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      兒童自信心實驗研究[推薦五篇]

      時間:2019-05-15 01:38:25下載本文作者:會員上傳
      簡介:寫寫幫文庫小編為你整理了多篇相關(guān)的《兒童自信心實驗研究》,但愿對你工作學(xué)習(xí)有幫助,當然你在寫寫幫文庫還可以找到更多《兒童自信心實驗研究》。

      第一篇:兒童自信心實驗研究

      《兒童自信心實驗研究》開題報告

      兒童自信心實驗研究課題組,是在遼寧師范大學(xué)楊麗珠教授主持的、沈陽師范大學(xué)郭黎巖教授指導(dǎo)下,國家“十五”教育科學(xué)規(guī)劃重點課題、國家社科基金項目一般課題《兒童個性發(fā)展特點及其影響因素的研究》的子課題。課題組以本實施方案為行動指南,課題內(nèi)容如下:

      一、課題研究的背景及意義

      (一)課題研究的背景

      新世紀之初,我國建國以來第八次基礎(chǔ)教育課程改革正以令世人矚目的迅猛之勢在全國順利推進,本次課程改革將實現(xiàn)我國中小學(xué)課程從學(xué)科本位、知識本位向關(guān)注每一個學(xué)生發(fā)展的歷史性轉(zhuǎn)變。在這種形勢下,兒童個性發(fā)展與教育是實現(xiàn)新課程改革基本理念——“關(guān)注每一個學(xué)生的發(fā)展”的重要舉措。兒童個性發(fā)展與教育是發(fā)展與教育心理學(xué)的重要領(lǐng)域之一,研究兒童個性發(fā)展的特點與培養(yǎng)規(guī)律,探索其個性社會化歷程的基本模式,全面推進兒童個性發(fā)展水平,促進兒童綜合素質(zhì)的發(fā)展是國內(nèi)外心理學(xué)家、教育界乃至全社會關(guān)注的極具實踐意義的熱點問題。我國知名專家學(xué)者——北京師范大學(xué)林崇德教授、遼寧師范大學(xué)楊麗珠教授等在兒童個性發(fā)展研究方面提出了卓見,積累了豐富的研究成果,對推進我國兒童個性社會化發(fā)展起到了奠基作用。

      自信心(自信),或稱自信感,是指個體對自身行為能力與價值的客觀認識和充分估價的一種體驗,是一種健康向上的心理品質(zhì)。自信心是人的個性重要組成部分,它的形成和發(fā)展直接影響著兒童的個性甚至整個心理的發(fā)展,擁有自信心也是健康人格的重要標志。但目前國內(nèi)比較注重學(xué)前兒童自信心的實證研究,而以兒童發(fā)展階段來看,小學(xué)兒童個性發(fā)展中關(guān)于自信心方面科學(xué)性地、系統(tǒng)地實證研究還不夠。在課題研究前期《兒童自信心養(yǎng)成研究》研究過程中,我們初步調(diào)查和分析了兒童自信心現(xiàn)狀,初步建立了兒童自信心結(jié)構(gòu)的理論建構(gòu),探討了兒童自信心影響因素,初步構(gòu)建了“兒童獲得成功體驗培養(yǎng)自信心”的系列自主教育活動體系。在此基礎(chǔ)上,課題繼續(xù)采用科學(xué)的實證研究的方法,堅持理論聯(lián)系實際,以小學(xué)兒童為主要研究對象,深入探究兒童自信心的培養(yǎng)。

      (二)課題研究意義

      1、理論意義

      (1)在國內(nèi)外學(xué)者研究基礎(chǔ)上,探討兒童自信心發(fā)展與培養(yǎng)的理論,構(gòu)建適應(yīng)小學(xué)兒童自信心發(fā)展特點的培養(yǎng)模式,以培養(yǎng)兒童健全的個性和良好的心理素質(zhì)。

      (2)為小學(xué)開展兒童自信心教育,提高兒童心理素質(zhì),提供宏觀決策和微觀操作的科學(xué)依據(jù),開辟一條切實可行的教育思路。

      2、實踐意義

      (1)通過兒童自信心實驗研究,為小學(xué)行政管理人員及一線教師開展心理健康教育提供直接的有效方法和措施。

      (2)通過兒童自信心實驗研究,促使學(xué)生家長不斷更新傳統(tǒng)家庭教育觀念,優(yōu)化兒童成長環(huán)境,從而提高家庭教育質(zhì)量。

      (3)通過兒童自信心實驗研究,在幫助兒童獲得成功體驗——兒童不斷積累、嘗試成功體驗——兒童自主成功的培養(yǎng)過程中,給予自卑和自負兒童積極期望,提供成功體驗的機會,對兒童進行鼓勵性評價,從而增強兒童自信心,提高兒童個性發(fā)展水平。

      二、課題研究的理論依據(jù)與研究目標

      (一)課題研究的理論依據(jù)

      課題組以心理科學(xué)、教育科學(xué)為基礎(chǔ),吸納了西方著名心理學(xué)家皮亞杰的心理發(fā)展理論、埃里克森的人格發(fā)展理論,借鑒了國內(nèi)有關(guān)學(xué)者關(guān)于自信心形成因素、關(guān)于自信心評價、關(guān)于自信心培養(yǎng)的研究成果,結(jié)合學(xué)校心理教育原理和機制,遵循小學(xué)生身心發(fā)展規(guī)律,堅持素質(zhì)教育指導(dǎo)方向,揭示實施兒童自信心教育的規(guī)律,堅持理論聯(lián)系實際的科學(xué)方法。

      (二)課題研究目標

      課題組以新一輪基礎(chǔ)教育改革為契機,針對我國兒童個性發(fā)展呈多元性的特點,在全面系統(tǒng)地探索兒童個性發(fā)展理論的基礎(chǔ)上,根據(jù)“兒童自信心實驗研究”的研究實際情況確定以下科研目標:

      1、在兒童自信心養(yǎng)成研究基礎(chǔ)上,進一步完善小學(xué)生自信心心理結(jié)構(gòu)的理論建構(gòu)。

      2、編制能評價小學(xué)生自信心水平的現(xiàn)狀且能分析小學(xué)生自信心發(fā)展特點的三套簡易問卷量表,即《小學(xué)生自信心發(fā)展水平教師評定問卷》、《小學(xué)生自信心發(fā)展水平家長評定問卷》和《小學(xué)生自信心發(fā)展水平自評問卷》。

      3、在兒童自信心養(yǎng)成研究基礎(chǔ)上,不斷完善小學(xué)生獲得成功體驗培養(yǎng)自信心的系列自主教育活動體系。

      4、構(gòu)建小學(xué)生自信心的培養(yǎng)模式。

      5、探討小學(xué)生自信心培養(yǎng)對策與途徑。

      三、課題研究的內(nèi)容

      (一)兒童自信心實驗研究的實施方案

      課題組針對國內(nèi)外同類或相似課題研究的狀況,尤其是遼寧師范大學(xué)楊麗珠教授主持的《兒童個性發(fā)展特點及其影響因素的研究》課題中關(guān)于幼兒自信心研究課題狀況,結(jié)合基礎(chǔ)教育的發(fā)展特點和趨勢,提出思路新穎、起點較高、應(yīng)用性強、極具推廣價值的課題研究模式和實施方案,以指導(dǎo)本課題高質(zhì)量的完成。

      (二)小學(xué)生現(xiàn)狀的調(diào)查與分析

      通過抽樣調(diào)查,分析小學(xué)生自信心現(xiàn)狀,有助于全面了解這一群體心理發(fā)展的特點,為準確分析小學(xué)生自信心形成原因,提出小學(xué)生培養(yǎng)的有效途徑與對策奠定基礎(chǔ)。

      (三)小學(xué)生自信心的影響因素的實驗研究

      本課題以小學(xué)1—6年級小學(xué)生為主要研究對象,通過《小學(xué)生自信心發(fā)展水平教師評定問卷》、《小學(xué)生自信心發(fā)展水平家長評定問卷》和《小學(xué)生自信心發(fā)展水平自評問卷》的問卷調(diào)查,對小學(xué)生自信心多重相關(guān)因素進行分析和研究,研究重點為學(xué)校教育環(huán)境及教育手段、家庭教養(yǎng)方式及策略、社會教育環(huán)境及媒體影響和小學(xué)生自身個性因素等方面的產(chǎn)生的影響作用,并有針對性的提出培養(yǎng)途徑與對策。

      (四)構(gòu)建小學(xué)生自信心培養(yǎng)模式

      在兒童自信心養(yǎng)成的研究基礎(chǔ)上,并同時借鑒國內(nèi)成功教育理論、主體教育理論、賞識教育、希望教育、愉快教育、“我能行”教育等小學(xué)特色教育理論精華,把握兒童自信心培養(yǎng)重點在于兒童成功體驗的獲得,提高小學(xué)生自我認識、自我體驗、自我評價能力,從理論和實踐相結(jié)合的角度構(gòu)建小學(xué)生自信心培養(yǎng)的框架,并探討小學(xué)生自信心培養(yǎng)的模式。

      (五)小學(xué)生自信心培養(yǎng)對策與途徑

      1、構(gòu)建“小學(xué)生獲得成功體驗培養(yǎng)自信心”系列自主教育活動的心理健康教育活動課程體系的直接的有效途徑。

      2、通過教師座談會、家庭教育交流會和家訪等活動以優(yōu)化小學(xué)生教育環(huán)境,建立小學(xué)生心理支持保障機制和學(xué)科滲透的途徑,提高小學(xué)生自信心水平

      3、探索小學(xué)生心理健康教育與心理咨詢活動有效途徑。

      第二篇:幼兒自信心的培養(yǎng)研究

      幼兒自信心的培養(yǎng)研究

      安義縣幼兒園:賀鳳

      自信心是兒童個性心理健康的一個重要標志。自信心的培養(yǎng)也是心理健康教育重要的內(nèi)容。目前有相當一部分幼兒缺乏自信心,懼怕參加競賽性活動,怕別人笑話;不敢與小朋友交往,畏縮退避,獨自玩耍,不敢主動在游戲中表達自己的愿望,總跟在能力較強的幼兒后面,聽從他人安排;在面對困難挫折時常常害怕、退縮、易放棄,而不能努力解決,懼怕嘗試新事物,新活動;與同伴發(fā)生矛盾時,常不能自己想辦法解決,而是依賴于他人幫助,向老師告狀或回家告訴父母。該如何培養(yǎng)幼兒的自信心呢?

      一、為幼兒創(chuàng)設(shè)一個自由、寬松、和諧的環(huán)境

      上課時教師常說:“都坐好了”、“不許亂講話”,這種命令性的語言使幼兒處于一種“必須聽話”的被動地位,缺乏敢于自我表現(xiàn)、自我發(fā)揮的機會。如在一次繪畫活動中,一個小朋友把太陽涂上了綠色,當時我對他說:“你看太陽是綠色的嗎,是紅色的,你重新畫一個吧。”他卻委屈地哭了。事后我了解到,因為我們學(xué)過一首詩歌叫“綠色的世界”,他是根據(jù)詩歌的內(nèi)容涂的顏色。要尊重幼兒的一些決定,肯定幼兒的一些做法,平等地對待幼兒,為他們創(chuàng)設(shè)自由、寬松、和諧的環(huán)境,是培養(yǎng)其自信心的重要條件。

      二、培養(yǎng)幼兒自信心,給予鼓勵和肯定

      教育藝術(shù)的本質(zhì)不在于傳授本領(lǐng),而在于喚醒和激勵。因此,我們對幼兒的任何進步,都要給予熱烈的贊揚,這對樹立幼兒健康的心理,特別是自信心的培養(yǎng),有著極為重要的作用。正確的鼓勵可以幫助幼兒樹立自信心,減少心理緊張。對活動過程中幼兒所做的努力進行評價,目的是讓幼兒明白真正值得表揚的是什么,而不是簡單給幼兒貼“好孩子”的標簽。例如:當幼兒主動向客人問好時,正確的表揚應(yīng)該是:“你真有禮貌!”而不是“你真是個好孩子!”其次,表揚要誠心誠意,不要摻雜著批評的成分。一次,我班的幼兒嘉懿得了一朵小紅花,離園時,很高興的告訴了媽媽,媽媽也很高興的接過了小紅花,說:“你今天得了小紅花不錯,可你不如菲菲得的多?!备改傅谋疽馐枪膭詈⒆幼龅酶?,可孩子卻覺得父母是在批評她,使自信心受到傷害,而放棄努力,這樣做的結(jié)果可能是事與愿違。成人要不吝嗇地說:“你真聰明”、“你真行”之類的贊語,善于發(fā)現(xiàn)孩子身上的閃光點。讓幼兒從成人的賞識、夸獎中體驗到成功的喜悅,他會覺得“我能行”、“我一定能干好”,樹立對自我的正確評價。從而逐步形成一種穩(wěn)定的性格特征——自信,這對幼兒一生的發(fā)展,都是大有裨益的。

      三、要賞識孩子,給予積極的評價

      賞識孩子能給孩子帶來愉快的心情,有位教育家說過:“賞識帶來愉快,愉快導(dǎo)致興趣,興趣帶來干勁,干勁帶來成就,成就帶來自信,自信帶來更大的成就?!庇變簣@的孩子年齡小,缺乏自我評價的能力,常常會以成人的評價來衡量自己、認識自己,他們更需要成人的賞識,尤其是老師的賞識,成人的賞識和積極的評價對孩子產(chǎn)生自信心至關(guān)重要。例如,我們班有個特別調(diào)皮的孩子劉浩然,他能在活動時讓所有的小朋友因為他報告老師,能在幾秒鐘內(nèi)圍著活動室跑上兩圈,讓人頭疼,可是有一天我發(fā)現(xiàn)他給一個哭的小朋友擦淚,還邊擦邊說“不哭,勇敢的孩子是不怕疼的,”我在一邊觀察,原來這個小朋友不小心摔到了??吹剿倪@一舉動我表揚他是個愛護小朋友的好孩子,可能是沒受過表揚的緣故他跑開了,可是從這以后他變了,變得愛幫助小朋友了,原來他的心這么善良,他也需要老師的賞識老師的鼓勵。

      在日常的教育教學(xué)過程中,教師要善于發(fā)現(xiàn)孩子身上的閃光點,學(xué)會賞識孩子,用欣賞、信任、期待的眼光看待每一個孩子,給孩子以鼓勵和力量,使孩子敢于相信自己的能力,能大膽的進行創(chuàng)造、想象和活動,同時,教師應(yīng)及時肯定、鼓勵孩子的每一個進步和優(yōu)點,哪怕在成人眼中是微不足道的,也不要輕易的放過,因為教師的鼓勵和積極的評價是孩子獲得自信心的重要途徑。要常用“你真棒!”“你進步真快!”“你真聰明!”“老師相信你能行!”等正面鼓勵性的評價語言。

      四、創(chuàng)造機會和條件,讓幼兒體驗成功快樂

      自信心是在實踐中培養(yǎng)起來的,《幼兒園教育指導(dǎo)綱要》也指出“應(yīng)為每個幼兒提供表現(xiàn)自己長處和獲得成功的機會,增強自信心?!?/p>

      因此幼兒無論在家或在幼兒園,我們應(yīng)該積極為幼兒創(chuàng)設(shè)一些自我鍛煉的機會,讓他們做一些力所能及的事。

      安安小朋友各方面發(fā)展均衡,接受能力很強,但是上課回答問題以及請小朋友講故事、唱歌的時候,看不到她舉起的小手。如今的社會競爭激烈,僅僅有知識技能還不夠,自信很重要。為此,教師特意跟家長溝通,她媽媽說平時在家是能歌善舞,電視里的歌聽一遍就會了。那么,在幼兒園怎么會不聲不響呢?“她害羞,不敢說!其實什么都會的,你就叫她回答好了,她會的。”她媽媽這樣對我說。于是我嘗試著經(jīng)常叫她回答問題,我也常鼓勵她聲音要響亮。并在集體面前表揚她:“安安回答的很好,還能用完整的句子回答呢!”不管是在教學(xué)中還是平時的表演中,我都給予她鍛煉的機會。慢慢的在舉起的小手里看到了她的小手,我從心里為她高興。她舉手的時候總把手舉得高高的,小臉紅紅的,小眼睛盯著你看,有時還有點害羞,我就帶著孩子們一起鼓掌歡迎她,一站到大家面前她就完全變了,愛唱愛跳,能說會道,聲音特別甜美,可招人喜歡了。就這樣,她愛在集體面前表現(xiàn)了,經(jīng)常講故事給小朋友們聽。

      五、家園密切合作,共同培養(yǎng)幼兒自信心

      家長在培養(yǎng)幼兒自信心的方面也起著重要作用。教師要向家長宣傳培養(yǎng)幼兒自信心的必要性和方法,取得家長的認同及配合,結(jié)合家長反饋的信息共同探討培養(yǎng)幼兒自信心的途徑和方法。家長要懂得尊重和信任幼兒,要結(jié)合實際水平提出要求,不能操之過急,期望過高,不包辦代替,以培養(yǎng)幼兒獨立生活能力。就像小班的孩子,剛?cè)雸@的時候有一半不會擦屁股,有的孩子大便以后就直接把褲子提上,當我發(fā)現(xiàn)了以后就耐心的讓孩子自己學(xué)著擦,并把他的褲子弄干凈,并積極做家長的工作,孩子在家一定要讓他自己的事情自己來做,比如:穿鞋子、穿衣服、擦屁股,吃飯等。一個連生活都不能自理的人,根本談不上獨立做事,當碰到困難時就會畏懼退縮,沒有自信,多讓家長稱贊鼓勵孩子,但也不要濫用表揚,注意表揚的及時性、合理性,及時的表揚有助于孩子對好的行為加以確認和鞏固。培養(yǎng)孩子各方面的興趣,培養(yǎng)孩子一技之長,給孩子一個自我驕傲的理由,從而增強孩子的自信心。

      第三篇:兒童自信心培養(yǎng)的幾點體會

      兒童自信心培養(yǎng)的幾點體會

      案例:

      美國人弗雷德。愛波斯坦由于生理上的原因,上小學(xué)時成績很差,不得已,他只能時常裝病,以躲避同學(xué)的嘲笑。上小學(xué)五年級后,他遇到了一位好老師赫得特。墨菲。一天課后,墨菲老師把弗雷德叫到辦公室,拿出了他的試卷。試卷上有許多題答錯了,弗雷德慚愧地低下了頭。但墨菲老師沒有責(zé)備他,而是和藹地說:“我相信這些題你都會,愿意重新再來一遍嗎?”弗雷德認真地點了點頭。墨菲老師讓他坐下,照著卷子上的每一道題逐一向他提問,弗雷德用口答的方式答題。

      “你看,題全都答對了!”墨菲老師臉上露出了滿意的笑容?!拔抑滥隳苄校 蹦评蠋煯斨ダ椎碌拿鎸⒃嚲砼臑槿珜?,并微笑著對弗雷德說:“你很聰明,孩子。我對你充滿信心?!?/p>

      正是這慈祥的笑容,照亮了弗雷德的心。從此弗雷德簡直判若兩人,學(xué)習(xí)成績異常優(yōu)秀,1963年春。他獲得紐約大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位,并成為紐約大學(xué)小兒神經(jīng)外科主任。首創(chuàng)了脊髓移植,腦瘤切除等手術(shù)。成功后的弗雷德說:“我永遠銘記著墨菲老師的話,她揚起了我自信的風(fēng)帆。”

      案例中的弗雷德是幸運的,他遇到了一位有愛心而且懂得用怎樣的教育方式使學(xué)生獲得成功的老師,那么作為一個小學(xué)教師,在實際的教育教學(xué)工作中應(yīng)該怎樣去做呢?

      兒童年齡小,興趣廣,可塑性強,幫助他們從小樹立自信心,讓他們身心健康地發(fā)展,是教育工作者的首要任務(wù)。

      培養(yǎng)兒童自信心,必須讓兒童樹立“我能行”的觀念,更重要的是創(chuàng)設(shè)一種被欣賞的環(huán)境。

      怎樣培養(yǎng)兒童的自信心呢?

      一、鼓勵為主,喚起自信心

      教師要以正面評價為主,用簡潔、中肯的評價,滿足兒童的成就感,喚起他們的自信心。平時,細心留意每個兒童的閃光點,把握時機,如在取得成績時,在做了好事時,特別是成績較差的兒童取得了進步時等。把握住學(xué)習(xí)生活中的細小事件,讓學(xué)生切實感受到老師對他的了解和重視。

      二、目標適中,產(chǎn)生自信心

      確定教學(xué)目標時,教師要根據(jù)兒童已有的水平,選擇有關(guān)的教學(xué)內(nèi)容。教學(xué)目標太高,教學(xué)內(nèi)容難度大,聽不懂,多次努力,幾經(jīng)挫折,還是沒有收獲,就會喪失信心,學(xué)習(xí)情緒下降,產(chǎn)生厭學(xué)情緒。反之,教學(xué)目標太低,不能讓兒童產(chǎn)生求知欲,也會產(chǎn)生不良情緒。因此,教師設(shè)立的教學(xué)目標要適中,讓兒童“跳一跳”獲得知識,達到目標,產(chǎn)生成功的喜悅感,從而形成積極的心理特征,相信自己的能力,產(chǎn)生自信心。

      三、分析、比較,發(fā)展自信心

      兒童的自信心往往是在通過與他人比較的基礎(chǔ)上產(chǎn)生的。以同學(xué)伙伴的優(yōu)點與自己的缺點相比,這樣就越比越泄氣,但也不能拿自己的長處與別人的短處比,這樣不僅無益于培養(yǎng)自己的自信心,反而會造成自傲或自負等缺點,應(yīng)當讓他們明白,世界上沒有十全十美的人。我們應(yīng)該學(xué)會分析比較,既要看到自己的優(yōu)點,也要認識到自己的不足。長處應(yīng)當發(fā)揚光大,短處設(shè)法彌補,這才是認識自己,評價自己的正確態(tài)度!才有利于自信心的良好發(fā)展。

      四、欣賞、信任、鼓勵自信心

      一個人的自信心是自我意識長期發(fā)展的結(jié)果,它與自我認識、自我評價密切聯(lián)系。在兒童時期,對自我的認識與評價是根據(jù)成人與伙伴的態(tài)度決定的。作為班主任,首先應(yīng)創(chuàng)設(shè)一個欣賞他們,信任他們的環(huán)境,需做好四方面的工作:家長、同學(xué)、任課老師以及學(xué)生自己。

      第四篇:家庭教育對兒童自信心的培養(yǎng)

      淺談家庭教育對兒童自信心的培養(yǎng)

      摘要: 一個人的內(nèi)心有著強大力量,可以超越他人或者超越自己,這就是自信心的來源。在人的成長發(fā)展中自信心是不能缺少的品格,于是自信心對人的品質(zhì)發(fā)展起著非常重要的作用,它的核心價值是不可替代的,但自信心也不是天生的,尤其是家庭教育對培養(yǎng)兒童的自信心起著非常重要的作用.所以家長們要注意搞好對孩子的家庭教育,讓自信心的積極作用能使孩子們通往前方的成功道路。

      關(guān)鍵詞:家庭教育;兒童;自信心

      一、概念的界定及作用

      (一)什么是自信心

      (二)什么是家庭教育

      二、目前兒童在自信心方面所存在的不足

      (一)不能正確的自我評價

      (二)人際交往能力太弱

      (三)應(yīng)對挫折的心理承受能力太弱

      三、家庭教育對兒童自信心發(fā)展的影響因素

      (一)家庭成員關(guān)系的和諧指數(shù)

      (二)家長對孩子的理解和關(guān)心程度

      (三)家長會打擊孩子的好奇心、積極性

      四、家庭教育促進兒童自信心發(fā)展的策略

      (一)家長要轉(zhuǎn)變教育觀念

      1、家長要尊重、信任孩子

      2、正確的理解孩子,降低超高期望值

      3、學(xué)會欣賞孩子,激發(fā)孩子的閃光點

      (二)家長要注重孩子各方面能力的培養(yǎng),促進個性發(fā)展

      1、讓孩子學(xué)會主動、學(xué)會關(guān)心,培養(yǎng)良好的交往能力

      2、滿足孩子的好奇心,培養(yǎng)孩子的創(chuàng)造能力

      3、鍛煉孩子耐挫力,體驗成功歡樂

      第五篇:實驗研究

      一、基因的克隆

      提取小鼠視網(wǎng)膜RNA,然后反轉(zhuǎn)錄為cDNA。

      RNA電泳

      用PCR擴增。先以檢測引物EL4d檢測基因表達情況。引物如下: EL4d-s 5 TAAGCACGCTCTATCTCCTGTTCG 3

      Tm 63.1 EL4d-a 5 TCCAAATACTCAACGCCTTTCG

      Tm 62.0

      268bp 擴增時使用了55.6, 56.5,58.4,60.4,62等5個梯度,結(jié)果每個溫度均出現(xiàn)目的條帶,說明EL4基因的表達豐度良好。

      再以全長基因擴增引物EL4和EL4r同時擴增目的基因。兩對引物如下: EL4-s CAAGATGGGGCTGCTGGACTCAG

      Tm 67.8 EL4-a TCACATTGGGGTTGCTTTGGTCTG

      Tm 67.9

      1190bp EL4r-s ATCGGTACCCAAGATGGGGCTGCTGGACTCAG

      Tm 67.8 EL4r-a ATAGAATTCAATTTACTCTCCTTTTGGCTTCCCGT

      Tm 67.8

      956 bp 擴增時使用了56.1, 58.3,59.7,62.6,65.5等5個梯度摸條件,結(jié)果每個溫度均出現(xiàn)目的條帶。但低溫有雜帶,高溫特異性強。由此可見,直接用帶有內(nèi)切酶的克隆引物EL4r擴增基因即可,用65℃最佳。

      引物EL4

      M2000

      引物EL4r

      質(zhì)粒電泳

      M2000

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