第一篇:血細(xì)胞分析作業(yè)指導(dǎo)書(shū)
血細(xì)胞分析檢驗(yàn)程序 檢驗(yàn)?zāi)康?/p>
檢測(cè)血液中血細(xì)胞(紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板)數(shù)量、白細(xì)胞分類(lèi)及相關(guān)參數(shù)(HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW及MPV等)的變化對(duì)臨床有關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果具有重要參考價(jià)值。2 檢測(cè)原理
血常規(guī)檢查方法采用血細(xì)胞自動(dòng)分析儀法,參見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》p7~11,部分白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)采用顯微鏡檢查法,參見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》p5~7。
2.1 電阻抗法血細(xì)胞計(jì)數(shù)(光電6318-K):即在細(xì)胞檢測(cè)器微孔的兩側(cè)各有一個(gè)電極,兩電極間通有恒定電流,經(jīng)過(guò)稀釋液(電解質(zhì)溶液)稀釋的血樣(血細(xì)胞)在通過(guò)檢測(cè)器微孔時(shí),產(chǎn)生了一個(gè)電脈沖;脈沖的高低代表細(xì)胞體積的大小,脈沖的個(gè)數(shù)代表細(xì)胞的數(shù)量。
2.2 細(xì)胞化學(xué)和光散射法白細(xì)胞計(jì)數(shù)(Ac.T 5-diff):即將血液經(jīng)過(guò)細(xì)胞化學(xué)試劑染色,不同的白細(xì)胞胞漿內(nèi)部即可出現(xiàn)不同的酶化學(xué)反應(yīng)。當(dāng)這些細(xì)胞通過(guò)測(cè)量區(qū)時(shí),由于酶反應(yīng)強(qiáng)度不同和細(xì)胞體積大小差異,激光束射到細(xì)胞上的前向角和散射角不同,以X軸為吸光率,Y軸為光散射,每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生兩個(gè)信號(hào)結(jié)合定位在細(xì)胞分布散點(diǎn)圖上。計(jì)算機(jī)對(duì)存儲(chǔ)的測(cè)量信息進(jìn)行分析處理,得出白細(xì)胞總數(shù)和分類(lèi)計(jì)數(shù)結(jié)果。
2.3 多角度激光法白細(xì)胞計(jì)數(shù)(XE-2100 XT-1800i):在白細(xì)胞分類(lèi)通道:全血加入溶血?jiǎng)?FD-Ⅰ和FD-Ⅱ)作用后,嗜酸性粒細(xì)胞內(nèi)顆粒被染色;其它白細(xì)胞略有皺縮。WBC/BASO通道:全血加入溶血?jiǎng)?FB)溶血。除BASO外,其它白細(xì)胞均明顯皺縮。儀器從低角度及高角度分析白細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。計(jì)算機(jī)對(duì)存儲(chǔ)的測(cè)量信息進(jìn)行分析處理,得出白細(xì)胞總數(shù)和分類(lèi)計(jì)數(shù)結(jié)果。
2.4 光電比色法測(cè)量血紅蛋白:在稀釋的血樣中加入溶血?jiǎng)┦辜t細(xì)胞膜破裂釋放出血紅蛋白,后者與溶血?jiǎng)┲杏嘘P(guān)成分結(jié)合形成Hb衍生物,進(jìn)入Hb測(cè)試系統(tǒng),在特定波長(zhǎng)(一般在530~550nm)下比色,吸光度的變化與液體中Hb含量成正比,儀器便可顯示其濃度。不同型號(hào)的血細(xì)胞分析儀配套溶血?jiǎng)┡浞讲煌?,形成的Hb衍生物亦不同,其吸收光譜各異但最大吸收均接近540nm。2.5 光散射法紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)(Ac.T 5-diff):以二維激光散射法檢測(cè)紅細(xì)胞和血小板。紅細(xì)胞測(cè)試原理是:在測(cè)試系統(tǒng)中,全血與紅細(xì)胞/血小板稀釋液混合,使自然狀態(tài)下雙凹盤(pán)狀扁平圓形的紅細(xì)胞成為球形并經(jīng)戊二醛固定,此種處理并不影響MCV體積。紅細(xì)胞無(wú)論以何種方位通過(guò)測(cè)量區(qū)時(shí),被激光束照射后所得的信號(hào)是相同的。激光束以低角度前向光散射和高角度光散射同時(shí)測(cè)量一個(gè)紅細(xì)胞,根據(jù)低角度光散射轉(zhuǎn)換能量大小,測(cè)量單個(gè)紅細(xì)胞體積與總數(shù);根據(jù)高角度光散射得出單個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白濃度。血小板與紅細(xì)胞在一個(gè)系統(tǒng)中測(cè)量,其原理是:根據(jù)同質(zhì)性球體光散射的Mie理論,當(dāng)球形化的血小板單個(gè)通過(guò)激光照射區(qū)時(shí),儀器在兩個(gè)角度測(cè)定激光的散射強(qiáng)度:高角度主要測(cè)細(xì)胞的折射指數(shù)(RI),它與細(xì)胞的密度有關(guān);低角度主要測(cè)細(xì)胞體積的大小。血小板的體積在1~30fl,RI在1.35~1.40之間。計(jì)算機(jī)對(duì)存儲(chǔ)的測(cè)量信息進(jìn)行分析處理,得出紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)結(jié)果。
2.6 顯微鏡白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù):把血液制成細(xì)胞分布均勻的薄膜涂片,經(jīng)瑞氏染料染色后,在顯微鏡下根據(jù)白細(xì)胞形態(tài)特征予以分類(lèi)計(jì)數(shù),得出相對(duì)比值(百分率),并觀察細(xì)胞形態(tài)的變化。3 設(shè)備性能參數(shù)
血細(xì)胞分析儀的操作性能因儀器的種類(lèi)與型號(hào)不同而異。3.1 XE-2100 XT-1800i血細(xì)胞分析儀
3.1.1 本儀器檢測(cè)血細(xì)胞的線性范圍為:WBC:(0.0~100.0)×109/L,RBC:(0.0~8.00)×1012/L;HGB:0.0~250g/L,PLT:(0.0~1000)×109/L。3.1.2 本儀器檢測(cè)血細(xì)胞的精密度為:WBC:±2.0%,RBC:±2.0%,HGB:±2.0%,PLT:±5.0%。
3.2 MEK-6108K MEK-6318K血細(xì)胞分析儀
3.2.1 本儀器檢測(cè)血細(xì)胞的線性范圍為:WBC:(0.0~99.99)×109/L,RBC:(0.00~9.99)×1012/L,HGB:0~299g/L,PLT:(10~999)×109/L。3.2.2 本儀器檢測(cè)血細(xì)胞的精密度為:WBC:±3.0%,RBC:±2.0%,HGB:±2.0%和PLT:±5%。3.3 Ac.T 5diff 血細(xì)胞分析儀
3.3.1 本儀器檢測(cè)血細(xì)胞的線性范圍為:WBC:(0.4~90.0)×109/L,RBC:(0.23~7.70)×1012/L,HGB:0~229g/L,PLT:(4~1000)×109/L。
3.3.2 本儀器檢測(cè)血細(xì)胞的精密度為:WBC:±3.0%,RBC:±2.0%,HGB:±2.0%和PLT:±6%。4 標(biāo)本
4.1 臨床護(hù)士抽取患者抗凝靜脈血2~3ml。4.2 采血后立即送到臨床檢驗(yàn)科。
4.3 血量不夠1ml或血液凝固、溶血或嚴(yán)重脂血標(biāo)本不能作檢測(cè)。5 設(shè)備和試劑
5.1 設(shè)備:XE-2100、XT-1800i、MEK-6108K、MEK-6318K 血細(xì)胞分析儀。5.2 試劑
5.2.1 稀釋液、溶血?jiǎng)┖颓逑匆骸?/p>
5.2.2 CBC試劑、DIFF試劑、消泡劑和鞘液沖洗液。5.2.3 瑞氏染液及緩沖液。
5.3 購(gòu)買(mǎi)的試劑應(yīng)放室溫保存,注意防塵、防潮。
5.4 開(kāi)封后的試劑應(yīng)盡快用完,變質(zhì)、超過(guò)有效期的試劑不能使用。6 容器及試劑添加劑
血液標(biāo)本采集的容器是一次性含EDTA-K2抗凝劑的真空采血管;血液標(biāo)本必需添加劑是EDTA-K2抗凝劑。7 校準(zhǔn)步驟
血細(xì)胞分析儀的操作過(guò)程分別見(jiàn)XT-2100 XT-1800i血細(xì)胞分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序、Ac.T 5-diff血細(xì)胞分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序、和MEK6108-K MEK6318K血細(xì)胞分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序中儀器校準(zhǔn)程序。8 操作步驟
8.1 申請(qǐng)單及標(biāo)本編號(hào)
整理血液常規(guī)檢驗(yàn)申請(qǐng)單及血液標(biāo)本,審核合格后,對(duì)檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血液標(biāo)本進(jìn)行編號(hào)。8.2 上機(jī)測(cè)試 操作過(guò)程分別見(jiàn)XE-2100血細(xì)胞分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序、XT-1800i血細(xì)胞分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序、Ac.T 5diff血細(xì)胞分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序和MEK6108-K MEK-6318K血細(xì)胞分析儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序標(biāo)準(zhǔn)操作程序。8.3 檢驗(yàn)結(jié)果的輸入
8.3.1 打開(kāi)電腦,啟動(dòng)“檢驗(yàn)程序”,輸入用戶名及口令后,進(jìn)入檢驗(yàn)程序。8.3.2 單擊“檢驗(yàn)”菜單,選擇“檢驗(yàn)結(jié)果錄入修改”,進(jìn)行檢驗(yàn)結(jié)果的錄入及修改。通過(guò)申請(qǐng)序號(hào)進(jìn)行結(jié)果的輸入,選擇“工作單號(hào)”(XE-2100 XT-1800i自動(dòng)傳輸:掃入當(dāng)前檢驗(yàn)標(biāo)識(shí)序號(hào);Ac.T 5diff自動(dòng)傳輸:掃入當(dāng)前檢驗(yàn)標(biāo)識(shí)序號(hào);MEK-6108K MEK-6318K測(cè)定結(jié)果和其它非自動(dòng)傳輸標(biāo)本:輸入病人姓名),儀器會(huì)自動(dòng)傳輸入檢測(cè)結(jié)果;同時(shí)輸入當(dāng)前患者的樣品“采集時(shí)間”和“接收時(shí)間”。
8.3.3 儀器檢測(cè)結(jié)果必要進(jìn)一步鏡檢標(biāo)準(zhǔn)
8.3.3.1MEK-6318K和MEK6108-K血細(xì)胞分析儀等三分類(lèi)儀器檢測(cè)的標(biāo)本全部需要鏡檢血涂片。
8.3.3.2XE-2100 XT-1800i和Ac.T 5diff血細(xì)胞分析儀等五分類(lèi)儀器檢測(cè)結(jié)果根據(jù)本程序第18款[白細(xì)胞五分類(lèi)血細(xì)胞分析儀的白細(xì)胞分類(lèi)篩選原則]選出需要做血涂片檢查的血標(biāo)本。
8.3.3.3 臨床醫(yī)生要求做紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板等形態(tài)檢查的血標(biāo)本。8.4 顯微鏡檢查操作步驟
8.4.1 制片:靜脈抗凝血標(biāo)本混勻或末梢血標(biāo)本,采血后推成厚薄適宜的血膜片,血膜應(yīng)呈舌狀,頭、體、尾清晰可分。推好的血膜在空氣中晃動(dòng),以促使快干,以免細(xì)胞變形縮小。
8.4.2 染色:平置玻片于染色架上,滴加瑞氏染色液3~5滴,使其迅速蓋滿血膜,約1分鐘后,滴加緩沖液5~10滴,輕輕搖動(dòng)玻片或?qū)?zhǔn)血片吹氣,與染液充分混和,5~10分鐘后用水沖去染液,待干。
8.4.3 鏡檢:先用低倍鏡或高倍鏡閱覽全片,注意觀察血片染色情況:如有無(wú)血小板或紅細(xì)胞聚集,片尾有無(wú)巨大異常細(xì)胞,再結(jié)合儀器警告的內(nèi)容,分別重點(diǎn)從白細(xì)胞分類(lèi)、紅細(xì)胞參數(shù)和血小板參數(shù)等方面進(jìn)行觀察,記錄各類(lèi)細(xì)胞結(jié)果。8.5 鏡檢結(jié)果的輸入及報(bào)告確認(rèn) 單擊“結(jié)果處理”菜單,選擇“報(bào)告確認(rèn)”進(jìn)入結(jié)果確認(rèn),通過(guò)選擇“工作單元”、“報(bào)告日期”、“單張”或“批量”后,按“提取”鍵提取檢測(cè)結(jié)果,對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行逐一確認(rèn)。8.6 檢測(cè)過(guò)標(biāo)本及廢物的處理
檢測(cè)過(guò)的血液標(biāo)本、廢液及經(jīng)血液標(biāo)本污染的各種廢物按血液常規(guī)標(biāo)本的采集與處理程序(文件編號(hào):PLA301-LJK–CJ-001)中4.14進(jìn)行處理。9 質(zhì)量控制
9.1 室內(nèi)質(zhì)控:周一~五每天做室內(nèi)質(zhì)控(廠家提供的質(zhì)控物)。測(cè)定過(guò)程是:從4~8℃冰箱取出全血質(zhì)控物置室溫,血細(xì)胞分析儀開(kāi)機(jī)后預(yù)熱20min,分別將質(zhì)控物混勻后上機(jī)檢測(cè),打印結(jié)果并與允許值范圍對(duì)比,質(zhì)控合格后才能檢測(cè)病人血標(biāo)本。對(duì)于失控應(yīng)按質(zhì)量控制程序處理,儀器質(zhì)量控制當(dāng)天的情況進(jìn)行逐一登記。
9.2 室間質(zhì)控:每月參加科內(nèi)的室間質(zhì)控考評(píng)2次。每年參加衛(wèi)生部和WHO室間質(zhì)控。
9.3 細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)的質(zhì)量控制 9.3.1 影響分類(lèi)計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性的因素 9.3.1.1 細(xì)胞分布不均
在一般涂片的尾部中性粒細(xì)胞較多,淋巴細(xì)胞較少。涂片越薄細(xì)胞分布越差,粗糙的推片所制成的血涂片,細(xì)胞分布明顯不均。當(dāng)白細(xì)胞有聚集現(xiàn)象時(shí),細(xì)胞分布極不規(guī)則,以致無(wú)法準(zhǔn)確地進(jìn)行分類(lèi)。胞體在的細(xì)胞和幼稚細(xì)胞分布在涂片的尾部和邊緣,相反,淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞則位于涂片的頭部和體部。因此,在日常操作中,應(yīng)盡量注意這些問(wèn)題,減少 10 干擾因素
10.1 嚴(yán)重的黃疸或脂血使血紅蛋白結(jié)果假性增高。
10.2 紅細(xì)胞冷凝集可使紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)結(jié)果假性減低,白細(xì)胞假性增高(電阻抗法)或假性減低(激光法)和MCV假性增高。
10.3 冷凝球蛋白增高使白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)結(jié)果假性增高。10.4 有血小板凝集者可使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果假性減低。11 結(jié)果計(jì)算及測(cè)量不確定度 按儀器設(shè)計(jì)原理,只對(duì)紅細(xì)胞常數(shù)(紅細(xì)胞平均體積、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度)進(jìn)行計(jì)算,可根據(jù)RBC、HGB及HCT結(jié)果求出。11.1 紅細(xì)胞平均體積(MCV)MCV(fl)? 每升血液中紅細(xì)胞比積每升血液中紅細(xì)胞個(gè)數(shù) ?HCTRBC根據(jù)RBC及HCT,由下式求出。11.2 紅細(xì)胞平均血紅蛋白量(MCH)根據(jù)RBC及HGB,由下式來(lái)求出。
MCH(pg)? 每升血液中血紅蛋白含每升血液中紅細(xì)胞個(gè)數(shù)量 ?HGBRBC11.3 紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)根據(jù)HCT及HGB,由下式來(lái)求出。
MCHC(g/L)? 每升血液中血紅蛋白含每升血液中紅細(xì)胞比積量 ?HGBHCT11.4 RDW由血細(xì)胞分析儀測(cè)量獲得,是反映周?chē)t細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù)。當(dāng)紅細(xì)胞通過(guò)小孔的一瞬間,計(jì)數(shù)電路得到一個(gè)相應(yīng)大小的脈沖,不同大小的脈沖信號(hào)分別貯存在儀器內(nèi)裝計(jì)算機(jī)的不同通道,計(jì)算出相應(yīng)當(dāng)體積及細(xì)胞數(shù),統(tǒng)計(jì)處理而得RDW。11.5 測(cè)量不確定度
11.5.1 SF-3000血液分析儀儀器檢測(cè)血細(xì)胞測(cè)量不確定度為:WBC:±0.22×109/L(均值=3.87)、±0.46×109/L(均值=6.07)和±0.80×109/L(均值=13.27);RBC:±0.22×1012/L(均值=2.39)、±0.24×1012/L(均值=4.18)和±0.36×1012/L(均值=6.02);HGB:±2.60g/L(均值=82.60)、±3.66g/L(均值=129.53)和±5.48g/L(均值=168.07);PLT:±15.66×109/L(均值=64.60)、±25.80×109/L(均值=200.40)和±40.82×109/L(均值=340.93)。11.5.2 BC-2000血液分析儀儀器檢測(cè)血細(xì)胞測(cè)量不確定度為:WBC:±0.22×109/L(均值=3.87)、±0.46×109/L(均值=6.07)和±0.80×109/L(均值=13.27);RBC:±0.22×1012/L(均值=2.39)、±0.24×1012/L(均值=4.18)和±0.36×1012/L(均值=6.02);HGB:±2.60g/L(均值=82.60)、±3.66g/L(均值=129.53)和±5.48g/L(均值=168.07);PLT:±15.66×109/L(均值=64.60)、±25.80×109/L(均值=200.40)和±40.82×109/L(均值=340.93)。
小11.5.3 MEK 6108K血液分析儀儀器檢測(cè)血細(xì)胞測(cè)量不確定度為:WBC:±0.28×109/L(均值=3.20)、±0.62×109/L(均值=8.56)和±0.94×109/L(均值=15.09);RBC:±0.22×1012/L(均值=2.30)、±0.24×1012/L(均值=4.03)和±0.42×1012/L(均值=6.03);HGB:±2.06g/L(均值=62.80)、±4.08g/L(均值=132.70)和±6.00g/L(均值=162.23);PLT:±20.56×109/L(均值=80.63)、±32.00×109/L(均值=203.50)和±43.67×109/L(均值=334.67)。
11.5.4 ADVIA 120血液分析儀儀器檢測(cè)血細(xì)胞測(cè)量不確定度為:WBC:±0.26×109/L(均值=3.69)、±0.32×109/L(均值=5.36)和±0.74×109/L(均值=13.32);RBC:±0.20×1012/L(均值=2.41)、±0.22×1012/L(均值=4.13)和±0.30×1012/L(均值=5.19);HGB:±2.90g/L(均值=82.90)、±3.66g/L(均值=130.63)和±4.38g/L(均值=1625.10);PLT:±10.32×109/L(均值=50.17)、±24.02×109/L(均值=201.13)和±30.54×109/L(均值=329.10)。12 生物參考區(qū)間 12.1 白細(xì)胞
成年人靜脈血:3.5~10.0×109/L;手指血:4.0~10.0×109/L;新生兒:15.0~20.0×109/L;6個(gè)月~2歲:11.0~12.0×109/L。12.2 紅細(xì)胞
成年男性:4.3~5.86×1012/L;成年女性:3.77~5.17×1012/L;新生兒:6.0~7.0×1012/L。12.3 血紅蛋白
成年男性:135~180g/L;成年女性:115~155g/L;新生兒:170~200g/。的一12.4 紅細(xì)胞壓積
成年男性:0.400~0.517; 成年女性:0.367~0.467。12.5 血小板 100~300×109/L。12.6 其它參數(shù)
MCV:80 ~ 100fL;MCH:27.2~34.3pg;MCHC:320~360g/L;RDW:<0.145;PCT:男性 0.183±0.041;女性 0.198±0.042;MPV:男性 10.07±1.78fL;女性 10.24±1.58fl;PDW:16.8%±0.63%;瞬13 患者檢驗(yàn)結(jié)果可報(bào)告區(qū)間 13.1 阻抗法儀器:WBC:(0.2~99.99)×109/L,RBC:(0.50~9.99)×1012/L,HGB:0~299g/L,PLT:(10~999)×109/L。
13.2 激光法儀器:WBC:(0.02~400)×109/L,RBC:(0.05~7.00)×1012/L,HGB:0~225g/L,PLT:(5~3500)×109/L。14 警告/危急值
白細(xì)胞<0.5×109/L;紅細(xì)胞<1.0×1012/L;血紅蛋白<30g/L;血小板<20×109/L。15 實(shí)驗(yàn)室解釋 15.1 白細(xì)胞計(jì)數(shù) 15.1.1 白細(xì)胞生理變化
15.1.1.1 年齡:初生兒白細(xì)胞較高,一般在15×109/L左右,個(gè)別可高達(dá)30×109/L以上。通常在3~4天后降至10×109/L左右,約保持3個(gè)月,然后逐漸降低至成人水平。初生兒外周血白細(xì)胞主要為中性粒細(xì)胞,到第6~9天逐漸下降至與淋巴細(xì)胞大致相等。以后淋巴細(xì)胞逐漸增多,整個(gè)嬰兒期淋巴細(xì)胞數(shù)均較高,可達(dá)70%。到2~3歲后,淋巴細(xì)胞逐漸下降,中性粒細(xì)胞逐漸上升,到4~5歲二者又基本相等,形成中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞變化曲線的兩次交叉,至青春期時(shí)與成人基本相同。
15.1.1.2 日間變化:白細(xì)胞數(shù)在靜息狀態(tài)時(shí)較低,活動(dòng)和進(jìn)食后較高;早晨較低,下午較高;一日之間最高值與最低值之間可相差1倍。運(yùn)動(dòng)、疼痛和情緒變化、一般的體力勞動(dòng)、冷熱水浴、日光或紫外線照射等,均可使白細(xì)胞輕度增高;而劇烈運(yùn)動(dòng)、劇痛和激動(dòng)可使白細(xì)胞顯著增高。如劇烈運(yùn)動(dòng),可于短時(shí)間內(nèi)使白細(xì)胞高達(dá)35×109/L,以中性粒細(xì)胞為主;當(dāng)運(yùn)動(dòng)結(jié)束后迅即恢復(fù)原有水平。這種短暫的變化,主要是由于循環(huán)池和邊緣池的粒細(xì)胞重新分配所致。
15.1.1.3 妊娠與分娩:妊娠期常見(jiàn)白細(xì)胞增多,特別是最后1個(gè)月,常波動(dòng)于(12~17)×109/L之間,分娩時(shí)可高達(dá)34×109/L。分娩后2~5日內(nèi)恢復(fù)正常。由于白細(xì)胞的生理波動(dòng)很大,只有通過(guò)定時(shí)和反復(fù)觀察才有意義。15.1.2 白細(xì)胞病理變化 15.1.2.1 白細(xì)胞增高
15.1.2.1.1 急性感染:急性化膿性感染時(shí),白細(xì)胞增高程度取決于感染微生物的種類(lèi)、感染灶的范圍、感染的嚴(yán)重程度、患者的反應(yīng)能力。如感染很局限且輕微,白細(xì)胞總數(shù)仍可正常,但分類(lèi)檢查時(shí)可見(jiàn)中性粒細(xì)胞有所增高;中度感染時(shí),白細(xì)胞總數(shù)常增高大于10×109/L,并伴有輕度核左移;嚴(yán)重感染時(shí),白細(xì)胞總數(shù)常明顯增高,可達(dá)20.0×109/L以上,且伴有明顯的核左移。
15.1.2.1.2 嚴(yán)重的組織損傷或大量血細(xì)胞破壞:在較大手術(shù)后12~36小時(shí),白細(xì)胞常達(dá)10.0×109/L以上,其增多的細(xì)胞成分以中性分葉核粒細(xì)胞為主。急性心肌梗塞后1~2天內(nèi),常見(jiàn)白細(xì)胞數(shù)明顯增高,借此可與心絞痛相區(qū)別。急性溶血反應(yīng)時(shí),也可見(jiàn)白細(xì)胞增高。
15.1.2.1.3 急性大出血:在脾破裂或?qū)m外孕輸卵管破裂后,白細(xì)胞迅速增高,常達(dá)(20~30)×109/L。其增多的細(xì)胞也主要是中性粒細(xì)胞。
15.1.2.1.4 急性中毒:化學(xué)藥物如安眠藥、敵敵畏等中毒時(shí),常見(jiàn)白細(xì)胞數(shù)增高,甚至可達(dá)20×109/L或更高,代謝性中毒如糖尿病酮癥酸中毒及慢性腎炎尿毒癥時(shí),也常見(jiàn)白細(xì)胞增高,均以中性粒細(xì)胞為主。15.1.2.1.5 腫瘤性增高:白細(xì)胞呈長(zhǎng)期持續(xù)增高,最常見(jiàn)于粒細(xì)胞性白血病,其次也可見(jiàn)于各種惡性腫瘤的晚期。此時(shí)不但總數(shù)常達(dá)(10~20)×109/L或更高,且可有較明顯的核左移現(xiàn)象,呈所謂類(lèi)白血病反應(yīng)。15.1.2.2 白細(xì)胞減低
15.1.2.2.1 某些感染:某些革蘭氏陰性桿菌如傷寒桿菌感染時(shí),如無(wú)并發(fā)癥,白細(xì)胞數(shù)均減少甚至可低到2×109/L以下。一些病毒感染如流感時(shí)白細(xì)胞亦減少,可能是由于在細(xì)菌內(nèi)毒素及病毒作用下使貼壁的即邊緣池粒細(xì)胞增多而導(dǎo)致循環(huán)池中粒細(xì)胞減少所致,也可能與內(nèi)毒素抑制骨髓釋放粒細(xì)胞有關(guān)。15.1.2.2.2 某些血液病:如典型的再生障礙性貧血時(shí),呈“三少”表現(xiàn)。此時(shí)白細(xì)胞可少到1×109/L以下,分類(lèi)時(shí)幾乎均為淋巴細(xì)胞,乃因中性粒細(xì)胞嚴(yán)重減少所致的淋巴細(xì)胞相對(duì)增多。小部分急性白血病其白細(xì)胞總數(shù)不高反而減低,稱非白血性白血病(aleukenic leuemia),其白細(xì)胞可<1×109/L,分類(lèi)時(shí)也呈淋巴細(xì)胞相對(duì)增多,此時(shí)只有骨髓檢查才能明確診斷。
15.1.2.2.3 慢性理、化損傷:電離輻射(如X線等)、長(zhǎng)期服用氯霉素后,可因抑制骨髓細(xì)胞的有絲分裂而致白細(xì)胞減少,故于接觸和應(yīng)用期間每周應(yīng)作一次白細(xì)胞計(jì)數(shù)。
15.1.2.2.4 自身免疫性疾?。喝缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡等,由于自身免疫性抗核抗體導(dǎo)致白細(xì)胞破壞而減少。
15.1.2.2.5 脾功能亢進(jìn):各種原因所致的脾腫大,如門(mén)脈肝硬化、班替綜合征等均可見(jiàn)白細(xì)胞減少。其機(jī)制為腫大的脾中的單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)破壞了過(guò)多的白細(xì)胞;腫大的脾分泌了過(guò)多的脾素,而此種體液因子能來(lái)活促進(jìn)粒細(xì)胞生長(zhǎng)的某些因素。
15.2 白細(xì)胞分類(lèi)結(jié)果異常 15.2.1 中性粒細(xì)胞
15.2.1.1 中性粒細(xì)胞增加:急性感染性化膿性炎癥,中毒(尿毒癥、糖尿病酸中毒)急性出血、急性溶血及手術(shù)后等。
15.2.1.2 中性粒細(xì)胞減少:某些傳染病(傷寒、瘧疾等)化學(xué)藥物及放射損害,某些血液病、過(guò)敏性休克、惡病質(zhì)、脾功能亢進(jìn)及自身免疫性疾病等。15.2.2 淋巴細(xì)胞
15.2.2.1 淋巴細(xì)胞增加:淋巴細(xì)胞性白血病,百日咳,傳染性單核細(xì)胞增多癥、水痘、麻疹、結(jié)核病、狹窄排斥反應(yīng)前期,傳染病恢復(fù)期等。
15.2.2.2 淋巴細(xì)胞減少:免疫缺陷病,丙種球蛋白缺乏癥,淋巴細(xì)胞減少癥,應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素后,放射病等。15.2.3 單核細(xì)胞
單核細(xì)胞增多:常見(jiàn)于亞急性細(xì)菌心內(nèi)膜炎、傷寒、瘧疾、黑熱病、活動(dòng)性結(jié)核、單核細(xì)胞性白血病,急性感染恢復(fù)期等。15.2.4 嗜酸性粒細(xì)胞
15.2.4.1 嗜酸性粒細(xì)胞增多:見(jiàn)于過(guò)敏性疾病、皮膚病、寄生蟲(chóng)、血液病、猩紅熱、潰瘍性結(jié)腸炎、X線照射后,脾切除、傳染病恢復(fù)期等。
15.2.4.2 嗜酸性粒細(xì)胞減少:多見(jiàn)于傷寒、副傷寒,以及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)素或促腎上腺皮質(zhì)素后。15.2.5 嗜堿性粒細(xì)胞
嗜堿性粒細(xì)胞增多:見(jiàn)于慢性粒細(xì)胞白血病、淋巴網(wǎng)細(xì)胞瘤、脾切除后等,惡性腫瘤、嚴(yán)重傳染病、敗血病、中毒(藥物或重金屬)大面積燒傷等。嚴(yán)重感染中性??沙霈F(xiàn)毒性顆粒、空泡、Dohle氏體,核棘突,退行性變及細(xì)胞大小不均等變化。
15.3 紅細(xì)胞結(jié)果異常 15.3.1生理性變化
年齡與性別的差異:初生兒由于出生前以彌散方式從母體血液獲得氧氣,通常處于生理性缺氧狀態(tài),故紅細(xì)胞明顯增高,但在出生2周后就逐漸下降。小兒生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)鐵供應(yīng)不足亦可引起貧血。男性兒童在6~7歲時(shí)最低,隨著年齡增大而逐漸上升,到25~30歲時(shí)達(dá)高峰,30歲后隨著年齡增高而逐漸下降,直到60歲尚未停止。在女性兒童也隨年齡逐漸增高,到13~15歲時(shí)達(dá)最高值,而后受到月經(jīng)、內(nèi)分泌等因素影響逐漸下降,到21~35歲維持最低水平后又逐漸增高與男性水平相近。男女兩性的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)在15~40歲期間差異明顯,主要可能與在此期間,男性雄激素水平較高,而睪酮有促進(jìn)紅細(xì)胞造血作用有關(guān)。精神因素:感情沖動(dòng)、興奮、恐懼、冷水浴刺激均可使腎上腺素增多,導(dǎo)致紅細(xì)胞暫時(shí)增加。
劇烈體力運(yùn)動(dòng)和勞動(dòng):主要由于氧需要量增加,引起相對(duì)缺氧。一般成人在安靜時(shí)全身每分鐘耗氧0.3~0.4L,肌肉運(yùn)動(dòng)時(shí)可增加到2~2.5L,最高可達(dá)到4~4.5L,此時(shí)由于紅細(xì)胞生成素生成增加而骨髓加速釋放紅細(xì)胞,導(dǎo)致紅細(xì)胞增多。氣壓降低:因缺氧刺激,紅細(xì)胞可代償性增生。高山地區(qū)居民和登山運(yùn)動(dòng)員紅細(xì)胞數(shù)均高于正常,此因大氣稀薄、氧分壓低,機(jī)體紅細(xì)胞生成素水平增高,引起骨髓產(chǎn)生更多的紅細(xì)胞所致。
妊娠中、后期:為適合胎盤(pán)循環(huán)的需要,通過(guò)神經(jīng)、體液調(diào)節(jié),孕婦的血漿容量明顯增加而引起血液稀釋。15.3.2 紅細(xì)胞增高
15.3.2.1 相對(duì)性增高:常見(jiàn)于劇烈嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、大面積燒傷、大量出汗、多尿和水的攝入量顯著不足的患者。
15.3.2.2 絕對(duì)性增高:與組織缺氧有關(guān)??梢鹄^發(fā)性紅細(xì)胞增多,如慢性肺源性心臟病、發(fā)紺性先天性心臟病,慢性一氧化碳中毒,登山病等。15.3.2.3 真性紅細(xì)胞增多癥,紅細(xì)胞可達(dá)(7~10)×1012/L 15.3.3 紅細(xì)胞減少
15.3.3.1 生理性貧血:妊娠期因血漿量相對(duì)增多,故紅細(xì)胞相對(duì)減少。3個(gè)月的嬰兒至15歲的兒童,因生長(zhǎng)發(fā)育迅速而致造血原料相對(duì)不足,紅細(xì)胞和血紅蛋白可較正常人低10%~20%。老年人由于骨髓造血功能逐漸減低,均可導(dǎo)致紅細(xì)胞和血紅蛋白含量減少。
15.3.3.2 病理性減少:①紅細(xì)胞減少所致的貧血:一是因骨髓造血功能衰竭,如再生障礙貧血、骨髓纖維化等伴發(fā)的貧血;二是因造血物質(zhì)缺乏或利用障礙引起的貧血,如缺鐵性貧血、鐵粒幼細(xì)胞性貧血、葉酸及維生素B12缺乏所致的巨幼細(xì)胞性貧血。②因紅細(xì)胞膜、酶遺傳性的缺陷或外來(lái)因素造成紅細(xì)胞破壞過(guò)多導(dǎo)致的貧血,如遺傳性球型紅細(xì)胞增多癥、地中海性貧血、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、異常血紅蛋白病、免疫性溶血性貧血、心臟體外循環(huán)的大手術(shù)及一些化學(xué)、生物因素等引起的溶血性貧血。③失血:急性失血或消化道潰瘍、鉤蟲(chóng)病等慢性失血所致貧血。紅細(xì)胞計(jì)數(shù)醫(yī)學(xué)決定水平:高于6.8×1012/L,應(yīng)采取相應(yīng)的治療措施;低于3.5×1012/L為診斷貧血的界限,應(yīng)繼續(xù)尋找病因;低于1.5×1012/L應(yīng)考慮輸血。15.4 紅細(xì)胞形態(tài) 紅細(xì)胞形態(tài)變化見(jiàn)于: 紅細(xì)胞大小不一
小紅細(xì)胞:提示血紅蛋白合成障礙,見(jiàn)于缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血和遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥。
大紅細(xì)胞:常見(jiàn)于巨幼紅細(xì)胞性貧血,也可見(jiàn)于溶血性貧血、惡性貧血等。巨紅細(xì)胞:最常見(jiàn)于葉酸及維生素B12缺乏所致的巨幼細(xì)胞性貧血。紅細(xì)胞大小不均:常見(jiàn)于嚴(yán)重的增生性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血。紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白含量改變
正常色素性:除見(jiàn)于正常人外,還見(jiàn)于急性失血、再生障礙性貧血和白血病等。低色素性:常見(jiàn)于缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血、鐵粒幼細(xì)胞性貧血、某些血紅蛋白病。
高色素性:最常見(jiàn)于巨幼細(xì)胞性貧血。
多色性:多色性紅細(xì)胞增多提示骨髓造血功能活躍,尤見(jiàn)于溶血性或急性失血性貧血。
細(xì)胞著色不一:多見(jiàn)于鐵粒幼紅細(xì)胞性貧血。紅細(xì)胞形狀改變
球形細(xì)胞:主要見(jiàn)于遺傳性和獲得性球形紅細(xì)胞增多癥(如自身免疫性貧血或直接理化損傷如燒傷等)。
橢圓形細(xì)胞:見(jiàn)于遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥。
靶形紅細(xì)胞:常見(jiàn)于各種低色素性貧血,尤見(jiàn)于珠蛋白生成障礙性貧血、HbC病,也見(jiàn)于阻塞性黃疸、脾切除后狀態(tài)。
口形細(xì)胞:常見(jiàn)于口形紅細(xì)胞增多癥,小兒消化系統(tǒng)疾患引起的貧血,也可見(jiàn)于乙醇中毒,某些溶血性貧血及肝病患者等。鐮形細(xì)胞:主要見(jiàn)于鐮狀細(xì)胞性貧血。
棘形細(xì)胞:多見(jiàn)于遺傳性或獲得性β-脂蛋白缺乏癥,可高達(dá)70%~80%;也可見(jiàn)于脾切除后、酒精中毒性肝臟疾病及尿毒癥等。新月形紅細(xì)胞:見(jiàn)于某些溶血性貧血,其意義不明。
淚滴形細(xì)胞:多見(jiàn)于貧血、骨髓纖維化癥時(shí),偶見(jiàn)于正常人。
裂紅細(xì)胞:見(jiàn)于彌散性血管內(nèi)凝血、微血管病性溶血性貧血、重型珠蛋白生成障礙性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、嚴(yán)重?zé)齻UH搜科辛哑?xì)胞小于2%。紅細(xì)胞形態(tài)不整:此種細(xì)胞在某些感染或嚴(yán)重貧血時(shí)多見(jiàn),最常見(jiàn)于巨幼細(xì)胞性貧血。異形紅細(xì)胞產(chǎn)生的原因尚未明,有人認(rèn)為是物理因素所致。
有核紅細(xì)胞:最常見(jiàn)于嚴(yán)重的溶血性貧血、新生兒溶血性貧血、自身免疫性溶血性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血;各種急、慢性白血病及紅白血病和慢性骨髓增生性疾病如骨髓纖維化。紅細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)異常結(jié)構(gòu)
嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞:見(jiàn)于中毒患者(如鉛、汞等金屬中毒)及各種增生活躍性貧血如溶血性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血等。
豪喬小體:見(jiàn)于脾切除術(shù)后、無(wú)脾癥、脾萎縮、脾功能低下、紅白血病和某些貧血患者;在巨幼細(xì)胞貧血時(shí),更易見(jiàn)到。
卡波氏環(huán):可見(jiàn)于白血病、巨幼細(xì)胞性貧血、增生性貧血、鉛中毒或脾切除后。寄生蟲(chóng):當(dāng)瘧原蟲(chóng)等感染時(shí),可見(jiàn)紅細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)相應(yīng)的病原體。15.5 血紅蛋白異常
血紅蛋白的增減臨床意義大致與紅細(xì)胞的增減意義相似,但血紅蛋白更準(zhǔn)確反映貧血的程度。血紅蛋白的減少與紅細(xì)胞的減少程度不一定呈正比例,一是在小紅細(xì)胞貧血時(shí),由于單個(gè)紅細(xì)胞血紅蛋白的含量少于正常,所以血紅蛋白減少的程度較紅細(xì)胞減少的程度更為明顯,如缺鐵性貧血、消化性潰瘍、腸息肉、痔瘡、月經(jīng)過(guò)多、鉤蟲(chóng)病等慢性反復(fù)出血等;二是在大紅細(xì)胞性貧血減少的程度較
血紅蛋白更為嚴(yán)重,如缺乏維生素B12或葉酸引起的營(yíng)養(yǎng)不良性貧血及肝硬化性貧血等;三是在大出血時(shí),血紅蛋白減少的程度基本上與紅細(xì)胞減少相一致,如消化道、肺部大出血及其他原因引起的大出血,再生障礙性貧血、純紅細(xì)胞再生障礙性貧血。15.6 紅細(xì)胞比積
紅細(xì)胞比積是用于計(jì)算紅細(xì)胞3個(gè)平均指標(biāo)的參數(shù)的要素之一,有助于貧血診斷和分類(lèi);可以評(píng)估血漿容量有無(wú)增減或稀釋濃縮程度,有助于某些疾病治療中補(bǔ)液量的控制,以及了解體液平衡情況。15.6.1 紅細(xì)胞比積增高
見(jiàn)于各種原因所致的血液濃縮,如大量嘔吐、大手術(shù)后、腹瀉、失血、大面積燒傷以及真性紅細(xì)胞增多癥(可達(dá)0.80)和繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥等。15.6.2 紅細(xì)胞比積減低
見(jiàn)于各種貧血。由于貧血種類(lèi)不同,紅細(xì)胞比積減少的程度并不與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)值完全一致。
15.7 紅細(xì)胞平均指標(biāo)
臨床上將紅細(xì)胞3個(gè)平均測(cè)定的指標(biāo)作為貧血的形態(tài)學(xué)分類(lèi)依據(jù)(表1)。表1 貧血的紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)分類(lèi)
貧血類(lèi)型 MC正細(xì)胞貧血 正增減減
MCH MCHV
C
常見(jiàn)原因或疾病
正常 正常 MM、急性失血性貧血、某些溶增高 正常 各種造血物質(zhì)缺乏或利用不減低 正常 慢性感染、慢性肝腎疾病性貧減低 減低 缺鐵性貧血及鐵利用不良貧 大細(xì)胞貧血
單純小細(xì)胞 小細(xì)胞低色15.8 紅細(xì)胞體積分布寬度
紅細(xì)胞體積分布寬度(red blood cell volume distribution width,RDW)是一個(gè)較新的紅細(xì)胞參數(shù),由血液分析儀根據(jù)紅細(xì)胞體積分布的直方圖導(dǎo)出,反映所測(cè)標(biāo)本中紅細(xì)胞體積大小的異質(zhì)程度,常用變異系數(shù)(CV)表示。
進(jìn)行貧血形態(tài)學(xué)新的分類(lèi):1983年Bessman提出用MCV和RDW兩項(xiàng)參數(shù)作為貧血的形態(tài)學(xué)分類(lèi)的新指標(biāo)。根據(jù)不同病因引起貧血的紅細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)的不同,可將貧血分成6類(lèi)(表2),新的分類(lèi)法較傳統(tǒng)分類(lèi)法可能更全面,對(duì)貧血的病因分析和鑒別診斷具有更大意義。
貧血類(lèi)型 MCV/RDW
特征 MCV減少,常見(jiàn)原因或疾病
小細(xì)胞均小細(xì)胞不正細(xì)胞均
輕型珠蛋白生成障礙性貧血、某缺鐵性貧血、β-珠蛋白生成障
MCVMCV、再障、白血病、某些慢性肝病、缺鐵性貧血(IDA)的篩選診斷和療效觀察:RDW增高對(duì)缺鐵性貧血診斷的靈敏度達(dá)95%,但特異性不強(qiáng),可作為缺鐵性貧血的篩選指標(biāo)。缺鐵性貧血時(shí)RDW增高,尤其是MCV尚處于參考值范圍時(shí),RDW增高更是診斷缺鐵性貧血的指征;當(dāng)MCV減小時(shí),RDW增高更為顯著;給予鐵劑治療有效時(shí),RDW將比給藥前更大。這是因?yàn)榛颊哐a(bǔ)鐵后,網(wǎng)織紅細(xì)胞增多并釋放入血,與給藥前的小紅細(xì)胞并存的緣故,故RDW先增大,隨著正常紅細(xì)胞的增多和小紅細(xì)胞的減小,RDW逐漸降至參考范圍。
鑒別缺鐵性貧血和β-珠蛋白生成障礙性貧血:Bessman曾分析了兩類(lèi)貧血患者RDW變化,缺鐵性貧血患者100%RDW增高,而88%輕型β-珠蛋白生成障礙性貧血患者的RDW正常,提示RDW可作為兩類(lèi)貧血的鑒別診斷指標(biāo)。15.9 血小板 15.9.1 生理性變化
正常人血小板數(shù)隨時(shí)間和生理狀態(tài)變化:如一天之內(nèi)可增減6~10%,午后略高于早晨;春季較冬季低;平原居民較高原居民低;月經(jīng)前減低,月經(jīng)后增高;妊娠中晚期增高,分娩后即減低;運(yùn)動(dòng)、飽餐后增高,休息后恢復(fù)。
15.9.2 血小板數(shù)增高:①一過(guò)性增高,見(jiàn)于急性大出血及溶血之后。②持續(xù)性增高,見(jiàn)于真性紅細(xì)胞增多癥、出血性血小板增多癥。③慢性粒細(xì)胞性白血病、多發(fā)性骨髓瘤及許多惡性腫瘤的早期??梢?jiàn)血小板增多。
15.9.3 血小板數(shù)減少:①血小板產(chǎn)生減少,見(jiàn)于造血功能受到損害,如再生障礙性貧血、急性白血病、急性放射病。②血小板破壞亢進(jìn),見(jiàn)于原發(fā)性血小板減少性紫癜、脾功能亢進(jìn)和進(jìn)行體外循環(huán)時(shí)。③血小板消耗過(guò)多,如彌散性血管內(nèi)凝血、血栓性血小板減少性紫癜等。16 安全性預(yù)警措施
血液標(biāo)本的運(yùn)輸必須保證運(yùn)送過(guò)程中的生物安全,防止溢出。血液標(biāo)本溢出后,應(yīng)該立即對(duì)污染的環(huán)境和設(shè)備進(jìn)行消毒處理。對(duì)標(biāo)明有傳染性疾病的血液標(biāo)本應(yīng)特別防護(hù),以不污染環(huán)境或保護(hù)工作安全為前提。
在進(jìn)行血液分析的一切操作活動(dòng)中,應(yīng)按《實(shí)驗(yàn)室安全管理》程序執(zhí)行。在進(jìn)行操作前,首先應(yīng)采取必要的保護(hù)性措施如穿戴保護(hù)性外套、手套等。
與血液標(biāo)本接觸的一切器皿、儀器組裝/拆卸組合零件都應(yīng)視為污染源,因此操作人員不小心接觸了這種污染源時(shí),應(yīng)立即用清水沖洗被污染區(qū)域并進(jìn)行消毒處理。
如果操作人員的皮膚或衣物上沾到了血液及廢液,應(yīng)立刻用清水沖洗并進(jìn)行消毒處理。如果眼睛被濺入血液及廢液,用大量的清水沖洗并采取必要的醫(yī)療措施。
如血液標(biāo)本采用開(kāi)蓋程序測(cè)試,開(kāi)蓋時(shí)應(yīng)防止氣霧膠污染環(huán)境。
所有檢查過(guò)的血液樣本及有關(guān)的廢棄物,都會(huì)給您帶來(lái)潛在的危險(xiǎn)或生物污染。所有廢棄樣本及廢棄物的處理方法同血液標(biāo)本的處理程序。17 變異潛在來(lái)源
嚴(yán)重的黃疸或脂血標(biāo)本可使血紅蛋白結(jié)果假性增高;
標(biāo)本溶血可使紅細(xì)胞結(jié)果假性減低、血小板計(jì)數(shù)結(jié)果假性增高;
紅細(xì)胞冷凝集可使紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)結(jié)果假性減低,白細(xì)胞假性增高(電阻抗法)或假性減低(激光法法)和MCV假性增高;
冷凝球蛋白或冷纖維蛋白增高使白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)結(jié)果假性增高 有血小板凝集者可使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果假性減低; 試劑的溫度;
檢測(cè)器微孔不完全堵塞;
標(biāo)本采集后放置的環(huán)境溫度過(guò)高、時(shí)間過(guò)長(zhǎng); 試劑變質(zhì)或過(guò)了有效期而未發(fā)現(xiàn)等。白細(xì)胞五分類(lèi)血細(xì)胞分析儀的白細(xì)胞分類(lèi)篩選原則 18.1 血液病病人,無(wú)論血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果和細(xì)胞分布圖是否正常,一律做血涂片鏡檢。
18.2 無(wú)論初診或復(fù)診病人,只要白細(xì)胞、紅細(xì)胞/血紅蛋白和血小板計(jì)數(shù)結(jié)果正常,白細(xì)胞散射圖、紅細(xì)胞和血小板直方圖均正常且無(wú)報(bào)警者,可不做血涂片鏡檢。
18.3 初診病人,其白細(xì)胞、紅細(xì)胞/血紅蛋白、血小板計(jì)數(shù)結(jié)果,白細(xì)胞散射圖、紅細(xì)胞和血小板直方圖中有一項(xiàng)異?;驁?bào)警時(shí),均需做血涂片鏡檢。
18.4 復(fù)診病人,其血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果與前一次結(jié)果無(wú)明顯變化,但白細(xì)胞散射圖異常且有報(bào)警時(shí),需做血涂片鏡檢。
18.5 復(fù)診病人,其血細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果與前一次檢測(cè)結(jié)果相比有變化,但與臨床診斷或治療相符;而且白細(xì)胞散射圖正常無(wú)報(bào)警時(shí),可不做血涂片鏡檢。19 異常結(jié)果處理
血細(xì)胞分析儀測(cè)試的血常規(guī)結(jié)果異常需與臨床診斷相符,不符合的結(jié)果應(yīng)復(fù)查。20 報(bào)告時(shí)間與標(biāo)本保存
20.1 病房患者的血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告單應(yīng)于當(dāng)日下午4點(diǎn)前由衛(wèi)生員發(fā)回病房科室。
20.2 檢驗(yàn)后的血常規(guī)標(biāo)本應(yīng)放置室溫保存至次日上午8點(diǎn)丟棄。21 實(shí)驗(yàn)方法的溯源
見(jiàn)XT-2100、MEK-6108K、XT-1800i和5-diff血細(xì)胞分析儀使用說(shuō)明書(shū)。22 參考文獻(xiàn)
①XT-2100、XT-1800i、MEK-6108K和5-diff血細(xì)胞分析儀使用說(shuō)明書(shū)。②“2013例北京市正常成年人靜脈血血細(xì)胞正常參考范圍調(diào)查”《中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志》 1996年第3期。
③葉應(yīng)嫵,王毓三主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司.南京.第二版.1997。
第二篇:血細(xì)胞分析后的質(zhì)量保證
[摘 要] 目的:了解血細(xì)胞分析后質(zhì)量保證的要點(diǎn)。方法:對(duì)常見(jiàn)影響因素進(jìn)行分析和處理。結(jié)果:影響血細(xì)胞分析檢測(cè)結(jié)果的因素是多方面的,包括樣本、操作、儀器、藥物、環(huán)境溫度、生理狀態(tài)、責(zé)任心等諸多因素。結(jié)論:分析后的質(zhì)量保證工作是確保血細(xì)胞分析檢測(cè)報(bào)告質(zhì)量的十分重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。
[關(guān)鍵詞] 血細(xì)胞;分析后;質(zhì)量保證
在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作中,血細(xì)胞分析是最為常用的項(xiàng)目之一,其質(zhì)量水平影響范圍最廣、涉及疾病最多。血細(xì)胞分析儀代替?zhèn)鹘y(tǒng)的手工法在血細(xì)胞分析工作中已經(jīng)得到了廣泛的應(yīng)用,盡管進(jìn)行了嚴(yán)格的校準(zhǔn),在分析前和分析中都進(jìn)行了規(guī)范化的質(zhì)量控制措施,也不等于每一次、每一批樣本的檢測(cè)結(jié)果就是完全準(zhǔn)確無(wú)誤的。在實(shí)際工作中,仍然會(huì)受到樣本、操作、儀器、藥物、環(huán)境溫度、生理狀態(tài)、責(zé)任心等諸多因素的影響,可以造成個(gè)別樣本或一部分樣本出現(xiàn)較大的誤差。因此,每發(fā)一張報(bào)告之前,都應(yīng)該認(rèn)真觀察各項(xiàng)指標(biāo)與臨床診斷是否相符,指標(biāo)與指標(biāo)之間是否相符,參考各種血液分析圖像,同時(shí)還要連續(xù)關(guān)注患者的測(cè)定結(jié)果,參考以前的報(bào)告,綜合分析確認(rèn)無(wú)誤后方可發(fā)出報(bào)告。這就是通常所說(shuō)的血細(xì)胞分析后的質(zhì)量保證,通俗的說(shuō)就是結(jié)果的審核,通過(guò)蛛絲馬跡找出干擾血細(xì)胞分析的原因,并進(jìn)行相應(yīng)的處理?,F(xiàn)結(jié)合多年臨床工作經(jīng)驗(yàn),從以下幾點(diǎn)介紹血細(xì)胞分析后質(zhì)量保證的體會(huì)。影響白細(xì)胞(WBC)分析常見(jiàn)的原因
1.1 難溶性紅細(xì)胞(RRBC)的影響 新生兒紅細(xì)胞(RBC)、某些肝病患者紅細(xì)胞膜質(zhì)類(lèi)異常,具有抵抗溶血?jiǎng)┳饔茫辜t細(xì)胞溶血不完全,導(dǎo)致WBC計(jì)數(shù)結(jié)果假性增高,且分類(lèi)結(jié)果淋巴細(xì)胞增高,中性粒細(xì)胞減少。此種情況,在CD1700 WBC直方圖會(huì)有明顯異常表現(xiàn),呈干擾圖形,在35 fl前區(qū)出現(xiàn)狹窄而較高的峰,分類(lèi)淋巴細(xì)胞偏高,中性粒細(xì)胞下降;有時(shí)淋巴細(xì)胞分類(lèi)甚至可高達(dá)80%~90%,如果結(jié)果報(bào)出去,臨床上容易誤認(rèn)為血液病,但CD3700血細(xì)胞分析儀對(duì)這種狀況會(huì)有RRBC的警告提示,可通過(guò)選擇RESISTANT RBC樣本測(cè)定模式進(jìn)行分析,在這種模式下運(yùn)行,樣本將通過(guò)較長(zhǎng)時(shí)間的孵育,從而使試劑充分發(fā)揮作用以達(dá)到溶解RRBC的結(jié)果,其WBC計(jì)數(shù)及分類(lèi)結(jié)果較為準(zhǔn)確。在工作中,遇到膽紅素較高的樣本應(yīng)特別注意RRBC對(duì)WBC結(jié)果的影響。
1.2 巨大血小板可計(jì)數(shù)為WBC。
1.3 冷凝集素能引起WBC計(jì)數(shù)假性增高 因?yàn)橄喈?dāng)于WBC大小的蛋白質(zhì)結(jié)晶被計(jì)數(shù)為WBC,此時(shí)應(yīng)將樣本置于40 ℃左右溫箱或水浴箱中加熱約15 min~30 min,待其加熱到37 ℃后蛋白質(zhì)結(jié)晶會(huì)消失,此時(shí)立即混勻重新上機(jī)測(cè)定即可。
1.4 有核RBC出現(xiàn)亦會(huì)影響WBC計(jì)數(shù)。Hb、RBC檢測(cè)結(jié)果的審核
血細(xì)胞分析測(cè)量報(bào)告的參數(shù)之間,存在有許多內(nèi)在聯(lián)系,比如Hb、RBC與MCH,Hb、HCT與MCHC,RBC、HCT與MCV之間,RDW與涂片的RBC形態(tài)變化,均有明顯的相關(guān)關(guān)系。在審核RBC的相應(yīng)測(cè)定值時(shí),應(yīng)仔細(xì)觀察Hb/RBC的比值以及MCV、MCH、MCHC的測(cè)定值。一般正常人Hb/RBC的比值約為30∶1(Hb的單位為“g/L”,RBC的單位為“1012/L”),MCV的值約為80 fl~100 fl、MCH的值約為27 pg~32 pg、MCHC約為325 g/L~355 g/L。一般來(lái)說(shuō),MCHC的值個(gè)體間差異小,相對(duì)較為恒定,是觀察儀器可信性、樣本狀況較為實(shí)用的一個(gè)指標(biāo),如果出現(xiàn)批量明顯增高或降低,則應(yīng)考慮為系統(tǒng)誤差,觀察是否為儀器故障或是試劑問(wèn)題,應(yīng)仔細(xì)查找原因。如果單個(gè)血細(xì)胞分析結(jié)果中出現(xiàn)過(guò)高的MCV、MCH、MCHC,且RBC數(shù)與Hb濃度比例明顯不當(dāng),出現(xiàn)這類(lèi)檢測(cè)結(jié)果一般主要有以下兩種情況:一是樣本有溶血,使RBC結(jié)果假性減低,導(dǎo)致HCT↓、MCH↑、MCHC↑;二是樣本內(nèi)含有較高的冷凝集素,在抽取全血樣本后,盡管抗凝效果很好,但在體外還是會(huì)發(fā)生RBC凝集,抗凝管內(nèi)的RBC可形成細(xì)小的、肉眼可見(jiàn)的凝集顆粒,有些RBC的凝集顆粒很小,肉眼難以觀察到。無(wú)論凝集顆粒是大是小,一旦形成冷凝集,就會(huì)使血細(xì)胞分析的結(jié)果出現(xiàn)很大偏離。一般認(rèn)為所謂冷凝集現(xiàn)象,一定是在室溫很低的情況下才會(huì)發(fā)生,其實(shí)不然,我們?cè)谙奶鞖鉁剌^高時(shí)就碰到過(guò)冷凝集樣本,有些患者的冷凝集素效價(jià)很高,溫度范圍寬,出現(xiàn)冷凝集時(shí)的血細(xì)胞分析結(jié)果可導(dǎo)致Hb和RBC的比值出現(xiàn)很大偏差,且MCH、MCHC的值與正常參考值極度偏離。所以,我們收到血細(xì)胞分析樣本時(shí),應(yīng)仔細(xì)觀察樣本,及早發(fā)現(xiàn)問(wèn)題;在審核報(bào)告單時(shí),除了重點(diǎn)審查幾大主要指標(biāo)外,千萬(wàn)不要放過(guò)MCV、MCH、MCHC。尤其是MCHC,往往能幫助我們發(fā)現(xiàn)比較嚴(yán)重的錯(cuò)誤,有冷凝集的樣本,一經(jīng)發(fā)現(xiàn),處理比較簡(jiǎn)單,方法如上所述,另外,高脂血癥可使Hb假性增高,甚至可增高達(dá)30 g/L;血液中白細(xì)胞顯著增高時(shí)亦會(huì)影響RBC計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性;血小板數(shù)太高時(shí)也會(huì)使Hb假性增高。[!--empirenews.page--] 3 血小板計(jì)數(shù)干擾因素分析
3.1 使用血細(xì)胞分析儀引起血小板計(jì)數(shù)假性減低的常見(jiàn)原因 血小板聚集或凝集,如EDTA誘導(dǎo)血小板減少癥;臨床上用ATP后血小板容易發(fā)生聚集,因ATP分解,產(chǎn)生大量ADP,而ADP是一種血小板誘導(dǎo)劑,易使血小板發(fā)生聚集而影響血小板計(jì)數(shù),導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)偏低[1]。衛(wèi)星現(xiàn)象,因EDTA抗凝血中血小板粘附于分葉核粒細(xì)胞表面,所以計(jì)數(shù)時(shí)沒(méi)有包括在內(nèi),出現(xiàn)巨大血小板。血細(xì)胞分析儀PLT的檢測(cè)閾值一般為2 fl~30 fl,由于某些血小板太大超過(guò)檢測(cè)閾值而未被計(jì)數(shù),造成血小板計(jì)數(shù)假性減少。血小板可逆聚集亦會(huì)對(duì)血小板計(jì)數(shù)產(chǎn)生影響,因此患者抽血后應(yīng)盡量放置一定時(shí)間(一般約為30 min)再進(jìn)行測(cè)定。
3.2 小RBC對(duì)血小板計(jì)數(shù)的影響 當(dāng)患者RBC大小不均、以小RBC(MCV<70 fl,且RDW明顯增大)居多時(shí),部分極小RBC會(huì)計(jì)入血小板數(shù),引起血小板數(shù)假性增高。這種現(xiàn)象在使用CD1700血細(xì)胞分析儀時(shí)極易出現(xiàn),因CD1700血小板計(jì)數(shù)是采用電阻抗原理,血小板和RBC是在同一個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)中通過(guò)顆粒大小來(lái)加以識(shí)別,血小板與RBC測(cè)量的信號(hào)常有交叉,小RBC的脈沖信號(hào)可能被視為血小板信號(hào),而導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)假性增高,此時(shí)應(yīng)顯微鏡計(jì)數(shù)血小板以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性,但CD3700血細(xì)胞分析儀對(duì)抗小RBC干擾的能力較強(qiáng),雖然也是采用電阻法進(jìn)行測(cè)定,但CD3700運(yùn)用改良RBC及PLT相交曲線的準(zhǔn)確分隔,以擋流板技術(shù)消除RBC通過(guò)小孔時(shí)渦流對(duì)血小板計(jì)數(shù)的影響,以擬合曲線消除碎片及小RBC的干擾,提高了血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。樣本因素
當(dāng)血細(xì)胞分析結(jié)果與臨床診斷不符時(shí),應(yīng)首先排除樣本原因,重新核對(duì)樣本標(biāo)簽,觀察樣本的外觀,并進(jìn)行二次檢測(cè),避免因樣本弄錯(cuò)或編號(hào)錯(cuò)誤而造成檢測(cè)結(jié)果張冠李戴,出現(xiàn)嚴(yán)重的連鎖反應(yīng),造成無(wú)可挽回的損失,另外還應(yīng)特別觀察樣本稀釋、樣本抗凝不佳和溶血等現(xiàn)象。這種情況尤以夜班或急診患者多見(jiàn),有時(shí)直接從輸液管抽血或從輸液的同側(cè)手臂抽血,血液顏色較淡,離心后上層血漿感覺(jué)沒(méi)有粘性,顏色也不象正常樣本的黃顏色,如同時(shí)抽取幾管血,會(huì)發(fā)現(xiàn)幾管血的顏色深淺明顯不一致,樣本明顯稀釋?zhuān)硗猓€常見(jiàn)樣本抗凝不完全的現(xiàn)象,凝塊較小,有時(shí)肉眼幾乎難以辨認(rèn),做了之后發(fā)現(xiàn)PLT數(shù)較低,與臨床不相符,此種情況多見(jiàn)于實(shí)習(xí)護(hù)士較多或新進(jìn)護(hù)士時(shí),此時(shí)應(yīng)積極與臨床聯(lián)系,核實(shí)樣本抽取情況,必要時(shí)通知臨床重新采血復(fù)查,并告知正確采血方法,如不是急診患者,應(yīng)盡量在清晨未用藥、未輸液之前采血;如為急診,且已經(jīng)在輸液,應(yīng)強(qiáng)調(diào)不能在輸液的同側(cè)手臂抽血。不同生理狀態(tài)對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響
不同生理狀態(tài)下血細(xì)胞各參數(shù)會(huì)有所不同,比如妊娠5個(gè)月以上或新生兒WBC總數(shù)明顯增高;暴熱或嚴(yán)寒常出現(xiàn)一過(guò)性WBC總數(shù)增高。飲食和運(yùn)動(dòng)對(duì)檢測(cè)結(jié)果亦會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)影響,進(jìn)食喝水后,血液會(huì)有生理性稀釋作用,RBC數(shù)和Hb檢測(cè)結(jié)果會(huì)有所下降;劇烈體育運(yùn)動(dòng)后血液濃縮,此時(shí)迅速采集血液可使RBC數(shù)和Hb檢測(cè)結(jié)果增加約10%。新生兒和小兒痛哭后毛細(xì)血管血WBC計(jì)數(shù)可顯著增加[2];每日不同時(shí)間WBC總數(shù)也有一定差別。由此可見(jiàn)不同生理狀態(tài)對(duì)血細(xì)胞分析測(cè)定結(jié)果的影響之大,因此,對(duì)于動(dòng)態(tài)觀察指標(biāo)的非急診患者最好固定某一時(shí)間檢查,以盡量減少不同生理狀態(tài)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。[!--empirenews.page--] 6 緊密聯(lián)系臨床
在審核報(bào)告單發(fā)現(xiàn)較為異常的結(jié)果時(shí)應(yīng)多與臨床醫(yī)生主動(dòng)聯(lián)系,看其是否可以從臨床角度加以解釋?zhuān)蚴欠衽c其他檢測(cè)參數(shù)相關(guān)。比如脾亢患者,在手術(shù)前血小板降低,手術(shù)后血小板數(shù)目會(huì)逐漸升高,有時(shí)甚至?xí)_(dá)到1 000×109/L以上,所以,檢驗(yàn)人員還應(yīng)多了解必要的臨床知識(shí),便于與臨床醫(yī)生溝通,有效的分析檢驗(yàn)結(jié)果,更好地為臨床服務(wù)。總之,血細(xì)胞分析是檢驗(yàn)工作中最基礎(chǔ)也是應(yīng)用最廣的檢驗(yàn)項(xiàng)目,需要我們?cè)趯?shí)際工作中不斷學(xué)習(xí)、探討和總結(jié),同時(shí),作為一名檢驗(yàn)人員,應(yīng)具備高度的責(zé)任心,嚴(yán)格按報(bào)告單審核程序進(jìn)行審核。當(dāng)發(fā)現(xiàn)較為異常的結(jié)果時(shí),不能嫌麻煩,抱有僥幸心理,該復(fù)檢的一定要復(fù)檢,該與臨床聯(lián)系的一定要聯(lián)系。在做好分析前、分析中質(zhì)量工作的基礎(chǔ)上,認(rèn)真仔細(xì)地做好血細(xì)胞分析后的質(zhì)量保證工作,才能更全面、更有效地保證血細(xì)胞分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和精密度。
第三篇:血細(xì)胞分析鏡檢規(guī)則
血細(xì)胞分析血細(xì)胞分析血細(xì)胞分析鏡檢鏡檢規(guī)則
1.有無(wú)白細(xì)胞分類(lèi)結(jié)果.血細(xì)胞分析無(wú)分類(lèi)結(jié)果必須顯微鏡檢查,且要給出白細(xì)胞形態(tài)和分類(lèi)計(jì)數(shù)結(jié)果.2.超出白細(xì)胞計(jì)數(shù)上限和下限 WBC<2.5*109
WBC>25*109
3.白細(xì)胞自動(dòng)分類(lèi)結(jié)果超出檢驗(yàn)結(jié)果上限和下限
1)五分類(lèi):MON>15%,EOS>15%,BASO>3%,LYM>60%(成人)>80%(兒童),NEU>85% 2)三分類(lèi):MON>10%, LYM>60%(成人)>80%(兒童),NEU>85% 4.儀器分析結(jié)果是否有報(bào)警提示.1)大血小板、小血小板凝集,小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、有核紅細(xì)胞、異形淋巴細(xì)胞、幼稚細(xì)胞。2)計(jì)數(shù)結(jié)果后有“*”號(hào)提示。3)血小板后有“*”號(hào)提示。5.血紅蛋白MCV、RDW異常。Hb<70g/L,MCV或RDW嚴(yán)重異常。
6.血小板數(shù)量減少,PLT<80*109/L,確定假性血小板減少。
7.同一病人近日WBC總數(shù)變化情況,3天內(nèi)WBC總數(shù)差>5.0*109/L。8.同一病人上一次分類(lèi)計(jì)數(shù)時(shí)間,24小時(shí)內(nèi)不必再計(jì)數(shù)。9.醫(yī)生申請(qǐng)要求鏡檢的標(biāo)本。
10.各種特殊病人(化療、放療、孕婦)。
第四篇:檢驗(yàn)科血液組血細(xì)胞分析質(zhì)量目標(biāo)
檢驗(yàn)科血液組血細(xì)胞分析質(zhì)量目標(biāo)
檢測(cè)項(xiàng)目
WBC
RBC
Hb
Hct
PLT
WCV
MCH
MCHC 變異系數(shù)
≤4.0%
≤2.0%
≤2.0%
≤3.0%
≤8.0%
≤2.0%
≤2.0%
≤2.0%
行標(biāo)批內(nèi)精密度≤4.0%
≤2.0%
≤1.5%
≤3.0%
≤5%
≤2.0%
≤2.0%
≤2.5% 行標(biāo)批間精密度≤6.0%
≤2.5%
≤2.0%
≤4.0%
≤8.0%
≤2.5%
≤2.5%
≤3.0%
衛(wèi)生部臨檢中心室間質(zhì)評(píng)允許最大誤差
檢測(cè)項(xiàng)目
WBC
RBC
Hb
Hct
PLT
WCV
MCH
MCHC 變異系數(shù)
≤15.0%
≤6.0%
≤6.0%
≤9.0%
≤20%
≤7.0%
≤7.0%
WS/T406-2012 5.3 批內(nèi)精密度(最佳條件)
表4
批內(nèi)精密度檢測(cè)要求
檢測(cè)項(xiàng)目
檢測(cè)范圍
變異系數(shù)
WBC
4.0×109/L—10.0×109/L
≤ 4.0% RBC
3.5×1012/L--5.5×1012/L
≤ 2.0% Hb
110g/L---160g/L
≤ 1.5% Hct
35%
---55%
≤ 3.0% PLT
100×109/L---300×109/L
≤ 5.0% MCV
80fl---100fl
≤ 2.0% MCH
27pg---34pg
≤ 2.0% MCHC
320PG---360PG
≤ 2.5% WS/T406-2012 5.4 批間精密度
表 5 日間精密度檢測(cè)要求
檢測(cè)項(xiàng)目
WBC
RBC
Hb
Hct
PLT
WCV
MCH
MCHC 變異系數(shù)
≤6.0%
≤2.5%
≤2.0%
≤4.0%
≤8.0%
≤2.5%
≤2.5%
≤3.0%
制定的依據(jù)2:
制定的依據(jù)3:累積標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)
8.0%
≤
第五篇:關(guān)于血細(xì)胞分析儀的幾個(gè)問(wèn)題
關(guān)于血細(xì)胞分析儀的幾個(gè)問(wèn)題
一. 發(fā)展簡(jiǎn)史
1947年美國(guó)科學(xué)家?guī)鞝柼?W.H.Coulter)發(fā)明了用電阻法計(jì)數(shù)粒子的專(zhuān)利技術(shù)。1956年他又將這一技術(shù)應(yīng)用于血細(xì)胞計(jì)數(shù)獲得成功,其原理是根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)的性質(zhì),以電解質(zhì)溶液中懸浮血細(xì)胞在通過(guò)計(jì)數(shù)小孔時(shí)引起的電阻變化進(jìn)行檢測(cè)為基礎(chǔ),進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)和體積測(cè)定,這種方法稱為電阻法或庫(kù)爾特原理。1962年,我國(guó)第一臺(tái)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在上海研制成功。到了60年代未血細(xì)胞分析儀除可進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)外,還可以同時(shí)測(cè)定HGB血紅蛋白。70年代,血小板計(jì)數(shù)儀問(wèn)世。80年代,開(kāi)發(fā)了白細(xì)胞分類(lèi)(3分類(lèi)及5分類(lèi))。90年代,開(kāi)發(fā)出了可對(duì)網(wǎng)狀紅細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)的血細(xì)胞分析儀,同時(shí)5分類(lèi)及幼稚細(xì)胞檢測(cè)更成熟,并發(fā)展成為血細(xì)胞分析流水線。
二. 如何選購(gòu)血細(xì)胞分析儀
當(dāng)前,在我國(guó)境內(nèi)銷(xiāo)售的的血細(xì)胞分析儀品牌很多,給醫(yī)院的選購(gòu)造成了一定的麻煩。如日本SYSMEX公司(東亞醫(yī)用電子株式會(huì)社)的血細(xì)胞分析儀系列、美國(guó)庫(kù)爾特公司(現(xiàn)已被貝克曼收購(gòu))的血細(xì)胞分析儀系列、日本光電公司的血細(xì)胞分析儀系列、美國(guó)丹能公司以及瑞典博爾醫(yī)療公司的血細(xì)胞分析儀系列。因此建議醫(yī)院購(gòu)買(mǎi)時(shí)從以下幾個(gè)角度考慮:
1.實(shí)用性。醫(yī)院應(yīng)該根據(jù)自身的能力和標(biāo)本量來(lái)決定購(gòu)買(mǎi)何種檔次的機(jī)器,不要盲目攀比,爭(zhēng)相購(gòu)買(mǎi)高檔機(jī)器,從而造成儀器購(gòu)置的浪費(fèi)。
2.儀器性能。這是最關(guān)鍵的一個(gè)因素。不能完全相信廠家的宣傳,要多聽(tīng)取專(zhuān)家意見(jiàn)和到友鄰單位了解。
3.價(jià)格比。衡量同檔次機(jī)器的價(jià)格。
4.售后服務(wù)。俗話說(shuō):救人如救火。對(duì)機(jī)器也是一樣,機(jī)器損壞待修時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)造成病人對(duì)醫(yī)院的信譽(yù)度下降,久而久之就會(huì)造成病人的流失。所以,機(jī)器的售后服務(wù)也是一個(gè)必須考慮的因素。
5.輔助設(shè)備、試劑、消耗品和零配件價(jià)格。要建立請(qǐng)專(zhuān)家進(jìn)行論證的制度,糾正過(guò)去由院長(zhǎng)一人說(shuō)了算的錯(cuò)誤做法。
三. 如何驗(yàn)收血細(xì)胞分析儀
1.驗(yàn)收前準(zhǔn)備工作:仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū);按說(shuō)明書(shū)要求準(zhǔn)備儀器的工作環(huán)境和相關(guān)的外部設(shè)備;成立驗(yàn)收小組;擬定驗(yàn)收計(jì)劃。
2.開(kāi)箱:必要時(shí)請(qǐng)商檢局派人參加;開(kāi)箱后按照裝箱單清點(diǎn)物品是否和裝箱單一致。
3.安裝:應(yīng)該對(duì)安裝過(guò)程進(jìn)行詳細(xì)的記錄。
4.驗(yàn)收儀器的技術(shù)性能指標(biāo)
(1)測(cè)定儀器試劑的本底;
(2)檢測(cè)儀器的精密度:用高、中、低值新鮮血標(biāo)本各測(cè)10次,計(jì)算X-S、CV值,取20~30個(gè)標(biāo)本隨機(jī)排列,各測(cè)3次,求出總重復(fù)性CV%,它代表批內(nèi)精度、儀器穩(wěn)定性、互染等因素的總和;
(3)互染率:取高、低兩個(gè)濃度全血(高、低值相差4~5倍),先測(cè)定高濃度3次,接著測(cè)低濃度3次,再測(cè)高濃度3次,計(jì)算高對(duì)低、低對(duì)高的互染率;
(4)線性:取全血標(biāo)本,用鹽水稀釋相當(dāng)于全血的90%、80%、70%……,測(cè)得RBC、WBC、HGB結(jié)果做y=a+bx,a接近于0,b接近于1;
(5)校準(zhǔn):應(yīng)由廠家提供全血校準(zhǔn)物(低檔儀器用校準(zhǔn)顆粒及HGB校準(zhǔn)液)進(jìn)行校準(zhǔn);
(6)上述指標(biāo)必須符合該儀器的出廠指標(biāo),才算驗(yàn)收合格。由驗(yàn)收小組成員、安裝工程師及設(shè)備科同志簽字后存檔。
四. 如何對(duì)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)
儀器經(jīng)使用一個(gè)階段后應(yīng)該作一次全面的校準(zhǔn),因?yàn)閮x器本身是個(gè)比較器。一旦儀器產(chǎn)生漂移將帶來(lái)分析誤差及不精密度,所以儀器應(yīng)該經(jīng)常定期校準(zhǔn)。
1. 儀器校準(zhǔn)前準(zhǔn)備:徹底清洗管道,去除管道中的殘留血液、吸附的蛋白和纖維等,然后測(cè)定試劑空白,本底必須符合要求。
2. 校準(zhǔn)物準(zhǔn)備:檢查校準(zhǔn)物是否在有效期內(nèi),外觀有無(wú)變質(zhì)。從冰箱中取出后,必須平衡至室溫,輕輕混勻,小心打開(kāi)瓶蓋,勿使血液濺出,分裝成兩瓶。
3. 在儀器上測(cè)定校準(zhǔn)物,連續(xù)測(cè)定11次。第1次結(jié)果棄置不用,將2至11次結(jié)果計(jì)算S,絕對(duì)誤差,相對(duì)誤差。
4. 核對(duì)實(shí)測(cè)結(jié)果與校準(zhǔn)物所示結(jié)果,檢查實(shí)測(cè)結(jié)果有無(wú)升高或下降的趨向性。
5. 判斷校準(zhǔn)結(jié)果:校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)要求如下表1。(1)如果各參數(shù)的絕對(duì)值誤差和相對(duì)誤差小于一級(jí)要求,屬合格范圍,不須作任何校準(zhǔn)。(2)如果參數(shù)大于一級(jí)要求,小于二級(jí)要求,可按說(shuō)明書(shū)要求調(diào)整系數(shù)。當(dāng)調(diào)整后,可再測(cè)定另一瓶全血標(biāo)準(zhǔn)物,理應(yīng)達(dá)到小于一級(jí)要求水平。(3)如果結(jié)果大于二級(jí)要求,則需通知廠家派工程師修理或調(diào)整,為保證病人標(biāo)本測(cè)試質(zhì)量,該儀器應(yīng)暫停使用。
6. 表1校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn) 要求
絕對(duì)誤差 相對(duì)誤差
一級(jí)要求 二級(jí)要求 一級(jí)要求 二級(jí)要求
WBC 0.1×109/l 0.4×109/l 1.25% 5%
RBC 0.03×1012/l 0.08×1012/l 0.7% 8.0%
HGB 1g/l 8g/1 0.78% 3.0%
HCT 0.8% 1.7% 2.0% 4.5%
MCV 1.0fl 8.0fl 1.18% 2.5%
PLT 6.0×109/l 20.0×109/l 2.7% 9.0%
MPV 0.50fl 8.0fl 5% 20%
五.使用血細(xì)胞分析儀的注意事項(xiàng)
為了保證使用血細(xì)胞分析儀得出的結(jié)果能夠盡量反映病人的真實(shí)情況,在使用時(shí)必須注意以下幾方面:
1. 血樣:由于靜脈血受外界因素影響較小,成份比較穩(wěn)定,檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度高重復(fù)性好,因此除嬰兒外,建議取血者均應(yīng)采用靜脈血。如果采集未梢血時(shí),注意不可局部過(guò)度擠壓,避免血液中混入大量的組織液,而且易激活凝血系統(tǒng)產(chǎn)生局部凝血,導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的誤差;第一滴血由于細(xì)胞成分不穩(wěn)定應(yīng)棄掉,用第二滴血進(jìn)行檢測(cè)。
2. 抗凝:使用拘櫞酸鹽抗凝劑時(shí)間過(guò)長(zhǎng)易結(jié)晶,細(xì)胞形態(tài)易發(fā)生變化,影響計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性;草酸鹽易使血小板產(chǎn)生凝集,并可使白細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化,影響計(jì)數(shù)結(jié)果及分類(lèi);而肝素抗凝過(guò)量易引起白細(xì)胞凝集和血小板減少;EDTA-2Na較EDTA-2K的可溶性低,血小板凝集的可能性大。因此國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(ICSH)1993年發(fā)表的文件中建議使用EDTA-2K作為血細(xì)胞分析儀的抗凝劑,用量為1.5~2.2mg/ml血。
3. 采血后用塞子密閉,室溫保存不超過(guò)6小時(shí)。
4. 稀釋?zhuān)合♂屍?、吸樣管要?jīng)過(guò)校準(zhǔn)。吸血后吸樣管外的血液要完全擦干凈。血液稀釋后要盡快測(cè)定,否則易引起“稀釋性溶血”。
5. 混勻:檢測(cè)前混勻很重要,如果無(wú)旋轉(zhuǎn)式混勻器應(yīng)顛倒混勻至少8次。
6. 試劑:血細(xì)胞分析儀對(duì)試劑的要求非常嚴(yán)格,要求有嚴(yán)格的滲透壓標(biāo)準(zhǔn)、穩(wěn)定的導(dǎo)電率、高標(biāo)準(zhǔn)的純凈度以及對(duì)儀器管道和閥路無(wú)腐蝕作用。因此溶血?jiǎng)?、稀釋液及清洗劑等最好選用原廠配套產(chǎn)品。
7. 白細(xì)胞分類(lèi):首先必須明確,迄今為止,世界上無(wú)論多先進(jìn)的血細(xì)胞分析儀,進(jìn)行的白細(xì)胞分類(lèi)都只是一種過(guò)篩手段,并不能完全取代人工鏡檢分類(lèi)。要堅(jiān)決糾正有些單位用了血細(xì)胞分析儀就丟掉鏡檢的錯(cuò)誤思想。
8. 質(zhì)量控制:血液分析必須建立嚴(yán)格的質(zhì)量控制制度,才能保證結(jié)果的可靠性。
六.現(xiàn)代血細(xì)胞分析儀的主要進(jìn)展
隨著高科技的引用和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的發(fā)展,各種先進(jìn)的血細(xì)胞分析測(cè)試技術(shù)被應(yīng)用到血細(xì)胞分析儀上。1987年Coulter公司發(fā)明的VCS(Volume,V,體積;Conductivity,C,電導(dǎo)性;
Scatter,S,光散射)技術(shù)可使血細(xì)胞未經(jīng)任何處理,在與體內(nèi)形態(tài)完全相同的自然狀態(tài)下得出檢測(cè)結(jié)果。而在SYSMEX的NE-8000和SF-3000血細(xì)胞分析儀中采用了阻抗和射頻技術(shù)聯(lián)合的白細(xì)胞分類(lèi)法。進(jìn)入90年代后,儀器的自動(dòng)化程度增高(達(dá)到120份/小時(shí));可進(jìn)行多參數(shù)分析(高達(dá)30余項(xiàng));精密度高(重復(fù)計(jì)數(shù);保證微孔管清潔;取中段血;運(yùn)動(dòng)流式細(xì)胞計(jì)數(shù)原理;鞘流原理……);向5分類(lèi)及鑒別幼稚細(xì)胞發(fā)展;準(zhǔn)確度好,全面質(zhì)量管理,保證儀器檢測(cè)可靠性;具有智能化,可對(duì)同一病人診斷的前后進(jìn)行對(duì)比,提出綜合意見(jiàn),確定診斷方向;更加注意保護(hù)操作人員的安全(SLS-Hb、自動(dòng)混勻、進(jìn)樣、吸樣針內(nèi)外清洗等);向流水線發(fā)展,將血細(xì)胞分析儀、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀、推片、染色機(jī)聯(lián)成流水操作線。最后,再?gòu)?qiáng)調(diào)一下,堅(jiān)決反對(duì)用了血細(xì)胞分析儀后就不進(jìn)行鏡下復(fù)檢和分類(lèi)的錯(cuò)誤傾向。