第一篇：酵母菌分類學(xué)的研究進展王志偉

酵母菌分類學(xué)的研究進展

07級農(nóng)學(xué)系生物技術(shù)2班王志偉0701024208

一、摘要隨著生物技術(shù)的發(fā)展,一些新方法應(yīng)用于酵母菌分類中,使酵母菌分類學(xué)研究從過去的傳統(tǒng)分類系統(tǒng)過渡到以遺傳特征（DNA序列）為主要依據(jù)的現(xiàn)代分類系統(tǒng)。本文將介紹脈沖電泳核型分析(PFGE)、PCR-LFP和RAPD 3種分子生物技術(shù)的方法、原理,以及在酵母菌分類鑒定方面的應(yīng)用現(xiàn)狀,并指出了各種技術(shù)的局限性和應(yīng)用前景。

關(guān)鍵詞：脈沖電泳核型分析(PFGE)PCR-LFPRAPD應(yīng)用進展

二、簡介經(jīng)典分類學(xué)方法在酵母菌分類中的應(yīng)用

經(jīng)典分類學(xué)方法是酵母菌分類學(xué)方法的基礎(chǔ),包括形態(tài)學(xué)特征和生理生化特征。形態(tài)學(xué)特征包括宏觀特征(菌落特征)、微觀特征(細胞形態(tài)、無性繁殖方式、有性生殖方式、孢子類型、假菌絲的形成)等;生理生化特征包括對糖發(fā)酵和碳、氮源化合物同化的能力,對外源維生素的依賴性和不同溫度下的生長能力等生理學(xué)特性。但是，隨著酵母菌資源庫不斷豐富和新種不斷被發(fā)現(xiàn)，單靠經(jīng)典的形態(tài)學(xué)和生理生化差異作為酵母菌種間鑒別依據(jù)有時是不夠的。所以現(xiàn)在該法只能作為酵母鑒定系統(tǒng)的基礎(chǔ)輔助其他分類方法使用。

三、分子分類學(xué)方法在酵母分類中的應(yīng)用

rDNA序列分析是近年來廣泛應(yīng)用的用于判斷不同分類群親緣關(guān)系遠近的指標(biāo), 在rDNA中, 26SrDNA(LSU)和18SrDNA(SSU)以串聯(lián)重復(fù)的方式排列,在細胞內(nèi)有數(shù)以百計的拷貝,增加了擴增成功的可能性。rDNA內(nèi)某些片段具有高度的保守性,同一細胞內(nèi)不同拷貝的rRNA基因序列,因協(xié)同進化作用而被均一化,因此每一拷貝的序列是相同的。當(dāng)前酵母分類中最為常用的包括18SrDNA、26SrDNA D1/D2區(qū)、ITS區(qū)等[1]。序列分析的大致流程是:活化菌株,提取目的菌株的基因組DNA,并以此為模板使用酵母菌通用引物擴增相應(yīng)的區(qū)域,擴增產(chǎn)物經(jīng)電泳檢測,純化后進行測序;將測序得到的序列提交到Genbank等核苷酸數(shù)據(jù)庫,與庫中所有酵母菌的同源序列進行相似性比較,與相似度最高的序列的堿基差異越小, 成為該序列所對應(yīng)菌種的可能性就越大。也可以從核苷酸數(shù)據(jù)庫中下載同源序列,構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,研究菌株的系統(tǒng)發(fā)育地位。

3.1脈沖電泳核型分析(PFGE)：

脈沖電泳是一種可在瓊脂糖凝膠中將不同大小的完整染色體DNA分子分開的技術(shù)；核型分析就是應(yīng)用脈沖電泳方法發(fā)展起來的一種新的實驗技術(shù),把整個染色體包埋在瓊脂糖凝膠中,依賴染色體的大小和立體結(jié)構(gòu)（代表了一個生物所含有遺傳物質(zhì)的多少及其組成形態(tài),該特征隨物種變化而變化,因而具有特定的系統(tǒng)分類學(xué)意義）及在凝膠中的不同遷移速度把基因組分離成染色體帶[2 ]。簡要的實驗步驟包括原生質(zhì)體制備、制膠、電泳、凝膠的溴化乙錠染色觀察4個過程。而影響PFGE 成敗的因素主要有兩種:一是完整染色體DNA 的制備,二是合適的脈沖電泳條件。脈沖電泳的原理是通過電場不斷改變, 迫使DNA分子的泳動方向做相應(yīng)的改變,小的DNA分子比大的變形快,故前者比后者泳動速度快,從而將不同大小的DNA分子分開[3]。隨著脈沖電泳儀的改進以及完整染色體DNA提取方法的發(fā)展,脈沖電泳技術(shù)越來越多的被應(yīng)用于酵母菌的分類學(xué)研究中，又因為PFGE分析帶型清晰易辨、分辨力較強,可達10000 kb 以上,適用于近緣關(guān)系菌株的分類研究，可作為變種鑒別和種內(nèi)分型的新基因型方法，故而它對于釀酒酵母菌在傳統(tǒng)方法分屬后的進一步分類有重要作用。

3.2限制性片段長度多態(tài)性DNA(PCR-LFP)

RFLP即限制性片段長度多態(tài)性(restriction ragment length polymorphism)是REFP 的改進形式,它采用DNA 探針和分子雜交技術(shù),特異性更強。PCR-LFP 是將PCR擴增的基因組DNA用限制性內(nèi)切酶酶解,經(jīng)電泳分離后表現(xiàn)的限制性片段長度差異，酵母基因組含有豐富的遺傳信息,且有較大差異,不同菌株的同源序列（5.8S-ITS區(qū)域的PCR-RFLP使用得最為廣泛[4]）肯定具有不完全一致的酶切位點，,這為該方法在酵母菌分類上的應(yīng)用提供了可能。，核糖體存在于所有生物細胞中,幾乎有一個共同的起源,而且某些rRNA 序列對所有的同源生物是相當(dāng)保守的,從而可以確定所有生物的分類地位。核基因組rDNA 的內(nèi)轉(zhuǎn)錄區(qū)間ITS(Internal Transcribed Spacer)適用于種以下的分類和鑒定。利用引物擴增rDNA 的ITS 區(qū)域,用限制性內(nèi)切酶消化,不用雜交,也可獲得RFLP圖譜。FERNANDEIESPLNAR 等擴增5.8SrRNA ,包括了內(nèi)轉(zhuǎn)錄區(qū)間ITS1和ITS2 ,擴增后的基因數(shù)目從700～870 bp不等,以此對酵母菌進行RFLP鑒定分析[3 ]。

Kuhlea 等(2001)用PCR-FLP分析法分析了啤酒中的酵母類群CECT-ATA聯(lián)盟建立了一個網(wǎng)上酵母菌鑒定數(shù)據(jù)庫(http: / /004km.cn /)里面存儲了酵母菌5.8S-ITS 片段及經(jīng)Cfo I、Dde I、Hae III, HinfI限制酶酶切后的信息,只需將菌株擴增的5.8 S-ITS片段大小和經(jīng)酶酶切后的片斷數(shù)量及大小

[5]輸入數(shù)據(jù)庫,就可快速簡單地鑒定一個菌株到種。

3.3 隨機擴增多態(tài)DNA(RAPD)

RAPD(隨機擴增多態(tài)DNA)是在PCR 技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一項多態(tài)分析新技術(shù)。其原理是利用大約10 個堿基的隨機引物以PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)，對整個基因組DNA 進行擴增，得到多個片斷，再利用聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）檢測個體間擴增出的片斷的多態(tài)性，可以辨別出菌株間基因組DNA 內(nèi)核苷酸序列存在的微小變異[6]。由于該方法中選用引物的堿基是隨機的,所用引物可達成百上千,可檢測到生物體的整個基因組,既能檢測有功能的基因編碼區(qū),又能檢測到重復(fù)序列區(qū)。與RFLP相比RAPD 大大減少了如制備克隆、Southern印記、分子雜交

[7]等準備工作,簡化了技術(shù)過程所需的條件 ,它以隨機寡核苷酸為引物,比RFLP

多態(tài)片段短許多,更方便種與亞種的鑒別。

RAPD 的主要缺點有: ①RAPD 標(biāo)記中的EB 染色帶往往是一種混合標(biāo)記,是在基因組DNA 中擴增位點不一,長度可能相同或不同的一組片段的混合片段標(biāo)記;②RAPD 的擴增帶多為顯性標(biāo)記,不能區(qū)分個體基因型是純合型還是雜合型;③穩(wěn)定性和重復(fù)性較差。

四、展望

酵母菌分類學(xué)方法的發(fā)展趨勢應(yīng)該是向著簡便、快捷、準確、合理的方向發(fā)展。就當(dāng)前情況來看,任何一種方法都不完美,只有將各種方法結(jié)合起來使用,才能達到令人滿意的鑒定效果。隨著生物技術(shù)正越來越多地應(yīng)用于酵母菌的鑒定，目前流行的鑒定程序是,首先對酵母菌進行形態(tài)特征, 在此基礎(chǔ)上對DNA測序分析,多種方法綜合運用就會得到較為滿意的結(jié)果。分子分類學(xué)方法的研究為酵母菌的分類展示了廣闊的前景和越來越重要的作用。

五、參考文獻：

[1] 王慶國.劉天明.酵母菌分類學(xué)方法研究進展微生物學(xué)雜志 2007年5月第27卷第3期

[2] 劉永翔.劉作易脈沖電泳技術(shù)在真菌研究中的應(yīng)用貴州農(nóng)業(yè)科學(xué) 2004 ,32(5):82～83

[3] 毛志群.張偉.馬雯.分子生物技術(shù)在酵母菌分類中的應(yīng)用進展河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報2002年5月第25 卷增刊

[4] 盧君.李艷釀 分子生物學(xué)技術(shù)在葡萄酒相關(guān)酵母菌分類鑒定中的應(yīng)用及研究進展酒科技2009 年第6 期（總第180 期）

[5] KUHL E A , J ESPEREN L , GLOVER R L K.Identification and characterization of S accaromyces cerevisiae strains isolated from West African sorghum beer[J ].Yeast ,2001 ,18(1):106938

第二篇：王偉簡介

王偉簡介

王偉，性別：女，出生時間：1977年5月26日，1996年畢業(yè)于長春煤炭工業(yè)學(xué)校師范專業(yè)，2006年學(xué)習(xí)漢語言文學(xué)，2009年畢業(yè)于渤海大學(xué)中文系，本科學(xué)歷。

教學(xué)中潛心鉆研教材教法，廣采他山之石。先后參加南票區(qū)、葫蘆島市教師培訓(xùn)。課前，她圍繞新課改理念，深刻領(lǐng)會新課標(biāo)內(nèi)涵，準確把握、認真鉆研教材，制定科學(xué)合理的教學(xué)目標(biāo)。課堂中，她把各種教學(xué)方法有機地結(jié)合起來，閱讀教學(xué)做到融整體把握、突出重點、品味語言、領(lǐng)悟?qū)懛橐惑w，實現(xiàn)師生、生生之間平等對話，合作交流，她的課因?qū)W生個性的張揚而美麗，因教學(xué)理念的前衛(wèi)而精彩。多節(jié)公開課已錄入南票區(qū)教育局“名師俱樂部”。

她所帶的中隊常年堅持“陽光助殘”，幫助雙目失明的孤身盲人——楊振榮，多年來風(fēng)雨無阻，從不間斷，孩子們與楊爺爺朝夕相處，不是親人，勝似親人。時光流轉(zhuǎn)，歲月更迭，雖然隊員們更換了一批又一批，但“雷鋒助殘中隊”陽光助殘活動始終如一，一如既往，陽光助殘的接力棒在一批又一批的隊員手中不斷地傳承著?！袄卒h助殘中隊”曾經(jīng)被遼寧省評為“英雄中隊”，“雷鋒助殘中隊”的事跡先后在葫蘆島電視臺、遼寧電視臺、中央電視臺等各家媒體不斷播放。王偉本人參加了遼寧電視臺《中國好人》“你是我的眼”節(jié)目的錄制。辛勤耕耘換來累累碩果，多年來曾經(jīng)榮獲“葫蘆島市基礎(chǔ)教育課程改革實驗工作先進個人”、“葫蘆島市優(yōu)秀班主任”、“葫蘆島市骨干教師”、“葫蘆島市家長學(xué)校骨干教師”、“南票區(qū)優(yōu)秀教師”，所帶班

級曾經(jīng)榮獲“遼寧省英雄中隊”、“葫蘆島市紅旗中隊”、“葫蘆島市三好班級”、“南票區(qū)三好班級”，《我愛我班》被評為葫蘆島市優(yōu)秀班會、《感恩》一課在南票區(qū)教學(xué)競賽中被評為優(yōu)質(zhì)課。

成績不能滿足，榮譽催人奮進。作為一名教師，覺得自己始終要踐行為人之道，從師之道。特別是在實施教師績效考核的今天，她覺得教師更要講敬業(yè)和奉獻。她始終就是這樣去做的，堅守著三尺講臺辛勤耕耘、開拓創(chuàng)新、默默奉獻。她相信她的未來不是夢，因為，在她的心中，學(xué)生永遠是天使，她就是為天使修補翅膀的人。

第三篇：邀請函王偉

主辦單位：清鎮(zhèn)市新發(fā)現(xiàn)信息周報

承辦單位：待定

贊助單位:

支持單位:

合作單位： 貴州天運成企業(yè)管理咨詢有限公司貴州六度文化傳播有限公司清鎮(zhèn)市市政府誠信辦(擬定)

尊敬的董事長/總經(jīng)理

您好！我們誠摯的邀請您參加“新發(fā)現(xiàn)商務(wù)”論壇，期待您的光臨。論壇的核心是通過客戶的交流資源共享由此帶動的一系列其它領(lǐng)域的商務(wù)模式創(chuàng)新，幫助清鎮(zhèn)中小企業(yè)及個商界人士降低成本快速發(fā)展。我們將邀請本土的是人類經(jīng)濟發(fā)展史中前所未有的科學(xué)技型、創(chuàng)新新型經(jīng)濟。移動互聯(lián)網(wǎng)新技術(shù)、50年以來的第5個財富周期，每個周期的贏家往往比上一個周期的贏家創(chuàng)造更大的財富。新的贏家不斷涌現(xiàn)，把握新的財富周期、順應(yīng)行業(yè)趨勢、利用移動互聯(lián)網(wǎng)，中小企業(yè)就能實現(xiàn)快速成長。移動智庫，包括政府領(lǐng)導(dǎo)、知名學(xué)者、戰(zhàn)略管理專家和新經(jīng)濟營銷專家等，共同為中小企業(yè)出謀劃策，幫助中國的中小企業(yè)快速建立渠道、快速樹立品牌、快速營銷突破、順應(yīng)產(chǎn)業(yè)趨勢，智庫在全國開展巡回活動，幫助中小企業(yè)快速成長。

【會議時間】：2011年 月日星期六 下午13:30

【會議地址】：清鎮(zhèn)市東風(fēng)發(fā)電廠新發(fā)現(xiàn)廣告四樓

【參會對象】：僅限企業(yè)法人、董事長、總經(jīng)理、清鎮(zhèn)市內(nèi)個體戶。

【參會要求】：憑邀請函參加會議。僅限一人參加，無邀請函謝絕入場、參會企業(yè)商家客戶均有機會獲得新發(fā)現(xiàn)提供的廣告支持及企業(yè)管理咨詢服務(wù)……

【會議內(nèi)容概述】：廣告與產(chǎn)品的利潤關(guān)系;中小型企業(yè)如何做有效宣傳廣告定位;清鎮(zhèn)市目前的各類廣告運作模式解析；企業(yè)主如何選擇適合自己的廣告，如何應(yīng)用廣告開發(fā)新市場建立銷售渠道，廣告與商人，參會嘉賓確認回執(zhí)單

要求：請?zhí)顚懞没貓?zhí)單并加蓋公章回轉(zhuǎn)至0851-2529277（請及時回執(zhí)，座位有限）會務(wù)專線：熱線電話：0851-2529277***劉先生

第四篇：周口市電化教育先進個人事跡材料 西夏二中 王志偉

周口市電化教育先進個人事跡材料

西華縣西夏鎮(zhèn)第二初級中學(xué)

王志偉

王志偉，男，現(xiàn)年39歲，畢業(yè)于河南教育學(xué)院，中學(xué)二級教師，在西華縣西夏鎮(zhèn)第二初級中學(xué)工作。上班以來，一直擔(dān)任學(xué)校八年級的英語教學(xué)工作，據(jù)學(xué)校工作的需要，我還兼職負責(zé)學(xué)校的多媒體教室、電腦室、衛(wèi)星接收室和 光盤播放室的管理和維護工作。自從去年我縣實施義務(wù)教育電教裝備薄改以后，我還負責(zé)學(xué)校的網(wǎng)絡(luò)設(shè)備和教室教學(xué)一體機的日常管護工作。

作為學(xué)校一名普通的教育工作者，在工作上，勤勤懇懇，無私奉獻。辛勤的付出，工作中認認真真。得到了上級和學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)及同事們的信任與尊重。在我的日常管護下，學(xué)校的電教設(shè)備完好無損，運行正常。不僅保障了學(xué)校電教工作的正常開展，還多次成功地舉辦了縣級優(yōu)質(zhì)示范課的評選活動。得到縣局和學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)的表揚和肯定。

信息技術(shù)變革教育。2010年，國務(wù)院審議通過了《國家中長期教育改革和發(fā)展規(guī)劃綱要(2010-2020年)》?！毒V要》中明確提出：信息技術(shù)對教育發(fā)展具有革命性影響，必須予以高度重視。到2020年，基本建成覆蓋城鄉(xiāng)各級各類學(xué)校的數(shù)字化教育服務(wù)體系，促進教育內(nèi)容、教學(xué)手段和方法現(xiàn)代化。充分利用優(yōu)質(zhì)資源和先進技術(shù)，創(chuàng)新運行機制和管理模式，整合現(xiàn)有資源，構(gòu)建先進、高效、實用的數(shù)字化教育基礎(chǔ)設(shè)施。加快終端設(shè)施普及，推進數(shù)字化校園建設(shè)，實現(xiàn)多種方式接入互聯(lián)網(wǎng)。重點加強農(nóng)村學(xué)校信息基礎(chǔ)建設(shè)，縮小城鄉(xiāng)數(shù)字化差距。

針對以上情況，我深感責(zé)任重大。作為一名青年教師，在政治思想方面，要讓自己健康向上，正確引導(dǎo)和影響身邊的同事和學(xué)生。在業(yè)務(wù)上，我積極參加市縣舉行的各種培訓(xùn)和學(xué)習(xí)活動。還通過電視、互聯(lián)網(wǎng)了解國家大政方針，時刻把教育政策和正確的輿論導(dǎo)向放在第一位，在平凡的工作中，自覺地用中小學(xué)教師行為規(guī)范來約束自己。做好工作中的每一件事。

教育就是服務(wù)。做電教管理工作，我認為搞好服務(wù)就是本職工作。竭盡所能為全校師生服務(wù)，才是工作的重點。西夏二中是一所農(nóng)村中學(xué)，辦學(xué)條件有限，教師隊伍缺乏。學(xué)校的電教設(shè)備在管理和維護工作方面不可或缺，學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)比較重視，我也樂于付出。在學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)安排任務(wù)之后，我總是第一時間出色完成，從不計個人得失。

微信公眾平臺，是傳播信息，凝聚情感的校園新媒體。2014年10月底，我校成功開通了微信公眾平臺，我擔(dān)負起每天的微信發(fā)布任務(wù)。通過微信平臺，我們及時傳播國家的教育政策和法規(guī)、校內(nèi)外的教育信息和現(xiàn)代家教理念。微信平臺的開通，我們加強了家校聯(lián)系，提升了辦學(xué)品質(zhì)。得到了上級領(lǐng)導(dǎo)和社會的好評。

強化信息技術(shù)應(yīng)用。提高教師應(yīng)用信息技術(shù)水平，更新教學(xué)觀念，改進教學(xué)方法，提高教學(xué)效果。2014年底，周口市信息技術(shù)能力提升國培教育工程動員會在西華召開。我作為西夏二中的教師代表參加了西華縣國培輔導(dǎo)教師培訓(xùn)班。在培訓(xùn)班上，從北京奧鵬專家那里學(xué)到了新的教育理念。再次感到現(xiàn)代信息技術(shù)教育在教育發(fā)展中的重要性。日前，國培工作正在積極推進。我在做好本職教學(xué)工作的同時，還在不斷認真做好我縣初中英語07班的國培輔導(dǎo)工作。

為了加快推行學(xué)校的網(wǎng)絡(luò)化、辦公計算機化、無紙化，我和同事積極配合。電腦和網(wǎng)絡(luò)一旦出現(xiàn)問題，我都積極主動去幫他們解決。由于自己的無私和熱心，我在學(xué)校也成了大忙人。幾年來，我在工作上的努力和付出，也得到了學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)和同事們的一致好評。我個人認為，作為一個人還是多一份善良為好，幫助他人，快樂自己。

西夏二中自從接了網(wǎng)絡(luò)光纖以來，我利用網(wǎng)絡(luò)這個“平臺”，建立了校園教師課改交流QQ群。利用網(wǎng)絡(luò)，本校教師可以相互交流教學(xué)心得，極大的提高了教師的電教操作技能。在滿足學(xué)生學(xué)習(xí)的同時，為我校信息技術(shù)的發(fā)展奠定了良好的基礎(chǔ)。

成績的取得，已屬過去。在今后教育教學(xué)管理工作中，我會更加珍惜機會、奮進不止，為辦好西華人民滿意教育事業(yè)，做出更大的貢獻！

第五篇：王志偉評李寶環(huán)的主題班會課

評李寶環(huán)的主題班會課

王志偉

1.目標(biāo)：

這節(jié)課的目標(biāo)制定的合理有效，貼地皮，接地氣；英雄在學(xué)生的心目中往往是遙遠的，觸不可及的，李老師的這節(jié)課從海林本土的英雄楊子榮出發(fā)，切入主題，學(xué)生易于接受，整節(jié)課不在于對英雄實際和精神的歌功頌德，而是結(jié)合學(xué)生實際從小處著手，潤物無聲的陶冶學(xué)生的情操，樹立正確的三觀。

2.策略：

（1）整體感知策略：列舉董存瑞、雷鋒、魯迅、袁隆平的事例，學(xué)生感知英雄，引入課題。

（2）小組討論策略：不單純講述楊子榮的事跡，而是組織學(xué)生討論，讓思維碰撞。

（3）媒體輔助策略：李老師精心搜索的楊子榮視頻，幫助學(xué)生深入了解英雄的精神。

（4）問題引領(lǐng)策略：李老師這節(jié)班會課的精彩之處，就在于問題提出的恰到好處，教師引導(dǎo)的水到渠成，學(xué)生在李老師的引導(dǎo)下思考老師的問題，發(fā)表自己的見解，陶冶了情操，升華了人格。

（5）氛圍感染策略：最后一環(huán)的宣誓，振奮人心，學(xué)生受到這種易氣氛的感染和熏陶。

3.評價：結(jié)合實際的問題可以再精心設(shè)計，再當(dāng)時的氛圍中，有思維綁架的嫌疑！