第一篇：實(shí)驗(yàn)室小浮選實(shí)驗(yàn)方法

試驗(yàn)室小浮選試驗(yàn)方法

一 試驗(yàn)步驟 調(diào)試浮選機(jī)，使轉(zhuǎn)速、充氣量達(dá)到規(guī)定值。2 稱量煤樣(稱準(zhǔn)到0.1克)（144g）。向浮選機(jī)內(nèi)先加入約1/3容積的水，使水位達(dá)到第一道標(biāo)線。開動(dòng)浮選機(jī)，加入稱好的干煤樣。待攪拌至煤全部潤(rùn)濕后再加入清水，使礦漿液面達(dá)到第二道標(biāo)線。礦漿凈體積約1.5升。開動(dòng)計(jì)時(shí)器。預(yù)攪拌兩分鐘后，向礦漿液面下加入預(yù)先量好體積的捕收劑，1分鐘后，再向礦漿頁面下加入預(yù)先量好體積的起泡劑。10秒鐘后，以30次/分的速度，沿浮選槽整個(gè)泡沫生成面，按一定的刮泡深度刮泡3分鐘，泡沫產(chǎn)品集中于一個(gè)器皿中。要控制補(bǔ)水速度，使在整個(gè)刮泡期間保持礦漿液面恒定。刮泡階段后期，應(yīng)用洗瓶將粘在浮選槽壁上的顆粒清洗至礦漿中 3分鐘后，關(guān)閉浮選機(jī)，并停止補(bǔ)水，把尾煤排放至專門容器內(nèi)。粘在浮選槽壁上的顆粒要清洗至尾煤容器中。粘在刮板及浮選槽唇邊的顆粒應(yīng)清洗至精煤產(chǎn)品中。向浮選槽加人清水，并開動(dòng)浮選機(jī)攪拌清洗直至浮選槽干凈為止。

注 ：各道浮選工序操作時(shí)間要嚴(yán)格按照上述規(guī)定執(zhí)行，誤差不超過兩秒。精煤和尾煤分別脫水（過濾），置于不超過75℃的恒溫干燥箱中進(jìn)行干操。冷卻至空氣干燥狀態(tài)后，分別稱重、測(cè)定灰分，必要時(shí)(當(dāng)浮選人料硫分超過1%時(shí))測(cè)定硫分。重復(fù)試驗(yàn)一次。

二 試驗(yàn)注意事項(xiàng) 精煤和尾煤重最之和(即計(jì)算入料重量)與實(shí)際浮選人料重量相比，其損失率不得超過2%，2浮選入料的加權(quán)平均灰分與化驗(yàn)灰分之差應(yīng)符合下列規(guī)定: a.煤樣灰分小于20%時(shí)，相對(duì)誤差不得超過士5%，b．煤樣灰分大于或等于20%時(shí)，絕對(duì)誤差不得超過±0.5%。3 兩次平行試驗(yàn)的精煤產(chǎn)率允許誤差應(yīng)小于或等于1.6%。精煤灰分允許誤差:當(dāng)精煤灰分小于或等于10%時(shí)，絕對(duì)誤差小于或等于0.4%，當(dāng)精煤灰分大于10%時(shí)，小于或等于0.5%。4 試驗(yàn)過程中的加藥時(shí)間要控制好。

第二篇：實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)教師崗位職責(zé)

實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)教師崗位職責(zé)

1、實(shí)驗(yàn)教師要根據(jù)學(xué)校的學(xué)期工作計(jì)劃和教研組的教學(xué)進(jìn)度計(jì)劃，制定本學(xué)科的實(shí)驗(yàn)教學(xué)工作學(xué)期計(jì)劃。

2、根據(jù)本學(xué)科教材的要求，要保證全部演示實(shí)驗(yàn)和學(xué)生分組實(shí)驗(yàn)的正常開出，并認(rèn)真落實(shí)各項(xiàng)制度。

3、實(shí)驗(yàn)教師要刻苦鉆研業(yè)務(wù)。要通讀本學(xué)科教材，熟練掌握本學(xué)科全部演示實(shí)驗(yàn)和學(xué)生分組實(shí)驗(yàn)的操作技術(shù)，并對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象做出恰當(dāng)?shù)睦碚摻忉尅?/p>

4、要按時(shí)開出實(shí)驗(yàn)課，積極協(xié)助任課教師輔導(dǎo)好學(xué)生的實(shí)驗(yàn)課，保證實(shí)驗(yàn)課正常進(jìn)行，并認(rèn)真填寫好實(shí)驗(yàn)記錄單。

5、與任課教師一起組織好學(xué)生的科技活動(dòng)、實(shí)驗(yàn)競(jìng)賽、實(shí)驗(yàn)復(fù)習(xí)和考評(píng)工作，為學(xué)生實(shí)驗(yàn)技能的訓(xùn)練和提高，提供有效的服務(wù)。

6、熟悉實(shí)驗(yàn)室、儀器室、準(zhǔn)備室的管理規(guī)則，熟悉儀器業(yè)務(wù)知識(shí)，及時(shí)編報(bào)儀器采購(gòu)計(jì)劃，對(duì)儀器要精心管理，科學(xué)存放，及時(shí)維護(hù)。掌握一套檢測(cè)和維修的過硬本領(lǐng)，保證儀器的完好率，要適應(yīng)新科學(xué)、新技術(shù)在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中應(yīng)用的新形勢(shì)，不斷更新自己的業(yè)務(wù)知識(shí)。

7、要積極開展實(shí)驗(yàn)教學(xué)研究活動(dòng)，不斷改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法，提高實(shí)驗(yàn)效果，大力開展自制教具的研制活動(dòng)，積極自制，代用和改進(jìn)教具，創(chuàng)造條件，多開實(shí)驗(yàn)。

8、注意培養(yǎng)學(xué)生良好的、科學(xué)的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，要求他們遵守實(shí)驗(yàn)室紀(jì)律，愛護(hù)設(shè)備，精心使用儀器，體現(xiàn)文明禮貌的作風(fēng)。

9、做好實(shí)驗(yàn)室、儀器室、準(zhǔn)備室的衛(wèi)生工作、安全防范和財(cái)產(chǎn)保護(hù)工作，熟悉防火器材的使用，經(jīng)常檢查安全措施的落實(shí)情況。根據(jù)儀器設(shè)備性能，定期完成維修保養(yǎng)工作。

10、調(diào)進(jìn)或調(diào)出實(shí)驗(yàn)室，要辦好交接手續(xù)，及時(shí)完成教學(xué)儀器帳目管理任務(wù)，帳目清楚，實(shí)物點(diǎn)清，以保證實(shí)驗(yàn)室工作正常進(jìn)行。

實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)則

一、實(shí)驗(yàn)前，學(xué)生要做好預(yù)習(xí)準(zhǔn)備。

二、在實(shí)驗(yàn)過程中，要仔細(xì)觀察各種實(shí)驗(yàn)的情況。作好記錄，認(rèn)真填寫好實(shí)驗(yàn)報(bào)告。要求自己清楚，數(shù)據(jù)、曲線、表格應(yīng)該按規(guī)定格式填寫、描述。在規(guī)定時(shí)間內(nèi)上交。

三、實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)注意安全，使用玻璃儀器時(shí)，當(dāng)心割破手指。使用易爆、易燃、腐蝕性、有毒性試劑時(shí)，應(yīng)該、聽從指導(dǎo)老師的指導(dǎo)，嚴(yán)格操作步驟。防止以外事故的發(fā)生。

四、用過的藥品、試液應(yīng)集中到在規(guī)定的桶內(nèi)，不得亂倒亂拋，保持實(shí)驗(yàn)室的清潔、衛(wèi)生。

五、實(shí)驗(yàn)完畢后，洗干凈所用過的實(shí)驗(yàn)器材并整理好，擺放整齊。

六、室內(nèi)要盡量做好防塵、防潮、防磁場(chǎng)等。

實(shí)驗(yàn)員職責(zé)

一、忠誠(chéng)黨的教育事業(yè)，熱愛本職工作，樹立全心全意為教學(xué)服務(wù)的思想。認(rèn)真學(xué)習(xí)教學(xué)大綱和教材，刻苦鉆研業(yè)務(wù)，積極參加業(yè)務(wù)進(jìn)修，不斷提高管理水平和實(shí)驗(yàn)技能。

二、積極參加教研組活動(dòng)，熟悉所管年級(jí)的教材和各種實(shí)驗(yàn)。開學(xué)初主動(dòng)向任課教師了解本學(xué)期的實(shí)驗(yàn)計(jì)劃，每學(xué)期把它們按年級(jí)、按章節(jié)寫出實(shí)驗(yàn)一覽表，做到心中有數(shù)，及時(shí)準(zhǔn)備。

三、建立健全教學(xué)儀器、設(shè)備、藥品的保管、使用帳目，做到進(jìn)出、缺損、消耗登記，做到賬物相符，儀器、設(shè)備擺放有條理、科學(xué)、美觀。努力做到三清：賬卡清、數(shù)量清、質(zhì)量清。四懂：懂性能、用途、操作、維修保養(yǎng)。經(jīng)常檢查儀器設(shè)備情況及存在的問題，及時(shí)匯報(bào)和解決。保證儀器、模型、標(biāo)本等的完好率。

四、根據(jù)教學(xué)計(jì)劃，獨(dú)立地提前做好學(xué)生實(shí)驗(yàn)及演示實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工作，保證實(shí)驗(yàn)按時(shí)完成。課前認(rèn)真?zhèn)浜媒贪福e極協(xié)助教師輔導(dǎo)學(xué)生上好實(shí)驗(yàn)課。實(shí)驗(yàn)完畢，認(rèn)真驗(yàn)收儀器，標(biāo)本等設(shè)備。認(rèn)真填寫實(shí)驗(yàn)記錄。

五、對(duì)易燃、易爆、劇毒等危險(xiǎn)品的存放、保管、使用，要按公安部門規(guī)定嚴(yán)格管理，并做好實(shí)驗(yàn)室的防火、防盜工作，確保師生的人身安生，保護(hù)好國(guó)家財(cái)產(chǎn)。

六、協(xié)助教師積極開展科技實(shí)驗(yàn)，自制教具和儀器維修等活動(dòng)，培養(yǎng)學(xué)生愛科學(xué)、學(xué)科學(xué)、用科學(xué)的積極性。

七、加強(qiáng)責(zé)任感，以身作則，嚴(yán)格遵守教學(xué)儀器使用、保養(yǎng)的規(guī)章制度。堅(jiān)持原則，對(duì)違犯規(guī)章制度的行為敢于制止。

八、每學(xué)期初，制定實(shí)驗(yàn)室工作計(jì)劃，期末總結(jié)實(shí)驗(yàn)室工作情況、任課教師實(shí)驗(yàn)情況、儀器使用情況及存在的問題，制定下學(xué)期購(gòu)物計(jì)劃。

九、搞好室內(nèi)衛(wèi)生，加強(qiáng)防火、防盜、防破壞安全措施，確保安全。

十、認(rèn)真遵守實(shí)驗(yàn)員守則，遵守作息制度，加強(qiáng)政治學(xué)習(xí)。努力提高工作能力及思想水平。

實(shí)驗(yàn)室學(xué)生實(shí)驗(yàn)守則

1、做分組實(shí)驗(yàn)是學(xué)生理論聯(lián)系實(shí)際的重要手段，對(duì)提高學(xué)生的觀察能力、操作能力、分析和解決問題的能力有重要作用。因此，每個(gè)學(xué)生必須高度重視實(shí)驗(yàn)課，珍惜每一堂實(shí)驗(yàn)課。

2、學(xué)生在實(shí)驗(yàn)前要認(rèn)真作好預(yù)習(xí)，明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、要求、原理、步驟以及實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容和注意事項(xiàng)。不預(yù)習(xí)不準(zhǔn)作實(shí)驗(yàn)。

3、進(jìn)實(shí)驗(yàn)室時(shí)要保持良好秩序，按實(shí)驗(yàn)小組順序就座，實(shí)驗(yàn)時(shí)要遵守紀(jì)律，不準(zhǔn)喧嘩、不打鬧。

4、實(shí)驗(yàn)開始前要認(rèn)真聽取教師講解有關(guān)實(shí)驗(yàn)問題，看清教師的示范。

5、實(shí)驗(yàn)開始須首先檢查實(shí)驗(yàn)用品是否齊全，如發(fā)現(xiàn)短缺或損壞，及時(shí)向教師報(bào)告。

6、實(shí)驗(yàn)過程中，要嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)步驟，操作要規(guī)范，儀器的連接和安裝要穩(wěn)固，取用藥品要適量，接通電源，點(diǎn)火加熱，接觸藥品或動(dòng)力時(shí)要注意安全。實(shí)驗(yàn)時(shí)如發(fā)現(xiàn)異?，F(xiàn)象或儀器損壞等情況后，立即停止實(shí)驗(yàn)并及時(shí)向教師報(bào)告，不得擅自處理。

7、實(shí)驗(yàn)過程中要認(rèn)真觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，仔細(xì)分析思考，實(shí)事求是做實(shí)驗(yàn)記錄。

8、實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)要切斷電源、水源、火源等，清洗容器，清理實(shí)驗(yàn)用品并擺放整齊，遇有損壞、丟失儀器時(shí)應(yīng)及時(shí)報(bào)告。廢液要倒入廢液缸，其它廢物扔入垃圾箱，嚴(yán)禁將廢液倒入水槽中，經(jīng)教師檢查允許后，方可離開實(shí)驗(yàn)室。

9、實(shí)驗(yàn)要注意安全，節(jié)約水電及實(shí)驗(yàn)材料，要愛護(hù)室內(nèi)一切設(shè)施和用品，未經(jīng)允許不得擅自動(dòng)用，要保持實(shí)驗(yàn)室的清潔，不要亂扔碎紙和雜物，下課時(shí)輪班值日，打掃衛(wèi)生。

10、實(shí)驗(yàn)課后要及時(shí)寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告，對(duì)失敗的實(shí)驗(yàn)要申請(qǐng)重（補(bǔ)）做。

第三篇：實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證方法

實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證方法

第一條 為建立規(guī)范的安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)能力驗(yàn)證工作機(jī)制，根據(jù)國(guó)家安全生產(chǎn)監(jiān)督管理總局（以下簡(jiǎn)稱國(guó)家總局）賦予省級(jí)煤礦安全生產(chǎn)監(jiān)察局的職責(zé)，制定本辦法。

第二條 本辦法所稱的能力驗(yàn)證，是指利用實(shí)驗(yàn)室間指定檢測(cè)數(shù)據(jù)的比對(duì)，確定實(shí)驗(yàn)室從事特定測(cè)試活動(dòng)的技術(shù)能力。

第三條 能力驗(yàn)證活動(dòng)應(yīng)當(dāng)遵循科學(xué)合理、操作可行、非營(yíng)利性和避免不必要的重復(fù)驗(yàn)證的原則。

第四條 安徽煤礦安全生產(chǎn)監(jiān)察局依照有關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、國(guó)際準(zhǔn)則制定有關(guān)實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證工作的基本規(guī)范和實(shí)施規(guī)則，統(tǒng)一監(jiān)管和綜合協(xié)調(diào)能力驗(yàn)證活動(dòng)。

第五條 能力驗(yàn)證的組織者應(yīng)當(dāng)建立并保存能力驗(yàn)證檔案及相關(guān)記錄，包括：

（一）實(shí)施能力驗(yàn)證的有關(guān)文件；

（二）能力驗(yàn)證的提供者的資質(zhì)證明；

（三）能力驗(yàn)證的組織者對(duì)能力驗(yàn)證的提供者的確認(rèn)記錄；

（四）能力驗(yàn)證的參加者名單；

（五）能力驗(yàn)證的技術(shù)報(bào)告；

（六）能力驗(yàn)證結(jié)果和后續(xù)處理文件。

第六條 能力驗(yàn)證的組織者應(yīng)當(dāng)于每年年底向國(guó)家總局報(bào)告下一的能力驗(yàn)證計(jì)劃，包括：名稱、目的、能力驗(yàn)證的內(nèi)容和關(guān)鍵技術(shù)要素設(shè)計(jì)、組織單位、實(shí)施時(shí)間、擬參加實(shí)驗(yàn)室的范圍和數(shù)量、能力驗(yàn)證提供者的資質(zhì)證明和審核材料等。

第七條 能力驗(yàn)證的提供者應(yīng)當(dāng)符合相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或者技術(shù)規(guī)范的要求，其技術(shù)能力在相應(yīng)領(lǐng)域和關(guān)鍵技術(shù)要素方面領(lǐng)先，并具備可持續(xù)性。

第八條 安徽煤礦安全生產(chǎn)監(jiān)察局組織有關(guān)方面專家，對(duì)能力驗(yàn)證的提供者是否符合相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或者技術(shù)規(guī)范的要求進(jìn)行評(píng)價(jià)。符合要求的，省局確定其作為能力驗(yàn)證的提供者。

省局鼓勵(lì)能力驗(yàn)證的組織者利用經(jīng)過國(guó)家認(rèn)監(jiān)委確定的能力驗(yàn)證的提供者。

第九條 能力驗(yàn)證的參加者應(yīng)當(dāng)向能力驗(yàn)證的組織者及時(shí)反饋相關(guān)信息，并保存相關(guān)記錄。

能力驗(yàn)證結(jié)果離群的，應(yīng)當(dāng)采取相應(yīng)的糾正措施。

第十條 能力驗(yàn)證的組織者應(yīng)當(dāng)及時(shí)向國(guó)家總局通報(bào)能力驗(yàn)證計(jì)劃的完成情況、能力驗(yàn)證結(jié)果、后續(xù)處理措施等有關(guān)事項(xiàng)。

第十一條

第十二條 省局在能力驗(yàn)證活動(dòng)完成后向有關(guān)方面通報(bào)能力驗(yàn)證活動(dòng)的結(jié)果。同時(shí)向社會(huì)報(bào)告能力驗(yàn)證結(jié)果，定期公布能力驗(yàn)證滿意結(jié)果的實(shí)驗(yàn)室名單。

第十三條 達(dá)到滿意結(jié)果的安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)和能力驗(yàn)證的提供者，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)接受安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審時(shí)，可以免于該項(xiàng)目的現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)。

鼓勵(lì)各有關(guān)方面利用能力驗(yàn)證的結(jié)果，優(yōu)先推薦或者選擇達(dá)到滿意結(jié)果的安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)承擔(dān)省局委托、授權(quán)或者指定的檢驗(yàn)檢測(cè)任務(wù)。

第十四條 能力驗(yàn)證的組織者應(yīng)當(dāng)對(duì)能力驗(yàn)證的提供者和能力驗(yàn)證的實(shí)施過程實(shí)施有效管理。

第十五條 對(duì)于能力驗(yàn)證的結(jié)果可疑或者離群的安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)機(jī)構(gòu)，能力驗(yàn)證的組織者應(yīng)當(dāng)要求其在規(guī)定期限內(nèi)進(jìn)行整改并驗(yàn)證整改效果，也可視情況暫?；蛘叱蜂N其相關(guān)項(xiàng)目的資質(zhì)認(rèn)定或者認(rèn)可，暫停其承擔(dān)省局授權(quán)、委托或者指定的檢驗(yàn)檢測(cè)任務(wù)的資格，直到完成糾正活動(dòng)并經(jīng)能力驗(yàn)證的組織者確認(rèn)后，方可恢復(fù)或者重新獲得認(rèn)可以及承擔(dān)省局授權(quán)、委托或者指定的檢驗(yàn)檢測(cè)任務(wù)的資格。

第十六條 能力驗(yàn)證的提供者違反職業(yè)道德，弄虛作假或者泄露機(jī)密的，省局應(yīng)當(dāng)取消其承擔(dān)能力驗(yàn)證的提供者的資格。

能力驗(yàn)證的參加者弄虛作假、進(jìn)行串通，經(jīng)查屬實(shí)的，能力驗(yàn)證組織者視其結(jié)果為不滿意。情節(jié)惡劣的，省局應(yīng)當(dāng)取消其相應(yīng)項(xiàng)目的檢測(cè)資質(zhì)資格，并報(bào)告國(guó)家總局備案。

第十七條 省局可以采取組織專家評(píng)議、向?qū)嶒?yàn)室征求意見、抽查檔案、要求能力驗(yàn)證的組織者和提供者報(bào)告能力驗(yàn)證的實(shí)施情況等方式，對(duì)實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證活動(dòng)進(jìn)行監(jiān)督。

第十八條 能力驗(yàn)證的參加者對(duì)能力驗(yàn)證的結(jié)果有異議的，可以向能力驗(yàn)證組織者進(jìn)行申訴；對(duì)違規(guī)行為可以向能力驗(yàn)證組織者或者國(guó)家總局進(jìn)行投訴。

第十九條 下列用語的含義：

本辦法所稱能力驗(yàn)證的提供者，是指從事能力驗(yàn)證的設(shè)計(jì)和實(shí)施的安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)。

本辦法所稱能力驗(yàn)證的參加者，是指參加實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)，以確定校準(zhǔn)或者檢測(cè)能力的安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)。

本辦法所稱的結(jié)果可疑，是指按照有關(guān)的技術(shù)統(tǒng)計(jì)方法確定的能力驗(yàn)證結(jié)果界于標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)可值（或者中位值）之間的結(jié)果。

本辦法所稱的離群（即結(jié)果離群），是指按照有關(guān)的技術(shù)統(tǒng)計(jì)方法確定的明顯偏離標(biāo)準(zhǔn)值（或者中位值）的結(jié)果。

第二十一條 本辦法由安徽煤礦安全生產(chǎn)監(jiān)察局負(fù)責(zé)解釋。

第二十二條 本辦法自二0一三年十二月一日起施行。

第四篇：《梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷方法》

梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷

梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要有顯微鏡檢查法和血清學(xué)檢測(cè)法。

一、顯微鏡檢查法

（一）暗視野顯微鏡檢查

【基本原理】

梅毒硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損的滲出液涂片，以及淋巴結(jié)穿刺液涂片等，在暗視野顯微鏡下，光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發(fā)出亮光，從而可根據(jù)其特殊形態(tài)和運(yùn)動(dòng)方式進(jìn)行檢測(cè)。

【儀器材料】

1．暗視野顯微鏡。

2．鈍刀（刮勺）、載玻片、蓋玻片、注射器具、無菌生理鹽水。

【標(biāo)本采集】

1．皮膚黏膜組織液：無菌生理鹽水浸濕的棉拭子擦去皮損表面的污物，鈍刀輕刮、擠壓皮損表層，取滲出液與預(yù)先滴加在載玻片上的生理鹽水混合后加蓋玻片鏡檢。

2．淋巴液：無菌操作下穿刺淋巴結(jié)，注入生理鹽水并反復(fù)抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于載玻片上，加蓋玻片鏡檢。

【操作步驟】

1．加鏡油：在暗視野顯微鏡的聚光器上滴加鏡油。

2．聚光：將標(biāo)本玻片置載物臺(tái)上，上升聚光器使鏡油接觸載玻片底面。

3．鏡檢：在鏡下觀察，尋找有特征形態(tài)和運(yùn)動(dòng)方式的梅毒螺旋體。

【結(jié)果判讀】

XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX、告XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX梅毒螺旋體在暗視野顯微鏡鏡下表現(xiàn)為纖細(xì)、白色、有折光的螺旋狀微生物，長(zhǎng)5～20mm，直徑小于0.2mm，有6～12個(gè)螺旋，具有旋轉(zhuǎn)、蛇行及伸縮等三種特征性的運(yùn)動(dòng)方式。暗視野顯微鏡下發(fā)現(xiàn)有上述特征的螺旋體為陽性結(jié)果。

【結(jié)果報(bào)告】

1．陽性：見到上述特征的梅毒螺旋體。

2．陰性：未見到上述特征的梅毒螺旋體。

【臨床意義】

1．暗視野顯微鏡檢查陽性,可確診梅毒。

2．螺旋體檢查是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最好方法，世界衛(wèi)生組織指定為性病實(shí)驗(yàn)室必備項(xiàng)目之一。

3．如未見到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性，應(yīng)復(fù)查和血清學(xué)檢查。

【注意事項(xiàng)】

1.取材時(shí)盡量避免出血，以免影響鏡下觀察。

2.取材后應(yīng)立即置暗視野顯微鏡下觀察。

3.鏡下觀察時(shí)應(yīng)注意與其他螺旋體相鑒別。

（二）鍍銀染色檢查

【基本原理】

梅毒螺旋體具有親銀性，可被銀溶液染色，從而可以在鏡下觀察到梅毒螺旋體。

【儀器材料】

1．顯微鏡。

2．羅吉氏固定液、鞣酸媒染劑、Fontana氏銀溶液。

【標(biāo)本采集】

1.皮膚黏膜組織液：無菌生理鹽水浸濕的棉拭子擦去皮損表面的污物，鈍刀輕刮、擠壓皮損表層，取滲出液涂片。

2．淋巴液：無菌操作下穿刺淋巴結(jié)，注入生理鹽水并反復(fù)抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于載玻片上。

【操作步驟】

1．涂片干燥：將標(biāo)本涂于干凈載玻片作一薄片，于空氣中自然干燥。

2．固定：用固定液將涂片固定2～3分鐘。

3．洗滌：用無水乙醇洗滌玻片上的油污。

4．媒染：加媒染劑于涂片上，微加熱產(chǎn)生蒸汽，染30秒。

5．銀染：水洗，加銀染液于涂片上，微加熱產(chǎn)生蒸汽，染30秒。

6．鏡檢：水洗、待干，用油鏡檢查。

【結(jié)果判讀】

顯微鏡下見到染成棕褐色的梅毒螺旋體為陽性結(jié)果。

【結(jié)果報(bào)告】

1．陽性：見到染成棕褐色梅毒螺旋體。

2．陰性：未見到染成棕褐色的梅毒螺旋體。

【臨床意義】

同暗視野顯微鏡檢查法。

【注意事項(xiàng)】

應(yīng)注意與其他螺旋體加以鑒別。

二、血清學(xué)檢測(cè)法

（一）非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)

非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)，包括性病研究實(shí)驗(yàn)室（VDRL）試驗(yàn)、快速血漿反應(yīng)素（RPR）環(huán)狀卡片試驗(yàn)、甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）等。

n

VDRL試驗(yàn)

【基本原理】

梅毒螺旋體感染人體后，宿主會(huì)產(chǎn)生抗類脂抗原的抗體（反應(yīng)素），與一定比例的心磷脂、卵磷脂及膽固醇混合物抗原反應(yīng)，可檢測(cè)梅毒患者血中的抗類脂抗原的抗體。

【儀器材料】

1.水平旋轉(zhuǎn)儀、顯微鏡。

2.試劑盒：VDRL抗原原液、VDRL緩沖液、抗原滴管及針頭、帶直徑14mm漆圈的玻璃反應(yīng)板、VDRL試驗(yàn)結(jié)果參照?qǐng)D片。

3.30mL平底玻璃小瓶、生理鹽水。

【標(biāo)本采集】

1.血清：抽取靜脈血，室溫靜止凝固后，分離新鮮血清。也可采用凍存的血清。

2.腦脊液：采用腰椎穿刺術(shù)獲得，應(yīng)由相關(guān)專業(yè)人員操作。

【操作步驟】

1.VDRL抗原配制。

2.VDRL玻片定性試驗(yàn)

（1）滅活：血清標(biāo)本56℃滅活30分鐘。

（2）吸樣：吸取0.05mL血清放入反應(yīng)板圈中，將血清涂布到整個(gè)圈內(nèi)。

（3）加抗原：用標(biāo)準(zhǔn)針頭加入1滴抗原。

（4）反應(yīng)：將反應(yīng)板置水平旋轉(zhuǎn)儀上旋轉(zhuǎn)4分鐘，〔(180±5)次/分鐘〕，立即置低倍顯微鏡下觀察。

3.VDRL定量試驗(yàn)

（1）加稀釋液：在圈內(nèi)加入0.05mL生理鹽水（根據(jù)需要確定稀釋度）。

（2）樣本稀釋：吸取0.05mL樣本與各圈中鹽水作系列稀釋并涂布整個(gè)圈內(nèi)。

（3）以下步驟同定性試驗(yàn)（2）～（4）。

【結(jié)果判讀】

凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)：

3＋

～

4＋：大的或中等大小的絮狀物，液體清亮

2＋：絮狀物較小，液體較清亮

1＋：絮狀物較小，均勻分布，液體混濁

±：抗原復(fù)合物顆粒稍粗

－：抗原顆粒均勻、細(xì)小

【結(jié)果報(bào)告】

1．定性試驗(yàn)：

（1）陽性：鏡下可見1＋～4＋的絮狀凝集物。

（2）陰性：不產(chǎn)生凝集反應(yīng)。

2．定量試驗(yàn)：

滴度：鏡下可見絮狀凝集物的血清最高稀釋倍數(shù)。

【臨床意義】

對(duì)一期、二期、潛伏期和晚期梅毒患者的敏感性分別為78%、100%、96%和71%。腦脊液VDRL陽性對(duì)神經(jīng)梅毒有診斷意義。

【注意事項(xiàng)】

1．VDRL用抗原需當(dāng)天配制。

2．試驗(yàn)反應(yīng)完畢，應(yīng)立即觀察結(jié)果。

n

RPR試驗(yàn)

【基本原理】

RPR試驗(yàn)是VDRL試驗(yàn)的一種改良方法。該法在心磷脂、卵磷脂和膽固醇等組成的抗原中加入活性炭顆粒，與待檢血清（漿）中的反應(yīng)素結(jié)合，形成肉眼可見的黑色絮狀物。

【儀器材料】

1．水平旋轉(zhuǎn)儀。

2．RPR試劑盒：RPR抗原、直徑為18mm圓圈的反應(yīng)卡片、抗原滴管、針頭。

【標(biāo)本采集】

1．血清：抽取靜脈血，室溫靜止凝固后，分離新鮮血清。也可采用凍存的血清。

2．血漿：各種抗凝劑制備的血漿。

【操作步驟】

1．定性試驗(yàn)

（1）

加樣：吸取0.05mL血清(漿)放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個(gè)圈內(nèi)。

（2）加抗原：將抗原輕輕搖勻，用9號(hào)針頭[每毫升（60±1）滴]加1滴抗原。

（3）反應(yīng)：將卡片置水平旋轉(zhuǎn)儀旋轉(zhuǎn)8分鐘[（100±5）轉(zhuǎn)/分鐘]。立即在亮光下觀察結(jié)果。

2．定量試驗(yàn)

（1）稀釋液準(zhǔn)備：在圈內(nèi)加入0.05mL生理鹽水（根據(jù)需要確定稀釋度），勿將鹽水涂開。

（2）加樣：吸取0.05mL血清（漿）與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布整個(gè)圈內(nèi)。

（3）同定性試驗(yàn)（2）～（4）。

【結(jié)果判讀】

凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)：

3＋

～

4＋：圓圈內(nèi)出現(xiàn)中到大的黑色絮狀物，液體清亮

2＋：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小到中的黑色絮狀物，液體較清亮

1＋：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小的黑色絮狀物，液體混濁

－：圓圈內(nèi)僅見碳顆粒集于中央一點(diǎn)或均勻分散

【結(jié)果報(bào)告】

1．定性試驗(yàn)：

（1）陽性：出現(xiàn)1＋～4＋強(qiáng)度的凝集反應(yīng)。

（2）陰性：不產(chǎn)生凝集反應(yīng)。

2．定量試驗(yàn)：

滴度：出現(xiàn)凝集反應(yīng)的血清最高稀釋倍數(shù)。

【臨床意義】

1．RPR試驗(yàn)適用于梅毒篩查、療效觀察、復(fù)發(fā)或再感染的檢查。

2．對(duì)未經(jīng)治療的一期、二期和潛伏梅毒患者的敏感性分別為86%、100%和98%。

【注意事項(xiàng)】

試驗(yàn)應(yīng)在23～29℃環(huán)境中進(jìn)行。

n

TRUST試驗(yàn)

TRUST試驗(yàn)是用甲苯胺紅顆粒代替RPR試驗(yàn)中的碳顆粒作為指示物，所以陽性結(jié)果為紅色絮狀物。其基本原理、儀器材料、標(biāo)本采集、操作步驟、結(jié)果判讀、結(jié)果報(bào)告、臨床意義及注意事項(xiàng)等與RPR試驗(yàn)基本相同。

（二）梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)

梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)是以梅毒螺旋體為抗原的特異性的抗原抗體反應(yīng)，用以檢測(cè)梅毒抗體，常用的方法有梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（TPPA）、梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)（TPHA）、熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）、梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA）和梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（TP-WB）等方法。

n

TPPA試驗(yàn)

【基本原理】

TPPA試驗(yàn)是用超聲裂解梅毒螺旋體制備的抗原，致敏明膠粒子，其致敏粒子與待檢血清中的抗梅毒螺旋體抗體結(jié)合，產(chǎn)生肉眼可見的凝集。

【儀器材料】

1.微量震蕩器。

2.試劑盒：“A”溶解用液、“B”標(biāo)本稀釋液、“C”致敏粒子、“D”未致敏粒子、“E”質(zhì)控血清。

3．U型反應(yīng)板。

【標(biāo)本采集】

同RPR試驗(yàn)。

【操作步驟】

1．試劑準(zhǔn)備：試驗(yàn)前將待檢樣本和試劑應(yīng)恢復(fù)到室溫。

2．加稀釋液：每份樣本做4孔，加B液至反應(yīng)孔內(nèi)，第1孔100μL，第2～4孔各25μL。

3．樣本稀釋：取血清25μL加至第1孔，混勻后取25μL至第2孔，連續(xù)倍比稀釋至第4孔，最后1孔混勻后棄去25μL。

4．加對(duì)照液：第3孔加D液25μL，第4孔加C液25μL。

5．混合：將反應(yīng)板置震蕩器震蕩30秒。

6．反應(yīng)：置濕盒內(nèi)，孵育2小時(shí)后，或放4℃冰箱過夜觀察結(jié)果。

【結(jié)果判讀】

觀察凝集反應(yīng)強(qiáng)度，分級(jí)如下：

4＋：

粒子光滑覆蓋整個(gè)孔底，有時(shí)邊緣有折疊

3＋：

粒子光滑覆蓋大部分孔底

2＋：

粒子光滑聚集覆蓋孔底，周圍有一細(xì)胞環(huán)

1＋：

粒子光滑集聚覆蓋孔底，周圍有一明顯細(xì)胞環(huán)

±：

粒子沉集孔底，中央形成一小點(diǎn)

－：

粒子緊密沉積孔底中央

【結(jié)果報(bào)告】

1．陽性：未致敏粒子不出現(xiàn)凝集（第3孔），血清1︰80以上稀釋與致敏粒子產(chǎn)生1＋～4＋凝集反應(yīng)。

2.陰性：未致敏粒子和致敏粒子均不產(chǎn)生凝集反應(yīng)。

【臨床意義】

1.TPPA可作為非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)(如RPR等)初篩陽性標(biāo)本的確證試驗(yàn)。

2．梅毒患者經(jīng)過抗梅治療后，TPPA試驗(yàn)仍可陽性，故TPPA試驗(yàn)陽性不能作為療效觀察的指標(biāo)。

3．TPPA陽性不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應(yīng)結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行診斷。

【注意事項(xiàng)】

1.試驗(yàn)結(jié)果為“可疑”時(shí)，應(yīng)選用其他的試驗(yàn)方法進(jìn)行復(fù)驗(yàn)。

2.如未致敏粒子出現(xiàn)凝集反應(yīng)，樣本進(jìn)行吸收后再進(jìn)行試驗(yàn)，或改用其他試驗(yàn)方法。

n

TPHA試驗(yàn)

【基本原理】

TPHA試驗(yàn)用超聲裂解的梅毒螺旋體菌體為抗原，致敏經(jīng)醛化、鞣化的羊或禽類紅細(xì)胞，與抗梅毒螺旋體抗體反應(yīng)，產(chǎn)生肉眼可見的抗原抗體凝集。

【儀器材料】

1.微量震蕩器。

2．TPHA試劑盒：“A”溶解用液、“B”標(biāo)本稀釋液、“C”致敏粒子、“D”

未致敏粒子、“E”質(zhì)控血清。

3.U型反應(yīng)板。

【標(biāo)本采集】

同RPR試驗(yàn)。

【操作步驟】

1．試劑準(zhǔn)備：試驗(yàn)前試劑恢復(fù)到15～25℃。

2．加稀釋液：加B液至反應(yīng)板，第1孔25mL，第2孔100mL，第3～5孔各加25mL。

3．樣本稀釋：取血清25mL加至第1孔，混勻后取25mL至第2孔，混勻后取25mL至第3孔，混勻后棄去25mL，再?gòu)牡?孔取25mL至第4孔，混勻后取25mL至第5孔，混勻后棄去25mL。

4．加對(duì)照液：第3孔加D液（未致敏細(xì)胞）75μL，第4、5孔加C液（致敏細(xì)胞）各75mL。

5．混合：將反應(yīng)板置震蕩器震蕩30秒。

6．反應(yīng)：置濕盒內(nèi)，15～25℃孵育4小時(shí)，或放4℃冰箱過夜觀察結(jié)果。

【結(jié)果判讀】

同TPPA試驗(yàn)。

【結(jié)果報(bào)告】

同TPPA試驗(yàn)。

【臨床意義】

同TPPA試驗(yàn)。

【注意事項(xiàng)】

有些采用禽類紅細(xì)胞為載體的TPHA試驗(yàn)，血清不用吸收，可直接進(jìn)行試驗(yàn)。

n

FTA-ABS試驗(yàn)

【基本原理】

以完整的梅毒螺旋體作為抗原，與經(jīng)吸收劑吸收的梅毒血清抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物，再加入熒光素（FITC）標(biāo)記的抗人免疫球蛋白，形成帶有熒光的抗原抗體復(fù)合物，在熒光顯微鏡下螺旋體顯出蘋果綠色熒光。

【儀器材料】

1．熒光顯微鏡。

2．試劑盒：梅毒螺旋體抗原片、吸收劑、熒光素標(biāo)記抗體、陽性對(duì)照血清、PBS緩沖液、固定劑。

3.血清稀釋板。

【標(biāo)本采集】

同VDRL試驗(yàn)。

【操作步驟】

1.血清滅活：將血清標(biāo)本于56℃滅活30分鐘，備用。

2.血清稀釋：待檢血清用吸收劑1：5稀釋，陽性血清及陰性血清分別用PBS緩沖液和吸收劑1:5稀釋。置37℃濕盒內(nèi)，30分鐘。

3.加樣：每次試驗(yàn)必須設(shè)PBS緩沖液、吸收劑、PBS液1︰5稀釋陽性和陰性血清及吸收劑1：5稀釋陽性和陰性血清共6個(gè)對(duì)照涂片。每個(gè)涂片分別加入10μL稀釋后的血清或緩沖液，置37℃濕盒內(nèi)，30分鐘。

4.洗滌：用PBS-

Tween-80液洗玻片2次，每次5分鐘，最后用蒸餾水洗一次，冷風(fēng)干燥。

5.加熒光抗體：每個(gè)涂片加10μL按要求稀釋的熒光抗體,置37℃濕盒內(nèi)30分鐘。

6.洗滌：同步驟4。

7.封片鏡檢：用固定劑封片，讀片。

【結(jié)果判讀】

1.陽性對(duì)照：無論P(yáng)BS緩沖液還是吸附劑稀釋，熒光強(qiáng)度應(yīng)相同。

2.陰性對(duì)照和空白對(duì)照：不產(chǎn)生熒光。

【結(jié)果報(bào)告】

1.陽性：熒光鏡下見到不同程度發(fā)綠色熒光的螺旋體。

2.陰性：無熒光或密螺旋體微顯淡綠色。

【臨床意義】

1.FTA-ABS是梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。

2．對(duì)未經(jīng)治療的一期、二期、潛伏梅毒和晚期梅毒患者的敏感性分別為84%、100%、100%和96%，特異性均可達(dá)97%。

3.其他同TPPA試驗(yàn)。

【注意事項(xiàng)】

1.抗原片每次洗滌要干凈，避免其他雜質(zhì)影響判讀結(jié)果。

2.試驗(yàn)需有高質(zhì)量熒光顯微鏡和技術(shù)熟練的操作人員。

n

TP-ELISA試驗(yàn)

【基本原理】

TP-ELISA試驗(yàn)是用包被在固相板條上經(jīng)超聲裂解、純化處理或重組的梅毒螺旋體抗原，與待檢血清中的梅毒特異性抗體結(jié)合，再與酶標(biāo)記的抗人免疫球蛋白單克隆抗體反應(yīng)，形成抗原抗體復(fù)合物而使底物顯色。

【儀器材料】

1.酶標(biāo)儀、洗板機(jī)。

2．試劑盒組成：96孔反應(yīng)板、標(biāo)本稀釋液、洗滌液、酶結(jié)合物、底物液、終止液、陽性對(duì)照、陰性對(duì)照。

【標(biāo)本采集】

同RPR試驗(yàn)

【操作步驟】

1.加稀釋液：取標(biāo)本稀釋液加到反應(yīng)板孔內(nèi)。

2.孵育：分別加入陽性、陰性對(duì)照和待檢血清，置37℃孵育一定時(shí)間,洗板。

3.加酶結(jié)合物：加酶結(jié)合物，置37℃孵育一定時(shí)間,洗板。

4.加顯色劑：加底物，37℃避光孵育。

5.終止反應(yīng)：加終止液，酶標(biāo)儀測(cè)OD（光密度）值。

【結(jié)果判讀】

1．每次試驗(yàn)的陽性、陰性對(duì)照應(yīng)在規(guī)定的數(shù)值范圍內(nèi)

2．根據(jù)陽性、陰性O(shè)D值設(shè)定閾值（cut-off值）。

【結(jié)果報(bào)告】

1．陽性：標(biāo)本OD值大于或等于cut-off值。

2．陰性：標(biāo)本OD值小于cut-off值。

【臨床意義】

（1）適用于流行病學(xué)調(diào)查或大樣本量標(biāo)本的檢測(cè)。

（2）ELISA陽性不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應(yīng)結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)(如RPR等)結(jié)果進(jìn)行診斷。

【注意事項(xiàng)】

1.不同批號(hào)試劑不能混用。

2.溫度和時(shí)間必須嚴(yán)格控制。

■

TP-WB試驗(yàn)

【基本原理】

用超聲粉碎的梅毒螺旋體或梅毒螺旋體重組的不同抗原，印跡至硝酸纖維膜條上。通過酶聯(lián)反應(yīng)，可檢測(cè)梅毒血清中多種特異抗原成分的抗體。

【儀器材料】

1.水平搖床。

2.試劑盒:硝酸纖維膜條、酶標(biāo)抗體、陽性質(zhì)控血清、陰性質(zhì)控血清、底物液、終止液、標(biāo)準(zhǔn)陽性反應(yīng)帶結(jié)果參比圖譜。

【標(biāo)本采集】

同RPR試驗(yàn)

【操作步驟】

1．反應(yīng)：每反應(yīng)槽加2.0mL工作緩沖液，浸濕膜條5分鐘，加入0.02mL待檢樣本，置水平搖床上(50轉(zhuǎn)/分)，18～25℃反應(yīng)45分鐘。

2．洗滌：棄去反應(yīng)槽中液體，加入

2.0mL工作緩沖液，置水平搖床洗滌3次，每次5分鐘。

3．加酶結(jié)合物：

加入酶標(biāo)抗體，置水平搖床反應(yīng)30分鐘。

4．洗滌：同步驟2。

5．顯色：每槽加2.0mL底物，置水平搖床上反應(yīng)8～10分鐘。

6．終止:

待陽性對(duì)照帶顯色清晰，加入1.0

mL終止劑2分鐘后棄去槽中液體，用蒸餾水洗2次，用鑷子取出反應(yīng)條，置濾紙上。

【結(jié)果判讀】

1．根據(jù)陽性結(jié)果參比圖譜判定結(jié)果。

2.將試驗(yàn)的硝酸纖維膜條上端標(biāo)記線與參比標(biāo)記線對(duì)齊。

3．觀察45KD、17KD及15.5KD帶區(qū)顯色帶。

【結(jié)果報(bào)告】

1．陽性：

45KD、17KD及15.5KD帶區(qū)均出現(xiàn)顯色帶。

2．陰性：

45KD、17KD及15.5KD三個(gè)條帶均未顯色。

【臨床意義】

1．同TPPA試驗(yàn)

2．可以用于檢測(cè)IgM或IgG抗體。

【注意事項(xiàng)】

1．洗滌要充分，否則易造成試驗(yàn)?zāi)l帶背景的顏色偏深。

2．硝酸纖維膜條有對(duì)照反應(yīng)條帶，在試驗(yàn)中應(yīng)顯示，如未顯示，則試驗(yàn)無效。

3．當(dāng)45KD、17KD及15.5KD中只有一個(gè)或兩個(gè)條帶出現(xiàn)明顯色帶為可疑結(jié)果，需重新試驗(yàn)。

n

快速免疫層析法

【基本原理】

利用免疫層析原理，采用吸附有顯色標(biāo)記的梅毒螺旋體重組抗原的濾紙條，快速檢測(cè)標(biāo)本中的梅毒螺旋體抗體。

【儀器材料】

試劑盒：測(cè)試板、一次性滴管。

【標(biāo)本采集】

同RPR試驗(yàn)，可用全血。

【操作步驟】

1．加樣：用一次性滴管滴加一定量標(biāo)本于加樣孔中。

2．加緩沖液：立即加入一定量的緩沖液。

3．觀察結(jié)果：規(guī)定時(shí)間內(nèi)判讀結(jié)果。

【結(jié)果判讀】

1.觀察質(zhì)控條帶,判斷試驗(yàn)有效性，如沒有出現(xiàn)質(zhì)控條帶，說明試驗(yàn)無效，需重復(fù)試驗(yàn)。

2．觀察標(biāo)本條帶。

【結(jié)果報(bào)告】

1．陽性:

出現(xiàn)標(biāo)本條帶和質(zhì)控條帶。

2．陰性：無標(biāo)本條帶，出現(xiàn)質(zhì)控條帶。

【臨床意義】

1．可以用于標(biāo)本的快速篩查。

2．快速檢測(cè)陽性不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應(yīng)結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)(如RPR等)結(jié)果進(jìn)行診斷。

【注意事項(xiàng)】

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出時(shí)，應(yīng)平衡至室溫后方可使用。

2．本試驗(yàn)方法存在一定的假陽性和假陰性。

三、其它方法

（一）梅毒IgM抗體的檢測(cè)

與其它細(xì)菌及病毒感染一樣，在梅毒中特異性IgM抗體的合成是第一次感染后的體液免疫應(yīng)答。在梅毒中螺旋體IgM抗體出現(xiàn)在早期梅毒患者中，在潛伏期及晚期患者也能發(fā)現(xiàn)。在自發(fā)痊愈的患者中IgM水平下降的速度比治療痊愈的患者慢。IgM分子大使其不能通過胎盤屏障及完整無損的血腦屏障。因此若在新生兒血中檢測(cè)到IgM抗體是兒童產(chǎn)前感染的診斷標(biāo)志；如在患者的完整無損的血腦屏障的腦脊液（CSF）中出現(xiàn)，則表示患有活動(dòng)性神經(jīng)梅毒。在最近未接受治療的患者血液中或CSF中出現(xiàn)抗梅毒IgM抗體均表示需要治療。

測(cè)定IgM抗體方法的基本原理是采用分離柱，使血清中的IgM和IgG按其分子量大小在分離過程中的沉降速度不同，將IgM和IgG分別收集，再進(jìn)行FTA-ABS等試驗(yàn)。亦可采用抗IgM單克隆抗體的酶標(biāo)法、蛋白質(zhì)印跡法等進(jìn)行檢測(cè)。目前測(cè)定IgM抗體的方法的敏感性還很不理想，但是檢查到IgM抗體則有助于對(duì)以下病例中的試驗(yàn)結(jié)果更可靠的解釋：先天性梅毒、早期一期梅毒、晚期梅毒、非梅毒螺旋體試驗(yàn)的血清陽轉(zhuǎn)前的早期感染患者的判愈試驗(yàn)及有梅毒史或其它螺旋體感染史患者的再感染。

（二）胎傳梅毒(或先天梅毒)的實(shí)驗(yàn)室診斷

具有下列實(shí)驗(yàn)室四個(gè)指標(biāo)之一，可診斷為胎傳梅毒(或先天梅毒)：①暗視野檢查梅毒螺旋體陽性；②患兒非梅毒螺旋體血清抗體滴度持續(xù)上升；③患兒非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗(yàn)結(jié)果比母親高4倍（低于或等于該值并不排除胎傳梅毒）；④患兒檢出19S-IgM抗體。

（三）神經(jīng)梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷

1．神經(jīng)梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)包括：①梅毒血清學(xué)檢查陽性；②腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)或蛋白測(cè)定結(jié)果異常；③腦脊液VDRL試驗(yàn)陽性。

2．腦脊液VDRL試驗(yàn)是神經(jīng)梅毒的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)，陽性結(jié)果可診斷為神經(jīng)梅毒，但該試驗(yàn)存在假陰性。

3．腦脊液的FTA－ABS試驗(yàn)陰性可排除神經(jīng)梅毒，但特異性不高，可能產(chǎn)生假陽性。

4．腦脊液檢查內(nèi)容

（1）細(xì)胞計(jì)數(shù)：正常時(shí)白細(xì)胞數(shù)應(yīng)小于3×106/L，若白細(xì)胞數(shù)大于10×106/L，提示中樞神經(jīng)系統(tǒng)有炎癥現(xiàn)象。

（2）蛋白質(zhì)量測(cè)定：總蛋白質(zhì)量正常為0.1～0.4g/L，神經(jīng)梅毒可稍升高，或高達(dá)1.0～2.0g/L。

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END

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第五篇：實(shí)驗(yàn)室意外情況及處理方法

1、著火

生化實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用大量的有機(jī)溶劑，如甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等，而實(shí)驗(yàn)室又經(jīng)常使用電爐等火源，因此極易發(fā)生著火事故。

閃點(diǎn)：液體表面的蒸汽和空氣的混合物在遇明火或火花時(shí)著火的最低溫度;自燃點(diǎn)：液體蒸汽在空氣中自燃時(shí)的溫度。

由上表可以看出，乙醚、二硫化碳、丙酮、和苯的閃點(diǎn)都很低，因此不得存于可能會(huì)產(chǎn)生電火花的普通冰箱內(nèi)。低閃點(diǎn)液體的蒸汽只需接觸紅熱物體的表面便會(huì)著火，其中二硫化碳尤其危險(xiǎn)。

2、預(yù)防火災(zāi)的操作規(guī)程

(1)嚴(yán)禁在開口容器和密閉體系中用明火加熱有機(jī)溶劑，只能使用加熱套或水浴加熱。(2)廢有機(jī)溶劑不得倒入廢物桶，只能倒入回收瓶，以后再集中處理。量少時(shí)用水稀釋后排入下水道。

(3)不得在烘箱內(nèi)存放、干燥、烘焙有機(jī)物。

(4)在有明火的實(shí)驗(yàn)臺(tái)面上不允許放置開口的有機(jī)溶劑或傾倒有機(jī)溶劑。

滅火方法

實(shí)驗(yàn)室中一旦發(fā)生火災(zāi)切不可驚慌失措，要保持鎮(zhèn)靜，根據(jù)具體情況正確地進(jìn)行滅火或立即報(bào)火警(火警電話119)。

(1)容器中的易燃物著火時(shí)，用玻璃纖維布滅火毯蓋滅。

(2)乙醇、丙酮等可溶于水的有機(jī)溶劑著火時(shí)可以用水滅火。汽油、乙醚、甲苯等有機(jī)溶劑著火時(shí)不能用水，只能用滅火毯和砂土蓋滅。

(3)導(dǎo)線、電器和儀器著火時(shí)不能用水和二氧化碳滅火器滅火，應(yīng)先切斷電源，然后用1211滅火器滅火。

(4)個(gè)人衣服著火時(shí)，切勿慌張奔跑，以免風(fēng)助火勢(shì)，應(yīng)迅速脫衣，用水龍頭澆水滅火，火勢(shì)過大時(shí)可就地臥倒打滾壓滅火焰。

3、爆炸 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室防止爆炸事故是極為重要的，因?yàn)橐坏┍ㄆ錃牧O大，后果將十分嚴(yán)重。生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的易燃物蒸汽在空氣中的爆炸極限(體積%)見表1—2。加熱時(shí)會(huì)發(fā)生爆炸的混合物有：有機(jī)化合物～氧化銅、濃硫酸～高錳酸鉀、三氯甲烷～丙酮等。常見的引起爆炸事故的原因有：①隨意混合化學(xué)藥品，并使其受熱、受摩擦和撞擊;②在密閉的體系中進(jìn)行蒸餾、回流等加熱操作;③在加壓或減壓實(shí)驗(yàn)中使用了不耐壓的玻璃儀器，或反過于激烈而失去控制;④易燃易爆氣體大量逸入室內(nèi);⑤高壓氣瓶減壓閥摔壞或失靈。

4、中毒

生化實(shí)驗(yàn)室常見的化學(xué)致癌物有：石棉、砷化物、鉻酸鹽、溴乙錠等。劇毒物有：氰化物、砷化物、乙腈、甲醇、氯化氫、汞及其化合物等。中毒的原因主要是由于不慎吸入、誤食或由皮膚滲入。

中毒的預(yù)防： ①保護(hù)好眼睛最重要，使用有毒或有刺激性氣體時(shí)，必須配戴防護(hù)眼鏡，并應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行;②取用毒品時(shí)必須配戴橡皮手套;③嚴(yán)禁用嘴吸移液管，嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)飲水、進(jìn)食、吸煙，禁止赤膊和穿拖鞋;④不要用乙醇等有機(jī)溶劑擦洗濺灑在皮膚上的藥品。

中毒急救的方法主要有：①誤食了酸或堿，不要催吐，可先立即大量飲水，誤食堿者再喝些牛奶，誤食酸者，飲水后再服Mg(OH)2乳劑，最后飲些牛奶;②吸入了毒氣，立即轉(zhuǎn)移室外，解開衣領(lǐng)，休克者應(yīng)施以人工呼吸，但不要用口對(duì)口法;③砷和汞中毒者應(yīng)立即送醫(yī)院急救。

5、外傷

(1)化學(xué)灼傷：

①眼睛灼傷或掉進(jìn)異物：眼內(nèi)濺入任何化學(xué)藥品，應(yīng)立即用大量水沖洗十五分鐘，不可用稀酸或稀堿沖洗。若有玻璃碎片進(jìn)入眼內(nèi)則十分危險(xiǎn)，必須十分小心謹(jǐn)慎，不可自取，不可轉(zhuǎn)動(dòng)眼球，可任其流淚，若碎片不出，則用紗布輕輕包住眼睛急送醫(yī)院處理。若有木屑、塵粒等異物進(jìn)入，可由他人翻開眼瞼，用消毒棉簽輕輕取出或任其流淚，待異物排出后再滴幾滴魚肝油。②皮膚灼傷：

酸灼傷：先用大量水洗，再用稀NaHCO3或稀氨水浸洗，最后再用水洗。堿灼傷：先用大量水沖洗，再用1%硼酸或2%醋酸浸洗，最后再用水洗。

溴灼傷：這很危險(xiǎn)，傷口不易愈合，一旦灼傷，立即用20%硫代硫酸鈉沖洗，再用大量水沖洗，包上消毒紗布后就醫(yī)。

(2)燙傷：使用火焰、蒸汽、紅熱的玻璃和金屬時(shí)易發(fā)生燙傷，應(yīng)立即用大量水沖洗和浸泡，若起水泡不可挑破，包上紗布后就醫(yī)，輕度燙傷可涂抹魚肝油和燙傷膏等。(3)割傷：

這是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常見的傷害，要特別注意預(yù)防，尤其是在向橡皮塞中插入溫度計(jì)、玻璃管時(shí)一定要用水或甘油潤(rùn)滑，用布包住玻璃管輕輕旋入，切不可用力過猛，若發(fā)生嚴(yán)重割傷時(shí)要立即包扎止血，就醫(yī)時(shí)務(wù)必檢查傷部神經(jīng)是否被切斷。

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)準(zhǔn)備一個(gè)完備的小藥箱，專供急救時(shí)使用。藥箱內(nèi)備有：醫(yī)用酒精、紅藥水、紫藥水、止血粉、創(chuàng)口貼、燙傷油膏(或萬花油)、魚肝油、1%硼酸溶液或2%醋酸溶液、1%碳酸氫鈉溶液、20%硫代硫酸鈉溶液、醫(yī)用鑷子和剪刀、紗布、藥棉、棉簽、繃帶等。

6、觸電

生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室要使用大量的儀器、烘箱和電爐等，因此每位實(shí)驗(yàn)人員都必須能熟練地安全用電，避免發(fā)生一切用電事故，當(dāng)50HZ 的電流通過人體25mA 電流時(shí)呼吸會(huì)發(fā)生困難，通過了100mA 以上電流時(shí)則會(huì)致死。

(1)防止觸電：①不能用濕手接觸電器;②電源裸露部分都應(yīng)絕緣;③壞的接頭、插頭、插座和不良導(dǎo)線應(yīng)及時(shí)更換;④先接好線路再插接電源，反之先關(guān)電源再拆線路;⑤儀器使用前要先檢查外殼是否帶電;⑥如遇有人觸電要先切斷電源再救人。

(2)防止電器著火：①保險(xiǎn)絲、電源線的截面積、插頭和插座都要與使用的額定電流相匹配;② 三條相線要平均用電;③生銹的電器、接觸不良的導(dǎo)線接頭要及時(shí)處理;④電爐、烘箱等電熱設(shè)備不可過夜使用;⑤儀器長(zhǎng)時(shí)間不用要拔下插頭，并及時(shí)拉閘;⑥電器、電線著火不可用泡沫滅火器滅火。