第一篇：診斷學(xué)知識(shí)點(diǎn)匯總_復(fù)習(xí)資料

診斷學(xué)知識(shí)點(diǎn)匯總，復(fù)習(xí)資料

緒論

1、癥狀概念，2、體格檢查，3、診斷學(xué)內(nèi)容 第一篇 常見(jiàn)癥狀

1、體征，2、正常體溫、稽留熱、弛張熱的定義，3、咯血定義，4、咯血與嘔血區(qū)別

5、呼吸困難定義，6、三種肺性呼吸困難表現(xiàn)（尤期前二種），7、心原性呼吸困難的特點(diǎn)

8、胸痛的病因，9、中心與周?chē)宰辖C不同原因，10、心原性與腎原性水腫的鑒別

11、肝原性水腫表現(xiàn)特點(diǎn)

12、急性腹痛的常見(jiàn)原因

13、嘔血的常見(jiàn)原因，出血量的估計(jì)，嘔血與便血的相互關(guān)系

14、黃疸（和隱性）的定義，三種黃疸的鑒別，15、嗜睡與昏睡的區(qū)別，淺與深昏迷的區(qū)別 第二篇 問(wèn)診

1、問(wèn)診的內(nèi)容，2、主訴的定義和組成

3、現(xiàn)病史是病史中的主體部分，由哪些組成，與既往史有何不同 第三篇 檢體診斷

1、體檢基本方法有哪些？觸診的方法有哪些？叩診的方法，體型的分類(lèi)

2，常見(jiàn)面容，三種體位，皮膚發(fā)黃二種原因的區(qū)別，紅疹與出血點(diǎn) 的區(qū)別，蜘蛛痣與肝掌購(gòu)

3、霍納氏征，瞳孔大小的改變，4、扁桃體腫大的分度，5、頸靜脈怒張的定義

6、甲狀腺腫大的分度，聽(tīng)到血管雜音的意義，7、桶狀胸

8、胸式（男，小孩）腹式（女）呼吸增減意義，9、深大呼吸，潮式及間停呼吸

10、觸覺(jué)語(yǔ)顫、聽(tīng)覺(jué)語(yǔ)音的定義及方法，增減意義、11、正常胸部叩診音（4種），肺下界及移動(dòng)度，12、三種呼吸音的區(qū)別

13、異常支氣管呼吸音聽(tīng)診意義，14、羅音產(chǎn)生機(jī)理，二種羅音的鑒別

15、胸膜磨擦音的聽(tīng)診特點(diǎn)，16、肺實(shí)變、肺氣腫、胸腔積液、氣胸的綜合體征。

17、心尖搏動(dòng)點(diǎn)的位置，范圍，左、右心室肥大及縱隔移位時(shí)的變化 18、震顫定義與雜音的辨證關(guān)系

19、心臟叩診的方法，左右心界的組成，心濁音界改變的原因（左室肥大、右室肥大肺脈高壓，心包積液，左氣胸及胸腔積液）20、心臟聽(tīng)診內(nèi)容，聽(tīng)診部位，21、早搏及房顫的體征，室早及房顫的ECG表現(xiàn)。

二、三聯(lián)律的概念。

22、第一、二心音的鑒別，23、第一心音增減及第二心音增減的意義，24鐘擺律，胎心律

25、第二心音分裂的聽(tīng)診特點(diǎn)及臨床意義（正常人，二狹，PDA，RBBB，ASD—“固定”）

26、左心室舒張期奔馬律的聽(tīng)診特點(diǎn)及臨床意義，27、OS及心包叩擊音的意義

28、心雜音分析內(nèi)容，29、器質(zhì)性與功能性雜音的區(qū)別 30、Austin Flint 及 Graham Steell的定義，31 連續(xù)性雜音的意義

32、異常脈搏，正常血壓，臨界高血壓，高血壓，低血壓

33、左、右心衰時(shí)的癥狀和體征，心功能級(jí)別（心功能不全度數(shù)）的判定原理及標(biāo)準(zhǔn)

34、二狹，二閉，主閉（周?chē)荏w征），主狹的綜合體征

35、腹部膨隆的意義，36、腹壁靜脈方向（上，下腔梗阻，門(mén)脈高壓，正常）

36、腹膜刺激征的檢查方法及意義（板狀腹，揉面感，壓痛點(diǎn)，反跳痛，麥?zhǔn)宵c(diǎn)，膽囊點(diǎn)）

37、腹部包塊的檢查內(nèi)容，38、液波震顫的意義

39、肝、脾觸診的方法，正常大小，40、莫菲氏征及膽總管漸進(jìn)阻塞征

41、泌尿系有炎癥時(shí)的壓痛點(diǎn)，42、肝上界位置、脾界，及濁音寬度

43、移動(dòng)性濁音及腹水與巨大卵巢囊腫的鑒別

44、振水音的意義，45、肝硬化肝功能失低償期，門(mén)脈高壓的全身綜合體征

46、胃腸穿孔致急性彌漫性腹膜炎時(shí)的綜合體征

47、區(qū)別上、下運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元癱瘓，偏癱和交叉癱的概念。肌力的分級(jí)

48、肌張力，震顫（靜止性，運(yùn)動(dòng)性，粗顫與細(xì)顫）

49、共濟(jì)運(yùn)動(dòng)的檢查方法和意義

50、生理反射，病理反射（巴氏征）的意義（錐體束損傷，上運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元癱瘓）82、腦膜刺征 第四篇 器械檢查 心電圖

1、胸導(dǎo)聯(lián)及肢導(dǎo)聯(lián)連接，心電軸的判斷及意義

2、每一小格橫、豎代表的時(shí)間、電壓，心率的計(jì)算

3、正常P波的方向，時(shí)間，電壓，“肺性P波”，“二尖瓣型P波”

4、QRS波：低電壓，左右心室肥大

5、ST-T改變與心肌缺血，6、心肌梗塞：特征性表現(xiàn)，演變過(guò)程，定位

7、正常竇性心律的心電圖特點(diǎn)，8、房性、交界性、室性早搏的心電圖特征

9、房室傳導(dǎo)阻滯：一度（P-R間期延長(zhǎng)），二度，三度

10、P-R間期縮短：預(yù)激綜合征

11、房顫的心電圖特點(diǎn)（1、2、3點(diǎn)）第五篇 實(shí)驗(yàn)室檢查 血液

1、血液三大系例正常值，2、中性粒細(xì)胞增減意義

3、中性粒細(xì)胞核左移，核右移，4、E的增減意義

5、Hct,Ret意義，骨髓

6、M/E，POX，NAP，鐵染色的意義

7、缺鐵性貧血的血象及骨髓象表現(xiàn) 出凝血

8、CFT，BT，9、血小板正常值與CRT

10、CT，KPTT，PT，11、PPP 尿液及腎功能

11、正常尿量，多尿，少尿，無(wú)尿的數(shù)值，12、血尿的概念，尿比重固定

13、蛋白尿的概念，尿糖，酮體陽(yáng)性的意義，14、白細(xì)胞尿，膿尿，管型尿的意義

15、腎小球?yàn)V過(guò)功能，腎小管排泄功能和濃縮稀釋試驗(yàn)的意義 糞便檢查

16、OB試驗(yàn)的意義 腦脊液檢查

17、幾種常見(jiàn)腦膜炎的腦脊液的特點(diǎn)，18、漏出液與滲出液的鑒別要點(diǎn) 肝臟檢查

18、肝功能檢查包括哪些項(xiàng)目，急性病毒性肝炎和慢性肝病時(shí)肝功能有何變化？

19、AFP、AKP、γ-GT的臨床意義 第七篇 診斷方法和病歷

1、診斷常用的推理方法有哪些？

2、一元性診斷的意義

3、診斷的內(nèi)容和格式，4、完整的住院病歷包括哪些內(nèi)容，由哪些人負(fù)責(zé)編寫(xiě)，病人入院后多長(zhǎng)時(shí)間完成。

第二篇：分子診斷學(xué)復(fù)習(xí)資料 簡(jiǎn)答題部分

簡(jiǎn)答

基因組的特點(diǎn)：？（大題）人類(lèi)基因組的特點(diǎn)：

1、人類(lèi)基因組具有23對(duì)染色體，基因組序列大約2.9億個(gè)核苷酸，含有蛋白質(zhì)編碼基因大約20, 000-25, 000個(gè)。其中大量基因與中樞神經(jīng)系統(tǒng)，特別是腦部發(fā)育相關(guān)；

2、絕大多數(shù)基因?yàn)閿嗔鸦?，且分布不均（每條染色體具有基因富集區(qū)和基因稀疏區(qū)）。除蛋白質(zhì)編碼基因外，其他大量基因?yàn)镽NA編碼基因；

3、基因內(nèi)和基因附近中存在大量短序列調(diào)控元件，發(fā)揮基因的調(diào)控表達(dá)和協(xié)調(diào)表達(dá)的作用；

4、基因組（基因內(nèi)）中存在大量功能未知的其他序列（“非編碼DNA”），如串聯(lián)重復(fù)序列、轉(zhuǎn)座元件。

5、序列突變是人類(lèi)基因突變的重要來(lái)源，序列/基因多態(tài)性是研究人類(lèi)遺傳突變的重要手段。

6、線(xiàn)粒體DNA（mtDNA）是人類(lèi)母系遺傳疾病的重要來(lái)源基礎(chǔ)。真核基因組特點(diǎn)：

1.真核基因組結(jié)構(gòu)龐大：人：3×109bp。幾、十、百倍于原核。

2.線(xiàn)性雙鏈DNA，多條染色體和二倍體（Diploid）：DNA和組蛋白質(zhì)形成染色體，存在于核膜內(nèi)。人：23對(duì)，46條；

3.單順?lè)醋?Monocistron)：一個(gè)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄生成一條mRNA。

4.功能基因不連續(xù)性，內(nèi)含子與外顯子并存（斷裂基因）：轉(zhuǎn)錄后需剪接(Splicing)5.非編碼區(qū)多于編碼序列(9:1)6.含有大量重復(fù)序列（Repetitive Sequences): 重復(fù)次數(shù)可達(dá)數(shù)百萬(wàn)次，序列多態(tài)性是真核生物基因組的重要特征。原核生物基因組的特點(diǎn)：

1.基因組呈共價(jià)閉合環(huán)狀雙鏈狀態(tài)，散布在細(xì)胞中，有時(shí)相對(duì)集中形成類(lèi)核/擬核（Nucleoid）

2.基因組DNA小，基因數(shù)目少（1500-5900個(gè)），種間DNA大小差異大，GC含量差異大(菌種鑒定和分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)），基因多為單拷貝基因（編碼rRNA、tRNA基因多拷貝，利于核糖體的快速組裝和蛋白質(zhì)合成）

3.基因組只有一個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)，功能相關(guān)的基因大多成簇地串聯(lián)排列（操縱子結(jié)構(gòu)）在染色體上，結(jié)構(gòu)基因無(wú)內(nèi)含子，基因連續(xù)分布，為多順?lè)醋印?/p>

4.除主基因組外，原核生物往往還具有質(zhì)?；蚪M

5.轉(zhuǎn)座元件/基因是原核生物基因組的重要特征（轉(zhuǎn)座元件（Tranposable Element）是指可移動(dòng)的基因成分，即能在一段DNA分子內(nèi)部或兩段DNA分子之間移動(dòng)的DNA片段，又稱(chēng)跳躍基因。）6.致病基因是致病原核生物基因的重要特征 病毒基因組的特點(diǎn)：

1.基因組大小相差很大（HBV：3.2kb，痘病毒：300kb）

2.結(jié)構(gòu)分子具有多樣性（DNA病毒/RNA病毒，單鏈DNA/RNA病毒，雙鏈DNA/RNA病毒，環(huán)狀分子/線(xiàn)性分子）3.基因組多數(shù)是連續(xù)性（單一分子基因組），但RNA病毒往往不連續(xù)（呼腸孤病毒：10條節(jié)段雙鏈RNA，甲乙流感病毒：8條單鏈節(jié)段RNA，丙型流感病毒：7段單鏈節(jié)段RNA。包裝在同一個(gè)病毒顆粒內(nèi)，或在不同病毒顆粒內(nèi)，只有全部基因組序列都存在，才具備感染能力）4.編碼序列占基因組的90%以上，間隔區(qū)序列很少；

5.多為單拷貝（單倍體），即每個(gè)基因只出現(xiàn)一次（除逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組有兩個(gè)拷貝）； 6.相關(guān)基因叢集（功能上相關(guān)的基因排列在一起）、有重疊基因和不規(guī)則基因結(jié)構(gòu)序列。

1、試述點(diǎn)突變（基因背景清楚和未知）的主要檢測(cè)方法。答：對(duì)基因背景清楚或部分清楚的點(diǎn)突變，可以采取直接檢測(cè)基因點(diǎn)突變的方法，如等位基因特異性寡核苷酸雜交(allele specific oligonucleotide，ASO)、PCR-ELISA、等位基因特異性擴(kuò)增(allele specific amplification，ASA)、PCR-RFLP、基因芯片技術(shù)等進(jìn)行診斷，例如β地中海貧血，可以使用ASO、PCR-RFLP 聯(lián)合基因芯片技術(shù)進(jìn)行診斷。對(duì)于一些基因背景未知的點(diǎn)突變，可以采用單鏈構(gòu)象多態(tài)性(single-strand conformational polymorphism，SSCP)、變性梯度凝膠電泳(denaturing graient gel electrophoresis，DEEG)、異源雙鏈分析(heteroduplex analysis，HA)、DNA序列測(cè)定、蛋白截短測(cè)試（protein truncation test，PTT）等方法，如Hopkins大學(xué)醫(yī)學(xué)院的研究人員設(shè)計(jì)了47 對(duì)PCR引物，分段擴(kuò)增血友病A因子Ⅷ 基因片段，進(jìn)行DGGE分析，發(fā)現(xiàn)多態(tài)性片段后再進(jìn)行DNA序列分析，幾乎查清了所有臨床輕中度病人的點(diǎn)突變。

2、試述限制性?xún)?nèi)切酶MstⅡ切割法診斷鐮狀細(xì)胞貧血的原理并圖示。

答：在FⅧ基因區(qū)域內(nèi)，有一種A基因存在三個(gè)拷貝，其功能不詳，其中一個(gè)A基因位于FⅧ基因的第22 號(hào)內(nèi)含子內(nèi)(A1)，另外兩個(gè)位于X染色體的末端(A2、A3)。A1基因可以與其上游的兩個(gè)A基因拷貝中的一個(gè)發(fā)生同源重組，引起FⅧ基因的1-22 外顯子片段倒位，這種倒位導(dǎo)致FⅧ功能完全喪失而發(fā)生嚴(yán)重的血友病(圖15-5)。其中與A2發(fā)生的重組稱(chēng)為近端重組，約占倒位的15％；與A3發(fā)生的重組稱(chēng)為遠(yuǎn)端重組，約占倒位的85％。

3、試述近端重組、遠(yuǎn)端重組概念。

答：在FⅧ基因區(qū)域內(nèi)，有一種A基因存在三個(gè)拷貝，其功能不詳，其中一個(gè)A基因位于FⅧ基因的第22 號(hào)內(nèi)含子內(nèi)(A1)，另外兩個(gè)位于X染色體的末端(A2、A3)。A1基因可以與其上游的兩個(gè)A基因拷貝中的一個(gè)發(fā)生同源重組，引起FⅧ基因的1-22 外顯子片段倒位，這種倒位導(dǎo)致FⅧ功能完全喪失而發(fā)生嚴(yán)重的血友病(圖15-5)。其中與A2發(fā)生的重組稱(chēng)為近端重組，約占倒位的15％；與A3發(fā)生的重組稱(chēng)為遠(yuǎn)端重組，約占倒位的85％。

4、簡(jiǎn)述TGGE/DGGE的基本原理

答：在TGGE中，隨著溫度的逐漸升高時(shí)，DNA分子會(huì)呈階梯式逐步發(fā)生解鏈。部分解鏈的雙鏈DNA分子表現(xiàn)出一種復(fù)雜的分枝構(gòu)像，使得其電泳遷移率大大下降。DNA分子的解鏈決定于該分子的解鏈溫度（Tm），而Tm有強(qiáng)烈的序列依賴(lài)性，如在單取代突變中，若是A:T（兩個(gè)氫鍵）被G:C（三個(gè)氫鍵）取代，將增加該雙鏈DNA分子的Tm值。而整個(gè)DNA分子序列對(duì)解鏈溫度也有影響，若A:T被T:A替代，或G:C被C:G替代，分子的解鏈溫度也會(huì)發(fā)生改變。因此不同的DNA分子由于其Tm不同，將于不同凝膠位置（溫度不同）產(chǎn)生分枝（解離）使電泳遷移率降低，從而在凝膠上的不同位置形成條帶。DGGE的變性條件為熱（一般為60℃的恒定溫度）和固定比率的甲酰胺（0－40％）、尿素（0－7M）。這些梯度變性的功能就相當(dāng)于TGGE中的溫度梯度的功能，使不同DNA分子在不同的凝膠部位發(fā)生解鏈，引起遷移率下降，從而將不同的DNA分子分離。

5、簡(jiǎn)述變性高效液相色譜法檢測(cè)基因變異的優(yōu)點(diǎn)

答：DHPLC突變檢測(cè)技術(shù)與其它方法相比，具有更高的準(zhǔn)確性和敏感性。

（1）DHPLC與各種電泳法的比較 SSCP 分析片段長(zhǎng)度<300 bp，對(duì)于人類(lèi)SNP的檢出率為50～95％，尤其容易漏檢位于發(fā)夾結(jié)構(gòu)中的變異。CSGE檢測(cè)雜合子的靈敏度與SSCP相當(dāng)或稍低。而DHPLC對(duì)150bp~600bp的DNA片段的突變檢出率都可達(dá)到100％，且而不需要特殊的樣本處理。TGGE/DGGE對(duì)于異源雙鏈及同源雙鏈分子的檢測(cè)靈敏度高出CSGE和SSCP很多。但對(duì)于較高溫度的融解區(qū)域的突變檢測(cè)，DHPLC的靈敏度要高于TGGE/DGGE。（2）DHPLC與DNA測(cè)序的比較 對(duì)于頻率高于20%的變異，直接測(cè)序的檢出率為80％，DHPLC的檢出率可達(dá)到100％；基因突變頻率低于20%時(shí)就很難用測(cè)序方法檢測(cè)到，而DHPLC可從待檢樣品中檢測(cè)到占總基因量0.5-5%的突變等位基因，且重現(xiàn)性很好。

6、試述PTT檢測(cè)基因變異的優(yōu)缺點(diǎn)

答：PTT檢測(cè)突變的優(yōu)點(diǎn)：①能檢測(cè)出只與疾病相關(guān)的蛋白截短突變；②可檢測(cè)出在RNA形成過(guò)程中發(fā)生的突變（如剪接突變）；③通過(guò)只鑒定引起疾病截短突變，PTT分析不會(huì)受到基因沉默變異如多態(tài)性的妨礙；④截短蛋白分子的長(zhǎng)度指明了突變的位置，因此更方便進(jìn)行測(cè)序分析以確定突變。

PPT檢測(cè)突變的缺點(diǎn)：①由于PCR擴(kuò)增效率的影響，對(duì)于包含幾千個(gè)核苷酸序列多個(gè)外顯子的疾病基因，就需要分成幾個(gè)1－2kb的片段分別擴(kuò)增，分別進(jìn)行PTT檢測(cè)；②由于微小缺失/插入突變對(duì)蛋白產(chǎn)物分子大小影響太小，凝膠不能分辯，因而檢測(cè)不出編碼序列中小的插入或缺失或是錯(cuò)義突變；③引起RNA產(chǎn)量改變或使mRNA不穩(wěn)定的突變可能被漏檢。

7、簡(jiǎn)述PFGE的基本原理

答：PFGE采用一種正交的交變脈沖電場(chǎng)，在進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳時(shí)，其方向、脈沖時(shí)間和電壓大小可交替改變。在每次電場(chǎng)方向改變時(shí)，DNA分子就要有一定的時(shí)間改變形狀和遷移方向，只有當(dāng)DNA分子達(dá)到一定構(gòu)型，沿新的泳動(dòng)方面伸直后，才能向前遷移。DNA分子的轉(zhuǎn)向時(shí)間與其大小關(guān)系極為密切，分子越大，分子構(gòu)型轉(zhuǎn)換所需時(shí)間就越長(zhǎng)，轉(zhuǎn)變遷移方向的時(shí)間也就越長(zhǎng)。對(duì)于不同大小的DNA大分子，其改變泳動(dòng)方向所需的時(shí)間不等，遷移速度的快慢也就不等，因此就可以按DNA分子量大小使其分離開(kāi)來(lái)。根據(jù)欲分離的DNA分子大小適當(dāng)調(diào)節(jié)電場(chǎng)方向的相交角度、電壓及脈沖時(shí)間等參數(shù)，即可將各種分子量大小不同的分子分開(kāi)。

8、假基因的分類(lèi)及其發(fā)生機(jī)理。

與正常功能的基因序列相似，但無(wú)轉(zhuǎn)錄功能或轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物無(wú)功能的基因稱(chēng)假基因(pseudogene)。根據(jù)是否保留相應(yīng)功能基因的間隔序列(如內(nèi)含子), 假基因分兩大類(lèi):一類(lèi)保留了間隔序列，稱(chēng)為非加工假基因(non-processed pseudogene)，通常因基因的復(fù)制修飾,如點(diǎn)突變、插入、缺失和移碼突變而導(dǎo)致復(fù)制后的基因在轉(zhuǎn)錄和翻譯時(shí)出現(xiàn)異常,喪失正常功能，它與功能基因一般在同一染色體上, 也稱(chēng)復(fù)制型假基因(duplicated pseudogene)。假基因中大多數(shù)則缺少間隔序列的稱(chēng)為已加工假基因(processed pseudogene)，主要是轉(zhuǎn)錄過(guò)程中mRNA 以cDNA 的方式重新整合進(jìn)入基因組(很可能發(fā)生在生殖細(xì)胞中)，在長(zhǎng)期進(jìn)化選擇過(guò)程中因?yàn)殡S機(jī)突變積累而喪失功能，通常這種假基因無(wú)內(nèi)含子，兩邊有小的側(cè)翼定向重復(fù)序列(flanking direct repeat)，3'端多具多聚腺苷酸尾。

9、簡(jiǎn)述CpG島與DNA甲基化調(diào)控。

大約有一半的人類(lèi)基因富含CpG 的順序，稱(chēng)為CpG島(CpG island)，CpG 島常位于轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)或其附近，主要存在于看家基因和一些組織特異性表達(dá)基因。在正常組織，除印記基因和失活的X染色體外，包括啟動(dòng)子區(qū)在內(nèi)的基因5′端CpG 島大部分是非甲基化的。DNA甲基化與基因表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，DNA甲基化調(diào)控基因表達(dá)直接的機(jī)制可能是因?yàn)榧谆鶑腄NA分子的大溝中突出，阻止了轉(zhuǎn)錄因子與基因相互作用，還可能直接抑制RNA聚合酶活性而抑制基因的表達(dá)。間接的機(jī)制包括兩種類(lèi)型：①與甲基化DNA結(jié)合蛋白結(jié)合；②改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)，這都間接阻礙轉(zhuǎn)錄因子與DNA結(jié)合而抑制轉(zhuǎn)錄。DNA甲基化對(duì)胚胎發(fā)育非常重要，與X染色體失活，基因組印記，特別是腫瘤密切相關(guān)。

10、作為一種遺傳標(biāo)記，人類(lèi)短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）的主要用途有哪幾個(gè)方面？

主要用途①人類(lèi)基因遺傳圖譜的制作。②目的基因篩選和基因診斷。通常目的基因若與STR位點(diǎn)有連鎖關(guān)系, 則其位置與STR位點(diǎn)鄰近, 故通過(guò)對(duì)STR附近區(qū)域克隆測(cè)序, 就可能發(fā)現(xiàn)目的基因。通過(guò)家系和對(duì)照研究, 運(yùn)用連鎖和相關(guān)分析, 可以找到與疾病高度相關(guān)的STR位點(diǎn)。③法醫(yī)學(xué)個(gè)體識(shí)別和親權(quán)鑒定。法醫(yī)案例中, 對(duì)于量極少和降解嚴(yán)重的生物檢材, 通過(guò)PCR進(jìn)行STR位點(diǎn)擴(kuò)增并將幾個(gè)STR 位點(diǎn)聯(lián)合起來(lái)分析, 可得到相當(dāng)高的累積個(gè)體識(shí)別率和父權(quán)排除率。因而STR用于法醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有著廣闊的前景，為司法偵案、破案提供有利的科學(xué)依據(jù)。

11、人類(lèi)單核苷酸的多態(tài)性（SNP）的特點(diǎn)及主要用途有哪幾個(gè)方面？

疾病的連鎖分析與基因的定位：包括復(fù)雜疾病（如骨質(zhì)疏松癥、糖尿病、心血管疾病、精神性紊亂、各種腫瘤等）的基因定位、關(guān)聯(lián)分析，并可用于遺傳病的單倍型診斷。

指導(dǎo)用藥和藥物設(shè)計(jì)：SNP多態(tài)性能充分反映個(gè)體間的遺傳差異。通過(guò)研究遺傳多態(tài)性與個(gè)體對(duì)藥物敏感性或耐受性的相關(guān)性, 可以闡明遺傳因素對(duì)藥物效用的影響, 從而對(duì)醫(yī)生針對(duì)性的用藥和藥物的開(kāi)發(fā)提供指導(dǎo)和依據(jù)。

用于進(jìn)化和種群多樣性的研究：生物界的進(jìn)化及進(jìn)化過(guò)程中物種多樣性的形成與基因組的突變和突變的選擇密切相關(guān), 構(gòu)建整個(gè)基因組的SNP 圖譜對(duì)于直接研究人類(lèi)的起源、進(jìn)化具極大意義。對(duì)比人群之間SNP 圖譜的異同情況可以對(duì)人類(lèi)的起源、遷移等作出估計(jì), 從而理清人類(lèi)進(jìn)化過(guò)程中源與流的問(wèn)題。

12、人類(lèi)基因組研究的主要內(nèi)容是什么？

人類(lèi)基因組研究主要包括兩方面的內(nèi)容：以全基因組測(cè)序?yàn)槟繕?biāo)的結(jié)構(gòu)基因組學(xué)和以基因功能鑒定為目標(biāo)的功能基因組學(xué)，又稱(chēng)后基因組研究。

結(jié)構(gòu)基因組學(xué)代表基因組分析的早期階段，通過(guò)基因作圖、核苷酸序列分析確定基因組成、基因定位的科學(xué)，包括規(guī)?；販y(cè)定蛋白質(zhì)、RNA及其它生物大分子的三維結(jié)構(gòu)等內(nèi)容,以獲得一幅完整的、能夠在細(xì)胞中定位以及在各種生物學(xué)代謝途徑、生理途徑、信號(hào)傳導(dǎo)途徑中全部蛋白質(zhì)在原子水平的三維結(jié)構(gòu)全息圖。功能基因組學(xué)代表基因分析的新階段，是利用結(jié)構(gòu)基因組學(xué)提供的信息研究基因功能，使人們有可能在基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)以致生物體整體水平上理解生命的原理。對(duì)疾病的防治和機(jī)理的闡明有重要應(yīng)用意義。

基因分類(lèi)：A.按功能:1.結(jié)構(gòu)基因---編碼蛋白和酶分子結(jié)構(gòu)（蛋白基因）；2.調(diào)控基因(Regulatory Gene)---調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)基因表達(dá)，包含調(diào)節(jié)基因、操縱基因和啟動(dòng)基因；3.轉(zhuǎn)錄而不翻譯的基因（RNA基因）：rRNA基因→rRNA→核仁形成區(qū)，核糖體組成。tRNA基因→tRNA→轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸。

B.按重要程度: 1.看家基因(House-keeping Gene): 維持細(xì)胞最低限度功能所不可少的基因, 如編碼組蛋白基因、編碼核糖體蛋白基因、線(xiàn)粒體蛋白基因、糖酵解酶的基因等。這類(lèi)基因在所有類(lèi)型的細(xì)胞中都進(jìn)行表達(dá)。2.必需基因(Essential Gene): 突變時(shí)會(huì)引起致死表型的基因.基因表達(dá)的特點(diǎn)：A時(shí)間特異性，單細(xì)胞生物：特定基因表達(dá)嚴(yán)格按特定時(shí)間順序發(fā)生。多細(xì)胞生物：基因表達(dá)在不同的發(fā)育階段嚴(yán)格按特定時(shí)間順序開(kāi)啟或關(guān)閉。又稱(chēng)為階段特異性（Stage specificity）。B, 空間特異性, 在某發(fā)育階段，同一基因在不同組織器官其表達(dá)有差異。又稱(chēng)為細(xì)胞特異性（Cell specificity）

基因表達(dá)的方式: A組成性表達(dá), 某些基因的表達(dá)不受內(nèi)外環(huán)境的影響，在個(gè)體生長(zhǎng)過(guò)程中，幾乎在所有的組織中持續(xù)表達(dá)或變化很小。這些基因一般為看家基因（Housekeeping gene）B, 誘導(dǎo)和阻遏表達(dá), 誘導(dǎo)（Induction）：基因受環(huán)境刺激而開(kāi)啟表達(dá)增強(qiáng)。阻遏（Repression）：基因受環(huán)境刺激而表達(dá)受到抑制和減弱C, 協(xié)調(diào)表達(dá), 在一定控制機(jī)制下，功能相關(guān)的一組基因進(jìn)行協(xié)調(diào)共同表達(dá)

14、敘述原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特征。

在原核生物基因組中只有一個(gè)DNA復(fù)制起點(diǎn)?；蚪MDNA通常是由一條環(huán)狀雙鏈DNA（double stranded DNA，dsDNA）分子組成。基因組DNA與支架蛋白和RNA結(jié)合在一起，以復(fù)合體的形式存在。廣泛存在操縱子結(jié)構(gòu)。操縱子結(jié)構(gòu)是原核生物基因組的功能單位，在原核基因調(diào)控中具有普遍的意義。原核生物的結(jié)構(gòu)基因多數(shù)是單拷貝的并且結(jié)構(gòu)基因中沒(méi)有內(nèi)含子成分。編碼順序一般不重疊。具有編碼同工酶的不同基因?；蚪M中編碼區(qū)所占比例為50﹪，不編碼區(qū)中常常含有基因表達(dá)調(diào)控的序列?；蚪MDNA分子中存在多種功能的識(shí)別區(qū)域，這些區(qū)域經(jīng)常有反向重復(fù)序列存在，并能形成特殊的結(jié)構(gòu)。原核生物基因組存在著可移動(dòng)的DNA序列，這些可移動(dòng)的DNA序列，通過(guò)不同的轉(zhuǎn)移方式發(fā)生基因重組，使生物體更適應(yīng)環(huán)境的變化。

15、簡(jiǎn)述原核生物的類(lèi)核組成。

原核生物與真核生物的主要區(qū)別在細(xì)胞核上。原核生物沒(méi)有典型的細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，基因組DNA位于細(xì)胞中央的核區(qū)，沒(méi)有核膜將其與細(xì)胞質(zhì)隔開(kāi)，但能在蛋白質(zhì)的協(xié)助下，以一定的組織形式盤(pán)曲、折疊包裝起來(lái)，形成類(lèi)核（nucleoid）也稱(chēng)擬核。類(lèi)核的中央部分由RNA和支架蛋白（scaffolding protein）組成，外圍是雙鏈閉環(huán)的超螺旋DNA。在超螺旋結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，DNA 分子再扭結(jié)成許多活結(jié)樣或花瓣樣的放射狀結(jié)構(gòu)的DNA環(huán)。每個(gè)環(huán)形的活結(jié)狀結(jié)構(gòu)代表一個(gè)結(jié)構(gòu)域，在各結(jié)構(gòu)域中DNA呈負(fù)超螺旋狀態(tài)。每個(gè)DNA環(huán)是一個(gè)相對(duì)獨(dú)立的功能區(qū)，可以獨(dú)立完成不同區(qū)域的基因表達(dá)與調(diào)控。在類(lèi)核中80﹪為DNA，其余為RNA 和蛋白質(zhì)。如果用DNA酶處理后可使基因組DNA鏈斷裂；如果用RNA酶或蛋白酶處理類(lèi)核，則類(lèi)核變得松散，不能維持DNA鏈的折疊結(jié)構(gòu)，這表明RNA和蛋白質(zhì)對(duì)維持類(lèi)核分子的折疊以及形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)是必不可少的。

16、簡(jiǎn)述原核生物轉(zhuǎn)座子的類(lèi)型及特點(diǎn)。

⑴插入序列（insertion sequence,IS）長(zhǎng)度約700bp～2 000bp，由一個(gè)轉(zhuǎn)位酶基因及兩側(cè)的反向重復(fù)序列（16bp～41bp）組成。反向重復(fù)序列的對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu)使IS可以雙向插入（正向插入或反向插入）靶位點(diǎn)。并在插入后于兩側(cè)形成一定長(zhǎng)度（3bp～11bp）的順向重復(fù)序列稱(chēng)靶序列（target sequence）IS的轉(zhuǎn)位頻率為10-7／拷貝，即在一個(gè)世代的107細(xì)菌中有1次插入。⑵轉(zhuǎn)座子（transposon,Tn）是一類(lèi)復(fù)雜的轉(zhuǎn)位因子。Tn比IS大，約4500～20000bp，除了攜帶有關(guān)轉(zhuǎn)座的必需基因外，還含有能決定宿主菌遺傳性狀的基因，主要是抗生素和某些藥物的抗性基因，轉(zhuǎn)座子中的轉(zhuǎn)位酶稱(chēng)為轉(zhuǎn)座酶（transposase），其功能是介導(dǎo)轉(zhuǎn)座子從一個(gè)位點(diǎn)轉(zhuǎn)座到另一個(gè)位點(diǎn)，或從一個(gè)復(fù)制子轉(zhuǎn)座到另一個(gè)復(fù)制子，其轉(zhuǎn)座過(guò)程與IS相似。

⑶Mu噬菌體 是一類(lèi)具有轉(zhuǎn)座功能的溫和性噬菌體。溫和性噬菌體有多種，如大腸桿菌λ噬菌體、大腸桿菌Mu-

1、P1和P2噬菌體等。這類(lèi)噬菌體具有整合能力，可以整合到細(xì)菌染色體中去，也稱(chēng)可轉(zhuǎn)座的噬菌體（transposable phage）。當(dāng)它們感染細(xì)菌后，其溶源性整合和裂解周期的復(fù)制均以轉(zhuǎn)座方式進(jìn)行，但轉(zhuǎn)座位點(diǎn)是隨機(jī)的。

17、通過(guò)轉(zhuǎn)座可引起哪些遺傳效應(yīng)？

⑴引起突變 轉(zhuǎn)位可能引起多種基因突變。當(dāng)轉(zhuǎn)位因子插入一個(gè)基因內(nèi)部，會(huì)引起這個(gè)基因的插入失活；當(dāng)插入多順?lè)醋忧岸说幕蛑袝r(shí)，可引起下游的所有基因停止轉(zhuǎn)錄，因?yàn)檗D(zhuǎn)位因子中含ρ依賴(lài)的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)；當(dāng)插入染色體或質(zhì)粒中時(shí)，常引起缺失和倒位突變。⑵引入新的基因 在插入位點(diǎn)上引入新的基因，如含有抗藥基因R質(zhì)粒的轉(zhuǎn)位因子，轉(zhuǎn)位到染色體中時(shí)，可在該部位出現(xiàn)抗藥性基因。若將帶有Amp+R質(zhì)粒的細(xì)菌與不含R質(zhì)粒的帶有Kan+轉(zhuǎn)座子的細(xì)菌進(jìn)行接合，結(jié)果產(chǎn)生了Amp+ Kan+的細(xì)菌，并且能夠在含有氨芐青霉素及卡那霉素的培養(yǎng)板上生長(zhǎng)。經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)位作用，在這種細(xì)菌內(nèi)產(chǎn)生Amp+及Kan+的質(zhì)粒，經(jīng)過(guò)再次接合作用，即可產(chǎn)生含Amp+ Kan+R質(zhì)粒細(xì)菌。

⑶引起生物進(jìn)化 基因重排經(jīng)常發(fā)生，轉(zhuǎn)座作用是基因重排的重要機(jī)理之一，如通過(guò)轉(zhuǎn)座，可將兩個(gè)本來(lái)相隔遙遠(yuǎn)的基因靠攏，從而進(jìn)行協(xié)調(diào)的控制作用，這兩段基因順序經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)座作用連接在一起有可能在進(jìn)化過(guò)程中產(chǎn)生新的蛋白質(zhì)。

18、真核生物染色體基因組的一般特點(diǎn)？

①真核生物基因組遠(yuǎn)大于原核生物基因組，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，基因數(shù)龐大，具有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)；②真核細(xì)胞的基因組DNA都是線(xiàn)狀雙鏈DNA，而不是環(huán)狀雙鏈分子；③基因組中非編碼區(qū)多于編碼區(qū)；④真核基因多為不連續(xù)的斷裂基因，由外顯子和內(nèi)含子鑲嵌而成；⑤存在大量重復(fù)序列。

19、真核生物基因組含有的重復(fù)序列有哪些？

（一）高度重復(fù)序列

重復(fù)頻度>105。根據(jù)衛(wèi)星DNA的長(zhǎng)度，又可分成3種：衛(wèi)星DNA、小衛(wèi)星DNA、微衛(wèi)星DNA。

（二）中度重復(fù)序列

這類(lèi)重復(fù)序列主要由比較大的片段（由100bp到幾千bp）串聯(lián)重復(fù)組成，分散在整個(gè)基因組中，重復(fù)頻度不等，如Alu家族、rRNA、tRNA和組蛋白等。

20、簡(jiǎn)述質(zhì)粒的概念和特性，常用的質(zhì)粒載體有哪幾種？

質(zhì)粒為細(xì)菌染色體外一些雙鏈、共價(jià)閉合環(huán)狀DNA分子，是能夠進(jìn)行獨(dú)立復(fù)制并保持穩(wěn)定遺傳的復(fù)制子。質(zhì)粒具有復(fù)制和控制機(jī)構(gòu)，能夠在細(xì)胞質(zhì)中獨(dú)立自主的進(jìn)行自身復(fù)制，并使子代細(xì)胞保持它們恒定的拷貝數(shù)。

質(zhì)粒一般具有以下特性：①自主復(fù)制性，它能獨(dú)立于宿主細(xì)胞的染色體DNA而自主復(fù)制；②質(zhì)粒不相容性；③可擴(kuò)增性；④可轉(zhuǎn)移性。

理想質(zhì)粒載體應(yīng)具備①具有松弛型復(fù)制子；②在復(fù)制子外存在幾個(gè)單一的酶切位點(diǎn)；③具有插入失活的篩選標(biāo)記；④分子量相對(duì)較小，有較高的拷貝數(shù)。

常見(jiàn)的質(zhì)粒載體有：pBR322質(zhì)粒、pUC質(zhì)粒載體、pGEM系列載體等。

21、試述舉2種質(zhì)粒DNA提取的方法及應(yīng)用。

[答案] 質(zhì)粒DNA提取的方法包括堿裂解法、煮沸裂解法和SDS裂解法。

1）堿裂解法：在NaOH存在的強(qiáng)堿性（pH12.0～14.0）的條件下，用強(qiáng)陽(yáng)離子去垢劑SDS破壞細(xì)胞壁和裂解細(xì)胞，并使宿主細(xì)胞的蛋白質(zhì)與染色體DNA發(fā)生變性，釋放出質(zhì)粒DNA。它是一種適用范圍很廣的方法，能從所有的大腸桿菌（E.coli）菌株中分離出質(zhì)粒DNA，制備量可大可小。

2）煮沸裂解法：是將細(xì)菌懸浮于含Triton X-100和溶菌酶的緩沖液中，Triton X-100和溶菌酶能破壞細(xì)胞壁，再用沸水浴裂解細(xì)胞，使宿主細(xì)胞的蛋白質(zhì)與染色體DNA發(fā)生變性。對(duì)CCC質(zhì)粒DNA因結(jié)構(gòu)緊密不會(huì)解鏈，當(dāng)溫度下降后，CCC質(zhì)粒DNA可重新回復(fù)其超螺旋結(jié)構(gòu)，通過(guò)離心去除變性的蛋白質(zhì)和染色體DNA，然后回收上清液中的質(zhì)粒DNA。本法只能用于小質(zhì)粒DNA（小于15kb）的小量或大量制備，適用于大多數(shù)從大腸桿菌（E.coli）菌株中分離出質(zhì)粒DNA。

3）SDS裂解法：它是將細(xì)菌懸浮于等滲的蔗糖溶液中，用溶菌酶和EDTA處理以破壞細(xì)胞壁，再用SDS裂解去壁細(xì)菌，從而溫和地釋放出質(zhì)粒DNA到等滲溶液中，然后用酚/氯仿抽提。適用于大質(zhì)粒DNA的提取。

22、簡(jiǎn)述哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因組DNA抽提的主要方法有哪幾種？ [本題答案]哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因組DNA抽提的主要方法有： 酚提取法、甲酰胺解聚法、玻棒纏繞法和異丙醇沉淀法、磁珠吸附法等。

23、簡(jiǎn)述從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的主要方法有哪幾種？

[本題答案] 從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的方法主要包括 DEAE-纖維素膜插片電泳法、電泳洗脫法、低熔點(diǎn)瓊脂糖凝膠挖塊回收法、冷凍擠壓法及現(xiàn)在有試劑盒供應(yīng)的以硅為基礎(chǔ)的純化系統(tǒng)等。

24、簡(jiǎn)述磁性球珠分離法分離mRNA的原理。

[本題答案]磁性球珠分離法是基于寡聚(dT)與poly(A)的互補(bǔ)配對(duì)特性、用生物素標(biāo)記寡聚(dT)，通過(guò)寡聚(dT)與mRNA 3’端poly(A)形成雜交體，這種雜交非常迅速，在1－2分鐘內(nèi)就可完成，可有效地除去rRNA, tRNA以及其他RNA,而后通過(guò)生物素與鏈親和素順磁性磁珠之間的相互作用來(lái)捕獲這些雜交物而達(dá)到分離純化。

25、描述質(zhì)粒DNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。

多數(shù)細(xì)菌來(lái)源的質(zhì)粒核酸是環(huán)狀雙鏈DNA分子，沒(méi)有游離的末端，每條鏈上的核苷酸通過(guò)共價(jià)鍵頭尾相連。質(zhì)粒DNA分子通常具有三種不同的構(gòu)型。當(dāng)其兩條核苷酸鏈均保持完整環(huán)形結(jié)構(gòu)時(shí)，為共價(jià)閉合環(huán)狀DNA分子，這樣的DNA常以超螺旋狀態(tài)存在；如果兩條鏈中只有一條鏈保持完整環(huán)形結(jié)構(gòu)，另一條鏈出現(xiàn)一至數(shù)個(gè)缺口時(shí)，為半開(kāi)環(huán)DNA；若兩條鏈均有缺口并發(fā)生斷裂則成為線(xiàn)性DNA分子。

26、試述質(zhì)粒的類(lèi)型有哪些？

根據(jù)細(xì)菌染色體對(duì)質(zhì)粒復(fù)制的控制程度是否嚴(yán)格可將質(zhì)粒分為：嚴(yán)緊型質(zhì)粒和松弛型質(zhì)粒。按轉(zhuǎn)移方式分為：接合型質(zhì)粒、可移動(dòng)型質(zhì)粒、自傳遞型質(zhì)粒。按質(zhì)粒大小分為：小型質(zhì)粒、大型質(zhì)粒。按質(zhì)粒的宿主范圍分為：窄宿主譜型質(zhì)粒、廣宿主譜型質(zhì)粒。按質(zhì)粒的功能分為：F質(zhì)粒、R質(zhì)粒、Col質(zhì)粒。

27、線(xiàn)粒體DNA與核DNA有哪些不同之處？

（一）非孟德?tīng)柕哪赶颠z傳。mtDNA 因位于細(xì)胞質(zhì)中,表現(xiàn)為嚴(yán)格的母性遺傳, 不服從孟德?tīng)栠z傳，絕大部分mtDNA 是通過(guò)卵細(xì)胞遺傳。

（二）高突變率。mt DNA突變率約為nDNA的10～100倍，此外mtDNA 與有毒物質(zhì)的結(jié)合頻率比核DNA 高數(shù)倍至數(shù)十倍。

（三）異質(zhì)性和復(fù)制分離。異質(zhì)性即突變mtDNA與野生型mtDNA 以不同的比例共存于一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的現(xiàn)象。復(fù)制分離即在細(xì)胞分裂的復(fù)制過(guò)程中,突變的和野生型的mtDNA 隨機(jī)進(jìn)入子細(xì)胞的過(guò)程，復(fù)制分離的結(jié)果使突變mtDNA 雜合體向突變純合或野生純合方向轉(zhuǎn)變,但因突變復(fù)制具有優(yōu)勢(shì),故易產(chǎn)生突變積累，突變積累的程度不同,突變mtDNA 在群體中的多態(tài)性程度也不同。

（四）閾值效應(yīng)。每個(gè)細(xì)胞的mt DNA有多種拷貝，而一個(gè)細(xì)胞mt DNA編碼基因的表現(xiàn)型依賴(lài)于一個(gè)細(xì)胞內(nèi)突變型mt DNA和野生型mt DNA的相對(duì)比例，mtDNA 突變導(dǎo)致氧化磷酸化水平降低,當(dāng)能量降低到維持組織正常功能所需能量的最低值時(shí)即達(dá)到了mtDNA表達(dá)的能量閾值，可引起某組織或器官的功能異常而出現(xiàn)臨床癥狀，這就是閾值效應(yīng)。

（五）半自主復(fù)制與協(xié)同作用。mt DNA雖有自我復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和編碼功能，但該過(guò)程還需要數(shù)十種nDNA編碼的酶參加，因此mt DNA基因的表達(dá)同時(shí)也受nDNA的制約，兩者具有協(xié)同作用。

28、何謂線(xiàn)粒體??？簡(jiǎn)述線(xiàn)粒體病的遺傳學(xué)分類(lèi)。

線(xiàn)粒體?。╩itochondriopathy）是指由于線(xiàn)粒體呼吸鏈功能不良所導(dǎo)致的臨床表現(xiàn)多樣化的一組疾病。臨床表現(xiàn)常見(jiàn)為眼瞼下垂、外眼肌麻痹、視神經(jīng)萎縮、神經(jīng)性耳聾、痙攣或驚厥、癡呆、偏頭痛、類(lèi)卒中樣發(fā)作等。

從核基因缺陷和線(xiàn)粒體基因缺陷的角度對(duì)線(xiàn)粒體病進(jìn)行遺傳學(xué)分類(lèi)可分為三種類(lèi)型：點(diǎn)突變，mtDNA的大規(guī)模缺失或插入和源于核DNA缺陷引起mtDNA缺失。

29、病毒的基本結(jié)構(gòu)成份主要有哪些？

毒沒(méi)有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，由四種基本結(jié)構(gòu)成份組成：①由一種核酸(DNA或RNA)組成的病毒基因組。②由病毒基因組編碼的衣殼蛋白組成的衣殼。③來(lái)源于宿主細(xì)胞質(zhì)膜系統(tǒng)（細(xì)胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜或高爾基體膜）的包膜。④病毒顆粒中的其它內(nèi)容物，包括酶、核酸結(jié)合蛋白及金屬離子等。30、國(guó)際病毒分類(lèi)委員會(huì)（ICTV）將病毒分成哪幾類(lèi)？ 國(guó)際病毒分類(lèi)委員會(huì)（ICTV）制定了《國(guó)際病毒分類(lèi)與命名原則》。根據(jù)病毒的基因組組成及復(fù)制方式，可將病毒分為如下幾類(lèi)：

DNA病毒（DNA Viruses）

第一組：雙鏈DNA病毒（Group I: dsDNA Viruses）第二組：?jiǎn)捂淒NA病毒（Group II: ssDNA Viruses）RNA病毒（RNA viruses）

第三組：雙鏈RNA病毒（Group III: dsRNA Viruses）第四組：正鏈RNA病毒（Group IV:(+)ssRNA Viruses）第五組：負(fù)鏈RNA病毒（Group V:(-)ssRNA Viruses）

DNA與RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒（DNA and RNA Reverse Transcribing Viruses）

第六組：RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒（Group VI: RNA Reverse Transcribing Viruses）第七組：DNA逆轉(zhuǎn)錄病毒（Group VII: DNA Reverse Transcribing Viruses）亞病毒因子（Subviral Agents）

衛(wèi)星（Satellites）類(lèi)病毒（Viroids）朊病毒（Prions）

31、簡(jiǎn)述長(zhǎng)病毒末端重復(fù)序列的特點(diǎn)和作用。

逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組RNA在逆轉(zhuǎn)錄后生成的雙鏈DNA中，兩端有長(zhǎng)末端重復(fù)序列（long terminal repeat，LTR）結(jié)構(gòu)。LTR在結(jié)構(gòu)與功能上與上述重復(fù)序列不同。LTR中的重復(fù)序列只占一部分，另外還包括單一序列。5＇端的LTR包含許多特定的基因表達(dá)調(diào)控區(qū)域，是一組真核生物增強(qiáng)子和啟動(dòng)子單位，而3＇端的LTR具有轉(zhuǎn)錄終止的作用。另外，逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組利用LTR中的重復(fù)序列形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，在整合酶作用下整合入宿主細(xì)胞基因組內(nèi)。53蛋白質(zhì)組學(xué)的研究特點(diǎn)有哪些？

① 整體性 ② 揭示生命的動(dòng)態(tài)性過(guò)程 ③ 體現(xiàn)生命現(xiàn)象的復(fù)雜性

32、等電聚焦凝膠電泳的原理是什么？

依據(jù)蛋白質(zhì)分子的凈電荷或等電點(diǎn)進(jìn)行分離的技術(shù)。在等電聚焦過(guò)程中，電場(chǎng)所采用的載體兩性電解質(zhì)含有脂肪族多氨基多羧酸，可在電場(chǎng)中形成正極為酸性，負(fù)極為堿性的連續(xù)pH梯度，蛋白質(zhì)分子在一個(gè)載體兩性電解質(zhì)(ampholyte)形成的連續(xù)而穩(wěn)定的線(xiàn)性pH梯度中電泳，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)遷移到其等電點(diǎn)位置時(shí)，凈電荷為零，在電場(chǎng)中不再移動(dòng)，因此可將各種不同等電點(diǎn)性質(zhì)的蛋白質(zhì)分離開(kāi)來(lái)

33、簡(jiǎn)述酵母雙雜交系統(tǒng)的優(yōu)缺點(diǎn)。

酵母雙雜交系統(tǒng)所具有的優(yōu)點(diǎn)：①蛋白質(zhì)作為被研究的對(duì)象不用被純化；②檢測(cè)在活細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行，可以在一定程度上反映體內(nèi)（細(xì)胞內(nèi)）的真實(shí)情況；③由于這一系統(tǒng)可以反映基因表達(dá)產(chǎn)物的累積效應(yīng)，因而可檢測(cè)存在于蛋白質(zhì)之間微弱或短暫的相互作用；④采用不同組織、器官、細(xì)胞類(lèi)型和分化時(shí)期材料構(gòu)建cDNA文庫(kù)，可用于分析多種不同功能的蛋白。

局限性：①雙雜交系統(tǒng)分析蛋白間的相互作用定位于細(xì)胞核內(nèi)，而許多蛋白間的相互作用依賴(lài)于翻譯后加工如糖基化、二硫鍵形成等，這些反應(yīng)在核內(nèi)無(wú)法進(jìn)行。②由于某些蛋白本身具有激活轉(zhuǎn)錄功能或在酵母中表達(dá)時(shí)發(fā)揮轉(zhuǎn)錄激活作用，從而引起報(bào)告基因的表達(dá)，產(chǎn)生“假陽(yáng)性”結(jié)果。③雙雜交只是反映蛋白質(zhì)間能發(fā)生作用的可能性，這種可能還必須經(jīng)過(guò)其他實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，尤其要與生理功能研究相結(jié)合，否則可能會(huì)誤入歧途。

34、蛋白質(zhì)間互作鑒定：

（1）蛋白質(zhì)亞基的聚合：線(xiàn)性、環(huán)狀、螺旋、球狀、交叉聚合（2）分子識(shí)別：抗原與抗體、配體與受體、酶與底物（3）分子的自我裝配：核糖體、細(xì)菌鞭毛、病毒的自動(dòng)裝配

（4）多酶復(fù)合體：丙酮酸脫氫酶復(fù)合體包括丙酮酸脫氫酶、二氫硫辛酸轉(zhuǎn)乙?；负投淞蛐了崦摎涿浮?/p>

蛋白質(zhì)間作用力：（1）氫鍵：肽鍵之間，主－側(cè)、側(cè)－側(cè)鏈之間（2）范德華力：取向力、誘導(dǎo)力、色散力

（3）疏水鍵：非極性基團(tuán)為了避開(kāi)水相二群集在一起的作用力。（4）離子鍵（鹽鍵）：正負(fù)離子之間的靜電引力所形成的化學(xué)鍵。

蛋白質(zhì)相互作用的研究方法: 體外：（1）肽蛋白質(zhì)親和層析；（2）親和印跡；（3）免疫沉淀；（4）交聯(lián)等。

體內(nèi)：（1）酵母雙雜交系統(tǒng)；（2）噬菌體展示技術(shù)；（3）生物傳感芯片質(zhì)譜；（4）蛋白質(zhì)定點(diǎn)誘變。

蛋白組學(xué)研究?jī)?nèi)容：1.蛋白質(zhì)分離；2.蛋白質(zhì)的鑒定；3.蛋白質(zhì)-核酸間相互作用；4.蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用。蛋白組學(xué)研究的特點(diǎn)：1）整體性和規(guī)?；?；2）動(dòng)態(tài)性和網(wǎng)絡(luò)化；3）復(fù)雜性和綜合技術(shù)化；

蛋白質(zhì)組研究常用技術(shù)：

1）蛋白質(zhì)分離技術(shù)（電泳和層析技術(shù)）；2）蛋白質(zhì)檢測(cè)與圖像分析以及鑒定技術(shù)； 3）蛋白質(zhì)互作研究技術(shù)；4）生物信息學(xué)分析技術(shù)。

35、蛋白質(zhì)組學(xué)的研究?jī)?nèi)容有哪些？

蛋白質(zhì)組學(xué)的研究包括兩個(gè)方面：一是針對(duì)蛋白質(zhì)表達(dá)模式的研究，一是在蛋白質(zhì)功能模式方面的深入分析。

36、PCR，聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase chain reaction)：是一種模擬體內(nèi)天然DNA復(fù)制過(guò)程的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)，是基因擴(kuò)增技術(shù)的一次重大革新。

PCR原理：利用DNA聚合酶催化一對(duì)引物間的特定DNA片段在體外實(shí)現(xiàn)快速、大量擴(kuò)增的方法，也稱(chēng)：無(wú)細(xì)胞克隆技術(shù)或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增法。PCR標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系（五要素,）

（1）DNA模板(template)：靶基因

（2）原料：dNTPs（dATP，dGTP，dCTP，dTTP）

（3）催化酶：耐高溫的DNA聚合酶（如：Taq酶）

（4）一對(duì)引物（primer）：擴(kuò)增序列的決定者其與靶基因兩側(cè)序列互補(bǔ)

（5）Mg2+ 和 Buffer PCR反應(yīng)過(guò)程----三步曲

1.高溫變性：在高溫（95℃）下，待擴(kuò)增的靶DNA雙鏈?zhǔn)軣嶙冃猿蔀閮蓷l單鏈DNA模板

2.低溫退火：在低溫（37～55℃）下，兩條人工合成的寡核苷酸引物分別與互補(bǔ)的單鏈DNA模板結(jié)合，形成部分雙鏈

3.適溫延伸：在耐熱DNA聚合酶的最適溫度（72℃）下，以引物的3’端為合成的起點(diǎn)，以單核苷酸為原料，沿模板以5’→3’方向延伸，合成DNA新鏈。

37、PCR衍生技術(shù)(pcr技術(shù)有哪些)：逆轉(zhuǎn)錄PCR、反向PCR、巢式PCR、標(biāo)記PCR、多重PCR、原位PCR、不對(duì)稱(chēng)PCR、定量PCR、錨定PCR

38、如何提高PCR擴(kuò)增的特異性？

① 升高退火溫度可增加引物與模板結(jié)合的特異性

② 縮短退火和延伸時(shí)間，可減少錯(cuò)誤引發(fā)及多余的DNA聚合酶分子參與酶促延伸的機(jī)會(huì) ③降低引物和酶的濃度也可以減少錯(cuò)誤引發(fā)，尤其是能減少引物二聚體的引發(fā) ④ 改變Mg2+的濃度可進(jìn)一步提高擴(kuò)增的特異性 ⑤ 引物設(shè)計(jì)的特異性 ⑥ 減少循環(huán)次數(shù)

⑦ 熱啟動(dòng)（Hot Start）：即首先將模板變性，然后在較高溫度時(shí)加入Taq DNA聚合酶、引物及MgCl2等一些重要成分，這樣使得引物在較高溫度下與模板退火，提高了反應(yīng)的嚴(yán)格性，使擴(kuò)增更特異 ⑧ 采用兩對(duì)引物即外引物和內(nèi)引物進(jìn)行擴(kuò)增來(lái)提高擴(kuò)增的特異性。

39、PCR檢測(cè)技術(shù)有何臨床應(yīng)用：(1)PCR在病原微生物的檢測(cè)中的應(yīng)用；（2）PCR在遺傳病中的應(yīng)用；（3）PCR在腫瘤中的應(yīng)用；（4）其它方面的應(yīng)用：PCR技術(shù)除用于臨床診斷和治療外，還可用于DNA指紋、個(gè)體識(shí)別、親子關(guān)系識(shí)別、法醫(yī)物證等。40、影響PCR反應(yīng)的因素有哪些？

PCR反應(yīng)體系包含DNA模板、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、dNTP及含有必需離子的反應(yīng)緩沖液，這些因素都對(duì)PCR反應(yīng)產(chǎn)生影響。

41、影響PCR反應(yīng)的因素有哪些？

PCR反應(yīng)體系包含DNA模板、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、dNTP及含有必需離子的反應(yīng)緩沖液，這些因素都對(duì)PCR反應(yīng)產(chǎn)生影響。

42、簡(jiǎn)述bDNA信號(hào)放大系統(tǒng)的原理。

分枝DNA是人工合成的帶有側(cè)鏈的DNA片段，在每個(gè)側(cè)鏈上都可以標(biāo)記可被激發(fā)的標(biāo)記物。以bDNA為基礎(chǔ)建立的連續(xù)放大DNA信號(hào)以檢測(cè)DNA的技術(shù)稱(chēng)為分枝DNA信號(hào)放大系統(tǒng)。

bDNA信號(hào)放大系統(tǒng)包括四種雜交探針，即目標(biāo)探針、前放大體、放大體和標(biāo)記探針。首先用親和素包被微孔，加入目標(biāo)探針，該組探針能與等檢核酸靶序列上不同區(qū)域互補(bǔ)，其5′端用生物素標(biāo)記，能與微孔中的親和素高度親和結(jié)合；再向微孔中加入待測(cè)標(biāo)本，目標(biāo)核酸與固定于微孔中的目標(biāo)探針結(jié)合；再加入前放大體，該組探針的一段能與目標(biāo)核酸的不同區(qū)域互補(bǔ)結(jié)合，另一段與放大體（即分枝DNA）的主鏈部分的序列互補(bǔ)結(jié)合，分枝DNA由主鏈和數(shù)十根寡核苷酸組成，每個(gè)分枝上都有標(biāo)記探針的雜交位點(diǎn)，由酶標(biāo)寡核苷酸組成的標(biāo)記探針與bDNA上的互補(bǔ)序列結(jié)合，加入底物后最后經(jīng)化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀檢測(cè)。利用bDNA信號(hào)放大系統(tǒng)可在每個(gè)靶序列上結(jié)合60～300個(gè)酶分子，而且所有雜交反應(yīng)同時(shí)進(jìn)行，觀察到的信號(hào)與靶DNA的量成正比，可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)將靶DNA定量。

43、簡(jiǎn)述鏈末端終止法測(cè)定 DNA 序列的原理

答：利用DNA聚合酶，以待測(cè)單鏈DNA為模板，以dNTP為底物，設(shè)立四種相互獨(dú)立的測(cè)序反應(yīng)體系，在每個(gè)反應(yīng)體系中加入不同的雙脫氧核苷三磷酸（dideoxyribonucleoside triphosphate，ddNTP）作為鏈延伸終止劑，在測(cè)序引物引導(dǎo)下，按照堿基配對(duì)原則，每個(gè)反應(yīng)體系中合成一系列長(zhǎng)短不一的引物延伸鏈，通過(guò)高分辨率的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，放射自顯影檢測(cè)后，從凝膠底部到頂部按5′→3′方向讀出新合成鏈序列，由此推知待測(cè)模板鏈的序列。

44、簡(jiǎn)述化學(xué)法測(cè)定 DNA序列的基本原理

答：化學(xué)法是對(duì)待測(cè)DNA進(jìn)行化學(xué)降解。在化學(xué)法的測(cè)序系統(tǒng)中，先對(duì)待測(cè)DNA末端進(jìn)行放射性標(biāo)記，然后分成4組或5組互為獨(dú)立的化學(xué)反應(yīng)體系，每一組用不同的化學(xué)試劑特異地針對(duì)某一種或某一類(lèi)堿基進(jìn)行化學(xué)切割，通過(guò)化學(xué)降解后產(chǎn)生長(zhǎng)短不一的DNA片段，其長(zhǎng)度取決于改組反應(yīng)所針對(duì)的堿基在待測(cè)DNA片斷中的位置，將各組反應(yīng)產(chǎn)物通過(guò)高分辨率的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，放射自顯影檢測(cè)后直接識(shí)讀待測(cè)DNA的序列。

45、Sanger雙脫氧鏈終止法,全稱(chēng)：雙脫氧鏈末端合成終止法

原理：利用DNA聚合酶，以待測(cè)單鏈DNA為模板，以dNTP為底物，設(shè)立4種互相獨(dú)立的測(cè)序反應(yīng)體系，在每個(gè)反應(yīng)體系中加入不同的雙脫氧核苷酸三磷酸（ddNTP）作為鏈延終止劑，在測(cè)序引物引導(dǎo)下，按照堿基配對(duì)原則，每個(gè)反應(yīng)體系中合成一系列長(zhǎng)短不一的引物延伸鏈，通過(guò)高分辨率的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，放射自顯影檢測(cè)后，從凝膠底部到頂部按5’到3’方向讀出新合成鏈序列，由此推知待測(cè)模板鏈的序列。每個(gè)測(cè)序反應(yīng)體系的組成：1.DNA聚合酶；2.單鏈DNA模板（待測(cè)片段）；3.帶有3-OH末端的單鏈寡核苷酸引物；4.Mg2+；5.原料-dNTPs(dATP,dGTP,dCTP和dTTP)；6.終止劑-ddNTPs(ddATP,ddGTP,ddCTP和ddTTP)測(cè)序體系的關(guān)鍵成分：（1）鏈終止劑，2’，3’-二脫氧核糖核苷酸（ddNTPs)（2）用于測(cè)序的變性聚丙烯酰胺凝膠（PAGE)膠長(zhǎng)40cm，厚度均勻；4-8%丙烯酰胺；7mol/L尿素（3）模板，即待測(cè)序的DNA片段（4）引物。酶促測(cè)序反應(yīng)中，利用一個(gè)與模板特定序列互補(bǔ)的合成寡核苷酸作為DNA合成的引物（5）DNA聚合酶（6）放射性同位素標(biāo)記的dNTP：α-35S-dNTP 焦磷酸測(cè)序技術(shù)（PSQ)：在以靶DNA鏈為模板指導(dǎo)核酸合成的過(guò)程中，將釋放的可見(jiàn)光作為檢測(cè)信號(hào)，從而對(duì)靶DNA鏈進(jìn)行實(shí)時(shí)測(cè)序的方法，是一種合成測(cè)序技術(shù)。原理：同一反應(yīng)體系中由四種酶催化的級(jí)聯(lián)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，首先讓測(cè)序引物與待測(cè)模板結(jié)合成雜交體，在每一輪測(cè)序反應(yīng)中，只加入一種dNTP，若該dNTP與模板配對(duì)，聚合酶就可以將其摻入到引物鏈中，并釋放出等摩爾的焦磷酸基團(tuán)（PPi），PPi最終轉(zhuǎn)化為可檢測(cè)的光信號(hào)，并由Pyrogram TM 轉(zhuǎn)化為一個(gè)峰值，每個(gè)峰值的高度與反應(yīng)中摻入的核苷酸數(shù)目成正比，隨后，加入下一種dNTP，繼續(xù)DNA鏈的合成。產(chǎn)生的熒光信號(hào)自動(dòng)傳入分析系統(tǒng)，直接測(cè)讀靶DNA序列。特點(diǎn)：1.無(wú)需電泳，也無(wú)需熒光標(biāo)記，操作極為簡(jiǎn)便，具快速、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)和實(shí)時(shí)；2.閱讀能力已從100bp至400bp ；3.該技術(shù)具有多種不同的用途。

46、簡(jiǎn)述哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因組DNA抽提的主要方法有哪幾種？

哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因組DNA抽提的主要方法有： 酚提取法、甲酰胺解聚法、玻棒纏繞法和異丙醇沉淀法、磁珠吸附法等。

47、簡(jiǎn)述重組DNA技術(shù)的原理及技術(shù)。

重組DNA是在體外利用限制性?xún)?nèi)切酶，將不同來(lái)源的DNA分子進(jìn)行特異的切割，獲得的目的基因或DNA片段與載體連接，從而組成一個(gè)新的DNA分子。重組的DNA分子能夠通過(guò)一定的方式進(jìn)入相應(yīng)的宿主細(xì)胞，并在宿主細(xì)胞中進(jìn)行無(wú)性繁殖，獲得大量的目的基因或DNA片段。經(jīng)重組的DNA分子能在宿主細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)，獲得相應(yīng)的蛋白質(zhì)。

大致步驟包括：①目的基因的獲??；②載體的選擇；③目的基因與運(yùn)載體連接成重組 DNA；④重組DNA導(dǎo)入受種細(xì)胞；⑤重組體的篩選

49、簡(jiǎn)述黏性末端DNA重組體的構(gòu)建過(guò)程。

目的基因和載體可由同一種限制酶切割后產(chǎn)生，或由不同的限制酶切割形成互補(bǔ)黏性末端，經(jīng)退火，彼此間很容易按堿基配對(duì)原則形成氫鍵。然后由DNA連接酶催化連接接頭處的缺口，形成重組質(zhì)粒。載體DNA在限制酶切割后，用堿性磷酸酶處理，除去5’端磷酸基，以避免載體DNA自身環(huán)化。50、舉例說(shuō)出重組DNA技術(shù)在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用。

可以利用重組DNA技術(shù)探明致病基因的結(jié)構(gòu)和功能，了解其致病機(jī)制；開(kāi)發(fā)基因工程藥物和疫苗用于臨床；建立基因診斷、治療技術(shù)，為疾病的預(yù)防、治療提供新方法、新技術(shù)。具體可用于基因診斷：基因診斷是從基因水平上檢測(cè)人類(lèi)遺傳性疾病的基因缺陷；基因治療：是指將人的正?；蚧蛴兄委熥饔玫幕蛲ㄟ^(guò)載體導(dǎo)入人體靶細(xì)胞取代靶細(xì)胞中的缺陷基因，從而達(dá)到治療疾病目的的方法；基因工程藥物、疫苗和抗體的研究和制備；利用基因敲除或轉(zhuǎn)基因技術(shù)可改造生物、培育新的生物品種或用于藥物篩選和新藥評(píng)價(jià)等。

51、基因芯片的主要類(lèi)型及其特點(diǎn)（1）從支持物來(lái)分 ①薄膜型：聚丙烯膜、硝酸纖維素膜和尼龍膜②玻片型：生產(chǎn)此類(lèi)產(chǎn)品的公司 如 Affimetrix（2）從點(diǎn)陣的制備方法來(lái)分 ①原位合成型（In Situ Synthesis）②合成點(diǎn)樣型（off-chip synthesis）（3）根據(jù)探針片段長(zhǎng)度分 ①Oligo-Chip：約8~25nt，常用于基因類(lèi)型的分析，如突變、正常變異（多態(tài)性）和測(cè)序②cDNA-Chip：<2000nt，常用于基因表達(dá)和差異表達(dá)分析（兩種或以上相關(guān)樣本）③Genomic Chip：>5000nt，基因組結(jié)構(gòu)分析（4）根據(jù)用途分：基因變異檢測(cè)芯片表達(dá)譜芯片功能基因芯片.52、生物芯片：采用平面微細(xì)加工技術(shù)（光導(dǎo)原位合成或微量點(diǎn)樣等）將大量生物樣品（核酸、多肽、細(xì)胞、組織切片等）有序地固化于支持物表面（玻片、硅片、尼龍膜等）由此組成的密集二維生物樣品的微陣列。原理：分子間特異的相互作用

生物芯片技術(shù)的特點(diǎn)：1）高度交叉的綜合性新技術(shù)；2）高度集成性、微型化和連續(xù)化；3）高通量；4）通過(guò)設(shè)計(jì)不同的探針陣列、使用特定的分析方法，可使該技術(shù)具有多種不同的應(yīng)用價(jià)值。

基因芯片：

1）基因芯片：有序地、高密度地排列著大量的基因片段（probe)的載體(玻璃片或纖維膜等)。2）基因芯片技術(shù)：將大量核酸探針?lè)肿庸潭ㄓ谥С治锷?，?biāo)記的樣品分子按堿基互補(bǔ)原則與探針進(jìn)行雜交，通過(guò)檢測(cè)雜交信號(hào)分布和強(qiáng)度、進(jìn)而獲取關(guān)于樣品分子的序列和數(shù)量的信息，是高通量研究基因表達(dá)、突變等的革命性技術(shù)?；蛐酒瑱z測(cè)的原理和步驟：

原理：將大量探針?lè)肿庸潭ㄓ谥С治锷?，然后與標(biāo)記的待測(cè)樣品進(jìn)行雜交，通過(guò)檢測(cè)雜交信號(hào)的分布和強(qiáng)度，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品中基因信息的定性和定量分析。

基本步驟：

1.芯片制備。2.靶核酸制備（樣品提取純化、擴(kuò)增和標(biāo)記）3.靶核酸與探針（芯片）雜交 4.雜交結(jié)果的掃描5.圖像分析和數(shù)據(jù)處理

基因芯片的特點(diǎn)：

1.微型化和自動(dòng)化；現(xiàn)有芯片面積：最大525cm２,最小1cm２樣品DNA的用量：5nl/陣點(diǎn) 雜交和洗片等過(guò)程自動(dòng)化,工作效率極高。2.高度平行性；實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的樣品等都在同一張芯片上同時(shí)進(jìn)行雜交分析,結(jié)果的可比性好。

3.巨大的信息產(chǎn)出率；芯片上各點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的基因或其表達(dá)的定性（量）分析、差異表達(dá)分析等。4.高度敏感性和專(zhuān)一性；能可靠并準(zhǔn)確檢測(cè)出10pgDNA/μL樣品。5.可反復(fù)使用；一張由尼龍膜制作的微陣列，可以重復(fù)雜交使用多達(dá)20次。

53、簡(jiǎn)述蛋白芯片的原理及應(yīng)用。

蛋白質(zhì)芯片的基本原理是采用原位合成、機(jī)械點(diǎn)樣或共價(jià)結(jié)合的等方法將多肽、蛋白、酶、抗原、抗體固定于固相介質(zhì)上形成的生物分子點(diǎn)陣，在待分析樣品中的生物分子與蛋白質(zhì)芯片的探針?lè)肿影l(fā)生雜交或相互作用或其他分離方式分離后，利用激光共聚焦顯微掃描儀對(duì)雜交信號(hào)進(jìn)行高通量檢測(cè)和分析。蛋白質(zhì)芯片是將整個(gè)蛋白質(zhì)水平的相關(guān)生化分析過(guò)程集成于芯片表面，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)多肽、蛋白質(zhì)及其他生物成份進(jìn)行高通量檢測(cè)。

蛋白質(zhì)芯片技術(shù)是一種快捷、高效、高通量、并行、微型化和自動(dòng)化的蛋白質(zhì)分析技術(shù)，適用于分析包括組織、細(xì)胞系、體液在內(nèi)的多種生物樣品能分析包含針對(duì)信號(hào)傳導(dǎo)、癌癥、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞結(jié)構(gòu)、凋亡和神經(jīng)生物學(xué)等廣泛的生物功能的相關(guān)蛋白，靈敏度高達(dá)pg/ml。

54、舉例說(shuō)明基因芯片在臨床診斷中的應(yīng)用。

基因芯片作為一項(xiàng)現(xiàn)代化的診斷新技術(shù)在感染性疾病、遺傳性疾病的診斷和耐藥性檢測(cè)等方面已顯示出良好的應(yīng)用前景。下面舉例說(shuō)明基因芯片在疾病診斷的應(yīng)用。

（1）感染性疾病的診斷。性傳播疾病、肝炎等。

（2）遺傳性疾病的診斷。地中海貧血、血友病、婚前檢查等。（3）耐藥性檢測(cè)。結(jié)核分支桿菌耐藥性檢測(cè)芯片等。

55、試述基因芯片的工作原理及制備。

基因芯片技術(shù)是建立在基因探針和雜交測(cè)序技術(shù)上的一種高效、快速的核酸序列分析手段。它將大量探針?lè)肿庸潭ㄓ谥С治锷?，然后與標(biāo)記的樣品進(jìn)行雜交，通過(guò)檢測(cè)雜交信號(hào)的強(qiáng)度及分布來(lái)進(jìn)行分析。在一塊1cm2大小的基因芯片上，根據(jù)需要可固定數(shù)以千計(jì)甚至萬(wàn)計(jì)的基因，以此形成一個(gè)密集的基因方陣，實(shí)現(xiàn)對(duì)千萬(wàn)個(gè)基因的同步檢測(cè)?；蛐酒夹g(shù)主要包括四個(gè)主要步驟：芯片制備、樣品制備、雜交反應(yīng)和信號(hào)檢測(cè)以及結(jié)果分析。

56、試述生物芯片的種類(lèi)及主要功能。

生物芯片根據(jù)其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，可以將生物芯片分為微陣列芯片和微流體芯片兩個(gè)主要類(lèi)別。微陣列芯片是由生物材料微陣列構(gòu)成的芯片，包括基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、細(xì)胞芯片和組織芯片等，由于它們的工作原理都是基于生物分子之間的親和結(jié)合作用，如核酸分子的堿基配對(duì)作用，抗原和抗體的結(jié)合等，所以通常也稱(chēng)為親和生物芯片。微流芯片是以各種微結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)的芯片，利用它可實(shí)現(xiàn)對(duì)各種生化組分的微流控操作和分析，這類(lèi)芯片的代表有毛細(xì)管電泳芯片、PCR反應(yīng)芯片、介電電泳芯片等。(生物芯片發(fā)展的最終目標(biāo)是將各種生物化學(xué)分析操作的整個(gè)過(guò)程，從樣品制備、生化反應(yīng)到結(jié)果檢測(cè)，都集成化并縮微到芯片上自動(dòng)完成，以獲得所謂的微型全分析系統(tǒng)（micro total analysis systen,μ-TAS）,或稱(chēng)“微縮芯片實(shí)驗(yàn)室”（lab-on-a-chip）。微縮芯片實(shí)驗(yàn)室代表了生物芯片技術(shù)發(fā)展的未來(lái)。)

57、核酸探針：序列已知的、能與待測(cè)的靶核酸序列互補(bǔ)結(jié)合、并帶有可檢測(cè)標(biāo)記的核酸片段。（它可以是整個(gè)基因，或基因的一部分；它可以是DNA或RNA）。

58、基因組DNA探針：為某一基因的全部或部分序列。缺點(diǎn)：真核基因組含有內(nèi)含子序列；因此，當(dāng)其用于檢測(cè)基因表達(dá)時(shí)，雜交效率低

cDNA探針：從已構(gòu)建的cDNA文庫(kù)中篩選和分離出來(lái)的靶基因序列。cDNA探針無(wú)內(nèi)含子序列，尤其適用于基因表達(dá)的檢測(cè)，目前應(yīng)用最廣。

59、基因組探針和cDNA探針的共同優(yōu)點(diǎn)：①制備方便：克隆于質(zhì)粒載體中②穩(wěn)定：DNA探針較RNA探針?lè)€(wěn)定；RNA易被RNA酶降解③標(biāo)記方法成熟和多樣。共同缺點(diǎn)：雙鏈探針存在自身復(fù)性，影響雜交效率。

60、RNA探針的優(yōu)點(diǎn)：?jiǎn)捂湥弘s交時(shí)不存在第二條鏈的競(jìng)爭(zhēng)（自身復(fù)性），雜交效率高；含RNA的雜交體更穩(wěn)定（Tm更高），雜交反應(yīng)可以在更為嚴(yán)格的條件下進(jìn)行，因而RNA探針雜交的特異性高 主要缺點(diǎn)：探針不穩(wěn)定，易被RNase降解。RNA探針適合于：Northern雜交、原位雜交等。61原位雜交的基本原理

樣本經(jīng)適當(dāng)處理后，使細(xì)胞通透性增加，讓探針進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)與組織、細(xì)胞中待檢測(cè)的核酸進(jìn)行特異性結(jié)合形成雜交體，然后通過(guò)組織化學(xué)或免疫組織化學(xué)方法在被檢測(cè)的核酸原位形成的雜交信號(hào)，在顯微鏡或電子顯微鏡下對(duì)待測(cè)核酸進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)定位的方法。

62、核酸雜交技術(shù)是一種分子生物學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，用于檢測(cè)DNA或RNA分子的特定序列（靶序列）。DNA或RNA先轉(zhuǎn)移并固定到硝酸纖維素或尼農(nóng)膜上，與其互補(bǔ)的單鏈DNA或RNA探針用放射性或非放射性標(biāo)記。在膜上雜交時(shí)，探針通過(guò)氫鍵與其互補(bǔ)的靶序列結(jié)合，洗去未結(jié)合的游離探針后，經(jīng)放射自顯影或顯色反應(yīng)檢測(cè)特異結(jié)合的探針。

63、核酸分離與純化的原則：

1.保證核酸序列結(jié)構(gòu)完整性，防止降解和結(jié)構(gòu)破壞;2.剔除其他物質(zhì)，保證純度

64、在核酸的分離和純化過(guò)程中，如何保持核酸的完整性？

[本題答案] 為了保證核酸的完整性，首先在操作過(guò)程中，應(yīng)盡量簡(jiǎn)化操作步驟，減少各種破壞核酸的有害因素，包括物理、化學(xué)與生物學(xué)的因素。提取應(yīng)在0～4℃的條件下進(jìn)行；另外避免強(qiáng)力的機(jī)械剪切力對(duì)核酸的破壞。細(xì)胞內(nèi)或外來(lái)的核酸酶對(duì)核酸的生物降解，而破壞核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)，使用EDTA、檸檬酸鹽并在低溫條件下操作，基本上就可以抑制DNA酶的活性；并盡可能地抑制RNA酶的活性。65、RNA的分離與提取：

難點(diǎn)：RNA在體外十分不穩(wěn)定，易降解，不易得到全長(zhǎng)；RNA酶在體外存在于手漢、唾液、呼吸、灰塵中。原則：防止污染、防止降解。

防止方法： 高壓滅菌；器皿：200 ℃烘烤2h；試劑：采用焦碳酸二乙脂（DEPC）處理；戴手套、口罩。

提取方法：（1）異硫酸胍-酚氯仿法： 異硫酸胍（4M）+巰基乙醇（0.14M）為蛋白質(zhì)變性劑，酚/氯仿抽提，異丙醇沉淀RNA，75%乙醇洗滌（2）TRIzol法： TRIzol（苯酚+硫氰酸化合物）+氯仿+異丙醇+75%乙醇（3）酚-氯法。純化方法：飽和酚（pH4.5-5.5）66、簡(jiǎn)述原位雜交在臨床中的應(yīng)用

原位雜交技術(shù)可以通過(guò)標(biāo)記的探針與分裂中期染色體DNA雜交來(lái)精確定位特定核苷酸序列在染色體上的位置；與細(xì)胞RNA雜交可觀察組織細(xì)胞中特定基因的表達(dá)水平；還可用特異性的細(xì)菌或病毒的核酸序列作為探針與組織、細(xì)胞雜交，以確定有無(wú)病原體的感染等。原位雜交能在成分復(fù)雜的組織中對(duì)單一細(xì)胞進(jìn)行研究，不受同一組織中其它成分的影響，因此對(duì)于那些細(xì)胞數(shù)量少且散在于其它組織中的細(xì)胞內(nèi)DNA或RNA的研究更為方便。此外，原位雜交不需要從組織中提取核酸，有利于檢測(cè)組織中含量極低的靶序列，并可完整地保持組織和細(xì)胞的形態(tài)，更能準(zhǔn)確地反應(yīng)出組織細(xì)胞的相互關(guān)系及功能狀態(tài)。舉例：原位雜交檢測(cè)上皮細(xì)胞中人乳頭狀瘤病毒（HPV）DNA 67、簡(jiǎn)述臨床診斷常用的FISH探針的類(lèi)型及用途。

根據(jù)核酸探針的序列特點(diǎn)，可將FISH探針?lè)譃槿箢?lèi)：重復(fù)序列探針、單一序列探針和全染色體涂抹探針。重復(fù)序列探針（repetitive sequences probes）是指與某條特定的染色體結(jié)構(gòu)結(jié)合、特異識(shí)別重復(fù)DNA序列的探針如著絲粒探針、端粒探針等。一般來(lái)說(shuō)，不同的染色體，著絲粒重復(fù)序列中的核苷酸序列也不同，但端粒重復(fù)序列不具有染色體特異性。單一序列探針(Unique sequence probes)與某條染色體上特定的區(qū)域或基因的單拷貝DNA序列雜交。包括帶特異性探針（band special probes）和基因座特異性探針（Locus Specific probes）等。全染色體涂抹探針（whole chromosome painting probes, WCP）是識(shí)別一條特定染色體全長(zhǎng)上的單一序列探針的混合物。68、臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)如何設(shè)置。

由于基因擴(kuò)增檢驗(yàn)是對(duì)靶核酸的指數(shù)倍擴(kuò)增過(guò)程，因而有大量的擴(kuò)增產(chǎn)物的出現(xiàn)，這種擴(kuò)增產(chǎn)物極易對(duì)以后的新擴(kuò)增反應(yīng)產(chǎn)生“污染”，為防止這種污染的發(fā)生，就需要對(duì)基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行嚴(yán)格的分區(qū)。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)分隔開(kāi)的工作區(qū)域，即試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)以及擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。如果采用全自動(dòng)擴(kuò)增儀，后兩個(gè)區(qū)域可以合并。應(yīng)注意的是，各工作區(qū)域必須有明確的標(biāo)記，避免不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品混用。進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格按單一方向進(jìn)行，即試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。各區(qū)的儀器設(shè)備包括工作服、鞋子、實(shí)驗(yàn)記錄本和筆等都必須專(zhuān)用，不得混淆。此外，上述四個(gè)工作區(qū)域內(nèi)還應(yīng)有固定于房頂?shù)淖贤鉄?，以便于工作后區(qū)域內(nèi)的空氣照射。69、如何保證臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量。

臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)測(cè)定由一系列步驟組成，包括樣本收集、樣本處理（核酸提?。?、核酸擴(kuò)增、產(chǎn)物檢測(cè)結(jié)果報(bào)告及解釋等。室內(nèi)質(zhì)量控制僅涉及樣本處理、核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析等測(cè)定分析步驟，而室間質(zhì)量評(píng)價(jià)則除了監(jiān)測(cè)測(cè)定分析步驟外，還包括較大范圍的實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)，諸如樣本接收中的可靠性、結(jié)果報(bào)告及解釋等。QA則是覆蓋更廣范圍的活動(dòng)，包括樣本收集、結(jié)果報(bào)告和解釋等。

第三篇：西醫(yī)診斷學(xué)心電圖部分知識(shí)點(diǎn)總結(jié)

1.靜息電位：細(xì)胞未受刺激時(shí)存在于細(xì)胞內(nèi)外的電位差，膜內(nèi)底，膜外高，心橫紋肌，骨骼肌相近，莫內(nèi)-80—-90（mv）.2.動(dòng)作電位：在靜息電位的基礎(chǔ)上，細(xì)胞受到閾電位刺激產(chǎn)生一個(gè)快速的去極化過(guò)程和復(fù)極化過(guò)程形成的電位變化，稱(chēng)為動(dòng)作電位。

3.除極過(guò)程電極位置與波形的關(guān)系：已除極部分的胞外電荷為負(fù)，未除極部分為正，將電極放在未除極的高電位處，將描述出一個(gè)正向的波，放于已除極處將描述一個(gè)負(fù)向的波。

4.復(fù)極過(guò)程電極位置與波形的關(guān)系：已復(fù)極部分的胞外電荷為正，未復(fù)極部分為負(fù)，電極放于未復(fù)極的低點(diǎn)位處，將描述一個(gè)負(fù)向的波，放于已復(fù)極處將描述一個(gè)正向的波。

5.正常心電興奮特點(diǎn)：①正常心肌除極由心內(nèi)膜向外膜推進(jìn)。

②中層心肌先除極后完成復(fù)極，外層心肌后除極先完成復(fù)極（好像復(fù)極過(guò)程從外層開(kāi)始的一樣）

由此決定了復(fù)極波（T）與除極波（R）方向的一致性。

6.心電波段的構(gòu)成：①P波：代表左右心房點(diǎn)（激動(dòng)）除極過(guò)程。②P—R間期：始于心房開(kāi)始除極，終于心室除極的開(kāi)始。③QRS波群：反映左右心室先后除極的過(guò)程。

④S—T段：是心室復(fù)極過(guò)程，基本上都處于平臺(tái)期，內(nèi)外心肌點(diǎn)位接近，是特殊的復(fù)極波。

⑤T波：主要是心室快速?gòu)?fù)極期先后不一致形成的點(diǎn)位變化。

7.心電向量的概念：①瞬時(shí)心電向量：心肌細(xì)胞在除極和復(fù)極過(guò)程中，由于前后的不同，每一瞬時(shí)相互間存在著電動(dòng)勢(shì)（電壓），具有方向和大小，稱(chēng)為V，規(guī)定方向朝向正點(diǎn)位。（這種既具有強(qiáng)度又具有方向性的點(diǎn)位幅度稱(chēng)為心電向量）

②瞬時(shí)心電綜合向量：心肌是立體結(jié)構(gòu)，除極和復(fù)極的每一瞬時(shí)存在著許多大小、方向不同的向量相互綜合成的一個(gè)總向量，稱(chēng)為V，其大小和方向按平行四邊形法則合成。

8． 心電綜合向量的大小與哪些因素有關(guān)：①與心肌細(xì)胞的數(shù)量（心肌厚度）呈正比關(guān)系；②與探查電極位置和心肌細(xì)胞之間的距離呈反比關(guān)系；③與探查電極的方位和心肌除極方向之間的角度有關(guān)，夾角越大，心電向量在導(dǎo)聯(lián)方向上的投影越小，點(diǎn)位愈弱。

9.空間心電向量環(huán)：一個(gè)心動(dòng)周期中循序出現(xiàn)的瞬時(shí)綜合心電向量的頂端C點(diǎn)位水平連接線(xiàn)所構(gòu)成的環(huán)形軌跡稱(chēng)為…

10.平面（或臨床）心電向量圖：將空間心電向量環(huán)投影在相互垂直的平面上即橫面（H），側(cè)面（S），額面（F）得到的三個(gè)投影圖，稱(chēng)為…

11．六軸系統(tǒng)：將導(dǎo)聯(lián)標(biāo)Ⅰ、Ⅱ，Ⅲ的導(dǎo)聯(lián)軸平行移動(dòng)，與aVR、aVL、aVF的導(dǎo)聯(lián)軸一同通過(guò)坐標(biāo)軸的軸心（“O”點(diǎn)）構(gòu)成了六軸系統(tǒng)（相互間角度均為30°）12.保準(zhǔn)導(dǎo)聯(lián)：標(biāo)Ⅰ 左上肢（＋）右上肢（－）； 標(biāo)Ⅱ 左下肢（＋）右上肢（－）； 標(biāo)Ⅲ 左下肢（＋）左上肢（－）；

13.單極肢體導(dǎo)聯(lián)：aVR 右上肢（＋）左上、下肢（－）；aVL 左上肢（＋）右上肢、左下肢（－）；aVF 左下肢（＋）左、右上肢（－）；

14.單極胸前導(dǎo)聯(lián)：左右上肢與左下肢連接在一起作為負(fù)極（－），正極（＋）分別位于： V1 胸骨右緣四肋間；V2 胸骨左緣四肋間；V3 在V2與V4的連線(xiàn)中點(diǎn)；V4 左鎖骨中線(xiàn)平第5肋間；V5 腋前線(xiàn)平V4水平；V6 腋中線(xiàn)平V4水平；

15.平面心電向量圖與心電圖的關(guān)系：⑴ 心電圖是有關(guān)的心電向量圖在相應(yīng)導(dǎo)聯(lián)上的投影。通過(guò)心電向量零電位點(diǎn)（即坐標(biāo)軸原點(diǎn)“O”）作一條與心電軸垂直的線(xiàn)，此線(xiàn)將心電軸分為分為正負(fù)兩側(cè)，向量投影在正側(cè)形成一個(gè)正向的波，投影在負(fù)側(cè)形成一個(gè)負(fù)向的波，其波幅大小取決于投影量的大小。

⑵ 胸前導(dǎo)聯(lián)心電圖相當(dāng)于橫面心電向量圖按時(shí)間順序在相應(yīng)導(dǎo)聯(lián)上的投影。⑶ 肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖相當(dāng)于額面心電向量圖按時(shí)間順序在相應(yīng)導(dǎo)聯(lián)上的投影。16.正常心電圖波段的形成特點(diǎn)、正常值及變化的臨床意義：P波：起始向量指向左前下，終末向量指向左后下，最大向量指向左下后；（構(gòu)成了P環(huán)，其主要向量指向左下稍偏后）

⑴ P波的方向：在標(biāo)Ⅰ、標(biāo)Ⅱ、aVF、V4—V6 直立；在aVL、標(biāo)Ⅲ、V1—V3 可以直立、倒置或低平；在aVR中倒置。

⑵ P波的寬度（時(shí)間）：小于0.12s，雙峰小于0.04。⑶ P波的振幅：肢導(dǎo)小于0.25mv，胸導(dǎo)小于0.2mv

P波異常：①當(dāng)時(shí)間超過(guò)0.12s時(shí)可能左房肥大或房室傳導(dǎo)阻滯

②P波在aVR導(dǎo)聯(lián)直立，在標(biāo)Ⅰ、標(biāo)Ⅱ、aVF 倒置，稱(chēng)為逆行性P波，表示激動(dòng)來(lái)自房室交界 ③P波高尖：肢導(dǎo)大于0.25mv，胸導(dǎo)大于0.2mv 見(jiàn)于右房肥大。

第四篇：中醫(yī)診斷學(xué)知識(shí)點(diǎn)--口味的臨床表現(xiàn)及其意義

中醫(yī)診斷學(xué)知識(shí)點(diǎn)-口味：口淡、口甜、口黏膩、口酸、口澀、口苦、口咸的臨床表現(xiàn)及其意義

口味異常是指病人口中的異常味覺(jué)。詢(xún)問(wèn)病人口味的異常變化，可診察內(nèi)在臟腑的疾病。

（一）口淡

口淡是指病人味覺(jué)減退，口中乏味，甚至無(wú)味的癥狀。多見(jiàn)于脾胃虛弱證。

（二）口甜

口甜是指病人自覺(jué)口中有甜味的癥狀。多見(jiàn)于脾胃濕熱或脾虛之證。

（三）口黏膩

口黏膩是指病人自覺(jué)口中黏膩不爽的癥狀。常見(jiàn)于痰熱內(nèi)盛、濕熱蘊(yùn)脾及寒濕困脾之證。

（四）口酸

口酸是指病人自覺(jué)口中有酸味，或泛酸。多因肝胃郁熱或飲食停滯所致。

（五）口澀

口澀是指病人自覺(jué)口有澀味，如食生柿子的癥狀。為燥熱傷津，或臟腑熱盛所致。

（六）口苦

口苦是指病人自覺(jué)口中有苦味的癥狀。多見(jiàn)于心火上炎或肝膽火熱之證。

（七）口咸

口咸是指病人自覺(jué)口中有戒味的癥狀。多見(jiàn)于腎病或寒水上泛的病證。

例題： A.口淡 B.口苦 C.口澀 D.口甜 E.口咸

1）燥熱津傷常見(jiàn)口味為 2）心火上炎常見(jiàn)口味為

1.【正確答案】 C 【答案解析】 口澀是指患者自覺(jué)口有澀味，如食生柿子的癥狀。為燥熱傷津，或臟腑熱盛所致。2.【正確答案】 B 【答案解析】 口苦是指患者自覺(jué)口中有苦味的癥狀。多見(jiàn)于肝膽火旺、濕熱內(nèi)蘊(yùn)致膽氣上逆、心火上炎。

第五篇：醫(yī)學(xué)影像診斷學(xué)的復(fù)習(xí)知識(shí)點(diǎn)(骨關(guān)節(jié))

1.X線(xiàn)的發(fā)現(xiàn)時(shí)間在1895年倫琴，德國(guó)物理學(xué)家2.X線(xiàn)的特性：.穿透性（是X 成像的基礎(chǔ)）：X線(xiàn)波長(zhǎng)短具有較高能量，物質(zhì)對(duì)它吸收弱，因此具有很強(qiáng)的穿透本領(lǐng)；熒光效應(yīng)（是進(jìn)行透視檢查的基礎(chǔ)）：某些物質(zhì)被X線(xiàn)照射后，能激發(fā)出可見(jiàn)熒光；.感光效應(yīng)（是X線(xiàn)膠片攝影的基礎(chǔ)）：X線(xiàn)和可見(jiàn)光一樣，同樣具有光化學(xué)作用，可使膠片乳劑感光能使很多物質(zhì)發(fā)生光化學(xué)作用；電離效應(yīng)（是進(jìn)行X線(xiàn)檢查時(shí)需要注意豐厚的的原因）：具有足夠能量的X線(xiàn)光子能夠撞擊原子中的軌道電子，使之脫離原子產(chǎn)生一次電離。被擊脫的電子仍有足夠能量去電離更多的原子。

3.X線(xiàn)的應(yīng)用：X線(xiàn)透視，X線(xiàn)攝影，特殊檢查（體層攝影，軟X線(xiàn)攝影，高電壓攝影），造影檢查

4.X線(xiàn)機(jī)的構(gòu)造：X線(xiàn)管裝置，高壓發(fā)生裝置，控制裝置，透視用影像裝置，機(jī)械輔助裝置。

5.X線(xiàn)透視與攝片的優(yōu)缺點(diǎn) ：透視的主要優(yōu)點(diǎn)是可轉(zhuǎn)動(dòng)患者體位，改變方向進(jìn)行觀察。檢查費(fèi)用較低。透視的主要缺點(diǎn)有：熒屏亮度較低，影像對(duì)比度及清晰度較差，難于觀察密度與厚度差別較少的器官以及密度與厚度較大的部位。

X線(xiàn)攝影： 與透視的優(yōu)缺點(diǎn)正好相反，其優(yōu)點(diǎn)是：能使人體較厚、較薄的部位清晰地顯示在X線(xiàn)照片上 ；病人所受的X線(xiàn)輻射劑量要小于透視、低于CT檢查。X線(xiàn)攝影的缺點(diǎn)是：不能動(dòng)態(tài)觀察，檢查費(fèi)用高于透視。

6.CR與DR優(yōu)缺點(diǎn)（CR是數(shù)字X線(xiàn)攝影DR是計(jì)算機(jī)X線(xiàn)攝影）

：CR優(yōu)點(diǎn)是可與床邊機(jī)配合進(jìn)行診室床邊攝影；缺點(diǎn)是工作效率低，增加攝影成本，對(duì)影像的分辨力及清晰度提高不多。

DR優(yōu)點(diǎn)是成像速度快，有高的空間分辨力及密度分辨力；缺點(diǎn)是部分產(chǎn)品相對(duì)較貴。7.攝片基本要求：骨盆正位片，一側(cè)橈、尺骨正位片及同側(cè)脛、腓骨正、側(cè)位片；必要時(shí)加攝胸部和腰椎正位片。攝片質(zhì)量要求：攝片位置準(zhǔn)確，對(duì)比度良好，直接曝光區(qū)呈黑色，軟組織是灰色，層次分明，皮質(zhì)和骨小梁顯示清晰。

8.兒童的骨骼特點(diǎn)：骨骼最初以軟骨的形式出現(xiàn)，軟骨必須經(jīng)過(guò)鈣化才能成為堅(jiān)硬的骨骼 ：長(zhǎng)骨骨端有骨垢，為了生長(zhǎng)發(fā)育，一個(gè)是紅骨髓含量高，處于造血活躍期

9.兒童骨折包括：靑枝骨折，肱骨髁上骨折。

10.骨折：指骨的完整性和連續(xù)性中斷。骨質(zhì)疏松 ：骨組織的有機(jī)成分和鈣鹽均減少，而比例仍正常。

11.骨折愈合的標(biāo)志：以骨痂多少及骨折線(xiàn)是否清晰為標(biāo)準(zhǔn)，如果骨折線(xiàn)模糊，有骨痂生長(zhǎng)了就開(kāi)始愈合了。

12.脊椎骨折的特點(diǎn)： 脊椎骨折不需要較大外力作用即可發(fā)生，60～70歲患者發(fā)病率最高，可發(fā)生在一個(gè)或多個(gè)椎體，主要發(fā)生在胸腰椎。脊椎骨折X線(xiàn)表現(xiàn)為椎體水平骨小梁減少，椎體前緣皮質(zhì)厚度減低，終板厚度改變，呈雙凹形或楔形改變。主要臨床表現(xiàn)為腰背疼，包括腰背及四肢關(guān)節(jié)酸痛、乏力等

13.關(guān)節(jié)脫位包括：肩關(guān)節(jié)脫位，肘關(guān)節(jié)脫位，髖關(guān)節(jié)脫位。

15.良惡性骨腫瘤的鑒別：

（1）生長(zhǎng)情況 ： 良性是生長(zhǎng)緩慢，不侵及鄰近組織，但可引起壓迫移位；無(wú)轉(zhuǎn)移 ；惡性是生長(zhǎng)迅速，易侵及鄰近組織、器官可有轉(zhuǎn)移。

（2）局部骨質(zhì)變化 :良性是呈膨脹性骨質(zhì)破壞，與正常骨界限清晰，邊緣銳利，骨皮質(zhì)變薄，膨脹，保持其連續(xù)性 ；惡性是呈侵潤(rùn)性骨破壞，病變區(qū)與正常骨界限模糊，邊緣不整。

（3）骨膜增生 :良性是一般無(wú)骨膜增生，病理骨折后可有少量骨膜增生，骨膜新生骨不被破壞；惡性是可出現(xiàn)不同形式的骨膜增生且多不成熟，并可被腫瘤侵犯破壞。

（4）周?chē)浗M織變化 ：良性是多無(wú)腫脹或腫塊影，如有腫塊，其邊緣清楚；惡性是長(zhǎng)入軟組織形成腫快，與周?chē)M織分界不清。

16.轉(zhuǎn)移性骨腫瘤：主要通過(guò)血液途徑轉(zhuǎn)移。

(1)成骨型 X線(xiàn)表現(xiàn)：病變?yōu)楦呙芏扔埃庸撬少|(zhì)內(nèi)，呈斑片狀或結(jié)節(jié)狀，密度均勻一致，骨皮質(zhì)多完整，多發(fā)生在腰椎與骨盆。常多發(fā)，境界不清。椎體不壓縮、變扁。

(2)溶骨型X線(xiàn)表現(xiàn)：

骨松質(zhì)中多發(fā)或單發(fā)小的蟲(chóng)蝕狀骨質(zhì)破壞。病變發(fā)展，破壞融合擴(kuò)大，形成大片溶骨性骨質(zhì)破壞區(qū)，骨皮質(zhì)也被破壞，但一般無(wú)骨膜增生。

17.類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)病特點(diǎn)：類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎可累及全身任何能活動(dòng)的關(guān)節(jié)以四肢關(guān)節(jié)尤以雙手和雙足小關(guān)節(jié)為主最常受累的是近端指間或趾間關(guān)節(jié)和掌指或庶趾關(guān)節(jié)其次腕、肘、膝、肩、踝、胸鎖、髖、寰樞椎關(guān)節(jié)也可被累及。此外額頜關(guān)節(jié)、環(huán)構(gòu)關(guān)節(jié)及其他頸椎偶可受累。18.強(qiáng)直性脊柱炎的典型表現(xiàn)：骶髖關(guān)節(jié)的改變，脊柱的改變，周?chē)P(guān)節(jié)的改變

19.退行性變與骨質(zhì)增生的區(qū)別：骨質(zhì)增生是退行性改變的表現(xiàn)之一。骨質(zhì)增生：指一定單位體積內(nèi)，骨質(zhì)數(shù)量增多，變致密的現(xiàn)象而言。是骨的基本影像學(xué)表現(xiàn)。

退行性改變：是軟骨退變，損傷。刺激軟骨及其下骨內(nèi)血管增殖，而導(dǎo)致骨皮質(zhì)面和軟骨下骨硬化及骨刺形成。