第一篇：生化實驗報告肝糖原測定

生物化學實驗報告

姓

名：

學

號：

專業(yè)年級：

組

別：

*** 實驗教學中心

第一部分

一、實驗目的

掌握程度 實驗主要目的1.掌握肝糖原提取、糖原和葡萄糖鑒定與蒽酮比色測定糖原含量的原理和注意事項，掌握其操作方法

2.正確操作使用刻度吸管和可調微量取液器

3.熟練運用溶液混勻的各種方法（試情況而定，采用合適的混勻方法）

4.正確掌握溶液轉移的操作

5、正確操作使用分光光度記 二、實驗原理

掌握程度 實驗內容及原理 實驗名稱

肝糖原的提取、鑒定與定量

實驗時間

*** 實驗地點

*** 指導老師

趙***

組員

*** 評分

批改日期

肝糖原的提取與鑒定

糖原儲存在細胞內，采用研磨勻漿等方法可使細胞破碎，低濃度的三氯醋酸能使蛋白質變性，破壞肝組織中的酶且沉淀蛋白質，而糖原仍穩(wěn)定保存于上清液中，從而使用糖原與蛋白質等其他成分分離開來。糖原不溶乙醇而溶于熱水，故先用 95%的乙醇將濾液中的糖原沉淀，再溶于熱水中。

糖原水溶液呈現乳樣光澤，遇碘變紅棕色。這是糖原中葡萄糖長鏈形成的螺旋中，依靠分子間引力吸附碘分子后呈現的顏色。糖原還可被酸水解為葡萄糖，利用呈色反應和葡萄糖的還原性，可判斷肝組織中糖原的存在。

CuSO 4 +2NaOH=Na 2 SO 4 +Cu(OH)2 2Cu(OH)2 +C 6 H 12 O 6 =2 CuOH+氧化型葡萄糖+H 2 O 2 CuOH= Cu 2 O(紅色)+ H 2 O Cu(OH)2 = CuO（黑色）+ H 2 O

肝糖 原定量測定

糖原在濃酸中可水解為葡萄糖，濃硫酸能使葡萄糖進一步脫水生成糠醛衍生物—5-羥甲基呋喃甲醛，此化合物再與蒽酮脫水縮合生成藍色化合物。該物質在 620nm 處有最大吸收。糖含量在 10~100ug,溶液顏色的深淺可與可溶性糖含量成正比。利用此反應與同樣處理的已知葡萄糖含量標準溶液比色，可得到樣品中糖原的含量。糖原在濃堿溶

液中非常穩(wěn)定，故在顯色之前，肝組織先置于濃堿中加熱，以破壞其他成分，而保留肝糖原。

一、材料與方法

1、實驗材料 樣品

雞肝

試劑

肝糖原的提取與鑒定：95%乙醇，0.31mol/L(5%)三氯醋酸溶液，濃鹽酸，NaOH 溶液，碘試劑,班氏試劑。

肝糖原定量測定：30%KOH 溶液，0.5mg/ml 的葡萄糖溶液，蒸餾水，蒽酮顯色劑。

儀器和器材

可見光分光光度計，恒溫水浴箱，試管架，三支試管，加樣槍，加樣槍架，普通離心機，研缽，刻度吸量管，白瓷反應器，100ml 容量瓶。

2、實驗流程 肝糖原的提取與鑒定：

雞肝約 1.5 g，剪碎 ＋5%CCl 3 COOH 1 ml 研磨至乳狀 ＋5%CCl 3 COOH 3 ml 研磨成肝勻漿

全部轉入離心管中，離心 3 分鐘（4000 r / min）

沉淀（棄去）

上清（取 3 ml）

＋3ml 95%乙醇，混勻，靜置 10 分鐘

離心 5 分鐘（4000 r / min）

上清（棄去）

沉淀 ＋蒸鎦水 1 ml 沸水浴 2 分鐘，溶解沉淀

白瓷板孔穴中

糖原溶液 1ml ＋濃 HCl 5 滴 加碘試劑 2 滴

加碘試劑 2 滴

沸水浴 15 分鐘，冷卻 糖原溶液 2 滴

＋50%NaOH 5 滴

呈色對比

糖原水解液 2 滴

糖原水解液 ＋班氏試劑 4 滴 混勻

沸水浴 2 分鐘，觀察變化

肝糖原定量測定

雞肝 0.15 g ＋30%KOH 1.5ml

沸水浴 15 分鐘

冷卻，全部轉入 100 ml 容量瓶中

加水至標線，仔細混勻，此為糖原提取液

糖原的測定

取 3 支試管，按下表操作。

試劑（ml）

空白管 標準管 樣品管 蒸餾水 1.0 — — 標準葡萄糖溶液 — 1.0 — 糖原提取液 — — 1.0 0.2%蒽酮溶液 2.5 2.5 2.5 混勻，沸水浴 10 分鐘，冷卻c。在分光光度計 620 nm 波長處，用空白管溶液調

零，測定各管溶液的吸光度（A）。

4、注意事項 肝糖原的提取與鑒定 ①在提取肝糖原中，向上清液中加入乙醇后，要充分混勻，可以用玻璃棒攪拌。

②糖原中葡萄糖螺旋鏈吸附碘產生的顏色與葡萄糖殘基的多少有關。肝糖原分支中葡萄糖殘基在 20 個以下，吸附碘后呈現紅棕色。

肝 糖 原 定 量測定

①肝組織必須在沸水浴中完全溶解，否則影響比色； ②注意要收集全部溶液，用水多次洗試管，一并收入容量瓶中； ③加入蒽酮溶液時要小心操作，將試管放在試管架上進行； ④如果溶液呈渾濁，則因配制蒽酮溶液的硫酸濃度不夠所致。

第二部分

一、實驗結果與處理

1、實驗現象 操作過程 現象圖片

（1 1）雞肝在三氯醋酸中，被研磨成肝勻漿

(2)雞肝研磨成肝勻漿后轉入試管

（3 3）第一次離心后

（4 4）第一次離心后上清液轉移到另一試管

（5 5）第二次離心后

（6 6）第二次離心后的沉淀

（7 7）沸水浴使沉淀溶解后

（8 8）糖原水解液

（9 9）班氏試劑與糖原水解液反應：

溶液顯藍色，磚紅色不明顯

（10）

白瓷板孔穴中糖原與碘反應（左邊為碘試劑與肝糖原溶液，右邊為碘試劑）: :

紫色不明顯

（11與）雞肝與 30% 的H NaOH 溶液混合在沸水浴中加熱后: :

呈血紅色

（12）糖原溶液裝入L 100mL 容量瓶混勻后：刻度線處有些許氣泡，混勻過程造成（13）糖原提取后的測定，三支試管水浴后（1 1、2 2、3 3 號試管分別為空白管、標準管、樣品管）：

三只試管水浴 10min后，標準管顏色最為明顯，為綠色，加入的是標準葡萄糖溶液，樣品管與空白管顏色依次遞減。

2、實驗數據記錄 在分光光度計 620nm 波長處，測定各管溶液的分光度（A），記錄結果如下：

各管吸光值 測定次數

空白

標準

樣品 1

0.000

0.350

0.010

0.000

0.351

0.011

0.000

0.353

0.013

3、實驗結果

肝糖原的提取與鑒定：

顯色反應中，碘液由黃色變?yōu)榧t棕色（不明顯），說明所提供材料中含糖原成分，但含量低；加入班氏試劑的溶液無明顯的顏色變化；

肝糖原定量測定

（1）雞肝所取質量：0.15g（2）各管吸光值

各管吸光值 測定次數

空白

標準

樣品 1

0.000

0.350

0.010

0.000

0.351

0.011

0.000

0.353

0.013

平均值

0.000

0.351

0.011

標準管吸光度平均值 0.351； 樣品管平均吸光度 0.011；

由公式計算：.1 *1000100*g100* 05.0 * 100 / g）

肝組織重（標準樣品肝組織）

肝糖原（AAg ?注：1.11 為此法測得的葡萄糖含量換算為糖原含量的常數，因為用蒽酮試劑顯色時，110ug 糖原與 100ug 葡萄糖顯色程度相當。

故經計算最后結果為 0.116(g/100 肝組織)。

4、討論與分析（1）與碘試劑反應時：加入糖原的孔穴并沒有出現明顯的紅棕色。可能原因如下：

A、是在取糖原沉淀時，沉淀很少，糖原含量也很少； B、碘試劑本身是黃色的，本來現象就不是很明顯，這樣一來，幾乎看不到反應會產生的紅棕色了，說明糖原含量極少。

（2）糖原中葡萄糖的鑒定：實驗結果也沒有如預期中的藍色溶液沸水浴后變?yōu)榇u紅色。原因如下：

A、沸水浴過程水溫沒有達到 100 攝氏度，且期間多個小組先后放、取水浴箱中的試管，對反應造成一定影響； B、糖原含量極少，又加過少量酸與堿，濃度更小，現象更不明顯，所以觀察不到明顯的磚紅色。

（3）在肝糖原定量測定中，由資料可知飽食雞肝的肝糖原含量為：2～3g/100g 肝組織。而我們的結果明顯偏低，實驗中沒有出現操作上的失誤，討論分析原因如下：

A、所用雞肝來源并非飽食雞的肝，且雞肝每個部位肝糖原的含量有差異，與其他實驗組對比，可能我們組所取雞肝的部位剛好是肝糖原含量較低的部位； B、查資料得知若肝糖原含量<1％時，蛋白質會干擾蒽酮反應，這可能對實驗結果進一步造成降低的影響。

第二篇：無機化學測定實驗報告

無機化學測定實驗報告

實驗名稱：室溫：氣壓：

年級組姓名實驗室指導教師日期 基本原理（簡述）：

數據記錄和結果處理：

問題和討論

附注：

指導教師簽名

第三篇：物理實驗報告《測定三棱鏡折射率》

【實驗目的】

利用分光計測定玻璃三棱鏡的折射率；

【實驗儀器】

分光計，玻璃三棱鏡，鈉光燈。

【實驗原理】

最小偏向角法是測定三棱鏡折射率的基本方法之一，如圖10所示，三角形?abc?表示玻璃三棱鏡的橫截面，ab和

ac是透光的光學表面，又稱折射面，其夾角a稱為三棱鏡的頂角；bc?為毛玻璃面，稱為三棱鏡的底面。假設某一波長的光線?ld?入射到棱鏡的?ab?面上，經過兩次折射后沿?er?方向射出，則入射線?ld?與出射線?er?的夾角

稱為偏向角。

圖10

三棱鏡的折射

由圖10中的幾何關系，可得偏向角

(3)

因為頂角a滿足，則

(4)

對于給定的三棱鏡來說，角a是固定的，隨

和

而變化。其中

與、、依次相關，因此

實際上是的函數，偏向角

也就僅隨

而變化。在實驗中可觀察到，當

變化時，偏向角

有一極小值，稱為最小偏向角。理論上可以證明，當

時，具有最小值。顯然這時入射光和出射光的方向相對于三棱鏡是對稱的，如圖11所示。

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圖1

1最小偏向角

若用

表示最小偏向角，將

代入(4)式

得

（5）

或

（6）

因為，所以，又因為，則

（7）

根據折射定律

得，（8）

將式（6）、（7）代入式（8）得：

（9）

由式（9）可知，只要測出入射光線的最小偏向角

及三棱鏡的頂角，即可求出該三棱鏡對該波長入射光的折射率n

.【實驗內容與步驟】

1．調節(jié)分光計

按實驗24一1中的要求與步驟調整好分光計。

2．調整平行光管

(1)去掉雙面反射鏡，打開鈉光燈光源。

(2)打開狹縫，松開狹縫鎖緊螺絲3。從望遠鏡中觀察，同時前后移動狹縫裝置2，直至狹縫成像清晰為止。然后調整狹縫寬度為1毫米左右（用狹縫寬度調節(jié)手輪?1?調節(jié)）。

(3)調節(jié)平行光管的傾斜度。將狹縫轉至水平，調節(jié)平行光管光軸仰角調節(jié)螺絲29，使狹縫像與望遠鏡分劃板的中心橫線重合。然后將狹縫轉至豎直方向，使之與分劃板十字刻度線的豎線重合，并無視差。最后鎖緊狹縫裝置鎖緊螺絲3。此時平行光管出射平行光，并且平行光管光軸與望遠鏡光軸重合。至此分光計調整完畢。

3．測三棱鏡的折射率

(1)將三棱鏡置于載物臺上，并使玻璃三棱鏡折射面的法線與平行光管軸線夾角約為?60度。

(2)觀察偏向角的變化。用光源照亮狹縫，根據折射定律判斷折射光的出射方向。先用眼睛（不在望遠鏡內）在此方向觀察，可看到幾條平行的彩色譜線，然后慢慢轉動載物臺，同時注意譜線的移動情況，觀察偏向角的變化。順著偏向角減小的方向，緩慢轉動載物臺，使偏向角繼續(xù)減小，直至看到譜線移至某一位置后將反向移動。這說明偏向角存在一個最小值（逆轉點）。譜線移動方向發(fā)生逆轉時的偏向角就是最小偏向角。

按

計算最小偏向角

（取絕對值）。

重復步驟?1~6，可分別測出汞燈光譜中各譜線的最小偏向角。

按式（9）計算出三棱鏡對各波長譜線的折射率。計算折射率?n?的數據表格3。

【數據記錄及處理】

表3

測量最小偏向角

鈉光波長（?）

第四篇：標準稠度用水量測定實驗報告

土木工程材料實驗報告

專業(yè)：組號：試驗日期：

組長：組員：

實驗名稱：標準稠度用水量測定

實驗目的：測量水泥凈漿達到標準稠度的用水量，以作為水泥凝結時間和安定性實驗是所需

水量的標準。

實驗儀器：

1、標準稠度和凝結時間測定儀

2、水泥凈漿攪拌機器

3、工業(yè)天平

4、量筒

實驗原理：試錐下沉深度來確定水泥稠度是否達到標準，從而得出水泥凈漿時的用水量。

實驗步驟：

1、稱取水泥式樣500g ,水142.5ml。用濕布將實驗的用具抹濕，然后將是水泥到

入拌料筒內。

2、置拌料筒于攪拌機上，開動機器，同時徐徐加入式樣和水慢速攪拌120s，停

拌15s，接著快速攪拌120s,停機。

3、攪拌完畢后立即漿凈漿一次裝入錐模筒內，用小刀插搗并振動數次，刮去多

余凈漿，迅速放在試錐下面固定位置上，并將試錐放下，使錐尖和凈漿表面接

觸，擰緊螺釘，然后突然松開螺釘，讓試錐自由沉入凈漿中，到30s時，擰緊

螺釘，記錄試錐下沉深度。如用調整用水量法時，以試錐下沉深度為26~30~m

m時的拌合水量為標準稠度用水量。如超過或不足26~30mm時，需另稱式樣，調整用水量重新實驗，直到滿足上述要求為止。

原始數據與處理結果：

第五篇：物理實驗報告測定三棱鏡折射率

物理實驗報告測定三棱鏡折射率

【實驗目的】

利用分光計測定玻璃三棱鏡的折射率；

【實驗儀器】

分光計，玻璃三棱鏡，鈉光燈。

【實驗原理】

最小偏向角法是測定三棱鏡折射率的基本方法之一，如圖10所示，三角形 ABC 表示玻璃三棱鏡的橫截面，AB和 AC是透光的光學表面，又稱折射面，其夾角a稱為三棱鏡的頂角；BC 為毛玻璃面，稱為三棱鏡的底面。假設某一波長的光線 LD 入射到棱鏡的 AB 面上，經過兩次折射后沿 ER 方向射出，則入射線 LD 與出射線 ER 的夾角稱為偏向角。

圖10 三棱鏡的折射

由圖10中的幾何關系，可得偏向角

(3)

因為頂角a滿足，則

(4)

對于給定的三棱鏡來說，角a是固定的，隨 和 而變化。其中 與、、依次相關，因此 實際上是 的函數，偏向角 也就僅隨 而變化。在實驗中可觀察到，當 變化時，偏向角 有一極小值，稱為最小偏向角。理論上可以證明，當 時，具有最小值。顯然這時入射光和出射光的方向相對于三棱鏡是對稱的，如圖11所示。

圖11 最小偏向角

若用 表示最小偏向角，將 代入(4)式 得

（5）

或

（6）

因為，所以，又因為，則

（7）

根據折射定律 得，（8）

將式（6）、（7）代入式（8）得：

（9）

由式（9）可知，只要測出入射光線的最小偏向角 及三棱鏡的頂角，即可求出該三棱鏡對該波長入射光的折射率n.【實驗內容與步驟】

1．調節(jié)分光計

按實驗24一1中的要求與步驟調整好分光計。

2．調整平行光管

(1)去掉雙面反射鏡，打開鈉光燈光源。

(2)打開狹縫，松開狹縫鎖緊螺絲3。從望遠鏡中觀察，同時前后移動狹縫裝置2，直至狹縫成像清晰為止。然后調整狹縫寬度為1毫米左右（用狹縫寬度調節(jié)手輪 1 調節(jié)）。

(3)調節(jié)平行光管的傾斜度。將狹縫轉至水平，調節(jié)平行光管光軸仰角調節(jié)螺絲29，使狹縫像與望遠鏡分劃板的中心橫線重合。然后將狹縫轉至豎直方向，使之與分劃板十字刻度線的豎線重合，并無視差。最后鎖緊狹縫裝置鎖緊螺絲3。此時平行光管出射平行光，并且平行光管光軸與望遠鏡光軸重合。至此分光計調整完畢。

3．測三棱鏡的折射率

(1)將三棱鏡置于載物臺上，并使玻璃三棱鏡折射面的法線與平行光管軸線夾角約為 60度。

(2)觀察偏向角的變化。用光源照亮狹縫，根據折射定律判斷折射光的出射方向。先用眼睛（不在望遠鏡內）在此方向觀察，可看到幾條平行的彩色譜線，然后慢慢轉動載物臺，同時注意譜線的移動情況，觀察偏向角的變化。順著偏向角減小的方向，緩慢轉動載物臺，使偏向角繼續(xù)減小，直至看到譜線移至某一位置后將反向移動。這說明偏向角存在一個最小值（逆轉點）。譜線移動方向發(fā)生逆轉時的偏向角就是最小偏向角。用望遠鏡觀察譜線。在細心轉動載物臺時，使望遠鏡一直跟蹤譜線，并注意觀察某一波長譜線的移動情況（各波長譜線的逆轉點不同）。在該譜線逆轉移動時，擰緊游標盤制動螺絲 27，調節(jié)游標盤微調螺絲 26，準確找到最小偏向角的位置。測量最小偏向角位置。轉動望遠鏡支架 15，使譜線位于分劃板的中央，旋緊望遠鏡支架制動螺絲 21，調節(jié)望遠鏡微調螺絲 18，使望遠鏡內的分劃板十字刻度線的中央豎線對準該譜線中央，從游標 1 和游標 2 讀出該譜線折射光線的角度和。測定入射光方向。移去三棱鏡，松開望遠鏡制動螺絲 21，移動望遠鏡支架 15，將望遠鏡對準平行光管，微調望遠鏡，將狹縫像準確地位于分劃板的中央豎直刻度線上，從兩游標分別讀出入射光線的角度和。按 計算最小偏向角（取絕對值）。重復步驟 1~6，可分別測出汞燈光譜中各譜線的最小偏向角。按式（9）計算出三棱鏡對各波長譜線的折射率。計算折射率 n 的數據表格3。

【數據記錄及處理】

表3 測量最小偏向角

鈉光波長（?）次數 游標1 游標2