第一篇：室內(nèi)空氣中微生物污染的研究進(jìn)展

室內(nèi)環(huán)境與微生物 環(huán)境污染與防治 網(wǎng)絡(luò)版 第9期 2008年9月 1 王毓丹1 段俊超2（1.重慶市環(huán)境科學(xué)研究院，重慶 400067； 2.重慶工商大學(xué)廢油資源化技術(shù)與裝備教育部工程研究中心，重慶 400067）介紹了室內(nèi)空氣微生物的危害、原因、來源及其控制措施，重點(diǎn)分析了在室內(nèi)空氣微生物的調(diào)查研究、毒理學(xué)研究、檢測技術(shù)研究及空氣凈化和抗菌技術(shù)方面取得的成就及存在的問題，最后討論了室內(nèi)空氣微生物污染的研究發(fā)展趨勢。室內(nèi)空氣品質(zhì) 空氣污染 室內(nèi)空氣 微生物 趨勢

室內(nèi)空氣品質(zhì)（IAQ）是一門年輕的跨學(xué)科的科學(xué)，它的研究成果對人類的健康和幸福有著很大的影響，并將影響未來的社會結(jié)構(gòu)。IAQ科學(xué)是環(huán)境可持續(xù)發(fā)展不可分割的一部分，其主要研究對象是人類停留90以上時間的室內(nèi)環(huán)境。研究IAQ的科學(xué)家們必須為室內(nèi)環(huán)境的質(zhì)量問題提供依據(jù)，揭示室內(nèi)污染物對人類的危害，并在充分的科學(xué)依據(jù)基礎(chǔ)上提出降低危險的措施1。

室內(nèi)空氣品質(zhì)極大地影響著人們的生活質(zhì)量、健康水平和生產(chǎn)效率。室內(nèi)空氣污染在近年來引起了廣泛關(guān)注，“非典”病毒肆虐的事實也充分說明，室內(nèi)生物性污染不可輕視。目前造成城市寫字樓和家庭室內(nèi)的生物污染主要有細(xì)菌、霉菌和螨蟲等，有的如軍團(tuán)菌、霉菌性肺炎也可傷害人的性命。微生物污染作為室內(nèi)環(huán)境污染的一個重要組成部分，現(xiàn)今已經(jīng)成為世界各國研究的熱點(diǎn)問題。2005年第251次香山科學(xué)會議主題就是室內(nèi)空氣污染問題。

細(xì)菌和真菌等空氣微生物是室內(nèi)空氣質(zhì)量的重要參數(shù)。室內(nèi)空氣微生物污染，可引起人們出現(xiàn)眼刺激感、哮喘、過敏性皮炎、過敏性肺炎和傳染性疾病，重者甚至導(dǎo)致死亡，也可稱為“不良建筑物綜合征”SBS2。室內(nèi)空氣污染及由此引起的SBS等健康問題開始受到普遍關(guān)注。研究表明，空氣微生物污染也是造成SBS的主要原因之一。

細(xì)菌和真 1第一作者：王毓丹，男，1963年生，高級工程師，主要從事環(huán)境工程設(shè)計。環(huán)境污染與防治 網(wǎng)絡(luò)版 第9期 2008年9月 2 菌等微生物在室內(nèi)孳生繁殖而污染空氣，已經(jīng)成為目前重要的公共環(huán)境衛(wèi)生問題，在美、日、德、法等國家，是人們最為關(guān)注的課題之一。1999年在英國召開第8屆室內(nèi)空氣環(huán)境國際會議講演的700篇論文中，以微生物為議題的就有126篇之多，僅次于揮發(fā)性有機(jī)物218篇。室內(nèi)空氣微生物污染影響人體健康甚至危及生命案例時有發(fā)生。近幾年，結(jié)核在全球死灰復(fù)燃，在防治結(jié)核的措施中，人們再次認(rèn)識到環(huán)境受污染后進(jìn)行消毒的重要性3。美國已開始在全國范圍內(nèi)對空氣微生物的種屬、濃度及季節(jié)變化等進(jìn)行監(jiān)測4。1.1 污染造成的危害

微生物是室內(nèi)環(huán)境污染源之一，加拿大的一項調(diào)查表明，室內(nèi)空氣質(zhì)量問題，有21％是微生物污染造成的。國內(nèi)外大量的調(diào)查研究證實，空氣微生物是引發(fā)各種中毒、感染和過敏疾病的主要原因之一，主要引起的疾病有軍團(tuán)病、結(jié)核病、呼吸系統(tǒng)疾病和SBS。室內(nèi)空氣中的微生物主要有青霉、芽枝菌、曲霉、葡萄球菌、微球菌、白霉及各種病毒等，其濃度主要與室內(nèi)濕度、溫度、人員活動等有關(guān)，室外空氣也是室內(nèi)細(xì)菌、真菌的重要來源之一。空氣中存在大量微生物，它們通常附著在一定粒徑的顆粒物上，以氣溶膠的形式存在，如微塵、飛沫核等，主要通過呼吸侵入機(jī)體，造成呼吸道感染。經(jīng)空氣傳播的傳染病，如流行性感冒、結(jié)核等的暴發(fā)流行，都與空氣微生物污染有密切關(guān)系。一般來說，當(dāng)空氣中致病性物質(zhì)達(dá)到感染劑量時，往往會引起人類患流感、皮炎、肺炎等急性疾病。細(xì)菌可引起人體出現(xiàn)不適、頭痛、干咳、胸疼、腹瀉等癥狀，還是昆士蘭熱、肺結(jié)核等呼吸傳染病的重要致病原。真菌污染與過敏性鼻炎、哮喘及呼吸感染等疾病有關(guān)。長期接觸室內(nèi)真菌代謝產(chǎn)物對人體免疫功能尤其是呼吸防疫功能構(gòu)成威脅。室內(nèi)環(huán)境還是一些病毒的溫床，如青猴病毒、埃博拉病毒、拉沙病毒，這些病毒可引發(fā)出血熱。

室內(nèi)生物氣溶膠主要包括細(xì)菌、病毒、真菌、花粉、原生動物及生物有機(jī)體成分等幾大類，它們主要通過與人皮膚接觸、呼吸道吸人、消化道攝人等途徑進(jìn)入人體，導(dǎo)致易感人員的身體健康損害，文獻(xiàn)5列出了幾類具有代表性的室內(nèi)生物氣溶膠及其危害。一般來說，當(dāng)空氣中致病性物質(zhì)達(dá)到感染劑量時，往往會引起人類患流感、皮炎、肺炎等急性疾病，并且還會隨著患者打噴嚏、咳嗽等生理活動形成二次生物氣溶膠并加以傳播，CROFT等對居民抱怨有咳嗽、咽喉腫痛、頭疼、疲勞等癥狀的樓房進(jìn)行了研究，當(dāng)采取一系列空氣凈化措施，并去除室內(nèi)可能造成微生物大量繁殖的建筑材料后，樓內(nèi)居民的上述癥狀得到明顯改善6。許多細(xì)菌的細(xì)胞成分如內(nèi)毒素、B-葡聚糖也是重要的病原7。真菌通過其孢子在空氣中傳播，作為條件致病菌主要引起多種呼吸疾病和過敏反應(yīng)，真菌毒素也可能導(dǎo)致多種中毒反應(yīng)，SOMERS等8觀測到吸人污染空氣顆粒的小鼠發(fā)生基因突變，這也為空氣真菌可能導(dǎo)致肺癌提供了間接證據(jù)。室內(nèi)空氣生物污染不僅危害人體的呼吸系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)，ANYANWU研究證明產(chǎn)毒真菌的長時間暴露可能影響到兒童神經(jīng)生理功能，研究人員通過神經(jīng)行為學(xué)問卷調(diào)查和一系列的神經(jīng)生理學(xué)測試，問卷結(jié)果證明生活在真菌環(huán)境污染與防治 網(wǎng)絡(luò)版 第9期 2008年9月 3 污染空氣環(huán)境中的兒童發(fā)生高水平行為異?，F(xiàn)象，而暴露組和對照組的腦電圖測試EEG異常率分別是70％和10％，腦干誘發(fā)電位BAEP波形異常率分別是90％和0，上述研究部分揭示產(chǎn)毒真菌可能對人體神經(jīng)系統(tǒng)的健康也存在威脅9。此外，從生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的角度來說，室內(nèi)生物氣溶膠污染直接影響到其生產(chǎn)的順利進(jìn)行并可能污染其產(chǎn)品，對于實驗室來說，還有一種潛在的危險，即遺傳物質(zhì)可能從基因修飾微生物中轉(zhuǎn)移到環(huán)境的野生物種中，造成基因污染10。

在注重生活質(zhì)量和公共衛(wèi)生的今天，SBS近年來得到人們的極大關(guān)注。世界衛(wèi)生組織提出的SBS是如今越來越多的寫字樓上班族常感到的一種身體不適，其癥狀主要有鼻咽發(fā)炎、頭疼發(fā)熱、上呼吸道感染、不明原因的過敏、皮膚干燥等，還伴有整個人感覺懶散惡心11。

1.2 污染類型

（1）真菌（酵母菌和霉菌）真菌是自然界分布最廣的一類生物體，在亞洲、非洲的溫、濕度較高的地區(qū)，適合真菌生長。人們受真菌的感染，易患腳氣、皮炎、皮癬、濕疹等癥。有些真菌能通過其毒性代謝物霉菌毒素致癌。

（2）細(xì)菌和病毒 室內(nèi)空氣中，特別在通風(fēng)不良、人員擁擠的環(huán)境中可有較多的致病微生物存在。除空氣中原有的一些微生物外，也存在來自由人體、動物、土壤和植物碎屑攜帶的細(xì)菌和病毒的某些病原微生物。許多病毒如流感、非典型性肺炎等病毒可以通過空氣、唾

液傳染，一般過濾、濾毒裝置對它們毫無辦法。

（3）塵螨 塵螨是一種非常小的微生物，在絕大多數(shù)住處和辦公場所都能被發(fā)現(xiàn)。塵螨適合在空氣不流通，溫度、濕度適合，且密閉的環(huán)境中生存，對環(huán)境的抵抗力很弱。塵螨是一種極強(qiáng)的變應(yīng)原，能引起呼吸過敏和皮膚過敏，主要癥狀是哮喘、過敏性皮炎、過敏性鼻炎、蕁麻疹等。目前對塵螨的研究很多。

1.3 室內(nèi)空氣微生物污染來源

細(xì)菌和真菌種類繁多，分布很廣，幾乎無所不在。在一般居住環(huán)境中，空氣中的細(xì)菌和真菌種類通常也有數(shù)十至數(shù)百種之多，濃度約在102～l05 cfu/m3。在室內(nèi)有污染源時，空氣污染更加嚴(yán)重，細(xì)菌和真菌的濃度可達(dá)106～108 cfu/m3，甚至高達(dá)1010 cfu/m3。一般來說，空氣缺乏微生物生長所需水分和養(yǎng)料，不是微生物生長的適宜環(huán)境。由于人們的生產(chǎn)和生活活動，使得空氣中可存在某些微生物，包括一些病原微生物在內(nèi)，并通過空氣引起疾病的傳播。室內(nèi)空氣特別在通風(fēng)不良、人員擁擠的環(huán)境中，可有較多的微生物存在。據(jù)監(jiān)測，通風(fēng)不良、密封的房間空氣中細(xì)菌含量一般較高。開窗通風(fēng)的房間，每立方米含細(xì)菌約5 800個，而密閉的房間每立方米含量可高達(dá)19 000個。致病微生物可附著在室內(nèi)的塵埃上被吸入呼吸道。除大氣中原有的一些微生物外，也可能存在來自人體、植物和寵物的某些病原微生物，可能成為空氣傳播疾病的病原。研究發(fā)現(xiàn)，空調(diào)機(jī)中細(xì)菌和真菌可以誘發(fā)或加重呼吸系統(tǒng)的過敏性反應(yīng)而引起哮喘。環(huán)境污染與防治 網(wǎng)絡(luò)版 第9期 2008年9月 4 在室內(nèi)有污染源時，空氣污染更加嚴(yán)重，細(xì)菌和真菌的濃度可達(dá)106～108 cfu/m3，甚至高達(dá)1010 cfu/m3。產(chǎn)生微生物污染最主要因素：

（1）有營養(yǎng)物質(zhì)：室內(nèi)的食物、被污染的地毯、潮濕的墊褥、空調(diào)系統(tǒng)中長期存在的冷卻水；（2）持續(xù)潮濕且通風(fēng)不佳的環(huán)境：如冰箱和空調(diào)機(jī)組的滴水盤。室內(nèi)的污染源可分為人體活動、建筑部件和家具、設(shè)備。（1）室內(nèi)建筑材料導(dǎo)致空氣微生物污染。在室內(nèi)潮濕、結(jié)露的地方或受水侵害的地方，如廚房、浴室和衛(wèi)生間，環(huán)境的相對濕度高達(dá)90％～100％，室內(nèi)的建筑材料和設(shè)備，就必然容易孳生細(xì)菌和真菌等微生物，特別是真菌，這是個普遍存在的問題12-15。據(jù)報道，在北美問卷調(diào)查結(jié)果顯示，有27％～36％的室內(nèi)建筑材料和設(shè)備有霉菌污染問題，實際測定的結(jié)果更高，達(dá)到42％～56％；在歐洲，英國為17％～46％，荷蘭為15％～18％，芬蘭為l5％12。在德國的8幢住宅里，地毯中的塵埃真菌總數(shù)為103～106 cfu/g，能產(chǎn)生毒素的花斑曲霉為10～105 cfu/g13。室內(nèi)塵埃中的真菌數(shù)達(dá)到102～107 cfu/g。受污染的內(nèi)墻表面的真菌數(shù)超過104 cfu/cm2以上。舊建筑材料中往往孳生著大量的真菌，釋放出來污染室內(nèi)空氣，特別在拆除舊建筑材料時，污染更為嚴(yán)重，比未拆除前高出4～25倍，達(dá)102～107 cfu/m3，拆除舊建筑材料的工人容易發(fā)生呼吸道疾病16。由于空氣流動，導(dǎo)致在建筑材料和設(shè)備中的真菌氣溶膠化，懸浮于空氣中，造成室內(nèi)空氣污染。在家庭里的廢物處理設(shè)備中的空氣細(xì)菌和真菌濃度達(dá)103～105 cfu/m3。

美國政府工業(yè)衛(wèi)生學(xué)家協(xié)會ACGIH指出，任何一種真菌的濃度≥500 cfu/m3時，表明建筑物內(nèi)可能存在相關(guān)污染源。REYNOLDS等14測定6處住宅和辦公室環(huán)境中的空氣真菌總數(shù)≥500 cfu/m3980～18 900 cfu/m3，真菌濃度比室外高10至數(shù)百倍，表明建筑物內(nèi)環(huán)境處于不正常狀態(tài)，影響室內(nèi)人員的身體健康，出現(xiàn)自覺癥狀。

（2）家用設(shè)備導(dǎo)致空氣微生物污染。室內(nèi)家用設(shè)備如空調(diào)器和加濕器中也容易孳生細(xì)

菌和真菌等微生物，成為室內(nèi)空氣微生物潛在污染源。家用空調(diào)器過濾器上真菌數(shù)高達(dá)102～104 cfu/cm3?？照{(diào)設(shè)備中孳生細(xì)菌和真菌，導(dǎo)致室內(nèi)空氣污染，嚴(yán)重影響人體健康。空調(diào)設(shè)備的空氣過濾器、制冷盤管、通風(fēng)管和冷卻水中孳生細(xì)菌和真菌，導(dǎo)致室內(nèi)空氣污染，嚴(yán)重影響人體健康。國內(nèi)的一些專業(yè)人員通過對一些公共場所、醫(yī)院的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，軍團(tuán)菌普遍存在于空調(diào)冷卻塔，已對暴露人群的健康造成威脅17-20。而軍團(tuán)菌污染在國外有許多案例。例如，1976年美國費(fèi)城召開退伍軍人會議，與會者中182人突然生病，其中29人死亡。癥狀是發(fā)熱、咳嗽、胸痛、肺炎。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該病癥由空調(diào)系統(tǒng)內(nèi)孳生的一種革蘭陰性桿菌在空氣中傳播引起。這些致病菌后命名為“軍團(tuán)菌”，“軍團(tuán)病”由此得名。l988年，英國廣播公司BBC空調(diào)設(shè)備也引發(fā)軍團(tuán)病，BBC的職員和周邊的居民約有70人生病，3人死亡。1998年，日本東京1所養(yǎng)老院，由于空調(diào)設(shè)備污染引起職員和病人123人中11人感染軍團(tuán)病，1人死亡。家庭里廢物處理設(shè)備中空氣細(xì)菌和真菌濃度達(dá)103～105 cfu/m3。另外，超聲波加濕器中孳生的細(xì)菌，隨著超聲波加濕器中的加濕用水生成的水霧一起散發(fā)出去，可引發(fā)感染癥狀21。

（3）人體活動產(chǎn)生微生物污染 日常生活中因不良生活習(xí)慣等造成的污染卻是長期環(huán)境污染與防治 網(wǎng)絡(luò)版 第9期 2008年9月 5 的，需要更多的重視。室內(nèi)微生物污染程度與周圍環(huán)境、居住密度和室內(nèi)空氣溫度、濕度、灰塵含量及采光通風(fēng)等因素有關(guān)。環(huán)境不潔、通風(fēng)不良、居住擁擠的室內(nèi)微生物污染比較嚴(yán)重。另外居民在室內(nèi)飼養(yǎng)的貓、狗等寵物會使微生物包括細(xì)菌、病毒、真菌、芽孢、霉菌、螨等大量繁殖。人在咳嗽或打噴嚏時，可噴射出上百萬個細(xì)小的飛沫小滴。如果在室內(nèi)吸煙，往往比馬路上一輛汽車的尾氣對人體危害更大。研究發(fā)現(xiàn)，使用吸塵器、中央空調(diào)和冷熱水系統(tǒng)為室內(nèi)制造了新的污染源。

（4）建筑部件和家具濕度很高的浴室、廚房容易繁殖霉菌；長期未清潔的地毯上容易滋生螨蟲；一般家具的后面和下面都很難清掃，造成灰塵堆積，給微生物繁殖創(chuàng)造了良好的條件。建筑材料中的縫隙，也是藏污納垢的場所。2.1 調(diào)查研究

目前，有關(guān)空氣微生物的研究多為調(diào)查研究，即對某種場所在一定時間內(nèi)進(jìn)行空氣微生物采樣，了解微生物的濃度、種屬等情況。國內(nèi)、外都對多種場所的空氣微生物進(jìn)行了調(diào)查研究。所涉及的場所包括室內(nèi)及室外多種公共場所，室內(nèi)如：醫(yī)院各科室22，23、室內(nèi)娛樂場所舞廳、網(wǎng)吧、保健品生產(chǎn)廠房、居室

24、教室、實驗室等；室外則有：某些城市的交通樞紐區(qū)、步行街、校園及不同的風(fēng)景區(qū)等。研究中采用的檢測指標(biāo)有：菌落總數(shù)、真菌總數(shù)，以及有針對性的病原菌、條件致病菌及微生物耐藥情況等。張鳳川等25研究了某醫(yī)院重癥監(jiān)護(hù)室的空氣細(xì)菌譜，劉汝青等26研究了廣州某綜合性大醫(yī)院各科門診候診室的空氣細(xì)菌污染狀況。國外對工業(yè)及醫(yī)療場所的空氣微生物狀況進(jìn)行了調(diào)查研究。工業(yè)化養(yǎng)豬場常預(yù)防性給豬喂食抗生素，周圍環(huán)境空氣、土壤及水都受到不同程度污染，在空氣中發(fā)現(xiàn)多重耐藥菌，人們可通過多種方式暴露于耐藥菌，如食用豬肉、接觸農(nóng)場周圍土壤、飲用周圍地面水及地下水等27。某地工業(yè)冷卻塔水被嗜肺軍團(tuán)菌污染，周圍空氣中也同樣檢出該菌

28。SHELTON等29在美國的一項大規(guī)模調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，空氣真菌濃度室內(nèi)低于室外，夏秋季高于冬春季，常見菌株為枝孢霉、青霉、不產(chǎn)孢子真菌、曲霉等。

2.2 毒理學(xué)研究

目前國內(nèi)空氣微生物的毒理學(xué)研究尚未見有關(guān)報，國外則多為空氣中真菌孢子及毒素的毒理學(xué)研究。HUTTUNEN等30研究發(fā)現(xiàn)，室內(nèi)空氣中的真菌孢子暴露，只有黑葡萄穗霉孢子可增加人肺上皮細(xì)胞白細(xì)胞介素-6的合成。暴露于黑葡萄穗霉孢子及毒素的幼鼠，其肺泡超微結(jié)構(gòu)顯著改變，肺泡表面活性劑轉(zhuǎn)化酶活性降低。據(jù)報道，黑葡萄穗霉可使動物中毒，近來又發(fā)現(xiàn)它與嬰兒肺部血鐵質(zhì)有關(guān)。LANDER等31應(yīng)用嗜堿細(xì)胞組胺釋放試驗HRT來檢測真菌特異性血清IgE，發(fā)現(xiàn)大部分不良建筑物綜合征與HRT陽性顯著相關(guān)。環(huán)境污染與防治 網(wǎng)絡(luò)版 第9期 2008年9月 6

2.3 檢測技術(shù)研究

因為室內(nèi)外空氣微生物污染，嚴(yán)重影響人體健康，通過廣泛用于室內(nèi)外進(jìn)行空氣微生物采樣技術(shù)，研究和評價醫(yī)院、住宅、辦公室等室內(nèi)空氣質(zhì)量。

如何選擇空氣微生物采樣器以及相應(yīng)的分析方法，主要從待采集的空氣微生物的種類和濃度來考慮，在采樣時必須具有獲得最大的收集效率32。選擇檢測方法時要根據(jù)檢測目的來選取合適的采樣器和采樣介質(zhì)，要根據(jù)檢測環(huán)境來布設(shè)采樣點(diǎn)和采樣時間，此外還要考慮到檢測的特異性、準(zhǔn)確性、可操作性以及氣溶膠的粒子大小等33，34?？諝馕⑸锊蓸悠骺煞譃閮纱箢悾哼^濾式采樣器和撞擊式采樣器。有固定式和便攜式采樣器兩種。固定式采樣器主要用于室外采集空氣過敏源。空氣微生物采樣技術(shù)有過濾式空氣采樣器、撞擊式空氣采樣器、其他采樣器（表面空氣系統(tǒng)采樣器、縫隙式空氣采樣器、離心式空氣采樣器、旋風(fēng)式空氣采樣器、靜電式空氣采樣器和個體采樣器）和平皿法?？諝馕⑸锏臏y定方法也分為兩大類：培養(yǎng)基方法和非培養(yǎng)基方法。培養(yǎng)基方法是將采集的微生物經(jīng)過培養(yǎng)繁殖生長成菌落后計數(shù)和鑒別，非培養(yǎng)基方法是在采樣后不經(jīng)過培養(yǎng)就可進(jìn)行計數(shù)和鑒別的方法。在20世紀(jì)80年代建立了幾種非培養(yǎng)基方法，如光學(xué)顯微鏡方法、熒光顯微鏡、電子掃描顯微鏡和流通式血球計方法。目前國內(nèi)外最常用的檢測方法是利用空氣微生物采樣器主動抽取空氣于采樣介質(zhì)中，采樣介質(zhì)可以是液體也可以是固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)計數(shù)法是目前國內(nèi)外檢測生物氣溶膠應(yīng)用最廣泛，結(jié)果最可靠的方法35，36。但是培養(yǎng)計數(shù)法依賴于微生物的可培養(yǎng)性，首先不是所有的微生物都能夠在采樣培養(yǎng)基上生長，不同微生物有不同的生長要求。據(jù)PARKES和TAYLOR計算，可培養(yǎng)的微生物大約只占空氣微生物總數(shù)的0.1％～10.0％，所以說培養(yǎng)計數(shù)法很容易低估空氣中生物氣溶膠總量37。

由于傳統(tǒng)的菌落計數(shù)法不夠準(zhǔn)確而且耗時耗力，所以許多研究都開始嘗試將新方法引入空氣微生物檢測中，主要有以下幾種：①生物發(fā)光法。吖啶橙是常用的染色劑，它能夠與微生物染色質(zhì)結(jié)合發(fā)出黃色熒光，便于在顯微鏡下細(xì)胞計數(shù)；②免疫檢測。利用微生物的免疫原性檢測生物氣溶膠，SCHMECHEL等38制備了短密青霉的單克隆抗體，結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附檢測了實驗室發(fā)生的生物氣溶膠；③生物標(biāo)記分子的檢測。鱟變形細(xì)胞溶解物試驗廣泛用于檢定革蘭氏陰性細(xì)菌的內(nèi)毒素，但是這種方法更適合于檢測微生物的活性而不是總數(shù)37，39。革蘭氏陽性細(xì)菌的胞壁酸，真菌細(xì)胞膜的麥角固醇也都可作為生物標(biāo)記37。分子生物學(xué)方法在生物氣溶膠檢測方面有巨大的應(yīng)用前景，針對微生物16SrRNA或18S rRNA基因的保守區(qū)設(shè)計種屬特異性的引物和探針，利用PCR和基因探針檢測生物氣溶膠，相對于培養(yǎng)法來說，該方法不依賴于微生物的生長或其他生理條件，具有良好的特異性、敏感性和分析速

度40，41。3.1 防止微生物污染的方法

室內(nèi)空氣是個小環(huán)境，各方面條件差異很大，因環(huán)境不同而微生物的來源和分布規(guī)律環(huán)境污染與防治 網(wǎng)絡(luò)版 第9期 2008年9月 7 也有所不同，了解不同環(huán)境因素對它的影響也有利于進(jìn)一步對室內(nèi)空氣質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)控。建筑物內(nèi)部有許多適合微生物生長的載體如植物、書籍、垃圾、窗簾等等。溫度和濕度是微生物生長的關(guān)鍵因素，寒冷干燥的空氣不利于微生物的存活。水浸和滲水的建筑物通常有高濃度的空氣微生物濃度，而且室內(nèi)吸水性的物品或建筑材料往往會成為室內(nèi)微生物的污染源?？刂瓶諝馑羝臐舛却蠹s60％以下可以降低微生物污染42。封閉的建筑物盡管避免了室外污染物的侵人，但是由于室內(nèi)外空氣得不到良好交換，所以同樣會發(fā)生室內(nèi)空氣生物污染，尤其是空調(diào)系統(tǒng)沒有定期清潔時，室內(nèi)微生物容易在HVAC的管道、風(fēng)口或濾網(wǎng)上繁殖，HVAC啟動就會造成整個建筑物內(nèi)空氣的污染43。同時，人員活動可以產(chǎn)生供微生物吸附的顆粒物，也有利于空氣微生物的傳播。因此，在人員密度較高的地方要采取清理措施，適度疏散人群對維持空氣潔凈有明顯效果?？刂剖覂?nèi)空氣污染的關(guān)鍵措施是良好的通風(fēng)和較低的濕度。王琨等44研究認(rèn)為，通風(fēng)可以有效降低室內(nèi)空氣微生物濃度，最為經(jīng)濟(jì)、易行。

采取如下措施也可有效改善室內(nèi)空氣微生物狀況，改善和提高室內(nèi)空氣質(zhì)量45-50：（1）去除污染源，被褥經(jīng)常晾曬。采用降低和消除濕氣，防止結(jié)露，使細(xì)菌和真菌等微生物不能在室內(nèi)孳生繁殖，或者徹底清除污染建筑材料；（2）保持室內(nèi)清潔衛(wèi)生，可有效降低室內(nèi)空氣微生物污染；（3）經(jīng)常通風(fēng)，保持室內(nèi)干燥。通常室外空氣中微生物的數(shù)量較室內(nèi)低，將細(xì)菌和真菌等微生物排出，降低室內(nèi)空氣微生物濃度；（4）綠化，綠色植物可吸附塵埃從而降低空氣微生物含量；（5）定期清洗空調(diào)器和地毯。長期使用后，空調(diào)的濾網(wǎng)上可吸附大量臟物，有利于微生物的滋生；軍團(tuán)菌常棲息在空調(diào)冷卻器處，可以氣霧形式播散到空氣中，使人感染軍團(tuán)菌病；（6）凈化空氣：使用空氣凈化器去除室內(nèi)空氣中的微生物，或者用紫外線照射殺死室內(nèi)空氣中微生物，也可以采用有機(jī)抗菌劑和無機(jī)抗菌劑抑制和殺死微生物，試圖減少室內(nèi)環(huán)境中潛在的微生物污染源，達(dá)到控制室內(nèi)空氣微生物污染，改善和提高室內(nèi)空氣質(zhì)量的目的。

3.2 空氣凈化及微生物殺滅技術(shù)

現(xiàn)代人類生活大部分時間都是在室內(nèi)度過，尤其是辦公室工作人員，室內(nèi)空氣質(zhì)量受到人們的廣泛關(guān)注。針對空氣微生物污染，人們采取了多種空氣凈化消毒措施，同時，不斷研究新的方法，改進(jìn)和完善原有的空氣凈化消毒方法。

第二篇：真菌微生物的研究進(jìn)展

論文題目：真菌微生物的研究進(jìn)展

作者：華江濤 專業(yè)：生物化工工藝 班級： 生化1321 學(xué)號： 2013277102 指導(dǎo)老師：劉磊

2016年4 月12日

真菌微生物的研究進(jìn)展

目錄

第1章 傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)法.................................3 第2章 分子生物學(xué)方法...................................3 2．1基于PCＲ的克隆文庫方法..........................3 2．2變性梯度凝膠電泳（DGGE）.........................3 2．3末端限制性長度多態(tài)性（T-ＲFLP）...................4 2．4實時熒光定量PCＲ..................................4 2．5熒光原位雜交（FISH）...............................4 2．6序列標(biāo)簽標(biāo)記的高通量測序..........................4 第3章 宏基因組學(xué)技術(shù)（Metagenomics）.....................5 前景與展望........................................5 致謝......................................................6 參考文獻(xiàn)..................................................6

摘要

真菌廣泛存在于自然界，在生態(tài)系統(tǒng)中發(fā)揮著重要的作用。隨著分子生物學(xué)技術(shù)在微生物多樣性研究中的廣泛應(yīng)用以及宏基因組學(xué)技術(shù)的出現(xiàn)，打破了傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)法的局限性，人們對于真菌多樣性的認(rèn)識日漸提高。該文主要綜述了研究真菌多樣性方法的主要發(fā)展歷程，介紹幾種有關(guān)真菌多樣性研究常用的分子生物學(xué)方法，包括基于PCＲ的克隆文庫方法、變性梯度凝膠電泳、末端限制性長度多態(tài)性、實時熒光定量PCＲ、熒光原位雜交、序列標(biāo)簽標(biāo)記的高通量測序以及宏基因組技術(shù)，并且闡述宏基因組學(xué)技術(shù)在此領(lǐng)域蘊(yùn)含的巨大發(fā)展?jié)摿?/p>

關(guān)鍵詞

真菌；多樣性；研究方法 Abstract Fungiwidelyexistsinnatureplayinganimportantroleintheecosystem．Thepervasiveapplicationofmolecularbiol-ogytechnologyinmicrobialdiversityandtheemergenceofmetagenomicbreakedthelimitationsoftraditionalmicrobialculturemeth-odsothatimprovethehumansrecognitionoffungaldiversity．ThispaperreviewedthemaindevelopmentcourseofstudyingfungaldiversityapproachesintroducedseveralcommonlyusedmethodsofmolecularbiologyonfungaldiversityresearchmainlyincludingclonelibraryPCＲbased，DenaturinggradientgelelectrophoresisTerminalrestrictionfragmentlengthpolymorphismeal-timeflu-orescentquantitativePCFluorescenceinsituhybridizationandbarcodedpyrosequencingndexpoundedthehugepotentialofmetagenomicsinthisfield．

Keyword fungi；diversity；method 正文

自然界中的微生物分布廣、種類多、資源極其豐富，主要包括細(xì)菌、病毒、真菌等。迄今人們已發(fā)現(xiàn)的微生物物種僅為自然界中微生物總數(shù)的1%～10%［1］。微生物群落多樣性是環(huán)境微生物多樣性研究的核心內(nèi)容。目前微生物多樣性研究多局限于細(xì)菌，而對真菌的研究相對較少。研究真菌群落多樣性可以了解真菌群落結(jié)構(gòu)、真菌的種類和數(shù)量分布特點(diǎn)，并且可以進(jìn)一步為控制和優(yōu)化真菌群落結(jié)構(gòu)提供參考，同時也是研究微生物群落多樣性的重要內(nèi)容。真菌遍布于自然界，據(jù)估計約有數(shù)百萬種，已發(fā)現(xiàn)的僅9萬余種，已發(fā)現(xiàn)的導(dǎo)致人類疾病的僅約400種。人類也生活在真菌包圍的環(huán)境中，日常工作、生活中所接觸到的真菌種類目 前的認(rèn)知。因此，不論是自然環(huán)境還是人體都具有較高的真菌多樣性。真菌多樣性的研究方法很多，從國內(nèi)外目前采用的方法來看，大致上可分為：傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)法、分子生物學(xué)方法以及宏基因組學(xué)技術(shù)。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，越來越多的新技術(shù)、新方法用于真菌多樣性領(lǐng)域的研究，使人們對真菌多樣性的認(rèn)識更加全面深入。

1傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)法

從傳統(tǒng)上講，真菌多樣性的研究主要利用分離培養(yǎng)及形態(tài)學(xué)檢測的方法，該技術(shù)在實驗室被廣泛使用。盡管各種新的培養(yǎng)技術(shù)不斷出現(xiàn)，但此方法費(fèi)時費(fèi)力，敏感度和特異性也較低，也不能反應(yīng)全部的真菌群落信息。Amann等曾根據(jù)微生物原位的、不依賴于培養(yǎng)的微生物系統(tǒng)發(fā)育學(xué)研究結(jié)果認(rèn)為：在自然界中，通過實驗室人工培養(yǎng)方法已經(jīng)被分離和描述的微生物物種數(shù)量僅占估計數(shù)量的1%～5%，而其余大多數(shù)微生物種群還仍然未被分離和認(rèn)識，因此，人們不能利用傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)技術(shù)獲得真菌多樣性的全部信息，極大的限制了研究的廣泛性。在臨床致病菌的鑒定方面，培養(yǎng)的方法更為常用。Ｒasi等利用培養(yǎng)法對從伊朗花斑糠疹患者皮膚上分離得到的馬拉色酵母菌進(jìn)行鑒定過程中，發(fā)現(xiàn)球形馬拉色菌是最常分離到的菌種，大約占31．3%，其次是糠秕馬拉色菌（20．5%）等。Findley等［7］通過微生物培養(yǎng)法從10個健康成人的14個部位的皮膚分離真菌，經(jīng)鑒定11個剛體部位和胳膊表面的優(yōu)勢真菌是馬拉色菌屬，通過比較，腳底、腳趾甲和趾間具有較高的真菌多樣性。

2分子生物學(xué)方法

鑒于分離培養(yǎng)技術(shù)的局限性，近年來，利用不依賴培養(yǎng)的方法分析和鑒定微生物群落多樣性的實驗越來越普遍。自從Pace提出將分子生物學(xué)方法用于微生物多樣性研究，微生物分子生態(tài)學(xué)得到了長足的發(fā)展。分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用于微生物群落結(jié)構(gòu)分析使得對環(huán)境樣品中占大部分的不可培養(yǎng)微生物的研究成為了可能。目前，大多數(shù)用于分析微生物群落結(jié)構(gòu)的方法是基于PCＲ擴(kuò)增的。在分析微生物群落結(jié)構(gòu)多樣性時，rＲNA是目前應(yīng)用最廣泛的分子標(biāo)記，它具有在功能上高度保守，其序列上的不同位置具有不同的變異速率，存在于所有的有機(jī)體（病毒除外）內(nèi)等優(yōu)點(diǎn)。對于細(xì)菌而言，16SrＲNA分析在實際應(yīng)用中最為廣泛，與細(xì)菌相比，使用真菌18SrDNA只能鑒定到屬或科的水平。真菌的非編碼rＲNA區(qū)域，如ITS區(qū)域（Inter-naltranscribedspacer），進(jìn)化快速，序列上的變化更加廣泛，因此提供了更多的分類信息，彌補(bǔ)了18SrＲNA的局限性。雖然如此，在實際研究內(nèi)容中仍然要根據(jù)對分類等級的不同要求來選擇合適的分子標(biāo)記。分子生物學(xué)方法的應(yīng)用使在遺傳水平上研究微生物多樣性成為了可能，該方法可歸納為三方面：①基于PCＲ技術(shù)的研究方法，這些方法是對樣品直接提取DNA或者ＲNA，然后對特定基因設(shè)計引物進(jìn)行PCＲ擴(kuò)增，再利用不同的方法進(jìn)行分析，（Fluorescenceinsituhybridization，F(xiàn)I可以對微生物在特定環(huán)境中的存在與否、分布模式及豐度等情況進(jìn)行研究，具有較高的靈敏性和特異性。③基于DNA序列測定的研究方法，分析具體堿基序列的分布情況，通過與生物信息學(xué)結(jié)合，進(jìn)行數(shù)據(jù)比較分析，如元基因組（Metagenome）測序技術(shù)，成為研究難培養(yǎng)微生物或不可培養(yǎng)微生物多樣性的重要方法。

2．1基于PCＲ的克隆文庫方法

基于PCＲ的克隆文庫方法使對不可培養(yǎng)微生物的分析成為可能，Pace提出將PCＲ產(chǎn)物進(jìn)行克隆后測序，大大提高了對微生物群落結(jié)構(gòu)的認(rèn)識，是使用較為廣泛的一種方法。目前已有研究采用針對18SrDNA及ITS的克隆文庫構(gòu)建技術(shù)對腸道內(nèi)真菌群落的多樣性進(jìn)行分析，研究結(jié)果表明人腸道真菌多樣性比較低，主要以不同亞型的芽囊原蟲屬為主

2．2變性梯度凝膠電泳（DGGE）

DGGE最初是lerman等［12-13］發(fā)明的，起初主要用來檢測DNA片段中的點(diǎn)突變。1993年，Muyzer等［14］首次將其用于微生物群落多樣性的研究。DGGE普遍用于分析環(huán)境中細(xì)菌、真菌、病毒群落的生物多樣性。Kim等利用PCＲ-DGGE技術(shù)分析了日本和中國發(fā)酵豆瓣醬中的細(xì)菌和真菌群落多樣性，確定了米曲霉和魯氏酵母的存在。We-erasekera等［16］通過PCＲ-DGGE方法研究人唾液中的酵母菌，在其中六個樣品中鑒定出兩種酵母菌，分別是白色念珠菌和杜氏假絲酵母，有力的證明利用DGGE技術(shù)研究口腔中的酵母菌是一種相對快速便捷的方法。

2．3末端限制性長度多態(tài)性（T-ＲFLP）

T-ＲFLP技術(shù)是在末端限制性片段長度多態(tài)性技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，依據(jù)rDNA序列的保守性和特異性，選擇具有系統(tǒng)進(jìn)化標(biāo)記特征的序列作為目 的序列。T-ＲFLP技術(shù)靈敏度高，對于評估復(fù)雜環(huán)境樣品的多樣性和快速的比較不同生態(tài)系統(tǒng)的微生物群落結(jié)構(gòu)和多樣性是一種有力的工具。Curlevski等［17］使用T-ＲFLP方法研究了澳大利亞商業(yè)化混交林和單一種植南洋杉林場土壤真菌群落的不同，通過對真菌的ITS區(qū)域進(jìn)行分析表明子囊菌門的豐度最高，其次是擔(dān)子菌門和接合菌門，但在不同類型的林場中它們的相對豐度存在差異。

2．4實時熒光定量PCＲ

（qPCＲ技術(shù)于1996年由美國AppliedBiosys-tems公司推出，是將熒光能量傳遞技術(shù)（Fluores-cenceresonanceenergytransfer，F(xiàn)ＲET）應(yīng)用于PCＲ，實現(xiàn)了PCＲ從定性到定量的飛躍。qPCＲ技術(shù)目前已得到廣泛應(yīng)用。李曉然等在對汾酒發(fā)酵過程和汾酒酒曲制作過程中細(xì)菌和真菌多樣性的研究中，利用qPCＲ技術(shù)對整個過程中的細(xì)菌和真菌進(jìn)行了定量，發(fā)現(xiàn)在汾酒發(fā)酵過程中真菌的數(shù)量保持相對穩(wěn)定，在酒曲制作過程中真菌的數(shù)量整體上呈下降趨勢。Li等通過qPCＲ方法研究了老年人舌背的真菌多樣性，表明老年人口腔中的真菌多樣性極高，并不僅限于念珠菌屬，其多樣性與老年人的健康狀態(tài)也具有密切的關(guān)系。

2．5熒光原位雜交（FISH）

比起費(fèi)時費(fèi)力且難以展現(xiàn)全部微生物群落信息的依賴于培養(yǎng)的方法和難以實現(xiàn)定量分析的多種依賴于PCＲ擴(kuò)增的分子生物學(xué)方法，使用探針雜交來研究微生物群落多樣性是一種更為快速的方法。熒光原位雜交是以熒光標(biāo)記的寡核苷酸探針來探測生態(tài)系統(tǒng)中微生物細(xì)胞的一種技術(shù)，不僅能研究自然或人工環(huán)境中的微生物個體，并且可以對微生物群落進(jìn)行評估。Lepère等使用酪胺信號放大技術(shù)與FISH結(jié)合的方法，用18SrDNA特異性的引物分析了湖水中的真核超微浮游生物的主要類群，獲得了真核浮游微生物的定量結(jié)果。雖然分子生物學(xué)方法目前是闡述微生物多樣性的強(qiáng)有力技術(shù)手段，并且在真菌多樣性研究中具有傳統(tǒng)培養(yǎng)法無法比擬的優(yōu)勢，但是基于PCＲ擴(kuò)增的各種方法及FISH等方法仍然存在著多種弊端，例如引物的偏向性、PCＲ存在的其他系統(tǒng)偏差以及FISH方法中由于引物的不匹配造成對分析結(jié)果的錯誤估計等。在實際的研究中，通常將多種技術(shù)綜合使用，以避免由于方法原理本身所帶來的不可避免的偏差，可提供更加全面準(zhǔn)確的微生物多樣性變化的信息

2．6序列標(biāo)簽標(biāo)記的高通量測序

隨著測序技術(shù)的發(fā)展，被稱為“第二代測序（next-generationsequencing［NGS］）”技術(shù)在過去幾年中不斷涌現(xiàn)。其特點(diǎn)是：高通量，低成本，可以同時對多個單獨(dú)的DNA分子進(jìn)行測序，這一改進(jìn)比

起每條序列需要單獨(dú)分析的Sanger法具有巨大的優(yōu)勢。第二代測序技術(shù)主要包括羅氏454公司的GS-FLX測序平臺、Illumina公司的SolexaGenomeAnalyzer測序平臺和ABI公司的Solid測序平臺［25］。自從Hamady等建立了在不同的樣品PCＲ引物上分別添加序列標(biāo)簽（barcode）來作為高通量測序后根據(jù)序列區(qū)分不同樣品的標(biāo)記，高通量測序技術(shù)越來越廣泛地應(yīng)用到微生物群落多樣性的分析中。綜合比較二代測序平臺，在研究微生物多樣性方面應(yīng)用較廣泛的是焦磷酸測序（Pyro-sequencing）。李曉然等［18］利用真菌ITS1的焦磷酸測序，研究了中國傳統(tǒng)汾酒發(fā)酵過程中的真菌群落多樣性，分析了在汾酒發(fā)酵過程中真菌的變化以及主要存在的真菌菌種，其中有60%的ITS序列屬于酵母菌科，豐度最高的是東方伊薩酵母，其次為啤酒酵母。Delhaes等利用焦磷酸測序的方法對囊泡纖維癥患者的真菌多樣性進(jìn)行了研究，結(jié)果表明肺功能下降及臨床狀態(tài)不好的患者真菌多樣性明顯降低。Hoffmann等對人體腸道的真菌多樣性進(jìn)行研究，通過焦磷酸測序表明人腸道中的真菌共66個屬，豐度較高的是子囊菌綱和擔(dān)子菌類。

3宏基因組學(xué)技術(shù)（Metagenomics）

利用基于rDNA的分子生物學(xué)方法研究微生物多樣性，對于龐大的微生物世界仍然是不足夠的，遠(yuǎn)不能闡明微生物的生理生化代謝特征。1998年，Handelman等［29］首次提出宏基因組的概念，并第1次使用了Metagenomics這個詞。宏基因組學(xué)技術(shù)是通過提取某一環(huán)境樣品所有微生物的基因組DNA，或通過鳥槍法直接測序探究環(huán)境中微生物的群落結(jié)構(gòu)和功能，或構(gòu)建宏基因組文庫及對文庫進(jìn)行篩選尋找和發(fā)現(xiàn)新的功能基因及活性代謝產(chǎn)物。通過這兩方面的研究，極大地豐富了我們對環(huán)境樣品微生物多樣性和其功能的認(rèn)知。宏基因組學(xué)技術(shù)避開傳統(tǒng)的微生物分離培養(yǎng)方法，直接從樣品中提取總DNA來展開研究，理論上覆蓋了環(huán)境樣品中的全部微生物，在分析環(huán)境微生物復(fù)雜群落結(jié)構(gòu)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。該技術(shù)在微生物多樣性領(lǐng)域的研究，有關(guān)細(xì)菌方面的居多，而關(guān)于真菌群落多樣性的研究為數(shù)并不多。Il-leghems等利用宏基因組學(xué)技術(shù)研究了可可豆自然發(fā)酵過程中的真菌和細(xì)菌群落多樣性，研究結(jié)果表明，葡萄汁有孢漢遜酵母、仙人掌有孢漢遜酵母、啤酒酵母、發(fā)酵乳桿菌和巴氏醋桿菌是主要存在的菌種，并且確定了主要以乳桿菌為宿主的肌病毒科和長尾噬菌體的存在。這是第1篇利用宏基因組學(xué)技術(shù)并結(jié)合454焦磷酸測序研究自然發(fā)酵可可豆中群落多樣性種系發(fā)生分析的報道，顯示了宏基因組學(xué)技術(shù)相比于之前研究方法的優(yōu)越性，能夠獲得更加全面的微生物群落信息。宏基因組學(xué)技術(shù)不僅在研究微生物群落結(jié)構(gòu)方面蘊(yùn)含巨大潛力，在發(fā)現(xiàn)新功能基因及活性物質(zhì)方面也具有極大的優(yōu)勢。Cardoso等 在對被蝸牛侵襲的農(nóng)作物進(jìn)行宏基因組學(xué)分析中，第1次對其微生物群落和參與生物化學(xué)通路的主要基因進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)變形菌門是主要的細(xì)菌門，其次是擬桿菌門和硬壁菌門，而病毒、真菌及古細(xì)菌的多樣性稍低。另外，通過功能分析發(fā)現(xiàn)其中存在的大量微生物基因有助于宿主降解木質(zhì)纖維素、對異生物質(zhì)脫毒以及合成必需氨基酸和維生素，同時有利于蝸牛的適應(yīng)性和廣泛攝食，并且檢測到2700多種編碼糖苷水解酶區(qū)域和碳水化合物結(jié)合結(jié)構(gòu)域的基因。通過宏基因組學(xué)技術(shù)不僅能夠避免PCＲ擴(kuò)增帶來的偏差，全面而準(zhǔn)確的研究微生物群落多樣性，同時也為研究樣品中微生物生化代謝、發(fā)現(xiàn)新功能基因和活性物質(zhì)提供了極大的便利。宏基因組學(xué)技術(shù)在分析群落多樣性中不可避免地也會存在一些弊端，例如測序產(chǎn)生的大量數(shù)據(jù)為后續(xù)的序列分析和處理帶來了挑戰(zhàn)，同時對計算機(jī)以及數(shù)據(jù)庫的要求也在不斷提高。盡管如此，宏基因組學(xué)技術(shù)本身所具有的巨大優(yōu)勢是目前其他研究方法不可比擬的。近年來，宏基因組學(xué)技術(shù)已經(jīng)開始影響真菌生物學(xué)，逐漸成為研究真菌多樣性的一個新的發(fā)展方向和研究熱點(diǎn)，也增加了獲得新生物活性物質(zhì)的機(jī)會，顯示宏基因組學(xué)技術(shù)在此方面蘊(yùn)含的巨大發(fā)展?jié)摿Α?/p>

前景與展望

近年來，隨著各種新技術(shù)的不斷完善與發(fā)展，對真菌多樣性的研究逐漸深入，利用這些新技術(shù)可以從不同的角度來研究真菌多樣性，為環(huán)境微生物多樣性和人體真菌病的診斷治療奠定堅實的基礎(chǔ)。值得一提的是，為了獲得更為全面的真菌多樣性信息，在條件許可的情況下可將幾種方法結(jié)合起來使用。目前對于真菌多樣性的研究是多方面的，不論是環(huán)境中、食品中還是定植于人體各部位的真菌，通過對其多樣性的研究必能為指導(dǎo)實踐提供理論基礎(chǔ)。因此，真菌多樣性研究方法的不斷完善必將推動真菌多樣性研究的快速發(fā)展。做生物的多樣性和微生物代謝產(chǎn)物的多樣性，永遠(yuǎn)是發(fā)現(xiàn)新藥的無窮寶藏。隨著生命科學(xué)的發(fā)展，一些新的抗真菌藥物作用靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)，必將有更多更有效的抗真菌抗生素被發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用。在過去的 20年間，刺白菌素類抗生素的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用，更增強(qiáng)了從微生物代謝產(chǎn)物中尋找抗真菌抗生素的信心。在今后的若干年間，將會有更多的作用靶位用于抗真菌抗生素的篩選，并一定能夠由此獲得更多更有效的抗生素。

致謝

大學(xué)三年學(xué)習(xí)時光已經(jīng)接近尾聲，在此我想對我的母校，我的父母、親人們，我的老師和同學(xué)們表達(dá)我由衷的謝意。感謝我的家人對我大學(xué)三年學(xué)習(xí)的默默支持;感謝我的母校安徽職業(yè)技術(shù)學(xué)院給了我我在大學(xué)三年深造的機(jī)會，讓我能繼續(xù)學(xué)習(xí)和提高;感謝生化班的老師和同學(xué)們?nèi)陙淼年P(guān)心和鼓勵。老師們課堂上的激情洋溢，課堂下的諄諄教誨;同學(xué)們在學(xué)習(xí)中的認(rèn)真熱情，生活上的熱心主動，所有這些都讓我的三年充滿了感動。這次畢業(yè)論文設(shè)計我得到了很多老師和同學(xué)的幫助，其中我的論文指導(dǎo)老師劉磊老師對我的關(guān)心和支持尤為重要。每次遇到難題，我最先做得就是向劉磊老師尋求幫助，而劉磊老師每次不管忙或閑，總會抽空來找我面談，然后一起商量解決的辦法。

我做畢業(yè)設(shè)計的每個階段，從選題到查閱資料，論文提綱的確定，中期論文的修改，后期論文格式調(diào)整等各個環(huán)節(jié)中都給予了我悉心的指導(dǎo)。這幾個月以來，劉磊老師不僅在學(xué)業(yè)上給我以精心指導(dǎo)，同時還在思想給我以無微不至的關(guān)懷，在此謹(jǐn)向劉磊老師致以誠摯的謝意和崇高的敬意。

同時，本片畢業(yè)論文的寫作也得到了白楊，江雙雙等同學(xué)的熱情幫助。感謝在整個畢業(yè)設(shè)計期間和我密切合作的同學(xué)，和曾經(jīng)在各個方面給予過我?guī)椭幕锇閭?，在此，我再一次真誠地向幫助過我的老師和同學(xué)便是感謝!

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第三篇：土壤石油污染綜合治理研究進(jìn)展

土壤石油污染綜合治理研究進(jìn)展

秦玉廣

（山東省淡水水產(chǎn)研究所，濟(jì)南 250013）

摘要：文章就土壤石油污染修復(fù)綜合治理問題，從法律法規(guī)、行政管理體制、政策措施、思想觀念、污染防治理念、修復(fù)治理技術(shù)、修復(fù)策略等進(jìn)行了系統(tǒng)論證，并提出土壤石油污染治理需在政府主導(dǎo)下，統(tǒng)籌兼顧、標(biāo)本兼治、綜合治理。

關(guān)鍵詞：土壤石油污染；政府主導(dǎo)；綜合治理

Comprehensive Control Strategy Study of Soil Petroleum

contamination

QIN Yu-guang(Shandong Fresh Water Fishery Institute of Provience, Jinan 250013)Abstract: This article was focused on the comprehensive control strategy of soil petroleum contamination.In order to gives out a comprehensive exposition, the correlate aspects such as the laws and regulations, the administrative system, the policy and measurement, the idea, the concept of prevention and remediation, the hot question of restoration technology, the recovery strategy etc.were all shed light on and systematically discussed.Even presented that to prevent from oil pollution and to restore the oil-contaminated soil, all factors should be taken into consideration and both the symptoms and root causes should be addressed, what’s more all should be conducted under the guidance of the government.Key words: soil petroleum contamination;guidance of the government;comprehensive control

石油號稱“工業(yè)的血液”，是重要的戰(zhàn)略資源我國石油企業(yè)每年約有7萬噸落地原油進(jìn)入土壤[1]，有近10萬噸石油污染土壤有待修復(fù) [2]。土壤是一個復(fù)雜的陸地生態(tài)系統(tǒng)，是人類賴以生存的主要資源之一，是國家最重要的自然資源 [3]。土壤中石油污染物對土壤生態(tài)[4]、食品安全[5]、人居環(huán)境和人類自身健康都有廣泛而持久的危害[6]。除陸域環(huán)境外，大連港和渤 海灣漏油致海域污染事件，再一次牽動了人們對環(huán)境的關(guān)注，也使人們更加認(rèn)識到環(huán)境污染治理絕非單純技術(shù)層面問題。我國土地和礦產(chǎn)資源都?xì)w國家所有，各級政府不可避免地成為礦產(chǎn)資源開采和土壤污染修復(fù)的雙重推手。土壤石油污染治理涉及多個社會層面如思想觀-------------------------作者簡介：秦玉廣（1970-)男,助研,從事漁業(yè)資源與環(huán)境研究（E-mail: qinyuguang888@126.com）

念、法律法規(guī)、政策措施、修復(fù)技術(shù)研究、檢驗評價等，并牽動各個利益攸關(guān)方，需要在各 級政府主導(dǎo)下，整合各種社會資源，統(tǒng)籌兼顧、標(biāo)本兼治、綜合治理。本文以土壤石油污染 治理為切入點(diǎn)綜合論證，希望也能對其他類型的環(huán)境污染綜合整治有所助益。

1.積極推動包括石油污染在內(nèi)的土壤污染防治法律、法規(guī)和體制建設(shè)

健全的法律法規(guī)是實施土壤污染綜合治理的先決和保障。土壤污染防治是環(huán)境保護(hù)三大任務(wù)（空氣、水、土壤）中最為薄弱的環(huán)節(jié)。

1.1我國土壤污染防治立法保護(hù)有待進(jìn)一步完善[3, 7]

我國綜合性法律法規(guī)如《憲法》、《刑法》和專門性法律法規(guī)如《土壤環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》、等都對土壤污染進(jìn)行了相關(guān)法律界定與解讀。但界定目標(biāo)主要圍繞土地權(quán)屬、管理、規(guī)劃和利用，對污染防治和環(huán)境保護(hù)僅能提供點(diǎn)源上的法律支持，無力應(yīng)對大面積的土壤質(zhì)量下降和土壤退化問題，且對于石油污染涉及更少。伴隨著我國經(jīng)濟(jì)和社會不斷發(fā)展和土壤污染狀況日益嚴(yán)峻，其不足之處逐步凸顯，主要表現(xiàn)為：

第一，綜合性法律法規(guī)對土壤污染防治多為原則性、概括性法律規(guī)范與解讀，對于土壤污染的防范，受污染土壤的治理、修復(fù)，缺乏可操作性的明確而具體的法律條文。

第二，現(xiàn)行土壤污染防治法律規(guī)范散見于各種綜合性、專門性法律處法規(guī)甚至部門規(guī)章中，而土壤污染防治需要一個整體、綜合的法律保護(hù)體系。

第三，現(xiàn)行土壤污染防治立法中許多基本的、具體的法律制度存在缺失現(xiàn)象，如土壤污染區(qū)域分級、防治規(guī)劃、責(zé)任認(rèn)定、整治費(fèi)用的承擔(dān)等，使得土壤污染防治工作無法有效展開。

第四，現(xiàn)行土壤污染防治法律沒有從土壤污染的隱蔽性、滯后性、累積性、不可逆轉(zhuǎn)性和難治理性等特點(diǎn)進(jìn)行制度設(shè)計，缺乏針對性。例如，通過對較為直觀的廢物、廢水、廢氣的控制并不能達(dá)到對土壤污染控制的效果，土壤污染治理效果需要通過檢測土壤質(zhì)量及其對人畜健康狀況的影響才能確定。

第五，土壤污染防治現(xiàn)行管理體制、政府職能、公眾參與、糾紛處理和責(zé)任認(rèn)定等各項具體制度還缺乏明確的法律界定，還沒有形成有效的土壤污染防治綜合法律體系。

第六，現(xiàn)行法律體系中缺乏有關(guān)土壤污染防范、治理、修復(fù)措施的法律規(guī)范，未做到“防”、“治”結(jié)合，更沒有強(qiáng)調(diào)加強(qiáng)預(yù)防，源頭治理的重要性。

第七，現(xiàn)行《土壤質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》嚴(yán)重滯后，不能滿足經(jīng)濟(jì)和社會發(fā)展的需要，亟待補(bǔ)充修訂。

1.2 借鑒發(fā)達(dá)國家經(jīng)驗，建立健全我國土壤污染防治法制體系建設(shè)

（1）借鑒歐美、日本等發(fā)達(dá)國家的土壤污染法制建設(shè)成果，建立健全我國特色土壤污 2 染防治法制體系。

第一，明確立法目的，提高立法思維高度

土壤污染防治立法，除了為保障人民健康和公私財產(chǎn)安全、有利于土地資源的有效利用外，更應(yīng)將防治土壤污染上升到立足民生、維護(hù)生態(tài)安全、建設(shè)生態(tài)文明的高度，注重對土壤生態(tài)功能的維護(hù)和修復(fù)。

第二，通過立法完善土壤污染防治行政管理體制，以法律的形式明確界定政府各相關(guān)部門的權(quán)責(zé)范圍，壓縮、堵塞部門間爭相管理或責(zé)任推諉的法律漏洞，形成即統(tǒng)一領(lǐng)導(dǎo)又各負(fù)其責(zé)的高效、有序的土壤污染防治和監(jiān)管體制。

第三，建立和完善公眾參與制度和機(jī)制，在政府主導(dǎo)的總體框架下，吸納社會力量，鼓勵公眾參與包括石油污染在內(nèi)的的土壤污染防治。（2）制定土壤石油污染防治細(xì)則。

以《中華人民共和國憲法》和《中華人民共和國環(huán)境保護(hù)法》為依據(jù)，以保護(hù)生態(tài)安全和公民環(huán)境權(quán)利為目標(biāo)，關(guān)注民生，制定土壤石油污染防治細(xì)則，突出規(guī)范性、操作性和實用性。

1.3 推動土壤石油污染防治的地方性法規(guī)及體制建設(shè)

我國幅員遼闊，地區(qū)差異明顯，1995 年國家頒布《土壤質(zhì)量環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)》，對于土壤污染的認(rèn)定具有決定性意義。業(yè)內(nèi)專家普遍認(rèn)為，該標(biāo)準(zhǔn)過分強(qiáng)調(diào)統(tǒng)一，并不適合我國土壤多樣化的特點(diǎn)，也需要相關(guān)地方性法規(guī)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的補(bǔ)充。各地應(yīng)立足區(qū)域人文、經(jīng)濟(jì)、社會發(fā)展現(xiàn)狀和土壤石油污染特征，并兼顧其他污染修復(fù)治理特點(diǎn)，在國家相關(guān)法律法規(guī)的總體框架內(nèi)，制定可操作性強(qiáng)的地方性法律法規(guī)。以可持續(xù)發(fā)展思想為指導(dǎo)，科學(xué)規(guī)劃，防治結(jié)合，牢固樹立全局觀、人本觀、科學(xué)發(fā)展觀和新型政績觀，從思想認(rèn)識、體制機(jī)制和法規(guī)建設(shè)等方面做文章。

隨著土壤污染問題越來越被普通民眾所重視，近年來一些發(fā)展較快、經(jīng)濟(jì)實力較強(qiáng)的省市也推出地方性的污染土壤防治法規(guī)，并以此推動了國家土壤污染防治立法進(jìn)程[8]。

2.樹立正確的思想觀念，堅持以防為主、防治結(jié)合的治理理念

2.1倡導(dǎo)樹立正確的思想觀念

土壤石油污染的治理是一項關(guān)乎經(jīng)濟(jì)、社會和人的全面、健康、可持續(xù)發(fā)展的社會性行為，亟需扭轉(zhuǎn)生產(chǎn)、治理、監(jiān)管各自為戰(zhàn)、自掃門前雪的片面認(rèn)識，增強(qiáng)社會意識，積極引導(dǎo)、樹立以政府“主導(dǎo)”為主，全社會積極參與的整體治理觀念。

2.2堅持以防為主、防治結(jié)合的治理理念

土壤石油污染防治包括新污染事件的防范和對既成污染的修復(fù)兩個方面，應(yīng)該確立以防為主，防治結(jié)合的治理理念，既要著重科學(xué)、實用修復(fù)方案的研究制定與貫徹實施，更要強(qiáng)調(diào)預(yù)防和減少污染事件的發(fā)生，預(yù)防污染勝過最好的污染修復(fù)措施。

（1）增強(qiáng)風(fēng)險防范意識[9]

首先，思想上高度重視，充分認(rèn)識土壤石油污染的危害性和全面治理的長期性、艱巨性和緊迫性，防止和克服“無所謂”、“與己無關(guān)”和“麻痹大意”等思想。作為污染源頭，石油企業(yè)項目職業(yè)健康安全管理應(yīng)符合 HSE 目標(biāo)，創(chuàng)造一個安全和健康的工作環(huán)境[10]。

其次，涉油企業(yè)要充分考慮發(fā)生事故，特別是人為因素引發(fā)事故的可能性，在油田開采以及輸油管道、油庫和加油站等設(shè)施建設(shè)之前，加強(qiáng)環(huán)境影響評價和環(huán)境風(fēng)險評估工作，把事故發(fā)生的可能性降到最低，此外安全保衛(wèi)部門亦需加強(qiáng)涉油案件污染防范意識。

第三，政府行政主管部門要切實履行監(jiān)督職能，防患于未然。（2）健全應(yīng)急處理機(jī)制

中石油2009年業(yè)已出臺企業(yè)應(yīng)急預(yù)案編制通則[11]，政府也有相關(guān)應(yīng)急機(jī)制出臺[12, 13]，會同相關(guān)單位，建立了聯(lián)動機(jī)制。但尚需進(jìn)一步完善、強(qiáng)化，力圖將不可預(yù)測性污染災(zāi)害降至最低。

3.建立合理賠償機(jī)制，確保土壤修復(fù)資金支持

既成土壤污染的修復(fù)治理離不開財政經(jīng)濟(jì)支持，治理方案、治理范圍和力度均受制于成本收益比較，可以充分借鑒美國“棕色地塊法”又稱（超級基金法(Super-fund Act)）[14]。3.1設(shè)立專項基金

根據(jù)“政府的作用是提供公共物品”的觀點(diǎn)以及“誰污染誰付費(fèi)”的原則，由政府和污染事故潛在責(zé)任人共同出資，設(shè)立石油污染專項基金，事故發(fā)生后先行對受害人進(jìn)行賠付并支付污染治理費(fèi)用。3.2保險公司介入

為分散風(fēng)險、降低損失、保護(hù)受害人和責(zé)任人的利益，應(yīng)強(qiáng)制規(guī)定污染潛在責(zé)任人每年應(yīng)繳納的最低保額，一旦事故發(fā)生可由保險公司先行理賠。3.3適度引入市場機(jī)制

2010 年我國環(huán)保產(chǎn)業(yè)市場規(guī)模約130億美元[15]，石油污染土壤修復(fù)，盡管以政府為主導(dǎo)，并不是政府包攬一切，還需要社會參與，可以適度引入市場機(jī)制，形成產(chǎn)業(yè)化，讓政府 4 有限資金激活并充分利用民間資本，從而最大限度地發(fā)揮主導(dǎo)作用。

4.提高石油污染土壤治理的技術(shù)水平

4.1 復(fù)合、集成現(xiàn)有修復(fù)技術(shù)

根據(jù)不同污染類型、不同地塊用途，復(fù)合、集成利用現(xiàn)有物理、化學(xué)、生物修復(fù)技術(shù)，修復(fù)過程既突出資源化，注重資源的回收利用，又兼顧生態(tài)目標(biāo)。4.2 因地制宜，結(jié)合區(qū)域原生態(tài)特點(diǎn)，實施生物修復(fù)

以黃河三角洲為例，石油污染土壤修復(fù)，應(yīng)著重考慮本地先鋒植物蘆葦、堿蓬、檉柳等非飼用植物實施植物修復(fù)，或植物—微生物聯(lián)合修復(fù)，特別是充分利用蘆葦濕地的修復(fù)作用，蘆葦濕地生態(tài)工程凈化落地原油是保護(hù)油田開發(fā)地區(qū)土壤環(huán)境的有效方法。應(yīng)用濕地植物(蘆葦、香蒲等)構(gòu)建“濕地桶”模擬實驗證明[16]，濕地環(huán)境對土壤中的石油污染有明顯的降解作用，落地原油還可以改善蘆葦纖維素和木質(zhì)素等品質(zhì)指標(biāo)，收獲的蘆葦可用于造紙，既可以移除石油污染，又充分利用廢棄物資源，且不進(jìn)入食物鏈，既無二次污染，又可獲得可觀的經(jīng)濟(jì)效益。此外，蘆葦濕地生態(tài)工程還可以恢復(fù)黃三角洲退化生態(tài)系統(tǒng)，凸顯生態(tài)效應(yīng)和景觀效應(yīng)。

4.3 推進(jìn)生物修復(fù)熱點(diǎn)研究，提高生物修復(fù)技術(shù)水平

由于生物修復(fù)具有低碳化、設(shè)備簡單、成本低廉、應(yīng)用范圍廣、處理方法多樣、形式靈活，并能充分轉(zhuǎn)化利用廢棄污染物等諸多優(yōu)勢，越來越受到世界各國的關(guān)注，當(dāng)前研究熱點(diǎn)有：高效石油降解菌株的選育[17]；強(qiáng)化生物修復(fù)技術(shù)研究[18]；生物表面活性劑的研究應(yīng)用[19]；植物—微生物聯(lián)合修復(fù)、真菌——細(xì)菌協(xié)同修復(fù)研究[20]；通過基因工程技術(shù)，改造、構(gòu)建高效降解菌株[21, 22]，環(huán)境基因組學(xué)研究應(yīng)用；分子生態(tài)學(xué)技術(shù)研究應(yīng)用[23] 等。

5.石油污染土壤的修復(fù)策略

為推進(jìn)環(huán)境友好型社會和生態(tài)文明建設(shè)，石油污染土壤的修復(fù)需要兩手抓：一是加強(qiáng)突發(fā)性污染事故的應(yīng)對能力；二是對既成污染土壤實施修復(fù)。5.1建立專業(yè)化、常態(tài)化污染災(zāi)害事故應(yīng)急處置機(jī)制

盡管從法規(guī)體制上重視加強(qiáng)事故災(zāi)害預(yù)防，但仍需相關(guān)部門聯(lián)合，建立專業(yè)化、常態(tài)化應(yīng)急處置機(jī)制，以應(yīng)對不可預(yù)見性污染災(zāi)害事故的發(fā)生，增強(qiáng)搶救性修復(fù)能力。力爭第一時間有序進(jìn)入現(xiàn)場，既要做好現(xiàn)場參與處置人員的安全防護(hù)，又要及時遏制事故性污染的擴(kuò)散蔓延，同時對事故區(qū)域內(nèi)受污染危害的人員及野生動物及時進(jìn)行轉(zhuǎn)移、搶救。5.2 對既成污染土壤的修復(fù)（1）政府出臺受污染土壤修復(fù)規(guī)劃

政府主管部門設(shè)立專項資金，組織社會資源進(jìn)行調(diào)研，根據(jù)地區(qū)土壤石油污染歷史和現(xiàn)狀調(diào)研評估結(jié)果，充分考量土壤石油污染對環(huán)境和人類健康的生態(tài)風(fēng)險，結(jié)合區(qū)域經(jīng)濟(jì)和社會發(fā)展戰(zhàn)略目標(biāo)，制定出臺相應(yīng)的石油污染土壤中、長期修復(fù)規(guī)劃。（2）修復(fù)單位制定合理的修復(fù)方案

為解決環(huán)境問題，最終修復(fù)效果、修復(fù)時間和資金都是決定性因素[24]。有一定資質(zhì)的修復(fù)單位，以政府中、長期土壤修復(fù)行政規(guī)劃為依據(jù)，按照受污染地塊不同用途和生態(tài)風(fēng)險輕重緩急，申請專項經(jīng)費(fèi)，經(jīng)充分調(diào)研論證、選擇合理的修復(fù)技術(shù)，經(jīng)小范圍實驗驗證，按照科學(xué)的成本—效益數(shù)據(jù)分析，分塊、分階段、有針對性地制定詳盡的修復(fù)計劃方案，競投標(biāo)或報請政府主管部門批復(fù)，并在政府有效監(jiān)督之下，有序?qū)嵤?/p>

①調(diào)研

調(diào)研是制定合理修復(fù)方案的先決條件。首先，污染物性質(zhì)、濃度、分布，理化修復(fù)、生物修復(fù)的可行性及其限制因素，現(xiàn)場地質(zhì)、水文、氣象等環(huán)境條件。其次，科學(xué)制定調(diào)查方案。再次，按批準(zhǔn)的方案認(rèn)真組織調(diào)查，保證調(diào)查質(zhì)量，如遇特殊情況確需變更方案的，要及時按規(guī)定報批。②優(yōu)選修復(fù)方案

在調(diào)研的基礎(chǔ)上，本著兼顧資源、生態(tài)、經(jīng)濟(jì)和效能的原則制定適宜的修復(fù)方案，并進(jìn)行必要的室內(nèi)實驗或小規(guī)模實地修復(fù)試驗，提出合理的工程設(shè)計、運(yùn)行方案和費(fèi)用預(yù)算。5.3政府對修復(fù)工程實施過程控制，對修復(fù)效果實施檢驗評價（1）對修復(fù)工程實施和資金使用情況實行有效監(jiān)督

施工質(zhì)量是保證修復(fù)效果的關(guān)鍵，修復(fù)承擔(dān)單位需嚴(yán)格按批準(zhǔn)的方案組織實施，如需修改修復(fù)計劃需報請批復(fù)，不得擅自更改，切忌偷工減料，確保施工進(jìn)度和質(zhì)量。

政府實施質(zhì)量同步監(jiān)測，及時掌握工程進(jìn)展，客觀評估施工質(zhì)量、物料供應(yīng)、設(shè)備運(yùn)行狀況和費(fèi)用效益比，確保工程順利運(yùn)行。（2）組織修復(fù)效果檢驗評價

土壤石油污染修復(fù)效果的評價是一項復(fù)雜的技術(shù)工作，修復(fù)工作完成后，政府相關(guān)部門需組織土壤、石油石化和生態(tài)等領(lǐng)域的專家成立評估小組，運(yùn)用恰當(dāng)?shù)募夹g(shù)方法，對修復(fù)后場地內(nèi)污染物去除率、次生污染物的增加率和污染物毒性下降率等技術(shù)數(shù)據(jù)進(jìn)行綜合分析，作出客觀和準(zhǔn)確評價。

結(jié)論

我國東北、華北、華南、華東、西北等不同地理位置和氣候特征的油田區(qū)土壤均受到了不同程度的石油污染，含油率最高達(dá)23%，超過環(huán)境背景值的500-1000倍。經(jīng)濟(jì)效益受生態(tài)效益制約，人類的經(jīng)濟(jì)活動不能脫離一定量的生態(tài)環(huán)境物質(zhì)要素的支持，經(jīng)濟(jì)效益必須以生態(tài)效益為基礎(chǔ)[25]。隨著 “十二五”規(guī)劃的逐步貫徹，轉(zhuǎn)變經(jīng)濟(jì)發(fā)展模式，大力發(fā)展循環(huán)經(jīng)濟(jì)、低碳經(jīng)濟(jì)、綠色經(jīng)濟(jì)，淡化增速概念，明確效益導(dǎo)向，突出保障改善民生等指導(dǎo)思想的確立，在政策推動和政府主導(dǎo)下，采用先進(jìn)科學(xué)技術(shù)和完善的法律法規(guī)體系“雙輪驅(qū)動”[15]，我國土壤石油污染修復(fù)綜合治理必將迎來新的明天。

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第四篇：大學(xué)校園空氣微生物污染調(diào)查

大學(xué)校園空氣微生物污染調(diào)查

了解校園四季空氣中微生物含量變化趨勢與污染情況。方法

采用撞擊式采樣器，在人員負(fù)荷最重、活動最頻繁時，對某大學(xué)校園空氣中細(xì)菌粒子和霉菌粒子含量進(jìn)行檢測。結(jié)果

校園空氣微生物含量在季節(jié)間有很大不同，細(xì)菌含量在夏季最高，霉菌含量高峰在夏秋兩季。細(xì)菌濃度比較高的功能區(qū)有道路、寢室、食堂、超市、體育館、微機(jī)室和教室?？晌朊咕Ｗ诱济咕Ｗ涌倲?shù)的比例高于細(xì)菌粒子。結(jié)論

校園空氣微生物含量在多種因素的綜合影響下，季節(jié)間和不同功能區(qū)之間均表現(xiàn)出明顯的差異，存在一過性污染情況。

空氣中的微生物往往吸附在顆粒物上形成生物粒子，隨風(fēng)飄蕩，其中小粒徑的生物粒子在疾病傳播方面具有更大意義。研究表明，空氣中微生物數(shù)量的多少與環(huán)境、清潔衛(wèi)生狀況、人員密度和活動情況、空氣流通程度等因素有關(guān)[1，2]。高校校園是師生集中生活和學(xué)習(xí)的地方，普遍存在空氣微生物污染問題[3，4]。加強(qiáng)對高校校園空氣微生物的監(jiān)測，對于了解校園衛(wèi)生狀況，加強(qiáng)環(huán)境衛(wèi)生管理有著非常重要的參考意義。采用空氣中生物粒子數(shù)(菌落總數(shù)，cfu)這一指示微生物指標(biāo)對校園主要功能區(qū)空氣質(zhì)量進(jìn)行生物學(xué)評價。1.材料與方法

1.1 校園概況

沈陽市內(nèi)某高校，2001年新遷校址，主要建筑物距離城市南北向主干道約150～1000m。

1.2采樣

為全面反映校園內(nèi)師生主要活動區(qū)域空氣微生物狀況，按功能不同將校園分成12個不同的功能區(qū)，即操場、道路、綠地、食堂、宿舍、教室、圖書館、微機(jī)室、實驗室、超市、體育館和辦公室。參照《公共場所衛(wèi)生監(jiān)測技術(shù)規(guī)范》(GB/T 17220-1998)，共設(shè)采樣點(diǎn)126個。于2008-12，2009-03、2009-06、2009-09采樣，分別代表冬、春、夏和秋四季，在各功能區(qū)人員負(fù)荷最重、活動最頻繁時采樣。參照《公共場所空氣微生物檢驗方法》(GB/T18204.1-2000)，采用撞擊式采樣。JWL-2型采樣器有上、下兩級，上級收集粒徑及以上的微生物粒子，下面級收集以下粒徑的可吸入微生物粒子。采樣高度為1.2～1.5m，采樣時間1min，采樣流量28.3L/min。細(xì)菌在37℃培養(yǎng)48h，霉菌在26℃培養(yǎng)72h后，分別計數(shù)兩級采樣皿中的細(xì)菌菌落數(shù)和霉菌菌落數(shù)(cfu)，也即捕獲在采樣皿中的空氣細(xì)菌粒子數(shù)和霉菌粒子數(shù)。全年共采樣2016份。

1.3培養(yǎng)基

營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和高鹽查氏培養(yǎng)基購自北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司。按使用說明配置、滅菌。使用Φ9cm平皿，每平皿傾注20ml培養(yǎng)基，冷卻備用。

1.4主要儀器

JWL-2 兩級篩孔型撞擊式空氣微生物采樣器，北京檢測儀器有限公司；DXC-280B型不銹鋼手提式滅菌器，上海申安醫(yī)療器械廠；YLN-30A菌落計數(shù)器，北京市亞力恩機(jī)電技術(shù)研究所；SHP-250型生化培養(yǎng)箱和MJP-250型霉菌培養(yǎng)箱，上海精宏實驗設(shè)備有限公司；DB-4A控溫電熱板，金壇市天竟實驗儀器廠，環(huán)境溫度在零度以下采樣時使用。

1.5 統(tǒng)計分析

菌落計數(shù)后，按照公式n=N×1000/(Q×t)計算受檢空氣中微生物含量。式中：N—平皿菌落計數(shù)，個；Q—空氣流量，L/min；t—采樣時間，min。

1.6質(zhì)量評價

我國《室內(nèi)空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB/T18883-2002)規(guī)定，室內(nèi)細(xì)菌菌落總數(shù)≤2500cfu/m3為合格。2.結(jié)果

2.1空氣中細(xì)菌粒子濃度及其變化趨勢 結(jié)果見表1，圖1。

由表2可見，同樣在冬季，室外空氣中霉菌粒子含量明顯低于其它三個季節(jié)，而在室內(nèi)表現(xiàn)為夏秋兩季高于冬春兩季?？諝庵锌晌朊咕Ｗ又饕趯嬍?、體育館、辦公室以及圖書館占比較高?？偟谋壤哂诩?xì)菌粒子，為60.5%。兩者間相關(guān)系數(shù)為0.822，P<0.05。

3.討論

空氣中微生物采樣一般有兩種常用方法，即自然沉降法和氣流撞擊法。自然沉降法不易測得處于懸浮狀態(tài)的微小生物粒子，檢測結(jié)果的誤差較大。氣流撞擊法較好地克服了自然沉降法的弊端，能準(zhǔn)確地測知空氣中微生物的含量[5，6]，我國《室內(nèi)空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB/T18883-2002)也規(guī)定了空氣微生物采樣用撞擊法。因此，本研究中采用氣流撞擊法采樣以盡可能準(zhǔn)確、真實反映校園空氣微生物狀況。關(guān)于空氣微生物采樣的時機(jī)一般有兩種選擇，一是選在一天中的某一固定時間，二是多個時段采樣，如早中晚三次。應(yīng)該說第二種方式所得結(jié)果較具有代表性?？諝馕⑸飻?shù)量變動受多種生態(tài)因子的影響，其中人員活動情況就是影響空氣微生物含量的重要因素之一，并且空氣微生物監(jiān)測的目的就是為了保障最大多數(shù)人員的身體健康，所以我們選在各功能區(qū)人員負(fù)荷最重、活動最頻繁時采樣，使得對結(jié)果的評價更具生物學(xué)意義。

沈陽地區(qū)的氣候特點(diǎn)是，冬季氣溫很低，非常不利于微生物生存。3月氣溫偏低，草木沒有返青，空氣干燥，不利于微生物生存，但春季風(fēng)沙大，空氣中顆粒物含量多，對微生物會起到一定庇護(hù)作用。3月和12月正處在采暖季節(jié)，室內(nèi)溫度一般不低于20℃，門窗緊閉，室內(nèi)外空氣交換率偏低，一定程度上利于空氣微生物生存。6月氣溫高，雨水多濕度大，云量偏多，這些都有利于微生物生存繁殖。9月氣溫最高，但秋高氣爽，云量稀少，紫外線強(qiáng)度最大，對室外空氣微生物有相當(dāng)?shù)臍缱饔?。夏秋兩季大多?shù)房間會經(jīng)常開窗通風(fēng)，室內(nèi)空氣微生物含量會更多地受到室外條件的影響。

監(jiān)測結(jié)果顯示，不同功能區(qū)、不同季節(jié)空氣中生物粒子含量有很大差別，霉菌粒子差異程度小于細(xì)菌粒子，且在有強(qiáng)紫外線輻射的9月濃度仍居高不下，這可能與霉菌孢子適應(yīng)能力強(qiáng)有關(guān)；可吸入生物粒子與生物粒子總量間呈高度正相關(guān)關(guān)系，其中可吸入霉菌粒子比例更高；主要在寢室、食堂、超市、體育館、微機(jī)室和教室存在空氣生物粒子超標(biāo)現(xiàn)象，因為是在人員負(fù)荷最大時采樣，有理由相信污染是一過性的。粒徑較小的懸浮粒子更易進(jìn)入呼吸道深部造成嚴(yán)重危害，監(jiān)測結(jié)果顯示可吸入粒子占比在50%以上，尤其霉菌性小粒子比例更高，與胡慶軒[7]等的監(jiān)測結(jié)果基本一致。

總之，校園空氣微生物含量受到自然環(huán)境因素、社會環(huán)境條件、人員活動及自身生存能力等因素的綜合影響，在季節(jié)間和不同功能區(qū)之間表現(xiàn)出明顯的差異；在人員高峰時存在一過性空氣微生物污染，提醒我們?nèi)孕杓訌?qiáng)這方面的監(jiān)測和管理工作。4 參考文獻(xiàn)

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第五篇：微生物污染防控實施方案

高校食堂餐飲微生物污染防控實施方案

在餐飲環(huán)節(jié),由于交叉污染、加工不當(dāng)、原料污染變質(zhì)、存儲不當(dāng)?shù)仍驅(qū)е碌牟惋嬍称肺⑸镂廴臼怯绊懖惋嬍称钒踩闹饕蛩刂?，所以食品微生物控制是確保餐飲食品衛(wèi)生質(zhì)量、保證食品安全、預(yù)防和控制餐飲環(huán)節(jié)食源性疾病的重要手段之一。而高校食堂就餐人群聚集、社會影響面廣的特點(diǎn)，決定了高校食堂餐飲食品安全至關(guān)重要。因此為切實加強(qiáng)高校食堂餐飲食品安全監(jiān)管工作，更加有效防控餐飲環(huán)節(jié)微生物污染，降低食品安全風(fēng)險，預(yù)防微生物性食源性疾病的發(fā)生，結(jié)合實際，特制定如下實施方案：

一、工作目標(biāo)

通過開展高校食堂餐飲微生物污染防控工作，徹底排查高校食堂存在的食品安全風(fēng)險，有效預(yù)防因微生物污染而導(dǎo)致食源性疾病的發(fā)生，保障廣大師生的飲食安全。高校食堂是集各種餐飲經(jīng)營模式于一體的綜合性餐飲服務(wù)單位，因此，通過開展高校食堂微生物污染防控工作，以點(diǎn)帶面，積極探索各種類型餐飲服務(wù)單位微生物污染防控方法，不斷推進(jìn)，全面提升我市餐飲環(huán)節(jié)微生物污染防控能力，建立健全有效的微生物污染防控體系，進(jìn)而形成長效機(jī)制，有效杜絕微生物污染引發(fā)的食品安全事件，維護(hù)社會穩(wěn)定。

二、工作步驟

此次高校食堂微生物污染防控工作分四個步驟進(jìn)行。

（一）宣傳動員

組織高校食堂負(fù)責(zé)人召開微生物污染防控工作會議，動員高校積 極配合，并明確此次工作目標(biāo)、工作重點(diǎn)、防控措施及工作責(zé)任，督促高校積極開展自查自控工作，同時加大社會宣傳力度，動員社會力量積極參與。

（二）自查自控

嚴(yán)格要求各高校務(wù)必實行校長為食品安全第一責(zé)任人的食品安全管理制度，設(shè)立專職食品安全管理員，明確各崗位負(fù)責(zé)人，對食堂實行網(wǎng)格化管理，對食品加工操作各環(huán)節(jié)進(jìn)行自查自糾，尤其是對易引起微生物污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)實施重點(diǎn)監(jiān)督管理，全面提升高校食堂微生物污染防控能力，構(gòu)建防控微生物污染第一道防線。

（三）集中監(jiān)督防控

各監(jiān)管單位要對轄區(qū)內(nèi)高校食堂開展全面網(wǎng)格化的監(jiān)督檢查，結(jié)合食品安全快速檢測、抽樣送檢及遠(yuǎn)程視頻監(jiān)控，對餐飲環(huán)節(jié)微生物污染關(guān)鍵控制點(diǎn)實施重點(diǎn)監(jiān)督，強(qiáng)化檢查力度，并通過量化評分進(jìn)行風(fēng)險排序，全面排查微生物污染隱患，降低微生物污染風(fēng)險。

（四）總結(jié)提高

對此次高校食堂微生物污染防控工作進(jìn)行全面總結(jié)，查找不足，強(qiáng)化微生物污染防控手段及措施，進(jìn)一步推動微生物污染防控工作在全市餐飲單位開展。

三、高校食堂微生物污染防控工作內(nèi)容

（一）、設(shè)立專職食品安全管理員

鑒于高校食堂動態(tài)性、人為性極強(qiáng)的特點(diǎn)，要切實有效地提高高校食堂食品安全水平，有效防控微生物污染，僅靠執(zhí)法人員的監(jiān)督檢查是不夠的，還需各高校務(wù)必設(shè)立專職食品安全管理員，并明確食品 安全管理員責(zé)任，進(jìn)一步強(qiáng)化高校食堂內(nèi)部的監(jiān)管力度。同時各高校將設(shè)立專職食品安全管理員情況報監(jiān)管部門備案。

（二）、落實從業(yè)人員崗前必讀，規(guī)范從業(yè)人員的操作 餐飲微生物污染防控就是人的誠信、良心工程，對餐飲加工環(huán)節(jié)的監(jiān)督檢查就要從“人”入手，各高校務(wù)必落實《從業(yè)人員崗前必讀》，真正使從業(yè)人員明確“什么人在什么地方（操作環(huán)節(jié)）做什么，怎么做、做得怎么樣”。

各高校應(yīng)按要求將《從業(yè)人員崗前必讀》（附件1）懸掛于各功能間，并要求各操作環(huán)節(jié)從業(yè)人員每天必讀，操作完畢之后簽字確認(rèn)是否按規(guī)定要求操作，食品安全管理員對從業(yè)人員操作情況進(jìn)行監(jiān)督檢查，并簽字確認(rèn)（簽字確認(rèn)記錄卡見附件2），同時將此納入到高校食堂日常管理之中，記錄內(nèi)容應(yīng)當(dāng)真實，保存期限不得少于半年。真正落實工作責(zé)任制及責(zé)任追究制，做到有責(zé)任、有落實、有提高。

（三）、抓住關(guān)鍵點(diǎn)，深入自查

高校食堂負(fù)責(zé)人及專職食品安全管理員應(yīng)按照《餐飲單位食品安全微生物污染防控自查表》（見附件3）的內(nèi)容要求，對食堂進(jìn)行全面深入的檢查，特別是對可能導(dǎo)致微生物污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)及關(guān)鍵點(diǎn)，要作為自查的重中之重來抓，同時對存在的食品安全風(fēng)險及時整改予以排除。在日常自查中，尤其要做好以下幾個方面：

一是把好從業(yè)人員資質(zhì)關(guān)和個人衛(wèi)生關(guān)

從業(yè)人員持有效健康合格證明方可上崗；認(rèn)真落實從業(yè)人員晨檢制度，嚴(yán)禁患有發(fā)熱、腹瀉、皮膚傷口或感染等有礙食品安全工作病癥的從業(yè)人員上崗工作，待病癥治愈后，方可重新上崗；從業(yè)人員應(yīng) 統(tǒng)一穿著整潔工作服，戴工作帽，不得染指甲、不得配戴戒指、耳環(huán)等首飾；涼菜間、裱花間等專間從業(yè)人員須穿戴專用工作服、口罩和發(fā)帽；工作服應(yīng)定期進(jìn)行清洗，保持整潔；從業(yè)人員出入食品處理區(qū)應(yīng)進(jìn)行更衣；個人衣物及私人物品不得帶入食品處理區(qū)；從業(yè)人員保持手部清潔，防止交叉污染。接觸可直接食用食品的從業(yè)人員清洗手部后還應(yīng)對手部進(jìn)行消毒。

二是把好食品處理區(qū)環(huán)境衛(wèi)生關(guān)

從業(yè)人員不得在食品處理區(qū)從事污染環(huán)境衛(wèi)生的活動；及時對食品處理區(qū)進(jìn)行日常環(huán)境衛(wèi)生保潔，避免衛(wèi)生死角的出現(xiàn)；定期對食品處理區(qū)進(jìn)行徹底的衛(wèi)生大掃除，不留衛(wèi)生死角；餐廚垃圾及時清理，避免污染食品處理區(qū)的環(huán)境衛(wèi)生。

三是把好食品原料關(guān)

所用食品原輔料應(yīng)集中采購管理；落實進(jìn)貨查驗制度；不得采購不符合《食品安全法》規(guī)定的食品原輔料；嚴(yán)格執(zhí)行食品購進(jìn)索證、索票制度，臺賬登記清晰完整；食品的貯存應(yīng)保持食品庫房清潔、通風(fēng)、防潮、防鼠，食品原輔料存放做到分類分架、隔墻離地、先進(jìn)先出；貯存設(shè)施設(shè)備及時維護(hù)，運(yùn)行正常；定期檢查、處理變質(zhì)及超過保質(zhì)期限的食品。

四是把好食品加工操作關(guān)

第一、粗加工環(huán)節(jié)：食堂不同檔口的食品粗加工應(yīng)盡量在同一區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，實行集中管理。粗加工時，認(rèn)真檢查待加工食品，不得使用腐敗變質(zhì)、感官性狀異常的食品；各種食品原料在使用前應(yīng)清洗干凈，植物性、動物性和水產(chǎn)類食品必須分別在專用水池內(nèi)進(jìn)行清洗，各功能性水池不得混用，防止微生物交叉污染。

第二、烹調(diào)加工環(huán)節(jié)：不得加工使用腐敗變質(zhì)的食品；需要熟制的食品必須燒熟煮透；不得在烹調(diào)加工場所進(jìn)行粗加工；成品、半成品及原料應(yīng)當(dāng)分開存放，食品儲存柜要標(biāo)識清晰明確，避免交叉污染。

第三、涼菜、裱花蛋糕等加工環(huán)節(jié)：必須嚴(yán)格遵守“五?！币螅粐?yán)格落實洗手消毒、二次更衣制度，從業(yè)人員保持良好的個人衛(wèi)生習(xí)慣；生肉和未經(jīng)清洗的果蔬等食品原料不得進(jìn)入專間內(nèi)加工；專間內(nèi)降溫、空氣及操作臺消毒等設(shè)施設(shè)備及時維護(hù)，運(yùn)行正常。

第四、及時對食品原輔料進(jìn)行檢查，清理過期產(chǎn)品。五是把好備餐供餐關(guān)

供餐前應(yīng)認(rèn)真檢查待供應(yīng)的食品，不得供應(yīng)腐敗變質(zhì)或者其他感官性狀異常的食品；備餐時應(yīng)避免食品受到污染；分配菜肴的工用具使用前應(yīng)進(jìn)行有效的消毒；烹飪后至食用前需較長時間（超過2小時）存放的食品應(yīng)當(dāng)在高于60℃或低于10℃的條件下存放；不得提供剩菜剩飯。

六是把好食品工用具及餐飲具清洗消毒關(guān)

清洗消毒人員要熟練掌握清洗消毒知識和方法，落實清洗消毒制度，規(guī)范清洗消毒行為，使清洗消毒效果達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)；清洗消毒后的餐飲具應(yīng)存放在專用的保潔設(shè)施內(nèi)備用，工用具應(yīng)做到分開使用、定位存放；定期對保潔設(shè)施進(jìn)行清洗消毒，以免對消毒后的餐飲具造成二次污染；清洗消毒及保潔設(shè)施、設(shè)備運(yùn)行良好，能正常使用。

為了強(qiáng)化高校食堂內(nèi)部管理的風(fēng)險意識，更為有效徹底地排除微生物污染風(fēng)險，在日常自查工作中，高校依據(jù)《餐飲單位食品安全微 生物污染防控自查表》，對食堂食品加工進(jìn)行綜合評分，綜合得分80分以上的屬存在食品安全風(fēng)險較低，應(yīng)及時整改，消除風(fēng)險；綜合得分60分至80分的屬存在食品安全風(fēng)險中等，應(yīng)及時向監(jiān)管部門上報相關(guān)信息，在執(zhí)法監(jiān)管人員的現(xiàn)場指導(dǎo)下進(jìn)行有效整改，消除食品安全風(fēng)險；綜合得分60分以下的屬存在食品安全風(fēng)險較高，應(yīng)立即自行停業(yè)整頓，在執(zhí)法監(jiān)管人員現(xiàn)場監(jiān)督指導(dǎo)下徹底整改，待徹底排除風(fēng)險后方可營業(yè)。

（四）、依托科技手段，完善內(nèi)部防控

由于微生物具有肉眼不可見性，以及餐飲加工動態(tài)性、人為性極強(qiáng)等特點(diǎn)，因此，唯有應(yīng)用有效的科技手段作為支撐，才能更加全面科學(xué)地預(yù)防和控制微生物污染。

第一、高校食堂應(yīng)配備相應(yīng)的食品安全快檢試劑及設(shè)備，積極開展食品安全快速檢測，尤其是微生物快速檢測，對購進(jìn)原料、半成品、成品及餐飲具等進(jìn)行快速檢測，及時發(fā)現(xiàn)可能導(dǎo)致微生物污染的風(fēng)險所在，消除風(fēng)險。

對配備食品安全快速檢測試劑及設(shè)備的高校，執(zhí)法人員會對高校食堂快檢操作人員進(jìn)行集中培訓(xùn)，使其能夠熟練應(yīng)用快檢試劑及設(shè)備開展工作。

第二、高校食堂應(yīng)引入遠(yuǎn)程視頻監(jiān)控系統(tǒng)，對食堂各加工環(huán)節(jié)中易引起微生物污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)實施動態(tài)監(jiān)控。

四、監(jiān)管部門要創(chuàng)新監(jiān)管模式，加大監(jiān)管力度

（一）、強(qiáng)化格式化監(jiān)管，做好風(fēng)險排序

對高校食堂食品加工過程中易引起微生物污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，實施 全面拉網(wǎng)式排查，及時發(fā)現(xiàn)存在的安全隱患，對存在違法違規(guī)的行為，加大處罰懲戒力度。在檢查過程中，嚴(yán)格按照《餐飲單位格式化監(jiān)督檢查表》對高校食堂進(jìn)行微生物污染風(fēng)險評估，并給予綜合量化評分排序，各高校食堂的風(fēng)險排名情況，不僅要在高校內(nèi)部進(jìn)行通報，而且要通報主管教育部門。對于得分較低、風(fēng)險較大的單位，要增加監(jiān)督檢查頻次，實施重點(diǎn)監(jiān)管，將食品安全隱患降至最低。對于存在的違法行為、給予警告或多次責(zé)令改正但拒不改正的行為，要依法予以嚴(yán)肅查處。

（二）、建立健全遠(yuǎn)程監(jiān)控和檢驗為主的科技支撐體系 采用遠(yuǎn)程監(jiān)控的新型執(zhí)法監(jiān)管手段，不僅可以節(jié)約監(jiān)管成本，提高監(jiān)管效率，更可使執(zhí)法監(jiān)管人員及時有效地對其微生物防控工作的每個環(huán)節(jié)進(jìn)行實時監(jiān)管，促使其餐飲服務(wù)行為的規(guī)范。因此，對于容易導(dǎo)致微生物污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，要安裝遠(yuǎn)程監(jiān)控設(shè)備，對關(guān)鍵控制點(diǎn)的具體操作情況實施動態(tài)監(jiān)控，實現(xiàn)微生物防控的動態(tài)性，一旦發(fā)現(xiàn)從業(yè)人員違規(guī)操作，存在食品安全風(fēng)險，即刻告知高校食品安全專職管理員，確保在第一時間排除各類可能引起微生物污染的隱患。

由于微生物的肉眼不可見性，依靠常規(guī)的監(jiān)管手段無法對微生物污染做出科學(xué)判斷，因此，在監(jiān)管過程中，應(yīng)用食品安全快速檢測設(shè)備對食品及食品工用具進(jìn)行檢測，對篩查出的可疑食品進(jìn)行抽樣送檢。食品安全快檢及抽驗，不僅使得微生物污染防控更加科學(xué)合理，同時也是對日常監(jiān)管及微生物防控效果的評估，能夠為微生物防控提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支撐。

監(jiān)管單位要依據(jù)監(jiān)督檢查及抽驗結(jié)果對高校食堂進(jìn)行風(fēng)險排序，找出不同風(fēng)險類別高校食堂微生物污染防控的關(guān)鍵環(huán)節(jié)和關(guān)鍵控制點(diǎn)，建立微生物污染防控預(yù)警體系，對安全風(fēng)險較大的單位及易引起微生物污染的關(guān)鍵環(huán)節(jié)制定相應(yīng)的監(jiān)督檢查計劃，并實施重點(diǎn)監(jiān)督檢查。

（三）建設(shè)記分制為主的微生物污染防控誠信體系

為了進(jìn)一步提高轄區(qū)內(nèi)高校食堂餐飲食品安全水平，更加有效預(yù)防和控制餐飲微生物污染，加強(qiáng)高校內(nèi)部微生物防控的力度，監(jiān)管單位應(yīng)對轄區(qū)內(nèi)高校食堂建立微生物污染防控誠信系統(tǒng)，采用記分管理手段，通過日常監(jiān)督與專項檢查相結(jié)合的形式對轄區(qū)內(nèi)高校食堂進(jìn)行監(jiān)督管理，對違規(guī)行為進(jìn)行記分，在一個記分周期內(nèi)，累計記分達(dá)到或超過某一限值，將采取有效措施進(jìn)行重點(diǎn)監(jiān)管。具體記分規(guī)則詳見附件4。

五、工作要求

（一）高度重視、認(rèn)真抓好落實

餐飲微生物污染防控是有效預(yù)防食源性疾病的重要手段之 一，事關(guān)我市餐飲服務(wù)食品安全全局，各有關(guān)單位的一把手要把此項工作放在重要位臵上，要親自抓，督促各高校落實好自查自控工作，確保微生物污染防控取得實效。

（二）統(tǒng)籌安排，提高工作效率

將微生物污染防控工作與日常的監(jiān)督檢查及各種專項檢查

工作相結(jié)合，要統(tǒng)籌安排執(zhí)法力量，打包落實工作任務(wù)，明確責(zé)任，確保此次高校食堂微生物防控工作落實到位。

（三）信息報送，完善工作資料

要確定專人，負(fù)責(zé)收集、報送此次微生物污染防控工作信息，工作結(jié)束后，做好相關(guān)資料整理和歸檔工作。