第一篇：分子診斷學(xué)教學(xué)大綱

《分子診斷學(xué)》理論教學(xué)大綱(本科)編寫單位：臨床生物化學(xué)教研室

參考教材：《分子診斷學(xué)》，尹一兵主編，高等教育出《分子診斷學(xué)》教學(xué)大綱

課程編碼：版社，第1版，2007年

05290040 課程名稱：分子診斷學(xué)（Molecular Diagnose）學(xué)分:2.5 總學(xué)時(shí)：50學(xué)時(shí)

理論學(xué)時(shí)：38學(xué)時(shí) 實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)：12學(xué)時(shí) 先修課程要求：生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)免疫學(xué) 適應(yīng)專業(yè)：醫(yī)學(xué)檢驗(yàn) 教材： 1.尹一兵.分子診斷學(xué)，高等教育出版社，第1版，2007年1月； 2.查錫良.生物化學(xué)，人民衛(wèi)生出版社，第七版，2008年1月

一、課程在培養(yǎng)方案中的地位、目的和任務(wù) 分子診斷學(xué)是臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)的一個(gè)重要分支。是利用分子生物學(xué)技術(shù)來研究機(jī)體外源性和內(nèi)源性生物大分子和大分子體系的存在、結(jié)構(gòu)或表達(dá)調(diào)控的改變，從而為疾病診斷，病情監(jiān)測(cè)，藥物療效，預(yù)后判斷和疾病預(yù)防等多方面提供信息和理論依據(jù)。隨著分子生物學(xué)理論與技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用，分子診斷學(xué)成為當(dāng)代醫(yī)學(xué)的重要前沿領(lǐng)域，將在臨床檢驗(yàn)工作中逐步進(jìn)入主導(dǎo)地位。

二、課程的基本要求 了解分子診斷學(xué)性質(zhì)、任務(wù)、發(fā)展歷程；掌握有關(guān)分子診斷學(xué)的基本理論和基礎(chǔ)知識(shí)，重點(diǎn)掌握基因與基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與功能；真核生物和原核生物的基因表達(dá)調(diào)控的基本原理；掌握分子診斷學(xué)常用技術(shù)方法，著重掌握基因工程技術(shù)、PCR、分子雜交、核酸測(cè)序、生物芯片技術(shù)等分子生物學(xué)核心實(shí)驗(yàn)技術(shù)；了解分子生物學(xué)新技術(shù)及應(yīng)用、新進(jìn)展，并學(xué)習(xí)DNA提取、PCR基因克隆技術(shù)等基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作技能和實(shí)際動(dòng)手能力。

三、學(xué)時(shí)安排

（理論課

38學(xué)時(shí)）授課內(nèi)容

總學(xué)時(shí) 理論學(xué)時(shí) 實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí) 備注 緒論 2 基因組概論 2 8 基因表達(dá)調(diào)控 4 蛋白質(zhì)組學(xué) 2 生物大分子物質(zhì)的分離與純化 2 重組DNA技術(shù) 4 PCR 6 4 核酸測(cè)序技術(shù) 2 核酸分子雜交技術(shù) 2 生物芯片技術(shù) 2 生物信息學(xué)概論 4 其他分子診斷檢測(cè)技術(shù) 4 復(fù)習(xí)2 總計(jì) 50 38 12

四、考核 考核方式：理論考試筆試。成績構(gòu)成：理論考試,70%，實(shí)驗(yàn)和平時(shí)成績30%。

五、課程基本內(nèi)容 第一章 緒論 [目的要求] 1.了解分子診斷學(xué)的發(fā)展簡史 2.熟悉分子診斷學(xué)研究的主要內(nèi)容 3.熟悉臨分子診斷學(xué)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用 [講課時(shí)數(shù)] 2學(xué)時(shí) [教學(xué)內(nèi)容] 1.分子診斷學(xué)的性質(zhì)、任務(wù)和特點(diǎn) 2.分子診斷學(xué)的歷史、現(xiàn)狀及未來 3.分子診斷學(xué)的現(xiàn)狀 [教學(xué)方法]講授法 [教學(xué)手段]多媒體教學(xué) 第二章 基因組概論

[目的要求] 1.了解基因組學(xué)的發(fā)展及研究內(nèi)容 2.熟悉基因組計(jì)劃主要內(nèi)容 3.掌握基因與基因組概念 [講課時(shí)數(shù)] 2學(xué)時(shí) [教學(xué)內(nèi)容] 1.基因 2.基因組 3.基因組計(jì)劃 4.基因組學(xué) [教學(xué)方法]講授法 [教學(xué)手段]多媒體教學(xué) 第十三章 基因表達(dá)調(diào)控（生物化學(xué)）[目的要求] 1.熟悉基因表達(dá)調(diào)控的基本概念 2.熟悉基因表達(dá)調(diào)控的基本原理 3.熟悉原核生物和真核生物基因表達(dá)調(diào)節(jié)方式 [講課時(shí)數(shù)] 4學(xué)時(shí) [教學(xué)內(nèi)容] 1.基因表達(dá)調(diào)控的基本概念 2.基因表達(dá)調(diào)控的基本原理 3.原核生物基因表達(dá)調(diào)節(jié) 4.真核生物基因表達(dá)調(diào)節(jié) [教學(xué)方法]講授法 [教學(xué)手段]多媒體教學(xué) 第五章 蛋白質(zhì)組學(xué) [目的要求] 1.熟悉蛋白質(zhì)組學(xué)研究特點(diǎn)及研究內(nèi)容 2.熟悉蛋白質(zhì)組學(xué)主要技術(shù) 3.掌握蛋白質(zhì)組學(xué)基本概念 [講課時(shí)數(shù)] 2學(xué)時(shí) [教學(xué)內(nèi)容]

1.蛋白質(zhì)組學(xué)基本概念

2.蛋白質(zhì)組學(xué)研究特點(diǎn) 3.蛋白質(zhì)組學(xué)主要技術(shù) [教學(xué)方法]講授法 [教學(xué)手段]多媒體教學(xué) 第六章 核酸的分離與純化 [目的要求] 1.熟悉核酸分離與純化的設(shè)計(jì)與原則 2.熟悉常用基因組DNA、質(zhì)粒DNA和RNA分離與純化原理與方法 [講課時(shí)數(shù)] 2學(xué)時(shí) [教學(xué)內(nèi)容] 1.核酸分離與純化的設(shè)計(jì)與原則 2.基因組DNA的分離與純化 3.質(zhì)粒DNA的分離與純化 4.RNA的分離與純化 [教學(xué)方法]講授法 [教學(xué)手段]多媒體教學(xué) 第七章 重組DNA技術(shù) [目的要求] 1.了解重組DNA技術(shù)的臨床應(yīng)用 2.了解重組DNA技術(shù)常用載體 3.熟悉重組DNA技術(shù)的一般步驟 4.掌握限制性核酸內(nèi)切酶作用特點(diǎn)與重組DNA技術(shù)概念 [講課時(shí)數(shù)] 4學(xué)時(shí) [教學(xué)內(nèi)容] 1.重組DNA技術(shù)概念 2.重組DNA技術(shù)體系 2.基因組DNA技術(shù)常用載體 3.重組DNA技術(shù)一般操作步驟 4.重組DNA技術(shù)的應(yīng)用 [教學(xué)方法]講授法 [教學(xué)手段]多媒體教學(xué)

第八章 PCR [目的要求] 1.了解 PCR

技術(shù)的臨床應(yīng)用 2.了解熒光定量PCR 3.熟悉 PCR的設(shè)計(jì)及影響因素 4.掌握PCR反應(yīng)原理 [講課時(shí)數(shù)] 6學(xué)時(shí) [教學(xué)內(nèi)容] 1.PCR反應(yīng)原理 2.PCR的設(shè)計(jì)及影響因素 3.熒光定量PCR 4.PCR檢測(cè)技術(shù)的臨床應(yīng)用 [教學(xué)方法]講授法 [教學(xué)手段]多媒體教學(xué) 第十章 核酸測(cè)序技術(shù) [目的要求] 1.了解 DNA測(cè)序策略 2.了解DNA測(cè)序新技術(shù)及DNA自動(dòng)化測(cè)序 3.熟悉 Sanger雙脫氧鏈終止法原理與過程 4.熟悉化學(xué)測(cè)序法原理與過程 [講課時(shí)數(shù)] 2學(xué)時(shí) [教學(xué)內(nèi)容] 1.Sanger雙脫氧鏈終止法 2.化學(xué)測(cè)序法 3.DNA測(cè)序策略 [教學(xué)方法]講授法 [教學(xué)手段]多媒體教學(xué) 第九章 核酸分子雜交技術(shù)（2學(xué)時(shí)）[目的要求] 1.了解 液相核酸分子雜交 2.熟悉傳統(tǒng)的核酸分子雜交技術(shù)（Southern印跡、Northern印跡、原位雜交）。

3.熟悉常用探針標(biāo)記方法

4.掌握核酸分子雜交基本原理 [講課時(shí)數(shù)] 2學(xué)時(shí) [教學(xué)內(nèi)容] 1.核酸分子雜交的基本原理 2.核酸分子雜交常見探針與標(biāo)記 3.傳統(tǒng)核酸分子雜交技術(shù) [教學(xué)方法]講授法 [教學(xué)手段]多媒體教學(xué) 第十一章 生物芯片技術(shù) [目的要求] 1.了解 芯片實(shí)驗(yàn)室 2.熟悉基因芯片基本原理及技術(shù) 3.熟悉 蛋白質(zhì)芯片基本原理及技術(shù) [講課時(shí)數(shù)] 2學(xué)時(shí) [教學(xué)內(nèi)容] 1.基因芯片原理、技術(shù)與應(yīng)用 2.蛋白質(zhì)芯片原理、分類、技術(shù)與應(yīng)用 [教學(xué)方法]講授法 [教學(xué)手段]多媒體教學(xué) 第十三章 生物信息學(xué)概論 [目的要求] 1.了解 生物信息學(xué)的定義 2.了解重要生物信息數(shù)據(jù)庫 3.了解核酸數(shù)據(jù)分析與蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)分析 [講課時(shí)數(shù)] 4學(xué)時(shí) [教學(xué)內(nèi)容] 1.生物信息學(xué)的定義與發(fā)展歷史 2.數(shù)據(jù)庫檢索 3.核酸數(shù)據(jù)分析與蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)分析 [教學(xué)方法]講授法 [教學(xué)手段]多媒體教學(xué)

第十二章 其他分子診斷檢測(cè)技術(shù) [目的要求] 1.了解 基因變異檢測(cè)技術(shù) 2.了解脈沖電場(chǎng)凝膠電泳技術(shù) 3.了解分子影像技術(shù) 4.了解凋亡常用檢測(cè)方法 5.了解RNA干擾 [講課時(shí)數(shù)] 4學(xué)時(shí) [教學(xué)內(nèi)容] 1.基因變異檢測(cè)技術(shù)原理、技術(shù)與應(yīng)用 2.脈沖電場(chǎng)凝膠電泳技術(shù)原理、技術(shù)與應(yīng)用 3.分子影像技術(shù)原理、技術(shù)與應(yīng)用 4.凋亡常用檢測(cè)方法原理 5.RNA干擾 [教學(xué)方法]講授法 [教學(xué)手段]多媒體教學(xué)

第二篇：診斷學(xué)教學(xué)大綱-四川大學(xué)

四川大學(xué)華西臨床醫(yī)學(xué)院

診斷學(xué)教學(xué)大綱

（供口腔、法醫(yī)、預(yù)防、醫(yī)檢、婦幼、醫(yī)技、營養(yǎng)等）

四川大學(xué)華西臨床醫(yī)學(xué)院內(nèi)科教研室

二O一五年九月

目錄

前言……………………………………………………………………………………………… 緒論……………………………………………………………………………………………… 常見癥狀…………………………………………………………………………………………

一、發(fā)熱………………………………………………………………………………………

二、疼痛………………………………………………………………………………………

三、呼吸困難………………………………………………………………………………

四、咳嗽、咳痰、咯血……………………………………………………………………

五、水腫、心悸、紫紺……………………………………………………

六、腹瀉、腹痛……………………………………………………………………………

七、消化道出血………………………………………………………………………………

八、黃疽……………………………………………………………………………………… 問診、書寫病歷……………………………………………………………………………… 檢體診斷…………………………………………………………………………………………

一、基本檢查方法及一般狀態(tài)檢查………………………………………………………

二、頭、頸部檢查…………………………………………………………………………

三、胸廓、肺部檢查………………………………………………………………………

四、心、血管的檢查……………………………………………………………………

五、腹部檢查………………………………………………………………………………

六、生殖器、肛門、直腸、脊柱與四肢檢查……………………………………………

七、神經(jīng)系統(tǒng)檢查…………………………………………………………………………

八、病歷編寫及診斷方法概述…………………………………………………………… 器械檢查…………………………………………………………………………………………

一、心電圖檢查…………………………………………………………………………

二、超聲波檢查……………………………………………………………………………

三、實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)（檢驗(yàn)系）、血常規(guī)檢查（講、習(xí)）…………………………………

前言

一、診斷學(xué)是一門橋梁課，但它的內(nèi)容以及在整個(gè)教學(xué)計(jì)劃中的位置都更偏向?yàn)橐婚T臨床課，重點(diǎn)內(nèi)容包括：問診、檢體診斷、實(shí)驗(yàn)診斷、心電圖診斷、超聲診斷。其它部分，未列入教學(xué)大綱中的內(nèi)容，供學(xué)生自學(xué)參考。

二、診斷學(xué)總教學(xué)時(shí)數(shù)為90學(xué)時(shí)，其中檢體診斷60學(xué)時(shí)，心電圖檢查15學(xué)時(shí)，超聲波檢查6學(xué)時(shí)。實(shí)驗(yàn)診斷5-6學(xué)時(shí)，其中課堂講授36學(xué)時(shí)，臨床見習(xí)45學(xué)時(shí)，電教9學(xué)時(shí)。

三、在診斷學(xué)教學(xué)過程中，轉(zhuǎn)換角色，互相實(shí)踐，應(yīng)盡可能地多運(yùn)用電子模具及接觸臨床，參加實(shí)踐，以達(dá)到理論聯(lián)系實(shí)際的目的。要注意引導(dǎo)學(xué)生努力學(xué)習(xí)運(yùn)用辯證唯物主義的觀點(diǎn)、方法，去認(rèn)識(shí)問題、分析問題和解決問題。不斷提高獨(dú)立思考、分析和解決問題的能力。在本階段的教學(xué)中，通過專業(yè)理論學(xué)習(xí)與臨床實(shí)踐，使學(xué)生逐步掌握診斷疾病的基本理論，基本知識(shí)和基本技能，為進(jìn)一步學(xué)習(xí)各臨床課程打下基礎(chǔ)。

四、學(xué)習(xí)診斷學(xué)的要求：

1、學(xué)會(huì)問診了解常見癥狀的發(fā)生機(jī)理和臨床意義。

2、掌握檢體診斷的基本理論和基本方法，以及典型體征的發(fā)生機(jī)理與臨床意義。

3、熟悉實(shí)驗(yàn)診斷講授內(nèi)容的基本理論，臨床意義和應(yīng)用指征，并了解血液、尿液、糞便三項(xiàng)常用臨床檢驗(yàn)操作方法。

4、熟悉心電圖各波形產(chǎn)生的基本原理，初步掌握正常心電圖的各波形及各波的測(cè)量方法，并了解心電圖檢查的臨床應(yīng)用及其某些常見典型的異常心電圖表現(xiàn)。

5、熟悉超聲波檢查的基本原理及應(yīng)用范圍。

6、初步學(xué)會(huì)對(duì)各方面臨床資料進(jìn)行綜合、分析的方法。在教學(xué)過程中，逐步使學(xué)生具有獨(dú)立編寫完整的住院病歷和提出初步診斷的能力。

緒

論

《教學(xué)要求》闡述診斷學(xué)是應(yīng)用問診、體格檢查、化驗(yàn)室檢查及器械檢查等方法，進(jìn)行調(diào)查研究，達(dá)到正確認(rèn)識(shí)健康與疾病的一門課程。學(xué)習(xí)本課程，必須以辯證唯物主義的觀點(diǎn)為指導(dǎo)，發(fā)揚(yáng)“救死扶傷，實(shí)行革命的人道主義”的精神，全心全意為人民服務(wù)。

《教學(xué)內(nèi)容》

一、學(xué)習(xí)診斷學(xué)的指導(dǎo)思想。

二、診斷學(xué)在臨床醫(yī)學(xué)中的地位與作用。

三、祖國醫(yī)學(xué)對(duì)診斷學(xué)的貢獻(xiàn)。

四、診斷學(xué)的基本內(nèi)容：常見癥狀、問診、體格檢查，化驗(yàn)室檢查，心電圖檢查，超聲檢查，病歷編寫與診斷思維方法，并概要介紹診斷方法的新進(jìn)展。

五、學(xué)習(xí)診斷學(xué)的方法和要求?！督虒W(xué)時(shí)數(shù)》2學(xué)時(shí) 《教學(xué)方法》課堂講授

常 見 癥 狀

《教學(xué)目的與要求》

癥狀學(xué)是機(jī)體在病理生理學(xué)或病理解剖學(xué)改變的基礎(chǔ)上，病人主觀感受到的異常感覺。重點(diǎn)了解常見癥狀的臨床表現(xiàn)，啟示學(xué)生了解癥狀分析對(duì)診斷疾病的重要作用。要求學(xué)生認(rèn)識(shí)常見癥狀，并掌握其出現(xiàn)的原因，發(fā)生機(jī)理及臨床意義。

《教學(xué)內(nèi)容》：發(fā)熱、疼痛、呼吸困難、咳嗽與咯血、心悸、紫紺、水腫、腹瀉、腹痛消化道出血，黃疸。

一、發(fā)熱（自學(xué)）

（一）發(fā)熱的原因：

1、感染性發(fā)熱；

2、非感染性發(fā)熱。

（二）發(fā)熱的起病方式（急緩），過程和臨床常見的幾種熱型（稽留熱、弛張熱、間歇熱、不規(guī)則熱）。

二、疼痛（自學(xué)）

（一）在分析疼痛時(shí)應(yīng)注意：

1、疼痛的位置與傳播；

2、疼痛的特點(diǎn)與程度；

3、疼痛延續(xù)時(shí)間、頻度或間期；

4、誘發(fā)、加重或減輕的原因；

5、伴隨癥狀與體征。

（二）臨床常見幾種疼痛的特點(diǎn)：

1、頭痛

2、胸痛

3、腹痛

4、腰痛

5、關(guān)節(jié)肌肉痛

重點(diǎn)了解疼痛的病因、發(fā)生機(jī)理及特點(diǎn)。

三、呼吸困難

重點(diǎn)了解呼吸困難的病因、機(jī)理與臨床意義及表現(xiàn)：

·1·

（一）肺源性（呼氣性、吸氣性及混合性）；

（二）心源性（左心或右心功能不全）；

（三）其他原因（如中毒性、神經(jīng)精神性等）。

四、咳嗽、咳痰、咯血

（一）咳嗽的性質(zhì)、時(shí)間及伴隨癥狀；

（二）咳嗽與咳痰的原因及臨床表現(xiàn)；

（三）咯血的原因及臨床表現(xiàn)；

五、紫紺：

（一）定義；

（二）中心性紫紺和周圍性紫紺的特點(diǎn)和病因。

六、水腫

（一）病因、分類及特點(diǎn)；

（二）心源性水腫與腎病性水腫的鑒別要點(diǎn)。

七、心悸：常見的病因和發(fā)生機(jī)理。

八、腹瀉

（一）腹瀉的概念及發(fā)生機(jī)理；

（二）急性與慢性腹瀉的常見原因及特點(diǎn)。

九、消化道出血

（一）嘔血：

1、嘔血常見的病因；

2、嘔血與咯血的鑒別；

3、消化性潰瘍出血與肝硬化合并食管靜脈曲張破裂出血的鑒別。

（二）便血：便血的特點(diǎn)及臨床意義。

1、鮮血便；

2、柏油樣便。

十、黃疸

溶血性、阻塞性、肝細(xì)胞性黃疸的鑒別?！督虒W(xué)時(shí)數(shù)》4學(xué)時(shí)

《教學(xué)方法》課堂講授：呼吸困難、心悸、紫紺、水腫、[咯血，腹痛、黃疸、消化道出血，自學(xué)]。

結(jié)合臨床實(shí)習(xí)及典型病例示教，用理論聯(lián)系實(shí)際的教學(xué)方法，對(duì)常見癥狀進(jìn)行觀察、·2· 討論和分析。教材中的其他癥狀，供實(shí)習(xí)中結(jié)合臨床自學(xué)與參考。

問

診

《教學(xué)目的與要求》

問診是采集病史，了解病情發(fā)生發(fā)展的重要方法，是診斷疾病的第一步，因此講授時(shí)，要求學(xué)生充分認(rèn)識(shí)問診的重要性，并掌握問診的主要內(nèi)容與方法。

《教學(xué)內(nèi)容》

一、問診的重要意義

二、問診的方法及注意事項(xiàng)

三、問診的內(nèi)容：

（一）一般項(xiàng)目

（二）主訴

（三）現(xiàn)病史

（四）既往史、個(gè)人史、婚姻史、月經(jīng)及生育史、家庭史。

（五）各系統(tǒng)的問診要點(diǎn)，呼吸系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、泌尿生殖系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、造血系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)及代謝障礙性疾病。

《教學(xué)時(shí)數(shù)》，習(xí)3學(xué)時(shí)。

《教學(xué)方法》教師在見習(xí)課堂中講授:問診內(nèi)容、方法、病歷書寫格式及方法，并將舉例說明如何問診，寫病歷。

檢

體

診

斷

基本檢查方法及一般狀態(tài)檢查 《教學(xué)目的與要求》

一、掌握望診、觸診、叩診、聽診的基本方法。

二、熟悉一般狀態(tài)檢查內(nèi)容。正常及異常體征的臨床意義?！督虒W(xué)內(nèi)容》

一、望診、觸診、叩診的檢查方法。

·3·

二、性別、年齡及疾病的關(guān)系。

三、體溫（測(cè)量體溫的方法，正常范圍及變異，以及引起差錯(cuò)的原因）、呼吸（見肺部檢查）、脈搏及血壓（見血管檢查），并綜合分析上述四項(xiàng)內(nèi)容的臨床意義。

四、發(fā)育及營養(yǎng)的判斷方法，常見的意識(shí)障礙，精神狀態(tài)，不同疾病的特殊面容及表情、姿勢(shì)、體位（自動(dòng)體位、被動(dòng)體位、強(qiáng)迫體位）與疾病的關(guān)系。

五、皮膚的彈性、顏色、皮疹、出血點(diǎn)、瘀瘢、蜘蛛痣、水腫等的辨認(rèn)以及臨床意義。

六、淋巴結(jié)的檢查方法、分布及其變化的臨床意義。

七、頭頸部檢查。《教學(xué)目的與要求》

熟悉頭部、頸部的檢查順序與方法，并了解正常狀態(tài)和異常改變的臨床意義?！督虒W(xué)內(nèi)容》

一、頭顱外部一般檢查

二、眼、耳、鼻檢查

三、口腔檢查：唇、口腔粘膜、牙及牙齦、扁桃體、咽和腭、舌等的檢查及臨床意義。

四、頸部檢查：頸部活動(dòng)情況及外形檢查，甲狀腺及氣管位置檢查，頸靜脈怒張及靜脈或動(dòng)脈搏動(dòng)的臨床意義。

《教學(xué)時(shí)數(shù)》6學(xué)時(shí)，（示教1，實(shí)習(xí)5）。《教學(xué)方法》

一、通過示教進(jìn)行講授，然后學(xué)生相互檢查，反復(fù)練習(xí)檢查順序、方法及認(rèn)識(shí)正常狀態(tài)。

二、通過臨床實(shí)習(xí)，檢查病人，識(shí)別異常體征，并分析其臨床意義。

胸廓、肺部檢查

《教學(xué)目的與要求》

一、掌握望診、觸診、叩診、聽診四種基本方法在胸廓及肺部檢查中的應(yīng)用，通過相互檢查，能獲得較為準(zhǔn)確的檢查結(jié)果。

二、通過臨床實(shí)習(xí)，熟悉肺部異常體征，并分析其臨床意義?！督虒W(xué)內(nèi)容》

一、胸部常用的骨骼標(biāo)志、劃線及分區(qū)的意義。

·4·

二、胸廓：正常及病態(tài)胸廓。

三、肺部檢查。

（一）望診：肺葉在體表的投影，呼吸的類型，節(jié)律、深度的改變及其臨床意義。

（二）觸診：語顫的檢查方法，產(chǎn)生機(jī)理，正常胸部語顫的特點(diǎn)。

（三）叩診：叩診的方法及其注意事項(xiàng)，間接與直接叩診法，重叩診與輕叩診法。叩診音的種類：清音、過清音、鼓音、濁音及實(shí)音。肺界叩診法及臨床意義。

（四）聽診：

1、正常肺部呼吸音的種類（肺泡性呼吸音、支氣管性呼吸音、支氣管肺泡性呼吸音）、特點(diǎn)及分布。

2、病理性呼吸音及臨床意義，肺泡性呼吸音的增強(qiáng)、減弱或消失。支氣管性呼吸音，支氣管肺泡性呼吸音。

3、啰音：啰音的發(fā)生機(jī)理、分類、特點(diǎn)和臨床意義。濕性啰音（水泡音）：大、中、小水泡音，捻發(fā)音。干性啰音：哨笛音、鼾音。

4、胸膜摩擦音的發(fā)生機(jī)理、特點(diǎn)及臨床意義。

5、語音傳導(dǎo)：語音傳導(dǎo)的檢查方法及臨床意義。

（五）呼吸系統(tǒng)常見病的主要體征：大葉性肺炎，肺氣腫，胸腔積液等?！督虒W(xué)時(shí)數(shù)》12學(xué)時(shí)（課堂講授

4、實(shí)習(xí)6，電教2）《教學(xué)方法》

一、教師指導(dǎo)學(xué)生相互檢查，掌握檢查的順序和方法以及正常肺部體征。

二、在臨床實(shí)習(xí)中示教典型體征，使學(xué)生熟悉肺部各種異常體征。配合電子模擬人實(shí)習(xí)。

三、通過實(shí)習(xí)達(dá)到獨(dú)立寫出呼吸系統(tǒng)疾病問診及肺部檢查記錄。

心血管的檢查

《教學(xué)目的與要求》

一、能比較準(zhǔn)確地叩出心界。

二、掌握第一與第二心音產(chǎn)生的機(jī)理、鑒別要點(diǎn)，并了解其增強(qiáng)、減弱的臨床意義。

·5·

三、熟悉心臟雜音的產(chǎn)生機(jī)理及臨床意義，正確掌握其聽診要點(diǎn)，并能辨別收縮期及舒張期雜音。

四、熟悉常見心律失常的特點(diǎn)（心動(dòng)過速，心動(dòng)過緩，過早搏動(dòng)及心房顫動(dòng)）。

五、正確測(cè)量血壓，并了解其改變的臨床意義。

六、熟悉脈搏檢查方法及血管體征?！督虒W(xué)內(nèi)容》

一、心臟：

（一）望診

1、心前區(qū)外形

2、心尖搏動(dòng)：正常心尖搏動(dòng)的位置、強(qiáng)度、范圍及其改變的臨床意義。

3、心前區(qū)及其他部位搏動(dòng)的臨床意義。

（二）觸診

1、心尖搏動(dòng)的位置、強(qiáng)度、范圍、節(jié)律及其改變的臨床意義。

2、心前區(qū)震顫的原因、部位、時(shí)間（收縮期、舒張期及連續(xù)性）及其臨床意義。

（三）叩診

1、心臟叩診方法。

2、正常心臟濁音界及心臟濁音界改變的原因、特點(diǎn)及臨床意義。

3、心界各部的組成及胸部、腹部疾病對(duì)心濁音界的影響。

（四）聽診

1、各瓣膜聽診區(qū)的部位。

2、正常心音及其產(chǎn)生機(jī)理，第一、第二心音的鑒別方法。

3、心率與心律。

4、心音的變化。

（1）第一心音的強(qiáng)度、性質(zhì)、改變的原因及臨床意義。

（2）主動(dòng)脈瓣區(qū)及肺動(dòng)脈瓣區(qū)第二音增強(qiáng)、減弱或分裂的原因及臨床意義。

5、心臟雜音

（1）心臟雜音的產(chǎn)生機(jī)理。（2）分析雜音的注意點(diǎn)：

部位、性質(zhì)、雜音的時(shí)期（收縮期、舒張期及連續(xù)性）、強(qiáng)度（收縮期雜音的分級(jí)）及傳導(dǎo)方向。

6、心包摩擦音的產(chǎn)生原因、特點(diǎn)、臨床意義及其與胸膜摩擦音的區(qū)別。

·6·

二、血管：

（一）動(dòng)脈搏動(dòng)、脈率及脈律。

（二）脈搏的強(qiáng)弱、大小、血管緊張度與動(dòng)脈壁的情況。

（三）水沖脈及奇脈。

（四）毛細(xì)血管搏動(dòng)征。

（五）血管雜音及射槍音。

（六）動(dòng)脈血壓的測(cè)量方法及臨床意義。

三、循環(huán)系統(tǒng)常見病變的主要癥狀和體征：心功能不全、慢性風(fēng)濕性心瓣膜病等?！督虒W(xué)時(shí)數(shù)》12學(xué)時(shí)（課堂講授4，實(shí)習(xí)6，電教2）?！督虒W(xué)方法》

一、課堂講授后，學(xué)生互相檢查，反復(fù)練習(xí)心臟及血管的檢查方法。

二、通過臨床實(shí)習(xí)，由教師指導(dǎo)進(jìn)行心臟檢查，聽心音及心臟雜音，以電子模擬人實(shí)習(xí)為主。

三、通過臨床實(shí)習(xí)并結(jié)合電教（如心音及心臟雜音的錄音）逐步深入掌握心臟及血管常見的體征及其臨床意義。

四、實(shí)習(xí)后，寫出心血管檢查的記錄（包括病史及體征）。

腹 部 檢 查

《教學(xué)目的與要求》

一、掌握腹部檢查方法（重點(diǎn)為肝、脾觸診），了解體表劃線、分區(qū)與腹腔內(nèi)臟的對(duì)應(yīng)關(guān)系。

二、熟悉腹部常見體征及臨床意義?！督虒W(xué)內(nèi)容》

一、腹部的體表標(biāo)志及分區(qū)。

二、腹部檢查

（一）望診：

1、腹部外形；

2、呼吸運(yùn)動(dòng)；

3、腹壁靜脈曲張；

·7·

4、蠕動(dòng)波；

5、皮膚及其他

（二）觸診：

1、觸診方法；

2、觸診內(nèi)容：腹壁緊張度，腹部壓痛、反跳痛、包塊及肝、膽、脾、腎的觸診。

（三）叩診：

1、肝啤叩診及腎區(qū)叩擊痛；

2、移動(dòng)性濁音及波動(dòng)感。

（四）聽診：

1、腸鳴音；

2、振水音；

3、血管雜音。

三、腹部常見病的主要癥狀及體征：消化性潰瘍、肝硬化腹水、腹膜炎?！督虒W(xué)時(shí)數(shù)》11學(xué)時(shí)（課堂講授

3、示教

1、實(shí)習(xí)5，電教2）《教學(xué)方法》

一、課堂講授后，教師示教檢查方法，然后在教師指導(dǎo)下相互檢查，練習(xí)檢查手法。

二、通過臨床實(shí)習(xí)，觀察腹部異常體征的表現(xiàn)，在病情允許的情況下，指導(dǎo)學(xué)生親手檢查。配合電子模擬人實(shí)習(xí)。

生殖器、肛門、直腸、脊柱與四肢檢查

《教學(xué)目的與要求》

了解肛門、直腸檢查的重要性，熟悉脊柱，四肢的檢查方法及病理改變的臨床意義?！督虒W(xué)內(nèi)容》

一、生殖器、肛門和直腸檢查，以講為主。

二、脊柱：正常曲度、畸形、壓痛和叩擊痛、運(yùn)動(dòng)功能障礙。三、四肢：肢體的位置與形態(tài)異常、運(yùn)動(dòng)障礙、關(guān)節(jié)病變、下肢靜脈曲張?！督虒W(xué)時(shí)數(shù)》與腹部檢查同時(shí)進(jìn)行。

·8· 《教學(xué)方法》由教師示教脊柱、四肢的檢查方法，學(xué)生相互檢查。

神經(jīng)系統(tǒng)檢查

《教學(xué)目的與要求》

一、了解神經(jīng)系統(tǒng)檢查的內(nèi)容及方法，（感覺、運(yùn)動(dòng)及植物神經(jīng)功能的檢查）。

二、顱神經(jīng)：十二對(duì)顱神經(jīng)，重點(diǎn)掌握面神經(jīng)和舌下神經(jīng)的中樞性損害和周圍性損害的特點(diǎn)。

三、掌握神經(jīng)反射的檢查方法及臨床意義?！督虒W(xué)內(nèi)容》

一、簡要講授感覺神經(jīng)、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)及植物神經(jīng)功能檢查的臨床意義。檢查方法由學(xué)生自學(xué)參考。

二、簡要講授神經(jīng)反射的檢查方法及病理反射的臨床意義。

（一）淺反射：腹壁反射，提睪反射。

（二）深反射：二頭肌反射、三頭肌反射、橈骨膜反射、膝反射、跟腱反射。

（三）病理反射： 1.錐體束征。

（1）跖反射（babinski征）及與其臨床意義相同的奧本海姆（Oppenheim）征、戈?duì)柕牵℅ordon）征、、查多克（Chaddock）征。

（2）霍夫曼（Hoffmann）征（3）陣攣：髕陣攣及踝陣攣。

2、腦膜刺激征：（1）頸項(xiàng)強(qiáng)直

（2）克尼格（Kernig）征。（3）布魯辛斯基（Brudzinski）征

3、拉塞格（Lasegue）征。

《教學(xué)時(shí)數(shù)》4學(xué)時(shí)（示教

1、實(shí)習(xí)2，電教1）《教學(xué)方法》

一、簡要介紹感覺神經(jīng)、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)及植物神經(jīng)功能檢查的臨床意義。

二、介紹神經(jīng)反射的檢查方法及病理反射陽性時(shí)的臨床意義。

·9·

三、在教師指導(dǎo)下，學(xué)生相互練習(xí)檢查方法。

四、示教病理反射、指導(dǎo)學(xué)生檢查，結(jié)合臨床分析陽性時(shí)的臨床意義。

五、通過電教，了解異常神經(jīng)系統(tǒng)檢查方法及臨床意義。

病歷編寫及診斷方法概述

《教學(xué)目的與要求》

一、使學(xué)生了解，病歷具有臨床診治疾病、教學(xué)、科研、法律依據(jù)等方面的重要意義。要求學(xué)生必須以認(rèn)真負(fù)責(zé)、實(shí)事求是的態(tài)度編寫病歷，能獨(dú)立寫出格式正確、文字通順，字體清楚，符合實(shí)際的病歷。

二、結(jié)合臨床實(shí)踐，培養(yǎng)學(xué)生對(duì)診斷的綜合分析能力，使學(xué)生熟悉癥狀、體征的現(xiàn)象與本質(zhì)、共性與個(gè)性、局部與整體、主要矛盾與次要矛盾，形態(tài)與功能的關(guān)系。了解診斷步驟，逐步掌握診斷過程的思維方法。

《教學(xué)內(nèi)容》

一、診斷步驟和思維方法。

（一）資料的收集、整理與分析。

（二）作出初步診斷。

二、病歷編寫。

（一）病歷的重要性。

（二）病歷編寫中注意的事項(xiàng)。

（三）住院病歷的格式及項(xiàng)目?！督虒W(xué)時(shí)數(shù)》9學(xué)時(shí)（示教3，實(shí)習(xí)6）

《教學(xué)內(nèi)容》在臨床實(shí)習(xí)中，認(rèn)真采集病史，進(jìn)行細(xì)致的體格檢查，按正規(guī)格式編寫出2-3份完整的病歷。教師修改后討論，指出病歷編寫中存在的問題，為臨床各科實(shí)習(xí)奠定良好的基礎(chǔ)，全身體格檢查錄像。

心電圖檢查

·10·

《教學(xué)目的與要求》

一、熟悉正常心電圖各波的圖形、正常值。

二、熟悉心電圖檢查的臨床應(yīng)用范圍及臨床意義。

三、熟悉幾種常見異常心電圖的特征?！督虒W(xué)內(nèi)容》

一、簡述心電圖產(chǎn)生的原理及常用導(dǎo)聯(lián)。

二、心電圖的各個(gè)波段、波形的測(cè)量法及其正常值。

三、心電圖的臨床應(yīng)用。

四、扼要介紹幾種常見異常心電圖的特征。

（一）左/右心房、心室肥大。

（二）期前收縮（房性、室性）。

（三）心房撲動(dòng)、心房顫動(dòng)。

（四）房室傳導(dǎo)阻滯（一度/二度I型/二度II型/高度/三度）。

（五）WPW預(yù)激綜合癥。

（六）左/右束支傳導(dǎo)阻滯。

（七）心肌梗死。（重點(diǎn)學(xué)習(xí)心肌梗死部位及時(shí)相的判斷方法）《教學(xué)時(shí)數(shù)》15學(xué)時(shí)，（課堂講授6，實(shí)習(xí)9。）《教學(xué)方法》

一、利用教具講授心電圖的產(chǎn)生、描記方法及導(dǎo)聯(lián)等。

二、采取邊講解、邊看心電圖、邊討論和解答問題的方式進(jìn)心電圖的測(cè)量及幾種異常心電圖的教學(xué)。

三、學(xué)生獨(dú)立閱讀及測(cè)量正常或大致正常心電圖，并寫出報(bào)告，交教師批閱。

超 聲 波 檢 查

《教學(xué)要求》

一、了解超聲診斷的原理，B型、M型檢查方法及其臨床應(yīng)用的范圍和價(jià)值。

二、了解肝占位性病變、膽囊和腎臟常見疾患以及妊娠的典型圖象。

三、了解心臟內(nèi)部結(jié)構(gòu)的聲象圖、瓣膜病、心包積液、先天性心血管畸形的典型圖象。

·11· 《教學(xué)內(nèi)容》

一、超聲診斷的物理基礎(chǔ)，基本診斷原理，A、B、M、D各型超聲檢查的特點(diǎn)。

二、超聲波的臨床應(yīng)用。

（一）肝膽疾患

（二）腎臟疾患

（三）妊娠聲象圖

（四）正常心臟聲象圖

（五）瓣膜病、心包疾患、心臟腫瘤、先天性心血管畸形?！督虒W(xué)時(shí)數(shù)》4學(xué)時(shí)（課堂講授4學(xué)時(shí)）《教學(xué)方法》

一、講解超聲診斷的基本原理，A、B、M、D各型超聲檢查法的特點(diǎn)。

二、講解各系統(tǒng)常見疾病超聲的圖象特點(diǎn)及其診斷價(jià)值。

三、課堂講解時(shí)充分利用幻燈片和典型病例進(jìn)行講解，輔以典型病例錄象示教。

實(shí)

驗(yàn)

診

斷

[教學(xué)目的與要求] 掌握 ：

實(shí)驗(yàn)診斷的定義，診斷性實(shí)驗(yàn)的選擇與評(píng)價(jià)，以臨床思維方式應(yīng)用實(shí)驗(yàn)診斷項(xiàng)目。

熟悉

： 實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)的定義及工作范圍。了解 實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)發(fā)展現(xiàn)狀及未來。[教學(xué)內(nèi)容] 實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)的基本概念、主要內(nèi)容和應(yīng)用范圍

實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)的現(xiàn)狀及進(jìn)展

實(shí)驗(yàn)診斷的臨床應(yīng)用與評(píng)價(jià)

[自學(xué)內(nèi)容] 標(biāo)本的采集與處理

[教學(xué)時(shí)數(shù)] 講課2學(xué)時(shí)

[教學(xué)方法] 應(yīng)用多媒體進(jìn)行理論講解。

·12· “血常規(guī)檢查” [教學(xué)目的與要求]

熟悉： 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白測(cè)定及臨床意義；白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)及臨床意義；自動(dòng)血細(xì)胞分析的檢測(cè)參數(shù)及正常范圍。

了解：

白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類計(jì)數(shù)；紅細(xì)胞計(jì)數(shù)；血小板計(jì)數(shù)的測(cè)定方法

[教學(xué)內(nèi)容]

紅細(xì)胞常規(guī)檢查：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定；紅細(xì)胞比積及有關(guān)參數(shù)；紅細(xì)胞分布寬度；網(wǎng)織紅細(xì)胞。

白細(xì)胞常規(guī)檢查：白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類計(jì)數(shù)的測(cè)定及臨床意義。

血小板常規(guī)檢查：血小板數(shù)量及相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定及臨床意義。

全血細(xì)胞分析：自動(dòng)血細(xì)胞分析的方法；常見檢測(cè)參數(shù)、細(xì)胞直方圖、細(xì)胞分布圖及異常信息指示；全血細(xì)胞檢測(cè)的分析及臨床應(yīng)用。[實(shí)驗(yàn)內(nèi)容]

白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類計(jì)數(shù)；紅細(xì)胞計(jì)數(shù)；血小板計(jì)數(shù)。

[教學(xué)時(shí)數(shù)] 實(shí)驗(yàn)3學(xué)時(shí)

[教學(xué)方法] 1． 教師先講解教學(xué)內(nèi)容中的項(xiàng)目。2． 學(xué)生在教師指導(dǎo)下互檢練習(xí)。

·13·

第三篇：(醫(yī)學(xué)影像診斷學(xué)教學(xué)大綱

(<醫(yī)學(xué)影像診斷學(xué)》教學(xué)大綱

(供七年制影像專門化用)前言

由于影像技術(shù)和設(shè)備的迅速發(fā)展，應(yīng)用于臨床的影像手段已經(jīng)包括了x線、CT、MRI、核索成像技術(shù)、超聲，以及參與治療的介入放射技術(shù)。本課程重點(diǎn)以講授x線、CT、超聲學(xué)為主，扼要介紹MRI特點(diǎn)。介入放射學(xué)、核素成像另作安排。

本大綱采用2005年8月白人駒主編、人民衛(wèi)生出版社出版、供醫(yī)學(xué)影像學(xué)專業(yè)用的全國高等醫(yī)藥院校教材《醫(yī)學(xué)影像診斷學(xué)》(第2版)為藍(lán)本，結(jié)合本校及各系統(tǒng)專業(yè)授課教師的實(shí)際而編寫。

本課程的教學(xué)是在學(xué)生學(xué)習(xí)完“人體結(jié)構(gòu)”、“呼吸與循環(huán)模塊”、“消化模塊”、“骨骼與肌內(nèi)模塊”、“神經(jīng)學(xué)模塊”、“胚胎與生殖模塊”系統(tǒng)基礎(chǔ)模塊課程及內(nèi)、外、婦、兒部分臨床核心模塊等課程．而且完成了本科臨床實(shí)習(xí)后，在第6學(xué)年進(jìn)行的專科定向培養(yǎng)授課，在教學(xué)過程中強(qiáng)調(diào)聯(lián)系和印證各系統(tǒng)模塊的基礎(chǔ)理論知識(shí)，并密切聯(lián)系臨床課專業(yè)知識(shí)。重點(diǎn)介紹本專業(yè)的基礎(chǔ)理論、基本知識(shí)和基本技能即“三基”知識(shí)。

本課程以備系統(tǒng)放射學(xué)(x線、CT、MRI)和超聲學(xué)的正常表現(xiàn)、基本病變、常見疾病的 診斷與鑒別診斷為主要內(nèi)容。要求學(xué)生重點(diǎn)掌握“三基”的要求，強(qiáng)調(diào)全面觀察、系統(tǒng)分析的臨影像思維能力的鍛練，為學(xué)生從事醫(yī)學(xué)影像診斷專業(yè)打好良好的基礎(chǔ)。

教師在教學(xué)活動(dòng)中，必須貫徹小而精的原則，精講多看(圖像)，要充分發(fā)揮教導(dǎo)的主導(dǎo)作用，著重培養(yǎng)學(xué)生影像自學(xué)能力和影像思維能力。本學(xué)科屬形態(tài)學(xué)科．因此要重視形象教學(xué)和直觀教學(xué)，理論講授與適當(dāng)閱讀影像圖片相結(jié)合，還要充分利用視聽教具，以多媒體課堂授課和閱片見習(xí)為主要教學(xué)方式，避免抽象式的理論教授。同時(shí)在教學(xué)過程中，必須注意言教身教，教書育人，寓醫(yī)德于課堂教育中，促使學(xué)生在德育、智育的全面發(fā)展。

授課學(xué)時(shí)300(含x線、cT、MRI、超聲)，理論講授與實(shí)習(xí)l：1。根據(jù)各系統(tǒng)的篇幅·以 及臨床發(fā)病就診情況、教學(xué)片數(shù)量、、授課難點(diǎn)等因素，大致分配如下。放射學(xué)(260學(xué)時(shí))：總論4學(xué)時(shí)，呼吸系統(tǒng)52學(xué)時(shí)，循環(huán)系統(tǒng)32學(xué)時(shí)，乳腺4學(xué)時(shí)，骨關(guān)節(jié)48學(xué)時(shí)，消、泌、殖62學(xué)時(shí)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)36學(xué)時(shí)，五官頸部16學(xué)時(shí)，機(jī)動(dòng)6學(xué)時(shí)。超聲40學(xué)時(shí)。以上根據(jù)每學(xué)期的教學(xué)計(jì)劃、教師的特點(diǎn)，各部分教學(xué)學(xué)時(shí)可適當(dāng)調(diào)整。核醫(yī)學(xué)另作安排a

總

論(4學(xué)時(shí))【教學(xué)要求】

通過醫(yī)學(xué)影像診斷學(xué)總論的學(xué)習(xí)，在學(xué)習(xí)了影像技術(shù)學(xué)的基礎(chǔ)上，對(duì)不同成像技術(shù)的特點(diǎn) 有進(jìn)一步的理解，并了解各種影像技術(shù)在臨床中的應(yīng)用概況，同時(shí)了解醫(yī)學(xué)影像診斷原則和診斷步驟、影像報(bào)告書寫要點(diǎn)。

【教學(xué)內(nèi)容】

一、醫(yī)學(xué)影像診斷學(xué)的定義和發(fā)展概況。

二、不同成像技術(shù)的特點(diǎn)和l臨床應(yīng)用 1 x線圖像的特點(diǎn)和臨床應(yīng)用 2 cT圖像的特點(diǎn)和臨床應(yīng)片j 3 MRI圖像的特點(diǎn)和臨床應(yīng)用

二、不同成像技術(shù)和方法的比較及綜合應(yīng)用 1不同成像技術(shù)和方法的比較

2不同成像技術(shù)和方法的綜合應(yīng)用

三、醫(yī)學(xué)影像診斷原則和診斷步驟 l醫(yī)學(xué)影像診斷原則

2．醫(yī)學(xué)影像診斷步驟

四、正確書寫影像診斷報(bào)告書 【教學(xué)方法】

課堂講授。電腦幻燈中展示各種影像檢查圖片和有關(guān)示意圖、線圈，說明圖像的特點(diǎn)和臨床應(yīng)用概況。配以典型實(shí)例，講解診斷原則和步驟。

呼吸系統(tǒng)(52學(xué)時(shí))【教學(xué)要求】

一、了解呼吸系統(tǒng)的x線及cT檢查方法。

二、掌握呼吸系統(tǒng)正常影像解剖基礎(chǔ)及基本病變的x線和cT表現(xiàn)。

三、掌握呼吸系統(tǒng)常見病的x線和cT表現(xiàn)與診斷。

四、了解呼吸系統(tǒng)某些較少見病的x線表現(xiàn)?！窘虒W(xué)內(nèi)容】

一、了解胸部x線檢查方法、價(jià)值與限度

二、掌握胸部影像學(xué)解剖

三、胸部基本病變的x線表現(xiàn)

四、常見的x線表現(xiàn)與診斷

1、掌握慢性支氣管炎、支氣管擴(kuò)張、肺部斃霉菌性病變、肺結(jié)核、肺部腫瘤、以胸外傷、氣管支氣管異物的x線表現(xiàn)及診斷。

2、了解不常見疾病，如結(jié)締組織病的肺x線表現(xiàn)、原因不明肺部病變、造血系統(tǒng)及網(wǎng)狀內(nèi)質(zhì)系統(tǒng)病的肺部表現(xiàn)以及變態(tài)反應(yīng)引起的肺部病變。

3、掌握胸膜炎、腸胸膿腫及胸膜腫瘤等x線表現(xiàn)及診斷。

4、掌握縱隔腫瘤與囊腫及腫瘤樣病變的x線表現(xiàn)與診斷。

5、了解膈膨升、膈下膿腫、膈肌腫瘤的x線診斷。

6、了解胸癌術(shù)后改變及并發(fā)癥的x線診斷。

五、胸部cT診斷

1、胸部cT檢查應(yīng)用價(jià)值與限度。

2、胸部cT檢查方法。

3、正常胸部cT影像解剖。

4、常見病的cT表現(xiàn)與診斷。

①掌握縱隔常見病的cT表現(xiàn)與診斷。

②掌握肺癌、肺結(jié)核、肺炎、特發(fā)性間質(zhì)纖維化肺氣腫、肺囊腫、肺轉(zhuǎn)移瘤的cT表現(xiàn)。

@了解塵肺、結(jié)節(jié)病及肺血管病變的cT表現(xiàn)-

④熟悉肺門部、胸壁及胸膜常見病變的cT表現(xiàn)。

【教學(xué)方法】

課堂理論講授和閱片見。，電腦幻燈中展示典型病例圖片，配以扼要的文字說明加以展開講解。特別要注意病變圖像與正常圖像，以及不同病變影像的比較，培養(yǎng)學(xué)生閱片發(fā)現(xiàn)瘸灶的能力、診斷和鑒別診斷的能力。

循環(huán)系統(tǒng)(32學(xué)時(shí))【教學(xué)要求】

一、熟悉心臟大血管的x線檢查方法。

二、掌握心臟大血管正常x線表現(xiàn)。

三、掌握心臟各房室增大及肺循環(huán)改變的x線表現(xiàn)。

四、掌握常見心臟病的x線診斷。【教學(xué)內(nèi)容】

一、引言

二、熟悉檢查方法

1、普通x線檢查

2、造影檢查

三、掌握正常x線表現(xiàn)

1、不同體位正常心臟太血管的x線表現(xiàn)

2、肺門-和肺血管生理解剖結(jié)構(gòu)及x線表現(xiàn)

3、心臟大血管的持動(dòng)

4、心臟大血管的x線測(cè)量

四、掌握心臟大血管基本病變的x線表現(xiàn)

1、各房室增大

2、主要血管異常x線征象

3、肺循環(huán)改變

4、心臟移位和位置改變

五、掌握常見病的x線診斷

l、后得性心臟?。?/p>

風(fēng)濕性心臟病、冠心病、高血壓心、肺源性心臟病、心肌病、心先疾患、主動(dòng)脈疾病。

2、先天性心臟?。?/p>

房缺、室缺、動(dòng)脈導(dǎo)管未閉、肺動(dòng)脈狹窄、法魯氏四聯(lián)癥、先天性主動(dòng)脈異常?！窘虒W(xué)方法】

課堂理論講授和閱片見。，電腦幻燈中展示典型病例圖片，配以扼要的文字說明加以展開講解。特別要注意病變圖像與正常圖像，以及不同病變影像的比較，培養(yǎng)學(xué)生閱片發(fā)現(xiàn)病灶的能力、診斷和鑒別診斷的能力。

乳腺(4學(xué)時(shí))【教學(xué)要求】

一、了解乳腺鉬靶檢查意義、方法。

二、熟悉正常乳腺和常見乳腺疾病的x線表現(xiàn)。掌握泌尿系統(tǒng)x線解剖及生理。

三、了解乳腺CT/MRI。【教學(xué)內(nèi)容】

一、乳腺鋁靶檢查意義、方法。

二、乳腺的基本解剖，生理變化。

三、乳腺疾病的基本病x線表現(xiàn)

四、常見乳腺病x線診斷。

五、乳腺cT、MRJ概況 【教學(xué)方法】

課堂理論講授和閱片見習(xí)。電腦幻燈中展示典型病例圖片．配以扼要的文字說明加以展開講解。特別要注意不同年齡的乳腺圖像、病變圖像與正常圖像，以及不同病變影像的比較?！窘虒W(xué)要求】 消化系統(tǒng)(46學(xué)時(shí))

一、熟悉消化系統(tǒng)檢查方法。

二、了解胃腸道正常x線解剖及生理。

三、掌握胃腸道異常影像學(xué)表現(xiàn)。

四、掌握胃腸道疾病的x線診斷。

五、了解膽道系統(tǒng)的檢查方法，正常x線表現(xiàn)及常見病x線診斷。

六、了解肝、膽、胰、腺CT檢查基本方法、正常CT表現(xiàn)及常見病的CT診斷?！窘虒W(xué)內(nèi)容】

一、引言及消化道檢查方法。

二、掌握胃腸道正常x線解剖及生理。

三、胃腸道異常x線表現(xiàn)。

四、掌握胃腸道常見病的x線診斷與鑒別診斷及了解某些少見病的x線表現(xiàn)。

1、食管疾病的x線診斷，重點(diǎn)是食管腫瘤的x線診斷與鑒別診斷。

2、胃部疾病的x線診斷，重點(diǎn)是冒、十二指腸潰瘍、胃癌、惡性淋巴瘤及胃部術(shù)后改變及并發(fā)癥的x線診斷與鑒別診斷。

3、小腸疾病的x線診斷，重點(diǎn)是腸結(jié)核、小腸腫瘤的x線診斷。

4、結(jié)腸疾病的x線診斷，重點(diǎn)是潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸癌及結(jié)腸結(jié)核及結(jié)腸息肉的x線診斷。

5、了解消化道畸形及小兒胃腸疾病的x線診斷。

6、急腹癥的x線診斷、檢查方法、正常、異常x線表現(xiàn)及常見病的x線診斷，重點(diǎn)是小腸梗阻的x線診斷與鑒別診斷。

7、了解腹腔、腹膜后腔的x線檢查方法，正常x線解剖及腹膜后感染及腫瘤的x線診斷。

8、了解膽道系統(tǒng)的x線檢查方法，正常x線解剖生理及異常x線表現(xiàn)，以及常見病的x線診斷。

9、了解肝、膽、胰、脾的cT檢查方法，正常及異常cT表現(xiàn)和常見病的cT診斷?！窘虒W(xué)方法】

課堂理論講授和閱片見。，電腦幻燈中展示典型病例圖片，配以扼要的文字說明加以展開講解。特別要注意病變圖像與正常圖像，以及不同病變影像的比較，培養(yǎng)學(xué)生閱片發(fā)現(xiàn)病灶的能力、診斷和鑒別診斷的能力。

泌尿系統(tǒng)(10學(xué)時(shí))【教學(xué)要求】

一、了解、掌握泌尿系統(tǒng)影像學(xué)檢查方法。

二、掌握泌尿系統(tǒng)x線解剖及生理。

二、掌握泌尿系統(tǒng)基本病變的x線表現(xiàn)。

四、掌握泌尿系統(tǒng)常見病的x線診斷?！窘虒W(xué)內(nèi)容】

一、引言及檢查方法

二、泌尿系統(tǒng)x線解剖與生理

三、泌尿系統(tǒng)基本病x線表現(xiàn)

四、常見病x線診斷

1、了解先天發(fā)育異常的x線表現(xiàn)

2、泌屎系結(jié)石

3、泌屎結(jié)核與慢性腎盂腎炎

4、泌屎系腫瘤

5、腎囊腫及其他病變

6、腎上腺疾病的x線診斷

7、了解泌尿系統(tǒng)的cT檢查方法，正常及異常cT表現(xiàn)和常見病的cT診斷?！窘虒W(xué)方法】

課堂理論講授和閱片見。，電腦幻燈中展示典型病例圖片，配以扼要的文字說明加以展開講解。特別要注意病變圖像與正常圖像，以及不同病變影像的比較，培養(yǎng)學(xué)生閱片發(fā)現(xiàn)病灶的能力、診斷和鑒別診斷的能力。

生殖系統(tǒng)(6學(xué)時(shí))【教學(xué)要求】

一、了解婦科的影像學(xué)檢查方法及適應(yīng)癥。

二、了解女性生殖器官正常影像學(xué)表現(xiàn)。

三、掌握常見婦科疾病的影像學(xué)診斷。

四、了解宮內(nèi)節(jié)育器的x線檢查與診斷。

五、了解男性生殖系統(tǒng)的影像學(xué)檢查與正常表現(xiàn)及常見病的診斷?！窘虒W(xué)內(nèi)容】

一、影像學(xué)檢方法及適應(yīng)癥，與禁忌癥

1、平片

2、子宮輸卵管造影術(shù)

3、盆腔空氣造影

4、盆腔淋巴造影

5、cT檢查

二、女性生殖器官正常影像學(xué)表現(xiàn)

1、平片表現(xiàn)

2、子宮輸卵管造影正常表現(xiàn)

3、盆腔充氣造彤正常表現(xiàn)

4、盆腔淋巴造影1E常表現(xiàn)

5、正常cT表現(xiàn)

三、常見病影像學(xué)診斷

l、先天性發(fā)育異常

2、非特異性炎癥及子宮輸卵管內(nèi)膜結(jié)核

3、子宮、卵巢良惡性腫瘤

4、子宮內(nèi)節(jié)育器的x線檢查與診斷

5、男性生殖系統(tǒng)x線、cT檢查方法與正常cT表現(xiàn)及常見病的cT診斷。

【教學(xué)方法】

課堂講授。電腦幻燈中展示典型病例cT圖片，配以掘要的文字說明。特別要注意病變 圖像與正常圖像的比較，培養(yǎng)學(xué)生聞片發(fā)現(xiàn)病灶的能力和初步的鑒別診斷能力。

骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)(48學(xué)時(shí))【教學(xué)要求】

一、了解骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)的影象檢查方法。

二、掌握骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)的正常影象學(xué)表現(xiàn)。

三、掌握骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)基本病變的影象學(xué)表現(xiàn)

四、掌握化膿性骨髓炎、骨關(guān)節(jié)結(jié)核、腫瘤及腫瘤樣病變、代謝性骨痛、慢性骨病等常見 病的典型x線、cT及MRl表現(xiàn)。

五、熟悉影象學(xué)分析“九項(xiàng)要點(diǎn)”在骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)疾病分析中的應(yīng)用 了解如何綜合分析臨床影象學(xué)所見的完成診斷，訓(xùn)練診斷思維方法。【教學(xué)內(nèi)容】

一、引言和檢查方法

(一)x線CT、MR／檢查在骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)的效用和限度。

(二)骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)的影象檢查方法

1．x線檢查

(1)普通x線檢查

1)通透視

2)普通攝片：正但6位

(2)特殊x檢查

3)體層攝影

4)放大攝影

5)血管造影

6)關(guān)節(jié)造影

CT檢查

MR]檢查

二．骨關(guān)節(jié)正常x線解剖、變異

骨的結(jié)構(gòu)

骨的成分

骨分類(按骨的結(jié)構(gòu))

骨分類(按骨的形式)

骨化形式

影響骨發(fā)育的因素

骨與關(guān)節(jié)正常x線表現(xiàn)(小兒骨骼)小兒骨骼正常表現(xiàn)的特點(diǎn) 小兒骨生長方式及注意事項(xiàng) 成人骨骼的正常表現(xiàn)

熒節(jié)的概念、構(gòu)成

脊柱正常解剖及x線表

常見的解剖變異

三．骨關(guān)l節(jié)基本病變的x線表現(xiàn)

骨骨質(zhì)軟化概念、x線表現(xiàn)、常見原閣、病變

質(zhì)骨質(zhì)破壞概念、x線表現(xiàn)、常見痛變疏松概念、x線表現(xiàn)、常見原因

骨質(zhì)增生概念、x線表現(xiàn)、常見病變

骨膜增生概念、x線表現(xiàn)、常見原因

骨內(nèi)與軟骨鈣化概念、x線表現(xiàn)、常見原因

骨質(zhì)壞死概念、x線表現(xiàn)、常見原因

礦物質(zhì)沉著病理改變、x線表現(xiàn)

骨骼大小改變、x線改變、原因

骨骼形態(tài)改變、x線改變、原剛

周圍軟組織改變、x線表現(xiàn)、原因

關(guān)節(jié)腫脹原因、x線表現(xiàn)

關(guān)節(jié)破壞概念、x線表現(xiàn)、意義

關(guān)節(jié)退行性改變概念、x線表現(xiàn)、原因

關(guān)節(jié)強(qiáng)直(骨性、纖維性)概念、x線表現(xiàn)、原因 四．骨關(guān)節(jié)外傷 骨關(guān)節(jié)外傷x線診斷目的、方法 骨折概念、臨床癥狀 骨折的x線表現(xiàn) 骨折類型

骨折對(duì)位對(duì)線關(guān)系概念

骨折愈合及愈合不照、骨折并發(fā)癥 關(guān)節(jié)脫位概念、分型、臨床表現(xiàn)

常見部位脫位的x線表現(xiàn)

先天性髖關(guān)節(jié)脫位病理、臨床表現(xiàn)x線表現(xiàn) 五．化膿性骨髓炎

化膿性骨髓炎病理基礎(chǔ)及蔓延途徑 急性化膿性骨髓炎臨床表現(xiàn) 急性化膿性骨髓炎x線表現(xiàn) 急性化膿性骨髓盎病愈征象 慢性化膿性骨髓炎病因及臨床表現(xiàn) 慢性化膿性骨髓炎x線表現(xiàn)

特征類型的化膿性骨髓炎病理x線表現(xiàn)Brode氏膿腫、Carre氏骨髓炎、化膿性脊柱炎 化膿性關(guān)節(jié)炎病聞及臨床表現(xiàn) 佬膿性關(guān)節(jié)炎的x線表現(xiàn) 六．骨關(guān)節(jié)結(jié)核

骨關(guān)節(jié)結(jié)核概述及臨床表現(xiàn)

長骨結(jié)核x線表現(xiàn)及鑒別診斷 短骨結(jié)核x線表現(xiàn)及鑒別診斷 關(guān)節(jié)結(jié)核概述、分型

常見關(guān)節(jié)結(jié)核(髖關(guān)節(jié)、臆關(guān)節(jié))臨床、x線分型 脊柱結(jié)核

七骨腫瘤與腫瘤樣痛變

骨腫瘤與腫瘤樣病變概述

骨軟骨瘤及骨巨細(xì)胞瘤病理、臨床及x線表現(xiàn) 骨瘤、內(nèi)生軟骨瘤、骨樣骨瘤診斷要點(diǎn)

骨母細(xì)胞瘤、軟骨母細(xì)胞瘤診斷要點(diǎn)

成骨肉瘤、軟骨肉j留、尤文氏肉瘤、纖維肉瘸的}臨床病理、x線表現(xiàn) 骨髓瘤和轉(zhuǎn)移瘤的診斷要點(diǎn)

骨囊腫、骨纖維結(jié)構(gòu)不良、動(dòng)脈瘤樣骨腫病理、x線診斷要點(diǎn) 八．代謝性及內(nèi)分泌性骨病的x線診斷要點(diǎn) 九．骨缺血性壞死、RA、AS、氟骨癥x線表現(xiàn) 骨缺血性壞死概述、診斷要點(diǎn)

股骨頭及脛骨結(jié)節(jié)缺血性壞死的x線診斷 強(qiáng)直性脊柱臨床及x線診斷 類風(fēng)邂性莢節(jié)炎x線診斷 氟骨癥x線診斷

十慢性骨病、血液病、軟組織病變等 退行性骨關(guān)節(jié)病的病理及x線診斷

剖傷性、癰風(fēng)性骨關(guān)節(jié)病的病理及x線診斷

組織細(xì)胞增生癥病理分型及x線診斷要點(diǎn)

血液痛的骨關(guān)節(jié)改變

軟組織病變 【教學(xué)方法】

課堂講授a電腦幻燈中展示典型病例cT圖片，配以扼要的文字說明。特別要注意病變 圖像與正常圖像的比較，培養(yǎng)學(xué)生閱片發(fā)現(xiàn)癰灶的能力和初步的鑒別診斷能力。

理論講授與閱片密切配臺(tái)，每一教學(xué)內(nèi)容的講授和實(shí)習(xí)．安排在同一單元時(shí)內(nèi)完成。課堂講授過程中盡量同時(shí)展示x線、cT、MRI示教片印證所講內(nèi)容，使理論知識(shí)與感性認(rèn)識(shí)結(jié)臺(tái)地授予學(xué)生。注意以病理為基礎(chǔ)和仿照應(yīng)用“九項(xiàng)要點(diǎn)’’分析病灶的方法，來啟發(fā)引導(dǎo)學(xué)生取得對(duì)病變x線、cT、MRI表現(xiàn)的理解和認(rèn)識(shí)。閱片實(shí)習(xí)時(shí)，強(qiáng)調(diào)要學(xué)生反復(fù)運(yùn)用“九項(xiàng)要點(diǎn)”去分析病灶，進(jìn)行推論和結(jié)合I臨床資料作山綜合診斷，以訓(xùn)練臨床診斷思維方法和能力。

中樞神經(jīng)系統(tǒng)(36學(xué)時(shí))

【教學(xué)要求】

一、了解中樞神經(jīng)系統(tǒng)影像學(xué)檢查方法，指征及價(jià)值與限度。

二、掌握平片診斷。

三、了解腦室造影定位診斷及腦血管造影定位、定位診斷。

四、掌握顱腦cT檢查方-掛．正格cT表現(xiàn)及異常cT表現(xiàn)。

五、掌握顱腦常見病的影像學(xué)診斷，重點(diǎn)是顱腦外傷、腦腫瘤、腦

六、掌握脊髓疾病的影像檢杏與診斷?！窘虒W(xué)內(nèi)容】

一，引言及檢查方法

頭顱平片、腦室造影、腦血管造影、顱腦cT、脊椎平片、脊髓造影、脊椎與脊髓CT檢查。

二、頭顱平片診斷

1、頭顱平片正常表現(xiàn)。

2、頭顱先天性畸形：狹骼癥、顱骨偏扁、顱底陷入。

3、頭顱外傷骨折、顱縫分離及頭顱外傷后遺癥。

4、顱內(nèi)疾病平片診斷價(jià)值、顱高壓及顱內(nèi)腫瘤平片表現(xiàn)。

三、腦室造影定位診斷根據(jù)

四、腦血管造影正常表現(xiàn)及定位與定性診斷

五、顱腦cT診斷

1、顱內(nèi)腫瘤影像學(xué)診斷。

2、顱腦外傷

3、腦血管疾病

4、顱內(nèi)感染與寄生蟲

5、腦先天性畸形與發(fā)育障礙

6、腦萎縮與脫髓鞘疾病

七、脊髓疾病診斷

l、脊髓、脊膜和椎管系解剖

2、脊椎平片診斷

3、脊髓造影診斷

4、脊柱和脊髓的cT診斷

①脊柱和脊髓正常cT表現(xiàn)

②脊柱和脊髓病變的cT表現(xiàn)

【教學(xué)方法】

課堂講授。電腦幻燈中展示典型病例cT圖片．配以扼要的文字說明。特別要注意病變 圖像與正常圖像的比較，培養(yǎng)學(xué)生閱片發(fā)現(xiàn)病灶的能力和初步的鑒別診斷能力。

五官系統(tǒng)(16學(xué)時(shí))【教學(xué)要求】

一、了解眼鼻咽喉耳的影像學(xué)檢查方法。

二、掌握正常眼鼻咽喉耳的影像學(xué)表現(xiàn)。

三、掌握常見病的影像學(xué)診斷?！窘虒W(xué)內(nèi)容】

眼、鼻與鼻竇、咽喉及耳的檢查方法、正常影像學(xué)表現(xiàn)及常見病的影像學(xué)診斷。【教學(xué)方法】

課堂講授。電腦幻燈中展示典型病例cT圖片，配以扼要的文字說明。特別要注意病變 圖像與正常圖像的比較，培養(yǎng)學(xué)生閱片發(fā)現(xiàn)病灶的能力和初步的鑒別診斷能力。

超聲診斷(40學(xué)時(shí))【教學(xué)要求】

一、了解超聲診斷的發(fā)展史及診斷原理，熟悉超聲診斷的類型及檢查方法。

二、掌握各臟器的正常超聲圖像特點(diǎn)。

三、熟悉常見病的超聲診斷及鑒別診斷，正確判斷超盧檢查對(duì)不同疾病的診斷價(jià)值。【教學(xué)內(nèi)容】

一、概論、超聲診斷學(xué)基礎(chǔ)與原理

1．超聲診斷的發(fā)展史與發(fā)展趨勢(shì)

2超聲檢查與其它影像檢查優(yōu)缺點(diǎn)的比較，超聲的物理基礎(chǔ)及診斷基礎(chǔ)

3常見聲學(xué)效應(yīng)及其對(duì)聲像閏的影響，人體組織回聲類型，超聲檢查類型(包括A型、B 型、M型、頻譜多譜勒及彩色多普勒)、超聲檢查方法，檢查前準(zhǔn)備、聲像固基本斷面與影像像分析

二、胸腔與心臟

l、了解胸腔與心臟的解剖結(jié)構(gòu)

2、熟悉胸腔與心臟的檢查方法

3、掌握心臟正常的超聲圖像

4、熟悉胸腔積液，胸膜間皮瘤的超聲診斷及鑒別診斷

5、熟悉下列常見心臟病的超聲診斷及鑒別診斷，包括：先天性心臟?。悍蝿?dòng)脈瓣狹窄、房間隔缺損、室間隔缺損、法樂氏四聯(lián)癥)：風(fēng)濕性心瓣膜?。憾獍戟M窄及關(guān)閉不全，主動(dòng)脈瓣狹窄及關(guān)閉不全，三尖瓣關(guān)閉不壘l心肌?。簲U(kuò)張型心肌病，肥厚型心肌病．限制型心肌??；其它心臟疾??；心包積液，左房粘液瘤，左房血栓，心內(nèi)膜贅生物，瓣膜脫垂，腱索斷裂；冠心?。宏惻f性心梗，室壁瘤：肺動(dòng)脈高壓，左心功能障礙

三、肝臟

l、了解肝臟的解剖結(jié)構(gòu)

2、熟悉肝臟的檢查方法

3、掌握肝臟正常的超聲圖像

4、熟悉下列常見肝臟疾病的超聲診斷及鑒別診斷，包括：肝臟彌漫性痛變：急性病毒 性肝炎、肝硬化、血吸蟲病肝臟、脂肪肝及非均勻脂肪肝肝臟古液性病變：肝囊腫、多囊肝、肝膿腫及肝臟實(shí)性占位病變：原發(fā)性肝癌、繼發(fā)性肝癌、肝血管瘤、肝局灶性結(jié)節(jié)性增生、良性腺瘤、炎性假瘤

四、膽道

l、了解膽道的解剖結(jié)構(gòu)

2、熟悉膽道的檢查方法

3、掌握膽道正常的超聲圖像

4、熟悉下列常見膽道疾病的超聲診斷及鑒別診斷，包括：膽系結(jié)石：膽囊結(jié)石、肝外

膽管結(jié)石及肝內(nèi)膽管結(jié)石：膽系炎癥：急性膽囊炎、慢性膽囊炎；膽囊癌及肝外膽管癌膽囊； 息肉樣病變、膽囊腺瘤膽道蛔蟲?。幌忍煨阅懣偣苣夷[；阻塞性黃疸的超聲表現(xiàn)。

五、胰腺

1、了解胰腺的解剖結(jié)構(gòu)

2、熟悉胰腺的檢查方法

3、掌握胰腺正常的超聲圖像

4、熟悉下列常見胰腺疾病的超聲診斷及鑒別診斷，包括：急性、慢性胰腺炎； 胰腺囊腫占位病變；囊腫、囊腺瘤、胰腺假性囊腫；胰腺、胰島素瘤、無功能胰島細(xì)胞瘤；胰腺惡性腫瘤：胰腺癌及壺胰腺癌。

六、脾臟、胃腸

1、了解脾臟、胃腸的解剖結(jié)構(gòu)

2、熟悉脾臟、胃腸的檢查方法

3、掌握脾臟、胃腸的超聲圖像

4、熟悉下列常見脾臟、胃腸疾病的超聲診斷及鑒別診斷，包括：脾腫大、副脾、脾血 管瘤、惡性淋巴瘤、脾破裂；胄癌、大腸癌、胃腸惡性淋巴瘤、腸梗阻及腸套疊；

七、腎臟、輸尿管、膀胱及前列腺

l、了解腎臟、輸尿管、膀胱及前列腺的解剖結(jié)構(gòu)

2、熟悉腎臟、輸尿管、膀胱及前列腺的檢查方法

3、掌握腎臟、輸尿管、膀胱及前列腺的超聲圖像

4、掌握下列常見腎臟、輸尿管、膀胱及前列腺疾病的超聲診斷及鑒別診斷，包括：

腎及輸尿管結(jié)石、腎及輸尿管積水、腎囊腫；腎腫瘤：腎細(xì)胞瘤、腎母細(xì)胞瘤及血管平滑肌脂肪瘤；腎先天性畸形：腎外傷；腎周膿腫；移植腎、無功能腎及腎功能衰竭；輸屎管囊腫、輸尿管狹窄；膀胱癌；膀胱結(jié)石、異物和血塊；膀胱憩室；前列腺增生和前列腺痛；

八、婦科

1、了解女性盆腔生殖器官的解剖結(jié)構(gòu)

2、熟悉女性盆腔生殖器官的檢查方法

3、掌握女性盆腔生殖器官的超聲圖像

4、熟悉下列常見婦科疾病的超聲診斷及鑒別診斷，包括：各種類型的子宮先天性畸形； 子宮肌瘤(肌壁間、粘膜下及漿膜下)；子宮腺肌癥廈腺肌瘤：子宮粘膜息肉；子宮內(nèi)膜癌；宮內(nèi)節(jié)有器；卵巢非贅生性囊腫(卵泡囊腫、黃體囊腫、多囊卵巢、黃素囊腫、卵巢巧克力囊腫)；各種卵巢良性腫瘤；各種卵巢惡性：卵巢輸卵管膿腫；輸卵管積水；盆腔靜脈曲張癥：

九、產(chǎn)科

1、了解正常妊娠的解剖結(jié)構(gòu)及生理特點(diǎn)

2、熟悉妊娠的檢查方法

3、掌握正常妊娠胎兒及附屬物的超聲圖像

4、熟悉下列常見產(chǎn)科疾病的超聲診斷及鑒別診斷，包括：妊娠的診斷及測(cè)量；胎兒發(fā) 育與標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量；多胎妊娠；流產(chǎn)；異位妊娠；過期妊娠；胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩；胎兒畸形：神經(jīng)管畸形；心血管畸形：消化道畸形；泌尿系畸形；膜壁異常；羊膜疾?。惶ケP與臍帶異常；前置胎盤i胎盤出血：胎盤絨毛膜血管瘤；臍帶繞頸；滋養(yǎng)細(xì)胞疾病：葡萄胎：惡性葡萄胎與絨毛膜癌；

十、腹膜后、腎上腺、腹部大血管

1、了解眼球、甲狀腺、乳腺的解剖結(jié)構(gòu)及生理特點(diǎn)

2、熟悉眼球、甲狀腺、乳腺的檢查方法

3、掌握正常眼球、甲狀腺、乳腺的超聲圖像

4、熟悉下列常見眼球、甲狀腺、乳腺疾病的超聲診斷及鑒別診斷，包括：眼球疾?。?視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、脈絡(luò)膜黑色素瘤、視網(wǎng)膜脫離、脈絡(luò)膜脫離、玻璃體出血、脈絡(luò)膜出血、球內(nèi)異物；彌漫性腫大：甲亢、亞急性甲狀腺炎、慢性甲狀腺炎；甲狀腺占位性瘸變：結(jié)節(jié)性甲狀腺腫、單純性甲狀腺腫、甲狀腺癌、甲狀腺腺瘤、甲狀腺囊腫： 【教學(xué)方法】

l-理論內(nèi)容一一電腦PPT軟件播放文字內(nèi)容、圖表及部分影像

2影像部分一一多媒體圖像播放軟件播放實(shí)例靜態(tài)及動(dòng)態(tài)影像

第四篇：分子診斷學(xué)復(fù)習(xí)資料 簡答題部分

簡答

基因組的特點(diǎn)：？（大題）人類基因組的特點(diǎn)：

1、人類基因組具有23對(duì)染色體，基因組序列大約2.9億個(gè)核苷酸，含有蛋白質(zhì)編碼基因大約20, 000-25, 000個(gè)。其中大量基因與中樞神經(jīng)系統(tǒng)，特別是腦部發(fā)育相關(guān)；

2、絕大多數(shù)基因?yàn)閿嗔鸦?，且分布不均（每條染色體具有基因富集區(qū)和基因稀疏區(qū)）。除蛋白質(zhì)編碼基因外，其他大量基因?yàn)镽NA編碼基因；

3、基因內(nèi)和基因附近中存在大量短序列調(diào)控元件，發(fā)揮基因的調(diào)控表達(dá)和協(xié)調(diào)表達(dá)的作用；

4、基因組（基因內(nèi)）中存在大量功能未知的其他序列（“非編碼DNA”），如串聯(lián)重復(fù)序列、轉(zhuǎn)座元件。

5、序列突變是人類基因突變的重要來源，序列/基因多態(tài)性是研究人類遺傳突變的重要手段。

6、線粒體DNA（mtDNA）是人類母系遺傳疾病的重要來源基礎(chǔ)。真核基因組特點(diǎn)：

1.真核基因組結(jié)構(gòu)龐大：人：3×109bp。幾、十、百倍于原核。

2.線性雙鏈DNA，多條染色體和二倍體（Diploid）：DNA和組蛋白質(zhì)形成染色體，存在于核膜內(nèi)。人：23對(duì)，46條；

3.單順反子(Monocistron)：一個(gè)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄生成一條mRNA。

4.功能基因不連續(xù)性，內(nèi)含子與外顯子并存（斷裂基因）：轉(zhuǎn)錄后需剪接(Splicing)5.非編碼區(qū)多于編碼序列(9:1)6.含有大量重復(fù)序列（Repetitive Sequences): 重復(fù)次數(shù)可達(dá)數(shù)百萬次，序列多態(tài)性是真核生物基因組的重要特征。原核生物基因組的特點(diǎn)：

1.基因組呈共價(jià)閉合環(huán)狀雙鏈狀態(tài)，散布在細(xì)胞中，有時(shí)相對(duì)集中形成類核/擬核（Nucleoid）

2.基因組DNA小，基因數(shù)目少（1500-5900個(gè)），種間DNA大小差異大，GC含量差異大(菌種鑒定和分類標(biāo)準(zhǔn)），基因多為單拷貝基因（編碼rRNA、tRNA基因多拷貝，利于核糖體的快速組裝和蛋白質(zhì)合成）

3.基因組只有一個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)，功能相關(guān)的基因大多成簇地串聯(lián)排列（操縱子結(jié)構(gòu)）在染色體上，結(jié)構(gòu)基因無內(nèi)含子，基因連續(xù)分布，為多順反子。

4.除主基因組外，原核生物往往還具有質(zhì)粒基因組

5.轉(zhuǎn)座元件/基因是原核生物基因組的重要特征（轉(zhuǎn)座元件（Tranposable Element）是指可移動(dòng)的基因成分，即能在一段DNA分子內(nèi)部或兩段DNA分子之間移動(dòng)的DNA片段，又稱跳躍基因。）6.致病基因是致病原核生物基因的重要特征 病毒基因組的特點(diǎn)：

1.基因組大小相差很大（HBV：3.2kb，痘病毒：300kb）

2.結(jié)構(gòu)分子具有多樣性（DNA病毒/RNA病毒，單鏈DNA/RNA病毒，雙鏈DNA/RNA病毒，環(huán)狀分子/線性分子）3.基因組多數(shù)是連續(xù)性（單一分子基因組），但RNA病毒往往不連續(xù)（呼腸孤病毒：10條節(jié)段雙鏈RNA，甲乙流感病毒：8條單鏈節(jié)段RNA，丙型流感病毒：7段單鏈節(jié)段RNA。包裝在同一個(gè)病毒顆粒內(nèi)，或在不同病毒顆粒內(nèi)，只有全部基因組序列都存在，才具備感染能力）4.編碼序列占基因組的90%以上，間隔區(qū)序列很少；

5.多為單拷貝（單倍體），即每個(gè)基因只出現(xiàn)一次（除逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組有兩個(gè)拷貝）； 6.相關(guān)基因叢集（功能上相關(guān)的基因排列在一起）、有重疊基因和不規(guī)則基因結(jié)構(gòu)序列。

1、試述點(diǎn)突變（基因背景清楚和未知）的主要檢測(cè)方法。答：對(duì)基因背景清楚或部分清楚的點(diǎn)突變，可以采取直接檢測(cè)基因點(diǎn)突變的方法，如等位基因特異性寡核苷酸雜交(allele specific oligonucleotide，ASO)、PCR-ELISA、等位基因特異性擴(kuò)增(allele specific amplification，ASA)、PCR-RFLP、基因芯片技術(shù)等進(jìn)行診斷，例如β地中海貧血，可以使用ASO、PCR-RFLP 聯(lián)合基因芯片技術(shù)進(jìn)行診斷。對(duì)于一些基因背景未知的點(diǎn)突變，可以采用單鏈構(gòu)象多態(tài)性(single-strand conformational polymorphism，SSCP)、變性梯度凝膠電泳(denaturing graient gel electrophoresis，DEEG)、異源雙鏈分析(heteroduplex analysis，HA)、DNA序列測(cè)定、蛋白截短測(cè)試（protein truncation test，PTT）等方法，如Hopkins大學(xué)醫(yī)學(xué)院的研究人員設(shè)計(jì)了47 對(duì)PCR引物，分段擴(kuò)增血友病A因子Ⅷ 基因片段，進(jìn)行DGGE分析，發(fā)現(xiàn)多態(tài)性片段后再進(jìn)行DNA序列分析，幾乎查清了所有臨床輕中度病人的點(diǎn)突變。

2、試述限制性內(nèi)切酶MstⅡ切割法診斷鐮狀細(xì)胞貧血的原理并圖示。

答：在FⅧ基因區(qū)域內(nèi)，有一種A基因存在三個(gè)拷貝，其功能不詳，其中一個(gè)A基因位于FⅧ基因的第22 號(hào)內(nèi)含子內(nèi)(A1)，另外兩個(gè)位于X染色體的末端(A2、A3)。A1基因可以與其上游的兩個(gè)A基因拷貝中的一個(gè)發(fā)生同源重組，引起FⅧ基因的1-22 外顯子片段倒位，這種倒位導(dǎo)致FⅧ功能完全喪失而發(fā)生嚴(yán)重的血友病(圖15-5)。其中與A2發(fā)生的重組稱為近端重組，約占倒位的15％；與A3發(fā)生的重組稱為遠(yuǎn)端重組，約占倒位的85％。

3、試述近端重組、遠(yuǎn)端重組概念。

答：在FⅧ基因區(qū)域內(nèi)，有一種A基因存在三個(gè)拷貝，其功能不詳，其中一個(gè)A基因位于FⅧ基因的第22 號(hào)內(nèi)含子內(nèi)(A1)，另外兩個(gè)位于X染色體的末端(A2、A3)。A1基因可以與其上游的兩個(gè)A基因拷貝中的一個(gè)發(fā)生同源重組，引起FⅧ基因的1-22 外顯子片段倒位，這種倒位導(dǎo)致FⅧ功能完全喪失而發(fā)生嚴(yán)重的血友病(圖15-5)。其中與A2發(fā)生的重組稱為近端重組，約占倒位的15％；與A3發(fā)生的重組稱為遠(yuǎn)端重組，約占倒位的85％。

4、簡述TGGE/DGGE的基本原理

答：在TGGE中，隨著溫度的逐漸升高時(shí)，DNA分子會(huì)呈階梯式逐步發(fā)生解鏈。部分解鏈的雙鏈DNA分子表現(xiàn)出一種復(fù)雜的分枝構(gòu)像，使得其電泳遷移率大大下降。DNA分子的解鏈決定于該分子的解鏈溫度（Tm），而Tm有強(qiáng)烈的序列依賴性，如在單取代突變中，若是A:T（兩個(gè)氫鍵）被G:C（三個(gè)氫鍵）取代，將增加該雙鏈DNA分子的Tm值。而整個(gè)DNA分子序列對(duì)解鏈溫度也有影響，若A:T被T:A替代，或G:C被C:G替代，分子的解鏈溫度也會(huì)發(fā)生改變。因此不同的DNA分子由于其Tm不同，將于不同凝膠位置（溫度不同）產(chǎn)生分枝（解離）使電泳遷移率降低，從而在凝膠上的不同位置形成條帶。DGGE的變性條件為熱（一般為60℃的恒定溫度）和固定比率的甲酰胺（0－40％）、尿素（0－7M）。這些梯度變性的功能就相當(dāng)于TGGE中的溫度梯度的功能，使不同DNA分子在不同的凝膠部位發(fā)生解鏈，引起遷移率下降，從而將不同的DNA分子分離。

5、簡述變性高效液相色譜法檢測(cè)基因變異的優(yōu)點(diǎn)

答：DHPLC突變檢測(cè)技術(shù)與其它方法相比，具有更高的準(zhǔn)確性和敏感性。

（1）DHPLC與各種電泳法的比較 SSCP 分析片段長度<300 bp，對(duì)于人類SNP的檢出率為50～95％，尤其容易漏檢位于發(fā)夾結(jié)構(gòu)中的變異。CSGE檢測(cè)雜合子的靈敏度與SSCP相當(dāng)或稍低。而DHPLC對(duì)150bp~600bp的DNA片段的突變檢出率都可達(dá)到100％，且而不需要特殊的樣本處理。TGGE/DGGE對(duì)于異源雙鏈及同源雙鏈分子的檢測(cè)靈敏度高出CSGE和SSCP很多。但對(duì)于較高溫度的融解區(qū)域的突變檢測(cè)，DHPLC的靈敏度要高于TGGE/DGGE。（2）DHPLC與DNA測(cè)序的比較 對(duì)于頻率高于20%的變異，直接測(cè)序的檢出率為80％，DHPLC的檢出率可達(dá)到100％；基因突變頻率低于20%時(shí)就很難用測(cè)序方法檢測(cè)到，而DHPLC可從待檢樣品中檢測(cè)到占總基因量0.5-5%的突變等位基因，且重現(xiàn)性很好。

6、試述PTT檢測(cè)基因變異的優(yōu)缺點(diǎn)

答：PTT檢測(cè)突變的優(yōu)點(diǎn)：①能檢測(cè)出只與疾病相關(guān)的蛋白截短突變；②可檢測(cè)出在RNA形成過程中發(fā)生的突變（如剪接突變）；③通過只鑒定引起疾病截短突變，PTT分析不會(huì)受到基因沉默變異如多態(tài)性的妨礙；④截短蛋白分子的長度指明了突變的位置，因此更方便進(jìn)行測(cè)序分析以確定突變。

PPT檢測(cè)突變的缺點(diǎn)：①由于PCR擴(kuò)增效率的影響，對(duì)于包含幾千個(gè)核苷酸序列多個(gè)外顯子的疾病基因，就需要分成幾個(gè)1－2kb的片段分別擴(kuò)增，分別進(jìn)行PTT檢測(cè)；②由于微小缺失/插入突變對(duì)蛋白產(chǎn)物分子大小影響太小，凝膠不能分辯，因而檢測(cè)不出編碼序列中小的插入或缺失或是錯(cuò)義突變；③引起RNA產(chǎn)量改變或使mRNA不穩(wěn)定的突變可能被漏檢。

7、簡述PFGE的基本原理

答：PFGE采用一種正交的交變脈沖電場(chǎng)，在進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳時(shí)，其方向、脈沖時(shí)間和電壓大小可交替改變。在每次電場(chǎng)方向改變時(shí)，DNA分子就要有一定的時(shí)間改變形狀和遷移方向，只有當(dāng)DNA分子達(dá)到一定構(gòu)型，沿新的泳動(dòng)方面伸直后，才能向前遷移。DNA分子的轉(zhuǎn)向時(shí)間與其大小關(guān)系極為密切，分子越大，分子構(gòu)型轉(zhuǎn)換所需時(shí)間就越長，轉(zhuǎn)變遷移方向的時(shí)間也就越長。對(duì)于不同大小的DNA大分子，其改變泳動(dòng)方向所需的時(shí)間不等，遷移速度的快慢也就不等，因此就可以按DNA分子量大小使其分離開來。根據(jù)欲分離的DNA分子大小適當(dāng)調(diào)節(jié)電場(chǎng)方向的相交角度、電壓及脈沖時(shí)間等參數(shù)，即可將各種分子量大小不同的分子分開。

8、假基因的分類及其發(fā)生機(jī)理。

與正常功能的基因序列相似，但無轉(zhuǎn)錄功能或轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物無功能的基因稱假基因(pseudogene)。根據(jù)是否保留相應(yīng)功能基因的間隔序列(如內(nèi)含子), 假基因分兩大類:一類保留了間隔序列，稱為非加工假基因(non-processed pseudogene)，通常因基因的復(fù)制修飾,如點(diǎn)突變、插入、缺失和移碼突變而導(dǎo)致復(fù)制后的基因在轉(zhuǎn)錄和翻譯時(shí)出現(xiàn)異常,喪失正常功能，它與功能基因一般在同一染色體上, 也稱復(fù)制型假基因(duplicated pseudogene)。假基因中大多數(shù)則缺少間隔序列的稱為已加工假基因(processed pseudogene)，主要是轉(zhuǎn)錄過程中mRNA 以cDNA 的方式重新整合進(jìn)入基因組(很可能發(fā)生在生殖細(xì)胞中)，在長期進(jìn)化選擇過程中因?yàn)殡S機(jī)突變積累而喪失功能，通常這種假基因無內(nèi)含子，兩邊有小的側(cè)翼定向重復(fù)序列(flanking direct repeat)，3'端多具多聚腺苷酸尾。

9、簡述CpG島與DNA甲基化調(diào)控。

大約有一半的人類基因富含CpG 的順序，稱為CpG島(CpG island)，CpG 島常位于轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)或其附近，主要存在于看家基因和一些組織特異性表達(dá)基因。在正常組織，除印記基因和失活的X染色體外，包括啟動(dòng)子區(qū)在內(nèi)的基因5′端CpG 島大部分是非甲基化的。DNA甲基化與基因表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，DNA甲基化調(diào)控基因表達(dá)直接的機(jī)制可能是因?yàn)榧谆鶑腄NA分子的大溝中突出，阻止了轉(zhuǎn)錄因子與基因相互作用，還可能直接抑制RNA聚合酶活性而抑制基因的表達(dá)。間接的機(jī)制包括兩種類型：①與甲基化DNA結(jié)合蛋白結(jié)合；②改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)，這都間接阻礙轉(zhuǎn)錄因子與DNA結(jié)合而抑制轉(zhuǎn)錄。DNA甲基化對(duì)胚胎發(fā)育非常重要，與X染色體失活，基因組印記，特別是腫瘤密切相關(guān)。

10、作為一種遺傳標(biāo)記，人類短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）的主要用途有哪幾個(gè)方面？

主要用途①人類基因遺傳圖譜的制作。②目的基因篩選和基因診斷。通常目的基因若與STR位點(diǎn)有連鎖關(guān)系, 則其位置與STR位點(diǎn)鄰近, 故通過對(duì)STR附近區(qū)域克隆測(cè)序, 就可能發(fā)現(xiàn)目的基因。通過家系和對(duì)照研究, 運(yùn)用連鎖和相關(guān)分析, 可以找到與疾病高度相關(guān)的STR位點(diǎn)。③法醫(yī)學(xué)個(gè)體識(shí)別和親權(quán)鑒定。法醫(yī)案例中, 對(duì)于量極少和降解嚴(yán)重的生物檢材, 通過PCR進(jìn)行STR位點(diǎn)擴(kuò)增并將幾個(gè)STR 位點(diǎn)聯(lián)合起來分析, 可得到相當(dāng)高的累積個(gè)體識(shí)別率和父權(quán)排除率。因而STR用于法醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著廣闊的前景，為司法偵案、破案提供有利的科學(xué)依據(jù)。

11、人類單核苷酸的多態(tài)性（SNP）的特點(diǎn)及主要用途有哪幾個(gè)方面？

疾病的連鎖分析與基因的定位：包括復(fù)雜疾?。ㄈ绻琴|(zhì)疏松癥、糖尿病、心血管疾病、精神性紊亂、各種腫瘤等）的基因定位、關(guān)聯(lián)分析，并可用于遺傳病的單倍型診斷。

指導(dǎo)用藥和藥物設(shè)計(jì)：SNP多態(tài)性能充分反映個(gè)體間的遺傳差異。通過研究遺傳多態(tài)性與個(gè)體對(duì)藥物敏感性或耐受性的相關(guān)性, 可以闡明遺傳因素對(duì)藥物效用的影響, 從而對(duì)醫(yī)生針對(duì)性的用藥和藥物的開發(fā)提供指導(dǎo)和依據(jù)。

用于進(jìn)化和種群多樣性的研究：生物界的進(jìn)化及進(jìn)化過程中物種多樣性的形成與基因組的突變和突變的選擇密切相關(guān), 構(gòu)建整個(gè)基因組的SNP 圖譜對(duì)于直接研究人類的起源、進(jìn)化具極大意義。對(duì)比人群之間SNP 圖譜的異同情況可以對(duì)人類的起源、遷移等作出估計(jì), 從而理清人類進(jìn)化過程中源與流的問題。

12、人類基因組研究的主要內(nèi)容是什么？

人類基因組研究主要包括兩方面的內(nèi)容：以全基因組測(cè)序?yàn)槟繕?biāo)的結(jié)構(gòu)基因組學(xué)和以基因功能鑒定為目標(biāo)的功能基因組學(xué)，又稱后基因組研究。

結(jié)構(gòu)基因組學(xué)代表基因組分析的早期階段，通過基因作圖、核苷酸序列分析確定基因組成、基因定位的科學(xué)，包括規(guī)?；販y(cè)定蛋白質(zhì)、RNA及其它生物大分子的三維結(jié)構(gòu)等內(nèi)容,以獲得一幅完整的、能夠在細(xì)胞中定位以及在各種生物學(xué)代謝途徑、生理途徑、信號(hào)傳導(dǎo)途徑中全部蛋白質(zhì)在原子水平的三維結(jié)構(gòu)全息圖。功能基因組學(xué)代表基因分析的新階段，是利用結(jié)構(gòu)基因組學(xué)提供的信息研究基因功能，使人們有可能在基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)以致生物體整體水平上理解生命的原理。對(duì)疾病的防治和機(jī)理的闡明有重要應(yīng)用意義。

基因分類：A.按功能:1.結(jié)構(gòu)基因---編碼蛋白和酶分子結(jié)構(gòu)（蛋白基因）；2.調(diào)控基因(Regulatory Gene)---調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)基因表達(dá)，包含調(diào)節(jié)基因、操縱基因和啟動(dòng)基因；3.轉(zhuǎn)錄而不翻譯的基因（RNA基因）：rRNA基因→rRNA→核仁形成區(qū)，核糖體組成。tRNA基因→tRNA→轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸。

B.按重要程度: 1.看家基因(House-keeping Gene): 維持細(xì)胞最低限度功能所不可少的基因, 如編碼組蛋白基因、編碼核糖體蛋白基因、線粒體蛋白基因、糖酵解酶的基因等。這類基因在所有類型的細(xì)胞中都進(jìn)行表達(dá)。2.必需基因(Essential Gene): 突變時(shí)會(huì)引起致死表型的基因.基因表達(dá)的特點(diǎn)：A時(shí)間特異性，單細(xì)胞生物：特定基因表達(dá)嚴(yán)格按特定時(shí)間順序發(fā)生。多細(xì)胞生物：基因表達(dá)在不同的發(fā)育階段嚴(yán)格按特定時(shí)間順序開啟或關(guān)閉。又稱為階段特異性（Stage specificity）。B, 空間特異性, 在某發(fā)育階段，同一基因在不同組織器官其表達(dá)有差異。又稱為細(xì)胞特異性（Cell specificity）

基因表達(dá)的方式: A組成性表達(dá), 某些基因的表達(dá)不受內(nèi)外環(huán)境的影響，在個(gè)體生長過程中，幾乎在所有的組織中持續(xù)表達(dá)或變化很小。這些基因一般為看家基因（Housekeeping gene）B, 誘導(dǎo)和阻遏表達(dá), 誘導(dǎo)（Induction）：基因受環(huán)境刺激而開啟表達(dá)增強(qiáng)。阻遏（Repression）：基因受環(huán)境刺激而表達(dá)受到抑制和減弱C, 協(xié)調(diào)表達(dá), 在一定控制機(jī)制下，功能相關(guān)的一組基因進(jìn)行協(xié)調(diào)共同表達(dá)

14、敘述原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特征。

在原核生物基因組中只有一個(gè)DNA復(fù)制起點(diǎn)?；蚪MDNA通常是由一條環(huán)狀雙鏈DNA（double stranded DNA，dsDNA）分子組成?；蚪MDNA與支架蛋白和RNA結(jié)合在一起，以復(fù)合體的形式存在。廣泛存在操縱子結(jié)構(gòu)。操縱子結(jié)構(gòu)是原核生物基因組的功能單位，在原核基因調(diào)控中具有普遍的意義。原核生物的結(jié)構(gòu)基因多數(shù)是單拷貝的并且結(jié)構(gòu)基因中沒有內(nèi)含子成分。編碼順序一般不重疊。具有編碼同工酶的不同基因?；蚪M中編碼區(qū)所占比例為50﹪，不編碼區(qū)中常常含有基因表達(dá)調(diào)控的序列?；蚪MDNA分子中存在多種功能的識(shí)別區(qū)域，這些區(qū)域經(jīng)常有反向重復(fù)序列存在，并能形成特殊的結(jié)構(gòu)。原核生物基因組存在著可移動(dòng)的DNA序列，這些可移動(dòng)的DNA序列，通過不同的轉(zhuǎn)移方式發(fā)生基因重組，使生物體更適應(yīng)環(huán)境的變化。

15、簡述原核生物的類核組成。

原核生物與真核生物的主要區(qū)別在細(xì)胞核上。原核生物沒有典型的細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，基因組DNA位于細(xì)胞中央的核區(qū)，沒有核膜將其與細(xì)胞質(zhì)隔開，但能在蛋白質(zhì)的協(xié)助下，以一定的組織形式盤曲、折疊包裝起來，形成類核（nucleoid）也稱擬核。類核的中央部分由RNA和支架蛋白（scaffolding protein）組成，外圍是雙鏈閉環(huán)的超螺旋DNA。在超螺旋結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，DNA 分子再扭結(jié)成許多活結(jié)樣或花瓣樣的放射狀結(jié)構(gòu)的DNA環(huán)。每個(gè)環(huán)形的活結(jié)狀結(jié)構(gòu)代表一個(gè)結(jié)構(gòu)域，在各結(jié)構(gòu)域中DNA呈負(fù)超螺旋狀態(tài)。每個(gè)DNA環(huán)是一個(gè)相對(duì)獨(dú)立的功能區(qū)，可以獨(dú)立完成不同區(qū)域的基因表達(dá)與調(diào)控。在類核中80﹪為DNA，其余為RNA 和蛋白質(zhì)。如果用DNA酶處理后可使基因組DNA鏈斷裂；如果用RNA酶或蛋白酶處理類核，則類核變得松散，不能維持DNA鏈的折疊結(jié)構(gòu)，這表明RNA和蛋白質(zhì)對(duì)維持類核分子的折疊以及形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)是必不可少的。

16、簡述原核生物轉(zhuǎn)座子的類型及特點(diǎn)。

⑴插入序列（insertion sequence,IS）長度約700bp～2 000bp，由一個(gè)轉(zhuǎn)位酶基因及兩側(cè)的反向重復(fù)序列（16bp～41bp）組成。反向重復(fù)序列的對(duì)稱結(jié)構(gòu)使IS可以雙向插入（正向插入或反向插入）靶位點(diǎn)。并在插入后于兩側(cè)形成一定長度（3bp～11bp）的順向重復(fù)序列稱靶序列（target sequence）IS的轉(zhuǎn)位頻率為10-7／拷貝，即在一個(gè)世代的107細(xì)菌中有1次插入。⑵轉(zhuǎn)座子（transposon,Tn）是一類復(fù)雜的轉(zhuǎn)位因子。Tn比IS大，約4500～20000bp，除了攜帶有關(guān)轉(zhuǎn)座的必需基因外，還含有能決定宿主菌遺傳性狀的基因，主要是抗生素和某些藥物的抗性基因，轉(zhuǎn)座子中的轉(zhuǎn)位酶稱為轉(zhuǎn)座酶（transposase），其功能是介導(dǎo)轉(zhuǎn)座子從一個(gè)位點(diǎn)轉(zhuǎn)座到另一個(gè)位點(diǎn)，或從一個(gè)復(fù)制子轉(zhuǎn)座到另一個(gè)復(fù)制子，其轉(zhuǎn)座過程與IS相似。

⑶Mu噬菌體 是一類具有轉(zhuǎn)座功能的溫和性噬菌體。溫和性噬菌體有多種，如大腸桿菌λ噬菌體、大腸桿菌Mu-

1、P1和P2噬菌體等。這類噬菌體具有整合能力，可以整合到細(xì)菌染色體中去，也稱可轉(zhuǎn)座的噬菌體（transposable phage）。當(dāng)它們感染細(xì)菌后，其溶源性整合和裂解周期的復(fù)制均以轉(zhuǎn)座方式進(jìn)行，但轉(zhuǎn)座位點(diǎn)是隨機(jī)的。

17、通過轉(zhuǎn)座可引起哪些遺傳效應(yīng)？

⑴引起突變 轉(zhuǎn)位可能引起多種基因突變。當(dāng)轉(zhuǎn)位因子插入一個(gè)基因內(nèi)部，會(huì)引起這個(gè)基因的插入失活；當(dāng)插入多順反子前端的基因中時(shí)，可引起下游的所有基因停止轉(zhuǎn)錄，因?yàn)檗D(zhuǎn)位因子中含ρ依賴的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)；當(dāng)插入染色體或質(zhì)粒中時(shí)，常引起缺失和倒位突變。⑵引入新的基因 在插入位點(diǎn)上引入新的基因，如含有抗藥基因R質(zhì)粒的轉(zhuǎn)位因子，轉(zhuǎn)位到染色體中時(shí)，可在該部位出現(xiàn)抗藥性基因。若將帶有Amp+R質(zhì)粒的細(xì)菌與不含R質(zhì)粒的帶有Kan+轉(zhuǎn)座子的細(xì)菌進(jìn)行接合，結(jié)果產(chǎn)生了Amp+ Kan+的細(xì)菌，并且能夠在含有氨芐青霉素及卡那霉素的培養(yǎng)板上生長。經(jīng)過轉(zhuǎn)位作用，在這種細(xì)菌內(nèi)產(chǎn)生Amp+及Kan+的質(zhì)粒，經(jīng)過再次接合作用，即可產(chǎn)生含Amp+ Kan+R質(zhì)粒細(xì)菌。

⑶引起生物進(jìn)化 基因重排經(jīng)常發(fā)生，轉(zhuǎn)座作用是基因重排的重要機(jī)理之一，如通過轉(zhuǎn)座，可將兩個(gè)本來相隔遙遠(yuǎn)的基因靠攏，從而進(jìn)行協(xié)調(diào)的控制作用，這兩段基因順序經(jīng)過轉(zhuǎn)座作用連接在一起有可能在進(jìn)化過程中產(chǎn)生新的蛋白質(zhì)。

18、真核生物染色體基因組的一般特點(diǎn)？

①真核生物基因組遠(yuǎn)大于原核生物基因組，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，基因數(shù)龐大，具有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)；②真核細(xì)胞的基因組DNA都是線狀雙鏈DNA，而不是環(huán)狀雙鏈分子；③基因組中非編碼區(qū)多于編碼區(qū)；④真核基因多為不連續(xù)的斷裂基因，由外顯子和內(nèi)含子鑲嵌而成；⑤存在大量重復(fù)序列。

19、真核生物基因組含有的重復(fù)序列有哪些？

（一）高度重復(fù)序列

重復(fù)頻度>105。根據(jù)衛(wèi)星DNA的長度，又可分成3種：衛(wèi)星DNA、小衛(wèi)星DNA、微衛(wèi)星DNA。

（二）中度重復(fù)序列

這類重復(fù)序列主要由比較大的片段（由100bp到幾千bp）串聯(lián)重復(fù)組成，分散在整個(gè)基因組中，重復(fù)頻度不等，如Alu家族、rRNA、tRNA和組蛋白等。

20、簡述質(zhì)粒的概念和特性，常用的質(zhì)粒載體有哪幾種？

質(zhì)粒為細(xì)菌染色體外一些雙鏈、共價(jià)閉合環(huán)狀DNA分子，是能夠進(jìn)行獨(dú)立復(fù)制并保持穩(wěn)定遺傳的復(fù)制子。質(zhì)粒具有復(fù)制和控制機(jī)構(gòu)，能夠在細(xì)胞質(zhì)中獨(dú)立自主的進(jìn)行自身復(fù)制，并使子代細(xì)胞保持它們恒定的拷貝數(shù)。

質(zhì)粒一般具有以下特性：①自主復(fù)制性，它能獨(dú)立于宿主細(xì)胞的染色體DNA而自主復(fù)制；②質(zhì)粒不相容性；③可擴(kuò)增性；④可轉(zhuǎn)移性。

理想質(zhì)粒載體應(yīng)具備①具有松弛型復(fù)制子；②在復(fù)制子外存在幾個(gè)單一的酶切位點(diǎn)；③具有插入失活的篩選標(biāo)記；④分子量相對(duì)較小，有較高的拷貝數(shù)。

常見的質(zhì)粒載體有：pBR322質(zhì)粒、pUC質(zhì)粒載體、pGEM系列載體等。

21、試述舉2種質(zhì)粒DNA提取的方法及應(yīng)用。

[答案] 質(zhì)粒DNA提取的方法包括堿裂解法、煮沸裂解法和SDS裂解法。

1）堿裂解法：在NaOH存在的強(qiáng)堿性（pH12.0～14.0）的條件下，用強(qiáng)陽離子去垢劑SDS破壞細(xì)胞壁和裂解細(xì)胞，并使宿主細(xì)胞的蛋白質(zhì)與染色體DNA發(fā)生變性，釋放出質(zhì)粒DNA。它是一種適用范圍很廣的方法，能從所有的大腸桿菌（E.coli）菌株中分離出質(zhì)粒DNA，制備量可大可小。

2）煮沸裂解法：是將細(xì)菌懸浮于含Triton X-100和溶菌酶的緩沖液中，Triton X-100和溶菌酶能破壞細(xì)胞壁，再用沸水浴裂解細(xì)胞，使宿主細(xì)胞的蛋白質(zhì)與染色體DNA發(fā)生變性。對(duì)CCC質(zhì)粒DNA因結(jié)構(gòu)緊密不會(huì)解鏈，當(dāng)溫度下降后，CCC質(zhì)粒DNA可重新回復(fù)其超螺旋結(jié)構(gòu)，通過離心去除變性的蛋白質(zhì)和染色體DNA，然后回收上清液中的質(zhì)粒DNA。本法只能用于小質(zhì)粒DNA（小于15kb）的小量或大量制備，適用于大多數(shù)從大腸桿菌（E.coli）菌株中分離出質(zhì)粒DNA。

3）SDS裂解法：它是將細(xì)菌懸浮于等滲的蔗糖溶液中，用溶菌酶和EDTA處理以破壞細(xì)胞壁，再用SDS裂解去壁細(xì)菌，從而溫和地釋放出質(zhì)粒DNA到等滲溶液中，然后用酚/氯仿抽提。適用于大質(zhì)粒DNA的提取。

22、簡述哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因組DNA抽提的主要方法有哪幾種？ [本題答案]哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因組DNA抽提的主要方法有： 酚提取法、甲酰胺解聚法、玻棒纏繞法和異丙醇沉淀法、磁珠吸附法等。

23、簡述從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的主要方法有哪幾種？

[本題答案] 從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的方法主要包括 DEAE-纖維素膜插片電泳法、電泳洗脫法、低熔點(diǎn)瓊脂糖凝膠挖塊回收法、冷凍擠壓法及現(xiàn)在有試劑盒供應(yīng)的以硅為基礎(chǔ)的純化系統(tǒng)等。

24、簡述磁性球珠分離法分離mRNA的原理。

[本題答案]磁性球珠分離法是基于寡聚(dT)與poly(A)的互補(bǔ)配對(duì)特性、用生物素標(biāo)記寡聚(dT)，通過寡聚(dT)與mRNA 3’端poly(A)形成雜交體，這種雜交非常迅速，在1－2分鐘內(nèi)就可完成，可有效地除去rRNA, tRNA以及其他RNA,而后通過生物素與鏈親和素順磁性磁珠之間的相互作用來捕獲這些雜交物而達(dá)到分離純化。

25、描述質(zhì)粒DNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。

多數(shù)細(xì)菌來源的質(zhì)粒核酸是環(huán)狀雙鏈DNA分子，沒有游離的末端，每條鏈上的核苷酸通過共價(jià)鍵頭尾相連。質(zhì)粒DNA分子通常具有三種不同的構(gòu)型。當(dāng)其兩條核苷酸鏈均保持完整環(huán)形結(jié)構(gòu)時(shí)，為共價(jià)閉合環(huán)狀DNA分子，這樣的DNA常以超螺旋狀態(tài)存在；如果兩條鏈中只有一條鏈保持完整環(huán)形結(jié)構(gòu)，另一條鏈出現(xiàn)一至數(shù)個(gè)缺口時(shí)，為半開環(huán)DNA；若兩條鏈均有缺口并發(fā)生斷裂則成為線性DNA分子。

26、試述質(zhì)粒的類型有哪些？

根據(jù)細(xì)菌染色體對(duì)質(zhì)粒復(fù)制的控制程度是否嚴(yán)格可將質(zhì)粒分為：嚴(yán)緊型質(zhì)粒和松弛型質(zhì)粒。按轉(zhuǎn)移方式分為：接合型質(zhì)粒、可移動(dòng)型質(zhì)粒、自傳遞型質(zhì)粒。按質(zhì)粒大小分為：小型質(zhì)粒、大型質(zhì)粒。按質(zhì)粒的宿主范圍分為：窄宿主譜型質(zhì)粒、廣宿主譜型質(zhì)粒。按質(zhì)粒的功能分為：F質(zhì)粒、R質(zhì)粒、Col質(zhì)粒。

27、線粒體DNA與核DNA有哪些不同之處？

（一）非孟德爾的母系遺傳。mtDNA 因位于細(xì)胞質(zhì)中,表現(xiàn)為嚴(yán)格的母性遺傳, 不服從孟德爾遺傳，絕大部分mtDNA 是通過卵細(xì)胞遺傳。

（二）高突變率。mt DNA突變率約為nDNA的10～100倍，此外mtDNA 與有毒物質(zhì)的結(jié)合頻率比核DNA 高數(shù)倍至數(shù)十倍。

（三）異質(zhì)性和復(fù)制分離。異質(zhì)性即突變mtDNA與野生型mtDNA 以不同的比例共存于一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的現(xiàn)象。復(fù)制分離即在細(xì)胞分裂的復(fù)制過程中,突變的和野生型的mtDNA 隨機(jī)進(jìn)入子細(xì)胞的過程，復(fù)制分離的結(jié)果使突變mtDNA 雜合體向突變純合或野生純合方向轉(zhuǎn)變,但因突變復(fù)制具有優(yōu)勢(shì),故易產(chǎn)生突變積累，突變積累的程度不同,突變mtDNA 在群體中的多態(tài)性程度也不同。

（四）閾值效應(yīng)。每個(gè)細(xì)胞的mt DNA有多種拷貝，而一個(gè)細(xì)胞mt DNA編碼基因的表現(xiàn)型依賴于一個(gè)細(xì)胞內(nèi)突變型mt DNA和野生型mt DNA的相對(duì)比例，mtDNA 突變導(dǎo)致氧化磷酸化水平降低,當(dāng)能量降低到維持組織正常功能所需能量的最低值時(shí)即達(dá)到了mtDNA表達(dá)的能量閾值，可引起某組織或器官的功能異常而出現(xiàn)臨床癥狀，這就是閾值效應(yīng)。

（五）半自主復(fù)制與協(xié)同作用。mt DNA雖有自我復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和編碼功能，但該過程還需要數(shù)十種nDNA編碼的酶參加，因此mt DNA基因的表達(dá)同時(shí)也受nDNA的制約，兩者具有協(xié)同作用。

28、何謂線粒體??？簡述線粒體病的遺傳學(xué)分類。

線粒體病（mitochondriopathy）是指由于線粒體呼吸鏈功能不良所導(dǎo)致的臨床表現(xiàn)多樣化的一組疾病。臨床表現(xiàn)常見為眼瞼下垂、外眼肌麻痹、視神經(jīng)萎縮、神經(jīng)性耳聾、痙攣或驚厥、癡呆、偏頭痛、類卒中樣發(fā)作等。

從核基因缺陷和線粒體基因缺陷的角度對(duì)線粒體病進(jìn)行遺傳學(xué)分類可分為三種類型：點(diǎn)突變，mtDNA的大規(guī)模缺失或插入和源于核DNA缺陷引起mtDNA缺失。

29、病毒的基本結(jié)構(gòu)成份主要有哪些？

毒沒有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，由四種基本結(jié)構(gòu)成份組成：①由一種核酸(DNA或RNA)組成的病毒基因組。②由病毒基因組編碼的衣殼蛋白組成的衣殼。③來源于宿主細(xì)胞質(zhì)膜系統(tǒng)（細(xì)胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜或高爾基體膜）的包膜。④病毒顆粒中的其它內(nèi)容物，包括酶、核酸結(jié)合蛋白及金屬離子等。30、國際病毒分類委員會(huì)（ICTV）將病毒分成哪幾類？ 國際病毒分類委員會(huì)（ICTV）制定了《國際病毒分類與命名原則》。根據(jù)病毒的基因組組成及復(fù)制方式，可將病毒分為如下幾類：

DNA病毒（DNA Viruses）

第一組：雙鏈DNA病毒（Group I: dsDNA Viruses）第二組：單鏈DNA病毒（Group II: ssDNA Viruses）RNA病毒（RNA viruses）

第三組：雙鏈RNA病毒（Group III: dsRNA Viruses）第四組：正鏈RNA病毒（Group IV:(+)ssRNA Viruses）第五組：負(fù)鏈RNA病毒（Group V:(-)ssRNA Viruses）

DNA與RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒（DNA and RNA Reverse Transcribing Viruses）

第六組：RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒（Group VI: RNA Reverse Transcribing Viruses）第七組：DNA逆轉(zhuǎn)錄病毒（Group VII: DNA Reverse Transcribing Viruses）亞病毒因子（Subviral Agents）

衛(wèi)星（Satellites）類病毒（Viroids）朊病毒（Prions）

31、簡述長病毒末端重復(fù)序列的特點(diǎn)和作用。

逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組RNA在逆轉(zhuǎn)錄后生成的雙鏈DNA中，兩端有長末端重復(fù)序列（long terminal repeat，LTR）結(jié)構(gòu)。LTR在結(jié)構(gòu)與功能上與上述重復(fù)序列不同。LTR中的重復(fù)序列只占一部分，另外還包括單一序列。5＇端的LTR包含許多特定的基因表達(dá)調(diào)控區(qū)域，是一組真核生物增強(qiáng)子和啟動(dòng)子單位，而3＇端的LTR具有轉(zhuǎn)錄終止的作用。另外，逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組利用LTR中的重復(fù)序列形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，在整合酶作用下整合入宿主細(xì)胞基因組內(nèi)。53蛋白質(zhì)組學(xué)的研究特點(diǎn)有哪些？

① 整體性 ② 揭示生命的動(dòng)態(tài)性過程 ③ 體現(xiàn)生命現(xiàn)象的復(fù)雜性

32、等電聚焦凝膠電泳的原理是什么？

依據(jù)蛋白質(zhì)分子的凈電荷或等電點(diǎn)進(jìn)行分離的技術(shù)。在等電聚焦過程中，電場(chǎng)所采用的載體兩性電解質(zhì)含有脂肪族多氨基多羧酸，可在電場(chǎng)中形成正極為酸性，負(fù)極為堿性的連續(xù)pH梯度，蛋白質(zhì)分子在一個(gè)載體兩性電解質(zhì)(ampholyte)形成的連續(xù)而穩(wěn)定的線性pH梯度中電泳，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)遷移到其等電點(diǎn)位置時(shí)，凈電荷為零，在電場(chǎng)中不再移動(dòng)，因此可將各種不同等電點(diǎn)性質(zhì)的蛋白質(zhì)分離開來

33、簡述酵母雙雜交系統(tǒng)的優(yōu)缺點(diǎn)。

酵母雙雜交系統(tǒng)所具有的優(yōu)點(diǎn)：①蛋白質(zhì)作為被研究的對(duì)象不用被純化；②檢測(cè)在活細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行，可以在一定程度上反映體內(nèi)（細(xì)胞內(nèi)）的真實(shí)情況；③由于這一系統(tǒng)可以反映基因表達(dá)產(chǎn)物的累積效應(yīng)，因而可檢測(cè)存在于蛋白質(zhì)之間微弱或短暫的相互作用；④采用不同組織、器官、細(xì)胞類型和分化時(shí)期材料構(gòu)建cDNA文庫，可用于分析多種不同功能的蛋白。

局限性：①雙雜交系統(tǒng)分析蛋白間的相互作用定位于細(xì)胞核內(nèi)，而許多蛋白間的相互作用依賴于翻譯后加工如糖基化、二硫鍵形成等，這些反應(yīng)在核內(nèi)無法進(jìn)行。②由于某些蛋白本身具有激活轉(zhuǎn)錄功能或在酵母中表達(dá)時(shí)發(fā)揮轉(zhuǎn)錄激活作用，從而引起報(bào)告基因的表達(dá)，產(chǎn)生“假陽性”結(jié)果。③雙雜交只是反映蛋白質(zhì)間能發(fā)生作用的可能性，這種可能還必須經(jīng)過其他實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，尤其要與生理功能研究相結(jié)合，否則可能會(huì)誤入歧途。

34、蛋白質(zhì)間互作鑒定：

（1）蛋白質(zhì)亞基的聚合：線性、環(huán)狀、螺旋、球狀、交叉聚合（2）分子識(shí)別：抗原與抗體、配體與受體、酶與底物（3）分子的自我裝配：核糖體、細(xì)菌鞭毛、病毒的自動(dòng)裝配

（4）多酶復(fù)合體：丙酮酸脫氫酶復(fù)合體包括丙酮酸脫氫酶、二氫硫辛酸轉(zhuǎn)乙酰基酶和二氫硫辛酸脫氫酶。

蛋白質(zhì)間作用力：（1）氫鍵：肽鍵之間，主－側(cè)、側(cè)－側(cè)鏈之間（2）范德華力：取向力、誘導(dǎo)力、色散力

（3）疏水鍵：非極性基團(tuán)為了避開水相二群集在一起的作用力。（4）離子鍵（鹽鍵）：正負(fù)離子之間的靜電引力所形成的化學(xué)鍵。

蛋白質(zhì)相互作用的研究方法: 體外：（1）肽蛋白質(zhì)親和層析；（2）親和印跡；（3）免疫沉淀；（4）交聯(lián)等。

體內(nèi)：（1）酵母雙雜交系統(tǒng)；（2）噬菌體展示技術(shù)；（3）生物傳感芯片質(zhì)譜；（4）蛋白質(zhì)定點(diǎn)誘變。

蛋白組學(xué)研究內(nèi)容：1.蛋白質(zhì)分離；2.蛋白質(zhì)的鑒定；3.蛋白質(zhì)-核酸間相互作用；4.蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用。蛋白組學(xué)研究的特點(diǎn)：1）整體性和規(guī)?；?；2）動(dòng)態(tài)性和網(wǎng)絡(luò)化；3）復(fù)雜性和綜合技術(shù)化；

蛋白質(zhì)組研究常用技術(shù)：

1）蛋白質(zhì)分離技術(shù)（電泳和層析技術(shù)）；2）蛋白質(zhì)檢測(cè)與圖像分析以及鑒定技術(shù)； 3）蛋白質(zhì)互作研究技術(shù)；4）生物信息學(xué)分析技術(shù)。

35、蛋白質(zhì)組學(xué)的研究內(nèi)容有哪些？

蛋白質(zhì)組學(xué)的研究包括兩個(gè)方面：一是針對(duì)蛋白質(zhì)表達(dá)模式的研究，一是在蛋白質(zhì)功能模式方面的深入分析。

36、PCR，聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase chain reaction)：是一種模擬體內(nèi)天然DNA復(fù)制過程的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)，是基因擴(kuò)增技術(shù)的一次重大革新。

PCR原理：利用DNA聚合酶催化一對(duì)引物間的特定DNA片段在體外實(shí)現(xiàn)快速、大量擴(kuò)增的方法，也稱：無細(xì)胞克隆技術(shù)或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增法。PCR標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系（五要素,）

（1）DNA模板(template)：靶基因

（2）原料：dNTPs（dATP，dGTP，dCTP，dTTP）

（3）催化酶：耐高溫的DNA聚合酶（如：Taq酶）

（4）一對(duì)引物（primer）：擴(kuò)增序列的決定者其與靶基因兩側(cè)序列互補(bǔ)

（5）Mg2+ 和 Buffer PCR反應(yīng)過程----三步曲

1.高溫變性：在高溫（95℃）下，待擴(kuò)增的靶DNA雙鏈?zhǔn)軣嶙冃猿蔀閮蓷l單鏈DNA模板

2.低溫退火：在低溫（37～55℃）下，兩條人工合成的寡核苷酸引物分別與互補(bǔ)的單鏈DNA模板結(jié)合，形成部分雙鏈

3.適溫延伸：在耐熱DNA聚合酶的最適溫度（72℃）下，以引物的3’端為合成的起點(diǎn)，以單核苷酸為原料，沿模板以5’→3’方向延伸，合成DNA新鏈。

37、PCR衍生技術(shù)(pcr技術(shù)有哪些)：逆轉(zhuǎn)錄PCR、反向PCR、巢式PCR、標(biāo)記PCR、多重PCR、原位PCR、不對(duì)稱PCR、定量PCR、錨定PCR

38、如何提高PCR擴(kuò)增的特異性？

① 升高退火溫度可增加引物與模板結(jié)合的特異性

② 縮短退火和延伸時(shí)間，可減少錯(cuò)誤引發(fā)及多余的DNA聚合酶分子參與酶促延伸的機(jī)會(huì) ③降低引物和酶的濃度也可以減少錯(cuò)誤引發(fā)，尤其是能減少引物二聚體的引發(fā) ④ 改變Mg2+的濃度可進(jìn)一步提高擴(kuò)增的特異性 ⑤ 引物設(shè)計(jì)的特異性 ⑥ 減少循環(huán)次數(shù)

⑦ 熱啟動(dòng)（Hot Start）：即首先將模板變性，然后在較高溫度時(shí)加入Taq DNA聚合酶、引物及MgCl2等一些重要成分，這樣使得引物在較高溫度下與模板退火，提高了反應(yīng)的嚴(yán)格性，使擴(kuò)增更特異 ⑧ 采用兩對(duì)引物即外引物和內(nèi)引物進(jìn)行擴(kuò)增來提高擴(kuò)增的特異性。

39、PCR檢測(cè)技術(shù)有何臨床應(yīng)用：(1)PCR在病原微生物的檢測(cè)中的應(yīng)用；（2）PCR在遺傳病中的應(yīng)用；（3）PCR在腫瘤中的應(yīng)用；（4）其它方面的應(yīng)用：PCR技術(shù)除用于臨床診斷和治療外，還可用于DNA指紋、個(gè)體識(shí)別、親子關(guān)系識(shí)別、法醫(yī)物證等。40、影響PCR反應(yīng)的因素有哪些？

PCR反應(yīng)體系包含DNA模板、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、dNTP及含有必需離子的反應(yīng)緩沖液，這些因素都對(duì)PCR反應(yīng)產(chǎn)生影響。

41、影響PCR反應(yīng)的因素有哪些？

PCR反應(yīng)體系包含DNA模板、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、dNTP及含有必需離子的反應(yīng)緩沖液，這些因素都對(duì)PCR反應(yīng)產(chǎn)生影響。

42、簡述bDNA信號(hào)放大系統(tǒng)的原理。

分枝DNA是人工合成的帶有側(cè)鏈的DNA片段，在每個(gè)側(cè)鏈上都可以標(biāo)記可被激發(fā)的標(biāo)記物。以bDNA為基礎(chǔ)建立的連續(xù)放大DNA信號(hào)以檢測(cè)DNA的技術(shù)稱為分枝DNA信號(hào)放大系統(tǒng)。

bDNA信號(hào)放大系統(tǒng)包括四種雜交探針，即目標(biāo)探針、前放大體、放大體和標(biāo)記探針。首先用親和素包被微孔，加入目標(biāo)探針，該組探針能與等檢核酸靶序列上不同區(qū)域互補(bǔ)，其5′端用生物素標(biāo)記，能與微孔中的親和素高度親和結(jié)合；再向微孔中加入待測(cè)標(biāo)本，目標(biāo)核酸與固定于微孔中的目標(biāo)探針結(jié)合；再加入前放大體，該組探針的一段能與目標(biāo)核酸的不同區(qū)域互補(bǔ)結(jié)合，另一段與放大體（即分枝DNA）的主鏈部分的序列互補(bǔ)結(jié)合，分枝DNA由主鏈和數(shù)十根寡核苷酸組成，每個(gè)分枝上都有標(biāo)記探針的雜交位點(diǎn)，由酶標(biāo)寡核苷酸組成的標(biāo)記探針與bDNA上的互補(bǔ)序列結(jié)合，加入底物后最后經(jīng)化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀檢測(cè)。利用bDNA信號(hào)放大系統(tǒng)可在每個(gè)靶序列上結(jié)合60～300個(gè)酶分子，而且所有雜交反應(yīng)同時(shí)進(jìn)行，觀察到的信號(hào)與靶DNA的量成正比，可通過標(biāo)準(zhǔn)曲線將靶DNA定量。

43、簡述鏈末端終止法測(cè)定 DNA 序列的原理

答：利用DNA聚合酶，以待測(cè)單鏈DNA為模板，以dNTP為底物，設(shè)立四種相互獨(dú)立的測(cè)序反應(yīng)體系，在每個(gè)反應(yīng)體系中加入不同的雙脫氧核苷三磷酸（dideoxyribonucleoside triphosphate，ddNTP）作為鏈延伸終止劑，在測(cè)序引物引導(dǎo)下，按照堿基配對(duì)原則，每個(gè)反應(yīng)體系中合成一系列長短不一的引物延伸鏈，通過高分辨率的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，放射自顯影檢測(cè)后，從凝膠底部到頂部按5′→3′方向讀出新合成鏈序列，由此推知待測(cè)模板鏈的序列。

44、簡述化學(xué)法測(cè)定 DNA序列的基本原理

答：化學(xué)法是對(duì)待測(cè)DNA進(jìn)行化學(xué)降解。在化學(xué)法的測(cè)序系統(tǒng)中，先對(duì)待測(cè)DNA末端進(jìn)行放射性標(biāo)記，然后分成4組或5組互為獨(dú)立的化學(xué)反應(yīng)體系，每一組用不同的化學(xué)試劑特異地針對(duì)某一種或某一類堿基進(jìn)行化學(xué)切割，通過化學(xué)降解后產(chǎn)生長短不一的DNA片段，其長度取決于改組反應(yīng)所針對(duì)的堿基在待測(cè)DNA片斷中的位置，將各組反應(yīng)產(chǎn)物通過高分辨率的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，放射自顯影檢測(cè)后直接識(shí)讀待測(cè)DNA的序列。

45、Sanger雙脫氧鏈終止法,全稱：雙脫氧鏈末端合成終止法

原理：利用DNA聚合酶，以待測(cè)單鏈DNA為模板，以dNTP為底物，設(shè)立4種互相獨(dú)立的測(cè)序反應(yīng)體系，在每個(gè)反應(yīng)體系中加入不同的雙脫氧核苷酸三磷酸（ddNTP）作為鏈延終止劑，在測(cè)序引物引導(dǎo)下，按照堿基配對(duì)原則，每個(gè)反應(yīng)體系中合成一系列長短不一的引物延伸鏈，通過高分辨率的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，放射自顯影檢測(cè)后，從凝膠底部到頂部按5’到3’方向讀出新合成鏈序列，由此推知待測(cè)模板鏈的序列。每個(gè)測(cè)序反應(yīng)體系的組成：1.DNA聚合酶；2.單鏈DNA模板（待測(cè)片段）；3.帶有3-OH末端的單鏈寡核苷酸引物；4.Mg2+；5.原料-dNTPs(dATP,dGTP,dCTP和dTTP)；6.終止劑-ddNTPs(ddATP,ddGTP,ddCTP和ddTTP)測(cè)序體系的關(guān)鍵成分：（1）鏈終止劑，2’，3’-二脫氧核糖核苷酸（ddNTPs)（2）用于測(cè)序的變性聚丙烯酰胺凝膠（PAGE)膠長40cm，厚度均勻；4-8%丙烯酰胺；7mol/L尿素（3）模板，即待測(cè)序的DNA片段（4）引物。酶促測(cè)序反應(yīng)中，利用一個(gè)與模板特定序列互補(bǔ)的合成寡核苷酸作為DNA合成的引物（5）DNA聚合酶（6）放射性同位素標(biāo)記的dNTP：α-35S-dNTP 焦磷酸測(cè)序技術(shù)（PSQ)：在以靶DNA鏈為模板指導(dǎo)核酸合成的過程中，將釋放的可見光作為檢測(cè)信號(hào)，從而對(duì)靶DNA鏈進(jìn)行實(shí)時(shí)測(cè)序的方法，是一種合成測(cè)序技術(shù)。原理：同一反應(yīng)體系中由四種酶催化的級(jí)聯(lián)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，首先讓測(cè)序引物與待測(cè)模板結(jié)合成雜交體，在每一輪測(cè)序反應(yīng)中，只加入一種dNTP，若該dNTP與模板配對(duì)，聚合酶就可以將其摻入到引物鏈中，并釋放出等摩爾的焦磷酸基團(tuán)（PPi），PPi最終轉(zhuǎn)化為可檢測(cè)的光信號(hào)，并由Pyrogram TM 轉(zhuǎn)化為一個(gè)峰值，每個(gè)峰值的高度與反應(yīng)中摻入的核苷酸數(shù)目成正比，隨后，加入下一種dNTP，繼續(xù)DNA鏈的合成。產(chǎn)生的熒光信號(hào)自動(dòng)傳入分析系統(tǒng)，直接測(cè)讀靶DNA序列。特點(diǎn)：1.無需電泳，也無需熒光標(biāo)記，操作極為簡便，具快速、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)和實(shí)時(shí)；2.閱讀能力已從100bp至400bp ；3.該技術(shù)具有多種不同的用途。

46、簡述哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因組DNA抽提的主要方法有哪幾種？

哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因組DNA抽提的主要方法有： 酚提取法、甲酰胺解聚法、玻棒纏繞法和異丙醇沉淀法、磁珠吸附法等。

47、簡述重組DNA技術(shù)的原理及技術(shù)。

重組DNA是在體外利用限制性內(nèi)切酶，將不同來源的DNA分子進(jìn)行特異的切割，獲得的目的基因或DNA片段與載體連接，從而組成一個(gè)新的DNA分子。重組的DNA分子能夠通過一定的方式進(jìn)入相應(yīng)的宿主細(xì)胞，并在宿主細(xì)胞中進(jìn)行無性繁殖，獲得大量的目的基因或DNA片段。經(jīng)重組的DNA分子能在宿主細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，獲得相應(yīng)的蛋白質(zhì)。

大致步驟包括：①目的基因的獲??；②載體的選擇；③目的基因與運(yùn)載體連接成重組 DNA；④重組DNA導(dǎo)入受種細(xì)胞；⑤重組體的篩選

49、簡述黏性末端DNA重組體的構(gòu)建過程。

目的基因和載體可由同一種限制酶切割后產(chǎn)生，或由不同的限制酶切割形成互補(bǔ)黏性末端，經(jīng)退火，彼此間很容易按堿基配對(duì)原則形成氫鍵。然后由DNA連接酶催化連接接頭處的缺口，形成重組質(zhì)粒。載體DNA在限制酶切割后，用堿性磷酸酶處理，除去5’端磷酸基，以避免載體DNA自身環(huán)化。50、舉例說出重組DNA技術(shù)在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用。

可以利用重組DNA技術(shù)探明致病基因的結(jié)構(gòu)和功能，了解其致病機(jī)制；開發(fā)基因工程藥物和疫苗用于臨床；建立基因診斷、治療技術(shù)，為疾病的預(yù)防、治療提供新方法、新技術(shù)。具體可用于基因診斷：基因診斷是從基因水平上檢測(cè)人類遺傳性疾病的基因缺陷；基因治療：是指將人的正常基因或有治療作用的基因通過載體導(dǎo)入人體靶細(xì)胞取代靶細(xì)胞中的缺陷基因，從而達(dá)到治療疾病目的的方法；基因工程藥物、疫苗和抗體的研究和制備；利用基因敲除或轉(zhuǎn)基因技術(shù)可改造生物、培育新的生物品種或用于藥物篩選和新藥評(píng)價(jià)等。

51、基因芯片的主要類型及其特點(diǎn)（1）從支持物來分 ①薄膜型：聚丙烯膜、硝酸纖維素膜和尼龍膜②玻片型：生產(chǎn)此類產(chǎn)品的公司 如 Affimetrix（2）從點(diǎn)陣的制備方法來分 ①原位合成型（In Situ Synthesis）②合成點(diǎn)樣型（off-chip synthesis）（3）根據(jù)探針片段長度分 ①Oligo-Chip：約8~25nt，常用于基因類型的分析，如突變、正常變異（多態(tài)性）和測(cè)序②cDNA-Chip：<2000nt，常用于基因表達(dá)和差異表達(dá)分析（兩種或以上相關(guān)樣本）③Genomic Chip：>5000nt，基因組結(jié)構(gòu)分析（4）根據(jù)用途分：基因變異檢測(cè)芯片表達(dá)譜芯片功能基因芯片.52、生物芯片：采用平面微細(xì)加工技術(shù)（光導(dǎo)原位合成或微量點(diǎn)樣等）將大量生物樣品（核酸、多肽、細(xì)胞、組織切片等）有序地固化于支持物表面（玻片、硅片、尼龍膜等）由此組成的密集二維生物樣品的微陣列。原理：分子間特異的相互作用

生物芯片技術(shù)的特點(diǎn)：1）高度交叉的綜合性新技術(shù)；2）高度集成性、微型化和連續(xù)化；3）高通量；4）通過設(shè)計(jì)不同的探針陣列、使用特定的分析方法，可使該技術(shù)具有多種不同的應(yīng)用價(jià)值。

基因芯片：

1）基因芯片：有序地、高密度地排列著大量的基因片段（probe)的載體(玻璃片或纖維膜等)。2）基因芯片技術(shù)：將大量核酸探針分子固定于支持物上，標(biāo)記的樣品分子按堿基互補(bǔ)原則與探針進(jìn)行雜交，通過檢測(cè)雜交信號(hào)分布和強(qiáng)度、進(jìn)而獲取關(guān)于樣品分子的序列和數(shù)量的信息，是高通量研究基因表達(dá)、突變等的革命性技術(shù)?；蛐酒瑱z測(cè)的原理和步驟：

原理：將大量探針分子固定于支持物上，然后與標(biāo)記的待測(cè)樣品進(jìn)行雜交，通過檢測(cè)雜交信號(hào)的分布和強(qiáng)度，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品中基因信息的定性和定量分析。

基本步驟：

1.芯片制備。2.靶核酸制備（樣品提取純化、擴(kuò)增和標(biāo)記）3.靶核酸與探針（芯片）雜交 4.雜交結(jié)果的掃描5.圖像分析和數(shù)據(jù)處理

基因芯片的特點(diǎn)：

1.微型化和自動(dòng)化；現(xiàn)有芯片面積：最大525cm２,最小1cm２樣品DNA的用量：5nl/陣點(diǎn) 雜交和洗片等過程自動(dòng)化,工作效率極高。2.高度平行性；實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的樣品等都在同一張芯片上同時(shí)進(jìn)行雜交分析,結(jié)果的可比性好。

3.巨大的信息產(chǎn)出率；芯片上各點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的基因或其表達(dá)的定性（量）分析、差異表達(dá)分析等。4.高度敏感性和專一性；能可靠并準(zhǔn)確檢測(cè)出10pgDNA/μL樣品。5.可反復(fù)使用；一張由尼龍膜制作的微陣列，可以重復(fù)雜交使用多達(dá)20次。

53、簡述蛋白芯片的原理及應(yīng)用。

蛋白質(zhì)芯片的基本原理是采用原位合成、機(jī)械點(diǎn)樣或共價(jià)結(jié)合的等方法將多肽、蛋白、酶、抗原、抗體固定于固相介質(zhì)上形成的生物分子點(diǎn)陣，在待分析樣品中的生物分子與蛋白質(zhì)芯片的探針分子發(fā)生雜交或相互作用或其他分離方式分離后，利用激光共聚焦顯微掃描儀對(duì)雜交信號(hào)進(jìn)行高通量檢測(cè)和分析。蛋白質(zhì)芯片是將整個(gè)蛋白質(zhì)水平的相關(guān)生化分析過程集成于芯片表面，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)多肽、蛋白質(zhì)及其他生物成份進(jìn)行高通量檢測(cè)。

蛋白質(zhì)芯片技術(shù)是一種快捷、高效、高通量、并行、微型化和自動(dòng)化的蛋白質(zhì)分析技術(shù)，適用于分析包括組織、細(xì)胞系、體液在內(nèi)的多種生物樣品能分析包含針對(duì)信號(hào)傳導(dǎo)、癌癥、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞結(jié)構(gòu)、凋亡和神經(jīng)生物學(xué)等廣泛的生物功能的相關(guān)蛋白，靈敏度高達(dá)pg/ml。

54、舉例說明基因芯片在臨床診斷中的應(yīng)用。

基因芯片作為一項(xiàng)現(xiàn)代化的診斷新技術(shù)在感染性疾病、遺傳性疾病的診斷和耐藥性檢測(cè)等方面已顯示出良好的應(yīng)用前景。下面舉例說明基因芯片在疾病診斷的應(yīng)用。

（1）感染性疾病的診斷。性傳播疾病、肝炎等。

（2）遺傳性疾病的診斷。地中海貧血、血友病、婚前檢查等。（3）耐藥性檢測(cè)。結(jié)核分支桿菌耐藥性檢測(cè)芯片等。

55、試述基因芯片的工作原理及制備。

基因芯片技術(shù)是建立在基因探針和雜交測(cè)序技術(shù)上的一種高效、快速的核酸序列分析手段。它將大量探針分子固定于支持物上，然后與標(biāo)記的樣品進(jìn)行雜交，通過檢測(cè)雜交信號(hào)的強(qiáng)度及分布來進(jìn)行分析。在一塊1cm2大小的基因芯片上，根據(jù)需要可固定數(shù)以千計(jì)甚至萬計(jì)的基因，以此形成一個(gè)密集的基因方陣，實(shí)現(xiàn)對(duì)千萬個(gè)基因的同步檢測(cè)?；蛐酒夹g(shù)主要包括四個(gè)主要步驟：芯片制備、樣品制備、雜交反應(yīng)和信號(hào)檢測(cè)以及結(jié)果分析。

56、試述生物芯片的種類及主要功能。

生物芯片根據(jù)其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，可以將生物芯片分為微陣列芯片和微流體芯片兩個(gè)主要類別。微陣列芯片是由生物材料微陣列構(gòu)成的芯片，包括基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、細(xì)胞芯片和組織芯片等，由于它們的工作原理都是基于生物分子之間的親和結(jié)合作用，如核酸分子的堿基配對(duì)作用，抗原和抗體的結(jié)合等，所以通常也稱為親和生物芯片。微流芯片是以各種微結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)的芯片，利用它可實(shí)現(xiàn)對(duì)各種生化組分的微流控操作和分析，這類芯片的代表有毛細(xì)管電泳芯片、PCR反應(yīng)芯片、介電電泳芯片等。(生物芯片發(fā)展的最終目標(biāo)是將各種生物化學(xué)分析操作的整個(gè)過程，從樣品制備、生化反應(yīng)到結(jié)果檢測(cè)，都集成化并縮微到芯片上自動(dòng)完成，以獲得所謂的微型全分析系統(tǒng)（micro total analysis systen,μ-TAS）,或稱“微縮芯片實(shí)驗(yàn)室”（lab-on-a-chip）。微縮芯片實(shí)驗(yàn)室代表了生物芯片技術(shù)發(fā)展的未來。)

57、核酸探針：序列已知的、能與待測(cè)的靶核酸序列互補(bǔ)結(jié)合、并帶有可檢測(cè)標(biāo)記的核酸片段。（它可以是整個(gè)基因，或基因的一部分；它可以是DNA或RNA）。

58、基因組DNA探針：為某一基因的全部或部分序列。缺點(diǎn)：真核基因組含有內(nèi)含子序列；因此，當(dāng)其用于檢測(cè)基因表達(dá)時(shí)，雜交效率低

cDNA探針：從已構(gòu)建的cDNA文庫中篩選和分離出來的靶基因序列。cDNA探針無內(nèi)含子序列，尤其適用于基因表達(dá)的檢測(cè)，目前應(yīng)用最廣。

59、基因組探針和cDNA探針的共同優(yōu)點(diǎn)：①制備方便：克隆于質(zhì)粒載體中②穩(wěn)定：DNA探針較RNA探針穩(wěn)定；RNA易被RNA酶降解③標(biāo)記方法成熟和多樣。共同缺點(diǎn)：雙鏈探針存在自身復(fù)性，影響雜交效率。

60、RNA探針的優(yōu)點(diǎn)：單鏈：雜交時(shí)不存在第二條鏈的競爭（自身復(fù)性），雜交效率高；含RNA的雜交體更穩(wěn)定（Tm更高），雜交反應(yīng)可以在更為嚴(yán)格的條件下進(jìn)行，因而RNA探針雜交的特異性高 主要缺點(diǎn)：探針不穩(wěn)定，易被RNase降解。RNA探針適合于：Northern雜交、原位雜交等。61原位雜交的基本原理

樣本經(jīng)適當(dāng)處理后，使細(xì)胞通透性增加，讓探針進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)與組織、細(xì)胞中待檢測(cè)的核酸進(jìn)行特異性結(jié)合形成雜交體，然后通過組織化學(xué)或免疫組織化學(xué)方法在被檢測(cè)的核酸原位形成的雜交信號(hào)，在顯微鏡或電子顯微鏡下對(duì)待測(cè)核酸進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)定位的方法。

62、核酸雜交技術(shù)是一種分子生物學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，用于檢測(cè)DNA或RNA分子的特定序列（靶序列）。DNA或RNA先轉(zhuǎn)移并固定到硝酸纖維素或尼農(nóng)膜上，與其互補(bǔ)的單鏈DNA或RNA探針用放射性或非放射性標(biāo)記。在膜上雜交時(shí)，探針通過氫鍵與其互補(bǔ)的靶序列結(jié)合，洗去未結(jié)合的游離探針后，經(jīng)放射自顯影或顯色反應(yīng)檢測(cè)特異結(jié)合的探針。

63、核酸分離與純化的原則：

1.保證核酸序列結(jié)構(gòu)完整性，防止降解和結(jié)構(gòu)破壞;2.剔除其他物質(zhì)，保證純度

64、在核酸的分離和純化過程中，如何保持核酸的完整性？

[本題答案] 為了保證核酸的完整性，首先在操作過程中，應(yīng)盡量簡化操作步驟，減少各種破壞核酸的有害因素，包括物理、化學(xué)與生物學(xué)的因素。提取應(yīng)在0～4℃的條件下進(jìn)行；另外避免強(qiáng)力的機(jī)械剪切力對(duì)核酸的破壞。細(xì)胞內(nèi)或外來的核酸酶對(duì)核酸的生物降解，而破壞核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)，使用EDTA、檸檬酸鹽并在低溫條件下操作，基本上就可以抑制DNA酶的活性；并盡可能地抑制RNA酶的活性。65、RNA的分離與提?。?/p>

難點(diǎn)：RNA在體外十分不穩(wěn)定，易降解，不易得到全長；RNA酶在體外存在于手漢、唾液、呼吸、灰塵中。原則：防止污染、防止降解。

防止方法： 高壓滅菌；器皿：200 ℃烘烤2h；試劑：采用焦碳酸二乙脂（DEPC）處理；戴手套、口罩。

提取方法：（1）異硫酸胍-酚氯仿法： 異硫酸胍（4M）+巰基乙醇（0.14M）為蛋白質(zhì)變性劑，酚/氯仿抽提，異丙醇沉淀RNA，75%乙醇洗滌（2）TRIzol法： TRIzol（苯酚+硫氰酸化合物）+氯仿+異丙醇+75%乙醇（3）酚-氯法。純化方法：飽和酚（pH4.5-5.5）66、簡述原位雜交在臨床中的應(yīng)用

原位雜交技術(shù)可以通過標(biāo)記的探針與分裂中期染色體DNA雜交來精確定位特定核苷酸序列在染色體上的位置；與細(xì)胞RNA雜交可觀察組織細(xì)胞中特定基因的表達(dá)水平；還可用特異性的細(xì)菌或病毒的核酸序列作為探針與組織、細(xì)胞雜交，以確定有無病原體的感染等。原位雜交能在成分復(fù)雜的組織中對(duì)單一細(xì)胞進(jìn)行研究，不受同一組織中其它成分的影響，因此對(duì)于那些細(xì)胞數(shù)量少且散在于其它組織中的細(xì)胞內(nèi)DNA或RNA的研究更為方便。此外，原位雜交不需要從組織中提取核酸，有利于檢測(cè)組織中含量極低的靶序列，并可完整地保持組織和細(xì)胞的形態(tài)，更能準(zhǔn)確地反應(yīng)出組織細(xì)胞的相互關(guān)系及功能狀態(tài)。舉例：原位雜交檢測(cè)上皮細(xì)胞中人乳頭狀瘤病毒（HPV）DNA 67、簡述臨床診斷常用的FISH探針的類型及用途。

根據(jù)核酸探針的序列特點(diǎn)，可將FISH探針分為三大類：重復(fù)序列探針、單一序列探針和全染色體涂抹探針。重復(fù)序列探針（repetitive sequences probes）是指與某條特定的染色體結(jié)構(gòu)結(jié)合、特異識(shí)別重復(fù)DNA序列的探針如著絲粒探針、端粒探針等。一般來說，不同的染色體，著絲粒重復(fù)序列中的核苷酸序列也不同，但端粒重復(fù)序列不具有染色體特異性。單一序列探針(Unique sequence probes)與某條染色體上特定的區(qū)域或基因的單拷貝DNA序列雜交。包括帶特異性探針（band special probes）和基因座特異性探針（Locus Specific probes）等。全染色體涂抹探針（whole chromosome painting probes, WCP）是識(shí)別一條特定染色體全長上的單一序列探針的混合物。68、臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)如何設(shè)置。

由于基因擴(kuò)增檢驗(yàn)是對(duì)靶核酸的指數(shù)倍擴(kuò)增過程，因而有大量的擴(kuò)增產(chǎn)物的出現(xiàn)，這種擴(kuò)增產(chǎn)物極易對(duì)以后的新擴(kuò)增反應(yīng)產(chǎn)生“污染”，為防止這種污染的發(fā)生，就需要對(duì)基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行嚴(yán)格的分區(qū)。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)分隔開的工作區(qū)域，即試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)以及擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。如果采用全自動(dòng)擴(kuò)增儀，后兩個(gè)區(qū)域可以合并。應(yīng)注意的是，各工作區(qū)域必須有明確的標(biāo)記，避免不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品混用。進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格按單一方向進(jìn)行，即試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。各區(qū)的儀器設(shè)備包括工作服、鞋子、實(shí)驗(yàn)記錄本和筆等都必須專用，不得混淆。此外，上述四個(gè)工作區(qū)域內(nèi)還應(yīng)有固定于房頂?shù)淖贤鉄?，以便于工作后區(qū)域內(nèi)的空氣照射。69、如何保證臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量。

臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)測(cè)定由一系列步驟組成，包括樣本收集、樣本處理（核酸提取）、核酸擴(kuò)增、產(chǎn)物檢測(cè)結(jié)果報(bào)告及解釋等。室內(nèi)質(zhì)量控制僅涉及樣本處理、核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析等測(cè)定分析步驟，而室間質(zhì)量評(píng)價(jià)則除了監(jiān)測(cè)測(cè)定分析步驟外，還包括較大范圍的實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)，諸如樣本接收中的可靠性、結(jié)果報(bào)告及解釋等。QA則是覆蓋更廣范圍的活動(dòng)，包括樣本收集、結(jié)果報(bào)告和解釋等。

第五篇：吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)教學(xué)大綱

白院08級(jí)臨床八班榮譽(yù)出品 實(shí)驗(yàn)診斷教學(xué)大綱（2個(gè)版本）

總 論

了解實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)概念、任務(wù)；

熟悉影響檢查的生理因素及干擾結(jié)果的原因、參考值、異常值、誤差的概念；

掌握實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)的學(xué)習(xí)方法和臨床思維方法。

第一章 血液檢驗(yàn)

（一）了解血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀基本原理

（二）掌握紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞分類的檢查方法、參考值及臨床意義

（三）熟悉貧血的形態(tài)學(xué)分類、紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞指數(shù)的參考值及臨床意義

（四）熟悉網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血沉測(cè)定，掌握參考值及臨床意義

（五）熟悉ABO血型和交叉配血的理論知識(shí)，了解血型鑒定與交叉配血方法

第二章 骨髓細(xì)胞學(xué)檢查

（一）熟悉骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的適應(yīng)癥，骨髓血細(xì)胞的發(fā)育規(guī)律

（二）掌握正常骨髓像的內(nèi)容和增生程度分級(jí)、粒紅比值以及變化的臨床意義等

（三）了解常用的細(xì)胞化學(xué)染色法（糖原、過氧化酶、堿性磷酸酶、鐵粒和酯酶染色）的臨床意義

（四）掌握常見貧血、白血病和血小板減少性紫癜的骨髓像特點(diǎn)

第三章 止血與凝血障礙的檢查

（一）掌握出血時(shí)間、凝血時(shí)間、凝血酶原時(shí)間、活化凝血活酶生成試驗(yàn)和血小板計(jì)數(shù)的參考值與臨床意義

（二）掌握臨床常見出血性/血栓性疾病的檢查規(guī)律

（三）了解常用纖溶和抗凝試驗(yàn)的原理、參考值和臨床意義

第四章 尿液檢查

（一）掌握尿標(biāo)本的收集及其影響因素

（二）掌握尿液性狀、蛋白質(zhì)、糖、酮體及尿沉渣等檢查的參考值及臨床重義

（三）了解尿液其它檢查項(xiàng)目的臨床意義

第五章 腎功能檢驗(yàn)

（一）掌握腎功能分段檢查的方法、參考值和臨床意義

（二）熟悉常用腎功能試驗(yàn)選擇原則，腎功能損害的分期標(biāo)準(zhǔn)

第六章 酸堿平衡測(cè)定與血?dú)夥治?/p>

（一）掌握血?dú)夥治龅闹笜?biāo)、參考值

（二）掌握血?dú)夥治鰴z查的原則和臨床意義 第七章 妊娠試驗(yàn)和生殖系統(tǒng)的體液檢驗(yàn)

（一）掌握精液、前列腺液檢查的臨床意義

（二）熟悉臨床常用的妊娠試驗(yàn)、陰道分泌物檢查的臨床意義

第八章 肝臟試驗(yàn)室檢查

（一）熟悉常用肝功能及肝臟疾病的實(shí)驗(yàn)室檢查的試驗(yàn)原理，掌握參考值和臨床意義及選用原則

（二）了解血漿脂質(zhì)的種類及熟悉常用脂質(zhì)測(cè)定的參考值及臨床意義

（三）掌握血糖參考值、臨床意義；了解葡萄糖耐量試驗(yàn)臨床意義

（四）掌握膽紅素檢查的參考值、臨床意義

（五）掌握乙型病毒肝炎檢驗(yàn)指標(biāo)及臨床意義;熟悉其它病毒肝炎的檢查方法

（六）熟悉肝癌標(biāo)志物檢驗(yàn)的臨床意義

第九章 血清酶學(xué)檢查

（一）了解臨床酶學(xué)變化的一般規(guī)律

（二）掌握常用臨床酶學(xué)檢查項(xiàng)目;尤其是肝與心肌酶的參考值及臨床意義

第十章 糞便、腦脊液、漿膜腔積液的檢查

（一）掌握糞便檢查及便潛血反應(yīng)的臨床意義

（二）掌握腦脊波檢查的參考值和臨床意義

（三）熟悉滲出液與漏出液的鑒別要點(diǎn)

第十一章 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)

（一）了解自身抗體的類別，主要檢查法及其臨床意義

（二）了解臨床最常用的腫瘤標(biāo)記物檢查的臨床意義

（三）了解淋巴細(xì)胞亞群分類方法和臨床意義

第十二章 血清離子檢查

了解血清離子檢查方法，掌握參考值及臨床意義

第十三章 內(nèi)分泌激素測(cè)定

了解血清內(nèi)分泌激素的檢查方法，掌握參考值及臨床意義

緒論：

掌握實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)定義，理解學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)的目的意義。第一章：實(shí)驗(yàn)室檢查標(biāo)準(zhǔn)化

了解實(shí)驗(yàn)室檢查標(biāo)準(zhǔn)化的意義。了解質(zhì)量控制方法。掌握參考范圍的概念。了解循證實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)。

第二章 臨床血液檢查

掌握紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類的參考值及其增減變化的臨床意義。了解上述各項(xiàng)檢驗(yàn)的檢驗(yàn)方法。

熟悉貧血的形態(tài)學(xué)分類，以及紅細(xì)胞比積、紅細(xì)胞平均指數(shù)的參考值及臨床意義。

了解網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及紅細(xì)胞沉降率測(cè)定的適應(yīng)征，掌握其參考值及臨床意義。

了解溶血性貧血常用實(shí)驗(yàn)室檢查的原則和臨床意義。

臨床血液檢查——骨髓細(xì)胞學(xué)檢查

熟悉骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的適應(yīng)癥、骨髓穿刺和骨髓活檢的選擇原則，以及送檢要求。

熟悉常見的血液病血象和骨髓象特點(diǎn)。

了解血細(xì)胞發(fā)育規(guī)律、骨髓增生程度分級(jí)、正常骨髓細(xì)胞的形態(tài)和分類比值。

了解常用的細(xì)胞化學(xué)染色法及其在急性白血病鑒別診斷中的臨床意義。

臨床血液檢查—常見血液病血液學(xué)特征、輸血與配血

1、掌握四類七種常見血液病血液學(xué)特征

2、了解配血與輸血原則

第四章 血栓與止血障礙的檢查

1熟悉引起止血與凝血障礙的常見原因。2掌握止血與凝血障礙常用檢驗(yàn)法的臨床意義。3熟悉止血與凝血障礙常用檢驗(yàn)方法的原理。熟悉出血性疾病的實(shí)驗(yàn)室檢查選用原則及實(shí)驗(yàn)室診斷的步驟。了解播散性血管內(nèi)凝血的基本檢查。

臨床生物化學(xué)檢查

1熟悉各種蛋白質(zhì)、脂類、氨基酸、膽紅素檢測(cè)的參考范圍及其臨床意義

2掌握各種血清酶、水、電解質(zhì)酸堿平衡、血?dú)夥治?、?nèi)分泌激素的參考范圍及其臨床意義。3了解鈣磷代謝、治療藥物的基本檢查。

第五章 主要器官的實(shí)驗(yàn)室檢查

1掌握常用肝功能試驗(yàn)及肝臟疾病實(shí)驗(yàn)室檢查選用原則與檢查程序。掌握常用心臟疾病實(shí)驗(yàn)室檢查選用原則與檢查程序。3 掌握常用腎功能試驗(yàn)選用原則與檢查程序。4 熟悉胰腺、骨相關(guān)代謝的實(shí)驗(yàn)室檢查的選用原則及檢查程序。熟悉甲狀腺/甲狀旁腺、腎上腺、性腺、腦垂體分泌激素的實(shí)驗(yàn)室檢查的選用原則及檢查程序。

第五章 臨床免疫學(xué)檢查

一、掌握免疫功能評(píng)價(jià)常用檢查方法及臨床意義

二、掌握病毒性肝炎血清標(biāo)志物、類風(fēng)濕因子（RF）測(cè)定、肥達(dá)（Widal）試驗(yàn)的參考值與臨床意義。

三、熟悉自身抗體檢查的常用項(xiàng)目：抗核抗體的檢查、抗雙股DNA抗體測(cè)定、抗ENA抗體測(cè)定及其臨床意義。第六章 臨床病原學(xué)檢查

掌握標(biāo)本的采集和運(yùn)送的注意事項(xiàng)

熟悉細(xì)菌、病毒、真菌和寄生蟲的檢驗(yàn)程序與特點(diǎn)；熟悉各系統(tǒng)感染時(shí)的細(xì)菌、病毒和真菌的檢查項(xiàng)目；掌握敗血癥的概念和細(xì)菌感染檢查項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用。熟悉性傳播疾病的概念、標(biāo)本采集和檢查項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用

掌握抗菌藥物敏感性試驗(yàn)和細(xì)菌耐藥性的檢查 熟悉醫(yī)院感染的實(shí)驗(yàn)室診斷

第七章 臨床細(xì)胞遺傳學(xué)與分子生物學(xué)檢查

熟悉PCR、染色體的檢測(cè)、基本芯片技術(shù)的概念、原理、臨床應(yīng)用

熟悉21-三體綜合征、X單體綜合征、47，XYY綜合征的染色體病檢查；血友病的基因突變病檢查

了解DNA測(cè)序、SNP、DNA印跡技術(shù)、FISH檢測(cè)

第九章 體液、分泌物、排泄物檢查掌握尿液檢驗(yàn)原理與方法

1掌握其參考范圍及臨床意義。

2熟悉糞便檢驗(yàn)法，掌握其異常變化的臨床意義；熟悉糞便隱血試驗(yàn)的方法，掌握其臨床意義。

3掌握脊液檢驗(yàn)的臨床意義、適應(yīng)征及參考值。4熟悉常見腦及腦膜疾病的腦脊液特點(diǎn)； 5掌握漿膜腔積液檢查的臨床意義，漏出液與滲出液的鑒別要點(diǎn)。