗原則以IgG為主。

6、傷寒沙門菌感染1周取血液標(biāo)本，2～3周取糞便，3周以后取尿液。

7、所致疾?。耗c熱癥，即傷寒與副傷寒病、食物中毒、慢性腸炎、敗血癥、沙門菌的局部感染如頸部、腰部等。

●變形桿菌屬

1、G-，桿菌，多形，有周鞭毛，無芽胞、無莢膜。

2、營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上呈遷徙生長。苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)陽性使其重要的生化鑒別反應(yīng)。

3、變形桿菌X19、X2、Xk等類型的O抗原與立克次體有共同抗原成分，可發(fā)生外斐反應(yīng)。

●耶爾森菌屬4、普通變性桿菌引起食物中毒，奇異變性桿菌引起嬰幼兒腸炎

1、鼠疫耶爾森菌是鼠疫的病原菌，我國將其列為甲類傳染病。

2、鼠疫耶爾森菌為G-，桿菌，球桿狀，兩極濃染，有莢膜，無鞭毛，無芽胞。

3、鼠疫耶爾森菌在血平板上菌落柔軟、黏稠，在液體培養(yǎng)基中，開始為渾濁生長，24小時(shí)后為沉淀生長，48小時(shí)后形成菌膜，搖動(dòng)后呈鐘乳石狀下沉。半固體穿刺呈縱樹狀生長。

4、小腸結(jié)腸耶爾森菌22～25℃培養(yǎng)有周鞭毛，呈翻滾螺旋運(yùn)動(dòng)；35℃時(shí)培養(yǎng)該菌無動(dòng)力，最適生長溫度為20～28℃。

5、小腸結(jié)腸耶爾森菌是人畜共患病原菌。

●弧菌屬

1、弧菌科氧化酶都是陽性，動(dòng)力陽性的G-細(xì)菌。包括弧菌屬、氣單胞菌屬、鄰單胞菌屬等。

2、霍亂弧菌根據(jù)生物學(xué)特性上的差異，分為古典生物型和Eltor生物型兩個(gè)生物型，兩個(gè)生物型的抗原同屬O1群霍亂弧菌。

3、O1群霍亂弧菌根據(jù)菌體抗原含有A、B、C

3種抗原因子的不同，又可將其分為小川型、稻葉型和彥島型，以小川型和稻葉型為常見流行型。

4、霍亂運(yùn)動(dòng)呈穿梭狀或流星狀，排列呈魚群狀，在亞碲酸鉀培養(yǎng)基上是褐色菌落，培養(yǎng)基是堿性蛋白胨水。主要致病物質(zhì)是霍亂腸毒素，患者大便呈米泔樣便。

5、霍亂弧菌的鑒別培養(yǎng)用硫代硫酸鹽-檸檬酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂平板（TCBS）。

6、霍亂弧菌在堿性蛋白胨水上生長迅速，最適pH為8.4～9.2。

7、霍亂弧菌的O1群、O139群引起霍亂，O2～O138群只引起人類胃腸炎，稱之為非O1群霍亂弧菌。

8、霍亂弧菌的生物分型

9、霍亂弧菌采集的標(biāo)本若不能及時(shí)在堿性蛋白胨水中增菌，應(yīng)置于文-臘二氏保存液活卡-布運(yùn)送培養(yǎng)基中由專人運(yùn)送。

10、副溶血性弧菌是一種嗜鹽菌，常存在與海水及海類產(chǎn)品中，是沿海地區(qū)食物中毒最常見的病原菌。

11、副溶血性弧菌與霍亂區(qū)別用蔗糖發(fā)酵試驗(yàn)，前者不發(fā)酵蔗糖，在TCBS上呈藍(lán)綠色菌落，后者呈黃色菌落。

12、副溶血性弧菌能使人或兔的紅細(xì)胞發(fā)生溶血，對(duì)馬紅細(xì)胞不溶血，稱為神奈川現(xiàn)象。

●其他菌屬主要特征及高頻考點(diǎn)

1、肺炎克雷伯菌動(dòng)力和鳥氨酸脫羧酶陰性、黏液狀菌落用接種環(huán)可拉絲是主要特征。

2、小結(jié)：志賀菌IMViC（-+--），大腸埃希菌IMViC（++--），產(chǎn)氣腸桿菌IMViC（--++）。

3、氣單胞菌屬運(yùn)動(dòng)活潑，在血平板上形成大而扁平的β溶血性菌落。嗜水氣單胞菌、豚鼠氣單胞菌可發(fā)酵阿拉伯糖。

4、鄰單胞菌屬引起水樣腹瀉，與志賀菌類似，也是引起食物中毒。

5、假單胞菌屬、產(chǎn)檢桿菌屬、不動(dòng)桿菌屬等不能發(fā)酵葡萄糖，均為非發(fā)酵革蘭陰性桿菌。

6、銅綠假單胞菌為專性需氧菌，在普通培養(yǎng)基上菌落有生姜味，可產(chǎn)生水溶性的綠色素，在血平板上產(chǎn)生透明溶血環(huán)。該菌42℃可生長，可通過該試驗(yàn)區(qū)分其他假單胞菌。

7、銅綠假單胞菌可引起泌尿道、皮膚、呼吸道、燒傷創(chuàng)面感染等，還可以導(dǎo)致菌血癥、敗血癥、心內(nèi)膜炎、囊性纖維變性及嬰幼兒嚴(yán)重腹瀉等。

8、不動(dòng)桿菌屬有三陰特征，即氧化酶、動(dòng)力、硝酸鹽還原試驗(yàn)均為陰性。

9、流感嗜血桿菌能產(chǎn)生自溶酶，生長需要Ⅴ、Ⅹ因子。培養(yǎng)有特殊要求，營養(yǎng)要求高，初次分離需要5%～10%CO2，用巧克力平板。有金黃色葡萄糖球菌（可產(chǎn)生Ⅴ、Ⅹ因子）時(shí)候，會(huì)出現(xiàn)衛(wèi)星生長現(xiàn)象。

嗜血桿菌的菌落呈露滴狀。

副流感嗜血桿菌的形態(tài)、菌落與?流感嗜血桿菌相似，也能產(chǎn)生衛(wèi)星現(xiàn)象，在生長過程中只需要V因子而不需要X因子。

10、軍團(tuán)菌屬培養(yǎng)要求特殊，培養(yǎng)基中必須含有半胱氨酸和鐵，培養(yǎng)基用活性炭-酵母浸液瓊脂培養(yǎng)基（BCYE）。傳播途徑為空氣。

12、布魯菌屬是人畜共患病原菌，包括羊、牛、豬、狗、綿羊布魯菌等。引起布病。如果在做題看到有什么草原養(yǎng)羊、羊接觸史的話，就選布魯菌感染。

13、彎曲菌屬，不分解糖類，氧化酶陽性，分離培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中需含有大量抗生素，初次分離，須在5%O2、10%CO2、85%N2的氣體環(huán)境中生長。

14、幽門螺桿菌呈海鷗狀彎曲，脲酶強(qiáng)陽性（快速分解尿素）是特征，標(biāo)本采集部位是胃，十二指腸。

15、白喉棒狀桿菌特異性標(biāo)志是異染顆粒，在亞碲酸鉀培養(yǎng)基上是黑色菌落，培養(yǎng)基選用呂氏血清斜面和亞碲酸鉀，致

19、炭疽芽孢桿菌在每毫升含有0.05～0.5U青霉素的培養(yǎng)基中，可發(fā)生形態(tài)變異，形成大而均勻的圓球狀并相連如串珠狀，稱為串

抗酸染色分級(jí)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)：①－：連續(xù)觀察300個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌；②±：1～2條/300視野；③1＋：1～9抗酸桿菌條/100個(gè)視野；④2＋：1～9條抗酸桿菌/10視野；⑤3＋：1～9條抗酸桿菌/每視野；⑥4＋：≥10條抗酸桿菌/每視野。

27、麻風(fēng)分枝桿菌，典型的胞內(nèi)寄生，所在細(xì)胞呈泡沫狀，稱為麻風(fēng)細(xì)胞。犰狳對(duì)本菌高度敏感，為本菌的良好動(dòng)物模型。抗酸染色為陽性桿菌。

28、厭氧菌屬，特征是在無氧條件下才能生長，懷疑厭氧菌感染用皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)。

29、破傷風(fēng)梭菌，嚴(yán)格厭氧，有周鞭毛、無莢膜。芽胞呈正圓形，寬于菌體，位于菌體頂端，細(xì)菌呈鼓槌狀。本菌的致病物質(zhì)主要是外毒素，包括破傷風(fēng)痙攣毒素和破傷風(fēng)溶血毒素，引起強(qiáng)直性痙攣。

30、產(chǎn)氣莢膜梭菌可以引起氣性壞疽，在牛乳培養(yǎng)基中是洶涌發(fā)酵生長是其主要特征。

31、肉毒梭菌引起食物中毒，致病物質(zhì)是肉毒毒素，是已知最劇烈的神經(jīng)外毒素。懷疑食物中毒，從患者血清中檢出毒素是最直接、有效的方法。

32、艱難梭菌可以引起腹瀉和假膜性腸炎。

33、衣原體，細(xì)胞內(nèi)專性寄生。有獨(dú)特的發(fā)育周期：①原體有高度感染性，無繁殖能力；②始體（網(wǎng)狀體），有繁殖能力，沒有感染性。每個(gè)發(fā)育周期是40～72h。

34、沙眼衣原體培養(yǎng)用McCoy細(xì)胞，鸚鵡熱衣原體和肺炎衣原體用Hela-299細(xì)胞培養(yǎng)。

35、沙眼衣原體引起四種疾?。孩偕逞郏虎诎w結(jié)膜炎，致盲的主要因素是包涵體結(jié)膜炎；③泌尿生殖道感染，非淋菌性生殖道感染的主要病原，男性尿道炎的常見病因。④性淋巴肉芽腫：又稱第四性病。

36、鸚鵡熱衣原體，氣溶膠傳播，引起非典型肺炎（人畜共患病原體）。

37、肺炎衣原體，呼吸道傳播，主要引起肺炎。

38、支原體，無細(xì)胞壁，能在人工培養(yǎng)基上生長，能通過細(xì)菌濾器，是最小的原核細(xì)胞型微生物，典型特征是菌落為“荷包蛋”樣。治療藥物首選紅霉素。

39、肺炎支原體通過呼吸道傳播，引起原發(fā)性非典型肺炎。

40、解脲支原體通過性傳播，引起非淋菌性尿道炎。

41、立克次體，細(xì)胞內(nèi)寄生，頭痛，發(fā)熱，皮疹以及中樞神經(jīng)是本病特征。立克次體一個(gè)重要試驗(yàn)是外斐試驗(yàn)，是非特異性凝集試驗(yàn)。

42、立克次體不能人工培養(yǎng)，檢測是利用變性桿菌的公共抗原檢測（共同抗原），OX19對(duì)應(yīng)流行性斑疹傷寒，鼠型斑疹傷寒。OX2對(duì)應(yīng)斑點(diǎn)熱，OXK對(duì)應(yīng)恙蟲病。

43、鉤端螺旋體通過疫水傳播，是典型的人畜共患病，鼠和豬是最常見的儲(chǔ)存宿主和傳染源，是一種自然疫源性疾病。治療藥物首選青霉素。

44、梅毒螺旋體為密螺旋體，用鍍銀染色。

45、梅毒三期分型，一期硬下疳，二期梅毒疹，三期梅毒瘤

46、早期梅毒傳染性強(qiáng)，破壞力小，晚期破壞力大，傳染性小

47、梅毒通過性傳播，輸血傳播，垂直傳播

48、梅毒檢查非特異性試驗(yàn)用牛心類脂質(zhì)。WHO推薦用VDRL（性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)），RPR（快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)）做篩查，確診試驗(yàn)是TPPA。

49、放線菌患者病灶有硫磺顆粒，菌體呈菊花狀，菌落由R型轉(zhuǎn)變?yōu)镾型。

50、諾卡菌屬主要有星型諾卡和巴西諾卡致病，星型諾卡菌落表面無白色菌絲，巴西諾卡表面有白色菌絲，諾卡菌屬抗酸染色是弱陽性，諾卡菌為革蘭氏陽性桿菌，有細(xì)長的菌絲，菌絲末端不膨大。色素小顆粒壓碎染色鏡檢，可見顆粒呈菊花狀。不同種類可產(chǎn)生不同色素，如橙紅、粉紅、黃、黃綠、紫以及其他顏色。巴西諾卡菌七葉苷、黃嘌呤、肌醇、甘露醇均為陽性。星型不分解黃嘌呤。

●真菌常見考點(diǎn)

1、真菌檢測的標(biāo)本如皮屑、指甲、頭發(fā)等，需要用10%KOH處理。

2、真菌培養(yǎng)一般選用沙氏培養(yǎng)基。

3、白假絲酵母菌鑒別要點(diǎn)：①芽管形成試驗(yàn)（＋）；②厚膜孢子形成試驗(yàn)（＋）；③脲酶試驗(yàn)（－）；④不能形成假菌絲；⑤革蘭陽性。

4、新型隱球菌鑒別要點(diǎn)：①墨汁染色，在黑色背景下可見到透亮菌體和寬厚莢膜；②沙保弱培養(yǎng)基上可生成酵母型菌落；③脲酶試驗(yàn)（＋）。

5、艾滋病人最易合并感染的真菌是卡氏肺孢子菌。

6、黃曲霉菌產(chǎn)生的黃曲霉毒素可以致癌。

●病毒常見考點(diǎn)

1、病毒是非細(xì)胞型微生物，基本結(jié)構(gòu)是核心、衣殼。

2、流感病毒是有包膜的RNA病毒，包膜上的血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）是重要的表面抗原，其中HA極易發(fā)生變異。此病毒的命名方式HXNX（X為型號(hào)，比如H1N1、H2N2等）。

3、麻疹病毒是單股的有包膜的RNA病毒，可以引起病毒血癥，發(fā)病2天后口腔黏膜出現(xiàn)白色外繞紅暈的黏膜斑（早期診斷有重要意義），之后患者皮膚相繼出現(xiàn)紅色版丘疹。常見并發(fā)癥為肺炎。

4、腮腺炎病毒是有包膜的RNA病毒，感染后可引起一側(cè)或雙側(cè)腮腺腫大，青春期感染者，男性易并發(fā)睪丸炎。

5、甲型肝炎病毒（HAV）是無包膜的RNA病毒。傳播途徑是糞-口傳播，引起甲肝，還可以引起病毒血癥。產(chǎn)生的甲肝抗體為IgM，ELISA檢測用捕獲法。

6、乙型肝炎病毒（HBV）是DNA病毒，引起乙肝，嚴(yán)重可發(fā)展為肝癌。

常見考點(diǎn)：①HBV的大球型顆粒（Dane）有感染性；②乙肝兩對(duì)半：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc；③大三陽指HBsAg、HBeAg、抗-HBc均為陽性，此種模式為急性乙肝，傳染性極強(qiáng)；④小三陽指HBsAg、抗-HBe、抗-HBc，此種模式感染趨向恢復(fù)期；⑤乙肝的保護(hù)性抗體指抗-HBs；⑥HBeAg陽性表示乙肝的傳染性極強(qiáng)；⑦抗-HBs、抗-HBs、抗-HB。

16、細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)包括：鞭毛、菌毛、莢膜、芽胞