第一篇：《臨床技術(shù)操作規(guī)范》消化內(nèi)鏡分冊

消化內(nèi)鏡診療管理制度

一、內(nèi)鏡室的基本設(shè)置

一、人員配置

1，醫(yī)師

(1)內(nèi)鏡室必須有專職醫(yī)師（或主任）負(fù)責(zé)日常工作，在科主任的領(lǐng)導(dǎo)下，全面負(fù)責(zé)內(nèi)鏡室的各項(xiàng)工作，并參加常規(guī)診療工作。專職醫(yī)師須由主治醫(yī)師以上人員擔(dān)任。

(2)內(nèi)鏡醫(yī)師必須有堅(jiān)實(shí)的臨床基礎(chǔ)，應(yīng)在工作，年么上的住院醫(yī)師中擇優(yōu)選拔，培訓(xùn)時間不少于3個月。從事治療性內(nèi)鏡工作的醫(yī)師，培訓(xùn)時間應(yīng)適當(dāng)延長。

(3)內(nèi)鏡醫(yī)師必須既有操作技能，又有豐富的臨床及理論知識。在有條件的地區(qū)，可采取考核上崗制度。

2，護(hù)士

(1)內(nèi)鏡室應(yīng)設(shè)有經(jīng)過培訓(xùn)的專業(yè)護(hù)士，其護(hù)齡至少在3年以上。每個檢查臺應(yīng)設(shè)置1名護(hù)士(按同一時間內(nèi)開展的臺數(shù)計(jì)算)。3臺以上的內(nèi)鏡室可設(shè)立護(hù)理組或配備護(hù)士長。

(2)內(nèi)鏡室護(hù)士應(yīng)經(jīng)過專門技術(shù)培，培訓(xùn)工作應(yīng)在三級醫(yī)院內(nèi)進(jìn)行，時間不短于2個月。在有條件的地區(qū)，可采取考核上崗制度。

3.技術(shù)員

對工作量較大的內(nèi)鏡室，尤其是有x線設(shè)備的內(nèi)鏡室應(yīng)配備技術(shù)員，技術(shù)員應(yīng)有(或相當(dāng)于)中專以上學(xué)歷，經(jīng)培訓(xùn)后上崗。

二、檢查室

1.每一檢查室面積不小于20m2 ,室內(nèi)主要放置內(nèi)鏡檢查設(shè)備與清洗消毒設(shè)施。

2.檢查臺數(shù)與內(nèi)鏡臺數(shù)應(yīng)與實(shí)際檢查人數(shù)相適應(yīng)，檢查臺過少必然會導(dǎo)致鏡消毒不嚴(yán)的后果。

3.不允許將不同類型的內(nèi)鏡(如胃鏡與氣管鏡)安排在同一檢查室內(nèi)進(jìn)行。

4.胃鏡和腸鏡檢查原則上應(yīng)分室進(jìn)行。檢查人數(shù)不多的單位可分不同時間段進(jìn)行檢查，但嚴(yán)格禁止在同一清洗槽內(nèi)進(jìn)行胃鏡與腸鏡的清洗與消毒。

5.檢查室應(yīng)配有空調(diào)、相應(yīng)的水電設(shè)施、穩(wěn)壓電源裝置、吸引裝置、供氧裝置、搶救藥品及設(shè)備。

三、基本器械

1.內(nèi)鏡數(shù)量 內(nèi)鏡室的內(nèi)鏡數(shù)量應(yīng)與本院內(nèi)鏡檢查人數(shù)相一致。根據(jù)國家衛(wèi)生部有關(guān)內(nèi)鏡消毒的規(guī)定，每例內(nèi)鏡檢查后，內(nèi)鏡清洗及消毒時間不得少于20min。醫(yī)院應(yīng)根據(jù)檢查人數(shù)配置相應(yīng)的內(nèi)鏡與檢查臺數(shù)，以保證內(nèi)鏡消毒質(zhì)量。

2.內(nèi)鏡的使用與報廢制度 各內(nèi)鏡室應(yīng)建立內(nèi)鏡檔案卡，記錄內(nèi)鏡購置時間、使用頻度、檢查人數(shù)及維修情況。對不能維修使用的內(nèi)鏡實(shí)行報廢制度性能 不良的內(nèi)鏡不得用于臨床檢查。

3.器械購置 對各類輔助器械與治療器械，購置時須嚴(yán)格檢查“三證”，未經(jīng)醫(yī)療衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)的器械不得使用。

4.其他器械 活檢鉗等器械應(yīng)每例患者一把，消毒后可重復(fù)使用，有條件者可采用一次性活檢鉗，但一次性器械不得反復(fù)使用。

四、其他輔助設(shè)施

各內(nèi)鏡室應(yīng)配備足量的檢查用品。包括：

1.內(nèi)鏡檢查用品每一內(nèi)鏡檢查臺必須配有足夠數(shù)量的彎盤、牙墊、治療巾、敷料缸、紗布、各類鑷子、過濾紙片、標(biāo)本瓶、消毒手套、消毒用桶等。

五、內(nèi)鏡室的管理制度

1.內(nèi)鏡室應(yīng)實(shí)施院長領(lǐng)導(dǎo)下的科主任負(fù)責(zé)制，醫(yī)護(hù)人員必須在有關(guān)規(guī)章制度下，有條不紊地進(jìn)行工作。

2.內(nèi)鏡室應(yīng)設(shè)負(fù)責(zé)醫(yī)師〔或主任)及護(hù)士長(或護(hù)理小組負(fù)責(zé)人)，共同管理好內(nèi)鏡室的日常工作。

3.內(nèi)鏡室工作應(yīng)嚴(yán)格按《規(guī)范》的要求及標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行工作，制定出符合各醫(yī)院實(shí)際情況的內(nèi)鏡室管理制度，使各項(xiàng)工作規(guī)范化、科學(xué)化。

4.內(nèi)鏡室負(fù)責(zé)醫(yī)師的職責(zé)

(1)在科主任的領(lǐng)導(dǎo)下，完成內(nèi)鏡室日常診斷與治療工作；

(2)與護(hù)士(或組長)共同組織實(shí)施有關(guān)內(nèi)鏡室的管理規(guī)定與制度；

(3)做好對下級醫(yī)生和進(jìn)修醫(yī)生的帶教工作；

(4)負(fù)責(zé)內(nèi)鏡檢查與治療的質(zhì)量控制，嚴(yán)格執(zhí)行預(yù)約、消毒制度；

(5)制定各類人員培訓(xùn)計(jì)劃及業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)制度，以不斷提高自身的業(yè)務(wù)水平。

5.內(nèi)鏡室護(hù)士的職責(zé)

(1)做好術(shù)前局部麻醉與器械準(zhǔn)備工作；

(2)配合醫(yī)師完成各種內(nèi)鏡檢查與治療工作，檢查治療過程中，應(yīng)隨時觀察患者病情的變化，發(fā)現(xiàn)異常及時報告并協(xié)助醫(yī)師處理；

(3)負(fù)責(zé)內(nèi)鏡及附件的清洗、消毒工作；

(4)收發(fā)內(nèi)鏡申請報告及檢查報告；

(5)交待有關(guān)的醫(yī)療建議，解答患者的詢問。

6.內(nèi)鏡室技術(shù)員的職責(zé)

(1)負(fù)責(zé)內(nèi)鏡室全部器械的管理與檔案記錄，保證器械安全使用；

(2)內(nèi)鏡及附件的報廢與添置應(yīng)上報科主任；

(3)負(fù)責(zé)內(nèi)鏡室計(jì)算機(jī)設(shè)備的維護(hù)與維修；

(4)負(fù)責(zé)內(nèi)鏡設(shè)備的使用與維護(hù)。

7.內(nèi)鏡室工作應(yīng)保持整齊、清潔，工作期間，嚴(yán)禁家屬及無關(guān)人員人室觀看；醫(yī)護(hù)人員在工作時間，應(yīng)集中精力，做好本職工作，不做、不講與工作無關(guān)的事和話。

8.內(nèi)鏡室應(yīng)有例會，布里、總結(jié)工作。

9.內(nèi)鏡室應(yīng)保管好各類資料，如內(nèi)鏡檢查、治療申請單，治療內(nèi)鏡術(shù)前同意書，內(nèi)鏡報告，內(nèi)鏡圖像，消毒檢測報告，器械維護(hù)記錄等。

10，內(nèi)鏡室應(yīng)制定儀器維修制度，及時報廢陳舊器械，不斷補(bǔ)充新器械，以保證日常工作正常進(jìn)行。

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2013-10-1

一dianzhiweijing鏡檢查

上消化道內(nèi)鏡能清晰地觀察食管、胃、十二指腸壺腹至降段的粘膜形態(tài)及病變，如有病變可作活體組織病理學(xué)和細(xì)胞學(xué)檢查以確定診斷。

【適應(yīng)證】

1.有上消化道癥狀，包括上腹不適、脹、痛、燒心及反酸、吞咽不適、梗噎、噯氣、呃逆及不明原因食欲不振、體重下降、貧血等。

2.上消化道鋇餐造影檢查不能確定病變或癥狀與鋇餐檢查結(jié)果不符者。

3.原因不明的急(慢)性上消化道出血或須做內(nèi)鏡止血治療者。

4.須隨訪的病變，如潰瘍病、萎縮性胃炎、癌前病變等。

5.高危人群(食管癌、胃癌高發(fā)區(qū))的普查。

6.須做內(nèi)鏡治療者。

【禁忌證】

1.食管、胃、十二指腸急性穿孔。

2.嚴(yán)重心、肺、腎、腦功能不全及多臟器功能衰竭者。

3.精神病及意識明顯障礙不能合作者。

【術(shù)前準(zhǔn)備】

1.器材 內(nèi)鏡、光源主機(jī)、活檢鉗、細(xì)胞刷、必要的各種治療器械、表面麻醉劑、各種急救藥品(備用)以及內(nèi)鏡消毒設(shè)備。

2.技術(shù)準(zhǔn)備

(1)了解病史、檢查目的、特殊要求、其他檢查情況、有無內(nèi)鏡檢查禁忌證、有無藥物過敏及急、慢性傳染病等。

(2)向患者講明檢查目的及配合檢查須注意的事項(xiàng)。

(3)術(shù)前禁食6～8h。已做鋇餐檢查者須待鋇劑排空后再做胃鏡檢查。幽門梗阻患者應(yīng)禁食２～3d，必要時術(shù)前洗胃。最好排空大小便。

(4)咽部麻醉：檢查前15min用含2%～4%利多卡因的膠漿（內(nèi)有祛泡劑）或普魯卡因噴霧或口含，有麻醉藥過敏史者可不用麻醉。

(5)不必常規(guī)應(yīng)用鎮(zhèn)靜劑、解痙劑，對個別精神緊張或胃腸蠕動強(qiáng)者可在檢查前15rnin肌內(nèi)注射阿托品。患者條件許可時可行無痛胃鏡檢查。

(6)術(shù)前常規(guī)檢查各項(xiàng)器材是否齊備。

【操作方法及程序】

1.患者體位

(1)患者取左側(cè)臥位，頭部略向前傾，雙腿屈曲。

(2)如患者有活動假牙宜取出，松解領(lǐng)口和褲帶，輕輕咬住牙墊。

2.插鏡

目前均使用單手法：術(shù)者面向患者，左手持內(nèi)鏡操縱部，右手在距離鏡端20cm處持鏡，使鏡面對準(zhǔn)患者舌根部，將鏡端自牙墊中插至咽后壁，左手調(diào)節(jié)旋鈕方向，使之順利到達(dá)咽喉部。.囑患者做吞咽動作，順勢輕柔地插人食管。切忌用暴力硬插。

雙手法（現(xiàn)已基本不用）

3.胃鏡檢查次序插鏡后，內(nèi)鏡直視下從食管上端開始循腔進(jìn)鏡，依次觀察食管、賁門、結(jié)腸鏡檢查

結(jié)腸鏡檢查是診斷和治療大腸疾病的安全、有效、可靠、簡便的方法之一，不但可明確鋇劑灌腸X線檢查未能明確的病變，而且能取活檢做病理檢查，并對某些大腸疾病進(jìn)行治療。廣泛開展此項(xiàng)檢查，可提高早期大腸癌的發(fā)現(xiàn)率，還能對癌前期病變和大腸息肉及時治療。

【適應(yīng)證】

1.原因不明的下消化道出血；

2.原因不明的慢性腹瀉、便秘、腹痛、腹脹；

3.鋇劑灌腸發(fā)現(xiàn)有異常；

4.不能排除大腸或末端回腸的腫物；

5.原因不明的低位腸梗阻；

6.某些炎癥性腸病須做鑒別和確定累及范圍及程度；

7.大腸某些良性病變?yōu)槌鈵盒宰儯?/p>

8.大腸息肉和癌診斷已明確，為了除外其他部位有無伴發(fā)性病變；

9.行結(jié)腸鏡下治療；

10.大腸某些疾病藥物治療的隨訪；

11.大腸癌手術(shù)后，大腸息肉摘除后隨訪；

12.大腸腫瘤的普查。

【禁忌證】

1.疑有大腸穿孔、腹膜炎;

2.嚴(yán)重心、肺、腎、肝及精神疾病;

3.多次開腹手術(shù)或有腸粘連者，應(yīng)慎行結(jié)腸鏡檢查;4.妊娠期可能會導(dǎo)致流產(chǎn)或早產(chǎn)；

5.大腸炎癥性疾病急性活動期為相對禁忌證；

6.高熱、衰弱、嚴(yán)重腹痛、低血壓者，最好待病情穩(wěn)定后再行結(jié)腸鏡檢查； 7.不合作者及腸道準(zhǔn)備不充分者為相對禁忌證。

【術(shù)前準(zhǔn)備】

.1.收集病史，介紹“患者須知”，爭取患者配合;

2.檢查前3d少渣飲食，檢查前1d流質(zhì)飲食，檢查日上午禁食。檢查前晚瀉藥清腸或清潔灌腸?，F(xiàn)在有更簡便的清腸方法，可根據(jù)不同要求按說明書使用。

3.準(zhǔn)備好結(jié)腸鏡、冷光源、括檢鉗、注射針、圈套器、高頻電發(fā)生器、細(xì)胞刷、吸 引器、潤滑油等。

【操作方法及程序】

分雙人操作或單人操作法。

一、雙人操作法：

1.患者取左側(cè)臥位，常規(guī)做肛門指檢，除外肛門狹窄和直腸腫物。

2.循腔進(jìn)鏡是結(jié)腸鏡操作的基本原則，即視野中見到腸腔才能插鏡，否則要退拉一下再找腔。

3.進(jìn)鏡中常有幾個急彎腸段，如乙狀結(jié)腸、降結(jié)腸交界處，脾曲、肝曲；找腸腔如有困難，可根據(jù)見到的腸腔走行方向行滑行插人，一般滑行插人2}cm左右即現(xiàn)腸腔；如滑進(jìn)很長距離仍不見腸腔，應(yīng)該退鏡另找方向再插鏡。

可。在操作不順利時，反倒應(yīng)該多使用空氣抽吸法和向后退鏡法，或者用手按壓腹部和變換患者體位的方法為好。但送氣量過少，對整個腸管的彎曲程度和正確的走向是難以判斷的。

【注意事項(xiàng)】

1.檢查結(jié)束后觀察患者有無腹痛、腹脹、腹部壓痛，若無異常。10min后即可離去。:

2.若有腹痛、腹脹、肝濁音界消失，應(yīng)立即做腹部X線透視，如腸下有游離氣體即為消化道穿孔，應(yīng)立即外科手術(shù)。

3.書寫報告單，應(yīng)詳細(xì)描述陽性病變的部位、范圍、大小、形狀等，并解釋檢查結(jié)果?！静l(fā)癥】

1.穿孔

發(fā)生率為0.11%～0.26%，最常見為乙狀結(jié)腸穿孔，結(jié)腸穿孔一旦確診應(yīng)立即手術(shù)。腹腔外穿孔一般不須手術(shù)，予以禁食補(bǔ)液，抗感染治療，1～2周后穿孔會自行愈合，腹膜后及皮下氣腫可自行吸收。

2.出血

發(fā)生率為0.07%，大部分經(jīng)鏡下止血和保守治療可獲痊愈。

3.漿膜撕裂

也稱不完全穿孔，較少見，一般不須特殊治療，會自行愈合。4.腸絞痛

一般為檢查刺激所致，無特殊意義，能自行緩解。

5.心血管意外

結(jié)腸鏡檢查對心血管影響極其輕微，原有嚴(yán)重冠心病或心律失常者應(yīng)慎重施行。

6.呼吸抑制

大部分與術(shù)前應(yīng)用鎮(zhèn)靜或麻醉劑有關(guān)，一旦發(fā)生應(yīng)立即復(fù)蘇治療。

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起來備用。

【操作方法及程序】

1.患者通常取左側(cè)臥位。根據(jù)息肉的具體位置、大小、外形等情況，可酌情改變體位，但應(yīng)以息肉不倒臥于胃腸壁、不下垂至與對側(cè)胃腸壁貼近和易于觀察為原則。

2.用生理鹽水浸濕的紗布覆蓋于電極板，并緊密捆綁于患者左大腿外側(cè)或與左臀部緊密接觸。

3.常規(guī)插入內(nèi)鏡，發(fā)現(xiàn)息肉，充分確認(rèn)其位置、大小、形態(tài)后，反復(fù)沖洗，吸盡息肉表面粘液及周圍液體，使其暴露良好，便于息肉電凝電切操作。同時，必須吸凈胃腸腔內(nèi)的氣體，尤其在大腸息肉切除時更須注意，必要時置換空氣，以防易燃?xì)怏w在通電時發(fā)生爆炸。

4.選擇合適的電切圈套器，經(jīng)內(nèi)鏡活檢管道插入胃腸腔。在內(nèi)鏡直視下，在靠近息肉處張開圈套，將息肉套人圈套器內(nèi)。于息肉根部逐漸拉緊套圈，但切勿用力過度，防止勒斷蒂部導(dǎo)致出血。

5.拉緊圈套器后，息肉因血流阻斷而頂端變?yōu)樽仙瑔痈哳l電源，腳踏開關(guān)通電，先凝后切。若使用新型高頻電發(fā)生器，具有ENDO CUT功能，則可自動輸出混合電流，自動通以凝、切電流，更易操作和控制，直至息肉被電切成功。

6.仔細(xì)觀察確認(rèn)電切部位無出血、穿孔等并發(fā)癥后，用三爪鉗、圈套器或網(wǎng)籃撈取息肉，連同內(nèi)鏡一并退出。

【并發(fā)癥及處理】

1.出血

在手術(shù)操作過程中或手術(shù)后均可發(fā)生出血，出血可為輕度、中度或大出血。輕度出血僅見創(chuàng)面輕度滲血或緩慢溢出，可自行停止。中度出血：上消化道息肉切除術(shù)后可表現(xiàn)為嘔血或黑便；大腸息肉切除術(shù)后可表現(xiàn)為排出鮮血便，應(yīng)積極行內(nèi)鏡下止血，多數(shù)經(jīng)內(nèi)科及內(nèi)鏡治療可止血。大出血者可出現(xiàn)休克，內(nèi)科及內(nèi)鏡治療無效，應(yīng)緊急外科手術(shù)控制出血。

2.穿孔

常由于電流強(qiáng)度過大，通電時間過長，視野不佳或內(nèi)鏡及圈套器位置不恰當(dāng)，即強(qiáng)行切除息肉或因圈套器破損，機(jī)械損傷胃腸壁等所致。

小穿孔可通過禁食、胃腸減壓、靜脈輸液并給予抗生素治療，內(nèi)科治療無效或大的穿孔，應(yīng)立即轉(zhuǎn)外科手術(shù)治療。

3.灼傷

電切時，若電極或電切圈套器安放位置不當(dāng)，或圈套器附近有導(dǎo)電的粘液，或息肉較長倒掛，均可引起電流分流燒灼附近正常鉆膜組織。電灼傷一般僅表現(xiàn)為淺表潰瘍，偶可造成貫穿性電灼傷甚至穿孔，應(yīng)予以重視。

4.潰瘍

息肉摘除術(shù)后，切斷面為壞死凝固物，形成的潰瘍多數(shù)在2~4周內(nèi)俞合。胃息肉大腸息肉電切術(shù)后，包含以無渣流質(zhì)或半流制裁為宜，不宜過多進(jìn)食及過早活動。適當(dāng)口服腸道不吸收的抗生素，口服液體石蠟以保持大便通暢。胃腸道息肉電切術(shù)后一般常規(guī)應(yīng)用H2受體阻滯藥或質(zhì)子泵抑制藥（PPI）及胃粘膜保護(hù)藥。

5.其他

高頻電切治療賁門部息肉時，可發(fā)生左側(cè)膈肌痙攣，并在心電圖上出現(xiàn)心肌缺血性改變。此可能為高頻電流影響膈神經(jīng)以及局部高溫傳至心臟所致。所以賁門區(qū)息肉電切時須小時，時予心電監(jiān)護(hù)。大腸息肉電切術(shù)偶爾可發(fā)生腸道氣體爆炸。因此，大腸肉電凝電切術(shù)前禁忌口服甘露醇清潔腸道，操作過程中可進(jìn)行腸道氣體置換，即將腸腔內(nèi)氣體盡吸盡并充以隋性氣體。

【注意事項(xiàng)】

1.分次電切法

廣基隆起、直腸大于2cm的消化道息肉，應(yīng)分次電凝電切。第一次電切息肉的一部分組織，再進(jìn)行第二次甚至第三次，直至完全切除。

2.長蒂息肉的切除

圈套器應(yīng)套在蒂中部或在離根郎3一5mm處緊縮圈套器。寧可將殘蒂保留稍長一些，以免引起胃腸穿孔。

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第二篇：《臨床技術(shù)操作規(guī)范 病理學(xué)分冊》（范文）

《臨床技術(shù)操作規(guī)范?病理學(xué)分冊》

第1章 總 則

一、為提高病理學(xué)診斷質(zhì)量，促進(jìn)臨床工作，依據(jù)《中華人民共和國執(zhí) 業(yè)醫(yī)師法》精神，結(jié)合醫(yī)院病理科工作的特點(diǎn)，制定本規(guī)范。

二、醫(yī)院病理科和承擔(dān)醫(yī)院病理科任務(wù)的醫(yī)學(xué)院校病理教研室的主要臨 床任務(wù)是通過活體組織病理學(xué)檢查（簡稱活檢）、細(xì)胞病理學(xué)檢查（簡 稱細(xì)胞學(xué)檢查）和尸體剖檢（簡稱尸檢）等作出疾病的病理學(xué)診斷（或 稱病理診斷）。具有一定規(guī)模的病理科，應(yīng)積極開展教學(xué)、培訓(xùn)病理醫(yī) 師和科學(xué)研究等項(xiàng)工作。

三、病理學(xué)診斷是病理醫(yī)師應(yīng)用病理學(xué)知識、有關(guān)技術(shù)和個人專業(yè)實(shí)踐 經(jīng)驗(yàn)，對送檢的患者標(biāo)本（或稱檢材，包括活體組織、細(xì)胞和尸體等）進(jìn)行病理學(xué)檢查，結(jié)合有關(guān)臨床資料，通過分析、綜合后，作出的關(guān)于 該標(biāo)本病理變化性質(zhì)的判斷和具體疾病的診斷。病理學(xué)診斷為臨床醫(yī)師 確定疾病診斷、制定治療方案、評估疾病預(yù)后和總結(jié)診治疾病經(jīng)驗(yàn)等提 供重要的、有時是決定性的依據(jù)，并在疾病預(yù)防，特別是傳染病預(yù)防中 發(fā)揮重要作用。

四、病理學(xué)診斷報告書（或稱病理診斷報告）是關(guān)于疾病診斷的重要醫(yī) 學(xué)文書。當(dāng)涉及醫(yī)、患間醫(yī)療爭議時，相關(guān)的病理學(xué)診斷報告書具有法 律意義。病理學(xué)診斷報告書應(yīng)由具有執(zhí)業(yè)資格的注冊主治醫(yī)師以上（含 主治醫(yī)師）的病理醫(yī)師簽發(fā)。各醫(yī)院可酌情準(zhǔn)予條件適宜的高年資病理 科住院醫(yī)師試行簽署病理學(xué)診斷報告書。低年資病理科住院醫(yī)師、病理 科進(jìn)修醫(yī)師和非病理學(xué)專業(yè)的醫(yī)師不得簽署病理學(xué)診斷報告書。

五、病理學(xué)檢查是臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師為確立疾病診斷而進(jìn)行的合作行 為，是有關(guān)臨床科室與病理科之間特殊形式的會診。臨床醫(yī)師和病理醫(yī) 師雙方皆應(yīng)認(rèn)真履行各自的義務(wù)和承擔(dān)相應(yīng)的責(zé)任。

六、病理學(xué)檢查申請單是臨床醫(yī)師向病理醫(yī)師發(fā)出的會診邀請單。病理 學(xué)檢查申請單的作用是：臨床醫(yī)師向病理醫(yī)師傳遞關(guān)于患者的主要臨床 信息（包括癥狀、體征、各種輔助檢查結(jié)果和手術(shù)所見等）、診斷意向 和就具體病例對病理學(xué)檢查提出的某些特殊要求，為進(jìn)行病理學(xué)檢查和 病理學(xué)診斷提供重要的參考資料或依據(jù)。病理學(xué)檢查申請單是疾病診治 過程中的有效醫(yī)學(xué)文書，各項(xiàng)信息必須真實(shí)，應(yīng)由主管患者的臨床醫(yī)師 親自（或指導(dǎo)有關(guān)醫(yī)師）逐項(xiàng)認(rèn)真填寫并簽名。

七、臨床醫(yī)師應(yīng)保證送檢標(biāo)本與相應(yīng)的病理學(xué)檢查申請單內(nèi)容的真實(shí)性 和一致性，所送檢材應(yīng)具有病變代表性和可檢查性，并應(yīng)是標(biāo)本的全 部。

八、患者或患者的授權(quán)人應(yīng)向醫(yī)師提供有關(guān)患者的真實(shí)信息（包括姓 名、性別、年齡、病史和可能涉及診斷需要的隱私信息）。病理醫(yī)師應(yīng) 尊重和保護(hù)患者的隱私。患者或患者的授權(quán)人應(yīng)保證其自送檢材的真實(shí) 性、完整性和可檢查性。

九、病理科應(yīng)努力為臨床、為患者提供優(yōu)質(zhì)服務(wù)，遵照本規(guī)范的要求加 強(qiáng)科室建設(shè)，制訂完善的科室管理制度，并實(shí)施有效的質(zhì)量監(jiān)控。

十、病理科工作人員應(yīng)恪盡職守，做好本職工作。病理醫(yī)師應(yīng)及時對標(biāo) 本進(jìn)行檢查和發(fā)出病理學(xué)診斷報告書，認(rèn)真對待臨床醫(yī)師就病理學(xué)診斷 提出的咨詢，必要時應(yīng)復(fù)查有關(guān)的標(biāo)本和切片，并予以答復(fù)。病理科技 術(shù)人員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)范的技術(shù)操作規(guī)程，提供合格的病理學(xué)常規(guī)染色 片、特殊染色片和可靠的其他相關(guān)檢測結(jié)果，并確保經(jīng)過技術(shù)流程處理 的檢材真實(shí)無誤。

第2章 病理學(xué)檢查常規(guī)

第一節(jié) 普通活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)

一、申請單和標(biāo)本的驗(yàn)收

(一)病理科應(yīng)有專人驗(yàn)收普通活體組織病理學(xué)檢查(常規(guī)活檢)申 請單和送檢的標(biāo)本。

(二)病理科驗(yàn)收人員必須：

1． 同時接受同一患者的申請單和標(biāo)本。

2． 認(rèn)真核對每例申請單與送檢標(biāo)本及其標(biāo)志（聯(lián)號條或其他寫明患者 姓名、送檢單位和送檢日期等的標(biāo)記）是否一致；對于送檢的微小標(biāo) 本，必須認(rèn)真核對送檢容器內(nèi)或?yàn)V紙上是否確有組織及其數(shù)量。發(fā)現(xiàn)疑 問時，應(yīng)立即向送檢方提出并在申請單上注明情況。

3．認(rèn)真檢查標(biāo)本的標(biāo)志是否牢附于放置標(biāo)本的容器上。

4．認(rèn)真查閱申請單的各項(xiàng)目是否填寫清楚，包括：①患者基本情況［姓 名、性別、年齡，送檢單位（醫(yī)院、科室）、床位、門診號/住院號、送 檢日期、取材部位、標(biāo)本數(shù)量等］，②患者臨床情況［病史（癥狀和體 征）、化驗(yàn)/影象學(xué)檢查結(jié)果、手術(shù)（包括內(nèi)鏡檢查）所見、既往病理學(xué) 檢查情況（包括原病理號和診斷）和臨床診斷等］。5．在申請單上詳細(xì)記錄患者或患方有關(guān)人員的明確地址、郵編及電話號 碼，以便必要時進(jìn)行聯(lián)絡(luò)，并有助于隨訪患者。

(三)驗(yàn)收標(biāo)本人員不得對申請單中由臨床醫(yī)師填寫的各項(xiàng)內(nèi)容進(jìn)行改動。

(四)下列情況的申請單和標(biāo)本不予接收：

1．申請單與相關(guān)標(biāo)本未同時送達(dá)病理科；

2．申請單中填寫的內(nèi)容與送檢標(biāo)本不符合；

3．標(biāo)本上無有關(guān)患者姓名、科室等標(biāo)志；

4．申請單內(nèi)填寫的字跡潦草不清；

5．申請單中漏填重要項(xiàng)目；

6．標(biāo)本嚴(yán)重自溶、腐敗、干涸等；

7．標(biāo)本過小，不能或難以制做切片；

8．其他可能影響病理檢查可行性和診斷準(zhǔn)確性的情況。

病理科不能接收的申請單和標(biāo)本一律當(dāng)即退回，不予存放。

(五)臨床醫(yī)師采取的標(biāo)本應(yīng)盡快置放于盛有固定液（4%中性甲醛，即1 0%中性福爾馬林）的容器內(nèi)，固定液至少為標(biāo)本體積的5倍。對于需作 特殊項(xiàng)目檢查（如微生物、電鏡、免疫組織化學(xué)、分子生物學(xué)等）的標(biāo) 本，應(yīng)按相關(guān)的技術(shù)要求進(jìn)行固定或預(yù)處理。

(六)病理醫(yī)師只對病理科實(shí)際驗(yàn)收標(biāo)本的病理診斷負(fù)責(zé)。

(七)病理科應(yīng)建立與送檢方交接申請單和標(biāo)本的手續(xù)制度。具體交接方 法由各醫(yī)院病理科自行制訂。

二、申請單和標(biāo)本的編號、登記

(一)病理科驗(yàn)收人員應(yīng)在已驗(yàn)收的申請單上注明驗(yàn)收日期并及時、準(zhǔn)確 編號（病理號），并逐項(xiàng)錄入活檢標(biāo)本登記簿或計(jì)算機(jī)內(nèi)。嚴(yán)防病理號 的錯編、錯登。

(二)標(biāo)本的病理號可按年編序，或連續(xù)性（不分）編序。(三)同一病例同一次的申請單、活檢標(biāo)本登記簿（包括計(jì)算機(jī)錄入）、放置標(biāo)本的容器、組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）及其切片等的病理號 必須完全一致。

(四)病理科應(yīng)建立驗(yàn)收人員與組織取材人員之間申請單和標(biāo)本的交接制度。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。

(五)在病理科內(nèi)移送標(biāo)本時，必須確保安全，嚴(yán)防放置標(biāo)本的容器傾 覆、破損和標(biāo)本的散亂、缺失等。

三、標(biāo)本的預(yù)處理

標(biāo)本驗(yàn)收人員對已驗(yàn)收的標(biāo)本酌情更換適宜的容器，補(bǔ)充足量的固定 液；對于體積大的標(biāo)本，值班取材的病理醫(yī)師在不影響主要病灶定位的 情況下，及時、規(guī)范地予以剖開，以便充分固定。

四、標(biāo)本的巨檢、組織學(xué)取材和記錄

對于核驗(yàn)無誤的標(biāo)本，應(yīng)按照下列程序進(jìn)行操作：①肉眼檢查標(biāo)本（巨 檢）；②切取組織塊（簡稱取材）；③將巨檢和取材情況記錄于活檢記 錄單上（活檢記錄單印于活檢申請單的背面）。巨檢和取材的技術(shù)操作 參見第3章第四節(jié)。

巨檢和取材時的注意事項(xiàng)：

(一)巨檢和取材必須由病理醫(yī)師進(jìn)行，應(yīng)配備人員負(fù)責(zé)記錄。

(二)巨檢和取材過程中，應(yīng)嚴(yán)防污染工作人員和周圍環(huán)境。

(三)標(biāo)本一般應(yīng)經(jīng)適當(dāng)固定后再行取材。已知具有傳染性（例如結(jié)核 病、病毒性肝炎等）的標(biāo)本，應(yīng)在不污染環(huán)境和／或不擴(kuò)散傳染的原則 下，經(jīng)必要的初步巨檢或切開后，立即置于盛有足量固定液的專用容器 內(nèi)，充分固定后再行常規(guī)巨檢和取材。

(四)病理醫(yī)師在對每例標(biāo)本進(jìn)行巨檢和取材前，應(yīng)與記錄人員認(rèn)真核對 該例標(biāo)本及其標(biāo)志與申請單的相關(guān)內(nèi)容是否一致。若對申請單填寫的內(nèi) 容或／和標(biāo)本有疑問（例如患者姓名有誤，標(biāo)本內(nèi)容、數(shù)量、病變特征 與申請單填寫的情況不符等），應(yīng)暫行擱置，盡快與送檢方聯(lián)系，查明 原因，確保無誤后，再行巨檢和取材。必要時，可邀請有關(guān)臨床醫(yī)師共 同檢查標(biāo)本和取材。對于有疑問的標(biāo)本，在消除疑問前不得進(jìn)行巨檢和 取材，應(yīng)將有關(guān)標(biāo)本連同其申請單一并暫時妥存。

(五)病理醫(yī)師進(jìn)行巨檢和取材時，記錄人員應(yīng)根據(jù)病理申請單內(nèi)容，向 巨檢醫(yī)師報告患者的基本臨床情況、手術(shù)所見、標(biāo)本情況（采取部位、數(shù)量等）和送檢醫(yī)師的特殊要求等，并如實(shí)、清楚地將病理醫(yī)師的口頭 描述記錄于活檢記錄單上。必要時，應(yīng)在活檢記錄單上（或另附紙）繪 簡圖顯示巨檢所見和標(biāo)示取材部位。取材者應(yīng)核對記錄內(nèi)容。

(六)具有醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)價值的標(biāo)本可攝影存檔，并酌情妥為保存。

(七)病理科宜積極推行巨檢和取材的錄音記錄。每次巨檢和取材結(jié)束 后，應(yīng)由專人立即對錄音內(nèi)容進(jìn)行文字整理，記錄于活檢記錄單上（手 錄或用計(jì)算機(jī)錄入、打印）。有關(guān)的錄音資料應(yīng)保存至病理診斷報告書 發(fā)出后兩周。

(八)細(xì)小標(biāo)本取材時，可用伊紅點(diǎn)染并用軟薄紙妥善包裹。

(九)每例標(biāo)本取材前、后，應(yīng)用流水徹底清洗取材臺面和所有相關(guān)器 物，嚴(yán)防檢材被無關(guān)組織或其他異物污染，嚴(yán)防細(xì)小檢材被流水沖失。

(十)巨檢和取材必須按照本規(guī)范的要求進(jìn)行操作（參見第3章第四 節(jié)）。對于由不同部位或不同病變區(qū)域切取的組織塊，應(yīng)在其病理號之 后再加編次級號（例如：－1，－2，－3，??；A,，B，C，??等）。

(十一)巨檢／取材者和記錄人員應(yīng)相互配合、核查，確保所取組織塊及 其編號標(biāo)簽準(zhǔn)確地置于用于脫水的容器（脫水盒等）內(nèi)。

(十二)標(biāo)本巨檢和取材后剩余的組織／器官應(yīng)置入適當(dāng)容器內(nèi)，添加適 量4%中性甲醛并附有相關(guān)病理號和患者姓名等標(biāo)志，然后按取材日期有 序地妥為保存。取材剩余的標(biāo)本一般保存至病理診斷報告書發(fā)出后兩 周。

(十三)病理醫(yī)師在每批標(biāo)本巨檢和取材后，應(yīng)與記錄人員共同核對取材 內(nèi)容，并在活檢記錄單／取材工作單上簽名和簽署日期。

(十四)取材后剩余的病理標(biāo)本屬于污染源，應(yīng)遵照有關(guān)規(guī)定處理。

(十五)巨檢／取材醫(yī)師或記錄人員與制片的技術(shù)人員認(rèn)真辦理交接手 續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。

五、組織切片制備的基本要求

(一)組織制片過程中，應(yīng)確保切片號與蠟塊號一致。

(二)制片工作一般應(yīng)在取材后2個工作日內(nèi)完成（不含需要脫鈣、脫脂 等特殊處理的標(biāo)本）。

(三)制片完成后，技術(shù)人員應(yīng)檢查制片質(zhì)量，并加貼標(biāo)有本病理科病理 號的標(biāo)簽。常規(guī)石蠟-HE染色片的優(yōu)良率應(yīng)≥95%，優(yōu)秀率不<35％。不合格切片應(yīng)立即重做。切片質(zhì)量的基本標(biāo)準(zhǔn)參見第3章第一節(jié)的附 表。

(四)制片過程發(fā)生意外情況時，有關(guān)技術(shù)人員和技術(shù)室負(fù)責(zé)人應(yīng)及時向 科主任報告，并積極設(shè)法予以補(bǔ)救。

(五)制片完成后，技術(shù)人員應(yīng)將所制切片與其相應(yīng)的活檢記錄單／取材 工作單等進(jìn)行認(rèn)真核對，確認(rèn)無誤后，將切片連同相關(guān)的活檢申請單／ 活檢記錄單／取材工作單等一并移交給病理醫(yī)師。雙方經(jīng)核對無誤后，辦理移交簽字手續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。

(六)常規(guī)活檢組織切片制備技術(shù)的基本要求參見第3章第一節(jié)。

六、組織切片的光學(xué)顯微鏡檢查和病理診斷

(一)病理醫(yī)師進(jìn)行病理診斷時：

1．應(yīng)認(rèn)真閱讀申請單提供的各項(xiàng)資料，必要時（尤其是疑難病例），應(yīng) 向有關(guān)臨床醫(yī)師了解更多的臨床信息。

2．應(yīng)認(rèn)真閱讀活檢記錄單中關(guān)于標(biāo)本巨檢的描述；負(fù)責(zé)復(fù)檢的病理醫(yī)師 必要時親自觀察標(biāo)本，補(bǔ)充或訂正病變描述，指導(dǎo)或親自補(bǔ)取組織塊。

3．應(yīng)了解患者既往病理學(xué)檢查情況（包括切片的病理診斷和有關(guān)文字記 錄）：①由本病理科既往受理者，必須及時調(diào)閱相關(guān)切片等病理學(xué)檢查 資料；②非本病理科既往受理者，應(yīng)積極協(xié)助患者從有關(guān)病理科商借相 關(guān)切片等病理學(xué)檢查資料參閱。

4．應(yīng)在活檢記錄單上簽署“醫(yī)囑”，告知技術(shù)人員進(jìn)行必要的深切片、連切片、特殊染色和其他相關(guān)技術(shù)檢測。

5．應(yīng)全面、細(xì)致地閱片，注意各種有意義的病變。

(二)進(jìn)行初檢的病理醫(yī)師，應(yīng)提出初診意見，送交主檢病理醫(yī)師復(fù)查。

(三)主檢病理醫(yī)師對難以明確診斷的病例,可以：

1．提請科內(nèi)上級醫(yī)師會診或進(jìn)行科內(nèi)讀片討論（會診）；

2．與有關(guān)臨床醫(yī)師進(jìn)行臨床－病理會診；

3．必要時約見患者（尤其門診患者）或患者親屬（或其他患方相關(guān)人 員），了解病情，說明病理診斷的疑難情況和延期簽發(fā)病理學(xué)診斷報告 書的原因等；

4．于簽發(fā)病理學(xué)診斷報告書前進(jìn)行科外病理會診(“診斷報告前病理會 診”)，應(yīng)將各方面會診意見的原件（或復(fù)印件）作為檔案資料貼附于有 關(guān)患者的活檢記錄單中備查；

5．必要時，建議臨床醫(yī)師重復(fù)活檢，或密切隨查。

(四)主檢病理醫(yī)師根據(jù)常規(guī)切片的鏡下觀察，結(jié)合標(biāo)本巨檢、相關(guān)技術(shù) 檢查結(jié)果、有關(guān)臨床資料和參考病理會診意見等，作出病理診斷或提出 病理診斷意見（意向），清楚地書寫于活檢記錄單的有關(guān)欄目中、并親 筆簽名。各方會診意見不

一、難以明確診斷時，主檢醫(yī)師可參考會診意 見酌情診斷，或在病理學(xué)診斷報告書中將各方會診意見列出，供臨床醫(yī) 師參考。

(五)對打印的病理學(xué)診斷報告書，主檢病理醫(yī)師應(yīng)與活檢記錄單上的病 理診斷文字進(jìn)行核對，并親筆簽名。［參見本節(jié)下文：“

八、常規(guī)活檢 病理學(xué)診斷報告書及其簽發(fā)”］

七、相關(guān)診斷技術(shù)的選用

病理醫(yī)師可借助于組織化學(xué)染色（包括特殊染色）、免疫組織化學(xué)染 色、電子顯微鏡技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)、流式細(xì)胞技術(shù)等相關(guān)診斷技術(shù) 檢查提供的佐證，對某些病例（尤其是疑難病例）進(jìn)行病理診斷。（參 見第4章）

八、病理學(xué)診斷報告書及其簽發(fā)

(一)病理診斷表述的基本類型

Ⅰ類：檢材部位／疾病名稱／病變性質(zhì)明確和基本明確的病理診斷。

Ⅱ類：不能完全肯定疾病名稱/病變性質(zhì)，或是對于擬診的疾病名稱／病 變性質(zhì)有所保留的病理診斷意向，可在擬診疾?。∽兠Q之前冠以諸 如病變可“符合為”、“考慮為”、“傾向?yàn)椤?、“提示為”、“可?為”、“疑為”、“不能排除（除外）”之類的詞語。

Ⅲ類：檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾?。床荒茏龀觫耦?或

Ⅱ類病理診斷），只能進(jìn)行病變的形態(tài)描述。

Ⅳ類：送檢標(biāo)本因過于細(xì)小、破碎、固定不當(dāng)、自溶、嚴(yán)重受擠壓（變 形）、被燒灼、干涸等，無法做出病理診斷。

(二)病理學(xué)診斷報告書的基本內(nèi)容

1．患者的基本情況，包括病理號，姓名，性別，年齡，送檢醫(yī)院／科室（住院／門診），住院號／門診號，送檢／收驗(yàn)日期等。

2．巨檢病變和鏡下病變要點(diǎn)描述（一般性病變和細(xì)小標(biāo)本可酌情簡述或 省略）。

3．與病理診斷相關(guān)技術(shù)的檢查結(jié)果。

4．病理診斷的表述（參見上文“病理診斷表述的基本類型”）。

5．對于疑難病例或作出Ⅱ、Ⅲ類病理診斷的病例，可酌情就病理診斷及 其相關(guān)問題附加：①建議（例如進(jìn)行其他有關(guān)檢查、再做活檢、科外病 理學(xué)會診、密切隨診／隨訪等）；②注釋／討論。

6．經(jīng)過本病理科或／和科外病理會診的病例，可將各方病理會診 意見列于該例患者的病理學(xué)診斷報告書中。

(三)病理學(xué)診斷報告書的書寫要求

1．病理學(xué)診斷報告書的文字表述力求嚴(yán)謹(jǐn)、恰當(dāng)、精練、條理和層 次清楚。

2．病理學(xué)診斷報告書應(yīng)為一式二份，一份交予送檢方，另一份隨同患者 的病理學(xué)檢查申請單／病理學(xué)檢查記錄單一并存檔。主檢病理醫(yī)師必須 在每一份病理學(xué)診斷報告書上簽名，不能以個人印章代替簽名，不能由 他人代為簽名；主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。

3．手書的病理學(xué)診斷報告書必須二聯(lián)復(fù)寫，必須文字規(guī)范、字跡清楚，不得潦草、涂改。

4．手書和計(jì)算機(jī)打印的病理學(xué)診斷報告書中的關(guān)鍵性文字，例如

“癌”、“瘤”、“陽性”、“陰性”和數(shù)字等，要認(rèn)真核對，不得有 誤。

5．計(jì)算機(jī)打印的圖文病理學(xué)診斷報告書提供的病變圖象要準(zhǔn)確，具有典 型（代表）性，放大倍數(shù)適當(dāng)。

6．患者的基本情況項(xiàng)目必須嚴(yán)格按照送檢臨床醫(yī)師填寫的文字抄寫或用 計(jì)算機(jī)輸錄于病理學(xué)診斷報告書中，并認(rèn)真核查無誤，簽發(fā)報告書的病 理醫(yī)師和病理科的其他人員都不得改動。7．病理醫(yī)師不得簽發(fā)虛假的病理學(xué)診斷報告書，不得向臨床醫(yī)師和患方 人員提供有病理醫(yī)師簽名的空白病理學(xué)診斷報告書。

(四)病理學(xué)診斷報告書的發(fā)送

1．病理科自接受送檢標(biāo)本至簽發(fā)該例病理學(xué)診斷報告書的時間，一般情 況下為5個工作日以內(nèi)；

2．由于某些原因（包括深切片、補(bǔ)取材制片、特殊染色、免疫組 織化學(xué)染色、脫鈣、疑難病例會診或傳染性標(biāo)本延長固定時間等）延遲 取材、制片，或是進(jìn)行其他相關(guān)技術(shù)檢測，不能如期簽發(fā)病理學(xué)診斷報 告書時，應(yīng)以口頭或書面告知有關(guān)臨床醫(yī)師或患方，說明遲發(fā)病理學(xué)診 斷報告書的原因。

3．病理科應(yīng)有專人發(fā)送病理學(xué)診斷報告書。住院患者的病理學(xué)診斷報告 書應(yīng)發(fā)送至有關(guān)臨床科室。病理科所在醫(yī)院門診患者和外院患者病理學(xué) 診斷報告書的發(fā)送方法，由各醫(yī)院病理科自行制訂。

4．病理學(xué)診斷報告書的經(jīng)收人員（包括患方人員）必須履行簽收手續(xù)。

5．病理科已發(fā)出的病理學(xué)診斷報告書被遺失時，一般不予補(bǔ)發(fā)；必要 時，經(jīng)病理科主任同意可以抄件形式補(bǔ)發(fā)。

九、資料管理

普通活體組織病理學(xué)檢查的資料必須妥善管理，有關(guān)規(guī)定參見本章第五 節(jié)。

十、會 診

病理學(xué)會診是普通活體組織病理學(xué)診斷過程的重要環(huán)節(jié)，有關(guān)規(guī)定參見本章第 六節(jié)。

第二節(jié) 手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)

一、概 述

(一)手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查（快速活檢）是臨床醫(yī)師在實(shí)施手術(shù) 過程中，就與手術(shù)方案有關(guān)的疾病診斷問題請求病理醫(yī)師快速進(jìn)行的急會診，尤其需要臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師間的密切合作。

(二)快速活檢要求病理醫(yī)師在很短時間內(nèi)，根據(jù)對切除標(biāo)本的巨檢和組織塊快 速冷凍切片（或快速石蠟切片）的觀察，向手術(shù)醫(yī)師提供的參考性病理診斷意 見。與常規(guī)石蠟切片的病理診斷相比，快速活檢會診具有更多的局限性和誤診 的可能性。有的病例難以快速診斷，需要等待常規(guī)石蠟切片進(jìn)一步明確診斷。因此，應(yīng)向臨床醫(yī)師說明快速活檢的：①局限性、②適用范圍、③慎用范圍和 ④不宜應(yīng)用范圍。

(三)有關(guān)臨床醫(yī)師應(yīng)于手術(shù)前向患者和／或患者授權(quán)人說明快速活檢的意義和 局限性等，取得患者和／或患方的知情和理解?；颊吆停蚧颊呤跈?quán)人應(yīng)在由 醫(yī)院制定的《手術(shù)中快速活檢患方知情同意書》簽署意見和簽名。

(四)主持手術(shù)的臨床醫(yī)師應(yīng)在手術(shù)前一天向病理科遞交快速活檢申請單，填寫 患者的病史，重要的影象學(xué)、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果和提請病理醫(yī)師特別關(guān)注的問題 等。盡可能不在手術(shù)進(jìn)行過程中臨時申請快速活檢。

(五)手術(shù)中快速活檢應(yīng)由經(jīng)過該項(xiàng)工作訓(xùn)練的主治醫(yī)師以上的病理醫(yī)師主持。尚不具備相應(yīng)條件的病理科不應(yīng)勉強(qiáng)開展手術(shù)中快速活檢。

(六)負(fù)責(zé)快速活檢的主檢病理醫(yī)師應(yīng)了解患者的①臨床情況，②手術(shù)所見，③ 既往有關(guān)的病理學(xué)檢查情況。

二、適用范圍

(一)需要確定病變性質(zhì)（如腫瘤或非腫瘤／良性腫瘤或惡性腫瘤等），以

決定手術(shù)方案的標(biāo)本。

(二)了解惡性腫瘤的擴(kuò)散情況，包括腫瘤是否浸潤相鄰組織、有無區(qū)域淋 巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。

(三)確定腫瘤部位的手術(shù)切緣有無腫瘤組織殘留。

(四)確認(rèn)切除的組織，例如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組織等。

三、慎用范圍

涉及截肢和其他會嚴(yán)重致殘的根治性手術(shù)切除的標(biāo)本。需要此類手術(shù)治療的患者，其病變性質(zhì)宜于手術(shù)前通過常規(guī)活檢確定。

四、不宜應(yīng)用范圍

(一)疑為惡性淋巴瘤。

(二)過小的標(biāo)本（檢材長徑≤0.2cm者）。(三)術(shù)前易于進(jìn)行常規(guī)活檢者。

(四)脂肪組織、骨組織和鈣化組織。

(五)需要依據(jù)核分裂象計(jì)數(shù)判斷良、惡性的軟組織腫瘤。(六)主要根據(jù)腫瘤生物學(xué)行為特征而不能依據(jù)組織形態(tài)判斷良、惡性的腫瘤。(七)已知具有傳染性的標(biāo)本（例如結(jié)核病、病毒性肝炎、艾滋病等）。

五、申請單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號和登記

手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查申請單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號和登記參照本章第一節(jié)中“一”至“三”項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定。

六、標(biāo)本的巨檢、取材和記錄

(一)病理科驗(yàn)收快速活檢申請單和標(biāo)本后，應(yīng)參照本章第一節(jié)中“四”項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定，立即進(jìn)行標(biāo)本的巨檢、取材和記錄。

(二)主持快速活檢的病理醫(yī)師應(yīng)親自參與標(biāo)本的巨檢和取材（或指導(dǎo)取 材）。

(三)通常選取具有代表性的病變組織1～2塊，需要時，增加取材塊數(shù)。

七、組織切片的制備(一)冷凍切片

1．完成冷凍HE染色切片制備的時間通常應(yīng)為20～25分鐘。

2．恒冷箱切片機(jī)制片：至少應(yīng)于切片前1小時開機(jī)預(yù)冷，冷室溫度一般為-15～-20℃。常規(guī)開展冷凍切片快速病理學(xué)診斷的病理科，恒冷箱切片機(jī)宜處于24小時恒溫待機(jī)狀態(tài)。

3．其他方法的冷凍切片制備參見第3章第一節(jié)。(二)快速石蠟切片

1．完成快速石蠟－HE染色切片的時間通常為30分鐘。2．快速石蠟切片的制備方法參見第3章第一節(jié)。

(三)制備好的冷凍／快速石蠟-HE染色切片，加貼標(biāo)有本病理科病理號的 標(biāo)簽后，立即交由主檢病理醫(yī)師進(jìn)行診斷。

八、手術(shù)中快速活檢會診意見及其簽發(fā)

(一)有條件的病理科宜由兩位中／高級稱職的病理醫(yī)師共同簽署快速活檢的病理診斷意見。對于病變疑難、手術(shù)切除范圍廣泛和會嚴(yán)重致殘的手術(shù)中快速活檢，應(yīng)由兩位高級稱職的病理醫(yī)師共同簽署會診意見。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。

(二)快速活檢診斷意見一般在收到送檢標(biāo)本后40分鐘內(nèi)發(fā)出；同一時間段內(nèi)相繼收到的多例患者標(biāo)本或是同一例患者的多次標(biāo)本，其發(fā)出報告的時間依次類推。對于疑難病變，可酌情延時報告。

(三)對于難以即時快速診斷的病變（例如病變不典型、交界性腫瘤病變或送檢組織不足以明確診斷等），主檢病理醫(yī)師應(yīng)向手術(shù)醫(yī)師說明情況，恰如其分地簽發(fā)病理診斷意見或告知需要等待常規(guī)石蠟切片進(jìn)一步明確病理診斷。

(四)主檢病理醫(yī)師簽署的快速活檢病理診斷意見，宜以文字形式報告（具體發(fā)出方式由各醫(yī)院自行決定）?？焖倩顧z病理診斷意見報告書發(fā)出前應(yīng)認(rèn)真核對無誤。

九、冷凍切片后剩余組織的處理

(一)冷凍切片后剩余的冷凍組織（簡稱 “凍對”）和冷凍切片取材后剩余、未曾冷凍的組織（簡稱“凍?！保?，均應(yīng)保存，用以制備常規(guī)石蠟切片，以便與冷凍切片進(jìn)行對照觀察。

（二）“凍對”／“凍剩”組織的蠟塊和切片需與同一病例手術(shù)后送檢的切除標(biāo)本編為同一病理號，并作出綜合性診斷。

(三)當(dāng)冷凍切片病理診斷意見與其“凍對”組織的常規(guī)石蠟-HE片的 病理診斷不一致時，該例的病理診斷一般應(yīng)以石蠟-HE片診斷為準(zhǔn)。

十、資料管理

手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查的資料必須妥善管理，有關(guān)規(guī)定參見本章第五節(jié)。

第三節(jié) 細(xì)胞病理學(xué)檢查常規(guī)

一、申請單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號和登記

(一)病理科應(yīng)參照本章第一節(jié)（常規(guī)活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)）中“一” 和“二”項(xiàng)的規(guī)定，進(jìn)行細(xì)胞病理學(xué)檢查(細(xì)胞學(xué)檢查)申請單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號和登記。

(二)用于細(xì)胞學(xué)檢查的標(biāo)本必須新鮮，取材后應(yīng)盡快送至病理科(或細(xì)胞病理學(xué)室,下同)；病理科核驗(yàn)檢材無誤后，應(yīng)盡快進(jìn)行涂片和染色。

(三)病理科驗(yàn)收標(biāo)本人員不得對申請單中由臨床醫(yī)師填寫的各項(xiàng)內(nèi)容進(jìn)行改動。

二、細(xì)胞涂片、組織印片和壓片的基本要求

(一)細(xì)胞涂片、組織印片和壓片（參見第3章第二節(jié)）。(二)腫物細(xì)針穿刺物涂片

1.應(yīng)由掌握細(xì)針穿刺技術(shù)的注冊醫(yī)師或注冊助理醫(yī)師，按照細(xì)針穿刺技術(shù)操作常規(guī)，親自對確有適應(yīng)癥且無禁忌癥的患者采取穿刺物。2.適應(yīng)癥：通常為：

(1)淺表腫物：乳腺、甲狀腺、涎腺、淋巴結(jié)、前列腺、皮下軟組織和骨等。(2)胸腔腫物：肺、胸膜和縱隔等。

(3)腹腔腫物：肝、胰、腎、腎上腺、腹腔內(nèi)、腹膜后和盆腔內(nèi)等。(4)顱內(nèi)腫物。

3．禁忌癥：患者有難以控制的咳嗽、肺動脈高壓癥、進(jìn)行性肺氣腫、出血 性體質(zhì)及“暈針史”等。

（三）對于核驗(yàn)無誤的送檢標(biāo)本，應(yīng)立即依序進(jìn)行：①涂片、印片或 壓片，②固定和③染色。

三、細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書及其簽發(fā)

(一)細(xì)胞病理學(xué)診斷可為臨床醫(yī)師診斷疾?。ㄓ绕涫悄[瘤）提供重要參考 依據(jù)。

(二)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書必須由具有主檢資格的注冊病理醫(yī)師簽署后發(fā)出。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。(三)細(xì)胞病理學(xué)診斷表述的基本類型

1.直接表述性診斷：適用于穿刺標(biāo)本的細(xì)胞病理學(xué)診斷報告。根據(jù)形態(tài)學(xué)觀察的實(shí)際情況，對于某種疾?。∽冏龀隹隙ㄐ裕á耦悾⒉煌潭纫庀蛐裕á蝾悾┘?xì)胞學(xué)診斷，或是提供形態(tài)描述性（Ⅲ類）細(xì)胞學(xué)診斷，或是告知無法做出（Ⅳ類）細(xì)胞學(xué)診斷。[參考本章第一節(jié)的八(一)項(xiàng)：“病理學(xué)診斷表述的基本類型”]

2.間接分級性診斷：用于查找惡性腫瘤細(xì)胞的診斷。Ⅰ級：未見惡性細(xì)胞 Ⅱ級：查見核異質(zhì)細(xì)胞 Ⅱa：輕度核異質(zhì)細(xì)胞 Ⅱb：重度核異質(zhì)細(xì)胞 Ⅲ級：查見可疑惡性細(xì)胞 Ⅳ級：查見高度可疑惡性細(xì)胞 Ⅴ級：查見惡性細(xì)胞

(四)細(xì)胞病理學(xué)診斷的局限性（假陰性或假陽性診斷）

1.假陰性：是指在惡性腫瘤患者的有關(guān)標(biāo)本中未能查見惡性細(xì)胞。假陰性

率一般為10%左右。因此，細(xì)胞病理學(xué)檢查的陰性結(jié)果并不能否定臨床醫(yī)師的惡性腫瘤診斷。

2.假陽性：是指在非惡性腫瘤患者的有關(guān)標(biāo)本中查見了“惡性細(xì)胞”。假陽 性率通常≤1%。因此，細(xì)胞病理學(xué)診斷應(yīng)密切結(jié)合患者的臨床資料，對于臨床上未考慮為惡性腫瘤患者的陽性細(xì)胞學(xué)診斷應(yīng)持慎重態(tài)度。(五)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的基本內(nèi)容

1．患者的基本情況項(xiàng)目，包括病理號、姓名、性別、年齡、送檢醫(yī)院／科室（住院／門診）、住院號／門診號、送檢／收驗(yàn)日期等。

2.細(xì)胞病理學(xué)診斷的表述（參見上項(xiàng)“細(xì)胞病理學(xué)診斷報告表述的基本類型”）。

3.必要時或條件允許時，可酌情就細(xì)胞病理學(xué)診斷及其相關(guān)問題附加：①

某些建議（例如進(jìn)行其他有關(guān)檢查、再做活檢、病理科外病理學(xué)會診、密切隨查/隨訪等）；②注釋／討論。

4.經(jīng)過本病理科或/和科外病理會診的病例，可將各方的細(xì)胞病理學(xué)診斷意見附于該例的細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書中。(六)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的書寫要求

1.參照本章第一節(jié)（“常規(guī)活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)”）中“八

（二）”項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定。

2.計(jì)算機(jī)圖文打印的細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書提供的細(xì)胞學(xué)圖象應(yīng)具有典型（代表）性，放大倍數(shù)適當(dāng)。

(七)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的發(fā)送

1.病理科自接受送檢標(biāo)本至簽發(fā)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的時間，一般情況 下為1～2個工作日。

2.因某些原因（包括特殊染色、免疫組化染色、疑難會診等）不能如期簽發(fā)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書時，應(yīng)以口頭或書面告知有關(guān)臨床醫(yī)師或患方，說明遲發(fā)報告書的原因。

3．病理科應(yīng)有專人發(fā)送細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書。住院患者的細(xì)胞病理學(xué)診 斷報告書應(yīng)發(fā)送至有關(guān)臨床科室；本院門診患者和外院患者的細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的發(fā)送方法由各醫(yī)院病理科自行制定。

4．細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的經(jīng)收人員（包括患方人員）必須履行病理科規(guī) 定的簽收手續(xù)。

5．已由病理科發(fā)出的細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書被遺失時，一般不予補(bǔ)發(fā)；必 要時，經(jīng)病理科主任同意可以抄件形式補(bǔ)發(fā)。

四、資料管理

細(xì)胞病理學(xué)檢查的資料必須妥善管理，有關(guān)規(guī)定參見本章第五節(jié)。

五、會 診

細(xì)胞病理學(xué)會診是細(xì)胞病理學(xué)診斷過程的重要環(huán)節(jié)，有關(guān)規(guī)定參見本章第六節(jié)。

第四節(jié) 尸體剖檢（尸檢）的診斷常規(guī)

一、尸檢的受理

(一)必須遵照國家有關(guān)規(guī)定受理尸檢。

(二)受理尸檢范圍：①普通病理尸檢；②涉及醫(yī)、患爭議的尸檢（由衛(wèi)生 行政主管部門指定的尸檢機(jī)構(gòu)實(shí)施）。

(三)受理尸檢部門：具備獨(dú)立尸檢能力的①醫(yī)院病理科，②醫(yī)學(xué)院校的病理學(xué)教研室，③經(jīng)醫(yī)政部門注冊的病理診斷中心。

(四)主持尸檢（主檢）人員：應(yīng)是接受過尸檢訓(xùn)練、具有中級以上專業(yè)職稱的病理學(xué)醫(yī)師或病理學(xué)教師。必要時，邀請法醫(yī)參與尸檢。

(五)申請或委托尸檢方：①有關(guān)醫(yī)院，②衛(wèi)生行政部門，③司法機(jī)關(guān)，④死者的親屬或代理人，或⑤被受理尸檢方認(rèn)可的其他申請或委托方。

(六)申請或委托尸檢方必須向受理尸檢方遞交：①死者的死亡證明，②有申請或委托方當(dāng)事人簽名、負(fù)責(zé)人簽名和加蓋委托單位公章的尸檢申請書或委托書，③逐項(xiàng)認(rèn)真填寫的尸檢申請書（包括死者的臨床資料要點(diǎn)和其他需要說明的情況）。

(七)死者親屬或代理人簽署說明尸檢有關(guān)事項(xiàng)的《死者親屬或代理人委托 尸檢知情同意書》（由受理尸檢方制定），確認(rèn)以下事項(xiàng)： 1．同意有關(guān)受理尸檢機(jī)構(gòu)對于死者進(jìn)行尸檢。

2．授權(quán)主持尸檢人員根據(jù)實(shí)際需要確定尸檢的術(shù)式、范圍、臟器或組織的取留及其處理方式。

3．主持尸檢人員負(fù)責(zé)遺體尸檢后的體表切口縫合，不參與尸檢后遺體的其 他安置事項(xiàng)。

4．明確新生兒和圍生期胎兒尸檢后的尸體處理方式。

5．同意對尸檢過程進(jìn)行必要的攝影、錄像，并確認(rèn)是否同意教學(xué)示教。6．尸檢病理學(xué)診斷報告書可提供死者所患的主要疾病和死因；難以作出明 確結(jié)論時，可僅提交病變描述性尸檢報告。7．尸檢病理學(xué)診斷報告書發(fā)送給委托尸檢方。(八)下列情況的尸檢可不受理：

1．委托尸檢手續(xù)不完備者（包括未按規(guī)定交納尸檢費(fèi)用者）；

2．拒簽《死者親屬或代理人委托尸檢知情同意書》者（包括對于尸檢的術(shù) 式、范圍、臟器或組織的取留及其處理方式等持有異義從而影響尸檢實(shí)施和尸檢結(jié)論形成者）；

3．委托尸檢方與受理尸檢方就涉及尸檢的某些重要問題未能達(dá)成協(xié)議者； 4.死者死亡超過48小時未經(jīng)冷凍、或冷凍超過7日者；

5．疑因或確因烈性傳染病死亡的病例，尸檢方不具備相應(yīng)尸檢設(shè)施條件者； 6．因其他情況不能受理者。

二、尸檢前的準(zhǔn)備工作(一)尸檢室環(huán)境的準(zhǔn)備。

(二)尸檢基本器材和工作服的準(zhǔn)備。

(三)安排實(shí)施尸檢的專業(yè)人員和技術(shù)人員。(四)將擬行剖驗(yàn)的尸體移送至尸檢室。

(五)主持尸檢人員確認(rèn)尸檢手續(xù)完備（死亡證明、尸檢申請書或委托書、死者的臨床資料要點(diǎn)等），并請死者親屬或委托代理人確認(rèn)尸體。

(六)主持尸檢人員認(rèn)真閱讀、熟悉有關(guān)死者的臨床資料要點(diǎn)（必要時閱讀死者的生前病歷），了解申請或委托方對于尸檢的要求和尸檢時需要注意的問題。(七)進(jìn)行尸檢編號并登錄于尸檢登記薄上。

(八)尸檢過程現(xiàn)場文字（或語音）記錄、攝影或錄象工作的準(zhǔn)備。

三、尸檢的衛(wèi)生管理

(一)制訂尸檢室衛(wèi)生管理制度并認(rèn)真實(shí)施。

(二)尸檢人員和尸檢室內(nèi)其他人員必須認(rèn)真做好個人和工作環(huán)境的衛(wèi)生防護(hù)。(三)疑為或確診為烈性傳染病死者的尸檢，必須遵照傳染病尸檢的有關(guān)規(guī) 定進(jìn)行操作。

(四)尸檢結(jié)束后衛(wèi)生處置

1．認(rèn)真清洗尸檢臺和尸檢室，并進(jìn)行環(huán)境消毒。2．認(rèn)真清洗尸檢工作服和器械等，并進(jìn)行消毒。3．按照有關(guān)規(guī)定認(rèn)真處理尸檢污物。4．尸檢人員在專用衛(wèi)生間內(nèi)淋浴。

5．進(jìn)行上述各項(xiàng)衛(wèi)生處置過程中必須嚴(yán)防污染有關(guān)人員和尸檢室內(nèi)、外環(huán)境。

四、尸檢的技術(shù)操作

尸檢的技術(shù)操作規(guī)范參見第3章的第三節(jié)。

五、尸檢組織的切片制備

尸檢組織切片制備的技術(shù)操作規(guī)范參見第3章第一節(jié)。

六、尸檢組織的病理學(xué)相關(guān)技術(shù)檢查

尸檢組織病理學(xué)相關(guān)技術(shù)檢查的規(guī)范參見第4章。

七、尸檢組織切片的光學(xué)顯微鏡檢查和病理學(xué)診斷

(一)光鏡檢查切片，客觀地描述和記錄各系統(tǒng)、器官的病變要點(diǎn)；

(二)在綜合鏡檢和巨檢（肉眼檢查）所見的基礎(chǔ)上，結(jié)合死者生前的臨床資料等形成尸檢的病理診斷。

(三)有關(guān)鏡檢診斷的其他事項(xiàng)參見本章第一節(jié)的一

（六）項(xiàng)（“組織切片的光學(xué)顯微鏡檢查和病理學(xué)診斷”）。

八、尸檢檔案資料(一)基本內(nèi)容

1.一般資料：包括死者的尸檢號、姓名、性別、年齡、籍貫、民族、出

生地、住址、死亡時間、尸檢時間和地點(diǎn)、相關(guān)醫(yī)院（臨床科室、住院號／門診號／急癥號）、委托或申請尸檢單位及主持尸檢人員和助手等。2.尸檢申請書或委托書。3.有關(guān)的臨床資料。

4.由死者親屬或代理人簽署的《死者親屬或代理人委托尸檢知情同意書》。5.尸檢所見（附有必要的圖像資料）。包括：(1)對有關(guān)尸體及其死亡征象的確認(rèn)。(2)體表檢查所見。

(3)體腔（胸腔、心包腔、腹腔）檢查所見。

(4)臟器檢查所見：依序逐個描述各臟器的肉眼檢查和光學(xué)顯微鏡檢查所見。(5)特殊檢查結(jié)果。例如毒物、病原生物學(xué)等檢查（附有關(guān)檢查報告）。

6.病理學(xué)診斷和尸檢病理學(xué)診斷報告書副本（參見下項(xiàng)“尸檢病理學(xué)診斷報告書及其簽發(fā)”）。7.死亡原因。8.小結(jié)。

9．討論。包括：

(1)主要疾病及其診斷依據(jù)、發(fā)生和發(fā)展特點(diǎn)。

(2)主要疾病／病變之間、主要疾病與繼發(fā)／伴發(fā)疾病之間的相互關(guān)系。(3)從臨床與病理相結(jié)合的角度，參考有關(guān)文獻(xiàn)，進(jìn)行討論。

10.其他資料。包括照片及其底片、幻燈片、圖表、臨床病理討論記錄、參考文獻(xiàn)和電子信息資料等。

(二)受理尸檢單位，應(yīng)積極實(shí)施尸檢檔案資料的計(jì)算機(jī)管理。

九、尸檢病理學(xué)診斷報告書及其簽發(fā)

(一)尸檢病理學(xué)診斷報告書(簡稱尸檢報告書或尸檢報告)是關(guān)于尸檢的正式病理學(xué)報告。

(二)尸檢病理學(xué)診斷報告書的基本內(nèi)容：①主要疾病（與死亡直接相關(guān)的疾?。?；②繼發(fā)疾?。ㄅc主要疾病密切相關(guān)的疾?。?；③伴發(fā)疾?。ㄅc主要疾病無密切關(guān)系的疾病）?？勺们檫M(jìn)行死因分析、小結(jié)和討論。疾病診斷力求使用國際醫(yī)學(xué)規(guī)范術(shù)語，并按各疾病的致死重要性和因果關(guān)系排序。

(三)尸檢病理學(xué)診斷報告書必須由主檢人員簽名后發(fā)出。主檢人員簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。

(四)尸檢病理學(xué)診斷報告書應(yīng)一式兩份（正本和副本），兩份報告書具有

同等效力。報告書的正本隨同其他尸檢資料一并歸檔，報告書的副本發(fā)給委托尸檢方。手書的尸檢病理學(xué)診斷報告書應(yīng)二聯(lián)復(fù)寫，必須文字規(guī)范、字跡清楚，不得涂改。

(五)尸檢病理學(xué)診斷報告書通常在尸檢后45個工作日內(nèi)發(fā)出。由于病變復(fù) 雜或其他原因不能按時發(fā)出尸檢病理學(xué)診斷報告書時，可酌情延遲發(fā)出并應(yīng)向委托尸檢方說明遲發(fā)原因。

十、尸檢資料的管理

尸檢資料必須妥善管理，有關(guān)規(guī)定參見本章第五節(jié)。

第五節(jié) 病理學(xué)檢查資料的管理

一、概 述

(一)常規(guī)活檢、手術(shù)中快速活檢、細(xì)胞病理學(xué)檢查和尸檢等的文字資料（含電子信息資料）、非文字資料（組織的石蠟包埋塊、切片等）以及其他相關(guān)資料均為有價值的醫(yī)學(xué)資料，皆由受理病理學(xué)檢查的病理科按照本規(guī)范規(guī)定的期限妥為保存。病理科必須設(shè)立病理檔案資料室和制訂病理檔案資料管理制度（包括病理檢查資料的歸檔、借用和歸還手續(xù)等），并有專人管理。應(yīng)積極實(shí)行病理學(xué)檢查資料的計(jì)算機(jī)管理。

(二)各種病理學(xué)檢查的文字資料應(yīng)裝訂成冊保存。

(三)據(jù)以做出常規(guī)活檢、快速活檢、尸檢病理學(xué)診斷的原始組織學(xué)切片和

查見腫瘤細(xì)胞或可疑腫瘤細(xì)胞的玻片必須妥善保存。未查見惡性腫瘤細(xì)胞的玻片，于診斷報告書發(fā)出后保存2周。

二、患者查詢病理學(xué)檢查資料的期限(一)門診患者為送檢后15年。(二)住院患者為送檢后30年。

三、活檢、尸檢大體標(biāo)本的保存期限(一)活檢：自簽發(fā)病理學(xué)診斷報告書之日起保存2～4周，具體保存期限由 各醫(yī)院自行規(guī)定。(二)尸檢

1.普通病理尸檢：自簽發(fā)病理學(xué)診斷報告書之日起保存3個月。2.涉及醫(yī)、患爭議的尸檢：按照尸檢前有關(guān)各方簽署的協(xié)議辦理。

四、病理學(xué)檢查資料的借用

(一)醫(yī)院必須制訂關(guān)于借用病理學(xué)檢查資料的辦法并嚴(yán)格實(shí)施。(二)關(guān)于患方借用病理組織學(xué)切片，應(yīng)注意：

1．患方人員申請借用有關(guān)患者的活檢切片、尸檢切片時，應(yīng)按照醫(yī)院制定 的有關(guān)規(guī)定辦理手續(xù)。

2．申請借用切片的患方人員必須：①出示本人身份證等有效證件并保留其復(fù)印件；②填寫借片申請單并簽名；③支付規(guī)定的借片押金（待歸還切片時退還）。

3． 病理科據(jù)以作出診斷的原始切片一般不外借，通常借出（或售出）相關(guān) 病例的復(fù)制切片。復(fù)制切片借出（或售出）前，應(yīng)確認(rèn)該切片的病變與原切片相同或基本相同。

4． 患方借出的切片應(yīng)妥善保存，必須在規(guī)定的期限內(nèi)歸還。患方借出的切 片若有破損、丟失等，應(yīng)按規(guī)定支付賠償金，并承擔(dān)相應(yīng)責(zé)任。

5．病理科因故不能向患方出借或出售有關(guān)切片時，由雙方協(xié)商解決病理學(xué)會診問題。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫(yī)師前來病理科閱片；有條件的單位可酌情進(jìn)行遠(yuǎn)程病理會診。

(三)關(guān)于患方借用細(xì)胞病理學(xué)玻片

1．一個病例的同一次檢查有多張查見惡性腫瘤細(xì)胞的“陽性片”或“可疑 陽性片”時，可允許患方借用其中的一張。借用手續(xù)參見上項(xiàng)(二)。

2．一個病例僅有一張為查見惡性腫瘤細(xì)胞的“陽性片”或“可疑陽性片”時，該陽性片或可疑陽性片原則上不予外借。其會診問題由雙方協(xié)商解決。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫(yī)師前來病理科閱片。(四)關(guān)于借用檢材組織的石蠟包埋塊

1.活檢和尸檢檢材組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）是無法復(fù)制的病理學(xué)檢 查資料，屬于診斷病理學(xué)的重要基礎(chǔ)檔案，原則上不外借。必要時，可由病理科向患方提供未經(jīng)染色的切片（通稱白片）。

3． 患方外借病理切片會診時，受理會診的病理科若確實(shí)需要有關(guān)病例病理 檢材的蠟塊，可由有關(guān)病理科雙方協(xié)商解決。

第六節(jié) 病理學(xué)會診

一、具有一定規(guī)模的病理科應(yīng)定期舉行科內(nèi)病理會診或讀片討論會。

二、積極推動建立地域性病理會診中心。

三、加強(qiáng)臨床－病理會診。

四、應(yīng)由具有高級職稱的病理醫(yī)師接受病理科內(nèi)、外的病理學(xué)會診。

五、接受外院的病理會診時，由會診的病理醫(yī)師簽發(fā)《病理學(xué)會診咨詢意見書》，并在該《意見書》上寫明：“病理醫(yī)師個人會診咨詢意見，僅供原病理診斷的病理醫(yī)師參考”。由作出原病理診斷的病理醫(yī)師自行決定是否采納病理會診咨詢意見和采納的程度。做出原診斷的病理科應(yīng)將《病理會診咨詢意見書》的原件或其復(fù)印件貼附于有關(guān)患者的病理檢查記錄單上，一并歸檔。

六、加做相關(guān)技術(shù)檢測方能作出診斷的會診病例，會診醫(yī)師應(yīng)在《意見書》中予以說明，并向患方進(jìn)行適當(dāng)解釋。

七、對病理診斷時間較為長久病例的會診，應(yīng)考慮到做出原診斷時期的診斷病理學(xué)理論、技術(shù)水平、相應(yīng)病變／疾病的定性診斷標(biāo)準(zhǔn)和原診斷病理科當(dāng)時的客觀條件。

八、有條件的病理科可開展遠(yuǎn)程病理會診。

第七節(jié) 病理科的基本設(shè)施

一、病理科基本設(shè)施的指導(dǎo)原則

(一)保證病理科完成基本工作任務(wù)。(二)保護(hù)病理工作人員免受污染。(三)保護(hù)環(huán)境免受污染。

二、病理科的基本工作空間

(一)病理科的常規(guī)工作需要在下列的各自獨(dú)立的房間內(nèi)進(jìn)行：

1．收發(fā)室（檢材的接收、登記，病理診斷報告書的發(fā)放，病理資料查詢等）2．巨檢和取材室（檢材的肉眼檢查和切取組織塊，貯存取材后的剩余檢材）3．常規(guī)切片前的預(yù)處理室（組織塊的脫水、透明和浸蠟）4．制片室（石蠟切片／冷凍切片／細(xì)胞學(xué)涂片的制做和染色）5．病理組織學(xué)診斷室

6．細(xì)胞病理學(xué)診斷（酌情附設(shè)組織穿刺室）7．病理會診室 8．病理檔案資料室

9．大體標(biāo)本制作室和陳列室

10．尸檢室及其配套空間（三級醫(yī)院建立，包括準(zhǔn)備室、尸檢室、肉眼檢查和取材室、更衣／淋浴室、標(biāo)本儲藏室等）11．儲藏室 12．淋浴室 13．辦公室

(二)較高技術(shù)層次的病理科還應(yīng)設(shè)置： 1．特殊染色和免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)室 2．細(xì)胞遺傳和分子病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室

3．其他特殊檢測實(shí)驗(yàn)室（例如超薄切片制備、電鏡檢測、細(xì)胞培養(yǎng)、流式細(xì)胞術(shù)和其他新技術(shù)實(shí)驗(yàn)室）

4．圖書／電子信息／學(xué)術(shù)活動室 5．進(jìn)修病理醫(yī)師教室。

三、病理科常規(guī)活檢和快速活檢工作的基本設(shè)施(一)收發(fā)室 1． 辦公設(shè)施

2． 紫外線消毒柜（用于活檢申請單等消毒）3． 合于個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng) 4． 其他相關(guān)設(shè)備

(二)病理標(biāo)本巨檢和取材室

1．便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修 2．室內(nèi)紫外線消毒設(shè)備 3．室內(nèi)高效通風(fēng)設(shè)施

4．封閉式高效能通風(fēng)柜廚(用于巨檢和取材，應(yīng)便于清洗、消毒，并安裝足夠照明和紫外線消毒設(shè)備)5．合于個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨(dú)立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池）

6．流水沖洗裝置

7．冷水和熱水供給系統(tǒng)

8．自動錄音設(shè)備（酌情安裝，用于記錄醫(yī)師巨檢標(biāo)本時的語言描述）9．標(biāo)本儲存柜（安裝排風(fēng)設(shè)備）10．隔離服裝（消毒后使用）11．其他相關(guān)設(shè)備。

(三)常規(guī)切片的預(yù)處理室和常規(guī)/快速制片室

1．排放有毒物質(zhì)的室內(nèi)高效通風(fēng)設(shè)施（用于組織塊和石蠟切片的 人工脫水流程）

2．符合個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨(dú)立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池）

3．室內(nèi)紫外線消毒設(shè)備

4．封閉式高效能通風(fēng)柜廚（用于人工脫水流程）5．實(shí)驗(yàn)臺

6．脫水設(shè)備：①人工脫水器具或/和②半自動或全封閉自動脫水機(jī) 7．組織塊石蠟包埋機(jī) 8．石蠟切片機(jī)

*9．恒溫冷凍切片機(jī)

*10．石蠟快速切片機(jī) ［* 9和10：兩項(xiàng)皆配備或配備一項(xiàng)］ #11．一次性切片刀及其配套部件

#12．切片刀和磨刀機(jī) ［# 11和12：兩項(xiàng)皆配備或配備一項(xiàng)］ 13．冰箱 14．恒溫箱 15．烤箱

16．有關(guān)試劑和試劑柜 17．天平

18．染色用器具

19．普通光學(xué)顯微鏡（用于染色質(zhì)量控制）20．其他相關(guān)設(shè)備

(四)特殊染色和免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)室

1．用于染色的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)施和染色的常規(guī)設(shè)備［參見上文：(三)常規(guī)切片的預(yù)處理室和制片室］

2．微波爐或其他抗原修復(fù)設(shè)備 3．有關(guān)試劑和試劑柜

4．自動免疫組化染色儀（具有一定規(guī)模的病理科，酌情）5．其他相關(guān)設(shè)備

(五)病理組織學(xué)診斷室和病理會診室

1．雙筒顯微鏡（每名病理醫(yī)師配備一臺）

*2．雙頭和／或多頭顯微鏡（用于共覽會診和培訓(xùn)示教）

*3．計(jì)算機(jī)和打印機(jī)（酌情連接局域網(wǎng)，用于病理學(xué)檢查資料的儲存和調(diào)閱）*4．顯微攝影設(shè)備，計(jì)算機(jī)圖像分析、電子圖像存儲和放映設(shè)備 [* 2～4：具有一定規(guī)模的病理科配置] 5．遠(yuǎn)程會診系統(tǒng)（酌情）6．其他相關(guān)設(shè)備(六)病理檔案資料室

1．用于儲存切片、蠟塊和文字資料的柜具

2．計(jì)算機(jī)和打印機(jī)（酌情連接局域網(wǎng)，用于病理學(xué)檢查資料的儲存和調(diào)閱）3．秘書辦公設(shè)施（具有一定規(guī)模的病理科）4．其他相關(guān)設(shè)備

(七)必要的專業(yè)參考書和基本的專業(yè)期刊（具有一定規(guī)模的病理科應(yīng)設(shè)立 圖書資料室）

(八)病理大體標(biāo)本制作室和陳列室 1．制作病理大體標(biāo)本的工具

2．用于陳列病理大體標(biāo)本的展覽柜（配備照明裝置）3．其他相關(guān)設(shè)備

(九)辦公室：必要的辦公設(shè)備(十)儲藏室：必要設(shè)施(十一)淋浴室：必備設(shè)施

四、細(xì)胞病理學(xué)檢查工作的基本設(shè)施(一)腫物穿刺取材室：

1．便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修 2．室內(nèi)紫外線消毒設(shè)備

3．用于實(shí)施穿刺術(shù)的檢查床、椅 4．穿刺用器械和器械柜

5．穿刺用、急救用藥物和藥品柜 6．其他相關(guān)設(shè)備

(二)細(xì)胞學(xué)涂片制片室：

1．用于染色的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)施和常規(guī)設(shè)備［參見本節(jié)的三(三)項(xiàng)：“常規(guī)切片的預(yù)處理室和常規(guī)／快速制片室”］)2．可調(diào)速離心機(jī)

3．自動細(xì)胞病理學(xué)檢查系統(tǒng)（具有一定規(guī)模的病理科，酌情）4．其他相關(guān)設(shè)備

(三)細(xì)胞病理學(xué)診斷室：參見本節(jié)的三(五)項(xiàng)（病理組織學(xué)診斷室和病理會診室）。

(四)獨(dú)立設(shè)置（不隸屬于病理科）的細(xì)胞病理學(xué)科室：需要其他必要空間的基本設(shè)備（參見本節(jié)的 “

三、病理科常規(guī)和快速活檢工作的基本設(shè)備”）。

五、尸檢工作的基本設(shè)施(一)尸檢準(zhǔn)備室

1． 尸檢專用器械和柜具 2． 參與尸檢人員用隔離用衣物和消毒器物 3． 辦公設(shè)施 4． 消毒設(shè)施

5． 其他相關(guān)設(shè)備(二)普通尸檢室

1．便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修 2．室內(nèi)紫外線消毒設(shè)備 3．室內(nèi)高效通風(fēng)設(shè)施

4．設(shè)計(jì)合理、適用的尸檢臺［具有合于個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨(dú)立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池），便于清洗、消毒。］ 5．適宜的照明裝置 6．冷水和熱水供給系統(tǒng)

7．階梯式看臺（示教用）8．其他相關(guān)設(shè)備

(三)傳染病用尸檢室：嚴(yán)格按照關(guān)于傳染病管理法規(guī)的要求建設(shè)。(四)更衣／淋浴室：必備設(shè)施

(五)病理標(biāo)本巨檢和取材室［參見本節(jié)的三(二)項(xiàng)：“病理標(biāo)本巨檢和取材室”］

(六)常規(guī)切片室：隸屬于病理科的尸檢室可不另設(shè)（參見本節(jié)的三(三)項(xiàng)：“常規(guī)切片的預(yù)處理室和常規(guī)／快速制片室”）(七)標(biāo)本儲藏室：必要設(shè)施

六、病理學(xué)相關(guān)技術(shù)實(shí)驗(yàn)室的基本設(shè)施

應(yīng)用特殊染色和組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)、塑料包埋組織切片制備、電子顯微鏡超微病理診斷檢材制備、圖像分析、流式細(xì)胞分析（FCM）、聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、細(xì)胞和分子細(xì)胞遺傳學(xué)、病理學(xué)攝影技術(shù)和其他新開發(fā)、引進(jìn)的病理學(xué)相關(guān)技術(shù)的病理科，應(yīng)個根據(jù)有關(guān)技術(shù)要求，建立具有必備基本設(shè)施的實(shí)驗(yàn)室。

《臨床技術(shù)操作規(guī)范?病理學(xué)分冊》/ 第三章 病理學(xué)基本技術(shù)規(guī)范

第一節(jié) 病理組織學(xué)診斷檢材的制備技術(shù)

一、組織的固定

㈠凡需要進(jìn)行病理組織學(xué)檢查的標(biāo)本（器官或組織），于離體（活體或尸體）后，應(yīng)盡快置放（浸泡）于裝有足夠量固定液的容器中固定。固定液量應(yīng)為被固定標(biāo)本體積的5~10倍。置放標(biāo)本的容器大小視標(biāo)本和固定液的體積而定，應(yīng)適當(dāng)大一些。臨床科室切取的標(biāo)本置放于容器中固定后，應(yīng)盡快送交病理科繼續(xù)固定。未能及時、充分固定的干涸或腐敗標(biāo)本不能再進(jìn)行固定和用于制做切片。

㈡常規(guī)固定液為4%中性甲醛（10%中性福爾馬林），應(yīng)預(yù)先多量配制貯存，以備隨時使用。小標(biāo)本的固定時間為4~6小時，大標(biāo)本為18~24小時或更久。㈢根據(jù)病理學(xué)特殊檢查（特殊染色和組織化學(xué)染色、免疫組織化學(xué)染色和原位核酸分子雜交染色、電鏡觀察等）的需要，應(yīng)選用其他適宜的固定液進(jìn)行固定［參見后述的“㈦固定液的常用種類和制備”］。㈣器官、組織固定的基本方法 ［另參見本章第四節(jié)（病理標(biāo)本的肉眼檢查和組織學(xué)切片取材技術(shù)）］

1．食管、胃、腸、膽囊、膀胱等空腔器官：依規(guī)范方法剪開后，按其自然狀態(tài)平鋪于硬紙板上（重點(diǎn)暴露黏膜面或內(nèi)表面的病變處），并用大頭針將標(biāo)本邊緣處固定于紙板上，然后放入4%中性甲醛中固定（黏膜面或內(nèi)表面朝向容器的液面，并覆蓋薄層脫脂棉）。

2．肝、脾：由器官背面，沿其長軸每間隔1.5~2.0cm縱向平行剖開，切成數(shù)片。將每片肝或脾輕輕地平放于裝有4%中性甲醛的容器中，容器底面襯以脫脂棉。應(yīng)避免標(biāo)本彎曲和相互間的疊壓。

3．肺葉：放入固定液中的肺葉漂浮于液面，需在肺表面覆蓋薄層脫脂棉。必要時從支氣管注入適量4%中性甲醛。

4．腎：沿腎外緣中線朝腎門方向作一水平切面（深達(dá)于腎盞），再行固定。5．淋巴結(jié)：先用4%中性甲醛固定1小時后，再沿其長軸切成數(shù)片（厚2 ~3mm），繼續(xù)固定。

6．骨組織：先鋸成小片（若是長骨應(yīng)作橫向鋸片），在4%中性甲醛中固定24小時后，再進(jìn)行脫鈣。

7．微小組織或液體沉淀物：先用拭紙或?yàn)V紙妥為包裹（需用大頭針扎牢），然后放入專用小盒內(nèi)進(jìn)行中性4%甲醛固定，以防檢材遺失。

8．凡進(jìn)入固定程序的標(biāo)本必須連帶其正確無誤的病理檢驗(yàn)號（病理號）。㈤多數(shù)固定液對人體有害，需要防護(hù)，必須在封閉的通風(fēng)條件下進(jìn)行操作。㈥組織塊的切取和固定：①由較大標(biāo)本切取用于制作切片的組織塊（取材）時，應(yīng)與標(biāo)本的斷面平行，組織塊厚度一般為0.3 cm(不應(yīng)>0.5cm)，面積一般在1~1.5×1~1.5以內(nèi)。②切取組織塊的形狀，在充分包括肉眼病變的前提下盡量規(guī)則些（例如方形、矩形、三角形等）；由一個標(biāo)本切取的多塊組織的形狀有所不同，便于蠟塊與其相應(yīng)切片的核對。③固定組織塊的固定液量，一般應(yīng)為組織塊總體積的5~10倍以上。④室內(nèi)常溫（25℃左右）下的固定時間為3~24小時；低溫（4℃）下的固定時間應(yīng)延長。⑤固定組織塊的容器要大一些。⑥組織塊固定期間需要間斷地輕搖或攪動固定液以利于固定液的滲入。㈦常用固定液

1．4%中性甲醛（10%中性福爾馬林）固定液

甲醛（40%）100 ml 無水磷酸氫二鈉 6.5g 磷酸二氫鈉 4.0g 蒸餾水 900ml 2．乙醇－甲醛（酒精－福爾馬林，AF）固定液 甲醛（40%）100ml 95%乙醇 900ml ［說明］一般組織塊經(jīng)乙醇－甲醛固定1～2小時后，即可移入95%乙醇內(nèi)脫水。

3．Carnoy固定液 無水乙醇 60ml 氯仿 30ml 冰醋酸 10ml ［說明］組織化學(xué)染色的常用固定液，組織經(jīng)Carnoy液固定1～2小時后，即可移入無水乙醇中脫水。4．Zenker固定液 升汞 5.0g 重鉻酸鉀 2.5g 硫酸鈉 1.0g 蒸餾水（加至）100ml ［說明］配制本液時，先將升汞溶于蒸餾水中、加溫至40～50℃溶解后，再加入重鉻酸鉀，最后加入硫酸鈉，貯存待用。使用前加入5ml冰醋酸，混合。組織塊需固定12~24小時。切片染色前，需進(jìn)行脫汞沉淀處理。5．Bouin固定液

飽和苦味酸水溶液（約1.22%）75ml 甲醛（40%）25ml 冰醋酸 5ml ［說明］本液臨用時配制。組織塊置于Bouin液固定12～24小時即可（小塊組織只需固定數(shù)小時）。經(jīng)Bouin液固定的組織被苦味酸染成黃色，可用水洗滌12小時后進(jìn)入乙醇脫水（兼脫色）。不必將組織中的黃色除凈（殘存于組織中的苦味酸無礙染色）

6．過碘酸－賴氨酸－多聚甲醛固定液（PLP）A液：賴氨酸 1.827g 蒸餾水 50ml 0.1mol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.4)50ml B液：8%多聚甲醛水溶液 100ml ［說明］本液臨用時配制：取A液3份、B液1份，混合后，加入過碘酸鈉，使液體終濃度為2%。組織塊在4℃下固定36~54小時。本液對細(xì)胞結(jié)構(gòu)和抗原性保存較好。

7．B5（醋酸鈉－升汞－甲醛）固定液 無水醋酸鈉 1.25g 升汞 6.0g 蒸餾水 90ml ［說明］將以上物質(zhì)混合、溶解，使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴組織。染色前應(yīng)進(jìn)行脫汞沉淀處理。如不加甲醛稱為B4固定液（蒸餾水為100 ml）。

8．丙酮固定液

冷丙酮（4℃）固定液用于酶組織化學(xué)染色。細(xì)胞標(biāo)本的免疫組化染色也常用冷丙酮固定10分鐘。

二、常規(guī)石蠟包埋組織切片（常規(guī)切片）的制備

㈠組織塊依序進(jìn)行：①水洗，②脫水，③透明，④浸蠟，⑤包埋和⑥切片。㈡組織切片制備及其HE染色過程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為 易燃、有毒物，必須專人管理，2m以內(nèi)不得有明火，局部環(huán)境應(yīng)有良好的通風(fēng)和消防設(shè)施。

㈢常規(guī)切片的手工操作（步驟次序和各步驟的持續(xù)時間）1．水洗：用流水沖洗已經(jīng)固定的組織塊30min。2．脫水（常溫下）

（1）乙醇－甲醛（AF）液固定 60~120min（2）80%乙醇 60~120min（3）95%乙醇Ⅰ 60~120min（4）95%乙醇Ⅱ 60~120min（5）無水乙醇Ⅰ 60~120min（6）無水乙醇Ⅱ 60~120min（7）無水乙醇Ⅲ 60min ［注意事項(xiàng)］①未經(jīng)充分固定的組織不得進(jìn)入脫水程序。②用于脫水的試劑容積應(yīng)為組織塊總體積的5～10倍以上。③自低濃度乙醇向高濃度乙醇逐級移進(jìn)脫水。④脫水試劑應(yīng)及時過濾、更換（500ml乙醇可用于500個組織塊脫水；加入硫酸銅的無水乙醇變藍(lán)時，提示需要更換）。⑤較大組織塊的脫水時間長于較小者，應(yīng)將兩者分開進(jìn)行脫水。⑥組織置于無水乙醇內(nèi)的時間不宜過長（以免硬化）。⑦丙酮脫水性能強(qiáng)，會使組織塊過縮、硬脆，不宜用以替代無水乙醇。3．透明

（1）二甲苯Ⅰ 20min（2）二甲苯Ⅱ 20min（3）二甲苯Ⅲ 20min ［注意事項(xiàng)］①二甲苯的容積應(yīng)為組織塊總體積的5～10倍以上。②組織塊在二甲苯中透明的時間不宜過長（以防組織硬、脆），并依不同種類組織及其大小而異；組織呈現(xiàn)棕黃或暗紅色透明即可。③二甲苯應(yīng)及時過濾、更換。④組織經(jīng)二甲苯適度處理后不顯透明時，常提示該組織的固定或脫水不充分，應(yīng)查找原因并妥善處理。4．浸蠟

（1）石蠟Ⅰ（45~50℃）60min（2）石蠟Ⅱ（56~58℃）60min（3）石蠟Ⅲ（56~58℃）60min ［注意事項(xiàng)］①熔化石蠟必須有專人負(fù)責(zé)，必須在熔蠟箱內(nèi)或水浴中（70 ℃）進(jìn)行，不得用明火加溫。②熔蠟的容積應(yīng)為組織塊總體積的5～10倍以上。③組織塊經(jīng)二甲苯適度透明后方可轉(zhuǎn)入浸蠟過程，應(yīng)盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中。④浸蠟時間適宜，過短時浸蠟不充分（組織過軟），過長時組織硬脆。⑤熔蠟應(yīng)及時過濾、更換。5．包埋

（1）先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經(jīng)過浸蠟的組織塊，使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入熔蠟中；應(yīng)將組織塊平正地置放于包埋模具底面的中央處；包埋于同一蠟塊內(nèi)的多塊細(xì)小組織應(yīng)彼此靠近并位于同一平面上；腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋（立埋）。

（2）將與組織塊相關(guān)的病理號小條置入包埋模具內(nèi)熔蠟的一側(cè)。

（3）待包埋模具內(nèi)的熔蠟表面凝固后，即將模具移入冷水中加速凝固。

（4）從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊（簡稱蠟快），用刀片去除組織塊周圍的過多石蠟（組織塊周圍保留1~2mm石蠟為宜）。將包埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長方形。

（5）將病理號小條牢固地烙貼在蠟塊一側(cè)（編號應(yīng)清晰可見）。（6）把修整好的蠟塊烙貼在支持器上，以備切片。（7）使用包埋機(jī)的方法按有關(guān)廠商的說明書操作。（8）注意事項(xiàng)

①應(yīng)將組織塊嚴(yán)格分件包埋。包埋時一定要首先認(rèn)真核對組織塊的病理號（包括亞號）、塊數(shù)和取材醫(yī)師對包埋面的要求，準(zhǔn)確地包入相應(yīng)的病理號小條。發(fā)生包埋差錯時，必須立即與取材醫(yī)師和病理科當(dāng)班負(fù)責(zé)人取得聯(lián)系，及時處置。

②必須嚴(yán)防各種異物污染，勿將無關(guān)組織（包括縫線、紙屑或其他異物（尤其是硬質(zhì)異物）埋入蠟塊內(nèi)。

③包埋過程要操作迅速，以免組織塊尚未埋妥前熔蠟?zāi)獭?/p>

④包埋用的熔蠟應(yīng)純凈，熔點(diǎn)適宜。浸蠟Ⅰ用軟蠟（熔點(diǎn)為45~50℃），浸蠟Ⅱ、Ⅲ和包埋用蠟均用硬蠟（熔點(diǎn)為56~58℃）。⑤包埋用熔蠟使用前應(yīng)將先靜置沉淀、過濾。

⑥熔蠟時不得使用明火，以防燃燒。包埋用熔蠟的溫度應(yīng)<65℃；包埋用的鑷子不可加溫過高，以免燙傷組織。6．切片

（1）切片刀或一次性切片刀片必須鋒利。使用切片刀時，必須精心磨備（在低倍顯微鏡下確認(rèn)刀刃無缺口）；使用一次性切片刀片時，應(yīng)及時更新。（2）載玻片必須潔凈、光亮。

（3）將切片刀或刀片安裝在持刀座上（以15°為宜）。

（4）將蠟塊固定于持支持器上，并調(diào)整蠟塊和刀刃至適當(dāng)位置（刀刃與蠟塊表面呈5°夾角）。

（5）細(xì)心移動刀座或蠟塊支持器，使蠟塊與刀刃接觸，旋緊刀座和蠟塊支持器。

（6）修塊（粗切）：用右手勻速旋轉(zhuǎn)切片機(jī)輪，修切蠟塊表面至包埋其中的組織塊完整地全部切到。修塊粗切片的厚度為15～20μm。［注意：對于醫(yī)囑再次深切片（特別是在原切片中發(fā)現(xiàn)了有意義病變而進(jìn)行的深切片），應(yīng)盡量少修塊，以盡量好地獲得有關(guān)病變的連續(xù)性。］

（7）調(diào)節(jié)切片厚度調(diào)節(jié)器（一般為4~6μm），進(jìn)行切片，切出的蠟片應(yīng)連續(xù)成帶，完整無缺，厚度適宜（3～5μm）、均勻，無刀痕、顫痕、皺折、開裂、缺損、松解等。

（8）以專用小鑷子輕輕夾取完整、無刀痕、厚薄均勻的蠟片，放入伸展器的溫水中（45℃左右），使切片全面展開。［注意：必須水溫適宜、潔凈（尤其是水面）；每切完一個蠟塊后，必須認(rèn)真清理水面，不得遺留其它病例的組織碎片，以免污染。］

（9）將蠟片附貼于涂有蛋白甘油或經(jīng)3－氨丙基－三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxy silane，APES)處理過的載玻片上（HE染色時酌情使用，可省略，必要時）。蠟片應(yīng)置放在載玻片右（或左）2/3處的中央，留出載玻片左（或右）1/3的位置用于貼附標(biāo)簽。蠟片與載玻片之間無氣泡。

（10）必須立即在置放了蠟片的載玻片一端（待貼標(biāo)簽的一端），用優(yōu)質(zhì)記號筆或刻號筆準(zhǔn)確、清楚標(biāo)記其相應(yīng)的病理號（包括亞號）。［注意：必須確保載玻片上的病理號與相關(guān)組織石蠟包埋塊的病理號完全一致，不得錯寫或漏寫病理號。］

（11）將置放了蠟片的載玻片呈45℃角斜置片刻；待載玻片上的水分流下 后，將其置于烤箱中烘烤（60～62℃，30～60min），然后即可進(jìn)行染色。（12）注意事項(xiàng) ①組織塊固定、脫水、透明和浸蠟的質(zhì)量直接影響切片制備。切片過程中遇到的困難首先應(yīng)注意從切片前的上述各環(huán)節(jié)中尋找原因。

②切片機(jī)的質(zhì)量是制備優(yōu)質(zhì)切片的重要前提。要使用質(zhì)量好的切片機(jī)，規(guī)范地切片，精心維護(hù)切片機(jī)。

③經(jīng)由內(nèi)窺鏡、穿刺等獲取的細(xì)小組織，應(yīng)間斷性連續(xù)切片多面（一般至少制備6張蠟片，必要時制備更多張）。需作特殊染色、免疫組化染色等的病例，可預(yù)制蠟片備用。

④切片人員應(yīng)細(xì)心操作，防范被切片刀具割傷。

㈣常規(guī)切片的自動組織處理機(jī)操作（步驟次序和各步驟的持續(xù)時間，總計(jì)需要14小時）

1．乙醇－甲醛（AF）固定液 2×60min 2．95%乙醇Ⅰ 2×60min 3．95%乙醇Ⅱ 2×60min 4．無水乙醇Ⅰ 60min 5．無水乙醇Ⅱ 60min 6．二甲苯Ⅰ 30min 7．二甲苯Ⅱ 30min 8．石蠟Ⅰ 30min 9．石蠟Ⅱ 60min 10．石蠟Ⅲ 90min 11．包埋

（1）手工常規(guī)包埋：參見上述的“㈠手工操作”項(xiàng)。（2）用組織包埋機(jī)時，按有關(guān)廠商說明書的規(guī)定操作。13．切片：參見上述的“㈠手工操作”項(xiàng)。14．注意事項(xiàng)

（1）必須按有關(guān)說明書的規(guī)定，使用和維護(hù)自動組織處理機(jī)、包埋機(jī)、磨刀機(jī)、封蓋玻片機(jī)等儀器等。

（2）要嚴(yán)防因停電、機(jī)械故障等造成的組織塊損壞。一旦發(fā)生此類事故，必須及時向科主任報告，盡快采取應(yīng)急措施妥善處置。

（3）使用自動組織處理機(jī)時：①合理設(shè)定的運(yùn)行時間（充分利用夜間）。②固定、脫水的環(huán)境溫度不得>30℃。③乙醇、二甲苯和熔蠟的容積，要大于組織塊總體積的5～10倍以上，并應(yīng)經(jīng)常過濾，保持清潔；應(yīng)經(jīng)常檢查試劑的濃度，及時更新。④對于多量組織塊，可按其大小分批進(jìn)行處理；小塊組織可適當(dāng)縮短處理時間。

三、快速石蠟包埋組織切片的制備 ㈠煮沸固定切片法

1．固定：切取大小適宜（厚度<2mm）的組織塊，盡快置入裝有5~8ml 10%中性4％甲醛的試管中煮沸1min，然后已入冷水中。2．脫水

（1）將已經(jīng)煮沸固定的組織塊取出，用刀片將其厚度修切至<1.5mm，隨 即置入盛有5~8 ml丙酮的試管中，煮沸2 min，然后將丙酮傾棄。

（2）再向該試管中重新加入5~8 ml丙酮并煮沸2min。如此重復(fù)3~4次。3．浸蠟：將已經(jīng)丙酮脫水的組織塊由試管中取出，用吸水紙去除其表面液體，隨即置入75~80℃熔化的石蠟中，待組織塊下沉、不再出現(xiàn)氣泡時（約需30s），即可包埋。4．包埋、切片和染色。

（1）用熱鑷子將預(yù)制的蠟塊表面熔化，埋入已經(jīng)浸蠟的組織塊。

（2）待埋入組織塊的蠟塊表面凝固后，即用載玻片輕壓蠟塊表面片刻，使 蠟塊表面平整。

（3）將蠟塊置入冰水中，使其變硬。

（4）迅速切片，裱片后用吸水紙去除載玻片上的水分。（5）將載玻片用火焰烘干（勿距火焰太近）。（6）迅速進(jìn)行HE染色。5．注意事項(xiàng)

（1）為了盡量縮短制片時間，必須預(yù)先作好有關(guān)準(zhǔn)備工作，備齊取材用具、試管、固定液、丙酮、酒精燈、火柴（或其他引火器）、包埋用蠟塊、載玻片和染色試劑等，放在固定部位待用。

（2）全部制片過程一般在20~25min內(nèi)完成。

（3）制片后剩余組織塊應(yīng)作常規(guī)石蠟包埋切片染色，進(jìn)一步診斷。（4）含脂肪較多的組織，須經(jīng)多次丙酮處理。

（5）用于組織固定、脫水、透明的試劑和浸蠟用的石蠟應(yīng)及時過濾、更換。（6）丙酮、乙醇、二甲苯等為易燃物，進(jìn)行上述各項(xiàng)流程時，2m距離內(nèi)不得存在明火。加溫脫水和浸蠟過程必須應(yīng)用隔水溫箱，不得使用干烤箱操作。㈡超聲波快速處理儀石蠟切片法（參照有關(guān)廠商的說明書操作）。

四、冷凍組織切片的制備

㈠應(yīng)用恒冷箱切片機(jī)制備切片：是目前最適用方法。恒冷箱切片機(jī)種類較多，應(yīng)嚴(yán)格按有關(guān)廠商的說明書操作。用于切片的標(biāo)本必須未曾固定。㈡應(yīng)用開放式冷凍切片機(jī)制備切片 1．二氧化碳制冷切片

（1）將組織塊放在冷凍臺上，滴加OCT或羥甲基纖維素液于組織塊周圍（將組織塊包埋），使固定在切片機(jī)上的切片刀接近組織塊表面。

（2）間斷開放液態(tài)二氧化碳桶的開關(guān)，噴凍組織塊和切片刀，使組織塊凍結(jié)和切片刀制冷。

（3）迅速移動切片刀進(jìn)行切片：先將組織塊修平，然后調(diào)節(jié)厚度至8~12μm處進(jìn)行切片。

（4）用毛筆將切片展開，貼附于載玻片上，稍干后，置于冷凍切片固定液中固定1min，隨即進(jìn)行HE染色。也可用毛筆將切片托入水中，再用玻璃彎針將切片移至染色皿中進(jìn)行染色。

（5）組織塊也可先在4%中性甲醛中煮沸固定1min，水洗后再行冷凍切片。2．半導(dǎo)體致冷切片

（1）切片刀與持刀器之間要間隔一層云母片或硬紙片。將冷刀致冷器粘在刀面上。

（2）將組織冷凍臺安裝在半導(dǎo)體切片機(jī)上。

（3）將冷凍臺和切片刀致冷器上的導(dǎo)線連接在控制臺直流電源上（注意：正負(fù)電極不可接反）。

（4）連接致冷器的冷卻水管并開始放水，然后開啟電源；冷卻水管中的水流量不宜過大，在使用過程不得斷水。

（5）調(diào)整冷凍溫度調(diào)節(jié)器，至切片刀和冷凍臺呈現(xiàn)霜凍。（6）將新鮮組織塊或已固定的組織放在冷凍臺中央，滴加水或OCT，或用水調(diào)成糊狀的甲基纖維素于組織塊周圍（將組織塊包埋）。（7）待組織塊冷凍適當(dāng)后，進(jìn)行切片。

（8）對于未經(jīng)固定的新鮮組織，用毛筆將制作滿意的切片展平，立即裱貼于蓋玻片或載玻片上，待冷凍的切片剛要融化時，立即將其置于冷凍切片固定液中固定1min。對于已經(jīng)固定的組織塊，可用毛筆將制作滿意的切片托入水中，再用玻璃彎針將切片移至染色皿中進(jìn)行染色。

（9）切片完畢后，先關(guān)閉電源，再關(guān)閉冷卻水，待冰霜融化后擦干機(jī)器，加罩。

3．甲醇致冷切片（按有關(guān)廠商的儀器說明書操作）。4．氯乙烷致冷切片

（1）將新鮮的或已經(jīng)固定的組織塊置于支持器中央，加少許水或OCT。

（2）連續(xù)噴射氯乙烷于組織塊上，待組織塊凍結(jié)后，改為間歇噴射，使凍結(jié)適度，立即切片。使用氯乙烷時應(yīng)注意防火、防爆。

（3）進(jìn)行組織切片的裱貼、固定和染色（與上述方法相同）。㈢注意事項(xiàng)

1．制作冷凍切片所需的試劑和設(shè)備等應(yīng)處于隨時可供使用狀態(tài)。

2．切取的組織塊大小適宜（厚度<2mm），并盡快置于冷凍組織切片機(jī)上制備切片。

3．調(diào)節(jié)冷凍程度，試切合適時便迅速切片。冷凍不足無法切片，冷凍過度 切片易碎。

4．冷凍切片固定液（1）乙醚-乙醇液

無水乙醚 1份 95%乙醇 1份

（2）乙醇-冰醋酸液

95%乙醇 100ml 冰醋酸 3～5滴

五、脫鈣方法

骨和其他鈣化組織，通常需要脫去鈣鹽后進(jìn)行切片。骨組織脫鈣前需先行固定。

㈠常規(guī)脫鈣法：

1． 將骨組織鋸成薄片（約1×1×0.3cm）。2． 在AF中或4％中性甲醛中固定6～12h。

3． 將骨片置于5%硝酸（急需時可置于37℃溫箱）中脫鈣，至用針輕刺可 入時為止，約需12~24h（小塊骨組織脫鈣僅需2~3h），其間可更新脫鈣液2～3次。

4． 流水沖洗1~2h。

5． 移入5%甲明礬液，2~4h。6． 流水沖洗2~3h。7． 按常規(guī)脫水。8．石蠟包埋。㈡電解脫鈣法：

將骨片置于裝有8%硝酸和10%甲酸混合液的電泳槽（有蓋的方形玻璃標(biāo)本 缸或燒杯）內(nèi)的陽極處，6V直流電源下持續(xù)電解30min~3h，至用針輕刺可入時為止。

㈢骨髓組織脫鈣：可浸泡于苦味酸乙醇飽和液（占85%）、甲醛（占10%）和冰醋酸（占5%）的混合液中（同時進(jìn)行固定和脫鈣）。㈣注意事項(xiàng)

1．骨片等脫鈣組織的厚度適宜。

2．脫鈣組織與脫鈣液的體積比>1:30。

3．脫鈣過程中應(yīng)不時搖動，多次更換脫鈣液。4．脫鈣時間不可過長。

5．微波處理可加速脫鈣過程。

6．脫鈣后的組織必須用流水充分沖洗。

7．用于包埋的石蠟硬度適中（不要過軟或過硬）。

六、蘇木素－伊紅（HE）染色

HE染色是應(yīng)用最廣泛的組織病理學(xué)常規(guī)染色技術(shù)。㈠染色程序

1．石蠟切片HE染色（常規(guī)HE染色）

（1）二甲苯Ⅰ 5～10min（2）二甲苯Ⅱ 5～10min（3）無水乙醇Ⅰ 1～3min（4）無水乙醇Ⅱ 1～3min（5）95%乙醇Ⅰ 1～3min（6）95%乙醇Ⅱ 1～3min（7）80%乙醇 1min（8）蒸餾水 1min（9）蘇木素液染色 5～10min（10）流水洗去蘇木素液 1min（11）1%鹽酸-乙醇 1～3s（12）稍水洗 1～2s（13）返藍(lán)（用溫水或1%氨水等）5～10s（14）流水沖洗 1～2min（15）蒸餾水洗 1～2min（16）0.5%伊紅液染色 1～3min（17）蒸餾水稍洗 1～2s（18）80%乙醇 1～2s（19）95%乙醇Ⅰ 2～3min（20）95%乙醇Ⅱ 2～3min（21）無水乙醇Ⅰ 3～5min（22）無水乙醇Ⅱ 3～5min（23）石炭酸-二甲苯 3～5min（24）二甲苯Ⅰ 3～5min（25）二甲苯Ⅱ 3～5min（26）二甲苯Ⅲ 3～5min（27）中性樹膠封固

注：①（12）和（13）項(xiàng)可省去，但（14）的沖水時間需延長至10～15min（細(xì)胞核顯示更清晰）。

②（23）項(xiàng)可用無水乙醇代替；北方地區(qū)可省略。2．冰凍切片HE染色

（1）冰凍切片固定 10～30s（2）稍水洗 1～2s（3）蘇木素液染色（60℃）30～60s（4）流水洗去蘇木素液 5～10s（5）1%鹽酸-乙醇 1～3s（6）稍水洗 1～2min（7）返藍(lán)（用溫水或1%氨水等）5～10s（8）流水沖洗 15～30s（9）0.5%伊紅液染色 1～2min（10）蒸餾水稍洗 1～2min（11）80%乙醇 1～2min（12）95%乙醇 1～2min（13）無水乙醇Ⅰ 1～2min（14）無水乙醇Ⅱ 1～2min（15）石炭酸-二甲苯 2～3min（16）二甲苯Ⅰ 2～3min（17）二甲苯Ⅱ 2～3min（18）中性樹膠封固

注：①（7）和（8）項(xiàng)可省去，但（9）的沖水時間需延長至10～15min（細(xì)胞核顯示更清晰）。

②（15）項(xiàng)可用無水乙醇代替；北方地區(qū)可省略。

㈡染色結(jié)果：細(xì)胞核呈藍(lán)色，細(xì)胞漿、肌纖維、膠原纖維和紅細(xì)胞呈不同程度的紅色。鈣鹽和細(xì)菌可呈藍(lán)色或紫藍(lán)色。㈢染色注意事項(xiàng)

1．切片染色前，應(yīng)徹底脫蠟。

2．用含有升汞液體固定的組織，其切片染色前應(yīng)先脫去汞鹽：（1）石蠟切片脫蠟至水洗

（2）Lugol液 20min（3）流水沖洗 5min（4）95%乙醇 10min（5）水洗 1min（6）5%次亞硫酸鈉水溶液 5min（7）流水沖洗 5min（8）顯微鏡觀察除汞滿意后，轉(zhuǎn)入HE染色 3．脫除福爾馬林色素（必要時）：（1）石蠟切片脫蠟至水洗

（2）1%NaOH(1ml)與80%乙醇（99ml）混合液 10min（3）流水沖洗 5min（4）轉(zhuǎn)入HE染色

4．嚴(yán)格執(zhí)行HE染色流程，用顯微鏡控制細(xì)胞核的蘇木素染色質(zhì)量。HE染片應(yīng)著色鮮艷，紅、藍(lán)分明，對比清晰。5．載玻片自二甲苯中取出后，應(yīng)立即用潔凈、光亮的蓋玻片和稠度適宜的中性樹膠濕封載玻片。封蓋處內(nèi)無氣泡，外無溢膠。封片時必須進(jìn)行操作人員和局部環(huán)境的二甲苯污染防護(hù)。不應(yīng)將組織切片烤干或風(fēng)干后再行封片。

6．必須在載玻片的一端牢貼標(biāo)簽。標(biāo)簽上應(yīng)印有病理科所在的醫(yī)院名稱。標(biāo)簽上應(yīng)清楚顯示有關(guān)的病理號及其亞號；標(biāo)簽上的病理號應(yīng)準(zhǔn)確無誤，無涂改。7．制片完成后，技術(shù)人員應(yīng)對切片與其相應(yīng)的病理學(xué)檢查記錄單或取材工作記錄單認(rèn)真進(jìn)行核對；確認(rèn)無誤后，將制備好的切片連同相關(guān)的活檢申請單/活檢記錄單以及取材工作單等一并移交給有關(guān)的病理醫(yī)師；交接雙方經(jīng)核對無誤后，辦理移交簽字手續(xù)。

8．石蠟切片-HE染色的優(yōu)良率（甲、乙級切片所占的比率）應(yīng)≥85%。石蠟切片-HE染色質(zhì)量的基本標(biāo)準(zhǔn)列于附表。

9．制片工作一般應(yīng)在取材后2個工作日內(nèi)完成（不含進(jìn)行脫鈣、脫脂等需要特殊處理的標(biāo)本）。

10．制片過程出現(xiàn)意外情況時，技術(shù)室人員應(yīng)及時向病理醫(yī)師和科主任報告，設(shè)法予以補(bǔ)救。

附表 常規(guī)石蠟包埋-HE染色切片質(zhì)量的基本標(biāo)準(zhǔn)

優(yōu) 質(zhì) 標(biāo) 準(zhǔn)

滿 分 質(zhì) 量 缺 陷 減 分

⒈組織切面完整，①組織稍不完整：減1～3分 ②不完整：減4～10分

內(nèi)鏡咬檢、穿刺標(biāo)本切面數(shù) 10 ③未達(dá)到規(guī)定面數(shù)：減5分

⒉切片薄(3～5μm)，厚薄均勻 10 ①切片厚(細(xì)胞重疊)，影響診斷：減6～10分

②厚薄不均勻：減3～5分

⒊切片無刀痕、裂隙、顫痕 10 ①有刀痕、裂隙、顫痕，尚不影響診斷：減2分

②有刀痕、裂隙、顫痕，影響診斷：減5分

⒋切片平坦，無皺褶、折疊 10 ①有皺褶或折疊，尚不影響診斷：各減2分

②有皺褶折或折疊，影響診斷：各減5分

⒌切片無污染 10 有污染：減10分

⒍無氣泡（切片與載玻片間/ 10 ①有氣泡：減3分 蓋片與切片、載玻片間），②膠液外溢：減3分

蓋片周圍無膠液外溢

⒎透明度好 10 ①透明度差：減1～3分

②組織結(jié)構(gòu)模糊：減5～7分

⒏細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色對比清晰 10 ①細(xì)胞核著色灰淡或過藍(lán)：減5分

②紅(細(xì)胞漿)與藍(lán)(細(xì)胞核)對比不清晰：減5分

⒐切片無松散，裱貼位置適當(dāng) 10 ①切片松散：減5分

②切片裱貼位置不當(dāng)：減5分

⒑切片整潔，①切片不整潔：減3分

標(biāo)簽端正粘牢，編號清晰 10 ②標(biāo)簽粘貼不牢：減3分

③編號不清晰：減4分

合 計(jì) 100

切片質(zhì)量分級標(biāo)準(zhǔn)： ①甲級片： ≥90分（優(yōu)）

②乙級片：75～89分（良）

③丙級片：60～74分（基本合格）

④丁級片： ≤59分（不合格）

㈣HE染色試劑的配制 1．蘇木素染液

（1）Harri蘇木素染液

蘇木素 1g 無水乙醇 10ml 硫酸鋁鉀 20g 蒸餾水 200ml 氧化汞 0.5g 冰醋酸 8ml 先用無水乙醇溶解蘇木素，用蒸餾水加熱溶解硫酸鋁鉀；然后將該兩液合并煮沸，加入氧化汞，繼續(xù)加熱和攪拌溶液至深紫色，隨即用冰水冷卻，恢復(fù)至室溫后過濾備用。使用前加入冰醋酸并混勻、過濾。

（2）Gill改良蘇木素液

蘇木素 2g 無水乙醇 250ml 硫酸鋁鉀 17g 蒸餾水 750ml 碘酸鈉 0.2g 冰醋酸 20ml 先用無水乙醇溶解蘇木素，用蒸餾水溶解硫酸鋁鉀；然后將該兩液混合，再依次加入碘酸鈉和冰醋酸。使用前過濾。

（3）Mayer改良蘇木素液

A液：蘇木素 2g 無水乙醇 40ml B液：硫酸鋁鉀 100g 蒸餾水 600ml 將蘇木素溶于無水乙醇中（A液）；稍加熱，使硫酸鋁鉀溶于蒸餾水中（B液）。將A液與B液混合后煮沸2min，再用蒸餾水補(bǔ)足至600 ml，加入400mg碘化鈉充分混勻。染液呈紫紅色。2.鹽酸－乙醇分化液

濃鹽酸 1 ml 70%乙醇 99 ml 3．伊紅液

（1）0.25～0.5%伊紅Y水溶液

伊紅Y 0.25～0.5 g 蒸餾水 100 ml 冰醋酸 1滴

（2）0.5%伊紅Y-氯化鈣水溶液

伊紅Y 0.5 g 蒸餾水 100 ml 無水氯化鈣 0.5 g（3）0.25～0.5%伊紅Y-乙醇溶液。

伊紅Y 0.25~0.5 g 80%乙醇 100 ml 4．石炭酸-二甲苯混合液

石炭酸 1份 二甲苯 3份 第二節(jié) 細(xì)胞學(xué)診斷檢材的制備技術(shù)

一、細(xì)胞涂片、組織印片和壓片的制備

（一）涂片質(zhì)量的基本要求

1．將檢材涂布于載玻片的右（或左）2/3處，另1/3部位粘貼標(biāo)簽。2．單向涂布檢材，避免細(xì)胞變形。3．均勻涂布檢材，涂片厚薄適當(dāng)。

4．紅細(xì)胞過多的涂片，可酌情進(jìn)行溶解紅細(xì)胞處理。

（二）涂片方法

1．涂抹法：用棉簽或針頭將標(biāo)本單向、均勻地涂抹于載玻片上。2．拉片法：將一滴檢材置于一張載玻片上，再用另一張載玻片疊加其 上并予輕壓，再將該兩張載玻片朝反向拉動，從而獲得兩張涂片。3．推片法：將一滴檢液置于載玻片的右端，再用另一張窄邊光滑的載

玻片作為推片，并以與滴液載玻片成40°夾角、自右向左勻力推動檢液，形成涂片。

（三）痰涂片的制作

1．送檢的痰液應(yīng)是由肺內(nèi)咳出，最好是清晨空腹時自肺內(nèi)深咳出的痰液。2．核查無誤的收驗(yàn)痰液，應(yīng)立即制作涂片（通常為2～3張）。3．用細(xì)簽或無鉤鑷子挑取痰液置于載玻片上，并左右往復(fù)薄涂，隨即投入固定液中。

4．痰液中呈現(xiàn)下列性狀的成分可能含有癌細(xì)胞，應(yīng)注意挑取制作涂片：①血絲；②灰白色痰絲（形如白色細(xì)線，微細(xì)螺旋狀，牽引時可伸長）；③透明痰液（可拉成較長細(xì)絲）。［及時在細(xì)胞學(xué)檢查申請單上記錄痰液性狀］ 5．檢查痰液中的腫瘤細(xì)胞，一般應(yīng)連續(xù)送檢3次。

（四）黏膜、皮膚表面刮?。ㄋ⑷?、拉?。┪锖头置谖锏耐科闹谱?/p>

1．陰道排出物、子宮頸刮取物涂片：通常由婦產(chǎn)科醫(yī)師將已制作、固定后的涂片送交病理科檢查。［注意由子宮頸外口上皮移行帶刮取細(xì)胞涂片］

2．支氣管鏡、胃鏡等內(nèi)腔鏡的黏膜刷取物涂片（黏膜刷片）：刷片通常由內(nèi)腔鏡醫(yī)師制作、固定后送交病理科檢查。

3．食管、胃拉網(wǎng)涂片：由食管拉出的套網(wǎng)氣囊適量放氣后，將氣囊套網(wǎng)在載玻片滾動涂片，尤應(yīng)將套囊上血絲、灰白色物制作涂片；涂片通常由有關(guān)臨床醫(yī)師將已制作、固定后的刷片送交病理科檢查。套網(wǎng)中的小塊組織可用來制作石蠟包埋切片。

4．眼、耳、鼻、咽、口腔、皮膚等處病變（潰瘍性病變等）的分泌物涂片。

（五）液體涂片的制作

液體標(biāo)本（檢材）包括乳頭溢液、胸水、腹水、尿液、胃液、腦脊液、穿

刺液、沖洗液、灌注液等。除乳頭溢液外，其他液體檢材一般均應(yīng)先行離心（2000r/min，10～20min）后，取其沉淀物制作涂片；液體檢材也可用細(xì)胞涂片離心機(jī)（cytospin）直接制作細(xì)胞涂片。制作好的涂片應(yīng)立即固定和染色。［及時在細(xì)胞學(xué)檢查申請單上記錄液體標(biāo)本的性狀和數(shù)量］

液體標(biāo)本的離心沉淀物較多時，將制作涂片后剩余的沉淀物固定于4％中性甲醛中1h，然后用檫鏡紙或綢布將其包裹，制作石蠟包埋切片。1．乳頭溢液：直接滴于載玻片上制作涂片。

（1）患者乳腺觸及腫物時：用手指自腫物遠(yuǎn)方沿乳腺導(dǎo)管引流方向輕力按 模擠壓，獲取溢液，宜取中段溢液和血性溢液涂片。

（2）患者乳腺未觸及腫物時：可自乳暈周圍向乳腺外周輕力按模擠壓，獲取溢液。

2．胸水和腹水

（1）由患者體內(nèi)抽取的胸水或腹水應(yīng)盡快送交病理科驗(yàn)收，檢液量以200～500ml為宜。因故（例如遠(yuǎn)途）延時送達(dá)時，需在標(biāo)本中加入40%的甲醛（加入量為送檢胸水、腹水量的1/5），或加入等量的50％乙醇－生理鹽水。

（2）胸水、腹水的離心：采取容器底部的液體10ml（包括可能存在的沉淀物），移入離心管內(nèi)進(jìn)行離心。

（3）離心后，傾去全部上清液，將離心管底部含有沉淀物的液體搖勻并用吸管吸出適量，滴注于載玻片上，制作涂片。3．尿液

（1）制作方法同胸、腹水。

（2）尿液含有膠狀物時，應(yīng)先將其除去。清除方法：用0.5ml/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)尿液Ph至6.0；離心后，傾去上清液，再向沉淀物中加入95%乙醇5～10ml／L（固定細(xì)胞），靜置5min后加入蒸餾水并輕搖（溶去膠狀物）；再次離心后，取沉淀物制作涂片。檢查尿液中的腫瘤細(xì)胞，一般應(yīng)連續(xù)送檢3次。4．胃液、胃沖洗液：制作方法同胸、腹水。5．腦脊液

（1）制作方法同胸、腹水。

（2）腦脊液內(nèi)細(xì)胞一般較少，可用微孔濾膜過濾法、沉淀法或纖維捕捉法收集細(xì)胞，制作涂片。

6．沖洗液、灌洗液、穿刺液涂片的制作：參見上述的胸水、腹水項(xiàng)。

二、腫物細(xì)針穿刺物涂片的制備

（一）實(shí)施細(xì)針穿刺術(shù)前的準(zhǔn)備工作

1．實(shí)施細(xì)針穿刺術(shù)的病理醫(yī)師應(yīng)先了解患者臨床情況，向患者和/或患者授權(quán)人說明實(shí)施穿刺術(shù)的意義、局限性和其他相關(guān)問題等，取得患者和/或患方的知情和理解，并簽署由各醫(yī)院制訂的《申請實(shí)施細(xì)針穿刺術(shù)細(xì)胞病理學(xué)診斷患方知情同意書》。

2．合格的手術(shù)操作環(huán)境。

3．必備的適用手術(shù)器械和其他相關(guān)設(shè)施。

（二）腫物穿刺術(shù)的操作要點(diǎn)：

1．確認(rèn)腫物部位并估計(jì)其大小、與皮表距離和質(zhì)地（實(shí)／囊性、硬度等），以指導(dǎo)穿刺的方向、深度和用力程度。2．必須嚴(yán)格實(shí)行無菌操作。

3．根據(jù)腫物大小及其血供情況選擇適用型號的穿刺用針頭。穿刺用針頭的外徑為0.6～0.9mm，安置在2ml或10ml的一次性空注射器上。4．針吸法穿刺術(shù)操作要點(diǎn)

（1）進(jìn)行穿刺前，先將安裝了穿刺用針頭的空注射器管芯外拉2cm；然后，用手固定腫物，將安裝在空注射器上的穿刺用針頭刺入腫物（注射器內(nèi)無空氣）。

（2）迅速上下提插注射器管芯10～20次（其間變換針頭方向3～4次），遂使腫物不同部位的多較內(nèi)容吸進(jìn)入針頭和注射器內(nèi)。

（3）將注射器與針頭分離（管內(nèi)負(fù)壓因而解除）；隨后，再將該注射器與仍插于腫物內(nèi)的針頭相接，拔出針頭，穿刺結(jié)束。

（4）迅速推動注射器的管芯，盡快地將位于穿刺針頭內(nèi)的少量吸出物排射在2～3張清潔的載玻片上，進(jìn)行涂片。

5．涂片方法：用針頭將載玻片上的吸出物輕輕均勻撥開，或用推片法朝一個方向展開（不可雙向往返推移）。

6．吸出物過少時，可用向離心管內(nèi)沖洗穿刺針頭；再將沖洗液離心，然后取其沉淀物涂片［參見上述一

（五）項(xiàng)“液體涂片的制作”］。

7．吸出物較多時，可適量50％乙醇－生理鹽水液將涂片后注射器和針頭內(nèi)剩余的吸出物沖洗至離心管中，離心后，取其沉淀物制作常規(guī)石蠟包埋切片。8．吸出物中含有細(xì)小組織塊時，應(yīng)將其制作常規(guī)石蠟包埋切片。

9．內(nèi)臟腫物穿刺時，必須在影象學(xué)檢查的引導(dǎo)下用較長細(xì)針進(jìn)行穿刺。10．穿刺操作完成后，即在細(xì)胞病理學(xué)檢查單上書寫穿刺記錄。

三、組織印片、壓片的制備

（一）組織印片：

1．用鋒利刀片剖開剛切取的新鮮腫瘤組織或淋巴結(jié)等，然后用清潔載玻片輕壓于組織剖面處，將組織表面的細(xì)胞成分印在玻片上。用稍微加溫的載玻片制備印片時，可印得較多細(xì)胞。

2．制作淋巴結(jié)印片前，應(yīng)先用濾紙吸去淋巴結(jié)切面上的血液、組織液。

（二）壓片：

1．選取微小薄片組織平鋪于一張載玻片上，再用另一張載玻片疊加其上并予輕壓。

2．腦組織質(zhì)軟，易于制作壓片；稍硬的組織需切成細(xì)碎薄片制作壓片。

四、涂片的固定

（一）用于HE染色和巴氏染色的涂片必須濕固定，即涂片后立即進(jìn)行固定。乳頭溢液涂片和液體標(biāo)本離心沉淀物涂片，應(yīng)待涂膜潮干（即周膜稍干而其中央?yún)^(qū)域未干）時進(jìn)行固定。用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆薩染色和免疫細(xì)胞化學(xué)染色的涂片，必須干固定，即待涂片稍干后再進(jìn)行固定。

（二）固定液

1．乙醇－冰醋酸液：95%乙醇∶冰醋酸＝99∶1。常用。

2．乙醇－乙醚液：95%乙醇49.5ml, 乙醚49.5ml, 冰醋酸1ml。較常用。3．甲醇：滴加在干燥涂片上，用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆薩染色 和免疫細(xì)胞化學(xué)染色。

4．丙酮：適用于酶類染色。

5．Carnoy液：由無水乙醇、氯仿、冰醋酸按6:3:1比例混成，適用于顯

示核酸、糖原、黏液染色。涂片在Carnoy液固定3～5min后，應(yīng)移入95%乙醇中繼續(xù)固定。

6．對于液體標(biāo)本的離心沉淀物、食管拉網(wǎng)獲取的小塊組織或吸出物中的細(xì)小組織塊等，固定于4%中性甲醛液中1h，然后制作常規(guī)石蠟包埋切片。

（三）固定方法 1．浸入法：

（1）將稍為干燥（不能完全干燥）的涂片直接浸泡于固定液內(nèi)至少15 ～ 30min。

（2）因細(xì)胞容易脫落，宜以一個盛有固定液的容器只固定一例標(biāo)本的涂片；一個容器固定多例涂片時，有可能造成的腫瘤細(xì)胞交叉污染。（3）必要時可將標(biāo)本涂在硅化載玻片上，以防脫落。（4）固定液重復(fù)使用時，應(yīng)先用濾紙過濾。

（5）95%乙醇固定液多次重復(fù)使用時，需測定其濃度比重，乙醇濃度低于90%時應(yīng)予棄用。

2．滴加法：將固定液滴加于平放的干燥涂片上，應(yīng)避免因固定液揮發(fā)造成沉淀。

（四）固定后未染色涂片的保存或郵寄：涂片固定15min后取出，立即滴加數(shù)滴甘油于涂膜上。對該涂片進(jìn)行染色前，應(yīng)先將其置于95%乙醇中溶去甘油。

五、涂片的染色

最常用于細(xì)胞病理學(xué)涂片檢查的是蘇木素－伊紅（HE）染色和巴氏染色。一些特殊染色、組織化學(xué)染色和免疫組織化學(xué)染色也用于細(xì)胞病理學(xué)的涂片檢查（參見第4章第一、二節(jié)）。

（一）蘇木素－伊紅（HE）染色（參見本章第一節(jié)的“六”項(xiàng)）。

（二）巴氏（Papanicolaou）染色

巴氏染色時，細(xì)胞透明度好，細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，色彩豐富而鮮艷，主要用于婦科細(xì)胞學(xué)涂片、痰涂片和富含鱗狀上皮細(xì)胞的涂片檢查。1．試劑配制

（1）Harri蘇木素液（參見本章第一節(jié)的“六”項(xiàng)）（2）鹽酸－乙醇液

濃鹽酸 1ml 70%乙醇 99ml（3）橙黃G6液

橙黃G6 0.5g 蒸餾水 5ml 無水乙醇 95ml 磷鎢酸 0.015g 先將橙黃G溶于蒸餾水中，再加入無水乙醇，然后加入磷鎢酸。

（4）EA36染液

①EA36儲備液

A液：亮綠0.5g，溶于5ml蒸餾水中，溶解后加入無水乙醇至100ml。B液：伊紅0.5g，溶于5ml蒸餾水中，溶解后加入無水乙醇至100ml。C液：俾士麥棕0.5g，溶于5ml蒸餾水中，溶解后加入無水乙醇至100ml。

②EA36工作液

EA36儲備液的A液 45 ml EA36儲備液的B液 45 ml EA36儲備液的C 液 10 ml 磷鎢酸 0.2 g 碳酸鋰飽和水溶液 1 滴 2．染色程序

（1）將已經(jīng)固定的涂片置于80%乙醇中2 min。

（2）蒸餾水洗2 min。

（3）蘇木素液染核10～12 min，自來水洗。

（4）鹽酸-乙醇液分化約20～30s，至涂片呈淡橙紅色。

（5）流水沖洗10～15min，蒸餾水洗。

（6）依次用80%、95%乙醇脫水，各2min。

（7）橙黃G6液染色3～5min。

（8）95%乙醇洗2～3次，洗去多余染液。

（9）EA36工作液染色3～5 min。

（10）95%乙醇洗2～3次，洗去多余染液。

（11）無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。

3．染色結(jié)果：細(xì)胞核呈深藍(lán)色，核仁呈紅色；不同分化類型的鱗狀上皮細(xì)胞，其胞漿顏色各異：角化細(xì)胞呈粉紅色，不全角化細(xì)胞呈橙黃色，角化前細(xì)胞呈淡藍(lán)或淡綠色；紅細(xì)胞呈橙紅或鮮紅色，白細(xì)胞的胞漿呈淡藍(lán)綠色；粘液呈淡藍(lán)或粉紅色。

（三）瑞氏（Wright）染色

瑞氏染色一般用于血液涂片，也可用于檢查腫瘤細(xì)胞。1．試劑配制

（1）瑞氏染液

瑞氏染料 1g 甲醇 600ml 將瑞氏染料放入研缽內(nèi)，加入適量甲醇與之混合研磨，使染料逐漸溶解。將溶解的染液傾入另一玻璃瓶內(nèi)，然后再加入適量甲醇繼續(xù)研磨；未溶解的染料如此反復(fù)多次，直至染料完全溶解、甲醇用完為止。染液避光保存?zhèn)溆谩?/p>

（2）磷酸鹽緩沖液

無水磷酸氫二鈉 6.5g 磷酸二氫鈉 4g 蒸餾水 1 000ml pH：6.5～7.0 2.染色程序

（1）涂片自然干燥。

（2）滴加瑞氏液染色1min。

（2）滴加等量的磷酸緩沖液，輕輕搖蕩玻片或用洗耳膠球在玻片上輕輕吹 氣，使兩液體混合均勻，持續(xù)10～15min。（4）流水洗去染液。

（5）涂片風(fēng)干后，二甲苯透明，中性樹膠封片。

3.染色結(jié)果：胞核呈紫紅色，胞漿呈紫藍(lán)色，粘液呈粉紅色或淡藍(lán)色。

（四）May-Grünwald-姬姆薩（Giemsa）染色

May-Grünwald-姬姆薩染色適用于造血系統(tǒng)的細(xì)胞涂片和鑒別惡型淋巴瘤的類型。May-Grünwald原液和姬姆薩原液配制繁瑣，可直接購買。1．試劑配制

（1）May-Grünwald工作液

May-Grünwald原液 1份

蒸餾水 6～10份

使用前配制。

（2）姬姆薩工作液

姬姆薩原液 1份 蒸餾水 6～10份

使用前配制。2．染色程序

（1）涂片自然干燥，蒸餾水洗1～2min。（2）May-Grünwald工作液染15～30min。

（3）自來水沖洗，洗去載玻片上的染液，蒸餾水稍洗。

（4）姬姆薩工作液染15～30min。

（5）自來水沖洗，洗去載玻片上的染液。

（6）涂片風(fēng)干后，二甲苯透明，中性樹膠封片。3．染色結(jié)果：胞核呈紫紅色，胞漿和核仁呈藍(lán)紫色。

（五）Rakoff染色

Rakoff染色用于陰道細(xì)胞學(xué)涂片快速測定雌激素水平。1． 試劑配制

（1）5%淡綠水溶液 83ml（2）1%伊紅水溶液 17ml 將兩液混合后使用。2．染色程序

（1）用細(xì)胞刷沿陰道側(cè)壁刷取黏膜鱗狀上皮細(xì)胞，放入裝有1~2ml生理鹽水的試管內(nèi)。（2）在試管內(nèi)滴入3滴Rakoff染液，用細(xì)胞刷在染液中輕搖混合。

（3）將1~2滴混合液滴于載玻片上，制成涂片。（4）待涂片干燥后，用中性樹膠封片。

染色結(jié)果：鱗狀上皮細(xì)胞的嗜酸性和嗜堿性胞漿區(qū)分明顯。角化前細(xì)胞的核呈網(wǎng)狀，角化細(xì)胞的固縮核呈基本不著色的空泡狀。

（六）猩紅－固綠染色

猩紅－固綠染色用于顯示性染色體。1．試劑配制（1）猩紅染液

水溶性比布里西猩紅 1.0g 磷鎢酸 0.3g 冰醋酸 5.0ml 50%酒精 100ml（2）固綠染液: 固綠 0.5g 磷鉬酸 0.3g 磷鎢酸 0.3g 冰醋酸 5.0ml 50%乙醇 100ml 2． 染色步驟

（1）涂片經(jīng)95%乙醇固定后，置于70%乙醇中2min。

（2）猩紅染液中5min。（3）50%乙醇中漂清多余染液。

（4）固綠染液中分化2~5h。每小時在顯微鏡下觀察胞漿和網(wǎng)狀核膜是否呈現(xiàn)綠色；如果綠色滿意，立即取出涂片（一般約需4h）。固縮核呈鮮紅色。

（5）50%乙醇中5min。

（6）依次置于70%、95%和無水乙醇中各2min。

（7）置于二甲苯溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中透明，各2min。

（8）中性樹膠封片。

染色結(jié)果：胞核呈淡綠色；性染色質(zhì)呈粉紅色、V字形或貼著于細(xì)胞膜呈三角形。在性染色質(zhì)周圍可見空泡。

（七）Fouchet染色

Fouchet染色用于顯示膽色素。1．染液配制 Fouchet染液

A液：25%三氯醋酸水溶液 B液：10%三氯化鐵水溶液

A、B液皆小量新鮮配制為宜。使用時，取A、B液各30ml混勻（當(dāng)天使用）。

2．染色步驟

（1）涂片經(jīng)95%酒精固定后，置于蒸鎦水中漂洗。

（2）Fouchet液中染5min。

（3）蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ中各1min。

（4）苦味品紅溶液中染5min。（5）95%乙醇Ⅰ、Ⅱ中漂洗。

（6）無水乙醇Ⅰ、Ⅱ中脫水。

（7）二甲苯Ⅰ、Ⅱ中透明，中性樹膠封片。

3．染色結(jié)果：膽色素呈橄欖綠色，膠原纖維呈紅色，涂片背景呈黃色。

（八）硫酸亞鐵染色

硫酸亞鐵染色用于顯示黑色素。1．試劑配制

（1）2.5%硫酸亞鐵水溶液（2）鐵氰化鉀醋酸液 鐵氰化鉀 1g 蒸餾水 99ml 冰醋酸 1ml（3）1%冰醋酸水溶液

（4）核固紅液[參見第4章第一節(jié)的八

（三）項(xiàng)（愛先藍(lán)法）] 2．染色程序

（1）涂片經(jīng)95%酒精固定后，置于蒸鎦水中漂洗1~2min。（2）2.5%硫酸亞鐵溶液中1h。

（3）蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中漂洗，各1min。（4）鐵氰化鉀醋酸液中30min。（5）1%冰醋酸液中1min。（6）蒸鎦水漂洗。

（7）核固紅液中染1~2min。（8）蒸鎦水漂洗。

（9）依次95%乙醇、無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。3．染色結(jié)果：黑色素呈深綠或深藍(lán)色，涂片背景呈紅色或粉紅色。

（九）快速硝酸銀染色

快速硝酸銀染色用于顯示卡氏肺囊蟲和真菌。1．試劑配制

（1）硝酸銀烏洛托品

常備液：3%烏洛托品溶液100ml與5%的硝酸銀溶液5ml充分混合。

工作液：常備液25ml、蒸鎦水25ml與5%硼酸鈉2ml充分混合。（2）固綠

常備液：固綠0.2g充分溶解于0.2%冰醋酸液100ml中。

工作液：常備液10ml與蒸鎦水40ml混合（3）5%鉻酸溶液

1%亞硫酸氫鈉溶液 0.2%氯化金溶液 2%硫代硫酸鈉溶液 2．染色步驟

（1）涂片經(jīng)95%乙醇固定后，置于蒸鎦水中漂洗1min。（2）5%鉻酸溶液（43℃水?。┲?min。（3）5%鉻酸溶液（58℃水?。┲?5min。（4）自來水漂洗。

（5）1%亞硫酸氫鈉溶液中30s。（6）自來水沖洗15s。

（7）蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ漂洗各1min。（8）硝酸銀工作液（43℃水浴）中2min。（9）硝酸銀工作液（58℃水浴）中23min。（10）蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ漂洗。（11）0.2%氯化金溶液中30s。（12）蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ漂洗。

（13）2%硫代硫酸鈉溶液中1min。（14）自來水沖洗15s。（15）固綠工作液中染30s。（16）自來水沖洗15s。（17）蒸鎦水Ⅰ、Ⅱ漂洗。

（18）95%酒精、無水酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。

3．染色結(jié)果：卡氏肺囊蟲和真菌皆呈黑色，形狀清晰；糖原和黏蛋白呈玫瑰色或灰色；涂片背景呈淡綠色。

（十）高碘酸-無色品紅（PAS）染色

PAS染色用于顯示多糖（糖原及黏蛋白等）。［參見第4章第一節(jié)的八

（一）項(xiàng)（高碘酸－無色品紅法）］

［《臨床技術(shù)操作規(guī)范?病理學(xué)分冊》／第四章 病理學(xué)相關(guān)技術(shù)規(guī)范］ 第九節(jié) 病理學(xué)攝影技術(shù)

一、概 述

（一）病理醫(yī)師根據(jù)病理學(xué)診斷、教學(xué)和研究的需要確定病理學(xué)攝影的內(nèi)容，進(jìn)行客觀、準(zhǔn)確的圖像記錄。

（二）病理學(xué)攝影的客體包括：①患者體表病征，②大體標(biāo)本（手術(shù)切除和尸檢標(biāo)本的肉眼病變），③組織學(xué)切片（光學(xué)顯微鏡下病變），④超薄切片（透射電子顯微鏡下超微病變），⑤冷凍蝕刻標(biāo)本（掃描電子顯微鏡下超微病變），⑥細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)本，⑦細(xì)胞和分子細(xì)胞遺傳學(xué)檢測結(jié)果，⑧尸檢過程，⑨動物實(shí)驗(yàn)標(biāo)本和⑩文字、圖像資料翻拍等。

二、普通攝影

（一）普通攝影是應(yīng)用普通照相機(jī)拍攝客體的圖像，包括患者體表病征，大體標(biāo)本的肉眼病變，尸檢過程，動物實(shí)驗(yàn)標(biāo)本和文字、圖像資料等。攝影時應(yīng)注意病征或病變顯示、光照、角度等，適度調(diào)節(jié)距離、光圈、速度。

（二）患者體表病征攝影

1．需征得患者或患方有關(guān)人員同意。2．應(yīng)遮蓋患者的面容和隱私部位。

（三）大體標(biāo)本攝影

1．于標(biāo)本下面鋪墊色澤反差鮮明、協(xié)調(diào)的平整背景（紙或布），并需置放標(biāo)尺和相關(guān)標(biāo)本的病理號，必要時添加箭頭等符號標(biāo)志指示重點(diǎn)部位。2．因照相機(jī)固定于翻拍機(jī)上，宜選用較慢的快門速度，以增加景深。

（四）尸檢過程攝影

1．宜用28～135mm變焦鏡頭的135相機(jī)進(jìn)行攝影。

2．重要病變的原位攝影：應(yīng)包括局部肉眼病變特征（“近拍”）及其與毗鄰結(jié)構(gòu)的解剖關(guān)系（“全景”），突出重要病變，兼顧顯示全貌。3．離體標(biāo)本攝影［參見上文：“

（二）大體標(biāo)本攝影”］

（五）文字、圖像資料翻拍 1．應(yīng)用翻拍機(jī)進(jìn)行攝影。

2．在翻拍相機(jī)的兩側(cè)一般至少安裝2～4盞100W燈光，與照明直線呈45o角，以使光線均勻。攝影條件可用測光表確定。

（六）底片的選擇

1．黑白攝影：擴(kuò)印照片者，可用ASA100速度底片；制作幻燈片者可用ASA25～50速度底片。2．彩色攝影：

（1）用日光型彩色底片攝影時，需用雷登80系列平衡濾色片把色溫調(diào)到5600oK狀態(tài)；用燈光照射者，無需平衡濾色片。

（2）用燈光型彩色底片在日光下攝影時，需用平衡濾色片把色溫調(diào)到3200oK狀態(tài)。

三、光學(xué)顯微鏡（光鏡）攝影

（一）光鏡顯微攝影是應(yīng)用顯微照相機(jī)拍攝通過光學(xué)顯微鏡放大40～1000倍的客體圖像。

（二）攝影用顯微鏡性能要求 1．具有攝影目鏡筒。

2．能通過目鏡筒對圖像進(jìn)行對焦。3．具有光鏡選擇移動桿。

4．物鏡具有分辨率良好平視場象。

5．聚光鏡具有孔徑光闌和調(diào)節(jié)光軸中心的機(jī)構(gòu)。6．具有視場光闌。

7．光源亮度足夠，電壓可以調(diào)節(jié)。8．具有插入濾色鏡的槽口。

（三）顯微攝影的基本裝置

1．具有自動輸片機(jī)構(gòu)的35mm照相機(jī)背。

2．具有對不同光照條件進(jìn)行光路調(diào)節(jié)的調(diào)節(jié)桿。3．具有能對不同標(biāo)本面積進(jìn)行自動測光的裝置。

4．具有與顯微鏡相連接的接圈、平場消色差物鏡(Splan，Dplan)和聚光鏡。5．具有顯微攝影控制臺。目前較常用的有日產(chǎn)Olympus PM-10及PM-20等顯微攝影裝置。常用參數(shù)項(xiàng)目包括：①快門按鈕(EXPOSE)，②底片類型選擇鍵(FORMAT)，③感光度旋鈕(ASA/ISO)，④倒易律失效的補(bǔ)償旋鈕(RECIPROCITY)，⑤曝光增減旋鈕(EXPOSURE ADJ)，⑥快門速度調(diào)節(jié)旋鈕(MODE/EXPOSURE TIME)，⑦卷片按鈕(OFF/MINDING)，⑧停片進(jìn)片按鈕(NO WINDING)，⑨自動曝光鎖按鈕(AEOCK)，⑩時間回憶按鈕(TIME RECALL)。

（四）顯微攝影要點(diǎn)

1．顯微照相機(jī)必須安放穩(wěn)定，具有一定防震性，室內(nèi)光線應(yīng)暗些以避免散射光進(jìn)入目鏡。

2．選擇適當(dāng)?shù)牟噬蚝诎椎灼b入照相機(jī)身（暗盒）。拍攝常規(guī)HE染色、特殊染色、免疫組化染色切片的病變，宜用感光度ASA為100的彩色或黑白底片；拍攝培養(yǎng)細(xì)胞和免疫熒光染色標(biāo)本，宜用感光度ASA為400的彩色或黑白底片。

3．調(diào)節(jié)照明和光照

（1）打開電源，調(diào)節(jié)電壓（約在9伏）。（2）視場光闌收縮到取景框邊緣外。

（3）孔徑光闌調(diào)到物鏡孔徑數(shù)值的60％～80％，例如孔徑為0.25的10×物鏡，聚光鏡上光闌應(yīng)調(diào)到：0.25×60％～80％＝0.15～0.2。（4）光通路調(diào)節(jié)

①常規(guī)攝影：先將視野與照明合軸、再將聚光鏡調(diào)中，使光線同時調(diào)到①觀察目鏡和②取景目鏡的視野之中，以便于邊觀察邊曝光攝影。如圖像分布均勻，將曝光增減旋鈕（EXPOSURE ADJ）調(diào)至“1”處。

②暗視野、熒光和偏振光攝影：將光線100％調(diào)到取景目鏡的視野之中，用調(diào)焦鏡觀察視野中的標(biāo)本圖像，進(jìn)行攝影。如圖像分布不均勻，應(yīng)將曝光增減旋鈕調(diào)于0.25～4之間。

4．調(diào)節(jié)和校準(zhǔn)取景目鏡于標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)：旋轉(zhuǎn)調(diào)焦鏡鏡筒上的圓環(huán)，使取景框中央的雙十字線達(dá)到最清晰。

5．將切片等標(biāo)本放置在載物臺上，先用觀察目鏡選定攝影圖像，再用取景目鏡調(diào)整攝影圖像，并轉(zhuǎn)動微調(diào)旋鈕，同時使圖像與取景框中的雙十字線像達(dá)到最清晰。

6．用彩色底片攝影時，必須用色溫計(jì)調(diào)節(jié)色溫：①將光通路100％到達(dá)色溫計(jì)上（由調(diào)焦鏡中看不到光線）；②觀察色溫指示表，用平衡濾色鏡（使用日光型底片時用雷登80系列）和燈光亮度將色溫調(diào)至最佳色溫點(diǎn)（日光型底片的色溫點(diǎn)為5600K左右，燈光型底片的色溫點(diǎn)定為3200K左右）

7．用黑白底片攝影時，必須按下列對應(yīng)關(guān)系選擇濾色片以提高圖像反差和清晰度：

標(biāo)本顏色 紅 橙 黃 綠 深藍(lán) 濾 色 鏡 藍(lán)、綠 藍(lán)、綠 藍(lán) 紅、藍(lán) 深綠、橙

8．檢查光線可達(dá)到底片的位置，確定正確的曝光時間和進(jìn)行曝光；或用自動攝影控制臺上的按鍵曝光。

9．記錄圖像的攝影日期、攝影編號、樣品編號、放大倍數(shù)、內(nèi)容、攝影條件和備注等。

10．將已全部攝影過的底片退回底片暗盒內(nèi)，取出底片并進(jìn)行暗室沖洗等后期處理。

四、電子顯微鏡(電鏡)攝影

（一）透射電鏡攝影

1．檢查電鏡工作狀態(tài)，確認(rèn)樣本無漂移現(xiàn)象，選擇好曝光條件。2．調(diào)節(jié)好燈絲像，消正像散。3．選擇視野，確定放大倍數(shù)。

4．調(diào)整物鏡光闌：樣品反差較強(qiáng)時，使用較大的物鏡光闌孔，直至反差適中為止；反差小時，宜用較小的光闌孔。

5．樣本聚焦在低倍電鏡（＜1500倍）圖像時，可采用搖擺聚焦法用肉眼定位；樣品聚焦在高倍電鏡（＞1500倍）圖像時，除用肉眼觀察定位外，還需采用系列拍照法：于確定焦點(diǎn)后，用細(xì)調(diào)鈕聚焦，增加物鏡電流，每調(diào)動一級最小鈕拍攝一張底片，總計(jì)拍攝4～5張，從中選擇最佳底片。6．放平熒光屏，傳送底片使之進(jìn)入攝影位置。

7．調(diào)定曝光亮度和速度，然后啟動快門進(jìn)行曝光；曝光結(jié)束后，將底片送入儲存盒內(nèi)。將底片全部攝影的儲存盒取出，進(jìn)行暗室沖洗等后期處理。

8．用于透射電鏡攝影的底片一般為色盲片（對紅光不感光），曝光時間為2～4s，ASA［中文？］為8～25s。

（二）掃描電鏡攝影 1．檢查電鏡工作狀態(tài)

（1）加速電壓強(qiáng)度的選擇：取決于樣品的性質(zhì)、圖像反差和放大倍率。高倍觀察時一般需要較高的加速電壓，低倍觀察時需要較低的加速電壓。

（2）聚光鏡電流的選擇：在保證圖像亮度和反差要求前提下，盡可能加大聚光鏡電流，以提高照片分辨力，加大景深。

（3）物鏡光闌孔的選擇：對于表面結(jié)構(gòu)高低差異大的樣本可用較小的光闌孔，以獲較大景深；低倍鏡下觀察時，可選用較大光闌孔，以增加視野內(nèi)的信號強(qiáng)度。

（4）選擇攝影掃描速度。

（5）視野選擇：與透射電鏡相同。

2．確定曝光時間。在掃描電鏡照相機(jī)處于光關(guān)？F8或F11情況下，照片的曝光時間在50～100s之間。

3．樣品的聚焦程度主要依靠操作人員的肉眼觀察。拍攝較低放大倍數(shù)（＜1000倍）的圖像，以調(diào)節(jié)粗聚焦鈕為主；拍攝較高放大倍數(shù)（＞1000倍）圖像，應(yīng)先調(diào)節(jié)粗聚焦鈕，再調(diào)節(jié)細(xì)聚焦鈕。

4．圖像消像散：①先調(diào)節(jié)X方向旋鈕，消除X方向的像散；②再調(diào)節(jié)Y方向旋鈕，消除Y方向的像散；③最后再調(diào)節(jié)細(xì)聚焦鈕，直到圖像最清晰為止。

5．調(diào)節(jié)高度和反差：掃描電鏡一般裝有亮度和反差自動調(diào)節(jié)按鈕，按動該鈕即可得到反差適當(dāng)?shù)膱D像。

6．拍攝：將照相機(jī)中的底片調(diào)至攝影位置，按動面板上的攝影快門鈕，熒光屏上便由上而下自動掃描圖像；掃描結(jié)束后，即完成一幅照片拍攝。

7．底片選擇：掃描電鏡裝有120或135照相機(jī)，故一般選擇感光速度為ASA100的120或135膠卷，；裝有Polaroid后背相機(jī)的掃描電鏡，可進(jìn)行一次成像。

8．記錄圖像的攝影日期、攝影編號、樣本編號、放大倍數(shù)、內(nèi)容、攝影條件和備注等。

五、暗室技術(shù)

（一）暗室技術(shù)用于：①普通攝影、顯微鏡攝影和電鏡攝影底片的沖洗，及其照片的洗印和放大；②幻燈片的制作等。

（二）攝影底片的沖洗操作程序

①于完全黑暗中取出全色底片（色盲片或電鏡底片可在紅燈下取出）→ ②將底片卷入螺旋形的槽內(nèi)或顯影架上 → ③清水濕潤2min → ④顯影3～12min（20℃）→ ⑤定影10～20min（20℃）→ ⑥水洗30min → ⑦涼干底片 → ⑧分類裝入底片袋內(nèi)，并做好記錄。

（三）試劑配制

1.顯影液：有多種配方，組成成分大同小異。下列的D‐11配方兼用于沖洗底片和照片的洗印和放大顯影： 水（50℃）500ml 米吐爾 1.0g 無水亞硫酸鈉 75 g 對苯二酚 9.0g 無水碳酸鈉 25 g 溴化鉀 5 g 加水至1 000ml 沖洗電鏡底片、色盲片和制做幻燈片、顯影照片等，需要極強(qiáng)反差，可用以上配方的原液顯影。普通攝影用的全色底片對反差要求不很高，可將原液用清水稀釋成1:2～1:4的工作液。2．停影液

水 750ml 28％醋酸 48ml 加水至1000ml 3.定影液：較常用下列的F‐5酸性堅(jiān)膜定影液 水（50℃）600ml 硫代硫酸鈉 240g 無水亞硫酸鈉 15g 28％醋酸 48ml 硼砂（結(jié)晶）7.5g 硫酸鋁鉀 15 g 加水至1000ml

（四）照片的洗印和放大

洗印和放大照片一般使用黑白放大相紙。這類相紙根據(jù)反差分為特軟性、軟性、中性、硬性和特硬性等5種，即0、1、2、3、4號相紙。較常用者為3號相紙。

1.洗?。涸谟∠嘞渲胁僮鳎ㄒ话阊b有自動定時曝光控制器），主要用于制做透射電鏡攝影的照片。已經(jīng)曝光的像紙進(jìn)入沖洗操作程序（同底片的沖洗程序）。

2.放大：在放大機(jī)上操作，主要用于制做顯微鏡攝影的照片。（1）操作程序

①放大鏡頭焦距的選擇參見下表：

底片規(guī)格 135 120 120 120 120（16張）（12張）（10張）（8張）負(fù) 片 負(fù) 片 負(fù) 片 底片尺寸

(mm×mm)24×36 45×60 60×50 60×70 60×90 80×105 90×120 108×125 鏡頭焦距

(mm)50 75 75～80 80～90 90～105 135 150 175

②裝入底片：將底片的乳劑面向下，目測聚焦，使放大的圖像結(jié)構(gòu)清晰。③選擇相紙：常用3號放大紙。

④確定鏡頭光圈和曝光時間：對于正常反差的底片，將鏡頭光圈縮小到f/5.6至f/8之間，曝光時間控制在8～20s為宜。⑤將曝光后放大紙進(jìn)入顯影、定影程序中。

六、數(shù)碼攝影技術(shù)

數(shù)碼攝影通常包括：①拍攝、②下載（將所拍攝的照片由數(shù)碼相機(jī)下載到電腦中）、③修飾（加工處理等后期制作）和④分享（將經(jīng)過修飾的照片輸出，例如打印等）4個步驟。

（一）選擇適當(dāng)?shù)恼掌|(zhì)量要求

數(shù)碼相機(jī)的照片質(zhì)量（解像度）分為①精細(xì)、②正常、③經(jīng)濟(jì)等檔次。圖像質(zhì)量越好，每張照片占用的存儲空間越大，在相同內(nèi)存的情況下，解存儲的照片數(shù)量越小。因此，在拍攝之前，應(yīng)先根據(jù)需要，設(shè)定對于照片的質(zhì)量要求，即設(shè)定壓縮比。

設(shè)定壓縮比的原則是：①對照片質(zhì)量要求越低，壓縮比可越高；②只在監(jiān)視器或電視機(jī)上觀察圖像而不打印時，壓縮比可高些，可選擇“正?！鄙踔痢敖?jīng)濟(jì)”檔拍攝儲存量小的圖像。③需要打印照片（尤其欲獲大幅彩色照片）時，壓縮比越低越好，應(yīng)選擇“精細(xì)”檔，最好選擇不壓縮的拍攝存儲方式。

（二）力求曝光準(zhǔn)確

1．?dāng)?shù)碼相機(jī)的感光度最低為ISO60，最高為ISO6400，多在ISO100左右。ISO額定值較低時，解像度高、色調(diào)范圍寬和反差低；ISO額定值較高時，解像度低、色調(diào)范圍寬和反差高。2．選擇感光度的原則：（1）檢查光線是否足夠。

（2）盡量用較低的感光度拍攝。

（3）曝光時間不要過長。照度低時，應(yīng)盡量利用閃光拍攝。避免進(jìn)行高感光度的長時間曝光。

（4）曝光準(zhǔn)確與否決定于對照片質(zhì)量的要求。

（三）注意對焦條件。

（四）注意用光。

（五）準(zhǔn)確使用快門和光圈：宜用自動模式（Auto）拍攝。使用手動相機(jī)或?qū)⒆詣酉鄼C(jī)設(shè)置于手動模式時，需要隨時進(jìn)行調(diào)整。

（六）正確設(shè)定白平衡：拍攝前設(shè)定自動白平衡，或是將白平衡調(diào)整設(shè)定在與拍攝光照條件一致的檔上。

（七）正確使用存儲媒介：向數(shù)碼相機(jī)內(nèi)插入移動式存儲卡時，一定要到位；從相機(jī)中取出存儲卡時，要防止滑落到堅(jiān)硬的物面上，以免不能讀取照片的某些數(shù)據(jù)，甚至損壞存儲卡。

（八）勿距攝影客體過遠(yuǎn)：適當(dāng)拍攝距離為5～15尺。拍攝小物體、文件等時，應(yīng)啟動數(shù)碼相機(jī)的近攝功能。

第三篇：消化內(nèi)鏡的規(guī)范化操作

消化內(nèi)鏡的規(guī)范化操作

1、學(xué)習(xí)內(nèi)鏡操作的人員條件

內(nèi)鏡技術(shù)與操作是--I"1專業(yè)性很強(qiáng)、要求很高的在人體腔內(nèi)進(jìn)行診療工作的學(xué)科。學(xué)習(xí)內(nèi)鏡技術(shù)或操作的人員需有相應(yīng)的專業(yè)知識及基本技能，不是僅有一定醫(yī)學(xué)背景知識的人都可以進(jìn)行內(nèi)鏡技術(shù)的學(xué)習(xí)、開展內(nèi)鏡操作的。將內(nèi)鏡操作認(rèn)為簡單、好學(xué)，會插鏡看看，隨意安排人員學(xué)習(xí)內(nèi)鏡操作的思想或認(rèn)識是片面的和不規(guī)范的，也不可能培養(yǎng)出理想合格的內(nèi)鏡醫(yī)師或消化專科醫(yī)師。學(xué)習(xí)內(nèi)鏡操作的人員需具備以下條件：①具備普通內(nèi)科學(xué)或普通外科學(xué)的臨床知識和基本技能，掌握心肺復(fù)蘇搶救等。②能夠把內(nèi)鏡和病人的整體病情進(jìn)行統(tǒng)一評估和解釋。③能夠獨(dú)立判斷具體病人的適應(yīng)癥、禁忌癥、內(nèi)鏡操作的輕重緩急、風(fēng)險及操作利害關(guān)系。④熟知元痛內(nèi)鏡使用的鎮(zhèn)靜劑、麻醉藥品的藥理，副作用及搶救方法。⑤掌握內(nèi)鏡設(shè)備的技術(shù)特點(diǎn)，清洗消毒要求，附件、活檢或細(xì)胞學(xué)用途，計(jì)算機(jī)圖文使用。⑥能夠和病人滿意交流，取得知情同意、向病人解釋病情、指導(dǎo)進(jìn)一步的診療。⑦能夠清楚描述內(nèi)鏡操作過程，準(zhǔn)確識別和解釋病變。⑧能夠與內(nèi)鏡中心麻醉師、護(hù)士、技師等協(xié)調(diào)工作，完成多人配合的內(nèi)鏡操作。盡管不是每個內(nèi)鏡中心都有條件開展所有的內(nèi)鏡操作，但在學(xué)習(xí)或培訓(xùn)內(nèi)鏡操作時，學(xué)習(xí)人員應(yīng)有基本的條件和要進(jìn)行規(guī)范化的學(xué)習(xí)與培訓(xùn)。因此，學(xué)習(xí)內(nèi)鏡操作的人應(yīng)具備以上的基本知識和能力。這可視為內(nèi)鏡規(guī)范化操作與學(xué)習(xí)的第一步。

2、系統(tǒng)的理論培訓(xùn)

內(nèi)鏡操作不僅僅是動手和一種技能，因?yàn)榘ㄕ_的診斷、治療以及操作的安全性。要進(jìn)行規(guī)范化的操作，首先需進(jìn)行一定的理論學(xué)習(xí)，然后通過規(guī)范的技能培i：EIA‘能成為一個“科班”的內(nèi)鏡操作醫(yī)師。理論培訓(xùn)是系統(tǒng)培訓(xùn)的第一步。包括消化道的解剖、生理、常見疾病的大體病理，這是進(jìn)行內(nèi)鏡操作和疾病識別的前提。同時需要學(xué)習(xí)不同疾病的好發(fā)部位、年齡、季節(jié)、地區(qū)、誘因等。消化疾病的分類，尤其內(nèi)鏡下分類是需要首先學(xué)習(xí)和掌握的。閱讀內(nèi)鏡設(shè)備說明，掌握內(nèi)鏡檢查或治療設(shè)備的性能和特點(diǎn)，正確和充分的發(fā)揮設(shè)備的功效及設(shè)備的正確維護(hù)，才能達(dá)到良好的人機(jī)結(jié)合?，F(xiàn)代內(nèi)鏡的特點(diǎn)不僅是診斷，治療技術(shù)越來越多，其中附件的作用日益增大。了解不同附件的特點(diǎn)、正確使用的方法，往往成為能否成功進(jìn)行內(nèi)鏡操作或減少并發(fā)癥的關(guān)鍵，一些規(guī)范化的內(nèi)鏡操作程序是基于附件的設(shè)計(jì)和特點(diǎn)，所以對附件的學(xué)習(xí)和掌握必不可少。內(nèi)鏡是介人人體腔內(nèi)進(jìn)行操作的器械，消毒和防止交叉感染等是進(jìn)行內(nèi)鏡安全操作的重要環(huán)節(jié)。不同的國家或機(jī)構(gòu)目前都制定了相應(yīng)的內(nèi)鏡清洗消毒指南、規(guī)定甚至是法規(guī)，從事內(nèi)鏡操作的人員需學(xué)習(xí)和掌握這些法規(guī)或指南，從而保證內(nèi)鏡操作的安全性。安全性不僅指內(nèi)鏡操作的安全性，還包括對病人和醫(yī)師的環(huán)境安全性，例如從事ERCP或支架植入等操作，需在x線下進(jìn)行，從事內(nèi)鏡操作的人員必須學(xué)習(xí)x線的正確使用、防護(hù)及監(jiān)測等，才能規(guī)范化防護(hù)醫(yī)患雙方。另外，為提高內(nèi)鏡操作的規(guī)范化，世界上一些學(xué)會組織制定了許多具體疾病或操作的指南，主要是美國消化內(nèi)鏡學(xué)會、世界消化內(nèi)鏡學(xué)會、歐洲消化內(nèi)鏡學(xué)會的指南，如：ERCP操作指南、胰腺假性囊腫處理指南、膠囊內(nèi)鏡使用指南、小腸鏡操作指南、曲張靜脈出血治療指南等。學(xué)習(xí)和更新這些指南對進(jìn)行規(guī)范化操作具有重要的指導(dǎo)意義，是系統(tǒng)的理論學(xué)習(xí)的重要組成部分，從事內(nèi)鏡操作的人員都應(yīng)學(xué)習(xí)或了解這些指南。

3、系統(tǒng)的技能培訓(xùn)

規(guī)范化的內(nèi)鏡操作需通過系統(tǒng)的技能培訓(xùn)。以前技能培訓(xùn)都是直接在人體上實(shí)踐或“練”出來的。近年來，計(jì)算機(jī)模擬使內(nèi)鏡初始培訓(xùn)可以在模擬機(jī)上進(jìn)行，避免并發(fā)癥和減少病人的痛苦，同時迅速提高醫(yī)師的操作技能。模擬機(jī)上訓(xùn)練內(nèi)鏡操作，目前還不普及，但代表著一個重要的進(jìn)步和發(fā)展方向。目前美國已有數(shù)十家醫(yī)療中心開始此項(xiàng)培訓(xùn)，我國北京友誼醫(yī)院、解放軍總醫(yī)院已開展模擬機(jī)上消化內(nèi)鏡的標(biāo)準(zhǔn)化程序培訓(xùn)。人體上的規(guī)范內(nèi)鏡操作，需從內(nèi)鏡準(zhǔn)備、病人知情同意、病人術(shù)前準(zhǔn)備、正確的進(jìn)鏡等逐項(xiàng)開始，正確的操作需在高年資內(nèi)鏡醫(yī)師的指導(dǎo)或監(jiān)督下從事。培訓(xùn)大致可分成3個階段(不同地區(qū)不盡相同)。第一階段為診斷內(nèi)鏡培訓(xùn)階段，此階段一般在完成大內(nèi)科或大外科培訓(xùn)后，進(jìn)行?？婆R床培訓(xùn)1年左右進(jìn)行，或臨床工作4—5年時進(jìn)行。學(xué)習(xí)上、下消化道內(nèi)鏡的插入、觀察、病變描述、活檢等，一般需完成500例操作，基本可以獨(dú)立進(jìn)行內(nèi)鏡的診斷操作。第二階段內(nèi)鏡操作培訓(xùn)主要針對基本的內(nèi)鏡治療，一般在完成內(nèi)鏡診斷1 000例以上、從事臨床工作6—8年或?qū)？乒ぷ?年以上時進(jìn)行，在上級醫(yī)師的指導(dǎo)下主要學(xué)習(xí)和掌握消化道狹窄的內(nèi)鏡規(guī)范化處理、較大息肉的內(nèi)鏡下切除、非靜脈曲張出血的內(nèi)鏡治療、異物取出、胃造瘺等。第三階段的內(nèi)鏡培訓(xùn)，在上級醫(yī)師指導(dǎo)下主要學(xué)習(xí)掌握操作風(fēng)險大及向特長方向發(fā)展的項(xiàng)目，如靜脈曲張出血內(nèi)鏡治療、超聲內(nèi)鏡、治療ERCP、小腸鏡等。需要指出的是規(guī)范的技能培訓(xùn)或以上階段的學(xué)習(xí)和培訓(xùn)，都應(yīng)在有帶教能力的老師指導(dǎo)下和在有條件的內(nèi)鏡中心進(jìn)行，同時應(yīng)規(guī)范記錄受訓(xùn)人員不同階段的理論學(xué)習(xí)內(nèi)容、操作項(xiàng)目、例數(shù)、帶教老師等，最后給出培訓(xùn)結(jié)果和達(dá)到的操作水平，從而保證內(nèi)鏡機(jī) 能培訓(xùn)的規(guī)范化及其質(zhì)量。

4、內(nèi)鏡操作的一般程序

不同的國家、不同的醫(yī)療體制和不同的內(nèi)鏡中心，內(nèi)鏡操作程序存在差異或不盡相同，但一些問題是共同關(guān)心和不可缺少的，從而保證內(nèi)鏡操作的質(zhì)量和安全性，或保證操作的規(guī)范化。系統(tǒng)培訓(xùn)過的內(nèi)鏡操作醫(yī)師，進(jìn)行內(nèi)鏡操作時，一般需包括：病史術(shù)中親屬聯(lián)系方式、病人術(shù)前準(zhǔn)備、內(nèi)鏡的觀察與治療、圖像或錄像的采集、標(biāo)本的處理、內(nèi)鏡報告的書寫和發(fā)送、術(shù)后恢復(fù)與醫(yī)囑、病理結(jié)果、術(shù)后隨訪或術(shù)后聯(lián)系等，國內(nèi)還應(yīng)包括醫(yī)療費(fèi)用與操作的關(guān)系等。這些內(nèi)容構(gòu)成了內(nèi)鏡操作的基本過程，從而保證和完成一個完整的或規(guī)范的內(nèi)鏡操作。

第四篇：消化內(nèi)鏡診療技術(shù)臨床應(yīng)用可行性報告

我院消化內(nèi)鏡診療技術(shù)臨床應(yīng)用可行性報告

XXX院消化內(nèi)鏡科成立至今已有10余年，現(xiàn)有6名醫(yī)師，6名護(hù)士，其中科主任為主任醫(yī)師，xxx副主任醫(yī)師，xxx醫(yī)師。我科醫(yī)師先后在xxx醫(yī)院，xxx醫(yī)院進(jìn)修學(xué)習(xí)，且均具有3年以上消化內(nèi)鏡相關(guān)診療工作經(jīng)驗(yàn)。消化內(nèi)鏡科成立以來，已經(jīng)完成相關(guān)檢查及治療11200余例。近兩年，隨著無痛胃腸鏡及鏡下治療的廣泛開展，更是積累了豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)。

科室現(xiàn)擁有4臺消化內(nèi)鏡主機(jī)，8條電子纖維胃鏡，3條電子纖維腸鏡，配備有先進(jìn)的“電腦內(nèi)鏡圖像數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)”，各種規(guī)格活檢鉗、異物鉗、高頻電、氬氣刀等豐富的輔助設(shè)備，能熟練開展胃鏡、結(jié)腸鏡檢查及各種內(nèi)鏡下治療。我科所在醫(yī)院是xx市最大的三級甲等醫(yī)院，我們在安全開展普通胃腸鏡檢查的同時，率先在本地區(qū)開展無痛胃腸鏡檢查，極大減輕了病人的痛苦，提高了診斷準(zhǔn)確率。治療內(nèi)鏡是我科室的專業(yè)特色，近幾年來我科陸續(xù)開展了大量的內(nèi)鏡下治療項(xiàng)目，主要有消化道息肉內(nèi)鏡下切除術(shù)、消化道出血內(nèi)鏡下各種止血術(shù)（局部噴灑止血藥、電凝止血、金屬鈦夾止血等）等內(nèi)鏡治療、消化道異物取出術(shù)等。

我科醫(yī)護(hù)人員積極學(xué)習(xí)，開展新技術(shù)、新業(yè)務(wù)，打造品牌科室，全面提高診療水平，更好的服務(wù)于廣大的群眾。

第五篇：《臨床技術(shù)操作規(guī)范_病理學(xué)分冊》醫(yī)院用

《臨床技術(shù)操作規(guī)范?病理學(xué)分冊》

第1章 總 則

一、為提高病理學(xué)診斷質(zhì)量，促進(jìn)臨床工作，依據(jù)《中華人民共和國執(zhí)業(yè)醫(yī)師法》精神，結(jié)合醫(yī)院病理科工作的特點(diǎn)，制定本規(guī)范。

二、醫(yī)院病理科和承擔(dān)醫(yī)院病理科任務(wù)的醫(yī)學(xué)院校病理教研室的主要臨床任務(wù)是通過活體組織病理學(xué)檢查（簡稱活檢）、細(xì)胞病理學(xué)檢查（簡稱細(xì)胞學(xué)檢查）和尸體剖檢（簡稱尸檢）等作出疾病的病理學(xué)診斷（或稱病理診斷）。具有一定規(guī)模的病理科，應(yīng)積極開展教學(xué)、培訓(xùn)病理醫(yī)師和科學(xué)研究等項(xiàng)工作。

三、病理學(xué)診斷是病理醫(yī)師應(yīng)用病理學(xué)知識、有關(guān)技術(shù)和個人專業(yè)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，對送檢的患者標(biāo)本（或稱檢材，包括活體組織、細(xì)胞和尸體等）進(jìn)行病理學(xué)檢查，結(jié)合有關(guān)臨床資料，通過分析、綜合后，作出的關(guān)于該標(biāo)本病理變化性質(zhì)的判斷和具體疾病的診斷。病理學(xué)診斷為臨床醫(yī)師確定疾病診斷、制定治療方案、評估疾病預(yù)后和總結(jié)診治疾病經(jīng)驗(yàn)等提供重要的、有時是決定性的依據(jù)，并在疾病預(yù)防，特別是傳染病預(yù)防中發(fā)揮重要作用。

四、病理學(xué)診斷報告書（或稱病理診斷報告）是關(guān)于疾病診斷的重要醫(yī)學(xué)文書。當(dāng)涉及醫(yī)、患間醫(yī)療爭議時，相關(guān)的病理學(xué)診斷報告書具有法律意義。病理學(xué)診斷報告書應(yīng)由具有執(zhí)業(yè)資格的注冊主治醫(yī)師以上（含主治醫(yī)師）的病理醫(yī)師簽發(fā)。各醫(yī)院可酌情準(zhǔn)予條件適宜的高年資病理科住院醫(yī)師試行簽署病理學(xué)診斷報告書。低 年資病理科住院醫(yī)師、病理科進(jìn)修醫(yī)師和非病理學(xué)專業(yè)的醫(yī)師不得簽署病理學(xué)診斷報告書。

五、病理學(xué)檢查是臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師為確立疾病診斷而進(jìn)行的合作行為，是有關(guān)臨床科室與病理科之間特殊形式的會診。臨床醫(yī)師和病理醫(yī)師雙方皆應(yīng)認(rèn)真履行各自的義務(wù)和承擔(dān)相應(yīng)的責(zé)任。

六、病理學(xué)檢查申請單是臨床醫(yī)師向病理醫(yī)師發(fā)出的會診邀請單。病理學(xué)檢查申請單的作用是：臨床醫(yī)師向病理醫(yī)師傳遞關(guān)于患者的主要臨床信息（包括癥狀、體征、各種輔助檢查結(jié)果和手術(shù)所見等）、診斷意向和就具體病例對病理學(xué)檢查提出的某些特殊要求，為進(jìn)行病理學(xué)檢查和病理學(xué)診斷提供重要的參考資料或依據(jù)。病理學(xué)檢查申請單是疾病診治過程中的有效醫(yī)學(xué)文書，各項(xiàng)信息必須真實(shí)，應(yīng)由主管患者的臨床醫(yī)師親自（或指導(dǎo)有關(guān)醫(yī)師）逐項(xiàng)認(rèn)真填寫并簽名。

七、臨床醫(yī)師應(yīng)保證送檢標(biāo)本與相應(yīng)的病理學(xué)檢查申請單內(nèi)容的真實(shí)性和一致性，所送檢材應(yīng)具有病變代表性和可檢查性，并應(yīng)是標(biāo)本的全部。

八、患者或患者的授權(quán)人應(yīng)向醫(yī)師提供有關(guān)患者的真實(shí)信息（包括姓名、性別、年齡、病史和可能涉及診斷需要的隱私信息）。病理醫(yī)師應(yīng)尊重和保護(hù)患者的隱私。患者或患者的授權(quán)人應(yīng)保證其自送檢材的真實(shí)性、完整性和可檢查性。

九、病理科應(yīng)努力為臨床、為患者提供優(yōu)質(zhì)服務(wù)，遵照本規(guī)范的要求加強(qiáng)科室建設(shè)，制訂完善的科室管理制度，并實(shí)施有效的質(zhì) 量監(jiān)控。

十、病理科工作人員應(yīng)恪盡職守，做好本職工作。病理醫(yī)師應(yīng)及時對標(biāo)本進(jìn)行檢查和發(fā)出病理學(xué)診斷報告書，認(rèn)真對待臨床醫(yī)師就病理學(xué)診斷提出的咨詢，必要時應(yīng)復(fù)查有關(guān)的標(biāo)本和切片，并予以答復(fù)。病理科技術(shù)人員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行本規(guī)范的技術(shù)操作規(guī)程，提供合格的病理學(xué)常規(guī)染色片、特殊染色片和可靠的其他相關(guān)檢測結(jié)果，并確保經(jīng)過技術(shù)流程處理的檢材真實(shí)無誤。

第2章 病理學(xué)檢查常規(guī)

第一節(jié) 普通活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)

一、申請單和標(biāo)本的驗(yàn)收

(一)病理科應(yīng)有專人驗(yàn)收普通活體組織病理學(xué)檢查(常規(guī)活檢)申請單和送檢的標(biāo)本。

(二)病理科驗(yàn)收人員必須：

1、同時接受同一患者的申請單和標(biāo)本。

2、認(rèn)真核對每例申請單與送檢標(biāo)本及其標(biāo)志（聯(lián)號條或其他寫明患者姓名、送檢單位和送檢日期等的標(biāo)記）是否一致；對于送檢的微小標(biāo)本，必須認(rèn)真核對送檢容器內(nèi)或?yàn)V紙上是否確有組織及其數(shù)量。發(fā)現(xiàn)疑問時，應(yīng)立即向送檢方提出并在申請單上注明情況。

3、認(rèn)真檢查標(biāo)本的標(biāo)志是否牢附于放臵標(biāo)本的容器上。

4、認(rèn)真查閱申請單的各項(xiàng)目是否填寫清楚，包括：①患者基本情況［姓名、性別、年齡，送檢單位（醫(yī)院、科室）、床位、門 診號/住院號、送檢日期、取材部位、標(biāo)本數(shù)量等］，②患者臨床情況［病史（癥狀和體征）、化驗(yàn)/影象學(xué)檢查結(jié)果、手術(shù)（包括內(nèi)鏡檢查）所見、既往病理學(xué)檢查情況（包括原病理號和診斷）和臨床診斷等］。

5、在申請單上詳細(xì)記錄患者或患方有關(guān)人員的明確地址、郵編及電話號碼，以便必要時進(jìn)行聯(lián)絡(luò)，并有助于隨訪患者。(三)驗(yàn)收標(biāo)本人員不得對申請單中由臨床醫(yī)師填寫的各項(xiàng)內(nèi)容進(jìn)行改動。

(四)下列情況的申請單和標(biāo)本不予接收：

1、申請單與相關(guān)標(biāo)本未同時送達(dá)病理科；

2、申請單中填寫的內(nèi)容與送檢標(biāo)本不符合；

3、標(biāo)本上無有關(guān)患者姓名、科室等標(biāo)志；

4、申請單內(nèi)填寫的字跡潦草不清；

5、申請單中漏填重要項(xiàng)目；

6、標(biāo)本嚴(yán)重自溶、腐敗、干涸等；

7、標(biāo)本過小，不能或難以制做切片；

8、其他可能影響病理檢查可行性和診斷準(zhǔn)確性的情況。病理科不能接收的申請單和標(biāo)本一律當(dāng)即退回，不予存放。

(五)臨床醫(yī)師采取的標(biāo)本應(yīng)盡快臵放于盛有固定液（4%中性甲醛，即10%中性福爾馬林）的容器內(nèi)，固定液至少為標(biāo)本體積的5倍。對于需作特殊項(xiàng)目檢查（如微生物、電鏡、免疫組織化學(xué)、分子生物學(xué)等）的標(biāo)本，應(yīng)按相關(guān)的技術(shù)要求進(jìn)行固定或預(yù)處理。(六)病理醫(yī)師只對病理科實(shí)際驗(yàn)收標(biāo)本的病理診斷負(fù)責(zé)。(七)病理科應(yīng)建立與送檢方交接申請單和標(biāo)本的手續(xù)制度。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。

二、申請單和標(biāo)本的編號、登記

(一)病理科驗(yàn)收人員應(yīng)在已驗(yàn)收的申請單上注明驗(yàn)收日期并及時、準(zhǔn)確編號（病理號），并逐項(xiàng)錄入活檢標(biāo)本登記簿或計(jì)算機(jī)內(nèi)。嚴(yán)防病理號的錯編、錯登。

(二)標(biāo)本的病理號可按年編序，或連續(xù)性（不分）編序。(三)同一病例同一次的申請單、活檢標(biāo)本登記簿（包括計(jì)算機(jī)錄入）、放臵標(biāo)本的容器、組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）及其切片等的病理號必須完全一致。

(四)病理科應(yīng)建立驗(yàn)收人員與組織取材人員之間申請單和標(biāo)本的交接制度。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。

(五)在病理科內(nèi)移送標(biāo)本時，必須確保安全，嚴(yán)防放臵標(biāo)本的容器傾覆、破損和標(biāo)本的散亂、缺失等。

三、標(biāo)本的預(yù)處理

標(biāo)本驗(yàn)收人員對已驗(yàn)收的標(biāo)本酌情更換適宜的容器，補(bǔ)充足量的固定液；對于體積大的標(biāo)本，值班取材的病理醫(yī)師在不影響主要病灶定位的情況下，及時、規(guī)范地予以剖開，以便充分固定。

四、標(biāo)本的巨檢、組織學(xué)取材和記錄

對于核驗(yàn)無誤的標(biāo)本，應(yīng)按照下列程序進(jìn)行操作：①肉眼檢查標(biāo)本（巨檢）；②切取組織塊（簡稱取材）；③將巨檢和取材情況記錄 于活檢記錄單上（活檢記錄單印于活檢申請單的背面）。巨檢和取材的技術(shù)操作 參見第3章第四節(jié)。

巨檢和取材時的注意事項(xiàng)：

(一)巨檢和取材必須由病理醫(yī)師進(jìn)行，應(yīng)配備人員負(fù)責(zé)記錄。(二)巨檢和取材過程中，應(yīng)嚴(yán)防污染工作人員和周圍環(huán)境。(三)標(biāo)本一般應(yīng)經(jīng)適當(dāng)固定后再行取材。已知具有傳染性（例如結(jié)核病、病毒性肝炎等）的標(biāo)本，應(yīng)在不污染環(huán)境和／或不擴(kuò)散傳染的原則下，經(jīng)必要的初步巨檢或切開后，立即臵于盛有足量固定液的專用容器內(nèi)，充分固定后再行常規(guī)巨檢和取材。

(四)病理醫(yī)師在對每例標(biāo)本進(jìn)行巨檢和取材前，應(yīng)與記錄人員認(rèn)真核對該例標(biāo)本及其標(biāo)志與申請單的相關(guān)內(nèi)容是否一致。若對申請單填寫的內(nèi)容或／和標(biāo)本有疑問（例如患者姓名有誤，標(biāo)本內(nèi)容、數(shù)量、病變特征與申請單填寫的情況不符等），應(yīng)暫行擱臵，盡快與送檢方聯(lián)系，查明原因，確保無誤后，再行巨檢和取材。必要時，可邀請有關(guān)臨床醫(yī)師共同檢查標(biāo)本和取材。對于有疑問的標(biāo)本，在消除疑問前不得進(jìn)行巨檢和取材，應(yīng)將有關(guān)標(biāo)本連同其申請單一并暫時妥存。

(五)病理醫(yī)師進(jìn)行巨檢和取材時，記錄人員應(yīng)根據(jù)病理申請單內(nèi)容，向巨檢醫(yī)師報告患者的基本臨床情況、手術(shù)所見、標(biāo)本情況（采取部位、數(shù)量等）和送檢醫(yī)師的特殊要求等，并如實(shí)、清楚地將病理醫(yī)師的口頭描述記錄于活檢記錄單上。必要時，應(yīng)在活檢記 錄單上（或另附紙）繪簡圖顯示巨檢所見和標(biāo)示取材部位。取材者應(yīng)核對記錄內(nèi)容。

(六)具有醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)價值的標(biāo)本可攝影存檔，并酌情妥為保存。(七)病理科宜積極推行巨檢和取材的錄音記錄。每次巨檢和取材結(jié)束后，應(yīng)由專人立即對錄音內(nèi)容進(jìn)行文字整理，記錄于活檢記錄單上（手錄或用計(jì)算機(jī)錄入、打?。?。有關(guān)的錄音資料應(yīng)保存至病理診斷報告書發(fā)出后兩周。

(八)細(xì)小標(biāo)本取材時，可用伊紅點(diǎn)染并用軟薄紙妥善包裹。(九)每例標(biāo)本取材前、后，應(yīng)用流水徹底清洗取材臺面和所有相關(guān)器物，嚴(yán)防檢材被無關(guān)組織或其他異物污染，嚴(yán)防細(xì)小檢材被流水沖失。

(十)巨檢和取材必須按照本規(guī)范的要求進(jìn)行操作（參見第3章第四節(jié)）。對于由不同部位或不同病變區(qū)域切取的組織塊，應(yīng)在其病理號之后再加編次級號（例如：－1，－2，－3，……；A,，B，C，……等）。

(十一)巨檢／取材者和記錄人員應(yīng)相互配合、核查，確保所取組織塊及其編號標(biāo)簽準(zhǔn)確地臵于用于脫水的容器（脫水盒等）內(nèi)。(十二)標(biāo)本巨檢和取材后剩余的組織／器官應(yīng)臵入適當(dāng)容器內(nèi)，添加適量4%中性甲醛并附有相關(guān)病理號和患者姓名等標(biāo)志，然后按取材日期有序地妥為保存。取材剩余的標(biāo)本一般保存至病理診斷報告書發(fā)出后兩周。

(十三)病理醫(yī)師在每批標(biāo)本巨檢和取材后，應(yīng)與記錄人員共同 核對取材內(nèi)容，并在活檢記錄單／取材工作單上簽名和簽署日期。(十四)取材后剩余的病理標(biāo)本屬于污染源，應(yīng)遵照有關(guān)規(guī)定處理。

(十五)巨檢／取材醫(yī)師或記錄人員與制片的技術(shù)人員認(rèn)真辦理交接手續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。

五、組織切片制備的基本要求

(一)組織制片過程中，應(yīng)確保切片號與蠟塊號一致。

(二)制片工作一般應(yīng)在取材后2個工作日內(nèi)完成（不含需要脫鈣、脫脂等特殊處理的標(biāo)本）。

(三)制片完成后，技術(shù)人員應(yīng)檢查制片質(zhì)量，并加貼標(biāo)有本病理科病理號的標(biāo)簽。常規(guī)石蠟-HE染色片的優(yōu)良率應(yīng)≥95%，優(yōu)秀率不<35％。不合格切片應(yīng)立即重做。切片質(zhì)量的基本標(biāo)準(zhǔn)參見第3章第一節(jié)的附表。

(四)制片過程發(fā)生意外情況時，有關(guān)技術(shù)人員和技術(shù)室負(fù)責(zé)人應(yīng)及時向科主任報告，并積極設(shè)法予以補(bǔ)救。

(五)制片完成后，技術(shù)人員應(yīng)將所制切片與其相應(yīng)的活檢記錄單／取材工作單等進(jìn)行認(rèn)真核對，確認(rèn)無誤后，將切片連同相關(guān)的活檢申請單／活檢記錄單／取材工作單等一并移交給病理醫(yī)師。雙方經(jīng)核對無誤后，辦理移交簽字手續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。

(六)常規(guī)活檢組織切片制備技術(shù)的基本要求參見第3章第一節(jié)。

六、組織切片的光學(xué)顯微鏡檢查和病理診斷(一)病理醫(yī)師進(jìn)行病理診斷時：

1、應(yīng)認(rèn)真閱讀申請單提供的各項(xiàng)資料，必要時（尤其是疑難病例），應(yīng)向有關(guān)臨床醫(yī)師了解更多的臨床信息。

2、應(yīng)認(rèn)真閱讀活檢記錄單中關(guān)于標(biāo)本巨檢的描述；負(fù)責(zé)復(fù)檢的病理醫(yī)師必要時親自觀察標(biāo)本，補(bǔ)充或訂正病變描述，指導(dǎo)或親自補(bǔ)取組織塊。

3、應(yīng)了解患者既往病理學(xué)檢查情況（包括切片的病理診斷和有關(guān)文字記錄）：①由本病理科既往受理者，必須及時調(diào)閱相關(guān)切片等病理學(xué)檢查資料；②非本病理科既往受理者，應(yīng)積極協(xié)助患者從有關(guān)病理科商借相關(guān)切片等病理學(xué)檢查資料參閱。

4、應(yīng)在活檢記錄單上簽署“醫(yī)囑”，告知技術(shù)人員進(jìn)行必要的深切片、連切片、特殊染色和其他相關(guān)技術(shù)檢測。

5、應(yīng)全面、細(xì)致地閱片，注意各種有意義的病變。

(二)進(jìn)行初檢的病理醫(yī)師，應(yīng)提出初診意見，送交主檢病理醫(yī)師復(fù)查。

(三)主檢病理醫(yī)師對難以明確診斷的病例,可以：

1、提請科內(nèi)上級醫(yī)師會診或進(jìn)行科內(nèi)讀片討論（會診）；

2、與有關(guān)臨床醫(yī)師進(jìn)行臨床－病理會診；

3、必要時約見患者（尤其門診患者）或患者親屬（或其他患方相關(guān)人員），了解病情，說明病理診斷的疑難情況和延期簽發(fā)病理學(xué)診斷報告書的原因等；

4、于簽發(fā)病理學(xué)診斷報告書前進(jìn)行科外病理會診(“診斷報告前病理會診”)，應(yīng)將各方面會診意見的原件（或復(fù)印件）作為檔案資料貼附于有關(guān)患者的活檢記錄單中備查；

5、必要時，建議臨床醫(yī)師重復(fù)活檢，或密切隨查。

(四)主檢病理醫(yī)師根據(jù)常規(guī)切片的鏡下觀察，結(jié)合標(biāo)本巨檢、相關(guān)技術(shù)檢查結(jié)果、有關(guān)臨床資料和參考病理會診意見等，作出病理診斷或提出病理診斷意見（意向），清楚地書寫于活檢記錄單的有關(guān)欄目中、并親筆簽名。各方會診意見不

一、難以明確診斷時，主檢醫(yī)師可參考會診意見酌情診斷，或在病理學(xué)診斷報告書中將各方會診意見列出，供臨床醫(yī)師參考。

(五)對打印的病理學(xué)診斷報告書，主檢病理醫(yī)師應(yīng)與活檢記錄單上的病理診斷文字進(jìn)行核對，并親筆簽名。［參見本節(jié)下文：“

八、常規(guī)活檢病理學(xué)診斷報告書及其簽發(fā)”］

七、相關(guān)診斷技術(shù)的選用

病理醫(yī)師可借助于組織化學(xué)染色（包括特殊染色）、免疫組織化學(xué)染色、電子顯微鏡技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)、流式細(xì)胞技術(shù)等相關(guān)診斷技術(shù)檢查提供的佐證，對某些病例（尤其是疑難病例）進(jìn)行病理診斷。（參見第4章）

八、病理學(xué)診斷報告書及其簽發(fā)(一)病理診斷表述的基本類型

Ⅰ類：檢材部位／疾病名稱／病變性質(zhì)明確和基本明確的病理診斷。Ⅱ類：不能完全肯定疾病名稱/病變性質(zhì)，或是對于擬診的疾病名稱／病變性質(zhì)有所保留的病理診斷意向，可在擬診疾病／病變名稱之前冠以諸如病變可“符合為”、“考慮為”、“傾向?yàn)椤?、“提示為”、“可能為”、“疑為”、“不能排除（除外）”之類的詞語。

Ⅲ類：檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾?。床荒茏龀觫耦惢颌蝾惒±碓\斷），只能進(jìn)行病變的形態(tài)描述。

Ⅳ類：送檢標(biāo)本因過于細(xì)小、破碎、固定不當(dāng)、自溶、嚴(yán)重受擠壓（變形）、被燒灼、干涸等，無法做出病理診斷。

(二)病理學(xué)診斷報告書的基本內(nèi)容

1、患者的基本情況，包括病理號，姓名，性別，年齡，送檢醫(yī)院／科室（住院／門診），住院號／門診號，送檢／收驗(yàn)日期等。

2、巨檢病變和鏡下病變要點(diǎn)描述（一般性病變和細(xì)小標(biāo)本可酌情簡述或省略）。

3、與病理診斷相關(guān)技術(shù)的檢查結(jié)果。

4、病理診斷的表述（參見上文“病理診斷表述的基本類型”）。

5、對于疑難病例或作出Ⅱ、Ⅲ類病理診斷的病例，可酌情就病理診斷及其相關(guān)問題附加：①建議（例如進(jìn)行其他有關(guān)檢查、再做活檢、科外病理學(xué)會診、密切隨診／隨訪等）；②注釋／討論。

6、經(jīng)過本病理科或／和科外病理會診的病例，可將各方病理 會診意見列于該例患者的病理學(xué)診斷報告書中。(三)病理學(xué)診斷報告書的書寫要求

1、病理學(xué)診斷報告書的文字表述力求嚴(yán)謹(jǐn)、恰當(dāng)、精練、條理和層次清楚。

2、病理學(xué)診斷報告書應(yīng)為一式二份，一份交予送檢方，另一份隨同患者的病理學(xué)檢查申請單／病理學(xué)檢查記錄單一并存檔。主檢病理醫(yī)師必須在每一份病理學(xué)診斷報告書上簽名，不能以個人印章代替簽名，不能由他人代為簽名；主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。

3、手書的病理學(xué)診斷報告書必須二聯(lián)復(fù)寫，必須文字規(guī)范、字跡清楚，不得潦草、涂改。

4、手書和計(jì)算機(jī)打印的病理學(xué)診斷報告書中的關(guān)鍵性文字，例如“癌”、“瘤”、“陽性”、“陰性”和數(shù)字等，要認(rèn)真核對，不得有誤。

5、計(jì)算機(jī)打印的圖文病理學(xué)診斷報告書提供的病變圖象要準(zhǔn)確，具有典型（代表）性，放大倍數(shù)適當(dāng)。

6、患者的基本情況項(xiàng)目必須嚴(yán)格按照送檢臨床醫(yī)師填寫的文字抄寫或用計(jì)算機(jī)輸錄于病理學(xué)診斷報告書中，并認(rèn)真核查無誤，簽發(fā)報告書的病理醫(yī)師和病理科的其他人員都不得改動。

7、病理醫(yī)師不得簽發(fā)虛假的病理學(xué)診斷報告書，不得向臨床醫(yī)師和患方人員提供有病理醫(yī)師簽名的空白病理學(xué)診斷報告書。(四)病理學(xué)診斷報告書的發(fā)送

1、病理科自接受送檢標(biāo)本至簽發(fā)該例病理學(xué)診斷報告書的時間，一般情況下為5個工作日以內(nèi)；

2、由于某些原因（包括深切片、補(bǔ)取材制片、特殊染色、免疫組織化學(xué)染色、脫鈣、疑難病例會診或傳染性標(biāo)本延長固定時間等）延遲取材、制片，或是進(jìn)行其他相關(guān)技術(shù)檢測，不能如期簽發(fā)病理學(xué)診斷報告書時，應(yīng)以口頭或書面告知有關(guān)臨床醫(yī)師或患方，說明遲發(fā)病理學(xué)診斷報告書的原因。

3、病理科應(yīng)有專人發(fā)送病理學(xué)診斷報告書。住院患者的病理學(xué)診斷報告書應(yīng)發(fā)送至有關(guān)臨床科室。病理科所在醫(yī)院門診患者和外院患者病理學(xué)診斷報告書的發(fā)送方法，由各醫(yī)院病理科自行制訂。

4、病理學(xué)診斷報告書的經(jīng)收人員（包括患方人員）必須履行簽收手續(xù)。

5、病理科已發(fā)出的病理學(xué)診斷報告書被遺失時，一般不予補(bǔ)發(fā)；必要時，經(jīng)病理科主任同意可以抄件形式補(bǔ)發(fā)。

九、資料管理

普通活體組織病理學(xué)檢查的資料必須妥善管理，有關(guān)規(guī)定參見本章第五節(jié)。

十、會

診

病理學(xué)會診是普通活體組織病理學(xué)診斷過程的重要環(huán)節(jié)，有關(guān)規(guī)定參見本章第六節(jié)。

第二節(jié) 手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)

一、概

述

(一)手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查（快速活檢）是臨床醫(yī)師在實(shí)施手術(shù)過程中，就與手術(shù)方案有關(guān)的疾病診斷問題請求病理醫(yī)師快速進(jìn)行的急會診，尤其需要臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師間的密切合作。

(二)快速活檢要求病理醫(yī)師在很短時間內(nèi)，根據(jù)對切除標(biāo)本的巨檢和組織塊快速冷凍切片（或快速石蠟切片）的觀察，向手術(shù)醫(yī)師提供的參考性病理診斷意見。與常規(guī)石蠟切片的病理診斷相比，快速活檢會診具有更多的局限性和誤診的可能性。有的病例難以快速診斷，需要等待常規(guī)石蠟切片進(jìn)一步明確診斷。因此，應(yīng)向臨床醫(yī)師說明快速活檢的：①局限性、②適用范圍、③慎用范圍和④不宜應(yīng)用范圍。

(三)有關(guān)臨床醫(yī)師應(yīng)于手術(shù)前向患者和／或患者授權(quán)人說明快速活檢的意義和局限性等，取得患者和／或患方的知情和理解?；颊吆停蚧颊呤跈?quán)人應(yīng)在由醫(yī)院制定的《手術(shù)中快速活檢患方知情同意書》簽署意見和簽名。

(四)主持手術(shù)的臨床醫(yī)師應(yīng)在手術(shù)前一天向病理科遞交快速活檢申請單，填寫患者的病史，重要的影象學(xué)、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果和提請病理醫(yī)師特別關(guān)注的問題等。盡可能不在手術(shù)進(jìn)行過程中臨時申請快速活檢。

(五)手術(shù)中快速活檢應(yīng)由經(jīng)過該項(xiàng)工作訓(xùn)練的主治醫(yī)師以上的病理醫(yī)師主持。尚不具備相應(yīng)條件的病理科不應(yīng)勉強(qiáng)開展手術(shù)中快 速活檢。

(六)負(fù)責(zé)快速活檢的主檢病理醫(yī)師應(yīng)了解患者的①臨床情況，②手術(shù)所見，③既往有關(guān)的病理學(xué)檢查情況。

二、適用范圍

(一)需要確定病變性質(zhì)（如腫瘤或非腫瘤／良性腫瘤或惡性腫瘤等），以決定手術(shù)方案的標(biāo)本。

(二)了解惡性腫瘤的擴(kuò)散情況，包括腫瘤是否浸潤相鄰組織、有無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。

(三)確定腫瘤部位的手術(shù)切緣有無腫瘤組織殘留。

(四)確認(rèn)切除的組織，例如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組織等。

三、慎用范圍涉及截肢和其他會嚴(yán)重致殘的根治性手術(shù)切除的標(biāo)本。需要此類手術(shù)治療的患者，其病變性質(zhì)宜于手術(shù)前通過常規(guī)活檢確定。

四、不宜應(yīng)用范圍

(一)疑為惡性淋巴瘤。

(二)過小的標(biāo)本（檢材長徑≤0.2cm者）。(三)術(shù)前易于進(jìn)行常規(guī)活檢者。

(四)脂肪組織、骨組織和鈣化組織。

(五)需要依據(jù)核分裂象計(jì)數(shù)判斷良、惡性的軟組織腫瘤。(六)主要根據(jù)腫瘤生物學(xué)行為特征而不能依據(jù)組織形態(tài)判斷良、惡性的腫瘤。(七)已知具有傳染性的標(biāo)本（例如結(jié)核病、病毒性肝炎、艾滋病等）。

五、申請單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號和登記

手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查申請單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號和登記參照本章第一節(jié)中“一”至“三”項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定。

六、標(biāo)本的巨檢、取材和記錄

(一)病理科驗(yàn)收快速活檢申請單和標(biāo)本后，應(yīng)參照本章第一節(jié)中“四”項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定，立即進(jìn)行標(biāo)本的巨檢、取材和記錄。(二)主持快速活檢的病理醫(yī)師應(yīng)親自參與標(biāo)本的巨檢和取材（或指導(dǎo)取材）。

(三)通常選取具有代表性的病變組織1～2塊，需要時，增加取材塊數(shù)。

七、組織切片的制備(一)冷凍切片

1、完成冷凍HE染色切片制備的時間通常應(yīng)為20～25分鐘。

2、恒冷箱切片機(jī)制片：至少應(yīng)于切片前1小時開機(jī)預(yù)冷，冷室溫度一般為-15～-20℃。常規(guī)開展冷凍切片快速病理學(xué)診斷的病理科，恒冷箱切片機(jī)宜處于24小時恒溫待機(jī)狀態(tài)。

3、其他方法的冷凍切片制備參見第3章第一節(jié)。(二)快速石蠟切片

1、完成快速石蠟－HE染色切片的時間通常為30分鐘。

2、快速石蠟切片的制備方法參見第3章第一節(jié)。(三)制備好的冷凍／快速石蠟-HE染色切片，加貼標(biāo)有本病理科病理號的標(biāo)簽后，立即交由主檢病理醫(yī)師進(jìn)行診斷。

八、手術(shù)中快速活檢會診意見及其簽發(fā)

(一)有條件時病理科宜由兩位病理醫(yī)師共同簽署快速活檢的病理診斷意見。對于病變疑難、手術(shù)切除范圍廣泛和會嚴(yán)重致殘的手術(shù)中快速活檢，應(yīng)由兩位高級稱職的病理醫(yī)師共同簽署會診意見。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。

(二)快速活檢診斷意見一般在收到送檢標(biāo)本后40分鐘內(nèi)發(fā)出；同一時間段內(nèi)相繼收到的多例患者標(biāo)本或是同一例患者的多次標(biāo)本，其發(fā)出報告的時間依次類推。對于疑難病變，可酌情延時報告。

(三)對于難以即時快速診斷的病變（例如病變不典型、交界性腫瘤病變或送檢組織不足以明確診斷等），主檢病理醫(yī)師應(yīng)向手術(shù)醫(yī)師說明情況，恰如其分地簽發(fā)病理診斷意見或告知需要等待常規(guī)石蠟切片進(jìn)一步明確病理診斷。

(四)主檢病理醫(yī)師簽署的快速活檢病理診斷意見，宜以文字形式報告（具體發(fā)出方式由各醫(yī)院自行決定）。快速活檢病理診斷意見報告書發(fā)出前應(yīng)認(rèn)真核對無誤。

九、冷凍切片后剩余組織的處理

(一)冷凍切片后剩余的冷凍組織（簡稱 “凍對”）和冷凍切片取材后剩余、未曾冷凍的組織（簡稱“凍?！保?，均應(yīng)保存，用以制備常規(guī)石蠟切片，以便與冷凍切片進(jìn)行對照觀察。

（二）“凍對”／“凍剩”組織的蠟塊和切片需與同一病例手術(shù)后送檢的切除標(biāo)本編為同一病理號，并作出綜合性診斷。(三)當(dāng)冷凍切片病理診斷意見與其“凍對”組織的常規(guī)石蠟-HE片的病理診斷不一致時，該例的病理診斷一般應(yīng)以石蠟-HE片診斷為準(zhǔn)。

十、資料管理

手術(shù)中快速活體組織病理學(xué)檢查的資料必須妥善管理，有關(guān)規(guī)定參見本章第五節(jié)。

第三節(jié) 細(xì)胞病理學(xué)檢查常規(guī)

一、申請單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號和登記

(一)病理科應(yīng)參照本章第一節(jié)（常規(guī)活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)）中“一”和“二”項(xiàng)的規(guī)定，進(jìn)行細(xì)胞病理學(xué)檢查(細(xì)胞學(xué)檢查)申請單和標(biāo)本的驗(yàn)收、編號和登記。

(二)用于細(xì)胞學(xué)檢查的標(biāo)本必須新鮮，取材后應(yīng)盡快送至病理科(或細(xì)胞病理學(xué)室,下同)；病理科核驗(yàn)檢材無誤后，應(yīng)盡快進(jìn)行涂片和染色。

(三)病理科驗(yàn)收標(biāo)本人員不得對申請單中由臨床醫(yī)師填寫的各項(xiàng)內(nèi)容進(jìn)行改動。

二、細(xì)胞涂片、組織印片和壓片的基本要求

(一)細(xì)胞涂片、組織印片和壓片（參見第3章第二節(jié)）。

(二)腫物細(xì)針穿刺物涂片

1、應(yīng)由掌握細(xì)針穿刺技術(shù)的注冊醫(yī)師或注冊助理醫(yī)師，按照 細(xì)針穿刺技術(shù)操作常規(guī)，親自對確有適應(yīng)癥且無禁忌癥的患者采取穿刺物。

2、適應(yīng)癥：通常為：

(1)淺表腫物：乳腺、甲狀腺、涎腺、淋巴結(jié)、前列腺、皮下軟組織和骨等。

(2)胸腔腫物：肺、胸膜和縱隔等。

(3)腹腔腫物：肝、胰、腎、腎上腺、腹腔內(nèi)、腹膜后和盆腔內(nèi)等。

(4)顱內(nèi)腫物。

3、禁忌癥：患者有難以控制的咳嗽、肺動脈高壓癥、進(jìn)行性肺氣腫、出血性體質(zhì)及“暈針史”等。

（三）對于核驗(yàn)無誤的送檢標(biāo)本，應(yīng)立即依序進(jìn)行：①涂片、印片或壓片，②固定和③染色。

三、細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書及其簽發(fā)

(一)細(xì)胞病理學(xué)診斷可為臨床醫(yī)師診斷疾病（尤其是腫瘤）提供重要參考依據(jù)。

(二)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書必須由具有主檢資格的注冊病理醫(yī)師簽署后發(fā)出。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應(yīng)能辨認(rèn)。(三)細(xì)胞病理學(xué)診斷表述的基本類型

1、直接表述性診斷：適用于穿刺標(biāo)本的細(xì)胞病理學(xué)診斷報告。根據(jù)形態(tài)學(xué)觀察的實(shí)際情況，對于某種疾病／病變做出肯定性（Ⅰ類）、不同程度意向性（Ⅱ類）細(xì)胞學(xué)診斷，或是提供形態(tài)描 述性（Ⅲ類）細(xì)胞學(xué)診斷，或是告知無法做出（Ⅳ類）細(xì)胞學(xué)診斷。[參考本章第一節(jié)的八(一)項(xiàng)：“病理學(xué)診斷表述的基本類型”]

2、間接分級性診斷：用于查找惡性腫瘤細(xì)胞的診斷。Ⅰ級：未見惡性細(xì)胞 Ⅱ級：查見核異質(zhì)細(xì)胞 Ⅱa：輕度核異質(zhì)細(xì)胞 Ⅱb：重度核異質(zhì)細(xì)胞 Ⅲ級：查見可疑惡性細(xì)胞 Ⅳ級：查見高度可疑惡性細(xì)胞 Ⅴ級：查見惡性細(xì)胞

(四)細(xì)胞病理學(xué)診斷的局限性（假陰性或假陽性診斷）

1、假陰性：是指在惡性腫瘤患者的有關(guān)標(biāo)本中未能查見惡性細(xì)胞。假陰性率一般為10%左右。因此，細(xì)胞病理學(xué)檢查的陰性結(jié)果并不能否定臨床醫(yī)師的惡性腫瘤診斷。

2、假陽性：是指在非惡性腫瘤患者的有關(guān)標(biāo)本中查見了“惡性細(xì)胞”。假陽性率通?！?%。因此，細(xì)胞病理學(xué)診斷應(yīng)密切結(jié)合患者的臨床資料，對于臨床上未考慮為惡性腫瘤患者的陽性細(xì)胞學(xué)診斷應(yīng)持慎重態(tài)度。

(五)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的基本內(nèi)容

1、患者的基本情況項(xiàng)目，包括病理號、姓名、性別、年齡、送檢醫(yī)院／科室（住院／門診）、住院號／門診號、送檢／收驗(yàn)日 期等。

2、細(xì)胞病理學(xué)診斷的表述（參見上項(xiàng)“細(xì)胞病理學(xué)診斷報告表述的基本類型”）。

3、必要時或條件允許時，可酌情就細(xì)胞病理學(xué)診斷及其相關(guān)問題附加：①某些建議（例如進(jìn)行其他有關(guān)檢查、再做活檢、病理科外病理學(xué)會診、密切隨查/隨訪等）；②注釋／討論。

4、經(jīng)過本病理科或/和科外病理會診的病例，可將各方的細(xì)胞病理學(xué)診斷意見附于該例的細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書中。(六)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的書寫要求

1、參照本章第一節(jié)（“常規(guī)活體組織病理學(xué)檢查常規(guī)”）中“八

（二）”項(xiàng)的有關(guān)規(guī)定。

2、計(jì)算機(jī)圖文打印的細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書提供的細(xì)胞學(xué)圖象應(yīng)具有典型（代表）性，放大倍數(shù)適當(dāng)。(七)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的發(fā)送

1、病理科自接受送檢標(biāo)本至簽發(fā)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的時間，一般情況下為1～2個工作日。

2、因某些原因（包括特殊染色、免疫組化染色、疑難會診等）不能如期簽發(fā)細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書時，應(yīng)以口頭或書面告知有關(guān)臨床醫(yī)師或患方，說明遲發(fā)報告書的原因。

3、病理科應(yīng)有專人發(fā)送細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書。住院患者的細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書應(yīng)發(fā)送至有關(guān)臨床科室；本院門診患者和外院患者的細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的發(fā)送方法由各醫(yī)院病理科自行制 定。

4、細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書的經(jīng)收人員（包括患方人員）必須履行病理科規(guī)定的簽收手續(xù)。

5、已由病理科發(fā)出的細(xì)胞病理學(xué)診斷報告書被遺失時，一般不予補(bǔ)發(fā)；必要時，經(jīng)病理科主任同意可以抄件形式補(bǔ)發(fā)。

四、資料管理

細(xì)胞病理學(xué)檢查的資料必須妥善管理，有關(guān)規(guī)定參見本章第四節(jié)。

第四節(jié) 病理學(xué)檢查資料的管理

一、概

述

(一)常規(guī)活檢、手術(shù)中快速活檢、細(xì)胞病理學(xué)檢查和尸檢等的文字資料（含電子信息資料）、非文字資料（組織的石蠟包埋塊、切片等）以及其他相關(guān)資料均為有價值的醫(yī)學(xué)資料，皆由受理病理學(xué)檢查的病理科按照本規(guī)范規(guī)定的期限妥為保存。病理科必須設(shè)立病理檔案資料室和制訂病理檔案資料管理制度（包括病理檢查資料的歸檔、借用和歸還手續(xù)等），并有專人管理。應(yīng)積極實(shí)行病理學(xué)檢查資料的計(jì)算機(jī)管理。

(二)各種病理學(xué)檢查的文字資料應(yīng)裝訂成冊保存。

(三)據(jù)以做出常規(guī)活檢、快速活檢、尸檢病理學(xué)診斷的原始組織學(xué)切片和查見腫瘤細(xì)胞或可疑腫瘤細(xì)胞的玻片必須妥善保存。未查見惡性腫瘤細(xì)胞的玻片，于診斷報告書發(fā)出后保存2周。

二、患者查詢病理學(xué)檢查資料的期限(一)門診患者為送檢后15年。(二)住院患者為送檢后30年。

三、活檢、尸檢大體標(biāo)本的保存期限

(一)活檢：自簽發(fā)病理學(xué)診斷報告書之日起保存2～4周，具體保存期限由各醫(yī)院自行規(guī)定。

四、病理學(xué)檢查資料的借用

(一)醫(yī)院必須制訂關(guān)于借用病理學(xué)檢查資料的辦法并嚴(yán)格實(shí)施。

(二)關(guān)于患方借用病理組織學(xué)切片，應(yīng)注意：

1、患方人員申請借用有關(guān)患者的活檢切片、尸檢切片時，應(yīng)按照醫(yī)院制定的有關(guān)規(guī)定辦理手續(xù)。

2、申請借用切片的患方人員必須：①出示本人身份證等有效證件并保留其復(fù)印件；②填寫借片申請單并簽名；③支付規(guī)定的借片押金（待歸還切片時退還）。

3、病理科據(jù)以作出診斷的原始切片一般不外借，通常借出（或售出）相關(guān)病例的復(fù)制切片。復(fù)制切片借出（或售出）前，應(yīng)確認(rèn)該切片的病變與原切片相同或基本相同。

4、患方借出的切片應(yīng)妥善保存，必須在規(guī)定的期限內(nèi)歸還?；挤浇璩龅那衅粲衅茡p、丟失等，應(yīng)按規(guī)定支付賠償金，并承擔(dān)相應(yīng)責(zé)任。

5、病理科因故不能向患方出借或出售有關(guān)切片時，由雙方協(xié)商解決病理學(xué)會診問題。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫(yī) 師前來病理科閱片；有條件的單位可酌情進(jìn)行遠(yuǎn)程病理會診。

(三)關(guān)于患方借用細(xì)胞病理學(xué)玻片

1、一個病例的同一次檢查有多張查見惡性腫瘤細(xì)胞的“陽性片”或“可疑陽性片”時，可允許患方借用其中的一張。借用手續(xù)參見上項(xiàng)(二)。

2、一個病例僅有一張為查見惡性腫瘤細(xì)胞的“陽性片”或“可疑陽性片”時，該陽性片或可疑陽性片原則上不予外借。其會診問題由雙方協(xié)商解決。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫(yī)師前來病理科閱片。

(四)關(guān)于借用檢材組織的石蠟包埋塊

1、活檢和尸檢檢材組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）是無法復(fù)制的病理學(xué)檢查資料，屬于診斷病理學(xué)的重要基礎(chǔ)檔案，原則上不外借。必要時，可由病理科向患方提供未經(jīng)染色的切片（通稱白片）。

2、患方外借病理切片會診時，受理會診的病理科若確實(shí)需要有關(guān)病例病理檢材的蠟塊，可由有關(guān)病理科雙方協(xié)商解決。

第五節(jié) 病理學(xué)會診

一、具有一定規(guī)模的病理科應(yīng)定期舉行科內(nèi)病理會診或讀片討論會。

二、積極推動建立地域性病理會診中心。

三、加強(qiáng)臨床－病理會診。

四、應(yīng)由具有高級職稱的病理醫(yī)師接受病理科內(nèi)、外的病理學(xué) 會診。

五、接受外院的病理會診時，由會診的病理醫(yī)師簽發(fā)《病理學(xué)會診咨詢意見書》，并在該《意見書》上寫明：“病理醫(yī)師個人會診咨詢意見，僅供原病理診斷的病理醫(yī)師參考”。由作出原病理診斷的病理醫(yī)師自行決定是否采納病理會診咨詢意見和采納的程度。做出原診斷的病理科應(yīng)將《病理會診咨詢意見書》的原件或其復(fù)印件貼附于有關(guān)患者的病理檢查記錄單上，一并歸檔。

六、加做相關(guān)技術(shù)檢測方能作出診斷的會診病例，會診醫(yī)師應(yīng)在《意見書》中予以說明，并向患方進(jìn)行適當(dāng)解釋。

七、對病理診斷時間較為長久病例的會診，應(yīng)考慮到做出原診斷時期的診斷病理學(xué)理論、技術(shù)水平、相應(yīng)病變／疾病的定性診斷標(biāo)準(zhǔn)和原診斷病理科當(dāng)時的客觀條件。

八、有條件的病理科可開展遠(yuǎn)程病理會診。

第六節(jié) 病理科的基本設(shè)施

一、病理科基本設(shè)施的指導(dǎo)原則(一)保證病理科完成基本工作任務(wù)。(二)保護(hù)病理工作人員免受污染。(三)保護(hù)環(huán)境免受污染。

二、病理科的基本工作空間

(一)病理科的常規(guī)工作需要在下列的各自獨(dú)立的房間內(nèi)進(jìn)行：

1、收發(fā)室（檢材的接收、登記，病理診斷報告書的發(fā)放，病理資料查詢等）

2、巨檢和取材室（檢材的肉眼檢查和切取組織塊，貯存取材后的剩余檢材）

3、常規(guī)切片前的預(yù)處理室（組織塊的脫水、透明和浸蠟）

4、制片室（石蠟切片／冷凍切片／細(xì)胞學(xué)涂片的制做和染色）

5、病理組織學(xué)診斷室

6、細(xì)胞病理學(xué)診斷（酌情附設(shè)組織穿刺室）

7、病理會診室

8、病理檔案資料室

9、大體標(biāo)本制作室和陳列室

10、儲藏室

(二)病理標(biāo)本巨檢和取材室

1、便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修

2、室內(nèi)紫外線消毒設(shè)備

3、室內(nèi)高效通風(fēng)設(shè)施

4、封閉式高效能通風(fēng)柜廚(用于巨檢和取材，應(yīng)便于清洗、消毒，并安裝足夠照明和紫外線消毒設(shè)備)

5、合于個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨(dú)立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池）

6、流水沖洗裝臵

7、冷水和熱水供給系統(tǒng)

8、標(biāo)本儲存柜（安裝排風(fēng)設(shè)備）

9、隔離服裝（消毒后使用）

10、其他相關(guān)設(shè)備。

(三)常規(guī)切片的預(yù)處理室和常規(guī)/快速制片室

1、排放有毒物質(zhì)的室內(nèi)高效通風(fēng)設(shè)施（用于組織塊和石蠟切片的人工脫水流程）

2、符合個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨(dú)立的污水排泄系統(tǒng)和污水處理池）

3、室內(nèi)紫外線消毒設(shè)備

4、封閉式高效能通風(fēng)柜廚（用于人工脫水流程）

5、實(shí)驗(yàn)臺

6、脫水設(shè)備：①人工脫水器具或/和②半自動或全封閉自動脫水機(jī)

7、組織塊石蠟包埋機(jī)

8、石蠟切片機(jī) *9．恒溫冷凍切片機(jī)

*10．石蠟快速切片機(jī) ［* 9和10：兩項(xiàng)皆配備或配備一項(xiàng)］ #11．一次性切片刀及其配套部件

#12．切片刀和磨刀機(jī)［# 11和12：兩項(xiàng)皆配備或配備一項(xiàng)］

13、冰箱

14、恒溫箱

15、烤箱

16、有關(guān)試劑和試劑柜

17、天平

18、染色用器具

19、普通光學(xué)顯微鏡（用于染色質(zhì)量控制）20、其他相關(guān)設(shè)備

(四)特殊染色和免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)室

1、用于染色的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)施和染色的常規(guī)設(shè)備［參見上文：(三)常規(guī)切片的預(yù)處理室和制片室］

2、微波爐或其他抗原修復(fù)設(shè)備

3、有關(guān)試劑和試劑柜

4、其他相關(guān)設(shè)備

(五)病理組織學(xué)診斷室和病理會診室

1、雙筒顯微鏡（每名病理醫(yī)師配備一臺）

*

2、雙頭和／或多頭顯微鏡（用于共覽會診和培訓(xùn)示教）*

3、計(jì)算機(jī)和打印機(jī)（酌情連接局域網(wǎng)，用于病理學(xué)檢查資料的儲存和調(diào)閱）

*4．顯微攝影設(shè)備，計(jì)算機(jī)圖像分析、電子圖像存儲和放映設(shè)備

[* 2～4：具有一定規(guī)模的病理科配臵]

5、其他相關(guān)設(shè)備(六)病理檔案資料室

1、用于儲存切片、蠟塊和文字資料的柜具

2、計(jì)算機(jī)和打印機(jī)（酌情連接局域網(wǎng)，用于病理學(xué)檢查資料的儲存和調(diào)閱）

3、其他相關(guān)設(shè)備

(七)必要的專業(yè)參考書和基本的專業(yè)期刊（具有一定規(guī)模的病理科應(yīng)設(shè)立圖書資料室）

(八)病理大體標(biāo)本制作室和陳列室

1、制作病理大體標(biāo)本的工具

2、其他相關(guān)設(shè)備

(九)辦公室：必要的辦公設(shè)備(十)儲藏室：必要設(shè)施(十一)淋浴室：必備設(shè)施

四、細(xì)胞病理學(xué)檢查工作的基本設(shè)施(一)腫物穿刺取材室：

1、便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修

2、室內(nèi)紫外線消毒設(shè)備

3、用于實(shí)施穿刺術(shù)的檢查床、椅

4、穿刺用器械和器械柜

5、穿刺用、急救用藥物和藥品柜

6、其他相關(guān)設(shè)備(二)細(xì)胞學(xué)涂片制片室：

1、用于染色的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)施和常規(guī)設(shè)備［參見本節(jié)的三(三)項(xiàng)：“常規(guī)切片的預(yù)處理室和常規(guī)／快速制片室”］)

2、可調(diào)速離心機(jī)

3、自動細(xì)胞病理學(xué)檢查系統(tǒng)（具有一定規(guī)模的病理科，酌 情）

4、其他相關(guān)設(shè)備

(三)細(xì)胞病理學(xué)診斷室：參見本節(jié)的三(五)項(xiàng)（病理組織學(xué)診斷室和病理會診室）。

第三章 病理學(xué)基本技術(shù)規(guī)范 第一節(jié) 病理組織學(xué)診斷檢材的制備技術(shù)

一、組織的固定

㈠凡需要進(jìn)行病理組織學(xué)檢查的標(biāo)本（器官或組織），于離體（活體或尸體）后，應(yīng)盡快臵放（浸泡）于裝有足夠量固定液的容器中固定。固定液量應(yīng)為被固定標(biāo)本體積的5~10倍。臵放標(biāo)本的容器大小視標(biāo)本和固定液的體積而定，應(yīng)適當(dāng)大一些。臨床科室切取的標(biāo)本臵放于容器中固定后，應(yīng)盡快送交病理科繼續(xù)固定。未能及時、充分固定的干涸或腐敗標(biāo)本不能再進(jìn)行固定和用于制做切片。

㈡常規(guī)固定液為4%中性甲醛（10%中性福爾馬林），應(yīng)預(yù)先多量配制貯存，以備隨時使用。小標(biāo)本的固定時間為4——6小時，大標(biāo)本為18——24小時或更久。

㈢根據(jù)病理學(xué)特殊檢查（特殊染色和組織化學(xué)染色、免疫組織化學(xué)染色和原位核酸分子雜交染色、電鏡觀察等）的需要，應(yīng)選用其他適宜的固定液進(jìn)行固定［參見后述的“㈦固定液的常用種類和制備”］。

㈣器官、組織固定的基本方法 ［另參見本章第四節(jié)（病理標(biāo)本的肉眼檢查和組織學(xué)切片取材技術(shù)）］

1、食管、胃、腸、膽囊、膀胱等空腔器官：依規(guī)范方法剪開后，按其自然狀態(tài)平鋪于硬紙板上（重點(diǎn)暴露黏膜面或內(nèi)表面的病變處），并用大頭針將標(biāo)本邊緣處固定于紙板上，然后放入4%中性甲醛中固定（黏膜面或內(nèi)表面朝向容器的液面，并覆蓋薄層脫脂棉）。

2、肝、脾：由器官背面，沿其長軸每間隔1.5~2.0cm縱向平行剖開，切成數(shù)片。將每片肝或脾輕輕地平放于裝有4%中性甲醛的容器中，容器底面襯以脫脂棉。應(yīng)避免標(biāo)本彎曲和相互間的疊壓。

3、肺葉：放入固定液中的肺葉漂浮于液面，需在肺表面覆蓋薄層脫脂棉。必要時從支氣管注入適量4%中性甲醛。

4、腎：沿腎外緣中線朝腎門方向作一水平切面（深達(dá)于腎盞），再行固定。

5、淋巴結(jié)：先用4%中性甲醛固定1小時后，再沿其長軸切成數(shù)片（厚2 ——3mm），繼續(xù)固定。

6、骨組織：先鋸成小片（若是長骨應(yīng)作橫向鋸片），在4%中性甲醛中固定24小時后，再進(jìn)行脫鈣。

7、微小組織或液體沉淀物：先用拭紙或?yàn)V紙妥為包裹（需用大頭針扎牢），然后放入專用小盒內(nèi)進(jìn)行中性4%甲醛固定，以防檢材遺失。

8、凡進(jìn)入固定程序的標(biāo)本必須連帶其正確無誤的病理檢驗(yàn)號（病理號）。

㈤多數(shù)固定液對人體有害，需要防護(hù)，必須在封閉的通風(fēng)條件下進(jìn)行操作。

㈥組織塊的切取和固定：①由較大標(biāo)本切取用于制作切片的組織塊（取材）時，應(yīng)與標(biāo)本的斷面平行，組織塊厚度一般為0.3 cm(不應(yīng)>0.5cm)，面積一般在1——1.5×1——1.5以內(nèi)。②切取組織塊的形狀，在充分包括肉眼病變的前提下盡量規(guī)則些（例如方形、矩形、三角形等）；由一個標(biāo)本切取的多塊組織的形狀有所不同，便于蠟塊與其相應(yīng)切片的核對。③固定組織塊的固定液量，一般應(yīng)為組織塊總體積的5~10倍以上。④室內(nèi)常溫（25℃左右）下的固定時間為3~24小時；低溫（4℃）下的固定時間應(yīng)延長。⑤固定組織塊的容器要大一些。⑥組織塊固定期間需要間斷地輕搖或攪動固定液以利于固定液的滲入。

㈦常用固定液 1、4%中性甲醛（10%中性福爾馬林）固定液

甲醛（40%）

ml 無水磷酸氫二鈉

6.5g 磷酸二氫鈉

4.0g 蒸餾水

900ml

2、乙醇－甲醛（酒精－福爾馬林，AF）固定液 甲醛（40%）100ml

95%乙醇 900ml ［說明］一般組織塊經(jīng)乙醇－甲醛固定1～2小時后，即可移入95%乙醇內(nèi)脫水。

3、Carnoy固定液 無水乙醇 60ml 氯仿 30ml 冰醋酸 10ml ［說明］組織化學(xué)染色的常用固定液，組織經(jīng)Carnoy液固定1～2小時后，即可移入無水乙醇中脫水。

4、Zenker固定液 升汞 5.0g 重鉻酸鉀 2.5g 硫酸鈉 1.0g 蒸餾水（加至）

100ml ［說明］配制本液時，先將升汞溶于蒸餾水中、加溫至40～50℃溶解后，再加入重鉻酸鉀，最后加入硫酸鈉，貯存待用。使用前加入5ml冰醋酸，混合。組織塊需固定12~24小時。切片染色前，需進(jìn)行脫汞沉淀處理。

5、Bouin固定液

飽和苦味酸水溶液（約1.22%）75ml 甲醛（40%）

25ml

冰醋酸

5ml

［說明］本液臨用時配制。組織塊臵于Bouin液固定12～24小時即可（小塊組織只需固定數(shù)小時）。經(jīng)Bouin液固定的組織被苦味酸染成黃色，可用水洗滌12小時后進(jìn)入乙醇脫水（兼脫色）。不必將組織中的黃色除凈（殘存于組織中的苦味酸無礙染色）

6、過碘酸－賴氨酸－多聚甲醛固定液（PLP）A液： 賴氨酸

1.827g

蒸餾水

50ml 0.1mol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.4)

50ml

B液：8%多聚甲醛水溶液

100ml ［說明］本液臨用時配制：取A液3份、B液1份，混合后，加入過碘酸鈉，使液體終濃度為2%。組織塊在4℃下固定36~54小時。本液對細(xì)胞結(jié)構(gòu)和抗原性保存較好。

7、B5（醋酸鈉－升汞－甲醛）固定液 無水醋酸鈉 1.25g 升汞 6.0g 蒸餾水 90ml ［說明］將以上物質(zhì)混合、溶解，使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴組織。染色前應(yīng)進(jìn)行脫汞沉淀處理。如不加甲醛稱為B4固定液（蒸餾水為100 ml）。

8、丙酮固定液

冷丙酮（4℃）固定液用于酶組織化學(xué)染色。細(xì)胞標(biāo)本的免疫組化染色也常用冷丙酮固定10分鐘。

二、常規(guī)石蠟包埋組織切片（常規(guī)切片）的制備

㈠組織塊依序進(jìn)行：①水洗，②脫水，③透明，④浸蠟，⑤包埋和⑥切片。

㈡組織切片制備及其HE染色過程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為易燃、有毒物，必須專人管理，2m以內(nèi)不得有明火，局部環(huán)境應(yīng)有良好的通風(fēng)和消防設(shè)施。

㈢常規(guī)切片的手工操作（步驟次序和各步驟的持續(xù)時間）

1、水洗：用流水沖洗已經(jīng)固定的組織塊30min。

2、脫水（常溫下）

（1）乙醇－甲醛（AF）液固定

60~120min（2）80%乙醇

60~120min（3）95%乙醇Ⅰ

60~120min（4）95%乙醇Ⅱ

60~120min（5）無水乙醇Ⅰ

60~120min（6）無水乙醇Ⅱ

60~120min（7）無水乙醇Ⅲ

60min ［注意事項(xiàng)］①未經(jīng)充分固定的組織不得進(jìn)入脫水程序。②用于脫水的試劑容積應(yīng)為組織塊總體積的5～10倍以上。③自低濃度乙醇向高濃度乙醇逐級移進(jìn)脫水。④脫水試劑應(yīng)及時過濾、更換（500ml乙醇可用于500個組織塊脫水；加入硫酸銅的無水乙醇變藍(lán)時，提示需要更換）。⑤較大組織塊的脫水時間長于較小者，應(yīng)將兩者分開進(jìn)行脫水。⑥組織臵于無水乙醇內(nèi)的時間不宜過長（以

免硬化）。⑦丙酮脫水性能強(qiáng)，會使組織塊過縮、硬脆，不宜用以替代無水乙醇。

3、透明

（1）二甲苯Ⅰ

20min（2）二甲苯Ⅱ

20min（3）二甲苯Ⅲ

20min ［注意事項(xiàng)］①二甲苯的容積應(yīng)為組織塊總體積的5～10倍以上。②組織塊在二甲苯中透明的時間不宜過長（以防組織硬、脆），并依不同種類組織及其大小而異；組織呈現(xiàn)棕黃或暗紅色透明即可。③二甲苯應(yīng)及時過濾、更換。④組織經(jīng)二甲苯適度處理后不顯透明時，常提示該組織的固定或脫水不充分，應(yīng)查找原因并妥善處理。

4、浸蠟

（1）石蠟Ⅰ（45-50℃）

60min（2）石蠟Ⅱ（56-58℃）

60min（3）石蠟Ⅲ（56-58℃）

60min ［注意事項(xiàng)］①熔化石蠟必須有專人負(fù)責(zé)，必須在熔蠟箱內(nèi)或水浴中（70℃）進(jìn)行，不得用明火加溫。②熔蠟的容積應(yīng)為組織塊總體積的5～10倍以上。③組織塊經(jīng)二甲苯適度透明后方可轉(zhuǎn)入浸蠟過程，應(yīng)盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中。④浸蠟時間適宜，過短時浸蠟不充分（組織過軟），過長時組織硬脆。⑤熔蠟應(yīng)及時過濾、更換。

5、包埋

36（1）先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經(jīng)過浸蠟的組織塊，使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入熔蠟中；應(yīng)將組織塊平正地臵放于包埋模具底面的中央處；包埋于同一蠟塊內(nèi)的多塊細(xì)小組織應(yīng)彼此靠近并位于同一平面上；腔壁、皮膚和黏膜組織必須垂直包埋（立埋）。

（2）將與組織塊相關(guān)的病理號小條臵入包埋模具內(nèi)熔蠟的一側(cè)。

（3）待包埋模具內(nèi)的熔蠟表面凝固后，即將模具移入冷水中加速凝固。

（4）從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊（簡稱蠟快），用刀片去除組織塊周圍的過多石蠟（組織塊周圍保留1~2mm石蠟為宜）。將包埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長方形。

（5）將病理號小條牢固地烙貼在蠟塊一側(cè)（編號應(yīng)清晰可見）。

（6）把修整好的蠟塊烙貼在支持器上，以備切片。

（7）使用包埋機(jī)的方法按有關(guān)廠商的說明書操作。

（8）注意事項(xiàng)

①應(yīng)將組織塊嚴(yán)格分件包埋。包埋時一定要首先認(rèn)真核對組織塊的病理號（包括亞號）、塊數(shù)和取材醫(yī)師對包埋面的要求，準(zhǔn)確地包入相應(yīng)的病理號小條。發(fā)生包埋差錯時，必須立即與取材醫(yī)師和病理科當(dāng)班負(fù)責(zé)人取得聯(lián)系，及時處臵。

②必須嚴(yán)防各種異物污染，勿將無關(guān)組織（包括縫線、紙屑或

其他異物（尤其是硬質(zhì)異物）埋入蠟塊內(nèi)。

③包埋過程要操作迅速，以免組織塊尚未埋妥前熔蠟?zāi)獭?/p>

④包埋用的熔蠟應(yīng)純凈，熔點(diǎn)適宜。浸蠟Ⅰ用軟蠟（熔點(diǎn)為45~50℃），浸蠟Ⅱ、Ⅲ和包埋用蠟均用硬蠟（熔點(diǎn)為56~58℃）。

⑤包埋用熔蠟使用前應(yīng)將先靜臵沉淀、過濾。

⑥熔蠟時不得使用明火，以防燃燒。包埋用熔蠟的溫度應(yīng)<65℃；包埋用的鑷子不可加溫過高，以免燙傷組織。

6、切片

（1）切片刀或一次性切片刀片必須鋒利。使用切片刀時，必須精心磨備（在低倍顯微鏡下確認(rèn)刀刃無缺口）；使用一次性切片刀片時，應(yīng)及時更新。

（2）載玻片必須潔凈、光亮。

（3）將切片刀或刀片安裝在持刀座上（以15°為宜）。

（4）將蠟塊固定于持支持器上，并調(diào)整蠟塊和刀刃至適當(dāng)位臵（刀刃與蠟塊表面呈5°夾角）。

（5）細(xì)心移動刀座或蠟塊支持器，使蠟塊與刀刃接觸，旋緊刀座和蠟塊支持器。

（6）修塊（粗切）：用右手勻速旋轉(zhuǎn)切片機(jī)輪，修切蠟塊表面至包埋其中的組織塊完整地全部切到。修塊粗切片的厚度為15～20μm。［注意：對于醫(yī)囑再次深切片（特別是在原切片中發(fā)現(xiàn)了有意義病變而進(jìn)行的深切片），應(yīng)盡量少修塊，以盡量好地獲

得有關(guān)病變的連續(xù)性。］

（7）調(diào)節(jié)切片厚度調(diào)節(jié)器（一般為4-6μm），進(jìn)行切片，切出的蠟片應(yīng)連續(xù)成帶，完整無缺，厚度適宜（3～5μm）、均勻，無刀痕、顫痕、皺折、開裂、缺損、松解等。

（8）以專用小鑷子輕輕夾取完整、無刀痕、厚薄均勻的蠟片，放入伸展器的溫水中（45℃左右），使切片全面展開。［注意：必須水溫適宜、潔凈（尤其是水面）；每切完一個蠟塊后，必須認(rèn)真清理水面，不得遺留其它病例的組織碎片，以免污染。］

（9）將蠟片附貼于涂有蛋白甘油或經(jīng)3－氨丙基－三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxy silane，APES)處理過的載玻片上（HE染色時酌情使用，可省略，必要時）。蠟片應(yīng)臵放在載玻片右（或左）2/3處的中央，留出載玻片左（或右）1/3的位臵用于貼附標(biāo)簽。蠟片與載玻片之間無氣泡。

（10）必須立即在臵放了蠟片的載玻片一端（待貼標(biāo)簽的一端），用優(yōu)質(zhì)記號筆或刻號筆準(zhǔn)確、清楚標(biāo)記其相應(yīng)的病理號（包括亞號）。［注意：必須確保載玻片上的病理號與相關(guān)組織石蠟包埋塊的病理號完全一致，不得錯寫或漏寫病理號。］

（11）將臵放了蠟片的載玻片呈45℃角斜臵片刻；待載玻片上的水分流下后，將其臵于烤箱中烘烤（60～62℃，30-60min），然后即可進(jìn)行染色。

（12）注意事項(xiàng)

①組織塊固定、脫水、透明和浸蠟的質(zhì)量直接影響切片制備。

切片過程中遇到的困難首先應(yīng)注意從切片前的上述各環(huán)節(jié)中尋找原因。

②切片機(jī)的質(zhì)量是制備優(yōu)質(zhì)切片的重要前提。要使用質(zhì)量好的切片機(jī)，規(guī)范地切片，精心維護(hù)切片機(jī)。

③經(jīng)由內(nèi)窺鏡、穿刺等獲取的細(xì)小組織，應(yīng)間斷性連續(xù)切片多面（一般至少制備6張蠟片，必要時制備更多張）。需作特殊染色、免疫組化染色等的病例，可預(yù)制蠟片備用。

④切片人員應(yīng)細(xì)心操作，防范被切片刀具割傷。

㈣常規(guī)切片的自動組織處理機(jī)操作（步驟次序和各步驟的持續(xù)時間，總計(jì)需要14小時）

1、乙醇－甲醛（AF）固定液

2×60min 2、95%乙醇Ⅰ

2×60min 3、95%乙醇Ⅱ

2×60min

4、無水乙醇Ⅰ

60min

5、無水乙醇Ⅱ

60min

6、二甲苯Ⅰ

30min

7、二甲苯Ⅱ

30min

8、石蠟Ⅰ

30min

9、石蠟Ⅱ

60min

10、石蠟Ⅲ

90min

11、包埋

（1）手工常規(guī)包埋：參見上述的“㈠手工操作”項(xiàng)。

40（2）用組織包埋機(jī)時，按有關(guān)廠商說明書的規(guī)定操作。

13、切片：參見上述的“㈠手工操作”項(xiàng)。

14、注意事項(xiàng)

（1）必須按有關(guān)說明書的規(guī)定，使用和維護(hù)自動組織處理機(jī)、包埋機(jī)、磨刀機(jī)、封蓋玻片機(jī)等儀器等。

（2）要嚴(yán)防因停電、機(jī)械故障等造成的組織塊損壞。一旦發(fā)生此類事故，必須及時向科主任報告，盡快采取應(yīng)急措施妥善處臵。

（3）使用自動組織處理機(jī)時：①合理設(shè)定的運(yùn)行時間（充分利用夜間）。②固定、脫水的環(huán)境溫度不得>30℃。③乙醇、二甲苯和熔蠟的容積，要大于組織塊總體積的5～10倍以上，并應(yīng)經(jīng)常過濾，保持清潔；應(yīng)經(jīng)常檢查試劑的濃度，及時更新。④對于多量組織塊，可按其大小分批進(jìn)行處理；小塊組織可適當(dāng)縮短處理時間。

三、快速石蠟包埋組織切片的制備

㈠煮沸固定切片法

1、固定：切取大小適宜（厚度<2mm）的組織塊，盡快臵入裝有5-8ml 10%中性4％甲醛的試管中煮沸1min，然后已入冷水中。

2、脫水

（1）將已經(jīng)煮沸固定的組織塊取出，用刀片將其厚度修切至<1.5mm，隨即臵入盛有5-8 ml丙酮的試管中，煮沸2 min，然后將丙酮傾棄。

（2）再向該試管中重新加入5-8 ml丙酮并煮沸2min。如此

重復(fù)3-4次。

3、浸蠟：將已經(jīng)丙酮脫水的組織塊由試管中取出，用吸水紙去除其表面液體，隨即臵入75~80℃熔化的石蠟中，待組織塊下沉、不再出現(xiàn)氣泡時（約需30s），即可包埋。

4、包埋、切片和染色。

（1）用熱鑷子將預(yù)制的蠟塊表面熔化，埋入已經(jīng)浸蠟的組織塊。

（2）待埋入組織塊的蠟塊表面凝固后，即用載玻片輕壓蠟塊表面片刻，使蠟塊表面平整。

（3）將蠟塊臵入冰水中，使其變硬。

（4）迅速切片，裱片后用吸水紙去除載玻片上的水分。

（5）將載玻片用火焰烘干（勿距火焰太近）。

（6）迅速進(jìn)行HE染色。

5、注意事項(xiàng)

（1）為了盡量縮短制片時間，必須預(yù)先作好有關(guān)準(zhǔn)備工作，備齊取材用具、試管、固定液、丙酮、酒精燈、火柴（或其他引火器）、包埋用蠟塊、載玻片和染色試劑等，放在固定部位待用。

（2）全部制片過程一般在20~25min內(nèi)完成。

（3）制片后剩余組織塊應(yīng)作常規(guī)石蠟包埋切片染色，進(jìn)一步診斷。

（4）含脂肪較多的組織，須經(jīng)多次丙酮處理。

（5）用于組織固定、脫水、透明的試劑和浸蠟用的石蠟應(yīng)及

時過濾、更換。

（6）丙酮、乙醇、二甲苯等為易燃物，進(jìn)行上述各項(xiàng)流程時，2m距離內(nèi)不得存在明火。加溫脫水和浸蠟過程必須應(yīng)用隔水溫箱，不得使用干烤箱操作。

㈡超聲波快速處理儀石蠟切片法（參照有關(guān)廠商的說明書操作）。

四、冷凍組織切片的制備

㈠應(yīng)用恒冷箱切片機(jī)制備切片：是目前最適用方法。恒冷箱切片機(jī)種類較多，應(yīng)嚴(yán)格按有關(guān)廠商的說明書操作。用于切片的標(biāo)本必須未曾固定。

㈡應(yīng)用開放式冷凍切片機(jī)制備切片

1、二氧化碳制冷切片

（1）將組織塊放在冷凍臺上，滴加OCT或羥甲基纖維素液于組織塊周圍（將組織塊包埋），使固定在切片機(jī)上的切片刀接近組織塊表面。

（2）間斷開放液態(tài)二氧化碳桶的開關(guān)，噴凍組織塊和切片刀，使組織塊凍結(jié)和切片刀制冷。

（3）迅速移動切片刀進(jìn)行切片：先將組織塊修平，然后調(diào)節(jié)厚度至8-12μm處進(jìn)行切片。

（4）用毛筆將切片展開，貼附于載玻片上，稍干后，臵于冷凍切片固定液中固定1min，隨即進(jìn)行HE染色。也可用毛筆將切片托入水中，再用玻璃彎針將切片移至染色皿中進(jìn)行染色。

43（5）組織塊也可先在4%中性甲醛中煮沸固定1min，水洗后再行冷凍切片。

㈢注意事項(xiàng)

1、制作冷凍切片所需的試劑和設(shè)備等應(yīng)處于隨時可供使用狀態(tài)。

2、切取的組織塊大小適宜（厚度<2mm），并盡快臵于冷凍組織切片機(jī)上制備切片。

3、調(diào)節(jié)冷凍程度，試切合適時便迅速切片。冷凍不足無法切片，冷凍過度切片易碎。

4、冷凍切片固定液（1）乙醚-乙醇液

無水乙醚

1份

95%乙醇

1份

（2）乙醇-冰醋酸液

95%乙醇

100ml

冰醋酸

3～5滴

第二節(jié) 細(xì)胞學(xué)診斷檢材的制備技術(shù)

一、細(xì)胞涂片、組織印片和壓片的制備

（一）涂片質(zhì)量的基本要求

1、將檢材涂布于載玻片的右（或左）2/3處，另1/3部位粘貼標(biāo)簽。

2、單向涂布檢材，避免細(xì)胞變形。

3、均勻涂布檢材，涂片厚薄適當(dāng)。

4、紅細(xì)胞過多的涂片，可酌情進(jìn)行溶解紅細(xì)胞處理。

（二）涂片方法

1、涂抹法：用棉簽或針頭將標(biāo)本單向、均勻地涂抹于載玻片上。

2、拉片法：將一滴檢材臵于一張載玻片上，再用另一張載玻片疊加其上并予輕壓，再將該兩張載玻片朝反向拉動，從而獲得兩張涂片。

3、推片法：將一滴檢液臵于載玻片的右端，再用另一張窄邊光滑的載玻片作為推片，并以與滴液載玻片成40°夾角、自右向左勻力推動檢液，形成涂片。

（三）痰涂片的制作

1、送檢的痰液應(yīng)是由肺內(nèi)咳出，最好是清晨空腹時自肺內(nèi)深咳出的痰液。

2、核查無誤的收驗(yàn)痰液，應(yīng)立即制作涂片（通常為2～3張）。

3、用細(xì)簽或無鉤鑷子挑取痰液臵于載玻片上，并左右往復(fù)薄涂，隨即投入固定液中。

4、痰液中呈現(xiàn)下列性狀的成分可能含有癌細(xì)胞，應(yīng)注意挑取制作涂片：①血絲；②灰白色痰絲（形如白色細(xì)線，微細(xì)螺旋狀，牽引時可伸長）；③透明痰液（可拉成較長細(xì)絲）。［及時在細(xì)胞學(xué)檢查申請單上記錄痰液性狀］

5、檢查痰液中的腫瘤細(xì)胞，一般應(yīng)連續(xù)送檢3次。

（四）黏膜、皮膚表面刮?。ㄋ⑷?、拉取）物和分泌物的涂片的制作

1、陰道排出物、子宮頸刮取物涂片：通常由婦產(chǎn)科醫(yī)師將已制作、固定后的涂片送交病理科檢查。［注意由子宮頸外口上皮移行帶刮取細(xì)胞涂片］

2、支氣管鏡、胃鏡等內(nèi)腔鏡的黏膜刷取物涂片（黏膜刷片）：刷片通常由內(nèi)腔鏡醫(yī)師制作、固定后送交病理科檢查。

3、食管、胃拉網(wǎng)涂片：由食管拉出的套網(wǎng)氣囊適量放氣后，將氣囊套網(wǎng)在載玻片滾動涂片，尤應(yīng)將套囊上血絲、灰白色物制作涂片；涂片通常由有關(guān)臨床醫(yī)師將已制作、固定后的刷片送交病理科檢查。套網(wǎng)中的小塊組織可用來制作石蠟包埋切片。

4、眼、耳、鼻、咽、口腔、皮膚等處病變（潰瘍性病變等）的分泌物涂片。

（五）液體涂片的制作

液體標(biāo)本（檢材）包括乳頭溢液、胸水、腹水、尿液、胃液、腦脊液、穿刺液、沖洗液、灌注液等。除乳頭溢液外，其他液體檢材一般均應(yīng)先行離心（2000r/min，10～20min）后，取其沉淀物制作涂片；液體檢材也可用細(xì)胞涂片離心機(jī)（cytospin）直接制作細(xì)胞涂片。制作好的涂片應(yīng)立即固定和染色。［及時在細(xì)胞學(xué)檢查申請單上記錄液體標(biāo)本的性狀和數(shù)量］

液體標(biāo)本的離心沉淀物較多時，將制作涂片后剩余的沉淀物固定于4％中性甲醛中1h，然后用檫鏡紙或綢布將其包裹，制作石蠟

包埋切片。

1、胸水和腹水

（1）由患者體內(nèi)抽取的胸水或腹水應(yīng)盡快送交病理科驗(yàn)收，檢液量以200～500ml為宜。因故（例如遠(yuǎn)途）延時送達(dá)時，需在標(biāo)本中加入40%的甲醛（加入量為送檢胸水、腹水量的1/5），或加入等量的50％乙醇－生理鹽水。

（2）胸水、腹水的離心：采取容器底部的液體10ml（包括可能存在的沉淀物），移入離心管內(nèi)進(jìn)行離心。

（3）離心后，傾去全部上清液，將離心管底部含有沉淀物的液體搖勻并用吸管吸出適量，滴注于載玻片上，制作涂片。

2、尿液

（1）制作方法同胸、腹水。

（2）尿液含有膠狀物時，應(yīng)先將其除去。清除方法：用0.5ml/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)尿液Ph至6.0；離心后，傾去上清液，再向沉淀物中加入95%乙醇5～10ml／L（固定細(xì)胞），靜臵5min后加入蒸餾水并輕搖（溶去膠狀物）；再次離心后，取沉淀物制作涂片。檢查尿液中的腫瘤細(xì)胞，一般應(yīng)連續(xù)送檢3次。

3、胃液、胃沖洗液：制作方法同胸、腹水。

4、腦脊液

（1）制作方法同胸、腹水。

（2）腦脊液內(nèi)細(xì)胞一般較少，可用微孔濾膜過濾法、沉淀法或纖維捕捉法收集細(xì)胞，制作涂片。

5、沖洗液、灌洗液、穿刺液涂片的制作：參見上述的胸水、腹水項(xiàng)。

二、腫物細(xì)針穿刺物涂片的制備

（一）實(shí)施細(xì)針穿刺術(shù)前的準(zhǔn)備工作

1、實(shí)施細(xì)針穿刺術(shù)的病理醫(yī)師應(yīng)先了解患者臨床情況，向患者和/或患者授權(quán)人說明實(shí)施穿刺術(shù)的意義、局限性和其他相關(guān)問題等，取得患者和/或患方的知情和理解，并簽署由各醫(yī)院制訂的《申請實(shí)施細(xì)針穿刺術(shù)細(xì)胞病理學(xué)診斷患方知情同意書》。

2、合格的手術(shù)操作環(huán)境。

3、必備的適用手術(shù)器械和其他相關(guān)設(shè)施。

（二）腫物穿刺術(shù)的操作要點(diǎn)：

1、確認(rèn)腫物部位并估計(jì)其大小、與皮表距離和質(zhì)地（實(shí)／囊性、硬度等），以指導(dǎo)穿刺的方向、深度和用力程度。

2、必須嚴(yán)格實(shí)行無菌操作。

3、根據(jù)腫物大小及其血供情況選擇適用型號的穿刺用針頭。穿刺用針頭的外徑為0.6～0.9mm，安臵在2ml或10ml的一次性空注射器上。

4、針吸法穿刺術(shù)操作要點(diǎn)

（1）進(jìn)行穿刺前，先將安裝了穿刺用針頭的空注射器管芯外拉2cm；然后，用手固定腫物，將安裝在空注射器上的穿刺用針頭刺入腫物（注射器內(nèi)無空氣）。

（2）迅速上下提插注射器管芯10～20次（其間變換針頭方向

3～4次），遂使腫物不同部位的多較內(nèi)容吸進(jìn)入針頭和注射器內(nèi)。

（3）將注射器與針頭分離（管內(nèi)負(fù)壓因而解除）；隨后，再將該注射器與仍插于腫物內(nèi)的針頭相接，拔出針頭，穿刺結(jié)束。

（4）迅速推動注射器的管芯，盡快地將位于穿刺針頭內(nèi)的少量吸出物排射在2～3張清潔的載玻片上，進(jìn)行涂片。

5、涂片方法：用針頭將載玻片上的吸出物輕輕均勻撥開，或用推片法朝一個方向展開（不可雙向往返推移）。

6、吸出物過少時，可用向離心管內(nèi)沖洗穿刺針頭；再將沖洗液離心，然后取其沉淀物涂片［參見上述一

（五）項(xiàng)“液體涂片的制作”］。

7、吸出物較多時，可適量50％乙醇－生理鹽水液將涂片后注射器和針頭內(nèi)剩余的吸出物沖洗至離心管中，離心后，取其沉淀物制作常規(guī)石蠟包埋切片。

8、吸出物中含有細(xì)小組織塊時，應(yīng)將其制作常規(guī)石蠟包埋切片。

9、內(nèi)臟腫物穿刺時，必須在影象學(xué)檢查的引導(dǎo)下用較長細(xì)針進(jìn)行穿刺。

10、穿刺操作完成后，即在細(xì)胞病理學(xué)檢查單上書寫穿刺記錄。

三、組織印片、壓片的制備

（一）組織印片：

1、用鋒利刀片剖開剛切取的新鮮腫瘤組織或淋巴結(jié)等，然后用清潔載玻片輕壓于組織剖面處，將組織表面的細(xì)胞成分印在玻片上。用稍微加溫的載玻片制備印片時，可印得較多細(xì)胞。

2、制作淋巴結(jié)印片前，應(yīng)先用濾紙吸去淋巴結(jié)切面上的血液、組織液。

（二）壓片：

1、選取微小薄片組織平鋪于一張載玻片上，再用另一張載玻片疊加其上并予輕壓。

2、腦組織質(zhì)軟，易于制作壓片；稍硬的組織需切成細(xì)碎薄片制作壓片。

四、涂片的固定

（一）用于HE染色和巴氏染色的涂片必須濕固定，即涂片后立即進(jìn)行固定。乳頭溢液涂片和液體標(biāo)本離心沉淀物涂片，應(yīng)待涂膜潮干（即周膜稍干而其中央?yún)^(qū)域未干）時進(jìn)行固定。用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆薩染色和免疫細(xì)胞化學(xué)染色的涂片，必須干固定，即待涂片稍干后再進(jìn)行固定。

（二）固定液

1、乙醇－冰醋酸液：95%乙醇∶冰醋酸＝99∶1。常用。

2、乙醇－乙醚液：95%乙醇49.5ml, 乙醚49.5ml, 冰醋酸1ml。較常用。

3、甲醇：滴加在干燥涂片上，用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆薩染色和免疫細(xì)胞化學(xué)染色。