第一篇：陰道分泌物檢查的方法學(xué)進(jìn)展

陰道分泌物檢查的方法學(xué)進(jìn)展

【中圖分類號(hào)】R446【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1672-3783（2013）11-0624-01

隨著生活生平不斷提升，女性對(duì)自身健康的要求越來(lái)越高，陰道分泌物檢查也在快速發(fā)展，一些傳統(tǒng)檢查方法已不能適應(yīng)患者的要求，我院也新引進(jìn)了一批新的儀器和采用更為有效的實(shí)驗(yàn)方法，筆者擬對(duì)陰道分泌物常規(guī)檢查的進(jìn)展做簡(jiǎn)要闡述。陰道分泌物檢查用于女性生殖系統(tǒng)炎癥、細(xì)菌性陰道病、腫瘤、其它病原體的診斷及雌激素水平的判斷，同時(shí)還對(duì)女性泌尿生殖道疾病的診斷治療有重要意義[1]。

1標(biāo)本的采集

標(biāo)本采集直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，我院就此給臨床科室醫(yī)護(hù)人員分發(fā)了標(biāo)本采集手冊(cè)。以前我院主要依靠臨床醫(yī)生刮取標(biāo)本置于玻片上及時(shí)送檢，送檢過(guò)程中的溫度不能有效的控制，經(jīng)及時(shí)糾正后，采集標(biāo)本的工具改為鹽水浸濕的棉拭子，目前許多商家提供有特制采集刷，大大提高了標(biāo)本采集合格率。滴蟲(chóng)和霉菌的檢出應(yīng)注意季節(jié)的關(guān)系，高溫季節(jié)檢出率明顯高于其他季節(jié)，因?yàn)榈蜗x(chóng)一般在25-42℃環(huán)境溫度中能夠運(yùn)動(dòng)生長(zhǎng)繁殖，因此標(biāo)本采集后一定要采取簡(jiǎn)便的保溫措施盡快送檢以提高檢出率[4]。

2陰道清潔度的研究

陰道分泌物作鹽水涂片，主要依靠白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、陰道桿菌及雜菌的多少劃分清潔度。傳統(tǒng)的劃分清潔度的實(shí)驗(yàn)方法已不能準(zhǔn)確的為臨床醫(yī)生提供依據(jù)，所以我院對(duì)于陰道分泌物清潔度的劃分，綜合考慮受檢者的年齡、生理、陰道正常菌群、寄生蟲(chóng)、炎癥細(xì)胞等因素。應(yīng)用流式細(xì)胞學(xué)方法（FCM）探索陰道分泌物快速定量分析，從陰道清潔度傳統(tǒng)方法（TM）和流式細(xì)胞學(xué)方法（FCM）對(duì)比中探討陰道分泌物清潔度流式細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)的可行性、分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)和參考范圍，為陰道微生態(tài)學(xué)研究、臨床陰道疾病診斷和亞健康預(yù)警研究提供快速、定量分析。通過(guò)此方法建立的清潔度分析較現(xiàn)行傳統(tǒng)方法，具有快速、定量、更客觀、更準(zhǔn)確的特點(diǎn)，重復(fù)性好，能更好地指導(dǎo)臨床并為陰道微生態(tài)的研究提供了分析手段。

3線索細(xì)胞的研究

顯微鏡觀察尋找到線索細(xì)胞是診斷細(xì)菌性陰道病的重要指標(biāo)。白帶常規(guī)鏡檢線索細(xì)胞、簡(jiǎn)便、快捷、價(jià)廉，適用于門(mén)診檢查室和基層醫(yī)院。傳統(tǒng)認(rèn)為在原來(lái)自帶常規(guī)檢查中加人線索細(xì)胞檢查可使一些常見(jiàn)婦科疾病的診斷率大大增加，漏減率大大減少。將線索細(xì)胞納入白帶常規(guī)檢查中，可為患者節(jié)省時(shí)間和費(fèi)用，為臨床診治提供了準(zhǔn)確、便捷的參考依據(jù)，使得白帶常規(guī)檢查提高一個(gè)層次。臨床檢查線索細(xì)胞常用鹽水涂片直接鏡檢法，但革蘭染色成像法中檢查線索細(xì)胞的陽(yáng)性率高于濕片法。前者簡(jiǎn)單、快速但較易誤認(rèn)與漏檢，后者準(zhǔn)確但較費(fèi)時(shí)。我院采用NaOH處理陰道分泌物，通過(guò)觀察細(xì)菌從上皮細(xì)胞中釋放的現(xiàn)象來(lái)檢查線索細(xì)胞，并同時(shí)做革蘭染色進(jìn)行對(duì)照。觀察視野時(shí)采取兩人同時(shí)進(jìn)行顯微鏡觀察，此法NaOH消化了白細(xì)胞及各種雜質(zhì)，視野清晰，細(xì)菌從線索細(xì)胞上釋放下來(lái)的現(xiàn)象能得以較清楚地觀察；退化、變性的上皮細(xì)胞由于其顆粒是細(xì)胞本身的一部分，加入NaOH后不會(huì)從上皮細(xì)胞上釋放下來(lái)，易于與線索細(xì)胞區(qū)別。菌釋試驗(yàn)的陽(yáng)性結(jié)果具有動(dòng)態(tài)效果，與鹽水涂片直接鏡檢相比能提高線索細(xì)胞的檢出率，減少誤認(rèn)與漏檢。在檢查完線索細(xì)胞后可用于檢查霉菌、纖毛菌等，尤其是在大批量婦科體檢時(shí)能明顯提高工作效率。

4鹽水稀釋法的改進(jìn)

陰道分泌物檢驗(yàn)常用生理鹽水稀釋涂片，可見(jiàn)到運(yùn)動(dòng)之滴蟲(chóng)，但氣溫較低時(shí)，尤其在冬季，或標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，原蟲(chóng)活動(dòng)性降低，不易檢出，臨床上我們習(xí)慣將標(biāo)本稍加溫后鏡檢效果也不明顯。我科采用鹽水稀酸稀堿三步法，加酸后蟲(chóng)體脹大呈圓形或長(zhǎng)圓形，蟲(chóng)體內(nèi)為粗細(xì)均勻的顆粒，有的仍可見(jiàn)到鞭毛。加酸同時(shí)將紅細(xì)胞破壞，使白細(xì)胞清晰易見(jiàn)，提高了觀察清晰度的速度。三步法加堿后迅速溶解涂片中的白細(xì)胞，上皮細(xì)胞等有形成份，低倍鏡檢，發(fā)現(xiàn)菌絲樣物，或高倍鏡檢見(jiàn)單個(gè)或成群卵圓形、無(wú)色透明的孢子，從而準(zhǔn)確報(bào)告霉菌，三步法較單純鹽水稀釋法步驟增多，但并不繁瑣，使診斷準(zhǔn)確率明顯提高，且試劑價(jià)格便宜，并大大的降低了漏診率。目前我院已經(jīng)淘汰了生理鹽水稀釋法而將鹽水稀酸稀堿三步法進(jìn)行陰道分泌物定為我科常規(guī)檢驗(yàn)。

5染色方法的研究改進(jìn)

目前的染色方法很多，白帶常規(guī)檢查加做革蘭染色后的標(biāo)本，因滴蟲(chóng)個(gè)體較大且有特定結(jié)構(gòu)易于辨認(rèn)，蟲(chóng)體內(nèi)可見(jiàn)粗細(xì)均勻的顆粒，甚至能清晰觀察到鞭毛，提高了陽(yáng)性檢出率。染色后的霉菌呈革蘭陽(yáng)性，芽生孢子及假菌絲的形態(tài)均典型突出，特別是標(biāo)本中霉菌量少又有膿細(xì)胞，上皮細(xì)胞、粘液絲等有形成份的掩蓋，革蘭染色后不易與其它污染物相混淆，因而提高了霉菌診斷率。染色后的標(biāo)本對(duì)于清潔度更容易判斷，還可進(jìn)一步了解陰道內(nèi)正常菌群與病原菌的數(shù)量及分布狀況.特別有助于對(duì)淋病奈瑟氏菌的檢查，給臨床提供更準(zhǔn)確檢查結(jié)果。采用衛(wèi)生部推廣的婦科白帶涂片多項(xiàng)檢查快速染色技術(shù)（CTB），與生理鹽水涂片法和革蘭染色對(duì)比，具有檢測(cè)項(xiàng)目多，方法簡(jiǎn)便，病原體形態(tài)清晰，檢出率高，不需特殊設(shè)備，可重復(fù)讀片，快速等優(yōu)點(diǎn)，是白帶中病原體檢測(cè)的一種較好的方法。

6質(zhì)量控制

為了提高陰道疾病實(shí)驗(yàn)室診斷的整體水平，我科通過(guò)現(xiàn)場(chǎng)陰道分泌物瑞特染色和/或革蘭染色后進(jìn)行質(zhì)量考核，將染色良好的涂片送周邊醫(yī)院臨檢室進(jìn)行交流比對(duì)，我科是四川省資陽(yáng)市臨床質(zhì)量分中心。建立了以瑞特染色或革蘭染色處理白帶標(biāo)本的一般質(zhì)量控制體系。此法可以進(jìn)行快速多項(xiàng)目檢查，設(shè)備和技術(shù)條件要求不高，成本低，易普及；尤其冬春季節(jié)查滴蟲(chóng)不受保溫措施的限制，可同時(shí)檢查核異質(zhì)細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞及線索細(xì)胞，判定清潔度，陽(yáng)性檢出率較高，有利于陰道疾病的診斷和治療。滴蟲(chóng)、霉菌及細(xì)菌性陰道炎是婦科常見(jiàn)病、多發(fā)病，為了提高其陽(yáng)性診斷率，確定致病體。目前我科依開(kāi)展PCR檢測(cè)淋菌、使用單抗檢查滴蟲(chóng)，建立熒光染色及培養(yǎng)法等方法，不斷提高陰道分泌物檢查的質(zhì)量。

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第二篇：細(xì)菌性陰道病及其實(shí)驗(yàn)室檢查

細(xì)菌性陰道病及其實(shí)驗(yàn)室檢查 【關(guān)鍵詞】細(xì)菌 【摘要】細(xì)菌性陰道病是近年來(lái)育齡婦女最常見(jiàn)的陰道感染性疾病，并被列為性傳播疾病之一，其發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。此病是一類在細(xì)菌學(xué)上表現(xiàn)為生殖道正常菌群數(shù)量減少，代之以一組厭氧菌群數(shù)量增加的臨床證候群。本文就細(xì)菌性陰道病的發(fā)病機(jī)理、病原體致病機(jī)制、實(shí)驗(yàn)室診斷方法及進(jìn)展加以綜述。

關(guān)鍵詞細(xì)菌性陰道病陰道加德納菌實(shí)驗(yàn)室檢查

細(xì)菌性陰道?。╞acterial vaginosis，簡(jiǎn)稱BV）是近年來(lái)被確定的與性傳播有關(guān)的疾病，其主要病原體為陰道加德納菌（Gv）。以往由于對(duì)它的認(rèn)識(shí)有限，曾報(bào)道過(guò)很多名稱，如非特異性陰道炎、加德納性陰道炎、陰道嗜血桿菌性陰道炎等，1984年在斯德哥爾摩關(guān)于非特異性陰道炎的國(guó)際會(huì)議上正式定名為細(xì)菌性陰道病。由于陰道加德納菌的感染與傳播和性活動(dòng)有關(guān)，故此將細(xì)菌性陰道病列入第三代性傳播疾病。隨著性病病原體感染譜的變化，其發(fā)病率有逐年增高的趨勢(shì)。1 細(xì)菌性陰道病

細(xì)菌性陰道病是育齡期婦女最常見(jiàn)的陰道感染性疾病。在健康婦女中，陰道由于組織解剖和生物化學(xué)以及生理方面的特點(diǎn)，對(duì)于外界病原體的侵入有著相當(dāng)強(qiáng)的防御能力，使病原體難以侵犯陰道，保持陰道的正常結(jié)構(gòu)和生理功能。如果陰道的自然防御屏障作用破壞，如經(jīng)期或妊娠期內(nèi)分泌激素水平改變、性交、陰道灌洗、抗生素等對(duì)陰道固有菌群的抑制，乳酸桿菌喪失其健康狀態(tài)下的優(yōu)勢(shì)地位而使多種致病菌，特別是厭氧菌大量繁殖，導(dǎo)致陰道生態(tài)系統(tǒng)紊亂，引起陰道炎癥。細(xì)菌性陰道病是由多種致病性厭氧菌感染引起的無(wú)明顯粘膜炎癥的一種疾病，感染率在15%～30%，且易復(fù)發(fā)［1］?；糂V孕婦胎膜感染的比例是健康者的3倍［2］，發(fā)生胎膜早破及早產(chǎn)的機(jī)會(huì)是健康者的2倍［3］，容易早產(chǎn)或分娩低體重兒，她們所生下的孩子也很可能會(huì)因此帶有各種缺陷。越來(lái)越多的證據(jù)表明，BV是導(dǎo)致組織性絨毛膜炎、羊水感染、剖宮產(chǎn)術(shù)后子宮內(nèi)膜炎及其他妊娠不良和妊娠并發(fā)癥的危險(xiǎn)因素。另外在婦科中，BV主要與輸卵管炎、盆腔炎、宮外孕、不孕癥、泌尿系感染、術(shù)后感染及婦科腫瘤有關(guān)［4～7］。有部分女性患者感染后得不到及時(shí)治療，或經(jīng)過(guò)不正規(guī)的治療后，轉(zhuǎn)為慢性感染或帶菌者，當(dāng)機(jī)體受外來(lái)及生理因素影響時(shí)，病原體可再次復(fù)活而侵襲傳播，使病情反復(fù)發(fā)作不能痊愈，此時(shí)病原體又不易查出，給患者帶來(lái)極大痛苦。陰道加德納菌作為一種條件致病菌，在臨床上，由于大量抗生素的應(yīng)用使加德納菌的感染率在不斷地增高，且又與性傳播有關(guān)，正逐步引起臨床的高度重視。2 細(xì)菌性陰道病的實(shí)驗(yàn)室檢查

目前對(duì)加德納菌的實(shí)驗(yàn)室診斷，主要有陰道分泌物的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)、免疫學(xué)試驗(yàn)、線索細(xì)胞檢查和細(xì)菌代謝產(chǎn)物測(cè)定等，近年來(lái)，有報(bào)道采用聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)陰道分泌物中的加德納菌，用于BV的快速診斷［8］。下面簡(jiǎn)述幾種實(shí)驗(yàn)室檢查方法及相關(guān)機(jī)理。從1954年Gardner發(fā)現(xiàn)BV以來(lái)，隨著對(duì)BV病原體認(rèn)識(shí)的改變，認(rèn)識(shí)到引起B(yǎng)V的細(xì)菌有多種，最近研究提示，引起感染的微生物數(shù)量是決定癥狀發(fā)展的關(guān)鍵［9］，但一致認(rèn)為本病特征是陰道生態(tài)環(huán)境的改變，由大量致病性厭氧菌取代了正常乳酸桿菌［10～12］，以加德納菌形態(tài)菌和（或）類桿菌形態(tài)細(xì)菌為主，其次是彎曲弧菌形態(tài)細(xì)菌、革蘭陽(yáng)性球菌，這幾種細(xì)菌可單獨(dú)感染引起B(yǎng)V，也可混合感染引起B(yǎng)V ［13］。以上一種或幾種大量增多，粘附在上皮細(xì)胞表面，使細(xì)胞溶解，邊緣呈鋸齒狀模糊不清，形成BV所特有的線索細(xì)胞。線索細(xì)胞是細(xì)菌性陰道病菌群變化后的必然產(chǎn)物，可作為診斷BV的主要指標(biāo)［14］。從1965年起革蘭染色方法用于BV的實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證，其敏感性為62%～100%，陽(yáng)性準(zhǔn)確率為76%～100%，重復(fù)性好，并與臨床表現(xiàn)具有極密切的相關(guān)性［9］。其優(yōu)點(diǎn)還在于它將陰道菌群分為正常態(tài)、過(guò)渡態(tài)和BV。處于過(guò)渡態(tài)的婦女一般有陰道pH值的略微升高、少量可見(jiàn)的線索細(xì)胞以及淡淡的異味等，診斷較為困難。這些人更可能是患有滴蟲(chóng)性陰道炎等病癥，比正常婦女則更容易患上BV。同時(shí)，該方法簡(jiǎn)便，具有容易保存及重復(fù)讀片等優(yōu)點(diǎn)，不僅可明確診斷BV，也可提高滴蟲(chóng)、霉菌等的檢出率。

BV患者陰道生態(tài)系統(tǒng)紊亂，造成厭氧菌大量繁殖，將產(chǎn)生丁二胺、三甲胺等氨類物質(zhì)，使pH值升高，堿化陰道，并進(jìn)一步促進(jìn)厭氧菌生長(zhǎng)，加重BV的臨床癥狀，引起上皮細(xì)胞脫落，分泌物增加并產(chǎn)生特殊氣味。因此，臨床上采用傳統(tǒng)的Amsel診斷方法，即符合以下4項(xiàng)指標(biāo)中的3項(xiàng)可診斷為BV:（1）陰道pH>4.5;（2）陰道分泌物增多，稀薄或均質(zhì)如面糊樣粘稠，有異味;（3）胺試驗(yàn)（Whiff）陽(yáng)性，即在陰道分泌物中加入10%KOH產(chǎn)生魚(yú)腥味;（4）陰道涂片中可見(jiàn)線索細(xì)胞［9］。由于BV是陰道中乳酸桿菌與其他多種菌群間的平衡失調(diào)所致，BV發(fā)病是混合感染。因此，對(duì)單一種類細(xì)菌的分離培養(yǎng)在BV的診斷中意義不大，必須同時(shí)結(jié)合臨床表現(xiàn)方能做出判斷。在一些與BV密切相關(guān)的細(xì)菌的培養(yǎng)試驗(yàn)中，不是特異性差，就是敏感性不好。

80年代后期，人們發(fā)現(xiàn)了BV與陰道中特有的微生物的代謝產(chǎn)物有關(guān)，并依次研究出一系列新的BV診斷技術(shù)和方法［15］。一些引起感染的微生物所產(chǎn)生的酶被認(rèn)為是致病因子。微生物可利用其自身產(chǎn)生的這些酶來(lái)干擾陰道的宿主防御體系。例如粘蛋白水解酶類中，粘蛋白酶能夠有效地分解生殖道中具有保護(hù)作用的粘蛋白外殼成分，改變宮頸防御功能，導(dǎo)致微生物進(jìn)入宮腔，并激發(fā)炎癥反應(yīng)［16］。唾液酸酶則能去除組織中接近末端的糖鏈，兩種作用均可增加細(xì)菌在宿主粘膜及組織表面的附著力;在混合性感染中，若有一種微生物產(chǎn)生粘蛋白水解酶便可改變宿主粘膜通透性，使其他細(xì)菌更容易與宿主上皮細(xì)胞結(jié)合并侵入。研究證實(shí)，唾液酸酶濃度與BV致病過(guò)程有關(guān)，其活性與早產(chǎn)、胎膜早破、低體重兒等一系列不良妊娠后果有直接關(guān)系;BV婦女陰道分泌物中的唾液酸酶活性明顯高于正常婦女，其活性上升的主要來(lái)源是存在與陰道中prevotella和bacteroids，他們?cè)谌焉锲陂g上行至生殖道引起感染。已證實(shí)子宮頸分泌的粘液以及羊水中均有大量的唾液酸，因此BV婦女明顯的比其他婦女容易發(fā)展為羊膜內(nèi)感染和產(chǎn)后子宮內(nèi)膜炎。隨著對(duì)BV發(fā)病機(jī)制的不斷深入了解，產(chǎn)生了以檢測(cè)BV患者陰道分泌物中所特有的微生物的代謝產(chǎn)物為基礎(chǔ)的診斷方法。這些方法具有優(yōu)于上述各方法的特性，客觀且適于批量操作。

脯氨酸氨肽酶法［9］ :應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)BV婦女分泌物中高于正常婦女的脯氨酸氨肽酶活性，檢測(cè)產(chǎn)物為β-naphthylamin，通過(guò)顯色劑判斷結(jié)果。體外實(shí)驗(yàn)證明許多細(xì)菌和真菌均能產(chǎn)生脯氨酸氨肽酶，但導(dǎo)致BV患者酶活性升高的原因還不十分清楚，該方法存在著一些較為嚴(yán)重的問(wèn)題。（1）有研究顯示，在應(yīng)用該方法進(jìn)行BV診斷與陰道滴蟲(chóng)感染有交叉，在相當(dāng)比例的陰道滴蟲(chóng)感染者中，脯氨酸氨肽酶檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，其原因在于滴蟲(chóng)是一種能夠在厭氧環(huán)境中大量繁殖的厭氧性病原微生物，它有一種能夠產(chǎn)氫的顆粒物質(zhì)，當(dāng)?shù)蜗x(chóng)大量存在時(shí)，其產(chǎn)生的氫會(huì)與陰道中的氧結(jié)合生成水，從而加劇陰道中的無(wú)氧狀況，刺激并加速其他厭氧微生物的生長(zhǎng)，導(dǎo)致一些BV的臨床表現(xiàn)的出現(xiàn)，其中包括陰道pH升高、分泌物增加并伴以檢測(cè)BV相關(guān)菌群的代謝產(chǎn)物為基礎(chǔ)的診斷實(shí)驗(yàn):有異味、厭氧菌數(shù)升高以及與相應(yīng)細(xì)菌有關(guān)的酶水平的升高等等。由此可見(jiàn)在應(yīng)用革蘭染色方法和本方法診斷BV時(shí)均會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性。（2）其檢測(cè)產(chǎn)物之一β-naphthylamin有強(qiáng)致癌性。已經(jīng)有人就此對(duì)該方法進(jìn)行了改進(jìn)，使產(chǎn)物變成p-nitroanilide，并指出新方法的特異性和敏感性與舊方法無(wú)明顯差異，但仍需要進(jìn)一步的臨床驗(yàn)證。（3）該方法相對(duì)來(lái)說(shuō)比較費(fèi)時(shí)，一次檢測(cè)至少需要4h。另外，該方法在結(jié)果判定方面雖然是通過(guò)顏色進(jìn)行識(shí)別，但顏色往往差別不大，陽(yáng)性和陰性的區(qū)別不易判斷。唾液酸酶法［9］ :最近的研究證實(shí)，陰道分泌物中唾液酸酶活性與BV之間存在一定的量的關(guān)系，無(wú)BV的婦女則不顯示異常的唾液酸酶活性。檢測(cè)唾液酸酶的方法有若干種，但由于技術(shù)和成本等原因未能在臨床得到普及。90年代，美國(guó)公司開(kāi)發(fā)出一種快速診斷試劑盒，用于判定BV治療用藥的臨床診斷。該方法利用陰道分泌物進(jìn)行簡(jiǎn)便操作，在10min之內(nèi)即可得出明確結(jié)果。試劑盒中包含一種與蛋白水解酶產(chǎn)生顏色反應(yīng)的結(jié)合物，該水解酶是BV的特異性指征。將患者的陰道分泌物樣本放入裝有具有顏色反應(yīng)活性的結(jié)合物的玻璃管中，于37℃保溫10min，加入顯色液，由顏色判定結(jié)果，黃色表示結(jié)果為陰性，綠色至藍(lán)色表示結(jié)果為陽(yáng)性，顏色變化的不同，反映了唾液酸酶活性升高的不同程度。這一成果大大提高了BV的診斷水平。用此方法測(cè)定診斷BV，操作簡(jiǎn)便，出結(jié)果快，陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)確，適宜于臨床篩查。

檢測(cè)其他代謝產(chǎn)物的試驗(yàn)方法還有對(duì)產(chǎn)生異味的氨類物質(zhì)的檢測(cè)，以及應(yīng)用氣-色譜技術(shù)檢測(cè)陰道分泌物中琥珀酸乳酸的量比等等，但前者缺乏特異性，后者則需要用到實(shí)驗(yàn)室不常備的儀器，因此不適合廣泛應(yīng)用。近年來(lái)研究證實(shí)，加德納菌的致病性與生物分型有關(guān)，IIS區(qū)基因的多態(tài)性是導(dǎo)致加德納菌發(fā)生不同生物型的原因之一。根據(jù)加德納菌位于IIS-23srRNA基因區(qū)序列作特異性引物，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增陰道或?qū)m頸分泌物中的加德納菌，證明該引物序列具有較強(qiáng)的特異性和較高的敏感性，可用于對(duì)陰道炎宮頸分泌物中加德納菌的快速檢測(cè)［8］。PCR法檢測(cè)的是病原體的遺傳物質(zhì)DNA，不受抗生素治療等藥物治療的影響，對(duì)徹底根治病原體有極其重要的意義。由于聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)方法本身所具有的高特異性和敏感性，采用此方法檢測(cè)陰道分泌物中的加德納菌，用于BV的快速診斷，有可能成為今后BV實(shí)驗(yàn)室診斷和主要快速檢測(cè)方法之一。

綜上所述，BV嚴(yán)重危害了廣大婦女的身體健康，對(duì)BV進(jìn)行系統(tǒng)性的篩查和治療，可以明顯降低與之相關(guān)疾病的危險(xiǎn)性，并且越早治療效果越好，對(duì)于保護(hù)廣大婦女身體健康，提高生育水平具有極大的實(shí)用價(jià)值。參考文獻(xiàn) 張欣，徐行麗，李金風(fēng)，等.陰道唾液酸酶檢測(cè)在細(xì)菌性陰道病及絨毛膜羊膜炎診斷中的價(jià)值.

第三篇：方法學(xué)驗(yàn)證（精選）

主要驗(yàn)證分析方法的可行性 含量方法學(xué) 首先肯定要有系統(tǒng)適用性、溶液穩(wěn)定性、專屬性、精密度（重復(fù)性或中間精密度）、線性、耐用性、準(zhǔn)確度、檢測(cè)限、定量限

一般一個(gè)項(xiàng)目從小試開(kāi)始、中試、放大 放大最少是三批作為驗(yàn)證批 驗(yàn)證批一般內(nèi)容一般有工藝驗(yàn)證、清潔驗(yàn)證、成品檢驗(yàn)、然后開(kāi)始穩(wěn)定性的考察、到穩(wěn)定性第六個(gè)月就可以申報(bào)到省局 這個(gè)時(shí)候就要寫(xiě)申報(bào)資料 質(zhì)量這塊主要負(fù)責(zé)10、11、14號(hào)資料（以前版本）現(xiàn)在一般是CTD資料 主要負(fù)責(zé)3.2.s部分。省局受理后一般一個(gè)月后來(lái)現(xiàn)考，主要檢查所有的檢驗(yàn)記錄、儀器使用臺(tái)賬、對(duì)照品使用臺(tái)賬。通過(guò)后有動(dòng)態(tài)批送檢，合格就送到國(guó)家局 等批件，這就要很久了 穩(wěn)定性考察還要繼續(xù)進(jìn)行一般長(zhǎng)期到36個(gè)月 上面是一個(gè)項(xiàng)目的主要流程、制劑還要進(jìn)行處方篩選，一般在小試、中試是進(jìn)行、方法學(xué)也在這個(gè)時(shí)候進(jìn)行（主要含量、有關(guān)物質(zhì)）固體還有釋放度，原料有殘留溶劑、其他已知雜質(zhì)都要有方法學(xué)的支持 針劑也要有處方的篩選、臨床稀釋液相容性、管道相容性固體分速釋、緩釋、口崩、混懸等這些都不同、從工藝到方法學(xué)都不同

實(shí)驗(yàn)室的所有儀器都必須通過(guò)驗(yàn)證、校準(zhǔn)才能用、外教一般是華南計(jì)量所的每隔一年一次

（液相兩年一次）這中間、每半年應(yīng)該有一次內(nèi)部校準(zhǔn)、每一年又一次驗(yàn)證（做了驗(yàn)證可不做內(nèi)角）

紫外、紅外也一樣

第四篇：體液學(xué)檢查進(jìn)展

隨著基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)深入研究，高新科技檢測(cè)技術(shù)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的廣泛應(yīng)用，使國(guó)內(nèi)血液各項(xiàng)檢查項(xiàng)目水平明顯提高，但相比之下，先進(jìn)的技術(shù)及方法在體液學(xué)常規(guī)檢查中應(yīng)用較少，為了提高我國(guó)體液學(xué)檢測(cè)水平，現(xiàn)將近年來(lái)國(guó)內(nèi)外進(jìn)展綜述如下。

一、尿液沉渣檢查及尿液蛋白分析 1.尿沉渣檢驗(yàn)方法學(xué)進(jìn)展主要是顯微鏡檢查的標(biāo)準(zhǔn)化和沉渣中有形成份分析方法的改進(jìn)。近年來(lái)，美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(NCCLS)，歐洲臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(ECCLS)，日本臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(JCCLS)和我國(guó)(1995年武夷山會(huì)議)先后制定的尿沉渣顯微鏡檢查法的推薦方法或試行方案，其中包括尿液標(biāo)本的采集，保存，運(yùn)輸；標(biāo)本的制作(包括特殊的離心管和標(biāo)準(zhǔn)尿板，離心力的要求，載玻片的標(biāo)準(zhǔn))操作規(guī)程及報(bào)告方式(XXX個(gè)細(xì)胞/μl)等，這些方法學(xué)的改進(jìn)使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更精確，更準(zhǔn)確，更有實(shí)驗(yàn)結(jié)果動(dòng)態(tài)分析的可比性。2.尿沉渣有形成份分析進(jìn)展主要有：(1)利用干化學(xué)試帶法檢查尿中白細(xì)胞，紅細(xì)胞，進(jìn)行顯微鏡檢查的篩選。(2)利用平面流動(dòng)池中連續(xù)位點(diǎn)圖像攝影系統(tǒng)，攝置尿沉渣粒子的靜止圖象，對(duì)尿沉渣粒子進(jìn)行自動(dòng)分類，電腦儲(chǔ)存等，形成獨(dú)立的尿沉渣自動(dòng)分析儀，或用流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合電阻抗原檢測(cè)尿中細(xì)胞成份，進(jìn)行定量分析的全自動(dòng)尿沉渣分析儀如UF-100。(3)在干涉顯微鏡下觀察尿沉渣中細(xì)胞管型，清晰度明顯提高；相差顯微鏡中由于視野明暗反差大，故對(duì)不典型紅細(xì)胞及血小板易與識(shí)別。用透射電鏡對(duì)尿沉渣的超薄切片進(jìn)行觀察，可準(zhǔn)確的診斷細(xì)菌管型，白色念珠菌管型(見(jiàn)于腎膿腫及白色念珠敗血癥患者)及血小板管型(見(jiàn)于急性彌漫性血管內(nèi)凝血患者)。用偏振光顯微鏡檢查尿沉渣，易于識(shí)別脂肪管型中的成份。(4)采用尿沉渣活體染色及細(xì)胞化學(xué)染色法等多種染色法來(lái)識(shí)別各種管型，如結(jié)晶紫-沙黃染色，可識(shí)別管型(尤其是透明管型)，并能區(qū)別存活及死亡的中性粒細(xì)胞和檢出閃光細(xì)胞。用巴氏染色觀察有形成份的細(xì)微結(jié)構(gòu)，對(duì)尿路腫瘤細(xì)胞和腎移植排異反應(yīng)具有診斷意義。細(xì)胞過(guò)氧化物酶染色，可鑒別不典型紅細(xì)胞和白細(xì)胞，并可區(qū)別中性粒細(xì)胞管型及腎上皮細(xì)胞管型。用酸性磷酸酶染色，可區(qū)分透明管型與顆粒管型。(5)應(yīng)用單克隆抗體技術(shù)識(shí)別各種細(xì)胞。臨床上可根據(jù)出現(xiàn)的不同細(xì)胞而診斷一些疑難的腎病如新月體腎炎，藥物引起的急性問(wèn)質(zhì)性腎炎，腎小管壞死等。因此尿沉渣檢查方法是很有發(fā)展前途的實(shí)驗(yàn)檢查方法。

3.尿蛋白成份分析對(duì)腎病的診斷治療以及愈后觀察都具有重要意義，這些指標(biāo)包括：(1)尿微量白蛋白檢測(cè)：a.腎小球損傷時(shí)，尿中白蛋白排出量明顯升高，其升高程度與腎小球損傷的程度相關(guān)；b.可對(duì)糖尿病性腎病，重金屬及藥物中毒等腎病早期發(fā)現(xiàn)、診斷和療效觀察提供參考依據(jù)；控制不良的糖尿病，常發(fā)生腎臟損害，尿中白蛋白排出量增加是最早出現(xiàn)的指標(biāo)之一，還可能通過(guò)檢測(cè)尿白蛋白濃度對(duì)糖尿病性腎病分期及愈后作出判斷。(2)尿中免疫球蛋白濃度測(cè)定及尿中游離輕鏈分析。尿中游離輕鏈(本周氏蛋白)的檢測(cè)對(duì)診斷輕鏈病是不可缺少的步驟，并對(duì)多發(fā)性骨髓瘤等疾病的預(yù)后判斷也有一定幫助。免疫濁度分析定量分析γ或λ輕鏈的濃度，測(cè)定結(jié)果可靠，對(duì)M蛋白Ig類型的鑒別，以及尿輕鏈的檢測(cè)，對(duì)單克隆丙球蛋白病的診斷、分類和預(yù)后都有一定參考價(jià)值。例如IgG型骨髓瘤常較IgA型或輕鏈型預(yù)后好。IgD型骨髓瘤的預(yù)后常較差，其發(fā)病年齡往往較其它類型為輕，且以λ型占多數(shù)。(3)選擇性蛋白尿測(cè)定腎小球?yàn)V膜正常時(shí)只能使分子量＜70 000的蛋白質(zhì)濾過(guò)，分子量＞70 000的蛋白質(zhì)不能濾過(guò)，稱為蛋白尿的選擇性。如果尿蛋白排出增多，但分子量仍以低分子蛋白質(zhì)為主者，即腎小球?yàn)V過(guò)膜的結(jié)構(gòu)仍保持原有大小的孔徑，稱為高選擇性蛋白尿，表示病情不太嚴(yán)重，而且用類固醇激素治療效果較好。反之如果高分子量的蛋白質(zhì)排出增多，表示選擇性降低，病情也較嚴(yán)重。通過(guò)尿IgG/血清/IgG值除以尿ALb/血清白蛋白(ALb)的值，即為選擇系數(shù)，選擇性系數(shù)＜0.1為高選擇性蛋白尿，表示病變輕微；選擇性系數(shù)在0.1～0.2之間為中度選擇性蛋白尿，表示病情一般；選擇性系數(shù)＞0.2為非選擇性或低選擇蛋白尿，表示病變嚴(yán)重。高度選擇性多見(jiàn)于微小病變，對(duì)激素和免疫抑制劑療效較好；低度選擇性多見(jiàn)于膜增性腎炎，局灶性節(jié)段性腎小球硬化或膜性腎病后期，對(duì)激素和免疫抑制劑反應(yīng)差。(4)尿中補(bǔ)體測(cè)定對(duì)腎病的診斷、鑒別診斷頗有意義。各種原發(fā)性腎小球腎炎及大多數(shù)急性腎炎，尿中往往補(bǔ)體C3陰性；而膜性增殖性腎小球腎炎。膜性腎病、狼瘡性腎炎活動(dòng)性等慢性腎病尿中補(bǔ)體C3大多為陽(yáng)性，因 此，測(cè)定尿中C3可對(duì)此類腎病作鑒別診斷。尿中補(bǔ)體測(cè)定可用于估計(jì)激素療效和預(yù)后。尿中C3陽(yáng)性的腎小球疾病患者較陰性患者病情重，含量越高病情越重。如腎病綜合征患者尿中C3測(cè)定為陰性，對(duì)激素治療則敏感。尿C3測(cè)定在腎小球疾病的預(yù)后上也有一定參考價(jià)值，它與尿內(nèi)溶菌酶測(cè)定的關(guān)系相當(dāng)密切，C3陽(yáng)性者溶菌酶基本陽(yáng)性。腎小球疾患溶菌酶增加，表明間質(zhì)已有損害，是預(yù)后不良的表現(xiàn)。臨床上所見(jiàn)C3陽(yáng)性的腎小球疾患，其病理變化也多較重。(5)β2-微球蛋白(β2-MG)測(cè)定了解腎小球?yàn)V過(guò)功能，其敏感度顯著高于目前常規(guī)應(yīng)用的血肌酐測(cè)定，當(dāng)血肌酐還不能反應(yīng)異常時(shí)，血β2-MG已顯示腎功能的異常。對(duì)IGA腎病，尤其是腎小球硬化者，即使腎功能正常，β2-MG也增高，可能由于該類疾病的患者體內(nèi)免疫反應(yīng)較強(qiáng)，淋巴細(xì)胞被激活，從T和B淋巴細(xì)胞中釋放的β2-MG增加之故。對(duì)于重金屬中毒腎損害的流行病調(diào)查，尿β2-MG可作為篩選試驗(yàn)。β2-MG水平為小管間質(zhì)性疾病的靈敏指標(biāo)，如Bartter綜合征，萬(wàn)可尼綜合征，Willson′s病，以及原發(fā)性腎炎等，尿中β2-MG均升高。(6)尿α1-微球蛋白測(cè)定腎小球。腎小管發(fā)生病變時(shí)，尿α1-MG水平升高，與判斷腎功能的另外二項(xiàng)指標(biāo)β2-MG和肌酐(Cr)呈密切相關(guān)。肌酐廓清率(Ccr)在100 ml/分以下時(shí)，α1-微球蛋白升高，為80 ml/分以下時(shí)，β2-MG開(kāi)始升高。可見(jiàn)α1-微球蛋白比β2-MG敏感，而且患惡性腫瘤時(shí)不升高，因此，與β2-MG相比，α1-MG在早期和鑒別診斷腎功能方面更具有臨床價(jià)值。[!--empirenews.page--]

二、男性學(xué)檢驗(yàn)方法學(xué)進(jìn)展

男性學(xué)檢驗(yàn)使精液分析從簡(jiǎn)單顯微鏡形態(tài)學(xué)檢查發(fā)展到多學(xué)科實(shí)驗(yàn)參數(shù)分析，使臨床能從生精細(xì)胞，睪丸，附睪，精囊，前列腺，尿道多部位分析病因與病理進(jìn)行不育癥的診斷與治療。包括：(1)精子活力從目測(cè)法發(fā)展為質(zhì)量分析儀自動(dòng)法，精子活率從目測(cè)法改為組化法。(2)精液中白細(xì)胞檢查，用WHO公布甲苯胺藍(lán)過(guò)氧化酶染色區(qū)別生精細(xì)胞與白細(xì)胞；白細(xì)胞＞10×109/L的不育患者稱為白細(xì)胞精子癥（見(jiàn)于附屬腺炎癥）。(3)生精細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查，正常人精子發(fā)育過(guò)程為：精原細(xì)胞（1.9%），初級(jí)精母細(xì)胞（9.3%）、次級(jí)精母細(xì)胞（7.5%）、精子（81.1%）；不育組分別為7.0%，9.2%，9.7%，74.0%，可見(jiàn)進(jìn)行精子細(xì)胞學(xué)形態(tài)分析對(duì)不育癥診斷與治療有重要意義。(4)生化學(xué)與免疫學(xué)分析可幫助男性生殖系各器管的病變。比如精液果糖測(cè)定(精囊)精液檸檬酸(前列腺)，精液酸性磷酸酶(前列腺)，精液肉堿(附睪、精囊)，LDH-X(存在睪丸初級(jí)精母細(xì)胞、精子細(xì)胞中)，頂體酶(精子頂體內(nèi)膜)，抗精子抗體及鋅的檢測(cè)。鋅在機(jī)體中的總量為1.5G左右，它主要集中于睪丸，附睪和前列腺，精液內(nèi)含量特別豐富，精漿比血漿中鋅的濃度高100倍以上?，F(xiàn)在認(rèn)為；a.鋅缺乏能明顯抑制腦垂體促性腺激素的釋放，使性腺發(fā)育不良，或使性腺的生殖和內(nèi)分泌功能發(fā)生障礙。b.鋅直接參與精子生成、成熟、激活和獲能過(guò)程，對(duì)精子活動(dòng)、代謝及其穩(wěn)定性都具有重要作用。研究證明[1][2][3][4]下一頁(yè)，鋅具有延緩精子膜的脂質(zhì)氧化，維持胞膜結(jié)構(gòu)的完整性和穩(wěn)定性，使精子保持良好的活力。精子通過(guò)精漿中的鋅與胞核染色質(zhì)的琉基結(jié)合，避免染色體過(guò)早解聚，有利于受精。c.鋅參與乳酸脫氫酶，脫氫酶及羧肽酶A的組成，是很多酶的輔因子，因此鋅不足可影響酶的活性，進(jìn)而影響生殖，內(nèi)分泌的功能。

三、漿膜腔積液檢查進(jìn)展

漿膜腔積液檢查的內(nèi)容日益增多，相關(guān)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)也不斷地提高，從以前化學(xué)及顯微鏡方法鑒別炎癥與非炎癥發(fā)展到用免疫學(xué)、生化學(xué)等方法鑒別引起漿膜腔積液的良性與惡性腫瘤甚至用液相色譜等手段對(duì)腫瘤進(jìn)行定位檢查，實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)的進(jìn)步使疾病的診斷更為明確，現(xiàn)代的漿膜腔積液的實(shí)驗(yàn)室檢查已成為臨床疾病診斷的重要手段。常用項(xiàng)目有：(1)新的滲出液與漏出液分類法：包括3個(gè)指標(biāo)：a.胸腹液LDH的比值＞0.6。b.胸腹蛋白同血漿蛋白比值＞0.5。c.胸腹液IgG，IgA比值＞0.5，提示為滲出液，大約90%的胸腹水滲出液顯示上述改變。(2)乳酸脫氫酶（LDH）活性測(cè)定，主要用于滲出液和漏出液的鑒別。(3)腺苷脫氫酶（ADA）總活性：對(duì)結(jié)核性積液的診斷有重要參考價(jià)值。(4)纖維連接蛋白（fibronectin，F(xiàn)N）對(duì)鑒別診斷惡性，非惡性腹水的準(zhǔn)確性達(dá)100%。惡性腹水FN顯著高于肝硬化腹水（P＜0.001）。(5)有人證實(shí)胸腔積液中的IBP含量可作為腫瘤性積液與結(jié)核性胸膜炎性積液的鑒 別診斷指標(biāo)，胸水中的IBP＞1 500 mg/ml，則為腫瘤性積液的可能性較大。(6)經(jīng)研究證實(shí)，有93%結(jié)核性胸水患者胸水溶菌酶的含量同血清溶菌酶含量的比值＞1.0，而100%惡性胸水患者此比值＜1.0。(7)β2-MG蛋白對(duì)鑒別結(jié)核性積液和非結(jié)核性積液有一定的價(jià)值。另外風(fēng)濕性胸腔積液和淋巴瘤并發(fā)的胸腔積液中，其含量也會(huì)升高，尤以后者最為顯著。但在其它疾病引發(fā)的胸腔積液，包括惡性腫瘤和系統(tǒng)性紅斑狼瘡，其中β2-MG均明顯低于結(jié)核病、風(fēng)濕病和淋巴瘤。(8)不同疾病漿膜腔積液中的纖維蛋白降解產(chǎn)物(FDP)含量不同，筆者的資料顯示，惡性腫瘤、結(jié)核性胸膜炎及腹膜胸腹水的FDP均值水平顯著高于肝硬化、肝癌。因此檢測(cè)胸腹水FDP，可以用作惡性腫瘤、結(jié)核與其他疾病診斷和鑒別診斷的指標(biāo)。(9)炎癥時(shí)C-反應(yīng)蛋白(CRP)結(jié)果較高，檢出率為100%，因?yàn)镃RP是一種急性期反應(yīng)蛋白，當(dāng)由于炎癥而導(dǎo)致腹水或胸水形成時(shí)，其中CRP含量的檢測(cè)對(duì)炎癥的診斷有一定價(jià)值。[!--empirenews.page--] FCM用于漿膜腔積液檢查主要集中在3個(gè)方面：DNA含量分析，腫瘤細(xì)胞抗原的測(cè)定，淋巴細(xì)胞的免疫表型分析。

1.DNA含量分析：用FCM進(jìn)行單個(gè)細(xì)胞DNA定量，臨床上主要用于細(xì)胞遺傳學(xué)和細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的研究。從分子生物學(xué)角度，將增殖周期分為四個(gè)階段，第1階段為DNA復(fù)制前期(G1期)此階段DNA含量為2N，第2階段為DNA復(fù)制期(S期)，此期DNA含量在2～4N之間，一旦DNA含量為4N，即進(jìn)入G2期，第四階段為分裂期。因此，F(xiàn)CM DNA定量可將形態(tài)上不易區(qū)別的群體細(xì)胞分成3個(gè)群(即G，S和G2期)，這3個(gè)群體細(xì)胞對(duì)不同的化療藥物反映不同。因此，細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的研究可利用藥物的選擇，療效的觀察及愈后的估計(jì)。另外腫瘤細(xì)胞多存在染色體的數(shù)目變化，也即DNA含量的不同。研究證明腫瘤細(xì)胞DNA含量不同，DNA指數(shù)的不同與腫瘤惡性程度有關(guān)，并可預(yù)示某些疾病的愈后。有文獻(xiàn)報(bào)告，將組織學(xué)證明的淺表胃炎，慢性萎縮性胃炎和晚期胃癌細(xì)胞做FCM DNA分析結(jié)果顯示：三者DNA非倍體分別為0(0/10例)，20%(2/10例)和90%(36/40例)，因此用FCM進(jìn)行漿膜腔積液內(nèi)細(xì)胞DNA測(cè)定屢有報(bào)告。Huang等對(duì)71例腫瘤患者檢測(cè)顯示，對(duì)惡性胸水診斷敏感性為52%，特異性為100%。若與脫落細(xì)胞檢查聯(lián)合應(yīng)用，則可使診斷敏感性達(dá)94%，F(xiàn)CM定的S期細(xì)胞比例是部分腫瘤的重要預(yù)后指標(biāo)。胸液中非整倍體腫瘤S期比例較二倍體腫瘤比例明顯增高。其中位生存期明顯縮短，Bartal等還觀察了惡性胸水局部治療前后FCM所顯示的胸水細(xì)胞DNA倍體特征，發(fā)現(xiàn)患者臨床癥狀改善與胸液細(xì)胞DNA倍體水平的變化相關(guān)，說(shuō)明倍體分析亦是評(píng)價(jià)治療效果的較好指標(biāo)。Hedley等提示：在細(xì)胞學(xué)檢查陽(yáng)性的惡性胸腔積液中，含有異倍體細(xì)胞的病人愈后差，其中位生存期與那些僅有二倍體細(xì)胞的病人相比為1.5∶4。2.腫瘤細(xì)胞抗原的測(cè)定：免疫細(xì)胞化學(xué)研究證實(shí)，利用FCM檢測(cè)上皮膜抗原(EMA)，癌胚抗原(CEA)，細(xì)胞角蛋白(Keratin)等對(duì)惡性胸水的診斷及鑒別診斷有一定的價(jià)值。Czerniak等將胸液細(xì)胞用酒精或甲醛固定后暴露于抗Cal抗原(僅出現(xiàn)于腫瘤細(xì)胞)的單克隆抗體液中，然后再與結(jié)合了異硫氰酸熒光素(FITC)的羊抗鼠免疫球蛋白，通過(guò)FCM檢測(cè)一定數(shù)量細(xì)胞的熒光強(qiáng)度，發(fā)現(xiàn)14/17例惡性胸腔積液中，熒光強(qiáng)度明顯高于對(duì)照組，而25例良性胸水液中無(wú)一例增強(qiáng)。

3.胸腔液淋巴細(xì)胞的免疫表型分析：淋巴細(xì)胞特別是T淋巴細(xì)胞的某些胸膜疾病中起著非常重要的作用。研究胸腔積液淋巴細(xì)胞的表現(xiàn)型，已成為許多專家的焦點(diǎn)。Ainslie等使用FCM證實(shí)TB胸水中富集CD4陽(yáng)性T細(xì)胞，其比例與外周血相比有明顯升高。胸水中CD4/CD8為3.92，而外周血僅為1.21。Barnes等利用FCM分選技術(shù)，將CD4陽(yáng)性細(xì)胞分為兩個(gè)亞群；CD4+CDw29+和CD4+CDw29-，結(jié)果顯示：在TB性胸水中主要是CD4+CDw29+T細(xì)胞，并產(chǎn)生γ干擾素，在對(duì)人類TB菌白細(xì)胞介導(dǎo)的局部免疫反應(yīng)中，起一個(gè)重要的作用。

四、腦脊液檢查方法進(jìn)展與應(yīng)用

1.腦脊液蛋白分析：腦脊液中免疫球蛋白檢查對(duì)腦病的診斷與鑒別診斷有重要意義。正常人腦脊液中未見(jiàn)IgM，若出現(xiàn)提示中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染。IgM濃度明顯增高是急性化膿性腦膜炎的特點(diǎn)，輕度增高是急性病毒性腦膜炎的特征，若I gM＞30 mg/L可排除病毒感染的可能。正常人IgG少于100 mg/L，IgG顯著增高（＞170 mg/L）見(jiàn)于亞急性硬化性腦炎、多發(fā)性硬化癥、結(jié)核性腦炎、麻疹腦炎及神經(jīng)梅毒等。IgA增高見(jiàn)于腦血管病等。髓鞘堿性蛋白（MBP）是神經(jīng)組織獨(dú)有的蛋白質(zhì)，是腦實(shí)質(zhì)性損傷的特異標(biāo)記。由于外傷或疾病引起神經(jīng)組織細(xì)胞破壞，髓鞘堿性蛋白即進(jìn)入腦脊液，因此測(cè)定腦脊液MBP的含量是反映腦、神經(jīng)組織細(xì)胞有無(wú)實(shí)質(zhì)性損傷敏感且可靠的指標(biāo)，其含量高低還可反映損傷的范圍及其嚴(yán)重程度。MBP定量常采用RIA和ELISA法。MBP按其存在的形式分為游離型和結(jié)合型兩種。在正常情況下，腦脊液中MBP＜6.95 mg/L，游離型6.03 mg/L，結(jié)合型＜3.31 mg/L。MS病人腦脊液中MBP變化與疾病發(fā)作有關(guān)，緩解后兩周大多數(shù)可恢復(fù)正常，而在急性期中游離型明顯增高，結(jié)合型增高不明顯，游離型/結(jié)合型比值增大。在MS穩(wěn)定期病人中，游離型和結(jié)合型均增加，其比值減少。β2-MG是Berggard和Bearn（1968年）首先自腎小管功能不全患者的尿中發(fā)現(xiàn)的。β2-MG在腦脊液中的出現(xiàn)及其濃度的增高，說(shuō)明中樞神經(jīng)系統(tǒng)有較嚴(yán)重的病理性損害。Gkle用放射免疫分析法測(cè)定，健康兒童腦脊液中β2-MG含量為(1.1±0.5)mg/L。兒童細(xì)菌性腦膜炎時(shí)明顯增高，β2-MG可達(dá)(4.4±1.7)mg/L，兒童病毒性腦炎時(shí)β2-MG為(2.0±0.6)mg/L，兒童癲癇時(shí)腦脊液中β2-MG也可增高。[!--empirenews.page--] Tenhunen報(bào)告成人腦脊液β2-MG正常值為(1.15±3.7)mg/L，當(dāng)剛發(fā)生的腦梗塞、腦膜炎、腦炎和多發(fā)性神經(jīng)病時(shí)，腦脊液中β2-MG含量增高。中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染、腫瘤和全身性自家免疫性疾患時(shí)腦脊液中β2-MG含量增高，這可能與中樞神經(jīng)系統(tǒng)免疫機(jī)制有關(guān)。1997年憲瑩等采用放射免疫法檢測(cè)54例急性白血病患兒的腦脊液β2-MG，并對(duì)其中伴中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血?。–NSL）的10例患兒的腦脊液β2-MG進(jìn)行了動(dòng)態(tài)觀察。結(jié)果顯示：27例CNSL患兒腦脊液β2-MG為3.18±1.127，27例NCNSL患兒腦脊液β2-MG為1.202±0.386，CNSL組明顯高于NCNSL組上一頁(yè)[1][2][3][4]下一頁(yè)。10例CNSL患兒治療后，病情逐漸緩解，腦脊液β2-MG逐漸下降，為1.263±0.278，與治療前相比差異有顯著意義，與NCNSL組相比差異無(wú)顯著意義。3例CNSL患兒在出現(xiàn)臨床癥狀及腦脊液檢查異常前已出現(xiàn)腦脊液β2-MG的改變。結(jié)果表明，腦脊液β2-MG與CNSL的發(fā)生及發(fā)展有著密切關(guān)系，腦脊液β2-MG的檢測(cè)可以作為早期診斷CNSL的客觀指標(biāo)之一，腦脊液β2-MG的動(dòng)態(tài)觀察也可作為評(píng)價(jià)療效的指標(biāo)。

2.腦脊液酶學(xué)檢查：正常腦脊液中的酶已知有20多種，比血清中少，但當(dāng)有些神經(jīng)系統(tǒng)疾患時(shí)腦脊液酶活性可增高。腦脊液酶活性增高的機(jī)制比較復(fù)雜，可受以下幾個(gè)方面因素的影響：(1)腦組織破壞時(shí)，從神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)酶逸出；(2)腦脊液中各種細(xì)胞解體；(3)腫瘤代謝過(guò)程中有關(guān)的酶漏出；(4)未被破壞的腦細(xì)胞酶流出量增多；(5)腦脊液酶清除率下降；(6)顱內(nèi)壓增高時(shí)酶隨腦脊液量的增多而增多；(7)血腦屏障通透性的改變，可使血中某些酶進(jìn)入腦脊液中。常用酶學(xué)檢查有腦脊液乳酸脫氫酶，其含量相當(dāng)于血清的1/10。腦脊液中乳酸脫氫酶的正常值為10～25 U，兒童較成人為高，年齡越小，乳酸脫氫酶的平均值越高：新生兒53.1 U，乳兒32.6 U，幼兒28.3 U。

凡有腦組織壞死時(shí)，腦脊液中乳酸脫氫酶增高。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾患，如細(xì)菌性腦膜炎、腦血管病、腦瘤和脫髓鞘病時(shí)，腦脊液乳酸脫氫酶增高較天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)增高更為明顯。病毒性腦膜炎時(shí)腦脊液乳酸脫氫酶多維持在正常水平，這對(duì)鑒別細(xì)菌性與病毒性腦膜炎有一定的診斷意義。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)菌感染（尤其是肺炎雙球菌腦膜炎）時(shí)，腦脊液乳酸脫氫酶顯著增高，同工酶以LDH4、5增高為主，其主要來(lái)自于粒細(xì)胞；而病毒性感染則為正常，LDH1、2上升，提示來(lái)自腦組織。無(wú)論細(xì)菌性或病毒性感染，若病人腦脊液同功酶LDH1、2顯著增高，均可作為腦實(shí)質(zhì)細(xì)胞廣泛損害的指標(biāo)。在腦血管病（包括腦梗塞、腦出血或蛛網(wǎng)膜下腔出血）的急性期，腦脊液乳酸脫氫酶均明顯增高，尤其是病情嚴(yán)重的血性腦脊液組更為突出。以后隨著病情的好轉(zhuǎn)而恢復(fù)。腦瘤在進(jìn)展期腦脊液乳酸脫氫酶增高，在緩解期下降，經(jīng)手術(shù)或其它方法治愈者，腦脊液乳酸脫氫酶恢復(fù)正常。腦組織 癌變時(shí)，腦脊液中以LDH4、5增高為主，若LDH5超過(guò)總活性的10%（特別是大于15%時(shí)），則能有力地支持腦腫瘤或軟腦膜繼發(fā)性癌的診斷。正常腦脊液中AST與ALT均約為血清中的1/4。腦脊液AST的正常值為0～19 U；ALT正常值為5～15單位。當(dāng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有器質(zhì)性病變，尤其是腦血管?。ㄈ缒X出血或蛛網(wǎng)膜下腔出血）或炎癥感染（如細(xì)菌性腦膜炎、腦炎、脊髓灰質(zhì)炎等）時(shí)，可因腦組織壞死及血腦屏障的通透性增大，在發(fā)病的第1周內(nèi)，腦脊液氨基轉(zhuǎn)移酶活性明顯增高，以AST增高較明顯。腦脊液AST的增高與腦組織的壞死以及血腦屏障的通透性增高有關(guān)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移癌、癌病性神經(jīng)肌病、大腦或小腦變性、腦萎縮、感染中毒性腦病、繼發(fā)性癲癇、缺氧性腦病、腦梗塞、家族性黑蒙性癡呆時(shí)，也可使腦脊液AST增高。肌酸激酶(CK)是在細(xì)胞線粒體內(nèi)氧化磷酸化生成的三磷酸腺苷(ATP)，以磷酸肌酸的形式進(jìn)入細(xì)胞，供應(yīng)細(xì)胞生理活動(dòng)需要的一種轉(zhuǎn)移酶。正常腦脊液CK活性尚不及血漿CK活性的1/50，主要是CK-BB同工酶。各種原因引起的缺氧性神經(jīng)系統(tǒng)疾病，缺氧后48～72小時(shí)腦脊液CK-BB活性升高，因此測(cè)定腦脊液中肌酸激酶有助于了解腦組織的破壞和細(xì)胞通透性的改變。腦脊液CK對(duì)腦膜炎性質(zhì)的鑒別診斷有一定臨床意義：化膿性腦膜炎增高最明顯，其次是結(jié)核性腦膜炎，病毒性腦膜炎僅輕度升高。1996年Nussinovitch也發(fā)現(xiàn)在細(xì)菌性腦膜炎中腦脊液中CK-BB活性明顯高于對(duì)照組和其它無(wú)細(xì)菌性腦膜炎，認(rèn)為在常規(guī)檢查不能區(qū)別細(xì)菌性與病毒性腦膜炎時(shí)，腦脊液CK-BB同功酶測(cè)定是一個(gè)很好的鑒別指標(biāo)。溶菌酶（Lys）是一種水解酶，由18種氨基酸共120個(gè)氨基酸殘基所組成分子量為14 500～17 500的堿性多肽。正常腦脊液中沒(méi)有溶菌酶或極微，當(dāng)細(xì)菌性腦膜炎時(shí)，由于血腦屏障通透性增高，可使血中的溶菌酶進(jìn)入腦脊液內(nèi)，使腦脊液溶菌酶活性增高。化膿性腦膜炎、病毒性腦炎、腦瘤或血腦屏障破壞時(shí)，腦脊液中溶菌酶活性也可增高，但不如結(jié)核性腦膜炎增高明顯。1977年Gekle報(bào)告，兒童細(xì)菌性腦膜炎時(shí)腦脊液溶菌酶增高［平均含量(2.3±1.4)mg/L］；病毒性腦膜炎時(shí)僅輕度增高；當(dāng)細(xì)菌性腦膜炎臨床癥狀改善時(shí)，溶菌酶活性下降。因此，溶菌酶的測(cè)定對(duì)鑒別細(xì)菌性和病毒性腦膜炎，及判斷其預(yù)后有重要意義。有些細(xì)菌性腦膜炎患者入院前已使用過(guò)抗菌素，以致掩蓋腦脊液細(xì)胞和生化的改變，細(xì)菌培養(yǎng)陰性，?？蓪?dǎo)致誤診，但這些患者腦脊液中的溶菌酶往往仍增高，因此認(rèn)為測(cè)定腦脊液溶菌酶是一種可靠的輔助診斷方法。[!--empirenews.page--] 3.關(guān)節(jié)腔積液檢查：關(guān)節(jié)滑膜液檢查對(duì)關(guān)節(jié)病的診斷十分重要。常規(guī)關(guān)節(jié)滑膜液檢查是指容量、透明度與顏色、粘滯性、細(xì)胞計(jì)數(shù)、顯微鏡檢查（吞噬性血細(xì)胞即RA細(xì)胞、結(jié)晶體、狼瘡細(xì)胞）、粘蛋白凝塊形成以及糖、蛋白定量、尿酸、乳酸、類風(fēng)濕因子、各種不同的抗核抗體檢查等生化學(xué)、免疫學(xué)檢驗(yàn)。這些檢查對(duì)于鑒別積液性質(zhì)（炎癥性、非炎癥性、化膿性及出血性）有重要臨床意義。

近年來(lái)，關(guān)節(jié)腔積液的研究逐步深入，臨床應(yīng)用也日益廣泛。有作者用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）對(duì)34例類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）患者的關(guān)節(jié)液評(píng)估人巨細(xì)胞病毒（CMV）基因物質(zhì)，巨細(xì)胞病毒DNA-陽(yáng)性的類風(fēng)濕 關(guān)節(jié)炎患者IL-8和IL-6水平顯著高于DNA-陰性的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者并且比對(duì)照的骨關(guān)節(jié)炎患者至少高10倍。這些發(fā)現(xiàn)提示IL-

8、IL-6水平升高和CMV基因組出現(xiàn)之間存在聯(lián)系。有作者用抗人C1qC鏈的單克隆抗體，在類風(fēng)濕（RA）患者血清和關(guān)節(jié)液中檢測(cè)到C1q-關(guān)聯(lián)免疫復(fù)合物（IC）。夾心-ELISA中，C1q-關(guān)聯(lián)IC被固相單克隆抗體捕獲并用抗人IgG或IgM的過(guò)氧化物酶-標(biāo)記的F（ab′）2-抗體檢測(cè)出來(lái)。測(cè)定結(jié)果與C1q固相結(jié)合試驗(yàn)的改良ELISA法比較（C1q-SPBA），在81.1%類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎血清和65.2%類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)液中檢測(cè)到C1q-關(guān)聯(lián)IC。提示抗C-C1q單克隆抗體的測(cè)定可能是類風(fēng)濕病診斷的有用指標(biāo)。有人對(duì)15例類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和15例其他疾?。ü顷P(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、痛風(fēng)等）患者關(guān)節(jié)內(nèi)和循環(huán)中的免疫復(fù)合物的免疫球蛋白重鏈同型成分用Raji細(xì)胞流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)液中ICs出現(xiàn)非常普遍，但是非類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清和關(guān)節(jié)液很少出現(xiàn)。巨噬細(xì)胞滲透進(jìn)入滑膜在炎癥性關(guān)節(jié)疾病中發(fā)揮著重要作用。單核細(xì)胞化學(xué)誘導(dǎo)蛋白-1（MCP-1）是最近鑒別出來(lái)的炎癥滑膜上的一種單核細(xì)胞趨化蛋白。MCP-1在多種炎性關(guān)節(jié)疾病中均可出現(xiàn)，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)和外傷性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)液中都含有MCP-1。體外培養(yǎng)時(shí)MCP-1也可由類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和其他炎癥性 關(guān)節(jié)疾病患者的滑膜產(chǎn)生，生成量差別不顯著。MCP-1水平與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)滑膜培養(yǎng)的上清液中IL-1β，IL-6，并且IL-8的水平顯著相關(guān)。類風(fēng)濕病的滑膜中，MCP-1和其他炎癥前細(xì)胞因子（IL-1β，IL-6，IL-8和TNF-α）與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的免疫病原增多癥不無(wú)關(guān)系。血清學(xué)檢查陰性的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)液以白細(xì)胞增多（7 656/mm3）、多核細(xì)胞增多（65.38%）和ragocyte細(xì)胞增多（59.27%）為特點(diǎn)，而關(guān)節(jié)積液形態(tài)學(xué)上以淋巴細(xì)胞增多（47%）為主要特征。超微結(jié)構(gòu)的改變，免疫復(fù)合物（CIC），免疫球蛋白和抗膠原Ⅱ抗體，提示這些免疫因子在發(fā)病早期的參與。Bray等人在研究中標(biāo)記了類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)液?jiǎn)蝹€(gè)核細(xì)胞中的大顆粒淋巴細(xì)胞。細(xì)胞化學(xué)和流式細(xì)胞研究表明類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者與那些非類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者相比，關(guān)節(jié)液?jiǎn)蝹€(gè)核細(xì)胞中的大顆粒淋巴細(xì)胞的[!--empirenews.page--]上一頁(yè)[1][2][3][4]下一頁(yè) 百分含量增加。流式細(xì)胞學(xué)分析證明一種表達(dá)罕見(jiàn)顯型CD3+/CD16+的細(xì)胞數(shù)量增加。然而這些細(xì)胞在正常人含量極低（少于2%），這在淋巴細(xì)胞增生紊亂中已有報(bào)道。近70%類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的此類細(xì)胞構(gòu)成了所有關(guān)節(jié)液?jiǎn)蝹€(gè)核細(xì)胞的20%～80%。此外，CD3+/CD16+細(xì)胞大于20%的關(guān)節(jié)液即使用重組IL-2孵育之后，也沒(méi)有顯著的細(xì)胞分解活性，然而CD3+/CD16+細(xì)胞不足20%的關(guān)節(jié)液卻有正常的細(xì)胞溶解活性。部分類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)理之中這些細(xì)胞的關(guān)聯(lián)性尚不清楚，但仍可鑒別CD3+/CD16+細(xì)胞異常而不是T細(xì)胞淋巴細(xì)胞增多癥。

可以看出體液學(xué)檢驗(yàn)有廣泛的前途和應(yīng)用前景，開(kāi)展體液學(xué)檢驗(yàn)對(duì)臨床診斷與治療有重要的價(jià)值和意義。

第五篇：創(chuàng)新方法學(xué)大論文

基于TRIZ的產(chǎn)品沖突問(wèn)題解決實(shí)例應(yīng)用

謝海燕231000334在前蘇聯(lián)，TRIZ方法一直被作為大學(xué)專業(yè)技術(shù)必修科目，已廣泛應(yīng)用于工程領(lǐng)域中。蘇聯(lián)解體后，大批TRIZ研究者移居美國(guó)等西方國(guó)家，TRIZ流傳于西方，受到極大重視，TRIZ的研究與實(shí)踐得以迅速普及和發(fā)展。西北歐、美國(guó)、臺(tái)灣等地出現(xiàn)了以TRIZ為基礎(chǔ)的研究、咨詢機(jī)構(gòu)和公司，一些大學(xué)將TRIZ 列為工程設(shè)計(jì)方法學(xué)課程。經(jīng)過(guò)半個(gè)多世紀(jì)的發(fā)展，如今TRIZ理論和方法已經(jīng)發(fā)展成為一套解決新產(chǎn)品開(kāi)發(fā)實(shí)際問(wèn)題的成熟的理論和方法體系，工程實(shí)用性強(qiáng)，并經(jīng)過(guò)實(shí)踐的檢驗(yàn)，如今它已在全世界廣泛應(yīng)用，創(chuàng)造出成千上萬(wàn)項(xiàng)重大發(fā)明，為知名企業(yè)取得了重大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。

TRIZ理論廣泛應(yīng)用于工程技術(shù)領(lǐng)域，目前已逐步向其他領(lǐng)域滲透和擴(kuò)展。應(yīng)用范圍越來(lái)越廣，由原來(lái)擅長(zhǎng)的工程技術(shù)領(lǐng)域分別是向自然科學(xué)、社會(huì)科學(xué)、管理科學(xué)、生物科學(xué)等領(lǐng)域發(fā)展?，F(xiàn)在已總結(jié)出了40條發(fā)明創(chuàng)造原理在工業(yè)、建筑、微電子、化學(xué)、生物學(xué)、社會(huì)學(xué)、醫(yī)療、食品、商業(yè)、教育應(yīng)用的案例，用于指導(dǎo)各領(lǐng)域遇到問(wèn)題的解決。

下面，從以下一個(gè)例子來(lái)看TRIZ的產(chǎn)品沖突問(wèn)題解決實(shí)例應(yīng)用：如何防止汽車的擋風(fēng)玻璃裝置產(chǎn)生噪音。

該問(wèn)題產(chǎn)生的應(yīng)用背景：用于固定汽車擋風(fēng)玻璃裝置，在汽車高速行駛時(shí)會(huì)發(fā)出“吱吱”和“嗡嗡”的噪音。這一噪音已經(jīng)存在了很長(zhǎng)時(shí)間，大約在十年前，當(dāng)制造這些裝置的材料從金屬改變成塑料時(shí)，這一問(wèn)題變得更加復(fù)雜和明顯。曾經(jīng)有一些研究人員在過(guò)去的五年中嘗試了許多的設(shè)計(jì)方法到行之有效和低成本的，但不幸的是，一直沒(méi)有找到解決的方案。

若解決了該問(wèn)題后所產(chǎn)生的效益是巨大的，從經(jīng)濟(jì)效益來(lái)看，在不增加生產(chǎn)成本的基礎(chǔ)上，提高汽車生產(chǎn)企業(yè)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力；從社會(huì)效益來(lái)看，可以讓乘車人在乘坐時(shí)更加舒服，提高產(chǎn)品的舒適度。

用于固定汽車擋風(fēng)玻璃裝置，在汽車高速行駛時(shí)會(huì)發(fā)出“吱吱”和“嗡嗡”的噪音。產(chǎn)生“吱吱”聲的原因是由于裝置邊緣在和金屬車體接觸時(shí)，在水平方向上產(chǎn)生的摩擦力并由此產(chǎn)生的粘滑現(xiàn)象所造成的。而嗡嗡聲是由于汽車在高速行駛產(chǎn)生的“伯努力效應(yīng)”導(dǎo)致固定汽車擋風(fēng)玻璃裝置邊緣在間斷變化的空氣壓力下產(chǎn)生上下顫動(dòng)所發(fā)出的聲音。

所以在這個(gè)系統(tǒng)存在的矛盾主有以下兩個(gè)。一個(gè)是技術(shù)矛盾：如果提高固定汽車擋風(fēng)玻璃裝置邊緣的硬度，則可以防止“嗡嗡聲”的產(chǎn)生，但是提高該裝置的硬度，又會(huì)是該裝置沿邊緣水平方向上產(chǎn)生的“吱吱”噪音增強(qiáng)，如果降低于固定汽車擋風(fēng)玻璃裝置邊緣的硬度，則可以消除“吱吱”噪音，但是由于降低硬度使前一種前一種噪音。一個(gè)是物理矛盾：固定汽車擋風(fēng)玻璃裝置邊緣硬度必須同時(shí)具有高和低的特性。

解決方案一是應(yīng)用TRIZ創(chuàng)新原理，運(yùn)用滾動(dòng)來(lái)抵滑動(dòng)摩擦力。

待解決的問(wèn)題是固定汽車擋風(fēng)玻璃裝置邊緣硬度過(guò)硬，雖然消除了嗡嗡聲，但是增大了吱吱聲。解決的方向是改變裝置邊緣，將裝置邊緣和車體的接觸方式 1

變?yōu)闈L動(dòng)接觸。解決方案：在裝置邊緣設(shè)置可滾動(dòng)的柱狀體，使得裝置邊緣和車體接觸時(shí)產(chǎn)生的震蕩和摩擦均圍繞中心點(diǎn)，或是在邊緣采用管狀結(jié)構(gòu)，對(duì)偏高中心的水平方向切線運(yùn)動(dòng)做補(bǔ)償。最終結(jié)果：當(dāng)裝置邊緣采用了滾動(dòng)方式與車體接觸后，即使增加邊緣裝置的硬度，也能夠使裝置邊緣在水平切線方向上變得“柔軟”，防止了“吱吱”的尖嘴噪音產(chǎn)生。同時(shí)也防止了在水平方向的運(yùn)動(dòng)過(guò)程中的“粘貼”現(xiàn)象的產(chǎn)生。

解決方案二是應(yīng)用TRIZ創(chuàng)新原理，提高強(qiáng)度并減輕重量。

待解決的問(wèn)題是固定汽車擋風(fēng)玻璃裝置邊緣硬度，減輕“嗡嗡”的噪音，同時(shí)防止“吱吱”噪音聲波的產(chǎn)生和傳播。解決方向：使用特殊的合成材料制作固定汽車擋風(fēng)玻璃裝置，來(lái)提高裝置的邊緣硬度和防止噪音聲波的發(fā)散。解決方案：在原有裝置的材料中，沿著裝置邊緣添加細(xì)金絲，增加系統(tǒng)強(qiáng)度，減輕“嗡嗡”的噪音，同時(shí)對(duì)“吱吱”噪音聲波的傳播到干涉作用，降低了“吱吱”的噪音。進(jìn)一步，可以根據(jù)TRIZ理論關(guān)于技術(shù)特性演化的八大定律其中的：“技術(shù)系統(tǒng)總是沿著從單一到雙最后到多的方向進(jìn)行演化”，對(duì)該裝置進(jìn)行進(jìn)一步變更，使金屬絲在結(jié)構(gòu)內(nèi)部呈網(wǎng)狀排列，該網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)可以用PVC擠壓成型。最終結(jié)果：使用該網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的合成材料，能夠提高裝置邊緣的硬度，降低“嗡嗡”噪音，同時(shí)也保留材料外表面的柔軟性，防止“吱吱”噪音的產(chǎn)生。

解決方案三是應(yīng)用TRIZ創(chuàng)新原理，技術(shù)系統(tǒng)總是沿著從單一到雙最后到多的方向進(jìn)行演化。待解決的問(wèn)題：提高汽車擋風(fēng)玻璃固定裝置外層的硬度，減輕“嗡嗡”的噪音，降低裝置內(nèi)層得硬度，同時(shí)防止“吱吱”噪音。解決方案：固定裝置邊緣內(nèi)層由柔軟的材料構(gòu)成，用于減輕車體金屬板和玻璃的相對(duì)運(yùn)動(dòng)，從而防止“吱吱”噪音的產(chǎn)生：固定裝置邊緣外層由堅(jiān)硬的材料構(gòu)成，能夠加強(qiáng)裝置的穩(wěn)定性，減輕“嗡嗡”的噪音。

還有一個(gè)例子是自行車剎車靴創(chuàng)新結(jié)構(gòu)。存在的技術(shù)矛盾有：如何用單一剎車靴（最方便）使自行車 A在干/濕路面下均可正常操作(提供足夠剎車力)。B.避免操作過(guò)程中產(chǎn)生之有害因子的影響。C.外部影響因子(水、細(xì)石)之有效控制解決方案一是使用復(fù)合材料，剎車墊上局部區(qū)域材質(zhì)改變或者解決方案二是將慣用結(jié)構(gòu)以彈性元件連結(jié)，利用一媒介執(zhí)行某一動(dòng)作，或暫時(shí)連接在原物體上，但可以移除?？梢?jiàn)，TRIZ理論以其良好的可操作性、系統(tǒng)性和實(shí)用性在全球的創(chuàng)新和創(chuàng)造學(xué)研究領(lǐng)域占據(jù)著獨(dú)特的地位。運(yùn)用TRIZ理論，可大大加快人們創(chuàng)造發(fā)明的進(jìn)程，而且能得到高質(zhì)量的創(chuàng)新產(chǎn)品。它能夠幫助我們系統(tǒng)的分析問(wèn)題情境，快速發(fā)現(xiàn)問(wèn)題本質(zhì)或者矛 盾，它能夠準(zhǔn)確確定問(wèn)題探索方向，不會(huì)錯(cuò)過(guò)各種可能，而且它能夠幫助我們突破思維障礙，打破思維定勢(shì)，以新的視覺(jué)分析問(wèn)題，進(jìn)行邏輯性和非邏輯性的系統(tǒng)思 維，還能根據(jù)技術(shù)進(jìn)化規(guī)律預(yù)測(cè)未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)，幫助我們開(kāi)發(fā)富有競(jìng)爭(zhēng)力的新產(chǎn)品。

TRIZ理論廣泛應(yīng)用于工程技術(shù)領(lǐng)域，目前已逐步向其他領(lǐng)域滲透和擴(kuò)展。應(yīng)用范圍越來(lái)越廣，由原來(lái)擅長(zhǎng)的工程技術(shù)領(lǐng)域分別是向自然科學(xué)、社會(huì)科學(xué)、管理科學(xué)、生物科學(xué)等領(lǐng)域發(fā)展?，F(xiàn)在已總結(jié)出了40條發(fā)明創(chuàng)造原理在工業(yè)、建筑、微電子、化學(xué)、生物學(xué)、社會(huì)學(xué)、醫(yī)療、食品、商業(yè)、教育應(yīng)用的案例，用于指導(dǎo)各領(lǐng)域遇到問(wèn)題的解決。

TRIZ是專門(mén)研究創(chuàng)新設(shè)計(jì)的理論，已建立一系列的普適性工具幫助設(shè)計(jì)者盡快獲得滿意的領(lǐng)域 解。TRIZ作為技術(shù)問(wèn)題或發(fā)明問(wèn)題解決的一種強(qiáng)有力方法，并不是針對(duì)某個(gè)具體的機(jī)構(gòu)、機(jī)械或過(guò)程，而是要建立解決問(wèn)題的模型及指明問(wèn)題解決對(duì)策的探索方 向。TRIZ的原理、算法也不局限于任何特定的應(yīng)用領(lǐng)域。它是指導(dǎo)人們創(chuàng)造性解決問(wèn)題并提供科學(xué)的方法、法則。因此，TRIZ 可以廣泛應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域創(chuàng)造性的解決問(wèn)題。不僅在前蘇聯(lián)得到廣泛應(yīng)用、在美國(guó)的很多企業(yè)特別是大企業(yè)，如波音、通用、克萊斯勒、摩托羅拉等的新產(chǎn)品開(kāi)發(fā)得 到了應(yīng)用，創(chuàng)造了可觀的經(jīng)濟(jì)效益。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2003年，三星電子采用 TRIZ 理論指導(dǎo)項(xiàng)目研發(fā)而節(jié)約相關(guān)成本 15 億美元，同時(shí)通過(guò)在67個(gè)研發(fā)項(xiàng)目中運(yùn)用 TRIZ 技術(shù)成功申請(qǐng)了52項(xiàng)專利。僅僅一項(xiàng)創(chuàng)新技術(shù)就能對(duì)一個(gè)跨國(guó)企業(yè)產(chǎn)生如此大的影響，這種情況是不多見(jiàn)的，TRIZ的創(chuàng)始人 G.S.Altshuller 對(duì)此也始料未及。

從1997年三星引入TRIZ理論到2003年的近7年時(shí)間里，三星應(yīng)用TRIZ 取得了顯著的創(chuàng)新成果，但很多創(chuàng)新環(huán)節(jié)仍然需要 TRIZ 專家的協(xié)助才能完成，而且這些專家往往都有十年以上的TRIZ應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)并通曉不同的工程領(lǐng)域。我們因此稱三星的這種創(chuàng)新模式為“專家輔助創(chuàng)新”。

在經(jīng)歷了理論創(chuàng)建與理論體系的內(nèi)部集成后，TRIZ理論正處于其自身的進(jìn)一步完善與發(fā)展，以及與其它先進(jìn)創(chuàng)新理論方法的集成階段，尤其是已成為最有效的計(jì)算機(jī)輔助創(chuàng)新技術(shù)和創(chuàng)新問(wèn)題求解的理論與方法基礎(chǔ)。經(jīng)過(guò)半個(gè)多世紀(jì)的發(fā)展，TRIZ理論已經(jīng)發(fā)展成為一套解決新產(chǎn)品開(kāi)發(fā)實(shí)際問(wèn)題的成熟的理論和方法體系，它實(shí)用性強(qiáng)，并經(jīng)過(guò)實(shí)踐檢驗(yàn)，應(yīng)用領(lǐng)域也從工程技術(shù)領(lǐng)域擴(kuò)展到管理、社會(huì)等方面。現(xiàn)在TRIZ理論在西方工業(yè)國(guó)家受到極大重視，TRIZ的研究與實(shí)踐得以迅速普及和發(fā)展。如今它已為眾多知名企業(yè)取得了重大的效益。

這些證明了運(yùn)用TRIZ理論可以為快速提升我們創(chuàng)新技術(shù)水平提供技術(shù)上的支持，所以我們應(yīng)該要更好的學(xué)習(xí)好這個(gè)理論，把它更好的應(yīng)用到實(shí)際中。、