第一篇：南開分子生物學(xué)本科教學(xué)大綱

《分子生物學(xué)》

教學(xué)大綱

第一、總綱

《分子生物學(xué)》是為三年級(jí)本科生開設(shè)的一門基礎(chǔ)必修課，該課程是在學(xué)生完成《微生物學(xué)》、《遺傳學(xué)》和《生物化學(xué)》等課程的學(xué)習(xí)后開設(shè)的，總學(xué)時(shí)為45學(xué)時(shí)，2.5個(gè)學(xué)分。采用我校陳啟民教授等編寫的教科書《分子生物學(xué)》（南開大學(xué)出版社2001年12月出版）中的部分章節(jié)為基本教材，同時(shí)選用英文編寫的教科書《Molecular Biology》和《Molecular Biology of The Cell》（Alberts B.等主編，Garland Publishing出版社出版，第三版）為輔助教材。

（一）指導(dǎo)方針

通過(guò)《分子生物學(xué)》課程的學(xué)習(xí)，使學(xué)生初步掌握分子生物學(xué)的概念和建立分子生物學(xué)的理論體系，對(duì)分子生物學(xué)的整體發(fā)展有比較清楚的了解。熟悉分子生物學(xué)的常用研究方法的原理和研究策略，了解分子生物學(xué)研究的前沿領(lǐng)域和發(fā)展趨勢(shì)。培養(yǎng)學(xué)生對(duì)分子生物學(xué)研究的興趣。理論聯(lián)系實(shí)際，能較熟練地查閱和閱讀分子生物學(xué)專業(yè)的英文文獻(xiàn)，并能夠理解和表述。

（二）教學(xué)方式

采用中國(guó)語(yǔ)和英語(yǔ)相結(jié)合的雙語(yǔ)教學(xué)，以中國(guó)語(yǔ)講解為主，部分內(nèi)容用英語(yǔ)講述后，再用中國(guó)語(yǔ)簡(jiǎn)要說(shuō)明，力求學(xué)生對(duì)所講述的內(nèi)容完全理解。以多媒體power point為教學(xué)輔助用具，部分內(nèi)容采用動(dòng)畫和原版英語(yǔ)解說(shuō)，最后再用中國(guó)語(yǔ)簡(jiǎn)要說(shuō)明，力求學(xué)生對(duì)所講述的內(nèi)容完全理解。采用“教、學(xué)互動(dòng)”的學(xué)習(xí)方式，鼓勵(lì)學(xué)生上臺(tái)，組織學(xué)生課外論文報(bào)告會(huì)，由學(xué)生報(bào)告綜述和課題設(shè)計(jì)開題報(bào)告。在課堂上進(jìn)行學(xué)術(shù)討論，開拓學(xué)生的科研思維。作業(yè)為每人寫一篇綜述論文，并選一篇英文論文翻譯為中文，該作業(yè)計(jì)作為平時(shí)成績(jī)。

（三）考核形式

采取綜合考核，包括筆試和平時(shí)成績(jī)兩部分。筆試為課堂上講授的內(nèi)容，成績(jī)計(jì)100分；平時(shí)成績(jī)包括寫綜述論文和以分子生物學(xué)專業(yè)研究為內(nèi)容的英文論文翻譯（英譯漢），平時(shí)成績(jī)優(yōu)秀者，在最后成績(jī)中適當(dāng)加分，對(duì)在課堂上表現(xiàn)優(yōu)秀的學(xué)生可在最后成績(jī)中適當(dāng)加分。第二、學(xué)習(xí)內(nèi)容

《分子生物學(xué)》課程的學(xué)習(xí)內(nèi)容分為三個(gè)部分：

（一）分子生物學(xué)概論，9學(xué)時(shí)；

（二）分子生物學(xué)基本理論，30學(xué)時(shí)；

（三）分子生物學(xué)研究前沿，6學(xué)時(shí)。

一、分子生物學(xué)基本概論（9學(xué)時(shí)）第一章 分子生物學(xué)的特征（3學(xué)時(shí)）(了解)

一、分子生物學(xué)的研究范圍

二、生物化學(xué)與分子生物學(xué)之間的關(guān)系與區(qū)別

三、分子生物學(xué)的形成及其發(fā)展過(guò)程

四、21世紀(jì)分子生物學(xué)發(fā)展的趨向

第二章 分子生物學(xué)的研究策略（3學(xué)時(shí)）(熟悉)一.分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的組成和設(shè)備 二.分子生物學(xué)研究的主要技術(shù)手段 三.分子生物學(xué)的研究策略

第三章 學(xué)習(xí)分子生物學(xué)的方法（3學(xué)時(shí)）(了解)

一、如何閱讀英文文獻(xiàn)

二、分子生物學(xué)研究入門

三、如何寫分子生物學(xué)學(xué)術(shù)論文

二、分子生物學(xué)基本理論（30學(xué)時(shí)）

第一章 生物大分子結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)知識(shí)（3學(xué)時(shí)）(掌握)第一節(jié) 大分子結(jié)構(gòu)常用名詞及其含義

一、構(gòu)形

二、構(gòu)象

第二節(jié) 生物大分子的螺旋結(jié)構(gòu) 第三節(jié) 維持生物大分子結(jié)構(gòu)的力 一．氫鍵 二．疏水力

第四節(jié) 生物大分子相互作用的原理 一．?dāng)U散作用

二．專一性相互作用 三．平衡常數(shù)

第八章 真核生物的基因組結(jié)構(gòu)(掌握)第一節(jié) 真核生物基因組的C值與特點(diǎn) 一．基因組的復(fù)雜性 二.生物基因組的特點(diǎn)

第二節(jié).真核生物基因組DNA序列的類型 一．DNA復(fù)性的動(dòng)力學(xué)

二．真核生物基因組DNA復(fù)性動(dòng)力學(xué)的序列類型 三．串聯(lián)重復(fù)序列

第三節(jié) 基因家族和基因簇 一.基因家族 二.基因簇

第四節(jié) 斷裂基因 一.斷裂基因的發(fā)現(xiàn) 二.斷裂基因的結(jié)構(gòu)

三.內(nèi)含子的起源與作用 第五節(jié) 真核基因組的包裝 一.真核細(xì)胞染色質(zhì)的結(jié)構(gòu) 二.核骨架與核骨架結(jié)合元件

第六節(jié) 酵母和線蟲的基因組結(jié)構(gòu) 一.酵母基因組的結(jié)構(gòu) 二.線蟲基因組結(jié)構(gòu)

第九章 原核生物基因表達(dá)與控制(6學(xué)時(shí))(第一節(jié) 細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄調(diào)控

一．細(xì)菌操縱子

二．阻遏物與激活物

三．正調(diào)控和負(fù)調(diào)控

四．誘導(dǎo)物和共阻遏物

五．正負(fù)調(diào)控的遺傳學(xué)證據(jù)

第二節(jié) 負(fù)調(diào)控

一．Lac操縱子的遺傳學(xué)

二．Lac突變的互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)

三．順式作用的lac突變

四．Lac-顯性突變體

五．組成型突變體的互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)

六．順式作用的LacOc突變

七．反式顯性組成型突變

八．Jacob和Monod的lac操縱子模型

九．Lac操縱子的修正

十．Lac操縱子的分解代謝產(chǎn)物阻遏

十一.Lac調(diào)控區(qū)的結(jié)構(gòu)

十二.Lac操縱子的實(shí)際應(yīng)用 第三節(jié) E.coli gal操縱子

一．阻遏物：Gal和GalS 二．兩個(gè)gal操縱基因：galOE和galOI 三．兩個(gè)gal啟動(dòng)子和分解代謝產(chǎn)物阻遏 第四節(jié) 生物合成操縱子的調(diào)控

一．生物合成操縱子的幾個(gè)概念

二．E.coli trp 操縱子 第五節(jié) 正調(diào)控

一．E.coli L-阿拉伯糖操縱子

二．E.coli 麥芽糖操縱子

三．tol操縱子 第六節(jié) 反饋抑制

一．色氨酸合成的反饋抑制

二．異亮氨酸－結(jié)氨酸反饋抑制

三．反饋抑制的機(jī)制

掌握)第七節(jié) cAMP調(diào)控

一．分解代謝物敏感操縱子

二．cAMP和它的結(jié)合蛋白

三．CAP-CAMP的 激活作用

第八節(jié) 核糖體和tRNA合成的調(diào)節(jié)

一．核糖體蛋白

二．核糖體蛋白和rRNA 三．核糖體蛋白的基因

四．核糖體蛋白合成的調(diào)節(jié)

五．rRNA和tRNA的調(diào)節(jié)

第十章 真核生物基因表達(dá)與調(diào)控（3學(xué)時(shí)）(第一節(jié) 染色質(zhì)結(jié)構(gòu)與基因轉(zhuǎn)錄

一．染色質(zhì)重構(gòu)與活性染色質(zhì)的形成二．組蛋白修飾與染色質(zhì)構(gòu)型

三．DNA甲基化與轉(zhuǎn)錄抑制

四．核基質(zhì)與基因活化

第二節(jié) 真核基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)

一．基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄及其調(diào)節(jié)

二．調(diào)節(jié)真核基因轉(zhuǎn)錄的順式作用元件

三．反式作用因子的結(jié)構(gòu)和功能

四．轉(zhuǎn)錄因子的活性調(diào)節(jié)

第三節(jié) 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加工與轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)

一．RNA結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)與功能

二．轉(zhuǎn)錄本的可變剪接及其調(diào)節(jié)

三．RNA編輯

四．轉(zhuǎn)錄本的核輸出的調(diào)節(jié) 第四節(jié) 翻譯效率及其調(diào)節(jié)因素

一．5’UTR結(jié)構(gòu)與翻譯起始的調(diào)節(jié)

二．蛋白質(zhì)磷酸化對(duì)翻譯效率的影響

三．3’UTR結(jié)構(gòu)與mRNA穩(wěn)定性調(diào)節(jié)

四．mRNA的細(xì)胞質(zhì)定位

五．蛋白質(zhì)的修飾，折疊與分選

第十一章 DNA突變與修復(fù)（3學(xué)時(shí)）(掌握)第一節(jié) 概述

第二節(jié) DNA修復(fù)的證據(jù)

第三節(jié) 特殊修復(fù)途徑

一．堿基脫氨

二．活性氧引起的DNA損傷

三．烷基化作用

四．嘧啶二聚體

五．體外誘變技術(shù) 第四節(jié) 一般修復(fù)機(jī)制

一．甲基介導(dǎo)的錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)

二．核苷酸切補(bǔ)修復(fù)

掌握)三．復(fù)制后修復(fù)或重組修復(fù)

四．DNA鏈交聯(lián)修復(fù)

五．SOS誘導(dǎo)修復(fù)

六．其他din基因

七．E.coli修復(fù)途徑

第五節(jié) 噬菌體修復(fù)途徑

第十二章 基因工程（3學(xué)時(shí)）(掌握)第一節(jié) 概述

第二節(jié) 工具酶及基因工程相關(guān)技術(shù)

一．用于基因克隆的核苷酸

二．其他工具酶

第三節(jié) 基因工程載體

一．基因工程的基本問(wèn)題

二．質(zhì)粒

三．λ噬菌體載體

四．單鏈?zhǔn)删w載體

第四節(jié) DNA克隆

一．基因克隆的全過(guò)程

二．克隆載體

三．克隆DNA進(jìn)入克隆載體

四．克隆技巧

第五節(jié) 原核生物基因克隆和鑒定

一．DNA文庫(kù)構(gòu)建

二．檢出目的克隆

三．在克隆DNA上定位基因

第六節(jié) 原核生物基因克隆的應(yīng)用

一．DNA序列分析

二．表達(dá)載體

三．定點(diǎn)誘變

第七節(jié) 聚合酶鏈反應(yīng)

一．引物

二．DNA聚合酶

三．RT-PCR 第八節(jié) 真核生物基因工程

一．cDNA基因文庫(kù)的構(gòu)建

二．酵母菌基因工程

三，植物基因工程

四．動(dòng)物基因工程

第十四章 免疫的分子生物學(xué)（3學(xué)時(shí)）(掌握)第一節(jié) 概述

第二節(jié) 典型抗體分子結(jié)構(gòu)

一．IgG抗體含有四條多肽鏈

二．H鏈和L鏈均由恒定區(qū)和可變區(qū)組成三．抗體分子很容易裂解成功能不同的片段 四．Ig分子富有柔韌性，尤其在鉸鏈區(qū)

五．Ig分子的每一功能域存在相似的結(jié)構(gòu)域

六．小節(jié)

第三節(jié) 抗體分子與特異抗原的相互作用

一．高度可變序列的定位區(qū)域形成抗原結(jié)合位點(diǎn)

二．小分子結(jié)合到重鏈、輕鏈V結(jié)構(gòu)域之間的凹刻上 三．抗體結(jié)合到天然蛋白抗原表面的擴(kuò)展位點(diǎn)

四．抗原抗體相互作用涉及各種作用力

五．小結(jié)

第四節(jié) 體液免疫應(yīng)答多樣性的產(chǎn)生

一．在抗體產(chǎn)生細(xì)胞中Ig的基因的重排

二．分離的基因片段經(jīng)過(guò)體細(xì)胞重組產(chǎn)生完整的V區(qū) 三．V區(qū)基因片段存在的多拷貝

四．V、D、J基因片段重排由兩側(cè)的DNA序列引導(dǎo) 五．抗體多樣性的產(chǎn)生經(jīng)過(guò)四個(gè)主要階段

六．在不同的組合中使用不同的重組基因片段 七．編碼V區(qū)基因片斷之間的結(jié)合處核苷酸的增減導(dǎo)致第三個(gè)高可變區(qū)的多樣性

八．V基因片斷的體細(xì)胞重組需要特殊的酶

九．體細(xì)胞高度突變使重排的V基因進(jìn)一步多樣化 十．小結(jié)

第五節(jié) Ig恒定區(qū)的結(jié)構(gòu)變化

一.通過(guò)重鏈恒定區(qū)的結(jié)構(gòu)來(lái)區(qū)分主要的Ig同型 二.IgM和IgA能形成多聚體 三.IgC區(qū)決定功能特異性

四.免疫應(yīng)答過(guò)程中同一個(gè)VH外顯子可能與不同的CH基因聯(lián)合 五.Ig之間的差異可通過(guò)抗體檢測(cè)

六.跨膜和分泌型Ig是由不同的重鏈轉(zhuǎn)錄體產(chǎn)生的 七.小結(jié)

第十五章 病毒的分子生物學(xué)（3學(xué)時(shí)）(掌握)第一節(jié) 分子病毒學(xué)的研究?jī)?nèi)容 一．病毒基因組的結(jié)構(gòu)與功能

二．病毒基因組的復(fù)制和表達(dá)調(diào)控 三．病毒對(duì)宿主細(xì)胞的影響 四．病毒與腫瘤的發(fā)生

五．病毒基因工程疫苗及病毒載體

第二節(jié) 乙型肝炎病毒的分子生物學(xué)

一.乙型肝炎病毒基因組的結(jié)構(gòu)與功能

二.乙型肝炎病毒x基因與肝癌發(fā)病的關(guān)系 第三節(jié) DNA病毒的分子生物學(xué) 一．腺病毒的發(fā)現(xiàn)

二．腺病毒的毒粒結(jié)構(gòu) 三．基因組結(jié)構(gòu) 四．腺病毒的復(fù)制 五．腺病毒的基因轉(zhuǎn)錄 六．腺病毒與腫瘤

七.腺病毒作為基因治療的載體 第四節(jié) RNA病毒的分子生物學(xué) 一．HCV的發(fā)現(xiàn)

二．HCV基因組的結(jié)構(gòu)與功能 三．HCV基因組的復(fù)制

第五節(jié) 反轉(zhuǎn)錄病毒的分子生物學(xué) 一．艾滋病與HIV 二．病毒的結(jié)構(gòu)與生活周期 三．病毒基因組的結(jié)構(gòu)與功能

四．病毒基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)

五．病毒基因轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)

六．病毒基因在翻譯水平的調(diào)節(jié)和翻譯后調(diào)節(jié)

第六節(jié) 亞病毒的分子生物學(xué)

一．類病毒

二．衛(wèi)星RNA和衛(wèi)星病毒

三．朊病毒

第十六章 蛋白質(zhì)工程及蛋白質(zhì)組學(xué)(3學(xué)時(shí))(掌握)第一節(jié) 概述

一．蛋白質(zhì)工程的概念及流程

二．蛋白質(zhì)工程所應(yīng)用的技術(shù)

第二節(jié) 蛋白質(zhì)工程研究進(jìn)展及展望

一 蛋白質(zhì)工程在認(rèn)識(shí)蛋白質(zhì)分子中的作用

二．蛋白質(zhì)工程在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用

三．蛋白質(zhì)工程在食品工業(yè)中的應(yīng)用

第三節(jié) 蛋白質(zhì)組概述

一．蛋白質(zhì)組學(xué)產(chǎn)生的背景

二．蛋白質(zhì)組以及蛋白質(zhì)組學(xué)的概念

三．蛋白質(zhì)組學(xué)的研究技術(shù)和內(nèi)容

第四節(jié) 蛋白質(zhì)組研究的進(jìn)展

一．原核及簡(jiǎn)單真核生物的蛋白質(zhì)組研究

二．多細(xì)胞真核生物的蛋白質(zhì)組研究 第十七章 腫瘤分子生物學(xué)（3學(xué)時(shí)）(掌握)第一節(jié) 癌細(xì)胞

一．癌的生物學(xué)和細(xì)胞學(xué)特征

二．培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)

三．體外細(xì)胞的轉(zhuǎn)化

四.腫瘤轉(zhuǎn)移

第二節(jié) 病毒癌基因

一．腫瘤病毒

二．反轉(zhuǎn)錄病毒癌基因

三．反轉(zhuǎn)錄病毒癌基因起源

第三節(jié) 細(xì)胞癌基因和腫瘤抑制基因 一．細(xì)胞癌基因的鑒定

二．細(xì)胞癌基因的激活

三．腫瘤抑制基因的發(fā)現(xiàn)

四．腫瘤抑制基因

第四節(jié) 癌基因和腫瘤抑制基因的功能

一．生長(zhǎng)因子

二．生長(zhǎng)因子受體和蛋白激酶

三．轉(zhuǎn)錄因子

四．促分裂信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑

五．細(xì)胞周期調(diào)控

六．發(fā)育、分化和細(xì)胞凋亡

第五節(jié) 病毒癌基因、細(xì)胞癌基因和腫瘤抑制基因之間的相互關(guān)系

三、分子生物學(xué)研究前沿（6學(xué)時(shí)）(熟悉)

（一）細(xì)胞凋亡

（二）干細(xì)胞

（三）分子生物學(xué)研究技術(shù)進(jìn)展及其應(yīng)用

（四）基因疫苗

第三、第二課堂活動(dòng)

1.將生科院內(nèi)能從事分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)計(jì)后, 組織學(xué)生參加科研活動(dòng), 計(jì)劃組織3-5個(gè)科研小組, 每組2-3人, 在課程結(jié)束前, 進(jìn)行論文報(bào)告會(huì)。

2.學(xué)生每人寫一篇分子生物學(xué)方面研究的綜述, 算課外成績(jī), 選出優(yōu)秀的文章在課程結(jié)束前的論文報(bào)告會(huì)上報(bào)告。

3.學(xué)生每人翻譯一篇分子生物學(xué)方面研究的英文論文, 算課外成績(jī)。4.組織學(xué)生論文報(bào)告會(huì)（2-3小時(shí)）, 要求用英語(yǔ)進(jìn)行, 也可用中國(guó)語(yǔ)。對(duì)優(yōu)秀者進(jìn)行獎(jiǎng)勵(lì)，在總成績(jī)中加分。

第二篇：分子生物學(xué)教學(xué)大綱

內(nèi)容 學(xué)時(shí)

課程簡(jiǎn)介與分子生物學(xué)簡(jiǎn)介 5 基因組保持1－核酸與染色體的結(jié)構(gòu) 5 基因組保持2－DNA復(fù)制 7 基因組保持3－DNA突變與修復(fù) 3 基因組保持4－DNA重組 3 基因組表達(dá)1－轉(zhuǎn)錄 7 基因組表達(dá)2－RNA剪接與轉(zhuǎn)錄后加工 5 基因組表達(dá)3－翻譯與遺傳密碼 5 基因調(diào)控1－原核調(diào)控 6 基因調(diào)控2－真核調(diào)控 4 基因調(diào)控3－基因調(diào)控與發(fā)育和疾病 5 方法1－分子生物學(xué)技術(shù) 8 方法2－模式生物 3 總結(jié) 5 機(jī)動(dòng)學(xué)時(shí) 1 總學(xué)時(shí) 72 第一章 課程簡(jiǎn)介與分子生物學(xué)發(fā)展史（教材第一至第五章）

第一節(jié) 課程介紹－教學(xué)目標(biāo)和方法

第二節(jié) 課程介紹－教學(xué)內(nèi)容和安排

第三節(jié) 分子生物學(xué)發(fā)展史1－蒙德爾的生物觀

重點(diǎn)：從名人的研究經(jīng)歷學(xué)法則、長(zhǎng)智慧

第四節(jié) 分子生物學(xué)發(fā)展史2－核酸承載遺傳信息

重點(diǎn)：從重大發(fā)現(xiàn)學(xué)法則、開思路

第五節(jié)化學(xué)弱相互作用與強(qiáng)相互作用決定大分子的結(jié)構(gòu)

第二章 基因組保持1－核酸與染色體的結(jié)構(gòu)（教材第6至第7章）

第一節(jié) DNA的結(jié)構(gòu)與拓?fù)洚悩?gòu)酶

重點(diǎn)：DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)與DNA的功能和復(fù)制之間的關(guān)系，以及DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶在解決細(xì)胞中DNA拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)中的重要性。

第二節(jié) RNA的結(jié)構(gòu)與核酶

重點(diǎn)：RNA可以折疊成高級(jí)結(jié)構(gòu)的機(jī)制，不同核酶的結(jié)構(gòu)與功能。

第三節(jié) 基因組的多樣性

重點(diǎn)：基因組的大小，基因密度與生物復(fù)雜度之間的關(guān)系。

第四節(jié) 染色體復(fù)制與細(xì)胞周期

重點(diǎn)：染色體的結(jié)構(gòu)與復(fù)制中所要解決的問(wèn)題

第五節(jié) 染色體的結(jié)構(gòu)調(diào)控

重點(diǎn)：染色體基本結(jié)構(gòu)，染色體結(jié)構(gòu)的動(dòng)態(tài)性及其生物學(xué)意義，染色體結(jié)構(gòu)動(dòng)態(tài)性機(jī)制。第三章 基因組保持2－DNA復(fù)制（教材第8章）

第一節(jié) DNA復(fù)制的化學(xué)本質(zhì)和DNA聚合酶的催化機(jī)制

重點(diǎn)：DNA復(fù)制的化學(xué)反應(yīng)，聚合酶的結(jié)構(gòu)與催化

第二節(jié) DNA復(fù)制的過(guò)程－原核

重點(diǎn)：不同蛋白因子是如何順序性在復(fù)制過(guò)程中起作用的，先導(dǎo)鏈和滯后鏈復(fù)制的異同，不同DNA聚合酶的作用。

第三節(jié) DNA復(fù)制的過(guò)程－真核 重點(diǎn)：不同蛋白因子和聚合酶是如何順序性在復(fù)制過(guò)程中起作用的，先導(dǎo)鏈和滯后鏈復(fù)制的異同。

第四節(jié)同一復(fù)制叉中先導(dǎo)鏈和滯后鏈同時(shí)被復(fù)制的機(jī)制

重點(diǎn)：Sliding clamps和Clamp loader的作用，Trombone復(fù)制模型

第五節(jié) DNA復(fù)制起始的調(diào)控－普遍機(jī)制和原核機(jī)制

重點(diǎn)：Replicator-initiator互作模型；E.coli的OriC，DnaA-ATP 水平，SeqA蛋白的作用

第六節(jié) DNA復(fù)制起始的調(diào)控－真核

重點(diǎn)：Pre-RC(復(fù)制前復(fù)合物)的形成和調(diào)控。

第七節(jié) DNA復(fù)制起始的結(jié)束

重點(diǎn)：原核－II型拓?fù)洚悩?gòu)酶的作用；真核－染色體復(fù)制的末端問(wèn)題以及端粒酶的作用。第四章 基因組保持3－DNA突變與修復(fù)（教材第9章）

第一節(jié) DNA復(fù)制錯(cuò)誤與修復(fù)

重點(diǎn)：DNA復(fù)制錯(cuò)誤的原因，頻率，錯(cuò)配修復(fù)機(jī)制

第二節(jié) DNA損傷

內(nèi)容：水解和脫氨造成的自然損傷；烷基化，氧化和輻射造成的損傷，堿基類似物和嵌入化合物造成的突變。

第三節(jié) 損傷修復(fù)機(jī)制

內(nèi)容：直接修復(fù)，堿基切除修復(fù)，核苷酸切除修復(fù)，重組修復(fù)，損傷轉(zhuǎn)移修復(fù) 第五章 基因組保持3－DNA重組（教材第10-11章）

第一節(jié) 同源重組

重點(diǎn)：雙鏈斷裂修復(fù)模型，RecBCD途徑，交配型轉(zhuǎn)變與位點(diǎn)特異性雙鏈斷裂。

第二節(jié) 位點(diǎn)特異性重組與DNA轉(zhuǎn)座

內(nèi)容：保守性位點(diǎn)特異性重組概念，機(jī)制以及生物學(xué)意義。DNA轉(zhuǎn)座的類型，機(jī)制和意義 第六章 基因組表達(dá)1－轉(zhuǎn)錄（教材第12章）

第一節(jié) RNA聚合酶與轉(zhuǎn)錄循環(huán)

內(nèi)容：RNA聚合酶的種類和特征，RNA聚合酶催化的轉(zhuǎn)錄步驟，轉(zhuǎn)錄復(fù)合物在轉(zhuǎn)錄過(guò)程中的結(jié)構(gòu)改變。

第二節(jié) 細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄循環(huán)1－啟動(dòng)子和 因子。

第三節(jié)細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄循環(huán)2－轉(zhuǎn)錄的起始，延伸和終止。

第四節(jié)真核轉(zhuǎn)錄1－RNA聚合酶II及其介導(dǎo)的前體mRNA轉(zhuǎn)錄起始

重點(diǎn)：核心啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)，以及普通轉(zhuǎn)錄因子組裝起始復(fù)合物的過(guò)程

其他內(nèi)容：因?yàn)槿旧w高級(jí)結(jié)構(gòu)的原因，體內(nèi)轉(zhuǎn)錄需要Mediator復(fù)合物的作用

第五節(jié) 真核轉(zhuǎn)錄2－RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄的延伸

重點(diǎn)：RNA聚合酶II CTD結(jié)構(gòu)域所結(jié)合蛋白因子的順序置換與前體mRNA的5'加帽，內(nèi)含子剪接，3'加尾和轉(zhuǎn)錄終止。

第六節(jié)真核轉(zhuǎn)錄3－RNA聚合酶I和III轉(zhuǎn)錄rRNA和tRNA，小RNA的機(jī)制 第七章 基因組表達(dá)2－RNA剪接（教材第13章）

第一節(jié) 不同類型內(nèi)含子分布和RNA剪接的化學(xué)性質(zhì)

第二節(jié) I型和II型內(nèi)含子核酶的剪接機(jī)制

重點(diǎn)：結(jié)構(gòu)和催化的化學(xué)反應(yīng)

第三節(jié)真核生物蛋白編碼基因內(nèi)含子的剪接－剪接體的組裝，重排和催化。

重點(diǎn)：剪接體的組分（snRNPs）；剪接體的組裝、重派和催化之間的關(guān)系。

第四節(jié) 可變剪接 重點(diǎn)：生物學(xué)意義，調(diào)控機(jī)制

第五節(jié) 其他加工過(guò)程

內(nèi)容：選擇性剪接體包含不同的snRNPs，RNA編輯，mRNA轉(zhuǎn)運(yùn)。第八章 基因組表達(dá)3－翻譯與遺傳密碼（教材第14－15章）

第一節(jié) mRNA的功能：

內(nèi)容：開放閱讀框決定多肽序列，原核和真核mRNA上的翻譯元件

第二節(jié)轉(zhuǎn)運(yùn)RNA的功能，結(jié)構(gòu)，以及氨基酸裝載過(guò)程

重點(diǎn)：氨基酸裝載的識(shí)別功能

第三節(jié) 核糖體

內(nèi)容：核糖體（翻譯機(jī)器）組裝與循環(huán)，翻譯的化學(xué)特性，核糖體的催化功能。

第四節(jié) 翻譯的循環(huán)

重點(diǎn)：翻譯循環(huán)以原核為模型，強(qiáng)調(diào)真核的不同點(diǎn)

第五節(jié) 遺傳密碼

內(nèi)容：密碼的簡(jiǎn)并性，遺傳密碼使用原則 第九章 原核調(diào)控（教材第16章）

第一節(jié) 調(diào)控的基本原則

重點(diǎn)：調(diào)控蛋白參與的招募調(diào)控；異構(gòu)調(diào)控；基因表達(dá)中的調(diào)控位置

第二節(jié) 細(xì)菌在轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控1：Lac操縱子

重點(diǎn)：Lac 阻遏物的抑制和cAMP響應(yīng)蛋白的激活

第三節(jié) 細(xì)菌在轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控2：可變 因子介導(dǎo)的調(diào)控

第四節(jié) NtrC-MerR介導(dǎo)的調(diào)控：異構(gòu)調(diào)控的實(shí)例

第五節(jié) 細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄起始后調(diào)控1：Trp操縱子

重點(diǎn)：Trp 阻遏物的作用（起始調(diào)控）和弱化作用（轉(zhuǎn)錄后）

第六節(jié) 細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄起始后調(diào)控2：核糖體蛋白是它們自身合成的翻譯阻遏物 第十章 真核調(diào)控（教材第17章）

第一節(jié) 真核保守的調(diào)控機(jī)制

重點(diǎn)：激活因子具有可分離的DNA結(jié)合和激活結(jié)構(gòu)域，DNA結(jié)合和激活結(jié)構(gòu)域的特點(diǎn)

第二節(jié) 真核激活因子可以招募蛋白復(fù)合物以促進(jìn)轉(zhuǎn)錄

內(nèi)容：招募轉(zhuǎn)錄機(jī)器和染色體修飾復(fù)合物，遠(yuǎn)距作用中的loop（環(huán)結(jié)構(gòu)）和insulator(隔離子)第三節(jié) 信號(hào)整合

內(nèi)容：轉(zhuǎn)錄激活因子可以協(xié)同作用以整合信號(hào)；HO基因表達(dá)的控制；組合調(diào)控與啤酒酵母的交配型控制

第四節(jié) 信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄調(diào)控

重點(diǎn)：信號(hào)一般會(huì)被傳送到轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子通過(guò)信號(hào)傳導(dǎo)

第十一章 真核調(diào)控與發(fā)育和疾?。ń滩牡?7－18章，附加內(nèi)容）

第一節(jié) RNA干擾

重點(diǎn)：RNA干擾，小干擾RNA（siRNA）與微小RNA（miRNA）的加工和RNA干擾機(jī)制。

第二節(jié) MicroRNA在發(fā)育中的調(diào)控作用

重點(diǎn)：微小RNA在秀麗線蟲和斑馬魚發(fā)育中的作用；

第三節(jié) 微小RNA在癌癥發(fā)生中的作用

重點(diǎn)：人類微小RNA的介紹；微小RNA在癌癥發(fā)生中表達(dá)譜的變化；微小RNA調(diào)控癌基因表達(dá)的機(jī)制。

第四節(jié) mRNA前體可變剪接調(diào)控在發(fā)育中的作用 第五節(jié)細(xì)胞被指令在不同發(fā)育時(shí)期表達(dá)不同組合基因的三種策略

內(nèi)容：細(xì)胞骨架天然的極性與mRNA在卵和胚胎中的定位；細(xì)胞－細(xì)胞相互作用和所釋放的信號(hào)分子會(huì)引起相鄰細(xì)胞的基因表達(dá)變化；分泌信號(hào)的濃度剃度會(huì)指令處在信號(hào)不同濃度剃度處的細(xì)胞遵循不同的發(fā)育途徑。

第十二章 方法1－分子生物學(xué)技術(shù)（教材第20章，附加內(nèi)容）

第一節(jié) 核酸技術(shù)1－基本操作

重點(diǎn)：電泳，酶切，雜交（Southern），PCR技術(shù)的原理，過(guò)程和應(yīng)用。

第二節(jié) 核酸技術(shù)2－克隆技術(shù)

重點(diǎn)：克隆載體與克隆技術(shù)，基因組和cDNA文庫(kù)建立

第三節(jié) 核酸技術(shù)3－測(cè)序

重點(diǎn)：普通測(cè)序，基因組測(cè)序和序列分析

第四節(jié) 基因表達(dá)及表達(dá)分析

重點(diǎn)：外源基因表達(dá)方法，RNA和蛋白質(zhì)的提取，分析與鑒定

第五節(jié) 蛋白質(zhì)純化技術(shù)

第六節(jié) 質(zhì)譜與蛋白組學(xué)

第七節(jié) 蛋白質(zhì)與核酸相互作用的研究

第八節(jié) 大分子結(jié)構(gòu)的研究方法

重點(diǎn)：結(jié)晶學(xué)，核磁共振

第十三章 方法2－模式生物（教材第20章）

第一節(jié) 細(xì)菌和酵母

第二節(jié) 秀麗線蟲和果蠅

第三節(jié) 小鼠

第三篇：分子生物學(xué)教學(xué)大綱

一．課程內(nèi)容與學(xué)時(shí)分配 內(nèi)容

學(xué)時(shí)

課程簡(jiǎn)介與分子生物學(xué)發(fā)展史和知識(shí)框架DNA和RNA的結(jié)構(gòu)

DNA復(fù)制

基因組表達(dá)1－轉(zhuǎn)錄

基因組表達(dá)2－RNA剪接與轉(zhuǎn)錄后加工

基因組表達(dá)3－翻譯與遺傳密碼

基因調(diào)控1－原核調(diào)控

基因調(diào)控2－真核調(diào)控

基因調(diào)控3－調(diào)控RNAs分子生物學(xué)技術(shù)平時(shí)小考兩次總學(xué)時(shí)

第一章

課程簡(jiǎn)介與分子生物學(xué)發(fā)展史（教材第1至第5章）第一節(jié)

課程介紹－教學(xué)目標(biāo)和方法 第二節(jié)

課程介紹－教學(xué)內(nèi)容和安排

第三節(jié)

分子生物學(xué)發(fā)展史1－蒙德爾的生物觀

重點(diǎn)：從名人的研究經(jīng)歷學(xué)法則、長(zhǎng)智慧 第四節(jié)

分子生物學(xué)發(fā)展史2－核酸承載遺傳信息

重點(diǎn)：從重大發(fā)現(xiàn)學(xué)法則、開思路

第五節(jié)

化學(xué)弱相互作用與強(qiáng)相互作用決定大分子的結(jié)構(gòu) 第二章

核酸結(jié)構(gòu)（教材第6章）第一節(jié) DNA的結(jié)構(gòu)與拓?fù)洚悩?gòu)酶

重點(diǎn)：DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)與DNA的功能和復(fù)制之間的關(guān)系，以及DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶在解決細(xì)胞中DNA拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)中的重要性 第二節(jié) RNA的結(jié)構(gòu)與核酶

重點(diǎn)：RNA可以折疊成高級(jí)結(jié)構(gòu)的機(jī)制，不同核酶的結(jié)構(gòu)與功能 第三章 DNA復(fù)制（教材第8章）

第一節(jié) DNA復(fù)制的化學(xué)本質(zhì)和DNA聚合酶的催化機(jī)制

重點(diǎn)：DNA復(fù)制的化學(xué)反應(yīng)，聚合酶的結(jié)構(gòu)與催化

第二節(jié) DNA復(fù)制的過(guò)程－原核

重點(diǎn)：不同蛋白因子是如何順序性在復(fù)制過(guò)程中起作用的，先導(dǎo)鏈和滯后鏈復(fù)制的異同，不同DNA聚合酶的作用

第三節(jié) DNA復(fù)制的過(guò)程－真核

重點(diǎn)：不同蛋白因子和聚合酶是如何順序性在復(fù)制過(guò)程中起作用的，先導(dǎo)鏈和滯后鏈復(fù)制的異同

第四節(jié)

同一復(fù)制叉中先導(dǎo)鏈和滯后鏈同時(shí)被復(fù)制的機(jī)制

重點(diǎn)：Sliding clamps和Clamp loader的作用，Trombone復(fù)制模型

第五節(jié) DNA復(fù)制起始的調(diào)控－普遍機(jī)制和原核機(jī)制

重點(diǎn)：Replicator-initiator互作模型；E.coli的OriC，DnaA-ATP 水平，SeqA蛋白的作用

第六節(jié) DNA復(fù)制起始的調(diào)控－真核

重點(diǎn)：Pre-RC(復(fù)制前復(fù)合物)的形成和調(diào)控

第七節(jié) DNA復(fù)制起始的結(jié)束

重點(diǎn)：原核－II型拓?fù)洚悩?gòu)酶的作用；真核－染色體復(fù)制的末端問(wèn)題以及端粒酶的作用 第四章

基因表達(dá)1－轉(zhuǎn)錄（教材第12章）第一節(jié) RNA聚合酶與轉(zhuǎn)錄循環(huán)

內(nèi)容：RNA聚合酶的種類和特征，RNA聚合酶催化的轉(zhuǎn)錄步驟，轉(zhuǎn)錄復(fù)合物在轉(zhuǎn)錄過(guò)程中的結(jié)構(gòu)改變 第二節(jié)

細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄循環(huán)1－啟動(dòng)子和 因子

第三節(jié)

細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄循環(huán)2－轉(zhuǎn)錄的起始，延伸和終止

第四節(jié)

真核轉(zhuǎn)錄1－RNA聚合酶II及其介導(dǎo)的前體mRNA轉(zhuǎn)錄起始 重點(diǎn)：核心啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)，以及普通轉(zhuǎn)錄因子組裝起始復(fù)合物的過(guò)程

其他內(nèi)容：因?yàn)槿旧w高級(jí)結(jié)構(gòu)的原因，體內(nèi)轉(zhuǎn)錄需要Mediator復(fù)合物的作用 第五節(jié)

真核轉(zhuǎn)錄2－RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄的延伸

重點(diǎn)：RNA聚合酶II CTD結(jié)構(gòu)域所結(jié)合蛋白因子的順序置換與前體mRNA的5'加帽，內(nèi)含子剪接，3'加尾和轉(zhuǎn)錄終止 第六節(jié)

真核轉(zhuǎn)錄3－RNA聚合酶I和III轉(zhuǎn)錄rRNA和tRNA，小RNA的機(jī)制 第五章

基因組表達(dá)2－RNA剪接（教材第13章）第一節(jié)

不同類型內(nèi)含子分布和RNA剪接的化學(xué)性質(zhì) 第二節(jié) I型和II型內(nèi)含子核酶的剪接機(jī)制 重點(diǎn)：結(jié)構(gòu)和催化的化學(xué)反應(yīng)

第三節(jié)

真核生物蛋白編碼基因內(nèi)含子的剪接－剪接體的組裝，重排和催化

重點(diǎn)：剪接體的組分（snRNPs）；剪接體的組裝、重派和催化之間的關(guān)系

第四節(jié)

可變剪接

重點(diǎn)：生物學(xué)意義，調(diào)控機(jī)制

第五節(jié)

其他加工過(guò)程

內(nèi)容：選擇性剪接體包含不同的snRNPs，RNA編輯，mRNA轉(zhuǎn)運(yùn) 第六章

基因組表達(dá)3－翻譯與遺傳密碼（教材第14－15章）第一節(jié) mRNA的功能

內(nèi)容：開放閱讀框決定多肽序列，原核和真核mRNA上的翻譯元件 第二節(jié)

轉(zhuǎn)運(yùn)RNA的功能，結(jié)構(gòu)，以及氨基酸裝載過(guò)程

重點(diǎn)：氨基酸裝載的識(shí)別功能 第三節(jié)

核糖

內(nèi)容：核糖體（翻譯機(jī)器）組裝與循環(huán)，翻譯的化學(xué)特性，核糖體的催化功能。第四節(jié)

翻譯的循環(huán)

重點(diǎn)：翻譯循環(huán)以原核為模型，強(qiáng)調(diào)真核的不同點(diǎn) 第五節(jié)

遺傳密碼

內(nèi)容：密碼的簡(jiǎn)并性，遺傳密碼使用原則 第七章

原核調(diào)控（教材第16章）

第一節(jié) 調(diào)控的基本原則

重點(diǎn)：調(diào)控蛋白參與的招募調(diào)控；異構(gòu)調(diào)控；基因表達(dá)中的調(diào)控位置

第二節(jié) 細(xì)菌在轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控1：Lac操縱子

重點(diǎn)：Lac 阻遏物的抑制和cAMP響應(yīng)蛋白的激活

第三節(jié) 細(xì)菌在轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控2：可變因子介導(dǎo)的調(diào)控

第四節(jié) NtrC-MerR介導(dǎo)的調(diào)控：異構(gòu)調(diào)控的實(shí)例

第五節(jié) 細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄起始后調(diào)控1：Trp操縱子

重點(diǎn)：Trp 阻遏物的作用（起始調(diào)控）和弱化作用（轉(zhuǎn)錄后）

第六節(jié) 細(xì)菌的轉(zhuǎn)錄起始后調(diào)控2：核糖體蛋白是它們自身合成的翻譯阻遏物 第八章

真核調(diào)控（教材第17章）

第一節(jié) 真核保守的調(diào)控機(jī)制

重點(diǎn)：激活因子具有可分離的DNA結(jié)合和激活結(jié)構(gòu)域，DNA結(jié)合和激活結(jié)構(gòu)域的特點(diǎn)

第二節(jié) 真核激活因子可以招募蛋白復(fù)合物以促進(jìn)轉(zhuǎn)錄

內(nèi)容：招募轉(zhuǎn)錄機(jī)器和染色體修飾復(fù)合物，遠(yuǎn)距作用中的loop（環(huán)結(jié)構(gòu)）和insulator(隔離子)

第三節(jié) 信號(hào)整合

內(nèi)容：轉(zhuǎn)錄激活因子可以協(xié)同作用以整合信號(hào)；HO基因表達(dá)的控制；組合調(diào)控與啤酒酵母的交配型控制

第四節(jié) 信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄調(diào)控

重點(diǎn)：信號(hào)一般會(huì)被傳送到轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子通過(guò)信號(hào)傳導(dǎo) 第九章

調(diào)控RNAs（教材第18章，附加內(nèi)容）

第一節(jié) RNA干擾

重點(diǎn)：RNA干擾，小干擾RNA（siRNA）與微小RNA（miRNA）的加工和RNA干擾機(jī)制

第二節(jié) MicroRNA在發(fā)育中的調(diào)控作用

重點(diǎn)：微小RNA在秀麗線蟲和斑馬魚發(fā)育中的作用；第三節(jié) 微小RNA在癌癥發(fā)生中的作用

重點(diǎn)：人類微小RNA的介紹；微小RNA在癌癥發(fā)生中表達(dá)譜的變化；微小RNA調(diào)控癌基因表達(dá)的機(jī)制

第四節(jié) mRNA前體可變剪接調(diào)控在發(fā)育中的作用

第五節(jié) 細(xì)胞被指令在不同發(fā)育時(shí)期表達(dá)不同組合基因的三種策略

內(nèi)容：細(xì)胞骨架天然的極性與mRNA在卵和胚胎中的定位；細(xì)胞－細(xì)胞相互作用和所釋放的信號(hào)分子會(huì)引起相鄰細(xì)胞的基因表達(dá)變化；分泌信號(hào)的濃度剃度會(huì)指令處在信號(hào)不同濃度剃度處的細(xì)胞遵循不同的發(fā)育途徑。第十章

分子生物學(xué)技術(shù)（教材第21章，附加內(nèi)容）

第一節(jié) 核酸技術(shù)1－基本操作

重點(diǎn)：電泳，酶切，雜交（Southern），PCR技術(shù)的原理，過(guò)程和應(yīng)用。

第二節(jié) 核酸技術(shù)2－克隆技術(shù)

重點(diǎn)：克隆載體與克隆技術(shù)，基因組和cDNA文庫(kù)建立

第三節(jié) 核酸技術(shù)3－測(cè)序

重點(diǎn)：普通測(cè)序，基因組測(cè)序和序列分析

第四節(jié) 基因表達(dá)及表達(dá)分析

重點(diǎn)：外源基因表達(dá)方法，RNA和蛋白質(zhì)的提取，分析與鑒定

第五節(jié) 蛋白質(zhì)純化技術(shù)

第六節(jié) 質(zhì)譜與蛋白組學(xué)

第七節(jié) 蛋白質(zhì)與核酸相互作用的研究

第八節(jié) 大分子結(jié)構(gòu)的研究方法 重點(diǎn)：結(jié)晶學(xué)，核磁共振

第四篇：分子生物學(xué)課程教學(xué)大綱

《分子生物學(xué)》課程教學(xué)大綱（理論學(xué)時(shí)：16學(xué)時(shí)）

使用教材： 醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)

（供8年制及7年制臨床醫(yī)學(xué)等專業(yè)用）

分子生物學(xué)是一門從分子水平研究生命現(xiàn)象、生命的本質(zhì)、生命活動(dòng)及其規(guī)律的科學(xué)。醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)是分子生物學(xué)的一個(gè)重要分支，是從分子水平研究人體在正常及疾病狀態(tài)下生命活動(dòng)及其規(guī)律的一門科學(xué)。它主要研究人體生物大分子和大分子體系的結(jié)構(gòu)、功能、相互作用及其同疾病發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。作為一門課程，醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)涵蓋了醫(yī)學(xué)各專業(yè)學(xué)生必須學(xué)習(xí)的分子生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)，以及分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中形成的專門研究領(lǐng)域及相關(guān)知識(shí)。

醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)既要較系統(tǒng)地了解分子生物學(xué)的基礎(chǔ)理論知識(shí)和技術(shù)理論知識(shí)，同時(shí)也要了解分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用和相關(guān)研究進(jìn)展。

本書共二十三章，包括5個(gè)方面內(nèi)容。第二章至第十章介紹分子生物學(xué)基本知識(shí)，主要介紹基因和基因組的基本概念和基本特點(diǎn)，基因組核酸復(fù)制與損傷修復(fù)、基因表達(dá)和功能蛋白形成與降解、基因表達(dá)調(diào)控、細(xì)胞間通訊與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的基本概念和基本理論，細(xì)胞增殖與凋亡的相關(guān)分子生物學(xué)機(jī)制。第十一章至第十三章介紹基因操作的基本知識(shí)，包括基因分析、基因功能研究和基因克隆與表達(dá)的相關(guān)基本知識(shí)和研究策略。第十四章至第十八章介紹疾病分子生物學(xué)機(jī)制，介紹了基因和基因組、細(xì)胞間通訊和信號(hào)與人類健康和疾病之間關(guān)系。第十九章至第二十一章介紹分子生物學(xué)理論與技術(shù)在醫(yī)學(xué)中應(yīng)用，包括基因診斷和基因治療概念與相關(guān)研究。最后兩章介紹分子生物學(xué)新興研究領(lǐng)域、生物信息學(xué)在基因和蛋白質(zhì)研究中的應(yīng)用。

本大綱正是從上述目的出發(fā)，在要求學(xué)生掌握分子生物學(xué)基本知識(shí)與基本技術(shù)，同時(shí)了解分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用與相關(guān)研究。使學(xué)生們?cè)诜肿铀缴涎芯咳梭w在正常及疾病狀態(tài)下生命活動(dòng)及其規(guī)律，為從事臨床醫(yī)學(xué)打下深厚的基礎(chǔ)。

緒 論

一、目的要求

了解分子生物學(xué)的定義、研究對(duì)象和研究?jī)?nèi)容；分子生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史；生物遺傳物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)；現(xiàn)代分子生物學(xué)的建立和深入發(fā)展；分子生物學(xué)與相關(guān)學(xué)科的關(guān)系；分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)中的應(yīng)用。

二、主要內(nèi)容

分子生物學(xué)則是從分子水平研究生命現(xiàn)象及其規(guī)律的一門新興學(xué)科。它以核酸和蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能為研究對(duì)象

（一）、分子生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容

分子生物學(xué)主要研究生物大分子的結(jié)構(gòu)、功能、生物大分子之間的相互作用及其與疾病發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。

研究?jī)?nèi)容主要包括以下三個(gè)方面。1.核酸分子生物學(xué) 2.蛋白質(zhì)分子生物學(xué) 3.細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

（二）、分子生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史

1、生物遺傳物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)

2、現(xiàn)代分子生物學(xué)的建立

3、現(xiàn)代分子生物學(xué)的深入發(fā)展

（三）、分子生物學(xué)與相關(guān)學(xué)科的關(guān)系

由于生命本質(zhì)的高度一致性，分子生物學(xué)已經(jīng)對(duì)生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域產(chǎn)生了全面而深刻的影響，并逐步形成了一系列的分子學(xué)科?？梢允褂猛惶桌碚?、同一套技術(shù)，來(lái)解釋和研究不同的病理、生理現(xiàn)象，甚至治療不同的疾病。

1、分子生物學(xué)與生物化學(xué)

2、細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)

3、分子生物學(xué)與遺傳學(xué)

4、分子生物學(xué)與生物技術(shù)

（四）、分子生物學(xué)與醫(yī)學(xué)未來(lái)

分子生物學(xué)的發(fā)展和滲透從根本上改變了醫(yī)學(xué)（包括臨床和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)）各個(gè)學(xué)科的格局, 使醫(yī)學(xué)各學(xué)科進(jìn)入了一個(gè)更高的水平——分子水平。

1、分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)中的應(yīng)用

2、分子生物學(xué)與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)

3、分子生物學(xué)和病理學(xué)

4、分子生物學(xué)和疾病診斷

5、分子生物學(xué)和疾病治療

基因治療技術(shù)的發(fā)展與整個(gè)醫(yī)學(xué)科學(xué)的發(fā)展以及許多分子生物學(xué)新理論、新技術(shù)、新方法的應(yīng)用密切相關(guān)。

所謂基因治療，就是用正?；蛑脫Q致病基因以糾正患者基因結(jié)構(gòu)和功能異常的一種疾病治療的方法。

狹義的基因治療是指目的基因?qū)氚屑?xì)胞后與宿主細(xì)胞內(nèi)的基因發(fā)生整合、成為宿主基因組的一部分，目的基因的表達(dá)產(chǎn)物起治療疾病的作用。廣義的基因治療則包括通過(guò)基因轉(zhuǎn)移技術(shù)，使目的基因得到表達(dá)，封閉、剪切致病基因的mRNA，或自殺基因產(chǎn)物催化藥物前體轉(zhuǎn)化為細(xì)胞毒性物質(zhì)，殺死腫瘤細(xì)胞，從而達(dá)到治療疾病的目的。

三、學(xué)時(shí)安排 1學(xué)時(shí)

第二章 基因與基因組

一、目的要求：

（一）掌握：基因的概念及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)；中心法則；基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控相關(guān)序列；多順?lè)醋樱瑔雾樂(lè)醋?；真核基因與原核基因的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)?；蚪M的概念；病毒、細(xì)菌及真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特征。

（二）熟悉：基因突變的意義，基因組變異的生理和病理學(xué)意義。

（三）了解：基因的命名法，基因組學(xué)；人類基因組計(jì)劃。

二、主要內(nèi)容

基因是負(fù)責(zé)編碼RNA或一條多肽鏈的DNA片段，包括編碼序列、編碼序列外的側(cè)翼序列及插入序列。編碼RNA或蛋白質(zhì)的DNA序列稱為結(jié)構(gòu)基因。原核生物的結(jié)構(gòu)基因是連續(xù)的，其RNA合成后不需要經(jīng)過(guò)剪接加工。而大多數(shù)真核生物基因在編碼區(qū)內(nèi)有非編碼的插入序列?；蛑泻信c轉(zhuǎn)錄有關(guān)調(diào)控序列。真核生物基因中調(diào)控序列一般稱為順式作用元件。

大多數(shù)生物的遺傳信息都是以特定的核苷酸排列順序貯存在DNA分 子中。但在一些病毒中，RNA作為遺傳物質(zhì)。多數(shù)生物信息按照從DNA到RNA再到蛋白質(zhì)的方向流。但是對(duì)RNA病毒是以RNA為模板，合成單鏈DNA，然后再合成雙鏈DNA。

mRNA將DNA中信息傳遞給蛋白質(zhì)。在mRNA編碼區(qū)內(nèi)每三個(gè)連續(xù)核苷酸，對(duì)應(yīng)多肽鏈一個(gè)氨基酸，指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成。原核生物mRNA稱多順?lè)醋觤RNA，而真核生物mRNA稱單順?lè)醋觤RNA。

基因突變?cè)谶M(jìn)化上具有重要意義，它是形成生物多樣性主要因素之一。同時(shí)基因突變可以改變遺傳信息，導(dǎo)致疾病。導(dǎo)致基因突變因素有自發(fā)、物理、化學(xué)因素等，基因突變可直接影響蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致疾病或?qū)膊∫赘小?/p>

基因命名的基本原則是簡(jiǎn)明、獨(dú)特、能夠表達(dá)基因的特征或功能?；蚍?hào)的命名也應(yīng)遵循獨(dú)特、簡(jiǎn)短、僅含有大寫拉丁字母或大寫字母和阿拉伯?dāng)?shù)字、不應(yīng)含有標(biāo)點(diǎn)符號(hào)的基本原則。

1．重點(diǎn)內(nèi)容：基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控相關(guān)序列；多順?lè)醋?，單順?lè)醋樱换蚪M的概念；病毒、細(xì)菌及真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特征。

2．難點(diǎn)內(nèi)容：基因的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特征。

三、學(xué)時(shí)安排

5學(xué)時(shí)

第三章 基因表達(dá)與基因表達(dá)調(diào)控

一、目的要求：

（一）掌握：遺傳信息表達(dá)，轉(zhuǎn)錄，翻譯，有意義鏈，轉(zhuǎn)錄模板鏈，開放閱讀框，遺傳密碼等基本概念?；虮磉_(dá)，管家基因，組成性基因表達(dá)，誘導(dǎo)表達(dá)，阻遏表達(dá)，協(xié)調(diào)表達(dá)，表達(dá)調(diào)控，反式作用因子，表達(dá)組織特異性等基本概念；乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)及其調(diào)節(jié)機(jī)制。

（二）熟悉：原核生物RNA和蛋白質(zhì)的生物合成基本過(guò)程，真核生物RNA和蛋白質(zhì)合成特點(diǎn)；真核生物基因表達(dá)調(diào)控的各個(gè)水平，DNA水平調(diào)控的不同方式，反式作用因子的主要特點(diǎn)和調(diào)節(jié)方式，轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的不同環(huán)節(jié)，翻譯水平和翻譯后水平調(diào)控的基本環(huán)節(jié)

（三）、了解：了解轉(zhuǎn)錄和翻譯后的加工。反式作用因子結(jié)構(gòu)域模式和反式作用因子的作用方式，基因表達(dá)的組織特異性和時(shí)相性。

二、主要內(nèi)容

原核生物基因表達(dá)調(diào)控主要是在轉(zhuǎn)錄水平和翻譯水平。轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控涉及啟動(dòng)子、S因子、阻遏蛋白、正調(diào)控蛋白等多種因素，翻譯水平的調(diào)控則涉及SD序列、mRNA的穩(wěn)定性及翻譯產(chǎn)物的調(diào)控。

真核生物基因表達(dá)調(diào)控環(huán)節(jié)較多，在DNA水平可通過(guò)染色體丟失、基因擴(kuò)增、基因重排、DNA甲基化以及染色質(zhì)結(jié)構(gòu)改變影響基因表達(dá)；在轉(zhuǎn)錄水平則主要通過(guò)反式作用因子的作用調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子與TATA盒的結(jié)合、RNA聚合酶與轉(zhuǎn)錄因子-DNA復(fù)合物的結(jié)合以及轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成；在轉(zhuǎn)錄后水平主要通過(guò)RNA修飾、剪接及mRNA運(yùn)輸?shù)目刂苼?lái)影響基因表達(dá)；影響翻譯水平的因素有影響翻譯起始的陰遏蛋白、5`AUG、5` 端非編碼區(qū)的長(zhǎng)度等，另外還存在小分子反義RNA對(duì)翻譯調(diào)控。翻譯后蛋白質(zhì)修飾和定位也是表達(dá)調(diào)控的重要環(huán)節(jié)。

同時(shí)近年提出的有關(guān)基因表達(dá)的統(tǒng)一理論慚被認(rèn)識(shí)。從而形成一個(gè)完整的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

1、重點(diǎn)內(nèi)容：

原核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機(jī)制；真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機(jī)制；真核生物轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控機(jī)制。

2、難點(diǎn)內(nèi)容：

原核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機(jī)制。

三、學(xué)時(shí)安排

4學(xué)時(shí)

第四章 基因分析的基本策略

一、目的要求

（一）掌握：Southern 雜交和PCR等技術(shù)原理及在分析基因拷貝數(shù)的應(yīng)用；Northern blot和RT-PCR技術(shù)原理及在基因轉(zhuǎn)錄水平變化分析中的應(yīng)用；

（二）熟悉：Western blot 原理及在特定基因產(chǎn)物-蛋白質(zhì)分析中的應(yīng)用。

（三）了解：DNA序列測(cè)定的原理及其主要應(yīng)用；RNA酶保護(hù)試驗(yàn)原理及應(yīng)用；原位雜交技術(shù)；DNA微陣列技術(shù)原理； 流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用；免疫 組化方法的應(yīng)用。

二、主要內(nèi)容

基因分析是一種策略性很強(qiáng)的工作，有許多技術(shù)可以用于基因分析，正確選擇實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法和基因分析切入點(diǎn)是進(jìn)行基因分析首先要考慮的問(wèn)題。根據(jù)信息中心法則，DNA是遺傳信息的攜帶者，RNA是基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，蛋白質(zhì)是結(jié)構(gòu)基因的最終產(chǎn)物，因此，分析基因可從DNA、RNA、蛋白質(zhì)水平上進(jìn)行。同時(shí)研究者善于將各種技術(shù)有機(jī)結(jié)合起來(lái)，根據(jù)研究目的篩選適當(dāng)技術(shù)方法，也可先制定研究策略，再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線設(shè)計(jì)。

1、重點(diǎn)內(nèi)容：Southern 雜交和PCR等技術(shù)原理及應(yīng)用；Northern blot和RT-PCR技術(shù)原理及應(yīng)用Western blot 原理及應(yīng)用。

2、難點(diǎn)內(nèi)容：RNA酶保護(hù)試驗(yàn)原理及應(yīng)用。

三、學(xué)時(shí)安排

3學(xué)時(shí)

第五章基因功能分析的基本策略

一、目的要求

（一）掌握：轉(zhuǎn)基因模型研究基因的功能原理、基因敲除技術(shù)原理、利用基因沉默技術(shù)對(duì)基因功能進(jìn)行分析的原理

（二）了解；三種實(shí)驗(yàn)技術(shù)的操作過(guò)程及注意事項(xiàng)

二、主要內(nèi)容

基因功能分析可以在DNA、RNA和蛋白質(zhì)水平上采用不同的技術(shù)和模 型來(lái)實(shí)現(xiàn)。模式生物是研究基因功能不可缺少的工具，轉(zhuǎn)基因小鼠和基因敲除技術(shù)是目前研究特定基因功能最常用的動(dòng)物模型，轉(zhuǎn)染細(xì)胞是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)建立的細(xì)胞模型。RNA干涉技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)在RNA水平上暫時(shí)關(guān)閉特定基因的方法。各種方法都具有各自的特點(diǎn)及局限性，研究者可根據(jù)不同目的篩選最合適方法與模型，實(shí)現(xiàn)對(duì)特定基因功能的研究目的。

1、重點(diǎn)內(nèi)容：轉(zhuǎn)基因技術(shù)、基因敲除技術(shù)及RNA干涉技術(shù)原理

2、難點(diǎn)內(nèi)容：轉(zhuǎn)基因技術(shù)、基因敲除技術(shù)及RNA干涉技術(shù)各自優(yōu)點(diǎn)及局限性

三、學(xué)時(shí)安排

3學(xué)時(shí)

第六章 基因工程與體外表達(dá)

一、目的要求：

（一）、掌握：常用克隆載體；基因克隆的基本過(guò)程；外源基因在大腸桿菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的原理和方法。

（二）、熟悉：限制性核酸內(nèi)切酶和其他常用工具酶的概念和特點(diǎn)；定點(diǎn)誘變技術(shù)原理。

（三）、了解：昆蟲表達(dá)系統(tǒng)；酵母表達(dá)系統(tǒng)。

二、主要內(nèi)容：

基因工程指在體外對(duì)DNA分子按照既定的目的與方案進(jìn)行剪切和重新連接，或?qū)NA中某個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行人工替換或刪除，改造基因結(jié)構(gòu)，然 后利用轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染、感染等方法將重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞，使DNA片段得到擴(kuò)增。DNA的體外剪切和重新連接是在限制性核酸內(nèi)切酶、邊接酶以及其他修飾酶的參與下進(jìn)行的。不同目的的克隆基因需要不同的載體，常用的載體有質(zhì)粒、噬菌體和粘性質(zhì)粒等。載體可與外源DNA在體外連接，構(gòu)成重組DNA分子，導(dǎo)入相應(yīng)的宿主細(xì)胞，能在宿主細(xì)胞中自行復(fù)制與表達(dá)。

克隆的基因可進(jìn)一步用于表達(dá)有關(guān)基因的產(chǎn)物，進(jìn)行DNA序列分析，基因治療，研究基因表達(dá)的調(diào)節(jié)因子以及基因的功能等。還可通過(guò)寡核苷酸介導(dǎo)法、含U模板法、PCR介導(dǎo)的定點(diǎn)誘變法等技術(shù)，定向改變克隆基因的序列結(jié)構(gòu)，從而改造相應(yīng)蛋白的結(jié)構(gòu)。

基因工程在得到重組體后，通常利用大腸桿菌、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、昆蟲、酵母等表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行克隆基因的體外表達(dá)。

1、重點(diǎn)內(nèi)容：基因克隆的基本操作過(guò)程。

2、難點(diǎn)內(nèi)容：α－互補(bǔ)篩選；陽(yáng)性轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選；定點(diǎn)誘變技術(shù)原理。

三、學(xué)時(shí)安排：

6學(xué)時(shí)

第七章 基因診斷(自學(xué))

一、目的要求：

（一）掌握：基因診斷的基本概念；掌握基因診斷中常用的分子生物學(xué)技術(shù)——核酸分子雜交、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）、單鏈構(gòu)象多態(tài)性（SSCP）檢測(cè)、限制性酶酶譜分析、DNA序列測(cè)定、DNA 芯片技術(shù)；

（二）熟悉基因診斷的基本方法；

（三）了解遺傳病、感染性疾病以及腫瘤的基因診斷的策略；了解基因診斷在法醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用。

二、主要內(nèi)容：

基因診斷已成為臨床實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)的一個(gè)重要組成部分。PCR擴(kuò)增和分子雜交是現(xiàn)代基因診斷技術(shù)的基本方法，基因診斷的基本操作流程是：樣本抽提、樣本擴(kuò)增、分子雜交和信號(hào)檢測(cè)。遺傳病的基因診斷主要是針對(duì)DNA分子的遺傳分析技術(shù)，其基本方法學(xué)包括連鎖分析和直接診斷。用作連鎖分析的遺傳標(biāo)志物主要有RFLP、STR、SNP。用于遺傳分析的代表性直接診斷技術(shù)有：用于DNA制圖的Southern印跡法、用于檢測(cè)點(diǎn)突變的ASO分子雜交法以及用于識(shí)別STR序列的PCR直接擴(kuò)增法等。同時(shí)基因診斷技術(shù)已經(jīng)成為現(xiàn)代法醫(yī)學(xué)的重要內(nèi)容。

1、重點(diǎn)內(nèi)容：各種檢測(cè)方法原理

2、難點(diǎn)內(nèi)容：各自優(yōu)點(diǎn)及缺點(diǎn)

三、學(xué)時(shí)安排

3學(xué)時(shí)

第八章 基因治療(自學(xué))

一、目的要求：

（一）掌握：基因治療、基因標(biāo)記、基因置換、基因添加、基因干預(yù)、反義RNA、核酶等基本概念；

（二）熟悉：基因轉(zhuǎn)移技術(shù)，逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒載體的特點(diǎn)；熟悉腫瘤基因治療思路，理解抑癌基因治療原理、實(shí)驗(yàn)研究和臨床試驗(yàn)及腫瘤的免疫基因治療；理解反義RNA在基因治療中的意義和應(yīng)用；

（三）了解：了解其它基因轉(zhuǎn)移方法；了解核酶及三鏈DNA在基因治療中的意義和基本原理；了解基因治療的前景與問(wèn)題。

二、主要內(nèi)容

基因治療是指以改變?nèi)祟愡z傳物質(zhì)為基礎(chǔ)的生物醫(yī)學(xué)學(xué)治療，即通過(guò)一定方式將人正?；蛞吧突蚧蛴兄委熥饔玫腄NA順序?qū)肴梭w靶細(xì)胞，以矯正或轉(zhuǎn)換致病基因的治療方法。目前開展基因治療方案采取的策略包括：用正?；蛑脫Q染色體上致病基因，將正?；蜣D(zhuǎn)移至患者的宿主細(xì)胞，使治療基因代替致病基因表達(dá)正常蛋白質(zhì)而發(fā)揮作用；向患者體內(nèi)或腫瘤細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入腫瘤抑制基因，以抑制其表達(dá)；也可用反義RNA、SiRNA、核酶、肽核酸抑制或封閉有害基因mRNA表達(dá)；也可將抗體、細(xì)胞因子等基因?qū)肽[瘤細(xì)胞以激活體內(nèi)免疫細(xì)胞活力，增強(qiáng)患者免疫力。

治療基因?qū)塍w內(nèi)方法有非病毒方法與病毒方法，非病毒方法包括直接注射法、電穿孔法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)運(yùn)法，其方法安全性好但效率低。與病毒方法各具有不同優(yōu)缺點(diǎn)。

1、重點(diǎn)內(nèi)容：基因治療概念、基因治療策略方法、2、難點(diǎn)內(nèi)容：治療基因?qū)塍w內(nèi)方法，各自優(yōu)缺點(diǎn)、病毒載體結(jié)構(gòu)特點(diǎn)；核酶及三鏈DNA在基因治療的原理

三、學(xué)時(shí)安排

3學(xué)時(shí)

第九章 基因組學(xué)與醫(yī)學(xué)(自學(xué))

一、目的求：

（一）掌握：基因組學(xué)、人類基因組計(jì)劃、基因病和SNP的概念；結(jié)構(gòu)基因組學(xué)、功能基因組學(xué)的概念及研究?jī)?nèi)容。

（二）熟悉：比較基因組學(xué)的概念；疾病相關(guān)基因的鑒定策略。

（三）了解：基因組學(xué)與醫(yī)學(xué)的關(guān)系。

二、主要內(nèi)容

人類基因組計(jì)劃的研究目標(biāo)是闡明構(gòu)成人類基因組的全部DNA的結(jié)構(gòu)；闡明基因的編碼方式和分布特點(diǎn)；理解基因及其調(diào)控序列之間的相互關(guān)系；理解DNA全部序列所蘊(yùn)藏的意義。該計(jì)劃包括為遺傳圖譜、物理圖譜、序列圖譜、轉(zhuǎn)錄圖譜分析。

功能基因組學(xué)是研究基因組中所有基因功能的學(xué)科。功能基因組學(xué)是從基因整體水平對(duì)基因的活動(dòng)規(guī)律進(jìn)行探討，其研究?jī)?nèi)容主要包括基因組的表達(dá)、蛋白質(zhì)產(chǎn)物的功能、基因組多樣性的研究、基因組功能注釋。

1、重點(diǎn)內(nèi)容：人類基因組計(jì)劃、功能基因組學(xué)的研究?jī)?nèi)容。

2、難點(diǎn)內(nèi)容：功能基因組學(xué)的研究?jī)?nèi)容。

三、學(xué)時(shí)安排 2學(xué)時(shí)

四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及學(xué)時(shí)安排

1大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取 3學(xué)時(shí) 2瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA 3學(xué)時(shí) 3 DNA純度、濃度和分子量的測(cè)定 4學(xué)時(shí) 4大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備與轉(zhuǎn)化 4學(xué)時(shí) 5動(dòng)植物基因組DNA的提取與純化 4學(xué)時(shí)

第五篇：《生物化學(xué)與分子生物學(xué)》教學(xué)大綱

分子生物學(xué)（Molecular Biology）

（50學(xué)時(shí)）

一、前言

本課程面向生物技術(shù)專業(yè)和生物科學(xué)專業(yè)，學(xué)時(shí)50，學(xué)分3，屬于專業(yè)必修課，先修課程為生物化學(xué)。

二、課程的性質(zhì)、地位和任務(wù)：

本課程首先介紹分子生物學(xué)的含義,它在生命科學(xué)中的位置、發(fā)展現(xiàn)狀及展望以及基因組織包括DNA結(jié)構(gòu)、復(fù)制、突變、修復(fù)和重組。同時(shí)兼顧學(xué)科發(fā)展動(dòng)向,著重涉及當(dāng)今分子生物學(xué)應(yīng)用技術(shù)即分子克隆工具酶、電泳技術(shù)、載體、DNA及RNA制備、構(gòu)建DNA文庫(kù)、遺傳轉(zhuǎn)化、基因表達(dá)、PCR、RFLP、RAPD,還介紹了蛋白質(zhì)合成及分析。旨在使研究生了解現(xiàn)代分子生物學(xué)理論的新進(jìn)展并為相關(guān)學(xué)科從分子水平上闡明問(wèn)題提供知識(shí)和技術(shù)。

三、教學(xué)基本要求和方法：

通過(guò)對(duì)本課程的學(xué)習(xí)，要求學(xué)生掌握基因概念在分子水平上的發(fā)展與演變、基因的分子結(jié)構(gòu)和特點(diǎn)、基因的復(fù)制、基因表達(dá)（在轉(zhuǎn)錄、翻譯水平）的基本原理、基因表達(dá)調(diào)控的基本模式、基因發(fā)生突變與交換及DNA遺傳多型性檢測(cè)的分子生物學(xué)原理。

四、授課教材及主要參考書目 教材：

P.C.Turner,A.G.McLennan,A.D.Bates&M.R.H.White 1999 分子生物學(xué)（Molecular Biology）科學(xué)出版社

參考書目：

黃翠芬 1987 遺傳工程理論和方法 科學(xué)出版社 盛祖嘉等 1988 分子遺傳學(xué) 復(fù)旦大學(xué)出版社 齊義鵬 1989 基因工程原理和方法 武漢大學(xué)出版社 吳乃虎 1991 基因工程原理 高等教育出版社 1998 基因工程原理(第二版)科學(xué)出版社 金冬雁 黎孟楓等譯 1992 分子克隆實(shí)驗(yàn)指南 科學(xué)出版社 謝友菊 1992 遺傳工程概論 北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社 閻隆飛、張玉麟 1993 分子生物學(xué) 北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社 閻隆飛、張玉麟 1997 分子生物學(xué)(第二版)北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社 徐洵、劉震乾 1993 DNA重組技術(shù) 科學(xué)出版社 盧圣棟 1993 現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù) 高等教育出版社 李德葆 徐平1994 重組DNA原理和方法 淅江科學(xué)技術(shù)出版社 孫志賢 1995 現(xiàn)代生物化學(xué)理論與研究技術(shù) 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社 林萬(wàn)明等 1995 PCR技術(shù)操作和應(yīng)用指南 人民軍醫(yī)出版社 金冬雁 1996 英漢分子生物學(xué)與生物工程詞匯 科學(xué)出版社 1998 基因及其操作原理 武漢大學(xué)出版社 金冬雁等 1996 核酸和蛋白的化學(xué)合成與序列分析 科學(xué)出版社 夏其昌 1997 蛋白質(zhì)化學(xué)研究技術(shù)與進(jìn)展 科學(xué)出版社 科學(xué)出版社名詞室 1997 英漢生物學(xué)詞匯（第二版）科學(xué)出版社 朱玉賢等 1997 現(xiàn)代分子生物學(xué) 高等教育出版社 瞿禮嘉等 1998 現(xiàn)代生物技術(shù)導(dǎo)論 高等教育出版社 Robert.F.Weaver 2000 分子生物學(xué)(in English)科學(xué)出版社 Sambrook J.等 1982 Molecular Cloning;A Laboratiry Manual 1989(2nd edition)Cold Spring Harbor Laboratory Press Turner等 1999 分子生物學(xué)(in English)科學(xué)出版社

五、教學(xué)內(nèi)容及學(xué)時(shí)分配： 第一章 細(xì)胞與大分子（2學(xué)時(shí)）

1、目的要求：掌握細(xì)胞和大分子的分類及用以分析的一些方法。

2、要點(diǎn)： 第一節(jié) 細(xì)胞分類

1.真細(xì)菌 2.古細(xì)菌 3.真核生物 4.分化 第二節(jié) 亞細(xì)胞器

1.細(xì)胞核 2.線粒體與葉綠體 3.內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 4.微體 5.細(xì)胞器的分離 第三節(jié) 生物大分子

1.蛋白質(zhì)和核酸 2.多糖 3.脂類 4.復(fù)雜大分子 第四節(jié) 大分子的組裝

1.蛋白質(zhì)復(fù)合體 2.核蛋白 3.膜

4.非共價(jià)相互作用

第二章 原核與真核生物的染色體結(jié)構(gòu)（2學(xué)時(shí)）

1、目的要求：掌握DNA如何整合進(jìn)原核和真核生物復(fù)雜的基因組中。

2、要點(diǎn)

第一節(jié) 原核生物的染色體結(jié)構(gòu)

1.大腸桿菌染色體 2.DNA結(jié)構(gòu)域 3.基因組超螺旋 4.DNA結(jié)合蛋白 第二節(jié) 染色質(zhì)結(jié)構(gòu)

1.染色質(zhì) 2.組蛋白 3.核小體 4.H1的功能 5.連接DNA 6.30nm纖絲 7.高級(jí)結(jié)構(gòu)

第三節(jié) 真核生物的染色體結(jié)構(gòu)

1.有絲分裂染色體 2.著絲粒 3.端粒 4.間期染色體 5.異染色質(zhì) 6.常染色質(zhì) 7.DNaseⅠ超敏性 8.CpG甲基化 9.組蛋白變異體和修飾 第四節(jié) 基因組復(fù)雜度

1.非編碼DNA 2.復(fù)性動(dòng)力學(xué) 3.單一序列DNA 4.串聯(lián)基因簇 5.分散重復(fù)DNA 6.衛(wèi)星DNA 7.遺傳多態(tài)性 第五節(jié) 遺傳信息流

1.中心法則 2.原核基因表達(dá) 3.真核基因表達(dá)

第三章 DNA復(fù)制（4學(xué)時(shí)）

1、目的要求：重點(diǎn)掌握DNA復(fù)制的過(guò)程，DNA復(fù)制在原核生物與真核生物中的區(qū)別。

2、要點(diǎn)：

第一節(jié) DNA復(fù)制概述

1.半保留機(jī)制

2.復(fù)制子、復(fù)制起點(diǎn)與終點(diǎn) 3.半不連續(xù)復(fù)制 4.RNA引導(dǎo) 第二節(jié) 細(xì)菌的DNA復(fù)制

1.實(shí)驗(yàn)系統(tǒng) 2.起始 3.解旋 4.延伸 5.終止與分離 第三節(jié) 細(xì)胞周期

1.細(xì)胞周期 2.細(xì)胞周期4個(gè)時(shí)期 3.檢驗(yàn)點(diǎn)及其調(diào)控

4.細(xì)胞周期蛋白和依賴于細(xì)胞周期蛋白的激酶 5.E2F和RB的調(diào)控

6.細(xì)胞周期的激活、抑制與癌癥 第四節(jié) 真核生物的DNA復(fù)制

1.實(shí)驗(yàn)系統(tǒng) 2.起始點(diǎn)與起始 3.復(fù)制叉 4.核基質(zhì) 5.端粒的復(fù)制

第四章 DNA損傷、修復(fù)與重組（4學(xué)時(shí)）

1、目的要求：了解導(dǎo)致DNA損傷的因素，掌握基因誘變、DNA重組和DNA修復(fù)的概念和方法。

2、要點(diǎn)： 第一節(jié) 誘變

1.突變 2.復(fù)制忠實(shí)性 3.物理誘變劑 4.化學(xué)誘變劑 5.直接誘變 6.間接誘變 第二節(jié) DNA損傷

1.DNA損傷 2.氧化性損傷 3.烷基化 4.聚化加合物 第三節(jié) DNA修復(fù)

1.光復(fù)活 2.烷基轉(zhuǎn)移酶 3.切除修復(fù) 4.錯(cuò)配修復(fù) 5.遺傳性的修復(fù)缺陷 第四節(jié) 重組

1.同源重組 2.位點(diǎn)特異性重組 3.轉(zhuǎn)座作用

第五章 基因操作（4學(xué)時(shí)）

1、目的要求：掌握現(xiàn)有的對(duì)DNA進(jìn)行操作的技術(shù)，學(xué)習(xí)用簡(jiǎn)單的DNA克隆策略圖說(shuō)明問(wèn)題。

2、要點(diǎn)：

第一節(jié) DNA克隆概述

1.DNA克隆 2.宿主和載體 3.亞克隆 4.DNA文庫(kù) 5.篩選文庫(kù) 6.克隆分析 第二節(jié) 質(zhì)粒DNA的制備

1.載體質(zhì)粒 2.質(zhì)粒的小量制備 3.堿裂解 4.酚抽提 5.乙醇沉淀 6.氯化銫梯度 第三節(jié) 限制酶與電泳

1.限制性內(nèi)切核酸酶 2.識(shí)別序列 3.黏末端 4.限制性酶解 5.瓊脂糖凝膠電泳 6.DNA片段的分離

第四節(jié) 連接、轉(zhuǎn)化與重組體分析

1.DNA連接 2.重組DNA分子 3.堿性磷酸酶 4.轉(zhuǎn)化 5.篩選 6.轉(zhuǎn)化率 7.篩選轉(zhuǎn)化子 8.轉(zhuǎn)化子的增殖與保存 9.凝膠分析 10.插入片段定向

第六章 克隆載體（4學(xué)時(shí)）

1、目的要求：了解常用的適合于各種用途的克隆載體。

2、要點(diǎn)：

第一節(jié) 質(zhì)粒載體的設(shè)計(jì)

1.連接產(chǎn)物 2.雙抗生素抗性 3.藍(lán)—白顏色篩選 4.多克隆位點(diǎn) 5.已克隆插入片段的轉(zhuǎn)錄 6.表達(dá)載體 第二節(jié) 噬菌體載體

1.λ噬菌體 2.λ置換型載體 3.包裝與侵染 4.噬菌斑的形成 5.λ溶原體 6.M13噬菌體載體 7.克隆到M13 8.質(zhì)?！狹13雜合載體 第三節(jié) 黏粒、YAC與BAC 1.大片段DNA的克隆 2.黏粒載體 3.YAC載體

4.用釀酒酵母的篩選 5.BAC載體 第四節(jié) 真核生物載體

1.克隆到真核生物 2.轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞 3.穿梭載體 4.酵母附加型質(zhì)粒 5.根癌農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒 6.桿狀病毒 7.哺乳動(dòng)物病毒載體 8.直接基因轉(zhuǎn)移

第七章 基因文庫(kù)與篩選（4學(xué)時(shí)）

1、目的要求：介紹用DNA文庫(kù)來(lái)分離篩選新的基因序列的過(guò)程與方法。

2、要點(diǎn)：

第一節(jié) 基因組文庫(kù)

1.具代表性的基因文庫(kù) 2.文庫(kù)大小 3.基因組DNA 4.載體 第二節(jié) cDNA文庫(kù)

1.mRNA分離、純化與分級(jí)分離 2.cDNA的合成 3.cDNA末端的處理 4.與載體的連接 第三節(jié) 篩選流程

1.篩選 2.菌落及噬菌斑雜交 3.表達(dá)篩選 4.雜交扣留與釋放 5.染色體步移

第八章 克隆DNA的分析與應(yīng)用（2學(xué)時(shí)）

1、目的要求：了解涉及DNA測(cè)序和克隆序列分析方面的一些更加復(fù)雜和詳細(xì)的方法，熟練掌握PCR技術(shù)的原理和過(guò)程。

2、要點(diǎn)：

第一節(jié) 克隆的鑒定

1.鑒定 2.限制圖譜 3.部分酶解 4.核酸標(biāo)記 5.DNA和RNA雜交 第二節(jié) 核酸測(cè)序

1.DNA測(cè)序 2.RNA測(cè)序 3.序列數(shù)據(jù)庫(kù) 4.序列分析 5.基因組測(cè)序計(jì)劃 第三節(jié) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

1.PCR 2.PCR循環(huán) 3.模板 4.引物 5.酶

6.PCR的條件優(yōu)化 7.PCR派生技術(shù) 第四節(jié) 克隆基因的組構(gòu)

1.組構(gòu)

2.在基因組DNA上定位cDNA 3.S1核酸酶作圖 4.引物延伸 5.凝膠阻滯 6.DNaseⅠ足跡法 7.報(bào)道基因 第五節(jié) 克隆基因的誘變

1.缺失突變 2.定點(diǎn)誘變 3.PCR誘變 第六節(jié) 克隆技術(shù)的應(yīng)用

1.應(yīng)用 2.重組蛋白 3.遺傳修飾生物體 4.DNA指紋分析 5.醫(yī)學(xué)診斷 6.基因治療

第九章

原核生物的轉(zhuǎn)錄（3學(xué)時(shí)）

1、目的要求：熟練掌握原核生物基因轉(zhuǎn)錄的原理、過(guò)程。

2、要點(diǎn)：

第一節(jié) 轉(zhuǎn)錄的基本原則

1.轉(zhuǎn)錄概述 2.起始 3.延伸 4.終止

第二節(jié) 大腸桿菌RNA聚合酶

1.大腸桿菌RNA聚合酶 2.α亞基 3.β亞基 4.β’亞基 5.σ因子 第三節(jié) 大腸桿菌σ70啟動(dòng)子

1.啟動(dòng)子序列 2.啟動(dòng)子大小 3.-10序列 4.-35序列 5.轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn) 6.啟動(dòng)子效率

第四節(jié) 轉(zhuǎn)錄的起始、延伸與終止

1.啟動(dòng)子結(jié)合 2.DNA解旋 3.RNA鏈起始點(diǎn) 4.RNA鏈延伸 5.RNA鏈終止 6.依賴ρ的轉(zhuǎn)錄終止

第十章

原核生物的轉(zhuǎn)錄調(diào)控（3學(xué)時(shí)）

1、目的要求：熟練掌握一些被細(xì)菌用來(lái)調(diào)控特定基因表達(dá)的精細(xì)機(jī)制。

2、要點(diǎn)：

第一節(jié) 乳糖操縱子

1.操縱子 2.乳糖操縱子 3.乳糖阻抑物 4.誘導(dǎo) 5.cAMP受體蛋白 第二節(jié) 色氨酸操縱子

1.色氨酸操縱子 2.色氨酸阻抑物 3.弱化子 4.前導(dǎo)RNA結(jié)構(gòu) 5.前導(dǎo)肽 6.弱化作用 7.弱化的重要性

第三節(jié) 不同σ因子對(duì)轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)

1.σ因子 2.啟動(dòng)子識(shí)別 3.熱休克

4.枯草桿菌的孢子形成 5.噬菌體σ因子

第十一章

真核生物的轉(zhuǎn)錄（2學(xué)時(shí)）

1、目的要求：熟練掌握真核生物基因轉(zhuǎn)錄的基本原理和過(guò)程。

2、要點(diǎn)：

第一節(jié) 三種RNA聚合酶：性質(zhì)與功能

1.真核生物RNA聚合酶 2.RNA聚合酶亞基 3.真核生物RNA聚合酶的活性 4.RNA聚合酶Ⅱ的CTD 第二節(jié) RNA聚合酶Ⅰ基因：核糖體重復(fù)

1.核糖體RNA基因 2.核仁的作用 3.RNA聚合酶Ⅰ啟動(dòng)子 4.上游結(jié)合因子 5.選擇因子1 6.TBP與TAF1 7.其他rRNA基因

第三節(jié) RNA聚合酶Ⅲ基因：5S基因與tRNA基因的轉(zhuǎn)錄

1.RNA聚合酶Ⅲ 2.tRNA基因 3.5S rRNA基因

4.可變的RNA聚合酶Ⅲ啟動(dòng)子 5.RNA聚合酶Ⅲ的終止

第四節(jié) RNA聚合酶Ⅱ基因：?jiǎn)?dòng)子與增強(qiáng)子

1.RNA聚合酶Ⅱ 2.啟動(dòng)子 3.上游調(diào)控元件 4.增強(qiáng)子

第五節(jié) 通用轉(zhuǎn)錄因子與RNA聚合酶Ⅱ的起始

1.RNA聚合酶Ⅱ的基本轉(zhuǎn)錄因子 2.TFⅡD 3.TBP 4.TFⅡA 5.TFⅡB與RNA酶的結(jié)合 6.RNA聚合酶進(jìn)入之后的結(jié)合因子 7.TFⅡH作用下的CTD磷酸化 8.起始轉(zhuǎn)錄復(fù)合體

第十二章

真核生物的轉(zhuǎn)錄調(diào)控（2學(xué)時(shí)）

1、目的要求：掌握一些重要的真核細(xì)胞基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控的例子。

2、要點(diǎn)：

第一節(jié) 真核生物的轉(zhuǎn)錄因子

1.轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu) 2.DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域 3.二聚體結(jié)構(gòu)域 4.轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域 5.阻抑物結(jié)構(gòu)域 6.轉(zhuǎn)錄調(diào)控的對(duì)象 第二節(jié) 轉(zhuǎn)錄調(diào)控舉例

1.組成性轉(zhuǎn)錄：SP1 2.激素調(diào)控：類固醇激素受體 3.磷酸化調(diào)控：STAT蛋白 4.轉(zhuǎn)錄延伸：HIV Tat 5.細(xì)胞決定：myoD 6.胚胎發(fā)育：同源域蛋白

第十三章 RNA加工與核糖核蛋白復(fù)合體（4學(xué)時(shí)）

1、目的要求：熟練掌握從新生RNA到成熟RNA分子的加工過(guò)程。

2、要點(diǎn)：

第一節(jié) rRNA加工與核糖體

1.RNA的加工類型 2.原核生物的rRNA加工 3.真核生物的rRNA加工 4.核糖核蛋白復(fù)合體及其研究 5.原核生物的核糖體 6.真核生物的核糖體

第二節(jié) tRNA的加工、RNA酶P和核酶

1.原核生物的tRNA加工 2.真核生物的tRNA加工 3.核糖核酸酶P 4.核酶

第三節(jié) mRNA加工、hnRNP和snRNP 1.mRNA的加工 2.hnRNP 3.snRNP顆粒 4.5’端加帽 5.3’端剪切及加尾 6.剪接

7.前mRNA的甲基化 第四節(jié) 可變mRNA加工

1.可變加工 2.可變poly(A)位點(diǎn) 3.可變剪接 4.RNA編輯

第十四章

遺傳密碼與tRNA（2學(xué)時(shí)）

1、目的要求：掌握遺傳密碼的特點(diǎn)以及tRNA在翻譯過(guò)程中的作用。

2、要點(diǎn)： 第一節(jié) 遺傳密碼

1.特性 2.破譯 3.特征 4.突變的效應(yīng) 5.通用性 6.可讀框 7.重疊基因

第二節(jié) tRNA的結(jié)構(gòu)與功能

1.tRNA的一級(jí)結(jié)構(gòu) 2.tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu) 3.tRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu) 4.tRNA功能 5.tRNA的氨酰化 6.氨酰tRNA合成酶 7.校正

第十五章

蛋白質(zhì)合成（4學(xué)時(shí)）

1、目的要求：熟練掌握RNA通過(guò)遺傳密碼翻譯成成熟蛋白質(zhì)序列的過(guò)程。

2、要點(diǎn)：

第一節(jié) 蛋白質(zhì)合成概述

1.密碼子與反密碼子的相互作用 2.擺動(dòng)現(xiàn)象 3.核糖體結(jié)合位點(diǎn) 4.多聚核糖體 5.起始tRNA 第二節(jié) 蛋白質(zhì)合成機(jī)制 1.基本過(guò)程 2.起始 3.延伸 4.終止

第三節(jié) 真核生物蛋白質(zhì)合成的起始

1.基本過(guò)程 2.掃描 3.起始 4.延伸 5.終止

第四節(jié) 翻譯調(diào)控與翻譯后加工

1.翻譯調(diào)控 2.多蛋白 3.蛋白質(zhì)定位 4.蛋白質(zhì)修飾 5.蛋白質(zhì)降解

第十六章

噬菌體與真核生物病毒（2學(xué)時(shí)）

1、目的要求：掌握重要的原核生物和真核生物病毒，了解它們對(duì)我們理解分子信息處理所作的貢獻(xiàn)。

2、要點(diǎn)： 第一節(jié) 病毒簡(jiǎn)介

1.病毒 2.病毒基因組 3.復(fù)制策略 4.病毒毒性 第二節(jié) 噬菌體

1.一般特性

2.裂解性與溶源性侵染 3.噬菌體M13 4.λ噬菌體 5.轉(zhuǎn)座噬菌體 第三節(jié) DNA病毒

1.DNA病毒基因組：復(fù)制與轉(zhuǎn)錄 2.較小DNA病毒 3.較大DNA病毒 4.單純皰疹病毒-1 第四節(jié) RNA病毒

1.RNA病毒基因組的一般特性 2.病毒的反轉(zhuǎn)錄 3.反轉(zhuǎn)錄病毒 4.致癌性反轉(zhuǎn)錄病毒

5.反轉(zhuǎn)錄病毒基因組結(jié)構(gòu)及其表達(dá) 6.反轉(zhuǎn)錄病毒的突變率

第十七章

腫瘤病毒與癌基因（2學(xué)時(shí)）

1、目的要求：從病毒的研究的進(jìn)展以及分子生物學(xué)其他領(lǐng)域的知識(shí)累積了解癌癥的發(fā)生機(jī)制。

2、要點(diǎn)：

第一節(jié) 腫瘤病毒中的癌基因

1.癌癥 2.癌基因

3.致癌性反轉(zhuǎn)錄病毒 4.癌基因的分離 第二節(jié) 癌基因的分類

1.癌基因與生長(zhǎng)因子 2.核癌基因 3.癌基因間的協(xié)同作用 第三節(jié) 腫瘤抑制基因

1.概述

2.腫瘤抑制基因存在的證據(jù) 3.RB1基因 4.P53基因 第四節(jié) 凋亡

1.凋亡

2.損傷或危險(xiǎn)性細(xì)胞的清除 3.凋亡過(guò)程中細(xì)胞變化 4.線蟲中的凋亡作用 5.哺乳動(dòng)物中的凋亡 6.凋亡在疾病和癌癥中的作用福建農(nóng)林大學(xué)生物科學(xué)專業(yè)

本科生《生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》教學(xué)大綱

80學(xué)時(shí) 3學(xué)分

一、課程的性質(zhì)和任務(wù)

分子生物學(xué)和生物工程學(xué)是兩門新興的學(xué)科，無(wú)論對(duì)基礎(chǔ)理論研究，還是生產(chǎn)實(shí)踐都將產(chǎn)生巨大的影響。生物化學(xué)與分子生物學(xué)是這兩門學(xué)科的重要基礎(chǔ)，是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)課程。掌握和應(yīng)用生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技能，是學(xué)好這一課程的必要條件。

生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)不僅是生物化學(xué)教學(xué)重要的組成部分，而且在培養(yǎng)學(xué)生分析和解決問(wèn)題的能力，嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度和獨(dú)立工作的能力方面，有著不可替代的作用。

針對(duì)學(xué)生的培養(yǎng)方向，本課程以培養(yǎng)學(xué)生掌握生物技術(shù)與分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技能為主要目標(biāo)，力圖最大限度地利用我?，F(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)條件，使學(xué)生通過(guò)本課程的學(xué)習(xí)和實(shí)踐，接觸和掌握從事生物技術(shù)研究所必要的實(shí)驗(yàn)手段。通過(guò)有限的實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐，涵蓋生物化學(xué)與分子生物學(xué)各個(gè)方面的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，以點(diǎn)帶面，突出重點(diǎn)，促進(jìn)學(xué)生對(duì)生物化學(xué)與分子生物學(xué)課程學(xué)習(xí)內(nèi)容的理解和掌握。

二、課程教學(xué)的基本要求

本課程的內(nèi)容以蛋白質(zhì)（含酶）、核酸及脂類的提取、分離、純化及鑒定為重點(diǎn)，兼及這些內(nèi)容的定性和基團(tuán)鑒定，以及糖類．維生素的實(shí)驗(yàn)。本課程的實(shí)驗(yàn)安排考慮到與化學(xué)基礎(chǔ)和后繼的專業(yè)實(shí)驗(yàn)的銜接，盡量避免重復(fù)。在實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目安排方面，主要涉及提取、透析、凍干、層析、電泳、分光、離心、濃縮、PCR、分子雜交和基因表達(dá)等基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技能的訓(xùn)練。在時(shí)間安排上，針對(duì)本科生的學(xué)習(xí)特點(diǎn)，盡量安排每一個(gè)實(shí)驗(yàn)可以在２－３小時(shí)內(nèi)完成，在課程結(jié)束前，適當(dāng)安排少量綜合實(shí)驗(yàn)，以培養(yǎng)學(xué)生應(yīng)用實(shí)驗(yàn)手段的綜合能力。

本課程教學(xué)總時(shí)數(shù)為8０學(xué)時(shí)，實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理采取以學(xué)生自習(xí)為主，課堂進(jìn)行提要式的提示講解和必要的答疑的方式，使學(xué)生掌握實(shí)驗(yàn)方法的基本原理和應(yīng)用范圍。本課程強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)技能訓(xùn)練的重要性，主要課時(shí)安排學(xué)生實(shí)驗(yàn)，以便盡量提高學(xué)時(shí)利用率。為了節(jié)省基礎(chǔ)設(shè)施投資，提高儀器利用率，本課程采取開放式集中實(shí)驗(yàn)的方式，要求學(xué)生在實(shí)施實(shí)驗(yàn)之前，必須做好預(yù)習(xí)準(zhǔn)備，擬好實(shí)驗(yàn)方案，經(jīng)任課教師認(rèn)可后，方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室做實(shí)驗(yàn)。課堂講授與實(shí)驗(yàn)課的比例為１：10。

我們?cè)谡n程成績(jī)?cè)u(píng)定上，不以一次考試定音的傳統(tǒng)考試方式，而強(qiáng)調(diào)平時(shí)和考試并重，基礎(chǔ)理論和實(shí)驗(yàn)技能相結(jié)合的綜合評(píng)定方式（理論３０％，實(shí)驗(yàn)技能考試３０％，平時(shí)觀察和記錄４０％）。

三、課程教學(xué)大綱及學(xué)時(shí)分配 1 緒論（3學(xué)時(shí)）常用生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及原理（自學(xué)）2.1 樣品處理 2.1.1 透析

2.1.2 薄膜濃縮與冷凍干燥 2.2 層析技術(shù) 2.3 電泳技術(shù) 2.4 光譜技術(shù) 2.5 離心技術(shù) 2.6 PCR技術(shù) 3 學(xué)生實(shí)驗(yàn)

3.1 氨基酸的分離鑒定───紙層析法（3學(xué)時(shí)）

了解層析技術(shù)的一般原理、分類及應(yīng)用范圍，重點(diǎn)掌握紙層層析法的原理及操作技術(shù)，用以分離游離氨基酸組分。3.2 多糖的薄層層析分離（5學(xué)時(shí)）

了解薄層層析的一般原理，掌握多糖的水解方法和硅膠G薄層層析的基本技術(shù)及其在可溶性糖分離鑒定中的應(yīng)用。

3.3 瓊脂糖凝膠柱層析測(cè)定蛋白質(zhì)分子量及分子量分布（8學(xué)時(shí)）

通過(guò)采用瓊脂糖凝膠柱層析測(cè)定蛋白質(zhì)分子量及分子量分布，學(xué)習(xí)和掌握凝膠柱層析法的工作原理和基本操作技術(shù)。

3.4 大蒜細(xì)胞ＳＯＤ的提取與分離（6學(xué)時(shí)）

通過(guò)大蒜細(xì)胞SOD的提取與分離，學(xué)習(xí)和掌握蛋白質(zhì)和酶的提取與分離的基本原理和操作方法。

3.5 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子量（8學(xué)時(shí)）

通過(guò)利用SDS-PAGE測(cè)定蛋白質(zhì)分子量實(shí)驗(yàn)，掌握垂直板型聚丙烯酰胺凝膠電泳的原理和操作方法，以及SDS-PAGE測(cè)定蛋白質(zhì)分子量的原理和方法。3.6 酵母ＲＮＡ的提取與分離（8學(xué)時(shí)）

通過(guò)采用苯酚溶液提取法提取酵母RNA，采用地衣酚顯色法測(cè)定RNA含量，學(xué)習(xí)和掌握RNA的分離與測(cè)定的基本原理和技術(shù)。3.7 植物ＤＮＡ的提取與測(cè)定（8學(xué)時(shí)）

通過(guò)采用SDS提取法提取花椰菜DNA，采用二苯胺顯色法測(cè)定DNA含量，采用瓊 脂糖凝膠電泳鑒定DNA，學(xué)習(xí)和掌握RNA的分離與測(cè)定的基本原理和技術(shù)。3.8 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備和轉(zhuǎn)化（3學(xué)時(shí)）

通過(guò)本實(shí)驗(yàn)，掌握大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化方法和技術(shù)。3.9 質(zhì)粒DNA的提取及酶切（8學(xué)時(shí)）

通過(guò)本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)和掌握堿裂解法提取質(zhì)粒。3.10

DNA重組（2學(xué)時(shí)）

通過(guò)本實(shí)驗(yàn)學(xué)會(huì)重組DNA連接以及鑒定重組子的方法。3.11

DNA序列測(cè)定——銀染色法（8學(xué)時(shí)）

通過(guò)本實(shí)驗(yàn)，掌握銀染測(cè)序法。3.12 PCR基因擴(kuò)增（6學(xué)時(shí)）

通過(guò)本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)PCR反應(yīng)的基本原理與實(shí)驗(yàn)技術(shù)。4 實(shí)驗(yàn)技能考試（2學(xué)時(shí)）和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)理論考試（2學(xué)時(shí)）

四、參考文獻(xiàn)

１

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