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      醫(yī)院檢驗(yàn)病理實(shí)驗(yàn)室建設(shè)解決方案

      時(shí)間:2019-05-15 09:56:37下載本文作者:會員上傳
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      第一篇:醫(yī)院檢驗(yàn)病理實(shí)驗(yàn)室建設(shè)解決方案

      醫(yī)院檢驗(yàn)病理實(shí)驗(yàn)室建設(shè)解決方案

      檢驗(yàn)科是醫(yī)院中接收病人血液、體液等樣本,進(jìn)行檢驗(yàn)分析,并向臨床醫(yī)師發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告的一個(gè)臨床診斷科室,一個(gè)設(shè)計(jì)科學(xué)合理的實(shí)驗(yàn)室,能為檢驗(yàn)人員提供一個(gè)安全、高效的工作環(huán)境。

      一、平面布局

      1、檢驗(yàn)科宜設(shè)在門診樓,并應(yīng)自成一區(qū),三甲醫(yī)院檢驗(yàn)科面積宜不少于1200㎡,二甲醫(yī)院檢驗(yàn)科面積宜不少于800㎡,如果檢驗(yàn)科還承擔(dān)有較多的科研、教學(xué)任務(wù),面積還應(yīng)適當(dāng)增加。

      2、檢驗(yàn)科平面布局應(yīng)能清晰的分出清潔區(qū)、半污區(qū)和污染區(qū),各域之間應(yīng)有隔斷隔開。

      清潔區(qū)主要由更衣室、辦公室等組成;

      半污染區(qū)主要由試劑庫、制水間等輔助功能間組成;

      污染區(qū)主要由采血室、檢測實(shí)驗(yàn)室組成。

      3、檢驗(yàn)科應(yīng)人物流分開,人員和物品應(yīng)有獨(dú)立的出入口,特別是污物應(yīng)有專用出口,且經(jīng)醫(yī)院的污梯送至醫(yī)院集中的醫(yī)療廢物存放點(diǎn),不得走醫(yī)院的客梯。

      4、為保證檢測工作的安全,生物安全實(shí)驗(yàn)室應(yīng)符合BSL-2級實(shí)驗(yàn)室的要求,在生物安全實(shí)驗(yàn)室的出口處應(yīng)設(shè)有非手動洗手裝置和緊急洗眼裝置,部分高污染風(fēng)險(xiǎn)的工作應(yīng)在二級生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。

      基本配置:

      二、潔凈裝飾要求

      1、墻板、頂棚材料要求易于清洗消毒、耐擦洗、不起塵、不開裂、光滑防水,常用材料為雙面夾心彩鋼板,防火等級不低于難燃B1級。

      2、地面材料要求無縫的防滑耐腐蝕地面,常用的裝飾材料為PVC或橡膠地面,鋪貼的接縫處需用同色焊條焊接并刨平。

      3、實(shí)驗(yàn)室對門的要求:應(yīng)能自動關(guān)閉,門上宜設(shè)觀察窗,要帶門鎖和閉門器,門頭上可加裝工作狀態(tài)指示燈,標(biāo)明實(shí)驗(yàn)室是否有人工作。

      4、實(shí)驗(yàn)室對窗的要求:墻體上不宜設(shè)可開啟的外窗,可設(shè)密閉觀察窗。

      5、實(shí)驗(yàn)室的墻體與墻體交接處,墻體與地面交接處,墻體與頂棚的交接處均應(yīng)用圓弧處理,彩鋼板拼接處均應(yīng)打密封膠處理,以保證實(shí)驗(yàn)室的氣密性。

      6、實(shí)驗(yàn)室吊頂高度以2.6m高為宜,主實(shí)驗(yàn)室吊頂不能開設(shè)人孔或設(shè)備檢修孔。

      7、近幾年來潔凈實(shí)驗(yàn)室裝修出現(xiàn)的新材料:

      a.雙層鋼化玻璃窗內(nèi)加可調(diào)百葉:雙層8mm厚鋼化玻璃,內(nèi)置有可調(diào)百葉窗,可增加大廳的采光和視覺效果,內(nèi)置百葉窗無污染不需要清洗。

      b.快速拼裝金屬墻板:主要用作輕質(zhì)隔墻,兩側(cè)為烤漆金屬板,內(nèi)填充為無機(jī)鎂質(zhì),與彩鋼板相比具有防火等級高、色彩豐富、墻面質(zhì)感好等優(yōu)點(diǎn)。

      c.抗菌墻板:主要用于內(nèi)墻面裝飾,在石膏板、金屬板的表面涂覆高性能氟碳涂料和陶瓷無機(jī)涂料,表面致密不起塵,耐擦洗、耐酸堿腐蝕,且有一定的抑菌作用,可用于潔凈室墻面裝修。

      三、通風(fēng)空調(diào)工程

      1、凈化實(shí)驗(yàn)室應(yīng)避免多個(gè)實(shí)驗(yàn)室共用一個(gè)空調(diào)機(jī)組的情況,單獨(dú)的空調(diào)機(jī)組可有效的避免交叉污染,節(jié)約運(yùn)行成本。

      2、實(shí)驗(yàn)室空調(diào)設(shè)計(jì)參數(shù)應(yīng)參照《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》相關(guān)要求,在設(shè)計(jì)時(shí)還應(yīng)考慮到生物安全柜、離心機(jī)、培養(yǎng)箱等設(shè)備的熱、濕負(fù)荷。

      3、空氣凈化系統(tǒng)應(yīng)設(shè)置粗、中、高三級空氣過濾,粗效過濾器應(yīng)設(shè)在新風(fēng)口處,中效過濾器應(yīng)在空調(diào)機(jī)組的正壓段,高效過濾器應(yīng)設(shè)系統(tǒng)的送風(fēng)末端。

      4、新風(fēng)口距地面高度不低于2.5m,新風(fēng)口應(yīng)有防雨及防鼠蟲措施,應(yīng)設(shè)有易拆除清洗的過濾網(wǎng)。

      5、實(shí)驗(yàn)室的排風(fēng)機(jī)應(yīng)與送風(fēng)機(jī)連鎖,排風(fēng)機(jī)應(yīng)先于送風(fēng)機(jī)開啟,后于送風(fēng)機(jī)關(guān)閉,室內(nèi)排風(fēng)管道與生物安全柜等設(shè)備的排風(fēng)管道應(yīng)分開設(shè)置。

      6、凈化室內(nèi)送排風(fēng)應(yīng)采用上送下排方式。室內(nèi)送風(fēng)口和排風(fēng)口布置應(yīng)使室內(nèi)氣流停滯的空間降低到最小程度。

      7、實(shí)驗(yàn)室的各區(qū)之間應(yīng)保持不小于5Pa 的壓差,保證氣流是從清潔區(qū)流向污染區(qū),應(yīng)在易于觀察的位置設(shè)置壓差表。

      8、過濾器和空調(diào)機(jī)組不能使用木制材料,應(yīng)耐消毒劑腐蝕、不吸水的材料,空調(diào)機(jī)組的漏風(fēng)率應(yīng)小于2%。

      9、舒適性空調(diào)主要是采用風(fēng)機(jī)盤管加新風(fēng)系統(tǒng),冬夏季使用醫(yī)院集中的冷熱源,如果春秋季節(jié)醫(yī)院沒有冷熱源,可自備風(fēng)冷式模塊機(jī)組提供冷熱源。

      四、電氣工程

      檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室宜按一級負(fù)荷供電,并應(yīng)設(shè)置不間斷電源,保證主要設(shè)備不小于30分鐘的電力供應(yīng)。

      1、照明系統(tǒng)

      a.實(shí)驗(yàn)室照度≥300 lx 緩沖間、準(zhǔn)備間≥200 lx 辦公區(qū)照度≥200 lx 采血臺臺面照度≥500 lx。

      b.凈化區(qū)應(yīng)采用密閉燈具,普通實(shí)驗(yàn)區(qū)可根據(jù)吊頂材料選用普通燈具。

      c.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配紫外線滅菌燈,可按10-15㎡配備一支紫外線燈(30W)。

      d.疏散指示燈、應(yīng)急燈、出口指示燈的數(shù)量和位置應(yīng)按消防相關(guān)規(guī)范設(shè)計(jì)。

      2、動力配電系統(tǒng)

      a.在進(jìn)行電氣設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)設(shè)置足夠多的插座,并應(yīng)提前了解實(shí)驗(yàn)室主要設(shè)備的用電功率,生物安全實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置專用配電箱。

      b.在設(shè)計(jì)不間斷電源前應(yīng)與實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人溝通,確定需要不間斷電源供電的設(shè)備及最短供電時(shí)間,不間斷電源放置的位置應(yīng)通風(fēng)條件良好。

      3、弱電系統(tǒng)

      a.電話網(wǎng)絡(luò)終端:在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)設(shè)置足夠多的電話網(wǎng)絡(luò)終端,滿足實(shí)驗(yàn)室信息化管理的要求。

      b.門禁系統(tǒng):可限制非授權(quán)人員的進(jìn)入,保證實(shí)驗(yàn)室的安全。c.監(jiān)控系統(tǒng):可監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室人員的出入情況、日常工作情況、視頻教學(xué)等。

      d.呼叫系統(tǒng):實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)設(shè)置緊急呼叫分機(jī),呼叫主機(jī)應(yīng)設(shè)在值班室內(nèi)。

      五、給排水及供氣工程

      1、給水系統(tǒng)

      實(shí)驗(yàn)室的出口處應(yīng)設(shè)有洗手裝置,洗手裝置應(yīng)使用非手動水龍頭,生物安全實(shí)驗(yàn)室建議配自動手消毒裝置,給水材料符合國家相關(guān)要求。

      2、排水系統(tǒng)

      潔凈實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不應(yīng)設(shè)置地漏,實(shí)驗(yàn)室排水應(yīng)與生活區(qū)排水分開,應(yīng)確保實(shí)驗(yàn)室排水進(jìn)入醫(yī)院污水處理站。

      3、純水系統(tǒng)

      實(shí)驗(yàn)室主要用純水的設(shè)備是生化儀,實(shí)驗(yàn)室純水系統(tǒng)在設(shè)計(jì)前應(yīng)與實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人溝通純水的用水點(diǎn),各水點(diǎn)的用水量。

      六、實(shí)驗(yàn)室配套家具

      1、實(shí)驗(yàn)室家具依據(jù)其使用的材質(zhì)可分為全鋼家具、鋼木家具、全木家具三大類,全鋼家具外型美觀但價(jià)格偏高,鋼木家具體格適中,全木家具因其在承重、防水方面的弊端已經(jīng)很少有人選用,應(yīng)結(jié)合醫(yī)院的預(yù)算費(fèi)用選用合適的家具。

      2、實(shí)驗(yàn)臺面材質(zhì)主要由實(shí)芯理化板、環(huán)氧樹脂板和千思板,因檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室使用的高溫設(shè)備不多,推薦使用實(shí)芯理化板臺面和千思板臺面。

      3、實(shí)驗(yàn)臺在制作前應(yīng)結(jié)合現(xiàn)場實(shí)際情況和工作需要來確定長度和款式,過多的家具會占用工作空間,家具數(shù)量不足又會影響工作開展。

      七、建設(shè)方的準(zhǔn)備工作

      1、了解實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的檢測項(xiàng)目和近3年準(zhǔn)備開展的檢測項(xiàng)目,了解每天門診量和醫(yī)院的床位數(shù),以確定檢測實(shí)驗(yàn)室的功能間及面積。

      2、把實(shí)驗(yàn)室的主要檢測設(shè)備列個(gè)清單出來,清單應(yīng)包含設(shè)備名稱、數(shù)量、功率、用水量、用氣量等信息,并提供給設(shè)計(jì)師參考。

      3、應(yīng)給設(shè)計(jì)師提供一份建筑平面圖,并與工程設(shè)計(jì)人員協(xié)商確定檢驗(yàn)科人員的出入口,清潔物品入口,污物出口,這些人物流路線不應(yīng)和整個(gè)大樓的人物流路線沖突。

      4、在初步設(shè)計(jì)方案確定后,應(yīng)協(xié)助設(shè)計(jì)人員與行業(yè)內(nèi)專家進(jìn)行一次溝通,以優(yōu)化設(shè)計(jì)方案。Labx.cn

      第二篇:病理檢驗(yàn)技術(shù)

      熒光原位雜交 FISH 用DNA探針與組織切片上互補(bǔ)的DNA雜交,通過觀察熒光信號在染色體上的位置和顏色來反映相應(yīng)基因的情況。

      第一章 病理檢驗(yàn)技術(shù)概述

      病理學(xué)的作用:

      1、研究疾病的病因、發(fā)病機(jī)制,認(rèn)識

      疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律

      2、為臨床診斷疾病、治療疾病、分析預(yù)

      后提供依據(jù)等。

      病理檢驗(yàn)的定義:

      ------在臨床醫(yī)療實(shí)踐中,通過對患者病變組織或細(xì)胞進(jìn)行檢查,以協(xié)助臨床診斷疾病的方法稱為病理檢驗(yàn)。

      一、病理檢驗(yàn)的主要任務(wù)

      (一)確定疾病的診斷

      (二)為臨床選擇治療方案提供依據(jù)

      (三)提供有關(guān)預(yù)后因素的信息。(最正確、最可靠、最后的診斷)

      (四)了解疾病的發(fā)展及分析療效

      (五)為科學(xué)研究積累資料

      (六)為提高臨床診斷水平服務(wù)

      二、病理檢驗(yàn)分類

      (一)細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)(脫落細(xì)胞、細(xì)針穿刺吸?。?/p>

      (二)組織學(xué)檢驗(yàn)---最后的診斷

      活體組織檢驗(yàn)、手術(shù)標(biāo)本檢驗(yàn)、手術(shù)中病理檢驗(yàn)

      (三)尸體剖驗(yàn)

      病理學(xué)技術(shù):

      在病理學(xué)臨床及科學(xué)研究工作中使用的各種技術(shù)方法統(tǒng)稱為病理學(xué)技術(shù)。病理檢驗(yàn)技術(shù)的質(zhì)量和水平是臨床病理診斷工作中至關(guān)重要的因素。“技術(shù)是病理學(xué)之母。”

      第二節(jié)、病理檢驗(yàn)技術(shù)常規(guī)工作 收發(fā)工作

      協(xié)助取材和尸體剖檢工作 制作制作切片及細(xì)胞學(xué)涂片 病理資料管理及檢索

      藥品、物資的管理及儀器維護(hù) 大體標(biāo)本的收集和制作

      第六章 組織制片技術(shù) P39 常規(guī)石蠟切片制作程序 組織固定→取材→固定→脫水→透明→浸蠟→包埋→切片→染色→封片→觀察

      第一節(jié) 組織塊的處理

      (一)組織切片制作過程中的各種操作:

      1、取材與固定:合理取材、及時(shí)固定;

      2、洗滌、脫水、透明;

      4、浸蠟、包埋;

      5、切片、貼片(展片、撈片)和染色:

      6、封片:長期保存。

      一、取材:

      -------按照病理檢查的目的和要求,切取適當(dāng)大小和數(shù)量的組織塊,用于制作組織切片的過程。

      注意事項(xiàng):

      部位、大小、形狀、方向

      二、固定和固定液

      生理鹽水或10%甲醛。

      固定:將組織浸入某些化學(xué)試劑,使

      4、蒸汽固定法:為了固定組織中可溶性物組織細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)盡量保持在生活狀態(tài)時(shí)質(zhì)、的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置過程。

      血液、細(xì)胞涂片等;

      (一)固定目的:

      (三)固定液的特性:

      (1)防止組織、細(xì)胞的自溶與腐敗;

      1、滲透力強(qiáng),迅速滲入組織內(nèi)部

      (2)凝固或沉淀細(xì)胞內(nèi)物質(zhì);

      2、不會使組織過度收縮或膨脹

      (3)增加組織硬度,便于制片;

      3、能硬化組織,保持細(xì)胞形態(tài)和位置

      (4)產(chǎn)生不同的折光率,有利于染色后觀

      4、使組織對染料產(chǎn)生親和力,產(chǎn)生折光率 察辨認(rèn)。

      (四)組織固定注意事項(xiàng):

      (二)固 定 方 法:

      1、及時(shí)固定

      1、浸泡固定法:病理外檢一般均用此法;

      2、固定容器宜大

      2、注射、灌注法:體積過大或整個(gè)臟器或

      3、固定液應(yīng)足量:固定組織體積的10-20尸體的固定; 倍

      3、微波固定法:應(yīng)用于臨床病理快速診斷,4、防止組織變形 微波固定組織溫度至關(guān)重要。微波固定介質(zhì)

      5、確定恰當(dāng)?shù)墓潭〞r(shí)間 可用

      (五)組織固定液 常用固定液: 1、4%甲醛(福爾馬林):配置為市售的40%甲醛1份加水9份混合即成;

      2、酒精(乙醇):高濃度組織硬化顯著,先用80%固定數(shù)小時(shí),再用95%固定;

      3、中性緩沖甲醛液:可提高免疫組化陽性率。

      4、酒精-甲醛液(A-F固定液):

      5、Zenker固定液: 1、4%甲醛(福爾馬林):

      久置能產(chǎn)生白色沉淀(三聚甲醛),容易氧化變成甲酸,嚴(yán)重影響細(xì)胞核著色。固定陳舊多血臟器如肝脾,易產(chǎn)生黑色色素,叫甲醛色素。

      2、酒精(乙醇):

      高濃度組織硬化顯著,先用80%固定數(shù)小時(shí),再用95%固定;

      50%以上濃度的乙醇可溶解脂肪和類脂質(zhì),也可以溶解血色素和損害其他色素。

      中性甲醛液

      配置:40%甲醛150-200ml,蒸餾水800-850ml,磷酸二氫鈉4g,磷酸氫二鈉13g。常用的固定液或標(biāo)本保存液,是免疫組化最常用的固定液。

      選擇性固定液:

      1、丙酮:廣泛用于組織化學(xué)中酶的固定;

      2、戊二醛固定液:廣泛用于電鏡標(biāo)本的固定,應(yīng)采用緩沖液配制固定液

      3、醋酸:不能保存糖,也不能固定脂肪及類脂,5%醋酸pH2~3可抑制細(xì)菌和酶的活性;

      4、苦味酸:強(qiáng)酸,易燃易爆,酒精溶液可固定糖類;

      5、氯化汞:只宜固定薄片組織,2mm~3mm厚的組織需固定6~18小時(shí);

      6、重鉻酸鉀:固定高爾基體、線粒體,對酸性染料著色良好;

      7、鋨酸:濃度為1%~2%水溶液用于電鏡制片;

      骨組織脫鈣液:

      在脫鈣前,先將骨或鈣化組織鋸成4mm~5mm厚的簿片,按常規(guī)充分固定,然后進(jìn)行脫鈣。

      組織脫鈣的方法及應(yīng)用:

      (一)酸性溶液脫鈣:

      1、脫鈣液配制:

      (1)5%~10%硝酸水溶液:濃硝酸5ml~10ml,蒸餾水加至100ml;(2)硝酸甲醛液:濃硝酸10ml,10%福爾馬林90ml;

      (3)Schridde液:濃硝酸20ml,10%福爾馬林100ml。對組織無明顯損害,迅速、安全;(4)5%~10%甲酸水溶液:甲酸5ml~10ml,蒸餾水加至100ml(5)甲酸酒精液:脫鈣速度較硝酸慢,但破壞組織也輕。(6)Plank-Rychlo液:脫鈣比5%硝酸液快3倍。

      Jenkins混合酸脫鈣液、鹽酸氯化鈉液、枸櫞酸鈉、甲酸脫鈣液等

      2、脫鈣方法:骨片懸于脫鈣液中,敞開瓶口,每日更換一次新液,最好早晚各一次。

      (二)螯合劑脫鈣:速度很慢,但對組織成分幾乎沒有損害。用于免疫組化染色較理想。

      1、脫鈣液配制:取乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)25g,溶解于200ml蒸餾水中,氫氧化鈉(NaOH)調(diào)整pH至7.0(大約加2.5g NaOH)。EDTA與鈣可形成一種可溶性非離子化的復(fù)合物。

      2、脫鈣法:將骨片浸入脫鈣液中,每周更換一次新液。一般致密骨脫鈣需要6~8周,含有少量骨渣的組織約需一周。

      (三)電解脫鈣法: 此法即在脫鈣液中通過電流,電解加速脫鈣。

      1、電解脫鈣液配制:

      25%鹽酸50ml,25%甲酸200ml,蒸餾水750ml;

      2、脫鈣方法:直徑30cm電解槽內(nèi)盛大量電解液,將骨組織放在一個(gè)四周多孔的塑料小容器內(nèi)放入電解液內(nèi),此容器通入白金絲或鎢絲作陽極,在電解液內(nèi)再放一白金絲或鎢絲作陰極,通入6V直流電,電流強(qiáng)度1A~2A,調(diào)節(jié)兩電極的距離來控制。電解液溫度不超30℃~45℃,一般2~6小時(shí)即可脫盡。

      脫鈣后的處理

      1、脫鈣后的組織經(jīng)流水沖洗4~12小時(shí),除去殘留的脫鈣劑;

      2、修去鋸面的薄層組織,切成適當(dāng)大小的組織塊,進(jìn)行常規(guī)脫水、透明、浸蠟及包埋;

      3、用酸性液脫鈣后的組織,蘇木素染色時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長,在伊紅中的時(shí)間應(yīng)該縮短;

      4、脫鈣后組織切片在染色中較易脫落,充分烤片,染色前滴加2%~5%的火棉膠液,以使之粘貼牢固。

      三、洗滌、脫水、透明

      (一)組織的洗滌

      1、洗滌的目的:防止組織中留有較多的固定液而影響脫水劑;

      2、洗滌的方法:

      (1)固定劑以水配制者:常用的固定劑是甲醛溶液(10%福爾馬林溶液),用流水沖洗。大組織沖洗24小時(shí),小組織沖洗2~4小時(shí)。

      (2)固定劑含酒精者:一般不用沖洗,如需要沖洗必須用與固定劑中的酒精濃度相近或略低的酒精沖洗。

      (二)組 織 脫 水

      1、脫水的目的及原則:用某些溶劑逐漸將組織內(nèi)吸收的水分置換出來,以利于透明劑和石蠟或火棉膠的滲入。

      2、脫水劑的種類及特征:

      特征:能與水在任何比例下混合;能與透明劑在任何比例下混合;

      單純脫水劑:脫水后再經(jīng)二甲苯透明才浸蠟;

      酒精:最常見的脫水劑。脫水能力強(qiáng),但易使組織收縮、脆。

      單純脫水劑:脫水后再經(jīng)二甲苯透明才浸蠟; 丙酮:脫水強(qiáng),組織收縮嚴(yán)重,價(jià)格高。異丙醇:可代替無水酒精使用。價(jià)格貴。脫水兼透明劑:脫水后即可直接浸蠟。

      正丁醇:為脫水劑兼有透明劑作用。用于植物標(biāo)本的處理效果較好。叔丁醇:脫水兼透明。電鏡標(biāo)本制作時(shí)常用作中間脫水劑。

      (三)組織透明或媒浸

      目的是使石蠟?zāi)芙虢M織塊便于包埋。

      1、二甲苯:最常用的透明劑,有毒、易揮發(fā),透明力強(qiáng),但組織易收縮變脆,小塊組織以30分鐘。

      2、苯和甲苯:組織收縮小、不易變脆。

      3、氯仿:即三氯甲烷。易發(fā)揮,透明力比二甲苯差,時(shí)間長,多用于大塊組織的透明。

      4、香柏油:為柏樹樹脂,收縮小,透明時(shí)間長,常用于染色后切片的透明。

      四、組織浸蠟(透蠟)P48

      (一)浸蠟的目的和方法:除去組織中的透明劑而代之以石蠟,以便切片。

      (二)浸蠟劑的種類:

      1、石蠟:經(jīng)56℃~58℃石蠟浸蠟的組織包埋,有利于組織切片的連續(xù)性,對蠟塊資料保存可靠,一般為3-4小時(shí)。

      2、火棉膠:目前使用火棉膠浸入組織較少,多用于染色前的覆蓋液。

      3、碳蠟;

      4、明膠。

      五、組 織 包 埋 P49

      (一)石蠟包埋法:為最常用的包埋法。

      1、常規(guī)石蠟包埋法:包埋過程、包埋面的選擇;

      2、體液標(biāo)本一般不做包埋和切片。

      (二)快速石蠟包埋法:

      1、操作過程:全程均加熱,20~30分鐘完成。(1)取材、固定:薄片1cmⅹ0.5cmⅹ0.3cm,在快速固定液(95%酒精、40%甲醛、冰醋酸)內(nèi)加熱煮沸1~2分鐘。(2)脫水:組織厚度不超1.5mm,加入丙酮5 ~ 8ml,煮沸5~6分鐘。(3)透明:加二甲苯加熱1~2分鐘。(4)包埋:石蠟包埋冰水冷卻硬化。

      3、碳蠟包埋法:即聚乙烯二醇。包埋熔點(diǎn)為38℃和52℃左右的分子量為1500和4000兩種。適用于脂肪及脂類組織的制片。

      4、明膠包埋法:

      5、石蠟半薄切片包埋法:常根據(jù)組織類型進(jìn)行脫水、透明和浸蠟。

      6、樹脂包埋法:適用于不脫鈣骨髓活檢組織、肝、腎穿刺活檢和淋巴結(jié)組織等。

      第二節(jié) 切片器具與切片

      一、切片機(jī):制作組織切片的主要儀器設(shè)備。

      (一)切片機(jī)的種類及使用:

      1、石蠟切片機(jī):能將石蠟包埋的組織切出一定厚薄的切片。分為旋轉(zhuǎn)式、滑動式、擺動式等。最常用的為旋轉(zhuǎn)式。

      2、冷凍切片機(jī):多為恒冷箱切片機(jī)用于組織化學(xué)、免疫組化及病理診斷。

      3、火棉膠切片機(jī):多用于眼球、內(nèi)耳、脊髓和腦的切片,切片厚度可達(dá)20μm~50μ。

      二、組織切片刀 P58

      (一)切片刀的種類: 其長度一般有 4cm、8cm、14cm、18cm、20cm、24cm等。

      1、平凹型:一側(cè)為直線,另一側(cè)為凹度,大凹度刀適用于火棉膠切片,小凹度刀適于石蠟切片。

      2、雙平型:刀身兩側(cè)均無凹度,兩面是平面。適用于冷凍切片和輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)的石蠟切片。

      3、雙凹型:刀身兩側(cè)均有凹度,適用于輪轉(zhuǎn)式石蠟切片。

      4、一次性刀片:需配置專用刀架。

      (二)刀背套與刀柄:刀背套供磨刀時(shí)用,刀背套有金屬和塑料兩種。刀柄有木制及塑料制兩種。

      (三)磨刀與被刀:

      1、手工磨刀法:

      ①磨刀前用軟布試凈磨刀石面塵垢;

      ②裝上刀背和刀柄,滴磨刀油于磨刀石上;

      ③右手緊握刀柄,左手緊按刀背另一端,刀刃向前,逐漸推動刀片至磨刀的一端,從右到左全部磨完。

      2、被刀:用被刀皮革被刀,與磨刀的動作相反;

      三、石蠟切片制作 P60

      (一)切片前的準(zhǔn)備:

      修整蠟塊,然后置于冷水或冰箱中冷卻,以增加硬度;

      準(zhǔn)備毛筆、眼科彎鑷子;

      載玻片均勻涂上薄層蛋清甘油,占2/3;

      接通攤片機(jī)電源,調(diào)節(jié)攤片(42℃~48℃)

      烤片(60-70℃左右)的溫度;

      (二)快速石蠟切片 P63 快速石蠟切片時(shí),組織取材應(yīng)薄,厚度一般不超過2mm,組織固定后要重新修正至1.5mm左右厚度,以利脫水,將組織塊埋入預(yù)制的蠟塊內(nèi),冷卻硬化后方可切片(取材、脫水、透明浸蠟、包埋見)。

      切片撈至載波片上,用酒精燈略加烘烤,再入二甲苯脫蠟,經(jīng)95%酒精后即刻入水水化,隨后即可進(jìn)行常規(guī)快速蘇木素伊紅染色。

      (三)冷凍切片制作 P64 組織經(jīng)過冷凍后,其內(nèi)的水分結(jié)冰,使組織變硬,有利于切成薄片。

      一、設(shè)備要求:

      (一)冷凍切片機(jī):一般由轉(zhuǎn)輪式切片機(jī)或推拉式切片機(jī)加上制冷裝置而成:

      1、二氧化碳制冷器;

      2、半導(dǎo)體制冷器;

      (二)恒冷箱冷凍卻片機(jī):利用壓縮機(jī)通過制冷劑循環(huán)制冷。

      冰凍切片機(jī)

      二、制作過程

      (一)取材、固定:選取有代表性的組織制片,厚度1~2mm。一般病理急診、組織化學(xué)顯示酶和免疫病理學(xué)進(jìn)行熒光抗體研究等,多數(shù)都用新鮮組織直接冷凍,切片后再進(jìn)行固定、染色或直接染色或孵化。采用二氧化碳冷凍設(shè)備制作須先固定。

      (二)冷凍切片方法:

      1、恒溫箱冷凍切片法

      (1)開機(jī)預(yù)冷:切片前2~3小時(shí),所需溫度如下: 各種新鮮組織冷凍切片參考溫度(℃)腦、淋巴結(jié)、肝、腎、脾、睪丸-12--16 肌肉、腎上腺、甲狀腺、子宮、卵巢-18--22 乳腺、皮膚、前列腺-22--28(2)放入、速凍、修整組織,待恒冷箱內(nèi)溫度降至要求溫度后,將組織用OT包埋,再速凍1~2分鐘,裝于機(jī)樣本夾上,修平;(3)調(diào)節(jié)抗卷板,以與刀刃平行對齊;

      (4)切片:所需厚度為4μm~8μm,用毛筆展平,貼于潔凈玻片上,晾干或吹干后染色;(5)切片后處理:清潔保養(yǎng)。

      2、半導(dǎo)體冷凍切片法

      3、二氧化碳冷凍切片法

      (三)冷凍切片粘片法

      1、蛋白甘油粘片法:

      按石蠟切片的粘片法處理,但溫度不宜超過40℃。烤干后即取出,70%酒精和自來水洗后即可染色。

      2、Lillie明膠粘片法:切片放入1%明膠水溶液數(shù)分鐘,撈到載玻片上,5%甲醛水溶液固定5分鐘,水洗10分鐘,即可染色。

      3、酒精明膠粘片法:切片浸入0.1%或0.75%明膠溶液(用40%酒精配制)數(shù)分鐘,用載玻片撈起后,室溫干燥,入氯仿1分鐘,經(jīng)95%和75%酒精洗去氯仿,再經(jīng)蒸餾水洗后即可染色。

      三、注意事項(xiàng)

      1、冷凍切片的組織不用固定;

      2、組織盡可能新鮮,不能用濕的鹽水紗布包裹和放入10℃冰箱內(nèi)緩慢冷卻,否則組織內(nèi)水分可逐漸析出形成水晶,造成組織結(jié)構(gòu)破壞;

      3、冷凍包埋劑應(yīng)適量;

      4、組織太小,不能做冷凍切片;

      5、冷凍時(shí)間太久的組織不能馬上切片,以免損傷切片刀;

      6、一般來說骨組織和鈣化組織不能做冷凍切片。觀察

      第七章組織切片染色技術(shù)

      第一節(jié) 病理切片染色概述 P68

      一、概念:用染液對組織切片進(jìn)行處理,使組織中的不同成分被染上相應(yīng)的顏色,產(chǎn)生不同的折射率,以利于顯微鏡觀察和分析。

      三、染色的原理

      染色就是染色劑和組織細(xì)胞相結(jié)合的過程。

      (一)染色的化學(xué)反應(yīng):組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與堿性染料的陽離子相結(jié)合,堿性物質(zhì)與酸性染料的陰離子相結(jié)合。具有酸性的細(xì)胞核被堿性蘇木素液所染色,堿性的胞質(zhì)與酸性染料伊紅所染色。

      (二)染色的物理作用:

      1、滲透作用:染料進(jìn)入組織;

      2、吸附作用:把另一種物質(zhì)的分子、原子、離子集中在界面上的過程;

      3、吸收作用(溶解作用)。

      三、常用染料概述:

      (一)染料的性質(zhì):有色的無機(jī)物或有機(jī)化合物

      1、發(fā)色團(tuán):能使染料分子產(chǎn)生顏色的基團(tuán),叫發(fā)色團(tuán);

      2、助色團(tuán):能使染料分子顏色加深,并與被染物質(zhì)分子形成親和力的基團(tuán)。

      (二)染料的分類:

      1、據(jù)染料來源:天然、合成染料和無機(jī)化合物

      2、根據(jù)染料化學(xué)反應(yīng):酸性、堿性和中性染料

      3、據(jù)染色對象:(1)組織染料: 1)結(jié)締組織和肌纖維染料:有膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維和肌原纖維等染料; 2)神經(jīng)組織的染料:尼氏體、神經(jīng)軸突、神經(jīng)髓鞘、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞等染料;(2)細(xì)胞染料:細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)染料等

      常用染色劑簡介見附錄一。

      五、常用染色術(shù)語的概念

      一、普通染色:最常應(yīng)用的是蘇木素-伊紅染色法,簡稱HE染色。

      二、特殊染色:特染是為了顯示特定的組織結(jié)構(gòu)或其他的特殊成分。

      三、單一染色:選用一種染料染色。

      四、復(fù)染色:用兩種不同性質(zhì)的染料染色方法。

      五、多種染色法:用兩種以上染料的染色法。

      第三節(jié) 染色前后的處理 P74

      一、染色前的處理:

      1、脫蠟至水:必須經(jīng)過二甲苯脫蠟、各級酒精(100%、95%、85%、75%)至水洗的過程。

      2、脫汞鹽結(jié)晶:切片在脫蠟后用0.2%~0.5%碘酒精處理5~15分鐘,使汞鹽沉淀物溶解。

      3、脫甲醛色素:在切片脫蠟至水后,用Verocay液(1%氫氧化鉀水溶液1ml,80%酒精100ml)處理10分鐘,然后流水沖洗5分鐘再常規(guī)染色。

      (二)染色后的處理:

      1、分化作用:必須用1%鹽酸酒精脫去所吸附的染料。

      2、藍(lán)化作用:分化后,用堿性水使細(xì)胞核變成藍(lán)色。

      3、染色后的脫水:低度到高度酒精逐步脫水。

      4、染色后的透明:透明劑用二甲苯。

      三、封固:

      1、封固劑:

      (1)甘油明膠封固劑

      配制方法:明膠10g,蒸餾水60ml,甘油70ml,石炭酸0.25g。(用前將甘油明膠置于溫箱內(nèi)融化后即可封片)。(2)中性樹膠(二甲苯樹膠液):屬油性封固劑,組織切片需徹底脫水、透明。優(yōu)良封固劑,可直接封片。

      七、染色的注意事項(xiàng)

      (1)具備實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)備和染色準(zhǔn)備工作(2)正確完成固定、脫水、透明、脫蠟步驟;

      (3)染色過程中,既要按書本的方法進(jìn)行操作,又要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行靈活運(yùn)用。

      第八章 組織切片常規(guī)染色技術(shù) 第一節(jié) 常規(guī)染色的概念

      一、染色原理

      (一)蘇木素染色原理:蘇木紅和鋁結(jié)合形成帶正電的 藍(lán)色色精,帶負(fù)電的細(xì)胞核與帶正電的藍(lán)色色精以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。

      (二)伊紅染色原理:伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料。在伊紅Y染料液中加入醋酸,使胞質(zhì)中蛋白質(zhì)帶正電荷,可被帶負(fù)電的伊紅染料染色,從而使細(xì)胞質(zhì)及紅細(xì)胞等染成紅色或粉紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對比。

      二、染液的配制 P80

      (一)蘇木素液:從蘇木素的樹中提煉的天然染料。

      1、Harris蘇木素液:最常用。

      蘇木素 1g 蒸餾水 200ml 無水酒精 10ml 氧化汞 0.5g 硫酸鋁鉀 20g 配置方法見書81頁。染色3~4分鐘。保存時(shí)間為一年。

      (二)伊紅染液:

      0.5%伊紅酒精染液:醇溶伊紅Y0.5g,95%酒精100ml。染色時(shí)間1~3分鐘。水溶性伊紅酒精液: 沉淀酸化伊紅Y酒精液:

      2、Mayer蘇木素改良配法:

      (1)A液:蘇木素2g,無水酒精40ml加熱溶解;

      (2)B液:硫酸鋁鉀100g,蒸餾水600ml,稍加熱使硫酸鋁鉀在水中溶解,再將A與B液混合2分鐘。用蒸餾水補(bǔ)足600ml,加入400mg碘酸鈉充分混勻,蘇木素染液呈紫紅色即可。染色時(shí)間為10~20分鐘。

      3、Ehrlich蘇木素液:蘇木素2g,無水酒精100ml,甘油100ml,硫酸鋁鉀15g,蒸餾水100ml,冰醋酸10ml。(染色時(shí)間為10~20分鐘)。

      4、Gill改良蘇木素液:蘇木素2g,無水酒精250ml,硫酸鋁鉀17.6g,蒸餾水750ml,碘酸鈉0.2g,冰醋酸20ml。染色時(shí)間為5分鐘。

      (三)0.5%~1%鹽酸酒精分化液:

      鹽酸 0.5ml~1ml, 75%酒精99ml。此液用一段時(shí)間后需要延長時(shí)間或更換液體,新液體分化時(shí)間要短。

      (四)藍(lán)化液:“藍(lán)化”是指蘇木素液染細(xì)胞核后,通過鹽酸酒精分化,切片由酸性轉(zhuǎn)入弱堿性液體,使之變藍(lán)的過程。1、50℃溫水

      2、稀氨水(1%氫氧化銨液)3 蒸餾水 100ml,氨水1ml。

      三、染色方法 P83

      (一)人工操作蘇木素-伊紅染色方法:

      1、脫蠟至水:

      (1)二甲苯Ⅰ脫蠟(脫蠟2-5分鐘);(2)二甲苯Ⅱ(2-5分鐘);(3)無水酒精Ⅰ(1-2分鐘);(4)95%酒精1分鐘;(5)85%酒精1分鐘;(6)75%酒精1分鐘;(7)自來水洗2分鐘;

      2、蘇木素染色:蘇木素液染色5-10分鐘;自來水洗1分鐘;

      3、分化返藍(lán):0.5%~1%鹽酸酒精分化數(shù)秒至30分鐘呈紫紅色;自來水1分鐘;用溫水(50℃)藍(lán)化5~15分鐘(或稀氨水藍(lán)化30秒,自來水洗5~10分鐘);

      4、伊紅染色:水溶性伊紅可直接入伊紅液,1分鐘;自來水洗1分鐘;

      5、脫水、透明:

      (1)85%酒精(20秒);(2)95%酒精Ⅰ(1分鐘);(3)無水酒精Ⅰ(1分鐘);(4)二甲苯Ⅰ(1~2分鐘);(5)二甲苯Ⅱ(1~2分鐘)。

      6、封固:

      (1)用中性樹膠封片;

      (2)附貼標(biāo)簽可書寫病理編號。

      (二)冷凍切片HE染色:

      冷凍切片貼片后,用95%酒精和冰醋酸5ml的混合液固定1分鐘,自來水洗30秒~1分鐘,HE染色。

      (三)快速石蠟切片染色:脫蠟至水、HE染色

      第三節(jié) 染色中常見問題及注意事項(xiàng) P85 HE染色結(jié)果:

      細(xì)胞核被蘇木素染成明顯的藍(lán)色;

      細(xì)胞質(zhì)被伊紅染成紅色。

      第九章 組織切片特殊染色 P87 為了顯示特定的組織結(jié)構(gòu)或組織細(xì)胞特殊成分,采用特定的染料和方法對組織切片進(jìn)行染色。第一節(jié) 結(jié)締組織染色 P88

      一、膠原纖維染色

      Van Gieson染色法(簡稱VG染色)(書上無)

      1、染料配制:

      (1)鐵蘇木素液:見Masson三色染色(2)Van Gieson苦味酸酸性品液:

      甲液:1.22%苦味酸飽和水溶液90ml,乙液 : 1%酸性品紅水溶液10ml。

      兩液提前配制,臨用前混合使用。

      2、染色步驟:

      (1)切片脫蠟至水(2)蒸餾水洗(3)Weigert鐵蘇木素液染5~10分鐘(4)自來水洗2分鐘

      (5)據(jù)情況可用0.5%鹽酸酒精分化(6)自來水洗至變藍(lán)再用蒸餾水洗(7)Van Gieson液染色3~5分鐘(8)去染液,用95%酒精分化脫水

      (9)無水酒精脫水(10)二甲苯透明(11)中性樹膠封固。

      3、染色結(jié)果:膠原纖維紅色,肌纖維黃色, 細(xì)胞核黑色.4、膠原纖維染色的應(yīng)用 P88(1)對梭形細(xì)胞腫瘤來源、性質(zhì)提供診斷和鑒別診斷的依據(jù);

      (2)顯示各種組織、器官病變時(shí)的修復(fù)情況與纖維化程度,如肝穿組織中纖維組織的含量與分布的觀察;

      (3)鑒定心肌壞死后疤痕的形成;

      (4)鑒別心內(nèi)膜彈力纖維增生癥與心內(nèi)膜心肌纖維化。

      三、網(wǎng)狀纖維染色 Gomori銀染法: P92

      1、染液配制:銀氨溶液:甲液:硝酸銀10.2g,蒸餾水100ml;乙液:氫氧化納3.1g,蒸餾水100ml

      2、染色步驟:(1)切片脫蠟至水(2)高錳酸鉀氧化液(高錳酸鉀0.5g,蒸餾水95ml,再加3%硫酸5ml)5分鐘(3)水洗1分鐘(4)2%草酸漂白2分鐘,水洗2分鐘(5)2%硫酸鐵銨媒染2分鐘(6)蒸餾水充分洗(7)氨銀溶液染色1分鐘(8)蒸餾水洗3次(9)20%福爾馬林液還原5分鐘(10)蒸餾水洗2次(11)入0.2%氯化金液中調(diào)色2分鐘,蒸餾水洗2次(12)2%硫代硫酸鈉固定2分鐘,自來水、蒸餾水洗(13)必要時(shí)用VG或伊紅復(fù)染(14)無水酒精脫水(15)二甲苯透明(16)中性樹脂封固。

      3、染色結(jié)果:網(wǎng)狀纖維呈黑色,膠原纖維呈紅色。

      4、網(wǎng)狀纖維染色的應(yīng)用

      (1)區(qū)分上皮性與非上皮性腫瘤;(2)區(qū)分血管內(nèi)皮瘤與血管外皮瘤;(3)判斷原位癌與早期浸潤癌;

      (4)觀察肝臟病變處的網(wǎng)狀支架塌陷或增生的情況,判斷病變性質(zhì)、程度及發(fā)展與轉(zhuǎn)歸。

      四、多色染色: P93

      (一)Masson三色染色法: P93

      1、染液配制:

      (1)麗春紅酸性品紅液:麗春紅0.7g,酸性品紅0.3g,冰醋酸1ml,蒸餾水99ml(先配好醋酸溶液后,分別溶解麗春紅或酸性品紅);亮綠液:亮綠1.0g,冰醋酸1ml,蒸餾水99ml。(2)苯胺藍(lán)液:苯胺藍(lán)2g,冰醋酸2ml,蒸餾水加至100ml。

      (3)Weigert鐵蘇木素液:甲液:蘇木素1g,95%酒精或無水酒精100ml;乙液:29%三氯化鐵水溶液4ml,純鹽酸1ml,蒸餾水95ml(臨用前取甲、乙兩液混合即可,24小時(shí)內(nèi)使用有效。)

      2、Masson三色的染色步驟:(1)切片脫蠟至蒸餾水;

      (2)Weigert鐵蘇木素染色5~10分鐘;(3)流水稍洗;(4)鹽酸酒精分化;(5)流水沖洗數(shù)分鐘;

      (6)麗春紅酸性品紅液染色5分鐘;(7)蒸餾水稍沖洗;

      (8)1%磷鉬酸水溶液處理5分鐘,鏡下見肌肉纖維呈紅色,膠原纖維呈淡紅色即可;(9)不經(jīng)水而直接用苯胺藍(lán)液或亮綠液染5分鐘;(10)1%冰醋酸處理1分鐘;(11)95%酒精、無水酒精脫水;(12)二甲苯透明;(13)中性樹膠封固。

      3、染色結(jié)果:膠原纖維呈藍(lán)色(用苯胺藍(lán)染)或綠色(用亮綠染),肌纖維、細(xì)胞質(zhì)呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)褐色。

      (二)Mallory三色染色法 P94

      1、染液配制:

      (1)0.5%酸性品紅水溶液;

      (2)苯胺藍(lán)橙黃G液:苯胺藍(lán)0.5g,橙黃G 2g,磷鎢酸1g,蒸餾水100ml。(先將1%的磷鎢酸溶液配好,一半用于溶解苯胺藍(lán),另一半用于溶解橙黃G,加熱溶解,冷卻后分別過濾,可長期保存。臨用前將兩液混合)。(3)重鉻酸鉀液;

      2、染色步驟:

      (1)切片脫蠟至水;(2)Zenker固定液固定1小時(shí);(3)充分水洗;(4)0.5%碘酒精處理5~10分鐘;(5)0.5%硫代硫酸納處理2~5分鐘;(6)充分水洗,再用蒸餾水浸洗;(7)酸性品紅液染5分鐘;(8)水洗、蒸餾水洗;(9)苯胺藍(lán)橙黃-G液染20~30分鐘;(10)直接95%酒精快速分化;(11)無水酒精脫水;(12)二甲苯透明;(13)中性樹膠封固。

      3、染色結(jié)果:膠原纖維、網(wǎng)狀纖維呈藍(lán)色,心機(jī)纖 維橘紅色,紅細(xì)胞呈淺黃色,細(xì)胞核呈黑色。

      結(jié)締組織復(fù)合染色的應(yīng)用(1)區(qū)分各種纖維成分;

      (2)判定各種組織、器官的病變程度和修復(fù)情況;(3)鑒別某些梭形細(xì)胞軟組織腫瘤的來源的判斷(4)用于腎小球腎炎的診斷。

      第二節(jié) 肌肉組織染色 P95

      (一)Mallory磷鎢酸蘇木素染色法(簡稱PTAH):

      1、染液配制

      (1)磷鎢酸蘇木素:蘇木素0.1g, 磷鎢酸2g, 蒸餾水100ml。

      將蘇木素加入20ml蒸餾水中,加熱溶解,再將磷鎢酸溶于80ml蒸餾水中。蘇木素冷卻后將兩液混合放置3~3月后使用。此液可保存數(shù)年。急用時(shí)可加高錳酸鉀0.15g促成熟,12~24小時(shí)即可用。

      (2)酸性高錳酸鉀液:5%高錳酸鉀水溶液50ml;

      0.5 硫酸水溶液50ml。

      2、染色步驟:

      (1)組織以Zenker液固定最佳;如用甲醛固定則先要用Zenker液處理(37℃溫箱內(nèi))3小時(shí);

      (2)切片脫蠟至水,用碘液除汞,用95%酒精脫碘;(3)充分水洗;(4)酸性高錳酸鉀液處理5~10分鐘(5)自來水洗2分鐘;(6)1%草酸漂白1分鐘;(7)自來水洗,蒸餾水洗2次;

      (8)磷鎢酸蘇木素液浸染24~48小時(shí);(9)直接用95%酒精分化;(10)無水酒精脫水;(11)二甲苯透明;(12)中性樹膠封固。

      3、染色結(jié)果:橫紋肌纖維、細(xì)胞核呈紫藍(lán)色,膠原纖維、網(wǎng)狀纖維呈玫瑰紅色。

      4、肌肉組織染色

      常用于Mallory磷鎢酸-蘇木素染色法能顯示與區(qū)分:(1)橫紋肌纖維的正常與異常形態(tài);

      (2)診斷心肌損傷早期病變及全身彌漫性血管內(nèi)凝血有一定參考價(jià)值;(3)用于橫紋肌肉瘤時(shí)顯示橫紋,(4)用于顯示神經(jīng)膠質(zhì)。

      第三節(jié) 脂肪染色 P96 蘇丹Ⅲ染色法:(書上無)

      1、染料配制:

      (1)蘇丹Ⅲ染液:蘇丹Ⅲ 0.15g,60%~70%酒精100ml。(將蘇丹Ⅲ染料溶于60%~70%酒精形成飽和液,作長期備用液。臨時(shí)配制時(shí)需要過濾才可使用。備用液僅用上清液。密封容器存放備用液)。

      (2)甘油明膠液:明膠 5g,甘油35ml,蒸餾水 35ml。(先將明膠溶于蒸餾水中加熱溶解,再加甘油充分混合,加1~2粒石炭酸。冷卻后4℃保存,用時(shí)水浴加熱)。

      2、蘇丹Ⅲ染色步驟:

      (1)冷凍切片厚8μm~10μm;(2)蒸餾水稍洗;(3)Harris蘇木素1~2分鐘;(4)自來水洗,鹽酸酒精分化、反藍(lán);(5)水洗、蒸餾水洗;(6)70%酒精浸洗;

      (7)蘇丹Ⅲ染液30~60分鐘(如置于56℃溫箱中可縮短時(shí)間);(8)70%酒精分化數(shù)秒;(9)蒸餾水洗;(10)在空氣中稍晾干;(11)甘油明膠液封固。

      3、注意事項(xiàng):采用冰凍切片染色。蘇丹Ⅲ染液溫浸時(shí)應(yīng)加蓋,防止染液中的酒精或丙酮揮發(fā)。在封固前,甘油明膠液應(yīng)放置56℃溫箱中加溫,避免搖蕩,防止封固時(shí)出現(xiàn)氣泡。切片染色后不能長期保存,應(yīng)盡快觀察或照相。

      4、染色結(jié)果:脂肪呈橘紅色,脂肪酸不作色,細(xì)胞核呈淡藍(lán)色。

      5、脂肪染色的應(yīng)用(1)鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡的性質(zhì)(水樣變性、脂肪變性或糖原);

      (2)顯示動脈粥樣斑塊病灶內(nèi)的脂質(zhì)沉積、脂肪栓塞。

      (3)神經(jīng)系統(tǒng)一些變性、脫髓鞘疾病的診斷有極為重要的作用。

      (4)脂肪染色主要用于卵巢纖維瘤與卵泡膜細(xì)胞瘤、腎母細(xì)胞瘤、皮脂腺癌的診斷和鑒別診斷。

      第四節(jié) 糖原染色與粘液染色

      一、過碘酸雪夫染色法(PAS法):P98

      1、染色配制:

      (1)過碘酸氧化液:過碘酸0.5g,蒸餾水100g。(此溶液應(yīng)放4℃冰箱保存)。(2)Schiff液:堿性品紅 1g,1mol/L鹽酸 20ml,偏重亞硫酸鈉(鉀)1g,雙蒸餾水200ml。(先將雙蒸餾水200ml煮沸,加入1g堿性品紅,再煮沸2分鐘。冷卻至50℃加1mol/L的鹽酸20ml,待溫度降低至25℃時(shí),加入偏重亞硫酸鈉(鉀)1g~1.5g,溫室2小時(shí)后堿稍帶紅色,5小時(shí)后為無色液體,如有顏色應(yīng)加入活性炭1g~1.5g,用雙層濾紙過濾,盛于棕色磨口瓶內(nèi),放入4℃冰箱保存。

      2、染色步驟:

      (1)切片脫蠟至水;(2)蒸餾水洗;(3)0.5%過碘酸氧化液10~20分鐘;(4)充分蒸餾水洗;(5)進(jìn)入Schiff液染色10分鐘(如室溫低于15℃可稍加溫);(6)自來水洗10分鐘;(7)用Mayer或 Harris明礬蘇木素染細(xì)胞核3~5分鐘;(8)鹽酸酒精分化;(9)水洗;(10)無水酒精脫水;(11)二甲苯透明;(12)中性樹膠封固。

      3、染色結(jié)果:糖原及其它PAS反應(yīng)陽性物質(zhì) 染成紅色,細(xì)胞核染成藍(lán)色。

      4、糖原染色的應(yīng)用

      (1)用于顯示糖原,對明確細(xì)胞空泡的性質(zhì)、糖原貯積病和糖尿病的診斷及某些透明細(xì)胞腫瘤的鑒別診斷方面具有重要作用。

      (2)用于中性黏液物質(zhì),對低分化腺癌的診斷也有一定價(jià)值。

      (3)清楚地顯示基底膜(腎炎的診斷)、網(wǎng)狀纖維、真菌菌絲、寄生蟲及腺泡狀軟組織肉瘤中胞質(zhì)內(nèi)結(jié)晶體。

      (4)觀察缺血缺氧早期心肌壞死或梗死區(qū)的糖原減少情況。

      粘液染色

      二、奧辛藍(lán)染色法(簡稱AB染色):P99

      1、染液配制:(1)AB液:(pH 2.5)奧辛藍(lán)8GS 1g,蒸餾水97ml,冰醋酸3ml,麝香草酚2粒(防腐)。(先配好3%冰醋酸,然后溶解奧辛藍(lán)。過濾后使用。pH值2.5~3.0之間.(2)0.5%中性紅水溶液: 中性紅 0.5g,蒸餾水加至 100ml。

      2、奧辛藍(lán)染色步驟:

      (1)石蠟切片脫蠟至水;(2)AB液染色20~30分鐘;(3)快速蒸餾水洗;(4)0.5%中性紅染1~2分鐘;(5)快速只能流水洗;

      (6)95%酒精、無水酒精脫水;(7)二甲苯透明;(8)中性樹膠封固。

      3、染色結(jié)果:酸性粘液物質(zhì)(及真菌菌絲、隱 球菌的夾膜)呈藍(lán)色,中性粘液呈紅色,混合 粘液呈紫紅色,細(xì)胞核呈紅色。

      4、粘液染色的應(yīng)用

      (1)黏液性腫瘤的診斷和鑒別診斷,如黏液瘤、黏液肉瘤、脂肪瘤、胃腸道低分化腺癌、軟骨黏液樣纖維瘤;

      (2)用于結(jié)締組織疾病及慢性胃炎腸上皮化生等的診斷。

      第五節(jié) 病原微生物染色 P100 石炭酸品紅抗酸桿菌染色法:P101

      1、染色配制:

      石炭酸品紅液:堿性品紅 1g,無水酒精 10ml,石炭酸(5%)水溶液100ml。

      (首先將堿性品紅溶于無水酒精,然后與石炭酸水溶液混合,臨使用前過濾)。

      2、抗酸桿菌染色步驟:(1)石蠟切片脫蠟至水;

      (2)將石炭酸品紅液滴切片上,文火熱至蒸氣出現(xiàn),離火染15~20分鐘;(3)蒸餾水洗;

      (4)1%鹽酸酒精液分化,至無紅色染料流下止;(5)蒸餾水洗;(6)1%美藍(lán)液復(fù)染2分鐘;(7)95%酒精分化,美藍(lán)脫色,以示清楚;(8)無水酒精脫水;(9)二甲苯透明;(10)中性樹膠封固。

      3、染色結(jié)果:抗酸桿菌(如結(jié)核桿菌、麻風(fēng)桿菌 等)呈紅色,細(xì)胞核呈淡藍(lán)色。

      4、病原微生物染色的應(yīng)用

      用于結(jié)核病的干酪樣壞死灶及麻風(fēng)病中泡沫狀細(xì)胞(瘤型麻風(fēng))內(nèi)的抗酸桿菌,其形態(tài)特點(diǎn)是:結(jié)核分支桿菌彎曲細(xì)長,長短粗細(xì)不一;而麻風(fēng)桿菌短粗成堆,數(shù)量較多(稱為麻風(fēng)團(tuán))。

      淀粉樣物質(zhì)的染色(書上無)Bennhola剛果紅染色法:

      1、染色配制:

      (1)1%剛果紅水溶液: 剛果紅 1g,蒸餾水100ml。(2)碳酸鋰飽和水溶液:碳酸鋰 1.25g,蒸餾水100ml。

      2、染色結(jié)果:

      淀粉樣物質(zhì)呈紅色,其它組織呈淺紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。

      3、Bennhola剛果紅染色步驟:(1)石蠟切片脫蠟至水;(2)明礬蘇木素染液淡染細(xì)胞核3~5分鐘;(3)1%鹽酸酒精液稍分化。水洗1~2分鐘;(4)充分水洗返藍(lán);(5)蒸餾水稍洗;

      (6)1%剛果紅溶液染色10~30分鐘或更長;(7)經(jīng)碳酸鋰飽和溶液處理1~2分鐘;

      (8)80%酒精液急速分化至無紅色染液流下為止;(9)水洗1~2分鐘;

      (10)95%酒精脫水及無水酒精脫水;(11)二甲苯透明;(12)中性樹膠封固。

      4、淀粉樣物質(zhì)的染色的應(yīng)用

      (1)淀粉樣物質(zhì)染色能顯示變性程度:如全身淀粉樣變性;(2)用于全身消耗性疾病的觀察:如結(jié)核病、甲狀腺髓樣癌等;(3)用于腫瘤的診斷和鑒別診斷:如內(nèi)分泌腫瘤的間質(zhì)常出現(xiàn)淀粉樣物質(zhì)沉著,又如甲狀腺髓樣癌、胰島細(xì)胞瘤、肺小細(xì)胞癌等,淀粉樣物質(zhì)染色陽性可作為診斷重要依據(jù);

      (4)為某些疾病的診斷與鑒別診斷提供依據(jù):鈣化上皮瘤、聲帶息肉等常出現(xiàn)淀粉樣變性,可為診斷依據(jù)。

      黑色素染色

      Masson-Fontana染色法:

      1、染液配制:

      (1)Masson-Fontana染:10%硝酸銀 15ml,蒸餾水 15ml。(將濃氨水逐滴加入10%硝酸銀液中直至微乳白色,并加入蒸餾水15ml,過濾后靜置1~2小時(shí)后使用。4℃冰箱保存,恢復(fù)室溫后使用,每次使用前應(yīng)重新過濾)。(2)5%硫代硫酸鈉水溶液。

      2、染色結(jié)果:黑色素、嗜銀細(xì)胞顆粒呈黑色,細(xì)胞核、膠原纖維呈紅色。

      3、黑色素(Masson-Fontana)染色步驟:(1)10%福爾馬林固定組織,石蠟包埋;(2)切片脫蠟至水;(3)蒸餾水充分洗;

      (4)用Masson-Fontana液室溫染18~48小時(shí);(5)蒸餾水細(xì)數(shù)次;

      (6)用5%硫代硫酸鈉水溶液固定5~10分鐘;(7)蒸餾水洗數(shù)次;

      (8)用0.5%中性紅對比染色1~2分鐘;(9)蒸餾水洗5~10分鐘;(10)無水酒精脫水;(11)二甲苯透明;(12)中性樹膠封固。

      4、黑色素染色的應(yīng)用 主要用于黑色素瘤的診斷,尤其是無色素性的分化差的黑色素瘤的診斷極為重要;對淋巴結(jié)內(nèi)轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞,證實(shí)有無黑色素的存在對腫瘤的診斷可提供有利的證據(jù);還有一些腫瘤及疾病中也存在色素,如色素性神經(jīng)瘤、透明細(xì)胞肉瘤、黑色棘皮病、老年疣等等均可提供診斷依據(jù)。

      第十五章 病理檢驗(yàn)技術(shù)進(jìn)展 P177

      一、計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)

      二、流式細(xì)胞儀技術(shù)

      三、分子病理學(xué)技術(shù)

      第十六章 病理檔案管理 P190

      二、組織制片常用玻璃器具:(1)染色缸:

      (2)標(biāo)本瓶:用于脫水、透明及染色;(3)培養(yǎng)皿:盛裝蛋清甘油;

      (4)配制試劑用具:量筒、量杯、燒杯、三角燒瓶、漏斗、吸管、滴管、滴瓶、試劑瓶、蒸餾水瓶、玻璃棒及研缽等;(5)酒精燈:用于染液配制等;(6)載玻片:(7)蓋玻片:

      3、免疫組化常用設(shè)備:(1)微波爐或高壓鍋;(2)微量加樣器;(3)微波震蕩器;

      (4)恒溫水浴箱或濕盒;

      4、常用器械盒工具:

      (1)標(biāo)本巨檢器械:解剖刀、手術(shù)刀、手術(shù)剪、鑷子、血管鉗、不繡鋼尺、搪瓷盤等;(2)尸體剖驗(yàn)器械;

      三、常用玻璃器材的清洗方法

      (一)新購玻璃器皿的處理: 先用洗衣粉浸泡洗刷,自來水洗后再用1%~2%鹽酸水溶液浸泡數(shù)小時(shí)后,用自來水沖洗干凈,再用蒸餾水洗2次。

      (二)使用后玻璃器皿的清洗方法:

      (1)自來水沖洗;

      (2)毛刷蘸洗衣粉洗擦干凈;

      (3)自來水沖洗;

      (4)涼干后放入清潔液內(nèi)浸泡24小時(shí);

      (5)自來水沖洗干凈,最后用蒸餾水洗2次;

      (6)把器皿置于有孔架上涼干或溫箱中烤干,備用。

      清潔液的配制:重鉻酸鉀+濃硫酸+蒸餾水

      (三)新購載玻片的處理:

      高質(zhì)量的已經(jīng)處理,可直接使用。對不凈的可放入清潔液浸泡5~12小時(shí)以上,流水沖洗,蒸餾水清洗,95%酒精浸泡,擦干備用

      (四)新購蓋玻片的清洗:

      投入清潔液中浸泡1~2小時(shí)左右,經(jīng)流水反復(fù)沖洗,蒸餾水洗,后投入95%酒精浸泡數(shù)分鐘,再轉(zhuǎn)入純酒精中浸泡,使用前用潔凈綢布擦干或在溫箱中烤干備用。

      (五)舊載玻片的清洗:

      用洗衣粉液煮沸30分鐘。

      (六)舊蓋玻片的清洗:

      先置入1%洗衣粉液中煮沸1分鐘,離火,待沸騰水泡平下后,再行煮沸,反復(fù)2~3次即可?;鶎俞t(yī)院病理科(室)應(yīng)完成:

      1、常規(guī)石蠟切片:按常規(guī),在3~5天發(fā)出報(bào)告;

      2、冷凍切片或快速石蠟切片:術(shù)中快速病理診斷。

      3、常用特殊染色和免疫組織化學(xué)檢查:據(jù)臨床病理診斷的需要。

      4、診斷細(xì)胞學(xué)檢查:完成臨床脫落細(xì)胞學(xué)及穿刺組織涂片檢查。

      5、尸體剖驗(yàn)檢查:與臨床醫(yī)師密切結(jié)合,開展新生兒及成人尸檢,提高診斷治療水平。

      第三篇:病理實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)備建設(shè)方案

      法醫(yī)病理實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)備建設(shè)方案

      1、生物組織機(jī)脫水機(jī)

      完美的標(biāo)本處理和最安全標(biāo)本保護(hù)。密封可靠的工程設(shè)計(jì)、創(chuàng)新的精密機(jī)械、用戶友好的操作界面。程序編寫簡單,9套程序任意設(shè)計(jì),令最嚴(yán)謹(jǐn)?shù)挠脩粲稳杏杏唷kp倍標(biāo)本處理的擴(kuò)充潛力--同一儀器上增加一個(gè)籃筐即可增加一倍的標(biāo)本處理量。

      2、生物組織石蠟包埋機(jī)

      分體式獨(dú)立冷臺,溫度恒-5℃,可放70只樣品,也可用作切片前樣本預(yù)冷;自動控溫熔蠟臺,可獨(dú)立使用。

      3、生物組織切片機(jī)

      切片厚度、修樣厚度、切片計(jì)數(shù)電腦程控自動設(shè)定;快速修塊及自動回縮功能;切片范圍 :1-60 μm;標(biāo)本回縮 :220 μm;最大標(biāo)本尺寸(長 × 寬):20 ×55mm;一次性刀架、刀片。

      4、生物組織漂片機(jī)

      溫度控制精確,升溫快,自動恒溫調(diào)控。

      5、生物組織烘片機(jī)

      溫度控制精確,升溫快,自動控溫不熔蠟。

      6、生物組織染色機(jī)

      全自動染色流程;每小時(shí)1000片;27個(gè)液體缸;自動清洗樣品,避免污染。

      7、生物顯微鏡 三目顯微鏡、平場相差物鏡5X、10X、20X、40X、100X(油鏡)、10X/25大視野目鏡、聚光鏡、12V 100W高亮度光源、透射光大載物臺、0.63倍C型圖像接口。

      8、攤片機(jī)/ 烘片機(jī)

      電子控溫,溫度自動調(diào)節(jié),便于清理。

      9、病理圖像分析軟件

      先進(jìn)的法醫(yī)病理圖片采集處理設(shè)備;標(biāo)準(zhǔn)的法醫(yī)學(xué)數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析軟件;強(qiáng)大的法醫(yī)學(xué)資料檢索功能;完善的圖文報(bào)告系統(tǒng),亦便于進(jìn)行案例遠(yuǎn)程會診分析。

      10、實(shí)驗(yàn)室常規(guī)工具及試劑一批

      一次性刀片、載玻片、蓋玻片、包埋盒、存片盒、曬片盒、染色架、脫水盒、取材刀、切片專用石蠟;香柏油、二甲苯、無水酒精、95%酒精、蘇木素、伊紅、丙酮。

      11、玻片存儲柜、臘塊儲存柜、病理取材柜

      北京畢思特聯(lián)合科技有限公司有多年的產(chǎn)品專業(yè)經(jīng)驗(yàn),擁有專業(yè)病理工程技術(shù)人員和維修工程師,和徠卡公司共同負(fù)責(zé)儀器的安裝及進(jìn)行技術(shù)培訓(xùn)以及售后儀器的保養(yǎng)和維修服務(wù),目前,畢思特公司已經(jīng)成功的在公檢法部門建立了大批現(xiàn)代化的法醫(yī)病理實(shí)驗(yàn)室,如:北京市高級人民法院、廣東省公安廳病理室、廣州刑科所病理室、海南省公安廳病理室、深圳市檢察院病理室、湖南省公安廳病理室、珠海市公安局病理室等,這些單位利用先進(jìn)的精密儀器設(shè)備在辦案中取得了巨大的成功。

      北京畢思特聯(lián)合科技有限公司 網(wǎng)址:http://004km.cn

      第四篇:病理檢驗(yàn)技術(shù)試題

      一、名詞解釋: 1.病理檢驗(yàn)技術(shù) 2.診斷細(xì)胞學(xué) 3.常規(guī)染色 4.核異質(zhì)細(xì)胞 5.媒染劑

      二、填空: 1.常用的組織切片法有____、____、____、樹脂包埋切片法、碳蠟切片法、塑料包 埋切片法。2.染色的物理作用有 _________、_____________、_____________。3.組織固定的常用方法有___、____、___________和 ___________。4.診斷細(xì)胞學(xué)根據(jù)細(xì)胞標(biāo)本來源的不同分為______和______。

      5.細(xì)胞學(xué)制片的方法有 _________、____________、___________、__________。

      6.常規(guī)石蠟切片制作的程序是取材、_______、固定后處理、___、____、浸蠟、___ _、切片、貼片等。

      三、單項(xiàng)選擇(選擇最佳答案): 1.優(yōu)質(zhì)切片的先決條件是 A 固定 B 染色 C 透明 D 切片

      2.下列哪種溶液被推薦為病理標(biāo)本的首選固定液

      A 10%福爾馬林液 B 中性緩沖甲醛液 C 酒精 D Zenker固定液 3.配制中性緩沖甲醛液最好用 A 蒸餾水 B 自來水 C 磷酸鹽 D 醋酸 4.常用的組織石蠟切片的透明劑是 A 乙醇 B 丙酮 C 乙酸 D 二甲苯 5.固定的目的下列哪項(xiàng)正確

      A 增加組織硬度 B 防止細(xì)胞自溶 C 凝固細(xì)胞內(nèi)物質(zhì) D 以上都對 6.最常用的石蠟切片機(jī)是

      A 骨組織切片機(jī) B 冰凍切片機(jī) C 旋轉(zhuǎn)式切片機(jī) D 超薄切片機(jī) 7.具有劇毒作用的固定劑是

      A 重鉻酸鉀 B 四氧化鋨 C 鉻酸 D 苦味酸 8.常用于脫鈣的酸類是 A 硝酸 B 硫酸 C 醋酸 D 磷酸

      9.下列哪項(xiàng)不是脫落細(xì)胞涂片常用的固定液

      A 丙酮 B 95%乙醇 C 10%福爾馬林 D 乙醚酒精固定液 10.在常規(guī)制片中(HE染色)細(xì)胞核的染色原理正確的是

      A 細(xì)胞核帶負(fù)電荷,呈酸性,易與帶正電荷的蘇木素酸性染料結(jié)合而染色 B 細(xì)胞核帶負(fù)電荷,呈堿性,易與帶正電荷的蘇木素堿性染料結(jié)合而染色 C 細(xì)胞核帶負(fù)電荷,呈酸性,易與帶正電荷的蘇木素堿性染料結(jié)合而染色 D 細(xì)胞核帶正電荷,呈堿性,易與帶正電荷的蘇木素堿性染料結(jié)合而染色 11.組織石蠟切片過程中透明的主要作用

      A 脫去多余水分 B 固定作用 C 媒介作用 D 使組織變硬 12.變移上皮主要分布在下列哪一器官 A 支氣管 B 氣管 C 膀胱 D 胸腔 13.福爾馬林色素的形成是由于

      A 還原作用 B 氧化作用產(chǎn)生蟻酸與血紅蛋白結(jié)合 C 與粘液蛋白結(jié)合 D 與核酸結(jié)合 14.HE 染色中呈藍(lán)色的成份是

      A 紅細(xì)胞 B 細(xì)胞核 C 嗜酸性顆粒 D 細(xì)胞質(zhì) 15.用過碘酸雪夫染色法(PAS 法)把糖原染成 A 紅色 B 藍(lán)色 C 紫色 D 黃色 16.石蠟包埋時(shí)應(yīng)注意

      A 有無特殊包埋面 B 石蠟中有雜物應(yīng)過濾后使用 C 包埋溫度不宜過高 D 以上都對

      17.在常規(guī) HE 染色中細(xì)胞質(zhì)的著色原理是 A 細(xì)胞質(zhì)著色與 PH 值無關(guān)

      B PH調(diào)至大于蛋白質(zhì)等電點(diǎn),被帶負(fù)電荷染料染色 C PH調(diào)至蛋白質(zhì)等電點(diǎn)時(shí)染色

      D PH調(diào)至胞質(zhì)等電點(diǎn)以下,帶正電荷,被帶負(fù)電荷染料染色 18.有關(guān)糖原的固定說法錯(cuò)誤的是 A 盡可能選取小塊新鮮組織 B 注意多次更換酒精混合固定液 C 用單一乙醇固定效果最佳

      D 固定不透、不均時(shí),表現(xiàn)為 “流水樣人工假象” 19.冷凍切片的注意事項(xiàng)錯(cuò)誤的是 A 一般來說骨組織不能做冷凍切片 B 送檢組織盡可能新鮮

      C 做冷凍切片的組織,切片前可用酒精固定 D 組織塊復(fù)溫時(shí)應(yīng)在 37℃加溫速融

      20.細(xì)胞學(xué)診斷方式的間接診斷法中最常用的是 A 二級法 B 四級法 C 三級法 D 巴氏五級診斷法 21.酒精進(jìn)行脫水的一般順序是: A 70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、無水乙醇

      B 70%酒精、80%酒精、90%酒精、95%酒精、95%酒精、無水乙醇、無水乙醇 C 無水乙醇、無水乙醇、95%酒精、95%酒精、90%酒精、80%酒精、70%酒精、D 無水乙醇、95%酒精、90%酒精、80%酒精、70%酒精 22.Wathin-Starry 胃幽門螺桿菌染色法,螺桿菌顯示什么顏色 A 棕黑色 B 紅色 C 綠色 D 藍(lán)色

      23.Mallory 磷鎢酸蘇木素染色法主要用于顯示 A 橫紋肌 B 膠原纖維 C 彈力纖維 D 網(wǎng)狀纖維

      24.病理大體標(biāo)本脂肪組織染色,配制蘇丹染料所用的乙醇濃度為 A 30%B 50%C 95%D 70% 25.在巴氏染色的宮頸/陰道涂片中高度可疑的惡性細(xì)胞,應(yīng)診斷為幾級 A V B Ⅲ C Ⅳ D II 26.乙型肝炎表面抗原(HBsAg)有豐富的雙硫鍵, 被氧化形成磺酸后, 與染色液產(chǎn)生較強(qiáng)的親和力 而著色,使用的氧化液是

      A 過碘酸 B 酸性高錳酸鉀 C 磷酸 D 鉻酸 27.蘇木精成為蘇木紅要經(jīng)過 A 氧化 B 媒染 C 分化 D 藍(lán)化

      28.淋球菌是革蘭陰性菌,在革蘭(Gram)染色中呈 A 紅色 B 藍(lán)色 C 紫色 D 綠色 29.常規(guī) HE 染色中分化液的配制

      A 75%酒精 100ml 加 5 ml鹽酸 B 75%酒精 99ml 加 l ml鹽酸 C 無水乙醇 99ml 加 l ml鹽酸 D 50%酒精 95ml 加 5 ml鹽酸 30.在組織染色過程中促染劑的作用

      A 有促進(jìn)染色能力,對染料和組織都有親和力 B 直接與組織結(jié)合 C 直接與染料結(jié)合 D 增強(qiáng)染料的染色能力 , 不參與染色反應(yīng)

      四、簡答題: 1.簡述合格切片的標(biāo)準(zhǔn)? 2.簡述常規(guī)石蠟切片 HE 染色的程序? 3.細(xì)胞學(xué)檢查的優(yōu)缺點(diǎn)有哪些? 4.單個(gè)癌細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)主要表現(xiàn)在細(xì)胞核上,可歸納為哪五大特征?

      第五篇:病理實(shí)驗(yàn)室組建方案

      病理實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境污染、室內(nèi)有毒物質(zhì)危害一直是困擾病理科的難題。改善基層醫(yī)院病理實(shí)驗(yàn)室的工作環(huán)境,加強(qiáng)對工作人員的安全防護(hù),是一個(gè)迫在眉睫的問題。

      基層醫(yī)院病理實(shí)驗(yàn)室用房現(xiàn)狀不少基層醫(yī)院病理實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)在規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化上差距頗大。有些醫(yī)院的病理科只有一間不到40平方米的屋子,取材、制片、診斷、檔案保存等全部在一起,沒有布局上的分區(qū)。工作環(huán)境的空氣中彌漫著甲醛、二甲苯、汽溶膠等大量的有害氣體。

      按照我國實(shí)驗(yàn)室的建立標(biāo)準(zhǔn),病理實(shí)驗(yàn)室布局應(yīng)明確分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū),污染區(qū)和半污染區(qū)之間設(shè)立緩沖間;實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有足夠的存儲空間擺放物品以方便使用,在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域外還應(yīng)有供長期使用的存儲空間;應(yīng)安裝獨(dú)立的送排風(fēng)系統(tǒng)以控制氣流方向和壓力梯度,確保氣流由清潔區(qū)流向污染區(qū),同時(shí)確保實(shí)驗(yàn)室空氣只能通過高效過濾后經(jīng)專用排風(fēng)管道排出等

      因此,基層醫(yī)院病理科至少應(yīng)有3間工作用房:診斷室、資料室(清潔區(qū))、實(shí)驗(yàn)室(半污染區(qū))和標(biāo)本取材室(污染區(qū))。

      病理實(shí)驗(yàn)室組建方案

      一、病理實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備

      1、取材類(取材臺、通風(fēng)柜、冷藏柜、蠟塊柜、切片柜、晾片柜)

      2、脫水類(組織脫水機(jī))

      3、包埋類(包埋機(jī)、冷臺、冰箱)

      4、切片類(石蠟切片機(jī)、冰凍切片機(jī))

      5、漂烘類(漂片儀、烘片儀、漂烘儀)

      6、染色類(組織染色機(jī)、免疫組化染色機(jī))

      7、閱片類(顯微鏡、病理圖文分析系統(tǒng))

      8、細(xì)胞類(離心機(jī)、制片機(jī)、快速混勻器)

      二、病理實(shí)驗(yàn)室常用耗材、試劑

      取材:取材刀、不銹鋼尺、天平稱、電子稱、福爾馬林溶液、大鑷子 脫水:脫水盒、福爾馬林溶液、乙醇、二甲苯、切片石蠟 包埋:不銹鋼包埋模、塑料包埋盒、冷凍包埋劑 切片:一次性刀片、大號毛筆、彎頭鑷子 漂片:載玻片、展片鑷子

      染色:免疫組化筆、晾片板、二甲苯、乙醇、蘇木素、鹽酸、伊紅 封片:蓋玻片、中性樹膠

      其他:定時(shí)鬧鐘、電熱吹風(fēng)機(jī)、涼片盒、切片存放柜、蠟塊存放柜

      三、房間設(shè)置安排

      1、取材室:取材臺、冷藏柜、組織脫水機(jī)、自動染色機(jī)、通風(fēng)柜

      2、技術(shù)室:包埋機(jī)、冷臺、石蠟切片機(jī)、漂烘儀、冰箱

      3、制片室:冰凍切片機(jī)、離心機(jī)、制片機(jī)、快速混勻器

      4、閱片室:顯微鏡、病理圖文系統(tǒng)

      5、檔案室:蠟塊存儲柜、切片存儲柜、晾片柜

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