第一篇:IP核設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
一、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
1)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一 波形發(fā)生器與頻率計(jì)設(shè)計(jì)
? 功能要求:
基本要求
1)使用Digilent Basys 開發(fā)板可輸出2KHZ正弦波信號(hào)(仿真),2)輸出正弦波信號(hào)的同時(shí),可輸出同頻方波信號(hào),并用示波器驗(yàn)證。
3)可對(duì)該信號(hào)進(jìn)行計(jì)數(shù),并在Digilent Basys 開發(fā)板上顯示頻率計(jì)數(shù)結(jié)果(精確到Hz)。發(fā)揮部分
1)可通過(guò)撥碼或按鍵輸入指定所生成輸出信號(hào)的頻率; 2)增加輸出波形的路數(shù)(各路之間可手動(dòng)設(shè)置同步關(guān)系); 3)實(shí)現(xiàn)輸出信號(hào)的DA轉(zhuǎn)換(附加必要外圍電路); 4)增加輸出波形的種類(如三角波、鋸齒波等)。5)幅度可調(diào);
6)輸出信號(hào)類型、頻率、幅度的手動(dòng)設(shè)置輸入控制;
7)可測(cè)量外部輸入到Digilent Basys 開發(fā)板允許的電壓信號(hào)的頻率(注意校驗(yàn)信號(hào)幅度峰值<3.3V與注意共地與連接關(guān)系?。?,并在Digilent Basys 開發(fā)板上顯示頻率計(jì)數(shù)結(jié)果。
8)利用Digilent Basys 開發(fā)板VGA輸出接口實(shí)現(xiàn)波形發(fā)生器與頻率計(jì)用戶界面。9)增加輸入計(jì)數(shù)信號(hào)波形的路數(shù);
10)提高所設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)的波形發(fā)生器與頻率計(jì)的量程與精度; 11)用戶自定義波形的輸入與產(chǎn)生 12)其他功能與性能。? 設(shè)計(jì)步驟與要求:
1)簡(jiǎn)要說(shuō)明所實(shí)現(xiàn)系統(tǒng)的基本原理。
2)在Xilinx ISE13.1 軟件中,編寫輸入所設(shè)計(jì)的源程序文件。3)對(duì)源程序進(jìn)行編譯及仿真分析(注意合理設(shè)置,以便能夠在驗(yàn)證邏輯的基礎(chǔ)上盡快得出仿真結(jié)果)。
4)輸入管腳約束文件,對(duì)設(shè)計(jì)項(xiàng)目進(jìn)行編譯與邏輯綜合,生成下載所需.bit類型文件。
5)在Basys2實(shí)驗(yàn)板上下載所生成的.bit文件,觀察驗(yàn)證所設(shè)計(jì)的電路功能。
2)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目二 電子琴與記譜器設(shè)計(jì)
? 功能要求:要求設(shè)計(jì)并實(shí)現(xiàn)能夠通過(guò)按鍵及撥碼開關(guān)設(shè)置實(shí)現(xiàn)電子琴?gòu)椬?、?lè)曲自動(dòng)演奏及簡(jiǎn)單樂(lè)曲的記譜功能?;疽?/p>
1)使用Digilent Basys 開發(fā)板按鍵及撥碼開關(guān)設(shè)置實(shí)現(xiàn)中音“1,2,3,4,5,6,7”的彈奏產(chǎn)生。
2)實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)達(dá)1分鐘非重復(fù)樂(lè)曲的自動(dòng)演奏。
3)實(shí)現(xiàn)對(duì)用戶彈奏樂(lè)曲(<1分鐘)的記錄及回放功能
4)實(shí)現(xiàn)輸出信號(hào)的DA轉(zhuǎn)換并通過(guò)喇叭或蜂鳴器輸出(附加必要外圍電路); 5)實(shí)現(xiàn)輸出樂(lè)音的即時(shí)顯示(數(shù)碼管方式)發(fā)揮部分
1)可通過(guò)撥碼或按鍵配置實(shí)現(xiàn)低音到中音直至高音的變化; 2)實(shí)現(xiàn)不同音色的樂(lè)音輸出
3)增加多路樂(lè)音的同時(shí)輸出(各路之間可手動(dòng)設(shè)置同步關(guān)系(同步或非同步),節(jié)拍器等);
4)幅度可調(diào);
5)輸出樂(lè)音音階、幅度及音色的手動(dòng)設(shè)置輸入控制;
6)利用Digilent Basys 開發(fā)板VGA輸出接口實(shí)現(xiàn)波形發(fā)生器與頻率計(jì)用戶界面。7)實(shí)現(xiàn)對(duì)外界喇叭播放樂(lè)聲的識(shí)別、記錄及回放。8)其他功能與性能。? 設(shè)計(jì)步驟與要求:
1)簡(jiǎn)要說(shuō)明所實(shí)現(xiàn)系統(tǒng)的基本原理。
2)在Xilinx ISE13.1 軟件中,編寫輸入所設(shè)計(jì)的源程序文件。3)對(duì)源程序進(jìn)行編譯及仿真分析(注意合理設(shè)置,以便能夠在驗(yàn)證邏輯的基礎(chǔ)上盡快得出仿真結(jié)果)。
4)輸入管腳約束文件,對(duì)設(shè)計(jì)項(xiàng)目進(jìn)行編譯與邏輯綜合,生成下載所需.bit類型文件。
5)在Basys2實(shí)驗(yàn)板上下載所生成的.bit文件,觀察驗(yàn)證所設(shè)計(jì)的電路功能。
3)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目三 簡(jiǎn)單計(jì)算器設(shè)計(jì)
? 功能要求:要求設(shè)計(jì)并實(shí)現(xiàn)能夠通過(guò)按鍵及撥碼開關(guān)設(shè)置實(shí)現(xiàn)的2位十進(jìn)制數(shù)字計(jì)算器。其中數(shù)字以數(shù)碼管顯示,2位十進(jìn)制操作數(shù)以撥碼開關(guān)輸入,符號(hào)位和計(jì)算符按鍵開關(guān)輸入?;疽?/p>
1)實(shí)現(xiàn)2位十進(jìn)制數(shù)字的可帶符號(hào)的加、減、乘、除計(jì)算,除法計(jì)算結(jié)果以商及余數(shù)方式呈現(xiàn)。發(fā)揮部分
1)利用Digilent Basys 開發(fā)板VGA輸出接口實(shí)現(xiàn)計(jì)算器顯示界面。2)利用Digilent Basys 開發(fā)板PS2接口實(shí)現(xiàn)數(shù)字輸入界面。3)實(shí)現(xiàn)浮點(diǎn)計(jì)算功能。
4)實(shí)現(xiàn)平方根、三角函數(shù)、指數(shù)函數(shù)等拓展計(jì)算。
5)利用擴(kuò)展語(yǔ)音模塊實(shí)現(xiàn)計(jì)算器輸入級(jí)輸出結(jié)果播報(bào)。6)設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)以計(jì)算器為基礎(chǔ)游戲。7)其他功能與性能。? 設(shè)計(jì)步驟與要求:
1)簡(jiǎn)要說(shuō)明所實(shí)現(xiàn)系統(tǒng)的基本原理。
2)在Xilinx ISE13.1 軟件中,編寫輸入所設(shè)計(jì)的源程序文件。3)對(duì)源程序進(jìn)行編譯及仿真分析(注意合理設(shè)置,以便能夠在驗(yàn)證邏輯的基礎(chǔ)上盡快得出仿真結(jié)果)。
4)輸入管腳約束文件,對(duì)設(shè)計(jì)項(xiàng)目進(jìn)行編譯與邏輯綜合,生成下載所需.bit類型文件。
在Basys2實(shí)驗(yàn)板上下載所生成的.bit文件,觀察驗(yàn)證所設(shè)計(jì)的電路功能。
4)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目四 圖片的VGA顯示
? 功能要求:利用Basys2實(shí)驗(yàn)板實(shí)現(xiàn)圖片在VGA接口顯示器上的顯示?;疽?/p>
1)實(shí)現(xiàn)240*160以上像素的圖片在VGA接口顯示器上的顯示。
2)利用算法實(shí)現(xiàn)特定圖片在VGA接口顯示器上的放大、縮小旋轉(zhuǎn)及其他動(dòng)作的自動(dòng)變換。發(fā)揮部分
1)實(shí)現(xiàn)輸入數(shù)字在VGA接口顯示器上的顯示。2)設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)以VGA接口顯示器為基礎(chǔ)的簡(jiǎn)單游戲。
3)設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)以VGA接口顯示器及PS2鍵盤為基礎(chǔ)的打字游戲。4)其他功能與性能。? 設(shè)計(jì)步驟與要求:
1)簡(jiǎn)要說(shuō)明所實(shí)現(xiàn)系統(tǒng)的基本原理。
2)在Xilinx ISE13.1 軟件中,編寫輸入所設(shè)計(jì)的源程序文件。3)對(duì)源程序進(jìn)行編譯及仿真分析(注意合理設(shè)置,以便能夠在驗(yàn)證邏輯的基礎(chǔ)上盡快得出仿真結(jié)果)。
4)輸入管腳約束文件,對(duì)設(shè)計(jì)項(xiàng)目進(jìn)行編譯與邏輯綜合,生成下載所需.bit類型文件。
在Basys2實(shí)驗(yàn)板上下載所生成的.bit文件,觀察驗(yàn)證所設(shè)計(jì)的電路功能。
5)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目五 語(yǔ)音頻譜分析與處理
? 功能要求:利用Basys2實(shí)驗(yàn)板實(shí)現(xiàn)輸入信號(hào)的頻譜分析與濾波處理?;疽?/p>
1)利用擴(kuò)展AD模塊實(shí)現(xiàn)特定信號(hào)(BW<20KHz)的數(shù)字化輸入。2)利用FFT實(shí)現(xiàn)對(duì)信號(hào)的基波頻率的識(shí)別及頻譜成分的分析
3)設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)FIR濾波器并能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)于輸入信號(hào)的濾波處理(低通、高通、帶通、帶阻、移相)發(fā)揮部分
1)實(shí)現(xiàn)輸入信號(hào)波形在VGA接口顯示器上的顯示,同時(shí)顯示輸入信號(hào)波形的特征參數(shù)。
2)實(shí)現(xiàn)輸入信號(hào)波形在VGA接口顯示器上的顯示,同時(shí)顯示輸入信號(hào)頻譜的特征參數(shù)。
3)實(shí)現(xiàn)輸入信號(hào)波形與輸出信號(hào)波形在VGA接口顯示器上的對(duì)比顯示,同時(shí)顯示輸入、輸出信號(hào)波形的特征參數(shù)。
4)實(shí)現(xiàn)輸入信號(hào)波形與輸出信號(hào)波形在VGA接口顯示器上的對(duì)比顯示,同時(shí)顯示輸入、輸出信號(hào)頻譜的特征參數(shù)。
5)實(shí)現(xiàn)對(duì)于簡(jiǎn)單語(yǔ)音信號(hào)的識(shí)別處理(如對(duì)于播報(bào)電話號(hào)碼的識(shí)別,對(duì)于小車運(yùn)動(dòng)方向及速度控制指令的識(shí)別)
? 設(shè)計(jì)步驟與要求:
1)簡(jiǎn)要說(shuō)明所實(shí)現(xiàn)系統(tǒng)的基本原理。
2)在Xilinx ISE13.1 軟件中,編寫輸入所設(shè)計(jì)的源程序文件。3)對(duì)源程序進(jìn)行編譯及仿真分析(注意合理設(shè)置,以便能夠在驗(yàn)證邏輯的基礎(chǔ)上盡快得出仿真結(jié)果)。
4)輸入管腳約束文件,對(duì)設(shè)計(jì)項(xiàng)目進(jìn)行編譯與邏輯綜合,生成下載所需.bit類型文件。
在Basys2實(shí)驗(yàn)板上下載所生成的.bit文件,觀察驗(yàn)證所設(shè)計(jì)的電路功能。
二、注意事項(xiàng)
適當(dāng)設(shè)置仿真文件,使得能夠盡快得到仿真結(jié)果,同時(shí)能夠驗(yàn)證所設(shè)計(jì)系統(tǒng)的邏輯與時(shí)序的目的。
三、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求
按實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式要求,描述系統(tǒng)設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)要求,設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)原理,對(duì)于用層次化設(shè)計(jì)方法所設(shè)計(jì)的電路系統(tǒng),給出系統(tǒng)各模塊的連接關(guān)系圖;描述利用xilinx提供ip核生成目標(biāo)模塊的過(guò)程,給出源碼清單,測(cè)試文件清單,管腳定義文件清單,系統(tǒng)使用說(shuō)明,系統(tǒng)功能與性能測(cè)試結(jié)果,并簡(jiǎn)述系統(tǒng)設(shè)計(jì)開發(fā)步驟與過(guò)程,總結(jié)實(shí)驗(yàn)心得體會(huì)并提出意見建議。
第二篇:IP實(shí)驗(yàn)步驟基本實(shí)驗(yàn)步驟
IP實(shí)驗(yàn)步驟 基本實(shí)驗(yàn)步驟
(1)收獲細(xì)胞,加入適量細(xì)胞IP裂解緩沖液(含蛋白酶抑制劑),冰上或者4?裂解30min,12,000g離心30 min后取上清;(2)取少量裂解液以備Western blot分析,剩余裂解液將1μg相應(yīng)的抗體和10-50 μl protein A/G-beads加入到細(xì)胞裂解液,4?C緩慢搖晃孵育過(guò)夜;(3)免疫沉淀反應(yīng)后,在4?C 以3,000 g速度離心5 min,將protein A/G-beads離心至管底;將上清小心吸去,protein A/G-beads用1ml裂解緩沖液洗3,4次;最后加入15μl的2×SDS 加樣緩沖液,沸水煮10分鐘;(4)SDS-PAGE, Western blotting或進(jìn)行質(zhì)譜分析。
一、樣品處理: 免疫沉淀實(shí)驗(yàn)成功與否,第一步處理樣品非常關(guān)鍵。免疫沉淀實(shí)驗(yàn)本質(zhì)上是處于天然構(gòu)象狀態(tài)的抗原和抗體之間的反應(yīng),而樣品處理的質(zhì)量決定了抗原抗體反應(yīng)中的抗原的質(zhì)量,濃度以及抗原是否處于天然構(gòu)象狀態(tài)。所以制備高質(zhì)量的樣品以用于后續(xù)的抗體-agarose beads孵育對(duì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)是否成功非常關(guān)鍵。在這個(gè)環(huán)節(jié)中,除了要控制所有操作盡量在冰上或者4?完成外,最為關(guān)鍵的是裂解液的成份。
用于免疫沉淀實(shí)驗(yàn)的樣品一般是原代培養(yǎng)細(xì)胞裂解液或者細(xì)胞系裂解液。我們以常用的RIPA裂解液為例(主要含有pH7.4左右的離子緩沖液,接近生理濃度下的NaCl,一定比例的去垢劑和甘油以及各類蛋白酶抑制劑等)來(lái)說(shuō)明其各主要成份的用途,進(jìn)而幫助我們?nèi)绾吾槍?duì)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮筒煌牡鞍踪|(zhì)特性來(lái)選擇最佳的裂解液。
a(緩沖液:離子緩沖液常采用pH7.4的Hepes或者Tris-Cl。b(NaCl濃度一般習(xí)慣用150 mM,這主要是因?yàn)?50 mM接近生理濃度,不會(huì)破壞蛋白質(zhì)之間的相互作用。然而細(xì)胞內(nèi)部的NaCl濃度并不是均一的,局部NaCl的濃度可以低到50 mM,150 mM的NaCl有可能會(huì)破壞這個(gè)區(qū)域的蛋白質(zhì)相互作用。因此裂解液配方最佳的NaCl濃度要視所分析的蛋白的亞細(xì)胞定位而定。
c(甘油由于其粘性,可以對(duì)蛋白質(zhì)之間的相互作用起到一個(gè)很好的保護(hù)作用。一般添加10%的甘油有助于穩(wěn)定蛋白質(zhì)之間的相互作用。
d(裂解液中的去垢劑可以裂解細(xì)胞質(zhì)膜,也同時(shí)破壞了許多細(xì)胞器的膜,從而釋放了其中儲(chǔ)存的許多蛋白酶。而由于用于免疫沉淀實(shí)驗(yàn)的去垢劑作用比較溫和,因此蛋白酶的活性大部分得以保存。還有一部分蛋白酶來(lái)自胞質(zhì)中,主要由于其抑制蛋白或者其活性抑制環(huán)境受到改變后從而恢復(fù)了蛋白酶活性。因此,添加蛋白酶抑制劑對(duì)于防止目的蛋白的降解從而完成免疫沉淀實(shí)驗(yàn)非常關(guān)鍵。一般主要通過(guò)添加EDTA抑制金屬蛋白酶,通過(guò)Protease Cocktail(多種蛋白酶抑制劑混合物)可以抑制蛋白酶。
e(去垢劑對(duì)于免疫沉淀實(shí)驗(yàn)尤其是免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)是一個(gè)非常關(guān)鍵的因素。不同的去垢劑種類和不同的去垢劑濃度主要通過(guò)影響以下三個(gè)因素來(lái)影響免疫沉淀效果:-細(xì)胞質(zhì)/器膜的通透性:因?yàn)樵S多目的蛋白都定位在細(xì)胞器中,所以必須先將這些蛋白釋放出來(lái),抗體才能與之反應(yīng)。
-膜蛋白的釋放:許多膜蛋白的構(gòu)象對(duì)去垢劑種類和濃度非常敏感,因此針對(duì)這類蛋白的免疫沉淀實(shí)驗(yàn),需要謹(jǐn)慎地嘗試多種去垢劑以及不同濃度。
-蛋白相互作用:不同去垢劑對(duì)不同性質(zhì)的蛋白質(zhì)的相互作用影響程度不一樣,需要根據(jù)具體蛋白的特性進(jìn)行分析選擇去垢劑種類和濃度。而由于何種去垢劑適應(yīng)作用于何種蛋白質(zhì)現(xiàn)在很難精準(zhǔn)預(yù)測(cè),所以一個(gè)更為切實(shí)可行的辦法就是通過(guò)具體實(shí)驗(yàn)篩選合適的去垢劑種類和濃度。
二、抗體-agarose beads孵育
裂解細(xì)胞,離心并去除不可溶的膜組份后,上清可以儲(chǔ)存在-80?保存3個(gè)月,但最好能夠使用新鮮制備的細(xì)胞裂解液上清去進(jìn)行抗體-agarose beads孵育實(shí)驗(yàn)??贵w可以先加入上清中與樣品孵育數(shù)小時(shí)后再加入Protein A或者G beads孵育過(guò)夜,也可以同時(shí)加入抗體和Protein A或者G beads孵育過(guò)夜。一般選擇1mg總蛋白(1mg/ml)對(duì)應(yīng)添加1 ug抗體,最高可以添加至5 ug抗體,過(guò)多的抗體會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性。這個(gè)步驟中關(guān)鍵因素在于選擇合適的陰性對(duì)照。一般選用加同樣量的IgG,但更為妥當(dāng)?shù)姆椒ㄊ沁x擇針對(duì)胞內(nèi)其它無(wú)關(guān)目的蛋白的一抗做對(duì)照。例如,做膜蛋白A的免疫沉淀,選擇膜蛋白B來(lái)做陰性對(duì)照,只要確認(rèn)二者之間沒有相互作用;而做胞質(zhì)可溶性蛋白C的免疫沉淀,則選擇另外一個(gè)可溶性蛋白D來(lái)做陰性對(duì)照。同時(shí),為避免Protein A或者G beads有(非)特異性吸附從而造成免疫沉淀實(shí)驗(yàn)結(jié)果的假陽(yáng)性,一般在加入目的蛋白抗體之前,預(yù)先將Protein A或者G beads與細(xì)胞裂解液孵育數(shù)小時(shí),然后取上清用于后續(xù)的抗體-agarose beads孵育。
同時(shí),Protein A或者G beads對(duì)不同類型的抗體親和力不同,結(jié)合一抗的種屬和Ig亞型,選擇合適的Protein A或者G beads也是決定免疫沉淀實(shí)驗(yàn)成功與否的一個(gè)重要因素。一般推薦使用Protein A和Protein G beads的混合物,這樣可以達(dá)到最佳實(shí)驗(yàn)效果,而且省去了許多選擇的煩惱。
三、抗體-agarose beads復(fù)合物洗滌: 除了選擇特異性好的抗體以及選擇合適的陰性對(duì)照外,去除免疫沉淀實(shí)驗(yàn)非特異性的一個(gè)辦法是對(duì)抗體-agarose beads復(fù)合物進(jìn)行多次洗滌。一般洗滌緩沖液使用和裂解液一樣的配方,但去除甘油,以減少由于甘油的粘性帶來(lái)的非特異性吸附。針對(duì)不同的實(shí)驗(yàn)要求,還可以通過(guò)更改NaCl的濃度以及去垢劑的比例,種類來(lái)達(dá)到去除非特異性吸附的效果。例如,針對(duì)單純的免疫沉淀而非免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)或者雖然是進(jìn)行免疫共沉淀實(shí)驗(yàn),但蛋白質(zhì)之間的結(jié)合比較牢靠,可以考慮使用低濃度(0.2-0.5%)的SDS洗滌抗體-agarose beads復(fù)合物,這樣可以去除絕大部分非特異性相互作用。
四、鑒定
免疫沉淀實(shí)驗(yàn)用途非常廣泛(見IP: Q&A),而且基于最基本的免疫沉淀實(shí)驗(yàn)衍生出了許多免疫沉淀相關(guān)實(shí)驗(yàn)手段(比如免疫共沉淀,染色質(zhì)免疫沉淀和RNA-蛋白免疫沉淀),因此,免疫沉淀實(shí)驗(yàn)的鑒定方法主要視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ā?/p>
我們?cè)诒臼謨?cè)中主要簡(jiǎn)單概述常見的免疫沉淀之后的WB檢測(cè)需要注意的實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)。由于
免疫沉淀實(shí)驗(yàn)使用目的蛋白抗體加Protein A/G beads與樣品孵育,因此在最后離心獲得抗體-agarose beads復(fù)合物后,eppendorf管中主要含有抗體,目的蛋白,Protein A/G beads以及一些其它非特異性作用蛋白。其中,抗體和目的蛋白以及Protein A/G beads三者之間是以非共價(jià)健結(jié)合在一起,只有Protein A/G與agarose beads是共價(jià)結(jié)合在一起的。因此,最后經(jīng)過(guò)添加含巰基乙醇的加樣緩沖液以及煮沸變性并離心出去Protein A/G beads后,eppendorf管只有抗體和目的蛋白以及少量非特異性吸附蛋白。這樣SDS-PAGE中就含有目的蛋白和抗體二種蛋白,由于加樣緩沖液中含有巰基乙醇從而導(dǎo)致抗體的重鏈與輕鏈之間的二硫鍵被破壞從而使得抗體分子變成重鏈分子(55KD)和輕鏈分子(25KD)。因此,WB顯色反應(yīng)中除了能檢測(cè)到目的蛋白外,如果所使用的二抗與用于免疫沉淀實(shí)驗(yàn)的抗體分子屬于同一種屬的話,還能檢測(cè)到重鏈和輕鏈分子。通常用于免疫沉淀的抗體量非常大(1ug),所以當(dāng)目的蛋白的大小接近重鏈或者輕鏈分子時(shí),重鏈或者輕鏈分子的WB信號(hào)常常由于信號(hào)過(guò)強(qiáng)而導(dǎo)致影響對(duì)目的蛋白的WB結(jié)果判斷。
針對(duì)上述情況,通常有二種解決辦法: a(選擇不同種屬的抗體分別進(jìn)行免疫沉淀實(shí)驗(yàn)和WB實(shí)驗(yàn),這樣再選擇一個(gè)種屬交叉反應(yīng)比較弱或者無(wú)種屬交叉反應(yīng)的二抗進(jìn)行WB實(shí)驗(yàn),就可以大大減弱重鏈和輕鏈分子的WB信號(hào)。
b(使用交聯(lián)劑將抗體和Protein A/G beads交聯(lián),然后通過(guò)添加不含巰基乙醇的加樣緩沖液處理目的蛋白-抗體-agarose beads復(fù)合物,最后離心去除抗體-agarose beads復(fù)合物,上清中只留下目的蛋白。
免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)原理
IP是利用抗原蛋白質(zhì)和抗體的特異性結(jié)合以及細(xì)菌蛋白質(zhì)的“protein A/G"特異性地結(jié)合到抗體(免疫球
蛋白)的FC片段的現(xiàn)象開發(fā)出來(lái)的方法。目前多用protein A/G預(yù)先結(jié)合在argarose beads上,使之
與含有抗原的溶液及抗體反應(yīng)后,beads上的prorein A/G就能達(dá)到吸附抗原的目的。通過(guò)低速離心,可以從含有目的抗原的溶液中將目的抗原與其它抗原分離。
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法,是確定兩種蛋白質(zhì)是否在生理?xiàng)l件下有相互作用的有效方法。其原理是:當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí),完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來(lái)。如果用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X,那么與X在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來(lái)。這種方法常用于測(cè)定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合;也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用蛋白。
白與蛋白 尋找新的 經(jīng)由免疫共沉淀然后通過(guò)質(zhì)譜或者的相互 相互作用 WB鑒定新的相互作用蛋白 作用 蛋白
驗(yàn)證目的 經(jīng)由免疫共沉淀然后通過(guò)使用待測(cè) 蛋白和 蛋白 待測(cè)蛋白 的抗體進(jìn)行WB實(shí)驗(yàn)可以確定目的蛋 是否有 白
相互作用 和待測(cè)蛋白是否有相互作用 通過(guò)對(duì)經(jīng)由免疫共沉淀而得到的DNA 片段進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)可以獲得DNA片研究蛋白與DNA的動(dòng)態(tài)作用 段的序列信息以及目的蛋白與DNA 之間的動(dòng)態(tài)作用信息
通過(guò)使用針對(duì)組蛋白不同修飾位點(diǎn)的研究蛋白 抗體進(jìn)行染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)去檢測(cè)
染色質(zhì) 與DNA 研究組蛋白的各種共價(jià)修飾 組蛋白的不同修飾狀態(tài)和目的基因啟
免疫沉淀 的相互 與基因表達(dá)之間的關(guān)系 動(dòng)子之間的動(dòng)態(tài)相互作用,從而研究作用 組蛋白修飾與目的基因表達(dá)之間的關(guān)
系
基于CHIP的原理發(fā)展出來(lái)的RIP 研究蛋白與RNA的相互作用(RNA-IP)技術(shù)可以用來(lái)研究目的蛋 白與RNA之間的相互作用信息
我該選擇什么樣的抗體做免疫沉淀,免疫共沉淀和RNA免疫沉淀以及染色質(zhì)免疫沉淀, 在所有免疫沉淀相關(guān)實(shí)驗(yàn)中,抗原的起始濃度相對(duì)其它免疫相關(guān)實(shí)驗(yàn)(WB和IF等)要低得多,所以對(duì)抗體的親和力相對(duì)其它實(shí)驗(yàn)(WB和IF等)提出了很高的要求,這就需要使用高親和力的抗體去進(jìn)行免疫沉淀相關(guān)實(shí)驗(yàn)。同時(shí),由于免疫沉淀相關(guān)實(shí)驗(yàn)主要是在生理?xiàng)l件性進(jìn)行,所以需要抗體識(shí)別蛋白的天然表面構(gòu)象,因此選擇的抗體其針對(duì)的抗原決定蔟需要暴露在蛋白表面。這些因素對(duì)制備能成功應(yīng)用于IP實(shí)驗(yàn)的抗體提出了很高的要求: a(用于免疫的蛋白抗原其構(gòu)象需要盡量接近目的蛋白的天然構(gòu)象或者用于免疫的多肽盡量暴露在目的蛋白的表面。獲得接近天然構(gòu)象的蛋白抗原的途徑有很多,主要有天然提取,原核表達(dá)重組蛋白以及真核表達(dá)重組蛋白三種方式。這其中,就蛋白構(gòu)象角度而言,天然提取是最佳途徑,但這種方法受材料來(lái)源限制和純化方法復(fù)雜等多因素影響,一般很少采用。原核表達(dá)因?yàn)槌杀镜土?,操作方便最為受歡迎,但其受表達(dá)環(huán)境與大部分蛋白天然存在環(huán)境差別巨大,構(gòu)象失真情況嚴(yán)重,抗原的構(gòu)象質(zhì)量有嚴(yán)重問(wèn)題。大規(guī)模瞬時(shí)真核表達(dá)是近期新興的表
達(dá)系統(tǒng),具有表達(dá)環(huán)境接近天然,操作方便等諸多優(yōu)點(diǎn),是獲取具有天然構(gòu)象蛋白抗原的首選工具。
b(親和力要比普通的抗體應(yīng)用要求高得多。多克隆抗體由于可以結(jié)合目的抗原的多個(gè)抗原決定簇,所以在親和力方面是首選。但考慮到特異性,獲得單克隆抗體群是更好的選擇。具體優(yōu)缺點(diǎn)總結(jié)如下表。
單克隆抗體群(由一個(gè)免疫原產(chǎn)生的多 多克隆抗體 單克隆抗體 個(gè)單克隆抗體混合物)抗體抗原作由抗體的親和力決定(極佳極佳 極佳 用信號(hào)強(qiáng)度 或者極弱)通常很好,但有時(shí)會(huì)極佳(由于選擇可以進(jìn)行IP且沒有交特異性 極佳,但有時(shí)會(huì)有交叉反應(yīng) 有非特異性相互作用 叉反應(yīng)的抗體組成單克隆抗體群)親和力高(由于抗體特異性好,親和力高(由于選擇可以進(jìn)可以與目的蛋白的多特異性好,且可以無(wú)限量供優(yōu)點(diǎn) 行IP且沒有交叉反應(yīng)的抗體組成單克個(gè)抗原決定蔟相互作應(yīng) 隆抗體群)用)需要篩選親和力高的抗體;能夠篩選得到的符合條件的單克隆并非特異性相互作用很缺點(diǎn) 抗原表位可能會(huì)被相互作不多,所以單克隆抗體群也就不容易獲難去除 用蛋白遮蔽 得
免疫沉淀效由抗體的親和力決定(極佳極佳(由于選擇可以進(jìn)行IP且沒有交極佳(由于親和力高)果 或者極弱)叉反應(yīng)的抗體組成單克隆抗體群)由抗體的親和力決定和抗通常很好,但有時(shí)非免疫共沉淀原表位是否被相互作用蛋極佳(由于選擇可以成功進(jìn)行IP且沒特異性相互作用會(huì)帶效果 白遮蔽決定(極佳或者極有交叉反應(yīng)的抗體組成單克隆抗體群)來(lái)假陽(yáng)性 弱)由抗體的親和力決定和抗
通常很好,但有時(shí)非原表位是否被遮蔽或者以染色質(zhì)免疫極佳(由于選擇可以成功進(jìn)行IP且沒特異性相互作用會(huì)帶及抗原表位是否被交聯(lián)實(shí)沉淀效果 有交叉反應(yīng)的抗體組成單克隆抗體群)來(lái)假陽(yáng)性 驗(yàn)所破壞決定(極佳或者極
弱)
第三篇:IP地址教學(xué)設(shè)計(jì)
課題名稱:認(rèn)識(shí)IP地址
教師姓名:黃恒一
學(xué)生年級(jí):理工科大學(xué)二年級(jí)
課時(shí):30分鐘 教學(xué)內(nèi)容分析:
1.從教材整個(gè)教學(xué)內(nèi)容上來(lái)說(shuō),本節(jié)內(nèi)容作為計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)層與傳輸層之間關(guān)鍵環(huán)節(jié),對(duì)于學(xué)生深入理解計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)層Ip地址及網(wǎng)絡(luò)層的數(shù)據(jù)包怎樣傳輸有幫助。
2.為學(xué)生后續(xù)內(nèi)容計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)CIDR網(wǎng)絡(luò)IP地址塊的分類學(xué)習(xí)有幫助;
3.便于學(xué)生理解IP地址怎樣確定每臺(tái)計(jì)算機(jī)是如何確定自己在網(wǎng)絡(luò)中的位置,以及為后續(xù)內(nèi)容網(wǎng)絡(luò)域名的理解有幫助。學(xué)生分析:
1.學(xué)生在日常的工作生活中對(duì)IP有一定的認(rèn)識(shí),但是對(duì)于IP的準(zhǔn)確定義缺乏一定深入的理解;
2.學(xué)生對(duì)網(wǎng)絡(luò)IP的認(rèn)識(shí)僅僅停留在書本上,對(duì)社會(huì)存在的網(wǎng)絡(luò)事件關(guān)注過(guò)少、思考少,不明確在網(wǎng)絡(luò)上自己的行為尺度。
上述對(duì)學(xué)生的幾點(diǎn)分析是從上課時(shí)對(duì)學(xué)生的提問(wèn),以及課下與學(xué)生的回答交流情況、學(xué)生的課堂表現(xiàn)中得到的。教學(xué)目標(biāo): 1.知識(shí)和技能:理解IP地址的含義,了解IP地址的分類,掌握 IP地址的組成,掌握 IP地址二進(jìn)制和十進(jìn)制的換算等。2.過(guò)程與方法:通過(guò)知識(shí)點(diǎn)導(dǎo)入,概念講解,習(xí)題講解,案例引入,教師演示,總結(jié)開展課堂的進(jìn)程;方法主要是利用PPT講解,案例分析,引導(dǎo)討論加深學(xué)生的理解。3.以科學(xué)的態(tài)度,通過(guò)各種方法加深知識(shí)理解,提升網(wǎng)絡(luò)道德,明確自己在網(wǎng)絡(luò)上那些事情可以做,哪些事情不可以做,提升學(xué)生的網(wǎng)絡(luò)道德水平。
教學(xué)重點(diǎn):1.IP的概念、IP的分類;
2.IP組成、IP地址的十進(jìn)制與二進(jìn)制換算; 教學(xué)難點(diǎn):1.IP地址的十進(jìn)制與二進(jìn)制換算;
2.IP地址的分類設(shè)計(jì)。
教學(xué)策略的選擇與設(shè)計(jì):
在本節(jié)課的教學(xué)中主要圍繞以下三個(gè)問(wèn)題來(lái)展開:
1.IP的概念; 2.IP的組成; 3.IP的分類;
1. IP的概念主要通過(guò)PPT來(lái)講述,結(jié)合習(xí)題來(lái)講解IP的十進(jìn)制與二進(jìn)制的含義。2. IP的組成結(jié)合PPT來(lái)講述
3. IP的分類老師講述結(jié)合引導(dǎo)學(xué)生歸納分類的特點(diǎn)。教學(xué)環(huán)境及資源準(zhǔn)備:
1.教師的教學(xué)資源網(wǎng)絡(luò)資源的豐富,學(xué)校圖書館的各種書籍,學(xué)校實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)機(jī)房可以便于形象生動(dòng)的講述,主要結(jié)合PPT進(jìn)行講述,可以在教學(xué)過(guò)程中結(jié)合教室的教學(xué)電腦對(duì)于關(guān)鍵的知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行描述;
2.學(xué)生在大一時(shí)有一定的計(jì)算機(jī)基礎(chǔ),學(xué)過(guò)計(jì)算機(jī)的基礎(chǔ)知識(shí),對(duì)于自己大學(xué)生活接觸很多的學(xué)習(xí)工具有學(xué)習(xí)的動(dòng)力,學(xué)習(xí)工具而言大部分學(xué)生具有自己的一臺(tái)筆記本,沒有筆記本的學(xué)生也可以利用學(xué)校開放的免費(fèi)機(jī)房進(jìn)行學(xué)習(xí)。教學(xué)過(guò)程:
1.問(wèn)題引入,舉出生活中的電話號(hào)碼的案例,引導(dǎo)學(xué)生發(fā)現(xiàn)電話號(hào)碼的特點(diǎn),學(xué)生而言,探討不同電話號(hào)碼之間的特征。設(shè)計(jì)次活動(dòng)主要為了引入本節(jié)主要講述的IP地址,IP地址用來(lái)確定每臺(tái)電腦在網(wǎng)絡(luò)上的編號(hào)。
2.概念講述:教師結(jié)合PPT講述IP的含義、IP的分類及IP的組成,學(xué)生而言做筆記領(lǐng)悟老師講述的內(nèi)容,在老師的引導(dǎo)下探討各類IP地址的特點(diǎn)。設(shè)計(jì)次活動(dòng)用來(lái)講述本節(jié)的重要內(nèi)容。
3.習(xí)題的講述:講述二進(jìn)制10進(jìn)制的轉(zhuǎn)換關(guān)系,講述IP地址的分類,學(xué)生而言練習(xí)講述的案例。設(shè)計(jì)次活動(dòng)的意圖加深學(xué)生對(duì)概念知識(shí)的理解。
4.案例引入:通過(guò)講述一個(gè)公安偵破網(wǎng)絡(luò)案例,學(xué)生而言探討案例與自己所學(xué)習(xí)的知識(shí)之間的關(guān)系。設(shè)計(jì)此活動(dòng)的作用在于增加學(xué)生的網(wǎng)絡(luò)道德意識(shí),明確自己在網(wǎng)絡(luò)上哪些行為可以做,哪些行為不可以做。5.教師演示:通過(guò)教師動(dòng)手演示IP地址的查找方法,激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣,形象生動(dòng)的體會(huì)學(xué)習(xí)的知識(shí)的實(shí)用性。教學(xué)評(píng)價(jià):
1.教師而言,可以隨即抽取學(xué)生回答問(wèn)題,根據(jù)學(xué)生回答的情況評(píng)價(jià)自己的教學(xué)效果。
2.學(xué)生而言,可以動(dòng)手實(shí)操訓(xùn)練,評(píng)價(jià)自己對(duì)知識(shí)的領(lǐng)悟水平。教學(xué)反思:
本課的教學(xué)環(huán)節(jié)中,不僅由生活中的實(shí)例類比分析出要學(xué)的理論知識(shí),而且還在任務(wù)探究過(guò)程中學(xué)以致用,利用所學(xué)的知識(shí)解決生活中可能遇到的問(wèn)題,做到了理論和實(shí)踐相結(jié)合,學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣較好,取得了很好的教學(xué)效果。
第四篇:實(shí)驗(yàn)一 市場(chǎng)調(diào)研項(xiàng)目設(shè)計(jì)
實(shí)驗(yàn)一:市場(chǎng)調(diào)研項(xiàng)目設(shè)計(jì)
[實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯
(1)了解市調(diào)研方案設(shè)計(jì)的意義,掌握調(diào)查研究設(shè)計(jì)的內(nèi)容與方法。
(2)體會(huì)、掌握市場(chǎng)調(diào)研的流程與注意事項(xiàng)。
(3)學(xué)習(xí)依托團(tuán)隊(duì)進(jìn)行調(diào)研方案的總體設(shè)計(jì)與規(guī)劃。
[實(shí)驗(yàn)內(nèi)容]
(1)市場(chǎng)調(diào)研項(xiàng)目個(gè)案演示與講解,掌握調(diào)查研究設(shè)計(jì)的基本內(nèi)容。
(2)就某一自定選題提供一份市場(chǎng)調(diào)研項(xiàng)目建議書,并說(shuō)明自己的研究思路。
[實(shí)驗(yàn)步驟]
(1)各任務(wù)小組根據(jù)任務(wù)范圍自行確定具體選題。
(2)提交完整的研究設(shè)計(jì)書。包括以下內(nèi)容:
? 認(rèn)識(shí)營(yíng)銷問(wèn)題/機(jī)會(huì),并界定問(wèn)題;
? 確立市場(chǎng)調(diào)研的目標(biāo);
? 制訂市場(chǎng)調(diào)研總體設(shè)計(jì)方案;
? 選擇基本的調(diào)研方法;
? 確定抽樣方案及樣本容量;
? 收集資料;
? 資料分析;
? 撰寫最終調(diào)研報(bào)告;
? 跟蹤調(diào)查。
? 制作PPT并口頭報(bào)告。
? 填寫并提交小組任務(wù)測(cè)評(píng)表(實(shí)驗(yàn)報(bào)告)。
[實(shí)驗(yàn)方法]
實(shí)驗(yàn)分小組展開(每組4-5人),各小組自行確定任務(wù),PPT展示并答辯。
[實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)]
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備階段:以實(shí)際案例進(jìn)行示范,講清重點(diǎn)和難點(diǎn);
實(shí)驗(yàn)進(jìn)行階段:隨時(shí)準(zhǔn)備接受學(xué)生的咨詢;
實(shí)驗(yàn)結(jié)束階段:PPT展示后提問(wèn),由學(xué)生進(jìn)行答辯;點(diǎn)評(píng)優(yōu)缺點(diǎn)及提出建議。
[問(wèn)題思考]
思考市場(chǎng)調(diào)研項(xiàng)目設(shè)計(jì)中,為什么營(yíng)銷調(diào)研目標(biāo)的確定過(guò)程(認(rèn)識(shí)營(yíng)銷問(wèn)題/機(jī)會(huì)、界定問(wèn)題、確立調(diào)研的目標(biāo))是任務(wù)的重點(diǎn)和難點(diǎn),應(yīng)該采取怎樣的保障目標(biāo)確立科學(xué)、合理、有效。
第五篇:項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)
4.3.1商務(wù)標(biāo)
(1)投標(biāo)函
(2)法定代表人授權(quán)委托書
(3)投標(biāo)報(bào)價(jià)表
a.各服務(wù)項(xiàng)目報(bào)價(jià)一覽表
b.各服務(wù)項(xiàng)目報(bào)價(jià)明細(xì)表
4.3.2技術(shù)標(biāo)
(1)管理服務(wù)理念和目標(biāo)
·關(guān)注弱勢(shì)群體并以現(xiàn)代化經(jīng)營(yíng)管理手段為業(yè)主服務(wù);
·創(chuàng)造一個(gè)方便、安全、清靜、整潔的居住和工作環(huán)境;
·最終的目的是實(shí)現(xiàn)社會(huì)效益、經(jīng)濟(jì)效益、環(huán)境效益和心理效益的同步增長(zhǎng)
(2)管理機(jī)構(gòu)運(yùn)作方法及管理制度
小區(qū)管理組織機(jī)構(gòu),項(xiàng)目經(jīng)理(小區(qū)經(jīng)理)的管理職責(zé)、主要管理人員的職責(zé)分工、日常管理制度和考核辦法;
物業(yè)管理員崗位職責(zé)
1、負(fù)責(zé)轄區(qū)物業(yè)日常管理工作;
2、做到每日進(jìn)行巡視,對(duì)水、電、氣等公共設(shè)施的供給、運(yùn)作情況和服務(wù)情況隨時(shí)檢查
掌握,發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)解決處理;
3、貫徹落實(shí)各項(xiàng)管理規(guī)定,巡查轄區(qū)住戶,對(duì)違反規(guī)定的行為及時(shí)制止,并作相應(yīng)處理;
4、落實(shí)各項(xiàng)防患措施,對(duì)轄區(qū)內(nèi)發(fā)生重大事故或超出本崗位處理權(quán)退職的事件應(yīng)立即(當(dāng)
天內(nèi))向部門經(jīng)理報(bào)告;
5、每月不定期地組織對(duì)水、電、氣、房屋、公共設(shè)施和轄區(qū)環(huán)境的綜合性檢查,認(rèn)真聽
取意見,及時(shí)解決問(wèn)題;
6、與業(yè)主保持密切聯(lián)系,及時(shí)處理或反映業(yè)主的投訴意見,會(huì)同相關(guān)人員,檢查落實(shí),并向當(dāng)事人反饋處理意見或結(jié)果;
7、熟悉轄區(qū)入住業(yè)主的情況,掌握轄區(qū)各種配套設(shè)施的運(yùn)行情況,認(rèn)真、及時(shí)替業(yè)主排
憂解難;
8、遵章守紀(jì),認(rèn)真完成領(lǐng)導(dǎo)交辦的其它工作。
保 安 員 崗 位 職 責(zé)
1.維護(hù)大門口的交通秩序,引導(dǎo)車輛行駛及行人過(guò)往,保障車輛和行人的安全、使門前暢通無(wú)阻;
4、時(shí)刻保持高度警惕,切實(shí)做好門前的警戒工作,特別是夜間警戒工作。注意車輛和行人的安全,人多時(shí)要注意防止失竊,防止大門口周圍有鬧事、斗毆事件發(fā)生,確保門前安全。
5、在值班過(guò)程中對(duì)發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題及時(shí)處理,緊急情況及時(shí)向公司領(lǐng)導(dǎo)匯報(bào),必要時(shí)向公
安部門報(bào)警。
6、及時(shí)做好當(dāng)班值班巡視記錄
保潔員崗位職責(zé)
1、小區(qū)的道路、停車場(chǎng)、廣場(chǎng)、綠地等公共場(chǎng)所每天清掃二遍;樓道每日清掃一遍,每周拖一次;樓梯扶手每日擦洗一遍;共用部位玻璃每周擦拭一次;路燈、樓道燈每月清潔一次;及時(shí)清除道路垃圾、積水;定期清洗二次供水水箱,定時(shí)檢測(cè)水質(zhì)。
2、當(dāng)班時(shí)間責(zé)任區(qū)內(nèi)垃圾、雜物等,必須做到隨收隨清,保持責(zé)任區(qū)的衛(wèi)生;
3、蚊蟲消殺:公共場(chǎng)所每周二次,重點(diǎn)是垃圾桶。雨水井、污水井、綠化槽等處;
4、維護(hù)責(zé)任區(qū)內(nèi)衛(wèi)生,勸阻和制止不衛(wèi)生、不文明的現(xiàn)象和行為;
5、發(fā)現(xiàn)異常情況或需維修事項(xiàng)及時(shí)向主管匯報(bào);
6、完成部門經(jīng)理交待的其他任務(wù)。
消控室人員崗位責(zé)任
1、消防監(jiān)控中心管理員應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行值班職責(zé),同時(shí)協(xié)助維修人員對(duì)設(shè)備進(jìn)行檢查、保養(yǎng)
工作。
2、護(hù)管隊(duì)負(fù)責(zé)滅火器、消火栓、應(yīng)急燈等設(shè)施的檢查保養(yǎng)工作。
3、工程維修部負(fù)責(zé)消防系統(tǒng)、閉路電視系統(tǒng)等設(shè)備的檢查、保養(yǎng)、維修工作。
管理制度:
1、工作人員應(yīng)以認(rèn)真負(fù)責(zé)的態(tài)度,嚴(yán)謹(jǐn)務(wù)實(shí)的作風(fēng)做好本職工作,辦公講求效率;
2、員工應(yīng)自覺遵守公司各項(xiàng)規(guī)章制度,嚴(yán)格執(zhí)行勞動(dòng)紀(jì)律,上班不遲到,不早退,不準(zhǔn)
中間私自離崗,外出辦公說(shuō)明去向;
3、保持辦公環(huán)境優(yōu)美清潔,不得隨意丟棄雜物;
4、愛護(hù)公共財(cái)物,節(jié)約用水用電;
5、重視防水、防盜和安全生產(chǎn);
6、接待客戶時(shí),要做到熱情周到,細(xì)心聽取客戶意見
主要管理服務(wù)人員的培訓(xùn)方案;
全體員工之入職基本培訓(xùn)
員工手冊(cè) ?
公司概況 ?
物業(yè)管理的概念及主要任務(wù) ?
管理處崗位設(shè)置,各崗位職責(zé)及基本操作規(guī)范 ?
本物業(yè)治安管理制度及各項(xiàng)措施 ?
本物業(yè)消防管理制及消防基本知識(shí) ?
?
? 突發(fā)事件處理程序 本物業(yè)及主要設(shè)備設(shè)施之概況
工程人員培訓(xùn)
日常工程運(yùn)作、各設(shè)備和系統(tǒng)之操作及維護(hù)要點(diǎn) ?
突發(fā)事件處理程序與方法 ?
文員培訓(xùn)
管理處檔案管理程序 ?
管理處人事系統(tǒng)管理程序 ?
員工福利工作程序 ?
每月考勤之統(tǒng)計(jì) ?
員工制服申領(lǐng)、清洗、退還之手續(xù) ?
接聽電話之規(guī)范,處理投訴程序 ?
接待員培訓(xùn)
接聽電話之規(guī)范 ?
投訴事件處理程序 ?
物業(yè)服務(wù)工作的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
(3)物業(yè)管理服務(wù)方案
a.物業(yè)共用設(shè)施設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)方案;
b.物業(yè)管理區(qū)域內(nèi)環(huán)境清潔保潔方案;
1、每天保持小區(qū)內(nèi)環(huán)境衛(wèi)生的整潔、清爽;
2、區(qū)內(nèi)道路及綠植草坪內(nèi)無(wú)明顯白色垃圾;
3、區(qū)內(nèi)宣傳牌內(nèi)無(wú)用信息清理與打掃;
4、休閑用排椅和健身器材始終保持清潔;
5、垃圾車停放在規(guī)定地點(diǎn),不得隨意停放,并注意防止垃圾的丟漏,垃圾應(yīng)及時(shí)送處理
站。
c.物業(yè)管理區(qū)域內(nèi)公共秩序及公共安全維護(hù)方案;
d.綠化及附屬設(shè)施的維護(hù)、保養(yǎng)方案;
e.業(yè)主、使用人裝飾裝修管理服務(wù)方案;
f.機(jī)動(dòng)車和非機(jī)動(dòng)車管理服務(wù)方案,含地面車位和地下車庫(kù)(含自行車庫(kù));
g.供暖服務(wù)方案;
(4)物業(yè)維修和管理的應(yīng)急措施
a.突然斷水、斷電、無(wú)天然氣的應(yīng)急措施;
1、在突然發(fā)生停電的情況下,應(yīng)及時(shí)轉(zhuǎn)換二路供電。工程和巡查人員應(yīng)逐層檢查備用照明的配備情況,保證停電后照明系統(tǒng)正常啟用。
2、及時(shí)確認(rèn)是內(nèi)部故障還是外部因素所引起的停電、停水。若系內(nèi)部故障,快速派人查找原因并采取措施,防止故障擴(kuò)大;若系外部停電、停水,一方面要防止突然來(lái)電、來(lái)水所引發(fā)的事故,一方面聯(lián)系電力局或供水公司查詢停電、停水具體情況,了解何時(shí)恢復(fù)供電、供水,第一時(shí)間開啟備用水源閥門,及時(shí)保障業(yè)主正常用水,并將了解的情況通知管理部門后告知業(yè)主,讓業(yè)主安心。
3、巡查人員應(yīng)立即會(huì)同工程人員分頭前往各樓層檢查電梯運(yùn)行情況,同時(shí)在監(jiān)控室查看業(yè)主乘電梯情況;
4、檢查應(yīng)急照明和緊急廣播系統(tǒng),確保正常。
b.雨、污水管及排水管網(wǎng)阻塞的應(yīng)急措施;
c.電梯故障的應(yīng)急措施;
1、當(dāng)發(fā)生電梯困人事故時(shí), 電梯工通過(guò)電梯對(duì)講機(jī)或喊話與被困人員取得聯(lián)系,務(wù)必保持
鎮(zhèn)靜,不要驚慌,被困人員不可以將身體任何部位伸出轎廂外。如果轎廂門處于半開閉狀態(tài),救援人員應(yīng)設(shè)法將轎門完全關(guān)閉。
2根據(jù)指層燈PC顯示或選層器標(biāo)尺判斷轎廂所在位置。
3、切斷機(jī)房電梯電源,并掛上“正在維修”的 警示牌。
4、如果轎廂停于接近廳門位置,且高于或低于樓面不超過(guò)0.5米。
·用專用廳門匙開啟廳門;
·轎頂用人力開啟轎廂門;
·協(xié)助乘客離開轎廂;
·重新關(guān)好轎門與廳門;
·使用抱閘扳手時(shí),必須由一人控制松閘,而另一人轉(zhuǎn)動(dòng)手輪。同時(shí)應(yīng)做斷續(xù)松閘動(dòng)作。
5、如果轎廂停于其他位置,先按4.4.5操作,將轎廂放到最近停層后,再按4.4操作進(jìn)
行救援。
d.消防應(yīng)急措施。
1、預(yù)警
定期對(duì)火險(xiǎn)危險(xiǎn)源、危險(xiǎn)區(qū)域和因素進(jìn)行監(jiān)控和排查,對(duì)排查出的隱患要建檔登記。
2、報(bào)警
當(dāng)發(fā)生火險(xiǎn)時(shí),第一發(fā)現(xiàn)人立即向單位報(bào)告,向值班人員說(shuō)明事故地點(diǎn)、事故類型等事
故概況。立即引導(dǎo)附近人員先行疏散,并迅速利用就近的消防器材控制火情
3、接報(bào)
消防值班人員、行政值班人員、組長(zhǎng)、副組長(zhǎng)為接報(bào)人員。并問(wèn)清報(bào)告人姓名、單位、聯(lián)系電話;問(wèn)明事故發(fā)生時(shí)間、地點(diǎn)、事故原因;向上級(jí)有關(guān)部門報(bào)告,做好電話記錄
4、組織救援隊(duì)伍
應(yīng)急組長(zhǎng)或副組長(zhǎng)接到報(bào)警電話后,立即通知應(yīng)急領(lǐng)導(dǎo)小組所有成員到達(dá)事故現(xiàn)場(chǎng)。接到通知后,立即組織起本組的工作人員及搶險(xiǎn)裝備,趕往事故現(xiàn)場(chǎng),向組長(zhǎng)、副組長(zhǎng)報(bào)到,接受任務(wù),了解現(xiàn)場(chǎng)災(zāi)害情況,實(shí)施統(tǒng)一的救援工作。
5、設(shè)立臨時(shí)指揮部及急救醫(yī)療點(diǎn)
·各救援隊(duì)伍進(jìn)入事故現(xiàn)場(chǎng)后,選擇有利地形設(shè)立現(xiàn)場(chǎng)指揮部及醫(yī)療急救站?!じ骶仍?duì)伍盡可能靠近現(xiàn)場(chǎng)指揮部,隨時(shí)保持與指揮部的聯(lián)系。
·指揮部、各救援組、醫(yī)療組均應(yīng)設(shè)置醒目的標(biāo)志,懸掛旗幟,方便救援人員和傷員識(shí)別。
6、搶險(xiǎn)救援
進(jìn)入現(xiàn)場(chǎng)的各支救援隊(duì)伍要盡快按照各自的職責(zé)和任務(wù)開展救援工作。
·現(xiàn)場(chǎng)指揮部:盡快開通通訊網(wǎng)絡(luò);迅速查明事故原因和危害程度,制定救援方案;根據(jù)事故災(zāi)情嚴(yán)重程序,決策是否需要外部援助;組織指揮救援行動(dòng)。
·危險(xiǎn)源控制
組織消防人員進(jìn)行滅火撲救;組織專業(yè)人員對(duì)出現(xiàn)火險(xiǎn)的部位進(jìn)行控制、搶修;對(duì)可能造成危險(xiǎn)物品、氣體泄漏的要制訂相應(yīng)的應(yīng)對(duì)措施。
7、現(xiàn)場(chǎng)警戒
警戒疏散組根據(jù)劃定的危害區(qū)域做好現(xiàn)場(chǎng)警戒,在通往事故現(xiàn)場(chǎng)的主要干道上實(shí)行交通管制;在警戒區(qū)的邊界設(shè)置警示標(biāo)識(shí),禁止其他人員及車輛靠近。
8、醫(yī)療急救
·醫(yī)療救護(hù)組在事故初起階段就應(yīng)與各大醫(yī)院聯(lián)系,說(shuō)明事故情況及人員傷亡情況,做
好緊急救護(hù)的準(zhǔn)備。
·醫(yī)療救護(hù)組必須在第一時(shí)間對(duì)傷員在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行處理急救,急救時(shí)按先重后輕的原則治
療。
·經(jīng)現(xiàn)場(chǎng)處理后,迅速護(hù)送至醫(yī)院救治。
·送醫(yī)院時(shí)作好傷員的交接,防止危重病人的多次轉(zhuǎn)院。
9、疏散撤離
事先設(shè)立安全區(qū)域,確定疏散撤離路線。并根據(jù)火情發(fā)生的位置、擴(kuò)散情況及威脅的嚴(yán)重程序,組織和指揮引導(dǎo)遇險(xiǎn)人員撤離事故現(xiàn)場(chǎng)。
(5)社區(qū)文化及和諧社區(qū)建設(shè)方案。
(6)小區(qū)底層商鋪的運(yùn)營(yíng)管理方案。
(7)投標(biāo)人認(rèn)為需要提供的其它內(nèi)容。
商務(wù)標(biāo)和技術(shù)標(biāo)要充分考慮廣廈廉租房小區(qū)特點(diǎn)及住戶特殊性。