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      透射電鏡生物樣品前處理步驟

      時間:2019-05-13 16:57:49下載本文作者:會員上傳
      簡介:寫寫幫文庫小編為你整理了多篇相關(guān)的《透射電鏡生物樣品前處理步驟》,但愿對你工作學(xué)習(xí)有幫助,當(dāng)然你在寫寫幫文庫還可以找到更多《透射電鏡生物樣品前處理步驟》。

      第一篇:透射電鏡生物樣品前處理步驟

      透射電鏡樣品制備步驟 取材脫水劑梯度脫水丙酮/環(huán)氧丙烷臵換-加熱聚合超薄切片鈾鉛染色

      1、取材:4℃冰塊上迅速取材,1mm3大小,立即放入2.5%戊二醛溶液中固定2-4h(4℃可保存1-2周,冷凍可保存2年)

      注:不可用自來水沖洗,被鉗、鑷夾取造成機械損傷的組織不可

      部分可取較大面積,但厚度必須小于1mm(戊二醛固定能力小于0.5mm)

      腦、胰等柔軟組織先切成較大厚片于戊二醛固定數(shù)分鐘增加硬度,再切成小塊臵于新的戊二醛固定液

      小腸、周圍神經(jīng)、肌肉等方向性、易扭曲樣本可綁在小波棒上固定,待硬化后縱行方向切成長方形固定

      2、漂洗:牙簽取出樣品至新的1.5ml離心管,用0.1M pH7.0磷酸緩沖液(PBS)漂洗樣品三次(搖床),每次15min3、鋨酸固定:1%鋨酸溶液固定樣品1-2h(臨用前計算用量≤50ul/樣,用0.1M PBS將2%鋨酸稀釋至1%,通風(fēng)櫥操作)注:餓酸固定時間過長會導(dǎo)致脂蛋白復(fù)合體溶解,使組織變脆,不利于切片

      3、再漂洗:吸出固定液,用0.1M pH7.0 PBS漂洗樣品三次,每次15min

      注:漂洗以清除固定液,避免產(chǎn)生沉淀物干擾結(jié)構(gòu)觀察

      骨組織漂洗后需脫鈣,EDTA-2Na脫鈣液

      4、脫水劑梯度脫水:用梯度濃度(50%,70%,80%,90%和95%)乙醇溶液對樣品進行脫水處理,每個濃度處理15min

      再用100%乙醇處理20min(乙醇細(xì)胞內(nèi)抽提少,但與包埋劑相容性差)

      最后用純丙酮處理20min(若包埋劑為Epon改用環(huán)氧乙烷臵換;Cell的固定脫水無需臵換)

      注:脫水以清除游離水以便包埋劑均勻滲透;脫水劑易吸收空氣中水分,密封,臵換時應(yīng)該迅速

      由低到高逐級脫水而不能急劇脫水,更換溶液時應(yīng)迅速,以免組織內(nèi)外產(chǎn)生氣泡。

      植物組織脫水時間延長,100%脫水劑中加入烤干的無水CuSO4、無水Na2SO45、包埋劑梯度滲透:①用包埋劑丙酮混合液(V/V=1/1)處理樣品1h:計算用量80ul/樣再配制(參考樣品大小)

      ②用包埋劑丙酮混合液(V/V=3/1)處理樣品3h:計算用量80ul/樣再配制(參考樣品大小)

      ③純包埋劑滲透樣品過夜:將樣品移至干燥的新離心管中,常溫過夜(所用器具均應(yīng)干燥)

      注:樣品周圍不能有氣泡

      6、加熱聚合:牙簽取出經(jīng)滲透處理的樣品至0.5ml干燥離心管(預(yù)先裝入約300 ul包埋劑),加熱聚合儀70℃加熱過夜。注意小腸等定向包埋

      7、萊卡EM UC 7超薄切片儀修快、切片(50-70nm)

      8、正染色:塑料包埋模具(刀劃幾道縫隙),染色時溫度低影響染色效果,冬天空調(diào)

      醋酸雙氧鈾50%乙醇飽和溶液100ul染色(15min-1h),雙蒸水沖洗

      檸檬酸鉛100ul染色15min(極易吸收空氣中CO2產(chǎn)生PbCO3,染色時毋對著說話、呼吸,同時放臵數(shù)塊NaOH)

      9、日立H-7650透射電鏡觀察

      spurr包埋劑配制:ERL2.5g

      NSA5.2 g混合均勻后再加入催化劑DMAE,攪拌30min;低溫干燥保存

      DER2.5 g

      DMAE0.1g

      宜新鮮配制但由于使用期限長(3-4天),混合物可在使用前一天制備。Spurr樹脂是嗜氧,聚合時不加蓋

      包埋劑儲存過久導(dǎo)致粘度上升,滲透性能下降,包埋塊硬度不均勻,切片困難

      第二篇:HPLC分離樣品樣品前處理方法

      HPLC分離樣品樣品前處理方法

      因為需要在儀器、柱子、溶劑和人力等方面做很大的投入,HPLC分離是一項成本很高的分離技術(shù)。而樣品前處理結(jié)果的好壞對分離過程有非常明顯的影響,有時會直接關(guān)系到分離的成??;如果能遵循適當(dāng)?shù)脑瓌t,做好樣品的前處理,往往既提高了分離的成功率和效率,也大大降低了成本。目前分離成本是按進樣針數(shù)分?jǐn)偟矫總€項目組的,所以合成同事送分離樣品前處理的好壞直接關(guān)系到所屬項目的成本。樣品前處理的技術(shù)比較復(fù)雜,并且跟合成反應(yīng)的關(guān)聯(lián)非常緊密,下面的方法是分離組根據(jù)經(jīng)驗總結(jié)出來的,并不完全,也希望合成同事提供更多的建議。另外,考慮到目標(biāo)組分含量過低的樣品會大量增加分離的難度和成本,分離組以后原則上不再接收含量低于10%的樣品。

      以反應(yīng)中的添加劑,催化劑來分類: 反應(yīng)中使用高反應(yīng)活性的物質(zhì),如三氯氧磷,二氯亞砜,NaH,LiAlH4等,反應(yīng)后一定要淬滅。這一點合成同事都是了解的。但是后面的一點容易被忽視,就是要做好中和。比如三氯氧磷用水淬滅后產(chǎn)生磷酸和鹽酸,要用弱堿中和至近中性。(近中性只是一個粗略的概念,如果可以知道樣品用什么體系分離合適,最好能將樣品溶液的pH調(diào)整為與該分離體系的流動相pH一致,酸性流動相pH~2,中性pH=6.8~7.5,堿性pH~10),否則對制備柱會造成損壞.有些物質(zhì)反應(yīng)活性雖然不是很強,如多聚甲醛,但如果不淬滅,在樣品溶液中,可能會繼續(xù)反應(yīng),導(dǎo)致目標(biāo)物純度發(fā)生變化。曾經(jīng)有一個樣品,使用多聚甲醛,還原胺化反應(yīng)實現(xiàn)N甲基化。本來粗品純度很好,但是在分離過程中發(fā)現(xiàn)目標(biāo)物純度越來越低,原來樣品結(jié)構(gòu)中還有一個反應(yīng)活性較弱的N,由于多聚甲醛未淬滅,這個反應(yīng)活性較弱的N原子也被甲酰化,導(dǎo)致目標(biāo)物純度降低,這個樣品分離失敗。所以,反應(yīng)后淬滅,中和是樣品送分離前的必修課,不可偷懶。如果不按照此原則操作,樣品送到分離組導(dǎo)致樣品分離失敗,或者嚴(yán)重的導(dǎo)致色譜柱損壞等,所增加的成本將會被分?jǐn)偟较鄳?yīng)的合成項目組。偶聯(lián)反應(yīng)類型中可能用到的金屬催化劑,如Pd(dppf)Cl2, Pd-118, Pd2(dba)3等均相的Pd催化劑,CuI,Chan-Lam反應(yīng)中會用到的Cu(Ac)2,其他還有TiCl4,鈦酸四異丙酯,F(xiàn)e(acac)2等。分別詳細(xì)說明一下。

      3.1 Pd催化劑如果是非均相的,則過濾即可去除。如果使用了Pd(PPh3)4,則由于該試劑不穩(wěn)定,反應(yīng)后會出現(xiàn)黑色Pd的沉淀,過濾也可以去除干凈。如果使用過Pd(dffp)Cl2等均相的Pd催化劑,由于該試劑可以溶解于常用有機溶劑中,所以不能通過過濾去除。而如果不處理干凈,Pd試劑在與流動相混合后析出,堵塞篩板,并與硅膠結(jié)合,導(dǎo)致反相色譜柱柱頭變黑,柱壓劇烈升高,色譜柱柱效嚴(yán)重下降,常常會出現(xiàn)白天摸好方法的樣品,在晚上多次進樣后峰型變差,純度降低,不能滿足交貨要求,更嚴(yán)重的,色譜柱柱效的嚴(yán)重降低,會影響后續(xù)樣品的分離,導(dǎo)致多個樣品分離失敗。所以,這類使用過Pd催化劑的樣品如果不處理,不但樣品不能順利交貨,還會導(dǎo)致色譜柱損壞,這樣做絕對是得不償失的。針對這種情況,分離組開發(fā)了用TMT溶液用來徹底沉淀Pd試劑的方法,去除Pd試劑對反相色譜柱的不利影響。方法非常簡單,反應(yīng)后加入TMT溶液,過夜放置,第二天過濾即可。

      3.2 CuI,該試劑看起來好像是離子型化合物,很多同事認(rèn)為該試劑易溶于水,用萃取的方法去除CuI。其實該試劑在DMSO,DMF中有很好的溶解度,而在甲醇,乙腈溶劑中溶解度非常有限,如果樣品可以使用甲醇,乙腈溶解完全,就不要使用DMSO,DMF溶解。有的合成同事看到加入甲醇后還有物質(zhì)沒有溶解,就加入DMSO,認(rèn)為把反應(yīng)瓶中的所有固體都溶解了才能保證回收率,這是不對的。把對于分離不利的物質(zhì),或者雜質(zhì)都溶解進來,增加了分離的難度,甚至?xí)p壞色譜柱。對于自己做的反應(yīng),反應(yīng)物的溶解性應(yīng)該有一定了解,遇到不溶的物質(zhì),可以通過點板等手段分析一下。如果確實目標(biāo)物只溶解于DMSO,DMF中,可以加入TMT-DMSO溶液,但是由于在DMSO中TMT-Cu的沉淀很細(xì)小,DMSO溶液粘度又很大,沉淀會懸浮在溶液中,直接過濾也阻力很大,難以操作。需要對樣品先離心,而后將上清液過濾。

      3.3 Cu(Ac)2是Chan-Lam反應(yīng)中會用到的試劑,而且由于反應(yīng)用量大,基本上1個當(dāng)量,與上述Pd試劑催化劑用量不同,加入TMT沉淀后,會產(chǎn)生大量沉淀,直接過濾也是不現(xiàn)實的。必須先離心,再對上清液過濾。由于沉淀量比較大,可以通過增加溶液體積,讓更多的目標(biāo)物溶解在溶劑中來提高回收率。

      3.4 TiCl4是一種強Lewis酸,加入水淬滅后會生成鹽酸與Ti(OH)2,Ti(OH)2進而生成TiO2沉淀,可以通過過濾去除TiO2,為了讓TiO2沉淀完全,建議加入弱堿性水,如稀氨水。鈦酸四異丙酯,可以通過加入弱堿性水,生成TiO2的方法處理干凈。如果含有該類試劑的樣品做堿性分析或者堿性分離時,會在色譜柱的塞板上生成TiO2,導(dǎo)致色譜柱壓力升高,柱效下降,導(dǎo)致樣品分離失敗,甚至色譜柱損壞。這個問題非常嚴(yán)重。分離組就有一根Waters Xbridge C18制備柱,價格約5萬RMB,在做了一些含有TiCl4的樣品后柱壓升高,不能使用。后經(jīng)過使用醋酸反沖的方法處理,柱壓有所下降,但柱效已經(jīng)嚴(yán)重下降,這是因為高柱壓已經(jīng)破壞了柱床的結(jié)構(gòu),造成不可逆損壞。對于含有這類試劑的樣品,合成同事應(yīng)該做好前處理工作,如果由于這類樣品導(dǎo)致色譜柱損壞,合成項目組將會被分?jǐn)偟较鄳?yīng)的色譜柱費用。

      3.5 Fe(acac)2也可以通過加入TMT沉淀,由于用量大,要離心,上清液過濾。縮合反應(yīng)中的縮合劑。比如HOBT,EDCI這一對最常用的縮合劑。由于HOBT帶有弱酸性,而EDCI反應(yīng)后的氧化產(chǎn)物,ms174的物質(zhì)為堿性,含有一個叔胺基團,當(dāng)分離體系選擇中性分離時,這兩種物質(zhì)都是出于極性最大的狀態(tài),易于通過分離去除干凈。而產(chǎn)物為酰胺,在中性條件下保留最強,所以縮合反應(yīng)的樣品可以首選中性體系分離。5 反應(yīng)中使用過三苯基膦。反應(yīng)后會生成三苯氧磷。三苯氧磷常常會與目標(biāo)物在分離時共流出,對目標(biāo)物的順利純化造成困擾。其實完全可以通過一般目標(biāo)物含有堿性N原子、可以在酸性條件下帶上正電荷,而三苯氧磷為中性、不帶電荷的差別,通過離子交換方法去除。詳情請參見《藥明康德化學(xué)通訊》第6卷第3期《離子交換分離模式在樣品純化中的應(yīng)用》 類似的還有TBAF。TBAF是一個季銨鹽,即便把溶液的pH調(diào)整為13,TBAF還是帶正電荷的。如果樣品中的N原子都是一些弱堿性N原子,在通過調(diào)整樣品溶液pH,使樣品溶液的pH約為目標(biāo)物pKa+2,這樣的條件下,目標(biāo)物99%都處于不帶電荷的狀態(tài),就可以通過陽離子交換樹脂柱去除TBAF了。由于TBAF無紫外吸收,而且為強堿性季銨鹽,如果使用堿性條件分離樣品,TBAF會在色譜柱上嚴(yán)重拖尾,導(dǎo)致目標(biāo)峰分離后仍混有TBAF,而且由于無紫外,分離時不易發(fā)現(xiàn),只有做ms或者lcms檢測才會發(fā)現(xiàn)。含有TBAF的樣品只要按照上述的方法正確處理,先處理,再分離,就不會給樣品的反相分離造成困擾,節(jié)省了時間和成本。溶解度差的樣品。其實從樣品的溶解度也可以初步判斷樣品用什么樣的分離手段比較合適。比如二氯甲烷易溶的樣品,應(yīng)該首選TLC或者正相開放柱分離。如果二氯甲烷溶解度差,而甲醇溶解度較好的物質(zhì),可以考慮反相分離。反相分離時的兩相分別是水和乙腈。一般甲醇,乙腈溶解度較好的樣品(大于10mg/ml),直接用反相分離不會造成太大問題。而如果樣品只能溶解在DMSO,DMF溶液中,加入甲醇,乙腈就會立即析出,這樣的樣品不能直接分離。需要針對對沉淀進行分析。曾經(jīng)有一個樣品,粗品lcms圖譜顯示純度約為50%,但是制備HPLC進一針后只看到一個色譜峰,ms檢測為其中的雜質(zhì),目標(biāo)物的色譜峰找不到了。當(dāng)嘗試對樣品的粗品再取樣,用乙腈稀釋,再分析一下粗品的情況時,發(fā)現(xiàn)加入乙腈后樣品立即變渾濁。這樣就可以解釋為什么樣品在制備HPLC上不出峰了,應(yīng)該是目標(biāo)物都析出在色譜柱前端,乙腈-水體系無法洗脫下來,所以只看到了雜質(zhì)。將沉淀濾出來,再用DMSO溶解,分析結(jié)果顯示純度很好,不用再分離了。這個例子告訴我們,溶解是分離的前提,如果樣品在水-乙腈體系中溶解度很差,直接進行反相分離就是不合適的。如果合成同事沒有時間摸索重結(jié)晶的方法,則可以把樣品的溶解度信息告訴分離人員,或者在DB中注明。對于這類溶解度差的樣品,可能有時并不會像這個例子這樣極端,而是部分被洗脫出來,但肯定會影響回收率。另外,很多含有金屬離子(Cu2+, Sn4+等)的樣品,除了會導(dǎo)致色譜柱嚴(yán)重?fù)p壞,還經(jīng)常會在紫外檢測池中析出,附著在紫外檢測池內(nèi)壁上,導(dǎo)致檢測池透光率降低,表現(xiàn)在色譜圖上就是樣品的吸收降低了,嚴(yán)重的會導(dǎo)致后續(xù)樣品峰吸收很低,甚至無法正常收集,樣品就被浪費了。我們所使用的Gilson半制備型檢測池價格約1萬多RMB,有的用稀硝酸浸泡可以部分恢復(fù),有的則沒有效果,只能換新的。所以含有金屬離子的樣品務(wù)必要在送分離時跟分離人員交流清楚,建議在DB中注明反應(yīng)類型,以及使用過哪些催化劑等信息,這些信息對于樣品的順利分離非常重要。9 樣品前處理經(jīng)驗交流之離子交換SPE的使用

      離子交換樹脂的使用參考《藥明康德化學(xué)通訊》第6卷第3期的一篇文章:離子交換分離模式在樣品純化中的應(yīng)用。其思路類似于調(diào)節(jié)水層pH,進行的水層與有機層的萃取,可以初步純化反應(yīng)物。

      具體操作很簡單:一般我們反應(yīng)后的樣品都帶有一些堿性基團,可以加入弱酸,調(diào)節(jié)反應(yīng)物pH,使樣品帶正電荷。溶劑要選擇水,甲醇,或者水-乙腈混合溶劑,即要選擇質(zhì)子型溶劑,在這樣的溶劑中樣品才能帶正電荷。將陽離子交換樹脂SPE小柱用甲醇潤洗,上樣,甲醇洗脫5個柱體積后,用10%氨水甲醇將目標(biāo)物洗托下來。這樣操作之后可以將那些不能帶正電荷的物質(zhì)除掉,降低后續(xù)分離的難度。離子交換樹脂適用于極性大,使用硅膠柱會發(fā)生死吸附的樣品。樣品前處理之硅膠柱初步純化:

      對于一些極性較小的樣品,適合先使用硅膠柱進行初步純化,比如可以將反應(yīng)溶劑旋干后,用正己烷-乙酸乙酯溶解,上樣到預(yù)先裝好的硅膠開放柱,或者使用Flash快速柱色譜裝置,配合Flash硅膠柱,根據(jù)TLC情況,簡單的選擇幾個梯度的流動相,比如正己烷-乙酸乙酯10:1,5:1,2:1,純乙酸乙酯等,每個梯度洗托2-3個柱體積,分別點板,確定目標(biāo)物所在餾分。這樣也可以達到樣品初步純化的目的。避免將含量低于10%的樣品簡單的丟到分離組。除去樣品中Pd的TMT溶液的配方如下:

      TMT,又名三聚硫氰酸,cas號為:638-16-4,結(jié)構(gòu)如下:

      SHNNHSNSH

      TMT可以沉淀Pd等金屬催化劑的原理在于TMT的巰基,H2S可以與鉛等金屬生成沉淀,中國藥典就使用這個方法檢測鉛。TMT含有三個巰基,原則上可以與三個金屬原子結(jié)合,生成的復(fù)合物分子量較大,不溶于水,甲醇,乙腈,DMSO,DMF等溶劑,可以通過過濾去除樣品中的Pd試劑。

      TMT溶液的配方為100ml溶液中包含45ml乙醇,5ml氨水(TMT為酸性,氨水可以增加溶解度),50ml水。再加入360mgTMT和1.4g NaCl。加入NaCl的目的在于,TMT與Pd(dppf)Cl2等有機Pd催化劑生成的沉淀為膠體,如果沒有鹽的存在,不會凝聚為大的沉淀顆粒,濾膜過濾時可以通過濾膜。

      使用方法為:100mg反應(yīng)物的溶液,一般加入1ml上述TMT溶液即可。放置過夜,再使用針桶配合濾膜過濾。也可以加熱,加速該反應(yīng)的進行,我們嘗試過50攝氏度2小時也可以沉淀完全。

      360mg TMT-->45ml ethanol 5ml ammonia water

      1.4g NaCl-->50ml water

      目前總結(jié)的這些經(jīng)驗也并不是完善的,還可以隨著我們接觸到的反應(yīng)類型,催化劑種類的增加而增補??偨Y(jié)下來就是這樣幾條:

      1、反應(yīng)后要淬滅,中和

      2、要盡量除掉樣品中含有金屬離子的催化劑、鹽等

      3、在DB中要寫明反應(yīng)類型,使用過哪些催化劑,縮合劑等,樣品的溶解性信息

      第三篇:word制作的簡報樣品及步驟

      中國玉文化 玉文化,是依托于玉石制作的各種工藝和產(chǎn)品而逐漸形成,經(jīng)鑒賞和審美 而不斷發(fā)展升華的一種獨特的文化現(xiàn)象,我國獨有的一種文化現(xiàn)象。崇玉、愛玉、賞玉、盤玉、藏玉、佩玉,可以說是人們文化生活中的最高境界、最高層次。

      玉 文 化
      計算機與 信息技術(shù)

      學(xué)院
      人 奉 楚 而 之 獻,玉 之 人 厲 曰 王 :。“ 厲 石 也 王 使。” 玉,中 山 楚 璞 玉 氏 得 和 人 相

      曰 : “和 氏 之 璧。”,遂 命 焉 寶 得 而 璞 其 理

      人 吾 所 以 悲 也?!?王 乃 使 玉

      石,貞 士 而 名 之 以 誑,此 以 之 題 而 玉 寶 夫,悲 也

      刖 也 ? ” 和 曰 : “吾 非 悲

      悲 下 之 刖 者 多 矣,子 奚 哭 之

      之 泣,使 人 問 其 故。曰 : “ 天 聞 王。血 以 之 繼 而 盡

      于 楚 山 之 下,三 日 三 夜,哭 而 璞 其 抱 乃,和 即 位 王

      而 刖 其 也 右 足。武 王 薨,文,誑 為 和 以 又 王?!?石 “

      武 和 王 使 玉 人 相 之,又 曰 :。王 武 之 獻 而 璞 其 奉 又

      足 王。及 厲 王 薨,武 王 即 位,左 其 刖 而,誑 為 和 以

      和田玉 產(chǎn)于新疆和田,和田玉的礦物組成以 透閃石為主,形成白色、青綠色、黃 色、黑色等不同色澤。多數(shù)為單色玉,少數(shù)有雜色。玉質(zhì)為半透明,拋光后 呈脂狀光澤。和田玉夾生在海拔 3500 米至 5000 米高的山巖中,經(jīng)長期分化剝解為大小 不等的碎塊,崩落在山坡上,再經(jīng)雨水沖刷流入河水 中。待秋季河水干涸,在河床中采集的玉塊稱為籽玉、在巖層開采的稱山料。和田玉的經(jīng)濟價值評定依據(jù)是 顏色與質(zhì)地純凈度,羊脂白玉為白玉中的上品,質(zhì)地 純潔細(xì)膩,含閃透石達 99%,色白、呈凝脂般含蓄光 澤。漢代、宋代和清乾隆時代都極推崇羊脂白玉。岫玉 產(chǎn)于遼寧岫巖,故又稱為岫巖玉。廣 義上可分兩類,一類是老玉(亦稱黃 白老玉),老玉中的籽料稱作河磨玉,屬于透閃石玉,其質(zhì)地樸實、凝重、色澤淡黃偏白,是一種珍貴的璞玉,可與新疆和田玉媲美,距今約 5000 年的紅山文化中出 土的古玉件屬河磨玉制品;另一類是岫巖碧玉(亦稱 瓦溝玉)屬蛇紋石類礦石,其質(zhì)地堅實而溫潤,細(xì)膩 而圓融,多呈綠色至湖水綠,其中以深綠、通透少瑕 為珍品。

      山玉產(chǎn)于河南南陽的獨山,獨也稱“南陽玉”或“河南玉”,也有簡稱為“獨玉”的。早在 6000 年以前,古人已開采獨山玉,安陽殷 墟婦好墓出土的玉器中,有不少獨山 玉的制品。獨山玉由于色澤鮮艷、透明度好等優(yōu)點,是玉雕的一等原料,躋身我國“四大名玉”之列。品 種主要有:白玉,綠玉、綠白玉、紫玉、黃玉、芙蓉

      紅玉、墨玉及雜色玉等,其中以芙蓉石、透水白玉、綠玉價值較高。高檔獨玉的翠綠色的品種,與緬甸翡 翠相似,故有“南陽翡翠”之譽。一般獨玉主要用于 雕琢各種陳設(shè)件以及手鐲、戒指、項鏈等飾物。綠松石 又名綠寶石,因其色、形似碧綠的松 果而得名,是世界上稀有的貴寶石品 種之一。生礦物,由含銅、鋁、磷的 地下水在早期花崗巖石中淋濾而成,在近地表的礦脈中沉淀形成結(jié)核,被 巖脈的基質(zhì)所包裹,多為深淺不同的 藍(lán)、綠等顏色,蠟狀光澤。湖北鄖陽地 區(qū)被稱為東方的綠寶石之鄉(xiāng),鄖縣云蓋 山綠松石礦出產(chǎn)的綠松石品位最佳,最 為珍貴。

      第三章 Microsoft Word 2003
      實驗一 利用 Word2003 制作簡報
      實驗?zāi)康模?1 掌握 Word2003 中文字的錄入和編輯等基本操作。2 學(xué)會加入文本框操作并對文本框進行編輯。3 掌握圖文混排及頁面的排版。實驗任務(wù): 制作如圖 3-1 示例所示的簡報。Word 文檔的文件名為“簡報”,A4 頁面尺寸,左右頁邊距均為 1.5 厘米,上 下頁邊距為 2 厘米。

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      2 3 4

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      圖 3-2 版面布局 圖 3-1 簡報示例圖 實驗步驟: 1 設(shè)計簡報的布局。將整個版面劃分為 7 個板塊,如圖 3-2 所示。注意各個板塊的大小位置。2 新建 Word 文檔。從“開始”菜單新建 Word 文檔,打開空白文檔后點擊“文件”|“保存”,在“另存為”對話框中選擇文件位 置和文件名稱。3 進行頁面設(shè)置。單擊“文件”|“頁面設(shè)置”菜單命令,打開“頁面設(shè)置”對話框。在“頁邊距”選項卡中,上、下頁邊距設(shè) 置為 2cm,左右頁邊距設(shè)置為 1.5cm。裝訂線設(shè)置為 0,裝訂線位置為左。“方向”設(shè)置為“縱向”。在“紙張” 選項卡的“紙張大小”設(shè)置為 A4(21 厘米×29.7 厘米)。單擊“確定”按鈕。4 各版塊的制作。(1)版塊 1 的制作。①單擊“插入”|“文本框”|“橫排”命令,在文檔的版芯拖動生成一個文本框。右擊文本框邊框,在彈出 的快捷菜單中選擇“設(shè)置文本框格式”命令,打開“設(shè)置文本框格式”對話框。選擇“顏色與線條”選項卡,“填 充”選項中“顏色”設(shè)置為“淺綠色”,透明度設(shè)置為“50%”“線條”選項中“顏色”設(shè)置為“無線條顏色”。選擇“大小”選項卡,“高度”設(shè)置為 4 厘米,“寬度”設(shè)置為 12.5 厘米。單擊“確定”按鈕。利用鼠標(biāo)拖動文 本框到布局中所示的左上角的位置。

      注:如果插入文本框時,出現(xiàn)“畫布”,可通過設(shè)置取消畫布直接插入文本框,方法是:單擊“工具”|“選 項”菜單命令,打開“選項”對話框,在“常規(guī)”選項卡中,把“插入自選圖形時自動繪制創(chuàng)建畫布”前面的復(fù) 選框中的
      的對勾去掉。②從提供的素材中將文字復(fù)制到文本框中,選中標(biāo)題文字,通過格式工具欄,字體設(shè)置為“華文行楷”,字 號設(shè)置為“三號”,對齊方式設(shè)置為“居中”,字體顏色設(shè)置為“綠色”。選中文字部分,“字體”設(shè)置為宋體,字 號設(shè)置為“五號”。單擊“顏色”按鈕,選擇“其他顏色”,在“顏色”對話框中選擇“自定義”選項卡,“顏色 模式”設(shè)置為“RGB”“紅色”設(shè)置為“0”“綠色”設(shè)置為“150”“藍(lán)色”設(shè)置為“0”,,單擊“確定”按鈕。另外,通過“格式”|“段落”菜單命令,在“段落”對話框中設(shè)置縮進為左縮進 2 個字符。(2)版塊 2 的制作。單擊“繪圖”工具欄的 按鈕,在版芯中拖動出一個文本框,參照版塊 1 的步驟,設(shè)置文本框填充色為 “淺綠”,線條顏色設(shè)置為“無線條顏色”。文本框內(nèi)輸入“玉文化”文字,選中文字,單擊“格式”|“字體” 對話框,打開“字體”對話框,在“字體”選項卡中,字體設(shè)置為“華文彩云”,字號設(shè)置為“2 號”,顏色設(shè)置 為“綠色” ;在“字符間距”選項卡中,“間距”選擇“加寬”,數(shù)值為“5 磅”。調(diào)整文本框的大小,并按照版面 布局,把版塊 2 拖動到版芯的右上角位置。(3)版塊 3 的制作。參照版塊 2 的步驟,制作文本框,并輸入“計算機與信息技術(shù)學(xué)院”文字。字體設(shè)置為“華文行楷”字號 設(shè)置為“二號”。選中“計算機與信息技術(shù)”文字,單擊“格式”|“中文版式”|“雙行合一”菜單命令,在“雙 行合一”對話框中查看效果,單擊“確定”。(4)版塊 4 的制作。單擊繪圖工具欄的 圖標(biāo)打開 “藝術(shù)字庫” 對話框,選擇一種藝術(shù)字(樣本中為第二排第二種藝術(shù)字),單擊“確定”按鈕,打開“編輯藝術(shù)字文字”對話框,在“文字”框中輸入“溫潤如玉”文字,字體設(shè)置為“隸 書”,字號設(shè)置為 36 號,單擊“確定”按鈕。右擊該藝術(shù)字,在彈出的快捷菜單中選擇“設(shè)置藝術(shù)字格式”命令,“版式”選項卡中選擇“四周型”版式,“顏色與線條”選項卡中,“填充”選項中,“顏色”設(shè)置為“墨綠”“透,明度”設(shè)置為 0,“線條”選項中,“顏色”設(shè)置為“綠色”“虛實”設(shè)置為“實線”“粗細(xì)”設(shè)置為“0.75 磅”。單擊“確定”按鈕。最后,調(diào)整藝術(shù)字的大小并移動到布局中的指定位置。(5)版塊 5 的制作。①單擊“插入”|“圖片”|“來自文件”菜單命令,打開“插入圖片”對話框,選擇圖片位置,插入素材圖 片,并復(fù)制一張,調(diào)整兩張圖片的位置,至布局 5 的位置,右擊圖片,在彈出的快捷菜單中

      選擇“疊放次序”| “置于底層”命令。②單擊“繪圖工具欄”的自選圖形按鈕,選擇“基本形狀”中的“圓角矩形”工具,在版心位置拖出一個圓 角矩形,右擊圓角矩形,在彈出的快捷菜單中選擇“添加文字”,插入素材中的“和氏璧”的文字,選中文字,單擊“格式”|“文字方向”菜單命令,在彈出的“文字方向”對話框中,選擇豎直方向。再右擊文本框,在彈 出的快捷菜單中選擇“設(shè)置自選圖形格式”,打開“自選圖形格式”對話框,在“顏色與線條”選項卡中,填充 顏色設(shè)置為“白色”,透明度設(shè)置為“50%”,線條的顏色選項設(shè)置為“帶圖案的線條”,在對話框中選擇“大紙 屑”,前景色設(shè)置為“黃色”,背景色設(shè)置為“橙色”,線型設(shè)置為 0.75 磅實線。將文本框調(diào)整合適的大小,并覆 蓋于圖片之上,即放在版塊 5 的位置。(6)版塊 6 的制作。① 參照版塊 4 的做法插入藝術(shù)字,并進行設(shè)置。②裝飾線的制作。利用“繪圖”工具欄上的“直線”工具,劃出一條直線,右擊直線,在彈出的快捷菜單中 選擇“設(shè)置自選圖形格式”菜單項,在彈出的“設(shè)置自選圖形格式”對話框中,在“顏色與線條”選項卡中,線 條的顏色選項設(shè)置為“帶圖案的線條”,在對話框中選擇“球體”,前景色設(shè)置為“橙色”,背景色設(shè)置為“黃色 色”,線型設(shè)置為 3 磅實線。裝飾線設(shè)置完后,復(fù)制后移到相應(yīng)的位置。

      (7)版塊 7 的制作。①分欄的設(shè)置。在藝術(shù)字的下方雙擊,把提供的素材里的文字添加到文檔中,選中文字,

      圖 3-3 “分欄”對話框 圖 3-4 “剪貼畫”任務(wù)窗格 單擊“格式”|“分欄”菜單命令,在彈出的“分欄對話框”中選擇“2”欄,見圖 3-3。則加入的素材形成分欄 效果,單擊“岫玉”文字的結(jié)尾,單擊“插入”|“分隔符”,在“分隔符”對話框中選擇“分欄符”,單擊“確 定”。則形成等高的分欄效果。②在各段文字前按照前面的方法插入素材中的 4 張圖片。注意設(shè)置圖片的版式為“四周型環(huán)繞”。③首字下沉效果。選中右欄中“獨山玉”的“獨”字,單擊“格式”|“首字下沉”,打開“首字下沉”對話 框,“位置”選項中選擇“下沉”“選項”中設(shè)置下沉行數(shù)為 3 行。調(diào)整到合適的位置。,④插入剪貼畫。將光標(biāo)定位在文檔的結(jié)尾部分,單擊“插入”|“圖片”|“剪貼畫”,打開“剪貼畫”任務(wù)窗 格,見圖 3-4,在搜索文字中輸入 “植物” 單擊搜索,單擊圖片完成剪貼畫的插入操作。設(shè)置剪貼畫的版式為 “緊 密型環(huán)繞”,并調(diào)整圖片的大小,拖放的制定位置。單擊剪貼畫,在“圖片”工

      具欄中,單擊“顏色”按鈕,選 擇“沖蝕”效果。⑤設(shè)置裝飾線。鼠標(biāo)定位在“和田玉”一段的末尾,單擊“格式”|“邊框和底紋”菜單命令,打開“邊框 和底紋”對話框,選擇底部的“橫線”按鈕,打開“橫線”對話框,見圖 3-5。選擇如樣例所示的橫線,單擊“確 定”按鈕,加入左側(cè)裝飾線,版式設(shè)置成“至于文字上方”。同樣的方法加入右側(cè)的裝飾線。選中左側(cè)的裝飾線,單擊“繪圖”工具欄的繪圖按鈕,選擇“旋轉(zhuǎn)或翻轉(zhuǎn),”項,選擇“水平翻轉(zhuǎn)”項,使裝飾線水平翻轉(zhuǎn),使兩條 線對稱。⑥設(shè)置頁面邊框。單擊“格式”|“邊框和底紋”菜單命令,打開“邊框和底紋”對話框,單擊“頁面邊框” 選項卡,“設(shè)置”選項選擇“方框”“線型”選擇雙行波浪線,“顏色“選擇“綠色”“粗細(xì)”選擇“1/4 磅”,單 擊“確定”完成操作。⑦格式查找替換。選中“獨山玉”一段文字,單擊“編輯”|“替換”,打開“查找和替換”對話框,選擇“替 換”選項卡,(若未展開狀態(tài),則單擊“高級”按鈕展開對話框)在“查找內(nèi)容”項輸入“南陽”“替換為”項,

      中輸入“南陽”,單擊對話框底部的“格式”按鈕,選擇“字體”選項,在“查找字體”對話框中設(shè)置文字顏色 為紅色,字體為華文行楷,單擊“確定”按 圖 3-5 “橫線”對話框 圖 3-6“查找和替換”對話框 鈕返回“查找和替換”對話框,單擊“全部替換”按鈕,完成整個段落的查找替換操作。(7)保存文件。由于在新建文件時已保存過文件,設(shè)置了文件的位置和名字,因此,在對文件進行了修改 之后,直接單擊常用工具欄的“保存”按鈕,即可完成保存操作。


      第四篇:樣品接收保管處理制度

      樣品接收、保管和處理制度

      ①凡屬委托試驗的試樣,應(yīng)在樣品室登記,登記時應(yīng)根據(jù)客戶的檢測要求,查看樣品狀況(包裝、外觀、型號、規(guī)格、等級等),并清點樣品,認(rèn)真檢查樣品及其配件、資料的完整性,檢查樣品的性質(zhì)和狀態(tài)是否適宜于進行所要求的檢測,否則應(yīng)根據(jù)實際情況要求送檢單位補充或重取試驗樣品;有些樣品還應(yīng)檢查所采用的包裝或容器是否可能造成樣品的變異,并在“委托檢驗協(xié)議書”上登記說明。同時應(yīng)與客戶商定有關(guān)樣品準(zhǔn)備的要求和檢畢樣品的處理方式。

      ②接受試樣后,收樣人員應(yīng)標(biāo)明試樣編號,并及時將樣品交給檢測室進行檢驗測試;

      ③試樣在搬運時,應(yīng)輕拿輕放,防止損壞和破壞幾何形狀,從而影響試驗結(jié)果;

      ④測試前需要進行加工的樣品,應(yīng)嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)方法進行加工和制樣;

      ⑤ 對于現(xiàn)場采集的砂、石等,運回室內(nèi)試驗時,均需留樣保存,所有留樣從試驗報告發(fā)出之日起,保存一個月備查。

      ⑥ 樣品傳遞到檢測室后,各室試驗人員應(yīng)進行交接驗收,查看樣品狀況是否與檢驗業(yè)務(wù)和委托書要求內(nèi)容相符,對以封裝方式送達的樣品,應(yīng)檢查封簽是否完整有效以及運輸過程有無損壞。

      ⑦檢畢樣品留樣期不得少于報告申訴期,留樣期一般不超過60天,特殊樣品根據(jù)要求另行商定,留樣期內(nèi)的樣品不得以任何理由挪作它用。

      第五篇:停工處理步驟

      工程項目停工復(fù)工表格

      第一章 總則

      第一條 為了防范經(jīng)營風(fēng)險,加強工程項目進度的及時、有效申報,確保工程款的及時回收,實現(xiàn)工程項目收支的相對平衡,特制訂本規(guī)定。

      第二條 工程項目停工、復(fù)工報告的決策應(yīng)當(dāng)本著慎重、準(zhǔn)確、及時的原則,并做到停工有理、商談明確、復(fù)工有利。在辦理過程中應(yīng)當(dāng)注意以下事宜:

      (一)停工、復(fù)工報告執(zhí)行前應(yīng)當(dāng)書面函件的形式通知發(fā)包方,并及時溝通以避免反復(fù)停、復(fù)工給施工組織管理帶來的不利影響。

      (二)工程項目在停、復(fù)工過程中,應(yīng)當(dāng)遵循誠實信用原則,以維護我方利益為前提,實現(xiàn)雙贏。

      第三條 本規(guī)定適合于本部、分公司及事業(yè)部各工程項目。

      第二章 停工的條件

      第四條 出現(xiàn)合同不符條款,可提出停工報告,包括:

      (一)進度申報時,連續(xù)兩個月合同發(fā)包方未按合同約定審核進度的或者授意監(jiān)理方單位具體辦事人拒不簽進度的,工程技術(shù)管理公司工程部辦理停工報告;

      (二)正常進度款申報時,合同發(fā)包方滯后一個月仍然不予付款的,銷售公司辦理停工報告;

      (三)涉及10萬元以上的工程項目變更時,合同發(fā)包方不辦理簽證的,工程技術(shù)管理公司工程部辦理停工報告;

      (四)出現(xiàn)其他嚴(yán)重違背合同條款的事項,工程技術(shù)管理公司工程部辦理停工報告。

      第五條 月度工程項目收支出現(xiàn)收款低于支出的情況,并且墊資超過該項目累計進度的20%時,可提出停工報告。

      (一)本部、分公司及事業(yè)部應(yīng)當(dāng)建立月度工程項目收支表,其中至少應(yīng)包括工程項目名稱、合同額、合同面積、進度、回款、材料費、安裝費、加工費等事項。詳見附表一。

      具體要求如下:

      1.工程名稱、合同內(nèi)容、累計進度、累計回款、安裝費及加工費項等由財務(wù)部填寫;

      2.材料費項由采購部填寫;

      3.該表月度更新,由財務(wù)部審核,并于每月5日前完成。

      4.該表報送公司領(lǐng)導(dǎo)班子、銷售公司、西安生產(chǎn)制造公司、工程技術(shù)管理公司工程部、采購部。

      5.分公司、事業(yè)部參照執(zhí)行。

      (二)出現(xiàn)本條款事項時,由工程技術(shù)管理公司辦理停工報告。

      第三章 停工報告流程

      第六條 出具工程項目停工報告,報告中須填寫工程項目基本信息,重點說明工程項目停工原因。詳見附表二。

      第七條 停工報告必須經(jīng)過以下會簽流程:銷售公司、工程技術(shù)管理公司、公司領(lǐng)導(dǎo)班子。最終經(jīng)過公司總經(jīng)理審批同意后執(zhí)行。

      第八條 辦理停工報告的部門,將停工報告原件留存本部門。停工報告復(fù)印件分別送達銷售公司(或工程技術(shù)管理公司)、西安生產(chǎn)制造公司、采購部、財務(wù)部及法律顧問處(通過總經(jīng)理辦公室送達)。

      第九條 停工報告批準(zhǔn)后,辦理停工報告的部門,以公司名義向發(fā)包方發(fā)送停工函,并進行停工期間的商務(wù)談判。

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