第一篇：考研生理生化資料總結(jié)

詞解釋；01.根壓——植物根系的生理活動(dòng)使液流從根部上升；04.內(nèi)聚力學(xué)說——以水分具有較大的內(nèi)聚力保證由；05.礦質(zhì)營養(yǎng)——植物對礦物質(zhì)的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和同化；06.必需元素——指在植物營養(yǎng)生理上表現(xiàn)為直接的；08.離子對抗——在發(fā)生單鹽毒害的溶液中，如加入；09.平衡溶液——對植物生長有良好作用而無毒害作；10.還原氨基化——還原氨直接使酮酸氨基化而形成；1 01.根壓——植物根系的生理活動(dòng)使液流從根部上升的壓力 02.蒸騰作用——水分通過植物體表面（如葉片等），以氣體狀態(tài)從體內(nèi)散失到體外的現(xiàn)象 03.水分臨界期——指在植物生長發(fā)育過程中對缺水最為敏感，最易受害的階段

04.內(nèi)聚力學(xué)說——以水分具有較大的內(nèi)聚力保證由葉至根水柱不斷來解釋水分上升原因的學(xué)說

05.礦質(zhì)營養(yǎng)——植物對礦物質(zhì)的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和同化，通稱為礦質(zhì)營養(yǎng)

06.必需元素——指在植物營養(yǎng)生理上表現(xiàn)為直接的效果、如果缺乏時(shí)則植物生育發(fā)生障礙，不能完成生活史、以及去除時(shí)植物表現(xiàn)出專一的、可以預(yù)防和恢復(fù)的癥狀的一類元素 07.單鹽毒害——溶液中只有一種金屬離子對植物起有害作用的現(xiàn)象

08.離子對抗——在發(fā)生單鹽毒害的溶液中，如加入少量其他金屬離子來減弱或消除單鹽毒害的作用叫離子對抗

09.平衡溶液——對植物生長有良好作用而無毒害作用的溶液

10.還原氨基化——還原氨直接使酮酸氨基化而形成相應(yīng)氨基酸的過程 11.胞飲作用— —物質(zhì)吸附在質(zhì)膜上，然后通過膜的內(nèi)折而轉(zhuǎn)移到細(xì)胞內(nèi)的攫取物質(zhì)及液體的過程

12.通道蛋白 ——在細(xì)胞質(zhì)膜上構(gòu)成圓形孔道的內(nèi)在蛋白 13.植物營養(yǎng)臨界期 —— 14.C3途徑——以RUBP為CO2受體，CO2固定后的最初產(chǎn)物為PGA的光合途徑為C3途徑

15.交換吸附——根部細(xì)胞在吸收離子的過程中，同時(shí)進(jìn)行著離子的吸附與解吸附的過程，總有一部分離子被其它離子所置換，所以細(xì)胞吸附離子具有交換性質(zhì)

16.C4途徑——以PEP為CO2受體，CO2固定后最的初產(chǎn)物是四碳雙羧酸的光合途徑為C4途徑。

17.光系統(tǒng)——由不同的中心色素和一些天線色素、電子供體和電子受體組成的蛋白色素復(fù)合體。

18.反應(yīng)中心——由中心色素、原初電子供體及原初電子受體組成的具有電荷分離功能的色素蛋白復(fù)合體結(jié)構(gòu)。

19.熒光現(xiàn)象——葉綠素溶液在透射光下呈綠色，在反射光下呈紅色的現(xiàn)象

20.磷光現(xiàn)象——當(dāng)去掉光源后，葉綠素溶液和能繼續(xù)輻射出極微弱的紅光，它是由三線態(tài)回到基態(tài)時(shí)所產(chǎn)生的光。這種發(fā)光現(xiàn)象稱為磷光現(xiàn)象。21.愛默生效應(yīng)——如果在長波紅光（大于685nm）照射時(shí)，再加上波長較短的紅光（650nm），則量子產(chǎn)額大增，比分別單獨(dú)用兩種波長的光照射時(shí)的總和還要高。

22.光合作用——綠色植物吸收光能，同化CO2和水，制造有機(jī)物質(zhì)并釋放O2并積蓄能量的過程

23.聚光色素——沒有光化學(xué)活性，只有收集光能的作用，并將之傳到反應(yīng)中心色素的色素 24.光合磷酸化——葉綠體在光下把無機(jī)磷和ADP轉(zhuǎn)化為ATP形成高能磷酸鍵的過程 25.光補(bǔ)償點(diǎn)——光合過程中吸收的CO2和呼吸過程中放出的CO2等量時(shí)的光照強(qiáng)度。26.光飽和點(diǎn)——增加光照強(qiáng)度，光合速率不再增加時(shí)的光照強(qiáng)度。

27.呼吸作用——生活細(xì)胞內(nèi)某些有機(jī)物在有氧和無氧條件下進(jìn)行徹底或不徹底的氧化分解，并釋放能量過程

28.呼吸鏈——呼吸代謝中間產(chǎn)物的電子和質(zhì)子，沿著一系列有順序的電子傳遞體組成的電子傳遞途徑，傳遞到分子氧的總過程

29.三羧酸循環(huán)——丙酮酸在有氧的條件下，通過一個(gè)包括三羧酸和二羧酸的循環(huán)而逐步氧

化分解，直到形成水和CO2為止的過程

30.巴斯德效應(yīng)——氧可以降低糖類的分解代謝和減少糖酵解產(chǎn)物的積累的現(xiàn)象叫巴斯德效應(yīng)

31.P/O——一對電子通過電子傳遞鏈每消耗1個(gè)氧原子與所用去的磷酸的比值 32.氧化磷酸化作用——氧化過程中伴隨著ATP的合成，即氧化作與磷酸化作用同時(shí)進(jìn)行的 過程

33.植物生長物質(zhì)——是指一些調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育的物質(zhì)，它包括植物激素和植物生長調(diào)節(jié)劑

34.植物生長調(diào)節(jié)劑——指具有一些激素活性人工合成的物質(zhì) 35.植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)——指在植物體內(nèi)合成的、能調(diào)節(jié)植物生長發(fā)育的非激素類的生理活性物質(zhì)。36.激素受體——能與激素特異地結(jié)合，并引起特殊生理效應(yīng)的蛋白質(zhì)類物質(zhì)

37.生長素結(jié)合蛋白——機(jī)位于質(zhì)膜上的生長素受體，可使質(zhì)子泵將膜內(nèi)質(zhì)子泵膜外，引起質(zhì)膜的超級化，胞壁松弛。也有位于胞基質(zhì)和核質(zhì)中，促進(jìn)mRNA的合成。

38.植物激素—— 一些在植物體內(nèi)合成，并從產(chǎn)生之處運(yùn)到別處，對生長發(fā)育產(chǎn)生顯著作用的微量有機(jī)物

39.自由生長素——易于從各種溶劑中提取的生長素

40.束縛生長素——指沒有活性，需要通過酶解、水解或自溶作用從束縛物質(zhì)釋放出來的生長素

41.乙烯的“三重反應(yīng)”——指乙烯使黃花豌豆幼苗變矮，變粗和橫向生長。42.生長抑制劑——抑制植物頂端分生組織生長、破壞頂端優(yōu)勢的生長調(diào)節(jié)劑 43.生長延緩劑——抑制植物亞頂端分生組織生長、抑制節(jié)間伸長的生長調(diào)節(jié)劑

44.植物生長——:是指植物體積和重量（干重）上的不可逆增加，是由細(xì)胞分裂、細(xì)胞伸長以及原生質(zhì)體、細(xì)胞壁的增長而引起。45．再分化——指離體培養(yǎng)中形成的處于脫分化狀態(tài)的細(xì)胞團(tuán)再度分化形成另一種或幾種類型的細(xì)胞、組織、器官、甚至最終再形成完整植株的過程。

46.植物細(xì)胞全能性——植物體的每一個(gè)細(xì)胞攜帶著一套完整的基因組，并有發(fā)育成完整植株的潛在能力

47.植物組織培養(yǎng)——指在無無菌條件下，將外植體接種到人工配制的培養(yǎng)基中培育離體植物組織、器官或細(xì)胞，以及培育成植株的技術(shù)。48.生長溫周期現(xiàn)象——植物對晝夜溫度周期性變化的反應(yīng)

49．生長的相關(guān)性——植物各部分間在生長上相互依賴有相互制約的現(xiàn)象 50.頂端優(yōu)勢——植物頂端在生長上占有優(yōu)勢并抑制側(cè)枝或側(cè)根生長的現(xiàn)象 51．光形態(tài)建成——光控制植物生長、發(fā)育和分化的過程

52．光敏色素——在植物體內(nèi)存在著一種吸收紅光和遠(yuǎn)紅光并且可以互相轉(zhuǎn)化的光受體蛋白，具有紅光吸收型（Pr）和遠(yuǎn)紅光吸收型（Pfr）兩種形式，其中Pfr型具有生理活性，參與光形態(tài)建成、調(diào)節(jié)植物生長發(fā)育

53．光受體——是指植物體中存在的一些微量色素，能夠感受到外界的光信號，并把光信號放大使植物做出相應(yīng)的反應(yīng)，從而影響植物的光形態(tài)建成

54.向性運(yùn)動(dòng)——是由光、重力等外界因素刺激而產(chǎn)生決定運(yùn)動(dòng)方向的，生長引起的不可逆高等植物運(yùn)動(dòng)

55.感性運(yùn)動(dòng)——是由外界刺激或內(nèi)部時(shí)間機(jī)制而引起的、但不能決定運(yùn)動(dòng)方向的高等植物運(yùn)動(dòng)

56.生理鐘——又稱生物鐘，指植物內(nèi)生節(jié)奏調(diào)節(jié)的近似24小時(shí)的周期性變化節(jié)律。

57.春化作用——用低溫促使植物開花的作用叫春化作用 58.光周期現(xiàn)象——植物對白天和黑夜的相對長度的反應(yīng)

59.雙重日長植物——花誘導(dǎo)和花形成兩個(gè)過程很明顯地分開，要求不同日常的植物 60.識別反應(yīng)——花粉落在雌蕊柱頭上能否正常萌發(fā)并導(dǎo)致受精，決定于雙方的親和性，即它們之間的“認(rèn)可”和“拒絕”稱為識別反應(yīng)

61.蒙導(dǎo)花粉——親和的花粉可使柱頭不能識別不親和的花粉，被稱為蒙導(dǎo)花粉

62.單性結(jié)實(shí)——有些植物的胚珠不經(jīng)受精，子房仍然能繼續(xù)發(fā)育成為沒有種子的果實(shí)，稱為單性結(jié)實(shí)

63.休眠——種子在合適的萌發(fā)條件下仍不萌發(fā)的現(xiàn)象

64.驟躍變型結(jié)實(shí)——指在成熟期出現(xiàn)呼吸躍變現(xiàn)象的果實(shí)。65.非驟變型果實(shí)——指在成熟期不出現(xiàn)呼吸躍變現(xiàn)象的果實(shí) 66.后熟——種子在休眠期內(nèi)發(fā)生的生理、生化過程 67.層積處理——對一些薔薇科和松柏科植物的種子，用濕砂將種子分層堆積在低溫處1至3個(gè)月，經(jīng)后熟才萌發(fā)的催芽技術(shù)

68.衰老——衰老是植物生命周期的最后階段，是成熟的細(xì)胞，組織，器官和整個(gè)植株自然地終止生命活動(dòng)的一系列機(jī)能衰敗過程

69.脫落——脫落是指有機(jī)體發(fā)育過程中，在結(jié)構(gòu)和生理功能方面出現(xiàn)進(jìn)行性的衰退變化，其特點(diǎn)是有機(jī)體對環(huán)境的適應(yīng)能力逐漸減弱，但不立即死亡

70.逆境——又稱脅迫，指對植物生存和生長不利的各種環(huán)境因素的總稱

71.抗逆性——植物對逆境的抵抗和忍耐能力，簡稱為抗性?？剐允侵参飳Νh(huán)境的一種適應(yīng)性反應(yīng)，是在長期進(jìn)化過程中形成的。

72.交叉抗性——植物經(jīng)歷了某種逆境后，能提高對另一些逆境的抵抗能力，這種對不同逆境間相互適應(yīng)作用，稱為交互適應(yīng)。73．滲透調(diào)節(jié)——植物細(xì)胞通過主動(dòng)增加溶質(zhì)降低滲透勢，增強(qiáng)吸水和保水能力，以維持正常細(xì)胞膨壓的作用。

74．凍害——溫度下降到零度以下，植物體內(nèi)發(fā)生冰凍，因而受傷甚至死亡的現(xiàn)象

75．冷害——零度以上低溫，雖無結(jié)冰現(xiàn)象，但能引起喜植物的生理障礙，使植物受傷甚至死亡的現(xiàn)象

76．逆境蛋白——由逆境因素和紫外線等誘導(dǎo)植物體內(nèi)形成新蛋白質(zhì)（酶）。

77．大氣干旱——空氣極度干燥，相對濕度極低，根系吸水趕不上蒸騰失水，因而發(fā)生水分虧缺現(xiàn)象。

78.鈣調(diào)素——一種耐熱的球蛋白

79.臨界暗期——引起短日照植物或長日照植物成花反應(yīng)的最低或最高暗期極限稱為臨界暗期

80.短日植物——每日在短于一定臨界日長的日照下才開花的植物

81.襯質(zhì)勢——是細(xì)胞膠體物質(zhì)親水性和毛細(xì)管對自由水束縛而引起水勢降低的值（以負(fù)值表示）

82.代謝源——指葉子，它制造出光合產(chǎn)物并輸送到其他器官

83.生長的相關(guān)性——植物在生長過程中各部分間的相互制約與協(xié)調(diào)現(xiàn)象

簡 答 題 01.植物體內(nèi)水分存在狀態(tài)與代謝活力有何關(guān)系？

答：自由水參與各種代謝作用，它的含量制約著植物的代謝強(qiáng)度，自由水占總含水量的百分比越大，植物代謝越旺盛；束縛水不參與代謝作用，但植物要求低微的代謝強(qiáng)度去度過不良的外界條件，因此，束縛水的含量與植物抗性大小有密切關(guān)系。02.簡述蒸騰作用的部位及生理意義？

答：蒸騰作用的部位有（1）植物幼小時(shí)，暴露在地面上的全部表面都能蒸騰；植物長大后蒸騰作用發(fā)生在莖枝上的皮孔和葉片。蒸騰作用的生理意義有（1）它是植物水分吸收和運(yùn)輸?shù)闹饕獎(jiǎng)恿?；?）它對吸收礦物質(zhì)和有機(jī)物以及它們在植物體內(nèi)的運(yùn)輸都是有幫助的；（3）它能降低葉片的溫度。

03.根系吸水的方式、動(dòng)力？ 答: 根系吸水的途徑有三條：（1）質(zhì)外體途徑；（2）跨膜途徑；（3）共質(zhì)體途徑.。根系吸水的動(dòng)力有根壓和蒸騰拉力。04.氣孔開關(guān)假說有哪些？

答：氣孔開關(guān)假說有（1）淀粉—糖轉(zhuǎn)化學(xué)說；（2）無機(jī)離子吸收學(xué)說；（3）蘋果酸生成學(xué)說

05．植物必需的礦質(zhì)元素應(yīng)具備哪些條件？ 答：植物必需的礦質(zhì)元素應(yīng)具備下列條件：（1）如缺乏該元素，植物生育發(fā)生障礙，不能完成生活史（2）除去該元素，則表現(xiàn)出專一的缺乏癥，而且這種缺乏癥是可以預(yù)防和恢復(fù)的；（3）該元素在植物營養(yǎng)生理上表現(xiàn)為直接的效果。06．植物吸收礦質(zhì)元素的方式？ 答：（1）離子通道運(yùn)輸；（2）載體運(yùn)輸；（3）離子泵運(yùn)輸；（4）胞飲作用。06． 植物吸收礦質(zhì)元素的特點(diǎn)？ 答：植物吸收礦質(zhì)元素的特點(diǎn)有：（1）一方面與吸水有關(guān)系，另一方面又有其獨(dú)立性；（2）對不同離子的吸收還有選擇性；〔3〕會(huì)出現(xiàn)單鹽毒害和離子對抗現(xiàn)象。07． 試述植物細(xì)胞對礦質(zhì)元素的被動(dòng)吸收和主動(dòng)吸收的機(jī)理？ 答：植物細(xì)胞對礦質(zhì)元素的被動(dòng)吸收 08． 02抑制光合作用的原因？ 答：（1）加強(qiáng)氧與CO2對RUBP的結(jié)合競爭，提高光呼吸速率。（2）氧能與NADP+競爭接受電子，使NADPH合成量減少，使碳同化需要的還原能力減少。（3）氧接受電子后形成的超氧陰離子會(huì)破壞光合膜。（4）在強(qiáng)光下氧參與光合色素的光氧化，破壞光合色素 09． 作物為什么會(huì)出現(xiàn)午休現(xiàn)象？

答：植物種類不同，生長條件不同，造成光合午休的原因也不同。有以下幾種原因：（1）中午水分供給不足，氣孔關(guān)閉。（2）CO2供應(yīng)不足。（3）光合產(chǎn)物淀粉等來不及分解運(yùn)走，累積在葉肉細(xì)胞中，阻礙細(xì)胞內(nèi)CO2的運(yùn)輸。（4）中午時(shí)的高溫低濕降低了碳同化酶的活性。（5）生理鐘調(diào)控。

10． C4比C3植物的光呼吸低，簡述原因？ 答：光呼吸是由RUBP加氧酶催化RUBP加氧造成的。C4植物在葉肉細(xì)胞中只進(jìn)行由PEP羧化酶催化的羧化活動(dòng)，且PEP羧化酶對CO2親和力高，固定CO2的能力強(qiáng)，在葉肉細(xì)胞形成C4二羧酸之后，再轉(zhuǎn)運(yùn)到維管束鞘細(xì)胞，脫羧后放出CO2，就起到了“CO2泵”的作用，增加了維管束鞘細(xì)胞中的CO2濃度，抑制了鞘細(xì)胞中的Rubisco的加氧活性并提高了它的羧化活性，有利于CO2的固定和還原，不利于乙醇酸的形成，不利于光呼吸進(jìn)行，所以C4植物光呼吸值很低。而C3植物，在葉肉細(xì)胞內(nèi)固定CO2，葉肉細(xì)胞的CO2/O2的比值低，此時(shí)，RUBP加氧酶活性增強(qiáng)，有利于光呼吸的進(jìn)行，而且C3植物中RUBPP羧化酶對CO2 親和力低，此外，光呼吸是釋放的CO2不易被重新固定。

11． 把大豆和高粱放在同一密閉照光室內(nèi)，一段時(shí)間后會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象，為什么？ 答：大豆首先死亡，一段時(shí)間后高粱也死亡。因?yàn)榇蠖故荂3植物，它的CO2補(bǔ)償點(diǎn)高于C4植物高粱。隨著光合作用的進(jìn)行，室內(nèi)的CO2濃度越來越低，當(dāng)?shù)陀诖蠖沟腃O2補(bǔ)償點(diǎn)時(shí)，大豆便沒有凈光合只有消耗，不久便死亡。此時(shí)的CO2濃度仍高于高粱的CO2補(bǔ)償點(diǎn)，所以高粱仍然能夠進(jìn)行光合作用，當(dāng)密閉室內(nèi)的CO2濃度低于高粱的CO2補(bǔ)償點(diǎn)時(shí)，高粱便因不能進(jìn)行光合作用而死亡。

12． 長時(shí)間無氧呼吸，植物為什么會(huì)死亡？

答：長時(shí)間無氧呼吸，植物會(huì)死亡的原因有三點(diǎn)：（1）無氧呼吸產(chǎn)生酒精，使細(xì)胞只的蛋白質(zhì)發(fā)生變性；（2）無氧呼吸利用葡萄糖產(chǎn)生的能量很少，植物要維持正常生理需要，就要消耗更多的有機(jī)物；（3）沒有丙酮酸氧化過程，許多由這個(gè)過程的中間產(chǎn)物形成的物質(zhì)就無法繼續(xù)合成。

13． 氧為何抑制糖酵解和發(fā)酵？

答：糖酵解和發(fā)酵都是糖類物質(zhì)在無氧的情況下分解成不徹底的氧化產(chǎn)物，同時(shí)釋放能量的過程。而氧可以降低糖類的分解代謝和減少糖酵解產(chǎn)物的積累，在氧氣充足的情況下，產(chǎn)生較多的ATP和檸檬酸，降低ADP和Pi的水平。ATP和檸檬酸是負(fù)效應(yīng)物，抑制磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的活性，糖分分解就慢，糖酵解和發(fā)酵也就受到抑制。

14． 試述收縮蛋白學(xué)說與細(xì)胞質(zhì)泵動(dòng)學(xué)說的主要內(nèi)容？這兩個(gè)學(xué)說主要解決了運(yùn)輸方面的哪些問題？

答：篩分子內(nèi)腔的細(xì)胞質(zhì)呈幾條長絲，形成胞縱連束，縱跨篩分子，在束內(nèi)呈環(huán)狀的蛋白質(zhì)反復(fù)地有節(jié)奏的收縮和張弛，就產(chǎn)生一種蠕動(dòng)，把細(xì)胞質(zhì)長距離泵走，糖分就隨之流動(dòng)的學(xué)說被稱之為細(xì)胞質(zhì)泵動(dòng)學(xué)說。而收縮蛋白學(xué)說認(rèn)為，篩分子的內(nèi)腔有一種由微纖絲相連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。微纖絲是由具收縮能力的P蛋白收縮絲所組成。微纖絲一端固定，一端游離于篩管細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，微纖絲似鞭毛一樣顫動(dòng)。收縮蛋白的收縮與伸展可能是同化產(chǎn)物沿篩管運(yùn)輸?shù)膭?dòng)力，它影響原生質(zhì)的流動(dòng)。這兩個(gè)學(xué)說主要解決了植物同化產(chǎn)物在篩分子內(nèi)腔的運(yùn)輸問題。15． 何為壓力流動(dòng)學(xué)說？實(shí)驗(yàn)依據(jù)是什么？有哪些不足之處？

答：德國E.Munch1930年提出的學(xué)說，主張篩管液流是靠源端和庫端的膨壓差建立起來的壓力梯度來推動(dòng)的。實(shí)驗(yàn)依據(jù)有：利用快速冷凍和固定技術(shù)的試驗(yàn)證明P蛋白沿著長軸分布在細(xì)胞壁附近，而不會(huì)堵塞開放的篩孔；Knoblauch等利用共聚焦激光掃描顯微鏡，加入與蔗糖結(jié)合的綠色熒光染料，觀察到蠶豆葉片的韌皮部是活的，有運(yùn)輸蔗糖的功能。該學(xué)說的不足之處在于不能解決單一篩管能否同時(shí)進(jìn)行雙向運(yùn)輸蔗糖的問題，且對于裸子植物同化產(chǎn)物的長距離運(yùn)輸不適用。16． 為什么“樹怕剝皮”？

答：有機(jī)物的運(yùn)輸主要是由韌皮部擔(dān)任的，如被剝皮，則同化產(chǎn)物的運(yùn)輸受阻，而且剝口下端也長不出枝條，時(shí)間一長，根系原來貯存的有機(jī)物消耗完畢，根部就會(huì)餓死，從而導(dǎo)致整個(gè)植株的死亡。

17． 束縛態(tài)的生長素在植物體內(nèi)有何作用？

答：束縛態(tài)的生長素在植物體內(nèi)的作用可能有下列幾個(gè)方面：（1）作為貯藏形式；（2）作為運(yùn)輸形式；（3）解毒作用；（4）調(diào)解自由生長素含量。18． 乙烯在生產(chǎn)上有何作用？

答：乙烯在生產(chǎn)上的作用有（1）果實(shí)催熟和改善品質(zhì)；（2）促進(jìn)次生物質(zhì)排出；（3）促進(jìn)開花

19． 乙烯誘導(dǎo)果實(shí)成熟原因是什么？ 答： 乙烯與質(zhì)膜的的受體結(jié)合之后，能誘發(fā)質(zhì)膜的透性增加，使氧氣容易通過質(zhì)膜進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，誘導(dǎo)水解酶的合成，使呼吸作用增強(qiáng)，分解分解有機(jī)速度加快，達(dá)到促使果實(shí)成熟的作用。

21． 種子萌發(fā)必需的外界條件有哪些？第一、三階段靠什么吸水？種子萌發(fā)時(shí)吸水可分為哪三個(gè)階段？

答：種子萌發(fā)必須的外界條件有：（1）足夠的水分；（2）充足的氧氣；（3）適當(dāng)?shù)臏囟?；?）某些植物種子的萌發(fā)還受光的影響。種子萌發(fā)時(shí)吸水可分為三個(gè)階段：（1）急劇的吸水；（2）吸水的停止；（3）胚根長出后的重新迅速吸水。第一階段細(xì)胞主要靠吸脹性吸水；第三階段是靠滲透性吸水。

24．土壤中缺氮時(shí)為什么根冠比會(huì)增大？

答：氮素是由根系從土壤中吸收后再供應(yīng)地上部分的。因此，土壤缺氮是對地上部分生長的影響就比對根的影響大。另外，缺氮時(shí)地上部分蛋白質(zhì)合成減少，積累的糖分多，這樣對根系供應(yīng)的糖分也增多，促進(jìn)了根系的生長，故使根冠比值增大。25．光敏色素作用的模式主要有哪兩類假說？ 答：（1）膜作用假說認(rèn)為光敏色素能改變細(xì)胞中一種或多種膜的特性或功能而參與光形態(tài)建成，從而引發(fā)一系列的反應(yīng)。顯然光敏色素調(diào)控的快速反應(yīng)都與膜性質(zhì)的變化有關(guān)；（2）基因調(diào)節(jié)假說認(rèn)為光敏色素對光形態(tài)建成的作用，是通過調(diào)節(jié)基因表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。一般認(rèn)為光敏調(diào)空的長期反應(yīng)與基因表達(dá)有關(guān)。

26． 高山上的樹木為什么比平地長得矮??？ 答：（1）高山上水分較少，土壤也較瘠薄，肥力較低，造成植物因缺少水、肥而生長不良。（2）氣溫也較低，且晝夜溫差大，夜間溫度過低，造成植物代謝緩慢，因而表現(xiàn)出植生長緩慢。（3）高山風(fēng)力較大，使植株受到的機(jī)械刺激多，體內(nèi)激素平衡不利植物生長發(fā)育。（4）高山頂上空氣中灰塵較少，光照較強(qiáng)，紫外光也較多，由于強(qiáng)光特別是紫外光抑制植物生長，因而高山樹木生長緩慢而矮小。

27． 種子萌發(fā)時(shí)，有機(jī)物質(zhì)發(fā)生哪些生理、生化變化？ 答：種子萌發(fā)時(shí)，有機(jī)物質(zhì)發(fā)生的生理、生化變化有：（1）淀粉的轉(zhuǎn)化。淀粉在淀粉酶、麥芽糖酶作用下轉(zhuǎn)變成葡萄糖（或磷酸葡萄糖）。（2）脂肪的轉(zhuǎn)化。脂肪在脂肪酶作用下轉(zhuǎn)變?yōu)楦视秃椭舅?，再進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為糖。（3）蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)化。胚乳或子葉內(nèi)貯藏的蛋白質(zhì)在蛋白質(zhì)酶和肽酶的催化下，分解為氨基酸。（4）植酸的動(dòng)員。植酸在植酸酶的作用下分解為肌醇和磷酸。

28．生物鐘有何特征？ 答：（1）需要光暗交替作為啟動(dòng)信號，一旦節(jié)奏啟動(dòng)了，就可以在穩(wěn)恒條件下持續(xù)一段時(shí)間。（2）具有內(nèi)生的近似晝夜節(jié)奏，約為22小時(shí)至28小時(shí)。（3）生物鐘有自調(diào)重?fù)芄δ堋Ｈ羧找诡嵉?，則可自行調(diào)整，而適應(yīng)于新的環(huán)境節(jié)奏。還可重新?lián)芑?。?）生物鐘的周期長度對溫度鈍感。

29．植物產(chǎn)生向光性彎曲的原因是什么？

答：植物的向光彎曲是由于向光面的生長與背光面生長的不均勻所致。究其原因目前主要有兩種一種觀點(diǎn)認(rèn)為由于生長素分布不均勻，單方向的光照會(huì)引起生長素向背光面移動(dòng)，以至引起背光面生長素含量增多，而較高濃度的生長素促進(jìn)莖細(xì)胞生長，因而背光面比向光面生長快，而表現(xiàn)向光彎曲。生長素向背光面移動(dòng)的原因可能與光照引起器官尖端的不同部位產(chǎn)生電勢差有關(guān)。向光面帶負(fù)電荷、背光面帶正電荷，弱酸性的生長素陰離子被正電荷吸引移向背面。另一種觀點(diǎn)認(rèn)為是由于抑制物質(zhì)分布不均勻而造成的。30．常言道：“根身葉茂”是何道理？ 答：所謂“根身葉茂”，有以下理由：（1）地上部分生長需要的水分和礦物質(zhì)主要是由根系供給的。另外根系還能合成多種氨基酸、細(xì)胞分裂素等供應(yīng)地上部分。因此，根發(fā)育得好，對

地上部分生長有利。（2）植物地上部分對根的生長也有促進(jìn)作用，葉片中制造的糖類、生長素、維生素等也可以供應(yīng)根，以利于根的生長。因此，地上部分長不利，根系也長不好，反之，根系生長不好，地上部分也不可能生長的好，它們是相互依賴相互促進(jìn)的。31．含羞草受震動(dòng)后葉子下垂的機(jī)理是什么？

答：含羞草受震動(dòng)后幾秒鐘內(nèi)葉子就下垂，機(jī)理是，由于復(fù)葉葉柄基部的葉枕中細(xì)胞緊張度發(fā)生變化的結(jié)果。在解剖結(jié)構(gòu)上，葉枕的上半部的細(xì)胞胞壁較厚，而下半部組織較薄，下半部組織的胞間隙也比上半部的大。在震動(dòng)刺激下，葉枕下半部細(xì)胞的透性增大，水分和溶質(zhì)由液泡中透出，進(jìn)入胞間隙，因此下半部組織細(xì)胞的緊張度下降，組織疲軟，而上半部組織此時(shí)仍保持緊張狀態(tài)，復(fù)葉下垂。

32． 植物生長的最適溫度和協(xié)調(diào)溫度有何不同？

答：植物生長的最適溫度是指植物生長最快的溫度，這個(gè)溫度對于植物健壯生長來說，往往不是最適宜的。因?yàn)橹参锷L最快時(shí)，物質(zhì)較多用于生長，消耗太快，沒有在較低溫度下生長那么結(jié)實(shí)。在生產(chǎn)實(shí)踐上培育健壯的植株，常要求在比生長最適溫度略低的溫度，即“協(xié)調(diào)的最適溫度”下進(jìn)行。

33． 什么是春化作用？如何證明植物感受低溫的部位是莖間生長點(diǎn)？

答：春化作用就是用低溫促使植物開花的作用。將芹菜種植在高溫的溫室中由于得不到花分化所需要的低溫，不能開花結(jié)實(shí)。但是以橡皮管纏繞芹菜莖的頂端，管內(nèi)不斷通過冰冷的水流，使莖的生長點(diǎn)獲得低溫，就能通過春化，可以開花結(jié)實(shí)。反之，將芹菜種植在冰冷的室內(nèi)，而使莖生長點(diǎn)處于高溫下，也不能開花結(jié)實(shí)。34． 赤霉素與春化作用有何關(guān)系？

答：小麥、油菜、燕麥等多種作物經(jīng)過春化處理后，體內(nèi)赤霉素含量增多。一些需要春化的植物未經(jīng)低溫處理，如施用赤霉素也能開花。這表明赤霉素可以某種方式代替低溫的作用。35． “南麻北種”有何利弊，為什么？

答：麻類是短日植物，南種北引可推遲開花，營養(yǎng)生長期長，使麻桿生長較長，提高纖維產(chǎn)量和質(zhì)量，但因?yàn)楸狈降貐^(qū)較難滿足短日作物麻類成花所需的短日條件，因而南麻北種會(huì)延遲開花，種子不能及時(shí)成熟。若在留種地采用苗期短日處理方法，可解決留種問題。36．舉例說明光周期在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用？ 答：（1）光周期的人工控制，可以促進(jìn)和延遲開花；（2）在溫室中延長或縮短日照強(qiáng)度，控制作物花期，可解決花期不遇問題，對雜交育種也將有很大的幫助；（3）引種。37． 種子成熟時(shí)主要發(fā)生哪些生理、生化變化？ 答：種子成熟時(shí)主要發(fā)生的生理、生化變化有：（1）從植株?duì)I養(yǎng)器官轉(zhuǎn)運(yùn)過來的可溶性低分子化合態(tài)養(yǎng)料被逐漸轉(zhuǎn)化為不溶性高分子化合態(tài)物質(zhì)積累起來；（2）呼吸作用由強(qiáng)到弱，由高到低；（3）種子內(nèi)的內(nèi)源激素由少變多，再由多變少；（4）種子的含水量隨著種子的成熟而逐漸減少。

38． 在逆境中，植物體內(nèi)積累脯氨酸有何作用？ 答：在逆境中，植物體內(nèi)積累脯氨酸的作用有：（1）作為滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，用于保持胞質(zhì)溶膠與環(huán)境的滲透平衡，防止水分散失；（2）保持膜結(jié)構(gòu)的完整性。39． 外施ABA提高植物抗逆性的原因？ 答：外施ABA提高植物抗逆性的原因有：（1）減少膜的傷害；（2）減少自由基對膜的破壞；（3）改變體內(nèi)代謝；（4）減少水分喪失。

40． 零上低溫對植物組織的傷害大致可分哪幾個(gè)步驟？ 答：零上低溫對植物組織的傷害大致可分為兩個(gè)步驟：第一步是膜相的改變，第二步是由于膜損壞而引起代謝紊亂，導(dǎo)致死亡。41． 提高作物抗旱性的途徑？

答：（1）播種前對萌動(dòng)種子進(jìn)行干旱鍛煉；（2）利用根冠比的特征選擇出不同抗旱性的作物品種，或作為抗旱育種的親本，加速抗旱育種的步驟；（3）控制土壤水分；（4）施用植物激素。

論 述 題：

1．病毒對在植物生理生化的影響如下：①水分平衡失調(diào)，許多植物感病后發(fā)生萎焉或猝倒。②呼吸作用加強(qiáng)。染病組織一般比健康組織的呼吸速率可增加許多倍，且氧化磷酸化截偶聯(lián)，大部分能量以熱能形式釋放出去，所以染病組織的溫度大大升高。③光合作用下降。染病后，葉綠體破壞，葉綠體含量減少，光合速率顯著下降。④生長改變。有些植物染病后由于IAA、GA增加，引起植物徒長，偏上生長，形成腫瘤等。

2．作物抗病的生理基礎(chǔ)是：①加強(qiáng)氧化酶（抗壞血酸氧化酶、過氧化物酶）的活性，可以分解毒素，促進(jìn)傷口愈合，抑制病菌水解酶活性。②植物染病后產(chǎn)生過敏性組織壞死，使有些只能寄生于活細(xì)胞的病原菌死亡。③產(chǎn)生抑制物質(zhì)。如馬鈴薯植株產(chǎn)生綠原酸，可以防止黑疤病菌的感染，亞麻的根分泌一種含氰化物的物質(zhì)，抑制微生物的呼吸。④作物還具有免疫反應(yīng)。即在病菌侵入時(shí)，體內(nèi)產(chǎn)生某種對病原菌有毒的化合物（多為酚類化合物）防止病菌侵染。此外，作物內(nèi)還含有一些化學(xué)物質(zhì)，如生物堿、單寧、苦杏仁苷等，對侵入的病菌有毒殺作用或防御反應(yīng)，能減輕病害。3．植物滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)可分為兩大類：一是由外界引入細(xì)胞中的無機(jī)離子，包括鉀、鈉、鈣、鎂、氯等；二是在細(xì)胞內(nèi)合成的有機(jī)溶質(zhì)，主要是蔗糖、山梨醇、脯氨酸、甜菜堿等。其主要生理功能包括： ⑴維持細(xì)胞膨脹壓變化不大，利于其他生理生化過程進(jìn)行；⑵維持氣孔開放，以保證光合作用較正常的進(jìn)行。

4．植物在逆境條件下合成的逆境蛋白有：⑴熱激蛋白f，可以和受熱激傷害后變性蛋白質(zhì)結(jié)合，維持它們的可溶狀態(tài)或使其恢復(fù)原有的空間構(gòu)象和生物活性。熱激蛋白也可以與一些酶結(jié)合成復(fù)合體，使這些酶的熱失活溫度明顯提高；⑵低溫誘導(dǎo)蛋白，亦稱冷擊蛋白，它與植物抗寒性的提高有關(guān)。由于這些蛋白具有高親水性，所以具有誠少細(xì)胞失水和防止細(xì)胞脫水的作用；⑶滲條蛋白，有利于降低細(xì)胞的滲透勢和防止細(xì)胞脫水，提高植物的抗鹽性和抗旱性；⑷病程相關(guān)蛋白（PRs），與植物局部和系統(tǒng)誘導(dǎo)抗性有關(guān)。還能抑制真菌孢子的萌發(fā)，抑制菌絲生長，誘導(dǎo)與其他防衛(wèi)系統(tǒng)有關(guān)的酶的合成，提高其抗病能力。5.植物器官脫落與植物激素有何關(guān)系？ 答：（1）生長素：實(shí)驗(yàn)證明，葉片年齡增長，生長素含量下降，便不能阻止脫落的發(fā)生。Addicott等提出脫落的生長素梯度學(xué)說，認(rèn)為不是葉片內(nèi)生長素的絕對含量，而是橫過離層區(qū)兩邊的生長素的濃度梯度影響脫落。梯度大，即遠(yuǎn)軸端生長素含量高，不易脫落；梯度小時(shí)，即近端生長素含量高于或等于遠(yuǎn)軸端的量，則促進(jìn)脫落。此外，已證明有些果實(shí)的自然脫落與生長素含量的降低也密切相關(guān)。在生長素產(chǎn)生少的時(shí)期，往往引起大量落果。（2）脫落酸：幼果和幼葉的脫落酸含量低，當(dāng)接近脫落時(shí)，它的含量最高。主要原因是可促進(jìn)分解細(xì)胞壁的酶的活性，抑制葉柄內(nèi)生長素的傳導(dǎo)。（3）乙烯：棉花子葉在脫落前乙烯生成量增加一倍多，感病植株乙烯適放量增多，會(huì)促進(jìn)脫落。（4）赤霉素：促進(jìn)乙烯生成，也可促進(jìn)脫落。細(xì)胞分裂素延緩衰老，抑制脫落。2.北方小麥與南方小麥相比，哪個(gè)蛋白質(zhì)含量高？為什么？

答：北方小麥蛋白質(zhì)含量高。因?yàn)樗止?yīng)不良對淀粉合成的影響比對蛋白質(zhì)的影響大。在小麥成熟期，北方雨量及土壤水分比南方少，所以北方小麥蛋白質(zhì)含量高。3.導(dǎo)致脫落的外界因素有哪些？ 答：（1）氧濃度 氧分壓過高過低都能導(dǎo)致脫落。高氧促進(jìn)乙烯的形成，低氧抑制呼吸作用；（2）溫度異常溫度加速器官脫落。高溫促進(jìn)呼吸消耗。此外，高溫還會(huì)引起水分虧缺，加速葉片脫落；（3）水分干旱缺水會(huì)引起葉、花、果的脫落。這是一種保護(hù)性反映，以減少水分散失。干旱會(huì)促進(jìn)乙烯、脫落酸增加，促進(jìn)離層形成引起脫落；（4）光照 光照弱脫落增加，長日照可以延遲脫落，短日照可以促進(jìn)脫落；（5）礦質(zhì)元素缺Zn、N、P、K、Fe等都可能導(dǎo)致脫落。

4．目前有關(guān)植物衰老機(jī)理的假說有哪些，并敘述自由基傷害假說的基本內(nèi)容。

答：關(guān)于植物衰老機(jī)理的假說有三種：一是營養(yǎng)虧缺假說；二是植物激素調(diào)空理論；三是自由基傷害假說。自由基傷害假說是人體和動(dòng)物衰老機(jī)理的眾多學(xué)說之一。該學(xué)說認(rèn)為衰老過程即氧代謝失調(diào)、自由基累積的過程。研究表明，植物細(xì)胞通過多種途徑產(chǎn)生超氧陰離子自由基、羥自由基和過氧化氫、單線態(tài)氧等活性氧。同時(shí)，植物細(xì)胞本身具有清、清除自由基活性氧的酶保護(hù)系統(tǒng)和非酶保護(hù)系統(tǒng)。在正常情況下，細(xì)胞自由基活性氧的產(chǎn)生與清除處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，自由基活性氧濃度很低，不會(huì)引起傷害。但在植物衰老劣變過程中，特別是處于干旱、高鹽、SO2等逆境條件下，這種平衡遭到破壞，結(jié)果自由基活性氧的濃度超過了傷害”閾值“導(dǎo)致蛋白質(zhì)、核酸的氧化破壞，特別是膜脂中不飽和雙鏈酸最易受自由基的攻擊發(fā)生過氧化作用；過氧化過程產(chǎn)生新的自由基，會(huì)進(jìn)一步促進(jìn)膜脂質(zhì)過氧化，膜的完整性受到破壞，最后導(dǎo)致植物傷害或死亡。5.花粉管為什么能向著胚囊定向生長？ 答：一般認(rèn)為這是由于花粉管的向化性運(yùn)動(dòng)所引起的。生長的花粉管從頂端到基部存在著由高到低的Ca2+濃度梯度。這種Ca2+梯度的存在有利于控制高爾基體小泡的定向分泌、運(yùn)轉(zhuǎn)與融合，從而使合成花粉管壁和質(zhì)膜的物質(zhì)源源不斷地運(yùn)到花粉管頂端，以保持頂端的極性生長。雌性生殖單位中的助細(xì)胞與花粉管的定向生長有關(guān)。棉花的花粉管在雌蕊中生長時(shí)，花粉管中的信號物質(zhì)如赤霉素會(huì)引起一個(gè)助細(xì)胞的首先解體，并釋放出大量的Ca2+，造成花柱與株孔間的Ca2+梯度，而Ca2+則被認(rèn)為是一種向化性物質(zhì)，因此，花粉管會(huì)朝Ca2+濃度高的方向生長，最后穿過株孔，進(jìn)入胚囊。此外，花粉管可能有向電性生長。7.授粉后雌蕊中生長素含量劇增的只要原因是什么？

答：只要不是花粉帶進(jìn)去的，而是因?yàn)榛ǚ壑泻惺股彼徂D(zhuǎn)變成吲哚乙酸的酶體系，花粉管在伸長過程中，能將這些酶分泌到雌蕊組織中去，因此，會(huì)引起花柱和子房形成大量生長素

8.影響植物花器官形成的條件有哪些？

答：1.內(nèi)因(1)營養(yǎng)狀況 營養(yǎng)是花芽分化以及花器官形成與生長的物質(zhì)基礎(chǔ)。其中的碳水化合物對花的形成尤為重要，C/N過小，營養(yǎng)生長過旺，影響花芽分化。(2)內(nèi)源激素 花芽分化屬內(nèi)源激素的調(diào)控。2.外因(1)光照 光照對花器官形成有促進(jìn)作用。在植物花芽分化期間，若光照充足，有機(jī)物合成多，則有利于花芽分化。此外，光周期還影響植物的育性。(2)溫度 一般植物在一定的溫度范圍內(nèi)，隨溫度升高而花芽分化加快。溫度主要影響光和作用、呼吸作用和物質(zhì)的轉(zhuǎn)化及運(yùn)輸?shù)冗^程，從而間接地影響花芽的分化。低溫還影響減數(shù)分裂期花粉母細(xì)胞的發(fā)育，使其不能正常分裂。(3)水分 不同植物的花芽分化對水分的需求不同，如對稻麥等作物來說，孕穗期對缺水敏感，此時(shí)缺水影響幼穗分化；而對果樹而言，夏季的適度干旱可提高果樹的C/N比，反而有利于花芽分化。(4)礦質(zhì)營養(yǎng) 缺氮，花器官分化慢且花的數(shù)量減少；氮過多，營養(yǎng)生長過旺，花的分化推遲，發(fā)育不良。在適宜的氮肥條件下，如能配合施用磷、鉀肥，并注意補(bǔ)充錳、鉬、硼等微量元素，則有利于花芽分化。

9.花粉和柱頭之間的相互識別的機(jī)制是什么？

答：花粉的識別物質(zhì)是外壁蛋白中的糖蛋白，它在花粉濕潤后幾秒鐘內(nèi)就迅速釋放出來。而雌蕊的識別物質(zhì)是柱頭表面的親水性蛋白質(zhì)薄膜，它具有粘性，易于捕捉花粉。當(dāng)親和花粉落到柱頭上時(shí)，花粉就釋放出外壁蛋白并擴(kuò)散入柱頭表面，與柱頭表面蛋白質(zhì)膜相互作用，認(rèn)可后花粉管伸長并穿過柱頭，沿花柱引導(dǎo)組織生長并進(jìn)入胚囊受精。如果是不親和的花粉則不能萌發(fā)，或花粉關(guān)生長受阻，或柱頭乳突細(xì)胞產(chǎn)生胼胝質(zhì)阻礙花粉管穿過柱頭

10.如何用實(shí)驗(yàn)證明植物感受光周期的部位，以及光周期刺激可能是以某種化學(xué)物質(zhì)來傳遞的？ 答：植物在適宜的光周期誘導(dǎo)后，成花部位是莖端的生長點(diǎn)，而感受光周期的部位卻是葉片。這一點(diǎn)可以用對植株不同部位進(jìn)行光周期處理后觀察對開花效應(yīng)的情況來證明：①將植物全株置于不適宜的光周期條件下，植物不開花而保持營養(yǎng)生長；②將植物全株置于適宜的光周期下，植物可以開花；③只將植物葉片置于適宜的光周期條件下，植物正常開花；④只將植物葉片置于不適宜的光周期下，植物不開花。用嫁接實(shí)驗(yàn)可證明植物的光周期刺激可能是以某種化學(xué)物資來傳遞的：如將數(shù)株短日植物蒼耳嫁接串聯(lián)在一起，只讓其中一株的一片葉接受適宜的短日光周期誘導(dǎo)，而其它植株都在長日照條件下，結(jié)果數(shù)株蒼耳全部開花。

第二篇：生化考研重點(diǎn)知識總結(jié)

生化考研重點(diǎn)知識總結(jié)

第一章 單糖

①多糖與碘顯色，至少需要的葡萄糖殘基數(shù)：6 ②唾液淀粉酶激活劑：Cl

③幾個(gè)典型非還原糖：蔗糖、糖原、淀粉 ④形成N-糖肽鍵的單糖或衍生物是：

第二章 油脂

①幾個(gè)非飽和脂肪酸雙鍵數(shù)： ?油酸：1 ?亞油酸：2 ?亞麻酸：3 ②人不能自身合成的必須脂肪酸： 亞油酸、亞麻酸 ③四種脂類轉(zhuǎn)運(yùn)脂蛋白：

?CM：乳糜微粒，轉(zhuǎn)運(yùn)外源性三酰甘油酯 ?VLDL：極低密度脂蛋白，轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)源性三酰甘

油酯

?LDL：低密度脂蛋白，轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)源性膽固醇

?HDL：高密度脂蛋白，轉(zhuǎn)運(yùn)外源性膽固醇

第三章 氨基酸與蛋白質(zhì) ①幾種主要氨基酸及三字母縮寫 ?兩特殊：Pro、Gly ?芳香：酪（Tyr）色（Trp/Try，吸光最強(qiáng)）苯（Phe）

?八種必需氨基酸：甲攜來一本亮色書，Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr ?側(cè)鏈為羥基氨基酸：蘇（Thr）絲（Ser）酪（Tyr）?酸性氨基酸：天（Asp）谷（Glu）※對應(yīng)兩酰胺：Asn、Gln ?堿性氨基酸：賴（Lys）精（Arg）組（His）?其它：丙氨酸（Ala）

-②PI ?PI的計(jì)算：PI=（PK1+PK2）/2=(PK1+PKRCOOH)/2=(PK2+PKRNH2)/2 ?PH的計(jì)算：PH=PK1+Lg（R/R）=PK2+Lg（R/R）

?PH =7的水中溶蛋白，PH=6，則該蛋白PI<6：蛋白溶后PH下降為6，表明蛋白的COOH

+--電離出H，則產(chǎn)生了R，PH=6>PI 時(shí)有R ③蛋白二級結(jié)構(gòu)

?α螺旋：Sn=3.613，存在Pro時(shí)不形成α螺旋，右手螺旋 ?β折疊：同/反向，肽鍵中H與O成氫鍵，軸距0.35nm ?β轉(zhuǎn)角：轉(zhuǎn)角處為Gly

④超二級結(jié)構(gòu)：無規(guī)卷曲、結(jié)構(gòu)域

⑤三級結(jié)構(gòu)：作用力（二硫鍵、疏水作用力、氫鍵、靜電離子鍵、范德華力）⑥蛋白結(jié)構(gòu)分析

?N端分析法：FDNB（Sanger）、PITC（Edman）、DNS-Cl（丹磺酰氯）、氨肽酶法 ?C端分析法：羧肽酶法、無水肼解法 ※羧肽酶A：不能水解C端為Lys、Arg、Pro的肽鍵；羧肽酶B：能水解C端為Lys、Arg的肽鍵；C端倒數(shù)第二位是Pro時(shí)，A、B都不能水解 ?打開二硫鍵：還原法（巰基化合物，碘乙酸保護(hù)）、氧化法（過甲酸）

?專一切斷：胰蛋白酶（Lys、Arg-COOH肽鍵）；CNBr（Met-COOH肽鍵）；胰凝乳蛋白酶（）； ⑦顯色反應(yīng)

?Follin酚：藍(lán)色，酚基（Tyr）、吲哚基（Trp），組分（CuSO4+磷鉬酸）?Millon：紅色，酚基（Tyr），組分（HgNO3+Hg（NO3）2）?坂口反應(yīng)：紅色，胍基（Arg），組分（α萘酚，NaClO）?黃色反應(yīng)：黃色，芳香氨基酸，組分（濃HNO3）?雙縮脲反應(yīng)：紫紅色，肽鍵，多肽，組分（NaOH+CuSO4）?乙醛酸反應(yīng)：紫色，吲哚基（Trp）⑧幾種重要氨基酸

?提供活性甲基的：S-腺苷Met ?形成N-糖肽鍵的：Asp ?膠原蛋白中含量高的氨基酸：Gly、Ala、Pro、HO-Pro、HO-Lys

+

-⑨蛋白分離純化技術(shù)：透析、超濾；密度梯度離心；凝膠過濾；PI法、鹽析、有機(jī)溶劑法；電泳、離子交換；吸附層析；親和層析 ※凝膠過濾大分子先出，凝膠電泳相反：機(jī)理 △分子運(yùn)動(dòng)速度決定因素：大小、電荷量、形狀 ※蛋白離子交換層析與洗脫：

※凝膠電泳三效應(yīng)：電荷、分子篩、濃度效應(yīng) ⑩蛋白含量測定

?測N：凱氏定氮、紫外吸光、雙縮脲吸光、福林酚顯色吸光 ?測M：沉降離心、凝膠過濾（凝膠排阻層析）、SDS-PAGE ※凱氏定氮：HNO2反應(yīng)，生成的N2中氨基酸占1/2 ⑾其它

?分離二硫基的肽段可用：SDS-PAGE ?幾個(gè)主要氨基酸的PI值： ?幾種重要蛋白：

?鐮刀貧血病：Glu→Val，第6位

?與烷化劑（碘乙酸）反應(yīng)的氨基酸：Cys（半胱氨酸）

第四章 酶學(xué)

①酶活化中心組成：結(jié)合部位、催化部位

②計(jì)算：活力單位（IU、Kat）、比活力（IU/mg）、轉(zhuǎn)化數(shù)/轉(zhuǎn)化周期、米氏方程 ③各可逆抑制作用的動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)：Km、Vmax ※幾個(gè)抑制作用：競爭抑制（丙二酸對琥珀酸脫氫酶）；有有機(jī)磷（與絲氨酸羥基共價(jià)不可逆）；CO、CN（作用于Cytaa3）；不可逆抑制（重金屬、有機(jī)砷、CN化物、硫化物、CO）④酶促反應(yīng)初速度與[E]、T有關(guān)

⑤以“三點(diǎn)結(jié)合”模型作用的酶：甘油激酶 ⑥酶的專一性

?專一水解葡萄糖形成的二酯鍵的酶：

?以O(shè)2為直接氫受體的氧化酶：VC氧化酶、細(xì)胞色素氧化酶 ⑦別構(gòu)酶

?兩獨(dú)立功能部位：活性中心、變構(gòu)中心 ?動(dòng)力學(xué)曲線：S型，其它為雙曲線 ?具有效應(yīng)：協(xié)同效應(yīng)、變構(gòu)效應(yīng)

※典型代表—血紅蛋白：協(xié)同效應(yīng)、波爾效應(yīng)、變構(gòu)效應(yīng) ⑧酶分離純化

?要求：純化倍數(shù)高、回收率高 ※純化倍數(shù)=比活力/純化前總比活力

回收率=活力單位數(shù)/純化前活力單位數(shù) ?方法：同蛋白質(zhì)

⑨競爭性抑制劑：增[S]可減弱抑制作用

⑩患尿黑酸癥的病人是由于：缺少尿黑酸氧化酶（尿黑酸氧化酶遺傳缺陷）

第五章 核酸

①反向互補(bǔ)配對：ACG-CGT（U）

②N-苷鍵：Ψ（C1‘-C5），嘌呤（N9-C1‘），嘧啶（N1-C1’）③SnRNA：核仁不均一RNA，功能（促進(jìn)轉(zhuǎn)錄、）④核酸分離技術(shù)

⑵ 凝膠電泳：三效應(yīng)、分子運(yùn)動(dòng)速度決定因素 見蛋白質(zhì) ?離子交換層析：陽離子交換層析，核苷酸脫下順序：U→G→C→A 陰離子交換層析，核苷酸脫下順序：C→A→U→G ⑶ 親和層析：可用親和層析法分離的核酸：mRNA（PolyA尾）

⑤DNA測序三法：加減法（Sanger、1975），化學(xué)斷裂法，雙脫氧終止法（Sanger、1977、原理）⑥不能形成兩性離子的核苷酸是UMP：原因 ⑦cNMP ?最重要的cNMP：cAMP、cGMP ?cAMP：第二信使

?cAMP分子內(nèi)有：環(huán)化的磷酸二酯鍵 cAMP與cGMP：生物作用并不是完全相反

第六章 分子生物學(xué)與基因工程 ①基因組學(xué)

?啟動(dòng)子組成3部分：識別部位（-

35、CG/CAAT），結(jié)合部位（-

10、TATA），轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) ?高度重復(fù)序列：衛(wèi)星DNA、小衛(wèi)星DNA、微衛(wèi)星DNA ?原核生物基因重疊類型：

?基因家族按特點(diǎn)分三類：簡單多基因家族、復(fù)雜多基因家族、發(fā)育調(diào)控的復(fù)雜多基因家

族

基因家族按組成分三類： ②DNA復(fù)制

?DNA復(fù)制方式：線性（眼型），環(huán)狀【θ（大腸桿菌）、滾環(huán)（病毒質(zhì)粒）、D型（線粒

體、葉綠體）】

?DNA復(fù)制需引物：轉(zhuǎn)錄不需引物

※原核DNA聚合酶功能：損傷修復(fù)、校正、合成DNA ③基因工程酶

?RNase:RNaseA(嘧啶3’→5’)、RNaseT1（G的3’→5’）、RNaseT2（A的3’→5’）?DNA連接酶所需能量：原核ATP、真核NAD+ ?轉(zhuǎn)移水解DNA-RNA中的RNA的酶：RNaseH、逆轉(zhuǎn)錄酶（有RNaseH活性）?牛脾磷酸二酯酶水解RNA所得產(chǎn)物：5’磷酸切開，產(chǎn)生3’單磷酸核苷 ?蛇毒磷酸二酯酶水解RNA所得產(chǎn)物：3’-OH切開，產(chǎn)生5’單磷酸核苷

?核酸合成酶：DDDP（依賴DNA的DNA聚合酶）、RDDP（依賴RNA的DNA聚合酶）、DDRP（依賴DNA的RNA聚合酶）?RNAPol2：RNAPolB，合成hnRNA，分布在核質(zhì)中 ?RNA用強(qiáng)堿水解產(chǎn)生：2’-核苷酸、3’-核苷酸混合物

?限制內(nèi)切酶切割特點(diǎn)：4-8bp、6bp主要，成黏性、平齊末端，成回文序列，甲基化難切 ④tRNA結(jié)構(gòu)

?含稀有堿基最多：D（二氫尿嘧啶）、ψ（假尿嘧啶）、I（次黃嘌呤）?四環(huán)四臂五區(qū)：D臂、TψC臂、氨基酸臂（受體臂）、反密碼子臂 ?二級：三葉草 ?三級：倒L ⑤基因表達(dá)

?DNA重組過程中DNA連接四方式：粘性末端連接、同聚物加尾法、加銜接物連接法、加

DNA接頭連接法

?轉(zhuǎn)位：三類轉(zhuǎn)位因子【（插入序列IS）、轉(zhuǎn)座子（Tn）、可轉(zhuǎn)座噬菌體】，轉(zhuǎn)位后遺傳

效應(yīng)（突變、產(chǎn)生新基因、染色體畸變）

?轉(zhuǎn)錄：轉(zhuǎn)錄5’端常見起始核苷酸是G、A，原核終止子在終止位點(diǎn)前有PolyU ?翻譯：參與肽鏈延伸的因子（EF-Tu、EF-TS、移位酶/G因子），肽基轉(zhuǎn)移酶催化組分（23SrRNA），蛋白合成時(shí)生成肽鍵的能量來自高能酯鍵水解 ?轉(zhuǎn)錄抑制劑：利福平、利迪鏈霉素、放線素D、α-鵝膏蕈堿

?翻譯抑制劑：抗生素（氯霉素、鏈霉素、卡那霉素、新霉素、四環(huán)素、土霉素）※機(jī)理 干擾素（使起始因子eIF2磷酸化失活），毒素（抑制真核肽鏈延長）⑥基因工程

?基因工程載體：必備條件（自主復(fù)制、有標(biāo)志基因便于篩選、易引入受體細(xì)胞、酶切位

點(diǎn)少、M大可攜帶大片基因）

常用載體（質(zhì)粒、病毒、噬菌體、人工大染色體改造而來）?DNA文庫：含某種生物體全部被轉(zhuǎn)錄成mRNA的所有基因序列 ⑦密碼子

?起始密碼子：原核（AUG、GUG、UUG，對應(yīng)fMet）真核（AUG，對應(yīng)Met）※起始tRNA：tRNAMet、tRNAfMet ?終止密碼子：UAA、UAG、UGA ?無義密碼子：UAA、UAG、UGA ?線粒體中三種特殊密碼子：UGA-色氨酸

?原核RF1識別的密碼子：UAA、UAX ※RF2識別的密碼子：UAA、UGA ?密碼子性質(zhì)：不重疊、特殊性、通用性、簡并性、連續(xù)性、擺動(dòng)性 ※擺動(dòng)性：A-U，U-A、G，C-G，G-C、U，I-A、U、C ⑧其它

?SnRNA功能：RNA成熟加工、與染色質(zhì)結(jié)合、調(diào)節(jié)基因活性 ?多拷貝基因有：組蛋白基因、?3種印跡法對應(yīng)檢測對象：S-DNA、N-RNA、W-Pro ?Tm的影響三因素：C三G、鹽濃度（Na+）、DNA均一性（均一→窄）Tm=（C+G）%×0.41+69.3 第七章 維生素與激素 ①幾種重要酶的輔酶

?脫羧酶：α酮酸脫羧酶（TPP/VB1）、氨基酸脫羧酶（磷酸吡哆醛（VB6）※磷酸吡哆醛：氨基酸脫羧酶、轉(zhuǎn)氨酶的輔酶

?以FAD為輔酶的酶：二氫硫辛酰胺脫氫酶、脂酰輔酶A脫氫酶、琥珀酸脫氫酶、線粒體α磷酸甘油脫氫酶 ?羧化酶的輔酶：生物素（VB7）?VB12：鈷胺素（參與甲基轉(zhuǎn)移）?氧化還原酶的輔酶：NAD+ ?以NADP為輔酶的酶：蘋果酸酶、6-p-G脫氫酶 ?以FAK為輔酶的酶：脂酰輔酶A脫氫酶 ②幾種特定功能的維生素 ?凝血維生素：VK，脂溶 ?抗血維生素：VC，水溶

?含A的維生素：NAD+、NADP、FAD、CoASH ※VD：

體內(nèi)活性最高的VD是：1,25-二羥基膽鈣化醇[1,25-（OH）2D3] 兩種VD原：VD3（7-脫氫膽固醇），VD2（麥角固醇）VD3的形成：膽固醇→7-脫氫膽固醇→VD3 ③胰島素等激素的受體是：

④含N激素受體在激素作用下與腺苷酸環(huán)化酶的耦聯(lián)是由G蛋白介導(dǎo)實(shí)現(xiàn)的 ⑤蛋白質(zhì)類激素受體位于：細(xì)胞質(zhì)膜上 ⑥類固醇激素受體位于：細(xì)胞內(nèi) 第八章 生物氧化

①肌肉或神經(jīng)細(xì)胞儲存能量的高能化合物是：磷酸肌酸（IP3）

②高能化合物有：磷酸肌酸、1,3-二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）、③生物合成中主要的還原劑；NADPH，來源于HMS（磷酸戊糖途徑/磷酸己糖旁路）

④生物氧化過程中，ATP生成方式：底物水平磷酸化、氧化磷酸化 ⑤線粒體的嵴：外表面與基質(zhì)接觸，含有氧化磷酸化組分 ⑥ATP合成酶

?F0F1-ATPase是：催化ATP合成的酶形式，一種膜結(jié)合復(fù)合物，單獨(dú)存在時(shí)沒ATP酶活性 ?F0：含H+通道 ⑦ATP合成機(jī)理

⑧細(xì)胞質(zhì)脫下的一對氫進(jìn)入線粒體的三方式：異檸檬酸穿梭、蘋果酸穿梭、甘油磷酸穿梭 ⑨丙氨酸脫氫酶系的輔因子：TPP（VB1）、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+

丙氨酸脫氫酶系的酶：丙酮酸脫羧酶、硫辛酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、二氫硫辛酸脫氫酶 ⑩醛縮酶的底物是：F-1,6-2P ⑾在TCA、有氧呼吸鏈中產(chǎn)生的ATP最多的是：α-酮戊二酸→琥珀酸 第九章 糖代謝 ㈠糖酵解 ①部位：胞液

②過程：葡萄糖、糖元轉(zhuǎn)變?yōu)楸?③三關(guān)鍵酶：

?己糖激酶：包括（葡糖糖激酶、果糖激酶），不受ATP/AMP的調(diào)節(jié)

?磷酸果糖激酶：限速，主要激活劑（2,6-二磷酸果糖），抑制劑（ATP、檸檬酸）?丙酮酸激酶：受ATP/AMP的抑制 ④產(chǎn)能：2ATP ⑤醛縮酶的底物：F-1，6-P2（1，6-二磷酸果糖）

※糖代謝中既催化脫氫又催化脫羧的兩種酶：異檸檬酸脫氫酶、6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶 ㈡糖的有氧氧化 ①丙酮酸→乙酰輔酶A： ?部位：線粒體內(nèi)膜

?丙酮酸脫氫酶系：3酶（丙酮酸脫羧酶、硫辛酸乙酰轉(zhuǎn)移酶、二氫硫辛酸脫氫酶）

5輔（TPP（VB1）、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+）

②TCA循環(huán)：檸檬酸循環(huán)、Krebs循環(huán)

?調(diào)節(jié)TCA循環(huán)運(yùn)轉(zhuǎn)最主要的酶：異檸檬酸脫氫酶（限速）、α-酮戊二酸脫氫酶系 ?部位：線粒體基質(zhì)、內(nèi)膜

?酶：檸檬酸合酶、異檸檬酸脫氫酶（限速）、α-酮戊二酸脫氫酶系 ③1分子葡萄糖有氧氧化產(chǎn)生ATP數(shù)：36（38）=2+6（4）+6+24 ④草酰乙酸來源三途徑：蘋果酸酶和蘋果酸脫氫酶、丙酮酸脫羧酶、磷酸丙酮酸脫羧酶 ㈢磷酸戊糖途徑、磷酸己糖旁路HMS ①核糖的分解途徑是：HMS ②生物合成中除ATP供能外 ?合成糖還需：UTP ?合成脂肪還需：GTP ?生物合成的還原力是NADPH，來源是HMS ※反應(yīng)部位總結(jié) 糖酵解（EMP）：胞質(zhì) TCA：線粒體基質(zhì)、內(nèi)膜 氧化磷酸化：線粒體內(nèi)膜 ㈣糖元代謝

①合成糖元時(shí)，葡萄糖先活化成：UDPG ②植物合成淀粉時(shí)需：ADPG ③合成蔗糖需：UDPG、6-P-G ㈤糖異生 第十章 脂代謝 ㈠三酰甘油代謝 ①分解代謝 ?β-氧化：

反應(yīng)部位：線粒體基質(zhì)

產(chǎn)物：偶數(shù)碳（乙酰CoA）、奇數(shù)碳（幾個(gè)乙酰CoA+1個(gè)丙酰CoA）反應(yīng)過程：二步脫氫（生成1FADH2+1NADH）、產(chǎn)ATP（5個(gè)）?飽和脂肪酸分解 ※酮體

生成部位：肝內(nèi)

成分：乙酰乙酸、β-羥丁酸、丙酮 利用部位：肝外，腦、肌 ?不飽和脂肪酸氧化分解：

兩特殊酶：順-反烯酯酰CoA異構(gòu)酶、順-反-β羥酯酰CoA異構(gòu)酶 1分子軟脂酸（16C）徹底氧化分解成CO2、H2O生成ATP數(shù)： ②脂肪酸合成

?脂肪酸合成代謝還原力是NADPH，來源是HMS ?催化胞液脂肪酸合成的限速反應(yīng)由乙酰CoA羧化酶催化 ??；d體為ACP，β-氧化中?；d體是乙酰CoA ㈡磷脂代謝

①合成磷脂所需能量來自：CTP ㈢膽固醇代謝

①在體內(nèi)可直接合成膽固醇的化合物是：脂酰CoA 第十一章 氨基酸與蛋白質(zhì)代謝 ①幾種氨基酸

?生酮氨基酸：Leu、Lys ?生糖氨基酸：除Leu、Lys外的

?生酮兼生糖氨基酸：Phe、Tyr、Trp、Thr、Ile、Lys ?可轉(zhuǎn)變?yōu)橐阴oA的氨基酸： ?能與糖鏈發(fā)生糖基化的氨基酸： ②脫氨基

?氧化脫氨基：L-Glu ?聯(lián)合脫氨基：組織中

?嘌呤核苷酸循環(huán)：骨骼肌、心肌中

③直接排氨的動(dòng)物：水生動(dòng)物（魚）、原生動(dòng)物 ④氨的代謝

?氨的儲存與轉(zhuǎn)運(yùn)： 儲存方式：

轉(zhuǎn)運(yùn)方式：丙氨酸-葡萄糖循環(huán)、谷氨酰胺-谷氨酸循環(huán)

※骨骼肌中脫氨基產(chǎn)生的氨通過什么途徑轉(zhuǎn)入肝臟：丙氨酸-葡萄糖循環(huán) ?氨的去路-鳥氨酸循環(huán)（尿素循環(huán)）部位：肝（線粒體、胞質(zhì)）終產(chǎn)物：尿素 關(guān)鍵酶：

※鳥氨酸循環(huán)生成尿素的前體是：Arg 產(chǎn)物-尿素中N的來源：N2-Asp

⑤個(gè)別氨基酸的代謝 ?組胺的形成：His脫羧 第十二章 核苷酸代謝 ㈠核苷酸合成代謝

①嘌呤堿基與嘧啶堿基中各原子來源 ?嘌呤堿基 N1-Asp C2、C8-C1（一碳單位）N3、N9-Gln C4、C5、N7-Gly C6-CO2 ?嘧啶堿基 C2-CO2 N3-Gln N1、C4、C5、C6-Asp ②脫氧核苷酸的合成

?脫氧發(fā)生在NDP（核苷二磷酸）水平?dTMP生成發(fā)生在NMP水平

※合成嘌呤需氨基酸：Asp、Gln、Gly 合成嘧啶需氨基酸：Gln、Asp 嘧啶核苷酸合成的重要中間產(chǎn)物是：OMP ㈡核苷酸分解代謝 ①嘌呤分解代謝 ?人體嘌呤分解代謝主要終產(chǎn)物：尿酸

?人、猿以外哺乳動(dòng)物嘌呤代謝終產(chǎn)物：尿囊素 ※代謝綜合總結(jié)：

聯(lián)系糖、脂、蛋白三大物質(zhì)代謝的關(guān)鍵物質(zhì)是：乙酰CoA、丙酮酸 氨甲蝶呤抑制：嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸的從頭合成

第三篇：微生物鑒定的生理生化反應(yīng)匯總

微生物鑒定的生理生化反應(yīng)

各種細(xì)菌具有各自獨(dú)特的酶系統(tǒng)，因而對底物的分解能力不同，其代謝產(chǎn)物也不同。用生物化學(xué)方法測定這些代謝產(chǎn)物，可用來區(qū)別和鑒定細(xì)菌的種類。利用生物化學(xué)方法來鑒別不同細(xì)菌，稱為細(xì)菌的生物化學(xué)試驗(yàn)或稱生化反應(yīng)。生物化學(xué)試驗(yàn)的方法很多，主要有以下幾類。

一、碳水化合物的代謝試驗(yàn) 1．糖（醇、苷）類發(fā)酵試驗(yàn)

（1）原理：不同種類細(xì)菌含有發(fā)酵不同糖（醇、苷）類的酶，因而對各種糖（醇、苷）類的代謝能力也有所不同，即使能分解某種糖（醇、苷）類，其代謝產(chǎn)物可因菌種而異。檢查細(xì)菌對培養(yǎng)基中所含糖（醇、苷）降解后產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣的能力，可用以鑒定細(xì)菌種類。

(2)方法：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中（如酚紅肉湯基礎(chǔ)培養(yǎng)基pH7.4）加入0.5~1.0％（w/v）的特定糖（醇、苷）類。所使用的糖（醇、苷）類有很多種，根據(jù)不同需要可選擇單糖、多糖或低聚糖、多元醇和環(huán)醇等，見表6-4-1。將待鑒定的純培養(yǎng)細(xì)菌接種入試驗(yàn)培養(yǎng)基中，置35℃孵育箱內(nèi)孵育數(shù)小時(shí)到兩周（視方法及菌種而定）后，觀察結(jié)果。若用微量發(fā)酵管，或要求培養(yǎng)時(shí)間較長時(shí)，應(yīng)注意保持其周圍的濕度，以免培養(yǎng)基干燥。

(3)結(jié)果：能分解糖（醇、苷）產(chǎn)酸的細(xì)菌，培養(yǎng)基中的指示劑呈酸性反應(yīng)（如酚紅變?yōu)辄S色），產(chǎn)氣的細(xì)菌可在小倒管（Durham小管）中產(chǎn)生氣泡，固體培養(yǎng)基則產(chǎn)生裂隙。不分解糖則無變化。

(4)應(yīng)用：糖（醇、苷）類發(fā)酵試驗(yàn)，是鑒定細(xì)菌的生化反應(yīng)試驗(yàn)中最主要的試驗(yàn)，不同細(xì)菌可發(fā)酵 不同的糖（醇、苷）類，如沙門菌可發(fā)酵葡萄糖，但不能發(fā)酵乳糖，大腸埃希菌則可發(fā)酵葡萄糖和乳糖。即便是兩種細(xì)菌均可發(fā)酵同一種糖類，其發(fā)酵結(jié)果也不盡相同，如志賀菌和大腸埃希菌均可發(fā)酵葡萄糖，但前者僅產(chǎn)酸，而后者則產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，故可利用此試驗(yàn)鑒別細(xì)菌。

表6-4-1 常用于細(xì)菌糖發(fā)酵試驗(yàn)的糖、醇類

單糖 四碳糖：赤蘚糖 , 五碳糖：核糖 核酮糖 木糖

阿拉伯糖, 六碳糖：葡萄糖 果糖 半乳糖 甘露糖

雙糖 蔗糖（葡萄糖＋果糖）乳糖（葡萄糖＋半乳糖）麥芽糖（兩分子葡萄糖）三糖 棉子糖（葡萄糖＋果糖＋半乳糖）多糖 菊糖（多分子果糖）淀粉

醇類 側(cè)金盞花醇 衛(wèi)茅醇 甘露醇 山梨醇 非糖類 肌醇

2．葡萄糖代謝類型鑒別試驗(yàn)

(1)原理：細(xì)菌在分解葡萄糖的過程中，必須有分子氧參加的，稱為氧化型；能進(jìn)行無氧降解的為發(fā)酵型；不分解葡萄糖的細(xì)菌為產(chǎn)堿型。發(fā)酵型細(xì)菌無論在有氧或無氧環(huán)境中都能分解葡萄糖，而氧化型細(xì)菌在無氧環(huán)境中則不能分解葡萄糖。本試驗(yàn)又稱氧化發(fā)酵（O/F或Hugh－Leifson，HL）試驗(yàn)，可用于區(qū)別細(xì)菌的代謝類型。

(2)方法：挑取少許純培養(yǎng)物（不要從選擇性平板中挑?。┙臃N2支HL培養(yǎng)管中，在其中一管加入高度至少為0.5cm的無菌液體石蠟以隔絕空氣（作為密封管），另一管不加（作為開放管）。置35℃孵箱孵育48h以上。

(3)結(jié)果： 兩管培養(yǎng)基均不產(chǎn)酸（顏色不變）為陰性；兩管都產(chǎn)酸（變黃）為發(fā)酵型；加液體石蠟管不產(chǎn)酸，不加液體石蠟管產(chǎn)酸為氧化型。(4)應(yīng)用：主要用于腸桿菌科與其它非發(fā)酵菌的鑒別。腸桿菌科、弧菌科細(xì)菌為發(fā)酵型，非發(fā)酵菌為氧化型或產(chǎn)堿型。也可用于鑒別葡萄球菌（發(fā)酵型）與微球菌（氧化型）。3．甲基紅（MR）試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌在糖代謝過程中，分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步被分解為甲酸、乙酸和琥珀酸等，使培養(yǎng)基pH下降至4.5以下時(shí)，加入甲基紅指示劑呈紅色。如細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或產(chǎn)生的酸進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為其它物質(zhì)（如醇、醛、酮、氣體和水），培養(yǎng)基pH在 5.4以上，加入甲基紅指示劑呈桔黃色。

(2)方法：將待試菌接種于葡萄糖磷酸鹽蛋白胨水中，35℃孵育48h~96h后，于5ml培養(yǎng)基中滴加5~6滴甲基紅指示劑，立即觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果判定：呈現(xiàn)紅色者為陽性，桔黃色為陰性，桔紅色為弱陽性。

(4)應(yīng)用：常用于腸桿菌科內(nèi)某些種屬的鑒別，如大腸埃希菌和產(chǎn)氣腸桿菌，前者為陽性，后者為陰性。腸桿菌屬和哈夫尼亞菌屬為陰性，而沙門菌屬、志賀菌屬、枸櫞酸桿菌屬和變形桿菌屬等為陽性。

4．β－半乳糖苷酶試驗(yàn)（ONPG試驗(yàn)）

(1)原理：乳糖發(fā)酵過程中需要乳糖通透酶和β－半乳糖苷酶才能快速分解。有些細(xì)菌只有半乳糖苷酶，因而只能遲緩發(fā)酵乳糖，所有乳糖快速發(fā)酵和遲緩發(fā)酵的細(xì)菌均可快速水解鄰硝基酚-β-D-半乳糖苷（O-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG）而生成黃色的鄰硝基酚。用于枸櫞酸菌屬、亞利桑那菌屬與沙門菌屬的鑒別。

(2)方法：將待試菌接種于ONPG肉湯中，35℃水浴或孵箱孵育18~24h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：呈現(xiàn)亮黃色為陽性，無色為陰性。

(4)應(yīng)用：可用于遲緩發(fā)酵乳糖細(xì)菌的快速鑒定，本法對于迅速及遲緩分解乳糖的細(xì)菌均可短時(shí)間內(nèi)呈現(xiàn)陽性。埃希菌屬、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬、哈夫尼亞菌屬、沙雷菌屬和腸桿菌屬等均為試驗(yàn)陽性，而沙門菌屬、變形桿菌屬和普羅威登斯菌屬等為陰性。

5．VP試驗(yàn)

(1)原理：測定細(xì)菌產(chǎn)生乙酰甲基甲醇的能力。某些細(xì)菌如產(chǎn)氣腸桿菌，分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步脫羧形成乙酰甲基甲醇。在堿性條件下，乙酰甲基甲醇被氧化成二乙酰，進(jìn)而與培養(yǎng)基中的精氨酸等含胍基的物質(zhì)結(jié)合形成紅色化合物。即V-P試驗(yàn)陽性。(2)方法：將待檢菌接種于葡萄糖磷酸鹽蛋白胨水中，35℃孵育24~48h，加入50g/Lα－萘酚（95％乙醇溶液）0.6ml，輕輕振搖試管，然后加0.2ml 400g/L KOH，輕輕振搖試管30s至1min，然后靜置觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：紅色者為陽性，黃色或類似銅色為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于大腸埃希菌和產(chǎn)氣腸桿菌的鑒別。本試驗(yàn)常與MR試驗(yàn)一起使用，一般情況下，前者為陽性的細(xì)菌，后者常為陰性，反之亦然。但腸桿菌科細(xì)菌不一定都這樣規(guī)律，如蜂房哈夫尼亞菌和奇異變形桿菌的VP試驗(yàn)和MR試驗(yàn)常同為陽性。6．膽汁七葉苷水解試驗(yàn)

（1）原理：在10%~40％膽汁存在下，測定細(xì)菌水解七葉苷的能力。七葉苷被細(xì)菌分解生成的七葉素，七葉素與培養(yǎng)基中的枸櫞酸鐵的二價(jià)鐵離子發(fā)生反應(yīng)形成黑色化合物。

(2)方法：將被檢菌接種于膽汁七葉苷培養(yǎng)基中，35℃孵育18~24h后，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：培養(yǎng)基完全變黑為陽性，不變黑為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于鑒別D群鏈球菌與其它鏈球菌的區(qū)別，以及腸桿菌科的某些種、某些厭氧菌（如脆弱擬桿菌等）的初步鑒別。D群鏈球菌本試驗(yàn)為陽性。7．淀粉水解試驗(yàn)

(1)原理：產(chǎn)生淀粉酶的細(xì)菌能將淀粉水解為糖類，在培養(yǎng)基上滴加碘液時(shí)，可在菌落周圍出現(xiàn)透明區(qū)。

(2)方法：將被檢菌劃線接種于淀粉瓊脂平板或試管中，35℃孵育18~24h，加入革蘭碘液數(shù)滴，立即觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：陽性反應(yīng)，菌落周圍有無色透明區(qū)，其它地方藍(lán)色；陰性反應(yīng)，培養(yǎng)基全部為藍(lán)色。

(4)應(yīng)用：用于白喉棒狀桿菌生物型的分型，重型淀粉水解試驗(yàn)陽性，輕、中型陰性；芽胞桿菌屬菌種和厭氧菌某些種的鑒定。8．甘油復(fù)紅試驗(yàn)

(1)原理：甘油可被細(xì)菌分解生成丙酮酸，丙酮酸脫去羧基為乙醛，乙醛與無色的復(fù)紅生成醌式化合物，呈深紫紅色。

(2)方法：取被檢菌接種于甘油復(fù)紅肉湯培養(yǎng)基中，于35℃孵育，觀察2~8d。應(yīng)同時(shí)做陰性對照。

(3)結(jié)果：紫紅色為陽性，與對照管顏色相同為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于沙門菌屬內(nèi)各菌種間的鑒別。傷寒沙門菌、甲（丙）型副傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、孔道夫沙門菌和仙臺沙門菌本試驗(yàn)為陰性，乙型副傷寒沙門菌結(jié)果不定，其它不常見沙門菌多數(shù)為陽性。9．葡萄糖酸氧化試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌可氧化葡萄糖酸鉀，生成α-酮基葡萄糖酸。α-酮基葡萄糖酸是一種還原性物質(zhì)，可與班氏試劑起反應(yīng)，出現(xiàn)棕色或磚紅色的氧化亞銅沉淀。

(2)方法：將待檢菌接種于葡萄糖酸鹽培養(yǎng)基中(1ml)，置35℃孵育48h,加入班氏試劑1ml，于水浴中煮沸10min并迅速冷卻，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：出現(xiàn)黃到磚紅色沉淀為陽性。不變或仍為藍(lán)色為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于假單胞菌的鑒定和腸桿菌科菌分群。

二、氨基酸和蛋白質(zhì)的代謝試驗(yàn) 1．硫化氫試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌能分解含硫氨基酸生成硫化氫，與亞鐵離子或鉛離子結(jié)合形成黑色沉淀物。

(2)方法：將待檢菌接種于含硫化物及亞鐵離子的培養(yǎng)基或克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）中，35℃孵育18~24h，觀察有無黑色沉淀出現(xiàn)。或用醋酸鉛紙條，懸掛于KIA管中（白色濾紙，根據(jù)試管大小裁剪適當(dāng)，在熱的50g/L醋酸鉛飽和水溶液中浸泡，然后于50~60℃烘干，121℃15min高壓滅菌備用）。醋酸鉛是最敏感的方法。(3)結(jié)果：有黑色沉淀物為陽性。

(4)應(yīng)用：主要用于鑒別腸桿菌科細(xì)菌，如沙門菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬、愛德華菌屬等為陽性，其它菌屬大多為陰性。但沙門菌屬中亦有部分硫化氫陰性菌株，如甲型副傷寒、仙臺、豬霍亂沙門菌等。2．明膠液化試驗(yàn)

(1)原理：細(xì)菌分泌的胞外蛋白水解酶（明膠酶）能分解明膠，使明膠失去凝固能力而液化。(2)方法：將待檢菌接種于明膠培養(yǎng)基中，35℃孵育24h到7d或更長時(shí)間，每24h取出放入4℃冰箱約2h后，觀察有無凝固。

(3)結(jié)果：如無凝固，則表示明膠已被水解，液化試驗(yàn)陽性。如凝固，則繼續(xù)培養(yǎng)。

(3)應(yīng)用：奇異變形桿菌、普通變形桿菌、沙雷菌屬和陰溝腸桿菌等到能液化明膠，腸桿菌科中的其它細(xì)菌很少液化明膠。有些厭氧菌如產(chǎn)氣莢膜梭菌、脆弱類桿菌等也能液化明膠。另外，許多假單胞菌也能產(chǎn)生明膠酶而使明膠液化。3．吲哚試驗(yàn)（靛基質(zhì)試驗(yàn)）(1)原理：某些細(xì)菌有色氨酸酶，能分解色氨酸產(chǎn)生吲哚，吲哚與對二甲氨基苯甲醛形成紅色的玫瑰吲哚。

(2)方法：將待檢菌接種于富含色氨酸的蛋白胨水培養(yǎng)基中，35℃孵育24~48h，加入靛基質(zhì)試劑，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：紅色為陽性，無色為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于腸桿菌科細(xì)菌的鑒定，如大腸埃希菌與產(chǎn)氣腸桿菌，肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌等的鑒別。4．苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)

(1)原理：測定細(xì)菌是否產(chǎn)生苯丙氨酸脫氨酶。細(xì)菌產(chǎn)生的苯丙氨酸脫氨酶使苯丙氨酸脫氨后生成苯丙酮酸，加入三氯化鐵試劑后產(chǎn)生綠色反應(yīng)。若延長時(shí)間，會(huì)引起退色。

(2)方法：將待檢菌大量接種入苯丙氨酸培養(yǎng)基中，35℃孵育18~24h，滴加100g/L三氯化鐵試劑4~5滴，立即觀察菌落生長處有無綠色出現(xiàn)。(3)結(jié)果：有綠色出現(xiàn)為陽性。

(4)應(yīng)用：變形桿菌屬、普羅威登菌屬、摩根菌屬均為陽性，腸桿菌科其它細(xì)菌均為陰性。5．氨基酸脫羧酶試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌可產(chǎn)生氨基酸脫羧酶使氨基酸脫羧生成胺和二氧化碳。由于胺的生成使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，可用指示劑指示出來。

(2)方法：將待檢菌分別接種于1支氨基酸（賴氨酸，鳥氨酸或精氨酸）脫羧酶試驗(yàn)管和1支氨基酸脫羧酶對照管（無氨基酸），各覆蓋至少0.5cm高度的無菌石蠟油，35℃孵育1~4d，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：若為溴甲酚紫指示劑，則試驗(yàn)管紫色為陽性，黃色為陰性，對照管應(yīng)為黃色。(4)應(yīng)用：主要用于某些細(xì)菌種間的鑒別，如賴氨酸用于產(chǎn)氣腸桿菌（陽性）與陰溝腸桿菌（陰性）；鳥氨酸用于陰溝腸桿菌（陽性）和克雷伯菌（陰性）；精氨酸用于陰溝腸桿菌（陽性）和產(chǎn)氣腸桿菌（陰性）等。6．精氨酸雙水解酶試驗(yàn)

(1)原理：精氨酸經(jīng)兩次水解后,生成鳥氨酸、氨及二氧化碳。鳥氨酸又在脫羧酶的作用下生成腐胺。氨及腐胺均為堿性物質(zhì)，故可使培養(yǎng)基變堿，用指示劑指示出來。(1)方法：將待檢菌接種于試驗(yàn)培養(yǎng)上，置35℃孵箱孵育1~4d，觀察結(jié)果。

(2)結(jié)果：溴甲酚紫指示劑呈紫色為陽性，酚紅指示劑呈紅色為陽性。黃色為陰性。(3)應(yīng)用：主要用于腸桿菌科及假單胞菌屬的鑒定。7．尿素酶試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶，分解尿素產(chǎn)生大量的氨，使培養(yǎng)基變堿。(2)方法：將待檢菌接種于含有尿素的培養(yǎng)基中，35℃孵育18~24h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：紅色為陽性，不變?yōu)殛幮浴?/p>

(4)應(yīng)用：主要用于腸桿菌科變形桿菌屬、普羅威登菌屬、克雷伯菌屬及假單胞菌屬的鑒定。

8．霍亂紅試驗(yàn)

(1)原理：霍亂弧菌分解色氨酸生成吲哚，并能使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，當(dāng)加入硫酸后生成亞硝酸吲哚，呈紅色反應(yīng)。

(2)方法：將待檢菌接種于蛋白胨水中，置35℃孵育24h，加入濃硫酸數(shù)滴，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：呈紅色者為陽性。

(4)應(yīng)用：霍亂弧菌呈陽性反應(yīng)，但本試驗(yàn)并非霍亂弧菌所特有。凡能產(chǎn)生吲哚并還原硝酸鹽為亞硝酸鹽的細(xì)菌，均可呈現(xiàn)陽性反應(yīng)。

三、碳源和氮源利用試驗(yàn) 1．枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌能利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源，而在此培養(yǎng)基上生長，并分解枸櫞酸鹽生成碳酸鈉，使培養(yǎng)基變堿性。

(2)方法：將待檢菌接種于枸櫞酸鹽培養(yǎng)基上，置35℃孵育1~4d，逐日觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：若用溴麝香草酚蘭指示劑，斜面出現(xiàn)菌落或菌苔，培養(yǎng)基變藍(lán)色為陽性；無菌落生長，培養(yǎng)基綠色為陰性。

(4)應(yīng)用：可用此試驗(yàn)作細(xì)菌種屬間鑒定。埃希菌屬、志賀菌屬、愛德華菌屬和耶爾森菌屬均為陰性，沙門菌屬、克雷伯菌屬通常陽性，粘質(zhì)和液化沙雷菌和某些變形桿菌及枸櫞酸桿菌陽性。此外，銅綠假單胞菌、洋蔥伯克霍爾德菌和嗜水氣單胞菌也能利用枸櫞酸鹽。

2．丙二酸鹽利用試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌能利用丙二酸鹽作為唯一碳源，丙二酸鹽被分解生成碳酸鈉，使培養(yǎng)基變堿。

(2)方法：將待檢菌接種于丙二酸鹽培養(yǎng)基中，置35℃孵育24~48h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：培養(yǎng)基由綠色變?yōu)樗{(lán)色為陽性。顏色無變化為陰性。

(4)應(yīng)用：腸桿菌科中亞利桑那菌和克雷伯菌屬為陽性，枸櫞酸桿菌屬、腸桿菌屬和哈夫尼亞菌屬有不同生物型反應(yīng)，其它各菌屬均為陰性。

3．醋酸鈉利用試驗(yàn)

(1)原理：細(xì)菌利用銨鹽作為唯一氮源，同時(shí)，利用醋酸鹽作為唯一碳源時(shí)，可在醋酸鹽培養(yǎng)上生長，分解醋酸鹽生成碳酸鈉，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性。

(2)方法：將被檢菌接種于醋酸鹽培養(yǎng)基中，置35℃孵育2~7d，逐日觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：培養(yǎng)基上有細(xì)菌生長，并變?yōu)樗{(lán)色為陽性。

(4)應(yīng)用：主要用于大腸埃希菌和志賀菌屬的鑒別，前者為陽性，而后者為陰性。4．馬尿酸鈉水解試驗(yàn)

(1)原理：某些細(xì)菌可具有馬尿酸水解酶，可使馬尿酸水解為苯甲酸和甘氨酸，苯甲酸與三氯化鐵試劑結(jié)合，形成苯甲酸鐵沉淀。

(2)方法：將待檢菌接種于馬尿酸鈉培養(yǎng)基中，置35℃孵育48h，離心沉淀，取上清液0.8ml，加入三氯化鐵試劑0.2ml，立即混勻，經(jīng)10~15min觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：出現(xiàn)恒定之沉淀物為陽性。(5)應(yīng)用：主要用于B群鏈球菌的鑒定。

5、乙酰胺利用試驗(yàn)

(1)原理：許多非發(fā)酵菌產(chǎn)生一種脫酰胺酶，可使乙酰胺經(jīng)脫酰胺作用釋放氨，使培養(yǎng)基變堿。

(2)方法：將被檢菌接種于乙酰胺培養(yǎng)基中，置35℃孵育24~48h，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：培養(yǎng)基由綠色變?yōu)樗{(lán)色為陽性。如不生長，或稍有生長，但培養(yǎng)基顏色不變?yōu)殛幮浴?/p>

(4)應(yīng)用：主要用于非發(fā)酵菌的鑒定。銅綠假單胞菌、去硝化產(chǎn)堿桿菌、食酸假單胞菌為陽性，其它非發(fā)酵菌大多數(shù)為陰性。

四、酶類試驗(yàn) 1.氧化酶試驗(yàn)

(1)原理：氧化酶又稱細(xì)胞色素氧化酶，是細(xì)胞色素氧化酶系統(tǒng)中的最終呼吸酶。此酶并不直接與氧化酶試劑起反應(yīng)，而是先使細(xì)胞色素C氧化，然后此氧化型細(xì)胞色素C再使對苯二胺氧化，產(chǎn)生顏色反應(yīng)。因此，本試驗(yàn)結(jié)果與細(xì)胞色素C的存在有關(guān)。

(2)方法：取潔凈濾紙條，沾取菌落少許，加氧化酶試劑（10g/L鹽酸四甲基對苯二胺水溶液或10g/L鹽酸二甲基對苯二胺水溶液）1滴，1min內(nèi)觀察結(jié)果。也可將試劑滴加到菌落上進(jìn)行試驗(yàn)。

(3)結(jié)果：陽性者立即變粉紅色，5~10s內(nèi)呈深紫色。無色為陰性。

(4)應(yīng)用：用于奈瑟菌屬的菌種鑒定，該屬細(xì)菌均陽性。此外，也用于假單胞菌屬與腸桿菌科細(xì)菌的區(qū)別，前者陽性，而后者陰性。莫拉菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬等均為陽性。

注意事項(xiàng)： ①試驗(yàn)時(shí)應(yīng)避免接觸含鐵物質(zhì)，以免出現(xiàn)假陽性。②10g/L鹽酸四甲基對苯二胺或10g/L鹽酸四甲基對苯二胺水溶液為無色溶液，在空氣中易被氧化而失效，故應(yīng)經(jīng)常更換新試劑，并盛于棕色瓶中，若試劑已變成深藍(lán)色，應(yīng)棄去不用。

2．觸酶試驗(yàn)

(1)原理：觸酶又稱過氧化氫酶，具有過氧化氫酶的細(xì)菌，能催化過氧化氫成為水和原子態(tài)氧，繼而形成氧分子，出現(xiàn)氣泡。

(2)方法：取潔凈玻片1張，用接種環(huán)挑取細(xì)菌，加3％H2O2 1滴，立即觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：若立即出現(xiàn)大量氣泡為陽性。無氣泡為陰性。

(4)應(yīng)用：大多需氧和兼性厭氧菌均產(chǎn)生過氧化氫酶，但鏈球菌科陰性，故常用此試驗(yàn)來鑒定。此外，金氏桿菌屬的細(xì)菌也為陰性。分枝桿菌的鑒別則用耐熱觸酶試驗(yàn)，結(jié)核分枝桿菌為陰性，戈氏分枝桿菌和地分枝桿菌為陽性。

注意事項(xiàng)：①3％H2O2溶液要新鮮配制。②不宜用血瓊脂平板上生長的菌落，因紅細(xì)胞含有觸酶，可致假陽性反應(yīng)，③取對數(shù)生長期的細(xì)菌。3．凝固酶試驗(yàn)

(1)原理：凝固酶試驗(yàn)是鑒定葡萄球菌致病性的重要試驗(yàn)。致病性葡萄球菌可產(chǎn)生兩種凝固酶，一種是與細(xì)胞壁結(jié)合的凝聚因子，稱結(jié)合凝固酶，它直接作用于血漿中纖維蛋白原，使發(fā)生沉淀，包圍于細(xì)菌外面而凝聚成塊，玻片法陽性結(jié)果是由此凝聚因子所致；另一種凝固酶是分泌至菌體外，稱為游離凝固酶，它能使凝血酶原變成凝血酶類產(chǎn)物，使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白，從而使血漿凝固。試管法可同時(shí)測定結(jié)合型和游離型凝固酶。(2)方法: ①玻片法：在一張潔凈玻片中央加1滴生理鹽水，用接種環(huán)取待檢培養(yǎng)物與其混合（設(shè)陽性和陰性對照）制成菌懸液，若經(jīng)10~20s內(nèi)無自凝現(xiàn)象發(fā)生，則加入人或兔新鮮血漿1環(huán)，與菌懸液混合，觀察結(jié)果。②試管法：于試管內(nèi)加1﹕4稀釋的兔或人血漿0.5ml，再加1~2個(gè)待試菌菌落，置37℃水浴，每30min觀察1次結(jié)果。

(3)結(jié)果：①玻片法：5~10s內(nèi)出現(xiàn)凝集者為陽性。②試管法：如有凝塊或整管凝集出現(xiàn)為陽性。2h后無上述現(xiàn)象出現(xiàn)，則放置過夜后再觀察。

(4)應(yīng)用：本試驗(yàn)僅用于致病性葡萄球的鑒定。

注意事項(xiàng)：①玻片法為篩選試驗(yàn)，陽性、陰性均需進(jìn)行試管法測定。②血漿必須新鮮。③應(yīng)使用肝素而非枸櫞酸鹽作抗凝劑抗凝的血漿。④本試驗(yàn)也可用市購的膠乳凝集試驗(yàn)試劑盒測定。

4．DNA酶試驗(yàn)

(1)原理： 某些細(xì)菌能產(chǎn)生DNA酶，水解外源性DNA使之成為寡核苷酸。DNA可被酸沉淀，而寡核苷酸則不會(huì)。故在DNA瓊脂平板上加鹽酸后，可在菌落周圍形成透明區(qū)。

(2)方法：在DNA瓊脂平板上點(diǎn)種待檢菌，35℃孵育18~24h，用1 mol/L鹽酸傾注平板，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：如菌落周圍有透明區(qū)者為陽性，無透明區(qū)為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于腸桿菌科及葡萄球菌屬某些菌種的鑒定。沙雷菌、變形桿菌和金黃色葡萄球菌DNA酶均陽性。

5．膽汁溶菌試驗(yàn)

(1)原理：膽汁或去氧膽酸鈉能導(dǎo)致某些細(xì)菌溶解，一方面是由于膽汁或去氧膽酸鈉降低了細(xì)菌細(xì)胞膜上的表面張力，使細(xì)菌的細(xì)胞膜破損或使菌體裂解。另一方面可能與激活細(xì)菌體內(nèi)的自溶酶有關(guān)。

(2)方法：①試管法：用純培養(yǎng)物制備1ml生理鹽水濃菌懸液，pH調(diào)至7.0，分裝兩支試管，各0.5ml。其中一管加0.5ml 100g/L去氧膽酸鈉為試驗(yàn)管，另一管加0.5ml生理鹽水作對照。35℃孵育每小時(shí)觀察1次結(jié)果。②平板法：在血平板上選取單個(gè)可疑菌落，作好標(biāo)記，直接在菌落上加1接種環(huán)20g/L去氧膽酸鈉（pH7.0），置35℃孵育30min（平板不要翻轉(zhuǎn)）觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：①試管法：在3h內(nèi)液體透明為陽性。②平板法：如菌落消失，僅留下溶血區(qū)為陽性，菌落不消失為陰性。

(4)應(yīng)用：用于肺炎鏈球菌的鑒定。6．硝酸鹽還原試驗(yàn)

(1)原理：硝酸鹽還原反應(yīng)包括兩個(gè)過程，其一是在合成代謝過程中，硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨，再由氨轉(zhuǎn)化為氨基酸和細(xì)胞內(nèi)其它含氮化合物；另一是在分解代謝過程中，硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統(tǒng)中的終末受氫體。硝酸鹽還原過程可因細(xì)菌不同而異。有的細(xì)菌僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，如大腸埃希菌等；有的細(xì)菌可使其還原為亞硝酸鹽和離子態(tài)的銨；有的細(xì)菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮，如沙雷菌屬；有的細(xì)菌還可以將其還原產(chǎn)物在合成性代謝中完全利用。硝酸鹽或亞硝酸鹽如果還原生成氣體的終末產(chǎn)物如氮或氧化氮，則稱為脫硝化或脫氮化作用。某些細(xì)菌能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，亞硝酸鹽與醋酸作用，生成亞硝酸，亞硝酸與試劑中的對氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸，后者與α-萘胺結(jié)合生成N-α萘胺偶苯磺酸。

(2)方法：將待檢菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基（內(nèi)含小倒管）中，35℃孵育1~4d。將甲、乙等量混合液（用時(shí)混合）0.1ml加于試管內(nèi)，立即或10min內(nèi)觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：出現(xiàn)紅色為陽性反應(yīng)。如欲觀察有無氮?dú)猱a(chǎn)生，可于培養(yǎng)基管內(nèi)加1只小倒管，有氣泡產(chǎn)生，則表示有氮?dú)馍?。如欲檢查培養(yǎng)基中硝酸鹽是否被分解，可取鋅粉少許加入培養(yǎng)基內(nèi)，如出現(xiàn)紅色表明硝酸鹽仍存在；若不出現(xiàn)紅色，表示硝酸鹽已被分解。

(4)應(yīng)用：本試驗(yàn)廣泛用于細(xì)菌鑒定。腸桿菌科細(xì)菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽；假單胞菌屬中有的細(xì)菌能產(chǎn)生氮?dú)猓玢~綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌、斯氏假單胞菌，有的則能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，如鼻疽假單胞菌等；厭氧菌如韋榮菌也能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽。7．卵磷脂酶試驗(yàn)

(1)原理：細(xì)菌產(chǎn)生的卵磷脂酶，經(jīng)鈣離子作用，能迅速分解卵黃或血清中的卵磷脂形成混濁沉淀狀的甘油酯和水溶性磷酸膽堿。

(2)方法：取待檢菌劃線接種或點(diǎn)種在卵黃瓊脂平板上，置35℃孵育3~6h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：3h后在菌落周圍形成乳白色混濁，即為卵磷脂酶試驗(yàn)陽性，6h后該混濁圈可擴(kuò)大到直徑5~6mm。(4)應(yīng)用：該試驗(yàn)主要用于厭氧的鑒定。產(chǎn)氣莢膜梭菌和諾維梭菌為陽性，其他梭菌為陰性。蠟樣芽孢桿菌亦為陽性。8．磷酸酶試驗(yàn)

(1)原理：磷酸酶是磷酸脂的水解酶，可使單磷脂水解，其反應(yīng)可根據(jù)反應(yīng)基質(zhì)不同而異，如用磷酸酚酞為基質(zhì)，經(jīng)磷酸酶水解后可釋放酚酞，在堿性環(huán)境中呈紅色。

(2)方法：取待檢菌接種于磷酸酚酞瓊脂平板上，置35℃孵育18~24h，于平皿蓋內(nèi)加1滴濃氨水，熏蒸片刻，觀察結(jié)果。亦可用液體培養(yǎng)基，經(jīng)孵育后，向管內(nèi)加400g/L氫氧化鈉溶液1滴，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：菌落變?yōu)榧t色者為陽性。

(4)應(yīng)用：主要用于致病性葡萄球菌與非致病性葡萄球菌的鑒別，前者為陽性，后者為陰性。

9．脂酶試驗(yàn)

(1)原理：細(xì)菌產(chǎn)生的脂酶可分解脂肪為游離脂肪酸。在培養(yǎng)基中加入維多利亞藍(lán)可與脂肪結(jié)合成為無色化合物，如果脂肪被分解，則維多利亞藍(lán)釋出，呈藍(lán)色。

(2)方法：將待檢菌接種于含維多利亞藍(lán)的脂酶培養(yǎng)基中，置35℃孵育24h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：培養(yǎng)基變?yōu)樯钏{(lán)色者為陽性，否則可呈無色或粉紅色。

(4)應(yīng)用：主要用于厭氧菌鑒定。在擬桿菌中產(chǎn)黑色素?cái)M桿菌中間亞種產(chǎn)生脂酶，其它擬桿菌陰性；在梭菌屬中諾維梭菌和產(chǎn)芽胞梭菌也產(chǎn)生此酶，其它梭菌為陰性。10．CAMP試驗(yàn)

(1)原理：B群鏈球菌（無乳鏈球菌）產(chǎn)生一種“CAMP”因子，此種物質(zhì)能促進(jìn)葡萄球菌的β-溶血素的活性。因此，可在兩種細(xì)菌的交界處溶血力增強(qiáng)，出現(xiàn)箭頭型透明溶血區(qū)。

(2)方法：在羊血或馬血瓊脂平板上，先以β-溶血的金黃色葡萄球菌劃一橫線接種。再將待檢菌與前一劃線作垂直接種，兩者應(yīng)相距1cm，于35℃孵育18~24h，觀察結(jié)果。每次試驗(yàn)應(yīng)做陰陽性對照。

(3)結(jié)果：兩種細(xì)菌劃線交接處出現(xiàn)箭頭型溶血區(qū)為陽性。

(4)應(yīng)用：主要用于B群鏈球菌（陽性）的鑒定，其他鏈球菌均為陰性。11．石蕊牛乳試驗(yàn)

(1)原理：由于牛乳內(nèi)含有豐富的蛋白質(zhì)和糖類，各種細(xì)菌對這些物質(zhì)的分解能力不同，故可有數(shù)種不同反應(yīng)，用以鑒別細(xì)菌。(2)將待檢菌接種于石蕊牛乳培養(yǎng)基中，若為芽胞梭菌，要在培養(yǎng)基中加入無菌鐵末，置35℃孵育18~24h，必要時(shí)可延長至14d。觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：①產(chǎn)酸：發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，使指示劑變?yōu)榉奂t色。②產(chǎn)氣：發(fā)酵乳糖而同時(shí)產(chǎn)氣，可沖開上面的凡士林。③凝固：因產(chǎn)酸太多而使牛乳中的酪蛋白凝固。④胨化：將凝固的酪蛋白繼續(xù)水解為胨，培養(yǎng)基上層液體變清，底部可留有未被完全胨化的酪蛋白。⑤產(chǎn)堿：乳糖未發(fā)酵，因分解含氮物質(zhì)，生成胺及氨，培養(yǎng)基變堿，指示劑變?yōu)樗{(lán)色。(4)應(yīng)用：主要用于梭菌、鏈球菌和丙酸桿菌的鑒定。

五、抑菌試驗(yàn)

1．Optochin敏感試驗(yàn)

(1)原理：Optochin(奧普托欣)是鹽酸乙基氫化羥基奎寧的商品名。對肺炎鏈球菌有特異抑制作用，其作用機(jī)制可能是干擾葉酸生物合成作用，而對其它鏈球菌則無此作用。

(2)方法：用棉拭子將待檢菌的肉湯培養(yǎng)物均勻涂布于血瓊脂平板上，貼上一張含5μg奧普托欣紙片，置燭缸或二氧化碳孵箱，35℃ 孵育18~24h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：抑菌圈直徑大于14mm為敏感，小于或等于 14mm為陰性。(4)應(yīng)用：主要用于肺炎鏈球菌（敏感）與其它鏈球菌（耐藥）的鑒別。2．桿菌肽敏感試驗(yàn)

(1)原理：A群鏈球菌對桿菌肽幾乎是100%敏感，而其它群鏈球菌對桿菌肽通常耐藥。故此試驗(yàn)可對鏈球菌進(jìn)行鑒別。

(2)方法：用棉拭子將待檢菌的肉湯培養(yǎng)物均勻涂布于血瓊脂平板上，稍干后貼一張含0.04U的桿菌肽紙片，置35℃ 孵育18~24h，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：抑菌圈直徑大于10mm為敏感，小于10mm為耐藥。(4)應(yīng)用：主要用于A群與非A群鏈球菌的鑒別。從臨床分離的菌株中有5%~15%非 A群鏈球菌也對桿菌肽敏感，如6%的B群鏈球菌、7.5%的C群鏈球菌和G群鏈球菌等。3．新生霉素敏感試驗(yàn)

(1)原理：金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌可被低濃度新生霉素所抑制，表現(xiàn)為敏感，而腐生葡萄球菌則表現(xiàn)為耐藥。

(2)方法：用棉拭子將待檢菌菌懸液均勻涂布于M-H瓊脂平板或血平板上，在平板中央貼含5μg/片新生霉素診斷紙片一張，置35℃孵育16~18h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：抑菌圈直徑大于16mm為敏感，小于或等于16mm為耐藥。(4)應(yīng)用：主要用于葡萄球菌某些種的鑒定。4．O/129試驗(yàn)

(1)原理：O/129（2，4二氨基-6，7-二異丙基喋啶）能抑制弧菌屬、發(fā)光桿菌屬和鄰單胞菌屬細(xì)菌生長，而氣單胞菌屬和假單胞菌屬細(xì)菌則耐藥。

(2)方法：用棉拭子將待檢菌菌懸液均勻涂布于堿性瓊脂平板上，將10μg/片及150μg/片的O/129診斷紙片貼于平板上，置35℃孵育18~24h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：出現(xiàn)抑菌圈者表示敏感，無抑菌圈者為耐藥。

(4)應(yīng)用：主要用于弧菌屬、鄰單胞菌屬與氣單胞菌屬的鑒別，弧菌屬和鄰單胞菌屬菌為敏感，氣單胞菌屬菌為耐藥。其它菌屬有發(fā)光桿菌屬為敏感，假單胞菌屬為耐藥。5．氰化鉀試驗(yàn)

(1)原理：氰化鉀可抑制某些細(xì)菌的呼吸酶系統(tǒng)。細(xì)胞色素、細(xì)胞色素氧化酶、過氧化氫酶和過氧化物酶均以鐵卟啉作為輔基，氰化鉀與鐵卟啉結(jié)合，使這些酶失去活性，使細(xì)菌生長受到抑制。(2)方法：將待檢菌接種于氰化鉀培養(yǎng)基中，同時(shí)接種一支不含氰化鉀的對照培養(yǎng)基，置35℃孵育24~48h，觀察結(jié)果。

(3)結(jié)果：細(xì)菌在氰化鉀培養(yǎng)基中生長的（不受抑制）為陽性，不生長（抑制）為陰性。(4)應(yīng)用：腸桿菌科中的沙門菌屬、志賀菌屬和埃希菌屬細(xì)菌的生長受到抑制，而其它各菌屬的細(xì)菌均可生長。

六、其它試驗(yàn)

1．克氏雙糖鐵或三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基試驗(yàn)

(1)原理：克氏雙糖鐵(KIA)或三糖鐵瓊脂(TSI)培養(yǎng)基制成高層和短的斜面，其中葡萄糖含量僅為乳糖或蔗糖的十分之一，若細(xì)菌只分解葡萄糖而不分解乳糖和蔗糖，分解葡萄糖產(chǎn)酸使pH降低，因此斜面和底層均先呈黃色，但因葡萄糖量較少，所生成的少量酸可因接觸空氣而氧化，并因細(xì)菌生長繁殖利用含氮物質(zhì)生成堿性化合物，使斜面部分又變成紅色；底層由于處于缺氧狀態(tài)，細(xì)菌分解葡萄糖所生成的酸類一時(shí)不被氧化而仍保持黃色。細(xì)菌分解葡萄糖、乳糖或蔗糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，使斜面與底層均呈黃色，且有氣泡。細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫時(shí)與培養(yǎng)基中的硫酸亞鐵作用，形成黑色的硫化鐵。

(2)方法：用接種針挑取待檢菌的菌落，先穿刺接種到KIA或TSI深層，距管底3~5mm為止，再從原路退回，在斜面上自下而上劃線，置35℃孵 育18~24h，觀察結(jié)果。(3)結(jié)果：常見的KIA反應(yīng)有如下幾種： ①斜面堿性/底層堿性：不發(fā)酵碳水化合物，系不發(fā)酵菌的特征。如銅綠假單胞菌。②斜面堿性/底層酸性：葡萄糖發(fā)酵、乳糖（和TSI中的蔗糖）不發(fā)酵，是不發(fā)酵乳糖菌的特征，如志賀菌。③斜面堿性/底層酸性（黑色）：葡萄糖發(fā)酵、乳糖不發(fā)酵并產(chǎn)生硫化氫，是產(chǎn)生硫化氫不發(fā)酵乳糖菌的特征。如沙門菌、亞利桑那菌、枸櫞酸桿菌和變形桿菌等。④斜面酸性/底層酸性：葡萄糖和乳糖（和TSI中的蔗糖）發(fā)酵，是發(fā)酵乳糖的大腸菌群的特征，如大腸埃希菌、克雷伯菌屬和腸桿菌屬。

(4)應(yīng)用：鑒別腸道桿菌用。KIA或TSI對初分離出的、可疑為革蘭陰性桿菌鑒定特別有用。其反應(yīng)模式是許多桿菌鑒定表的組成部分，也可作為觀察其他培養(yǎng)基反應(yīng)的有價(jià)值的質(zhì)控依據(jù)。

2．氫氧化鉀拉絲試驗(yàn)

(1)原理：革蘭陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁在稀堿溶液中易于破裂，釋放出未斷裂的DNA螺旋，使氫氧化鉀菌懸液呈現(xiàn)粘性，可用接種環(huán)攪拌后拉出粘絲來，而革蘭陽性細(xì)菌在稀堿溶液中沒有上述變化。

(2)方法：取1滴40g/L氫氧化鉀水溶液（應(yīng)新鮮配制）于潔凈玻片上，取新鮮菌落少許，與氫氧化鉀水溶液攪拌混勻，并每隔幾秒鐘上提接種環(huán)，觀察能否拉出粘絲。(3)結(jié)果：用接種環(huán)拉出粘絲者為陽性，仍為混懸液者為陰性。

(4)應(yīng)用：主要用于革蘭陰性菌與易脫色的革蘭陽性菌的鑒別。大多數(shù)革蘭陰性菌于5~10s內(nèi)出現(xiàn)陽性反應(yīng)，有的則需30~45s，假單胞菌、無色桿菌、黃桿菌、產(chǎn)堿桿菌、莫拉菌等大多數(shù)在10s內(nèi)呈陽性，不動(dòng)桿菌、莫拉菌反應(yīng)較慢，大多數(shù)菌株在60s內(nèi)出現(xiàn)陽性，而革蘭陽性菌在60s以后仍為陰性。

第四篇：實(shí)驗(yàn)五 細(xì)菌的生理生化

實(shí)驗(yàn)五 細(xì)菌的生理、生化試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

初步學(xué)會(huì)細(xì)菌生理、生化試驗(yàn)的操作、結(jié)果分析。

儀器材料：

蛋白胨水培養(yǎng)基、糖發(fā)酵培養(yǎng)基、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基、醋酸鉛蛋白胨水培養(yǎng)基、檸檬酸鹽瓊脂斜面培養(yǎng)基等；甲基紅（MR）試劑、維-培（V-P）試劑、靛基質(zhì)試劑等；大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌、沙門氏菌的24h純培養(yǎng)物等。

微生物生化反應(yīng)是指用化學(xué)反應(yīng)來測定微生物的代謝產(chǎn)物，生化反應(yīng)常用來鑒別一些在形態(tài)和其它方面不易區(qū)別的微生物。因此微生物生化反應(yīng)是微生物分類鑒定中的重要依據(jù)之一,微生物檢驗(yàn)中常用的生化反應(yīng)介紹如下：

一、糖酵解試驗(yàn)

不同微生物分解利用糖類的能力有很大差異，或能利用或不能利用，能利用者，或產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣?？捎弥甘緞┘鞍l(fā)酵管檢驗(yàn)。

試驗(yàn)方法：以無菌操作，用接種針或環(huán)移取純培養(yǎng)物少許，接種于發(fā)酵液體培養(yǎng)基管中，若為半固體培養(yǎng)基，則用接種針作穿刺接種。接種后，置36±1.0°C培養(yǎng)，每天觀察結(jié)果，檢視培養(yǎng)基顏色有無改變（產(chǎn)酸），小倒管中有無氣泡，微小氣泡亦為產(chǎn)氣陽性，若為半固體培養(yǎng)基，則檢視沿穿刺線和管壁及管底有無微小氣泡，有時(shí)還可看出接種菌有無動(dòng)力，若有動(dòng)力，培養(yǎng)物可呈彌散生長。本試驗(yàn)主要是檢查細(xì)菌對各種糖、醇和糖苷等的發(fā)酵能力，從而進(jìn)行各種細(xì)菌的鑒別，因而每次試驗(yàn)，常需同時(shí)接種多管。一般常用的指示劑為酚紅、溴甲酚紫，溴百里藍(lán)和An-drade指示劑。

二、淀粉水解試驗(yàn)

某些細(xì)菌可以產(chǎn)生分解淀粉的酶，把淀粉水解為麥芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再變藍(lán)色。

試驗(yàn)方法：以18~24h的純培養(yǎng)物，涂布接種于淀粉瓊脂斜面或平板（一個(gè)平板可分區(qū)接種，試驗(yàn)數(shù)種培養(yǎng)物）或直接移種于淀粉肉湯中，于36±1°C培養(yǎng)24~48h，或于20℃培養(yǎng)5天。然后將碘試劑直接滴浸于培養(yǎng)表面，若為液體培養(yǎng)物，則加數(shù)滴碘試劑于試管中。立即檢視結(jié)果，陽性反應(yīng)（淀粉被分解）為瓊脂培養(yǎng)基呈深藍(lán)色、菌落或培養(yǎng)物周圍出現(xiàn)無色透明環(huán)、或肉湯顏色無變化。陰性反應(yīng)則無透明環(huán)或肉湯呈深藍(lán)色。

淀粉水解系逐步進(jìn)行的過程，因而試驗(yàn)結(jié)果與菌種產(chǎn)生淀粉酶的能力、培養(yǎng)時(shí)間，培養(yǎng)基含有淀粉量和pH等均有一定關(guān)系。培養(yǎng)基pH必須為中性或微酸性，以pH7.2最適。淀粉瓊脂平板不宜保存于冰箱，因而以臨用時(shí)制備為妥。

三：V-P試驗(yàn)

某些細(xì)菌在葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸縮合，脫羧成乙酰甲基甲醇，后者在強(qiáng)堿環(huán)境下，被空氣中的氧氧化為二乙酰，二乙酰與蛋白胨中的胍基生成紅色化合物，稱V－P（+）反應(yīng)。

試驗(yàn)方法：

１）O’Meara氏法：將試驗(yàn)菌接種于通用培養(yǎng)基，于36±1°C培養(yǎng)48h，培養(yǎng)液1ml加O’Meara試劑（加有0.3%肌酸Creatine或肌酸酐Creatinine的40%氫氧化鈉水溶液）1ml，搖動(dòng)試管1~2min，靜置于室溫或36±1°C恒溫箱，若4h內(nèi)不呈現(xiàn)伊紅，即判定為陰性。亦有主張?jiān)?8~50°C水浴放置2h后判定結(jié)果者。

２）Barritt氏法：將試驗(yàn)菌接種于通用培養(yǎng)基，于36±1°C培養(yǎng)4天、培養(yǎng)液2.5ml先加入a萘酚（2-na-phthol）純酒精溶液0.6ml,再加40%氫氧化鉀水溶液0.2ml，搖動(dòng)2~5min，陽性菌常立即呈現(xiàn)紅色，若無紅色出現(xiàn)，靜置于室溫或36±1°C恒溫箱，如2h內(nèi)仍不顯現(xiàn)紅色、可判定為陰性。

３）快速法：將0.5%肌酸溶液2滴放于小試管中、挑取產(chǎn)酸反應(yīng)的三糖鐵瓊脂斜面培養(yǎng)物一接種環(huán)，乳化接種于其中，加入5%α-萘酚3滴，40%氫氧化鈉水溶液2滴，振動(dòng)后放置5min，判定結(jié)果。不產(chǎn)酸的培養(yǎng)物不能使用。

本試驗(yàn)一般用于腸桿菌科各菌屬的鑒別。在用于芽胞桿菌和葡萄球菌等其它細(xì)菌時(shí)，通用培養(yǎng)基中的磷酸鹽可阻礙乙酰甲基醇的產(chǎn)生，故應(yīng)省去或以氯化鈉代替。

四：甲基紅（Methyl Red）試驗(yàn)

腸桿菌科各菌屬都能發(fā)酵葡萄糖，在分解葡萄糖過程中產(chǎn)生丙酮酸，進(jìn)一步分解中，由于糖代謝的途徑不同，可產(chǎn)生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性產(chǎn)物，可使培養(yǎng)基PH值下降至pH4.5以下，使甲基紅指示劑變紅。

試驗(yàn)方法：挑取新的待試純培養(yǎng)物少許，接種于通用培養(yǎng)基，培養(yǎng)于36±1°C或30°C（以30°C較好）3~5天，從第二天起，每日取培養(yǎng)液1ml，加甲基紅指示劑1~2滴，陽性呈鮮紅色，弱陽性呈淡紅色，陰性為黃色。迄至發(fā)現(xiàn)陽性或至第5天仍為陰性、即可判定結(jié)果。

甲基紅為酸性指示劑，pH范圍為4.4~6.0，其pK值為5.0。故在pH5.0以下，隨酸度而增強(qiáng)黃色，在pH5.0以上，則隨堿度而增強(qiáng)黃色，在pH5.0或上下接近時(shí)，可能變色不夠明顯，此時(shí)應(yīng)延長培養(yǎng)時(shí)間，重復(fù)試驗(yàn)。

五：靛基質(zhì)（Imdole）試驗(yàn)

某些細(xì)菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用顯色反應(yīng)表

現(xiàn)出來。吲哚與對二甲基氨基苯醛結(jié)合，形成玫瑰吲哚，為紅色化合物。

試驗(yàn)方法：將待試純培養(yǎng)物小量接種于試驗(yàn)培養(yǎng)基管，于36±1°C培養(yǎng)24h時(shí)后，取約2ml培養(yǎng)液，加入Kovacs氏試劑2~3滴，輕搖試管，呈紅色為陽性，或先加少量乙醚或二甲苯，搖動(dòng)試管以提取和濃縮靛基質(zhì)，待其浮于培養(yǎng)液表面后，再沿試管壁徐緩加入Kovacs氏試劑數(shù)滴，在接觸面呈紅色，即為陽性。

實(shí)驗(yàn)證明靛基質(zhì)試劑可與17種不的靛基質(zhì)化合物作用而產(chǎn)生陽性反應(yīng)，若先用二甲苯或乙醚等進(jìn)行提取，再加試劑，則只有靛基質(zhì)或5-甲基靛基質(zhì)在溶劑中呈現(xiàn)紅色，因而結(jié)果更為可靠。

六、硝酸鹽（Nitrate）還原試驗(yàn)

有些細(xì)菌具有還原硝酸鹽的能力，可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽、氨或氮?dú)獾?。亞硝酸鹽的存在可用硝酸試劑檢驗(yàn)。

試驗(yàn)方法：臨試前將試劑的A（磺胺酸冰醋酸溶液）和B（α－萘胺乙醇溶液）試液各0.2ml等量混合、取混合試劑約0.1ml、加于液體培養(yǎng)物或瓊脂斜面培養(yǎng)物表面，立即或于10min內(nèi)呈現(xiàn)紅色即為試驗(yàn)陽性，若無紅色出現(xiàn)則為陰性。

用α-萘胺進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，陽性紅色消退很快、故加入后應(yīng)立即判定結(jié)果。進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)必須有未接種的培養(yǎng)基管作為陰性對照。α-萘胺具有致癌性、故使用時(shí)應(yīng)加注意。

七、明膠（Gelatin）液化試驗(yàn)

有些細(xì)菌具有明膠酶（亦稱類蛋白水解酶），能將明膠先水解為多肽，又進(jìn)一步水解為氨基酸，失去凝膠性質(zhì)而液化。

試驗(yàn)方法：挑取18~24h待試菌培養(yǎng)物，以較大量穿刺接種于明膠高層約2/3深度或點(diǎn)種于平板培養(yǎng)基。于20~22℃培養(yǎng)7~14天。明膠高層亦可培養(yǎng)于36±1℃。每天觀察結(jié)果，若因培養(yǎng)溫度高而使明膠本身液化時(shí)應(yīng)不加搖動(dòng)、靜置冰箱中待其凝固后、再觀察其是否被細(xì)菌液化，如確被液化，即為試驗(yàn)陽性。平板試驗(yàn)結(jié)果的觀察為在培養(yǎng)基平板點(diǎn)種的菌落上滴加試劑，若為陽性，10~20min后，菌落周圍應(yīng)出現(xiàn)清晰帶環(huán)。否則為陰性。

八、尿素酶（Urease）試驗(yàn)

有些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶，將尿素分解、產(chǎn)生2個(gè)分子的氨，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，酚紅呈粉紅色。尿素酶不是誘導(dǎo)酶，因?yàn)椴徽摰孜锬蛩厥欠翊嬖冢?xì)菌均能合成此酶。其活性最適pH為7.0。

試驗(yàn)方法：挑取18~24h待試菌培養(yǎng)物大量接種于液體培養(yǎng)基管中，搖均，于36±1℃培養(yǎng)10，60和120min，分別觀察結(jié)果?；蛲坎疾⒋┐探臃N于瓊脂斜面，不要到達(dá)底部，留底部作變色對照。培養(yǎng)2，4和24h分別觀察結(jié)果，如陰性應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至4天，作最終判定，變?yōu)榉奂t色為陽性。

九、氧化酶（Oxidase）試驗(yàn)

氧化酶亦即細(xì)胞色素氧化酶，為細(xì)胞色素呼吸酶系統(tǒng)的終末呼吸酶，氧化酶先使細(xì)胞色素C氧化，然后此氧化型細(xì)胞色素C再使對苯二胺氧化，產(chǎn)生顏色反應(yīng)。

試驗(yàn)方法：在瓊脂斜面培養(yǎng)物上或血瓊脂平板菌落上滴加試劑1~2滴，陽性者Kovacs氏試劑呈粉紅色~深紫色，Ewing氏改進(jìn)試劑呈藍(lán)色。陰性者無顏色改變。應(yīng)在數(shù)分鐘內(nèi)判定試驗(yàn)結(jié)果。

十、硫化氫（H2S）試驗(yàn)

有些細(xì)菌可分解培養(yǎng)基中含硫氨基酸或含硫化合物，而產(chǎn)生硫化氫氣體，硫化氫遇鉛鹽或低鐵鹽可生成黑色沉淀物。

試驗(yàn)方法：在含有硫代硫酸鈉等指示劑的培養(yǎng)基中，沿管壁穿刺接種，于36±1℃培養(yǎng)24~28h，培養(yǎng)基呈黑色為陽性。陰性應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至6天。也可用醋酸鉛紙條法：將待試菌接種于一般營養(yǎng)肉湯，再將醋酸鉛紙條懸掛于培養(yǎng)基上空，以不會(huì)被濺濕為適度；用管塞壓住置36±1℃培養(yǎng)1~6天。紙條變黑為陽性。

十一、三糖鐵（TSI）瓊脂試驗(yàn)

試驗(yàn)方法：以接種針挑取待試菌可疑菌落或純培養(yǎng)物，穿刺接種并涂布于斜面，置36±1℃培養(yǎng)18~24h，觀察結(jié)果。

本試驗(yàn)可同時(shí)觀察乳糖和蔗糖發(fā)酵產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣（變黃）；產(chǎn)生硫化氫（變黑）。葡萄糖被分解產(chǎn)酸可使斜面先變黃，但因量少，生成的少量酸，因接觸空氣而氧化，加之細(xì)菌利用培養(yǎng)基中含氮物質(zhì)，生成堿性產(chǎn)物，故使斜面后來又變紅，底部由于是在厭氧狀態(tài)下，酸類不被氧化，所以仍保持黃色。

十二、硫化氫-靛基質(zhì)-動(dòng)力（SIM）瓊脂試驗(yàn)

試驗(yàn)方法：以接種針挑取菌落或純養(yǎng)物穿刺接種約1/2深度，置36±1℃培養(yǎng)18~24h，觀察結(jié)果。培養(yǎng)物呈現(xiàn)黑色為硫化氫陽性，混濁或沿穿刺線向外生長為有動(dòng)力，然后加Kovacs氏試劑數(shù)滴于培養(yǎng)表面，靜置10min，若試劑呈紅色為靛基質(zhì)陽性。培養(yǎng)基未接種的下部，可作為對照。

本試驗(yàn)用于腸桿菌科細(xì)菌初步生化篩選，與三糖鐵瓊脂等聯(lián)合使用可顯著提高篩選功效。

第五篇：考研資料重要會(huì)議總結(jié)

.黨的一大：

1921年，中國共產(chǎn)黨在上海召開，黨的綱領(lǐng)是以無產(chǎn)階級革命軍隊(duì)推翻資產(chǎn)階級，聯(lián)合共產(chǎn)國際。

規(guī)定黨員條件和黨的紀(jì)律。

黨的中心任務(wù)是開產(chǎn)工人運(yùn)動(dòng)。宣告了中國共產(chǎn)黨的成立。

2.黨的二大：提出反帝反封建的民主革命綱領(lǐng)

1922年，上海召開，正確分析了中國的社會(huì)性質(zhì)，中國革命的性質(zhì)是民主主義革命、對象是帝國主義和封建軍閥、動(dòng)力和前途，指出了中國革命要分兩步走，在中國近代史上第一次提出了徹底的反帝反封建的

黨的最高綱領(lǐng)是實(shí)現(xiàn)社會(huì)主義、共產(chǎn)主義；現(xiàn)階段的革命綱領(lǐng)即最低綱領(lǐng)是消除內(nèi)亂，打倒軍閥，建設(shè)國內(nèi)和平，推翻國際帝國主義壓迫，達(dá)到中華民族的完全獨(dú)立，統(tǒng)一中國為真正的民主共和國。提出了群眾路線。

3.黨的三大：大革命洪流中召開的黨的代表大會(huì)

1923年，黨的三大召開，決定共產(chǎn)黨員以個(gè)人身份加入國民黨，實(shí)現(xiàn)國共合作，建立革命統(tǒng)一戰(zhàn)線，同時(shí)保持共產(chǎn)黨在政治、思想、組織上的獨(dú)立性。

4.國民黨一大 1924年召開，確立聯(lián)俄、聯(lián)共、扶助農(nóng)工的三大政策，形成了新三民主義，標(biāo)志著第一次國共合作正式形成。改組后的國民黨變成工人階級，農(nóng)民階級，小資產(chǎn)階級，民族資產(chǎn)階級的革命聯(lián)盟。

5.黨的四大：大革命洪流中召開的黨的代表大會(huì)（課本未提及）

1925年四大召開，提出了無產(chǎn)階級在民主革命中的領(lǐng)導(dǎo)權(quán)問題和工農(nóng)聯(lián)盟問題。四大的缺點(diǎn)和不足是：雖然提出了領(lǐng)導(dǎo)權(quán)的問題，但對于如何爭取領(lǐng)導(dǎo)權(quán)，缺乏具體明確的方針，只講對群眾運(yùn)動(dòng)的領(lǐng)導(dǎo)權(quán)，而完全忽視了對政權(quán)和武裝力量的領(lǐng)導(dǎo)權(quán)。

提出了農(nóng)民是革命同盟軍的問題，但沒有提出土地革命這一解決農(nóng)民問題的根本思想。

6.黨的五大

1927年五大召開，大大雖然批判了陳獨(dú)秀的右傾錯(cuò)誤，強(qiáng)調(diào)了通資產(chǎn)階級爭奪領(lǐng)導(dǎo)權(quán)的重要性，均未做出切合實(shí)際的回答，反而對武漢公民政府抱有幻想。五大實(shí)際上并未解決挽救時(shí)局的問題。

7.八七會(huì)議：政權(quán)是由槍桿子中取得的

1927年8月7日，漢口召開。選出中央臨時(shí)政治局，瞿秋白，李維漢，蘇兆征為政治局常委。

會(huì)議堅(jiān)決糾正了以陳獨(dú)秀為代表的右傾投降主義。

確定實(shí)行土地革命和武裝反抗國民黨反動(dòng)派的總方針，并把發(fā)動(dòng)農(nóng)民舉行秋收起義作為當(dāng)前黨的主要任務(wù)，解決了要不要繼續(xù)革命和革誰的命的問題。中國革命從此開始由國民革命失敗到土地革命戰(zhàn)爭星期的歷史轉(zhuǎn)折。

8.黨的六大：唯一一次在國外召開的黨的代表大會(huì)

1928年六大在莫斯科召開，仍舊把城市工作放在全黨工作的中心，這對中國革命的發(fā)展起了消極的影響。

9.三灣改編

1927年9月29日，這是中國工農(nóng)紅軍政治工作的開端，確立了黨對軍隊(duì)的絕對領(lǐng)導(dǎo)，為從組織上，政治上和思想上建設(shè)一支全新型的人民軍隊(duì)奠定了牢固的基礎(chǔ)。

10.古田會(huì)議：用無產(chǎn)階級思想進(jìn)行軍隊(duì)和和黨的建設(shè)。

11.遵義會(huì)議：第一次將馬克思列寧主義原理與中國實(shí)踐結(jié)合（探索中國社會(huì)主義建設(shè)道路是第二次將馬克思列寧主義原理與中國實(shí)踐結(jié)合P119）

1935年1月，會(huì)議集中全力解決當(dāng)時(shí)最緊迫的軍事問題和組織問題。

結(jié)束了王明“左”傾教條主義在黨中央的統(tǒng)治，事實(shí)上確立了以毛澤東為核心的新的中央的正確領(lǐng)導(dǎo)。

挽救了紅軍，挽救了黨，挽救了中國革命，是中國共產(chǎn)黨歷史上一個(gè)生死攸關(guān)的轉(zhuǎn)折點(diǎn)。

12.瓦窯堡會(huì)議：中國共產(chǎn)黨是無產(chǎn)階級的先鋒隊(duì)，又是全民族的先鋒隊(duì)。

1935年12月，確定了抗日民族統(tǒng)一戰(zhàn)線的策略方針，同時(shí)堅(jiān)持無產(chǎn)階級在統(tǒng)一戰(zhàn)線中的領(lǐng)導(dǎo)權(quán)。

批評黨內(nèi)存在的左傾冒險(xiǎn)主義和關(guān)門主義傾向。圓滿解決了遵義會(huì)議沒有解決的黨的政治路線問題。

13.洛川會(huì)議：為爭取抗日戰(zhàn)爭的勝利奠定了政治思想基礎(chǔ)

1937年8月，中共中央政治局在陜北洛川縣召開擴(kuò)大會(huì)議。會(huì)議通過了《關(guān)于目前形勢與黨的任務(wù)的決定》確定全面抗戰(zhàn)路線。

會(huì)議通過《抗日救國十大綱領(lǐng)》是全面抗戰(zhàn)路線的具體體現(xiàn)。會(huì)議認(rèn)為必須堅(jiān)持無產(chǎn)階級在抗戰(zhàn)中的領(lǐng)導(dǎo)權(quán)，在敵人后方放手發(fā)動(dòng)獨(dú)立自主的游擊戰(zhàn)，在國民黨統(tǒng)治區(qū)放手發(fā)動(dòng)抗日的群眾運(yùn)動(dòng)。

14.中共六屆六中全會(huì)：我們的原則是黨指揮槍，而決不允許槍指揮黨

1938年9月至11月，毛澤東提出“馬克思主義中國化”。會(huì)議基本糾正王明右傾錯(cuò)誤。

15.國民參政會(huì)

1944年9月15日，林伯渠根據(jù)中共中央的指示正式提出建立民主聯(lián)合政府的主張

16.黨的六屆七中全會(huì)

1945年4月，通過《關(guān)于若干歷史問題的研究》是整風(fēng)運(yùn)動(dòng)的重要成果，也是正逢運(yùn)動(dòng)結(jié)束的標(biāo)志。

17.黨的七大：確立毛澤東思想在全黨的指導(dǎo)地位

1945年七大在延安召開，大會(huì)確立毛澤東思想為全黨的指導(dǎo)思想。

大會(huì)把黨在長期奮斗中形成的優(yōu)良傳統(tǒng)和作風(fēng)概括為三大作風(fēng)：即理論聯(lián)系實(shí)際，密切聯(lián)系群眾，批評與自我批評。

18.黨的七屆二中全會(huì)

1949年3月，確立迅速奪取民主革命勝利的方針。

規(guī)定了全國勝利后在政治、經(jīng)濟(jì)（新民主主義的五種經(jīng)濟(jì)成分）、外交的基本政策。黨的工作重心由農(nóng)村轉(zhuǎn)向城市。毛澤東第一次提出了執(zhí)政黨的建設(shè)問題：“兩個(gè)務(wù)必”的思想——要求全黨在革命勝利后務(wù)必要保持謙虛、謹(jǐn)慎、不驕、不躁的作風(fēng)，務(wù)必要保持艱苦奮斗的作風(fēng)，警惕資產(chǎn)階級“糖衣炮彈”的侵蝕和攻擊。

19.中國人民政治協(xié)商會(huì)議一屆會(huì)議

1949年9月21日至30日，會(huì)議通過《中國人民政治協(xié)商會(huì)議共同綱領(lǐng)》，規(guī)定了國體和政體、經(jīng)濟(jì)建設(shè)、民族政策、外交方面的問題。

《共同綱領(lǐng)》起著臨時(shí)憲法的作用。政協(xié)一屆全會(huì)的召開標(biāo)志著中共領(lǐng)導(dǎo)的多黨合作制度的形成，宣告中華人民共和國的成立。

20.全國人大一屆一次會(huì)議

1954年，通過了《中華人民共和國憲法》，是第一部社會(huì)主義性質(zhì)的憲法。

21.黨的八大：探索建設(shè)社會(huì)主義道路的良好開端

1956年，我國無產(chǎn)階級同資產(chǎn)階級之間的矛盾已經(jīng)基本解決，國內(nèi)的主要矛盾，已經(jīng)是人民對于建立先進(jìn)的工業(yè)國的要求同落后的農(nóng)業(yè)國的現(xiàn)實(shí)之間的矛盾，已經(jīng)是人民對于經(jīng)濟(jì)文化迅速發(fā)展的需要同當(dāng)前經(jīng)濟(jì)文化不能滿足人民需要的狀況之間的矛盾（1957年中共八屆三中全會(huì)改變八大關(guān)于社會(huì)主要矛盾的正確判斷，認(rèn)為主要矛盾是無產(chǎn)階級和資產(chǎn)階級，社會(huì)主義和資本主義的矛盾）。

黨和人民當(dāng)前的主要任務(wù)，就是要集中力量解決這個(gè)矛盾，把我國盡快地從落后的農(nóng)業(yè)國變成先進(jìn)的工業(yè)國（另一種說法：社會(huì)主義的根本任務(wù)是發(fā)展生產(chǎn)力，實(shí)現(xiàn)工業(yè)化，逐步滿足人民日益增長的需要）。

經(jīng)濟(jì)建設(shè)的指導(dǎo)方針：既反保守，又反冒進(jìn)，堅(jiān)持在綜合平衡中穩(wěn)步前進(jìn)（陳云在八大的發(fā)言中提出了我國社會(huì)主義經(jīng)濟(jì)“三個(gè)主體，三個(gè)補(bǔ)充”的思想）政治建設(shè)上：有法可依，有法必依。

黨的建設(shè)：堅(jiān)持理論聯(lián)系實(shí)際，實(shí)事求是，堅(jiān)持民主集中制和集體領(lǐng)導(dǎo)制；加強(qiáng)監(jiān)督，擴(kuò)大民主。

22.黨的十一屆三中全會(huì)：馬克思同中國實(shí)際相結(jié)合第二次飛躍的起點(diǎn)

1978年12月，重新確立馬克思主義的思想路線，政治路線和組織路線，改革開放的序幕由此拉開。

科學(xué)評價(jià)了毛澤東和毛澤東思想，徹底否定了“以階級斗爭為綱”的理論。重新確認(rèn)實(shí)事求是的思想路線。

把工作重心轉(zhuǎn)向經(jīng)濟(jì)建設(shè)，確立社會(huì)主義初級階段基本路線。形成黨的二代領(lǐng)導(dǎo)集體，創(chuàng)立鄧小平理論。

23.黨的十一屆四中全會(huì)

《關(guān)于加快農(nóng)業(yè)發(fā)展若干問題的決定》確認(rèn)“統(tǒng)分結(jié)合”的家庭聯(lián)產(chǎn)承包責(zé)任制?！罢绾弦?的人民公社制度解體，成立鄉(xiāng)鎮(zhèn)基層政權(quán)，將村民委員會(huì)作為村民自治組織。

24.黨的十一屆六中全會(huì)：黨和國家在指導(dǎo)思想上撥亂反正的完成 通過《關(guān)于建國以來黨的若干問題的決議》，正確評價(jià)文革，分析原因。實(shí)事求是評價(jià)毛澤東的歷史地位。

正確評價(jià)毛澤東思想（活的靈魂：實(shí)事求是，群眾路線，獨(dú)立自主）。

25.黨的十二大

1982年十二大召開，鄧小平在這次大會(huì)上第一次提出了“建設(shè)有中國特色的社會(huì)主義”的嶄新命題。

到20 世紀(jì)末，GDP翻兩番，人民物質(zhì)文化生活達(dá)到小康水平。

26.黨的十二屆三中全會(huì)

1984年10月在北京召開，通過了《關(guān)于經(jīng)濟(jì)體制改革的決定》，確認(rèn)我國社會(huì)主義經(jīng)濟(jì)是公有制基礎(chǔ)上的有計(jì)劃的商品經(jīng)濟(jì)。

在《決定》精神的指導(dǎo)下，以城市為重點(diǎn)的整個(gè)經(jīng)濟(jì)體制改革從1985年起全面展開。形成以公有制為主體，多種經(jīng)濟(jì)成分并存的局面。

27.中國共產(chǎn)黨十二屆六中全會(huì)

1986年9月28日在北京舉行。會(huì)議通過了《中共中央關(guān)于社會(huì)主義精神文明建設(shè)指導(dǎo)方針的決議》，闡明了精神文明建設(shè)的任務(wù)，培養(yǎng)有理想，有道德，有文化，有紀(jì)律的公民。

28.1987年十三大召開，十三大第一次系統(tǒng)地闡明了關(guān)于社會(huì)主義初級階段的理論，明確概括了黨在社會(huì)主義初級階段“一個(gè)中心，兩個(gè)基本點(diǎn)”的基本路線。

提出經(jīng)濟(jì)體制改革和政治體制改革的任務(wù)（建立有計(jì)劃的商品經(jīng)濟(jì)和高度民主、法制完備、富有效率的政治體制）。

大會(huì)還制定了社會(huì)主義現(xiàn)代化建設(shè)“三步走” 的戰(zhàn)略部署。

29.黨的十四大：鄧小平南方談話，為十四大召開作了理論準(zhǔn)備 確立鄧小平建設(shè)有中國特色社會(huì)主義理論在全黨的指導(dǎo)地位。明確經(jīng)濟(jì)體制改革的目標(biāo)是建立社會(huì)主義市場經(jīng)濟(jì)體制。

30.黨的十五大：高舉鄧小平理論偉大旗幟

1997年黨的十五大召開，在大會(huì)通過的黨章中，把鄧小平理論作為黨的指導(dǎo)思想，并寫入修改后的黨章。

提出黨在社會(huì)主義初級階段的基本綱領(lǐng)。大會(huì)指出：公有制為主體，多種所有制經(jīng)濟(jì)共同發(fā)展，是社會(huì)主義初級階段的基本經(jīng)濟(jì)制度。依法治國是當(dāng)領(lǐng)導(dǎo)人民治理國家的基本方略。選舉了以江澤民為首的領(lǐng)導(dǎo)機(jī)構(gòu)。

31.黨的十六大：與時(shí)俱進(jìn)的大會(huì)

2002年黨的十六大召開，把“三個(gè)代表”確立為全黨的指導(dǎo)思想。并實(shí)現(xiàn)了我們黨承前啟后，完成整體性新老交替的任務(wù)。

明確提出“全面建設(shè)小康社會(huì)”，加快推進(jìn)社會(huì)主義現(xiàn)代化，為開創(chuàng)中國特色社會(huì)主義事業(yè)新局面而奮斗。

32.中國共產(chǎn)黨十六屆三中全會(huì)

以人為本，全面協(xié)調(diào)可持續(xù)的科學(xué)發(fā)展觀。

提出按照統(tǒng)籌城鄉(xiāng)發(fā)展、統(tǒng)籌區(qū)域發(fā)展、統(tǒng)籌經(jīng)濟(jì)社會(huì)發(fā)展、統(tǒng)籌人與自然和諧發(fā)展、統(tǒng)籌國內(nèi)發(fā)展和對外開放的要求。

33.中國共產(chǎn)黨十六屆五中全會(huì)：科學(xué)發(fā)展觀是推動(dòng)社會(huì)發(fā)展，加快現(xiàn)代化建設(shè)必須堅(jiān)持的指導(dǎo)思想

34.中國共產(chǎn)黨十六屆六中全會(huì)

《中共中央關(guān)于和諧社會(huì)若干問題的決定》指出：社會(huì)和諧是中國特色社會(huì)主義的本質(zhì)屬性（特征是民主法治，公平正義，誠信友愛，充滿活力，安東有序，人與自然和諧相處）。馬克思主義指導(dǎo)思想，中國特色社會(huì)主義共同理想，以愛國主義為核心的民族精神和以改革創(chuàng)新為核心的時(shí)代精神，社會(huì)主義榮辱觀，構(gòu)成社會(huì)主義核心價(jià)值體系的基本內(nèi)容。將“和諧”列入現(xiàn)代化建設(shè)的奮斗目標(biāo)。和諧社會(huì)的提出使中國特色社會(huì)主義事業(yè)發(fā)展為經(jīng)濟(jì)建設(shè)，政治建設(shè)，文化建設(shè)社會(huì)建設(shè)四位一體。

35.中共十七大

大會(huì)主題是：高舉中國特色社會(huì)主義偉大旗幟，以鄧小平理論和“三個(gè)代表”重要思想為指導(dǎo)，深入貫徹落實(shí)科學(xué)發(fā)展觀，繼續(xù)解放思想，堅(jiān)持改革開放，推動(dòng)科學(xué)發(fā)展，促進(jìn)社會(huì)和諧，為奪取全面建設(shè)小康社會(huì)新勝利而奮斗。

大會(huì)對我國社會(huì)主義經(jīng)濟(jì)建設(shè)，政治建設(shè)，文化建設(shè)，社會(huì)建設(shè)作了全面部署。將科學(xué)發(fā)展觀寫入黨章。