第一篇:系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者卵巢儲(chǔ)備功能研究
系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者卵巢儲(chǔ)備功能研究
[摘要] 目的 探?系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者卵巢儲(chǔ)備功能及月經(jīng)變化與臨床各個(gè)疾病指標(biāo)的相關(guān)性。方法 收集2015年11月~2016年9月就診于西安市第四軍醫(yī)大學(xué)附屬西京及唐都醫(yī)院風(fēng)濕免疫科SLE住院及門診患者40例(SLE組),詳細(xì)記錄入選者的基本資料(姓名、年齡、職業(yè)等)、血尿常規(guī)、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)及血清補(bǔ)體(C3、C4)、血沉(ESR)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、類風(fēng)濕因子(RF)、抗核抗體(ANA)譜、抗苗勒氏管激素(AMH)及月經(jīng)情況、孕產(chǎn)史。其中補(bǔ)體及免疫球蛋白的檢測采用免疫比濁法,ANA譜的檢測采用間接免疫熒光法,并用SLEDAI評(píng)分評(píng)估疾病活動(dòng)度。同時(shí)在唐都醫(yī)院生殖中心收集40例年齡匹配的女性健康者(健康組)進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果 SLE組AMH值明顯低于健康組(P 0.05)。此外,AMH與SLEDAI評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.338,P
[關(guān)鍵詞] 系統(tǒng)性紅斑狼瘡;卵巢儲(chǔ)備功能;抗苗勒氏管激素;月經(jīng)異常
[中圖分類號(hào)] R593.241 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210(2016)12(c)-0125-04
[Abstract] Objective To discuss the relationship between ovarian reserve function,menstrual changes and clinical parameters in patients with systemic lupus erythematosus(SLE).Methods The 40 SLE patients,who came from the Department of Rheumatology and Immunology of Xijing and Tangdu Hospital,the Fourth Military Medical University,from November 2015 to September 2016 were involved in this study(SLE group).The characteristics of SLE group patients were obtained,including patients' name,age,occupation,etc..Further more,the clinical parameters were detected and analyzed,involved routine blood and urine test,serum immunoglobulin(IgG,IgA,IgM),serum complement(C3,C4),erythrocyte sedimentation rate(ESR),C reactive protein(CRP),rheumatoid factor(RF),antinuclear antibody spectrum(ANA),anti-Müllerian hormone(AMH)and history of menstrual,gestation and pregnancy.The disease activity was evaluated by SLEDAI score.Meanwhile,40 age-matched healthy women were collected as healthy control goup.Results AMH of SLE goup patients was significantly lower than that of healthy control group(P 0.05).Furthermore,AMH was negatively correlated with SLEDAI score(r=-0.338,P
3討論
SLE是一種多系統(tǒng)損害的自身免疫病,可損害患者的皮膚、肺臟、腎臟、血液、關(guān)節(jié)等重要器官,好發(fā)于育齡期女性,臨床上發(fā)現(xiàn)很多SLE患者很早就出現(xiàn)月經(jīng)異常,因而推測本病對(duì)患者卵巢功能也有影響。臨床常用血清基礎(chǔ)卵泡刺激素(bFSH)、基礎(chǔ)雌二醇(E2)、黃體生成素(LH)、FSH/LH值、抑制素B(InhB)等來評(píng)價(jià)卵巢功能,但是這些激素易受下丘腦-垂體-卵巢(H-P-O)軸反饋調(diào)控,彼此相互影響,呈現(xiàn)周期性變化,不能單獨(dú)作為評(píng)估指標(biāo),也不能早期、準(zhǔn)確反映卵巢儲(chǔ)備功能的變化[3]。而AMH可以抑制原始卵泡的募集,降低其對(duì)FSH的反應(yīng)性[7],不受H-P-O軸的影響而變化,具有更好的穩(wěn)定性、敏感性和特異性,并已在生殖內(nèi)分泌有廣泛的應(yīng)用。
育齡期SLE女性患者卵巢儲(chǔ)備功能的損害一方面是由于疾病引起的免疫性卵巢炎[8];另一方面是治療藥物對(duì)卵巢儲(chǔ)備功能的損傷[9],如使用環(huán)磷酰胺藥物治療后AMH顯著降低,卵巢儲(chǔ)備功能受到損害[9-14]。本研究在排除藥物等混雜因素的條件下,發(fā)現(xiàn)SLE患者的AMH明顯低于健康組,這提示SLE疾病本身會(huì)造成患者卵巢儲(chǔ)備功能的下降。此外,ESR、SLEDAI評(píng)分越高則AMH越低,即病情活動(dòng)度與AMH呈負(fù)相關(guān),這一結(jié)果與Mok等[9-12,15-16]的研究結(jié)果一致。但?cLawrenz等[17-19]的研究結(jié)果不一致,這些研究結(jié)果均顯示SLE患者AMH與健康組無顯著差異,SLE疾病本身對(duì)卵巢儲(chǔ)備功能無影響。造成各個(gè)研究結(jié)果不一致的原因,可能是因?yàn)锳MH檢測方法、SLE患者病情及樣本量大小等不同。本研究發(fā)現(xiàn),SLE組月經(jīng)異常率顯著高于健康組,與國內(nèi)外研究結(jié)果一致[20-23],其中以經(jīng)量減少(27.5%)占多數(shù),同時(shí)也有周期異常或兩者同時(shí)出現(xiàn),甚至閉經(jīng)。另外還發(fā)現(xiàn)月經(jīng)周期異常與抗Sm抗體陽性、nRNP抗體陽性、ESR升高相關(guān)。進(jìn)一步SLE組內(nèi)的統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn),AMH值與ANA譜、免疫球蛋白、補(bǔ)體、CRP、ASL、RF、月經(jīng)變化變化均無相關(guān)性;月經(jīng)周期異常與抗Sm抗體陽性、nRNP抗體陽性、ESR升高相關(guān),與其他抗體無相關(guān)性。分析其中的原因,一方面可能是因?yàn)闃颖玖枯^小統(tǒng)計(jì)效能低;也有可能是它們之間確實(shí)不存在關(guān)聯(lián),需要進(jìn)一步的大樣本研究來確定。
綜上所述,SLE疾病本身對(duì)患者卵巢功能是有影響的,可以引起卵巢儲(chǔ)備功能下降,作為卵巢儲(chǔ)備功能更方便敏感的一個(gè)指標(biāo),AMH在SLE組較健康組低,多數(shù)初診及未接受藥物治療的SLE患者已存在卵巢儲(chǔ)備功能下降和月經(jīng)異常,且卵巢儲(chǔ)備功能與疾病活動(dòng)度呈負(fù)相關(guān)。通過檢測育齡期SLE者的血清AMH水平及相關(guān)臨床指標(biāo),可對(duì)女性患者卵巢功能早期評(píng)估,在下一步臨床治療中積極控制原發(fā)病的病情活動(dòng),避免對(duì)卵巢的進(jìn)一步損害。
[參考文獻(xiàn)]
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第二篇:多囊卵巢患者的感謝信
患者李女士,今年25歲,月經(jīng)稀發(fā)6年,婚后未避孕未孕4年,多囊卵巢患者的感謝信?;颊?5歲月經(jīng)初潮,5-7/30天,經(jīng)量中,無血塊,無痛經(jīng)。自2003年起月經(jīng)周期延長,5-7/2-6個(gè)月。2007年口服黃體酮(一天2粒,服用五天)一年,每次需服用藥物方可來月經(jīng)。2008年1月到北京三院就診,行B超及激素檢查均提示多囊卵巢,未行治療?;禺?dāng)?shù)睾笾兴幹委熑剿膫€(gè)月,仍無月經(jīng)來潮,監(jiān)測排卵無優(yōu)勢(shì)卵泡,感謝信《多囊卵巢患者的感謝信》。2009年8月到承德都市婦科醫(yī)院肌注黃體酮四天,月經(jīng)來潮兩個(gè)周期,LMp:2009-9??;颊?006年結(jié)婚,婚后性生活正常,未避孕一直未懷孕?;颊咦鐾晷g(shù)前準(zhǔn)備后做了宮腹聯(lián)合手術(shù)。手術(shù)后她的月經(jīng)也正常了。術(shù)后半年懷孕就懷孕了,給我們打來電話,我們也非常高興。
第三篇:綿羊卵巢組織研究論文初稿
2014屆畢業(yè)生畢業(yè)論文
綿羊卵巢組織研究
學(xué)
名
努日艾合麥提·塔西
學(xué)
號(hào)
2011109124
所屬學(xué)院
動(dòng)物科學(xué)學(xué)院
專
業(yè)
動(dòng)物醫(yī)學(xué)
班
級(jí)
動(dòng)醫(yī)民14-1
指導(dǎo)教師
鄭毛亮
塔里木大學(xué)教務(wù)處
綿 羊 卵 巢 組 織 研 究
(努日艾合免提·塔西)
(塔里木大學(xué)843300)
【摘要]為觀察綿羊正常卵巢組織的形態(tài)結(jié)構(gòu),采用蘇術(shù)精一伊紅(hcmatoxylirrcosin, HE)染色法制作綿羊卵巢組織石蠟切片。結(jié)果顯示,在切片制作過程中存在的問題主要包括染色不均、染色對(duì)比不明顯、過度染色、染色過淺和切片出現(xiàn)斑點(diǎn)等。在試驗(yàn)過程中可通過充分分化、藍(lán)化、充分水洗等因素的控制來提高切片的染色效果,該方法可為動(dòng)物卵巢及卵泡染色切片制作提供技術(shù)指導(dǎo)。
關(guān)鍵詞:綿羊;HF染色;卵巢;切片;優(yōu)化;
HF染色法是石蠟切片技術(shù)中常用的染色法。蘇術(shù)精堿性染液可使細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)核糖體著藍(lán)紫色;伊紅酸性染料可使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,作為組織學(xué)、月王胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中最基木的技術(shù)方法而被廣泛使用[1]。
木試驗(yàn)通過HF染色技術(shù)制作石蠟切片,該方法是一種多步驟、多因素決定的過程,在試驗(yàn)中由于操作不當(dāng),經(jīng)驗(yàn)不足,以及實(shí)踐的使用和時(shí)間的掌握等諸多因素影響,出現(xiàn)切片脫落、染色不均勻、糊不清、褶皺,及細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)對(duì)比不明顯等現(xiàn)象,從而影響使用效果。HF染色切片制作過程中出現(xiàn)的問題進(jìn)行了探究,并提出解決方案,這對(duì)相關(guān)的試驗(yàn)操作具有指導(dǎo)意義。1材料與方法 1.1試驗(yàn)材料
木試驗(yàn)選用成年健康母羊,屠宰后取卵巢。1.2主要試劑和儀器
Bouin氏固定液、包埋紙盒、染色缸、融蠟箱、切片機(jī)、恒溫箱、載玻片、小燒杯、吸水紙、移液槍、蓋玻片、石蠟,1%鹽酸水溶液、0.5%伊紅(水溶性)溶液、各梯度的乙醇、二甲苯、蘇術(shù)精染液、伊紅染液、中性樹膠、蒸餾水。1.3試驗(yàn)方法
1.3.1綿羊卵巢的處理:將卵巢投入預(yù)先配好的固定液中(10%福爾馬林Bouin氏固定液等),使組織蛋白質(zhì)變性并防止幾細(xì)胞死亡后自溶或細(xì)菌分解。1.3.2脫水透明:用低濃度到高濃度酒精作脫水劑,逐漸脫去組織中的水分,再將組織塊置于二甲苯中透明,以二甲苯替換出組織塊中的酒精,才能浸蠟包埋。1.3.3浸蠟包埋:將透明處理的組織塊置于熔化的石蠟中,放入熔蠟箱保溫。待石蠟完全浸入組織塊后進(jìn)行包埋。
1.3.4通切片與貼片:將包埋好的蠟塊固定于切片機(jī)上,切成厚度為5~8um薄片。切卜的薄片往往皺折,要放到加熱的水中燙平,再貼到載玻片上,放朽。45℃恒溫箱中烘干[2]。
1.3.5脫蠟染色:染色前,用二甲苯(Ⅰ)脫蠟5min,入二甲苯(Ⅱ)中脫蠟 10min,用吸水紙吸干液體;入100%乙醇(Ⅰ)5min,入100%乙醇(Ⅰ)5min,用吸水紙吸干液體;入95%乙醇3 min并過流水2 min,用吸水紙吸干水分。蘇術(shù)精染色4~8 min,并用1%鹽酸水溶液分化5~10s,自來水洗返藍(lán)15~30 min;0.5%伊紅(水溶性)染色30 s,95%乙醇(Ⅰ)脫水5 min,用吸水紙吸干液體;95%乙醇(Ⅱ)脫水5 min,用吸水紙吸干液體;入100%乙醇(Ⅰ)5min,100%乙醇(Ⅱ)2 min,用吸水紙吸干液體;入二甲苯(Ⅰ)中透明2~3min,二甲苯(Ⅱ)中透明5 min。用移液槍吸取適量中性樹膠于載玻片上,蓋上蓋玻片待凝固后觀察結(jié)果。2結(jié)果與分析 2.1正常染色
經(jīng)顯微鏡觀察,正常HF染色切片見圖1-A,l-B。圖1-A可見卵巢上有腔卵泡的存在,圖1-B可見卵巢卵泡顆粒細(xì)胞(GC)、內(nèi)膜細(xì)胞(TC)的細(xì)胞核呈藍(lán)紫色;而周圍的細(xì)胞質(zhì)、纖維被染成粉紅色,切片染色均勻無褶皺,細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)對(duì)比明顯。2.2染色異常
在切片制作尤其是染色過程中常會(huì)出現(xiàn)染色異常情況,從而影響了正常的組織形態(tài)觀察。圖1-C顯示細(xì)胞核染色蒼白、暗淡,細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)染色對(duì)比度差。出現(xiàn)這類問題有三種原因:切片在蘇術(shù)精染液停留時(shí)間太短;蘇術(shù)精染液過度氧化,失去染色能力;分化步驟處理時(shí)間過長??蛇M(jìn)行切片重新染色。如果組織在酸性固定液Zenker,Bouin及非中性緩沖甲醛液固定時(shí)間過長,細(xì)胞核染色能力將減弱,須增加其在蘇術(shù)精染色液的時(shí)間,或用一些方法增加組織的嗜堿性,以改善細(xì)胞核的著色。
圖1-D顯示細(xì)胞核過染,核膜、核仁等不清晰,細(xì)胞質(zhì)含有大量的蘇術(shù)精,導(dǎo)致細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)比例失調(diào)。這主要是由于在染色過程中切片在蘇術(shù)精染液停留過長、切片太厚、分化步驟時(shí)間太短,造成蘇術(shù)精染液大量分布而占據(jù)細(xì)胞質(zhì)位置。通過顯微鏡上卜微調(diào)觀察,如果只有1 ~ 2層細(xì)胞核層次,說明不是因?yàn)榍衅?,可?jīng)脫色、漂白、重新染色,對(duì)染色和分化時(shí)間做些適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。若是由于切片太厚導(dǎo)致的細(xì)胞核過染,則需要重新切片。
圖1-E顯示細(xì)胞核呈紅、棕色改變。這主要由于蘇術(shù)精染色液過度氧化和切片在蘇術(shù)精染液染色后返藍(lán)不足。提示染色之前檢查蘇術(shù)精染色液的染色能力,發(fā)現(xiàn)氧化過度應(yīng)及時(shí)更換;同時(shí),可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉溶液等在蘇術(shù)精染色后,給切片足夠的藍(lán)化時(shí)間。
圖1-F顯示伊紅著色淡,切片中央?yún)^(qū)域伊紅染色不均勻,可能為弱堿性溶液
殘留導(dǎo)致伊紅拒染;也可能是藍(lán)化液殘留過多、切片太薄,或切片經(jīng)伊紅染色后在乙醇脫水時(shí)間過長。因此,在染色前應(yīng)檢查伊紅染液的pH值,必要時(shí)可用乙酸將pH調(diào)節(jié)在4.6-5.0之間。在脫水時(shí)切片在低濃度乙醇停留時(shí)間不可過長,低濃度乙醇會(huì)將伊紅的顏色分化掉[7]
圖1-G顯示細(xì)胞質(zhì)過染,分色不足,這是由于伊紅深染導(dǎo)致細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)沒有層次,缺乏對(duì)比。提示在染色前適當(dāng)稀釋伊紅染液,減少伊紅染色時(shí)間;切片在乙醇脫水步驟時(shí),停留時(shí)間要相對(duì)均勻。
圖1-H顯示切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物,這主要是試驗(yàn)中使用的蘇術(shù)精染液沒有過濾處理,導(dǎo)致蘇術(shù)精染液中的金屬膜熟附在玻片上。建議使用半氧化蘇術(shù)精染色液,如Gill蘇術(shù)精染液,可以避免金屬膜的產(chǎn)生。
圖1-I可見切片內(nèi)有大量水珠或云霧狀改變,這是梯度乙醇處理后沒有完全脫水造成的,因此,所有用于脫水和透明的液體,在使用一定時(shí)間后應(yīng)及時(shí)更換。
圖1-J顯示由于組織切片脫蠟不徹底或分化液濃度過大、分化后沒有迅速入水終止分化,導(dǎo)致切片染色不均,出現(xiàn)“陰陽臉”,出現(xiàn)這種情況需要重新取材制作切片[8]
圖1-K顯示鏡檢時(shí)切片中出現(xiàn)大片白色斑點(diǎn),這是由于脫蠟不徹底,染色液因石蠟斑點(diǎn)的殘留不能滲透組織著色。因此,脫蠟時(shí)切片在二甲苯中停留時(shí)間相對(duì)延長或更換二甲苯,脫色、漂白、重新染色[9]。
3討論
在研究雌性動(dòng)物繁殖性能中,卵巢組織切片是較常用的用于了解動(dòng)物卵巢結(jié)構(gòu)與其年齡特征、生理功能、細(xì)胞凋亡、蛋白表達(dá)相關(guān)的常規(guī)技術(shù)。常青等(2001)為觀察早期老年大鼠使用外源雌激素后卵巢結(jié)構(gòu)及功能的變化,通過建立早期老年大鼠模型,采用放射免疫法測定使用外源雌激素后外周血液中促卵泡素(FSH)、促黃體素((LH),雌二醇(E2)及辜酮(T)水平,并通過卵巢組織切片觀察卵巢結(jié)構(gòu)的改變。發(fā)現(xiàn),早期老年大鼠應(yīng)用雌激素后外周血FSH明顯降低,E2水平明顯上升,T水平明顯降低;同時(shí)卵巢門細(xì)胞減少,卵巢基質(zhì)相對(duì)增生[10].。土朝清等(2006)為探索家兔卵巢典型結(jié)構(gòu)與其年齡的關(guān)系,選取不同年齡段的家兔卵巢,常規(guī)石蠟切片,HE, Vna~icson和PAS染色,鏡檢并計(jì)數(shù)各級(jí)卵泡。結(jié)果表明,2月齡的家兔卵泡開始發(fā)育,隨年齡的增長發(fā)育程度逐
漸增強(qiáng)。4~ 5月齡卵巢的皮質(zhì)、髓質(zhì)分界清楚,未見黃體、閉鎖卵泡及間質(zhì)腺,發(fā)育中卵泡由周圍向中央排列,與人的卵巢結(jié)構(gòu)較為相似。7~8月齡卵巢結(jié)構(gòu)呈性成熟狀態(tài),卵巢髓質(zhì)隨著家兔月齡增長間質(zhì)腺逐漸增多[11]。陳華絮等(2007)針對(duì)常規(guī)石蠟切片制作步驟瑣、耗時(shí)長,試驗(yàn)中所用二甲苯對(duì)人體有較大危害的缺點(diǎn),探討提高兔卵巢組織石蠟切片質(zhì)量的制作方法,研究從脫水和透明環(huán)節(jié)進(jìn)行技術(shù)優(yōu)化,用正J醇與無水乙醇混合溶液取代常規(guī)的脫水劑和透明劑。該混合
液具有較好的脫水和透明作用。鏡檢結(jié)果表明,卵巢組織結(jié)構(gòu)清晰可辨、對(duì)比度好、層次分明,組織切片鏡檢效果良好,具有工序簡單、質(zhì)優(yōu)、省時(shí)和實(shí)用性較好等優(yōu)點(diǎn)[12]。楊軒(2009)對(duì)家兔卵巢石蠟切片HF染色過程中影響因素進(jìn)行了研究,在試驗(yàn)過程中通過改變條件進(jìn)行比較試驗(yàn),重點(diǎn)分析了染色過程中溫度、時(shí)間、切片厚度等因素對(duì)鏡檢效果的影響[13]。
木研究通過對(duì)綿羊卵巢組織切片的制作,并通過鏡檢效果重點(diǎn)對(duì)影響HF染色的因素如切片厚度、染液pH值、染色時(shí)間、分化、藍(lán)化等進(jìn)行分析探討,對(duì)試驗(yàn)中影響鏡檢效果的相關(guān)因素進(jìn)行了解決并加以優(yōu)化,這對(duì)相關(guān)動(dòng)物卵巢常規(guī)切片的制作具有一定的指導(dǎo)意義。
參考文獻(xiàn)
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第四篇:系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者自身抗體檢測的臨床意義
系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者自身抗體檢測的臨床意義
日期:2010-06-13來源:作者: 點(diǎn)擊:103次 0 條評(píng)論
作者單位:山東省濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院免疫風(fēng)濕科,山東 濰坊 261031 【摘要】 目的:探討抗核小體抗體(anti-nucleosome antibody,ANuA)、抗雙鏈DNA抗體(anti-doublestrandedDNA,dsDNA)、抗史密斯抗體D1(Anti-SmD1antibody,SmD1)等特異性自身抗體聯(lián)合檢測在SLE的診斷及臨床應(yīng)用中的價(jià)值。方法:分別用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法和間接免疫熒光法檢測SLE患者及對(duì)照組患者血清中的ANuA、抗dsDNA、抗SmD1抗體,并分析它們之間的關(guān)系。結(jié)果:70例SLE患者中單項(xiàng)檢測抗dsDNA、抗SmD1、ANuA的陽性率分別為40.0%、75.7%、64.3%,三者聯(lián)合檢測后的陽性率為87.1%。結(jié)論:抗SmD1、ANuA、抗dsDNA聯(lián)合檢測提高了診斷的敏感性,對(duì)SLE的診斷和治療有重要意義。
【關(guān)鍵詞】 抗核小體抗體 抗雙鏈DNA抗體 抗SmD1抗體 系統(tǒng)性紅斑狼瘡
Study on the relationship between autoantibodies and systemic lupus erythematosus 【Abstract】 Objective:To investigate the clinicalsinificance of determing anti-SmD1,anti-nucleosome(ANuA)and anti-double stranded DNA(dsDNA)in SLE and to analysis the relationship in SLE.Methods:ELISA and indirect immunofluorescence respectively method were used to measure the anti-SmD1,ANuA and anti-dsDNA in serum of 70 SLE patients,27 patients of other rheumatic diseases and 20 healthy people.Results:The positive rate of anti-dsDNA,anti-SmD1 and AnuA in the patients with SLE was 40.0%、75.7%、and 64.3% respectively.After combined determination of anti-dsDNA,anti-SmD1 and ANuA,the positive rate rose to 87.1%.Conclusion:The combined determination of anti-dsDNA.anti-SmD1 and ANuA may improve the sensitivity and efficiency of laboratory diagnosis of SLE and has an important significance in diagnosis and treatment of SLE.【Key words】 Anti-nucleosome antibody;Anti-double stranded DNA antibody;Anti-SmD1 antibody;Systemic lupus erythematosus 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythemtosus,SLE)是一種常見的多系統(tǒng)損害自身免疫性疾病。其主要特征是體內(nèi)產(chǎn)生多種抗核抗體(ANA),如抗雙鏈DNA抗體(抗dsDNA抗體)、抗史密斯抗體(抗Sm抗體)、抗組蛋白抗體、抗核小體抗體(ANuA)等,而引起自身多組織、多器官以血管炎為特征的彌漫性損害的疾病。目前,SLE的實(shí)驗(yàn)室檢查主要檢測抗dsDNA抗體、ANuA、抗Sm抗體等。研究用抗Sm對(duì)應(yīng)的抗原結(jié)構(gòu)中一種蛋白組分(D1)的多肽順序取代整個(gè)Sm分子作抗原,檢測患者血清中的抗SmD1,提高了檢測的靈敏度[1]。本文檢測了70例SLE患者抗核小體抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗SmD1,討論它們?cè)赟LE的診斷中的意義。材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象 70例SLE以及其他結(jié)締組織病27例均來自2004年10月至2006年10月濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院免疫風(fēng)濕科住院患者,其中男6例,女64例,年齡14~65歲,平均年齡33歲。均符合1982年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)。其他結(jié)締組織病27例,男5例,女22例,年齡18~67歲,平均年齡42歲。其中,類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎13例、雷諾綜合征4例、多發(fā)性肌炎4例、干燥綜合征6例,診斷均符合相應(yīng)的診斷標(biāo)準(zhǔn)。我院正常健康體檢者20例(均無肝、腎病史及結(jié)締組織病)作為對(duì)照組,男17例,女26例,年齡14~66歲,平均年齡43歲。所有標(biāo)本采集后分離血清-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1.2 實(shí)驗(yàn)方法 抗dsDNA、抗SmD1測定采用間接免疫熒光法;ANuA測定采用ELISA法。試劑均由歐蒙(德國)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司提供。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 組間率比較采用χ2檢驗(yàn)。結(jié)果
2.1 3種自身抗體在SLE及對(duì)照組中的陽性情況以及陽性率比較 70例SLE患者中血清抗dsDNA、抗SmD1和ANuA單項(xiàng)檢測的陽性率分別為40.0%、75.7%、64.3%;抗dsDNA和抗SmD1聯(lián)合檢測的陽性率為82.9%(58/70),抗SmD1和ANuA聯(lián)合檢測的陽性率為84.3%(59/70),抗dsDNA和ANuA聯(lián)合檢測的陽性率為82.9%(58/70);抗dsDNA、抗SmD1和ANuA 3種自身抗體聯(lián)合檢測(有一自身抗體陽性即為聯(lián)合檢測陽性)陽性率為87.1%(61/70)。由此可見,以3種自身抗體聯(lián)合檢測的陽性率最高。同樣,3種自身抗體單項(xiàng)檢測和聯(lián)合檢測在SLE中的陽性率與其他結(jié)締組織病及正常對(duì)照組比較差異有顯著性(P<0.05),而其他結(jié)締組織病與正常對(duì)照組比較差異無顯著性,見表1。表1 3種自身抗體在SLE及對(duì)照組中的陽性例數(shù)及陽性率注:與其他結(jié)締組織病組比較,*P<0.05;與正常對(duì)照組比較,#P<0.05。
2.2 3種自身抗體診斷SLE的敏感性、特異性、預(yù)測值的比較 從表1得出,3種自身抗體聯(lián)合檢測和單項(xiàng)檢測的敏感性、特異性、預(yù)測值。3種自身抗體聯(lián)合檢測與單項(xiàng)檢測比較,特異性由100%降低到77.8%,但敏感性由40.0%提高到87.1%,見表2。表2 抗dsDNA、抗SmD1、ANuA診斷SLE的敏感性、特異性、預(yù)測值討論
SLE常累及全身多個(gè)臟器,臨床表現(xiàn)多種多樣,單根據(jù)臨床表現(xiàn)難以特異性診斷,因此,自身抗體的檢測對(duì)SLE診斷有非常重要的意義??筍m是一類抗核糖核蛋白粒子抗體,其相應(yīng)抗原由U-RNA和共同核心蛋白(即B,B,N,D1,D2,D3,E,F(xiàn),G蛋白)組成。目前公認(rèn)抗Sm抗體幾乎僅見于SLE,是SLE的特異性標(biāo)志之一,在SLE診斷中特異性最高,在患者血清中出現(xiàn)后將持續(xù)陽性,可作SLE回顧性診斷指標(biāo)[2],不受病情活動(dòng)及治療的影響。但其陽性率偏低,一般為30%~40%。而D1蛋白是最重要的Sm抗原[1],本文用D1蛋白的一個(gè)多肽順序(83-119)來取代整個(gè)Sm抗原檢測患者血清中的抗SmD1,陽性率達(dá)75.7%,特異性為85.6%,20例健康人也全部陰性,在其他結(jié)締組織病中陽性率為14.4%,大大提高了診斷SLE的敏感性,因此,抗SmD1抗體可能是SLE的一個(gè)既敏感又特異的指標(biāo)。
抗dsDNA抗體是SLE標(biāo)志性抗體,幾乎存在于所有患者的血清中[3],與臨床表現(xiàn)密切相關(guān),它是SLE活動(dòng)期的標(biāo)志,但可能由于患者血清中有過多的游離DNA抗原,與相應(yīng)的DNA抗體結(jié)合導(dǎo)致檢測結(jié)果比較低。因此,抗dsDNA結(jié)果陰性,不能排除SLE的診斷??筪sDNA對(duì)SLE診斷的特異性較高,但敏感性較低。本文結(jié)果顯示,抗dsDNA只在SLE中出現(xiàn),對(duì)照組均陰性,特異性高達(dá)100%,但陽性率只有40.0%,單靠抗dsDNA診斷SLE漏檢率高。此外有研究證明,抗dsDNA和DNA結(jié)合成為免疫復(fù)合物在腎小球基底膜沉積,或抗體直接作用于腎小球抗原而造成SLE患者的腎損傷[4]??筪sDNA對(duì)于SLE的診斷和鑒別診斷、監(jiān)視治療和病情追蹤以及判斷預(yù)后等有重要意義。
抗核小體抗體(ANuA)是1978年Hannested[5]等首先描述,核小體(Nuleosome)是細(xì)胞染色質(zhì)的基本單位,且是SLE的發(fā)病過程中一種主要的自身抗原,其核心是由8個(gè)帶正電荷的組蛋白分子(H2A、H2B、H3和H4各2個(gè)分子)組成,這種八聚體的復(fù)合物中,H3、H4位于中心,H2A、H2B位于兩側(cè)。當(dāng)細(xì)胞受到致病因素?fù)p傷時(shí),細(xì)胞的線粒體腫脹,胞膜破裂,核小體釋放,刺激T細(xì)胞的增生活化,進(jìn)而激活B細(xì)胞,產(chǎn)生抗核小體抗體、抗dsDNA抗體,并形成抗原抗體復(fù)合物參與SLE的發(fā)病[6]。本實(shí)驗(yàn)研究示,在SLE患者中ANuA陽性率64.3%。且抗核小體抗體與SLE患者的疾病活動(dòng)性、腎炎和精神神經(jīng)因素密切相關(guān)[7~9],認(rèn)為抗核小體可能成為SLE診斷新的標(biāo)記性抗體[10]。ANuA對(duì)SLE診斷的敏感性高,特異性強(qiáng)可能是SLE診斷的標(biāo)記性抗體之一;尤其對(duì)dsDNA抗體、Sm等抗體陰性的SLE的診斷具有重要意義[11];ANuA可出現(xiàn)在疾病進(jìn)程的各個(gè)時(shí)期,并與疾病的活動(dòng)性密切相關(guān)。
本實(shí)驗(yàn)顯示,抗dsDNA特異性好而敏感性差,抗SmD1敏感性高而特異性差,ANuA的敏感性、特異性介于抗dsDNA和抗SmD1之間,3種抗體兩兩之間聯(lián)合檢測的陽性率均低于它們同時(shí)檢測的陽性率。雖同時(shí)檢測后的特異性低于單項(xiàng)檢測的特異性,但提高了SLE診斷的敏感性,避免因單項(xiàng)檢測出現(xiàn)的漏診情況。因此,3種自身抗體聯(lián)合檢測更有利于全面分析病情所處的階段,提高SLE的檢出率,對(duì)SLE病情的診斷、分型、治療、追蹤和預(yù)后判定有重要的意義。
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第五篇:偏癱患者步行功能再訓(xùn)練
室內(nèi)步行,平衡能力達(dá)到2級(jí),室外步行,平衡能力必須3級(jí)以上。下肢主要的伸肌如股四頭肌,臀大肌等肌力必須在3級(jí)以上,才能保證另一條腿完成向前擺動(dòng)的動(dòng)作。
另外,如果要達(dá)到實(shí)用性步行,我們還要考慮患者步行是否安全,相對(duì)省力,足夠的速度,外觀要自然,盡可能不使用手杖,還能自動(dòng)行走
想要恢復(fù)基本正常的步行,我們就得了解步行時(shí)存在的問題并訓(xùn)練相關(guān)的動(dòng)作,首先我們來看支撐期存在的問題,1.由于伸肌痙攣并且喪失選擇性運(yùn)動(dòng)模式,患者不能將重心前移。患者擔(dān)心向前跌倒,維持靠后的位置更覺得安全。重心不能向患側(cè)轉(zhuǎn)移,患者的重心通常位于重力線的后方,此時(shí)邁步必須主動(dòng)提腿和放下足,重心不向前轉(zhuǎn)移,就不會(huì)產(chǎn)生自然的鐘擺樣動(dòng)作。2.膝關(guān)節(jié)過伸或者過屈?
患者不能主動(dòng)選擇性伸髖,重心不能前移至偏癱腿上,健腿向前邁步時(shí),患側(cè)髖部會(huì)向后運(yùn)動(dòng),此時(shí)會(huì)導(dǎo)致膝過伸;小腿肌肉張力過高,使患足蹬地時(shí),脛骨向后移動(dòng),導(dǎo)致膝過伸;患者存在感覺障礙,膝關(guān)節(jié)輕微屈曲時(shí)感受到的關(guān)節(jié)位置信息很少,必須通過鎖住膝關(guān)節(jié)才能感知到膝關(guān)節(jié)已伸直,這個(gè)也會(huì)導(dǎo)致患者采取過伸狀態(tài)。
膝關(guān)節(jié)以屈曲共同運(yùn)動(dòng)模式向前邁步,導(dǎo)致膝關(guān)節(jié)在擺動(dòng)期末端沒有伸直,此時(shí)步長將明顯縮短,步行速度也會(huì)降低,能量消耗會(huì)增大。
3.屈髖,一般發(fā)生在支撐相中后期,此時(shí)的屈髖肌要比伸髖肌活躍
4.髖關(guān)節(jié)外旋?軀干和髖區(qū)的運(yùn)動(dòng)向腳的方向傳遞,許多患者不能充分穩(wěn)定軀干,致使產(chǎn)生側(cè)屈和過度旋轉(zhuǎn)。
5.支撐相過短,健腿邁步短又快,可能是為了避免患腿單獨(dú)站立及維持平衡 擺動(dòng)相存在的問題: 1.屈髖無力,身體代償?
健腿向前邁一步,患腿髖關(guān)節(jié)處于后伸狀態(tài),患腿的伸肌群張力升高,導(dǎo)致伸肌痙攣。屈髖肌無力,患者代償性上提骨盆,使腳離地。2.足下垂、內(nèi)翻導(dǎo)致觸地異常
脛骨前肌在伸趾長肌和伸踇長肌的協(xié)助下背屈踝關(guān)節(jié),如果脛前肌無力產(chǎn)生足下垂,如果在擺動(dòng)中期脛前肌本該不收縮,如果持續(xù)收縮,又會(huì)產(chǎn)生足內(nèi)翻。3.屈膝無力導(dǎo)致過度屈髖 在支撐末期,膝被動(dòng)的屈曲30度開始擺動(dòng),在擺過支撐腿時(shí),膝關(guān)節(jié)進(jìn)一步屈曲至60度左右?;颊咭话悴荒茉跀[動(dòng)期開始時(shí)放松膝關(guān)節(jié),導(dǎo)致屈膝困難 4.劃圈步態(tài)
患者下肢伸肌痙攣,髖膝踝屈曲困難,導(dǎo)致上提患側(cè)骨盆,伸直的腿通過劃圈邁步向前。
安全、不費(fèi)力的站起和坐下是功能性步行的重要組成部分,實(shí)際治療中有兩種常見情況,第1點(diǎn)是患者不能把重心充分前移超過腳,第2種是患者不對(duì)稱站起,