第一篇:氫氧化鐵的制備小教案
小教案
姓名:農(nóng)瑞嬌 學(xué)號:201010900006 姓名:梁艷榮 學(xué)號:201010900019
二氧化硫小教案
教學(xué)過程
【提出問題】SO2是一種大氣污染物,它是形成硫酸型酸雨的“罪魁禍?zhǔn)住保敲船F(xiàn)在就讓我們一起來探究SO2的實驗室制備方法和其化學(xué)性質(zhì)。【板書】二氧化硫的制備與性質(zhì)研究
【演示實驗】在玻璃皿中放蓋住小藥匙底部的少量亞硫酸鈉,將玻璃皿放在燒杯中。將分別滴加、品紅溶液、高錳酸鉀溶液、硫化鈉溶液的三張濾紙貼在漏斗內(nèi)壁,將漏斗倒扣在燒杯中,使玻璃皿在漏斗內(nèi)部。在漏斗的頸部上連接吸有幾滴濃硫酸的膠頭滴管。沿著燒杯避倒入適量的氫氧化鈉溶液,使液面漫過漏斗邊沿,但低于玻璃皿上沿。滴加濃硫酸,觀察漏斗壁上濾紙顏色的變化。【實驗現(xiàn)象板書】
(1)滴有 KMnO4 溶液的濾紙 褪色。
(2)滴有品紅溶液的濾紙褪色,加熱濾紙,后顏色重新變紅。(3)滴有 Na2S 溶液的濾紙變?yōu)辄S色?!菊砺?lián)系】
(1)滴有 KMnO4 溶液的濾紙
褪色,說明 SO2具有還原性,易被 KMnO4 所氧化。
(2)品紅溶液褪色,說明 SO2 具有漂白性;加熱已褪色的濾紙后濾紙變紅,說明SO2 的漂白性不穩(wěn)定。
(3)滴有 Na2S 溶液的濾紙變?yōu)辄S色,說明SO2 具有氧化性,易將-2價硫氧化為0價?!窘Y(jié)論板書】
二氧化硫的實驗室制法:H2SO4(濃)+Na2SO3=Na2SO4+SO2↑+H2O SO2具有還原性、氧化性、酸性、漂白性,且漂白性不穩(wěn)定。
二氧化氮的裝備及其性質(zhì)教案
1.教學(xué)目標(biāo)
(1)了解二氧化氮的物理性質(zhì)(2)掌握二氧化氮化學(xué)性質(zhì)
(3)通過觀察思考等過程訓(xùn)練科學(xué)的學(xué)習(xí)方法 2.教學(xué)重點
實驗原理和二氧化氮的化學(xué)性質(zhì) 3.課前準(zhǔn)備
所用實驗用品:50mL注射器,小燒杯三個(分別盛水,氫氧化鈉溶液,一個空的),大燒杯一個,大橡膠塞一個,表面皿一個,藍(lán)色石蕊試紙
所用藥品:銅片,濃硝酸,氫氧化鈉溶液,水 4.實驗演示過程
[提出問題]我們已經(jīng)學(xué)過二氧化氮的物理性質(zhì)和一些化學(xué)性質(zhì)以及它的制備原理,那在實驗中我們?nèi)绾蝸頇z驗它的一些化學(xué)性質(zhì)呢,由于二氧化氮是有毒氣體,在實驗中希望制備盡量少的氣體,又能完成性質(zhì)的檢驗,那我們用什么樣的實驗來實現(xiàn)我們的目的呢,下面就讓我們來看有關(guān)二氧化氮的制備和性質(zhì)檢驗的微型實驗。
[介紹媒體]我們這個實驗用的儀器很簡單,和一氧化氮的制備與性質(zhì)檢驗相似,用注射器做為反應(yīng)裝置,另外用到橡膠塞作為密封裝置。[實驗探究] 實驗原理: Cu﹢4HNO3(濃)﹦ Cu(NO3)2﹢2NO2↑+ H2O
相應(yīng)裝置(或?qū)嶒炑b置)
儀器藥品
注射器,小燒杯三個(分別盛水,氫氧化鈉溶液,一個空的),大燒杯一個,大橡膠塞一個,表面皿一個,藍(lán)色石蕊試紙
銅片,濃硝酸,氫氧化鈉溶液,水
實驗步驟
(1)在注射器中放入兩片銅片(約0.5克),將注射器推到底部(2)將輸液管插入濃硝酸中,吸入0.5ml后,將注射器插到橡膠塞上(3)待反應(yīng)停止后,看見紅棕色氣體,壓注射器活塞,引導(dǎo)學(xué)生觀察氣體顏色變淡還是變濃還是不變,取一張藍(lán)色石蕊試紙濕潤放在干凈的表面皿上,拔出注射器,讓藍(lán)色溶液流到大燒杯中,將試紙靠近針頭,試紙變紅色
(4)吸入6ml水在注射器中,看見紅棕色氣體變無色,讓水流出,吸入空氣,引導(dǎo)學(xué)生觀察那一瞬間出現(xiàn)紅棕色,(因為注射器中有水,二氧化氮溶于水所以紅棕色很快消失)實驗結(jié)束,將氣體推到氫氧化鈉溶液中。5.板書設(shè)計
二氧化氮的制備及其性質(zhì)檢驗
實驗原理:Cu﹢4HNO3(濃)﹦ Cu(NO3)2﹢2NO2↑+ H2O 化學(xué)性質(zhì)
現(xiàn)象:壓活塞,氣體顏色變淺 性質(zhì):2NO2
N2O4 藍(lán)色石蕊試紙變紅 性質(zhì):NO2為酸性氣體
吸入水后紅棕色氣體變成 無色溶液和無色氣體
氧化性,3 NO2﹢H2O﹦ NO ﹢2HNO3
第二篇:氫氧化鐵膠體的制備和性質(zhì)實驗教學(xué)設(shè)計
氫氧化鐵膠體的制備和性質(zhì)實驗教學(xué)設(shè)計
1.掌握實驗室制備氫氧化鐵膠體的實驗操作技能和方法。2.實驗探究膠體的重要性質(zhì)——丁達(dá)爾效應(yīng),學(xué)會用簡單的方法鑒別膠體和溶液。3.培養(yǎng)由宏觀實驗現(xiàn)象推斷微觀粒子大小的能力。4.認(rèn)識膠體在生活生產(chǎn)和科學(xué)研究中的應(yīng)用。1.利用已有的經(jīng)驗,并查閱有關(guān)資料或向老師咨詢,完成以下問題:(1)按分散質(zhì)或分散劑的聚集狀態(tài)(氣態(tài)、液態(tài)、固態(tài)),它們之間可以組合形成9種分散系,對每種分散系,請各舉一個實例。(2)當(dāng)分散劑是水或其他液體時,按分散質(zhì)粒子的大小不同,可將分散系分為哪幾類?對每一類請各舉幾個實例。2.膠體是物質(zhì)的一種存在形式,是一種(填“混合物”或“純凈物”)體系,它研究的(填“是”或“不是”)某種物質(zhì)特有的性質(zhì),而是物質(zhì) 所表現(xiàn)出來的性質(zhì)。由此可知,物質(zhì)的性質(zhì)不僅與 有關(guān),還與 有關(guān)。3.在實驗室制備FeOH3膠體的實驗操作方法是,有關(guān)反應(yīng)的化學(xué)方程式為。4.若將FeOH3膠體和泥水分別進(jìn)行過濾,你預(yù)測在濾紙上都有固體物質(zhì)留下嗎? 蒸餾水,F(xiàn)eCl3飽和溶液,CuSO4溶液,泥水,食鹽溶液,淀粉膠體 小燒杯,量筒,酒精燈,鐵架臺(配鐵圈),石棉網(wǎng),膠頭滴管,激光筆(或手電筒),玻璃棒,漏斗,火柴,濾紙 1.制備FeOH3膠體:在潔凈的小燒杯里加入約25 mL蒸餾水,加熱至沸騰,然后向沸水中逐滴加入12 mL FeCl3飽和溶液,繼續(xù)煮沸至液體呈紅褐色,停止加熱。FeCl3飽和溶液呈 色。FeOH3膠體呈 色。反應(yīng)的化學(xué)方程式為。2.FeOH3膠體、CuSO4溶液和泥水的外觀比較:另取兩個小燒杯分別加入約25 mL CuSO4溶液、25 mL泥水,觀察比較FeOH3膠體、CuSO4溶液
和泥水。FeOH3膠體、CuSO4溶液都是 的液體,泥水是 的液體。靜置,的分散質(zhì)會下沉。FeOH3膠體和CuSO4溶液在外觀上。三種分散系中最不穩(wěn)定的是,分散質(zhì)粒子最大的是。3.丁達(dá)爾效應(yīng):1把盛有CuSO4溶液和FeOH3膠體的燒杯置于暗處,分別用激光筆(或手電筒)照射燒杯中的液體,在與光束垂直的方向進(jìn)行觀察。2把盛有食鹽溶液和淀粉膠體的燒杯置于暗處,分別用激光筆(或手電筒)照射燒杯中的液體,在與光束垂直的方向進(jìn)行觀察。光束照射時:FeOH3膠體中、CuSO4溶液中。光束照射時:淀粉膠體中、食鹽溶液中。預(yù)測:FeOH3膠體有此現(xiàn)象的原因可能是 或 等。淀粉膠體和食鹽溶液在外觀上。綜合12可知造成膠體的丁達(dá)爾效應(yīng)的原因(填“是”或“不是”)液體的顏色,而是 不同,這一現(xiàn)象說明膠體和溶液中分散質(zhì)粒子的大小順序是。4.FeOH3膠體、泥水的過濾:按“實驗1-1”中過濾的裝置和操作方法,將FeOH3膠體和泥水分別進(jìn)行過濾,觀察現(xiàn)象。過濾后的濾紙上:FeOH3膠體、泥水。FeOH3膠體的分散質(zhì)粒子(填“能”或“不能”)透過濾紙孔隙,這說明膠體和濁液中分散質(zhì)粒子的大小順序是。結(jié)論:溶液、膠體和濁液中分散質(zhì)粒子的大小順序是,三種分散系的穩(wěn)定性順序是,三種分散系的本質(zhì)區(qū)別是。液體的顏色不同不是三種分散系的本質(zhì)區(qū)別。1.請從分散質(zhì)粒子大?。▎挝唬簄m)、主要特征、具體實例等方面列表比較濁液、溶液和膠體。2.有三瓶液體,分別是NaCl溶液、FeOH3膠體、淀粉膠體,請設(shè)計實驗方案檢出哪一瓶是NaCl溶液?由此你能得到什么結(jié)論? 3.半透膜(如雞蛋殼膜、羊皮紙、玻璃紙等)有
非常細(xì)小的孔,只能允許較小的離子、分子透過,膠體的分散質(zhì)粒子不能透過。請查閱有關(guān)資料、設(shè)計實驗方案提純精制用FeCl3飽和溶液制備的FeOH3膠體,將你的方案與同學(xué)或老師討論后,再到實驗室進(jìn)行實驗。4.查閱有關(guān)資料,列舉幾個具體實例:(1)生產(chǎn)、生活中的常見膠體及其應(yīng)用。(2)丁達(dá)爾效應(yīng)在生產(chǎn)、生活和科學(xué)研究中的重要應(yīng)用。5.本次實驗中,你還發(fā)現(xiàn)了什么問題或有什么其他新的認(rèn)識或感受? 豆丁致力于構(gòu)建全球領(lǐng)先的文檔發(fā)布與銷售平臺,面向世界范圍提供便捷、安全、專業(yè)、有效的文檔營銷服務(wù)。包括中國、日本、韓國、北美、歐洲等在內(nèi)的豆丁全球分站,將面向全球各地的文檔擁有者和代理商提供服務(wù),幫助他們把文檔發(fā)行到世界的每一個角落。豆丁正在全球各地建立便捷、安全、高效的支付與兌換渠道,為每一位用戶提供優(yōu)質(zhì)的文檔交易和賬務(wù)服務(wù)。
第三篇:二氧化硫制備實驗演示小教案
二氧化硫制備及性質(zhì)檢驗實驗小教案
教學(xué)目標(biāo): 1,、知識與技能
通過探究學(xué)習(xí),獲取二氧化硫的制備原理及性質(zhì)檢驗的機(jī)理,訓(xùn)練實驗設(shè)計及操作技能。
2、過程與方法
a.經(jīng)歷實驗探究的過程,學(xué)習(xí)科學(xué)探究的基本方法,提高化學(xué)實驗設(shè)計能力; b.發(fā)展學(xué)生自主學(xué)習(xí)、合作學(xué)習(xí)的能力。
3、情感態(tài)度與價值觀
激發(fā)學(xué)生在自主探究學(xué)習(xí)中的創(chuàng)新意識,體驗科學(xué)探究的喜悅,培養(yǎng)學(xué)生善于質(zhì)疑的精神以及嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度觀。
教學(xué)重點:探究二氧化硫的制備原理,以及二氧化硫性質(zhì)檢驗,二氧化硫漂白的原理。培養(yǎng)學(xué)生探究物質(zhì)性質(zhì)的科學(xué)方法。
教學(xué)難點:SO2制備裝置的搭建及氣密性檢驗,氣體的制備。教學(xué)方法:實驗教學(xué)法
教學(xué)過程:
【引入】之前我們已經(jīng)學(xué)過了一氧化氮、氨氣等氣體的性質(zhì)實驗,現(xiàn)在我們來學(xué)習(xí)兩種種新的氣體制備實驗——二氧化硫?!咎釂枴客瑢W(xué)們,你們聞過硫磺燃燒時的氣味嗎? 生:沒有。
師:那大家有沒有聞過煤煙味? 生:聞過
師:那股味道好聞嗎? 生:不好。因為它有刺激性。
師:好了,我們今天就制備二氧化硫,重新認(rèn)識這種氣體,研究它的化學(xué)性質(zhì)。
實驗過程: 裝置搭建如右圖:
搭建裝置時,遵循“從下到上,從左到右”原則。
氣密性檢驗時,把導(dǎo)氣管伸入水中,關(guān)掉滴液漏斗的活塞,用手捂住圓底燒瓶,當(dāng)看見導(dǎo)氣管在水中有氣泡冒出,松手后不久,導(dǎo)管里有一段水柱,則說明裝置氣密性良好。
實驗步驟:
a.向具支試管加入亞硫酸鈉固體,用醫(yī)用針筒吸取少量濃硫酸,并穿過橡膠塞。b.用蘸有酸性高錳酸鉀溶液的棉花放置在玻璃管的一端,另一端放蘸有紫色石蕊試液的棉花。
c.將導(dǎo)管接入盛有品紅的小試管中,檢驗二氧化硫的漂白性。d.品紅褪色后,將導(dǎo)管通入盛有硫化鈉的小試管中。e.將褪色的品紅溶液加熱,檢驗二氧化硫褪色的原理。
教學(xué)小結(jié):
本實驗是高中實驗中現(xiàn)象較為明顯的實驗,有利于學(xué)生加深對二氧化硫的印象,以及進(jìn)一步學(xué)習(xí)氧族元素。實驗的重點是講解二氧化硫制備原理及性質(zhì)檢驗,實驗的難點是解釋二氧化硫漂白的原理。
第四篇:7單克隆抗體制備教案
單克隆抗體的制備
一、教學(xué)目標(biāo)
知識目標(biāo):
1、單克隆抗體的概念
2、單克隆抗體的制備過程,以及過程中涉及的具體篩選過程。
3、單克隆抗體的應(yīng)用,和普通抗體相比的優(yōu)點。能力目標(biāo):
1、學(xué)會從復(fù)雜的制備過程中找出簡單的流程圖
2、注意前后知識點的對比學(xué)習(xí)。情感態(tài)度價值觀:從生物導(dǎo)彈的應(yīng)用了解單克隆抗體目前在抗癌方面的貢獻(xiàn),并努力掌握更多的相關(guān)知識。
二、教學(xué)的重點難點:
單克隆抗體的制備過程,以及過程中涉及的具體篩選過程。
三、教學(xué)課時:1課時
四、教學(xué)過程:
【一】錨式問題:從“生物導(dǎo)彈”一個新穎而又陌生的畫面入手。引發(fā)學(xué)生的探究熱情。具體結(jié)合材料和圖片來介紹生物導(dǎo)彈。資料:“生物導(dǎo)彈”是免疫導(dǎo)向藥物的形象稱呼,它由單克隆抗體與藥物或放射性同位素配合而成,因帶有單克隆抗體而能自動導(dǎo)向,在生物體內(nèi)與特定目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合,并由其攜帶的藥物產(chǎn)生治療作用。問題:生物導(dǎo)彈中的關(guān)鍵成分是什么?什么是單克隆抗體? 【二】自主探究(4分鐘,學(xué)生看課本完成)
1、長期人們怎樣獲得抗體?這樣的抗體有什么缺點?
(給動物反復(fù)注射抗原,然后在動物的血清中提取抗體??贵w產(chǎn)量低、純度低、特異性差)
2、B淋巴細(xì)胞在分泌抗體時有什么特點?B淋巴細(xì)胞實際指的是什么細(xì)胞?(一個或是一種B淋巴細(xì)胞只能分泌一種抗體;效應(yīng)B細(xì)胞或是漿細(xì)胞)
分析:這兩個問題比較簡單,而且在課本中能直接找到答案,學(xué)生迅速閱讀課本就能完成?!救坷^續(xù)探究(10分鐘,學(xué)生看課本,查閱資料,討論合作完成)
1、寫出單克隆抗體制備的過程簡圖(略,見課件)
2、怎么獲得免疫小鼠,目的是什么?
(給小鼠注射特定的抗原,使小鼠發(fā)生特定的體液免疫,產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞)
3、為何選擇B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞?
(B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特定的抗體,單不能無限增殖;骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖)
4、過程中大致需要幾次篩選?怎么篩選?目的是什么?(主要是2次。第一次為了篩選出雜交瘤細(xì)胞;第二次篩選出能大量產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。)
5、最終獲得單克隆抗體的辦法有幾種?分別是?
(兩種。體內(nèi)在小鼠的腹水中提?。惑w外在細(xì)胞的培養(yǎng)液中提?。?/p>
6、單克隆抗體制備過程涉及的技術(shù)及其原理有哪些?
(細(xì)胞融合:原理是細(xì)胞膜具有流動性;動物細(xì)胞培養(yǎng)原理:細(xì)胞增殖)
分析:上述的6個問題涉及的內(nèi)容是本節(jié)課的重點和難點,也是考點,需要和學(xué)生一起系統(tǒng)化的梳理,并強(qiáng)調(diào)重點內(nèi)容作好筆記?!舅摹坷^續(xù)探究總結(jié)
1、單克隆抗體的“單”和“克隆”分別指的是什么?
(單:單個能產(chǎn)生大量抗體的雜交瘤細(xì)胞;克?。簾o性繁殖即有絲分裂)
2、單克隆抗體的應(yīng)用主要有哪些?
(主要集中在醫(yī)學(xué)方面,診斷疾病,治療疾病等)
3、單克隆抗體的主要優(yōu)點有哪些?
(特異性強(qiáng)、靈敏度高、純度大、可大量制備)【五】運用質(zhì)疑
1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合,得到雜交細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細(xì)胞融合的是(A)A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 B.不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D.不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞
2、將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與一種B淋巴細(xì)胞融合,可使融合的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體,下列說法中不正確的是(C)A.動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ) B.實驗中雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖的方式是主動運輸
C.B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞直接放入培養(yǎng)液中就能融合為雜交瘤細(xì)胞
D.按照培養(yǎng)基的用途分類,實驗中篩選雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基
6、單克隆抗體是指(C)
A.單個骨髓瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的抗體
B.單個B淋巴細(xì)胞增殖產(chǎn)生的抗體 C.單個雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的抗體
D.單個抗體通過克隆化,產(chǎn)生大量抗體 【六】課外延伸
單克隆抗體是來自誰?如果直接給人注射,會有什么反應(yīng)?請同學(xué)想辦法來解決??!
第五篇:實驗教案 培養(yǎng)基的制備
實驗一 培養(yǎng)基的制備
一目的要求 明確培養(yǎng)基的配制原理 通過對基礎(chǔ)培養(yǎng)基的配制,掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟 二 基本原理
不同培養(yǎng)基中含有不同的微生物生長所需要的營養(yǎng)物質(zhì),其可供微生物生長繁殖用,為微生物提供C源、能源、N源和維生素。在配制固體培養(yǎng)基時還要加入一定量瓊脂作凝固劑。瓊脂在常用濃度下96度溶化,實際應(yīng)用時,一般在沸水中或下面墊以石棉網(wǎng)煮沸溶化,以免燒焦,瓊脂在40度時凝固,通常不被微生物分解利用,固體培養(yǎng)基中瓊脂含量根據(jù)瓊脂的質(zhì)量和氣溫的不同有所不同。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基:
牛肉膏:3.0g,蛋白胨10.0g,NACl5.0g,水1000ml,pH 7.2-7.4.馬鈴薯培養(yǎng)基是霉菌的基本培養(yǎng)基,培養(yǎng)基配方如下: 馬鈴薯 100g 蔗糖 10g 瓊脂 10g 水500ml pH 自然 三器材:
1試劑或溶液:馬鈴薯、蔗糖、瓊脂、蒸餾水。
2儀器或其它用具:試管、三角瓶、燒杯、玻璃棒、天平、牛角勺,紗布、麻繩、牛皮紙、高壓滅菌鍋 四操作步驟 1稱量:
依次稱取馬鈴薯塊、蔗糖、,切碎的瓊脂放入三角瓶中并加入500ml蒸餾水 2 把三角瓶放入鍋中,鍋蓋好后放在電熱爐上加熱,等瓊脂溶解后取出三角瓶 3過濾:趁熱用多層紗布過濾,去除里面的雜質(zhì) 4分裝:將配制好的培養(yǎng)基分裝入試管。
5加塞:分裝完后在試管口塞上塞子,以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基造成污染,并保證有良好的勇氣性能。
6包扎:用牛皮紙再包扎瓶口,以防滅菌時弄濕棉塞。7滅菌:用高壓蒸汽鍋在0.1MP下滅菌20min 8擱置斜面:趁熱將試管里的培養(yǎng)基斜面,注意斜面的長度大約為試管長度的1/2 9無菌檢查 五:注意事項
1培養(yǎng)基配制后,必須立即滅菌
2分裝過程中,注意不要使培養(yǎng)基沾在管口上,以免沾在塞子上而引起污染
實驗二
革蘭氏染色法
一目的要求
1學(xué)習(xí)并初步掌握革蘭氏染色法
2了解革蘭氏染色法的原理及其在細(xì)菌分類鑒定中的重要性 二基本原理
革蘭氏染色法是1884年丹麥病理學(xué)家christain Gram 創(chuàng)立的而后作了些改進(jìn),革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中最重要的鑒別染色法。革蘭氏染色法的基本步驟是:先用初染劑結(jié)晶紫進(jìn)行染色,再用碘液媒染,然后用乙醇脫色,最后用復(fù)染劑復(fù)染。經(jīng)此方法染色后,細(xì)胞保留初染劑藍(lán)紫色的細(xì)菌為革蘭氏陽性菌。如果細(xì)胞中初染劑被脫色劑洗脫而細(xì)菌染上復(fù)染劑的顏色,該菌屬于革蘭氏陰性菌。革蘭氏染色法將細(xì)菌分為革蘭氏陽性和革蘭氏陰性,是由這兩類細(xì)菌細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)和組成不同決定的。實際上,當(dāng)用結(jié)晶紫初染后,像簡單染色法一樣,所有細(xì)菌都被染成初染劑的藍(lán)紫色,碘作為媒染劑,它能結(jié)晶紫結(jié)合成結(jié)晶紫-碘復(fù)合物,從而增強(qiáng)了染料與細(xì)菌的結(jié)合力,當(dāng)用脫色劑處理時,兩類細(xì)菌的脫色效果是不同的,革蘭氏陽性細(xì)菌的細(xì)胞壁主要由肽聚糖形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組成,壁厚、類脂含量低,用乙醇脫色時細(xì)胞壁脫水,使肽聚糖的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)孔徑縮水,透性降低,從而合結(jié)晶紫-碘復(fù)合物不易被洗脫,而保留在細(xì)胞內(nèi),經(jīng)脫色和復(fù)染后仍保留初染劑 的藍(lán)紫色,革蘭氏陰性菌則不同,由于其細(xì)胞壁肽聚糖較薄、類脂含量高,所以當(dāng)脫色處理時,類脂質(zhì)被乙醇溶解,細(xì)胞壁透性增大,使結(jié)晶紫-碘復(fù)合物比較容易被洗脫出來,用復(fù)染劑復(fù)染后,細(xì)胞被染上復(fù)染劑的紅色。三器材
1菌種 大腸桿菌
2染色劑:革蘭氏染色液
(1)草酸銨結(jié)晶紫:A 液:結(jié)晶2g:95%乙醇20ml;
B 液:草酸銨0.8g;蒸餾水80ml;
混合AB兩液,靜置48h后使用()(2)盧戈氏碘液
碘片1g;碘化鉀2g;蒸餾水30ml;(3)95%乙醇
(4)番紅復(fù)染液:番紅25g;95%乙醇 100ml 取上述配好的番紅乙醇溶液10ml和 80ml蒸餾水混勻即成。3儀器或其他用具
顯微鏡 酒精燈 載玻片 接種環(huán) 蒸餾水 四 操作步驟 1制片
(1)涂片:取載玻片,各滴一小滴蒸餾水于玻片中央,有接種環(huán)無菌操作挑取菌苔于水滴中,混合 并涂成薄膜。(2)干燥:室溫自然干燥
(3)固定:涂面朝上,通過2~3次 2 初染
滴加結(jié)晶紫染色1-2Min,水洗 3 媒染
用碘液沖去殘水,并用碘液覆蓋1min,水洗 用濾紙吸去玻片上的殘水,將玻片傾斜,在魄背景下,用滴管流加95的乙醇脫色,直到流出的乙醇無紫色時,立即水洗,脫色時間一般20-30min 5復(fù)染
用番紅復(fù)染2min,水洗。并用吸水紙吸干玻片上的殘水。6鏡檢
干燥后,用顯微鏡觀察。
菌體被當(dāng)成藍(lán)紫色的是革蘭氏陽性菌,被染成紅色的革蘭氏陰性菌。實驗三
酵母菌的形態(tài)觀察及死活細(xì)胞的的鑒別
一目的要求
1觀察酵母菌的形態(tài)及出芽生殖方式,學(xué)習(xí)區(qū)分酵母菌死活的實驗方法 2 掌握酵母菌的一般特征及其與細(xì)菌的區(qū)別 二基本原理
酵母菌是不運動的單細(xì)胞真核微生物,共大小通常比常見細(xì)菌大幾倍甚至十幾倍,大多數(shù)酵母以出芽方式進(jìn)行無性繁殖,有的分裂繁殖有性繁殖通過接合產(chǎn)生子囊孢子,本實驗 通過美藍(lán)染水浸片來觀察酵母的形態(tài)和出芽生殖方式。美藍(lán)是一種無毒性的染料,它的氧化型呈現(xiàn)藍(lán)色,還原型無色。用美藍(lán)對酵母的活細(xì)胞進(jìn)行染色時,由于細(xì)胞的新陳代謝作用,細(xì)胞內(nèi)具有較強(qiáng)的還原能力,能使美藍(lán)由藍(lán)色的氧化型 變?yōu)闊o色的還原型,因此,具有還原能力的酵母活細(xì)胞是無色的,而死細(xì)胞或代謝微弱的衰老細(xì)胞則呈藍(lán)色或淡藍(lán)色,借此即可對酵母菌的死細(xì)胞和活細(xì)胞進(jìn)行鑒別。三器材
1菌種:釀酒酵母培養(yǎng)約2天的純培養(yǎng)物 2溶液或試劑:呂氏堿性美藍(lán)染色液
3儀器或其他用具:顯微鏡,載玻片 蓋玻片 四操作步驟
1美藍(lán)浸片的觀察
(1)在載玻片中央加一滴呂氏堿性美藍(lán)染色液,然后按無菌操作用接中環(huán)挑取水量酵母菌放在染液中,混合均勻。
(2)用鑷子取一塊蓋玻片,先將一邊與菌液接觸,然后慢慢將蓋玻片放下,使其不著邊際在菌液上
(3)將制片放置約3分鐘,鏡檢。先用低倍鏡,然后用高倍鏡觀察酵母的形態(tài),和出芽情況。并根據(jù)顏色區(qū)別死活細(xì)胞。
(4)染色約0.5小時后再次進(jìn)行觀察,注意死細(xì)胞的數(shù)量是否增加。2 水—碘液浸片的觀察
在載玻片中央加一小滴革蘭氏染液用碘液,然后在其上加3小滴水,取少許酵母菌苔放在水—碘液中混勻,蓋上蓋玻片后鏡檢。五實驗結(jié)果
觀察的酵母菌的形成特征:
實驗四 霉菌的形態(tài)觀察
一實驗?zāi)康?/p>
1學(xué)習(xí)并掌握觀察霉菌的形態(tài)的基本方法 2了解甲類常見霉菌的基本形態(tài)特征。二實驗原理
霉菌可產(chǎn)生復(fù)雜的分枝的菌絲體,分基內(nèi)菌絲和氣生菌絲,氣生菌絲生長 到一寂階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲,由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。霉菌菌絲體及孢子的形態(tài)特征是識別不同種類霉菌的重要依據(jù)。霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細(xì)菌和放線菌粗得多。常是細(xì)菌菌體的幾倍到幾十倍,因此,用低倍顯微鏡即可觀察。觀察霉菌的形態(tài)有多種方法,常用的有下列三種:直接制片觀察法、載玻片培養(yǎng)觀察法,玻璃紙培養(yǎng)觀察法。三實驗器材
1菌種:黃典霉 青霉 產(chǎn)黃青霉 黑根霉 2溶液與試劑:呂氏美藍(lán)染色液 蒸餾水
3儀器或其他用具:顯微鏡 載玻片 蓋玻片 接種環(huán) 濾紙 四實驗步驟
1在載玻片中央加一滴呂氏堿性美藍(lán)染色液,然后按無菌操作用接種環(huán)挑取少量霉菌放在呂氏堿性美藍(lán)染色液中,混合均勻。
2用鑷子取一塊蓋玻片,先將一邊與菌液接觸,然后慢慢將蓋玻片放下使其蓋在菌液上。3將制片放置約3MIN后鏡檢,先用低倍鏡,后用高倍鏡,觀察霉菌的形態(tài)。五結(jié)果
六思考:霉菌的孢子有哪些形態(tài)。
實驗五
微生物的分離純化
一目的要求
掌握倒平板的方法和幾種常用的分離純化微生物的基本操作技術(shù) 二基本原理
從混雜的微生物群體中獲得只含一種工某一株微生物的過程為微生物的分離與純化。常用的方法有:
1簡易單細(xì)胞挑取法
它需要特制的顯微鏡操縱器或其它顯微技術(shù),因而其使用受到限制。簡易單孢子分離法是一種不需要顯微單孢操縱器,直接在普通顯微鏡下利用低倍鏡分離單孢子的方法,它采用很細(xì)的毛細(xì)管吸取較稀的萌發(fā)的孢子懸液滴在培養(yǎng)皿蓋的內(nèi)壁上,在低倍鏡下逐個檢查微滳,將只含有一個萌發(fā)孢子的微滴放在一小塊營養(yǎng)瓊脂片,使其發(fā)育成微菌落,再將微菌落轉(zhuǎn)移2到培養(yǎng)基中,即可獲得公由單個孢子發(fā)育而成的純培養(yǎng)。2平板分離法
該方法操作簡便,普遍用于微生物的分離與純化,其基本原理包括兩方面:
(1)選擇適合待分離微生物生長條件,如營養(yǎng)、酸堿度、溫度和氧等要求或加入某種抑制劑造成只利于該微生物生長,而抑制其它微生物生長的環(huán)境,從而淘汰一些不需要的微生物。(2)微生物在固體培養(yǎng)基上生長形成的單個菌落,可以是由一個細(xì)胞繁殖而成的集合體,因此可以通過挑取單菌落而獲得一種純培養(yǎng),獲取單個菌落的方法,可通過稀釋涂布平板或平板劃線等技術(shù)完成。三器材
1菌種:米曲霉
2培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 馬鈴薯培養(yǎng)基 3溶液或試劑:試管、三角瓶、瓊脂
4儀器或其他用具:無菌玻璃棒、無菌吸管、接種環(huán)、無菌培養(yǎng)基、樣品 四操作步驟平板劃線分離法
1倒平板:按稀釋涂布平板法倒平板,并用記號筆標(biāo)明培養(yǎng)基名稱,樣品編號和實驗日期。2劃線:在近火焰處左手拿皿底,右手拿接種環(huán),挑取樣品懸液一環(huán)在平板上劃線。劃線的方法很多,但無論采用哪種方法,其目的都是通過劃線將樣品在平板上進(jìn)行稀釋,使之形成 單個菌落。常用的劃線方法有下列二種:
(1)用接種環(huán)以無菌操作挑取樣品懸液一環(huán),先平板培養(yǎng)基的一邊作第一次平等劃線3~4條,再轉(zhuǎn)動培養(yǎng)基約70度角,并將接種環(huán)上的剩余燒掉,待冷卻后通過第一次劃線部分作第二次平行劃線,再用同樣的方法通過第二次劃線部分作第三次劃線 和第四次交平行劃線。劃線完畢后,蓋上培養(yǎng)皿,倒置于溫箱培養(yǎng)。
(2)挑取有樣品的接種環(huán)在平板培養(yǎng)基上作連續(xù)劃線。劃線完畢后,蓋上培養(yǎng)皿蓋,倒置下載培養(yǎng)箱中。
(3)挑菌落 同稀釋涂布平板法,一直到分離的微生物認(rèn)為純化為止。五思考題。