第一篇：色氨酸酶基因工程菌的活力及其與分析

基因工程論文

色氨酸酶基因工程菌的活力與分析

學(xué)院：醫(yī)學(xué)院

專業(yè)：醫(yī)學(xué)檢驗

班級:122 姓名：高倩

學(xué)號12352050 色氨酸酶基因工程菌的活力與分析

姓名：高倩 班級：檢驗122 學(xué)號：12352050 大連大學(xué)醫(yī)學(xué)院 遼寧 大連 116622 摘要：選擇并改進了以L-色氨酸為底物測定吲哚的生成量作為色氨酸酶活力測定方法，應(yīng)用改進的方法測定了7株工程菌色氨酸酶的活力，也對不同誘導(dǎo)時間色氨酸酶的表達與活力關(guān)系進行了比較。結(jié)果表明工程菌色氨酸酶的活力比宿主菌均有不同程度的提高，其中11號工程菌比宿主菌高16倍。誘導(dǎo)表達1h時酶活最高，但酶活高低并不與其表達量呈平行關(guān)系。

關(guān)鍵詞：色氨酸酶基因工程菌，L-色氨酸，吲哚，活力，表達

Study on the activity of tryptophanase inGenet icengineering strains and relationshipbetween It and expression

Abstract：The enzyme asssay method based on production of indole from L-try ptophan was selected and improved to measure activities of tryptophanase from s even genetic engineering strains.The relationship between expression and activ ity of tryptophanase after different induction time is also compared.The resul ts showed that the activities of tryptophanase from genetic engineering strains are greater than that of host strain, and the enzyme activity of No.11 was of 1 6 times as high as that of the host.The enzyme activity reached maximum after one hour induction, but it was not parallel to enzyme expression.Key Words:Tryptophanase genetic engineering strain, L-Tryptophan, Indole, Ac tivity, Expression

引言：L-色氨酸是人體內(nèi)的重要必需氨基酸,主要用于制造復(fù)方氨基酸營養(yǎng)輸液,并可單獨作為抗抑郁劑和催眠劑。色氨酸酶（EC4.1.99.1）在正常情況下催化L-色氨酸降解生成丙酮酸、吲哚和氨，但在高濃度的丙酮酸和氨條件下，它也能有效地催化丙酮酸、吲哚和氨合成L-色氨酸［1］。色氨酸酶的活力測定方法主要有三種：一是Wood等［2］提出的以色氨酸為底物測定吲哚的生成量,該法缺點是吲哚對色氨酸酶有一定的抑制及操作較繁;二是Nakazawa［3］等采用的以丙酮酸、吲哚和氨為底物測定色氨酸的合成量,該法生成的色氨酸可用紙層析或HPLC測定,但前者費時、后者費用較高；三是Suelter［4］發(fā)明的以S-O-硝基苯-L-半

胱氨酸（SOPC）為底物生成O-硝基苯硫酚的直接分光光度法，該法雖然簡便、靈敏，但底物SOPC需自行合成，且前體鄰硝基苯胺不易購得，合成收率偏低?；蚬こ痰陌l(fā)展為人類快速獲取一些高效菌種提供了新方法。微生物學(xué)家發(fā)現(xiàn)微生物對污染物的降解性與其所帶的質(zhì)粒有關(guān)。利用降解性質(zhì)粒的相容性，把能夠降解不同有害物的質(zhì)粒組合到一個菌種中，組建一個多質(zhì)粒的新菌種，這樣能使一種微生物降解多種污染物或完成降解過程的多個環(huán)節(jié)，或使不帶降解性的菌帶上質(zhì)粒從而獲得降解性。另外，可采用質(zhì)粒分子育種，即在選擇壓力的條件下培養(yǎng)，使微生物發(fā)生質(zhì)粒相互作用和傳遞，縮短了自然進化所需的時間，以達到加速培養(yǎng)新菌種的目的。降解性質(zhì)粒DNA體外重組，是在體外對生物大分子DNA進行剪切加工，將不同親本的DNA重新連接，轉(zhuǎn)移到受體細胞中，通過復(fù)制表達使細胞獲得新的遺傳性狀。本文對上述第一種酶活測定方法進行了改進，并用改進的方法測定了色氨酸酶基因工程菌的活力，同時也探討了工程菌在不同誘導(dǎo)時間下其表達與酶活的關(guān)系，旨在篩選出高活力的色氨酸酶工程菌，為工業(yè)化酶法生產(chǎn)L-色氨酸提供材料上的保證。

1材料

1.1菌株和培養(yǎng)基

E.coliBL21（DE3）由南京軍區(qū)醫(yī)學(xué)研究所李光富惠贈,色氨酸酶基因工程菌由本室構(gòu)建,LB培養(yǎng)基。1.2試劑

異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）購自Promega公司,磷酸吡哆醛（PLP）購自Sigma公司,L-色氨酸、吲哚、還原型谷胱甘肽（GSH）和對二甲氨基苯甲醛（PDAB）分別購自上海伯奧生物技術(shù)公司、上海雙喜香料助劑廠、中國新興醫(yī)藥保健品科技開發(fā)公司和上海試劑三廠,其它試劑均為國產(chǎn)分析純。1.3儀器

Beckman高速冷凍離心機,CS-900薄層掃描儀（日本島津公司）,JY88-II型超聲波細胞粉碎機（浙江寧波新芝科器研究所）,721型分光光度計（上海第三分析儀器廠）,DYY-III4型穩(wěn)壓穩(wěn)流高壓電泳儀（北京六一儀器廠）。

2方法

2.1色氨酸酶的誘導(dǎo)表達

取工程菌株一個單菌落接種于LB培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)過夜以獲得飽和培養(yǎng)物，將飽和培養(yǎng)物以1%接種于含Amp（100μg/ml）的LB培養(yǎng)基中，37℃繼續(xù)培養(yǎng)2h后，添加IPTG至終濃度1mmol／L，誘導(dǎo)表達色氨酸酶。2.2粗提酶液的獲得

將誘導(dǎo)一定時間后的培養(yǎng)液于5000r/min離心10min，收集的沉淀用0.1mol/L磷酸鉀緩沖液（pH8.0）懸浮,并以15KHz或最大功率

超聲波處理3min，經(jīng)超聲破碎后的細胞懸液離心15min，上清用作粗提色氨酸酶液。2.3酶活測定方法的建立 2.3.1標準曲線的制作

精密稱取吲哚5mg，用甲苯定容至50ml，配制100μg／ml的吲哚標準溶液,分別取吲哚標準溶液10，20，30，40和50μl加入帶塞試管,用甲苯補足至1.0ml,再加0.4ml蒸餾水和3ml5%PDAB和5%硫酸正丁醇混合顯色液,搖勻,靜置30min后于570nm處測定吸光度。以吸光度為縱坐標，吲哚濃度為橫坐標得標準曲線回歸方程A570＝0.03900＋0.08278C，相關(guān)系數(shù)r＝0.9997，在0～6μg／ml范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系（n＝5）。2.3.2測活反應(yīng)體系的確立

在10ml三角瓶中按順序分別添加20μl0.20mg／mlPLP溶液，10μl0.005mol/LGSH溶液，270μl粗提色氨酸酶液（pH8.0，約100mg濕菌體所含酶量），上述0.3ml溶液用1.0ml甲苯覆蓋,37℃保溫5min后加入100μl5.0mg/mlL-色氨酸溶液，置37℃搖床輕緩振蕩使反應(yīng)進行10min，然后添加3ml5%PDAB和5%硫酸正丁醇混合顯色液中止反應(yīng),且形成不同深淺的玫瑰紅色，30min后于570nm處進行吸光度定量測定。色氨酸酶活力定義:在上述反應(yīng)條件下，37℃、10min催化形成0.01μmol吲哚所需要的酶量為一個活力單位。

3結(jié)果

3.1色氨酸酶工程菌的活力測定

色氨酸酶工程菌4，9，11，20，26，36和53號以及宿主菌BL21（DE3），經(jīng)IPTG誘導(dǎo)1h后酶活測定結(jié)果見表1。由表1可知:工程菌色氨酸酶的活力比宿主菌均有不同程度的提高，其中11號比宿主菌高16倍。

3.2不同誘導(dǎo)時間色氨酸酶表達與活力的關(guān)系

將分別誘導(dǎo)0.5，1，2，3h的培養(yǎng)物,經(jīng)適當處理后取上清20μl進行SDS-PAGE檢測,電泳結(jié)果見圖1。薄層掃描顯示：誘導(dǎo)0.5，1、2，3h的色氨酸酶表達量分別占菌體總蛋白的45.0%，69.4%，76.9%和77.4%。同樣，將分別誘導(dǎo)0.5，1，2，3，4h的培養(yǎng)物,經(jīng)超聲波破碎細胞處理后進行酶活測定，結(jié)果見表2。從圖1和薄層掃描結(jié)果可知:在0～3h誘導(dǎo)時間內(nèi)色氨酸酶的表達量隨誘導(dǎo)時間的延長而增加，并逐步趨于穩(wěn)定。由表2可知：色氨酸酶的活力并不隨誘導(dǎo)時間的延長而增加，而是在誘導(dǎo)1h左右呈現(xiàn)最高活力。不同誘導(dǎo)時間下，色氨酸酶表達與活力的關(guān)系見圖2。

Lane 1:without induction by IPTG;Lane 2,3,4,5: 0.5, 1,2, 3h after induction respectively Fig 1The SDS-PAGE results of crude extracts after different induction time

Tab 2Effect of different induction time on the activity of tryptophanase

◆ enzyme expression;■ enzyme activity

Fig 2The relationship between the expression and activity of

tryptophanase after different induction time.4討論

4.1 比較 本文在比較、分析了三種色氨酸酶活力測定方法的基礎(chǔ)上，選擇以色氨酸為底物測定吲哚的生成量作為活力測定方法，并加以改進,基本克服了這一經(jīng)典方法的主要缺點即吲哚對色氨酸酶的抑制作用和操作繁瑣［4］。在改進的測活方法中，測活體系采用兩相（水相和甲苯相）反應(yīng)系統(tǒng)，PLP，GSH，L-色氨酸和色氨酸酶處于水相，而反應(yīng)中產(chǎn)生的吲哚難溶于水，易溶于甲苯，這樣就及時地轉(zhuǎn)移了對色氨酸酶有一定抑制作用的吲哚，從而能較真實的反映工程菌色氨酸酶的活力高低。

4.2建立測活方法

除了確定了該方法的線性范圍和回歸方程外,還考察了測定波長、顯色時間、顯色劑用量和穩(wěn)定性等因素。將顯色后的反應(yīng)液在500～600nm范圍內(nèi)掃描,最大吸收波長為570nm。在顯色劑用量為3ml的情況下，按10、20、30、40、50和60min分次測定吸光度，30min后顯色穩(wěn)定。在顯色時間為30min的情況下，按2、2.5、3、3.5和4ml顯色劑用量分次測定吸光度，顯色劑用量為3～3.5ml顯色穩(wěn)定。因此，選擇570nm為測定波長、30min為顯色時間、3ml為顯色劑用 量。這與Wood等報道的560nm、20min和3.5ml稍有不同。本實驗未作具吲哚核的色氨酸干擾實驗，有待補充和完善。超聲波破碎細胞的強度、時間以及超聲時所產(chǎn)生的熱量，是影響本測活方法精確性、可重復(fù)性的重要因素，也需經(jīng)一步優(yōu)化和完善。4.3SDS-PAGE和薄層掃描

工程菌色氨酸酶表達量占菌體總蛋白的60%以上,與Studier和Moffatt［5］報道的利用T7RNA聚合酶可指導(dǎo)靶蛋白高水平表達（誘導(dǎo)3h左右表達量在50%以上）相一致，從而進一步證明了 T7噬菌體RNA聚合酶-啟

動了表達系統(tǒng)在克隆化基因高效表達方面的可行性和有效性。酶活測定結(jié)果同樣表明，7株色氨酸酶工程菌的活力比宿主菌都有不同程度的提高，有的可高達16倍。就表達量和活力大小而言，本文的研究結(jié)果比Shibatani［6］、Tani等［7］和張玉彬等［8］報道的均有明顯提高。另外，在一定誘導(dǎo)時間范圍內(nèi)，工程菌酶活大小與表達量并不呈平行關(guān)系。當表達量為69.4%時酶活最高,76.9%時有所下降,77.4%時則顯著降低。究其原因，可能是當色氨酸酶大量表達時，酶分子之間的離子鍵、疏水鍵或二硫鍵等因素發(fā)生作用，導(dǎo)致其空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，從而影響酶活；再是當色氨酸酶過量表達時，細菌σ因子的蛋白水解能力達到飽和，表達產(chǎn)物積累形成多聚體，進而形成包涵體，使得酶活顯著降低。

參考文獻

1.Watanabe T,Snell E.Reversibility of the trptophanase reaction: synthesis of tryptophan from indole ,pyruvate and ammonia.Proc Natl Acad Sci,1972,69(5)∶1086 2.Wood W,Gunsalus I,Umbreit W.Function of pyridoxal phosphate:resolutio n and purification of the tryptophanase enzyme of E coli.J Biol Chem,1 947,170∶313 3.Nakazawa H,Enei H,Okumura S,et al.Synthesis of L-tryptophan from pyruvate,ammonia and indole.Agr Biol Chem,1972,36(13)∶2523 4.Suelter C,Wang J,Snell E.Direct spectrophotometric assay of tryptophanase.FEBS Letters,1976,66(2)∶230 5.Studier F,Moffatt A.Use of Bacteiophage T7 RNA polymerase to direct selective high-level express ion of cloned genes.J Mol Biol,1986,189∶113

6.Shibatani T,Omori k,Tosa T.Cloning of tryptophanase gene of Alcaligen es fecalis for effective production of L-tryptophan.American Society Micr obiology Annual Meeting,1987,March 1～8, Poster presentation

7.Tani S,Ts ujimoto N,kawata Y, et al.Overproduction and crystallization of tryptophanase from recombinant cellls of E coli.Biotechnology and Applied Biochemistry,1990,12∶28

8.張玉彬吳梧桐，等.L-色氨酸酶 基因工程菌的構(gòu)建.中國藥科大學(xué)學(xué)報,1996,27（10）∶624

9.平和.吳梧桐.王旻.Wei Pinghe.Wu Wutong.Wang Min 色氨酸酶基因工程菌酶法合成L-色氨酸[期刊論文]-中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)1999,16(6)

10.韋平和.吳梧桐.余方兵.Wei Pinghe.Wu Wutong.Yu Fangbing 色氨酸酶基因工程菌的活力及其與表達關(guān)系研究[期刊論文]-藥物生物技術(shù)1999,6(2)11.宮長斌;羅穎;李霜;徐虹;何冰芳;;基因工程菌雙酶耦合法生產(chǎn)L-Phe的初步研究[A];第一屆全國化學(xué)工程與生物化工年會論文摘要集(下)[C];2004年

12.鄭楊春;鄧旭;李清彪;盧英華;何寧;孫道華;彭雅娟;;高選擇性基因工程菌E.coli在含汞環(huán)境中的生長富集耦合[A];第一屆全國化學(xué)工程與生物化工年會論文摘要集(下)[C];2004年

第二篇：激活紅色基因煥發(fā)生機活力

激活紅色基因煥發(fā)生機活力

來源：今視網(wǎng) 作者： 2014-05-14 11:43:00 編輯：何露

原標題：激活紅色基因 煥發(fā)生機活力

——強衛(wèi)作風(fēng)建設(shè)黨課報告精彩摘登

今視網(wǎng)5月13日南昌訊（記者良保）5月13日，省委召開開展“三大工程”、深入推進第二批教育實踐活動視頻會議，省委書記強衛(wèi)作了題為《激活紅色基因煥發(fā)生機活力》的作風(fēng)建設(shè)黨課報告。本網(wǎng)現(xiàn)將強衛(wèi)書記報告中的精彩內(nèi)容摘要刊登，以饗網(wǎng)友。

講話脈絡(luò)

總書記指出，要讓紅色基因代代相傳

前不久，總書記在新疆軍區(qū)某紅軍師考察工作時指出，要把紅色基因融入官兵血脈，讓紅色基因代代相傳?？倳涥P(guān)于紅色基因的重要論述，給我們以深刻的啟迪和教誨。

江西紅色基因是中國共產(chǎn)黨革命精神的源頭

江西作為著名的革命老區(qū)，為中國革命勝利作出了重大貢獻，在中國共產(chǎn)黨歷史上具有重要地位。在艱苦卓絕的革命斗爭中，這片紅土地上產(chǎn)生了偉大的井岡山精神、蘇區(qū)精神和蘇區(qū)干部好作風(fēng)等一系列寶貴的精神財富，為我們黨孕育和發(fā)展紅色基因作出了突出貢獻。黨和國家的一系列偉大精神都傳承了江西紅土地上的紅色基因并賦予了新的時代內(nèi)涵，成為我們黨的寶貴精神財富。江西紅色基因，是中國共產(chǎn)黨革命精神的源頭。

江西紅色基因基本內(nèi)涵

信念堅定，紀律嚴明。信念堅定是共產(chǎn)黨人的政治靈魂，紀律嚴明是共產(chǎn)黨人的高度自覺。

對黨忠誠，一心為民。永遠忠誠黨、忠誠人民，忠誠共產(chǎn)主義事業(yè)，是共產(chǎn)黨人的政治本色。群眾路線是黨的生命線和根本工作路線。

艱苦奮斗，勇于犧牲。一不怕苦、二不怕死的革命精神，是共產(chǎn)黨人獨有的標識，鑄就了我們的黨魂和軍魂。

實事求是，勇闖新路。一切從實際出發(fā)，是馬克思主義的精髓，也是共產(chǎn)黨人不斷取得勝利的法寶。

清正廉潔，無私奉獻。清廉與奉獻，是共產(chǎn)黨人應(yīng)有的政治品格，是黨的先進性和純潔性的重要體現(xiàn)。

新時代需要激活紅色基因

激活紅色基因，就是要把黨的光榮傳統(tǒng)、優(yōu)良作風(fēng)，與我們正在進行的奮斗相結(jié)合，讓黨的寶貴精神財富彰顯出新的時代價值。當前，我們黨所處的歷史方位發(fā)生了重大變化，擔(dān)負的歷史任務(wù)無比繁重，面臨的歷史考驗更加嚴峻。黨提高戰(zhàn)斗力、增強免疫力、強化創(chuàng)新力，順利完成好時代賦予的使命，不負人民的重托，就必須激活紅色基因，努力把自身鍛造成為團結(jié)和諧、富有活力、勇于進取、敢于擔(dān)當?shù)膱詮娂w。

三大工程是我省激活紅色基因的具體抓手

省委作出決定，在全省開展“連心、強基、模范”三大工程，這是我省深入推進第二批活動、激活紅色基因的具體抓手。主要目的就是激活紅色基因，讓黨的光榮傳統(tǒng)接力傳遞下去，使廣大黨員干部始終滿懷激情、滿懷信心、滿懷斗志，始終昂揚向上、奮發(fā)有為、一往無前，永葆為民務(wù)實清廉的價值追求。

爭做紅色基因的傳承者爭做“四有”好黨員好干部

紅土地孕育了紅色基因，江西人的血液里流淌著紅色基因。我們不僅要為擁有光榮革命傳統(tǒng)而驕傲自豪，更要為傳承、弘揚紅色基因而不懈努力。全省各級黨員干部以焦裕祿、龔全珍等先進模范人物為標桿，自覺參與到“連心、強基、模范”三大工程中來，爭做紅色基因的傳承者，爭做有信仰、有擔(dān)當、有情懷、有氣節(jié)的好黨員、好干部。

精彩觀點

黨的肌體中流淌著“先進血液”

正是因為自身的先進性，紅色基因從我們黨誕生起就植根于黨的肌體中。這就從本質(zhì)上規(guī)定了我們黨是中國共產(chǎn)黨，而不是其他什么政黨；黨領(lǐng)導(dǎo)的軍隊是人民軍隊，而不是其他什么性質(zhì)的軍隊。就像一個人體內(nèi)流淌的有A型血、B型血、O型血一樣，我們黨的肌體中流淌的就是科學(xué)、為民、無私、高尚的“先進血液”。

讓黨的寶貴精神財富彰顯出新的時代價值

大家知道，生物學(xué)意義上的激活基因，是指通過改變基因排序等技術(shù)手段，優(yōu)化生物原有的遺傳特性，使之煥發(fā)出新的活力。同樣，激活紅色基因，就是要把黨的光榮傳統(tǒng)、優(yōu)良作風(fēng)，與我們正在進行的奮斗相結(jié)合，讓黨的寶貴精神財富彰顯出新的時代價值。

新時期更要建設(shè)“鐵軍”

“加強紀律性，革命無不勝。”過去，我們靠鐵的紀律打敗了敵人。新的歷史條件下，更要上下同心、步調(diào)一致、統(tǒng)一行動，使我們黨成為一支“鐵軍”，使組織的力量倍增。唯有如此，才能更好地帶領(lǐng)人民群眾前進，完成“兩個一百年”目標、實現(xiàn)民族復(fù)興中國夢。

思想政治教育活動純潔了黨

激活紅色基因，我們黨有許多行之有效的成功經(jīng)驗，其中重要的一條就是高度重視思想政治教育。從井岡山斗爭時期到延安時期，從建國之初的社會主義建設(shè)時期到十一屆三中全會以來的改革開放時期，我們黨總是結(jié)合實際需要開展思想政治教育，純潔黨的肌體，凈化黨的隊伍，努力保持黨的先進性和純潔性。

做群眾工作不能三天打魚兩天曬網(wǎng)

以前有句順口溜，“雷鋒叔叔沒戶口，三月來了四月走?！边@是群眾對運動式工作方法的諷刺。我們決不能刮一陣風(fēng)、搞運動，三天打魚兩天曬網(wǎng)，集中抓的時候雷霆萬鈞，平時放任自流，而是要經(jīng)常抓、抓經(jīng)常，把已經(jīng)采取的措施、形成的機制扎根落地，做到有章必循、違規(guī)必究，把服務(wù)群眾工作堅持不懈抓下去。

把群眾的難事當作家事來辦

要更加耐心和細心，把群眾的委屈當作家人的委屈來傾聽，把群眾的難事當作家事來辦，對群眾的普遍愿望和合理訴求，明確工作責(zé)任、整改時限，不推諉、不拖延、不畏難，抓鐵留痕，務(wù)求必成，讓群眾真正感到蘇區(qū)干部好作風(fēng)又回來了。

組織力是社會主義最大優(yōu)越性的根本保障

社會主義的最大優(yōu)越性是集中力量辦大事，也是因為我們形成了從上到下的組織體系，只要黨有號召，各級層層動員，基層立即行動，凝聚了攻堅克難的磅礴力量。所以說，高度重視基層，著力打牢根基，始終是我們黨的一條寶貴經(jīng)驗。

像央視評選“十大感動人物”那樣評選“龔全珍式好干部”

要面向全省集中推選一批“龔全珍式好干部”，注意廣泛發(fā)動群眾參與，讓群眾來推舉、鑒別、評判，就像中央電視臺評選“十大感動人物”、“最美人物”那樣，使推出的典型為群眾所公認，具有廣泛而深厚的群眾基礎(chǔ)。

立志做大事，而不是立志做大官

要志存高遠，胸懷大局，以“天下興亡、匹夫有責(zé)”的無私情懷，立志做大事，而不是立志做大官，把全部心思用在黨的事業(yè)上，用在為民造福上。特別是在黨和人民需要的關(guān)鍵時刻，要豁得出來、頂?shù)蒙先?，真正成為帶領(lǐng)人民群眾戰(zhàn)風(fēng)險、渡難關(guān)的主心骨，用實際行動展現(xiàn)對黨的信仰、對人民的忠誠。

把自己擺進去學(xué)習(xí)先進

我過去多次觀看電影《焦裕祿》，最近省四套班子成員又集中看了一遍，每一次看感受都不一樣。過去看的時候，更多的是為他的高尚品格所感動，感到他是個好人、好官。現(xiàn)在作為領(lǐng)導(dǎo)干部看的時候，我把自己擺進去，一一對照焦裕祿的言行、舉止，對照焦裕祿的事跡和精神體會更深了，尤其是焦裕祿把改變蘭考的責(zé)任擔(dān)在肩上，對我們從政為官者有很深的教育和啟發(fā)。

群眾滿意是衡量一切工作的最高標準

常有干部說，我們一天忙到晚，花了很多精力、干了很多事，可是群眾還是不滿意。為什么？我想，這里有一個標準問題。我們講自己多累多辛苦、干了多少工作，這是自我標準，不是群眾標準，群眾滿意才是衡量一切工作的最高標準。

當人民的“勤務(wù)員”做百姓的“遮陽傘”

我們要時刻牢記，人民群眾對美好生活的向往就是我們的奮斗目標，我們要俯下身子去當人民的“勤務(wù)員”，張開雙臂去做百姓的“遮陽傘”，用實效贏得群眾信任，用實干為群眾謀利益。

共產(chǎn)黨員理應(yīng)成為頂天立地的大丈夫

現(xiàn)在，黨員干部面臨的誘惑確實多了，能不能做到“敵軍圍困千萬重，我自巋然不動”，是對我們思想品格、人生境界的考驗。孟子說，“富貴不能淫，貧賤不能移，威武不能屈，此之謂大丈夫。”我們共產(chǎn)黨員理應(yīng)成為這種頂天立地的大丈夫。

在廉潔從政中收獲健康、感受快樂、體驗幸福

每個黨員干部都要捫心自問，我們的所作所為是否對得起廉潔政府的稱號？是否對得起人民的信任和重托？全省上下一定要牢記，為政清廉才能取信于民，秉公用權(quán)才能贏得民心。在任何時候、任何情況下，都要以黨的事業(yè)為重、人民利益為先，做到秉公用權(quán)、公私分明、公而忘私、大公無私，在廉潔從政中收獲健康、感受快樂、體驗幸福。

第三篇：激活紅色基因 煥發(fā)生機活力

激活紅色基因 煥發(fā)生機活力

5月13日，省委召開開展“三大工程”、深入推進第二批教育實踐活動視頻會議，省委書記強衛(wèi)作了題為《激活紅色基因煥發(fā)生機活力》的作風(fēng)建設(shè)黨課報告。他指出，前不久，總書記在新疆軍區(qū)某紅軍師考察工作時指出，要把紅色基因融入官兵血脈，讓紅色基因代代相傳?？倳涥P(guān)于紅色基因的重要論述，給我們以深刻的啟迪和教誨。

省委副書記、省長鹿心社主持會議，省委副書記尚勇代表省委作工作部署。省領(lǐng)導(dǎo)趙愛明、張忠厚在南昌主會場出席會議。

會上，省直機關(guān)工委、吉安市委、新建縣委等單位作了第二批教育實踐活動經(jīng)驗交流發(fā)言。

●紅土地孕育了紅色基因

江西作為著名的革命老區(qū)，為中國革命勝利作出了重大貢獻，在中國共產(chǎn)黨歷史上具有重要地位。在艱苦卓絕的革命斗爭中，這片紅土地上產(chǎn)生了偉大的井岡山精神、蘇區(qū)精神和蘇區(qū)干部好作風(fēng)等一系列寶貴的精神財富，為我們黨孕育和發(fā)展紅色基因作出了突出貢獻。

強衛(wèi)在報告中以一個個紅色歷史故事，總結(jié)提煉了江西紅色基因的根本內(nèi)涵：信念堅定、紀律嚴明，對黨忠誠、一心為民，艱苦奮斗、勇于犧牲，實事求是、勇闖新路，清正廉潔、無私奉獻。他深刻指出，這些內(nèi)涵，集中體現(xiàn)了井岡山精神、蘇區(qū)精神、蘇區(qū)干部好作風(fēng)的共性特征。

●新時代需要激活紅色基因

強衛(wèi)指出，激活紅色基因，就是要把黨的光榮傳統(tǒng)、優(yōu)良作風(fēng)，與我們正在進行的奮斗相結(jié)合，讓黨的寶貴精神財富彰顯出新的時代價值。

強衛(wèi)具體闡釋指出，首先，提高黨的戰(zhàn)斗力需要激活紅色基因。其次，增強黨的免疫力需要激活紅色基因。其三，強化黨的創(chuàng)新力需要激活紅色基因。強衛(wèi)強調(diào)，只有進一步激活紅色基因，讓那種敢闖新路、敢于擔(dān)當?shù)难灾匦掳簱P起來，堅決克服惰性、去除暮氣，才能使黨員干部永葆青春活力，使我們黨永葆向上的活力。

●決不能刮一陣風(fēng)、搞運動

目前，第二批活動正在有序開展，總體進展順利、態(tài)勢良好，取得了初步成效。為了讓第二批活動更加扎實有效，省委作出決定，在全省開展“連心、強基、模范”三大工程，這是我省深入推進第二批活動、激活紅色基因的具體抓手。強衛(wèi)強調(diào)，“連心”工程，就是要在總結(jié)各地的群眾工作好做法好經(jīng)驗基礎(chǔ)上，進一步提質(zhì)、擴面，打造群眾工作新平臺，使黨員干部的心與人民群眾的心緊緊聯(lián)系在一起，做到心心相印、血脈相連。“強基”工程，就是要以整頓軟弱渙散基層黨組織為切入點，著力解決部分村級組織不夠健全、領(lǐng)導(dǎo)班子軟弱無力、黨員隊伍不起作用、社會治理水平較低等突出問題，進一步強壯黨的執(zhí)政根基，夯實黨的執(zhí)政基礎(chǔ)，使每一個黨支部都成為強有力的戰(zhàn)斗堡壘。“模范”工程，就是促使黨員干部以黨的各項事業(yè)中涌現(xiàn)出來的先進典型為鏡，努力改正不足，積極爭創(chuàng)一流。

就做群眾工作，強衛(wèi)深刻指出，我們決不能刮一陣風(fēng)、搞運動，而是要經(jīng)常抓、抓經(jīng)常，把已經(jīng)采取的措施、形成的機制扎根落地，做到有章必循、違規(guī)必究，把服務(wù)群眾工作堅持不懈抓下去。

●送給黨員干部四句詩

強衛(wèi)以四句詩要求全省各級黨員干部爭做紅色基因的傳承者，爭做有信仰、有擔(dān)當、有情懷、有氣節(jié)的好黨員、好干部。

——有信仰，咬定青山不放松。強衛(wèi)指出，激活紅色基因，首要的就是激活我們黨這種與生俱來的理想主義情懷，也就是為共產(chǎn)主義而奮斗終生。我們開展教育實踐活動、實施“三大工程”，最需要解決的就是理想信念問題。

——有擔(dān)當，敢教日月?lián)Q新天。強衛(wèi)指出，中國共產(chǎn)黨是敢于擔(dān)當?shù)鸟R克思主義政黨，堅持原則、敢于擔(dān)當是共產(chǎn)黨員的鮮明品格。傳承紅色基因，就應(yīng)該向先輩先烈那樣，把黨和人民的事業(yè)，當作一份沉甸甸的責(zé)任，不怕困難、不懼風(fēng)險，知難而進、迎難而上。

——有情懷，俯首甘為孺子牛。強衛(wèi)指出，全心全意為人民服務(wù)是黨的根本宗旨。我們黨來自人民、植根人民、以服務(wù)人民為最大追求。我們要時刻牢記，人民群眾對美好生活的向往就是我們的奮斗目標，用實效贏得群眾信任，用實干為群眾謀利益。

——有氣節(jié)，只留清白在人間。強衛(wèi)指出，清正廉潔是共產(chǎn)黨人的政治本色，也是黨員干部應(yīng)該堅守的人生底線。我們黨之所以能夠由弱到強，我們的事業(yè)之所以能夠發(fā)展壯大，很重要的就是廉潔奉公的紅色基因起作用。

強衛(wèi)書記講話精彩摘錄

●就像一個人體內(nèi)流淌的有A型血、B型血、O型血一樣，我們黨的肌體中流淌的就是科學(xué)、為民、無私、高尚的“先進血液”。

●小平同志曾說過：“過去我們黨無論怎樣弱小，無論遇到什么困難，一直有強大的戰(zhàn)斗力，因為我們有馬克思列寧主義和共產(chǎn)主義的信念。有了共同的理想，也就有了鐵的紀律。無論過去、現(xiàn)在和將來，這都是我們的真正優(yōu)勢?！边@段話，確確實實道出了我們黨走向勝利的“達芬奇密碼”。

●過去，我們靠鐵的紀律打敗了敵人。新的歷史條件下，更要上下同心、步調(diào)一致、統(tǒng)一行動，使我們黨成為一支“鐵軍”，使組織的力量倍增。唯有如此，才能更好地帶領(lǐng)人民群眾前進，完成“兩個一百年”目標、實現(xiàn)民族復(fù)興中國夢。●只有激活紅色基因，才能增強體內(nèi)抗體，防止基因變異，減少被感染幾率，從根本上保證黨的思想純潔、組織純潔、作風(fēng)純潔。

●我們決不能刮一陣風(fēng)、搞運動，三天打魚兩天曬網(wǎng)，集中抓的時候雷霆萬鈞，平時放任自流，而是要經(jīng)常抓、抓經(jīng)常，把已經(jīng)采取的措施、形成的機制扎根落地，做到有章必循、違規(guī)必究，把服務(wù)群眾工作堅持不懈抓下去。

●要更加耐心和細心，把群眾的委屈當作家人的委屈來傾聽，把群眾的難事當作家事來辦，對群眾的普遍愿望和合理訴求，明確工作責(zé)任、整改時限，不推諉、不拖延、不畏難，抓鐵留痕，務(wù)求必成，讓群眾真正感到蘇區(qū)干部好作風(fēng)又回來了。

●在我們黨的90多年歷史中，一代代共產(chǎn)黨人前赴后繼、勇往直前，為的就是心中那永不磨滅的信仰。越是困難時期、越是面臨考驗，他們的革命信念越執(zhí)著，革命意志越堅定，即使犧牲生命也在所不惜，這種精神就是我們黨最寶貴的紅色基因。

●我們共產(chǎn)黨員的干部，是官又不是官。說是官，因為我們擔(dān)負一定職責(zé)權(quán)力；說不是官，是因為我們除了好好地為人民服務(wù)之外，沒有任何特權(quán)。

講話脈絡(luò)

總書記指出，要讓紅色基因代代相傳

前不久，總書記在新疆軍區(qū)某紅軍師考察工作時指出，要把紅色基因融入官兵血脈，讓紅色基因代代相傳?？倳涥P(guān)于紅色基因的重要論述，給我們以深刻的啟迪和教誨。

江西紅色基因是中國共產(chǎn)黨革命精神的源頭

江西作為著名的革命老區(qū)，為中國革命勝利作出了重大貢獻，在中國共產(chǎn)黨歷史上具有重要地位。在艱苦卓絕的革命斗爭中，這片紅土地上產(chǎn)生了偉大的井岡山精神、蘇區(qū)精神和蘇區(qū)干部好作風(fēng)等一系列寶貴的精神財富，為我們黨孕育和發(fā)展紅色基因作出了突出貢獻。黨和國家的一系列偉大精神都傳承了江西紅土地上的紅色基因并賦予了新的時代內(nèi)涵，成為我們黨的寶貴精神財富。江西紅色基因，是中國共產(chǎn)黨革命精神的源頭。

江西紅色基因基本內(nèi)涵

信念堅定，紀律嚴明。信念堅定是共產(chǎn)黨人的政治靈魂，紀律嚴明是共產(chǎn)黨人的高度自覺。

對黨忠誠，一心為民。永遠忠誠黨、忠誠人民，忠誠共產(chǎn)主義事業(yè)，是共產(chǎn)黨人的政治本色。群眾路線是黨的生命線和根本工作路線。

艱苦奮斗，勇于犧牲。一不怕苦、二不怕死的革命精神，是共產(chǎn)黨人獨有的標識，鑄就了我們的黨魂和軍魂。

實事求是，勇闖新路。一切從實際出發(fā)，是馬克思主義的精髓，也是共產(chǎn)黨人不斷取得勝利的法寶。

清正廉潔，無私奉獻。清廉與奉獻，是共產(chǎn)黨人應(yīng)有的政治品格，是黨的先進性和純潔性的重要體現(xiàn)。

新時代需要激活紅色基因

激活紅色基因，就是要把黨的光榮傳統(tǒng)、優(yōu)良作風(fēng)，與我們正在進行的奮斗相結(jié)合，讓黨的寶貴精神財富彰顯出新的時代價值。當前，我們黨所處的歷史方位發(fā)生了重大變化，擔(dān)負的歷史任務(wù)無比繁重，面臨的歷史考驗更加嚴峻。黨提高戰(zhàn)斗力、增強免疫力、強化創(chuàng)新力，順利完成好時代賦予的使命，不負人民的重托，就必須激活紅色基因，努力把自身鍛造成為團結(jié)和諧、富有活力、勇于進取、敢于擔(dān)當?shù)膱詮娂w。

三大工程是我省激活紅色基因的具體抓手

省委作出決定，在全省開展“連心、強基、模范”三大工程，這是我省深入推進第二批活動、激活紅色基因的具體抓手。主要目的就是激活紅色基因，讓黨的光榮傳統(tǒng)接力傳遞下去，使廣大黨員干部始終滿懷激情、滿懷信心、滿懷斗志，始終昂揚向上、奮發(fā)有為、一往無前，永葆為民務(wù)實清廉的價值追求。爭做紅色基因的傳承者 爭做“四有”好黨員好干部

紅土地孕育了紅色基因，江西人的血液里流淌著紅色基因。我們不僅要為擁有光榮革命傳統(tǒng)而驕傲自豪，更要為傳承、弘揚紅色基因而不懈努力。全省各級黨員干部以焦裕祿、龔全珍等先進模范人物為標桿，自覺參與到“連心、強基、模范”三大工程中來，爭做紅色基因的傳承者，爭做有信仰、有擔(dān)當、有情懷、有氣節(jié)的好黨員、好干部。

精彩觀點

黨的肌體中流淌著“先進血液”

正是因為自身的先進性，紅色基因從我們黨誕生起就植根于黨的肌體中。這就從本質(zhì)上規(guī)定了我們黨是中國共產(chǎn)黨，而不是其他什么政黨；黨領(lǐng)導(dǎo)的軍隊是人民軍隊，而不是其他什么性質(zhì)的軍隊。就像一個人體內(nèi)流淌的有A型血、B型血、O型血一樣，我們黨的肌體中流淌的就是科學(xué)、為民、無私、高尚的“先進血液”。

讓黨的寶貴精神財富彰顯出新的時代價值

大家知道，生物學(xué)意義上的激活基因，是指通過改變基因排序等技術(shù)手段，優(yōu)化生物原有的遺傳特性，使之煥發(fā)出新的活力。同樣，激活紅色基因，就是要把黨的光榮傳統(tǒng)、優(yōu)良作風(fēng)，與我們正在進行的奮斗相結(jié)合，讓黨的寶貴精神財富彰顯出新的時代價值。

新時期更要建設(shè)“鐵軍”

“加強紀律性，革命無不勝。”過去，我們靠鐵的紀律打敗了敵人。新的歷史條件下，更要上下同心、步調(diào)一致、統(tǒng)一行動，使我們黨成為一支“鐵軍”，使組織的力量倍增。唯有如此，才能更好地帶領(lǐng)人民群眾前進，完成“兩個一百年”目標、實現(xiàn)民族復(fù)興中國夢。

思想政治教育活動純潔了黨

激活紅色基因，我們黨有許多行之有效的成功經(jīng)驗，其中重要的一條就是高度重視思想政治教育。從井岡山斗爭時期到延安時期，從建國之初的社會主義建設(shè)時期到十一屆三中全會以來的改革開放時期，我們黨總是結(jié)合實際需要開展思想政治教育，純潔黨的肌體，凈化黨的隊伍，努力保持黨的先進性和純潔性。做群眾工作不能三天打魚兩天曬網(wǎng)

以前有句順口溜，“雷鋒叔叔沒戶口，三月來了四月走?！边@是群眾對運動式工作方法的諷刺。我們決不能刮一陣風(fēng)、搞運動，三天打魚兩天曬網(wǎng)，集中抓的時候雷霆萬鈞，平時放任自流，而是要經(jīng)常抓、抓經(jīng)常，把已經(jīng)采取的措施、形成的機制扎根落地，做到有章必循、違規(guī)必究，把服務(wù)群眾工作堅持不懈抓下去。

把群眾的難事當作家事來辦

要更加耐心和細心，把群眾的委屈當作家人的委屈來傾聽，把群眾的難事當作家事來辦，對群眾的普遍愿望和合理訴求，明確工作責(zé)任、整改時限，不推諉、不拖延、不畏難，抓鐵留痕，務(wù)求必成，讓群眾真正感到蘇區(qū)干部好作風(fēng)又回來了。

組織力是社會主義最大優(yōu)越性的根本保障

社會主義的最大優(yōu)越性是集中力量辦大事，也是因為我們形成了從上到下的組織體系，只要黨有號召，各級層層動員，基層立即行動，凝聚了攻堅克難的磅礴力量。所以說，高度重視基層，著力打牢根基，始終是我們黨的一條寶貴經(jīng)驗。像央視評選“十大感動人物”那樣評選“龔全珍式好干部”

要面向全省集中推選一批“龔全珍式好干部”，注意廣泛發(fā)動群眾參與，讓群眾來推舉、鑒別、評判，就像中央電視臺評選“十大感動人物”、“最美人物”那樣，使推出的典型為群眾所公認，具有廣泛而深厚的群眾基礎(chǔ)。

立志做大事，而不是立志做大官

要志存高遠，胸懷大局，以“天下興亡、匹夫有責(zé)”的無私情懷，立志做大事，而不是立志做大官，把全部心思用在黨的事業(yè)上，用在為民造福上。特別是在黨和人民需要的關(guān)鍵時刻，要豁得出來、頂?shù)蒙先?，真正成為帶領(lǐng)人民群眾戰(zhàn)風(fēng)險、渡難關(guān)的主心骨，用實際行動展現(xiàn)對黨的信仰、對人民的忠誠。

把自己擺進去學(xué)習(xí)先進

我過去多次觀看電影《焦裕祿》，最近省四套班子成員又集中看了一遍，每一次看感受都不一樣。過去看的時候，更多的是為他的高尚品格所感動，感到他是個好人、好官。現(xiàn)在作為領(lǐng)導(dǎo)干部看的時候，我把自己擺進去，一一對照焦裕祿的言行、舉止，對照焦裕祿的事跡和精神體會更深了，尤其是焦裕祿把改變蘭考的責(zé)任擔(dān)在肩上，對我們從政為官者有很深的教育和啟發(fā)。

群眾滿意是衡量一切工作的最高標準

常有干部說，我們一天忙到晚，花了很多精力、干了很多事，可是群眾還是不滿意。為什么？我想，這里有一個標準問題。我們講自己多累多辛苦、干了多少工作，這是自我標準，不是群眾標準，群眾滿意才是衡量一切工作的最高標準。當人民的“勤務(wù)員” 做百姓的“遮陽傘”

我們要時刻牢記，人民群眾對美好生活的向往就是我們的奮斗目標，我們要俯下身子去當人民的“勤務(wù)員”，張開雙臂去做百姓的“遮陽傘”，用實效贏得群眾信任，用實干為群眾謀利益。

共產(chǎn)黨員理應(yīng)成為頂天立地的大丈夫

現(xiàn)在，黨員干部面臨的誘惑確實多了，能不能做到“敵軍圍困千萬重，我自巋然不動”，是對我們思想品格、人生境界的考驗。孟子說，“富貴不能淫，貧賤不能移，威武不能屈，此之謂大丈夫?！蔽覀児伯a(chǎn)黨員理應(yīng)成為這種頂天立地的大丈夫。

在廉潔從政中收獲健康、感受快樂、體驗幸福

每個黨員干部都要捫心自問，我們的所作所為是否對得起廉潔政府的稱號？是否對得起人民的信任和重托？全省上下一定要牢記，為政清廉才能取信于民，秉公用權(quán)才能贏得民心。在任何時候、任何情況下，都要以黨的事業(yè)為重、人民利益為先，做到秉公用權(quán)、公私分明、公而忘私、大公無私，在廉潔從政中收獲健康、感受快樂、體驗幸福。（本報記者 劉 勇整理）

第四篇：《新陳代謝與酶》教案（精選）

《新陳代謝與酶》教案

一、教學(xué)目標(一)知識教學(xué)目標

1．理解新陳代謝、同化作用、異化作用的概念及其相互關(guān)系。2．理解酶在新陳代謝中的作用，掌握酶的作用特性。

3．理解ATP在新陳代謝中的作用以及ATP的分子結(jié)構(gòu)簡式，初步掌握ATP與ADP之間的相互轉(zhuǎn)變關(guān)系。(二)能力培養(yǎng)目標

1．通過同化作用與異化作用及物質(zhì)代謝與能量代謝相互關(guān)系的學(xué)習(xí)，學(xué)生能進行辯證思維。

2．通過教材中的實驗演示，學(xué)生的觀察分析能力能得以提高

3．通過課后練習(xí)溫度等對酶催化作用的影響的實驗設(shè)計，學(xué)生的創(chuàng)新思維能力得到培養(yǎng)。

4．通過對酶的催化演示實驗的學(xué)習(xí)，學(xué)生掌握對比實驗法；通過酶與化學(xué)催化劑，ATP、ADP轉(zhuǎn)變與化學(xué)上的可逆反應(yīng)的比較分析，學(xué)生會使用比較分析的學(xué)習(xí)方法。(三)德育滲透目標

結(jié)合對新陳代謝概念的學(xué)習(xí)，加深對生命本質(zhì)的科學(xué)認識，學(xué)生得到辯證唯物主義思想的教育。

二、教材分析與學(xué)情分析

1．重點

(1)理解新陳代謝是生命物體特有的運動形式，是生物的基本特征。

(2)理解并初步掌握酶、ATP與新陳代謝的重要關(guān)系。

2．難點

(1)同化作用與異化作用之間的相互轉(zhuǎn)變。

(2)ATP與ADP之間的相互轉(zhuǎn)變。

3．學(xué)生可能的疑點

(1)新陳代謝有別于其它的物理、化學(xué)等運動形式。

(2)ATP與ADP相互轉(zhuǎn)變的“可逆性”

4．解決辦法

(1)由于學(xué)生在初中階段已經(jīng)學(xué)習(xí)過新陳代謝的概念，但是就理解而言，并不深入，因此，在組織本節(jié)內(nèi)容的學(xué)習(xí)時，應(yīng)把生物體所特有的運動形式與非生物體的運動形式進行對比思考，重點理解“新”與“陳”的代謝是生物體的自我更新；對代謝的概念還應(yīng)由宏觀性代謝過程的描述轉(zhuǎn)向微觀化學(xué)反應(yīng)的認識上。

(2)通過ATP與ADP的“可逆性”轉(zhuǎn)變與化學(xué)上可逆性反應(yīng)的比較分析，促進學(xué)生發(fā)現(xiàn)這兩個“可逆性”的差異。

三、課時安排：1課時。

四、教學(xué)方法：自學(xué)輔導(dǎo)法。

五、教具準備：小麥淀粉催化作用的演示實驗。

六、學(xué)生活動設(shè)計 1．由于高中學(xué)生已有一定的學(xué)習(xí)能力，又由于新陳代謝概念、酶這兩個知識點在初中學(xué)習(xí)過，所以引入后首先讓學(xué)生結(jié)合提問進行自學(xué)。

2．由于知識的學(xué)習(xí)是一個新舊知識的雙向建構(gòu)過程，故在各知識點教學(xué)中要求學(xué)生列舉以前學(xué)習(xí)過的知識來學(xué)習(xí)和建構(gòu)新內(nèi)容。

3．由于在初中生理衛(wèi)生學(xué)習(xí)中學(xué)生已做過唾液淀粉酶的實驗，要求學(xué)生運用已有知識設(shè)計溫度對酶催化活性影響的實驗。

4．結(jié)合本節(jié)內(nèi)容的課堂練習(xí)再進行反饋性校正。

七、教學(xué)過程

(一)導(dǎo)入新課

[導(dǎo)言] 通過高中生物緒論的學(xué)習(xí)，我們已經(jīng)知道生物區(qū)別于非生物最本質(zhì)的特征是新陳代謝，它是生物體進行一切生命活動的基礎(chǔ)。從本節(jié)內(nèi)容開始，我們將學(xué)習(xí)關(guān)于新陳代謝的有關(guān)知識。由于新陳代謝過程比較復(fù)雜，在學(xué)習(xí)具體的代謝過程之前，我們首先要學(xué)習(xí)與新陳代謝過程緊密相關(guān)的幾個問題，這就是我們本節(jié)課要學(xué)習(xí)的內(nèi)容。

[副板書]通過本節(jié)內(nèi)容的學(xué)習(xí)，我們要達到的學(xué)習(xí)目標是：(板書在黑板右側(cè)：)

1．理解新陳代謝的概念及其基本類型；

2．理解酶的概念并掌握酶的作用特性；

3．識記ATP的分子簡式，理解ATP與新陳代謝間的重要關(guān)系。

[ 導(dǎo)學(xué)與提問] 本節(jié)內(nèi)容主要講述了三個問題：一是新陳代謝的概念，二是新陳代謝與酶，三是新陳代謝與ATP，一共三個大問題。下面請同學(xué)們首先看書，找找關(guān)鍵語句，看看它們之間有何內(nèi)在聯(lián)系？

(二)中心授課

[學(xué)生自學(xué)與討論] 10分鐘。

[師生合作] 針對上述提問進行抽查，了解學(xué)生自學(xué)與討論的結(jié)果。對學(xué)生回答的結(jié)論經(jīng)簡短評價后將本節(jié)的知識框架邊講述邊板書：新陳代謝包括生物體內(nèi)的全部化學(xué)反應(yīng)，而眾多化學(xué)反應(yīng)能順利而迅速地進行，一是因為有酶的催化，二是因為有源源不斷的能量供應(yīng)。

[板書] 1．新陳代謝的概念及分類

[復(fù) 述]什么是新陳代謝？新陳代謝是指生物體在生命活動過程中不斷地與外界環(huán)境進行物質(zhì)和能量的交換，以及生物體內(nèi)物質(zhì)和能量的轉(zhuǎn)化過程。

[設(shè)問]名之曰新陳代謝，何謂“新”何謂“陳”？

[講 述]生物體在新陳代謝的過程中，從外界環(huán)境攝取營養(yǎng)物質(zhì)，合成自身的組成物質(zhì)、貯存能量；同時，生物體分解自身組成物質(zhì)、釋放能量，將代謝終產(chǎn)物排出體外、散失能量。其中，合成自身的“組成物質(zhì)、貯存能量”，謂之“新”；分解自身“組成物質(zhì)、釋放能量”，謂之“陳”。生命運動的本質(zhì)就是生物體的自我更新。據(jù)估計，人體內(nèi)的組成物質(zhì)平均每80天就有一半被分解，其中組成肺、骨骼和大部分肌肉的蛋白質(zhì)的壽命約為185天，而組成肝臟、血漿的蛋白質(zhì)的壽命更短，只有10天左右。生物體只有不斷地與周圍環(huán)境進行物質(zhì)和能量交換，不斷地進行新物質(zhì)的合成和能量的貯存，不斷地進行舊物質(zhì)的分解和能量的釋放，才能延續(xù)生命?？茖W(xué)家們應(yīng)用示蹤元素測知，人體內(nèi)約有98％的物質(zhì)每年被新的物質(zhì)所代替，一年之內(nèi)，幾乎全部更新。由此可見，生命運動區(qū)別于非生命運動最本質(zhì)的特征就是生物體的自我更新。也正是自我更新，生物獲得了維持生命活動所需要的物質(zhì)和能量。提問？新陳代謝都有哪些分類？它們是怎樣劃分的？ [學(xué)生回答]略。[難點突破](1)同化作用與異化作用

從上述圖中可以發(fā)現(xiàn)，同化作用與異化作用看似矛盾的兩個過程，實際上它們之間并不是物質(zhì)與能量的簡單進與出，而是在相互聯(lián)系又同時進行的過程中，不斷地進行著的生物“新”與“舊”的循環(huán)更新，是生命特有的運動形式。(2)物質(zhì)代謝與能量代謝

物質(zhì)代謝和能量代謝是新陳代謝過程中的不可分割的兩個內(nèi)容，物質(zhì)代謝總是伴隨有能量代謝，這是因為物質(zhì)分子中貯存有化學(xué)能，物質(zhì)在發(fā)生化學(xué)變化時，總有能量的變化。所以沒有孤立的物質(zhì)代謝，更沒有孤立的能量代謝。知識點間銜接：我們已學(xué)習(xí)了新陳代謝的宏觀過程，然而，如果著眼于新陳代謝的微觀環(huán)節(jié)，代謝過程實際上是由許許多多的化學(xué)反應(yīng)組成的，新陳代謝則是生物體內(nèi)所有化學(xué)反應(yīng)的總稱。這么多的化學(xué)反應(yīng)之所以能在常溫常壓下順利而迅速地進行，是因為生物體內(nèi)有酶的催化。[板書] 2．新陳代謝與酶(1)酶是生物催化劑

[提 問]什么是酶？

[復(fù) 述]酶是活細胞產(chǎn)生的具催化能力的一類特殊蛋白質(zhì)。將酶的概念進行分析可得：

酶的來源(活細胞產(chǎn)生)、酶的功能(催化作用)、酶的化學(xué)本質(zhì)(一種特殊蛋白質(zhì))。演示實驗：演示完后再將結(jié)果填寫

[提問與分析] a．實驗中甲試管實驗結(jié)果證明：酶有催化作用。b．實驗中設(shè)計乙試管的作用是：對照作用。c．實驗中恒溫的原因是：酶催化需要適宜的溫度。

酶的催化活性除了受溫度的影響外，還受到酸堿度等條件的影響。

(2)酶的特性

[提 問]在化學(xué)上同學(xué)們也學(xué)習(xí)過催化劑，那么一般的催化劑都有哪些性質(zhì)呢？ [學(xué)生回答]用量少而催化效率高，反應(yīng)前后不發(fā)生變化，促進化學(xué)反應(yīng)迅速進行等。[講 述] 酶作為生物催化劑，除了具有上述一般催化劑的性質(zhì)外，還具有以下重要特性：

a．具有高效性：催化反應(yīng)的速度比一般的無機催化劑高106-107倍，有的酶催化反應(yīng)速度極快，如碳酸酐酶催化二氧化碳與水合成碳酸的反應(yīng)是已知最快的酶催化反應(yīng)之一。每一個酶分子在1秒鐘內(nèi)可以使105個二氧化碳分子發(fā)生水合反應(yīng)。b．具有專一性：一種酶只能作用于某一類或某一種特定的物質(zhì)使其發(fā)生反應(yīng)。如麥芽糖酶只能催化麥芽糖分解成葡萄糖，胃蛋白酶只能催化食物中蛋白質(zhì)的分解。c．酶的種類具有多樣性：酶的種類繁多，目前已知的約有2千多種。正是由于酶對反應(yīng)的專一性，成千上萬的化學(xué)反應(yīng)就需要許多的酶分別在各自代謝途徑的特定位置上發(fā)揮作用，保證新陳代謝有條不紊地進行。

歸納總結(jié)：每一種酶都具有高效性和專一性，從酶的家族整體上看呈現(xiàn)出多樣性。3．新陳代謝與ATP。

[導(dǎo)入新概念]新陳代謝順利進行除了需要酶的催化外，還需要能量源源不斷的供應(yīng)。如肌肉收縮、腺體分泌等都需要消耗能量。那么消耗的能量從哪里來？

[提 問]現(xiàn)在我們回憶一下，到目前為止，我們都學(xué)習(xí)過與能源相關(guān)的哪些內(nèi)容？ [學(xué)生列舉]糖類是生命活動的主要能源物質(zhì)，脂肪是生物體內(nèi)儲存能量的物質(zhì)等。將列舉的內(nèi)容寫在黑板的適當位置上。

[提 問]我們現(xiàn)在要學(xué)習(xí)的ATP也是能源物質(zhì)，與上述能源有何關(guān)系呢 [過渡語]下面我們先學(xué)習(xí)關(guān)于ATP的有關(guān)知識，然后再來回答這個問題。(1)ATP的分子簡式

全稱叫三磷酸腺苷，由于其分子較大，為便于書寫，人們根據(jù)其結(jié)構(gòu)進行簡寫，用A代表腺苷，T代表三個，P代表磷酸基，簡稱ATP。

ATP中大量的化學(xué)能就貯存在兩個高能磷酸鍵中。(2)ATP與ADP的相互轉(zhuǎn)變：

[講 述]復(fù)述ATP分解為ADP的過程，先用分子結(jié)構(gòu)簡式形象表示為：

其中釋放出的能量直接經(jīng)各種生命活動供能。反過來，在酶的作用下，ADP也可以吸收能量后與一個磷酸結(jié)合，合成ATP。其中吸收的能量來自呼吸作用即糖類、脂肪等有機物的氧化分解，對綠色植物來說，還來自光合作用即光能的吸收和轉(zhuǎn)換。二者間的相互轉(zhuǎn)變可表示為：

[回答前面的提問] ATP與其它能源物質(zhì)間的能量傳遞關(guān)系可用下圖表示：

[難點突破] ATP與ADP之間的相互轉(zhuǎn)變是有別于化學(xué)的可逆反應(yīng)。這是因為，在化學(xué)上講到的可逆反應(yīng)的特點是：正逆反應(yīng)都能在同一條件同一場所下同時進行，如NO2與N2O4在燒瓶內(nèi)的可逆反應(yīng)。而ATP與ADP的相互轉(zhuǎn)變，有以下幾點不同：

(1)正逆反應(yīng)需要的酶不同：合成反應(yīng)需要的是ATP合成酶，而分解反應(yīng)需要的是ATP水解酶。

(2)正逆反應(yīng)的場所不同：ATP的合成場所比較固定，如細胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體、葉綠體等，而分解場所卻是不穩(wěn)定的，因為ATP在細胞內(nèi)就象貨幣一樣是流動的，分解的場所較多。

(3)從能量代謝的角度上，ATP分解釋放出的能量絕不是合成ATP時的能量，這兩種能量無論從用途還是從來源上看都有很大的差別。所以，ATP與ADP的相互轉(zhuǎn)變看起來像可逆反應(yīng)，而實際上卻不是，二者的轉(zhuǎn)變只能表明在細胞中ATP與ADP是不斷循環(huán)的，保證了生命活動的正常進行。(三)結(jié)課

[總結(jié)]新陳代謝包括同化作用和異化作用兩個方面，兩個看似矛盾的過程中實際完成的是生物體的自我更新。新陳代謝從微觀上講是所有化學(xué)反應(yīng)的總和，它的順利進行需要酶的催化和ATP等能源物質(zhì)的參與。[反饋練習(xí)] 1．下列有關(guān)酶的敘述錯誤的是 [ ] A．酶在活細胞的核糖體上合成

B．每種酶都具有高效性、專一性，不具多樣性 C．酶的基本組成單位是氨基酸 D．酶都具有消化功能

2．下列關(guān)于新陳代謝的敘述，不正確的是 [ ] A．能量代謝是伴隨物質(zhì)代謝而進行的 B．有機物合成時貯存能量，分解時釋放能量 C．同化作用貯存ATP，異化作用釋放ATP D．同化作用、異化作用是不分先后，同時進行的 3．肌肉收縮時需要的能量直接來自 [ ] A．ATP B．糖類 C．光能 D．ADP 4．比照教材中小麥淀粉酶的催化實驗，設(shè)計一個說明溫度對酶的催化速度影響的實驗。

5．對照板書，梳理本節(jié)內(nèi)容的知識結(jié)構(gòu)。答案：1．(D)；2．(C)；3．(A)。

4．在教材實驗設(shè)計的基礎(chǔ)上增加與甲試管內(nèi)容相同的丙、丁兩支試管，將丙、丁分別放進冰水浴和沸水浴，然后再用碘液進行檢驗，觀察呈現(xiàn)的顏色和深度即可。

(四)板書設(shè)計

第二章 生物的新陳代謝

第一節(jié) 新陳代謝概述

一、新陳代謝的概念 1．概念

2．同化作用與異化作用的相互關(guān)系：相互依存，同時進行，組成了生物的自我循環(huán)更新

3．物質(zhì)代謝與能量代謝的相互關(guān)系：物質(zhì)的變化總是伴隨能量的變化

二、新陳代謝與酶 1．酶的概念

三、新陳代謝與ATP

八：參考資料

高能磷酸鍵：高能鍵是與低能鍵相對而言。在生物化學(xué)上一般把水解時自由能降超過20kj.mol-的鍵稱為高能鍵，如ATP的兩個高能磷酸鍵水解時，每個鍵可放出30kj.mol-，而ATP中的第一個普通磷酸鍵水解時釋放出的能量很少，可類比的數(shù)據(jù)(萄萄糖-6-磷酸)是13.8kj.mol-。高能磷酸鍵有很多類型，不同的高能鍵間水解時釋放的能量也有很大的差異，最高的如烯醇式磷氧鍵可達61.9mol-。(據(jù)《生物化學(xué)》沈同等編)

九：教學(xué)后記 本節(jié)課教學(xué)過程的設(shè)計思路： 本節(jié)內(nèi)容多，時間比較緊。對代謝概念的討論中要注意及時概括。在酶的教學(xué)中，課前要準備好演示實驗，盡可能節(jié)約時間，保證內(nèi)容的完整性。

第五篇：酶技術(shù)原理與應(yīng)用

酶法提取原理

摘要：簡要介紹了酶法提取的基本原理、特點及提取速率的影響因素，結(jié)合酶法在提取有效成分中的應(yīng)用實例和與其他技術(shù)的聯(lián)用，對酶法在中藥提取領(lǐng)域的前景進行展望。

關(guān)鍵詞：酶法；中藥提取；綜述

中藥是中華民族燦爛文明中一朵盛開的奇葩，有著幾千年的悠久歷史。中藥成分復(fù)雜且很多貴重有效成分含量很低，因此中藥開發(fā)中的關(guān)鍵工序即為如何有效地提取中藥中的有效成分。傳統(tǒng)提取方法如煎煮、回流、浸漬、滲漉法，存在著周期長、工序多、提取率不高等缺點。酶作為一種生物催化劑，在中藥提取中，對中草藥細胞壁的有效成分進行分解破壞，從而降低傳質(zhì)阻力，提高提取率；可改變中藥目標產(chǎn)物的生理生化性能，優(yōu)化產(chǎn)物效用，并且酶法提取操作簡單，條件溫和，環(huán)保無毒，現(xiàn)已將其用于中藥提取過程。本文就酶法的提取技術(shù)及其應(yīng)用進展方面進行綜述。

1酶法提取的基本原理

大多數(shù)中藥為植物性草藥，中藥材中的有效成分多存在于植物細胞的細胞質(zhì)中。在中藥提取過程中，溶劑需要克服來自細胞壁及細胞間質(zhì)的傳質(zhì)阻力。細胞壁是由纖維素、半纖維素、果膠質(zhì)等物質(zhì)構(gòu)成的致密結(jié)構(gòu)，選用合適的酶(如纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶)對中藥材進行預(yù)處理，能分解構(gòu)成細胞壁的纖維素、半纖維素及果膠，從而破壞細胞壁的結(jié)構(gòu)，產(chǎn)生局部的坍塌、溶解、疏松，減少溶劑提取時來自細胞壁和細胞間質(zhì)的阻力，加快有效成分溶出細胞的速率，提高提取效率，縮短提取時間[1]。

而且，在中藥提取中酶法可作用于目標產(chǎn)物，改善目標產(chǎn)物的理化性質(zhì)，提高其在提取溶劑中的溶解度，減少溶劑的用量，降低成本；也可改善目標產(chǎn)物的生理生化功能，從而提高其效用。

2酶法提取的特點

2.1反應(yīng)條件溫和，產(chǎn)物不易變性

酶法提取主要采用酶破壞細胞壁結(jié)構(gòu)，具有反應(yīng)條件溫和、選擇性高的特點，而酶的專一性可避免對底物外物質(zhì)的破壞。在提取熱穩(wěn)定性差或含量較少的化學(xué)成分時，優(yōu)勢更為明顯。楊云龍等[2]用酶法提取洋蔥中黃酮類化合物，采用酶解法來處理洋蔥皮，避免了因高溫對黃酮類化合物結(jié)構(gòu)的破壞，提高了黃酮類化合物的提取率。

2.2提高提取率，縮短提取時間

酶法預(yù)處理減少了中藥材中有效成分的溶出及溶劑提取時的傳質(zhì)阻力，縮短了提取時間，提高了提取率，具有很大的應(yīng)用價值。張文森[3]使用復(fù)合酶法提取茉莉花中有效成分，相比較傳統(tǒng)的水提取，提取溫度由85～90℃降至50℃，提取時間由3h降至1h，提取率由55%～60%升至65%～70%。

2.3降低成本，環(huán)保節(jié)能

酶法是綠色高效的植物提取技術(shù)，可利用相關(guān)的酶制劑來提高提取物的極性，從而減少有機溶劑的使用，降低成本。

2.4優(yōu)化有效組分

酶法不僅可以應(yīng)用在中藥材的提取過程，也可對中藥提取物進行酶法處理，優(yōu)化有效組分，提高目標產(chǎn)物的藥用價值。肖連冬使用堿性蛋白酶對啤酒糟麥芽蛋白進行水解，在最佳酶解條件下，麥芽蛋白的起泡性、溶解性和乳化性分別達到167%、22.68%和13.8%，比未改性前的麥芽蛋白分別提高了735%、247%和27.8%。

[4]

2.5工藝簡單可行

酶法提取在原工藝條件上僅增加了1個操作單元，反應(yīng)條件溫和易獲得，不需要對原有工藝設(shè)備進行過多的改變，對反應(yīng)設(shè)備的要求較低，操作簡單。姚曉琳等

[5]在研究酶法提取柑橘黃酮時，與原有醇提工藝相比，僅在乙醇浸取提取步驟前增加了一個步驟——適量酶液酶解提取?？傸S酮提取率可達2.67±0.06%，提取率大幅提高。

3酶法提取的影響因素

3.1藥材顆粒度

為利于酶解，需對藥材進行預(yù)處理。如用粉碎機作預(yù)處理，粉碎顆粒越細，越易懸浮在酶解液中，增加有效面積而易被酶水解，加快水解速度。但粉碎過細，吸附作用過強，反而會影響擴散作用。因此通常在提取前適當粉碎，可提高酶解效率。

3.2提取溶劑

酶法提取的關(guān)鍵，是選擇適當?shù)娜軇?。溶劑選擇適當，就可以比較順利地將需要的成分提取出來，并且可溶解較多的有效成分。選擇溶劑主要注意以下3點：(1)溶劑對有效成分溶解度大，對雜質(zhì)溶解度?。?2)溶劑不能與中藥的成分起化學(xué)變化；(3)溶劑要經(jīng)濟、易得、使用安全等?，F(xiàn)在工業(yè)生產(chǎn)及實驗室主要采用水、乙醇等作為提取的溶劑。

3.3溫度及pH

溫度增高，分子運動加快，溶解、擴散速度也加快，有利于有效成分的提出，所以熱提常比冷提效率高。但溫度過高，有些有效成分被破壞，酶的活性降低，甚至失活，同時雜質(zhì)的溶出也增多。故一般加熱不超過60℃，最高不超過100℃。過高或過低的pH都會導(dǎo)致酶失活，pH不僅影響酶立體構(gòu)象，也影響底物解離狀態(tài)。在最適宜的pH下進行提取，效率最高。

3.4酶解時間

有效成分的提取率通常隨提取時間的延長而增加，直到藥材細胞內(nèi)外有效成分的濃度達到平衡為止。所以不必?zé)o限制地延長提取時間，一般用水加熱提取以每次0.5～1h為宜，用乙醇加熱提取每次以1h為宜。

3.5酶的用量

隨著酶的濃度的升高，與底物的接觸面積增大，酶解反應(yīng)速率增大。但當酶的濃度達到過飽和時，底物濃度相對較低，酶與底物競爭，會對酶產(chǎn)生抑制作用，酶得不到充分利用，造成浪費。

4酶法提取在中藥領(lǐng)域的應(yīng)用實例

4.1酶法作用于植物細胞壁

植物細胞壁及細胞間質(zhì)中的纖維素、半纖維素、果膠等具有大分子結(jié)構(gòu)的物質(zhì)是中藥提取中傳質(zhì)的主要阻力來源。所以采用酶法提取，分解破壞植物細胞的細胞壁，多采用纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶。

(1)纖維素酶。纖維素是由β-D-葡萄糖以1,4-β葡萄糖苷鍵連接，用纖維素酶酶解可以破壞β-D-葡萄糖苷鍵，使細胞壁破壞，有利于對有效成分的提取。項雷文等[6]通過正交實驗法研究了纖維素酶法提取杭白菊中總黃酮的主要工藝參數(shù)(酶添加量、酶解時間、酶解溫度和pH)對總黃酮提取率的影響。得到纖維素酶法提取的最佳條件為：酶添加量0.5%、酶解時間2.5h、酶解溫度55℃、pH5.0，此條件下總黃酮提取率比對照組提高了19.2%。

(2)果膠酶。果膠酶是作用于果膠復(fù)合物的酶的總稱。果膠酶有兩種：果膠甲酯酶和多聚半乳糖醛酸酶。周向榮等[7]利用鹽漬藠頭提取其風(fēng)味物質(zhì)，考查了pH值、溫度、加熱時間、商品果膠酶添加量對鹽漬藠頭中蒜素提取效果的影響。在果膠酶同原料比為0.6%～1.2%，pH3.4、溫度50℃、提取時間2～4h的條件下，蒜素的提取率可達到較高水平(0.21～0.27g/100ML)，且出汁效果較好(90%～92%)，固形物含量較高(19.2～19.8Brix)，能較好地保持藠頭特有的香氣。

(3)半纖維素酶。戴瑜等[8]研究了半纖維素酶法提取杜仲葉中主要有效成分，即苯丙素類的綠原酸(CHA)，通過單因素試驗、正交試驗和方差分析確定了半纖維素酶法提取杜仲葉中綠原酸的最佳操作條件。結(jié)果表明：加入996U／g半纖維素酶0.45%、pH4.0、溫度40℃，得率最高可達38.01mg／g。

(4)復(fù)合酶。采用兩種或兩種以上的酶按一定比例進行組合，進行中藥提取，可以較大地加快提取速率，提高提取率。吳國卿等[9]研究了復(fù)合酶法提取野木瓜汁的工藝。以野木瓜為原料，采用復(fù)合酶法提取野木瓜汁。確定了果膠酶與纖維素酶的最佳添加比例為1︰6。復(fù)合酶提取野木瓜汁的最佳酶解工藝條件為：復(fù)合酶添加量1.0%，酶解溫度45℃，pH4.0，酶解時間2.5h，在此最佳條件下，野木瓜出汁率可達56.7%，比空白樣的出汁率13.7%高出43.0%。

4.2酶法作用于目標產(chǎn)物

對于有效成分中立體結(jié)構(gòu)大的物質(zhì)，可使用葡萄糖苷酶、轉(zhuǎn)苷酶、淀粉酶等進行分解糖苷鍵等，改變理化性質(zhì)，增大極性，減少有機溶劑的用量，降低成本，且改變生理生化性質(zhì)，提高效用。

(1)轉(zhuǎn)苷酶。許明淑等[10]在提取銀杏葉黃酮時，使用Suhong475轉(zhuǎn)苷酶和糖基配體對銀杏葉進行處理，提高黃酮苷元、黃酮苷的極性，進而在30%乙醇溶劑中提取。此時的提取率相當于60%乙醇提取條件下的提取率。郁軍等[11]使用淀粉酶和環(huán)糊精轉(zhuǎn)糖苷酶(cGTase)處理甜菊糖作用于甜菊糖苷，破壞了甜菊苷的結(jié)構(gòu)，與未用酶法處理過的甜菊糖相比較，有效地改善了甜菊糖的后苦味。

(2)葡萄糖苷酶。殷涌光等[12]從松針中提取松針黃酮，即8-葡萄糖苷酶松針總黃酮(PNF)，使用葡萄糖苷酶酶解PNF，酶解溫度40℃，酶添加量1／1000，底物質(zhì)量濃度0.6g／L，酶解時間5h，經(jīng)過修飾后的PNF對自由基清除率、羥基自由基清除率、超氧陰離子清除率及對鐵離子的還原能力都有明顯地提高。

(3)復(fù)合酶。兩種以上的酶的應(yīng)用，既可以對植物細胞壁進行作用，也可以對有效成分進行優(yōu)化。董捷等[13]在研究油菜花粉萌發(fā)孔通透性時采用了復(fù)合酶法中溫淀粉酶和復(fù)合纖維素酶的組合。結(jié)果表明：用中溫淀粉酶和復(fù)合纖維素酶處理花粉后，每克花粉上清液中可溶性糖含量最高可達到(0.365±0.017g)，與空白相比提高了53%。

5酶法提取技術(shù)與其他技術(shù)的聯(lián)用

某些中藥采用酶法提取時收率明顯提高，具有較大的應(yīng)用潛力，但該技術(shù)同時也存在著一定的局限性。酶法的最佳反應(yīng)條件需要嚴格控制，條件微小的波動，也有可能引起酶活性的大大下降。實驗中的酶有可能會與實驗中其他的化學(xué)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，會影響反應(yīng)速率和產(chǎn)物的純度。故實驗室或工業(yè)生產(chǎn)中，多采用酶法與其他技術(shù)的聯(lián)合進行中藥提取，可揚長補短，發(fā)揮協(xié)同作用，提高有效成分的提取效率。

5.1酶法協(xié)同超聲波

趙玉等[14]采用復(fù)合酶法協(xié)同超聲波提取南瓜水溶性多糖，試驗將兩種獨立的提取方法進行協(xié)同作用，考察協(xié)同作用對提取效果的影響，并與單一超聲波法、復(fù)合酶解法相比較。原料經(jīng)復(fù)合酶酶解處理，超聲10min后，多糖提取率為25.94%，提取率明顯高于單一使用超聲波、復(fù)合酶法的提取。

5.2酶法協(xié)同超高壓提取

超聲波在使用時，在破碎細胞的同時，會引起溫度急劇上升，費用較高。而超高壓提取可在低溫條件下應(yīng)用，不會引起溫度的劇烈變化，不會引起酶的活性降低，在熱敏物質(zhì)的提取中應(yīng)用將會更為廣泛。奚海燕等[15]在超高壓輔助酶法提取大米蛋白的研究中，首先在400MPa下對大米進行預(yù)處理，后加堿性蛋白酶量1.4%，溫度58℃，pH8.3，時間4h及液固比9︰1進行處理，大米蛋白質(zhì)的提取率為78.72%，而只用堿性蛋白酶進行處理的提取率為70%，提取率提高顯著。

5.3酶法協(xié)同微波提取

與傳統(tǒng)的溶劑提取法相比，微波法批處理量較大，萃取效率高、省時，而且選擇性較好，可提高萃取效率和產(chǎn)品純度。王文平等[16]首次采用微波輔助酶法提取薏苡仁粗多糖，并對提取工藝進行了探討。在單因素試驗的基礎(chǔ)上，采用正交試驗優(yōu)化其工藝，得到的最佳提取工藝為：微波功率560W，料液比1︰30，提取時間4min，提取得率達22.61%。

6酶法提取技術(shù)的應(yīng)用前景

酶法強化中藥提取由于反應(yīng)特異性強、條件溫和易獲得、提取時間短、提取率高、綠色節(jié)能等已引起廣泛的關(guān)注，必將成為中藥開發(fā)的重要手段，具有較大的應(yīng)用潛力，且隨著對酶法技術(shù)的不斷研究，酶法與其他技術(shù)如超聲波、超高壓、微波等技術(shù)的聯(lián)用也將成為中藥提取的另一個熱點研究方向