第一篇：2018高中生物第五章植物的組織培養(yǎng)技術52植物種苗脫毒技術素材中圖版1!

植物種苗脫毒技術

——莖尖脫毒的實例

（一）、莖尖脫毒

1、莖尖脫毒的依據(jù)。

病毒在植物體內(nèi)分布是不均一的，越接近生長點約（0.1-1mm區(qū)域），病毒濃度越稀，因此有可能采用小的莖尖離體培養(yǎng)而脫除植物病毒。

2、莖尖培養(yǎng)法脫除植物病毒的技術關鍵

（1）、被脫毒植物攜帶病毒的診斷及其在體內(nèi)的分布

脫毒之前，應了解植物攜帶何種病毒，病毒在體內(nèi)的分布位置，以確定培養(yǎng)莖尖的大?。?）、母體植株的選擇和預處理

母體的選擇：

欲脫毒材料的品種典型性：關系到脫毒以后的脫毒苗是否保持原品種的特征特性

植體健康程度選擇：應選感病輕、帶毒量少的健康植株作為脫毒的外植體材料，這樣更容易獲得脫毒株。外植體預處理：（3）、莖尖的剝離

在剝?nèi)∏o尖時，把莖芽置于解剖鏡下（8~40倍），一只手用鑷子將其按住，另一只手用解剖針將葉片和葉原基剝掉，解剖針要常常蘸入90%酒精，并用火焰灼燒以進行消毒。但要注意解剖針的冷卻，可蘸入無菌水進行冷卻。當一個閃亮半圓球的頂端分生組織充分暴露出來之后，用解剖刀片將分生組織切下來，為了提高成活率，可帶1-2枚幼葉，然后將其接到培養(yǎng)基上。接種時確保微莖尖不與其他物體接觸，只用解剖針接種即可。剝離莖尖時，應盡快接種，莖尖暴露的時間應當越短越好，以防莖尖變干。可在一個襯有無菌濕濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)進行操作，有助于防止莖尖變干。

將接種好的莖尖置于25℃左右的溫度下。每天以16小時 2000-3000lx的光照條件下培養(yǎng)。由于在低溫和短日照下，莖尖有可能進入休眠；所以較高的溫度和充足的日照時間必須保證。微莖尖需數(shù)月才能成功。

繼代培養(yǎng)得到足夠的檢測苗、進行病毒檢測。（4）、脫毒效果檢測

A 指示植物鑒定(indicator test plants)所謂指示植物是指具有能夠辨別某種病毒的?；园Y狀的寄主植物。

每種病毒都有自己敏感的植物，例如：

馬鈴薯病毒的敏感植物有千日紅、黃花煙、心葉煙、毛葉曼佗羅 大麗花病毒的敏感植物為：矮牽牛、黃瓜、莧色蘺 菊花病毒：矮牽牛、豇豆

指示植物鑒定病毒的方法 a.摩擦接種法：

取培養(yǎng)植株的葉片置于研缽中，加入少量的水和等量的0.1mol/L磷酸緩沖液（pH 7.0），磨成勻獎，將其涂抹在指示植株葉片上，在指示植物的葉片撒上金剛砂，通過輕輕摩擦使汁浸入葉片表皮細胞而又不損傷葉片。5分鐘后用清水清洗葉面。將指示植株放于防蚜蟲網(wǎng)罩的溫室內(nèi)。然后視其病斑的有無，來判斷是否脫除了病毒。

例如：植物液接種后如使千日紅葉片枯斑，黃花煙、心葉煙呈花葉，證明該植物體內(nèi)具有馬鈴薯X病毒 b、嫁接法

有些病毒不是通過汁液傳播，而是通過專門的介體傳播的，例如草莓黃花病毒、草莓叢枝病毒是通過一種特殊的蚜蟲為介體進行傳播的。這種病毒的鑒定，需將培養(yǎng)植株的芽嫁接在敏感植物上，根據(jù)敏感植株的病癥來判斷是否脫除了病毒

B 血清鑒定(serologic test)試管沉淀反應；免疫雙擴散；酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)。a、試管沉淀反應

在抗原-抗體最適比例的條件下，觀察有無沉淀的產(chǎn)生來確定被測植株是否帶病毒。試管沉淀反應操作簡單，需注意的問題： ①、葉綠體的自發(fā)凝聚

可用磷酸緩沖液提取汁液，再用氯仿處理除去葉綠體，pH 保持在6.5-8.5）

②、抗原抗體的比例要適當，當抗原過量時回抑制沉淀的形成 b、免疫雙擴散

在半固體凝膠中測定在其中擴散的抗原和抗體間的沉淀反應的方法。與沉淀法比較起來有兩個優(yōu)點：一是節(jié)約血清，二是汁液不用特殊處理。

步驟：

①倒膠，一般厚2mm ②打孔，多打成梅花型

③加樣，加血清和汁液。

一般加樣后在37℃恒溫過夜，即可進行結(jié)果觀察。有擴散沉淀的即為帶毒株，沒有則為不帶毒株

c、酶連免疫吸附測定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）

它是將抗原、抗體的免役反應和酶的高效催化反應有機結(jié)合起來的一種綜合性技術。即通過化學的方法將酶與抗體或抗原結(jié)合起來，形成酶標記物。然后將它與相應的抗原或抗體起反應，形成酶標記的免疫復合物。結(jié)合在免疫復合物的酶，在遇到相應的底物時，催化無色底物生成有色底物，通過比色計可以準確測定。優(yōu)點是靈敏度高，測定快速，每次可以同時測定多個樣品。

C 電鏡檢查法

采用電子顯微鏡，可直接觀察樣品材料有無病毒存在，還可以進一步鑒定病毒顆粒大小、形狀和結(jié)構，這些特征相當穩(wěn)定，因此電鏡檢查法即準確又有效，但需要有一定的設備和技術。

第二篇：關于植物組織培養(yǎng)技術感想

關于植物組織培養(yǎng)技術的感想

植物組織培養(yǎng)俗稱植物克隆，是當今國際農(nóng)業(yè)領域的一項高新植物育苗技術，是在無菌條件下，將植物器官、組織、花藥、體細胞甚至原生質(zhì)體等外植體接種到人工配制的培養(yǎng)基上培育成植株的技術。研究人員可以通過研究外植體其在不受植物體其他部分干擾的條件下的生長和分化規(guī)律，另一方面，研究植物體的器官、組織和細胞在改變培養(yǎng)條件，包括培養(yǎng)基的配方、光照和培養(yǎng)溫度等的生長、分化和發(fā)育規(guī)律，從而解決植物形態(tài)建成中的實際問題，為農(nóng)林、醫(yī)學等生產(chǎn)提供理論基礎及實踐指導。

一、植物組織培養(yǎng)的原理

植物細胞的全能性是指植物體的任何一個細胞都具有生長分化成為一個完整植株的能力，整個過程包括細胞的脫分化和再分化過程。植物組織培養(yǎng)是利用植物細胞全能性，將其從植物體中分離出來，這一過程稱細胞脫分化，然后在一定的培養(yǎng)條件下經(jīng)再分化，最后形成完整的植株的過程。

二、植物組織培養(yǎng)的基礎條件

植物組織培養(yǎng)的技術條件主要包括培養(yǎng)基的配制、無菌條件和培養(yǎng)條件等。

（一）培養(yǎng)基的配制

植物組織培養(yǎng)中一個關鍵的步驟。對組織培養(yǎng)的外植體生長而言，培養(yǎng)基的組分是一個決定性的因素，不同的植物材料要求不同的培養(yǎng)基，適于誘導愈傷組織的培養(yǎng)基不一定適于器官分化，適于固體培養(yǎng)的培養(yǎng)基不一定適于液體培養(yǎng)，因此要想獲得成功，必須精心選擇適宜的培養(yǎng)基。根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)，可將植物組織培養(yǎng)分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)。不同的外植體、不同的培養(yǎng)方法、不同的培養(yǎng)目的等，都要求采用不同的培養(yǎng)基。

一般來說植物體對土壤的pH值有一定的要求，所以外植體培養(yǎng)基也不例外。目前，在植物組織培養(yǎng)上常用的培養(yǎng)基有十幾種，其主要成分是大致如下：首先，培養(yǎng)基中含有大量的水分，可以滿足外植體生長對水分的需要。

其次，培養(yǎng)基中的礦質(zhì)元素包括植物必需的大量礦質(zhì)元素N、P、K、Ca、Mg、S和微量元素Fe、Mn、B、Cu、Zn、Mo、Cl以及非必需的Na等。糖除了給外植體提供碳源外，還可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透勢。碳源一般采用蔗糖，少量采用葡萄糖，濃度各有不同。

植物生長素和細胞分裂素要根據(jù)培養(yǎng)的目的適當選用?？刹捎肐AA、IBA和NAA、KT、6-BA、ZT等。在誘導根和芽的等不同分化時段，還需根據(jù)要求調(diào)整培養(yǎng)基養(yǎng)分的比值。維生素B(硫胺素)是必需的，而煙酸、B16雖屬于不必需，但對生長有促進作用，所以一般也添加到培養(yǎng)基中。有些培養(yǎng)基中還包括氨基酸、水解酪蛋白、酵母汁、椰子乳等有機附加物，以促進細胞的分化。

（二）無菌條件

根據(jù)前面的配制可知，由于營養(yǎng)基的營養(yǎng)十分豐富，微生物極易滋生而造成污染，因此，在植物組織培養(yǎng)的整個過程中都必須保持嚴格的無菌條件。所以消毒顯得重要。外植體的消毒通常采用氯化汞、過氧化氫、次氯酸鈣、次氯酸鈉或70%的酒精等，消毒后需用無菌水充分沖洗。用具必須進行高溫高壓滅菌。培養(yǎng)室要盡量保持無菌狀態(tài)，定期用紫外燈照射和用殺菌劑熏蒸殺菌。

(三)培養(yǎng)條件

自然界中的植物體所需的光、溫、水、氣，植物組織培養(yǎng)時也同樣所需要。水分和氧氣條件一般容易得到滿足，而植物組織培養(yǎng)條件可通過人為控制光照和溫度，溫度一般控制在25~28℃之間，有的還要求有晝夜溫差，主要通過控制光強和光周期進行調(diào)節(jié)。人工光照一般采用日光燈，也可以透光的玻璃培養(yǎng)室利用自然光照。

三、植物組織培養(yǎng)的優(yōu)缺點

（一）植物組織培養(yǎng)技術優(yōu)點

植物可以不受生長季節(jié)限制地繁殖；不攜帶病毒，防止植物病毒的危害，極大的提高了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)效率；培養(yǎng)周期短，短時間內(nèi)大批量的培育出所需要的植物新個體；可用組培中的愈傷組織制取特殊的生化制品；可短時間大量繁殖，用于拯救瀕危植物；可誘導之分化成需要的器官，如根和芽；解決有些植物產(chǎn)種子少或無的難題，如將香蕉進行組培得到人工種以方便移種。

（二）植物組織培養(yǎng)的缺點

為了滿足人們生活需要，吃飯問題已經(jīng)與組培快繁密不可分了。由于培養(yǎng)基幾乎完全屬于人為調(diào)配獲得的，這就導致一個問題，調(diào)控的人是否理解植物的特性、是否熟悉培養(yǎng)基的理論和植物生理、是否有足夠的經(jīng)驗來駕馭組織培養(yǎng)技術，這幾點都決定了組培育苗的品質(zhì)。如果嚴格把關組培過程的話，那么組織培養(yǎng)或快速繁殖所獲得的苗，跟葉插、砍頭苗完全一樣，能最大程度的保留了植物的完整基因組。這是組培快繁的最大優(yōu)勢，這也就決定了目前重要的作物、名貴花卉的繁殖和保存也都是組培快繁的途徑實現(xiàn)的。

轉(zhuǎn)基因植物食品對我們來說已經(jīng)是一個公開的話題，也是借助組培快繁平臺來完成，我們生活中至少接觸30種轉(zhuǎn)基因植物的衍生產(chǎn)品。資料顯示這些衍生產(chǎn)品的缺點也比較明顯：1）表現(xiàn)為“硬化”不足，即從實驗室進入溫室后進行馴化栽培時間不夠，行內(nèi)稱作“硬化”。2）激素殘留明顯，或者對激素的敏感性變化，少部分苗會在后期發(fā)根后呈現(xiàn)出一些殘留激素效應，這種效應不會超過一年，表現(xiàn)為容易出側(cè)芽、大量畸形根、生長周期紊亂、開花增多等。但是這種情況并不是組培快繁苗所特有，用激素誘導的葉插和砍頭苗也會出現(xiàn)這種癥狀，甚至更夸張！因此這一點并不是鑒別組培苗的根本。3）對有性繁殖的影響，由于組培快繁獲得的苗都是小苗，需要經(jīng)過硬化和長期的溫室栽培才可能開花，所以一般存在對有性繁殖無影響。4）根原基異常，由于激素環(huán)境下會對導致根原基維管束的排列紊亂，這就導致了出根可能會受到抑制，正常的根無法順利萌發(fā)。

四、植物組織培養(yǎng)在生產(chǎn)實踐上的應用

（一）植物體的無性快速繁殖及脫毒

用組織培養(yǎng)技術進行植物的無性快速繁殖，已廣泛應用于一些花卉、果樹等園藝作物、農(nóng)作物以及林木的育苗。如廣東、廣西和海南島香蕉的種植已大多采用試管苗，甘蔗和蘭花試管苗也已大量應用于生產(chǎn)，柑橘、菠蘿、草莓、桉樹以及其他許多花卉等也利用試管苗進行栽培。

受病毒感染的馬鈴薯植株，除了莖尖生長錐外，其他部位往往都帶有病毒。因此，繼續(xù)用塊莖作繁殖材料，必將導致后代植株染病。若利用莖尖生長錐作外植體進行無性快速繁殖，所生產(chǎn)出的幼苗將不帶病毒，從而達到脫毒的目的，可解決馬鈴薯品種的退化問題。利用組織培養(yǎng)技術進行無性快速繁殖具有許多優(yōu)缺點，在實際生產(chǎn)中應該注意揚長避短，本著良心去做事，最好是建立相應的法規(guī)并嚴格執(zhí)行。

（二）花粉培養(yǎng)和單倍體育種

利用花粉進行組織培養(yǎng)可以獲得單倍體植株。進行單倍體育種，可以加速育種的進程并可獲得純系。我國已培育出10多種花粉植株，如水稻、小麥、大黑麥、小黑麥、玉米、甜菜、茄子、煙草、辣椒、楊樹和橡膠樹等，其中小麥“花培一號”、煙草“單育一號”等優(yōu)良品種已廣泛應用于生產(chǎn)。

（三）人工種子

將植物組織培養(yǎng)中產(chǎn)生的體細胞胚包裹在含有養(yǎng)分的膠囊內(nèi)，可像種子一樣直接播種到大田用于生產(chǎn)，即所謂的人工種子。天然種子中的胚是合子胚，而人工種子中的胚是體胚，胚乳和種皮也是人工的。目前，已有胡蘿卜、芹菜、苜蓿、棉花、玉米、水稻、橡膠樹等幾十種植物的人工種子試種成功，但成本相對較高，美國己大規(guī)模生產(chǎn)樹木的人工種子。

（四）原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細胞雜交

采用酶法去除細胞壁的原生質(zhì)體培養(yǎng)，不僅是研究細胞生命活動機理的良好體系之一，還可以通過原生質(zhì)體培養(yǎng)開展原生質(zhì)體融合與體細胞雜交，獲得新品系、新品種。從理論上講，細胞雜交比有性雜交可得到更多的不同類型。

五、總結(jié)

目前，植物組培方式以固體培養(yǎng)基培養(yǎng)為主，液體培養(yǎng)基培養(yǎng)由于具有物質(zhì)交換快，生長速度快，產(chǎn)生的代謝物質(zhì)不會在組織周圍積累等優(yōu)點，值得大力研究與推廣。同時要有計劃、有步驟地引進先進的植物組培苗生產(chǎn)配套設施，建立健全培養(yǎng)室組培快繁與溫室栽培相配套的組培苗生產(chǎn)體系，確保培育出高質(zhì)量的商品化組培苗。

總之，植物組織培養(yǎng)技術仍處于發(fā)展階段，還存在許多問題，其潛力也沒有得到充分發(fā)揮，許多機理有待深入探索，相信但隨著科技的進步和社會的發(fā)展，問題可以逐步得以解決。希望在不久的將來，植物組織培養(yǎng)技術能夠我國開發(fā)西部、建設森林城市、綠化山川、防風固沙、退耕還林、以及調(diào)整農(nóng)村產(chǎn)業(yè)結(jié)構中發(fā)揮巨大作用，該項技術將會在我國甚至全世界將發(fā)揮舉足輕重的作用。

第三篇：果樹組織培養(yǎng)脫毒技術與檢測方法

果樹組織培養(yǎng)脫毒技術與檢測方法 王曉丹

（化學與生命科學學院 110802 彭慶園）

(浙江省縉云縣農(nóng)業(yè)局特產(chǎn)站 縉云323000)摘要：果樹組織培養(yǎng)有著十分廣闊的應用前景，然而在果樹組織培養(yǎng)過程中，果樹容易受到病毒的侵染，一旦果樹感染上了病毒，其產(chǎn)量和質(zhì)量都會大大減少。為了提高農(nóng)產(chǎn)品商品產(chǎn)出率和能夠有效的保持優(yōu)良品種的特性，介紹了幾種果樹脫除病毒的方法及其原理、方法和優(yōu)缺點，并介紹了幾種常用的病毒檢測方法及其優(yōu)缺點。

關鍵詞：果樹組織培養(yǎng)；脫毒技術；檢測技術

果樹是多年生植物，在長期無性繁殖過程中，大多感染和積累了多種病毒。1965年世界各國在落葉果樹上共發(fā)現(xiàn)84種病毒病，到2003年增加到180種。目前。我國各地調(diào)查鑒定明確的果樹病毒及類病毒病害約60種Ⅲ，因而每年都必須更新母株。病原菌的侵染并不都會造成植物的死亡，很多病毒甚至可能不表現(xiàn)任何可見癥狀，然而，在果樹中病毒的存在會減少其產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量。果樹病毒病與其他一年生的植物的病毒病相比，有很多不同之處，其發(fā)生特點具有全身侵染、．嫁接侵染、混合侵染、潛伏侵染。然而果樹病毒也是植物病毒的一部分，就病毒本質(zhì)來講。果樹病毒與其他植物病毒是相同的，即病毒在植物體內(nèi)的分布是不均勻的。利用這一特點，采取植物莖尖生長點等組織或器官進行組織培養(yǎng)，可以達到脫去病毒．恢復和提高植物的優(yōu)良品質(zhì)和性狀的目的。植物脫毒后，生長再澆回頭水，以后注意保持苗床濕潤。脫毒技術 1．1 熱處理法

將植物材料在高于正常溫度的環(huán)境條件下處理定的時間，使植物病原失去活性或鈍化病毒，而植物的生長受到較小的影響或在高溫生長加快，這樣植物的新生部分不帶病毒，取該無病毒組織培育即可獲取無病毒植株，是園藝植物病毒脫除處理中應用最早和最普遍的方法之一?，F(xiàn)在更常用的方法是將病毒感染的植物用35℃～38℃熱空氣處理2—4周或者更長時間進行脫毒．然后要立即把莖尖切下來嫁接到無病的砧木上。此法尤其適合處理生理干旱的材料和處于休眠狀態(tài)的果樹。其原理是利用病毒和寄主植物對高溫的忍耐性的差異，使植物的生長速度超過病毒的擴散速度．得到一小部分不含病毒的植物分生組織，進行無毒個體培育[31。熱處理脫毒法已應用多年，被世界多個國家利用。該項技術要求的設備條件比較簡單，脫毒操作也比較容易。主要缺陷：熱處理只對那些球狀的病毒(如葡萄扇葉病毒[

41、蘋果花葉病毒[51)或線狀的病毒(如康乃馨病毒)有效果，而對桿狀病毒(如牛蒡斑駁病毒)不起作用。很多不能由單獨的熱處理消除的病毒，可以通過莖尖培養(yǎng)和熱處理相結(jié)合，或單獨的莖 尖培養(yǎng)而消除。

1．2 莖尖培養(yǎng)脫毒法

莖尖培養(yǎng)脫毒原理：在頂端生長點的分生組織病毒濃度低，大部分細胞不帶病毒，取頂端生長點培養(yǎng)可獲得無病毒植株，越接近生長點，病毒含量越少。病毒的DNA隨細胞的分裂而復制，兩者存在競爭，生長點分裂的速度比病毒快，一般來說不含病毒?，F(xiàn)在莖尖培養(yǎng)脫毒法已經(jīng)成為植物無毒苗生產(chǎn)中應用最廣泛的一種方法。莖尖培養(yǎng)方法：最主要的影響因素就是莖尖大小，一般要求莖尖長度小于1 mm。技術上通常切取莖尖越小，脫毒效果越好，但是莖尖培養(yǎng)成活率變低。曹為玉等研究發(fā)現(xiàn)，葡萄莖尖長度與存活率成正相關，與脫毒率成反相關。當切取莖尖長度為0．2～0．3 mm時，存活率為21％～38％，脫毒率為91．4％～97％；當切取O．5 mm以上時，存活率為75％～83％ ．脫 毒率僅為70．6％～76．5％[4]對于不同的李屬植物，脫毒效果主要取決去病毒的類型而不是植物種類。近來，Barlass等(1982)采用一種特殊的莖尖培養(yǎng)方法培育無病毒葡萄．在無菌條件下，用解刀取大小為1 mm的莖尖．其結(jié)果是，不定芽發(fā)芽在葉原基的左邊，脫毒株率取決于培養(yǎng)時的溫度同。

1．3 熱處理與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合法

莖尖培養(yǎng)脫毒法脫毒率高，但存在的缺點是植物的存活率低。為克服這一缺點，經(jīng)常是將熱處理與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合來使用。熱處理與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合之所以能夠提高脫毒效果。是由于熱處理可使植物生長本身所具有的頂端免疫區(qū)得以擴大。有利于切取較大的莖尖(約1mm)，從而能夠提高培養(yǎng)的成活率。

1．4 抗病毒藥劑法

這是一種新的脫毒方法．其作用原理是抗病毒藥劑在三磷酸狀態(tài)下會阻止病毒RNA帽子結(jié)構17Schuser和Hu2ber研究認為抗病毒抑制劑能阻止馬鈴薯X病毒的復制，在早期破壞RNA 聚合酶的形成，在后期破壞病毒外殼蛋白的形成。常用的抗病毒化學藥物有三氮唑核苷(病毒唑)、5一二氫尿嘧啶(DHT)和雙乙酰一二氫一5一氮尿嘧啶(DA—DHT)。這些藥物常通過直接注射到帶病毒的植株上，或加到植株生的培養(yǎng)基上。經(jīng)過抗病毒藥劑處理的嫩莖，切取莖尖，再進行組織培養(yǎng)，就會提高脫毒率和成活率。采用病毒抑制劑與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合的脫毒方法，可以較容易的脫除多種病毒，而且這種方法對取材要求不嚴，接種莖尖可大于1 mm，易于分化出苗，提高存活率。但是有些病毒比較難去除。單獨使用其中

某一個方法很難獲得成功，所以有人將熱處理、抗病毒藥劑和莖尖培養(yǎng)相結(jié)合使用，效果更好。如

Deigratias等(1989)把這3種方法結(jié)合起來，成功地脫除了甜櫻桃上的櫻桃矮化病毒、櫻桃壞死環(huán)斑病毒和蘋果褪綠葉斑病毒 ；Chen等(1991)利用這種方法去除了花生斑駁病毒[81。

1．5 微芽嫁接脫病毒

組織培養(yǎng)與嫁接相結(jié)合，是獲得無病毒苗木的一種技術。這種技術首先成功應用于柑橘脫病毒，以后逐漸應用到其他多種果樹病毒的脫除。微芽嫁接已成為柑橘脫病毒良種培養(yǎng)的常規(guī)方法，得以廣泛一三 的應用。在西班牙，Navaho等(1997)采用該技術脫除柑橘病毒獲得了脫毒率達80％以上的令人滿意的結(jié)果。有人實驗。從試管培養(yǎng)10～14 d的桃樹新梢，切取0．5—1．0 mm帶有3—4個葉原基的莖尖進行嫁接。成活率4O％～70％ ．獲得脫除李屬壞死環(huán)斑病毒(PNRSV)、李矮縮病毒(PDV)和蘋果褪綠葉斑病毒(ACLSV)㈣的桃苗。微芽嫁接不僅是獲得無病毒苗木的方法之一。同時還可解決某些植物營養(yǎng)繁殖生根難的問題。

1．6 抗病毒果樹基因工程

近些年來分子生物學的發(fā)展，特別是基因工程的興起為防治病毒病帶來了希望?，F(xiàn)已有多種病毒基因被導入到植物的基因組中而產(chǎn)生了不同程度的抗病效果。目前果樹上采用的的抗病毒策略主要有以下3種：(1)外蛋白基因策略；(2)病毒衛(wèi)星RNA基因策略；(3)運動蛋白基因策略 脫毒效果檢測方法 經(jīng)過脫毒處理的植株是否還存在病毒．須經(jīng)過病毒學檢測才能確定．可靠的病毒檢測方法與建立有效的脫毒方法同等重要。傳統(tǒng)上一直沿用的檢測方法是目測法，但是這種方法無法剔除潛隱性病毒。后來出現(xiàn)的指示植物法。擴大了檢測范圍。近年來隨著生物科學的迅猛發(fā)展。免疫學方法、分子生物學方法等許多先進的理化技術的應用，促進了病毒檢測技術的改進與發(fā)展。下面簡要介紹幾種檢測脫毒苗的方法。

2．1 性狀鑒定 脫毒苗葉色濃綠，均勻一致，長勢好。帶毒株長勢弱，葉片表現(xiàn)褪綠條斑，扭曲、植株矮化(大蒜)，花葉或明脈壞死。卷葉、植株矮縮等(馬鈴薯)，花葉褪綠斑點(甘薯、康乃馨等)，表現(xiàn)出病毒病癥狀的植株可初步定位病株。根據(jù)癥狀診斷要注意區(qū)分病毒病癥狀與植物的機械損傷、蟲害及藥害等表現(xiàn)。

2．2 指示植物法

當原始寄主的癥狀不明顯時，就可用指示植物法，因為指示植物比原始寄主更容易表現(xiàn)癥狀。具體做法是將病葉研磨，把汁液接種到寄主植物上。指示植物法簡便易行，但其靈敏性差，所需時間長，難以區(qū)分病毒種類【砌。例如：百合體內(nèi)的一些病毒可以采用汁液接種法，接種到其他草本植物上，然后根據(jù)指示植物的感病表現(xiàn)研究病毒的生物屬性特征并進行種類鑒定。此外，有些草本植物病毒可采用嫁接法進行接種鑒定．如草莓病毒鑒定常用小葉嫁接接種法【ll】。

2．3 血清學方法

抗血清鑒定法要進行抗原的制備、抗血清的采收、分離等。血清可分裝到小玻璃瓶中，貯存在一15℃一25℃的冰凍條件下。測定時。把稀釋的抗血清與未知的病毒植物在小試管內(nèi)混合，這一反應導致形成可見的沉淀．然后根據(jù)沉淀反應來鑒定病毒。此法靈敏度高，獲得檢測結(jié)果迅速。

2．4 電子顯微鏡檢測

采用電子顯微鏡既可以直接觀察病毒，檢查出有無病毒存在，了解病毒顆粒的大小、形狀和結(jié)構，又可鑒定病毒的種類，但需一定的設備和技術。由于電子的穿透力很低，制品必須薄到10～100 m，通常制成厚20 m左右的薄片，置于銅載網(wǎng)上，才能在電子顯微鏡下觀察到。近代發(fā)展使電鏡結(jié)合血清檢測病毒，稱為免疫吸附電鏡(ISEM)。

2．5 酶聯(lián)免疫法

方法是將抗原固定在支持物上，加入待檢血清，然后加入酶(過氧化物酶或堿性磷酸酶)標記的抗體，使待檢血清與對應抗原的特異性抗體結(jié)合，最后用分光光度計進行診斷。

2．6 RT-PCR檢測

RT—PCR技術靈敏而且用途廣．可用于檢測病毒DNA的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物及分析表達的水平。該方法已用于大蒜脫毒苗檢測。小結(jié) 綜上所述，現(xiàn)有的脫毒技術多種多樣，各有優(yōu)缺點。常用的脫毒技術是熱處理法、莖尖培養(yǎng)法、抗病毒藥劑法． 目前應用的趨勢是將不同的方法結(jié)合起來應用。隨著脫毒苗的大量生產(chǎn)．脫毒苗的檢測技術也越來越重要?，F(xiàn)在廣泛應用的檢測技術有兩種，即ELISA方法和RT_PCR方法。但是ELISA方法需要制備抗體，而且一次只能檢測一種病毒。所以相比較來說。最有前途的應當是RT—PCR技術，與其他方法相比，它特異性強、靈敏度高，而且不需要制備抗血清以及放射性探針，操作簡單，適于廣泛應用。參考文獻

【1]t國平，洪霓．果樹的脫毒與組織培養(yǎng)【M】．北京：化學工業(yè)出版社，2005． 【2】姚立平，石文平．對組培技術應用的幾點建議[J]．遼寧林業(yè)科技，2005(4)．

【3]張尊平，洪霓，姜修風，等．蘋果熱處理脫毒技術的改進[J】．北方果樹。1996(4)：12—13．

第四篇：高中生物 植物資源分類素材

植物資源分類

中國是植物資源十分豐富的國家，共計有植物種類3184屬，27150種，居世界第三位。其中可作為資源開發(fā)利用的共2411種，約為全國植物種類的1/10。植物資源按用途可分為食用、藥用、工業(yè)用、保護改造環(huán)境用和種植資源五大類：

食用植物資源

食用植物資源包括直接食用和間接食用的植物?？煞譃榈矸邸⑻穷愔参?，蛋白質(zhì)植物，油脂植物，維生素植物，飲料植物，食用香料色素植物，植物性飼料、餌料七種。其中淀粉、糖類植物是中國野生植物中較主要的種類，包括各種橡子、薯芋、蘑芋、蕨類、葛根、菱等，含糖及甜味植物包括龍眼、荔枝、柿、棗、羅漢果等；蛋白質(zhì)植物包括葉蛋白、食用菌類、小球藻、四棱豆、派克豆等；全國現(xiàn)有含油量在15%以上的野生油料植物約1000種，其中含油量在20% 以上的有300種，能夠食用的百余種，包括蝴蝶果、油瓜、榛子等；維生素植物包括獼猴桃、陽桃、沙棘、山楂、海棠等，多以野生為主；飲料植物包括茶葉、可可、咖啡以及一些地區(qū)性飲料植物，如白茶、菊花茶、金銀花等；食用香料色素植物包括有傳統(tǒng)食用色素如茜草、紅花、姜黃等和傳統(tǒng)調(diào)味香料如花椒、八角、桂皮等。植物性飼料、餌料包括大部分禾草類、豆科植物的枝葉果實，如各種野芭蕉、構樹葉、高山櫟等。

藥用植物資源

中國現(xiàn)有藥用植物11146種，可分為中草藥和植物性農(nóng)藥兩類。其中中藥草植物達5000種以上，常用的約400種，如人參、杜仲、黃連、甘草等，有些已進行人工栽培和制造成藥；植物性農(nóng)藥植物包括土農(nóng)藥植物，如除蟲菊、沖天子、魚藤等近500種，植物激素如露水草等，也可作為農(nóng)藥使用。

工業(yè)用植物資源

工業(yè)用植物資源包括木材、纖維、鞣科、芳香油、膠脂、工業(yè)用油脂及植物性染料七種。中國是少林國家且森林分布不均勻，木材資源較少，今后國家將大力發(fā)展泡桐、杉木、楊樹等優(yōu)良速生樹種的種植；中國現(xiàn)有重要纖維植物190種，多為禾本科、鳶尾科、香蒲科、龍舌蘭科、棕櫚科等單子葉植物的桿葉及榆、桑、蕁麻、木棉、等植物的根、莖、皮部或果實的棉毛，用于紡織業(yè)、造紙業(yè)和編織業(yè)；鞣料資源包括各種落葉松、云杉、鐵杉等，它們含有豐富的單寧，可用于烤膠鞣革和制藥；芳香油植物是提取香料、香精的主要原料，中國種子植物中約有60余科為含有芳香油的植物，包括木姜子、樟樹、楓茅、香草等；植物膠資源包括富含橡膠、硬膠、樹脂、水溶性聚糖膠等的植物，是橡膠工業(yè)的重要原料，包括各種松科、豆科、瓜兒豆、金合歡等；中國的工業(yè)用油脂植物資源中，含油量在 20%以上大約有300種，其中工業(yè)用油樹種占50%以上，包括油桐、漆樹、烏桕等，桐油、生漆是中國傳統(tǒng)的出口商品；工業(yè)用植物性染料包括桑色素、蘇木精、紅木靛葉和姜黃等。

植物資源分類

用心

愛心

專心 1

中國是植物資源十分豐富的國家，共計有植物種類3184屬，27150種，居世界第三位。其中可作為資源開發(fā)利用的共2411種，約為全國植物種類的1/10。植物資源按用途可分為食用、藥用、工業(yè)用、保護改造環(huán)境用和種植資源五大類：

食用植物資源

食用植物資源包括直接食用和間接食用的植物。可分為淀粉、糖類植物，蛋白質(zhì)植物，油脂植物，維生素植物，飲料植物，食用香料色素植物，植物性飼料、餌料七種。其中淀粉、糖類植物是中國野生植物中較主要的種類，包括各種橡子、薯芋、蘑芋、蕨類、葛根、菱等，含糖及甜味植物包括龍眼、荔枝、柿、棗、羅漢果等；蛋白質(zhì)植物包括葉蛋白、食用菌類、小球藻、四棱豆、派克豆等；全國現(xiàn)有含油量在15%以上的野生油料植物約1000種，其中含油量在20% 以上的有300種，能夠食用的百余種，包括蝴蝶果、油瓜、榛子等；維生素植物包括獼猴桃、陽桃、沙棘、山楂、海棠等，多以野生為主；飲料植物包括茶葉、可可、咖啡以及一些地區(qū)性飲料植物，如白茶、菊花茶、金銀花等；食用香料色素植物包括有傳統(tǒng)食用色素如茜草、紅花、姜黃等和傳統(tǒng)調(diào)味香料如花椒、八角、桂皮等。植物性飼料、餌料包括大部分禾草類、豆科植物的枝葉果實，如各種野芭蕉、構樹葉、高山櫟等。

藥用植物資源

中國現(xiàn)有藥用植物11146種，可分為中草藥和植物性農(nóng)藥兩類。其中中藥草植物達5000種以上，常用的約400種，如人參、杜仲、黃連、甘草等，有些已進行人工栽培和制造成藥；植物性農(nóng)藥植物包括土農(nóng)藥植物，如除蟲菊、沖天子、魚藤等近500種，植物激素如露水草等，也可作為農(nóng)藥使用。

工業(yè)用植物資源

工業(yè)用植物資源包括木材、纖維、鞣科、芳香油、膠脂、工業(yè)用油脂及植物性染料七種。中國是少林國家且森林分布不均勻，木材資源較少，今后國家將大力發(fā)展泡桐、杉木、楊樹等優(yōu)良速生樹種的種植；中國現(xiàn)有重要纖維植物190種，多為禾本科、鳶尾科、香蒲科、龍舌蘭科、棕櫚科等單子葉植物的桿葉及榆、桑、蕁麻、木棉、等植物的根、莖、皮部或果實的棉毛，用于紡織業(yè)、造紙業(yè)和編織業(yè)；鞣料資源包括各種落葉松、云杉、鐵杉等，它們含有豐富的單寧，可用于烤膠鞣革和制藥；芳香油植物是提取香料、香精的主要原料，中國種子植物中約有60余科為含有芳香油的植物，包括木姜子、樟樹、楓茅、香草等；植物膠資源包括富含橡膠、硬膠、樹脂、水溶性聚糖膠等的植物，是橡膠工業(yè)的重要原料，包括各種松科、豆科、瓜兒豆、金合歡等；中國的工業(yè)用油脂植物資源中，含油量在 20%以上大約有300種，其中工業(yè)用油樹種占50%以上，包括油桐、漆樹、烏桕等，桐油、生漆是中國傳統(tǒng)的出口商品；工業(yè)用植物性染料包括桑色素、蘇木精、紅木靛葉和姜黃等。

用心

愛心

專心 2

第五篇：崗位職責----植物技術負責人

植物技術負責人崗位職責

1.認真熟悉施工圖紙，參與項目組織的圖紙會審，編制施工技術措施及方案；

2.嚴格按照國家規(guī)范規(guī)程、驗收標準、施工組織實施與驗收； 3.協(xié)助負責人按施工組織設計制訂具體的植物施工計劃、植物材料計劃，并認真組織實施工作，并做好工作日志；

4.參與植物竣工圖的編制與繪制，配合相關部門做好竣工收方工作； 5.對現(xiàn)場植物施工班組進行管理，合理安排工種，保質(zhì)保量的完成施工生產(chǎn)任務；

6.按施工進度提出植物的需求計劃；

7.負責現(xiàn)場植物竣工后的收方工作，對甲方提出的現(xiàn)場問題進行協(xié)商解決，對業(yè)主提出的要求進行合理協(xié)調(diào)；

8.對現(xiàn)場工人的種植技術給予指導和監(jiān)督，對現(xiàn)場工人進行定期技術培訓，提高工人的生產(chǎn)技能；

9.執(zhí)行安全法規(guī)、規(guī)程，落實安全措施施工，做到安全生產(chǎn)、文明施工；

10.準確提供現(xiàn)場變更、隱檢、簽證等資料，并簽證歸檔； 11．在每道工序施工前，必須對班組做好書面技術交底，歸檔； 12．準確提出分段工作的周工作計劃及月工作計劃； 13．根據(jù)項目要求完成項目OA中表單填寫工作； 14．完成領導交辦的臨時性任務。