第一篇：微生物第六七章總結(jié)（推薦）

微生物的生長(zhǎng)和控制

第一節(jié)：測(cè)定生長(zhǎng)繁殖的方法

一.測(cè)生長(zhǎng)量

(一)直接法：有粗放的測(cè)體積法和精確的稱干重法。(二)間接法：1.比濁法2.生理指標(biāo)法 二.計(jì)繁殖數(shù)

(一)直接法：指用計(jì)數(shù)板(例如血球計(jì)數(shù)板)在光學(xué)顯微鏡下直接觀察細(xì)胞并進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法。此法十分常用,但得到的數(shù)目是包括死細(xì)胞在內(nèi)的總菌數(shù)?？梢圆捎锰厥獾娜旧ㄓ?jì)算活細(xì)胞。

(二)間接法：

1.平板菌落計(jì)數(shù)法：可用澆注平板或涂布平板或滾管法等方法進(jìn)行。2.厭氧菌的菌落計(jì)數(shù)法：亨蓋特滾管培養(yǎng)法。

第二節(jié)微生物的生長(zhǎng)規(guī)律

一.單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線

它只適合單細(xì)胞微生物如細(xì)菌和酵母菌,非典型的絲狀菌生長(zhǎng)曲線缺乏指數(shù)生長(zhǎng)期, 與此期相當(dāng)?shù)闹皇桥囵B(yǎng)時(shí)間與菌絲體干重的立方根成直線關(guān)系的一段快速生長(zhǎng)時(shí)期。根據(jù)微生物的生長(zhǎng)速率常數(shù), 即每小時(shí)分裂次數(shù)(的不同, 一般可把典型生長(zhǎng)曲線粗分為延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期等4個(gè)時(shí)期。(一)延滯期：

延滯期又稱停滯期、調(diào)整期或適應(yīng)期。

影響延滯期長(zhǎng)短的因素：菌種類型，接種齡，接種量，培養(yǎng)基成分。(二)指數(shù)期：

指數(shù)期又稱對(duì)數(shù)期

在指數(shù)期中,有 3 個(gè)重要參數(shù),其相互關(guān)系及計(jì)算方法在書P155 影響對(duì)數(shù)期的因素：菌種，營(yíng)養(yǎng)成分，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度，培養(yǎng)溫度(三)穩(wěn)定期：

細(xì)胞內(nèi)開始積聚糖原、異染顆粒和脂肪等內(nèi)含物;芽孢桿菌一般在這時(shí)開始形成芽孢;在這時(shí)開始以初生代謝物作前體,合成抗生素等對(duì)人類有用的各種次生代謝物。

穩(wěn)定期到來的原因是:①營(yíng)養(yǎng)物尤其是生長(zhǎng)限制因子的耗盡;②營(yíng)養(yǎng)物的比例失調(diào);③有害代謝產(chǎn)物的累積;④物理化學(xué)條件越來越不適宜等等。(四)衰亡期：

有的微生物在這期會(huì)進(jìn)一步合成或釋放對(duì)人類有益的抗生素等次生代謝物;而在芽孢桿菌中, 往往在此期釋放芽孢;等等。第三節(jié)影響微生物生長(zhǎng)的主要因素

其中最主要的溫度、pH和氧氣。一.溫度：

生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn):最低生長(zhǎng)溫度、最適生長(zhǎng)溫度和最高生長(zhǎng)溫度。在不同溫度下，微生物的代謝產(chǎn)物可能會(huì)發(fā)生改變。二.PH：除不同種類微生物有其最適生長(zhǎng)PH外, 即使同一種微生物在其不同的生長(zhǎng)階段和不同的生理、生化過程, 也有不同的最適PH要求。三.氧氣：

按照微生物與氧的關(guān)系,可把它們粗分成好氧微生物和厭氧微生物兩大類。細(xì)分為專性好氧菌，兼性厭氧菌，微好氧菌，耐氧菌和厭氧菌。關(guān)于厭氧菌不能存活于氧氣環(huán)境中的解釋，現(xiàn)在普遍認(rèn)為是因?yàn)閰捬蹙胁淮嬖谶^氧化氫酶和SOD（超氧化物歧化酶）

第四節(jié)微生物培養(yǎng)法概論

一.實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)法(一)固體培養(yǎng)法

1.好氧菌的固體培養(yǎng)：主要用試管斜面、培養(yǎng)皿瓊脂平板。

2.厭氧菌的固體培養(yǎng)：高層瓊脂柱，厭氧培養(yǎng)皿，亨蓋特滾管技術(shù)(二)液體培養(yǎng)法

1.好氧菌的液體培養(yǎng)：(1)試管液體培養(yǎng);(2)三角瓶淺層液體培養(yǎng);(3)搖瓶培養(yǎng)

第五節(jié)有害微生物的控制

滅菌:采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施,稱為滅菌.消毒:是一種采用較溫和的理化因素,僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體或動(dòng)、植物有害的病原菌, 而對(duì)被消毒的對(duì)象基本無害的措施。

防腐:防腐就是利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長(zhǎng)繁殖, 即通過制菌作用防止食品、生物制品等對(duì)象發(fā)生霉腐的措施。例如：低溫，缺氧，干燥，高滲，高酸，高醇，防腐劑。

一.物理滅菌因素的代表——高溫 1.干熱滅菌法

把金屬器械或洗凈的玻璃器皿放入電熱烘箱內(nèi), 在150～170℃下維持1～2 h后, 可達(dá)到徹底滅菌(包括細(xì)菌的芽孢)的目的。2.濕熱滅菌法(1)常壓法

①巴氏消毒法：此法可殺滅物料中的無芽孢病原菌(如牛奶中的結(jié)核分枝桿菌或沙門氏菌), 又不影響其原有風(fēng)味。

具體方法可分兩類: 第一類是經(jīng)典的低溫維持法(LTH),例如用于牛奶消毒只要在63℃下維持30 min即可;第二類是較現(xiàn)代的高溫瞬時(shí)法（HTST）,用此法作牛奶消毒時(shí)只要在72℃下保持15 s。

③間歇滅菌法：適用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌，將待滅菌的培養(yǎng)基放在80～100℃下蒸煮 15～60min,以殺滅其中所有的微生物營(yíng)養(yǎng)體, 然后放至室溫或 37℃下保溫過夜, 誘使其中殘存的芽孢發(fā)芽,第二天再以同法蒸煮和保溫過夜, 如此連續(xù)重復(fù) 3 天即可在較低的滅菌溫度下同樣達(dá)到徹底滅菌的良好效果。(2)加壓法

①常規(guī)加壓蒸氣滅菌法：一般稱作“高壓蒸氣滅菌法”，一般要求為121℃，時(shí)間維持15-20min ②連續(xù)加壓蒸氣滅菌法:在發(fā)酵行業(yè)里也稱“連消法”。此法僅用于大型發(fā)酵廠的大批培養(yǎng)基滅菌。

利用溫度殺菌時(shí)幾個(gè)關(guān)鍵的數(shù)值：

①D值是指在一定的致死溫度下，90％的活菌被殺死所需的時(shí)間（min),即為D值。

②Z值是指如果在加熱致時(shí)間曲線中，加熱時(shí)間縮短90％，所需升高的溫度，這所需升高的溫度即為z值，或者說殺菌時(shí)間變化10倍，相應(yīng)的溫度變化值。影響加壓蒸氣滅菌效果的因素： 1.滅菌物體含菌量

2.滅菌鍋內(nèi)空氣排除程度 3.滅菌對(duì)象的 pH 4.滅菌對(duì)象的體積 5.加熱與散熱速度

微生物的遺傳變異和育種

第一節(jié)遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ) 個(gè)基本概念:(1)遺傳型：又稱基因型, 指某一生物個(gè)體所含有的全部遺傳因子即基因的總和。

(2)表型：指某一生物體所具有的一切外表特征和內(nèi)在特性的總和,是其遺傳型在合適環(huán)境條件下通過代謝和發(fā)育而得到的具體體現(xiàn)。

(3)變異：指生物體在某種外因或內(nèi)因的作用下所引起的遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)或數(shù)量的改變,亦即遺傳型的改變。

(4)飾變：即一種不涉及遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)改變而只發(fā)生在轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯水平上的表型變化。一.三個(gè)證明遺傳物質(zhì)是核酸的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)：(一)經(jīng)典轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)：肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(二)噬菌體感染實(shí)驗(yàn)(三)植物病毒的重建實(shí)驗(yàn) 二.原核生物的質(zhì)粒簡(jiǎn)介：

(1)F質(zhì)粒：又稱F因子、致育因子或性因子,是E.coli等細(xì)菌決定性別并有轉(zhuǎn)移能力的質(zhì)粒。(2)R質(zhì)粒：又稱R因子，為細(xì)菌提供抗藥性。(3)Col質(zhì)粒：編碼細(xì)菌素的質(zhì)粒。

(4)Ti質(zhì)粒：即誘癌質(zhì)?；蚬诎`質(zhì)粒。Ri質(zhì)粒與Ti質(zhì)粒類似。

(5)mega質(zhì)粒：即巨大質(zhì)粒,存在于根瘤菌屬中, 其上有一系列與共生固氮相關(guān)的基因。(6)降解性質(zhì)粒：只在 Pseudomonas(假單胞菌屬)中發(fā)現(xiàn)。這類質(zhì)?？蔀榻到庖幌盗袕?fù)雜有機(jī)物的酶編碼,從而使這類細(xì)菌在污水處理、環(huán)境保護(hù)等方面發(fā)揮特有的作用。(7)2μm質(zhì)粒存在于酵母菌細(xì)胞中。

第二節(jié)基因突變和誘變育種

一.基因突變

（一）突變類型 1.營(yíng)養(yǎng)缺陷型：某一野生型菌株因發(fā)生基因突變而喪失合成一種或幾種生長(zhǎng)因子、堿基或氨基酸的能力,因而無法再在基本培養(yǎng)基(MM)上正常生長(zhǎng)繁殖的變異類型。

2.抗性突變型：指野生型菌株因發(fā)生基因突變,而產(chǎn)生的對(duì)某化學(xué)藥物或致死物理因子的抗性變異類型。6.產(chǎn)量突變型：通過基因突變而產(chǎn)生的在代謝產(chǎn)物產(chǎn)量上明顯有別于原始菌株的突變株, 稱產(chǎn)量突變型。產(chǎn)量高則為正變株，產(chǎn)量低則為負(fù)變株。

（二）基因突變的特點(diǎn)

①自發(fā)性②不對(duì)應(yīng)性③稀有性⑤可誘變性⑥穩(wěn)定性⑦可逆性

（三）基因突變的機(jī)制

1.誘發(fā)突變：誘發(fā)突變簡(jiǎn)稱誘變,是指通過人為的方法, 利用物理、化學(xué)或生物因素顯著提高基因自發(fā)突變頻率的手段。凡具有誘變效應(yīng)的任何因素, 都稱誘變劑。(1)堿基的置換：因它只涉及一對(duì)堿基被另一對(duì)堿基所置換。

置換又可分兩個(gè)亞類:一類稱轉(zhuǎn)換,即DNA鏈中一個(gè)嘌呤被另一個(gè)嘌呤或是一個(gè)嘧啶被另一個(gè)嘧啶所置換;另一類稱顛換,即一個(gè)嘌呤被另一個(gè)嘧啶或是一個(gè)嘧啶被另一個(gè)嘌呤所置換。①直接引起置換的誘變劑: 例如亞硝酸、羥胺和各種烷化劑等 ②間接引起置換的誘變劑: 5-溴尿嘧啶等

(2)移碼突變：指誘變劑會(huì)使 DNA 序列中的一個(gè)或少數(shù)幾個(gè)核苷酸發(fā)生增添(插入)或缺失,從而使該處后面的全部遺傳密碼的閱讀框架發(fā)生改變。能引起移碼突變的因素是一些吖啶類染料。

(3)染色體畸變：包括染色體結(jié)構(gòu)上的缺失、重復(fù)、插入、易位和倒位,也包括染色體數(shù)目的變化。某些強(qiáng)烈理化因子, 如電離輻射(X射線等)和烷化劑、亞硝酸等會(huì)導(dǎo)致染色體畸變。2.自發(fā)突變：指生物體在無人工干預(yù)下自然發(fā)生的低頻率突變。

（四）紫外線對(duì) DNA 的損傷及其修復(fù)

嘧啶對(duì)UV的敏感性比嘌呤強(qiáng)得多, 其光化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)物主要是嘧啶二聚體(TT, TC, CC)和水合物,相鄰嘧啶形成二聚體后, 造成局部DNA分子無法配對(duì)。二.突變與育種

(一)自發(fā)突變與育種 1.從生產(chǎn)中育種 2.定向培育優(yōu)良菌株(二)誘變育種

1.誘變育種是指利用物理、化學(xué)等誘變劑處理均勻而分散的微生物細(xì)胞群, 在促進(jìn)其突變率顯著提高的基礎(chǔ)上,采用簡(jiǎn)便、快速和高效的篩選方法, 從中挑選出少數(shù)符合目的的突變株,以供科學(xué)實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)實(shí)踐使用。2.艾姆斯試驗(yàn)

艾姆氏試驗(yàn)是一種利用細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變來檢測(cè)環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑的簡(jiǎn)便有效方法。（三致作用：致癌致畸致突變）實(shí)驗(yàn)菌種：鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型

試驗(yàn)方法：是在含待測(cè)可疑“三致”物的試樣中,加入鼠肝勻漿液, 經(jīng)一段時(shí)間保溫后,吸入濾紙片中, 然后將濾紙片放置于上述平板中央。經(jīng)培養(yǎng)后,出現(xiàn)結(jié)果。有三種結(jié)果

①在平板上無大量菌落產(chǎn)生, 說明試樣中不含誘變劑;②在紙片周圍有一抑制圈, 其外周出現(xiàn)大量菌落, 說明試樣中有某種高濃度的誘變劑存在;③在紙片周圍長(zhǎng)有大量菌落, 說明試樣中有濃度適當(dāng)?shù)恼T變劑存在。加入鼠肝勻漿的作用：因許多化學(xué)物質(zhì)原先并非誘變劑或致癌劑,只有在進(jìn)入機(jī)體并在肝臟的解毒過程中, 受到肝細(xì)胞中一些加氧酶的作用,才形成有害的環(huán)氧化物或其他激活態(tài)化合物, 故試驗(yàn)中先要加入鼠肝勻漿液保溫;3.營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的篩選方法

①與篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株有關(guān)的 3 類培養(yǎng)基: 基本培養(yǎng)基(MM,符號(hào)為[-]):僅能滿足某微生物的野生型菌株生長(zhǎng)所需要的最低成分的組合培養(yǎng)基,稱基本培養(yǎng)基。

完全培養(yǎng)基(CM,符號(hào)為[ + ]):凡可滿足一切營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株?duì)I養(yǎng)需要的天然或半組合培養(yǎng)基, 稱完全培養(yǎng)基。

補(bǔ)充培養(yǎng)基(SM,符號(hào)為[ A]或[B]等):凡只能滿足相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株生長(zhǎng)需要的組合或半組合培養(yǎng)基, 稱補(bǔ)充培養(yǎng)基。

②與營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變有關(guān)的 3 類遺傳型個(gè)體: 野生型:指從自然界分離到的任何微生物在其發(fā)生人為營(yíng)養(yǎng)缺陷突變前的原始菌株。

營(yíng)養(yǎng)缺陷型:野生型菌株經(jīng)誘變劑處理后, 由于發(fā)生了喪失某酶合成能力的突變,因而只能在加有該酶合成產(chǎn)物的培養(yǎng)基中才能生長(zhǎng), 這類突變菌株稱為營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株。

原養(yǎng)型:一般指營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株經(jīng)回復(fù)突變或重組后產(chǎn)生的菌株,其營(yíng)養(yǎng)要求在表型上與野生型相同。

(3)營(yíng)養(yǎng)缺陷型的篩選方法 ①誘變劑處理

②淘汰野生型：通過抗生素法或者菌絲過濾法即可 ③檢出缺陷型：

夾層培養(yǎng)法: 先在培養(yǎng)皿底部倒一薄層不含菌的基本培養(yǎng)基（MM）,待凝,添加一層混有經(jīng)誘變劑處理菌液的基本培養(yǎng)基（含菌MM）,其上再澆一薄層不含菌的基本培養(yǎng)基（MM）,遂成“三明治”狀。經(jīng)培養(yǎng)后,對(duì)首次出現(xiàn)的菌落用記號(hào)筆一一標(biāo)在皿底。然后, 再向皿內(nèi)倒上一薄層第四層培養(yǎng)基——完全培養(yǎng)基（CM）。再經(jīng)培養(yǎng)后,全長(zhǎng)出形態(tài)較小的新菌落, 它們多數(shù)都是營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株。限量補(bǔ)充培養(yǎng)法 逐個(gè)檢出法 影印平板法

④鑒定缺陷型:可借生長(zhǎng)譜法進(jìn)行。

第三節(jié)基因重組與雜交育種

真核微生物中的有性雜交、準(zhǔn)性雜交、原生質(zhì)體融合以及原核生物中的轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合和原生質(zhì)體融合等。

一.原核生物的基因重組

特點(diǎn)為: ①片段性,僅一小段DNA序列參與重組;②單向性,即從供體菌向受體菌(或從供體基因組向受體基因組)作單方向轉(zhuǎn)移;③轉(zhuǎn)移機(jī)制獨(dú)特而多樣,如接合、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)等。(一)轉(zhuǎn)化

1.定義：受體菌直接吸收供體菌的DNA片段而獲得后者部分遺傳性狀的現(xiàn)象,稱為轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)化作用。通過轉(zhuǎn)化方式而形成的雜種后代,稱轉(zhuǎn)化子。

2.感受態(tài)：凡能發(fā)生轉(zhuǎn)化, 其受體細(xì)胞必須處于感受態(tài)。感受態(tài)是指受體細(xì)胞最易接受外源 DNA 片段并能實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化的一種生理狀態(tài)。(二)轉(zhuǎn)導(dǎo) 1.定義：通過缺陷噬菌體的媒介,把供體細(xì)胞的小片段 DNA 攜帶到受體細(xì)胞中,通過交換與整合, 使后者獲得前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象, 稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)。

2.普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)：通過極少數(shù)完全缺陷噬菌體對(duì)供體菌基因組上任何小片段DNA進(jìn)行“誤包” , 而將其遺傳性狀傳遞給受體菌的現(xiàn)象,稱為普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)。

3.局限轉(zhuǎn)導(dǎo)：指通過部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中, 并與后者的基因組整合、重組, 形成轉(zhuǎn)導(dǎo)子的現(xiàn)象。(三)接合

1.定義：供體菌(“雄性”)通過性菌毛與受體菌(“雌性”)直接接觸, 把 F 質(zhì)?；蚱鋽y帶的不同長(zhǎng)度的核基因組片段傳遞給后者, 使后者獲得若干新遺傳性狀的現(xiàn)象, 稱為接合。2.E.coli的4種接合型菌株

根據(jù)F質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)的存在方式, 可把 E.coli 分成 4 種不同接合型菌株

(1)F+ 菌株即“雄性”菌株, 指細(xì)胞內(nèi)存在一至幾個(gè)F質(zhì)粒, 并在細(xì)胞表面著生一至幾條性菌毛的菌株。

(2)F-菌株即“雌性”菌株, 指細(xì)胞中無 F 質(zhì)粒、細(xì)胞表面也無性菌毛的菌株。它可通過與F+菌株或F’菌株的接合而接受供體菌的F質(zhì)?；騀’質(zhì)粒, 從而使自己轉(zhuǎn)變成“雄性”菌株;也可通過接合接受來自Hfr菌株的一部分或一整套核基因組 DNA(3)Hfr菌株:在Hfr菌株細(xì)胞中, 因F質(zhì)粒已從游離態(tài)轉(zhuǎn)變成在核染色體組特定位點(diǎn)上的整合態(tài), 故Hfr菌株與F-菌株相接合后, 發(fā)生基因重組的頻率要比單純用F+與F-接合后的頻率高出數(shù)百倍。

二.真核微生物的基因重組(一)有性雜交

有性雜交, 一般指不同遺傳型的兩性細(xì)胞間發(fā)生的接合和隨之進(jìn)行的染色體重組,進(jìn)而產(chǎn)生新遺傳型后代的一種育種技術(shù)。(二)準(zhǔn)性雜交 1.定義：準(zhǔn)性生殖是一種類似于有性生殖,但比它更為原始的兩性生殖方式, 這是一種在同種而不同菌株的體細(xì)胞間發(fā)生的融合,它可不借減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子。2.準(zhǔn)性生殖過程

(1)菌絲聯(lián)結(jié)：它發(fā)生于一些形態(tài)上沒有區(qū)別、但在遺傳型上卻有差別的同種不同菌株的體細(xì)胞(單倍體)間。發(fā)生菌絲聯(lián)結(jié)的頻率是極低的。

(2)形成異核體：兩個(gè)遺傳型有差異的體細(xì)胞經(jīng)菌絲聯(lián)結(jié)后,先發(fā)生質(zhì)配,使兩個(gè)單倍體核集中到同一細(xì)胞中, 于是形成了雙相的異核體。異核體能獨(dú)立生活。

(3)核融合：或稱核配, 指在異核體中的兩個(gè)細(xì)胞核在某種條件下,低頻率地產(chǎn)生雙倍體雜合子核的現(xiàn)象。

(4)體細(xì)胞交換和單倍體化：體細(xì)胞交換，即體細(xì)胞中染色體間的交換,也稱有絲分裂交換。3.準(zhǔn)性雜交育種

(1)選擇親本：即選擇來自不同菌株的合適的營(yíng)養(yǎng)缺陷型作為準(zhǔn)性雜交的親本。(2)強(qiáng)制異合：即用人為的方法強(qiáng)制兩個(gè)營(yíng)養(yǎng)缺陷型的親本菌株形成互補(bǔ)的異核體。(3)移單菌落：將平板上長(zhǎng)出的單菌落移種到基本培養(yǎng)基[-]的斜面上。

(4)驗(yàn)穩(wěn)定性：指設(shè)法檢驗(yàn)獲得的菌株究竟是一種不穩(wěn)定的異核體,還是穩(wěn)定的雜合二倍體。(5)促進(jìn)變異：把上述穩(wěn)定菌株所產(chǎn)生的分生孢子處理,以促使其發(fā)生染色體交換、染色體在子細(xì)胞中分配不均、染色體缺失或畸變以及發(fā)生點(diǎn)突變等變化,從而使分離后的雜交子代(單倍體雜合子)進(jìn)一步增加新性狀變異的可能性。第四節(jié)菌種的衰退、復(fù)壯和保藏

一.菌種的衰退與復(fù)壯

衰退：是指由于自發(fā)突變的結(jié)果, 而使某物種原有一系列生物學(xué)性狀發(fā)生量變或質(zhì)變的現(xiàn)象。具體表現(xiàn)有: ①原有形態(tài)性狀變得不典型了②生長(zhǎng)速度變慢,產(chǎn)生的孢子變少③代謝產(chǎn)物生產(chǎn)能力下降,即出現(xiàn)負(fù)變④致病菌對(duì)宿主侵染力的下降,⑤對(duì)外界不良條件包括低溫、高溫或噬菌體侵染等抵抗能力的下降等等。狹義的復(fù)壯僅是一種消極的措施，指的是在菌種已發(fā)生衰退的情況下, 通過純種分離和測(cè)定典型性狀、生產(chǎn)性能等指標(biāo),從已衰退的群體中篩選出少數(shù)尚未退化的個(gè)體, 以達(dá)到恢復(fù)原菌株固有性狀的相應(yīng)措施。

廣義的復(fù)壯則應(yīng)是一項(xiàng)積極的措施, 即在菌種的典型特征或生產(chǎn)性狀尚未衰退前,就經(jīng)常有意識(shí)地采取純種分離和生產(chǎn)性狀的測(cè)定工作, 以期從中選擇到自發(fā)的正變個(gè)體。(一)衰退的防止 1.控制傳代次數(shù)

2.創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件

3.利用不易衰退的細(xì)胞傳代 4.采用有效的菌種保藏方法(二)菌種的復(fù)壯 1.純種分離法 2.通過宿主體復(fù)壯 3.淘汰已衰退的個(gè)體 二.菌種的保藏

1.定義：通過適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ沟梦⑸锬軌蜷L(zhǎng)期存活，并保持原種的微生物學(xué)性狀穩(wěn)定不變的一類措施。

2.原理：首先應(yīng)挑選典型菌種或典型培養(yǎng)物的優(yōu)良純種, 最好保藏它們的分生孢子、芽孢等體眠體;其次,還要?jiǎng)?chuàng)造一個(gè)有利于它們長(zhǎng)期休眠的良好環(huán)境條件。3.七種常用的方法： 冰箱保藏法（斜面）冰箱保藏法（半固體）石蠟油封保藏法 甘油懸液保藏法 砂土保藏法

冷凍干燥保藏法：干燥，低溫，無氧，有保護(hù)劑 液氮超低溫保藏法：超低溫（-196℃）

各大菌種保藏單位普遍使用冷凍干燥保藏法和液氮超低溫保藏法

微生物的生態(tài)

1.土壤中微生物的數(shù)目：

盡管土壤的類型眾多, 其中各種微生物的含量變化很大, 但一般來說, 在每克耕作層土壤中,各種微生物含量之比大體有一個(gè) 10 倍系列的遞減規(guī)律: 細(xì)菌(～108)>放線菌(～107 , 孢子)>霉菌(～106 , 孢子)>酵母菌(～105)>藻類(～104)>原生動(dòng)物(～103)2.微生物與生物環(huán)境間的關(guān)系：

①互生：兩種可單獨(dú)生活的生物, 當(dāng)它們?cè)谝黄饡r(shí), 通過各自的代謝活動(dòng)而有利于對(duì)方, 或偏利于一方的生活方式,稱為互生。

②共生：是指兩種生物共居在一起, 相互分工合作、相依為命, 甚至達(dá)到難分難解、合二為一的極其緊密的一種相互關(guān)系。

③寄生：一般指一種小型生物生活在另一種較大型生物的體內(nèi)(包括細(xì)胞內(nèi))或體表, 從中奪取營(yíng)養(yǎng)并進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖,同時(shí)使后者蒙受損害甚至被殺死的一種相互關(guān)系。前者稱為寄生物,后者則稱作宿主或寄主。④拮抗：指由某種生物所產(chǎn)生的特定代謝產(chǎn)物可抑制他種生物的生長(zhǎng)發(fā)育甚至殺死它們的一種相互關(guān)系。⑤捕食：一般指一種大型的生物直接捕捉、吞食另一種小型生物以滿足其營(yíng)養(yǎng)需要的相互關(guān)系。

習(xí)題：

一.填空題

1.證明核酸是遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)的是三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)分別是：____、____和____。2.細(xì)菌的質(zhì)粒種類很多，其中接合性質(zhì)粒如____，抗藥性質(zhì)粒如____，產(chǎn)細(xì)菌素質(zhì)粒如____，誘癌質(zhì)粒如____等。

3.常見的“三致”是指____、____和____，目前檢出某試樣是否含有三致作用的減簡(jiǎn)便。高效的試驗(yàn)是____。

4.與營(yíng)養(yǎng)缺陷突變有關(guān)的三類培養(yǎng)基是____、____和____。其符號(hào)分別是____，____和____。5.檢出營(yíng)養(yǎng)缺陷型一般有四種方法：____，____，____和____。

6.艾姆斯試驗(yàn)中用的菌株是____的____缺陷型菌株，通過____突變可以測(cè)定待測(cè)樣品中“三致”物質(zhì)的存在。

7.普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)與局限轉(zhuǎn)導(dǎo)的區(qū)別在于：①普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體是____噬菌體，而局限轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體是____噬菌體。②普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體能夠轉(zhuǎn)移供體菌的____基因，而局限轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體只能轉(zhuǎn)移供體菌的____基因。

8.在大腸桿菌接合過程中，有四種獨(dú)特的菌株參與，他們是____、____、____和____。9.目前國(guó)際上代表性菌種保藏機(jī)構(gòu)如美國(guó)的ATCC僅使用兩種保藏方法，即____和____。二.判斷題

1.原養(yǎng)型是野生型的別稱，兩者不僅表型相同，而且遺傳型也一致。2.受體細(xì)胞實(shí)現(xiàn)DNA轉(zhuǎn)化，必須先出現(xiàn)感受態(tài)。

3.5-尿溴吡啶是以堿基是以堿基顛換的方式引起基因突變的。

4.微生物菌種退化的問題在工業(yè)生產(chǎn)中有時(shí)會(huì)遇到，一旦菌種退化，生產(chǎn)效率下降，更重要的是：退化菌種群體中再也找不到生產(chǎn)能力正常的細(xì)胞。

5.準(zhǔn)性雜交中能夠?qū)е碌皖l率的基因重組是因?yàn)檫@些真菌的雜合二倍體細(xì)胞在進(jìn)行減數(shù)分裂時(shí)，同源染色體進(jìn)行配對(duì)而發(fā)生染色體之間交換的結(jié)果。

6.在篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型時(shí)，在完全培養(yǎng)基中加入青霉素，可以有效殺死大量生長(zhǎng)繁殖的野生型菌株，從而達(dá)到濃縮營(yíng)養(yǎng)缺陷型的作用。7.普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)可將供體菌的任何基因轉(zhuǎn)導(dǎo)，故可使受體菌成為獲得全套供體菌基因組的轉(zhuǎn)導(dǎo)子。8.轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)都不需要供體菌和受體菌的完整細(xì)胞直接接觸而進(jìn)行的。

9、當(dāng)大腸桿菌的F+和F-菌株發(fā)生結(jié)合時(shí)，F(xiàn)因子由供體菌進(jìn)入受體菌，從而使原F+變成了 F-，而原F-變成了F+。

10.粘質(zhì)沙雷氏菌在25℃下形成血紅色菌落，但置于37℃下則形成無色菌落，這說明該菌種發(fā)生了衰退。

11.C+G%值差別越遠(yuǎn)的兩種生物，其親緣關(guān)系必然十分疏遠(yuǎn)。12.親緣關(guān)系越近的微生物，其堿基序列也越接近，故核酸分子雜交的同源性百分值就越高。13.微生物的數(shù)值分類法實(shí)際上是一種利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行的統(tǒng)計(jì)分類方法。三.選擇題

1.2μm質(zhì)粒存在于（）中 A.草履蟲 B.釀酒酵母 C.大腸桿菌 D.粗糙脈胞菌

2.某微生物經(jīng)誘變后，其DNA鏈上的A變成G,這種突變屬于（）A.轉(zhuǎn)換 B.顛換 C.移碼 D.轉(zhuǎn)座 3.最易引起移碼突變的誘變劑是（）A.亞硝酸 B.烷化劑 C.5-尿溴吡啶

D.吖啶類染料

4.有一種檢出營(yíng)養(yǎng)缺陷型的夾層培養(yǎng)法，要在培養(yǎng)基中先加入3薄層片培養(yǎng)基，經(jīng)過培養(yǎng)后再倒入第4層培養(yǎng)基，這四層加入的順序是（）A.MM+含菌MM+SM+CM B.MM+含菌MM+MM+CM C.MM+含菌MM+MM+SM D.MM+含菌MM+CM+SM 5.有一種簡(jiǎn)便的，快速的鑒定營(yíng)養(yǎng)缺陷型的方法是（）A.青霉素法 B.夾層平板法 C.影印平板法 D.生長(zhǎng)譜法

6.必須經(jīng)過兩性細(xì)胞如何而完成的高頻率基因重組并產(chǎn)生雜種子代的雜交方法，稱為（）A.準(zhǔn)性雜交 B.接合 C.有性雜交 D.轉(zhuǎn)導(dǎo)

7.發(fā)生低頻率的染色體重組并產(chǎn)生雜種子代的方式，稱為（）A.準(zhǔn)性雜交 B.接合 C.有性雜交 D.轉(zhuǎn)導(dǎo)

8.供體細(xì)胞和受體細(xì)胞通過缺陷噬菌體作為媒介，從供體細(xì)胞傳遞部分染色體至受體細(xì)胞的現(xiàn)象，稱為（）

A.接合 B.轉(zhuǎn)化 C.轉(zhuǎn)導(dǎo) D.性導(dǎo)

9.供體菌的游離DNA不通過細(xì)胞間的接觸直接進(jìn)入受體菌并實(shí)現(xiàn)部分染色體遺傳重組的現(xiàn)象，稱為（）

A.接合 B.轉(zhuǎn)化 C.轉(zhuǎn)導(dǎo) D.轉(zhuǎn)染

10.白喉棒桿菌被β噬菌體溶源化后，稱為產(chǎn)毒株，此即（）A.轉(zhuǎn)化 B.轉(zhuǎn)導(dǎo) C.轉(zhuǎn)染 D.溶原性轉(zhuǎn)變

11.在細(xì)菌接合實(shí)驗(yàn)中，不同菌株接合后的使受體菌獲得較多供體菌性狀的配對(duì)是（）A.F+和F-B.F和F-C.F+和Hfr D.Hfr和F-12.對(duì)于低溫保藏菌種來說，以下四種溫度中以（）為最好 A.0℃ B.-20℃

C.-70℃

D.-196℃ 13.人體正常菌群與人類的關(guān)系屬于（）A.互生 B.共生 C.寄生 D.拮抗

14.下列微生物中，有一種非但不是條件致病菌，而且還可以制成優(yōu)良益生菌制劑的是（）A.大腸桿菌

B.脆弱擬桿菌 C.白色假絲酵母

D.嗜酸乳桿菌 四.問答題

1.簡(jiǎn)述微生物遺傳育種中常用的方法。2.微生物污染食品的途徑有哪些？

3.菌種保藏原理是什么？簡(jiǎn)要介紹三種常用的方法？

第二篇：微生物總結(jié)

第一章、緒論

巴斯得的貢獻(xiàn)：

1、徹底否定了“自生說”

2、免疫學(xué)—預(yù)防接種

3、證實(shí)發(fā)酵是由微生物引起的3、巴斯德消毒法

柯赫貢獻(xiàn)：

1、證實(shí)炭疽病菌是炭疽病的病原菌

2、發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌

3、提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的病原菌——柯赫原則

4、固體培養(yǎng)基分離純化微生物的技術(shù)

5、配制培養(yǎng)基

微生物的5大共性：

1、體積小、面積大

2、吸收多、轉(zhuǎn)化快

3生長(zhǎng)旺、繁殖快

4、分布廣、種類多

5、適應(yīng)性強(qiáng)、易變異 第二章、微生物的純培養(yǎng)和顯微技術(shù)

一、涂布平板法作用：用于純種分離、篩選菌落、得到單菌落，對(duì)一些細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù) 五區(qū)劃線發(fā)作用：純化菌種、得到單菌落

搖瓶實(shí)驗(yàn)作用：菌種篩選、發(fā)酵實(shí)驗(yàn)、種子培養(yǎng)等 穿刺法的作用：保藏厭氧菌種、研究微生物的動(dòng)力 之字劃線法的作用：保藏菌種、單菌落的獲取

二、斜面菌種保藏法：保藏期限3個(gè)月以內(nèi)，沙土管保藏法：保藏期限1~10年主要適用于產(chǎn)孢子的，如芽孢桿菌、放線菌 石蠟油封藏法：保藏期限1~2年

真空冷凍干燥法：保藏期限5~10年，液氮超低溫病結(jié)法：保藏期限5~10年 第三章

一、細(xì)胞壁：根據(jù)細(xì)胞壁將原核生物分為革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌兩種。

1、革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁的特點(diǎn)：厚度大（20~80nm）和化學(xué)組分簡(jiǎn)單，一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。

革蘭氏陽性菌的機(jī)械阻攔與保護(hù)作用有肽聚糖完成。磷壁酸：是結(jié)合在革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁上的一種酸性多糖，主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。

磷壁酸為革蘭氏陽性菌所特有。對(duì)于革蘭氏陽性菌而言，抗原性由磷壁酸完成。磷壁酸的主要生理功能：1）、其磷酸分子上較多的負(fù)電荷可提高細(xì)胞周圍鎂離子的濃度進(jìn)入細(xì)胞后就可以保證細(xì)胞膜上一些需鎂離子的合成提高活性 2）儲(chǔ)藏磷元素 3）、增強(qiáng)某些致病菌如A族鏈球菌對(duì)宿主細(xì)胞的黏連、避免被白細(xì)胞吞噬以及補(bǔ)抗體的作用 4）賦予革蘭氏陽性菌以特異的表面抗原 5）可作為噬菌體的特異性吸附受體

6）調(diào)節(jié)細(xì)胞自溶素的活力，借以防止細(xì)胞自溶而死亡

2、革蘭氏陰性菌：由肽聚糖和外膜組成，外膜中的脂多糖是革蘭氏陰性菌所特有的 外壁層可分為3層：外層為脂多糖層，中層為磷脂層，內(nèi)層為脂蛋白 革蘭氏陰性菌外膜的作用：1）控制細(xì)胞透性

2）提高鎂離子濃度 3）決定細(xì)胞的抗原性

4）類脂A是類毒素的主要成分

脂多糖：是位于革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁最外層的一層較厚的類脂多糖物質(zhì)，由類脂A、核心多糖和O-特異側(cè)鏈

脂多糖的功能：1）其中類脂A是革蘭氏陰性菌致病物質(zhì)——內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ) 2）因其負(fù)電荷較強(qiáng)，有吸附鎂離子、鈣離子等陽離子以提高其在細(xì)胞表面的濃度作用 3)由于LPS結(jié)構(gòu)多變，決定了革蘭氏陰性菌細(xì)胞表面抗原決定族 4）是許多噬菌體在在細(xì)胞表面的吸附受體 5）具有控制某些物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的部分選擇性屏障功能

3、革蘭氏染色機(jī)制：通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞膜內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚，肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密，故與乙醇與丙酮作脫色處理時(shí)因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會(huì)溶出縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其任呈紫色。反之革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層的類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差，遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物的溶出，因此，通過乙醇脫色后細(xì)胞退成無色。這時(shí)，再經(jīng)沙黃等紅色染料進(jìn)行復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈現(xiàn)紅色，而革蘭氏陽性則保留紫色。

二、芽孢

芽孢：某些細(xì)胞在生長(zhǎng)發(fā)育后期，在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強(qiáng)的休眠體

芽孢的特點(diǎn)：1）芽孢內(nèi)新陳代謝幾乎停止，處于休眠狀態(tài)，但保持潛在萌發(fā)力

2）芽孢不具生殖能力，僅只是一種休眠體 3）抗逆性最強(qiáng)的生命體之一，有抗熱、抗化學(xué)藥物、抗輻射和抗靜水壓能力 4）含水量低，壁厚而致密，通透性差，不易著色，折光性強(qiáng)

5）一個(gè)孢子萌發(fā)只產(chǎn)生一個(gè)營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的細(xì)胞 芽孢的耐熱機(jī)制：芽孢的耐熱性在于芽孢衣對(duì)多價(jià)陽離子和水分的透性很差和皮層的離子強(qiáng)度很高，從而是皮層產(chǎn)生極高的滲透壓去奪取芽孢核心中的水分，其結(jié)果造成皮層的充分膨脹，而核心部分的細(xì)胞質(zhì)卻變得高度失水，因此，導(dǎo)致核心具極強(qiáng)的耐熱性。第四章微生物的營(yíng)養(yǎng)要求

一、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：能夠滿足微生物機(jī)體生長(zhǎng)、繁殖和完成各種生理?xiàng)l件所需的物質(zhì) 營(yíng)養(yǎng)：微生物獲得U和利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的過程

二、1、碳源：是在微生物生長(zhǎng)過程中為微生物提供碳素來源的物質(zhì)。為微生物提供碳元素與能量

2、氮源：為微生物提供氮元素來源，只有少數(shù)自養(yǎng)微生物能利用銨鹽、硝酸鹽同時(shí)作為氮源與能源（是構(gòu)成細(xì)胞中核酸和蛋白質(zhì)的重要元素）氮源的類型：無機(jī)氮、有機(jī)氮、氣體氮

3、無機(jī)鹽：作用：作為酶活性中心的組成部分、維持生物大分子和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、調(diào)節(jié)并維持細(xì)胞的滲透壓、控制細(xì)胞的氧化還原電位和作為某些微生物生長(zhǎng)的能源物質(zhì)。

4、生長(zhǎng)因子：通常是指那些微生物生長(zhǎng)所必需的的且需量很少，但微生物自身不能合成或合成量不足以滿足機(jī)體生長(zhǎng)需要的有機(jī)化合物

5、水：生理功能：1)起到溶劑與運(yùn)輸介質(zhì)的作用

2）參與細(xì)胞內(nèi)一系列的化學(xué)反應(yīng)

3）維持蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子穩(wěn)定的天然構(gòu)象

4）是良好的導(dǎo)熱體，調(diào)節(jié)細(xì)胞溫度 微生物的營(yíng)養(yǎng)類型分類（P84表格）

三、1、培養(yǎng)基的配制原則：1）目標(biāo)明確

2）營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)

3）物理化學(xué)條件適宜

4）原料來源的選擇

2、C多有助于次生物質(zhì)分泌，N多有助于個(gè)體生長(zhǎng)發(fā)育

3、PH：細(xì)菌：7.0~8.0

酵母菌：4.0~6.0

放線菌：8.0~9.0

霉菌：4.0~5.8

4、維持培養(yǎng)基PH的方法：1）加緩沖劑一氫和二氫磷酸鹽的混合物

2）備用堿：CaCO3、CaHCO3 3）弱酸鹽：檸檬酸鹽、乳酸鹽

4）液氨或鹽酸

5、原料來源：1）經(jīng)濟(jì)節(jié)約原則：以粗代精、以廢代好、以簡(jiǎn)代繁

2）原料來源要廣泛

3）原料藥易處理、處理成本要低

4）原料處理后廢物、廢液、廢氣要少

6、選擇和配制培養(yǎng)基的方法四種：生態(tài)模擬、查閱文獻(xiàn)、精心設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)比較

四、培養(yǎng)基的分類

1、按成分不同劃分：天然培養(yǎng)基：優(yōu)點(diǎn)為取材方便，營(yíng)養(yǎng)豐富，種了多樣，配制方便合成培養(yǎng)基：優(yōu)點(diǎn)：組分精確，重復(fù)性好確定：較昂貴，一般用于研究

2、根據(jù)物料狀態(tài)劃分：固體培養(yǎng)基：一般用于進(jìn)行微生物的分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)及菌種保藏半固體培養(yǎng)基：用于觀察微生物的運(yùn)動(dòng)特征、分類鑒定及噬菌體效價(jià)滴定液體培養(yǎng)基：用于大量培養(yǎng)微生物，研究生理代謝

3、按用途劃分：基礎(chǔ)培養(yǎng)基：用于培養(yǎng)野生型微生物和原養(yǎng)型微生物 加富培養(yǎng)基（營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基）：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制成的一類營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基作用一般為分離某種微生物而專門設(shè)計(jì)或培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求嚴(yán)謹(jǐn)?shù)漠悩游⑸?鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)可中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì) 選擇培養(yǎng)基：根據(jù)不同種類微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，有利于所需要微生物的生長(zhǎng)，有利于所需微生物的生長(zhǎng) 第五章、微生物代謝

微生物發(fā)酵過程的三個(gè)階段：脫氫（電子）、遞氫（或電子）和受氫（或電子）發(fā)酵：是指微生物細(xì)胞將有機(jī)物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某些中間產(chǎn)物，同時(shí)釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物

代謝：生命存在的基本特征，是微生物體內(nèi)所進(jìn)行的全部生化反應(yīng)的總稱。主要由分解代謝和合成代謝兩個(gè)過程組成。分解代謝：是指將大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì)，并在這個(gè)過程中產(chǎn)生能量（都是氧化反應(yīng)）合成代謝：是指細(xì)胞利用簡(jiǎn)單的小分子物質(zhì)合成復(fù)雜大分子，在這個(gè)過程要消耗能量（都是還原反應(yīng)）

代謝途徑都是有一系列連續(xù)的酶促反應(yīng)構(gòu)成的

P102~P105EMP HM ED途徑的特點(diǎn)功能以及途徑路線

根據(jù)氧化還原反應(yīng)電子受體的不同可將發(fā)酵和呼吸分為有氧和無氧呼吸兩種 P108 TCA途徑圖

TCA循環(huán)特點(diǎn)：1）氧雖然不直接參與其中反應(yīng)，但必需在有氧條件下運(yùn)行

2）每個(gè)丙酮酸產(chǎn)生15個(gè)ATP 3）位于一切分解代謝與合成代謝的樞紐地位，可為生物合成提供各種碳價(jià)原料

TCA的生理意義：1）為細(xì)胞提供能量

2）各種能源物質(zhì)徹底氧化的共同代謝途徑（對(duì)于微生物來說）3）物質(zhì)轉(zhuǎn)化樞紐

無氧呼吸：電子受體不是氧氣而是外源無機(jī)物與部分簡(jiǎn)單小分子有機(jī)物

發(fā)酵作用：沒有外源電子受體，底物具有的能量只釋放一小部分，合成少量ATP 三種磷酸化：底物水平磷酸化，高能磷酸化，氧化磷酸化

光合磷酸化的特點(diǎn)：1）光驅(qū)使下電子自菌綠素上逐出后經(jīng)類似呼吸鏈又回到菌綠素

2）產(chǎn)還原力[H]和產(chǎn)ATP分別進(jìn)行，還原力來自于H2O等無機(jī)物

3）不產(chǎn)生氧氣 合成代謝：微生物利用能量代謝所產(chǎn)生的能量、中間代謝產(chǎn)物以及從外界吸收的小分子合成復(fù)雜細(xì)胞物質(zhì)的過程

P118~P119 CO2固定路線圖

藍(lán)細(xì)菌孤單的抗氧化保護(hù)機(jī)制：1）分化出特殊的還原性異形胞

2）非異形胞藍(lán)細(xì)菌固氮酶的保護(hù)將固氮與光合進(jìn)行時(shí)間上分隔

微生物固氮反應(yīng)6要素：1）ATP的供應(yīng)

2)還原力[H]及傳遞氫載體

3）固氮酶

4）還原底物——氮?dú)?/p>

5）鎂離子

6）嚴(yán)格厭氧微環(huán)境

聯(lián)合固氮菌：指必需生活在植物根莖葉，動(dòng)物腸道等處才能進(jìn)行固氮的微生物，不形成類似根瘤的共生結(jié)構(gòu) 微生物的代謝調(diào)節(jié)主要有兩種類型：一是酶活性的調(diào)節(jié)，即調(diào)節(jié)已經(jīng)存在的酶分子的活性，是酶在化學(xué)水平的變化。另一類是酶合成的調(diào)節(jié)，即調(diào)節(jié)酶分子的合成量，是遺傳水平發(fā)生的變化 第六章

一、生長(zhǎng)曲線延滯期

特點(diǎn)：1）生長(zhǎng)速率常數(shù)為零，細(xì)胞數(shù)目不增加或增加很小

2）細(xì)胞形態(tài)變大或 增長(zhǎng)許多桿菌可長(zhǎng)成絲狀

3）合成代謝十分活躍，核糖體、酶類和ATP 的合成加速產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶

4）對(duì)外界不良條件如NaCl溶液，溫度和抗 生素等理化因素反應(yīng)敏感

出現(xiàn)原因：1）微生物接種到一個(gè)新的環(huán)境，暫缺乏足夠的能量和必需的生長(zhǎng)因子

2）“種子”老化即處于未對(duì)數(shù)期或種子未活化

3）接種時(shí)損傷

影響其長(zhǎng)短的因素與實(shí)踐意義：1）接種齡：對(duì)數(shù)期種子延滯期短，延滯期或衰亡期的種子延滯期較長(zhǎng)

2）接種量：接種量大，延滯期較短，接種量小，延滯期較長(zhǎng)

3）培養(yǎng)基成分：培養(yǎng)基成分豐富的延滯期較短，培養(yǎng)基成分與種子培養(yǎng)基一致的延滯期較短

二、生長(zhǎng)曲線指數(shù)期

特點(diǎn)：1）生長(zhǎng)速率最快，細(xì)胞呈指數(shù)增長(zhǎng)

2）生長(zhǎng)速率恒定

3）代謝旺盛，細(xì)胞組分平衡發(fā)展

4）群體的生理特性一致

影響指數(shù)期的意義：1）菌種：不同菌種代時(shí)差異極大

2）營(yíng)養(yǎng)成分：營(yíng)養(yǎng)越豐富代時(shí)越短

3）營(yíng)養(yǎng)物濃度：影響微生物的生長(zhǎng)速率和生長(zhǎng)總量

4）培養(yǎng)溫度：影響微生物的生長(zhǎng)速率和生長(zhǎng)總量

指數(shù)期的實(shí)踐意義：1）是代謝、生理研究的良好材料

2)是增殖噬菌體的最適宿主菌齡

4）革蘭氏染色是采用此期微生物

生長(zhǎng)曲線穩(wěn)定期特點(diǎn)：1）活細(xì)胞總數(shù)維持不變即新增殖的細(xì)胞數(shù)與衰亡的細(xì)胞數(shù)相等，菌體總數(shù)達(dá)到最高點(diǎn)

2）細(xì)胞生長(zhǎng)速率為零

3）細(xì)胞生理上處于衰老，代謝活力鈍化，細(xì)胞成分合成緩慢，革蘭氏染色發(fā)生變化

三、生長(zhǎng)曲線衰亡期

特點(diǎn)：細(xì)胞以指數(shù)速率死亡，有時(shí)細(xì)胞速率的降低是由于抗性細(xì)胞的積累，細(xì)胞變形退化，有的發(fā)生自溶，革蘭氏染色發(fā)生變化

影響衰亡期的因素及實(shí)踐意義：1）與菌種的遺傳特性有關(guān)：有些細(xì)菌的培養(yǎng)經(jīng)歷所有的各個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期，幾天以后死亡，有細(xì)菌培養(yǎng)基個(gè)月乃至幾年以后任然有一些貨細(xì)胞

2）與是否產(chǎn)芽孢有關(guān)：產(chǎn)芽孢的細(xì)菌更易幸存下來

3）與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和有毒物質(zhì)有關(guān)：補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)和能源，以及中和環(huán)境毒性，可以減緩死亡細(xì)胞的死亡速率，延長(zhǎng)細(xì)菌培養(yǎng)物的存貨時(shí)間

四、分批培養(yǎng)：是指將微生物置于一定容積的的培養(yǎng)基中，經(jīng)過生長(zhǎng)培養(yǎng)，最后一次收獲培養(yǎng)方式 連續(xù)培養(yǎng)：在一個(gè)恒定容積的的流動(dòng)系統(tǒng)中培養(yǎng)微生物，一方面以一定速率加入新的培養(yǎng)基，另一方面又以相同的速率流出培養(yǎng)物（菌體和代謝產(chǎn)物）

連續(xù)發(fā)酵的優(yōu)點(diǎn)：1）高效

2）產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定

3）節(jié)約了大量動(dòng)力、人力、水和蒸汽，且使水、汽、電的負(fù)荷均衡合理

連續(xù)發(fā)酵的缺點(diǎn)：1）菌種易退化

2）易污染雜菌 3）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率一般 同步生長(zhǎng)：就是指在培養(yǎng)物中所有微生物細(xì)胞都同一生長(zhǎng)階段，并都能同時(shí)分裂的生長(zhǎng)方式 同步培養(yǎng)法包括誘導(dǎo)法與選擇法

誘導(dǎo)法：是采用物理、化學(xué)一男子使微生物生長(zhǎng)到某一階段而停下來，使所有細(xì)菌都達(dá)到這個(gè)階段時(shí)再使其生長(zhǎng) 恒濁器：根據(jù)培養(yǎng)器內(nèi)微生物的生長(zhǎng)密度并借光電控制系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液流速，以取得菌體密度高，生長(zhǎng)速度恒定的微生物細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)

恒化器：與恒濁器相反，是一種設(shè)法使培養(yǎng)液流速保持不變 最高生長(zhǎng)速率條件下進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖的一種連續(xù)培養(yǎng)裝置 裝置

控制對(duì)象

培養(yǎng)基

培養(yǎng)基流速

生長(zhǎng)速率

產(chǎn)物

應(yīng)用范圍

恒濁器

菌體密度(內(nèi)控制)

無限制生長(zhǎng)因子

不恒定

最高速率

大量菌體或與菌體平行的代謝產(chǎn)物

生產(chǎn)為主

恒化器

培養(yǎng)基流速（外控制）

有限制生長(zhǎng)因子

恒定

低于最高速率

不同生長(zhǎng)速率的菌體、并使微生物始終在低于其

實(shí)驗(yàn)室為主

五、防腐：是在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下防止或抑制微生物生長(zhǎng)的一種措施，它能防止食物腐敗或防止其他物質(zhì)霉變 消毒：利用某種殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有微生物的一種措施，它可以起到防止感染或傳播的作用

滅菌：利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物的一種措施 第七章

1、病毒的特點(diǎn):1)形態(tài)及其微小，一般能通過細(xì)菌濾器必須自電鏡下才能觀察

2）沒有細(xì)胞構(gòu)造，主要成分僅為核酸與蛋白質(zhì)

3）每一種病毒致含有一種核酸

DNA和RNA 4）依靠自身的核酸進(jìn)行復(fù)制，一病毒的核酸和蛋白質(zhì)等原件實(shí)現(xiàn)裝配，實(shí)現(xiàn)繁殖

5）嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，缺乏完整的酶和產(chǎn)能系統(tǒng)，只能利用宿主細(xì)胞的現(xiàn)成的代謝系統(tǒng)合成病毒自身的核酸和蛋白質(zhì)

6）在離體條件下，能以無生命力的大分子狀態(tài)存在，并可長(zhǎng)期保持器侵染力

7）對(duì)一般抗生素不敏感，但對(duì)干擾素敏感

8）有些病毒的基因可以整合到宿主的基因中去

2、病毒與活細(xì)胞的區(qū)別：1）結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)

2）幾乎所有的毒粒中只有DNA或RNA一種類型的核酸

3）在細(xì)胞外不能增殖

3、得到一步生長(zhǎng)曲線的實(shí)驗(yàn)：二院培養(yǎng)系統(tǒng)：1）低濃度病毒宿主細(xì)胞(給幾分鐘時(shí)間侵染)2）高倍稀釋病毒與細(xì)胞的培養(yǎng)物

3）保濕培養(yǎng)

4）不同時(shí)間取樣，涂布平板，得到效價(jià)

5）以時(shí)間為橫坐標(biāo)，病毒濃度為縱坐標(biāo)繪圖

4、烈性噬菌體：感染宿主后增殖裂解宿主 溶原性噬菌體（溫和性細(xì)菌）：感染后大多數(shù)可整合到宿主基因中少數(shù)以染色體外獨(dú)立存在

5、病毒分為真病毒和亞病毒，亞病毒又分為類病毒、衛(wèi)星病毒、衛(wèi)星RNA、朊病毒 類病毒：是一種只包含RNA的病毒，只在植物中出現(xiàn)，分質(zhì)量極小，不能編碼蛋白質(zhì) 衛(wèi)星病毒：寄生于與之無關(guān)的輔助病毒的基因產(chǎn)物的病毒 衛(wèi)星RNA：是指必需依賴一些輔助病毒進(jìn)行復(fù)制的小分子單鏈RNA，他們被包藏在輔助病毒的殼體中

朊病毒：是一類能引起哺乳動(dòng)物亞急性海綿樣腦病的病原因子 第八章

P204頁Griffith轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)等3個(gè)實(shí)驗(yàn)

基因組：是指位于細(xì)菌或細(xì)胞中的所有基因 大腸桿菌基因組的特點(diǎn)：1）遺傳信息的連續(xù)性

2）功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu)

3）結(jié)構(gòu)基因的單拷貝及rRNA基因的多拷貝

4）基因組重復(fù)序列少而短

質(zhì)粒：是一種獨(dú)立于染色體外，能進(jìn)行自主復(fù)制的細(xì)胞質(zhì)遺傳因子，主要存在于各種微生物中

轉(zhuǎn)座子：是位于染色體或質(zhì)粒上的一種能改變自身位置的DNA序列，廣泛分布于原核和真核細(xì)胞中

質(zhì)粒的主要類型：致育因子、抗性因子、Col質(zhì)粒、毒性質(zhì)粒、代謝質(zhì)粒、隱秘質(zhì)粒

致育因子：又稱F質(zhì)粒，其大小約100kb，這是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象（結(jié)合作用）有關(guān)的質(zhì)粒

抗性因子：是另一類普遍而重要的質(zhì)粒，主要包括抗藥性和抗重金屬兩大類，簡(jiǎn)稱R質(zhì)粒 Col質(zhì)粒：該質(zhì)粒含有編碼大腸菌素的基因，大腸菌素是一種細(xì)菌蛋白，只殺死近緣且不含Col質(zhì)粒的菌株，而宿主不受其產(chǎn)生的細(xì)菌素的影響

毒性質(zhì)粒：致病菌中攜帶的能引起致病性的質(zhì)粒，這些質(zhì)粒具有編碼毒素的基因 代謝質(zhì)粒：攜帶有能降解某些基質(zhì)的酶的基因的質(zhì)粒

隱秘質(zhì)粒：不顯示任何表型效應(yīng)，它們的存在只有通過物理方法檢測(cè)出來 原核生物中對(duì)的轉(zhuǎn)座因子有3種類型：插入順序（IS）、轉(zhuǎn)座子（Tn）、病毒（Mu）轉(zhuǎn)座的遺傳學(xué)效應(yīng)：插入突變、產(chǎn)生染色體畸變、基因的移動(dòng)和重排

基因突變：一個(gè)基因內(nèi)部遺傳結(jié)構(gòu)或DNA序列的任何改變包括一對(duì)或幾對(duì)堿基的缺失、插入或置換，而導(dǎo)致的遺傳變化

堿基變化對(duì)遺傳信息改變的四種類型：同義突變，錯(cuò)義突變，無義突變，移碼突變 同義突變：是指某個(gè)堿基的變化沒有改變產(chǎn)物氨基酸序列的密碼子變化

錯(cuò)義突變：是指堿基序列的改變引起了產(chǎn)物氨基酸的改變（可能為致死突變）無義突變：是指某個(gè)堿基的改變，使代表某種氨基酸的密碼子變?yōu)榈鞍踪|(zhì)的合成的終止密碼子，蛋白質(zhì)的合成提前終止，產(chǎn)生短截的蛋白質(zhì)

移碼突變：由于DNA序列中發(fā)生1~2個(gè)核苷酸的缺失或插入，使翻譯的閱讀框發(fā)生改變，從而導(dǎo)致改變位置以后的氨基酸序列的完全變化（一般為致死突變）

表型變化的突變型：營(yíng)養(yǎng)缺陷型，抗藥性突變型，條件致死突變型，形態(tài)突變型 營(yíng)養(yǎng)缺陷型：缺乏合成其生存所必需的營(yíng)養(yǎng)物的突變型，只有從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營(yíng)養(yǎng)或前體物才能生長(zhǎng) 影印平板P218 抗藥性突變型：是由于基因突變使菌株對(duì)某種或某幾種藥物，特別是抗生素產(chǎn)生抗性的一種突變型

條件致死突變型：是指在某一條件下具有致死效應(yīng)，而在另一條件下沒有致死效應(yīng)的突變型 形態(tài)突變型：是指造成形態(tài)改變的突變型（包括菌落形態(tài)、顏色一件噬菌斑形態(tài)）

自發(fā)突變的緣由：1）NDA復(fù)制過程產(chǎn)生的錯(cuò)誤

2）堿基互變異構(gòu)體的相互轉(zhuǎn)變

3）轉(zhuǎn)座子的隨機(jī)插入基因

自發(fā)突變的特性：1）非對(duì)應(yīng)性

2）稀有性

3）規(guī)律性

4）獨(dú)立性

5）遺傳和回復(fù)

6）可誘變性

誘發(fā)突變：堿基類似物、插入染料、直接與DNA其化學(xué)反應(yīng)的誘變劑、輻射和熱、生物誘變因子

DNA損傷修復(fù)：光復(fù)活作用、切除修復(fù)、重組修復(fù)、SOS修復(fù) 光復(fù)活：由phr基因編碼的光解酶進(jìn)行

切除修復(fù)：又稱暗修復(fù)，該修復(fù)系統(tǒng)除了堿基錯(cuò)誤配對(duì)和單核苷酸插入不能修復(fù)外，幾乎其他DNA損傷均可修復(fù)，是細(xì)胞內(nèi)主要修復(fù)系統(tǒng)

重組修復(fù)：是一種越過損傷而進(jìn)行的修復(fù)，這種修復(fù)不將損傷堿基除去

SOS修復(fù)：是DNA分子受到較大范圍的重大損傷時(shí)誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種應(yīng)急反應(yīng) P226~227 高頻重組菌等

轉(zhuǎn)導(dǎo)：是由病毒介導(dǎo)的細(xì)胞間進(jìn)行遺傳交換的一種方式

供體DNA進(jìn)入受體的命運(yùn)：1）發(fā)生穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子

2）流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)：即不被降解，又不被整合，也不被復(fù)制

3）外源DNA被降解，轉(zhuǎn)導(dǎo)失敗

遺傳轉(zhuǎn)化：是指同源或異源的游離DNA分子被自然或人工感受態(tài)細(xì)胞攝取，并得到表達(dá)的水平方向的基因轉(zhuǎn)移過程

4個(gè)影響供體DNA與受體細(xì)胞間的最初相互作用：1）轉(zhuǎn)化片段的大小

2）形態(tài)：雙鏈DNA 3）濃度：在在臨界值出現(xiàn)之前成正比

4）生理狀態(tài)：感受器——?jiǎng)偼Ｖ笵NA合成 微生物育種：誘變育種、代謝育種、體內(nèi)基因組育種 代謝育種：改變代謝途徑、擴(kuò)展代謝途徑、構(gòu)建新的代謝途徑 體內(nèi)基因組育種：原生質(zhì)體融合，雜交育種

融合子的判別：1）親本遺傳標(biāo)記的互補(bǔ)的2）親本滅活后性狀的恢復(fù)

3）具有雙親本的熒光標(biāo)記 第九章

順式作用元件：位于基因的旁側(cè)，可以調(diào)控影響基因表達(dá)的核酸序列。其本身并不編碼蛋白質(zhì)

反式作用因子：通常為蛋白質(zhì)或RNA，其特征是可以合成并擴(kuò)散到目標(biāo)場(chǎng)所發(fā)揮作用 正調(diào)控：控制因子通過與啟動(dòng)子原件結(jié)合來激活基因的表達(dá) 負(fù)調(diào)控：抑制物與操縱基因結(jié)合起來阻止基因表達(dá) P248 操縱子的結(jié)構(gòu)

P249圖

P250 圖

啟動(dòng)子：是RNA聚合酶和CAP的結(jié)合位點(diǎn)，控制著轉(zhuǎn)錄的起始，一個(gè)啟動(dòng)子可以啟動(dòng)多個(gè)基因的表達(dá)

操縱基因：DNA上的一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，阻抑物能與之結(jié)合抑制相鄰啟動(dòng)子的起始轉(zhuǎn)錄，操縱基因不表達(dá)任何東西 終止子：控制轉(zhuǎn)錄結(jié)束

轉(zhuǎn)錄因子：轉(zhuǎn)錄起始過程中RNA聚合酶所需要的輔助因子

轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控:1）DNA的結(jié)構(gòu)

2）RNA聚合酶的功能

3）蛋白質(zhì)因子及其他小分子配基的相互作用

第三篇：微生物總結(jié)

微生物：一類分布廣泛、體積微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼直接看不到，微小生物的總稱。

細(xì)菌L型：細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制，這種細(xì)胞壁受損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活，稱細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型或L型。

質(zhì)粒：是染色體外的遺傳物質(zhì)，控制某些特定的生物學(xué)性狀，不是細(xì)菌生長(zhǎng)所必需。

莢膜：是細(xì)菌合成分泌的包繞于細(xì)胞壁外的一層粘液性物質(zhì)。界限清晰性質(zhì)穩(wěn)定結(jié)合牢固。培養(yǎng)基：由人工方法經(jīng)滅菌后制成，專供微生物生長(zhǎng)使用的混合營(yíng)養(yǎng)制品。一般pH為7.2-7.6。

兼性厭氧菌：兼有需氧呼吸和無氧發(fā)酵兩種功能，無論在有氧或無氧環(huán)境中都能生長(zhǎng)，但以有氧時(shí)生長(zhǎng)較好，大多數(shù)病原菌屬于此。菌落：在固體培養(yǎng)基中，經(jīng)過十八到24小時(shí)培養(yǎng)后，單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細(xì)紅細(xì)胞吸附：流感病毒等感染細(xì)胞后，由于細(xì)胞膜上出現(xiàn)了血凝素（HA），具有吸附脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的能力，這一現(xiàn)象稱為紅細(xì)胞吸附。抗毒素：通常是用細(xì)菌類毒素給馬多次注射后，取其免疫血清提取免疫球蛋白精制而成抗生素：微生物來源的抗菌藥物，以及人工化學(xué)修飾或半合成的衍生物

無菌：就是指沒有活菌的意思。

1：細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及功能？答：化學(xué)組成：G+①肽聚糖：聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋②磷壁酸：粘附功能，與致病性有關(guān)；抗原性很強(qiáng)③其他成分：如A群鏈球菌的M蛋白G-①肽聚糖：聚糖骨架；四肽側(cè)鏈②外膜：脂蛋白；脂質(zhì)雙層；脂多糖：脂類A（毒性成分，無種屬特異性）；核心多糖；特異多糖。功能：①維持細(xì)菌固有形態(tài)②保護(hù)細(xì)菌抵抗低滲環(huán)境③物質(zhì)交換④決定菌體的抗原性。2：G-菌與G+菌細(xì)胞壁的異同點(diǎn)及其意義？答：兼性厭氧菌、專性厭氧菌。

11：與醫(yī)學(xué)有關(guān)的合成代謝產(chǎn)物？答：① 毒素與侵襲性酶：外毒素和內(nèi)毒素②熱原質(zhì)：G-菌細(xì)胞壁的脂多糖，耐高溫，250℃干烤破壞。③抗生素：某些微生物代謝中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死其他微生物或腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)。④維生素：如VitK、B族維生素。⑤色素：脂溶性和水溶性色素。⑥細(xì)菌素：無治療應(yīng)用價(jià)值。13：病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成。答：多數(shù)病毒呈球形或近似球形，少數(shù)呈桿狀（植物病毒）、絲狀（初分離的流感病毒）、彈狀（狂犬病毒）、磚塊狀（如痘類病毒）和蝌蚪狀（噬菌體）。病毒的核心和衣殼，二者構(gòu)成核衣殼，病毒包膜和其他輔助結(jié)構(gòu)。化學(xué)組成：核心：主要為核酸，化學(xué)組成為DNA或RNA。衣殼：包繞在核心外面的一層蛋白質(zhì)，由許多蛋白質(zhì)亞單位（殼粒）組成。包膜：化學(xué)組成： 脂質(zhì)蛋白質(zhì)糖類。

答：?jiǎn)渭?xì)胞真菌呈圓形或卵圓形。多細(xì)胞真菌

結(jié)構(gòu)：菌絲和孢子，菌絲：分為營(yíng)養(yǎng)菌絲、氣中菌絲、生殖菌絲；孢子：是真菌的繁殖體。結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁外成分；細(xì)胞壁；隔膜；其他結(jié)構(gòu)。

25：真菌培養(yǎng)特性。答：最常用的培養(yǎng):沙保弱培養(yǎng)基。溫度:多數(shù)都在22 ~ 28oC，但深部感染真菌最適溫度為37oC，pH4.0 ~ 6.0病原菌通常生長(zhǎng)緩慢，1~4周。

26：真菌繁殖方式。答：①無性生殖：①由菌絲斷裂形成新個(gè)體②細(xì)胞直接分裂產(chǎn)生子細(xì)胞③產(chǎn)生芽生孢子④產(chǎn)生孢子囊孢子和分生孢子②有性生殖：指經(jīng)過兩性細(xì)胞配合產(chǎn)生新個(gè)體的繁殖方式。

27：真菌抵抗力答：①對(duì)干燥、陽光、紫外線及常用消毒劑有強(qiáng)抵抗力②不耐熱，菌絲與孢子60℃ 1小時(shí)均可殺死③2﹪石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞、2.5%碘酊敏感④抗真菌藥物：菌集團(tuán)。

純培養(yǎng)基：挑取一個(gè)菌落，移種到另一培養(yǎng)基中，生長(zhǎng)出來的細(xì)菌均為純種。

毒性噬菌體：在宿主菌細(xì)胞內(nèi)噬菌體增殖產(chǎn)生子代噬菌體，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。溫和噬菌體：噬菌體基因與宿主菌染色體整合，成為前噬菌體，噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制而復(fù)制，并隨細(xì)菌的分裂而傳到子代細(xì)菌的基因組中，變成溶原性細(xì)菌，形成溶原性周期。前噬菌體：整合在細(xì)菌染色體上的噬菌體基因。轉(zhuǎn)座子：細(xì)菌基因組中的一段DNA序列，可以在染色體、質(zhì)?；蚴删w之間自行移動(dòng)的遺傳成分，伴隨轉(zhuǎn)座子的移動(dòng)，會(huì)出現(xiàn)插入突變?；蜣D(zhuǎn)移：遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入受體菌的過程為基因轉(zhuǎn)移。

重組：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組，重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。轉(zhuǎn)化：細(xì)菌通過性菌毛相互連接溝通，將質(zhì)?；蛉旧w等遺傳物質(zhì)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌的過程。

接合：是受體菌直接攝取供體菌DNA片段，從而獲得新的遺傳性狀的過程。

轉(zhuǎn)導(dǎo)：以噬菌體為載體將供菌的DNA片段轉(zhuǎn)移到受菌體內(nèi)使受菌獲得供菌的部分遺傳性狀。溶原性轉(zhuǎn)換：某些前噬菌體可導(dǎo)致細(xì)菌基因型和性狀發(fā)生改變，例如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素的機(jī)理，溫和噬菌體感染細(xì)菌時(shí)，其基因可整合于宿主菌染色體中，使宿主菌獲得噬菌體基因賦予的新的性狀，稱溶原性轉(zhuǎn)換。原生質(zhì)體融合：將兩種不同的細(xì)菌經(jīng)溶菌酶或青霉素等處理，失去細(xì)胞壁成為原生質(zhì)體后進(jìn)行融合的過程。融合后的染色體之間發(fā)生重組。病毒的自我復(fù)制：以病毒核酸為模板，經(jīng)過復(fù)雜的生化過程，復(fù)制子代病毒的核酸并通過轉(zhuǎn)錄翻譯產(chǎn)生病毒蛋白質(zhì)，裝配成熟后釋放到細(xì)胞外，這種增殖方式稱為病毒的自我復(fù)制。頓挫感染：被病毒侵入的細(xì)胞如不能為病毒增殖提供必需成分，則病毒不能合成本身成分，或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細(xì)胞與容納細(xì)胞

缺陷病毒：病毒基因組不完整或某一基因位點(diǎn)改變，不能正常增殖，不能復(fù)制出完整有感染性的病毒顆粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒?完成復(fù)制

干擾現(xiàn)象：當(dāng)兩種病毒感染同一宿主細(xì)胞時(shí)，發(fā)生一種病毒的增殖抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象。某些病毒感染細(xì)胞時(shí)不出現(xiàn)CPE或其他易于測(cè)出的變化（如HAd），但能干擾其后感染的另一病毒的增殖，從而阻抑后者所特有的CPE 芽孢：某些細(xì)菌在一定環(huán)境條件下，胞質(zhì)脫水濃縮，在菌體內(nèi)部形成的一個(gè)圓形或卵圓形小體。

正常菌群：正常人的體表和與外界相通的眼結(jié)膜，口腔、鼻腔、腸道、泌尿生殖道等腔道粘膜中的不同種類和數(shù)量及對(duì)人體無害而有益的微生物。正常微生物群通稱為正常菌群

細(xì)菌群體：細(xì)菌附著在有生命或無生命的材料表面后，由細(xì)菌及其所分泌的胞外多聚物共同組成的呈膜狀的細(xì)菌群體。機(jī)會(huì)性感染：由正常菌群在機(jī)體免疫功能低下、寄居部位改變、菌群失調(diào)等特定條件下引起的感染。

毒力：致病性的強(qiáng)弱程度。

侵襲素：某些細(xì)菌的基因編碼一些具有侵襲功能的蛋白多肽，促進(jìn)該病原菌向鄰近組織擴(kuò)散甚至介導(dǎo)進(jìn)入鄰近黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)。

包涵體：細(xì)胞漿或細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)光鏡下可見的斑塊狀結(jié)構(gòu)

G+ 菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,五肽交聯(lián)橋,三維立體②磷壁酸:重要表面抗原，與粘附致病有關(guān)，加強(qiáng)穩(wěn)定細(xì)胞壁G－菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽側(cè)鏈組成二維結(jié)構(gòu), ②外膜（脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成）功能:屏障結(jié)構(gòu)LPS是G－菌的內(nèi)毒素。細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)異同:G+菌/G－菌--強(qiáng)度:較堅(jiān)韌/較疏松--厚度:厚20-80nm/薄10-15nm--肽聚糖層數(shù):多可達(dá)50層/少，1-2層--肽聚糖結(jié)構(gòu):聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,五肽交聯(lián)橋,三維立體/聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,二維平面--脂類含量/少/多--磷壁酸:有/無--外膜:無/有,由脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成3：細(xì)菌L型，特殊結(jié)構(gòu)種類、化學(xué)組成、抗原性及意義？答：定義：細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制，這種細(xì)胞壁受損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活，稱細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型或L型。種類：G+菌細(xì)胞壁缺失后，僅有胞膜，稱原生質(zhì)體，G--菌肽聚糖層受損，尚有外膜，稱原生質(zhì)球?？乖约耙饬x：高度多形性，大小不一；大多染成G－；高滲低瓊脂含血清培養(yǎng)基—油煎蛋樣菌落；去除誘因后，有些可回復(fù)為原菌；某些L型仍有致病性,引起慢性感染。作用于胞壁的抗菌性藥對(duì)L型感染治療無效

4：細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)？答：①莢膜：多糖或多肽的多聚體。功能a抗吞噬b黏附作用c抗有害物質(zhì)的損傷d有抗原性，用于細(xì)菌的鑒定和分型②鞭毛：蛋白質(zhì)，由基礎(chǔ)小體絲狀體鉤狀體組成，高度抗原性。功能a是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官b某些細(xì)菌的鞭毛與致病性有關(guān)c根據(jù)鞭毛的動(dòng)力和鞭毛的抗原性可用以細(xì)菌的鑒別和分類③菌毛：由亞單位菌毛蛋白構(gòu)成。功能a黏附作用b傳遞遺傳物質(zhì)④芽孢：生產(chǎn)芽孢的細(xì)菌都是革陽菌。功能：a增強(qiáng)抵抗力b不直接致病c鑒定。

5：細(xì)菌的遺傳物質(zhì)？答：細(xì)菌染色體，質(zhì)粒，噬菌體：

6：基因轉(zhuǎn)移與重組方式的種類及定義？答：定義：基因轉(zhuǎn)移：遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入受體菌的過程為基因轉(zhuǎn)移。重組：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組，重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。分類：轉(zhuǎn)化,接合,轉(zhuǎn)導(dǎo),融合,轉(zhuǎn)換.【表格】類型：基因來源/轉(zhuǎn)移方式--轉(zhuǎn)化：供菌游離的DNA片段/直接攝入--接合：供菌質(zhì)粒DNA/ 性菌毛--轉(zhuǎn)導(dǎo)：供菌任意DNA或噬菌體與供菌特定DNA/噬菌體--融合：兩菌原生質(zhì)體的DNA/融合--轉(zhuǎn)換：溫和噬菌體/吸附穿入

7：噬菌體及其相關(guān)概念。答：1）毒性噬菌體：在宿主菌細(xì)胞內(nèi)噬菌體增殖產(chǎn)生子代噬菌體，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。2）溫和噬菌體：噬菌體基因與宿主菌染色體整合，成為前噬菌體，噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制而復(fù)制，并隨細(xì)菌的分裂而傳到子代細(xì)菌的基因組中，變成溶原性細(xì)菌，形成溶原性周期。

8：細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件？答:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)/酸堿度 多數(shù)病原菌最適pH為7.2~7.6/溫度 多數(shù)病原菌生長(zhǎng)最適溫度為37℃/氣體 據(jù)代謝時(shí)對(duì)分子氧的需要與否，專性需氧菌、微需氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌/滲透壓。

9：細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖？答：生長(zhǎng)曲線：一定數(shù)量的細(xì)菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中，連續(xù)定時(shí)取樣測(cè)定活菌數(shù)量，以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，以活菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)作圖，得到的一條曲線。遲緩期：適應(yīng)階段。對(duì)數(shù)期：對(duì)抗生素敏感，細(xì)菌鑒定選此期。穩(wěn)定期：代謝產(chǎn)物形成（如外毒素、抗生素、芽胞等）。衰亡期：菌體細(xì)胞呈現(xiàn)多種形態(tài)。

10：按細(xì)菌對(duì)氧需要的分類？答：據(jù)代謝時(shí)對(duì)分子氧的需要與否，專性需氧菌、微需氧菌、14：雙鏈DNA病毒的復(fù)制周期？答：vDNA（RNA聚合酶）→早期mRNA（翻譯）→早期蛋白（酶）→ vDNA（酶）子代DNA →? mRNA?→結(jié)構(gòu)蛋白.→子代DNA+結(jié)構(gòu)蛋白→子代病毒。簡(jiǎn)要過程：吸附，穿入，脫殼，生物合成，組裝、成熟與釋放。

15：頓挫病毒，缺陷病毒的概念？答：頓挫病毒：被病毒侵入的細(xì)胞如不能為病毒增殖提供必需成分，則病毒不能合成本身成分，或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細(xì)胞與容納細(xì)胞。缺陷病毒：病毒基因組不完整或某一基因位點(diǎn)改變，不能正常增殖，不能復(fù)制出完整有感染性的病毒顆粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒=完成復(fù)制 16：細(xì)菌的感染與致病。答：感染：在一定條件下，微生物與機(jī)體相互作用并導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生不同程度的病理過程?！?/p>

17：細(xì)菌的毒力比較，外毒素與內(nèi)毒素生物學(xué)特性。答：【表格】種類：內(nèi)毒素★外毒素。來源：G-菌★G+菌部分G-菌。編碼基因：染色體基因★質(zhì)?；蚯笆删w或染色體基因。存在部位：細(xì)胞壁成分、細(xì)菌裂解后釋出★活菌分泌或細(xì)菌溶解后散出。化學(xué)成分：脂多糖★蛋白質(zhì)。穩(wěn)定性：好(160℃2~4h才破壞）★差（60~80 ℃30m可破壞）。毒性作用：弱、各種內(nèi)毒素作用大致相同★強(qiáng)、對(duì)機(jī)體組織器官有選擇性?？乖裕喝?，甲醛處理后不能形成類毒素★強(qiáng)，能刺激機(jī)體形成抗毒素，經(jīng)甲醛脫毒后能形成類毒素。

18：細(xì)菌感染的類型答：①不感染②隱性感染③潛伏感染④顯性感染：急慢性感染；局部、全身感染⑤帶菌狀態(tài)。

19：病毒感染類型。答：①隱性感染②顯性感染：急性病毒感染：潛伏期短，發(fā)病急，數(shù)日或數(shù)周回復(fù)，病原消滅型感染。持續(xù)性病毒感染：慢性病毒感染；潛伏性病毒感染；慢發(fā)病毒感染。

20：細(xì)菌的致病機(jī)制。答：細(xì)菌的致病性強(qiáng)弱取決于毒力，細(xì)菌的毒力因子：①侵襲力：致病菌突破宿主生理屏障，進(jìn)入機(jī)體并在體內(nèi)定植、繁殖和擴(kuò)散的能力包括黏附素、莢膜和微莢膜、侵襲性物質(zhì)②毒素：細(xì)菌產(chǎn)生的損傷宿主引起生理功能紊亂的毒性物質(zhì)，包括內(nèi)毒素和外毒素。

21：正常菌群的生理作用。答：①生物拮抗：競(jìng)爭(zhēng)粘附（占位性保護(hù)）作用；產(chǎn)生有害代謝物質(zhì)；營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)②營(yíng)養(yǎng)作用③免疫作用④抑癌作用⑤抗衰老作用。

22：病毒分離鑒定方法及病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中的增殖的指標(biāo)。答：病毒的分離：①動(dòng)物接種②雞胚培養(yǎng)；流感病毒初次分離接種于羊膜腔；流感病毒的再培養(yǎng)接種于尿囊腔③組織培養(yǎng)④細(xì)胞培養(yǎng) — 病毒分離鑒定中最常用的方法單層細(xì)胞培養(yǎng)；原代細(xì)胞培養(yǎng)；二倍體細(xì)胞培養(yǎng)；傳代細(xì)胞培養(yǎng)。指標(biāo)：1）細(xì)胞的變化①細(xì)胞病變效應(yīng)：有些病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖時(shí)引起的特有的細(xì)胞病變，如細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落②多核巨細(xì)胞形成：有些病毒如麻疹病毒、巨細(xì)胞病毒等作用于細(xì)胞膜，使鄰近的細(xì)胞融合，形成多核巨細(xì)胞③胞質(zhì)或核內(nèi)包涵體的形成狂犬病病毒、巨細(xì)胞病毒。2）紅細(xì)胞吸附流感病毒等感染細(xì)胞后，由于細(xì)胞膜上出現(xiàn)了血凝素，具有吸附脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的能力，這一現(xiàn)象稱為紅細(xì)胞吸附。常用來鑒定具有血凝素的黏病毒或副黏病毒的增殖3）.紅細(xì)胞凝集檢測(cè)含血凝素病毒的方法4）干擾現(xiàn)象5）空斑形成試驗(yàn)。

23：病毒成份的檢測(cè)（抗原、核酸檢測(cè)）答：1.病毒抗原的檢測(cè)2.病毒核酸的檢測(cè)

24：真菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)（單細(xì)胞和多細(xì)胞真菌）。

灰黃霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑；對(duì)抗生素不敏感。

28：抗菌藥物的種類與作用機(jī)制。答：殺菌藥和抑菌藥。機(jī)制：①抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成②抑制細(xì)菌

細(xì)胞膜功③抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成④抑制細(xì)菌核酸合成。29：細(xì)菌耐藥的機(jī)制。答：產(chǎn)生鈍化酶；細(xì)胞通透性的改變；靶位結(jié)構(gòu)的改變；建立代謝旁路；代謝酶分子的改變

30：醫(yī)院感染的定義。答：由醫(yī)院的病原生物或其毒素導(dǎo)致的局部或全身感染性疾病。

31：細(xì)菌分離培養(yǎng)和鑒定、生化試驗(yàn)、血清學(xué)試驗(yàn)？答：細(xì)菌分離培養(yǎng)和鑒定：原則上應(yīng)對(duì)所有送檢標(biāo)本做分離培養(yǎng)，以便獲得單個(gè)菌落后進(jìn)行純培養(yǎng)，從而對(duì)細(xì)菌做進(jìn)一步的生物學(xué)、免疫學(xué)、致病性或細(xì)菌的藥物敏感性等方面的檢查，最終獲得確切的報(bào)告。生化試驗(yàn)：得到細(xì)菌的純培養(yǎng)物后，用糖發(fā)酵試驗(yàn)，吲哚試驗(yàn)，硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)等對(duì)細(xì)菌的酶系統(tǒng)和其代謝產(chǎn)物的檢查，是鑒別細(xì)菌的重要方法之一。血清學(xué)實(shí)驗(yàn)：利用含已知的特異性抗體的免疫血清，對(duì)細(xì)菌進(jìn)行群和型的鑒別。

微生物種類名稱★生物學(xué)性狀★致病物質(zhì)、致病機(jī)理及所致疾病

破傷風(fēng)梭菌：菌體細(xì)長(zhǎng)，芽胞正圓比菌體粗，位于菌體頂端菌體鼓槌狀★不發(fā)酵糖類，不分解蛋白質(zhì)。條件：局部傷口需形成厭氧微環(huán)境，傷口窄而深，有泥土或異物污染，大面積創(chuàng)傷，壞死組織多，局部組織缺血，同時(shí)有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染的傷口。防治原則：特異性預(yù)防：注射破傷風(fēng)類毒素主動(dòng)免疫；迅速對(duì)傷口清創(chuàng)擴(kuò)創(chuàng)，防止形成厭氧微環(huán)境；緊急預(yù)防：TAT（精制破傷風(fēng)抗毒素）；治療： 早期足量使用TAT，抗生素。產(chǎn)氣莢膜梭菌：G+粗大桿菌，芽胞位于次極端，橢圓形，直徑小于菌體形成明顯莢膜★血平板：雙層溶血環(huán)，代謝十分活躍，牛奶培養(yǎng)基：“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象。增加血管通透性，組織壞死，氣性壞疽，食物中毒，壞死性腸炎。

肉毒梭菌：G+粗短桿菌，芽胞位于次極端，橢圓形，菌體呈網(wǎng)球拍狀，嚴(yán)格厭氧，分型多，生化反應(yīng)復(fù)雜★肉毒毒素，抑制乙酰膽堿釋放，引起運(yùn)動(dòng)神經(jīng)末梢失調(diào)→肌肉麻痹；食物中毒，嬰兒肉毒中毒。

支原體：菌落油煎蛋型，高度多形態(tài)型，細(xì)胞膜含高度固醇，無細(xì)胞壁，對(duì)青霉素有抵抗作用★支原體肺炎，病變?yōu)殚g質(zhì)性肺炎，可合并支氣管肺炎。稱為原發(fā)性非典型性肺炎。不規(guī)則發(fā)熱，刺激性咳嗽，頭痛。嬰幼兒病情嚴(yán)重，發(fā)病急，病程長(zhǎng)，以呼吸困難為主。有些合并其他系統(tǒng)病變，如循環(huán)系統(tǒng)等。飛沫傳播。立克次體：是一類體積微小，絕大多數(shù)為自身代謝不完善，嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的原核細(xì)胞型微生物★流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、恙蟲病、Q熱

衣原體：嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，有獨(dú)特發(fā)育周期，能通過細(xì)菌濾器，原核細(xì)胞型微生物★ 沙眼:感染眼結(jié)膜上皮細(xì)胞→增殖，包涵體→局部炎癥→早期流淚、有粘液膿性分泌物、結(jié)膜充血及濾泡增生→后期結(jié)膜瘢痕、眼瞼內(nèi)翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜損害→影響視力或致盲包涵體結(jié)膜炎、泌尿生殖道感染、沙眼衣原體肺炎、性病淋巴肉芽腫

螺旋體：是一類細(xì)長(zhǎng)、柔軟、彎曲、運(yùn)動(dòng)活潑的原核細(xì)胞型微生物基本結(jié)構(gòu)及生物學(xué)形狀與細(xì)菌相似★梅毒，人是唯一傳染源，致病物質(zhì)為莢膜樣物質(zhì)，透明質(zhì)酸酶；后天通過性接觸傳播或者先天經(jīng)過母體傳播。

第四篇：口腔微生物總結(jié)

1.口腔生態(tài)系:是指口輕微生物與口腔環(huán)境所組成的微小生態(tài)系統(tǒng),包括生態(tài)區(qū)、微生物、生態(tài)因子等因素。2.生態(tài)區(qū)：是生態(tài)系統(tǒng)的空間層次，是生物體生存的環(huán)境區(qū)。（生態(tài)區(qū)→生境→生態(tài)點(diǎn)→生態(tài)位）3.口腔生態(tài)學(xué)：是研究口腔組織器官與口腔微生物群以及微生物群之間的相互關(guān)系的一門學(xué)科，它闡明口腔組織器官與微生物群之間的相互作用的生理平衡態(tài)和病理失調(diào)態(tài)的機(jī)制，提出維護(hù)口腔生態(tài)平衡的和防止失調(diào)的措施和辦法。

4.口腔正常微生物：是指口腔內(nèi)在進(jìn)化過程中自然選擇的與宿主有明顯共生關(guān)系的微生物。包括細(xì)菌、真菌、支原體、原蟲和病毒。在正常生理狀態(tài)下口腔正常微生物是有益的，不致病。生態(tài)環(huán)境的改變可能使正常微生物定位轉(zhuǎn)換變成致病菌?？谇徽Ｎ⑸锏亩ㄐ?、定量、定位可以作為人體生理功能的檢測(cè)指標(biāo)。有益作用：保護(hù)性生物屏障；合成維生素；拮抗有害菌群；刺激宿主免疫。5.口腔微生物之間的關(guān)系：相互凝集作用；相互營(yíng)養(yǎng)關(guān)系；競(jìng)爭(zhēng)與拮抗；通訊與遺傳多樣性。6.影響口腔生態(tài)系的因素：1.宿主因素：宿主生理改變（年齡增長(zhǎng)、口腔衛(wèi)生、食物等）和宿主病理改變（口腔疾?。?微生物因素：口腔微生物種類和數(shù)量的變化。3免疫因子：免疫缺陷或者口腔感染。4其他作用：抗生素、女性性激素和口干癥等。

7.QS（Quorum sensing）：是細(xì)菌響應(yīng)細(xì)胞密度而調(diào)節(jié)基因表達(dá)的過程。在此過程中細(xì)菌產(chǎn)生并釋放一種稱作自誘導(dǎo)子（autoinducers，AI）的化學(xué)信號(hào)分子，當(dāng)其達(dá)到一定閾值時(shí)便可調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達(dá)。革蘭氏陰性細(xì)菌和革蘭氏陽性細(xì)菌通過QS回路調(diào)節(jié)多種生理活性。

8.口腔微生物種群：

1細(xì)菌：兼性厭氧革蘭氏陽性菌：葡萄球菌（金黃色葡萄球菌）、鏈球菌（變異鏈球菌、血鏈球菌）、腸球菌、口腔球菌、顆粒鏈球菌

專性厭氧革蘭氏陽性菌：消化鏈球菌（厭氧/微小消化鏈球菌）

革蘭氏陽性無芽孢厭氧桿菌：放線菌（粘性放線菌）、真桿菌、丙酸桿菌、雙歧桿菌、乳桿菌。

兼性厭氧革蘭氏陰性桿菌：嗜血菌、艾肯菌、彎曲菌、金氏菌、二氧化碳嗜纖維菌

革蘭氏陰性無芽孢厭氧桿菌：坦納菌、卟啉單胞菌、梭桿菌。

革蘭氏陰性：厭氧：韋榮菌；需氧：奈瑟球菌

芽孢桿菌：厭氧：梭菌屬；需氧：

螺旋體：密螺旋體

2其他口腔微生物：真菌：假絲酵母（白假絲酵母菌）；原蟲：牙齦阿米巴原蟲；支原體：唾液支原體；病毒：腮腺病毒、單純皰疹病毒。9.牙菌斑生物膜：

定義：牙面上或牙周袋內(nèi)的多種對(duì)氧敏感性不同的菌從構(gòu)成的生態(tài)系。細(xì)菌在其中生長(zhǎng)、繁殖和衰亡。其中細(xì)菌的代謝活動(dòng)影響著細(xì)菌與宿主的生態(tài)平衡，一旦平衡被打破，細(xì)菌可能對(duì)宿主產(chǎn)生破壞。結(jié)構(gòu)：基底層（靠近牙面的無細(xì)胞均質(zhì)結(jié)構(gòu)、獲得性膜）、中間層（主體部分，柵欄狀結(jié)構(gòu)，絲狀菌、球菌和桿菌相互黏附構(gòu)成）和表層（谷穗狀結(jié)構(gòu)，絲狀菌為中心，球菌黏附其上）。

組成：不同位置牙菌斑的細(xì)菌種類差異較大，致病性和非治病性牙菌斑的細(xì)菌種類差別不大，細(xì)菌比例不同。影響因素：微生物種類；唾液；食物等

分類：部位：齦上菌斑（牙頸部齦緣以上，多為革蘭氏陽性球菌和桿菌、絲狀菌，分為溝裂菌斑和光滑面菌斑）和齦下菌斑（齦緣以下，齦溝和牙周袋內(nèi)，多為革蘭氏陰性厭氧菌，分為附著性齦下菌斑和非附著性齦下菌斑）

10.獲得性膜：是指由唾液糖蛋白選擇性黏附在牙齒表面形成，是牙菌斑生物膜的基底層。

結(jié)構(gòu)：表面下層（牙釉質(zhì)表面之下，鋸齒形，深入牙釉質(zhì)因脫鈣形成的縫隙或自然小孔內(nèi)）、表面層（牙釉質(zhì)表面，均質(zhì)，薄而透明）、表面上層（牙菌斑生物膜下，較厚，有時(shí)發(fā)生礦化，可能是唾液蛋白、細(xì)胞分泌物或退變的表皮細(xì)胞而來）。

作用：1確定首先定植于牙齒表面的細(xì)菌種類2細(xì)菌代謝的營(yíng)養(yǎng)來源3保護(hù)牙釉質(zhì)表面4牙齒表面的離子保護(hù)庫(kù)。

11.細(xì)菌對(duì)牙面的黏附和集聚：

黏附：鈣橋作用，氫鍵作用，疏水作用，受體-粘附素作用。

集聚：細(xì)菌間細(xì)胞外聚合物的相互黏附；不同細(xì)菌直接黏附；細(xì)菌與宿主的聚合物黏附。

12.Stephan曲線：Stephan最先建立的食糖后牙菌斑PH變化的動(dòng)態(tài)曲線。即：靜止?fàn)顟B(tài)時(shí)菌斑PH穩(wěn)定，食糖后幾分鐘pH迅速下降到最低水平，以后逐漸回升，一小時(shí)左右恢復(fù)正常。蔗糖＞葡萄糖＞麥芽糖、乳糖、果糖＞山梨糖醇＞木糖醇。

13.齲病：牙硬組織的慢性感染性疾病，是牙齒局部生態(tài)平衡失調(diào)的表現(xiàn)。

14.齲病與細(xì)菌：Orland的無菌鼠實(shí)驗(yàn)：無菌鼠+細(xì)菌→齲齒；無菌鼠+高糖飲食→無齲齒

Miller的體外實(shí)驗(yàn)：牙齒+面包+唾液→齲齒；牙齒+面包+煮沸唾液→無齲

牙齒+脂肪+唾液→無齲。結(jié)論：細(xì)菌代謝碳水化合物是齲齒產(chǎn)生根本原因

齲病相關(guān)細(xì)菌：口腔鏈球菌（血鏈球菌，早起定植），變異鏈球菌（s.m），乳桿菌（嗜酸乳桿菌，參與齲病發(fā)展），口腔放線菌（黏性放線菌：菌毛I(xiàn)與牙面黏附，菌毛I(xiàn)I與變鏈等細(xì)菌的集聚），口腔韋榮菌（小韋榮菌：與變鏈等集聚增加粘附力和加速生物膜形成，可利用乳酸減少產(chǎn)酸菌的致齲），奈瑟菌。

致齲微生物的特性：1產(chǎn)酸和耐酸2合成胞外多糖3牙面黏附能力

致齲標(biāo)準(zhǔn)：1具有致齲生物特性2在齲病發(fā)生各時(shí)期可以培養(yǎng)得到3菌量與齲病正相關(guān)4引起動(dòng)物傳染性致齲5選擇性限制該菌可以減少致齲。

15.牙髓根尖周感染途徑：牙體感染；牙周感染；血緣感染（引菌作用：暫時(shí)性的菌血癥引起的細(xì)菌在代謝障礙或創(chuàng)傷的牙髓組織的定植、增植）。

16.牙髓根尖周感染菌：卟啉單胞菌（牙齦卟啉單胞菌Pg、牙髓卟啉單胞菌Pe：革蘭陰性桿菌、專性厭氧，產(chǎn)生黑色素和臭味，誘導(dǎo)化膿性感染，不酵解碳水化合物，可產(chǎn)生吲哚和硫化氫，主要終末酸產(chǎn)物是正丁酸和乙酸）、普雷沃菌屬（中間普雷沃菌：晚期牙髓根尖周感染常見菌）、梭桿菌屬（具核梭桿菌，G-，厭氧，主要定植于牙菌斑和齦溝，與Pg密切共生，毒力強(qiáng)，誘導(dǎo)IL-1和炎癥反應(yīng)）、擬桿菌屬、放線菌屬（內(nèi)氏放線菌、粘性放線菌，厭氧補(bǔ)充CO2才能生長(zhǎng)）、消化鏈球菌屬（厭氧消化鏈球菌，根管和根尖周感染，產(chǎn)硫化氫）。

17.牙髓根尖周感染機(jī)制：內(nèi)毒素（誘導(dǎo)IL-1和TNF細(xì)胞因子，炎癥反應(yīng)）；侵襲性酶（導(dǎo)致組織破壞和感染擴(kuò)散）、菌毛和莢膜、細(xì)菌代謝產(chǎn)物（外毒素和內(nèi)毒素）。

18.牙髓疾病與細(xì)菌：1.冷刺激痛與細(xì)菌感染： 可逆性牙髓炎（33% 細(xì)菌感染，為鏈球菌和乳桿菌）2.自發(fā)痛和熱刺激痛與細(xì)菌感染：不可逆性化膿性牙髓炎，90%細(xì)菌感染，以專性厭氧菌 為主）3.腐敗臭和顯著出血與細(xì)菌感染：以專性厭氧的普雷沃菌為主）4.拔髓后根管內(nèi)細(xì)菌殘留：拔髓后根管殘留細(xì)菌是根管治療后根尖周炎的主要原因。5.牙髓疾病中牙髓感染與拔髓后根管細(xì)菌殘存相關(guān)：拔髓后根管一次性填充，增加細(xì)菌殘留風(fēng)險(xiǎn)，以專性厭氧菌為主。

19.根尖周疾病與細(xì)菌：1.根尖周炎：厭氧菌為主，急性根尖周炎100%可檢測(cè)到細(xì)菌2.叩擊痛與根管內(nèi)細(xì)菌定植情況：急性期以專性厭氧菌為主，慢性期以兼性厭氧菌為主3.根管內(nèi)滲出物與根管內(nèi)細(xì)菌定植間的關(guān)系：專性厭氧為主

20.牙周病主要致病菌：牙齦卟啉單胞菌（侵襲性酶，內(nèi)毒素，菌毛，牙齦素）、伴防線嗜血桿菌（白細(xì)胞毒素，內(nèi)毒素，spa，上皮細(xì)胞毒素，骨吸收誘導(dǎo)因子）、普雷沃菌屬（蛋白酶機(jī)制免疫細(xì)胞能力）、具核梭桿菌、直形彎曲菌（白細(xì)胞毒素）、微小消化鏈球菌。21.牙周病致病菌致病機(jī)制：非特異性菌斑學(xué)說，特異性菌斑學(xué)說

22.口腔黏膜病相關(guān)病毒：?jiǎn)渭儼捳畈《尽⑺?帶狀皰疹病毒、EB病毒、HIV、人乳頭瘤病毒。23.變異鏈球菌致齲：能牢固粘附至牙面；能利用外源性糖類迅速產(chǎn)生乳酸；能利用外源性糖產(chǎn)生細(xì)胞內(nèi)多糖，在外源性糖缺乏時(shí)利用其產(chǎn)酸；能在酸性環(huán)境（pH<5）中生存并繼續(xù)產(chǎn)酸，具有較強(qiáng)耐酸性。

第五篇：環(huán)境工程微生物總結(jié)

選擇一個(gè)環(huán)境問題，論述微生物在防治此問題中的作用及研究應(yīng)用現(xiàn)狀。

由于有機(jī)毒物和重金屬的污水農(nóng)田灌溉和土地處理，固體廢物的堆放和填埋，以及地下儲(chǔ)油罐泄露，還有最普遍的農(nóng)藥噴灑等等，使得土壤的污染越來越嚴(yán)重。這些物質(zhì)破壞了土壤生態(tài)平衡，隨水源進(jìn)入人體毒害人類。為了解決這個(gè)問題，可以采用微生物土壤修復(fù)。

土壤生物修復(fù)，是利用土壤中天然的微生物資源或人為投加目的菌株，將滯留的污染物快速降解和轉(zhuǎn)化，恢復(fù)土壤的天然功能。土壤本來就是微生物的大本營(yíng)，因此選用適當(dāng)?shù)木N，可以是受污染土壤本來就有的菌種，或是新植入的菌種。加入適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)物并保證合適的溶解氧，微生物可以通過自身的特點(diǎn)快速的分解土壤中的有害物質(zhì)，從而縮短土壤修復(fù)的時(shí)間。

關(guān)于土壤修復(fù)的研究應(yīng)用現(xiàn)狀，最主流的是土壤生物修復(fù)功能。有微生物修復(fù)法和植物修復(fù)法兩種。微生物修復(fù)法分原位生物修復(fù)（將污染土壤在原地處理）和異位生物修復(fù)。植物修復(fù)是利用植物對(duì)某些污染物的超強(qiáng)吸附積累，以及植物代謝等共同途徑，增強(qiáng)污染物的降解活性，從而加速土壤污染物的降解過程。

微生物的特點(diǎn)

體積小比表面積大

分布廣種類多

生長(zhǎng)旺繁殖快

適應(yīng)性強(qiáng)易變異

1分布廣種類多：已發(fā)現(xiàn)的微生物達(dá)10萬種以上,新種不斷發(fā)現(xiàn).。可以說微生物無處不有,無處不在，冰川,溫泉,火山口等極端環(huán)境都有。土壤，空氣，水，還有動(dòng)植物體表都有微生物存在。繁殖快：因?yàn)槲⑸锏拇x能力很強(qiáng), 由于微生物個(gè)體微小,單位體積的表面積相對(duì)很大,有利于細(xì)胞內(nèi)外的物質(zhì)交換,細(xì)胞內(nèi)的代謝反應(yīng)較快.變異：微生物個(gè)體微小,對(duì)外界環(huán)境很敏感,抗逆性較差,很容易受到各種不良外界環(huán)境的影響;另外,微生物的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,缺乏免疫監(jiān)控系統(tǒng), 很容易變異，但微生物的遺傳不穩(wěn)定性,是相對(duì)高等生物而言的。

稀釋平板分離法

該方法是將一定濃度的活性污泥稀釋液，通過平板劃線，表面涂布或是平板澆注的方法，接種到配置好的培養(yǎng)基上，最終獲得分離出來的特定微生物種群。

1先將一定濃度（10ml）的活性污泥置于90ml無菌水中，搖勻。得到10，-1 2用1ml移液管吸取1ml上述溶液到9ml無菌水中，的10，-2 3重復(fù)6次，最終獲得10,-6.4做平板：將融化并冷卻至50°的培養(yǎng)基倒入消過毒的滅過菌的培養(yǎng)皿中。5

（1）劃線：形狀多種多樣，但是不能劃破培養(yǎng)基，同時(shí)保證充分分散獲得單菌落。（2）澆注：現(xiàn)將配置好的稀釋液加入培養(yǎng)皿，在制作平板。

（3）涂布：先用無菌移液管吸取少量稀釋液于平板上，用三角刮刀在平板上均勻涂抹。

染色

染色作用：微生物的細(xì)胞小而透明，在普通光學(xué)顯微鏡下與背景反差很小不容易識(shí)別，因此，為了增加色差，必須染色以便識(shí)別各種形態(tài)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)。分類：簡(jiǎn)單染色和鑒別染色。

特點(diǎn)：簡(jiǎn)單染色：只用一種染料，操作簡(jiǎn)便，但是只能顯示微生物形態(tài)不能顯示構(gòu)造。

復(fù)合染色：用兩種以上的染料或試劑進(jìn)行多次染色處理，使不同菌體和構(gòu)造顯示不同顏色從而鑒別。

革蘭氏染色

意義：成功的講兩類混在一起的細(xì)菌分離開，作為分類鑒別的第一步。步驟：1,涂片，干燥（固定）2初染：低價(jià)草酸銨結(jié)晶紫染液1-2min，水洗。3媒染，滴加革蘭氏染液，染1-2min，水洗。4脫色：滴加95%乙醇，講撥片搖晃幾下傾去乙醇，重復(fù)2-3次。5復(fù)染：滴加番紅 染2-3min，水洗并干燥。6鏡檢 關(guān)鍵步驟：脫色是否合適。若脫色過度，G+也可能脫色而被認(rèn)為是G-。反之。

滅菌消毒

滅菌，是指用物理，化學(xué)方法殺滅或者除去物體上所有微生物及其芽孢。消毒，是指用物理，化學(xué)方法殺死物體上的能致病的微生物，或全部微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢。

方法：干熱滅菌，濕熱滅菌，間歇滅菌，氣體滅菌，和過濾除菌

干熱：培養(yǎng)皿 移液管等玻璃器皿。先至于電熱干燥箱，160°2h。降至50°

濕熱：密閉金屬鍋，適用于一切物品。先加蒸餾水，浸沒被滅菌物品，對(duì)稱緊固螺栓，預(yù)置溫度時(shí)間，加熱 排放冷空氣 最后至于37°恒溫箱內(nèi)24h