第一篇：實(shí)驗(yàn)五 細(xì)菌的生理生化

實(shí)驗(yàn)五 細(xì)菌的生理、生化試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

初步學(xué)會細(xì)菌生理、生化試驗(yàn)的操作、結(jié)果分析。

儀器材料：

蛋白胨水培養(yǎng)基、糖發(fā)酵培養(yǎng)基、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基、醋酸鉛蛋白胨水培養(yǎng)基、檸檬酸鹽瓊脂斜面培養(yǎng)基等；甲基紅（MR）試劑、維-培（V-P）試劑、靛基質(zhì)試劑等；大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌、沙門氏菌的24h純培養(yǎng)物等。

微生物生化反應(yīng)是指用化學(xué)反應(yīng)來測定微生物的代謝產(chǎn)物，生化反應(yīng)常用來鑒別一些在形態(tài)和其它方面不易區(qū)別的微生物。因此微生物生化反應(yīng)是微生物分類鑒定中的重要依據(jù)之一,微生物檢驗(yàn)中常用的生化反應(yīng)介紹如下：

一、糖酵解試驗(yàn)

不同微生物分解利用糖類的能力有很大差異，或能利用或不能利用，能利用者，或產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣?？捎弥甘緞┘鞍l(fā)酵管檢驗(yàn)。

試驗(yàn)方法：以無菌操作，用接種針或環(huán)移取純培養(yǎng)物少許，接種于發(fā)酵液體培養(yǎng)基管中，若為半固體培養(yǎng)基，則用接種針作穿刺接種。接種后，置36±1.0°C培養(yǎng)，每天觀察結(jié)果，檢視培養(yǎng)基顏色有無改變（產(chǎn)酸），小倒管中有無氣泡，微小氣泡亦為產(chǎn)氣陽性，若為半固體培養(yǎng)基，則檢視沿穿刺線和管壁及管底有無微小氣泡，有時(shí)還可看出接種菌有無動(dòng)力，若有動(dòng)力，培養(yǎng)物可呈彌散生長。本試驗(yàn)主要是檢查細(xì)菌對各種糖、醇和糖苷等的發(fā)酵能力，從而進(jìn)行各種細(xì)菌的鑒別，因而每次試驗(yàn)，常需同時(shí)接種多管。一般常用的指示劑為酚紅、溴甲酚紫，溴百里藍(lán)和An-drade指示劑。

二、淀粉水解試驗(yàn)

某些細(xì)菌可以產(chǎn)生分解淀粉的酶，把淀粉水解為麥芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再變藍(lán)色。

試驗(yàn)方法：以18~24h的純培養(yǎng)物，涂布接種于淀粉瓊脂斜面或平板（一個(gè)平板可分區(qū)接種，試驗(yàn)數(shù)種培養(yǎng)物）或直接移種于淀粉肉湯中，于36±1°C培養(yǎng)24~48h，或于20℃培養(yǎng)5天。然后將碘試劑直接滴浸于培養(yǎng)表面，若為液體培養(yǎng)物，則加數(shù)滴碘試劑于試管中。立即檢視結(jié)果，陽性反應(yīng)（淀粉被分解）為瓊脂培養(yǎng)基呈深藍(lán)色、菌落或培養(yǎng)物周圍出現(xiàn)無色透明環(huán)、或肉湯顏色無變化。陰性反應(yīng)則無透明環(huán)或肉湯呈深藍(lán)色。

淀粉水解系逐步進(jìn)行的過程，因而試驗(yàn)結(jié)果與菌種產(chǎn)生淀粉酶的能力、培養(yǎng)時(shí)間，培養(yǎng)基含有淀粉量和pH等均有一定關(guān)系。培養(yǎng)基pH必須為中性或微酸性，以pH7.2最適。淀粉瓊脂平板不宜保存于冰箱，因而以臨用時(shí)制備為妥。

三：V-P試驗(yàn)

某些細(xì)菌在葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸縮合，脫羧成乙酰甲基甲醇，后者在強(qiáng)堿環(huán)境下，被空氣中的氧氧化為二乙酰，二乙酰與蛋白胨中的胍基生成紅色化合物，稱V－P（+）反應(yīng)。

試驗(yàn)方法：

１）O’Meara氏法：將試驗(yàn)菌接種于通用培養(yǎng)基，于36±1°C培養(yǎng)48h，培養(yǎng)液1ml加O’Meara試劑（加有0.3%肌酸Creatine或肌酸酐Creatinine的40%氫氧化鈉水溶液）1ml，搖動(dòng)試管1~2min，靜置于室溫或36±1°C恒溫箱，若4h內(nèi)不呈現(xiàn)伊紅，即判定為陰性。亦有主張?jiān)?8~50°C水浴放置2h后判定結(jié)果者。

２）Barritt氏法：將試驗(yàn)菌接種于通用培養(yǎng)基，于36±1°C培養(yǎng)4天、培養(yǎng)液2.5ml先加入a萘酚（2-na-phthol）純酒精溶液0.6ml,再加40%氫氧化鉀水溶液0.2ml，搖動(dòng)2~5min，陽性菌常立即呈現(xiàn)紅色，若無紅色出現(xiàn)，靜置于室溫或36±1°C恒溫箱，如2h內(nèi)仍不顯現(xiàn)紅色、可判定為陰性。

３）快速法：將0.5%肌酸溶液2滴放于小試管中、挑取產(chǎn)酸反應(yīng)的三糖鐵瓊脂斜面培養(yǎng)物一接種環(huán)，乳化接種于其中，加入5%α-萘酚3滴，40%氫氧化鈉水溶液2滴，振動(dòng)后放置5min，判定結(jié)果。不產(chǎn)酸的培養(yǎng)物不能使用。

本試驗(yàn)一般用于腸桿菌科各菌屬的鑒別。在用于芽胞桿菌和葡萄球菌等其它細(xì)菌時(shí)，通用培養(yǎng)基中的磷酸鹽可阻礙乙酰甲基醇的產(chǎn)生，故應(yīng)省去或以氯化鈉代替。

四：甲基紅（Methyl Red）試驗(yàn)

腸桿菌科各菌屬都能發(fā)酵葡萄糖，在分解葡萄糖過程中產(chǎn)生丙酮酸，進(jìn)一步分解中，由于糖代謝的途徑不同，可產(chǎn)生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性產(chǎn)物，可使培養(yǎng)基PH值下降至pH4.5以下，使甲基紅指示劑變紅。

試驗(yàn)方法：挑取新的待試純培養(yǎng)物少許，接種于通用培養(yǎng)基，培養(yǎng)于36±1°C或30°C（以30°C較好）3~5天，從第二天起，每日取培養(yǎng)液1ml，加甲基紅指示劑1~2滴，陽性呈鮮紅色，弱陽性呈淡紅色，陰性為黃色。迄至發(fā)現(xiàn)陽性或至第5天仍為陰性、即可判定結(jié)果。

甲基紅為酸性指示劑，pH范圍為4.4~6.0，其pK值為5.0。故在pH5.0以下，隨酸度而增強(qiáng)黃色，在pH5.0以上，則隨堿度而增強(qiáng)黃色，在pH5.0或上下接近時(shí)，可能變色不夠明顯，此時(shí)應(yīng)延長培養(yǎng)時(shí)間，重復(fù)試驗(yàn)。

五：靛基質(zhì)（Imdole）試驗(yàn)

某些細(xì)菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用顯色反應(yīng)表

現(xiàn)出來。吲哚與對二甲基氨基苯醛結(jié)合，形成玫瑰吲哚，為紅色化合物。

試驗(yàn)方法：將待試純培養(yǎng)物小量接種于試驗(yàn)培養(yǎng)基管，于36±1°C培養(yǎng)24h時(shí)后，取約2ml培養(yǎng)液，加入Kovacs氏試劑2~3滴，輕搖試管，呈紅色為陽性，或先加少量乙醚或二甲苯，搖動(dòng)試管以提取和濃縮靛基質(zhì)，待其浮于培養(yǎng)液表面后，再沿試管壁徐緩加入Kovacs氏試劑數(shù)滴，在接觸面呈紅色，即為陽性。

實(shí)驗(yàn)證明靛基質(zhì)試劑可與17種不的靛基質(zhì)化合物作用而產(chǎn)生陽性反應(yīng)，若先用二甲苯或乙醚等進(jìn)行提取，再加試劑，則只有靛基質(zhì)或5-甲基靛基質(zhì)在溶劑中呈現(xiàn)紅色，因而結(jié)果更為可靠。

六、硝酸鹽（Nitrate）還原試驗(yàn)

有些細(xì)菌具有還原硝酸鹽的能力，可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽、氨或氮?dú)獾取喯跛猁}的存在可用硝酸試劑檢驗(yàn)。

試驗(yàn)方法：臨試前將試劑的A（磺胺酸冰醋酸溶液）和B（α－萘胺乙醇溶液）試液各0.2ml等量混合、取混合試劑約0.1ml、加于液體培養(yǎng)物或瓊脂斜面培養(yǎng)物表面，立即或于10min內(nèi)呈現(xiàn)紅色即為試驗(yàn)陽性，若無紅色出現(xiàn)則為陰性。

用α-萘胺進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，陽性紅色消退很快、故加入后應(yīng)立即判定結(jié)果。進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)必須有未接種的培養(yǎng)基管作為陰性對照。α-萘胺具有致癌性、故使用時(shí)應(yīng)加注意。

七、明膠（Gelatin）液化試驗(yàn)

有些細(xì)菌具有明膠酶（亦稱類蛋白水解酶），能將明膠先水解為多肽，又進(jìn)一步水解為氨基酸，失去凝膠性質(zhì)而液化。

試驗(yàn)方法：挑取18~24h待試菌培養(yǎng)物，以較大量穿刺接種于明膠高層約2/3深度或點(diǎn)種于平板培養(yǎng)基。于20~22℃培養(yǎng)7~14天。明膠高層亦可培養(yǎng)于36±1℃。每天觀察結(jié)果，若因培養(yǎng)溫度高而使明膠本身液化時(shí)應(yīng)不加搖動(dòng)、靜置冰箱中待其凝固后、再觀察其是否被細(xì)菌液化，如確被液化，即為試驗(yàn)陽性。平板試驗(yàn)結(jié)果的觀察為在培養(yǎng)基平板點(diǎn)種的菌落上滴加試劑，若為陽性，10~20min后，菌落周圍應(yīng)出現(xiàn)清晰帶環(huán)。否則為陰性。

八、尿素酶（Urease）試驗(yàn)

有些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶，將尿素分解、產(chǎn)生2個(gè)分子的氨，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，酚紅呈粉紅色。尿素酶不是誘導(dǎo)酶，因?yàn)椴徽摰孜锬蛩厥欠翊嬖?，?xì)菌均能合成此酶。其活性最適pH為7.0。

試驗(yàn)方法：挑取18~24h待試菌培養(yǎng)物大量接種于液體培養(yǎng)基管中，搖均，于36±1℃培養(yǎng)10，60和120min，分別觀察結(jié)果?；蛲坎疾⒋┐探臃N于瓊脂斜面，不要到達(dá)底部，留底部作變色對照。培養(yǎng)2，4和24h分別觀察結(jié)果，如陰性應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至4天，作最終判定，變?yōu)榉奂t色為陽性。

九、氧化酶（Oxidase）試驗(yàn)

氧化酶亦即細(xì)胞色素氧化酶，為細(xì)胞色素呼吸酶系統(tǒng)的終末呼吸酶，氧化酶先使細(xì)胞色素C氧化，然后此氧化型細(xì)胞色素C再使對苯二胺氧化，產(chǎn)生顏色反應(yīng)。

試驗(yàn)方法：在瓊脂斜面培養(yǎng)物上或血瓊脂平板菌落上滴加試劑1~2滴，陽性者Kovacs氏試劑呈粉紅色~深紫色，Ewing氏改進(jìn)試劑呈藍(lán)色。陰性者無顏色改變。應(yīng)在數(shù)分鐘內(nèi)判定試驗(yàn)結(jié)果。

十、硫化氫（H2S）試驗(yàn)

有些細(xì)菌可分解培養(yǎng)基中含硫氨基酸或含硫化合物，而產(chǎn)生硫化氫氣體，硫化氫遇鉛鹽或低鐵鹽可生成黑色沉淀物。

試驗(yàn)方法：在含有硫代硫酸鈉等指示劑的培養(yǎng)基中，沿管壁穿刺接種，于36±1℃培養(yǎng)24~28h，培養(yǎng)基呈黑色為陽性。陰性應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至6天。也可用醋酸鉛紙條法：將待試菌接種于一般營養(yǎng)肉湯，再將醋酸鉛紙條懸掛于培養(yǎng)基上空，以不會被濺濕為適度；用管塞壓住置36±1℃培養(yǎng)1~6天。紙條變黑為陽性。

十一、三糖鐵（TSI）瓊脂試驗(yàn)

試驗(yàn)方法：以接種針挑取待試菌可疑菌落或純培養(yǎng)物，穿刺接種并涂布于斜面，置36±1℃培養(yǎng)18~24h，觀察結(jié)果。

本試驗(yàn)可同時(shí)觀察乳糖和蔗糖發(fā)酵產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣（變黃）；產(chǎn)生硫化氫（變黑）。葡萄糖被分解產(chǎn)酸可使斜面先變黃，但因量少，生成的少量酸，因接觸空氣而氧化，加之細(xì)菌利用培養(yǎng)基中含氮物質(zhì)，生成堿性產(chǎn)物，故使斜面后來又變紅，底部由于是在厭氧狀態(tài)下，酸類不被氧化，所以仍保持黃色。

十二、硫化氫-靛基質(zhì)-動(dòng)力（SIM）瓊脂試驗(yàn)

試驗(yàn)方法：以接種針挑取菌落或純養(yǎng)物穿刺接種約1/2深度，置36±1℃培養(yǎng)18~24h，觀察結(jié)果。培養(yǎng)物呈現(xiàn)黑色為硫化氫陽性，混濁或沿穿刺線向外生長為有動(dòng)力，然后加Kovacs氏試劑數(shù)滴于培養(yǎng)表面，靜置10min，若試劑呈紅色為靛基質(zhì)陽性。培養(yǎng)基未接種的下部，可作為對照。

本試驗(yàn)用于腸桿菌科細(xì)菌初步生化篩選，與三糖鐵瓊脂等聯(lián)合使用可顯著提高篩選功效。

第二篇：生化實(shí)驗(yàn)

1．火

（1）酒精及其它可溶于水的液體著火時(shí)，可用水滅火

（2）汽油、乙醚、甲苯等有機(jī)溶劑著火時(shí)，應(yīng)用石棉布或砂土撲滅，絕對不能用水，否則反而會擴(kuò)大燃燒面積。

（3）電起火，不能用水和二氧化碳滅火器，應(yīng)切斷電源或用四氯化碳滅火器。2．燒傷

（1）強(qiáng)堿燒傷：先用大量水沖洗，再用5%的硼酸溶液和2%的乙酸溶液沖洗。（2）強(qiáng)酸燒傷：先用大量水沖洗，再用5%的碳酸氫鈉或5%的氫氧化銨沖洗。

氨基酸的分離鑒定紙層析法

紙層析法是用濾紙作為惰性支持物的分配層析法。層析溶劑由有機(jī)溶劑和水組成。物質(zhì)被分離后在紙層析圖譜上的位置是用Rf值（比移）來表示的：

在一定的條件下某種物質(zhì)的Rf值是常數(shù)。Rf值的大小與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、溶劑系統(tǒng)；層析濾紙的質(zhì)量和層析溫度等因素有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)利用紙層析法分離氨基酸。

在操作過程中，手不要摸濾紙。點(diǎn)樣直徑不超過3mm。

點(diǎn)樣的一端朝下, 擴(kuò)展劑的液面需低于點(diǎn)樣線1cm。

即時(shí)取出濾紙, 以免出現(xiàn)氨基酸層析跑到濾紙的外面不能檢測。

蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應(yīng) 雙縮脲反應(yīng)

紫紅色

肽鍵 可用于蛋白質(zhì)的定性或定量測定 一切蛋白質(zhì)或二肽以上的多肽都有雙縮脲反應(yīng)，但有雙縮脲反應(yīng)的物質(zhì)不一定都是蛋白質(zhì)或多肽。茚三酮反應(yīng)

除脯氨酸、羥脯氨酸和茚三酮反應(yīng)產(chǎn)生黃色物質(zhì)外，所有α—氨基酸及一切蛋白質(zhì)都能和茚三酮反應(yīng)生成藍(lán)紫色物質(zhì)。此反應(yīng)的適宜pH為5~7，同一濃度的蛋白質(zhì)或氨基酸在不同pH條件下的顏色深淺不同，酸度過大時(shí)甚至不顯色。

與茚三酮呈陽性反應(yīng)的不一定就是蛋白質(zhì)或氨基酸。在定性、定量測定中，應(yīng)嚴(yán)防干擾物存在。該反應(yīng)十分靈敏，1∶1 500 000濃度的氨基酸水溶液即能給出反應(yīng)，是一種常用的氨基酸定量測定方法。茚三酮反應(yīng)分為兩步，第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛，水合茚三酮被還原成還原型茚三酮；第二步是所形成的還原型茚三酮同另一個(gè)水合茚三酮分子和氨縮合生成有色物質(zhì)。黃色反應(yīng)

含有苯環(huán)結(jié)構(gòu)的氨基酸，如酪氨酸和色氨酸，遇硝酸后，可被硝化成黃色物質(zhì)，該化合物在堿性溶液中進(jìn)一步形成橙黃色的硝醌酸鈉。苯丙氨酸不易硝化，需加入少量濃硫酸才有黃色反應(yīng)。

坂口反應(yīng)

與精氨酸反應(yīng)呈紅色，精氨酸是唯一呈此反應(yīng)的氨基酸，反應(yīng)極為靈敏 醋酸鉛反應(yīng)

蛋白質(zhì)分子中常含有半胱氨酸和胱氨酸，含硫蛋白質(zhì)在強(qiáng)堿條件下，可分解形成硫化鈉。硫化鈉和醋酸鉛反應(yīng)生成黑色的硫化鉛沉淀。若加入濃鹽酸，就生成有臭味的硫化氫氣體。

蛋白質(zhì)分子中常含有半胱氨酸和胱氨酸，含硫蛋白質(zhì)在強(qiáng)堿條件下，可分解形成硫化鈉。硫化鈉和醋酸鉛反應(yīng)生成黑色的硫化鉛沉淀。若加入濃鹽酸，就生成有臭味的硫化氫氣體。

蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)測定和沉淀反應(yīng)

當(dāng)溶液的pH達(dá)到一定數(shù)值時(shí)，蛋白質(zhì)顆粒上正負(fù)電荷的數(shù)目相等，在電場中，蛋白質(zhì)既不向陰極移動(dòng)，也不向陽極移動(dòng)，此時(shí)溶液pH值稱為此種蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。

用醋酸與醋酸鈉（醋酸鈉混合在酪蛋白溶液中）配制成各種不同pH值的緩沖液。向緩沖液溶液中加入酪蛋白后，沉淀出現(xiàn)最多的緩沖液的pH值即為酪蛋白的等電點(diǎn) 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)

在水溶液中的蛋白質(zhì)分子由于表面生成水化層和雙電層而成為穩(wěn)定的親水膠體顆粒，在一定的理化因素影響下，蛋白質(zhì)顆?？梢蚴ル姾珊兔撍恋?。蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)可分為兩類。

（1）可逆的沉淀的反應(yīng)

此時(shí)蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)尚未發(fā)生顯著變化，除去引起沉淀的因素后，蛋白質(zhì)的沉淀仍能溶解于原來的溶劑中，并保持其天然性質(zhì)而不變性。如大多數(shù)蛋白質(zhì)的鹽析作用或在低溫下用乙醇（或丙酮）短時(shí)間作用于蛋白質(zhì)。提純蛋白質(zhì)時(shí)，常利用此類反應(yīng)。

（2）不可逆沉淀反應(yīng)

此時(shí)蛋白質(zhì)分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生重大改變，蛋白質(zhì)常變性而沉淀，不再溶于原來溶劑中。加熱引起的蛋白質(zhì)沉淀與凝固，蛋白質(zhì)與重金屬離子或某些有機(jī)酸的反應(yīng)都屬于此類。

蛋白質(zhì)變性后，有時(shí)由于維持溶液穩(wěn)定的條件仍然存在（如電荷），并不析出。因此變性蛋白質(zhì)并不一定都表現(xiàn)為沉淀，而沉淀的蛋白質(zhì)也未必都已變性。

考馬斯亮藍(lán)法測定蛋白質(zhì)濃度

考馬斯亮藍(lán)G-250染料，在酸性溶液中與蛋白質(zhì)結(jié)合，使染料的最大吸收峰(max)位置由465 nm變?yōu)?95 nm，溶液顏色也由棕黑色變?yōu)樗{(lán)色。通過測定595 nm處光吸收的增加量可知與其結(jié)合蛋白質(zhì)的量。吸光度與蛋白質(zhì)含量成正比。靈敏度高，測定快速簡便，干擾物質(zhì)少。

微量凱氏定氮法

有機(jī)物與濃硫酸共熱，有機(jī)氮轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)氮（氨），氨與硫酸作用生成硫酸氨，后者與強(qiáng)堿作用釋放出氨，借蒸汽將氨蒸至酸液中，根據(jù)此過量酸液被中和的程度，即可計(jì)算出樣品的含氮量。

中和程度用滴定法來判斷，分回滴法和直接法兩種。

（1）回滴法：用過量的標(biāo)準(zhǔn)酸吸收氨，其剩余的酸可用標(biāo)準(zhǔn)NaOH滴定，由鹽酸量減去滴定所耗NaOH的量即為被吸收的氨之量。此法采用甲基紅做指示劑。

（2）直接法：用硼酸作為氨的吸收溶液，結(jié)果使溶液中[H+]降低，混合指示劑（PH4.3－5.4），黑紫色變?yōu)榫G色。再用標(biāo)準(zhǔn)酸來滴定，使硼酸恢復(fù)到原來的氫離子濃度為止，指示劑出來淡紫色為終點(diǎn)，此時(shí)所耗的鹽酸量即為氨的量。

樣液：1g卵清蛋白溶于0.9%NaCl液，并稀釋至100ml。如有不溶物，離心取上清液備用。

醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質(zhì)

本實(shí)驗(yàn)是以醋酸纖維素薄膜作為支持體的區(qū)帶電泳。

方法是將少量新鮮血清用點(diǎn)樣器點(diǎn)在浸有緩沖液的乙酸纖維素薄膜上，薄膜兩端經(jīng)過濾紙與電泳槽中緩沖液相連，所用緩沖液pH值為8.6，血清蛋白質(zhì)在此緩沖液中均帶負(fù)電荷，在電場中向正極泳動(dòng)。

由于血清中不同蛋白質(zhì)帶有的電荷數(shù)量及分子量不同而泳動(dòng)速度不同。帶電荷多及分子量小者泳動(dòng)速度快；帶電荷少及分子量大者泳動(dòng)速度慢，從而彼此分離。

電泳后，將薄膜取出，經(jīng)染色和漂洗，薄膜上顯示出五條藍(lán)色區(qū)帶，每條帶代表一種蛋白質(zhì)，按泳動(dòng)快慢順序，一般經(jīng)漂洗后，薄膜上可呈現(xiàn)清晰的5條區(qū)帶，由正極端起，依次為清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白。

經(jīng)洗脫比色觀察不同蛋白質(zhì)的區(qū)帶。

1、醋酸纖維素薄膜一定要充分浸透后才能點(diǎn)樣。點(diǎn)樣后電泳槽一定要密閉。電流不宜過大，以防止薄膜干燥，電泳圖譜出現(xiàn)條痕。

2、緩沖溶液離子強(qiáng)度不應(yīng)小于0.05或大于0.07。因?yàn)檫^小可使區(qū)帶拖尾，過大則使區(qū)帶過于緊密。

3、電泳槽中緩沖液要保持清潔(數(shù)天過濾)兩極溶液要交替使用；最好將連接正、負(fù)極的線路調(diào)換使用。

4、通電過程中，不準(zhǔn)取出或放入薄膜。通電完畢后，應(yīng)先斷開電源后再取薄膜，以免觸電。

酶的特性

溫度對酶活力的影響

大多數(shù)動(dòng)物酶的最適溫度為37－40℃，植物酶的最適溫度為50－60℃。高溫失活，低溫能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。pH對酶活性的影響

唾液淀粉酶的最適pH約為6.8。唾液淀粉酶的活化和抑制

酶的活性受活化劑或抑制劑的影響。氯離子為唾液淀粉酶的活化劑，銅離子為其抑制劑。

血糖的定量測定

動(dòng)物血液中的糖主要是葡萄糖，其含量較恒定。用硫酸鋅和氫氧化鈉除去被檢測血中的蛋白質(zhì)制成無蛋白血濾液。當(dāng)將血濾液與標(biāo)準(zhǔn)鐵氰化鉀溶液共熱時(shí),一部分鐵氰化鉀還原成亞鐵氰化鉀，并與鋅離子生成不溶性化合物。

向混合物中加入碘化物后，用硫代硫酸鈉溶液滴定所釋放的碘。即可知剩余的鐵氰化鉀量。血糖越多，剩余的鐵氰化鉀越少，所消耗的硫代硫酸鈉也越少。硫代硫酸鈉溶液用量與血糖的關(guān)系可以由經(jīng)驗(yàn)確定下來的數(shù)字表查出。對照組要多一些，且要先查表再相減

脂肪酸的β－氧化

樣品中丙酮的含量=(V1-V2)x C Na2S2O3 x 1/6 V1—滴定對照所消耗的Na2S2O3 的體積 V2—滴定樣品所消耗的Na2S2O3 的體積 C—Na2S2O3 的濃度

維生素C的定量測定

2，6-二氯酚靛酚滴定法

用藍(lán)色的堿性染料標(biāo)準(zhǔn)溶液,對含維生素 C的酸性浸出液進(jìn)行氧化還原滴定,染料被還原為無色,當(dāng)?shù)竭_(dá)滴定終點(diǎn)時(shí),多余的染料在酸性介質(zhì)中則表現(xiàn)為淺紅色,如無其他干擾物質(zhì)存在，樣品提取液所還原的標(biāo)準(zhǔn)染料量與樣品中所含的還原性抗壞血酸量成正比。

過氧化物酶的作用 過氧化物酶能催化過氧化氫釋出新生氧以氧化某些酚類和胺類物質(zhì)，例如氧化溶于水中的焦性沒食子酸生成不溶于水的焦性沒食子橙（橙紅色）；氧化愈創(chuàng)木脂中的愈創(chuàng)木酸成為藍(lán)色的愈創(chuàng)木酸的臭氧化物。

目前測定蛋白質(zhì)含量的方法有很多種，下面列出根據(jù)蛋白質(zhì)不同性質(zhì)建立的一些蛋白質(zhì)測定方法：

物理性質(zhì)：紫外分光光度法。

化學(xué)性質(zhì)：凱氏定氮法、雙縮脲法、Lowry法等。染色性質(zhì)：考馬斯亮藍(lán)染色法、銀染法。其他性質(zhì)：熒光法。

一、凱氏定氮法： 根據(jù)蛋白質(zhì)的含氮量來測定蛋白質(zhì)的含量

公式:每g樣品中含氮克數(shù) × 6.25 ×100

二、比色法：利用蛋白質(zhì)與不同試劑的呈色反應(yīng)，測定蛋白質(zhì)的含量，如雙縮尿法和酚試劑法（lowry’s method）。

三、紫外分光光度法：利用蛋白質(zhì)對280nm紫外光有最大的吸光度而采用

第三篇：生理實(shí)驗(yàn)復(fù)習(xí)資料

生理實(shí)驗(yàn)復(fù)習(xí)資料2（藍(lán)林）

1．為何肌肉收縮在一定范圍內(nèi)可隨刺激強(qiáng)度的增加而增強(qiáng)？

從閾刺激起始，隨著刺激強(qiáng)度的增加，肌肉收縮也相應(yīng)地增大。當(dāng)刺激強(qiáng)度增加到一定限度時(shí)，肌肉收縮也達(dá)到最大限度，如再增大刺激強(qiáng)度，肌肉收縮力就不再增大。其原因同上一題。

2．用閾強(qiáng)度和閾上刺激分別刺激單根神經(jīng)纖維與神經(jīng)干時(shí)，其記錄的電變化有何不同？為什么？

用閾強(qiáng)度和閾上刺激分別刺激單根神經(jīng)纖維與神經(jīng)干時(shí)，動(dòng)作電位幅度不相同。①用不同的刺激強(qiáng)度刺激神經(jīng)干時(shí)，動(dòng)作電位的幅度將隨刺激強(qiáng)度的增大而呈等級性反應(yīng)。神經(jīng)干是由許多條興奮性不同的神經(jīng)纖維組成，即興奮性高的纖維先興奮，隨著刺激強(qiáng)度的增大，興奮的纖維越來越多。當(dāng)刺激達(dá)到某一最適強(qiáng)度時(shí)，可使神經(jīng)干中所有的纖維都興奮，此時(shí)動(dòng)作電位的幅度就先到最大值，再增大刺激強(qiáng)度，動(dòng)作電位幅度不再增大。在神經(jīng)干上記錄的是許多神經(jīng)纖維興奮所形成的復(fù)合動(dòng)作電位。②單根神經(jīng)纖維的動(dòng)作電位呈“全或無”現(xiàn)象。刺激強(qiáng)度未達(dá)到閾值不產(chǎn)生動(dòng)作電位。一旦達(dá)到閾值，就產(chǎn)生固定幅度的動(dòng)作電位。再給予閾上刺激，動(dòng)作電位幅值也不隨之增大。

3．電刺激坐骨神經(jīng)－腓腸肌標(biāo)本的神經(jīng)后，從電刺激神經(jīng)到引起肌肉收縮的整個(gè)過程中依次發(fā)生了哪些生理活動(dòng)？

從坐骨神經(jīng)接受刺激到發(fā)生肌肉收縮歷經(jīng)下列變化過程：①刺激引起坐骨神經(jīng)產(chǎn)生動(dòng)作電位；②動(dòng)作電位沿坐骨神經(jīng)以跳躍式傳導(dǎo)至末梢；③興奮在神經(jīng)-肌肉接頭處的傳遞，即：突觸前膜去極化引起Ca2+內(nèi)流→Ca2+內(nèi)流觸發(fā)神經(jīng)遞質(zhì)Ach釋放→Ach經(jīng)擴(kuò)散與接頭后膜上的N2型Ach受體結(jié)合，出現(xiàn)Na+內(nèi)流為主的離子跨膜流動(dòng)，形成終板電位→終板電位電緊張傳播，引起周圍肌膜產(chǎn)生動(dòng)作電位；④骨骼肌興奮收縮－耦聯(lián)，肌細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)Ca2+濃度迅速增高；⑤胞質(zhì)內(nèi)Ca2+與肌鈣蛋白結(jié)合，誘發(fā)肌絲滑行，肌肉收縮；⑥肌質(zhì)網(wǎng)膜上Ca2+泵活動(dòng)的結(jié)果，使胞質(zhì)內(nèi)Ca2+濃度恢復(fù)，肌肉出現(xiàn)舒張。4．在蛙心灌注實(shí)驗(yàn)中，逐級升高任氏液K＋濃度時(shí)，心肌的興奮性和傳導(dǎo)性有何變化？為什么？有何意義？ 制備離體蛙心灌流模型。用蛙心夾連接心尖和張力傳感器，調(diào)節(jié)放大倍數(shù)，進(jìn)行下列實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：（1）描記一段蛙心正常收縮曲線。

（2）向套管中加入1%KCl 1～2滴，觀察蛙心活動(dòng)有何變化？然后繼續(xù)加入1%KCl 1～2滴，觀察蛙心活動(dòng)有何變化？ 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，心肌的興奮性出現(xiàn)雙向變化。當(dāng)細(xì)胞外液K＋濃度輕度升高時(shí)，心肌細(xì)胞膜內(nèi)外K＋濃度差減小，K＋外流減少，心肌細(xì)胞靜息電位或最大復(fù)極電位輕度減小，與閾電位之間差距減小，心肌興奮性升高。當(dāng)細(xì)胞外液K＋過度升高時(shí)，心肌細(xì)胞靜息電位或最大復(fù)極電位絕對值顯著減小，心肌膜上的Na+通道部分或大量失活，心肌興奮性減低，甚至喪失。

心肌興奮性傳導(dǎo)速度將逐漸減慢。其機(jī)制是當(dāng)細(xì)胞外液K＋濃度逐漸升高時(shí)，心肌細(xì)胞靜息電位或最大復(fù)極化電位絕對值顯著減小，Na+（或Ca2+）內(nèi)流的驅(qū)動(dòng)減小，并且Na+（或Ca2+）通道部分失活，心肌動(dòng)作電位0期Na+（或Ca2+）內(nèi)流的速度和量減小，0期去極化的速度和幅度減小，局部電流形成減慢，強(qiáng)度減小，局部電流影響范圍小，故興奮傳導(dǎo)減慢。嚴(yán)重的高血鉀可引起房室交界和心房肌傳導(dǎo)阻滯，嚴(yán)重時(shí)引起心室內(nèi)傳導(dǎo)阻滯，心臟停跳。5．試述影響動(dòng)脈血壓的因素。影響動(dòng)脈血壓的因素有：

（1）搏出量：在心率與外周阻力恒定的情況下，搏出量可以增加動(dòng)脈內(nèi)血容量，升高收縮壓；雖然舒張壓也升高，但不如收縮壓，脈壓也有輕度增加。因此，收縮壓的高低主要反映心臟搏出量的多少。

（2）心率：如心率加快則使心舒期縮短，心舒期末主動(dòng)脈內(nèi)存留血量增加。因此心率加快時(shí)，舒張壓的升高大于收縮壓的升高，故脈壓減小。當(dāng)心率減慢時(shí)，結(jié)果相反?？梢?，心率主要影響舒張壓。

（3）外周阻力：外周阻力增加時(shí)，阻止動(dòng)脈血液流向外周，使心舒期末動(dòng)脈內(nèi)存留的血量增加。因此，以舒張壓增加為主。同理，外周阻力降低時(shí)，血壓降低也以舒張壓為明顯?？梢?，舒張壓的高低主要反應(yīng)外周阻力的大小。

（4）主動(dòng)脈和大動(dòng)脈的順應(yīng)性：大動(dòng)脈彈性擴(kuò)張主要是緩沖血壓，使收縮壓降低，舒張壓升高。故當(dāng)大動(dòng)脈硬化時(shí)，順應(yīng)性變小，緩沖能力減弱，收縮壓升高而舒張壓降低，脈壓增大。

（5）循環(huán)血量和血管系統(tǒng)容量的比例：失血時(shí)，循環(huán)血量減少，而血管容量改變不大，體循環(huán)平均壓下降，使回心血量減少，心輸出量減少，動(dòng)脈血壓下降。如循環(huán)血量不變，血管容量增加，也可使回心血量減少，動(dòng)脈血壓下降。

6．在嚴(yán)重缺O(jiān)2、CO2潴留、酸中毒、窒息情況下，機(jī)體是如何維持動(dòng)脈血壓的？

在嚴(yán)重缺O(jiān)2、CO2潴留、酸中毒、窒息對體循環(huán)血管的直接作用是擴(kuò)張血管，降低動(dòng)脈血壓。但機(jī)體可通過頸動(dòng)脈體和主動(dòng)脈體化學(xué)感受性反射維持動(dòng)脈血壓，維持心腦等重要生命器官血液供應(yīng)。正常情況下，化學(xué)感受器反射主要是調(diào)節(jié)呼吸運(yùn)動(dòng)，對心血管活動(dòng)不起明顯調(diào)節(jié)作用。但血液中O2分壓降低，CO2分壓升高及pH值降低，可激活頸動(dòng)脈體及主動(dòng)脈體內(nèi)的化學(xué)感受器。傳入沖動(dòng)分別沿竇神經(jīng)和主動(dòng)脈神經(jīng)上傳到延髓的心血管中樞及呼吸中樞，引起呼吸加深加快，并因此使心率加快，心肌收縮增強(qiáng)，心輸出量增多；同時(shí)使交感縮血管緊張?jiān)鰪?qiáng)，使外周血管收縮，外周阻力加大，動(dòng)脈血壓升高，皮膚、骨骼肌、腹腔內(nèi)臟和腎臟的血流量減少，心、腦血流量增加，從而維持了動(dòng)脈血壓和心腦的血液供應(yīng)。7．在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，夾閉一側(cè)頸總動(dòng)脈后，動(dòng)脈血壓有何變化？為什么 夾閉一側(cè)頸總動(dòng)脈后，動(dòng)脈血壓會出現(xiàn)升高。

心臟射出的血液經(jīng)主動(dòng)脈弓、頸總動(dòng)脈而到達(dá)頸總動(dòng)脈竇。當(dāng)血壓升高時(shí)，該處動(dòng)脈管壁受到機(jī)械牽張而擴(kuò)張，從而使主動(dòng)脈弓和頸動(dòng)脈竇血管壁外膜上作為壓力感受器的感覺神經(jīng)末梢興奮，引起減壓反射，使血壓下降。當(dāng)血壓下降使竇內(nèi)壓降低，減壓反射減弱，使血壓升高。在實(shí)驗(yàn)中夾閉一側(cè)頸總動(dòng)脈后，心臟射出的血液不能流經(jīng)該側(cè)頸動(dòng)脈竇，使竇內(nèi)壓力降低，壓力感受器受到刺激減弱，經(jīng)竇神經(jīng)上傳中樞的沖動(dòng)減少，減壓反射活動(dòng)減弱，因而心率加快、心縮力加強(qiáng)、回心血量增加、心輸出量增加；阻力血管收縮，外周阻力增加，導(dǎo)致動(dòng)脈血壓升高。

8．電刺激家兔完整的減壓神經(jīng)時(shí)動(dòng)脈血壓有何變化？若再分別刺激減壓神經(jīng)向中端及向心端又會引起什么結(jié)果？為什么？

主動(dòng)脈弓壓力感受器的傳入纖維一般均在迷走神經(jīng)中上傳到中樞，但家兔主動(dòng)脈弓壓力感受器的傳入纖維卻自成一束，在頸部與迷走神經(jīng)及頸交感神經(jīng)伴行，稱之為減壓神經(jīng)。電刺激家兔完整的減壓神經(jīng)或切斷后的減壓神經(jīng)向中端，其傳入沖動(dòng)相當(dāng)于壓力感受器的傳入興奮，傳入延髓心血管中樞將引起減壓反射的加強(qiáng)，使心率減慢，心輸出量減少，外周血管阻力降低，動(dòng)脈血壓下降；刺激減壓神經(jīng)的外周端對動(dòng)脈血壓無影響，因?yàn)闇p壓神經(jīng)是傳入神經(jīng)。

9．電刺激家兔迷走神經(jīng)向心端引起動(dòng)脈血壓如何變化？機(jī)制是什么？

電刺激家兔迷走神經(jīng)向心端即刺激支配心臟的迷走神經(jīng)，其末梢釋放的遞質(zhì)是乙酰膽堿（Ach）, Ach與心肌細(xì)胞膜上的M膽堿受體結(jié)合，可導(dǎo)致心率減慢，心房肌收縮力量減弱，心房肌不應(yīng)期縮短，房室傳導(dǎo)速度減慢，甚至出現(xiàn)房室傳導(dǎo)阻滯，即負(fù)性變時(shí)、變力和變傳導(dǎo)效應(yīng)，導(dǎo)致血壓下降。10．靜脈注射腎上腺素或乙酰膽堿之后血壓會發(fā)生什么變化，為什么？

靜脈注射腎上腺素，血壓先升高后降低，然后再逐漸恢復(fù)。腎上腺素對心臟的作用是使心率加快，興奮傳導(dǎo)速度增加，心肌收縮力加強(qiáng)和心輸出量增加。對血管的作用則主要取決于血管平滑肌上受體的分別情況：對α受體占優(yōu)勢的皮膚、腎臟、腸胃等內(nèi)臟的血管，腎上腺素使之收縮；而對以β受體占優(yōu)勢的骨骼肌、肝臟和心臟冠脈等血管，小劑量的腎上腺素則使之舒張，而大劑量時(shí)才出現(xiàn)縮血管反應(yīng)。靜脈注射腎上腺素后，開始血液中濃度較高，對心臟和α受體占優(yōu)勢的血管發(fā)生作用，使心跳加快，心肌收縮力加強(qiáng)，心輸出量增加，皮膚、腎臟、腸胃等內(nèi)臟的血管收縮，所以血壓升高。隨著血中腎上腺素的代謝，其濃度逐漸降低，對α受體占優(yōu)勢的血管作用減弱，而對β受體占優(yōu)勢的骨骼肌、肝臟和冠脈血管發(fā)生作用，使之?dāng)U張，引起血壓下降。最后腎上腺素逐漸消失，血壓也逐漸恢復(fù)正常。靜脈注射乙酰膽堿后，血壓會降低。乙酰膽堿與心肌細(xì)胞膜上的M2型膽堿能受體結(jié)合，通過第二信使cGMP提高K+通道開放程度，減少細(xì)胞內(nèi)cAMP，降低Ca2+通道開放程度，使靜息電位水平下降，興奮性降低；竇房結(jié)P細(xì)胞靜息電位水平下移，外向電流Ik衰減減慢，心率減慢；復(fù)極化進(jìn)程加速，Ca2+內(nèi)流減少，房室結(jié)傳導(dǎo)慢，且心肌收縮減弱，故血管平滑肌舒張，使血壓下降。11．切斷家兔雙側(cè)頸迷走神經(jīng)對呼吸的影響如何 為什么 ? 切斷家兔雙側(cè)頸迷走神經(jīng)后，呼吸變深變慢。兔的肺牽張感受器較為敏感，正常的呼吸受肺牽張反射的調(diào)節(jié)，阻止吸氣活動(dòng)過長，加速吸氣動(dòng)作和呼氣動(dòng)作的交替。迷走神經(jīng)中含有肺牽張反射的傳入纖維。切斷兩側(cè)迷走神經(jīng)后，中斷了肺牽張反射的傳入通路，肺牽張反射作用被消除，呼吸變深變慢。12．試述動(dòng)脈血中CO2分壓升高，O2分壓下降，對呼吸有何作用 機(jī)制如何

血中PCO2增高，PO2、pH下降均可使呼吸運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)，但其機(jī)制有所不同。CO2為很強(qiáng)的呼吸興奮劑，其作用通過兩條途徑：一是刺激延髓腹外側(cè)的中樞化學(xué)感受器（CO2能透過血腦屏障，加強(qiáng)腦脊液中H+對此感受器的作用），這是主要途徑；另一是刺激外周化學(xué)感受器，沖動(dòng)沿竇神經(jīng)和主動(dòng)脈神經(jīng)傳入延髓呼吸中樞，誘發(fā)反射性呼吸加深加快；CO2減少時(shí)呼吸減弱，但血PCO2過高反能抑制呼吸中樞。血PO2下降作用于外周化學(xué)感受器引起反射性呼吸興奮，缺氧對呼吸中樞的直接作用是抑制。pH降低、H+增高亦通過外周與中樞化學(xué)感受器兩種途徑興奮呼吸中樞。雖然中樞化學(xué)感受器的生理刺激是H+，但H+通過血腦屏障緩慢，限制了它的中樞效應(yīng)。

13．靜脈注入3%乳酸2 ml，家兔的呼吸運(yùn)動(dòng)有何變化

家兔注入2 ml的3%乳酸后，血中H＋濃度升高，pH下降，通過外周化學(xué)感受器，反射性地引起呼吸加快加深。

14．家兔吸入CO2后呼吸運(yùn)動(dòng)有何變化 為什么

家兔吸入CO2，可使呼吸運(yùn)動(dòng)加深加快，肺通氣量增加。因?yàn)镃O2興奮呼吸是通過刺激中樞化學(xué)感受器和外周化學(xué)感受器兩條途徑而起作用的，并且以興奮中樞化學(xué)感受器為主。

15．小腸運(yùn)動(dòng)的形式有幾種？各有何生理作用？小腸運(yùn)動(dòng)受哪些因素的調(diào)節(jié)？ 小腸的運(yùn)動(dòng)形式有：

（1）緊張性收縮，小腸平滑肌經(jīng)常處于緊張狀態(tài)，這種緊張性是小腸運(yùn)動(dòng)的基礎(chǔ)。如果小腸緊張性降低，腸腔易于擴(kuò)張，混合食糜無力，推送食糜也慢；反之，緊張性升高，推送和混合食糜就加快。（2）分節(jié)運(yùn)動(dòng)，主要作用是使食糜與消化液充分混合，便于進(jìn)行化學(xué)性消化；它還使食糜與腸壁緊密接觸，有利于營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。此外，分節(jié)運(yùn)動(dòng)還能擠壓腸壁，有助于血液和淋巴的回流。（3）蠕動(dòng)，腸段的一種速度緩慢的波浪式推進(jìn)運(yùn)動(dòng)。

（4）擺動(dòng)，以縱行肌為主的節(jié)律性舒縮活動(dòng)。在草食動(dòng)物中擺動(dòng)較為明顯。小腸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)：

①內(nèi)在神經(jīng)叢的作用：食糜對腸壁的機(jī)械和化學(xué)刺激，通過肌間神經(jīng)叢聯(lián)系的局部反射，引起平滑肌的蠕動(dòng)。

②外來神經(jīng)的作用：副交感神經(jīng)興奮能加強(qiáng)小腸運(yùn)動(dòng)，交感神經(jīng)則抑制其運(yùn)動(dòng)，上述作用還依腸肌當(dāng)時(shí)的機(jī)能狀態(tài)而定。③體液因素的作用：除乙酰膽堿和去甲腎上腺素外，P物質(zhì)、腦啡肽和 5-羥色胺都有刺激小腸運(yùn)動(dòng)的作用。16．為什么小腸是最重要的吸收部位？

小腸之所以成為吸收的最重要部位，是因?yàn)樗邆湟韵聴l件：（1）小腸內(nèi)集中了許多重要的消化液，如胰液、膽汁、小腸液等。其中的各種消化酶，對食物的各種成分都能進(jìn)行徹底消化。（2）小腸具有廣泛的吸收面積。人的小腸長約5～7m，小腸黏膜上有環(huán)狀皺褶，皺褶上又有大量絨毛，絨毛外的柱狀上皮細(xì)胞頂端還有許多微絨毛，這些結(jié)構(gòu)最終可使小腸面積增加約600倍，達(dá)200 m2左右。（3）食物在小腸內(nèi)停留時(shí)間較長（3～8h），可作充分地消化和吸收。（4）小腸絨毛內(nèi)有毛細(xì)血管和中央乳糜管，利于代謝物質(zhì)的吸收并進(jìn)入血液和淋巴。

17．簡述胃運(yùn)動(dòng)的形式及其生理意義。

胃運(yùn)動(dòng)功能在于接受和貯存從食管來的食物，還可以機(jī)械地磨碎塊狀固體食物，并使食物與胃液充分混合，直至成為一種半流體混合物－食糜，以適宜的速度逐次地、小量地將食糜分批排入小腸。消化期主要運(yùn)動(dòng)形式有2種。（1）胃的容受性舒張：當(dāng)進(jìn)食時(shí)，咀嚼和吞咽食物對咽、食管等處感受器的刺激，可反射性地引起胃底和胃體肌肉的舒張，該運(yùn)動(dòng)形式被稱為胃的容受性舒張。舒張后的胃容量可增加到1.5L，使胃適應(yīng)于大量食物的擁入，從而更好地完成容受和貯存食物的機(jī)能。（2）胃的蠕動(dòng)：食物進(jìn)入胃后約5min，蠕動(dòng)即開始。蠕動(dòng)是從胃的中部開始，有節(jié)律地向幽門方向進(jìn)行。在人其頻率為3/min，每次需1min左右到達(dá)幽門。因此，通常是一波未平，一波又起。蠕動(dòng)的主要的生理意義是，一方面使食物與胃液充分混合，以利于胃液發(fā)揮作用；另一方面，則可攪拌和粉碎食物，并推進(jìn)胃內(nèi)容物通過幽門進(jìn)入十二指腸內(nèi)。胃在消化期存在移行性復(fù)合運(yùn)動(dòng)，其生理意義在于它的Ⅲ時(shí)相出現(xiàn)強(qiáng)烈的收縮活動(dòng)，加速胃排空，把胃內(nèi)容物“清掃”入十二指腸，接著沿小腸向下“清掃”。同時(shí)還伴有胃酸分泌等，為下一次消化做好準(zhǔn)備。18．膽汁成分中與消化有關(guān)的物質(zhì)是什么？它具有什么作用？膽汁的分泌和排出是如何調(diào)節(jié)的？

膽汁的成分：膽汁中除水外，還有膽色素、膽鹽、膽固醇、卵磷脂以及血漿中所有的無機(jī)鹽，膽汁中沒有消化酶。

膽汁的作用：

⑴膽汁中的膽鹽、膽固醇和卵磷脂等可做為乳化劑，減低脂肪的表面張力，增加胰脂肪酶的作用面積。⑵膽汁達(dá)到一定濃度后，可聚合成微膠粒，與脂肪分解產(chǎn)物形成水溶性復(fù)合物，作為運(yùn)載工具，促進(jìn)不溶于水的脂肪分解產(chǎn)物的吸收。

⑶促進(jìn)脂溶性維生素A,D,E,K的吸收。此外，它在十二指腸可中和一部分胃酸，它還作為促進(jìn)膽汁自身分泌的體液因素。膽汁分泌的調(diào)節(jié)

⑴神經(jīng)因素的作用：

進(jìn)食動(dòng)作或食物對胃、小腸的刺激，均可通過神經(jīng)反射引起肝膽汁分泌的少量增加和膽囊的輕度收縮。迷走神經(jīng)釋放乙酰膽堿可直接作用于肝細(xì)胞和膽囊，增加膽汁分泌和引起膽囊收縮，還可通過釋放胃泌素引起肝膽汁分泌增加。⑵體液因素的作用：

①胃泌素的作用：它可通過血液循環(huán)直接作用于肝細(xì)胞，也可先引起胃酸的分泌，后者再作用于十二指腸粘膜，使之釋放促胰液素而作用于肝細(xì)胞，引起膽汁分泌增加。②促胰液素的作用：可刺激肝細(xì)胞引起肝膽汁的分泌。

③膽囊收縮素的作用：可興奮膽囊平滑肌，使其強(qiáng)烈地收縮，從而排出膽汁。④膽鹽的作用：膽鹽經(jīng)過肝腸循環(huán)后回到肝臟，刺激肝細(xì)胞分泌膽汁。

19、靜脈注射37℃的20％葡萄糖溶液10 ml，計(jì)數(shù)每分鐘尿分泌的滴數(shù)。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，靜脈注射清水后，尿量增加。因?yàn)?，血液被稀釋，血漿晶體滲透壓下降，位于下丘腦的滲透壓感受器可感受這種變化，轉(zhuǎn)而引起抗利尿激素分泌減少，腎遠(yuǎn)曲小管和集合管對水的重吸收減少，于是尿液被稀釋，尿量增加，從而使體內(nèi)多余的水被排除體外。這就是水利尿的產(chǎn)生機(jī)制。

靜脈注射葡萄糖溶液后，由于腎小管內(nèi)的葡萄糖含量超過腎小管重吸收的能力，葡萄糖將不能完全被吸收，小管液滲透壓升高，結(jié)果導(dǎo)致尿量增多。這就是滲透性利尿的產(chǎn)生機(jī)制。20.電刺激家兔迷走神經(jīng)外周端，尿量有何變化？為什么？

電刺激家兔迷走神經(jīng)外周端，其末梢釋放的遞質(zhì)是乙酰膽堿與心肌細(xì)胞膜上的M膽堿受體結(jié)合，改變離子通道的通透性和心肌動(dòng)作電位，使心臟活動(dòng)抑制，出現(xiàn)負(fù)性變化，心輸出量減少，血壓下降，腎小球毛細(xì)血管壓降低，有效濾過壓減小，腎小球?yàn)V過率減少，所以尿生成減少。21．靜脈注射腎上腺素對尿量有何影響？

腎上腺素作用于腎血管平滑肌的腎上腺素能受體，引起腎血管收縮，使腎血流量減少，腎小球的有效濾過壓下降，腎小球?yàn)V過率降低。增加近端小管和髓袢上皮細(xì)胞重吸收Na+、Cl-和水。因此，靜脈注射腎上腺素可使尿量減少。

22．飲大量生理鹽水或清水后，尿量發(fā)生什么變化 為什么

正常人一次飲用1000ml清水后，經(jīng)過0.5h，尿量就開始增加，到第1h末，尿量可達(dá)最高值；隨后尿量減少，2～3h后恢復(fù)到原來水平，此現(xiàn)象稱為水利尿。其原因是：大量飲清水后，使血漿晶體滲透壓下降和血容量增加，引起抗利尿激素分泌減少，以致遠(yuǎn)曲小管和集合管對水的重吸收減少，尿量增加。如果飲用的是生理鹽水，因?yàn)槭堑葷B溶液，僅改變血容量而不會改變血漿晶體滲透壓，抗利尿激素抑制程度輕，故其尿量少于飲清水后的水利尿排出的尿量。

23．大量出汗后尿量會發(fā)生什么變化？為什么？

尿量減少。因?yàn)楹挂簽榈蜐B液體，大量出汗造成機(jī)體水分的丟失大于電解質(zhì)的丟失，使血漿晶體滲透壓升高，對滲透壓感受器刺激增強(qiáng)，抗利尿激素釋放增多，促進(jìn)遠(yuǎn)曲小管和集合管對水的重吸收，尿量減少。24.胰島素和胰高血糖素是如何相互作用來維持機(jī)體血糖穩(wěn)定的？

胰島素通過促進(jìn)組織細(xì)胞攝取葡萄糖，增強(qiáng)糖原合成和減少糖異生，而使血糖降低。胰高血糖素的作用與胰島素相反，通過促進(jìn)糖原分解和增強(qiáng)糖異生，使血糖升高。胰高血糖分泌有利于機(jī)體防止低血糖的發(fā)生。血糖水平是調(diào)節(jié)胰島素和胰高血糖素分泌的最主要因素。血糖水平持續(xù)升高時(shí)，胰島β細(xì)胞合成與釋放胰島素增加，而胰島α-細(xì)胞分泌胰高血糖素減少，使血糖降低；而當(dāng)血糖降低時(shí)，胰島素分泌量迅速降低，而胰高血糖素分泌量大增，使血糖回升。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題

1．請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明纖維蛋白原在凝血中的作用。

取新鮮血液50 ml放入燒杯中，用帶有開叉橡皮管的玻棒攪動(dòng)，以除去其中的纖維蛋白，結(jié)果血液不凝固。說明去除纖維蛋白后血液不發(fā)生凝固，纖維蛋白原在凝血中具有重要的作用。2．請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明加速或延緩血液凝固的方法。

（1）取試管3支，一支做對照，另兩支分別加少量棉花，或涂少許液體石蠟。加1 ml新鮮家兔靜脈血到三支試管內(nèi)，每30 s輕輕地傾斜試管一次，記錄三管的凝血時(shí)間。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，加少量棉花使血液與粗糙面接觸，促進(jìn)凝血因子的激活，進(jìn)而加速凝血。涂少許液體石蠟使血液與光滑面接觸，延緩血液凝固。（2）取試管3支，分別加入新鮮血液1 ml，然后分別置于37℃水浴、室溫和冰水中，比較3管的凝血時(shí)間。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，37℃水浴適當(dāng)增加溫度可加快酶促反應(yīng)而使血凝加速。反之，冰水低溫可延緩血液凝固。（3）取試管3支，一支做對照，另2支分別加入3滴3.8％檸檬酸鈉和5％草酸鉀，然后再向各管加入1 ml新鮮血液，混合后觀察血凝情況。往加入檸檬酸鈉和草酸鉀的兩管分別再加1％CaCl2 1～2滴。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，加入3.8％檸檬酸鈉和5％草酸鉀可與血液中Ca2+結(jié)合成為絡(luò)合物或沉淀的化學(xué)物質(zhì)，減少血液中Ca2+從而起到抗凝作用。再加1％CaCl2 1～2滴后，血液發(fā)生凝固。

（4）取一支試管放肝素8單位，再加入新鮮血液1 ml，搖勻后，觀察其結(jié)果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，肝素能抑制凝血酶的活性而延緩血液凝固。（5）取新鮮血液50 ml放入燒杯中，用帶有開叉橡皮管的玻棒攪動(dòng)，以除去其中的纖維蛋白，觀察血液能否凝固。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，去除纖維蛋白后血液不發(fā)生凝固。3．血清與血漿的主要區(qū)別是什么？

血漿是指經(jīng)過抗凝處理過的血液經(jīng)離心沉淀得到的淡黃色半透明液體，血清是指末經(jīng)抗凝處理的血液發(fā)生凝固，待血凝塊收縮后得到的淡黃色上清液。所以，血漿和血清的主要區(qū)別是：制備血漿的血液經(jīng)過了抗凝處理，未發(fā)生凝血，故血漿中含較齊備的凝血因子；而制備血清的血液，未經(jīng)抗凝處理，發(fā)生了凝血，所以其中的凝血因子因消耗而減少，某些凝血因子甚至耗竭。此外，血清中還含血管內(nèi)皮細(xì)胞和血小板在凝血過程中釋放的活性物質(zhì)。

4．設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證實(shí)心肌有較長的有效不應(yīng)期。

（1）動(dòng)物和設(shè)備的準(zhǔn)備：破壞蛙的腦和脊髓，使之背位固定于蛙板上，剪開胸部皮膚、肌肉和胸骨，暴露心臟。用蛙心夾連接心尖和張力傳感器并調(diào)節(jié)好緊張度，刺激電極接觸心室；刺激參數(shù)選單刺激、波寬1 ms、強(qiáng)度增加達(dá)到閾值。

（2）描記一段正常蛙心收縮曲線。

（3）在心室收縮期給于一個(gè)閾上刺激，記錄其反應(yīng)。

（4）在心室舒張?jiān)缙凇⒅衅?、晚期各給予一次閾上刺激并記錄其反應(yīng)。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在收縮期間不能接受任何刺激而出現(xiàn)新的興奮和收縮。而心肌的舒張期（不包括舒張?jiān)缙冢﹦t處于相對不應(yīng)期，該期中能接受閾上刺激，并出現(xiàn)一個(gè)期前收縮，隨后有一代償性間歇，因此心肌具有相當(dāng)長的有效不應(yīng)期，比整個(gè)收縮期還略長。

5．設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)分析蛙心興奮的正常起搏點(diǎn)及傳導(dǎo)方向，各部分自律性的高低。

（1）動(dòng)物和設(shè)備的準(zhǔn)備：破壞蛙的腦和脊髓，使之背位固定于蛙板上，剪開胸部皮膚、肌肉和胸骨，暴露心臟。用蛙心夾連接心尖。

（2）將蛙心翻向頭端或提起心尖，觀察蛙心各部的收縮順序，并記錄其收縮頻率。

（3）在主動(dòng)脈之下穿線，將心臟翻向頭端，用絲線在心房和靜脈竇之間結(jié)扎，此結(jié)扎稱為斯氏第一結(jié)扎。觀察此時(shí)心房、心室搏動(dòng)均停止，但靜脈竇仍搏動(dòng)。

（4）待心臟恢復(fù)搏動(dòng)后，用絲線在心房和心室之間結(jié)扎，此結(jié)扎稱為斯氏第二結(jié)扎。此時(shí)心室搏動(dòng)停止，但心房和靜脈竇仍搏動(dòng)。

蛙心傳導(dǎo)系統(tǒng)各部分都具有自律性，其中以靜脈竇（哺乳動(dòng)物為竇房結(jié)）的自律性最高，房室交界次之，心室內(nèi)的傳導(dǎo)組織最低。故靜脈竇為蛙心興奮和搏動(dòng)的正常起搏點(diǎn)。靜脈竇的興奮沿心房傳至房室交界，再經(jīng)房室束和浦金野氏纖維傳至心肌。如在不同部位阻斷傳導(dǎo)，則出現(xiàn)正常收縮節(jié)律的障礙。6．設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證實(shí)組織胺和腎上腺素對毛細(xì)血管的影響

取蟾蜍一只，破壞蛙腦和脊髓后將蛙固定在蛙板上，在腹側(cè)部剪一切口，拉出一段小腸，將腸系膜展開，并用大頭針將其固定在蛙板的圓孔周圍。其上滴加任氏液，防止干燥，然后進(jìn)行以下項(xiàng)目：（1）在低倍鏡下觀察小動(dòng)脈、小靜脈和毛細(xì)血管中血流情況，分辨其流速、方向和特征。

（2）滴1滴0.01%腎上腺素于腸系膜血管上，觀察血管口徑及血流速度的變化。發(fā)生變化后，速以任氏液沖洗。

（3）滴1滴0.01%組織胺于腸系膜血管上，觀察血管口徑及血流速度的變化。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，滴加腎上腺素后，血管口徑變小，血流速度加快。腎上腺素對α受體和β受體都有作用，因此腎上腺素對血管的作用則取決于在血管平滑肌上哪種受體占優(yōu)勢，對以α受體占優(yōu)勢的血管，如皮膚和內(nèi)臟的血管等，腎上腺素使之收縮。滴加組織胺后，血管口徑變大，血流速度減慢，因?yàn)榻M胺有強(qiáng)烈的舒血管作用。

7．設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明胰島素和腎上腺素調(diào)控血糖水平的不同作用。

（1）選擇體重約20g的小白鼠3只，禁食24h。皮下注射1～2單位胰島素后觀察小鼠的活動(dòng)，有無不安，呼吸局促，痙攣，甚至休克現(xiàn)象的發(fā)生。

（2）待小白鼠出現(xiàn)低血糖癥狀如驚厥時(shí)，留1只作對照，其余2只分別進(jìn)行腹腔注射(或尾靜脈注射)20％葡萄糖1ml和皮下注射(或尾靜脈注射)0.01％腎上腺素0.1ml，觀察并記錄結(jié)果。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，注射胰島素后因血糖濃度迅速下降動(dòng)物可出現(xiàn)精神不安、抽搐、休克等表現(xiàn)，這些癥狀幾乎全是低血糖對神經(jīng)系統(tǒng)作用的后果。腦組織對低血糖比較敏感，需要量非常多，因此如果血糖濃度降低，會使神經(jīng)組織的正常代謝受到限制，對交感神經(jīng)產(chǎn)生刺激而引起一系列交感神經(jīng)異常興奮的癥狀。

對注射胰島素引起以上癥狀，最有效的辦法就是立即靜脈注射葡萄糖溶液，動(dòng)物因血糖水平即刻升高，低血糖癥狀會立刻糾正。也可皮下注射0.01％腎上腺素，此法糾正低血糖癥狀較慢。機(jī)理是進(jìn)入體內(nèi)的腎上腺素與胰島β細(xì)胞α受體結(jié)合，抑制胰島素的釋放；亦可直接作用于肝臟、肌肉等組織，使糖原異生，糖原和脂肪分解增加，提高血糖水平。

8．設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明腎上腺對動(dòng)物生命活動(dòng)及應(yīng)激反應(yīng)的生理作用。

（1）取實(shí)驗(yàn)鼠20只，稱重并編號，分成4組，每組5只。第一組為對照組（假手術(shù)組），其余為腎上腺摘除組。手術(shù)操作參見第一章實(shí)驗(yàn)手術(shù)方法。

（2）四組動(dòng)物在相同條件下單籠飼養(yǎng)。室溫20～25℃，喂以高熱量和高蛋白飼料，飲水充足。

（3）摘除腎上腺后動(dòng)物水鹽代謝和存活率的影響：手術(shù)后，動(dòng)物分成以下四個(gè)大組，按下表給予相應(yīng)處理一周并將記錄每天情況：

第四篇：生化實(shí)驗(yàn)計(jì)劃

2016-2017學(xué)年第一學(xué)期生物化學(xué)教研室實(shí)驗(yàn)室工作計(jì)劃

一、指導(dǎo)思想

堅(jiān)持以鄧小平理論和“三個(gè)代表”的重要思想及科學(xué)發(fā)展觀為指導(dǎo)，踐行社會主義核心價(jià)值觀,開展教育教學(xué)改革，全力推進(jìn)以高等衛(wèi)生職業(yè)教育為核心的素質(zhì)教育，抓好教育教學(xué)管理工作。

二、工作計(jì)劃

（一）實(shí)驗(yàn)室日常管理計(jì)劃

1、牢固樹立“教學(xué)中心”意識，對實(shí)驗(yàn)室的儀器耗材進(jìn)行精確登記備案，以便為《生物化學(xué)》實(shí)驗(yàn)做好后勤服務(wù)。

2、嚴(yán)格執(zhí)行儀器使用人使用儀器必須登記的規(guī)章制度。

3、嚴(yán)格執(zhí)行及時(shí)更新實(shí)驗(yàn)耗材的規(guī)章制度。

4、嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)安全條例，做好實(shí)驗(yàn)室安全意識宣講，做到實(shí)驗(yàn)室安全零事故。

5、嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室值日制度。

6、嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生制度，保持實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生整潔，給學(xué)生提供一個(gè)良好的實(shí)驗(yàn)環(huán)境。

7、嚴(yán)格執(zhí)行學(xué)院規(guī)定及時(shí)批改實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

8、切實(shí)做好實(shí)驗(yàn)課的示教工作。

（二）實(shí)驗(yàn)室?guī)熧Y隊(duì)伍建設(shè)

1、開展政治學(xué)習(xí)和業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)，特別是學(xué)習(xí)社會主義核心價(jià)值體系和人才培養(yǎng)水平評估標(biāo)準(zhǔn)，提高教師的政治品德和業(yè)務(wù)素養(yǎng)，組織教師開展高等衛(wèi)生職業(yè)教育理念討論，切實(shí)轉(zhuǎn)變教學(xué)理念，改變教學(xué)方式，提高教學(xué)水平。

2、加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師的管理和培養(yǎng)，提高實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)的準(zhǔn)備能力和指導(dǎo)水平。

3、加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師的安全責(zé)任意識。

生物化學(xué)教研室 2016年9月

第五篇：生化實(shí)驗(yàn)心得

生化實(shí)驗(yàn)心得

劉欣怡

201100140057 2011級生物基地班

我很喜歡做實(shí)驗(yàn)，并且樂于鍛煉自己的動(dòng)手能力。

本學(xué)期的生化實(shí)驗(yàn)，雖然只從第二周上到第十五周，但是我收獲了很多并且留下了深刻的印象。對于本次實(shí)驗(yàn)心得的撰寫，我將分為以下3個(gè)部分來進(jìn)行：本學(xué)期實(shí)驗(yàn)回顧、本學(xué)期實(shí)驗(yàn)總結(jié)以及對于生化實(shí)驗(yàn)課的支持和建議。

一、本學(xué)期實(shí)驗(yàn)回顧：

本學(xué)期的生化實(shí)驗(yàn)課上，我們一共進(jìn)行了11次實(shí)驗(yàn)，分別是Folin-酚試劑法測定血清蛋白質(zhì)含量、酵母RNA的提取、醋酸纖維薄膜電泳、紫外吸收法測定RNA含量、聚酰胺薄膜層析、纖維素酶活力的測定（三硝基水楊酸法）、還原糖和總糖含量的測定（三硝基水楊酸法）、酶最適PH的測定、費(fèi)林試劑熱滴定糖、肌糖原酵解作用、微量凱氏定氮法。這些實(shí)驗(yàn)具有代表性，是典型的生化實(shí)驗(yàn)。在這些實(shí)驗(yàn)中，涵蓋了以前無機(jī)實(shí)驗(yàn)和有機(jī)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)操作，還有全新的實(shí)驗(yàn)操作以及實(shí)驗(yàn)儀器。

在這學(xué)期的生化實(shí)驗(yàn)課上，我既復(fù)習(xí)并熟練了大一無機(jī)實(shí)驗(yàn)和有機(jī)實(shí)驗(yàn)的基本實(shí)驗(yàn)操作和儀器（比如移液管、滴定管、蒸餾等），又學(xué)習(xí)并掌握了許多新操作以及新儀器的使用，比如紫外分光光度計(jì)、離心機(jī)、聚酰胺薄膜、熱滴定、凱氏定氮儀器等。最重要的是，我學(xué)習(xí)并掌握了一些重要的實(shí)驗(yàn)方法和原理，比如Folin-酚試劑法、紫外吸收法、三硝基水楊酸法、費(fèi)林試劑與糖的反應(yīng)、微量凱氏定氮法等。掌握了這些實(shí)驗(yàn)原理以及方法，有利于我們在以后中靈活運(yùn)用設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。

總體來說，本學(xué)期生化實(shí)驗(yàn)教會了我測定蛋白質(zhì)、糖、核酸的方法，電泳和層析分離物質(zhì)、如何測定酶的相關(guān)特性、驗(yàn)證肌糖原酵解作用、如何提取RNA。

二、本學(xué)期實(shí)驗(yàn)總結(jié)

通過這學(xué)期的生化實(shí)驗(yàn)，我的實(shí)驗(yàn)技能的到了大大地提升，同時(shí)，實(shí)驗(yàn)中的細(xì)節(jié)、注意事項(xiàng)以及老師拓展的知識令我獲益匪淺，也讓我深深地認(rèn)識到科學(xué)是非常嚴(yán)謹(jǐn)?shù)?，尤其是在做?shí)驗(yàn)的時(shí)候，要全神貫注，井井有條，否則很容易出差錯(cuò)，而這個(gè)小小的差錯(cuò)很有可能就使實(shí)驗(yàn)前功盡棄，既耽誤時(shí)間又浪費(fèi)試劑。

回顧這一學(xué)期我的實(shí)驗(yàn)課程，每一次我都能完成實(shí)驗(yàn)任務(wù)。大多數(shù)都比較順利，小組內(nèi)兩人也大多配合默契，但是有一些美中不足的地方。有的一些實(shí)驗(yàn)比較麻煩，實(shí)驗(yàn)步驟較為繁瑣，我們在做實(shí)驗(yàn)時(shí)偶爾會產(chǎn)生不耐煩的思想，只想著抓緊結(jié)束，但是在這種時(shí)候往往更容易出差錯(cuò)。我有兩次記憶很深，一次是在測定纖維素酶活力（三硝基水楊酸法）時(shí)，沒能及時(shí)貼上空白標(biāo)簽，導(dǎo)致又重新制作空白，拜拜浪費(fèi)了時(shí)間；另一次是在鑒定肌糖原酵解作用時(shí)，實(shí)驗(yàn)步驟較為繁瑣，并且老師對黑板上的簡易實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行了多個(gè)補(bǔ)充，其中一點(diǎn)是要在水浴后取出大塊肉再加下一步驟的試劑，結(jié)果我們當(dāng)時(shí)產(chǎn)生了不耐煩情緒，就直接加了試劑而沒有取出大肉塊。對于這兩次情況，雖然對最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果沒有產(chǎn)生什么明顯的影響，但是，它實(shí)實(shí)在在體現(xiàn)了自己的操作并不是很嚴(yán)謹(jǐn)，需要注意和努力。

在本學(xué)期生化實(shí)驗(yàn)報(bào)告的撰寫中，我重點(diǎn)注意老師強(qiáng)調(diào)的實(shí)驗(yàn)分析部分。上課認(rèn)真聽老師的實(shí)驗(yàn)講解并認(rèn)真記錄有關(guān)的可能實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析。在課后撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告時(shí)對這些點(diǎn)重點(diǎn)分析和總結(jié)，有時(shí)甚至是查找相關(guān)資料然后再進(jìn)行分析。通過這一些列的做法，我的實(shí)驗(yàn)分析能力得到了提升，我能在討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果或者實(shí)驗(yàn)操作時(shí)找到更好、更精確的切入點(diǎn)，能得出更好的結(jié)論。

同時(shí)，本學(xué)期老師將我們分為兩人一組來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，兩人之間的磨合和合作是一種鍛煉，對今后很有幫助。

三、對于生化實(shí)驗(yàn)課的支持和建議

我非常感謝老師在這一學(xué)期中的辛勤勞動(dòng)。老師在課前為我們做好實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備很不容易，配試劑等都很辛苦。謝謝老師您了。

我覺得咱們的額生化實(shí)驗(yàn)課設(shè)計(jì)的挺好的。兩人一組可以分工合作，加快實(shí)驗(yàn)效率，同時(shí)又避免了因?yàn)橥M同學(xué)人數(shù)多而有的同學(xué)無事可做的現(xiàn)象。老師在課上講解實(shí)驗(yàn)時(shí)，有關(guān)實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)可能結(jié)果、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)的分析、講解和拓展令我獲益匪淺，有利于培養(yǎng)我的實(shí)驗(yàn)思維并且拓寬了知識視野。

建議方面，我想和老師提的一點(diǎn)建議其實(shí)是有關(guān)實(shí)驗(yàn)器材方面的。對于老師所提到的有關(guān)節(jié)約試劑、減少材料浪費(fèi)等事項(xiàng)我非常贊同，并且大多數(shù)時(shí)候器材和試劑都很全（這和大一的無機(jī)實(shí)驗(yàn)和有機(jī)實(shí)驗(yàn)相比條件進(jìn)步了很多），只是希望咱們的一些其他實(shí)驗(yàn)儀器能更全面一點(diǎn)，舉一個(gè)例子，可以使用的紫外分光光度計(jì)只有3臺，有些過少，實(shí)驗(yàn)中要等待的時(shí)間較長，并且有的儀器還不是很準(zhǔn)確，對于我們的實(shí)驗(yàn)造成了一定的困擾，希望老師能將實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有些問題的儀器同一修一修。

總之，我很喜歡咱們的生化實(shí)驗(yàn)課，并且從中學(xué)到了很多知識、實(shí)驗(yàn)方法和應(yīng)用，鍛煉了實(shí)驗(yàn)操作，形成了實(shí)驗(yàn)要耐心、細(xì)心、恒心的觀念。同時(shí)還培養(yǎng)了團(tuán)隊(duì)意識和合作觀念。我獲益匪淺。