第一篇：乙醇脫氫酶的分離提純鑒定與定量

乙醇脫氫酶的分離提純鑒定與定量

乙醇脫氫酶的分離提純鑒定與定量

12級臨本二班 呂夢月 許力飛

王雅琦 王明華 馬翔 張宇 王帥

實驗?zāi)康模阂掖济摎涿傅姆蛛x提純鑒定與定量 實驗原理：

分離：加蛋白質(zhì)抑制劑：競爭性或非競爭性抑制蛋白酶活性；防止蛋白酶分解；除核酸：利用核酸和蛋白質(zhì)在鏈霉素磷酸酶中溶解度不同除去核酸；去鹽 ：超濾液篩分過程，以膜兩側(cè)的壓力差為驅(qū)動力，以超濾膜為過度介質(zhì)，在一定的壓力下，當原液流過膜表面時，超濾液膜表面密布的許多細小的微孔只允許水及小分子物質(zhì)通過而成為透過液，而原液中體積大于膜表面微孔徑的物質(zhì)則被截留在膜的進液側(cè)，成為濃縮液，因而實現(xiàn)對原液的凈化、分離和濃縮的目的。等電點測定法的原理：在等電點時蛋白質(zhì)分子以兩性離子形式存在，其分子靜電荷為零，此時蛋白質(zhì)分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥，分子相互作用之間的作用減弱，其顆粒極易碰撞、凝聚而產(chǎn)生沉淀，所以蛋白質(zhì)在等電點時，其溶解度最小，最易形成沉淀物。

提純：醋酸纖維素薄膜電泳以醋酸纖維薄膜為支持物。它是纖維素的醋酸酯，由纖維素的羥基經(jīng)乙?；瞥?。它溶于丙酮等有機溶液中，即可涂布成均一細密的微孔薄膜，厚度以0.1mm—0.15mm為宜。太厚吸水性差，分離效果不好；太薄則膜片缺少應(yīng)有的機械強度則易碎。

鑒定：乙醇脫氫酶可將乙醇分解生成乙醛

定量：SDS-PAGE即十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳法：1.在混合樣品中各蛋白質(zhì)組分的遷移率主要取決于分子大小和形狀以及所帶電荷量。2.在聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中，加入適量SDS(陰離子表面活性劑)，使蛋白質(zhì)的氫鍵和疏水鍵打開，并結(jié)合到蛋白質(zhì)分子上(一定條件下，大多數(shù)蛋白質(zhì)與之結(jié)合比為1.4g SDS/1g protein)，使各種蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物都帶上相同密度的負電荷，其數(shù)量遠遠超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，從而掩蓋了不同種類蛋白質(zhì)之間原有的電荷差別。此時特定蛋白質(zhì)分子的電泳遷移率主要取決于其分子量大小，而其它因素對電泳遷移率的影響幾乎可以忽略不計。3.蛋白質(zhì)分子量在15,000～200,000之間時，電泳遷移率與分子量的對數(shù)值線性相關(guān)：若將已知分子量的標準蛋白質(zhì)的遷移率對分子量的對數(shù)作圖，可以獲得一條標準曲線，而從未知蛋白質(zhì)在相同電泳條件下的遷移率即可在標準曲線上求得其分子量。

實驗試劑與器材：

器材：剪刀、研缽、鐵架臺、漏斗、燒杯、玻璃棒、濾紙、試管一支、管式的超濾裝置、聚酰胺膜、醋酸纖維薄膜（2×8厘米）；常壓電泳儀；點樣器（市售或自制）；培養(yǎng)皿（染色及漂洗）（直徑9cm—10cm）；普通濾紙；玻璃板；鈍頭鑷子；白瓷反應(yīng)板；試管（15～20ml）；水??；分光光度計；離心機；比色杯（光徑1cm）

試劑：磷酰胺素、1%~2%的鏈霉素硫酸鹽、硫酸銨、0.02mol/L的鹽酸、PH7.4的磷酸鹽 緩沖液、0.1mol/mL的氫氧化鈉、去離子水、巴比妥—巴比妥鈉緩沖液（pH8.6，0.07mol/L，離子強度0.06）：稱取1.66g巴比妥（AR）和12.76g巴比妥鈉（AR），置于三角燒瓶中，加蒸餾水約600ml，稍加熱溶解，冷卻后用蒸餾水定容至1000ml。置4℃保存，、.交聯(lián)葡聚糖G-25(細粒)、0.1mol/L磷酸緩沖液(pH7.0)、0.4% K3Fe(CN)6、乙醇脫氫酶的標準溶液、乙醇、染色液（0.5%氨基黑10B）：稱取0.5g氨基黑10B，加蒸餾水40ml，甲醇（AR）50ml，冰乙酸（AR）10ml混勻溶解后置具塞試劑瓶中貯存、漂洗液：取95%乙醇（AR）45ml，冰乙酸（AR）5ml和蒸餾水50 ml混勻置具塞試劑瓶貯存、透明液：臨用前配制。

甲液：取冰乙酸（AR）15ml，無水乙醇（AR）85ml，混勻置試劑瓶內(nèi)，塞緊瓶塞，備用。

乙醇脫氫酶的分離提純鑒定與定量

乙液：取冰乙酸（AR）25ml，無水乙醇（AR）75ml，混勻置試劑瓶內(nèi)，塞緊瓶塞，備用。、保存液：液體石蠟、定量洗脫液（0.4mol/L NaOH溶液）：稱取16g氫氧化鈉（AR）用少量蒸餾水溶解后定容至1000ml。

實驗步驟：

分離：1.細胞破碎：將10g肝組織用剪刀剪碎，放入研缽中,加入0.067mol/LPH7.4的磷酸鹽緩沖液4ml研磨成糊狀，再加2ml0.067mol/LPH7.4的磷酸鹽緩沖液,攪勻，然后將所得的物質(zhì)過濾，取濾液。2.添加蛋白質(zhì)抑制劑：在盛有研磨液的試管中加入5ml磷酰胺素，震蕩40度水浴中保溫30min。3.除核酸：逐滴加入1%~2%的鏈霉素硫酸鹽，直至沉淀不再產(chǎn)生。進行過濾除去沉淀。4.鹽析：逐滴加入硫酸銨溶液直至蛋白質(zhì)不再沉淀。進行過濾取其沉淀部分，并加入適量磷酸鹽緩沖液直至蛋白形成6ml糊狀物。5.去鹽：將上述溶液放入超濾裝置中，使蛋白質(zhì)和小分子物質(zhì)分離開，將大分子物質(zhì)分離開并加入一定量磷酸鹽緩沖液直至糊狀物形成6ml。6.等電點沉淀法：在上述溶液中加入一定量0.02mol/L鹽酸邊加入邊攪拌，一邊用PH劑測量使其PH值調(diào)至5.4，然后倒置離心機中6000r/min離心15分鐘，倒掉上清液，再在此溶液中加入6ml去離子水，震蕩使下部的沉淀重新溶解，并以0.1mol/mL的氫氧化鈉將其PH值調(diào)至8.6.重復(fù)進行兩次。

提純：醋酸纖維膜電泳：1電泳槽與薄膜的制備（1）醋酸纖維素薄膜的濕潤與選擇：用鈍頭鑷子取一片薄膜，在薄膜無光澤面上，距邊2cm處用鉛筆各劃一條直線此線為點樣標志區(qū)。小心地平放在盛有緩沖液的平皿中。若漂浮于液面的薄膜在15s—30s內(nèi)迅速濕潤，整條薄膜色澤深淺一致，則此膜均勻可用于電泳；若薄膜濕潤緩慢，色澤深淺不一或有條紋及斑點，則表示薄膜厚薄不均勻應(yīng)舍去，以免影響電泳結(jié)果，將選好的薄膜用竹夾子輕壓，使其完全浸泡于緩沖液中約30min后方可用于電泳。（2）電泳槽的準備：根據(jù)電泳槽的寬度，剪裁尺寸合適的濾紙條。在兩個電極槽中，各倒等體積的電極緩沖液，在電泳槽的兩個膜支架上，各放兩層濾紙條，使濾紙的長邊與支架前沿對齊，另一端浸入電極緩沖液內(nèi)。當濾紙條全部浸潤后，用玻璃棒輕輕擠壓在膜支架上的濾紙以驅(qū)趕氣泡，使濾紙的一端能緊貼在膜支架上。

2、點樣用鈍頭鑷子取出浸透的薄膜，夾在兩層濾紙間以吸去多余的緩沖液，無光澤面向上平放在點樣板上，點樣時用點樣器沾少許經(jīng)分離的肝臟研磨液，再將點樣器輕輕印在點樣區(qū)內(nèi)，樣品線長度一般為1.5cm，寬度一般不超過3mm.使經(jīng)分離的肝臟研磨液完全滲透至薄膜內(nèi)，形成一定寬度、粗細均勻的直線，用同樣的方法對標準乙醇脫氫酶溶液進行點樣。

3、電泳 用鈍頭鑷子將點樣端的薄膜平貼在陰極電泳槽支架的濾紙橋上（點樣面朝下），另一端平貼在陽極端支架上。如圖1-2-9所示，要求薄膜緊貼濾紙橋并繃直，中間不能下垂，如一電泳槽同時安放幾張薄膜，則薄膜之間應(yīng)隔幾毫米，蓋上電泳槽蓋使薄膜平衡10min。用導(dǎo)線將電泳槽的正、負極與電泳儀的正、負極分別連接，注意不要接錯。在室溫下電泳，打開電源開關(guān)，調(diào)旋鈕調(diào)到每厘米電流強度為0.3mA（8塊薄膜則為4.8mA）。通電10min—15min后，將電流調(diào)節(jié)到每厘米膜寬電流強度為0.5mA（8片共8mA），電泳時間約50min—60min。電泳后調(diào)節(jié)旋鈕使電流為零，關(guān)閉電泳儀切斷電源或自然風(fēng)干。

4、染色與漂洗用鈍頭鑷子取出電泳后的薄膜，無光澤面向上，放在含有0.5％氨基黑10B染色液的培養(yǎng)皿中，浸染5min。取出后用自來水沖去多余染料，然后放到盛有漂洗液的培養(yǎng)皿中，每隔10min換漂洗液一次，連續(xù)數(shù)次，直至背景藍色脫盡。取出后放在濾紙上，用電吹風(fēng)的冷風(fēng)將薄膜吹干。凝膠層析法：1.凝膠準備 稱取5g交聯(lián)葡聚糖G-25,傾入錐形瓶中,加蒸餾水約60ml溶脹,攪動后靜置.待凝膠沉積后,用傾注法除去浮于表面的細粒,重復(fù)3次.將溶脹后的凝膠用10倍體積的磷酸緩沖液浸泡過夜,以達平衡.2.裝柱 取玻璃層析柱(25cm×1.5cm)一支,垂直裝好.加入緩沖液,打開出口,將氣泡趕出,關(guān)閉出口.然后從管頂向柱內(nèi)加入緩沖液8cm左右高,將 2

乙醇脫氫酶的分離提純鑒定與定量

平衡后的交聯(lián)葡聚糖G-25懸浮液邊攪拌邊加入柱內(nèi),再打開出口,使液體流出,繼續(xù)不斷地加入交聯(lián)葡聚糖G-25懸浮液,柱內(nèi)凝膠柱床沉積至高20cm左右時為止.床面上覆蓋3ml緩沖液,關(guān)閉出口,在凝膠柱面上加蓋一層圓形濾紙,使層析柱穩(wěn)定5～10min后,接儲液瓶,打開出口,用2倍于床體積的磷酸緩沖液洗脫平衡,最后關(guān)閉出口.3..上樣,洗脫 打開平衡好的層析柱出口,使柱內(nèi)溶液流出至剛露出柱床面時即關(guān)閉出口.吸混合物樣品0.5ml左右,在距離床面1mm處沿管內(nèi)壁輕輕轉(zhuǎn)動加進樣品,切勿攪動床面.然后打開出口,使樣品進入床內(nèi),直至床面重新露出.同上加入1～2倍樣品量體積的洗脫液(這樣可以使樣品定容至最小,而樣品又完全進入床內(nèi)),當少量洗脫液將流入床面時,加入多量的洗脫液,但注意切勿攪動床面凝膠,連接儲液瓶進行洗脫.4.分部收集 根據(jù)電泳方法進行的結(jié)果可得乙醇脫氫酶為第N條帶，用自動部分收集器,以5滴/min,5min/管的速度進行收集.并且觀察柱上的色帶,待第N柱液體流下時,再繼續(xù)收集兩管透明的洗脫液作為空白,關(guān)閉出口.即可收集到提純后的乙醇脫氫酶。再進行醋酸纖維膜電泳進行一遍看看是否純凈，若不純凈則重復(fù)進行凝膠交換柱層析法進行提純。

鑒定：將提純后的乙醇脫氫酶中放入一定量酒精，并加入氧化亞銅并加熱，觀察是否有磚紅色沉淀。

定量：1.安裝夾心式垂直板電泳槽：夾心式垂直板電泳槽有很多型號，主要結(jié)構(gòu)相同，且操作簡單，不易泄漏?？筛鶕?jù)具體不同型號要求進行操作。主要注意事項：安裝前，膠條、玻板、槽子都要潔凈干燥；勿用手接觸灌膠面的玻璃。

2.配膠：根據(jù)待測蛋白質(zhì)分子量范圍，選擇適宜的分離膠和濃縮膠濃度，按下表配制：

3.制備凝膠板： ①分離膠制備： 按表配制12%分離膠。由于AP和TEMED相遇后凝膠即開始聚合，所以應(yīng)立即混勻混合液?；靹蚝笥米⑸淦鞒槿?.2~3.5ml凝膠液，加至長、短玻璃板間的縫隙內(nèi)(立即清洗注射器及針頭)。再用滴管取少許蒸餾水，沿長玻璃板壁緩慢注入約3~4mm高，以進行水封。30~60min后，凝膠與水封層間出現(xiàn)折射率不同的界線，則表示凝膠完全聚合。傾去水封層的蒸餾水，再用濾紙條吸去多余水分。②濃縮膠的制備：按表配制3%濃縮膠(待分離膠聚合后再加AP/TEMED)，混勻后用注射器加到已聚合的分離膠上方，直至距離短玻璃板上緣約0.5cm處(立即清洗注射器及針頭)。輕輕將樣品槽模板插入濃縮膠內(nèi)，避免帶入氣泡。約30min后凝膠聚合。

待凝膠凝固后，小心拔去樣品槽模板，用窄條濾紙吸去樣品凹槽中多余的水分，將Tris-Gly電泳緩沖液倒入上、下貯槽中，應(yīng)沒過短板約0.5cm以上，即可準備加樣。4.樣品處理及加樣 蛋白質(zhì)標樣及待測蛋白都用樣品溶解液溶解，使?jié)舛葹?.5~1mg/ml，沸水浴加熱3分鐘，冷卻至室溫備用(處理好的樣品液如經(jīng)長期存放，使用前應(yīng)在沸水浴中加熱1min，以消除亞穩(wěn)態(tài)聚合)。一般加樣體積為10~15?l。如樣品較稀可適量增加加樣體積。用微量注射器小心將樣品通過緩沖液加到凝膠凹形樣品槽底部(雙手操作，避免傷及凝膠)，待所有樣品槽內(nèi)都加完樣品后即可開始電泳。5.電泳將直流穩(wěn)壓電泳儀開關(guān)打開，將電流調(diào)至10~20mA(穩(wěn)流)開始電泳。待藍色染料(溴

乙醇脫氫酶的分離提純鑒定與定量

酚藍)遷移至距凝膠底部約1cm時關(guān)閉電源。6.染色及脫色取出玻璃板，先用注射器取水從兩側(cè)小心沖洗使之松動，再用取膠板輕輕將短玻璃板撬開移去(必要時同時用水沖洗)，在膠板一端切除一角作為標記，將膠板移至大培養(yǎng)皿中染色。

將染色液倒入培養(yǎng)皿中，染色1h左右，用蒸餾水漂洗數(shù)次，再用脫色液脫色，直到蛋白區(qū)帶清晰。7.相對分子量計算用直尺分別量取各蛋白質(zhì)條帶中心以及溴酚藍條帶中心距分離膠頂端的距離，按下式計算：相對遷移率 = 樣品遷移距離(cm)/ 染料遷移距離(cm)以標準蛋白質(zhì)分子量的對數(shù)對相對遷移率作圖，得到標準曲線，根據(jù)待測樣品相對遷移率，從標準曲線上查出其分子量。

實驗結(jié)果：

由此次實驗可推理的，將乙醇脫氫酶提純純凈，則可得其可乙醇進行脫氫生成醛，且可得此物質(zhì)的相對分子質(zhì)量為141000.實驗討論：

1.并非所有蛋白質(zhì)都能用此法測定其分子量。已發(fā)現(xiàn)有些蛋白質(zhì)用這種方法測出的分子量是不可靠的，包括電荷異常或構(gòu)象異常的蛋白質(zhì)，帶有較大輔基的蛋白質(zhì)(如某些糖蛋白)以及一些結(jié)構(gòu)蛋白如膠原蛋白等。例如組蛋白F1本身帶有大量正電荷，盡管結(jié)合有正常比例的SDS，仍不能完全掩蓋其原有正電荷的影響：其分子量是21,000，但用本法測定的結(jié)果卻是35,000。因此有必要至少用兩種方法來測定未知樣品的分子量，以便互相驗證。2.有許多蛋白質(zhì)是由亞基(如血紅蛋白)或兩條以上肽鏈(如?-胰凝乳蛋白酶)組成的，它們在SDS和巰基乙醇的作用下解離成亞基或單條肽鏈。因此，對于這一類蛋白質(zhì)，本法測定的只是其亞基或單條肽鏈的分子量。為了得到更全面的資料，還必須用其它方法測定其分子量及分子中肽鏈的數(shù)目等，以便與SDS-凝膠電泳的結(jié)果互相參照。3.此次實驗為推理實驗，則不知是否純正，所以要進行檢測，而檢測的方法是醋酸纖維蛋白膜進行檢測即可知道含有幾種蛋白質(zhì)，用標準液進行對比就可知道乙醇脫氫酶的排列順序是什么，則就知道在凝膠交換柱層析法的分離順序，如若分離不徹底即要反復(fù)進行。就可分離出較純正的乙醇脫氫酶。然后進行檢測其活性和相對分子質(zhì)量。

注意事項：

1進行研磨操作時，研缽應(yīng)放在不易滑動的物體上，研杵應(yīng)保持垂直。研缽中盛放固體的量不得超過其容積的1／3。洗滌研缽時，應(yīng)先用水沖洗，耐酸腐蝕的研缽可用稀鹽酸洗滌。研缽上附著難洗滌的物質(zhì)時，可向其中放入少量食鹽，研磨后再進行洗滌。2.加入鏈霉素磷酸鹽時要適量，不要大量一次加入。3.裝柱后要檢查柱床是否均勻,若有氣泡或分層的界面時,需要重新裝柱.4.流速不可太快,否則分子小的物質(zhì)來不及擴散,隨分子大的物質(zhì)一起被洗脫下來,達不到分離目的.附：本次實驗思路

乙醇脫氫酶的分離提純鑒定與定量

乙醇脫氫酶的分離提純鑒定與定量

原料選?。吼囸I24小時后的肝臟

↓

分離：細胞破碎（搗碎）→添加蛋白質(zhì)抑制劑（絲氨酸蛋白質(zhì)抑制劑）→除核酸（沉淀法

1％-2％的鏈霉素硫酸鹽）→鹽析（硫酸銨）→去鹽（超濾）→等電點沉淀法（PI=5.4-5.8）↓

提純：檢測電泳檢測是否是純凈的蛋白質(zhì)若不純凈看乙醇脫氫酶的帶的順序、凝膠交換柱層析法提純、檢測電泳檢測是否是純凈的蛋白質(zhì)若不純凈再進行提純

↓

鑒定：加入乙醇分解鑒定

↓

定量：SDS-PAGE法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量

乙醇脫氫酶的分離提純鑒定與定量

實驗清單

實驗試劑與器材：器材：剪刀、研缽、鐵架臺、漏斗、燒杯、玻璃棒、濾紙、試管一支、管式的超濾裝置、聚酰胺膜、醋酸纖維薄膜（2×8厘米）；常壓電泳儀；點樣器（市售或自制）；培養(yǎng)皿（染色及漂洗）（直徑9cm—10cm）；普通濾紙；玻璃板；鈍頭鑷子；白瓷反應(yīng)板；試管（15～20ml）；水??；分光光度計；離心機；比色杯（光徑1cm）

試劑：磷酰胺素、1%~2%的鏈霉素硫酸鹽、硫酸銨、0.02mol/L的鹽酸、PH7.4的磷酸鹽 緩沖液、0.1mol/mL的氫氧化鈉、去離子水、巴比妥—巴比妥鈉緩沖液（pH8.6，0.07mol/L，離子強度0.06）：稱取1.66g巴比妥（AR）和12.76g巴比妥鈉（AR），置于三角燒瓶中，加蒸餾水約600ml，稍加熱溶解，冷卻后用蒸餾水定容至1000ml。置4℃保存，、.交聯(lián)葡聚糖G-25(細粒)、0.1mol/L磷酸緩沖液(pH7.0)、0.4% K3Fe(CN)6、乙醇脫氫酶的標準溶液、乙醇、染色液（0.5%氨基黑10B）：稱取0.5g氨基黑10B，加蒸餾水40ml，甲醇（AR）50ml，冰乙酸（AR）10ml混勻溶解后置具塞試劑瓶中貯存、漂洗液：取95%乙醇（AR）45ml，冰乙酸（AR）5ml和蒸餾水50 ml混勻置具塞試劑瓶貯存、透明液：臨用前配制。

甲液：取冰乙酸（AR）15ml，無水乙醇（AR）85ml，混勻置試劑瓶內(nèi)，塞緊瓶塞，備用。乙液：取冰乙酸（AR）25ml，無水乙醇（AR）75ml，混勻置試劑瓶內(nèi)，塞緊瓶塞，備用。、保存液：液體石蠟、定量洗脫液（0.4mol/L NaOH溶液）：稱取16g氫氧化鈉（AR）用少量蒸餾水溶解后定容至1000ml。

第二篇：有機物分離和提純教案

第四節(jié) 研究有機化合物的一般步驟和方法

主講人：黃菊梅 2013/12/4 知識與技能:

1、了解怎樣研究有機化合物，應(yīng)采取的步驟和方法。

2、掌握有機物的分離和提純的一般方法。過程與方法: 通過多媒體課件和講授的方式，了解質(zhì)譜、紅外光譜、核磁共振氫譜。情感、態(tài)度與價值觀: 通過本節(jié)的練習(xí)，從中體驗研究有機化合物的過程和科學(xué)方法，提高自身的科學(xué)素養(yǎng)。教學(xué)重點

研究有機化合物的一般步驟和常用方法。

1、蒸餾、重結(jié)晶等分離提純有機物的實驗操作

2、通過具體實例了解某些物理方法如何確 【教學(xué)過程】

【引入】從天然資源中提取有機物成分或者是工業(yè)生產(chǎn)、實驗室合成的有機化合物不可能直接得到純凈物，因此，必須對所得到的產(chǎn)品進行分離提純，如果要鑒定和研究未知有機物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)，必須得到更純凈的有機物。我們已經(jīng)知道，有機化學(xué)是研究有機物的組成、結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、制備方法與應(yīng)用的科學(xué)。那么，該怎樣對有機物進行研究呢？一般的步驟和方法是什么？ 這就是我們這節(jié)課將要探討的問題。

【板書】 第四節(jié) 研究有機化合物的一般步驟和方法

從天然資源中提取有機物成分，首先得到的是含有有機物的粗品。在工廠生產(chǎn)、實驗室合成的有機化合物也不可能直接得到純凈物，得到的往往是混有未參加反應(yīng)的原料，或反應(yīng)副產(chǎn)物等的粗品。因此，必須經(jīng)過分離、提純才能得到純品。如果要鑒定和研究未知有機物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)，必須得到更純凈的有機物。下面是研究有機化合物一般要經(jīng)過的幾個基本步驟： 【板書】

首先我們結(jié)合高一所學(xué)的知識了學(xué)習(xí)第一步——分離和提純?！景鍟?/p>

一、分離、提純

提純混有雜質(zhì)的有機物的方法很多，基本方法是利用有機物與雜質(zhì)物理性質(zhì)的差異而將它們分離。接下來我們主要學(xué)習(xí)三種分離、提純的方法?！景鍟?/p>

1、蒸餾

蒸餾是分離、提純液態(tài)有機物的常用方法。當液態(tài)有機物含有少量雜質(zhì)，而且該有機物熱穩(wěn)定性較強，與雜質(zhì)的沸點相差較大時（一般約大于30oC），就可以用蒸餾法提純此液態(tài)有機物?！狙菔緦嶒?-1】含有雜質(zhì)的工業(yè)乙醇的蒸餾

所用儀器：鐵架臺（鐵圈、鐵夾）、酒精燈、石棉網(wǎng)、蒸餾燒瓶、溫度計、冷凝管、接受器等。如圖所示：

【蒸餾的注意事項】

(1)注意儀器組裝的順序：“先下后上，由左至右”；(2)不得直接加熱蒸餾燒瓶，需墊石棉網(wǎng)；

(3)蒸餾燒瓶盛裝的液體，最多不超過容積的2/3；不得將全部溶液蒸干；需使用沸石；

(4)冷凝水水流方向應(yīng)與蒸氣氣流方向相反（逆流：下進上出）；

(5)溫度計水銀球位置應(yīng)與蒸餾燒瓶支管口齊平，以測量餾出蒸氣的溫度； 【演示實驗1-2】（要求學(xué)生認真觀察，注意實驗步驟）【板書】

2、重結(jié)晶

（1）冷卻法：將熱的飽和溶液慢慢冷卻后析出晶體，此法適合于溶解度隨溫度變化較大的溶液。

（2）蒸發(fā)法：此法適合于溶解度隨溫度變化不大的溶液，如粗鹽的提純。（3）重結(jié)晶：將以知的晶體用蒸餾水溶解，經(jīng)過濾、蒸發(fā)、冷卻等步驟，再次析出晶體，得到更純凈的晶體的過程。

重結(jié)晶的首要工作是選擇適當?shù)娜軇?，要求該溶劑：?）雜質(zhì)在此溶劑中的溶解度很小或溶解度很大，易于除去；（2）被提純的有機物在此溶劑中的溶解度，受溫度的影響較大?！舅伎寂c交流】

1、已知KNO3在水中的溶解度很容易隨溫度變化而變化，而NaCl的溶解度卻變化不大，據(jù)此可用何方法分離出兩者混合物中的KNO3并加以提純？

2、重結(jié)晶對溶劑有何要求？被提純的有機物的溶解度需符合什么特點？

3、重結(jié)晶苯甲酸需用到哪些實驗儀器？

4、能否用簡潔的語言歸納重結(jié)晶苯甲酸的實驗步驟？ 【概括】高溫溶解、趁熱過濾、低溫結(jié)晶

【補充】

1、洗滌沉淀或晶體的方法：用膠頭滴管往晶體上加蒸餾水直至晶體被浸沒，待水完全流出后，重復(fù)兩至三次，直至晶體被洗凈。

2、檢驗洗滌效果：取最后一次的洗出液，再選擇適當?shù)脑噭┻M行檢驗。

【板書】

3、萃取（1）所用儀器：燒杯、漏斗架、分液漏斗。

（2）萃取：利用溶液在互不相溶的溶劑里溶解度的不同，用一種溶劑把溶質(zhì)從它與另一種溶劑組成的溶液中提取出來，前者稱為萃取劑，一般溶質(zhì)在萃取劑里的溶解度更大些。

分液：利用互不相溶的液體的密度不同，用分液漏斗將它們一一分離出來。注意事項：

1、萃取劑必須具備兩個條件：一是與溶劑互不相溶；二是溶質(zhì)在萃取劑中的溶解度較大。

2、檢查分液漏斗的瓶塞和旋塞是否嚴密。

3、萃取常在分液漏斗中進行，分液是萃取操作的一個步驟，必須經(jīng)過充分振蕩后再靜置分層。

4、分液時，打開分液漏斗的活塞，將下層液體從漏斗頸放出，當下層液體剛好放完時，要立即關(guān)閉活塞，上層液體從上口倒出。

練習(xí)1 下列每組中各有三對物質(zhì)，它們都能用分液漏斗分離的是 A 乙酸乙酯和水，酒精和水，植物油和水 B 四氯化碳和水，溴苯和水，硝基苯和水 C 甘油和水，乙酸和水，乙酸和乙醇 D 汽油和水，苯和水，己烷和水

練習(xí)2 可以用分液漏斗分離的一組液體混和物是 A 溴和四氯化碳 B 苯和溴苯 C 汽油和苯 D 硝基苯和水

當堂檢測

1)．下列屬于分離、提純液態(tài)有機物的操作的是（）A．蒸餾 B．蒸發(fā) C．重結(jié)晶 D．過慮

2).下列各組混合物中，可以用分液漏斗分離的是（）

A.溴苯和水 B.乙酸和乙醇 C.酒精和水 D.溴苯和苯

3).現(xiàn)有三組混合液，①乙酸乙酯和乙酸鈉溶液 ②乙醇和丁醇 ③溴化鈉和單質(zhì)溴的水溶液，分離以上各混合液的正確方法依次是（）

A.分液、萃取、蒸餾 B.萃取、蒸餾、分液 Ｃ.分液、蒸餾、萃取 Ｄ．蒸餾、萃取、分液

4)．下列物質(zhì)中的雜質(zhì)（括號中是雜質(zhì)）分別可以用什么方法除去。（1）酒精（水）（2）壬烷（己烷）（3）KNO3（NaCl）（4）乙酸乙酯（乙醇）（5）甲烷（乙烯）（6）NaCl（泥沙）（7）溴水（水）（8）CO2（HCl）

第三篇：《有機物的分離與提純》教學(xué)設(shè)計

《有機物的分離與提純》教學(xué)設(shè)計

【教材分析】有機物的分離與提純是選修5第一章第四節(jié)第一課時。研究一個有機化合物，不論這個有機化合物是天然存在的，還是人工合成的，第一步就是分離、提純，得到純凈的有機化合物。分離提純有機化合物是正確測定其元素組成和機構(gòu)的基礎(chǔ)，是進行現(xiàn)代物理方法測試前必須做好的準備工作。隨著科學(xué)技術(shù)的進步與發(fā)展，分離、提純的方法也逐漸增多，這節(jié)僅學(xué)習(xí)最常用的基本方法——蒸餾法、萃取法和重結(jié)晶法?！窘虒W(xué)目標】 知識與技能：

1、了解怎樣研究有機化合物應(yīng)采取的步驟和方法

2、掌握有機化合物分離提純的常用方法

3、掌握蒸餾、重結(jié)晶和萃取實驗的基本技能

過程與方法： 通過有機化合物研究方法的學(xué)習(xí)，了解分離提純的常見方法

情感態(tài)度與價值觀：通過化學(xué)實驗激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)化學(xué)的興趣，體驗科學(xué)研究的艱辛和喜悅，感受化學(xué)世界的奇妙與和諧

【教學(xué)重點】掌握蒸餾、重結(jié)晶、萃取的實驗操作方法 【教學(xué)難點】重結(jié)晶的原理 【教學(xué)方法】通過觀看網(wǎng)上下載的實驗錄像、教師演示實驗、學(xué)生動手操作來學(xué)習(xí)實驗操作，通過多媒體展示教學(xué)過程，通過分組實驗分組討論來歸納整理，讓學(xué)生更直觀地學(xué)習(xí)?！窘虒W(xué)過程】 好奇實驗：

菠菜的顏色是由一種色素構(gòu)成的嗎？

小實驗 現(xiàn)象：3種顏色 綠色 黃綠色 黃色

有機物（不純）——有機物（純凈）——確定實驗式——確定分子式——結(jié)構(gòu)式（有哪些官能團）

一、蒸餾

（1）基本原理：利用混合液體或液-固體系中各組分沸點不同，使低沸點組分蒸發(fā)，再冷凝以分離整個組分的操作過程?！咎釂枴?/p>

（2）基本條件：① 有機物熱穩(wěn)定性較強；

②與雜質(zhì)的沸點相差較大（一般約大于30℃）?！咎釂枴?/p>

（3）實驗儀器：鐵架臺、酒精燈、石棉網(wǎng)、蒸餾燒瓶、溫度計、冷凝管、牛角管、錐形瓶（4）實驗操作：工業(yè)酒精的分離【通過網(wǎng)上下載的實驗錄像《含有雜質(zhì)的工業(yè)乙醇的蒸餾》一起來學(xué)習(xí)蒸餾的儀器組裝，實驗過程以及實驗注意事項】

（5）注意事項：①在蒸餾燒瓶中放少量碎瓷片，防止液體暴沸。

②溫度計水銀球的位置應(yīng)與支管底口下緣位于同一水平線上。③冷凝管中冷卻水從下口進，從上口出； 先通水后點燈?！咎釂枴?/p>

【思考】工業(yè)上如何制取無水乙醇？

工業(yè)乙醇——（蒸餾）——95.6﹪的共沸混合物——(CaO)——99.5﹪以上的無水乙醇 【思考與交流】

1、如何提取溴水中的溴？

2、實驗原理是什么？

3、用到的實驗儀器（玻璃儀器）有哪些？

4、如何選取萃取劑？

二、萃取

（1）基本原理：利用混合物中一種溶質(zhì)在不同溶劑里的溶解度不同,用一種溶劑把這種溶質(zhì)從另一種溶劑里提出取出來的方法?！咎釂枴?/p>

（2）萃取劑的選擇：① 萃取劑和原溶劑互不相溶且不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。

②溶質(zhì)在萃取劑中的溶解度遠大于在原溶劑中溶解度。【提問】

（2）學(xué)生實驗

碘水的分離

用4ml的四氯化碳萃取10ml碘水中的碘

（3）操作步驟

1.檢漏2.加液3.振蕩4.靜置5.分液【提問】 【思考與交流】

如何提純苯甲酸、NaCl和沙子組成的混合物中的苯甲酸 提示:（1）苯甲酸在水中溶解度：0.35g（25℃）、5.9g（100℃）

（2）NaCl在水中溶解度：36.2g（25℃）、39.8（100℃）

（3）沙子不溶于水

先在較高的溫度下溶解樣品，過濾，除去沙子，再冷卻，苯甲酸就會析出

二、重結(jié)晶

（1）溶劑的條件：①雜質(zhì)在此溶劑中溶解度很小或很大；

②被提純有機物在此溶劑中的溶解度受溫度的影響較大。（4）實驗操作：【通過教師的演示來學(xué)習(xí)整個操作過程】

學(xué)與問：為了得到更多的苯甲酸晶體，是不是結(jié)晶時的溫度越低越好？

答：不是。因為溫度過低，雜質(zhì)的溶解度也會降低，部分雜質(zhì)也會析出，達不到提純苯甲酸的目的。

【 隨堂練習(xí)】

1、連線題，將下列物質(zhì)中的雜質(zhì)(括號中是雜質(zhì))與除雜方法連接起來。

物質(zhì)

方法(1)酒精(水)

A．結(jié)晶或重結(jié)晶(2)壬烷(己烷)

B．CaO，蒸餾(3)乙酸乙酯(乙醇)

C．洗氣

(4)甲烷(乙烯)

D．飽和Na2CO3溶液，分液(5)溴水(水)

E．蒸餾(6)CO2(HCl)

F．溶解，過濾（7）KNO3(NaCl)

G．萃取 答案：1B 2E 3D 4C 5G 6C 7A

2、可以用分液漏斗分離的一組混合物是(D)

A．溴和四氯化碳

B．苯和溴苯

C．酒精和水

D．硝基苯和水

3、下列實驗操作中錯誤的是(C)A．分液時，分液漏斗中下層液體從下口放出，上層液體從上口倒出 B．蒸餾時應(yīng)使溫度計水銀球靠近蒸餾燒瓶支管口 C．重結(jié)晶實驗中，玻璃棒只有攪拌作用。

D．稱量時，稱量物放在稱量紙上，置于托盤天平的左盤，砝碼放在托盤天平的右盤 小結(jié)：

【教學(xué)反思】本節(jié)課通過實驗觀看、教師演示、學(xué)生動手操作，基本完成了教學(xué)目標； 通過有機化合物研究方法的學(xué)習(xí)，了解分離提純的常見方法；通過化學(xué)實驗激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)化學(xué)的興趣，體驗科學(xué)研究的艱辛和喜悅，感受化學(xué)世界的奇妙與和諧。

第四篇：初中化學(xué)物質(zhì)分離與提純的常用方法小結(jié)

初中化學(xué)物質(zhì)分離與提純的常用方法小結(jié)

物質(zhì)的分離是將幾種物質(zhì)通過物理或化學(xué)方法分開，提純則要求把不純物質(zhì)中的雜質(zhì)除去。提純的原則是： ①不增：即在除掉雜質(zhì)時不增加新雜質(zhì)。②不減：即被提純的物質(zhì)不能減少或改變。③易分：即操作簡便易行，雜質(zhì)易分離除去。

④最佳：即最好在除去雜質(zhì)的同時能增加被提純物質(zhì)的量。

一、常用的物理方法

1.過濾法：適用于固體與液體的混合物進行分離。

①先將混合物溶于水。

②過濾。

③將濾液蒸發(fā)得某溶質(zhì)。

2、蒸發(fā)：適用于可溶性固體溶質(zhì)與溶劑的分離。

3、降溫結(jié)晶（重結(jié)晶）法：適用于兩種可溶性固體的溶解度受溫度影響變化明顯不同的混合物進行分離。溶解度變化大的那種物質(zhì)被提純出來。

可按如下步驟：①在高溫下制成飽和溶液，②結(jié)晶，③過濾。

4、特殊性質(zhì)法：利用混合物中某些物質(zhì)的特性進行物質(zhì)分離。如：Cu粉中混有Fe粉，可用磁鐵吸出鐵粉。

二、常用的化學(xué)方法

原理：所用試劑能與雜質(zhì)反應(yīng)，不能與提純物反應(yīng)，把雜質(zhì)轉(zhuǎn)化成水；氣體；沉淀除去，又不能引入新的雜質(zhì)。

1、沉淀法：即加入一種試劑和雜質(zhì)反應(yīng)生成沉淀經(jīng)過濾而除去。如：HNO3中混有H2SO4，可加入適量的Ba(NO3)2溶液：

2、化氣法：即加入一種試劑和雜質(zhì)反應(yīng)，使其生成氣體而除去。如一般某鹽中混有少量碳酸鹽、碳酸氫鹽等常用此法除去。

如NaCl溶液中混有Na2CO3，可加入適量的稀鹽酸：

3、置換法：即在某鹽溶液中加入某金屬，把鹽溶液中的金屬置換出來，從而把雜質(zhì)除去。

如Zn SO4 溶液中含有CuSO4，可加入過量的鋅：

4、轉(zhuǎn)化法：即通過某種方法，把雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為被提純的物質(zhì)。如CO2氣體中混有少量的CO，可將混合氣體通過盛有足量灼熱的CuO的試管：

第五篇：有機化學(xué)試題庫六——鑒別與分離提純題及解答

試題庫六——鑒別與分離提純題及解答

6-1．(A)己烷(B)1－己炔(C)2－己炔

+ 答：加入溴水不褪色的為(A)，余下兩者加入Ag(NH3)2溶液有白色沉淀生成的為(B)，另者為(C)。

6-2．(A)1－戊炔(B)1－戊烯(C)正戊烷

+ 答：加入KMnO4溶液不褪色的為(C)，余下兩者加入Ag(NH3)2溶液有白色沉淀生成的為(A)，另者為(B)。

6-3．(A)1－戊炔(B)2－戊炔(C)1,3－戊二烯

+ 答：加入Ag(NH3)2溶液有白色沉淀生成的為(A)，余下兩者加入順丁烯二酸酐有白色沉淀生成的為(C)，另者為(B)。

6-4．(A)甲苯(B)苯乙烯(C)苯乙炔

+答：加入溴水不褪色的為(A)，余下兩者加入Ag(NH3)2溶液有白色沉淀生成的為(C)，另者為(B)。

6-5．(A)環(huán)己烯(B)1,1－二甲基環(huán)丙烷(C)1,3－環(huán)己二烯

答：加入KMnO4溶液不褪色的為(B)，余下兩者加入順丁烯二酸酐有白色沉淀生成的為(C)，另者為(A)。

6-6．(A)2－丁烯(B)1－丁炔(C)乙基環(huán)丙烷

+答：加入KMnO4溶液不褪色的為(C)，余下兩者加入Ag(NH3)2溶液有白色沉淀生成的為(B)，另者為(A)。

6-7．(A)1－庚炔(B)2－庚炔(C)1,3－庚二烯

+答：加入Ag(NH3)2溶液有白色沉淀生成的為(A)，余下兩者加入順丁烯二酸酐有白色沉淀生成的為(C)，另者為(B)。

6-8．(A)環(huán)己基乙炔(B)環(huán)己基乙烯(C)2－環(huán)己基丙烷

+答：加入Ag(NH3)2溶液有白色沉淀生成的為(A)，余下兩者加入溴水，使褪色的為(B)，另者為(C)。

6-9．(A)2－辛炔(B)環(huán)丙烷(C)1,3－環(huán)戊二烯

答：加入KMnO4溶液不褪色的為(B)，余下兩者加入順丁烯二酸酐有白色沉淀生成的為(C)，另者為(A)。

6-10．(A)丙烯(B)環(huán)丙烷(C)丙炔

答：加入氯化亞銅氨溶液有磚紅色沉淀生成的為(C)，另兩者加入稀的KMnO4溶液，使之褪色的為(A)，余者為(B)。

6-11．苯乙炔 環(huán)己烯 環(huán)己烷

+加溴水使溴水不褪色的為環(huán)己烷，余者加Ag(NH3)2有白色沉淀為苯乙炔。6-12.1－戊烯 1,2－二甲基環(huán)丙烷

加KMnO4不褪色的為1,2-二甲基環(huán)丙烷。6-13．2-丁烯 1-丁炔 乙基環(huán)丙烷

+ 加KMnO4不褪色的為乙基環(huán)丙烷，余者加Ag(NH3)2有白色沉淀為1－丁炔。6-14.環(huán)丙烷與丙烷 5．1,2－二甲基環(huán)丙烷與環(huán)戊烷

加溴水使溴水褪色的為環(huán)丙烷。加溴水褪色的為1,2-二甲基環(huán)丙烷。6-15.乙基環(huán)丙烷和環(huán)戊烷 7．乙基環(huán)丙烷和乙烯基環(huán)丙烷 加溴水使溴水褪色的為乙基環(huán)丙烷。加KMnO4褪色的為乙烯基環(huán)丙烷。6-16.環(huán)己烯與異丙基環(huán)丙烷 9．丁烷和甲基環(huán)丙烷

加KMnO4褪色的為環(huán)己烯。加溴水使溴水褪色的為乙基環(huán)丙烷。6-17.1,3－環(huán)已二烯與環(huán)己烯

加順丁烯二酸酐產(chǎn)生白色沉淀的為1,3－環(huán)己二烯。6-18．甲基環(huán)丁烷和環(huán)己烷

加溴水使溴水褪色的為乙基環(huán)丙烷。

6-19.環(huán)丁烯與1,3－丁二烯鑒別下列各組化合物 1．甲苯 1－己烯 1,3－環(huán)己二烯

加入溴水無變化者為甲苯，已反應(yīng)的兩種化合物中加入順丁烯二酸酐，產(chǎn)生白色沉淀者為1,3環(huán)己二烯。

6-20．苯 乙苯 苯基乙炔

+加入Ag(NH3)2有白色者為苯基乙炔，余下兩者加入KMnO4溶液，使之褪色者為乙苯。6-21．鄰甲苯酚 甲苯 苯

加入FeCl3溶液有顏色反應(yīng)者為鄰甲苯酚，余下兩者加入KMnO4溶液，使之褪色者為甲苯，另者為苯。

6-22．環(huán)戊基苯 叔丁基苯 苯酚

加入溴水生成白色沉淀的為苯酚，余下兩者加入KMnO4溶液使之褪色者為環(huán)戊基苯，另者為叔丁基苯。

6-23．苯 異丙苯 苯乙烯

加入溴水褪色者為苯乙烯，余下兩者加入KMnO4溶液，使之褪色者為異丙苯，另者為苯。

加順丁烯二酸酐產(chǎn)生白色沉淀的為1,3－丁二烯。

6-24．正溴丙烷 叔丁基溴 3-溴丙烯

答：加入硝酸銀的乙醇溶液，室溫下有淺黃色生成的為3－溴丙烯和叔丁基溴，余者為正溴丙烷。將前兩者加入溴的四氯化碳溶液使溴水褪色者為3－溴丙烯。6-25．對氯甲苯 芐基氯 烯丙基氯

答：加入Ag(NH3)2的乙醇溶液有白色沉淀生成的為芐基氯和烯丙基氯，余者為對苯基氯。有沉淀的兩者加入溴水，使溴水褪色的為烯丙基溴，另者為芐基氯。

CH2Cl6-26．

答：加入硝酸銀乙醇溶液，室溫下有白色沉淀生成的為芐基氯，另者為鄰氯甲苯。6-27．與CH3ClCH2Br

CH3Br

CH2CH2Br

答：室溫加入硝酸銀乙醇溶液有淡黃色沉淀的為芐基溴，加熱后有淡黃色沉淀的為2－苯基－1－溴乙烷，而對甲基溴苯即使加熱也無沉淀生成。6-28．對氯甲苯 芐基氯 2-苯基氯乙烷

答：加入硝酸銀的乙醇溶液室溫下有白色沉淀的為芐基氯，加熱以后有白色沉淀的為2-苯基氯乙烷，無變化的為對氯甲苯。

6-29．(A)(CH3)3CBr(B)CH2=CHCH2Br(C)CH3CHCHBr

答：加入硝酸銀乙醇溶液室溫下有淡黃色沉淀的為(A)和(B)，將(A)和(B)兩種液體加入溴水，使溴水褪色的為(B)，另者為(A)。

6-30．(A)3－溴環(huán)己烯(B)氯代環(huán)己烷(C)碘代環(huán)己烷

答：加入硝酸銀乙醇溶液室溫下有黃色沉淀的為（A）和（C），無變化的為(B)，將（A）和（C）加入高錳酸鉀，使高錳酸鉀退色的為（A），另者為(C)。

6-31．用簡單方法鑒別下列兩組化合物。

（1）1－溴丙烷和1－碘丙烷

（2）烯丙基溴和1－溴丙烷

答 ：（1）加入AgNO3－C2H5OH溶液1－碘丙烷立即產(chǎn)生黃色沉淀。

（2）加入AgNO3－C2H5OH溶液烯丙基溴立即產(chǎn)生淡黃色沉淀。6-32．(A)氯乙烯(B)丙炔(C)溴丙烷

答：加入銀氨溶液有白色沉淀的為(B)，余者能與硝酸銀的乙醇溶液溫?zé)釙r能生成淡黃色沉淀的為(C)，另者為(A)。

6-33．(A)正碘丁烷(B)正丁烷(C)環(huán)己烯

答：加入溴水能使溴水褪色的為(C)，余下二者加入硝酸銀乙醇溶液溫?zé)幔悬S色碘化銀沉淀的為(A),另者為(B)。

6-34．(A)環(huán)己醇(B)環(huán)己烯(C)環(huán)己基溴

答：加入溴水使溴水褪色的為(B)，余下兩者加入硝酸銀的醇溶液，有淡黃色沉淀的為(C),另者為(A)。（也可用金屬鈉鑒別醇的方法，先鑒別出環(huán)己醇）。

6-35

6-36

6-37 兩瓶沒有標簽的無色液體，一瓶是正己烷，另一瓶是1－己烯，用什么簡單方法可以給它們貼上正確的標簽？ 答案：

1－己烯正己烷無反應(yīng)Br2 / CCl4or KMnO4褪色1－己烯 正己烷用簡單并有明顯現(xiàn)象的化學(xué)方法鑒別下列各組化合物：

a.正庚烷 1,4－庚二烯 1－庚炔 b.1－己炔 2－己炔 2－甲基戊烷 答案：

a.正庚烷1,4－庚二烯1－庚炔Ag(NH3)2+灰白色1－庚炔褪色1,4－庚二烯正庚烷無反應(yīng)正庚烷1,4－庚二烯1－己炔Br2 / CCl4無反應(yīng)b.2－甲基戊烷2－己炔1－己炔Ag(NH3)2+灰白色褪色無反應(yīng)2－甲基戊烷Br2 / CCl42－己炔無反應(yīng)2－己炔2－甲基戊烷

6-38 用簡單化學(xué)方法鑒別下列各組化合物：

a.1,3－環(huán)己二烯，苯和1－己炔 b.環(huán)丙烷和丙烯 答案：

a.A1,3－環(huán)己二烯BC苯1－己炔+Ag(NH3)2灰白色C無反應(yīng)BA無反應(yīng)ABr2 / CCl4B褪色b.AB環(huán)丙烷丙烯無反應(yīng) KMnO4褪色AB

6-39 用簡便且有明顯現(xiàn)象的方法鑒別下列各組化合物 a.HCCCH2CH2OHCH3CCCH2OH b.CH2OHOHCH3

c.CH3CH2OCH2CH3 , CH3CH2CH2CH2OH , CH3(CH2)4CH3 d.CH3CH2Br , CH3CH2OH 答案：

+a.Ag(NH3)2 b.FeCl3 c.濃H2SO4和K2Cr2O7 d.濃H2SO4 6-40 簡單化學(xué)方法鑒別下列各組化合物

a.丙醛、丙酮、丙醇和異丙醇 b.戊醛、2-戊酮和環(huán)戊酮 答案：

a.ABCD丙醛丙酮丙醇異丙醇2,4－二硝基苯肼沉淀有沉淀ＡTollen試劑ＢＣＤI2 / NaOH無沉淀無沉淀黃色沉淀沉淀Tollen試劑無沉淀BCI2 / NaOH無沉淀CＡＢＣＤ無沉淀b.ABC戊醛2－戊酮環(huán)戊酮ACHI3B

COOCH36-41 用簡單化學(xué)方法鑒別下列各組化合物：

COOHa.COOHCOOH與CH2COOHCH2COOHb.OCH3COOH與OHOHOHc.(CH3)2CHCH=CHCOOH與COOHd.CH3與與COCH3OHCH=CH2

答案：

a.KmnO4 b.FeCl3 c.Br2 or KmnO4 d.①FeCl3 ②2,4-二硝基苯肼或I2 / NaOH 6-42 怎樣將己醇、己酸和對甲苯酚的混合物分離得到各種純的組分？ 答案：

己醇ANaHCO3水溶液有機相已醇對甲苯酚NaOH有機相水相已酸鈉HCl已酸B水相酚鈉HCl酚C已酸B對甲苯酚C已醇A

6-43 用化學(xué)方法鑒別下列各組化合物：

a.鄰甲苯胺 N－甲基苯胺 苯甲酸和鄰羥基苯甲酸 b.三甲胺鹽酸鹽 溴化四乙基銨 答案：

CH3a.NH2(A)不溶AB(B)NaOHCOOH(C)顯色COOHOH可溶(D)CDFeCl3不顯色DH3CNaOHSO2Cl不溶可溶BNHCH3AC

AgClb.(CH3)3N ．HCl+(A)白A或者用NaOHA分層AgNO3AgBr黃B(CH3CH2)4NBr－(B)Ｂ均相

由于三甲胺b.p.3℃,可能逸出,也可能部分溶于NaOH,所以用AgNO3 作鑒別較好.6-44 N－甲基苯胺中混有少量苯胺和N,N－二甲苯胺,怎樣將N－甲基胺提純? 答案： 使用Hinsberg反應(yīng).(注意分離提純和鑒別程序的不同)NHCH3CH3ANH2BH3CSO2ClNSO2CH3(D)蒸鎦除去CNaOH水洗除ENHSO2CH3(E)CNH3CCH3CH3NH3CH+CH3CH3NH。HCl有機相NSO2(D)CH3OH－NHCH3純Ａ

6-45 將芐胺、芐醇及對甲苯酚的混合物分離為三種純的組分。

CH2NH2(A)CH2OHNaOH水溶液(B)(C)HOCH3再進一步分別純化水相C的鈉鹽稀HClC水相有機相ABHCl有機相A的鹽酸鹽BNaOHA

6-46 用簡單化學(xué)方法鑒別下列各組化合物

a.葡萄糖和蔗糖 b.纖維素和淀粉 c.麥牙糖和淀粉 d.葡萄糖和果糖 e.甲基-β-D-吡喃甘露糖苷和2-O-甲基-β-D-吡喃甘露糖 答案： a.Bendict 試劑;b.I2c.I2d.Br2_H2Oe.Tollen試劑

6-47 怎樣鑒別下列各組化合物? a.糠醛 苯甲醛 b.苯與噻吩 c.吡咯與四氫吡咯 d.吡啶與苯 答案：

a.苯胺醋酸鹽 b.濃H2SO4，室溫 c.KOH or HCl or I2 d.HCl 6-48 怎樣鑒別下列各組化合物? a.糠醛 苯甲醛 b.苯與噻吩 c.吡咯與四氫吡咯 d.吡啶與苯 答案：

a.苯胺醋酸鹽 b.濃H2SO4，室溫

6-49．正溴丙烷 叔丁基溴 3-溴丙烯

答：加入硝酸銀的乙醇溶液，室溫下有淺黃色生成的為3－溴丙烯和叔丁基溴，余者為正溴丙烷。將前兩者加入溴的四氯化碳溶液使溴水褪色者為3－溴丙烯。6-50．對氯甲苯 芐基氯 烯丙基氯

答：加入Ag(NH3)2的乙醇溶液有白色沉淀生成的為芐基氯和烯丙基氯，余者為對苯基氯。有沉淀的兩者加入溴水，使溴水褪色的為烯丙基溴，另者為芐基氯。

CH2Cl6-51．

答：加入硝酸銀乙醇溶液，室溫下有白色沉淀生成的為芐基氯，另者為鄰氯甲苯。6-52．與CH3ClCH2Br

CH3Br

CH2CH2Br

答：室溫加入硝酸銀乙醇溶液有淡黃色沉淀的為芐基溴，加熱后有淡黃色沉淀的為2－苯基－1－溴乙烷，而對甲基溴苯即使加熱也無沉淀生成。6-53．對氯甲苯 芐基氯 2-苯基氯乙烷

答：加入硝酸銀的乙醇溶液室溫下有白色沉淀的為芐基氯，加熱以后有白色沉淀的為2-苯基氯乙烷，無變化的為對氯甲苯。

6-54．(A)(CH3)3CBr(B)CH2=CHCH2Br(C)CH3CHCHBr

答：加入硝酸銀乙醇溶液室溫下有淡黃色沉淀的為(A)和(B)，將(A)和(B)兩種液體加入溴水，使溴水褪色的為(B)，另者為(A)。

6-55．(A)3－溴環(huán)己烯(B)氯代環(huán)己烷(C)碘代環(huán)己烷

答：加入硝酸銀乙醇溶液室溫下有黃色沉淀的為（A）和（C），無變化的為(B)，將（A）和（C）加入高錳酸鉀，使高錳酸鉀退色的為（A），另者為(C)。6-56．用簡單方法鑒別下列兩組化合物。

（1）1－溴丙烷和1－碘丙烷

（2）烯丙基溴和1－溴丙烷

答 ：（1）加入AgNO3－C2H5OH溶液1－碘丙烷立即產(chǎn)生黃色沉淀。

（2）加入AgNO3－C2H5OH溶液烯丙基溴立即產(chǎn)生淡黃色沉淀。6-57．(A)氯乙烯(B)丙炔(C)溴丙烷

答：加入銀氨溶液有白色沉淀的為(B)，余者能與硝酸銀的乙醇溶液溫?zé)釙r能生成淡黃色沉淀的為(C)，另者為(A)。

6-58．(A)正碘丁烷(B)正丁烷(C)環(huán)己烯

答：加入溴水能使溴水褪色的為(C)，余下二者加入硝酸銀乙醇溶液溫?zé)?，有黃色碘化銀沉淀的為(A),另者為(B)。

6-59．(A)環(huán)己醇(B)環(huán)己烯(C)環(huán)己基溴

答：加入溴水使溴水褪色的為(B)，余下兩者加入硝酸銀的醇溶液，有淡黃色沉淀的為(C),另者為(A)。（也可用金屬鈉鑒別醇的方法，先鑒別出環(huán)己醇）。