第一篇：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在腦損傷中的臨床應(yīng)用

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在腦損傷中的臨床應(yīng)用

【摘要】 目的 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是存在于骨髓中區(qū)別于造血干細(xì)胞的一種多潛能干細(xì)胞，可作為多種疾病細(xì)胞替代治療和基因治療的載體。近年研究發(fā)現(xiàn)其可在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)存活并能分化為神經(jīng)樣細(xì)胞，在體外也可通過(guò)定向誘導(dǎo)向神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)化，提示骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞有可能取代神經(jīng)干細(xì)胞用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的細(xì)胞治療和損傷的修復(fù)。由于其取材容易，能在體外迅速培養(yǎng)擴(kuò)增，通過(guò)自體移植可避開(kāi)免疫排斥反應(yīng)，且能以多種途徑包括靜脈注射、腦內(nèi)不同部位進(jìn)行細(xì)胞移植，所以骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)中的臨床應(yīng)用前景廣闊。關(guān)鍵詞 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 中樞神經(jīng)系統(tǒng) 誘導(dǎo)分化 細(xì)胞移植

長(zhǎng)期以來(lái)中樞神經(jīng)系統(tǒng)（Central Nervous System，CNS）的損傷與再生一直是困擾人類(lèi)健康的難題，也是科學(xué)家們致力于研究的焦點(diǎn)。曾經(jīng)認(rèn)為人腦內(nèi)的神經(jīng)細(xì)胞缺乏再生能力，如果遇到損傷，受損的神經(jīng)細(xì)胞將會(huì)永遠(yuǎn)喪失，由膠質(zhì)細(xì)胞充填。19世紀(jì)末至20世紀(jì)初，人們逐漸發(fā)現(xiàn)低等脊椎動(dòng)物和兩棲類(lèi)的中樞和外周神經(jīng)損傷后都能再生，而在哺乳動(dòng)物中，斷定只有外周神經(jīng)系統(tǒng)（Peripheral nervous sysˉtem，PNS）損傷后可以再生，CNS則沒(méi)有再生能力。然而隨著近十余年對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞研究的逐步深入，這一傳統(tǒng)認(rèn)識(shí)現(xiàn)已被徹底打破。

神經(jīng)干細(xì)胞（Nerual stem cells，NSCs）的發(fā)現(xiàn)是在研究造血發(fā)生和神經(jīng)發(fā)育的基礎(chǔ)上開(kāi)始的，于20世紀(jì)90年代初，Reynolds等 ［1］ 從成年小鼠腦紋狀體分離出能在體外不斷分裂增殖、具有多種分化潛能的細(xì)胞群，參照造血系統(tǒng)干細(xì)胞的性質(zhì)，正式提出了NSCs的概念，它是一類(lèi)多能干細(xì)胞，能長(zhǎng)期自我更新（復(fù)制），并具有分化成神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞的多潛能特性。Gage ［2］ 于2000年在《Science》上發(fā)表文章指出，神經(jīng)干細(xì)胞通常具有:來(lái)源于神經(jīng)系統(tǒng)能產(chǎn)生神經(jīng)組織;有自我更新能力;能通過(guò)不對(duì)稱細(xì)胞分裂產(chǎn)生除自我子代（仍為干細(xì)胞）以外的其他類(lèi)型的細(xì)胞（前體細(xì)胞））。通過(guò)大量試驗(yàn)研究，目有NSCs的生物學(xué)特性可概括為:（1）能產(chǎn)生神經(jīng)組織或起源于神經(jīng)系統(tǒng);（2）有增殖能力;（3）在整個(gè)生命過(guò)程中能自我維持、自我更新;（4）能通過(guò)擴(kuò)增祖細(xì)胞而產(chǎn)生大量的后代;（5）具有向多細(xì)胞系分化的能力;

（6）損傷或疾病能刺激干細(xì)胞分化。以往對(duì)于神經(jīng)系統(tǒng)疾病的移植治療，主要用胚胎神經(jīng)干細(xì)胞治療Parkinson病、缺血性疾病等，其不足包括組織來(lái)源缺乏、倫理學(xué)問(wèn)題及免疫排斥等多方面問(wèn)題。為避開(kāi)胚胎來(lái)源NSCs的局限性，近年成人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞的分化及在神經(jīng)修復(fù)中的作用，因其獨(dú)有的優(yōu)勢(shì)，已成為NSCs的研究熱點(diǎn)。歷史回顧及研究意義

130年前，德國(guó)病理學(xué)家Cohnheim在研究傷口修復(fù)時(shí)，就提出骨髓中可能存在非造血組織的干細(xì)胞。直到20世紀(jì)70年代中期，F(xiàn)riedenstein等才首次報(bào)道，骨髓標(biāo)本中小部分貼附細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中能夠分化形成類(lèi)似骨或軟骨的集落 ［3］。后來(lái)的研究表明Friedenstein粗糙分離所得到的細(xì)胞是多能的，可分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和成肌細(xì)胞。因此，骨髓基

質(zhì)中的這種多能細(xì)胞，由于能夠分化成為多種中胚層來(lái)源的間質(zhì)細(xì)胞，而被稱為間充質(zhì)干細(xì)胞（Mesenchymal Stem Cell，MSCs）。1998年Azizi等 ［4］ 將人類(lèi)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞植入鼠的紋狀體，發(fā)現(xiàn)大約20%的植入細(xì)胞發(fā)生遷移。移植細(xì)胞的遷移路徑與已知的神經(jīng)干細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞的遷移路徑相同，即從腦室下帶沿著白質(zhì)束遷移到皮層、紋狀體、前腦和小腦等部位，未發(fā)現(xiàn)炎癥和免疫反應(yīng)，從而證明MSCs可用作自體移植治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的細(xì)胞和基因治療的載體。2000年Woodbury等的研究結(jié)果顯示成年鼠和人的BMSCs能夠分化為神經(jīng)元 ［5］。人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（hBMSCs）能夠分化為神經(jīng)元樣和神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞，其取材容易，體外可迅速培養(yǎng)、擴(kuò)增，彌補(bǔ)了神經(jīng)干細(xì)胞的諸多缺點(diǎn)，自體MSCs移植又避免了移植后的免疫排斥反應(yīng)，因此BMSCs作為神經(jīng)細(xì)胞的另一來(lái)源，用于神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)的細(xì)胞治療，具有明顯的臨床應(yīng)用價(jià)值。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的研究方法

2.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離 Friedenstein首先通過(guò)貼壁培養(yǎng)的方法分離得到MSCs，他們將全骨髓組織用塑料培養(yǎng)皿培養(yǎng)4h后棄末貼壁細(xì)胞，貼壁細(xì)胞外觀呈多樣性，經(jīng)過(guò)2～4天的休眠期后迅速增殖，培養(yǎng)數(shù)代后形態(tài)趨于一致，呈紡錘形。目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)室分離MSCs是基于此方法。新鮮骨髓內(nèi)，造血干細(xì)胞所占比例較大，造血干細(xì)胞較難培養(yǎng)擴(kuò)增，而非造血干細(xì)胞則易于分離擴(kuò)增。原代培養(yǎng)2～3周后，大多數(shù)造血干細(xì)胞死亡，剩下的即為MSCs。Colter ［6］ 報(bào)道，MSCs在原代培養(yǎng)以低密度種植可形成單細(xì)胞克隆，并增殖迅速。細(xì)胞經(jīng)過(guò)5天遲滯期，5天對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后，進(jìn)入靜止期。高密度種植生長(zhǎng)緩慢的原因與細(xì)胞間相互接觸抑制或細(xì)胞分泌的因子作用有關(guān)。

2.2 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化 MSCs在體外培養(yǎng)時(shí)，保持干細(xì)胞的特性自身不斷地增殖，在不同誘導(dǎo)條件下能夠向不同譜系分化。體外誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞分化的試劑有:維甲酸（RA）、生長(zhǎng)因子、抗氧化劑、脫甲基試劑、可增加細(xì)胞內(nèi)cAMP的混合物和生理學(xué)上的神經(jīng)誘導(dǎo)劑及頭蛋白（noggin）等。已有許多實(shí)驗(yàn)室在體外條件下利用堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）、表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、維甲酸（RA）、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）、睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（CNTF）、甲狀腺素3（T 3）、膠質(zhì)細(xì)胞系源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（GDNF）等作為增殖及分化誘導(dǎo)因子，對(duì)MSCs進(jìn)行增殖培養(yǎng)，分化誘導(dǎo)，并通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)法進(jìn)行細(xì)胞性質(zhì)鑒定。結(jié)果證實(shí)MSCs在一定的培養(yǎng)條件下可以向神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)前體細(xì)胞及其終末細(xì)胞方向分化。將進(jìn)行標(biāo)記的MSCs及誘導(dǎo)后的神經(jīng)元、星型膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞移植入腦損傷后功能缺失的動(dòng)物模型上，已取得明顯的治療效果。

2.3 干細(xì)胞的鑒定 骨髓間質(zhì)來(lái)源的MSCs，形態(tài)成纖維樣，可聚集成均勻的集落，流式細(xì)胞術(shù)分析表明分離的細(xì)胞群體表型單一，細(xì)胞表面蛋白如SH2、SH3、CD29、CD44、CD71、CD90、CD106、CD120a、CD124等呈陽(yáng)性，但CD14、CD34和CD45造血譜系標(biāo)記則呈陰性。體外由BMSC分化成的神經(jīng)細(xì)胞很少表現(xiàn)出典型的成熟神經(jīng)元或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)，而應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)可更準(zhǔn)確、方便地鑒定各類(lèi)培養(yǎng)細(xì)胞?？捎糜阼b定神經(jīng)干細(xì)胞的特異性分子標(biāo)志物有巢蛋白（nestin）、波形蛋白（vimentin）和musashil蛋白;鑒定神經(jīng)元的標(biāo)志物有神經(jīng)元特異性烯醇

化酶（NSE）、神經(jīng)特異性核蛋白（NeuN）、中間神經(jīng)絲（NF-m）、tau蛋白和一些微管蛋白（tubulin-β、MAP-

2、TuJ-1）;常用于鑒定星形膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志物是膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）;鑒定少突膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志物有半乳糖苷酶（GalC）和碳酸苷酶Ⅱ（CAⅡ）。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究現(xiàn)狀

3.1 BMSCs移植 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有自我更新和多向分化增殖潛能，已有研究表明，骨髓細(xì)胞是某些腦細(xì)胞如小膠質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的前體細(xì)胞 ［7］。Chopp等 ［8］ 多次將BMSCs應(yīng)用于腦外傷或腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ停l(fā)現(xiàn)hBMSCs約1%分化為神經(jīng)元，5%～8%分化為神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，并明顯促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)。Schwarz等 ［9］ 應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄病毒攜帶酪氨酸羥化酶和鳥(niǎo)苷三磷酸水解酶Ⅰ，轉(zhuǎn)染給大鼠和人骨髓間充質(zhì)細(xì)胞，并將細(xì)胞移植到大鼠帕金森模型的紋狀體，觀察到細(xì)胞在移植的腦組織中存活至少87天，外源性基因能夠表達(dá)的時(shí)間達(dá)9天。Chen ［10］ 將BMSCs和BDˉNF（腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子）共同植入大鼠缺血模型的腦缺血邊緣，在包括運(yùn)動(dòng)、感覺(jué)、反射和旋轉(zhuǎn)的神經(jīng)功能評(píng)分中，接受移植的小鼠功能明顯改善。Chopp ［11］ 將MSCs植入脊髓損傷模型1周后的大鼠，發(fā)現(xiàn)在脊髓中有移植細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)蛋白標(biāo)志，并有功能恢復(fù)。Mahmood ［7，12］ 將MSCs或全骨髓直接或經(jīng)靜脈途徑植入大鼠創(chuàng)傷模型，14天或28天后神經(jīng)功能明顯改善，組織學(xué)檢查移植細(xì)胞有小部分表達(dá)NeuN、GFAP。

上述用于臨床前的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，MSCs移植無(wú)論是局部或靜脈途徑都能產(chǎn)生積極的治療作用。近年來(lái)，人們不斷地探索利用hBMSCs進(jìn)行細(xì)胞治療和基因治療。只需通過(guò)局部麻醉，就可較容易地得到少量骨髓抽取物，而不影響人體的健康;而且將分離的hBMSCs在體外培養(yǎng)擴(kuò)增和導(dǎo)入外源基因也相對(duì)方便。因此，hBMSCs在將來(lái)實(shí)際應(yīng)用時(shí)就具有潛在的優(yōu)勢(shì)。首先，可以用體外培養(yǎng)擴(kuò)增的MSCs，作為細(xì)胞移植的種子細(xì)胞，修復(fù)損傷的腦組織。前述的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中已提及用體外培養(yǎng)擴(kuò)增的MSCs來(lái)修復(fù)各種損傷，并且具有良好的效果。MSCs在體外培養(yǎng)過(guò)程中，可以保持未分化表型不斷增殖，達(dá)到所需的數(shù)目，然后經(jīng)誘導(dǎo)可定向分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞等;而已分化的細(xì)胞來(lái)源有限，在體外培養(yǎng)時(shí)，增殖速度較慢，而且還存在去分化的問(wèn)題。另外，MSCs可以很方便地通過(guò)抽取骨髓來(lái)得到，而不必通過(guò)手術(shù)從病人身上得到自身成熟細(xì)胞，避免了對(duì)病人 造成不必要的二次創(chuàng)傷。其次，可通過(guò)轉(zhuǎn)基因的方法，將外源基因?qū)隡SCs。可以將利于定向分化的生長(zhǎng)因子基因轉(zhuǎn)入MSCs，促進(jìn)定向分化，加快體內(nèi)神經(jīng)組織修復(fù)的進(jìn)程。然而在MSCs安全有效地用于臨床之前，顯然需要解決大量有關(guān)的MSCs的基礎(chǔ)問(wèn)題，比如組織相容性、優(yōu)化定向分化

第二篇：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化探討

龍?jiān)雌诳W(wǎng) http://.cn

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化探討

作者：陳金國(guó) 徐國(guó)興 白 月 徐 巍 郭 健

來(lái)源：《海峽科學(xué)》2010年第05期

[摘要] 目的：探討體外培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(rat mesenchymal stem cells，rMSCs)誘導(dǎo)分化成視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞的能力。方法：用貼壁篩選法分離、培養(yǎng)SD大鼠骨髓MSC細(xì)胞，經(jīng)流式細(xì)胞儀鑒定后，利用光感受器細(xì)胞培養(yǎng)上清液誘導(dǎo)MSC細(xì)胞14 d。用免疫細(xì)胞化學(xué)染色和Rt-PCR觀察誘導(dǎo)后的細(xì)胞是否表達(dá)視紫紅質(zhì)（Rhodopsin）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)，膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）。結(jié)果：誘導(dǎo)細(xì)胞14d后即可見(jiàn)有神經(jīng)元樣細(xì)胞出現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組MSC的Rhodopsin表達(dá)率為35.1%±6.2 %，而對(duì)照組中無(wú)Rhodopsin陽(yáng)性的細(xì)胞, 實(shí)驗(yàn)組MSC的NSE表達(dá)率為33.6%±4.0 %，對(duì)照組為10.6%±5.0%, 實(shí)驗(yàn)組MSC的GFAP表達(dá)率為9.6%±1.5 %，對(duì)照組為13.7%±3.0 %。RT-PCR鑒定結(jié)果分析示實(shí)驗(yàn)組MSC的GFAP、NSE、Rhodopsin mRNA均有表達(dá)，而對(duì)照組的只表達(dá)GFAP和NSE，未見(jiàn)Rhodopsin條帶。結(jié)論：體外培養(yǎng)的rMSC，經(jīng)過(guò)視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞培養(yǎng)上清液導(dǎo)，可以分化為視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞。

[關(guān)鍵詞] 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 光感受器細(xì)胞 誘導(dǎo)分化

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell，MSC)，是一群具有多向分化潛能的均質(zhì)性成體干細(xì)胞，它具有兩項(xiàng)干細(xì)胞最顯著的生物學(xué)特性：自我更新(self-renewa1)能力及多向分化潛能。1968年, Friedenstein[1]等學(xué)者首先報(bào)告骨髓中存在一種細(xì)胞具有高度的自我更新能力和多向分化潛能,他們認(rèn)為這種細(xì)胞可能是間充質(zhì)細(xì)胞的前體。隨著研究的發(fā)現(xiàn)，MSC具有向中內(nèi)外胚層組織細(xì)胞分化的能力 ,可以在體外被誘導(dǎo)分化為肌肉細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞、上皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等[2, 3]。近年來(lái)，BMSCs向神經(jīng)元細(xì)胞的分化的研究成為了研究的熱點(diǎn)?？衫每寡趸瘎?、生長(zhǎng)因子、維甲酸、共培養(yǎng)等將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成神經(jīng)樣細(xì)胞[4-6]。本文探索了利用視網(wǎng)膜光感受器培養(yǎng)上清液體外誘導(dǎo)BMSCs分化為視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞的可行性。材料和方法

1.1 材料

清潔級(jí)健康Sprague-Dawley（SD）大鼠20只40眼，重量100~125g，購(gòu)于上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司； DMEM培養(yǎng)基(美國(guó)Hyclone公司)，Neurobasal培養(yǎng)基（美國(guó)

Invitrogen公司），B27(美國(guó)Invitrogen公司)，胎牛血清（美國(guó)Hyclone公司），0.25％胰蛋白酶（美國(guó)Hyclone公司），木瓜蛋白酶（美國(guó)sigma公司），多聚賴酸（美國(guó)sigma公司），小鼠抗大鼠單CD34-FITC、CD44-PE和CD90-PE，以及相應(yīng)同型對(duì)照單抗小鼠IgG1-

FITC, IgG1-PE和IgG2a –PE（Beckman-Coulter公司），神經(jīng)元特異性標(biāo)志小鼠抗大鼠醇化酶（美國(guó) Fisher Scientific公司），光感受器特異性標(biāo)志小鼠抗大鼠單克隆抗體視紫質(zhì)(Rhodopsin)（RET-P1，美國(guó)Millipore公司），星形膠質(zhì)細(xì)胞特異性標(biāo)志小鼠抗大鼠單克隆抗體神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白(GFAP)（美國(guó) Fisher Scientific公司），DAB顯色試劑盒（北京中杉金橋公司），總抽提試劑盒（上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司），THERMO FORMA 3111 CO2培養(yǎng)箱（美國(guó)），OLYMPUS 1×70熒光倒置式相差顯微鏡（日本），OLYMPUS BH-2型光學(xué)顯微鏡（日本），Beckman-Coulter Epics XL 流式細(xì)胞儀（美國(guó)），臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（上海），Gene Amp 9700型PCR 擴(kuò)增儀（美國(guó)），Bio-Rad凝膠成像分析系統(tǒng)（Gel DOC2000）（美國(guó)），AIR-TECH BCM-1000A型生物潔凈工作臺(tái)（蘇州）。

1.2 方法

1.2.1骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)和鑒定

取清潔級(jí)SD大鼠，4mL／kg水合氯醛(100g/L)進(jìn)行腹腔麻醉。碘伏消毒，無(wú)菌條件下取出大鼠的雙側(cè)脛骨和股骨，分別剪斷股骨干和脛骨中間及兩端的干骺剪斷，用含有肝素的培養(yǎng)液10mL進(jìn)行反復(fù)沖洗骨髓腔，沖洗液經(jīng)200目不銹鋼標(biāo)準(zhǔn)篩網(wǎng)過(guò)濾組織塊以及已凝血塊后，進(jìn)行離心后用20%FBS的DMEM培養(yǎng)基制成單細(xì)胞懸液接種于25cm2 培養(yǎng)瓶中，24h后首次換液去除未貼壁細(xì)胞，以后每2d換液一次，換液前PBS洗去部分未貼壁細(xì)胞，當(dāng)70％～80％細(xì)胞達(dá)到融合時(shí)用0.25%胰蛋自酶消化傳代，進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)。用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面抗原CD34、CD44和CD90的表達(dá)[7]。

1.2.2視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞的分離培養(yǎng)和鑒定

在暗環(huán)境下無(wú)菌取下清潔級(jí)SD大鼠的眼球，游離出完整的視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層。利用木瓜蛋白酶進(jìn)行消化分離出光感受器細(xì)胞，用Neurobasal培養(yǎng)基A 1mL（加入1:50的B27和

0.5mM L-glutamine）進(jìn)行避光培養(yǎng)，兩天換液一次，將視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞培養(yǎng)換液的上清液收集于干凈玻璃瓶中，通過(guò)0.22um過(guò)濾篩過(guò)濾后按2:3比例與DMEM培養(yǎng)液混合后備用。分別把消化前和消化后的視網(wǎng)膜片進(jìn)行HE染色,在顯微鏡下觀察，同時(shí)對(duì)分離的光感受器細(xì)胞進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定。

1.2.3對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)以及鑒定

將3代的rMSCs接種在6孔板中。分為2個(gè)對(duì)照組，4個(gè)實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組加入光感受器細(xì)胞上清液與10%FBS的DMEM培養(yǎng)基（2:3）進(jìn)行誘導(dǎo)，對(duì)照組用Neurobasal培養(yǎng)基A與10%FBS的DMEM培養(yǎng)基（2:3）進(jìn)行培養(yǎng)，在倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)及分化情況，誘導(dǎo)后14天，行免疫細(xì)胞化學(xué)和Rt-PCR鑒定，免疫細(xì)胞化學(xué)：PBS洗滌3次，多聚甲醛固定，0.2％Triton-X作用10 min，過(guò)氧化酶阻斷，非免疫動(dòng)物血清孵育 10 min，加Rhodopsin(1:100), NSE(1:200),GFAP(1:100)抗

體，4℃過(guò)夜，加入生物素標(biāo)記的第二抗體，鏈霉菌抗生物素蛋白－過(guò)氧化物酶溶液，DAB溶液顯色，蘇木素復(fù)染，中性樹(shù)膠封固，在顯微鏡下觀察。RT—PCR法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照當(dāng)中的GFAP，NSE，Rhodopsin的表達(dá)。Rhodopsin引物上游引物

ATGTTCGTGGTCCACTTCA3’，下游引物5’ CGTTGTCCTCA

GCCGATG 3’，擴(kuò)增長(zhǎng)度為107bp；NSE引物上游引物：5’ CTGTGGTGGAGCAGGAGA 3’，下游引物5’ GGGAGATAGC

GGTGTAAC 3’，擴(kuò)增長(zhǎng)度為156bp；GFAP引物上游引物：

5’TAGGAGTGGTAGGGCAGACTTG3’，下游引物5’GCAACC

AGGAATAGACCTTCACAA 3’，擴(kuò)增長(zhǎng)度為482bp；內(nèi)參Rat GAPDH 為

5’CAGTGCCAGCCTCGTCTC 3’，BC050110為5’ AGGGGCCATCCACAGTCTTC 3’，擴(kuò)增長(zhǎng)度為595bp。參照TRIZOL試劑說(shuō)明書(shū)對(duì)誘導(dǎo)的MSC分別提取總RNA，進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄、PCR擴(kuò)增，將 PCR產(chǎn)物電泳后進(jìn)行圖像分析儀采集圖像。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包(statistical package for the social science)分析，采用t檢驗(yàn)。結(jié)果

2.1骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的鑒定

培養(yǎng)的大鼠的BMSCs接種后24小時(shí)開(kāi)始貼壁，前3天細(xì)胞增殖慢，數(shù)量比較少，第3開(kāi)始細(xì)胞的增長(zhǎng)速度明顯增加，7天后就達(dá)到融合狀態(tài)，呈現(xiàn)漩渦狀、菊花狀。第三代時(shí)，細(xì)胞仍呈梭形，生長(zhǎng)旺盛。BMSCs標(biāo)志鑒定結(jié)果表明，培養(yǎng)的第三代BMSCs干細(xì)胞表面標(biāo)志CD90陽(yáng)性（CD90+/CD34-：92%），基質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志CD44陽(yáng)性（CD44+/CD34-：93%）（見(jiàn)圖1）。

圖1 大鼠MSC流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果（A: CD90+/CD34-：92%;B: CD44+/CD34-：93%)

2.2 視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞的鑒定

取下來(lái)的視網(wǎng)膜在消化前后分別進(jìn)行HE染色，消化前可以很清楚地觀察到九層細(xì)胞，說(shuō)明取下來(lái)的是完整的視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層，不含有色素上皮，消化后的視網(wǎng)膜片，光感受器層的細(xì)胞變少，其它層細(xì)胞完整，光感受器細(xì)胞的免疫細(xì)胞化學(xué)示，光感受器細(xì)胞的特異標(biāo)志物視紫紅質(zhì)的表達(dá)率達(dá)95%以上。

2.3 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的誘導(dǎo)

實(shí)驗(yàn)組BMSCs誘導(dǎo)后的第4天細(xì)胞形態(tài)開(kāi)始變化，可見(jiàn)小的突起。隨后細(xì)胞便圓，突起增長(zhǎng)，出現(xiàn)少量神經(jīng)樣細(xì)胞的形態(tài)，到14天最為明顯，出現(xiàn)一、二級(jí)分支，相互之間連接呈網(wǎng)狀。對(duì)照組也有少量的細(xì)胞呈神經(jīng)樣的形態(tài)。誘導(dǎo)后的神經(jīng)元樣細(xì)胞GFAP，NSE，Rhodopsin呈強(qiáng)陽(yáng)性。非神經(jīng)元樣細(xì)胞呈多邊形或梭形，上述抗體染色呈弱陽(yáng)性。陰性對(duì)照未見(jiàn)染色。

免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定，共培養(yǎng)2周后，陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果顯示： rMSC的Rhodopsin表達(dá)率實(shí)驗(yàn)組為35.1%±6.2 %（圖2A）,而對(duì)照組中無(wú)Rhodopsin陽(yáng)性的細(xì)胞（圖2B），rMSC的NSE表達(dá)率實(shí)驗(yàn)組為33.6%±4.0 %（圖3A），對(duì)照組為10.6%±5.0%（圖3B）, rMSC的GFAP實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)率為9.6%±1.5 %（圖4A），對(duì)照組為：13.7%±3.0 %（圖4B）； 對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行兩樣本的t檢驗(yàn)NSE：F =0.09，方差齊，P < 0.001，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，GFAP：F =1.726，方差齊，P ＞0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

A:實(shí)驗(yàn)組大量表達(dá)Rhodopsin(×100)；B:對(duì)照組未表達(dá)Rhodopsin(×100)

圖2 免疫細(xì)胞化學(xué)rMSCs表達(dá)Rhodopsin結(jié)果

A:實(shí)驗(yàn)組大量表達(dá)NSE(×100)；B:對(duì)照組少量表達(dá)NSE(×100)

圖3 免疫細(xì)胞化學(xué)rMSCs表達(dá)NSE結(jié)果

A:實(shí)驗(yàn)組表達(dá)有GFAP(×100)；B：對(duì)照組表達(dá)有GFAP(×100)

圖4 免疫細(xì)胞化學(xué)rMSCs表達(dá)GFAP結(jié)果

RT-PCR鑒定結(jié)果分析顯示，實(shí)驗(yàn)組MSC的GFAP、NSE、Rhodopsin均有表達(dá)，其中GFAP表達(dá)比較弱；而對(duì)照組的只表達(dá)GFAP和NSE，且均較弱，未見(jiàn)Rhodopsin條帶(圖5)。A:為實(shí)驗(yàn)組，GFAP、NSE、Rhodopsin均有表達(dá)；B:為對(duì)照組，只表達(dá)GFAP和NSE。圖5 Rt-PCR檢測(cè)GFAP、NSE、Rhodopsin討論

本實(shí)驗(yàn)?zāi)M視網(wǎng)膜體內(nèi)發(fā)育的微環(huán)境誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成為視網(wǎng)膜細(xì)胞，利視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞培養(yǎng)上清液對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行向視網(wǎng)膜樣細(xì)胞誘導(dǎo)。本實(shí)驗(yàn)關(guān)于視紫紅質(zhì)的檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組表達(dá)率高達(dá)35.1 %±6.2 %，對(duì)照組沒(méi)有表達(dá)，說(shuō)明其光感受器條件培養(yǎng)基能使MSC向光感受器細(xì)胞方向轉(zhuǎn)化。從而驗(yàn)證了大鼠MSC確實(shí)可以在體外被誘導(dǎo)為表達(dá)視紫紅質(zhì)的光感受器樣細(xì)胞，Tomita M[8]研究表明不管是利用BDNF, NGF, and bFGF或與視網(wǎng)膜片共培養(yǎng)，均未發(fā)現(xiàn)表達(dá)Rhodopsin的證據(jù)。Anthony等[5]對(duì)BMSCs向視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞誘導(dǎo)分化進(jìn)行了體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)。利用維甲酸、?；撬岷虴GF體外將小鼠 BMSCs成功誘導(dǎo)為視網(wǎng)膜光

感受器樣細(xì)胞，誘導(dǎo)后的細(xì)胞可以表達(dá)視網(wǎng)膜光感受器細(xì)胞特異性標(biāo)志物：視紫紅質(zhì)、視蛋白和恢復(fù)蛋白，最近國(guó)內(nèi)學(xué)者單純用EGF也可以誘導(dǎo)rMSC表達(dá)Rhodopsin[9]。本實(shí)驗(yàn)當(dāng)中NSE表達(dá)率也明顯高于對(duì)照組，而GFAP，兩組表達(dá)并無(wú)差異，說(shuō)明，光感受器條件培養(yǎng)基促進(jìn)rMSC向神經(jīng)元細(xì)胞方向分化，而對(duì)于膠質(zhì)細(xì)胞方向分化并無(wú)誘導(dǎo)作用。本實(shí)驗(yàn)的對(duì)照并未加誘劑的rMSC也能表達(dá)神經(jīng)元特異性標(biāo)志，Tomita M[8] 研究說(shuō)明沒(méi)有生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的MSC沒(méi)有向神經(jīng)方向分的證據(jù)，強(qiáng)調(diào)生長(zhǎng)因子在神經(jīng)分化中的重要地位，但是也有許多學(xué)者提出了在未誘的條件下仍發(fā)現(xiàn)神經(jīng)特異性標(biāo)志物的表達(dá)，Tondreau T等[10]發(fā)現(xiàn)未誘的的MSC也可以表達(dá)神經(jīng)特異標(biāo)記物，如Nestin和β微管蛋白Ⅲ，酪氨酸羥化酶等。Deng J[11]研究中也證實(shí)，體外培養(yǎng)大鼠的MSC具有自發(fā)表達(dá)早期的神經(jīng)標(biāo)記物(如Nestin和β微管蛋白Ⅲ)，也有細(xì)胞表達(dá)成熟神經(jīng)細(xì)胞的標(biāo)記物，如神經(jīng)微絲M（FNM），這些跟本實(shí)驗(yàn)對(duì)照組仍能誘導(dǎo)的MSC能表達(dá)NSE相一致。

我們的實(shí)驗(yàn)利用光感受器細(xì)胞上清液模擬視網(wǎng)膜體內(nèi)發(fā)育的微環(huán)境誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成為視網(wǎng)膜光感受器樣細(xì)胞，視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)上清液可能在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的存活與分化方面起重要作用。盡管BMSC向神經(jīng)細(xì)胞分化的研究已獲得了一些令人鼓舞的結(jié)果，但是還面對(duì)了許多待進(jìn)一步解決的問(wèn)題：（1）對(duì)于BMSC的鑒定一直都沒(méi)有一個(gè)統(tǒng)一的說(shuō)法，對(duì)BMSC的細(xì)胞學(xué)特點(diǎn)和分化各階段細(xì)胞標(biāo)志物的進(jìn)一步研究；（2）光感受器細(xì)胞在體外的外節(jié)容易脫落變性，如何進(jìn)一步保持其完整性以及存活時(shí)間；（3）體外BMSC向視網(wǎng)膜樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化模式和分子調(diào)控機(jī)制還不甚清楚，其誘導(dǎo)的微環(huán)境還比較復(fù)雜，有的學(xué)者直接采用雞尾酒式的加入好幾種生長(zhǎng)因子進(jìn)行誘導(dǎo)，對(duì)于其中各生長(zhǎng)因子具體作用以及相互間的作用仍不清楚；（4）對(duì)于本實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)出來(lái)表達(dá)視紫紅質(zhì)的MSC細(xì)胞的與真正的光感受器細(xì)胞之間不管是從形態(tài)上還是都有很大的差距，縮短這一差別，將MSC真正應(yīng)用于眼科臨床，還需進(jìn)一步深入的研究探索。

參考文獻(xiàn)：

[1] Friedenstein AJ, Petrakova KV, Kurolesova AI, et al.Heterotopic of bone marrow.Analysis of precursor cells for osteogenic and hematopoietic tissues[J].Transplantation, 1968,6(2):230-247.[2] Pittenger MF, Mackay AM, Beck SC, et al.Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells[J].Science, 1999,284(5411):143-147.[3] Bianco P, Riminucci M, Gronthos S, et al.Bone marrow stromal stem cells: nature, biology, and potential applications[J].Stem Cells, 2001,19(3):180-192.[4] Woodbury D, Schwarz EJ, Prockop DJ, et al.Adult rat and human bone marrow stromal cells differentiate into neurons[J].J Neurosci Res, 2000,61(4):364-370.[5] Kicic A, Shen WY, Wilson AS, et al.Differentiation of marrow stromal cells into photoreceptors in the rat eye[J].J Neurosci, 2003,23(21):7742-7749.[6] Ullian EM, Sapperstein SK, Christopherson KS, et al.Control of synapse number by glia[J].Science, 2001,291(5504):657-661.[7] 謝茂松,徐國(guó)興,李瓊,等.大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的比較[J].國(guó)際眼科雜志, 2007,7(5):1285-1287.[8] Tomita M, Mori T, Maruyama K, et al.A comparison of neural differentiation and retinal transplantation with bone marrow-derived cells and retinal progenitor cells[J].Stem Cells, 2006,24(10):2270-2278.[9] 張枝橋, 董方田, 等.大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)為光感受器樣細(xì)胞的研究[J].中華眼科雜志, 2008,44(6):540-544.[10] Tondreau T, Lagneaux L, Dejeneffe M, et al.Bone marrow-derived mesenchymal stem cells already express specific neural proteins before any differentiation[J].Differentiation, 2004,72(7):319-326.[11] Deng J, Petersen BE, Steindler DA, et al.Mesenchymal stem cells spontaneously express neural proteins in culture and are neurogenic after transplantation[J].Stem Cells, 2006,24(4):1054-1064.

第三篇：在廣西干細(xì)胞研究與臨床應(yīng)用學(xué)術(shù)研討會(huì)開(kāi)幕式上的致辭

在廣西干細(xì)胞研究與臨床應(yīng)用學(xué)術(shù)研討會(huì)

開(kāi)幕式上的致辭

2011年5月21日

尊敬的吳祖澤院士、田增民院長(zhǎng)、各位醫(yī)學(xué)界的領(lǐng)導(dǎo)與專家：

大家上午好！

首先，請(qǐng)?jiān)试S我代表廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳和本次會(huì)議的主辦方對(duì)各位領(lǐng)導(dǎo)和專家在百忙之中前來(lái)出席此次會(huì)議表示熱烈的歡迎和衷心的感謝！

眾所周知，國(guó)民的健康狀況是中華民族強(qiáng)盛、綜合國(guó)力發(fā)展、社會(huì)繁榮與穩(wěn)定最核心的要素之一。國(guó)務(wù)院《國(guó)家中長(zhǎng)期科學(xué)和技術(shù)發(fā)展規(guī)劃綱要（2006—2020年）》中提到，前沿技術(shù)的發(fā)展，特別是生物技術(shù)專項(xiàng)中提出的“基于干細(xì)胞的人體組織工程技術(shù)”的發(fā)展，是國(guó)家發(fā)展的重中之重。

2009年11月3日，溫家寶總理在中國(guó)科學(xué)院成立60周年大會(huì)上發(fā)言時(shí)強(qiáng)調(diào)：“干細(xì)胞研究促進(jìn)了再生醫(yī)學(xué)的發(fā)展，這是繼藥物治療、手術(shù)治療之后的又一場(chǎng)醫(yī)療革命。這是一個(gè)重大機(jī)遇，我們不會(huì)再錯(cuò)失良機(jī)，這不是人類(lèi)信仰的又一次盲動(dòng)，所謂英雄所見(jiàn)略同是也。正因如此，作為生物干細(xì)胞技術(shù)不僅成為科學(xué)家們的研究熱點(diǎn)，更成為資本市場(chǎng)的投資新寵，而且得到各國(guó)政府高度重視，以及對(duì)干細(xì)胞的政策支持！我們要力爭(zhēng)在干細(xì)胞研究的更多領(lǐng)域取得領(lǐng)先地位?！蓖瑫r(shí)，在國(guó)家863項(xiàng)目中，投入到干細(xì)胞與治療性克隆、組織工程技術(shù)與產(chǎn)品研制、組織器官代用品研發(fā)等項(xiàng)目的研究經(jīng)費(fèi)達(dá)到近2億元人民幣。由此可見(jiàn)，我國(guó)在干細(xì)胞和組織工程領(lǐng)域的研究，已經(jīng)被

1提高到了一個(gè)具有戰(zhàn)略意義的高度。

干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué)是當(dāng)今世界生命科學(xué)的熱點(diǎn)領(lǐng)域，已經(jīng)成為繼藥物、手術(shù)治療之后的新治療模式。近年來(lái)，我區(qū)在干細(xì)胞研究應(yīng)用方面取得一系列重大進(jìn)展，在基礎(chǔ)科學(xué)研究、應(yīng)用技術(shù)開(kāi)發(fā)、人才培養(yǎng)引進(jìn)、創(chuàng)新平臺(tái)建設(shè)、創(chuàng)新載體建設(shè)等方面取得了新的突破，為推動(dòng)干細(xì)胞產(chǎn)業(yè)化發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。

干細(xì)胞移植作為先進(jìn)的醫(yī)療手段，可以有效治療糖尿病、缺血性心臟病、惡性血液疾病、遺傳性疾病以及其他常規(guī)醫(yī)療手段難以應(yīng)對(duì)的疾病。自體儲(chǔ)存的干細(xì)胞使用方便，細(xì)胞活性強(qiáng)，無(wú)免疫排斥的危險(xiǎn)，移植成活率高，治愈率高，醫(yī)療費(fèi)用低。干細(xì)胞治療的這些特點(diǎn)會(huì)為有需要的廣大百姓帶來(lái)福祉。其次，發(fā)展干細(xì)胞產(chǎn)業(yè)也是保護(hù)自治區(qū)民族基因資源的需要。廣西是個(gè)多民族的自治區(qū)，生物資源豐富，基因資源的保護(hù)尤為重要。第三，自治區(qū)政府將生物醫(yī)藥作為戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)，發(fā)展干細(xì)胞產(chǎn)業(yè)一方面可以提升廣西在國(guó)內(nèi)科研領(lǐng)域的地位，促進(jìn)廣西生物醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展，另一方面也可以充分發(fā)揮自治區(qū)豐富的動(dòng)、植物資源優(yōu)勢(shì)，加快開(kāi)發(fā)具有廣西優(yōu)勢(shì)和特色的生物醫(yī)藥產(chǎn)品、保健藥品以及日化用品等。干細(xì)胞產(chǎn)業(yè)化基地的建設(shè)既能創(chuàng)造巨大的經(jīng)濟(jì)效益，同時(shí)也有利于打造區(qū)域優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè)，形成區(qū)域經(jīng)濟(jì)核心競(jìng)爭(zhēng)力。

我相信，通過(guò)本次學(xué)術(shù)交流，將進(jìn)一步提高我區(qū)干細(xì)胞研究和臨床應(yīng)用的水平，使廣大患者早日分享到高科技成果帶來(lái)的好處。

祝大會(huì)圓滿成功。

謝謝大家！

第四篇：PICC在臨床護(hù)理中的應(yīng)用

PICC在臨床護(hù)理中的應(yīng)用

外周靜脈置入中心靜脈導(dǎo)管(Peripherally Inserted Central Catheter PICC)是由外周靜脈穿刺插管,其導(dǎo)管尖端定位于上腔靜脈或鎖骨下靜脈。根據(jù)導(dǎo)管質(zhì)量的不同可以在體內(nèi)留置3個(gè)月~1年，操作快捷，無(wú)嚴(yán)重并發(fā)癥。為患者開(kāi)辟了一條方便,安全有效的靜脈通路。能將各種藥物直接輸送到中心靜脈處，能迅速稀釋藥物濃度，避免刺激性藥物對(duì)血管的損傷。該項(xiàng)護(hù)理技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于臨床。PICC的臨床應(yīng)用

1.1危重患者的搶救與鎖骨下靜脈置管相比，PICC組導(dǎo)管留置時(shí)間長(zhǎng)、并發(fā)癥少的優(yōu)點(diǎn)，并且PICC操作簡(jiǎn)單，可由護(hù)士單獨(dú)執(zhí)行操作，當(dāng)醫(yī)生進(jìn)行其他搶救時(shí)，為病情重的患者的搶救贏得了時(shí)間[1]。

1.2用于燒傷患者大面積燒傷患者由于皮膚受損面積大,體液丟失多，休克期需補(bǔ)充大量液體,加之感染、修復(fù)期用藥時(shí)間長(zhǎng)，故靜脈輸液是治療的重要途徑之一。PICC為患者短時(shí)快速補(bǔ)液開(kāi)辟了一條方便、安全的通路，減少了患者反復(fù)穿刺的痛苦[2]。

1.3胃腸外營(yíng)養(yǎng)治療及腫瘤患者化療胃腸外營(yíng)養(yǎng)對(duì)于危重患者的治療具有的重要意義，是腸瘺，重癥胰腺炎，短腸綜合征等疾病的主要治療手段的其中一種。而建立起一條有效的靜脈通道是臨床開(kāi)展腸外營(yíng)養(yǎng)的必要條件。PICC輸注腸外營(yíng)養(yǎng)是一種并發(fā)癥少、有效、成功率高、安全的營(yíng)養(yǎng)支持方法。PICC置管并發(fā)癥的發(fā)生率明顯低于鎖骨下靜脈置管和外周靜脈穿刺[3]。

腫瘤患者經(jīng)常需要長(zhǎng)期靜脈輸注化療藥物及高濃度營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，臨床傳統(tǒng)的用藥途徑為反復(fù)淺靜脈穿刺，這種方法不可避免地造成患者痛苦，化療藥物特殊的不良反應(yīng)及對(duì)血管的破壞。由于PICC直達(dá)上腔靜脈，藥物注入后迅速被稀釋，從而解除了藥物對(duì)周?chē)艿膿p害，保護(hù)了上肢血管網(wǎng)，為腫瘤患者提供了一種無(wú)痛性的治療通路[4]。

1.4 用于胸腹腔積液引流與化學(xué)治療胸腹腔穿刺屬于一種創(chuàng)傷性的治療措施，適用于胸腔里面有大量的積液、大量腹水的患者，若一次性放水量過(guò)多、過(guò)快,會(huì)因胸、腹腔內(nèi)壓突然的降低,使血管擴(kuò)張了，以及回心血量的減少，從而導(dǎo)致血壓的下降,患者會(huì)發(fā)現(xiàn)有明顯的不適，因此需要多次的進(jìn)行胸腹腔穿刺放液才可以達(dá)到療效。進(jìn)行PICC置管引流胸腹腔積液,其優(yōu)勢(shì)就在于穿刺得危險(xiǎn)性較小而且并發(fā)癥少、并可多次的進(jìn)行放液。劉杰等[5]在62例的惡性胸腔積液治療過(guò)程中，應(yīng)用PICC管進(jìn)行胸腔留置引流化療，除了其中1例出現(xiàn)了穿刺點(diǎn)紅腫,胸腔內(nèi)積液沿PICC管外滲外，其余的患者都沒(méi)有發(fā)生并發(fā)癥。廖少萍等[6]對(duì)其中43例頑固性腹水患者行PICC管長(zhǎng)期留置引流，平均置管的時(shí)間達(dá)到20~30 d，沒(méi)有1例出現(xiàn)過(guò)腹腔感染、低血壓等的不良反應(yīng)。PICC管在引流的過(guò)程中若有患者出現(xiàn)了不適的癥狀，可隨時(shí)的調(diào)節(jié)速度或關(guān)閉其引流系統(tǒng)，不需要進(jìn)行拔管，還可以隨時(shí)的行腔內(nèi)注射藥物治療，可以達(dá)到控制胸、腹腔積液的目的[7]。選擇應(yīng)用PICC管做胸腹腔引流,不僅可以有效的減少患者進(jìn)行反復(fù)穿刺的痛苦,從而還避免了有發(fā)生交叉感染的癥狀[8]。

2PICC的置管方法

2.1靜脈選擇首選貴要靜脈，因它管徑粗，靜脈瓣少，且在置管體位下為導(dǎo)管頭端到中心靜脈最短、最直的途徑。其次選肘正中靜脈、頭靜脈，盡量避免在頭靜脈穿刺。與頭靜脈相比較，貴要靜脈置管成功率高、留管時(shí)間長(zhǎng)[9]。

2.2置管要領(lǐng)送管中動(dòng)作輕柔,送管遇到阻力不可強(qiáng)行置，可向后撤導(dǎo)管，輕微旋轉(zhuǎn)或調(diào)整方向。穿刺了以后從回血帽觀察回血狀況，保持住穿刺針的位置，隔無(wú)菌巾松止血帶，輕壓穿刺點(diǎn)上方止血，撤出穿刺針、固定，用肝素鹽水抽吸至見(jiàn)到有回血，然后連接好肝素帽以及密閉輸液器。穿刺部位放小方紗，將覆蓋無(wú)菌的透氣膜固定好，以穿刺點(diǎn)為中心用彈力繃帶加壓包扎24h，穿刺第2d再換膜1次，以后每2~3d換膜1次。導(dǎo)管的護(hù)理

3.1 封管液的選擇封管液的選擇是保證PICC管道通暢比較關(guān)鍵的一環(huán)，除使用正壓封管方法外，高濃度肝素封管液(25u/ml)較低濃度(12.5u/ml)堵管率低。對(duì)于不能使用肝素的疾病如血友病、血小板減少癥、以及化療的患者，都可以使用生理鹽水進(jìn)行封管，在封管之前需要用20ml的生理鹽水進(jìn)行沖管，然后再進(jìn)行生理鹽水的正壓封管[10]。

3.2 帶管回家的護(hù)理 PICC留管的時(shí)間長(zhǎng)，許多化療的患者在化療期間歇期需要帶管回家?；颊邘Ч艹鲈汉笠⒁猗俅┐虃?cè)肢體后不可進(jìn)行劇烈的運(yùn)動(dòng)，不可提重物品。②衣袖要穿寬松的。②每次洗澡之前用清潔塑料薄膜包裹好穿刺部位上下至少到10cm，以防止浸濕了局部。不能進(jìn)行盆浴。洗完澡后要盡快用干毛巾把局部擦干。③平時(shí)的時(shí)候要每星期去醫(yī)院進(jìn)行封管兩次。④如果發(fā)現(xiàn)敷料有污染或者是局部有紅、腫、痛、滲出等異常的情況及時(shí)到醫(yī)院去處理。

3.3 拔管的護(hù)理拔出導(dǎo)管時(shí)的動(dòng)作要輕，幫助患者擺好體位，仔細(xì)的清掉敷料，皮膚進(jìn)行常規(guī)消毒，在插管的地方抓住導(dǎo)管，與之皮膚至平行慢慢的拔出。拔完后把無(wú)菌紗布放置于針孔處，輕輕按壓直到不出血為止，然后固定好膠布。觀察拔出來(lái)的導(dǎo)管尖端是不是完整的、測(cè)量管長(zhǎng)、并且比較插管時(shí)的長(zhǎng)度。常見(jiàn)并發(fā)癥的原因及處理

4.1機(jī)械性靜脈炎機(jī)械性靜脈炎常出現(xiàn)在穿刺后48~72 h。主要因選擇的導(dǎo)管型號(hào)和血管的內(nèi)徑大小不適宜、導(dǎo)管材料過(guò)硬、穿刺側(cè)肢體活動(dòng)過(guò)度等所致，還包括患者缺乏維護(hù)導(dǎo)管的基本知識(shí)[11]。女性患者常見(jiàn)。對(duì)已發(fā)生機(jī)械性靜脈炎患者，應(yīng)抬高患肢,促進(jìn)靜脈回流，緩解癥狀，腫脹部位給以隔濕熱敷或使用如意金黃散加綠茶茶水調(diào)制糊狀外敷并配合紫蘇葉代茶飲效果較好。半導(dǎo)體激光治療儀(紅外線)照射患處也可以預(yù)防性使用[12]。

4.2導(dǎo)管阻塞導(dǎo)管堵塞原因分血凝性導(dǎo)管堵塞和非血凝性導(dǎo)管堵塞。前者是由于血管壁受損或炎癥、封管時(shí)機(jī)、方法不正確導(dǎo)致血液返流、在管腔內(nèi)形成凝塊或血栓所致；后者是導(dǎo)管管徑選擇不當(dāng),導(dǎo)管扭曲、打折、血流速度減慢、血液粘度異常者、藥物沉淀所致。

為預(yù)防導(dǎo)管阻塞，根據(jù)血管粗細(xì)選擇合適規(guī)格的導(dǎo)管尤為必要。穿刺過(guò)程中減少對(duì)血管內(nèi)膜的損傷、選擇20ml注射器正壓脈沖式封管、輸注粘稠度較高的液體時(shí)必須每6h用生理鹽水沖管一次、對(duì)易于發(fā)生血栓的患者應(yīng)用抗凝劑、置入后行胸片檢查確認(rèn)導(dǎo)管有無(wú)打折、盤(pán)繞或其他受損跡象亦是常采取的措施。如發(fā)生液體輸入不暢，考慮末端孔頂?shù)窖鼙?，回血抽不出，此時(shí)將導(dǎo)管外端轉(zhuǎn)幾圈，避開(kāi)靜脈壁。如血栓堵塞時(shí)，注入溶栓藥物(尿激酶濃度5000IU/m1)保留20min[13]。

4.3感染感染的發(fā)生與無(wú)菌技術(shù)、不及時(shí)換藥或免疫力低下有關(guān)。臨床操作中應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌操作技術(shù);及時(shí)更換無(wú)菌貼膜,第一個(gè)24h內(nèi)更換貼膜1次,以后更換貼膜1次/w。遵醫(yī)囑給予抗生素治療及營(yíng)養(yǎng)支持治療,提高患者抵抗力[14]。

4.4 導(dǎo)管脫出其常見(jiàn)原因有：護(hù)士未能向患者及家屬說(shuō)明導(dǎo)管留置中的注意事項(xiàng)，患者隨意活動(dòng)過(guò)度造成脫管，護(hù)理巡視不到位，未能及時(shí)發(fā)現(xiàn)貼膜松動(dòng)或有汗液、血液滲出使貼膜脫落而導(dǎo)致導(dǎo)管脫出。因此，置管后應(yīng)向患者及家屬說(shuō)明導(dǎo)管留置中的注意事項(xiàng)，活動(dòng)時(shí)采取保護(hù)性措施。及時(shí)觀察貼膜情況，如有松動(dòng)或有汗液、血液滲出需及時(shí)更換。導(dǎo)管一旦脫出不可再用。

4.5穿刺點(diǎn)滲血滲液發(fā)生原因常見(jiàn)于：滲血凝血機(jī)制異常、導(dǎo)管固定不當(dāng)自由出入穿刺點(diǎn)頻繁、穿刺位置選擇不當(dāng)、滲液纖維蛋白鞘生成、患者低蛋白血癥期、輸液管路不暢等。對(duì)前者應(yīng)彈力繃帶加壓包扎，后者給予紫外線治療儀照射，在15cm的距離使用，第1d5s，第2d 10s，第3d 15s，癥狀未完全緩解可重復(fù)照射，合并使用抗生素[15]。

第五篇：醫(yī)學(xué)影像學(xué)在臨床中的應(yīng)用

醫(yī)學(xué)影像學(xué)在臨床中的應(yīng)用

摘要：醫(yī)學(xué)影像學(xué)在醫(yī)學(xué)診斷領(lǐng)域是一門(mén)新興的學(xué)科，不過(guò)目前在臨床的應(yīng)用上是非常廣泛的，對(duì)疾病的診斷提供了很大的科學(xué)和直觀的依據(jù)，可以更好的配合臨床的癥狀、化驗(yàn)等方面，為最終準(zhǔn)確診斷病情起到不可替代的作用；同時(shí)也很好的應(yīng)用在治療方面。現(xiàn)對(duì)X成像、CT成像、超聲成像、核磁共振等基本原理、臨床應(yīng)用特點(diǎn)進(jìn)行介紹。

關(guān)鍵字：醫(yī)學(xué)影像學(xué)、X光成像(X-ray)、腦斷層掃描(CT)、核磁共振成像（MRI）、超生成像(ultrasound)等

1895年德國(guó)的物理學(xué)家倫琴發(fā)現(xiàn)了X線，不久即被用于人體的疾病檢查，并由此形成了放射診斷學(xué)。近30年來(lái)，CT、MRI、超聲和核素顯像設(shè)備在不斷地改進(jìn)核完善，檢查技術(shù)核方法也在不斷地創(chuàng)新，影像診斷已從單一依靠形態(tài)變化進(jìn)行診斷發(fā)展成為集形態(tài)、功能、代謝改變?yōu)橐惑w的綜合診斷體系。與此同時(shí)，一些新的技術(shù)如心臟和腦的磁源成像和新的學(xué)科分支如分子影像學(xué)在不斷涌現(xiàn)，影像診斷學(xué)的范疇仍在不斷發(fā)展和擴(kuò)大之中。1.X線成像

1.1 X線成像的基本原理

X線之所以能使人體組織在熒屏上或膠片上形成影像，一方面是基于X線的穿透性、熒光效應(yīng)和感光效應(yīng)；另一方面是基于人體組織之間有密度和厚度的差別。當(dāng)X線透過(guò)人體不同組織結(jié)構(gòu)時(shí)，被吸收的程度不同，所以到達(dá)熒屏或膠片上的X線量即有差異。這樣，在熒屏或X線片上就形成明暗或黑白對(duì)比不同的影像。1.2 X線成像的特點(diǎn)

顯示的結(jié)構(gòu)層次比較豐富，有利于整體觀察受檢部位的組織結(jié)構(gòu)，具有較高的空間分辨率，但其密度分辨率較低，無(wú)法區(qū)別組織密度差別小的結(jié)構(gòu)。

1.3 X線成像在臨床中的應(yīng)用

X線成像是重要的臨床診斷方法之一，是影像學(xué)的基礎(chǔ)，已經(jīng)積累了豐富成熟的經(jīng)驗(yàn)，也是臨床上使用最多的、最基本的診斷方法，特別是在骨骼、胸部、胃腸道應(yīng)用廣泛。2.CT成像

2.1 CT的成像基本原理

CT是用X線束對(duì)人體某部一定厚度的層面進(jìn)行掃描，由探測(cè)器接收透過(guò)該層面的X線，轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢?jiàn)光后，由光電轉(zhuǎn)換變?yōu)殡娦盘?hào)，再經(jīng)模擬/數(shù)字轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)為數(shù)字，輸入計(jì)算機(jī)處理。圖像形成的處理有如對(duì)選定層面分成若干個(gè)體積相同的長(zhǎng)方體，稱之為體素。掃描所得信息經(jīng)計(jì)算而獲得每個(gè)體素的X線衰減系數(shù)或吸收系數(shù)，再排列成矩陣，即數(shù)字矩陣，數(shù)字矩陣可存貯于磁盤(pán)或光盤(pán)中。經(jīng)數(shù)字/模擬轉(zhuǎn)換器把數(shù)字矩陣中的每個(gè)數(shù)字轉(zhuǎn)為由黑到白不等灰度的小方塊，即象素，并按矩陣排列，即構(gòu)成CT圖像。所以，CT圖像是重建圖像。每個(gè)體素的X線吸收系數(shù)可以通過(guò)不同的數(shù)學(xué)方法算出。

2.2 CT的成像的特點(diǎn)

CT圖像是由一定數(shù)目由黑到白不同灰度的象素按矩陣排列所構(gòu)成。這些象素反映的是相應(yīng)體素的X線吸收系數(shù)。不同CT裝置所得圖像的象素大小及數(shù)目不同。

CT圖像是以不同的灰度來(lái)表示，反映器官和組織對(duì)X線的吸收程度。因此，與X線圖像所示的黑白影像一樣，黑影表示低吸收區(qū)，即低密度區(qū)，如含氣體多的肺部；白影表示高吸收區(qū)，即高密度區(qū)，如骨骼。但是CT與X線圖像相比，CT的密度分辨力高，即有高的密度分辨力。因此，人體軟組織的密度差別雖小，吸收系數(shù)雖多接近于水，也能形成對(duì)比而成像。這是CT的突出優(yōu)點(diǎn)。所以，CT可以更好地顯示由軟組織構(gòu)成的器官，如腦、脊髓、縱隔、肺、肝、膽、胰以及盆部器官等，并在良好的解剖圖像背景上顯示出病變的影像。2.3 CT的成像在臨床中的應(yīng)用

CT由于它的特殊診斷價(jià)值，已廣泛應(yīng)用于臨床。但CT設(shè)備比較昂貴，檢查費(fèi)用偏高，某些部位的檢查，診斷價(jià)值，尤其是定性診斷，還有一定限度，所以不宜將CT檢查視為常規(guī)診斷手段，應(yīng)在了解其優(yōu)勢(shì)的基礎(chǔ)上，合理的選擇應(yīng)用。3.核磁共振成像

3.1 核磁共振成像的基本原理

核磁共振成像技術(shù)是核磁共振在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用。人體內(nèi)含有非常豐富的水，不同的組織，水的含量也各不相同，如果能夠探測(cè)到這些水的分布信息，就能夠繪制出一幅比較完整的人體內(nèi)部結(jié)構(gòu)圖像，核磁共振成像技術(shù)就是通過(guò)識(shí)別水分子中氫原子信號(hào)的分布來(lái)推測(cè)水分子在人體內(nèi)的分布，進(jìn)而探測(cè)人體內(nèi)部結(jié)構(gòu)的技術(shù)。3.2 核磁共振成像的特點(diǎn)

核磁共振成像技術(shù)是一種非介入探測(cè)技術(shù)，相對(duì)于X-射線透視技術(shù)和放射造影技術(shù)，MRI對(duì)人體沒(méi)有輻射影響，相對(duì)于超聲探測(cè)技術(shù)，核磁共振成像更加清晰，能夠顯示更多細(xì)節(jié)，此外相對(duì)于其他成像技術(shù)，核磁共振成像不僅僅能夠顯示有形的實(shí)體病變，而且還能夠?qū)δX、心、肝等功能性反應(yīng)進(jìn)行精確的判定。在帕金森氏癥、阿爾茨海默氏癥、癌癥等疾病的診斷方面，MRI技術(shù)都發(fā)揮了非常重要的作用。3.3 核磁共振成像在臨床中應(yīng)用

MRI所獲得的圖像非常清晰精細(xì)，大大提高了醫(yī)生的診斷效率，避免了剖胸或剖腹探查診斷的手術(shù)。由于MRI不使用對(duì)人體有害的X射線和易引起過(guò)敏反應(yīng)的造影劑，因此對(duì)人體沒(méi)有損害。MRI可對(duì)人體各部位多角度、多平面成像，其分辨力高，能更客觀更具體地顯示人體內(nèi)的解剖組織及相鄰關(guān)系，對(duì)病灶能更好地進(jìn)行定位定性。對(duì)全身各系統(tǒng)疾病的診斷，尤其是早期腫瘤的診斷有很大的價(jià)值。4.超聲成像

4.1 超聲成像的基本原理

陣列聲場(chǎng)延時(shí)疊加成像是炒成成像中最傳統(tǒng)，最簡(jiǎn)單的，也是目前實(shí)際當(dāng)中應(yīng)用最為廣泛的成像方式。在這種方式中，通過(guò)對(duì)陣列的各個(gè)單元引入不同的延時(shí)，而后合成為一聚焦波束，以實(shí)現(xiàn)對(duì)聲場(chǎng)各點(diǎn)的成像。4.2超聲成像的特點(diǎn)

在臨床應(yīng)用方面，B超為最重要的診斷方法，B超可以清晰地顯示各臟器及周?chē)鞴俚母鞣N斷面像，由于圖像富于實(shí)體感，接近于解剖的真實(shí)結(jié)構(gòu)。4.3 超聲成像的應(yīng)用

隨著醫(yī)學(xué)超聲成像技術(shù)的發(fā)展，從A型、M型一維超聲成像、B型二維超聲成像，發(fā)展到動(dòng)態(tài)三維成像；由黑白灰階超聲成像發(fā)展到彩色血流成像；超聲造影、諧波成像、多普勒組織成像等技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于臨床。醫(yī)學(xué)超聲成像技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用以其非電離輻射的獨(dú)到之處、對(duì)軟組織鑒別力較高的優(yōu)勢(shì)、儀器使用方便價(jià)格便宜的特點(diǎn)，成為醫(yī)學(xué)成像中頗具生命力而不可代替的現(xiàn)代影像診斷技術(shù)。5.其他影像成像技術(shù) 5.1 放射性核素顯像

將放射性藥物引入體內(nèi)后，以臟器內(nèi)、外或正常組織與病變之間對(duì)放射性藥物攝取的差別為基礎(chǔ)，利用顯像儀器獲得臟器或病變的影像。常用的顯像儀器為γ照相機(jī)和發(fā)射型計(jì)算機(jī)斷層照相機(jī)（ECT），后者又分為正電子類(lèi)型的 PECT 和單光子類(lèi)型的SPECT。按顯像的方式分為靜態(tài)和動(dòng)態(tài)顯像兩種。由于病變部位攝取放射性藥物的量和速度與它們的血流量、功能狀態(tài)、代謝率或受體密度等密切相關(guān)，因此所得影像不僅可以顯示它們的位置和形態(tài)，更重要的是可以反映它們的上述種種狀況（可以統(tǒng)稱為功能狀況），故實(shí)為一種功能性顯像。眾所周知，絕大多數(shù)疾病的早期，在形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化之前，上述功能狀態(tài)已有改變，因此放射性核素顯像常常能比以顯示形態(tài)結(jié)構(gòu)為主的 XCT、MRI、超聲檢查等較早地發(fā)現(xiàn)和診斷很多疾病。但它的空間分辨率不如上述其他醫(yī)學(xué)影像方法，清晰度較差，應(yīng)根據(jù)需要適當(dāng)選擇或聯(lián)合應(yīng)用各種顯像方法。

放射性核素檢查的主要內(nèi)容有：①心血管系統(tǒng)。主要有心肌顯像和心功能測(cè)定。②神經(jīng)系統(tǒng)。主要有局部腦血流（γCBF）斷層顯像、局部腦葡萄糖代謝顯像和神經(jīng)受體顯像。③腫瘤顯像。主要有放射免疫顯像（RII）、其他特異性親腫瘤顯像、67Ga 顯像、骨轉(zhuǎn)移灶顯像和淋巴顯像。④消化系統(tǒng)。主要有肝血管瘤顯像、肝膽顯像、異位胃粘膜顯像和活動(dòng)性消化道出血顯像。⑤呼吸系統(tǒng)。主要用于早期診斷發(fā)病2～3日內(nèi)的肺栓塞。⑥泌尿系統(tǒng)。主要有泌尿系動(dòng)態(tài)顯像。利用 99mTc-DMSA 可以顯示腎實(shí)質(zhì)影像，能靈敏地發(fā)現(xiàn)腎臟瘢痕。此外，放射性核素顯像還可用于內(nèi)分泌系統(tǒng)、骨骼系統(tǒng)和血液系統(tǒng)疾病的診斷。5.2 數(shù)字減影血管造影技術(shù)

數(shù)字減影血管造影技術(shù)（Digital Subtraction Angiography，DSA）是一種新的X線成像系統(tǒng)，是常規(guī)血管造影術(shù)和電子計(jì)算機(jī)圖像處理技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物。普通血管造影圖像具有很多的解剖結(jié)構(gòu)信息，例如骨骼、肌肉、血管及含氣腔隙等等，彼此相互重疊影響，若要想單純對(duì)某一結(jié)構(gòu)或組織進(jìn)行細(xì)微觀察就較為困難。

DSA的成像基本原理是將受檢部位沒(méi)有注入造影劑和注入造影劑后的血管造影X線熒光圖像，分別經(jīng)影像增強(qiáng)器增益后，再用高分辨率的電視攝像管掃描，將圖像分割成許多的小方格，做成矩陣化，形成由小方格中的像素所組成的視頻圖像，經(jīng)對(duì)數(shù)增幅和模/數(shù)轉(zhuǎn)換為不同數(shù)值的數(shù)字，形成數(shù)字圖像并分別存儲(chǔ)起來(lái)，然后輸入電子計(jì)算機(jī)處理并將兩幅圖像的數(shù)字信息相減，獲得的不同數(shù)值的差值信號(hào)，再經(jīng)對(duì)比度增強(qiáng)和數(shù)/模轉(zhuǎn)換成普通的模擬信號(hào)，獲得了去除骨骼、肌肉和其它軟組織，只留下單純血管影像的減影圖像，通過(guò)顯示器顯示出來(lái)。

通過(guò)DSA處理的圖像，使血管的影像更為清晰，在進(jìn)行介入手術(shù)時(shí)更為安全。

5.3正子掃描(PET)

正電子發(fā)射型計(jì)算機(jī)斷層顯像（Positron Emission Computed Tomography），是核醫(yī)學(xué)領(lǐng)域比較先進(jìn)的臨床檢查影像技術(shù)。

其大致方法是，將某種物質(zhì)，一般是生物生命代謝中必須的物質(zhì)，如：葡萄糖、蛋白質(zhì)、核酸、脂肪酸，標(biāo)記上短壽命的放射性核素（如F18，碳11等），注入人體后，通過(guò)對(duì)于該物質(zhì)在代謝中的聚集，來(lái)反映生命代謝活動(dòng)的情況，從而達(dá)到診斷的目的。

最近各醫(yī)院主要使用的物質(zhì)是氟代脫氧葡萄糖，簡(jiǎn)稱FDG。其機(jī)制是，人體不同組織的代謝狀態(tài)不同，在高代謝的惡性腫瘤組織中葡萄糖代謝旺盛，聚集較多，這些特點(diǎn)能通過(guò)圖像反映出來(lái)，從而可對(duì)病變進(jìn)行診斷和分析。6.總結(jié)

醫(yī)學(xué)影像學(xué)，以部位、功能為主線，綜合講述各部位正常人體各器官、組織的X線、CT、MRI表現(xiàn)，各種病變、疾病的X線、CT、MRI的表現(xiàn)與診斷。依不同的檢查方法又可分成普通放射診斷學(xué)、CT診斷學(xué)、MR診斷學(xué)和介入放射學(xué)。

醫(yī)學(xué)影像學(xué)是一門(mén)以各種成像設(shè)備（含X線攝影，超聲顯象，放射性核素，放射計(jì)算機(jī)斷層攝影、電子計(jì)算機(jī)集X線體層攝影、核磁共振成像等）和放療設(shè)備手段，應(yīng)用基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)基本理論知識(shí)，對(duì)疾病進(jìn)行醫(yī)學(xué)影像診斷和放射治療的學(xué)科。它具有自己的獨(dú)立的理論體系，是自然科學(xué)、工程學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等多學(xué)科相互滲透和綜合的新興學(xué)科。7.參考文獻(xiàn) ① 部分內(nèi)容摘抄自百度百科。② X線成像、超聲成像、數(shù)字減影血管造影技等摘抄自課本P30-70，P163—173。