第一篇：微生物知識(shí)點(diǎn)總結(jié)

一、名詞解釋：

1.溫和噬菌體(temperate phage)：噬菌體基因與宿主染色體整合，不產(chǎn)生子代噬菌體，但噬

菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制，并隨細(xì)菌的分裂而傳代。

2.溶原性：溫和噬菌體這種產(chǎn)生成熟噬菌體顆粒（前噬菌體偶爾可自發(fā)地或在某些理化和生物因素的誘導(dǎo)下脫離宿主菌基因組而進(jìn)入溶菌周期，產(chǎn)生成熟噬菌體，導(dǎo)致細(xì)菌裂解）和溶解宿主菌的潛在能力，稱為溶原性。

3.溶原性細(xì)菌：帶有前噬菌體基因組的細(xì)菌稱為溶原性細(xì)菌。

4.莢膜：莢膜是一些細(xì)菌在其細(xì)胞表面分泌的一種黏性物質(zhì)，把細(xì)胞壁完全包圍封住，這層黏性物質(zhì)就叫莢膜。

5.菌膠團(tuán)：有些細(xì)菌由于其遺傳特性決定，細(xì)菌之間按一定的排列方式互相黏集在一起，被一個(gè)公共莢膜包圍形成一定形狀的細(xì)菌集團(tuán)，叫做菌膠團(tuán)。

6.芽孢:某些細(xì)菌遇到不良環(huán)境時(shí)，在其細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)內(nèi)生孢子叫芽孢。

7.酶的活性中心：是指酶的活性部位，是酶蛋白分子直接參與和底物結(jié)合，并與酶的催化作用直接有關(guān)的部位。

8.生長(zhǎng)因子：是一類調(diào)節(jié)微生物正常生長(zhǎng)代謝所必需，但不能用簡(jiǎn)單的碳、氮源自行合成的有機(jī)物。

9.培養(yǎng)基：根據(jù)各種微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需要（如水，碳源，能源，氮源，無(wú)機(jī)鹽及生長(zhǎng)因子等），按一定的比例配制而成的，用以培養(yǎng)微生物的基質(zhì)，稱為培養(yǎng)基。

10.選擇培養(yǎng)基：根據(jù)某微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求，或?qū)Ω鞣N化學(xué)物質(zhì)敏感程度的差異而設(shè)計(jì)、配制的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。

11.鑒別培養(yǎng)基：幾種細(xì)菌由于對(duì)培養(yǎng)基中某一成分的分解能力不同，其菌落通過(guò)指示劑顯示出不同的顏色而被區(qū)分開(kāi)，這種起鑒別和區(qū)分不同細(xì)菌作用的培養(yǎng)基，叫鑒別培養(yǎng)基。

12.發(fā)酵：是指在無(wú)外在電子受體時(shí)，底物脫氫后所產(chǎn)生的還原力[H]不經(jīng)呼吸鏈傳遞而直接交給某一內(nèi)源性中間產(chǎn)物接受，以實(shí)現(xiàn)底物水平磷酸化產(chǎn)能的一類生物氧化反應(yīng)。

13.好氧呼吸：是有外在最終電子受體（O2）存在時(shí)，對(duì)底物（能源）的氧化過(guò)程。

14.無(wú)氧呼吸*：無(wú)氧呼吸又稱厭氧呼吸，是一類電子傳遞體系末端的受氫體為外源無(wú)機(jī)氧化物的生物氧化。

15.土壤自凈：土壤對(duì)施入一定負(fù)荷的有機(jī)物或有機(jī)污染物具有吸附和生物降解的能力，通過(guò)各種物理、化學(xué)過(guò)程自動(dòng)分解污染物使土壤恢復(fù)到原有水平的凈化過(guò)程，稱土壤凈化。

16.水體自凈：天然水體受到污染后，在沒(méi)有人為的干預(yù)條件下，借助水體自身的能力使之得到凈化，這種現(xiàn)象成為水體自凈，其中包括生物學(xué)和生物化學(xué)的作用。

17：水體富營(yíng)養(yǎng)化（環(huán)化有）

18.硝化作用：氨基酸脫下的氨，在有氧的條件下，經(jīng)亞硝酸細(xì)菌和硝酸細(xì)菌的作用轉(zhuǎn)化為硝酸的過(guò)程。

19.反硝化作用：當(dāng)發(fā)生缺氧或厭氧環(huán)境時(shí)，兼性厭氧的硝酸鹽還原菌將硝酸鹽還原為氮?dú)狻?/p>

20.好氧活性污泥法（了解）：

21.活性污泥絲狀膨脹：由于絲狀細(xì)菌極度生長(zhǎng)引起的活性污泥膨脹，稱活性污泥絲狀膨脹。

22.消毒：利用理化因素殺死微生物營(yíng)養(yǎng)體的方法。

23.滅菌：利用理化及生物因素殺死所有微生物的方法。

24.放線菌：菌體為單細(xì)胞絲狀體，以產(chǎn)生孢子的方式進(jìn)行繁殖的原核微生物。（判斷）

25.一步生長(zhǎng)曲線（補(bǔ)充）：將適量病毒接種于高濃度敏感細(xì)胞培養(yǎng)物建立同步感染，以感

染時(shí)間為橫坐標(biāo)，病毒的效價(jià)為縱坐標(biāo)，繪制出的病毒特征繁殖曲線。

26.生長(zhǎng)曲線（補(bǔ)充）：以時(shí)間為橫坐標(biāo)，以單細(xì)胞數(shù)目的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，可以繪出一條有規(guī)律的曲線，稱為生長(zhǎng)曲線。

微生物的特點(diǎn)：

1、個(gè)體極小

2、分布廣、種類繁多

3、繁殖快

4、易變異

第一章

病毒的特點(diǎn)：

1、不具備獨(dú)立代謝能力

2.營(yíng)寄生生活

3.易變異

4.具有抗藥性和耐藥性 病毒的形態(tài)和大?。簞?dòng)物病毒：球形、橢圓形、磚形

植物病毒：桿狀、絲狀和球狀

噬菌體：蝌蚪狀和絲狀

大?。杭{米計(jì)通常100~300nm

病毒的繁殖過(guò)程：吸附、侵入、復(fù)制與聚集、釋放

第二章

細(xì)菌的形態(tài)和大小：球狀、桿狀、螺旋狀、絲狀

大?。ㄩL(zhǎng)乘寬）：以微米計(jì)

0.5~2 細(xì)胞壁：革蘭氏陽(yáng)性菌：肽聚糖、磷壁酸、細(xì)胞質(zhì)膜

革蘭氏陰性菌：外壁層（脂多糖、脂蛋白、類脂）、肽聚糖、細(xì)胞質(zhì)膜

細(xì)胞壁生理功能：1.保護(hù)原生質(zhì)體免受滲透壓引起破裂

2.維持細(xì)菌的細(xì)胞形態(tài)

3.阻擋某些分子進(jìn)入和保留蛋白質(zhì)在周質(zhì)

4.為鞭毛提供支點(diǎn)，使鞭毛運(yùn)動(dòng)

細(xì)胞質(zhì)膜的生理功能：1.維持滲透壓的梯度和溶質(zhì)的轉(zhuǎn)移

2.細(xì)胞質(zhì)膜上有合成細(xì)胞壁和形成橫膈膜組分的酶

3.膜內(nèi)陷形成中間體含有細(xì)胞色素，參與呼吸作用

4.在細(xì)胞質(zhì)膜上進(jìn)行物質(zhì)代謝和能量代謝

5.為鞭毛提供附著點(diǎn)

莢膜的定義：莢膜是細(xì)菌在其細(xì)胞表面分泌的一種黏性物質(zhì)。

功能：1.有助于肺炎鏈球菌侵染人體

2.保護(hù)致病菌免受宿主吞噬細(xì)胞的吞噬、免受干燥的影響

3.可做碳源和能源，有些莢膜可做氮源

4.有生物吸附作用

芽孢的定義：某些細(xì)菌生活史中的某個(gè)階段或某些細(xì)菌遇到外界不良環(huán)境時(shí)，在其細(xì)胞內(nèi)形成的一個(gè)內(nèi)生孢子叫芽孢。

芽孢的特點(diǎn)：1.含水率低

2.芽孢壁厚而致密

3.芽孢中的2,6-吡啶二羧酸含量高

4.芽孢含有耐熱性酶

細(xì)菌的染色原理：用染色液染菌體，增加菌體與背景的反差。帶負(fù)電荷的菌體剛好可以被帶正電荷的堿性染液染色。

革蘭氏染色法（簡(jiǎn)單染色法和復(fù)合染色法）：涂布

草酸銨結(jié)晶紫染色

碘—碘化鉀媒染

中性脫色劑脫色（陽(yáng)性菌不褪色呈紫色，陰性菌褪色呈無(wú)色）

番紅染液復(fù)染（陽(yáng)紫陰紅）

革蘭氏染色的機(jī)制：等電點(diǎn)和細(xì)胞壁，1.陽(yáng)帶負(fù)電荷多，等電點(diǎn)低與染劑結(jié)合牢固不易被乙醇提取。2.陽(yáng)細(xì)胞壁脂質(zhì)少，不易被乙醇溶解，通透性弱，染劑不易被乙醇提取 放線菌的定義：在固體培養(yǎng)基上呈輻射狀生長(zhǎng)而得名、腐生菌、在自然界循環(huán)中起積極作用、改良土壤。

形態(tài)：由纖細(xì)的、長(zhǎng)短不一的菌絲組成，菌絲分枝，為單細(xì)胞。

原核微生物：立克次氏體：“二分裂”革蘭氏陰性、營(yíng)寄生生活、傳染病有流行斑疹、傷寒、姜蟲(chóng)熱及Q熱等

支原體：“二分裂” 革蘭氏陰性

衣原體：革蘭氏陰性：二分裂、能引起人患沙眼、鸚鵡熱、淋巴肉芽腫、粒性結(jié)膜炎

第三章

原生動(dòng)物“有關(guān)于水處理”：不同種類對(duì)環(huán)境變化的敏感程度不同。鞭毛綱中鞭毛蟲(chóng)喜在多污帶和中污帶生活，所以在污水生物處理中，活性污泥培養(yǎng)初期或在水處理效果差時(shí)鞭毛蟲(chóng)大量出現(xiàn)，可做污水處理效果差時(shí)的指示生物。肉足綱變形蟲(chóng)出現(xiàn)，處理效果一般；纖毛綱鐘蟲(chóng)、累枝蟲(chóng)耐污能力強(qiáng)，是水體自凈程度高，污水生物處理效果好的指示生物。真菌：酵母菌：細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)：與細(xì)菌不同、含葡聚糖、甘露聚糖、蛋白質(zhì)及脂質(zhì)。啤酒酵母還含幾丁質(zhì)

繁殖方式：有無(wú)性生殖和有性生殖、無(wú)性繁殖又有出芽生殖和裂殖。

霉菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)膜、細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)及內(nèi)含物，大多數(shù)霉菌的細(xì)胞質(zhì)含幾丁質(zhì)，少數(shù)水生霉菌的細(xì)胞壁含纖維素。

繁殖方式：借助有性孢子和無(wú)性孢子繁殖，也可借助菌絲的片段繁殖。

菌落特征：菌落疏松、與培養(yǎng)基結(jié)合不緊易挑取、相似：圓形、絨毛狀、絮狀或蜘蛛網(wǎng)狀

不同：較大、生長(zhǎng)迅速（相比其他微生物）

不同霉菌的孢子形狀結(jié)構(gòu)和顏色都不同。

第四章

微生物的酶：?jiǎn)纬煞置福ㄖ缓鞍踪|(zhì)）和全酶（酶蛋白和輔助因子）

酶的活性中心定義：是指酶的活性部位，是酶蛋白分子中直接參與和底物結(jié)合，并與酶的催化作用直接相關(guān)的部位，是酶催化功能的基礎(chǔ)。

組成：兩個(gè)功能部位（結(jié)合部位和催化部位）

酶的分類（六大類）：氧化酶、轉(zhuǎn)移酶、水解酶、裂解酶、異構(gòu)酶、合成（連接）酶 酶的催化特性：1.具有一般催化劑的共性

2.具有高度的專一性

3.催化條件溫和

4.對(duì)環(huán)境條件的變化極為敏感

5.催化效率極高

影響酶促效應(yīng)的因素：1.酶濃度

2.底物濃度

3.溫度

4.pH 5.激活劑

6.抑制劑 微生物的營(yíng)養(yǎng)（六大營(yíng)養(yǎng)）：水、碳源、能源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子 碳氮磷比：根瘤菌要求11.5:1

霉菌要求9:1

固氮菌要求27.6:1

混合群體要求25：1 水處理中好氧活性污泥要求碳氮磷比100:5:1 水處理中厭氧活性污泥要求碳氮磷比100:6:1 有機(jī)固體廢物堆肥發(fā)酵要求碳氮比30:1

碳磷比75~100:1 培養(yǎng)基的定義：根據(jù)各種微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需要，按一定的比例配制而成的，用來(lái)培養(yǎng)微生物的基質(zhì)。

配制步驟：按順序加入緩沖化合物、無(wú)機(jī)元素、微量元素、生長(zhǎng)因子

培養(yǎng)基的分類：1.選擇培養(yǎng)基

2.鑒別培養(yǎng)基

營(yíng)養(yǎng)物進(jìn)入微生物細(xì)胞的方式：1.單純擴(kuò)散

2.促進(jìn)擴(kuò)散

3.主動(dòng)運(yùn)輸

4.基因轉(zhuǎn)位 ATP的生成方式：1.基質(zhì)（底物）水平磷酸化（糖酵解和三羧酸循環(huán)）

2.氧化磷酸化（好氧呼吸和無(wú)氧呼吸）

3.光合磷酸化（光合作用）

發(fā)酵的定義：是指在無(wú)外在電子受體時(shí)，底物脫氫后所產(chǎn)生的還原力{H}不僅呼吸鏈傳遞而直接交給某一內(nèi)源性中間產(chǎn)物接受，以實(shí)現(xiàn)底物水平磷酸化產(chǎn)能的一類生物氧化反應(yīng)。

好氧呼吸：是指有氧氣存在時(shí)對(duì)底物的氧化過(guò)程：兩個(gè)階段（1）葡萄糖的酵解

（2）三羧酸循環(huán)看124頁(yè)轉(zhuǎn)化圖

細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線：1.延緩期（適應(yīng)期）

2.對(duì)數(shù)期

3穩(wěn)定期（.靜止期）4.衰老期 微生物生長(zhǎng)量的測(cè)定方式種類：1.計(jì)數(shù)器直接計(jì)數(shù)（血球計(jì)數(shù)板）

2.電子計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)

3.染色涂片計(jì)數(shù)（單位面積菌數(shù)*面積*稀釋倍數(shù)）

4.比濁法測(cè)定細(xì)菌懸液細(xì)胞數(shù)（分光光度計(jì)測(cè)定）

第五章

微生物的生存因子：溫度、pH（較重要）、氧化還原電位、溶解氧、太陽(yáng)輻射、活動(dòng)與滲透壓、表面張力

微生物和其他生物間的關(guān)系：1.競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系（不同微生物種群同一環(huán)境）

2.原始合作關(guān)系（可單獨(dú)生活的兩種生物共存于同一環(huán)境中）

3.共生關(guān)系（不能單獨(dú)生活的兩種生物共同生活與同一環(huán)境中）

4.偏害關(guān)系(甲對(duì)乙有害，乙對(duì)甲無(wú)影響)5.捕食關(guān)系

6.寄生關(guān)系

菌種的退化、復(fù)壯和保藏：遺傳性使各種微生物的遺傳性狀得以延續(xù)：微生物發(fā)生變異，使其得到進(jìn)化，退化是產(chǎn)生了負(fù)變，復(fù)壯是在性狀沒(méi)有退化之前做好純種分離和性能測(cè)定。菌種保藏適宜條件：低溫、干燥、缺氧、貧乏培養(yǎng)基和添加保護(hù)劑。

方法：定期移植法、干燥法、隔絕空氣法、蒸餾水懸浮法、綜合法

第七章

土壤自凈的定義：土壤對(duì)施入一定負(fù)荷的有機(jī)物或有機(jī)污染物具有吸附和生物降解的能力，通過(guò)各種物理化學(xué)過(guò)程自動(dòng)分解污染物使土壤恢復(fù)到原有水平的凈化過(guò)程。

水體自凈：河流接納了一定量的有機(jī)污染物后，在物理的、化學(xué)的和水生物等因素的綜合作用后得到進(jìn)化，水質(zhì)恢復(fù)到污染前的水平和狀態(tài)

第八章

碳氮循環(huán)：

硝化作用的定義：氨基酸脫下的氮，在有氧的條件下，經(jīng)亞硝化細(xì)菌恒和硝化細(xì)菌的作用轉(zhuǎn)化為硝酸。

反硝化作用：植物藻類及其他微生物體內(nèi)通過(guò)硝酸還原酶將硝酸還原成氨，由氨合成為氨基酸、蛋白質(zhì)及其他含氮物質(zhì)構(gòu)成它們的機(jī)體。

第九章

好氧活性污泥：由多種多樣的好氧微生物和兼性厭氧微生物（兼有少量厭氧）與污（廢）水中有機(jī)和無(wú)機(jī)固體物質(zhì)混凝交織在一起，形成絮狀體或稱絨粒。

圖9—1：

菌膠團(tuán)的作用;1.有很強(qiáng)的生物絮凝、吸附能力和氧化分解有機(jī)物的能力。

2.對(duì)有機(jī)物的吸附和分解，為原生動(dòng)物和微型后生動(dòng)物提供了良好的生存環(huán)境。3.為原生動(dòng)物、微型后生動(dòng)物提供附著棲息場(chǎng)所。4.具有指示作用

原生動(dòng)物和微型后生動(dòng)物的作用：1.指示作用

2.凈化作用

3.促進(jìn)絮凝和沉淀作用 活性污泥膨脹：有絲狀細(xì)菌極度生長(zhǎng)引起的，呈現(xiàn)為污泥結(jié)構(gòu)極度松散，體積增大、上浮，難以沉降分離影響出水水質(zhì)的現(xiàn)象。

活性污泥膨脹的成因：1.溫度

2.溶解氧

3.可溶性有機(jī)物及其種類

4.有機(jī)物濃度 活性污泥膨脹的控制對(duì)策：1.控制溶解氧

2.控制有機(jī)負(fù)荷

3.改革工藝

為什么濕熱滅菌比干熱滅菌好？

1.菌體蛋白質(zhì)吸收熱水分凝固比干熱容易

2.濕熱比干熱傳導(dǎo)快，穿透力強(qiáng)，能迅速提高物體內(nèi)部溫度

3.蒸汽與物品接觸凝結(jié)成水，放出潛能，能迅速提高溫度，加速微生物死亡。

第二篇：高中生物微生物與發(fā)酵工程知識(shí)點(diǎn)總結(jié)

高中生物微生物與發(fā)酵工程知識(shí)點(diǎn)總結(jié)

微生物類群

細(xì)菌、放線菌、病毒

細(xì)菌分裂方式：二分裂。

多數(shù)抗生素由放線菌產(chǎn)生。

病毒的衣殼決定病毒抗原特異性。

一種病毒只含有一種核酸。

微生物營(yíng)養(yǎng) 營(yíng)養(yǎng)：

各種成分：碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和水。

碳源——構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物。

氮源——合成蛋白質(zhì)、核酸和含氮產(chǎn)物。

生長(zhǎng)因子——合成酶和核酸。糖類（葡萄糖）是最常用的碳源。

不同種類微生物對(duì)碳源種類、數(shù)量有不同要求。

銨鹽、硝酸鹽是最常用的氮源。

生長(zhǎng)因子：維生素、氨基酸、堿基等

天然物質(zhì)（酵母膏、蛋白胨、動(dòng)植物組織提取液）可作為生長(zhǎng)因子。

培養(yǎng)基配置原則：

目的明確、營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)、PH要適宜

谷氨酸生產(chǎn)：

C：N = 4：1 菌體大量繁殖

C：N = 3：1 谷氨酸大量合成 PH：

細(xì)菌——6.5~7.5

放線菌——7.5~8.5

真菌——5~6

谷氨酸棒狀桿菌——7~8

培養(yǎng)基種類：記憶實(shí)例

分類 物理

固體：分離、鑒定

半固體：觀察運(yùn)動(dòng)、留種 液體：工業(yè)生產(chǎn)

化學(xué)

合成培養(yǎng)基：分類、鑒定 天然培養(yǎng)基：工業(yè)生產(chǎn)

用途

選擇培養(yǎng)基：抑制劑、促進(jìn)劑 鑒別培養(yǎng)基：指示劑、化學(xué)藥品

微生物代謝

代謝產(chǎn)物：初級(jí)代謝產(chǎn)物、次級(jí)代謝產(chǎn)物

代謝調(diào)節(jié)：酶合成調(diào)節(jié)、酶活性調(diào)節(jié)。

酶分類：組成酶、誘導(dǎo)酶。

代謝人工控制途徑：

誘變處理；改變細(xì)胞膜透性。（記憶實(shí)例）微生物代謝異常旺盛的原因：

表面積與體積比很大，能夠迅速與外界進(jìn)行物質(zhì)交換。

酶合成調(diào)節(jié)……保證代謝需要，避免胞內(nèi)物質(zhì)能量浪費(fèi)，增強(qiáng)微生物適應(yīng)能力。

酶活性調(diào)節(jié)……（改變構(gòu)象）快速、精細(xì)調(diào)節(jié)方式。微生物生長(zhǎng)

（記憶書本細(xì)節(jié)）

四個(gè)時(shí)期：調(diào)整期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期。

連續(xù)培養(yǎng)：縮短了培養(yǎng)周期，消除不利于微生物生長(zhǎng)的某些環(huán)境因素，提高設(shè)備利用率，便于自動(dòng)化管理。（穩(wěn)定期進(jìn)行）

影響因素：溫度、PH、氧。

測(cè)定培養(yǎng)生長(zhǎng)情況：將少量某細(xì)菌接種到定容的液體培養(yǎng)基中觀察。測(cè)定方法：細(xì)胞數(shù)；測(cè)重。

生長(zhǎng)曲線反映細(xì)菌菌體生長(zhǎng)狀況。

調(diào)整期——代謝活躍，體積增長(zhǎng)快，大量合成酶、ATP等。時(shí)間取決于：菌種、培養(yǎng)條件。

對(duì)數(shù)期——代謝旺盛，形態(tài)、特征穩(wěn)定。留種，科研材料。時(shí)間取決于：接種量、培養(yǎng)基。

穩(wěn)定期——?jiǎng)討B(tài)平衡，活菌數(shù)最大，大量積累次級(jí)代謝產(chǎn)物。種內(nèi)斗爭(zhēng)最激烈，出現(xiàn)芽孢。

衰亡期——死亡率＞繁殖率，有多種形態(tài)和畸形。死細(xì)胞解體，釋放代謝產(chǎn)物。

發(fā)酵工

程 發(fā)酵工程概念和內(nèi)容：

發(fā)酵工程的應(yīng)用：

醫(yī)藥工程：代謝產(chǎn)物中的抗生素、激素、疫苗、干擾素、抗體等。

食品工程：傳統(tǒng)發(fā)酵產(chǎn)品，食品添加劑，單細(xì)胞蛋白。谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)實(shí)例。

菌種的選育：誘變育種、基因工程、細(xì)胞工程。

培養(yǎng)基的配制：根據(jù)配制三原則。

滅菌、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種。

發(fā)酵過(guò)程：控制影響微生物生長(zhǎng)的環(huán)境因素。分離提純：菌體（過(guò)濾、沉淀），代謝產(chǎn)物（蒸餾、萃取、離子交換）。

第三篇：微生物總結(jié)

微生物：一類分布廣泛、體積微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼直接看不到，微小生物的總稱。

細(xì)菌L型：細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制，這種細(xì)胞壁受損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活，稱細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型或L型。

質(zhì)粒：是染色體外的遺傳物質(zhì)，控制某些特定的生物學(xué)性狀，不是細(xì)菌生長(zhǎng)所必需。

莢膜：是細(xì)菌合成分泌的包繞于細(xì)胞壁外的一層粘液性物質(zhì)。界限清晰性質(zhì)穩(wěn)定結(jié)合牢固。培養(yǎng)基：由人工方法經(jīng)滅菌后制成，專供微生物生長(zhǎng)使用的混合營(yíng)養(yǎng)制品。一般pH為7.2-7.6。

兼性厭氧菌：兼有需氧呼吸和無(wú)氧發(fā)酵兩種功能，無(wú)論在有氧或無(wú)氧環(huán)境中都能生長(zhǎng)，但以有氧時(shí)生長(zhǎng)較好，大多數(shù)病原菌屬于此。菌落：在固體培養(yǎng)基中，經(jīng)過(guò)十八到24小時(shí)培養(yǎng)后，單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見(jiàn)的細(xì)紅細(xì)胞吸附：流感病毒等感染細(xì)胞后，由于細(xì)胞膜上出現(xiàn)了血凝素（HA），具有吸附脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的能力，這一現(xiàn)象稱為紅細(xì)胞吸附。抗毒素：通常是用細(xì)菌類毒素給馬多次注射后，取其免疫血清提取免疫球蛋白精制而成抗生素：微生物來(lái)源的抗菌藥物，以及人工化學(xué)修飾或半合成的衍生物

無(wú)菌：就是指沒(méi)有活菌的意思。

1：細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及功能？答：化學(xué)組成：G+①肽聚糖：聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋②磷壁酸：粘附功能，與致病性有關(guān)；抗原性很強(qiáng)③其他成分：如A群鏈球菌的M蛋白G-①肽聚糖：聚糖骨架；四肽側(cè)鏈②外膜：脂蛋白；脂質(zhì)雙層；脂多糖：脂類A（毒性成分，無(wú)種屬特異性）；核心多糖；特異多糖。功能：①維持細(xì)菌固有形態(tài)②保護(hù)細(xì)菌抵抗低滲環(huán)境③物質(zhì)交換④決定菌體的抗原性。2：G-菌與G+菌細(xì)胞壁的異同點(diǎn)及其意義？答：兼性厭氧菌、專性厭氧菌。

11：與醫(yī)學(xué)有關(guān)的合成代謝產(chǎn)物？答：① 毒素與侵襲性酶：外毒素和內(nèi)毒素②熱原質(zhì)：G-菌細(xì)胞壁的脂多糖，耐高溫，250℃干烤破壞。③抗生素：某些微生物代謝中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死其他微生物或腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)。④維生素：如VitK、B族維生素。⑤色素：脂溶性和水溶性色素。⑥細(xì)菌素：無(wú)治療應(yīng)用價(jià)值。13：病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成。答：多數(shù)病毒呈球形或近似球形，少數(shù)呈桿狀（植物病毒）、絲狀（初分離的流感病毒）、彈狀（狂犬病毒）、磚塊狀（如痘類病毒）和蝌蚪狀（噬菌體）。病毒的核心和衣殼，二者構(gòu)成核衣殼，病毒包膜和其他輔助結(jié)構(gòu)?；瘜W(xué)組成：核心：主要為核酸，化學(xué)組成為DNA或RNA。衣殼：包繞在核心外面的一層蛋白質(zhì)，由許多蛋白質(zhì)亞單位（殼粒）組成。包膜：化學(xué)組成： 脂質(zhì)蛋白質(zhì)糖類。

答：?jiǎn)渭?xì)胞真菌呈圓形或卵圓形。多細(xì)胞真菌

結(jié)構(gòu)：菌絲和孢子，菌絲：分為營(yíng)養(yǎng)菌絲、氣中菌絲、生殖菌絲；孢子：是真菌的繁殖體。結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁外成分；細(xì)胞壁；隔膜；其他結(jié)構(gòu)。

25：真菌培養(yǎng)特性。答：最常用的培養(yǎng):沙保弱培養(yǎng)基。溫度:多數(shù)都在22 ~ 28oC，但深部感染真菌最適溫度為37oC，pH4.0 ~ 6.0病原菌通常生長(zhǎng)緩慢，1~4周。

26：真菌繁殖方式。答：①無(wú)性生殖：①由菌絲斷裂形成新個(gè)體②細(xì)胞直接分裂產(chǎn)生子細(xì)胞③產(chǎn)生芽生孢子④產(chǎn)生孢子囊孢子和分生孢子②有性生殖：指經(jīng)過(guò)兩性細(xì)胞配合產(chǎn)生新個(gè)體的繁殖方式。

27：真菌抵抗力答：①對(duì)干燥、陽(yáng)光、紫外線及常用消毒劑有強(qiáng)抵抗力②不耐熱，菌絲與孢子60℃ 1小時(shí)均可殺死③2﹪石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞、2.5%碘酊敏感④抗真菌藥物：菌集團(tuán)。

純培養(yǎng)基：挑取一個(gè)菌落，移種到另一培養(yǎng)基中，生長(zhǎng)出來(lái)的細(xì)菌均為純種。

毒性噬菌體：在宿主菌細(xì)胞內(nèi)噬菌體增殖產(chǎn)生子代噬菌體，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。溫和噬菌體：噬菌體基因與宿主菌染色體整合，成為前噬菌體，噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制而復(fù)制，并隨細(xì)菌的分裂而傳到子代細(xì)菌的基因組中，變成溶原性細(xì)菌，形成溶原性周期。前噬菌體：整合在細(xì)菌染色體上的噬菌體基因。轉(zhuǎn)座子：細(xì)菌基因組中的一段DNA序列，可以在染色體、質(zhì)?；蚴删w之間自行移動(dòng)的遺傳成分，伴隨轉(zhuǎn)座子的移動(dòng)，會(huì)出現(xiàn)插入突變。基因轉(zhuǎn)移：遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入受體菌的過(guò)程為基因轉(zhuǎn)移。

重組：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組，重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。轉(zhuǎn)化：細(xì)菌通過(guò)性菌毛相互連接溝通，將質(zhì)?；蛉旧w等遺傳物質(zhì)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌的過(guò)程。

接合：是受體菌直接攝取供體菌DNA片段，從而獲得新的遺傳性狀的過(guò)程。

轉(zhuǎn)導(dǎo)：以噬菌體為載體將供菌的DNA片段轉(zhuǎn)移到受菌體內(nèi)使受菌獲得供菌的部分遺傳性狀。溶原性轉(zhuǎn)換：某些前噬菌體可導(dǎo)致細(xì)菌基因型和性狀發(fā)生改變，例如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素的機(jī)理，溫和噬菌體感染細(xì)菌時(shí)，其基因可整合于宿主菌染色體中，使宿主菌獲得噬菌體基因賦予的新的性狀，稱溶原性轉(zhuǎn)換。原生質(zhì)體融合：將兩種不同的細(xì)菌經(jīng)溶菌酶或青霉素等處理，失去細(xì)胞壁成為原生質(zhì)體后進(jìn)行融合的過(guò)程。融合后的染色體之間發(fā)生重組。病毒的自我復(fù)制：以病毒核酸為模板，經(jīng)過(guò)復(fù)雜的生化過(guò)程，復(fù)制子代病毒的核酸并通過(guò)轉(zhuǎn)錄翻譯產(chǎn)生病毒蛋白質(zhì)，裝配成熟后釋放到細(xì)胞外，這種增殖方式稱為病毒的自我復(fù)制。頓挫感染：被病毒侵入的細(xì)胞如不能為病毒增殖提供必需成分，則病毒不能合成本身成分，或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細(xì)胞與容納細(xì)胞

缺陷病毒：病毒基因組不完整或某一基因位點(diǎn)改變，不能正常增殖，不能復(fù)制出完整有感染性的病毒顆粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒?完成復(fù)制

干擾現(xiàn)象：當(dāng)兩種病毒感染同一宿主細(xì)胞時(shí)，發(fā)生一種病毒的增殖抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象。某些病毒感染細(xì)胞時(shí)不出現(xiàn)CPE或其他易于測(cè)出的變化（如HAd），但能干擾其后感染的另一病毒的增殖，從而阻抑后者所特有的CPE 芽孢：某些細(xì)菌在一定環(huán)境條件下，胞質(zhì)脫水濃縮，在菌體內(nèi)部形成的一個(gè)圓形或卵圓形小體。

正常菌群：正常人的體表和與外界相通的眼結(jié)膜，口腔、鼻腔、腸道、泌尿生殖道等腔道粘膜中的不同種類和數(shù)量及對(duì)人體無(wú)害而有益的微生物。正常微生物群通稱為正常菌群

細(xì)菌群體：細(xì)菌附著在有生命或無(wú)生命的材料表面后，由細(xì)菌及其所分泌的胞外多聚物共同組成的呈膜狀的細(xì)菌群體。機(jī)會(huì)性感染：由正常菌群在機(jī)體免疫功能低下、寄居部位改變、菌群失調(diào)等特定條件下引起的感染。

毒力：致病性的強(qiáng)弱程度。

侵襲素：某些細(xì)菌的基因編碼一些具有侵襲功能的蛋白多肽，促進(jìn)該病原菌向鄰近組織擴(kuò)散甚至介導(dǎo)進(jìn)入鄰近黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)。

包涵體：細(xì)胞漿或細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)光鏡下可見(jiàn)的斑塊狀結(jié)構(gòu)

G+ 菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,五肽交聯(lián)橋,三維立體②磷壁酸:重要表面抗原，與粘附致病有關(guān)，加強(qiáng)穩(wěn)定細(xì)胞壁G－菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽側(cè)鏈組成二維結(jié)構(gòu), ②外膜（脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成）功能:屏障結(jié)構(gòu)LPS是G－菌的內(nèi)毒素。細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)異同:G+菌/G－菌--強(qiáng)度:較堅(jiān)韌/較疏松--厚度:厚20-80nm/薄10-15nm--肽聚糖層數(shù):多可達(dá)50層/少，1-2層--肽聚糖結(jié)構(gòu):聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,五肽交聯(lián)橋,三維立體/聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,二維平面--脂類含量/少/多--磷壁酸:有/無(wú)--外膜:無(wú)/有,由脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成3：細(xì)菌L型，特殊結(jié)構(gòu)種類、化學(xué)組成、抗原性及意義？答：定義：細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制，這種細(xì)胞壁受損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活，稱細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型或L型。種類：G+菌細(xì)胞壁缺失后，僅有胞膜，稱原生質(zhì)體，G--菌肽聚糖層受損，尚有外膜，稱原生質(zhì)球?？乖约耙饬x：高度多形性，大小不一；大多染成G－；高滲低瓊脂含血清培養(yǎng)基—油煎蛋樣菌落；去除誘因后，有些可回復(fù)為原菌；某些L型仍有致病性,引起慢性感染。作用于胞壁的抗菌性藥對(duì)L型感染治療無(wú)效

4：細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)？答：①莢膜：多糖或多肽的多聚體。功能a抗吞噬b黏附作用c抗有害物質(zhì)的損傷d有抗原性，用于細(xì)菌的鑒定和分型②鞭毛：蛋白質(zhì)，由基礎(chǔ)小體絲狀體鉤狀體組成，高度抗原性。功能a是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官b某些細(xì)菌的鞭毛與致病性有關(guān)c根據(jù)鞭毛的動(dòng)力和鞭毛的抗原性可用以細(xì)菌的鑒別和分類③菌毛：由亞單位菌毛蛋白構(gòu)成。功能a黏附作用b傳遞遺傳物質(zhì)④芽孢：生產(chǎn)芽孢的細(xì)菌都是革陽(yáng)菌。功能：a增強(qiáng)抵抗力b不直接致病c鑒定。

5：細(xì)菌的遺傳物質(zhì)？答：細(xì)菌染色體，質(zhì)粒，噬菌體：

6：基因轉(zhuǎn)移與重組方式的種類及定義？答：定義：基因轉(zhuǎn)移：遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入受體菌的過(guò)程為基因轉(zhuǎn)移。重組：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組，重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。分類：轉(zhuǎn)化,接合,轉(zhuǎn)導(dǎo),融合,轉(zhuǎn)換.【表格】類型：基因來(lái)源/轉(zhuǎn)移方式--轉(zhuǎn)化：供菌游離的DNA片段/直接攝入--接合：供菌質(zhì)粒DNA/ 性菌毛--轉(zhuǎn)導(dǎo)：供菌任意DNA或噬菌體與供菌特定DNA/噬菌體--融合：兩菌原生質(zhì)體的DNA/融合--轉(zhuǎn)換：溫和噬菌體/吸附穿入

7：噬菌體及其相關(guān)概念。答：1）毒性噬菌體：在宿主菌細(xì)胞內(nèi)噬菌體增殖產(chǎn)生子代噬菌體，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。2）溫和噬菌體：噬菌體基因與宿主菌染色體整合，成為前噬菌體，噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制而復(fù)制，并隨細(xì)菌的分裂而傳到子代細(xì)菌的基因組中，變成溶原性細(xì)菌，形成溶原性周期。

8：細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件？答:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)/酸堿度 多數(shù)病原菌最適pH為7.2~7.6/溫度 多數(shù)病原菌生長(zhǎng)最適溫度為37℃/氣體 據(jù)代謝時(shí)對(duì)分子氧的需要與否，專性需氧菌、微需氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌/滲透壓。

9：細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖？答：生長(zhǎng)曲線：一定數(shù)量的細(xì)菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中，連續(xù)定時(shí)取樣測(cè)定活菌數(shù)量，以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，以活菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)作圖，得到的一條曲線。遲緩期：適應(yīng)階段。對(duì)數(shù)期：對(duì)抗生素敏感，細(xì)菌鑒定選此期。穩(wěn)定期：代謝產(chǎn)物形成（如外毒素、抗生素、芽胞等）。衰亡期：菌體細(xì)胞呈現(xiàn)多種形態(tài)。

10：按細(xì)菌對(duì)氧需要的分類？答：據(jù)代謝時(shí)對(duì)分子氧的需要與否，專性需氧菌、微需氧菌、14：雙鏈DNA病毒的復(fù)制周期？答：vDNA（RNA聚合酶）→早期mRNA（翻譯）→早期蛋白（酶）→ vDNA（酶）子代DNA →? mRNA?→結(jié)構(gòu)蛋白.→子代DNA+結(jié)構(gòu)蛋白→子代病毒。簡(jiǎn)要過(guò)程：吸附，穿入，脫殼，生物合成，組裝、成熟與釋放。

15：頓挫病毒，缺陷病毒的概念？答：頓挫病毒：被病毒侵入的細(xì)胞如不能為病毒增殖提供必需成分，則病毒不能合成本身成分，或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細(xì)胞與容納細(xì)胞。缺陷病毒：病毒基因組不完整或某一基因位點(diǎn)改變，不能正常增殖，不能復(fù)制出完整有感染性的病毒顆粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒=完成復(fù)制 16：細(xì)菌的感染與致病。答：感染：在一定條件下，微生物與機(jī)體相互作用并導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生不同程度的病理過(guò)程?！?/p>

17：細(xì)菌的毒力比較，外毒素與內(nèi)毒素生物學(xué)特性。答：【表格】種類：內(nèi)毒素★外毒素。來(lái)源：G-菌★G+菌部分G-菌。編碼基因：染色體基因★質(zhì)?；蚯笆删w或染色體基因。存在部位：細(xì)胞壁成分、細(xì)菌裂解后釋出★活菌分泌或細(xì)菌溶解后散出?；瘜W(xué)成分：脂多糖★蛋白質(zhì)。穩(wěn)定性：好(160℃2~4h才破壞）★差（60~80 ℃30m可破壞）。毒性作用：弱、各種內(nèi)毒素作用大致相同★強(qiáng)、對(duì)機(jī)體組織器官有選擇性?？乖裕喝?，甲醛處理后不能形成類毒素★強(qiáng)，能刺激機(jī)體形成抗毒素，經(jīng)甲醛脫毒后能形成類毒素。

18：細(xì)菌感染的類型答：①不感染②隱性感染③潛伏感染④顯性感染：急慢性感染；局部、全身感染⑤帶菌狀態(tài)。

19：病毒感染類型。答：①隱性感染②顯性感染：急性病毒感染：潛伏期短，發(fā)病急，數(shù)日或數(shù)周回復(fù)，病原消滅型感染。持續(xù)性病毒感染：慢性病毒感染；潛伏性病毒感染；慢發(fā)病毒感染。

20：細(xì)菌的致病機(jī)制。答：細(xì)菌的致病性強(qiáng)弱取決于毒力，細(xì)菌的毒力因子：①侵襲力：致病菌突破宿主生理屏障，進(jìn)入機(jī)體并在體內(nèi)定植、繁殖和擴(kuò)散的能力包括黏附素、莢膜和微莢膜、侵襲性物質(zhì)②毒素：細(xì)菌產(chǎn)生的損傷宿主引起生理功能紊亂的毒性物質(zhì)，包括內(nèi)毒素和外毒素。

21：正常菌群的生理作用。答：①生物拮抗：競(jìng)爭(zhēng)粘附（占位性保護(hù)）作用；產(chǎn)生有害代謝物質(zhì)；營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)②營(yíng)養(yǎng)作用③免疫作用④抑癌作用⑤抗衰老作用。

22：病毒分離鑒定方法及病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中的增殖的指標(biāo)。答：病毒的分離：①動(dòng)物接種②雞胚培養(yǎng)；流感病毒初次分離接種于羊膜腔；流感病毒的再培養(yǎng)接種于尿囊腔③組織培養(yǎng)④細(xì)胞培養(yǎng) — 病毒分離鑒定中最常用的方法單層細(xì)胞培養(yǎng)；原代細(xì)胞培養(yǎng)；二倍體細(xì)胞培養(yǎng)；傳代細(xì)胞培養(yǎng)。指標(biāo)：1）細(xì)胞的變化①細(xì)胞病變效應(yīng)：有些病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖時(shí)引起的特有的細(xì)胞病變，如細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落②多核巨細(xì)胞形成：有些病毒如麻疹病毒、巨細(xì)胞病毒等作用于細(xì)胞膜，使鄰近的細(xì)胞融合，形成多核巨細(xì)胞③胞質(zhì)或核內(nèi)包涵體的形成狂犬病病毒、巨細(xì)胞病毒。2）紅細(xì)胞吸附流感病毒等感染細(xì)胞后，由于細(xì)胞膜上出現(xiàn)了血凝素，具有吸附脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的能力，這一現(xiàn)象稱為紅細(xì)胞吸附。常用來(lái)鑒定具有血凝素的黏病毒或副黏病毒的增殖3）.紅細(xì)胞凝集檢測(cè)含血凝素病毒的方法4）干擾現(xiàn)象5）空斑形成試驗(yàn)。

23：病毒成份的檢測(cè)（抗原、核酸檢測(cè)）答：1.病毒抗原的檢測(cè)2.病毒核酸的檢測(cè)

24：真菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)（單細(xì)胞和多細(xì)胞真菌）。

灰黃霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑；對(duì)抗生素不敏感。

28：抗菌藥物的種類與作用機(jī)制。答：殺菌藥和抑菌藥。機(jī)制：①抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成②抑制細(xì)菌

細(xì)胞膜功③抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成④抑制細(xì)菌核酸合成。29：細(xì)菌耐藥的機(jī)制。答：產(chǎn)生鈍化酶；細(xì)胞通透性的改變；靶位結(jié)構(gòu)的改變；建立代謝旁路；代謝酶分子的改變

30：醫(yī)院感染的定義。答：由醫(yī)院的病原生物或其毒素導(dǎo)致的局部或全身感染性疾病。

31：細(xì)菌分離培養(yǎng)和鑒定、生化試驗(yàn)、血清學(xué)試驗(yàn)？答：細(xì)菌分離培養(yǎng)和鑒定：原則上應(yīng)對(duì)所有送檢標(biāo)本做分離培養(yǎng)，以便獲得單個(gè)菌落后進(jìn)行純培養(yǎng)，從而對(duì)細(xì)菌做進(jìn)一步的生物學(xué)、免疫學(xué)、致病性或細(xì)菌的藥物敏感性等方面的檢查，最終獲得確切的報(bào)告。生化試驗(yàn)：得到細(xì)菌的純培養(yǎng)物后，用糖發(fā)酵試驗(yàn)，吲哚試驗(yàn)，硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)等對(duì)細(xì)菌的酶系統(tǒng)和其代謝產(chǎn)物的檢查，是鑒別細(xì)菌的重要方法之一。血清學(xué)實(shí)驗(yàn)：利用含已知的特異性抗體的免疫血清，對(duì)細(xì)菌進(jìn)行群和型的鑒別。

微生物種類名稱★生物學(xué)性狀★致病物質(zhì)、致病機(jī)理及所致疾病

破傷風(fēng)梭菌：菌體細(xì)長(zhǎng)，芽胞正圓比菌體粗，位于菌體頂端菌體鼓槌狀★不發(fā)酵糖類，不分解蛋白質(zhì)。條件：局部傷口需形成厭氧微環(huán)境，傷口窄而深，有泥土或異物污染，大面積創(chuàng)傷，壞死組織多，局部組織缺血，同時(shí)有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染的傷口。防治原則：特異性預(yù)防：注射破傷風(fēng)類毒素主動(dòng)免疫；迅速對(duì)傷口清創(chuàng)擴(kuò)創(chuàng)，防止形成厭氧微環(huán)境；緊急預(yù)防：TAT（精制破傷風(fēng)抗毒素）；治療： 早期足量使用TAT，抗生素。產(chǎn)氣莢膜梭菌：G+粗大桿菌，芽胞位于次極端，橢圓形，直徑小于菌體形成明顯莢膜★血平板：雙層溶血環(huán)，代謝十分活躍，牛奶培養(yǎng)基：“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象。增加血管通透性，組織壞死，氣性壞疽，食物中毒，壞死性腸炎。

肉毒梭菌：G+粗短桿菌，芽胞位于次極端，橢圓形，菌體呈網(wǎng)球拍狀，嚴(yán)格厭氧，分型多，生化反應(yīng)復(fù)雜★肉毒毒素，抑制乙酰膽堿釋放，引起運(yùn)動(dòng)神經(jīng)末梢失調(diào)→肌肉麻痹；食物中毒，嬰兒肉毒中毒。

支原體：菌落油煎蛋型，高度多形態(tài)型，細(xì)胞膜含高度固醇，無(wú)細(xì)胞壁，對(duì)青霉素有抵抗作用★支原體肺炎，病變?yōu)殚g質(zhì)性肺炎，可合并支氣管肺炎。稱為原發(fā)性非典型性肺炎。不規(guī)則發(fā)熱，刺激性咳嗽，頭痛。嬰幼兒病情嚴(yán)重，發(fā)病急，病程長(zhǎng)，以呼吸困難為主。有些合并其他系統(tǒng)病變，如循環(huán)系統(tǒng)等。飛沫傳播。立克次體：是一類體積微小，絕大多數(shù)為自身代謝不完善，嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的原核細(xì)胞型微生物★流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、恙蟲(chóng)病、Q熱

衣原體：嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，有獨(dú)特發(fā)育周期，能通過(guò)細(xì)菌濾器，原核細(xì)胞型微生物★ 沙眼:感染眼結(jié)膜上皮細(xì)胞→增殖，包涵體→局部炎癥→早期流淚、有粘液膿性分泌物、結(jié)膜充血及濾泡增生→后期結(jié)膜瘢痕、眼瞼內(nèi)翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜損害→影響視力或致盲包涵體結(jié)膜炎、泌尿生殖道感染、沙眼衣原體肺炎、性病淋巴肉芽腫

螺旋體：是一類細(xì)長(zhǎng)、柔軟、彎曲、運(yùn)動(dòng)活潑的原核細(xì)胞型微生物基本結(jié)構(gòu)及生物學(xué)形狀與細(xì)菌相似★梅毒，人是唯一傳染源，致病物質(zhì)為莢膜樣物質(zhì)，透明質(zhì)酸酶；后天通過(guò)性接觸傳播或者先天經(jīng)過(guò)母體傳播。

第四篇：微生物總結(jié)

第一章、緒論

巴斯得的貢獻(xiàn)：

1、徹底否定了“自生說(shuō)”

2、免疫學(xué)—預(yù)防接種

3、證實(shí)發(fā)酵是由微生物引起的3、巴斯德消毒法

柯赫貢獻(xiàn)：

1、證實(shí)炭疽病菌是炭疽病的病原菌

2、發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌

3、提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的病原菌——柯赫原則

4、固體培養(yǎng)基分離純化微生物的技術(shù)

5、配制培養(yǎng)基

微生物的5大共性：

1、體積小、面積大

2、吸收多、轉(zhuǎn)化快

3生長(zhǎng)旺、繁殖快

4、分布廣、種類多

5、適應(yīng)性強(qiáng)、易變異 第二章、微生物的純培養(yǎng)和顯微技術(shù)

一、涂布平板法作用：用于純種分離、篩選菌落、得到單菌落，對(duì)一些細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù) 五區(qū)劃線發(fā)作用：純化菌種、得到單菌落

搖瓶實(shí)驗(yàn)作用：菌種篩選、發(fā)酵實(shí)驗(yàn)、種子培養(yǎng)等 穿刺法的作用：保藏厭氧菌種、研究微生物的動(dòng)力 之字劃線法的作用：保藏菌種、單菌落的獲取

二、斜面菌種保藏法：保藏期限3個(gè)月以內(nèi)，沙土管保藏法：保藏期限1~10年主要適用于產(chǎn)孢子的，如芽孢桿菌、放線菌 石蠟油封藏法：保藏期限1~2年

真空冷凍干燥法：保藏期限5~10年，液氮超低溫病結(jié)法：保藏期限5~10年 第三章

一、細(xì)胞壁：根據(jù)細(xì)胞壁將原核生物分為革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌兩種。

1、革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁的特點(diǎn)：厚度大（20~80nm）和化學(xué)組分簡(jiǎn)單，一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。

革蘭氏陽(yáng)性菌的機(jī)械阻攔與保護(hù)作用有肽聚糖完成。磷壁酸：是結(jié)合在革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁上的一種酸性多糖，主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。

磷壁酸為革蘭氏陽(yáng)性菌所特有。對(duì)于革蘭氏陽(yáng)性菌而言，抗原性由磷壁酸完成。磷壁酸的主要生理功能：1）、其磷酸分子上較多的負(fù)電荷可提高細(xì)胞周圍鎂離子的濃度進(jìn)入細(xì)胞后就可以保證細(xì)胞膜上一些需鎂離子的合成提高活性 2）儲(chǔ)藏磷元素 3）、增強(qiáng)某些致病菌如A族鏈球菌對(duì)宿主細(xì)胞的黏連、避免被白細(xì)胞吞噬以及補(bǔ)抗體的作用 4）賦予革蘭氏陽(yáng)性菌以特異的表面抗原 5）可作為噬菌體的特異性吸附受體

6）調(diào)節(jié)細(xì)胞自溶素的活力，借以防止細(xì)胞自溶而死亡

2、革蘭氏陰性菌：由肽聚糖和外膜組成，外膜中的脂多糖是革蘭氏陰性菌所特有的 外壁層可分為3層：外層為脂多糖層，中層為磷脂層，內(nèi)層為脂蛋白 革蘭氏陰性菌外膜的作用：1）控制細(xì)胞透性

2）提高鎂離子濃度 3）決定細(xì)胞的抗原性

4）類脂A是類毒素的主要成分

脂多糖：是位于革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁最外層的一層較厚的類脂多糖物質(zhì)，由類脂A、核心多糖和O-特異側(cè)鏈

脂多糖的功能：1）其中類脂A是革蘭氏陰性菌致病物質(zhì)——內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ) 2）因其負(fù)電荷較強(qiáng)，有吸附鎂離子、鈣離子等陽(yáng)離子以提高其在細(xì)胞表面的濃度作用 3)由于LPS結(jié)構(gòu)多變，決定了革蘭氏陰性菌細(xì)胞表面抗原決定族 4）是許多噬菌體在在細(xì)胞表面的吸附受體 5）具有控制某些物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的部分選擇性屏障功能

3、革蘭氏染色機(jī)制：通過(guò)結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞膜內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。革蘭氏陽(yáng)性菌由于其細(xì)胞壁較厚，肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密，故與乙醇與丙酮作脫色處理時(shí)因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會(huì)溶出縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其任呈紫色。反之革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層的類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差，遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物的溶出，因此，通過(guò)乙醇脫色后細(xì)胞退成無(wú)色。這時(shí)，再經(jīng)沙黃等紅色染料進(jìn)行復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈現(xiàn)紅色，而革蘭氏陽(yáng)性則保留紫色。

二、芽孢

芽孢：某些細(xì)胞在生長(zhǎng)發(fā)育后期，在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強(qiáng)的休眠體

芽孢的特點(diǎn)：1）芽孢內(nèi)新陳代謝幾乎停止，處于休眠狀態(tài)，但保持潛在萌發(fā)力

2）芽孢不具生殖能力，僅只是一種休眠體 3）抗逆性最強(qiáng)的生命體之一，有抗熱、抗化學(xué)藥物、抗輻射和抗靜水壓能力 4）含水量低，壁厚而致密，通透性差，不易著色，折光性強(qiáng)

5）一個(gè)孢子萌發(fā)只產(chǎn)生一個(gè)營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的細(xì)胞 芽孢的耐熱機(jī)制：芽孢的耐熱性在于芽孢衣對(duì)多價(jià)陽(yáng)離子和水分的透性很差和皮層的離子強(qiáng)度很高，從而是皮層產(chǎn)生極高的滲透壓去奪取芽孢核心中的水分，其結(jié)果造成皮層的充分膨脹，而核心部分的細(xì)胞質(zhì)卻變得高度失水，因此，導(dǎo)致核心具極強(qiáng)的耐熱性。第四章微生物的營(yíng)養(yǎng)要求

一、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：能夠滿足微生物機(jī)體生長(zhǎng)、繁殖和完成各種生理?xiàng)l件所需的物質(zhì) 營(yíng)養(yǎng)：微生物獲得U和利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的過(guò)程

二、1、碳源：是在微生物生長(zhǎng)過(guò)程中為微生物提供碳素來(lái)源的物質(zhì)。為微生物提供碳元素與能量

2、氮源：為微生物提供氮元素來(lái)源，只有少數(shù)自養(yǎng)微生物能利用銨鹽、硝酸鹽同時(shí)作為氮源與能源（是構(gòu)成細(xì)胞中核酸和蛋白質(zhì)的重要元素）氮源的類型：無(wú)機(jī)氮、有機(jī)氮、氣體氮

3、無(wú)機(jī)鹽：作用：作為酶活性中心的組成部分、維持生物大分子和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、調(diào)節(jié)并維持細(xì)胞的滲透壓、控制細(xì)胞的氧化還原電位和作為某些微生物生長(zhǎng)的能源物質(zhì)。

4、生長(zhǎng)因子：通常是指那些微生物生長(zhǎng)所必需的的且需量很少，但微生物自身不能合成或合成量不足以滿足機(jī)體生長(zhǎng)需要的有機(jī)化合物

5、水：生理功能：1)起到溶劑與運(yùn)輸介質(zhì)的作用

2）參與細(xì)胞內(nèi)一系列的化學(xué)反應(yīng)

3）維持蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子穩(wěn)定的天然構(gòu)象

4）是良好的導(dǎo)熱體，調(diào)節(jié)細(xì)胞溫度 微生物的營(yíng)養(yǎng)類型分類（P84表格）

三、1、培養(yǎng)基的配制原則：1）目標(biāo)明確

2）營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)

3）物理化學(xué)條件適宜

4）原料來(lái)源的選擇

2、C多有助于次生物質(zhì)分泌，N多有助于個(gè)體生長(zhǎng)發(fā)育

3、PH：細(xì)菌：7.0~8.0

酵母菌：4.0~6.0

放線菌：8.0~9.0

霉菌：4.0~5.8

4、維持培養(yǎng)基PH的方法：1）加緩沖劑一氫和二氫磷酸鹽的混合物

2）備用堿：CaCO3、CaHCO3 3）弱酸鹽：檸檬酸鹽、乳酸鹽

4）液氨或鹽酸

5、原料來(lái)源：1）經(jīng)濟(jì)節(jié)約原則：以粗代精、以廢代好、以簡(jiǎn)代繁

2）原料來(lái)源要廣泛

3）原料藥易處理、處理成本要低

4）原料處理后廢物、廢液、廢氣要少

6、選擇和配制培養(yǎng)基的方法四種：生態(tài)模擬、查閱文獻(xiàn)、精心設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)比較

四、培養(yǎng)基的分類

1、按成分不同劃分：天然培養(yǎng)基：優(yōu)點(diǎn)為取材方便，營(yíng)養(yǎng)豐富，種了多樣，配制方便合成培養(yǎng)基：優(yōu)點(diǎn)：組分精確，重復(fù)性好確定：較昂貴，一般用于研究

2、根據(jù)物料狀態(tài)劃分：固體培養(yǎng)基：一般用于進(jìn)行微生物的分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)及菌種保藏半固體培養(yǎng)基：用于觀察微生物的運(yùn)動(dòng)特征、分類鑒定及噬菌體效價(jià)滴定液體培養(yǎng)基：用于大量培養(yǎng)微生物，研究生理代謝

3、按用途劃分：基礎(chǔ)培養(yǎng)基：用于培養(yǎng)野生型微生物和原養(yǎng)型微生物 加富培養(yǎng)基（營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基）：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制成的一類營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基作用一般為分離某種微生物而專門設(shè)計(jì)或培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求嚴(yán)謹(jǐn)?shù)漠悩游⑸?鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)可中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì) 選擇培養(yǎng)基：根據(jù)不同種類微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，有利于所需要微生物的生長(zhǎng)，有利于所需微生物的生長(zhǎng) 第五章、微生物代謝

微生物發(fā)酵過(guò)程的三個(gè)階段：脫氫（電子）、遞氫（或電子）和受氫（或電子）發(fā)酵：是指微生物細(xì)胞將有機(jī)物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某些中間產(chǎn)物，同時(shí)釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物

代謝：生命存在的基本特征，是微生物體內(nèi)所進(jìn)行的全部生化反應(yīng)的總稱。主要由分解代謝和合成代謝兩個(gè)過(guò)程組成。分解代謝：是指將大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì)，并在這個(gè)過(guò)程中產(chǎn)生能量（都是氧化反應(yīng)）合成代謝：是指細(xì)胞利用簡(jiǎn)單的小分子物質(zhì)合成復(fù)雜大分子，在這個(gè)過(guò)程要消耗能量（都是還原反應(yīng)）

代謝途徑都是有一系列連續(xù)的酶促反應(yīng)構(gòu)成的

P102~P105EMP HM ED途徑的特點(diǎn)功能以及途徑路線

根據(jù)氧化還原反應(yīng)電子受體的不同可將發(fā)酵和呼吸分為有氧和無(wú)氧呼吸兩種 P108 TCA途徑圖

TCA循環(huán)特點(diǎn)：1）氧雖然不直接參與其中反應(yīng)，但必需在有氧條件下運(yùn)行

2）每個(gè)丙酮酸產(chǎn)生15個(gè)ATP 3）位于一切分解代謝與合成代謝的樞紐地位，可為生物合成提供各種碳價(jià)原料

TCA的生理意義：1）為細(xì)胞提供能量

2）各種能源物質(zhì)徹底氧化的共同代謝途徑（對(duì)于微生物來(lái)說(shuō)）3）物質(zhì)轉(zhuǎn)化樞紐

無(wú)氧呼吸：電子受體不是氧氣而是外源無(wú)機(jī)物與部分簡(jiǎn)單小分子有機(jī)物

發(fā)酵作用：沒(méi)有外源電子受體，底物具有的能量只釋放一小部分，合成少量ATP 三種磷酸化：底物水平磷酸化，高能磷酸化，氧化磷酸化

光合磷酸化的特點(diǎn)：1）光驅(qū)使下電子自菌綠素上逐出后經(jīng)類似呼吸鏈又回到菌綠素

2）產(chǎn)還原力[H]和產(chǎn)ATP分別進(jìn)行，還原力來(lái)自于H2O等無(wú)機(jī)物

3）不產(chǎn)生氧氣 合成代謝：微生物利用能量代謝所產(chǎn)生的能量、中間代謝產(chǎn)物以及從外界吸收的小分子合成復(fù)雜細(xì)胞物質(zhì)的過(guò)程

P118~P119 CO2固定路線圖

藍(lán)細(xì)菌孤單的抗氧化保護(hù)機(jī)制：1）分化出特殊的還原性異形胞

2）非異形胞藍(lán)細(xì)菌固氮酶的保護(hù)將固氮與光合進(jìn)行時(shí)間上分隔

微生物固氮反應(yīng)6要素：1）ATP的供應(yīng)

2)還原力[H]及傳遞氫載體

3）固氮酶

4）還原底物——氮?dú)?/p>

5）鎂離子

6）嚴(yán)格厭氧微環(huán)境

聯(lián)合固氮菌：指必需生活在植物根莖葉，動(dòng)物腸道等處才能進(jìn)行固氮的微生物，不形成類似根瘤的共生結(jié)構(gòu) 微生物的代謝調(diào)節(jié)主要有兩種類型：一是酶活性的調(diào)節(jié)，即調(diào)節(jié)已經(jīng)存在的酶分子的活性，是酶在化學(xué)水平的變化。另一類是酶合成的調(diào)節(jié)，即調(diào)節(jié)酶分子的合成量，是遺傳水平發(fā)生的變化 第六章

一、生長(zhǎng)曲線延滯期

特點(diǎn)：1）生長(zhǎng)速率常數(shù)為零，細(xì)胞數(shù)目不增加或增加很小

2）細(xì)胞形態(tài)變大或 增長(zhǎng)許多桿菌可長(zhǎng)成絲狀

3）合成代謝十分活躍，核糖體、酶類和ATP 的合成加速產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶

4）對(duì)外界不良條件如NaCl溶液，溫度和抗 生素等理化因素反應(yīng)敏感

出現(xiàn)原因：1）微生物接種到一個(gè)新的環(huán)境，暫缺乏足夠的能量和必需的生長(zhǎng)因子

2）“種子”老化即處于未對(duì)數(shù)期或種子未活化

3）接種時(shí)損傷

影響其長(zhǎng)短的因素與實(shí)踐意義：1）接種齡：對(duì)數(shù)期種子延滯期短，延滯期或衰亡期的種子延滯期較長(zhǎng)

2）接種量：接種量大，延滯期較短，接種量小，延滯期較長(zhǎng)

3）培養(yǎng)基成分：培養(yǎng)基成分豐富的延滯期較短，培養(yǎng)基成分與種子培養(yǎng)基一致的延滯期較短

二、生長(zhǎng)曲線指數(shù)期

特點(diǎn)：1）生長(zhǎng)速率最快，細(xì)胞呈指數(shù)增長(zhǎng)

2）生長(zhǎng)速率恒定

3）代謝旺盛，細(xì)胞組分平衡發(fā)展

4）群體的生理特性一致

影響指數(shù)期的意義：1）菌種：不同菌種代時(shí)差異極大

2）營(yíng)養(yǎng)成分：營(yíng)養(yǎng)越豐富代時(shí)越短

3）營(yíng)養(yǎng)物濃度：影響微生物的生長(zhǎng)速率和生長(zhǎng)總量

4）培養(yǎng)溫度：影響微生物的生長(zhǎng)速率和生長(zhǎng)總量

指數(shù)期的實(shí)踐意義：1）是代謝、生理研究的良好材料

2)是增殖噬菌體的最適宿主菌齡

4）革蘭氏染色是采用此期微生物

生長(zhǎng)曲線穩(wěn)定期特點(diǎn)：1）活細(xì)胞總數(shù)維持不變即新增殖的細(xì)胞數(shù)與衰亡的細(xì)胞數(shù)相等，菌體總數(shù)達(dá)到最高點(diǎn)

2）細(xì)胞生長(zhǎng)速率為零

3）細(xì)胞生理上處于衰老，代謝活力鈍化，細(xì)胞成分合成緩慢，革蘭氏染色發(fā)生變化

三、生長(zhǎng)曲線衰亡期

特點(diǎn)：細(xì)胞以指數(shù)速率死亡，有時(shí)細(xì)胞速率的降低是由于抗性細(xì)胞的積累，細(xì)胞變形退化，有的發(fā)生自溶，革蘭氏染色發(fā)生變化

影響衰亡期的因素及實(shí)踐意義：1）與菌種的遺傳特性有關(guān)：有些細(xì)菌的培養(yǎng)經(jīng)歷所有的各個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期，幾天以后死亡，有細(xì)菌培養(yǎng)基個(gè)月乃至幾年以后任然有一些貨細(xì)胞

2）與是否產(chǎn)芽孢有關(guān)：產(chǎn)芽孢的細(xì)菌更易幸存下來(lái)

3）與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和有毒物質(zhì)有關(guān)：補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)和能源，以及中和環(huán)境毒性，可以減緩死亡細(xì)胞的死亡速率，延長(zhǎng)細(xì)菌培養(yǎng)物的存貨時(shí)間

四、分批培養(yǎng)：是指將微生物置于一定容積的的培養(yǎng)基中，經(jīng)過(guò)生長(zhǎng)培養(yǎng)，最后一次收獲培養(yǎng)方式 連續(xù)培養(yǎng)：在一個(gè)恒定容積的的流動(dòng)系統(tǒng)中培養(yǎng)微生物，一方面以一定速率加入新的培養(yǎng)基，另一方面又以相同的速率流出培養(yǎng)物（菌體和代謝產(chǎn)物）

連續(xù)發(fā)酵的優(yōu)點(diǎn)：1）高效

2）產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定

3）節(jié)約了大量動(dòng)力、人力、水和蒸汽，且使水、汽、電的負(fù)荷均衡合理

連續(xù)發(fā)酵的缺點(diǎn)：1）菌種易退化

2）易污染雜菌 3）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率一般 同步生長(zhǎng)：就是指在培養(yǎng)物中所有微生物細(xì)胞都同一生長(zhǎng)階段，并都能同時(shí)分裂的生長(zhǎng)方式 同步培養(yǎng)法包括誘導(dǎo)法與選擇法

誘導(dǎo)法：是采用物理、化學(xué)一男子使微生物生長(zhǎng)到某一階段而停下來(lái)，使所有細(xì)菌都達(dá)到這個(gè)階段時(shí)再使其生長(zhǎng) 恒濁器：根據(jù)培養(yǎng)器內(nèi)微生物的生長(zhǎng)密度并借光電控制系統(tǒng)來(lái)控制培養(yǎng)液流速，以取得菌體密度高，生長(zhǎng)速度恒定的微生物細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)

恒化器：與恒濁器相反，是一種設(shè)法使培養(yǎng)液流速保持不變 最高生長(zhǎng)速率條件下進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖的一種連續(xù)培養(yǎng)裝置 裝置

控制對(duì)象

培養(yǎng)基

培養(yǎng)基流速

生長(zhǎng)速率

產(chǎn)物

應(yīng)用范圍

恒濁器

菌體密度(內(nèi)控制)

無(wú)限制生長(zhǎng)因子

不恒定

最高速率

大量菌體或與菌體平行的代謝產(chǎn)物

生產(chǎn)為主

恒化器

培養(yǎng)基流速（外控制）

有限制生長(zhǎng)因子

恒定

低于最高速率

不同生長(zhǎng)速率的菌體、并使微生物始終在低于其

實(shí)驗(yàn)室為主

五、防腐：是在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下防止或抑制微生物生長(zhǎng)的一種措施，它能防止食物腐敗或防止其他物質(zhì)霉變 消毒：利用某種殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有微生物的一種措施，它可以起到防止感染或傳播的作用

滅菌：利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物的一種措施 第七章

1、病毒的特點(diǎn):1)形態(tài)及其微小，一般能通過(guò)細(xì)菌濾器必須自電鏡下才能觀察

2）沒(méi)有細(xì)胞構(gòu)造，主要成分僅為核酸與蛋白質(zhì)

3）每一種病毒致含有一種核酸

DNA和RNA 4）依靠自身的核酸進(jìn)行復(fù)制，一病毒的核酸和蛋白質(zhì)等原件實(shí)現(xiàn)裝配，實(shí)現(xiàn)繁殖

5）嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，缺乏完整的酶和產(chǎn)能系統(tǒng)，只能利用宿主細(xì)胞的現(xiàn)成的代謝系統(tǒng)合成病毒自身的核酸和蛋白質(zhì)

6）在離體條件下，能以無(wú)生命力的大分子狀態(tài)存在，并可長(zhǎng)期保持器侵染力

7）對(duì)一般抗生素不敏感，但對(duì)干擾素敏感

8）有些病毒的基因可以整合到宿主的基因中去

2、病毒與活細(xì)胞的區(qū)別：1）結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)

2）幾乎所有的毒粒中只有DNA或RNA一種類型的核酸

3）在細(xì)胞外不能增殖

3、得到一步生長(zhǎng)曲線的實(shí)驗(yàn)：二院培養(yǎng)系統(tǒng)：1）低濃度病毒宿主細(xì)胞(給幾分鐘時(shí)間侵染)2）高倍稀釋病毒與細(xì)胞的培養(yǎng)物

3）保濕培養(yǎng)

4）不同時(shí)間取樣，涂布平板，得到效價(jià)

5）以時(shí)間為橫坐標(biāo)，病毒濃度為縱坐標(biāo)繪圖

4、烈性噬菌體：感染宿主后增殖裂解宿主 溶原性噬菌體（溫和性細(xì)菌）：感染后大多數(shù)可整合到宿主基因中少數(shù)以染色體外獨(dú)立存在

5、病毒分為真病毒和亞病毒，亞病毒又分為類病毒、衛(wèi)星病毒、衛(wèi)星RNA、朊病毒 類病毒：是一種只包含RNA的病毒，只在植物中出現(xiàn)，分質(zhì)量極小，不能編碼蛋白質(zhì) 衛(wèi)星病毒：寄生于與之無(wú)關(guān)的輔助病毒的基因產(chǎn)物的病毒 衛(wèi)星RNA：是指必需依賴一些輔助病毒進(jìn)行復(fù)制的小分子單鏈RNA，他們被包藏在輔助病毒的殼體中

朊病毒：是一類能引起哺乳動(dòng)物亞急性海綿樣腦病的病原因子 第八章

P204頁(yè)Griffith轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)等3個(gè)實(shí)驗(yàn)

基因組：是指位于細(xì)菌或細(xì)胞中的所有基因 大腸桿菌基因組的特點(diǎn)：1）遺傳信息的連續(xù)性

2）功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu)

3）結(jié)構(gòu)基因的單拷貝及rRNA基因的多拷貝

4）基因組重復(fù)序列少而短

質(zhì)粒：是一種獨(dú)立于染色體外，能進(jìn)行自主復(fù)制的細(xì)胞質(zhì)遺傳因子，主要存在于各種微生物中

轉(zhuǎn)座子：是位于染色體或質(zhì)粒上的一種能改變自身位置的DNA序列，廣泛分布于原核和真核細(xì)胞中

質(zhì)粒的主要類型：致育因子、抗性因子、Col質(zhì)粒、毒性質(zhì)粒、代謝質(zhì)粒、隱秘質(zhì)粒

致育因子：又稱F質(zhì)粒，其大小約100kb，這是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象（結(jié)合作用）有關(guān)的質(zhì)粒

抗性因子：是另一類普遍而重要的質(zhì)粒，主要包括抗藥性和抗重金屬兩大類，簡(jiǎn)稱R質(zhì)粒 Col質(zhì)粒：該質(zhì)粒含有編碼大腸菌素的基因，大腸菌素是一種細(xì)菌蛋白，只殺死近緣且不含Col質(zhì)粒的菌株，而宿主不受其產(chǎn)生的細(xì)菌素的影響

毒性質(zhì)粒：致病菌中攜帶的能引起致病性的質(zhì)粒，這些質(zhì)粒具有編碼毒素的基因 代謝質(zhì)粒：攜帶有能降解某些基質(zhì)的酶的基因的質(zhì)粒

隱秘質(zhì)粒：不顯示任何表型效應(yīng)，它們的存在只有通過(guò)物理方法檢測(cè)出來(lái) 原核生物中對(duì)的轉(zhuǎn)座因子有3種類型：插入順序（IS）、轉(zhuǎn)座子（Tn）、病毒（Mu）轉(zhuǎn)座的遺傳學(xué)效應(yīng)：插入突變、產(chǎn)生染色體畸變、基因的移動(dòng)和重排

基因突變：一個(gè)基因內(nèi)部遺傳結(jié)構(gòu)或DNA序列的任何改變包括一對(duì)或幾對(duì)堿基的缺失、插入或置換，而導(dǎo)致的遺傳變化

堿基變化對(duì)遺傳信息改變的四種類型：同義突變，錯(cuò)義突變，無(wú)義突變，移碼突變 同義突變：是指某個(gè)堿基的變化沒(méi)有改變產(chǎn)物氨基酸序列的密碼子變化

錯(cuò)義突變：是指堿基序列的改變引起了產(chǎn)物氨基酸的改變（可能為致死突變）無(wú)義突變：是指某個(gè)堿基的改變，使代表某種氨基酸的密碼子變?yōu)榈鞍踪|(zhì)的合成的終止密碼子，蛋白質(zhì)的合成提前終止，產(chǎn)生短截的蛋白質(zhì)

移碼突變：由于DNA序列中發(fā)生1~2個(gè)核苷酸的缺失或插入，使翻譯的閱讀框發(fā)生改變，從而導(dǎo)致改變位置以后的氨基酸序列的完全變化（一般為致死突變）

表型變化的突變型：營(yíng)養(yǎng)缺陷型，抗藥性突變型，條件致死突變型，形態(tài)突變型 營(yíng)養(yǎng)缺陷型：缺乏合成其生存所必需的營(yíng)養(yǎng)物的突變型，只有從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營(yíng)養(yǎng)或前體物才能生長(zhǎng) 影印平板P218 抗藥性突變型：是由于基因突變使菌株對(duì)某種或某幾種藥物，特別是抗生素產(chǎn)生抗性的一種突變型

條件致死突變型：是指在某一條件下具有致死效應(yīng)，而在另一條件下沒(méi)有致死效應(yīng)的突變型 形態(tài)突變型：是指造成形態(tài)改變的突變型（包括菌落形態(tài)、顏色一件噬菌斑形態(tài)）

自發(fā)突變的緣由：1）NDA復(fù)制過(guò)程產(chǎn)生的錯(cuò)誤

2）堿基互變異構(gòu)體的相互轉(zhuǎn)變

3）轉(zhuǎn)座子的隨機(jī)插入基因

自發(fā)突變的特性：1）非對(duì)應(yīng)性

2）稀有性

3）規(guī)律性

4）獨(dú)立性

5）遺傳和回復(fù)

6）可誘變性

誘發(fā)突變：堿基類似物、插入染料、直接與DNA其化學(xué)反應(yīng)的誘變劑、輻射和熱、生物誘變因子

DNA損傷修復(fù)：光復(fù)活作用、切除修復(fù)、重組修復(fù)、SOS修復(fù) 光復(fù)活：由phr基因編碼的光解酶進(jìn)行

切除修復(fù)：又稱暗修復(fù)，該修復(fù)系統(tǒng)除了堿基錯(cuò)誤配對(duì)和單核苷酸插入不能修復(fù)外，幾乎其他DNA損傷均可修復(fù)，是細(xì)胞內(nèi)主要修復(fù)系統(tǒng)

重組修復(fù)：是一種越過(guò)損傷而進(jìn)行的修復(fù)，這種修復(fù)不將損傷堿基除去

SOS修復(fù)：是DNA分子受到較大范圍的重大損傷時(shí)誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種應(yīng)急反應(yīng) P226~227 高頻重組菌等

轉(zhuǎn)導(dǎo)：是由病毒介導(dǎo)的細(xì)胞間進(jìn)行遺傳交換的一種方式

供體DNA進(jìn)入受體的命運(yùn)：1）發(fā)生穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子

2）流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)：即不被降解，又不被整合，也不被復(fù)制

3）外源DNA被降解，轉(zhuǎn)導(dǎo)失敗

遺傳轉(zhuǎn)化：是指同源或異源的游離DNA分子被自然或人工感受態(tài)細(xì)胞攝取，并得到表達(dá)的水平方向的基因轉(zhuǎn)移過(guò)程

4個(gè)影響供體DNA與受體細(xì)胞間的最初相互作用：1）轉(zhuǎn)化片段的大小

2）形態(tài)：雙鏈DNA 3）濃度：在在臨界值出現(xiàn)之前成正比

4）生理狀態(tài)：感受器——?jiǎng)偼Ｖ笵NA合成 微生物育種：誘變育種、代謝育種、體內(nèi)基因組育種 代謝育種：改變代謝途徑、擴(kuò)展代謝途徑、構(gòu)建新的代謝途徑 體內(nèi)基因組育種：原生質(zhì)體融合，雜交育種

融合子的判別：1）親本遺傳標(biāo)記的互補(bǔ)的2）親本滅活后性狀的恢復(fù)

3）具有雙親本的熒光標(biāo)記 第九章

順式作用元件：位于基因的旁側(cè)，可以調(diào)控影響基因表達(dá)的核酸序列。其本身并不編碼蛋白質(zhì)

反式作用因子：通常為蛋白質(zhì)或RNA，其特征是可以合成并擴(kuò)散到目標(biāo)場(chǎng)所發(fā)揮作用 正調(diào)控：控制因子通過(guò)與啟動(dòng)子原件結(jié)合來(lái)激活基因的表達(dá) 負(fù)調(diào)控：抑制物與操縱基因結(jié)合起來(lái)阻止基因表達(dá) P248 操縱子的結(jié)構(gòu)

P249圖

P250 圖

啟動(dòng)子：是RNA聚合酶和CAP的結(jié)合位點(diǎn)，控制著轉(zhuǎn)錄的起始，一個(gè)啟動(dòng)子可以啟動(dòng)多個(gè)基因的表達(dá)

操縱基因：DNA上的一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，阻抑物能與之結(jié)合抑制相鄰啟動(dòng)子的起始轉(zhuǎn)錄，操縱基因不表達(dá)任何東西 終止子：控制轉(zhuǎn)錄結(jié)束

轉(zhuǎn)錄因子：轉(zhuǎn)錄起始過(guò)程中RNA聚合酶所需要的輔助因子

轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控:1）DNA的結(jié)構(gòu)

2）RNA聚合酶的功能

3）蛋白質(zhì)因子及其他小分子配基的相互作用

第五篇：微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本要求知識(shí)點(diǎn)

病毒是一類體積微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、具有嚴(yán)格的寄生于活細(xì)胞的微小生物，它們具有下列幾種基本特征：

1、病毒的基本結(jié)構(gòu)是由核酸（基因組）與蛋白質(zhì)組成，由DNA或RNA組成核心，外有一蛋白外殼（核殼），有些病毒在核殼外面另有一層脂蛋白組成的包膜包圍著。

2、病毒只在活細(xì)胞中增殖，因?yàn)椴《救狈ν暾?xì)胞器等必要裝置，所以必須依賴宿主細(xì)胞提供高分子合成裝置和能量。

3、病毒非常微小，無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，絕大多數(shù)不能用光學(xué)顯微鏡檢查，而必須用電子顯微鏡才能察見(jiàn)。核酸化學(xué)：

DNA是脫氧核糖核酸的英文縮寫。RNA與DNA差別在核糖2'位帶有一個(gè)羥基。DNA ①DNA起儲(chǔ)存遺傳信息作用，并以核苷酸排列順序形式儲(chǔ)存遺傳信息。②由4種核苷酸組成DNA分子，由堿基互補(bǔ)維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。

③在動(dòng)植物、細(xì)菌、真菌中都含有DNA，但在病毒中（非細(xì)胞型微生物）不一定含DNA。④DNA為長(zhǎng)絲狀分子互相糾纏，其溶液十分粘稠。

⑤它對(duì)紫外線有最強(qiáng)的吸收，通常用260nm波長(zhǎng)測(cè)DNA溶液濃度，它在近中性環(huán)境中帶負(fù)電核，DNA變性后OD值會(huì)升高。

⑥因DNA 不溶于乙醇，常用二倍量沉淀DNA ⑦在變性溫度時(shí)，它的粘性突然降低。

⑧ 淬火是為了保持DNA單鏈狀態(tài)。DNA變性后溶液慢慢冷卻，DNA會(huì)自動(dòng)恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)。說(shuō)法錯(cuò)誤的：

（1）DNA和RNA的化學(xué)結(jié)構(gòu)堿基G與C通過(guò)2對(duì)氫鍵配對(duì)構(gòu)成DNA分子說(shuō)法錯(cuò)誤的。（2）與DNA分子相比，RNA分子難水解的看法也不對(duì)。（3）許多質(zhì)粒可在宿主之間進(jìn)行轉(zhuǎn)移的說(shuō)法是不對(duì)的。形狀：

（1）TRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)呈三草形。

（2）在細(xì)胞內(nèi)RNA分子中rRNA占比例最大。（3）DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)中呈左手雙螺旋的是Z構(gòu)象。

DNA結(jié)構(gòu)、性質(zhì)：在真菌中網(wǎng)崎片段一般為100～200核苷酸。噬菌體核酸最常見(jiàn)的是雙鏈線狀DNA。反式作用因子具有的DNA識(shí)別或DNA結(jié)合域，主要有 螺旋/轉(zhuǎn)折/螺旋（T/H/T）,鋅指結(jié)構(gòu)，堿性-亮氨酸拉鏈（bZIP），堿性-螺旋/環(huán)/螺旋（bH/L/H）。

真核生物中的瑞粒酶是由RNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成的。一般真核生物染色體上有5種主要的組蛋白，其中親和力最強(qiáng)的兩種是H3 H4。DNA的復(fù)制和修復(fù)：

（1）細(xì)胞每分裂一次，染色體DNA就合成一次，新DNA是按原DNA分子合成。

（2）DNA分子拆（ca）開(kāi)成兩條鏈，依每一條單鏈合成一條新單鏈，成為半保留復(fù)制。（3）在合成DNA時(shí)限制性核酸內(nèi)切酶不是合成DNA的必要條件。

（4）DNA多聚酶只能結(jié)合在一長(zhǎng)段DNA單鏈的一小段局部雙鏈結(jié)構(gòu)上，才能順利開(kāi)始DNA合成。（5）在DNA合成中單核苷酸分子必須順序以共價(jià)鏈連接在已形成核酸鏈3，末端的羥基上。

（6）在合成發(fā)生錯(cuò)誤時(shí)，DNA多聚酶會(huì)切除錯(cuò)誤核苷酸，在那個(gè)位置上重新加一個(gè)正確核苷酸。（7）在人工合成DNA時(shí)，只加一種或兩種三磷酸單核苷酸，那么合成就會(huì)停止在缺失的核苷酸位置上。在大腸菌DNA損傷修復(fù)時(shí)填補(bǔ)缺口最重要的酶是DNA聚合酶Ⅰ。DNA三個(gè)終止密碼子分別是UAA、UAG、UGA。

在大腸菌中DNA復(fù)制最主要的DNA聚合酶是DNA聚合酶Ⅲ。該酶的核心聚合酶中，具有3，3?外切酶活性。DNA修復(fù)過(guò)程中尿嘧啶 糖基酶系統(tǒng)不包括Sl核酸酶。

在逆轉(zhuǎn)錄酶的RNAaseH活性是一般DNA聚合酶所不具備的。在逆轉(zhuǎn)錄酶的最終產(chǎn)物雙鏈DNA的長(zhǎng)度較正鏈RNA稍長(zhǎng)。轉(zhuǎn)錄：

在生物體內(nèi)，RNA合成過(guò)程稱為轉(zhuǎn)錄。它（RNA）是按照儲(chǔ)存在DNA上遺傳信息合成。合成RNA時(shí)DNA雙鏈也要解旋，解旋部位稱啟動(dòng)子。

去掉RNA分子5，末端的磷酸，不起合成酶功能的作用。在刺激點(diǎn)突變，改變某些基因功能與DNA向RNA轉(zhuǎn)移無(wú)直接關(guān)系（？）

（1）大腸菌的RNA聚合酶由5個(gè)亞基，其笱腔釁舳幼饔謾￡（2）利福平作用該酶（聚合酶）庋腔稀￡

（3）RNA聚合酶Ⅰ主要是轉(zhuǎn)錄rRNA（構(gòu)成核糖體骨架的是rRNA）。Prt-mRNA內(nèi)含子的5，-末端一般是GU。

（4）RNA聚合酶Ⅱ主要是轉(zhuǎn)錄hnRNA。在真核基因啟動(dòng)子近側(cè)序列元件中，對(duì)轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)定位起關(guān)鍵作用的是TATA盒。

（5）放線菌素D能抑制DNA轉(zhuǎn)錄。編碼核糖體RNA的基因是一種中度重復(fù)序列的DNA序列。翻譯：

在合成各種不同RNA中：

（1）tRNA具有搬運(yùn)氨基酸功能。構(gòu)成核糖體骨架的是rRNA。mRNA直接決定蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。

（2）合成蛋白質(zhì)需4種核苷酸，排列組成遺傳信息，然后轉(zhuǎn)換成20種氨基酸，組成遺傳信息稱為翻譯。（3）3個(gè)核苷酸排列順序代表一種氨基酸密碼，表示蛋白質(zhì)合成開(kāi)始的密碼有一種。（4）在細(xì)菌里，依靠rRNA和mRNA之間一段互補(bǔ)序列能發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)合成開(kāi)始的位置。

（5）在核糖體上，有兩個(gè)位置上暴露出mRNA（直接決定蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)）分子相鄰的兩個(gè)密碼子，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成進(jìn)行到?jīng)]有攜帶任何一種氨基酸t(yī)RNA（具有搬運(yùn)功能）與其對(duì)應(yīng)，這說(shuō)明合成蛋白質(zhì)結(jié)束，并已開(kāi)始同一種蛋白質(zhì) 分子的合成。

（6）合成蛋白質(zhì)后，決定其空間結(jié)構(gòu)的是蛋白質(zhì)的氨基酸排列順序確定后，就能自動(dòng)折疊卷曲成一定的空間形狀。

（7）在原核生物核糖體是由16 SrRNA、23 SrRNA、5 SrRNA 組成，在真核生物核糖體的五種主要的組蛋白中，H1在進(jìn)化中最不保守。基因表達(dá)調(diào)空：

（1）氯霉素可與核糖體50S亞基結(jié)合并抑制蛋白質(zhì)合成。

（2）在基因5，上游基因內(nèi)或其3，下游序列中存在，能提高同一條DNA鏈上靶基因轉(zhuǎn)錄速率的遺傳控制元件是增強(qiáng)子。

（3）乳糖操縱（zong）子中結(jié)構(gòu)基因是LacA、LacY、LacZ。遺傳重組： 轉(zhuǎn)座子的功能有

（1）促進(jìn)染色體重排（2）促進(jìn)基因重復(fù)（3）促進(jìn)基因擴(kuò)增（4）造成缺失突變

在大腸遺傳重組中，同源重組需RecA蛋白質(zhì)。

一、核酸提取、純化、濃縮

1.用煮沸法從表達(dá)內(nèi)切酶A的大腸菌小量制備質(zhì)粒時(shí)不能省略酚-氯仿抽提。2.用煮沸法制備質(zhì)粒所用溶菌酶液是用TrisCL配制的。3.用乙醇沉淀溶于SDS中RNA時(shí)，要避免用乙酸鉀。4.小量制備DNA時(shí)不被限制酶切開(kāi)，應(yīng)用酚-氯仿抽提。

5.用異丙醇沉淀核酸與用乙醇相比，最明顯優(yōu)點(diǎn)是可減少溶液體積。

1、質(zhì)粒DNA提?。涸谟脡A裂解法少量提取質(zhì)粒DNA時(shí)，在緩沖液（Ⅰ液）中不含SDS。多數(shù)質(zhì)粒在自然狀態(tài)下是環(huán)狀鏈DNA。質(zhì)粒DNA純化方法有： ①離子交換分析； ②聚乙二醇分級(jí)沉淀； ③二凝膠過(guò)濾層析；

④氯化銫（se）-溴化乙錠梯度平衡離心。

質(zhì)粒具備有復(fù)制起點(diǎn)、抗生素抗性基因、有多種限制酶的單一切點(diǎn)、有較高的拷貝數(shù)。

2、NA凝膠電泳：要使大于2Kb的DNA片段在凝膠電泳中分辨率達(dá)最大，其電壓不應(yīng)超過(guò)5V/cm。在電泳中不同構(gòu)象DNA泳動(dòng)率通常是：超螺旋＞線性＞切口環(huán)狀。

二、PCR擴(kuò)增技術(shù)：

PCR反應(yīng)中變性、延伸溫度通常是：95℃、72℃。引物的Tm值估算每個(gè)A或T加2℃。

在PCR反應(yīng)中每一種dNTP的濃度通常是200umol/L，在PCR反應(yīng)中經(jīng)n次循環(huán)后理論上，DNA鏈的擴(kuò)增數(shù)目是2n倍。

在PCR反應(yīng)中引物只與靶序列的相應(yīng)部分結(jié)合的說(shuō)法是錯(cuò)誤的。

再此（PCR擴(kuò)增技術(shù)）反應(yīng)中礦物油不是必需的，用于擴(kuò)增未知序列的PCR是反向PCR。不對(duì)稱PCR法專用于制備單鏈DNA的擴(kuò)增。

在PCR反應(yīng)DNA堿基錯(cuò)配率較高，原因是TaqDNA聚合酶缺乏3'5，外切酶活性的亞基是逖腔￡

在體內(nèi)染色DNA復(fù)制時(shí)必須有RNA引物。在哺（bu）乳動(dòng)物細(xì)胞中負(fù)責(zé)合成線粒體DNA是DNA聚合酶r。RNA酶Tl可特異地作用于嘌呤核苷酸3，端磷酸并切割與相鄰核苷酸相連的磷酸二酯鍵。體內(nèi)DNA復(fù)制與體外PCR不同的是引發(fā)酶參與。與體內(nèi)DNA復(fù)制不相關(guān)酶是反轉(zhuǎn)錄酶。在細(xì)胞內(nèi)DNA合成正常進(jìn)行是RecA蛋白，而RecA蛋白不具有蛋白酶活性。在大腸菌DNA聚合酶Ⅰ klenow片段沒(méi)有5?5，外切酶活性。PCR反應(yīng)中的引物是DNA。反應(yīng)體系中Taq酶過(guò)多及引物過(guò)多都可引起非靶序列擴(kuò)增。

三、寡核苷酸探針合成、放射標(biāo)記、雜交 標(biāo)記合成寡核苷酸時(shí)dNTP的濃度不應(yīng)低于1umol/L。

探針是一段帶標(biāo)記的單鏈DNA，雙鏈DNA，cDNA，單鏈RNA。

雜交液的成分與雜交溫度間的關(guān)系正確的是甲酰胺42℃，水68℃。標(biāo)記探針的最有效簡(jiǎn)單方法是體外轉(zhuǎn)錄法。

標(biāo)記雙鏈DNA的3，端時(shí)，常用T4噬菌體DNA聚合酶，而不是大腸菌DNA聚合酶Ⅰklenow片段，主要是因?yàn)?'-5，外切酶活性高。

Western blotting所用探針一般是Ab。Southen blotting一般是用于DNA分子的雜交技術(shù)。在核酸分子雜交技術(shù)基礎(chǔ)之上又發(fā)展了一系列檢測(cè)DNA和RNA的技術(shù)，如Southen blotting、Western blotting、Dot blotting和菌落雜交。

大腸菌的DNA聚合酶Ⅰ用在切口平移法標(biāo)記DNA。在20℃～25℃下探針與靶序列退火速率最大，比解鏈溫度低情況下進(jìn)行雜交。

將外源性質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌中稱為轉(zhuǎn)化。外源性重組質(zhì)粒與感受態(tài)細(xì)菌混在一起，一般在42℃作短暫的熱刺激。cDNA基因克隆以mRNA為模板。

四、基因克隆載體：

柯(ke)斯質(zhì)粒載體具有噬菌體特性，能通過(guò)溶菌周期，形成子代噬菌體顆粒的說(shuō)法是不對(duì)的。

五、DNA序列測(cè)定：

與Sanger雙脫氧鏈終止DNA測(cè)序法相比，Maxam-Gilbert法所測(cè)序列為原DNA分子，這是其特點(diǎn)。

六、克隆子DNA定點(diǎn)誘變：

Mu噬菌體DNA轉(zhuǎn)座成分不含末端反向重復(fù)序列。

改變蛋白質(zhì)密碼序列的個(gè)別密碼子最好采用寡核苷酸介導(dǎo)誘變。

七、研究DNA與蛋白質(zhì)的方法：（1）凝膠阻滯試驗(yàn)（2）DhAsel足跡試驗(yàn)（3）甲基化干擾試驗(yàn)

（4）體內(nèi)足跡試驗(yàn)都是研究DNA與蛋白質(zhì)作用的方法。

1、Ag-Ab反應(yīng)結(jié)合力： 有4種力致使Ag-Ab結(jié)合，其中一以靜電引力為最重要。

2、Ag-Ab反應(yīng)特點(diǎn)（1）特異性（2）階段性（兩個(gè)階段）（3）可逆性（4）比例性（Ag與Ab結(jié)合比例以3：2為最佳）（Ag=3，Ab=2）。

3、影響Ag-Ab反應(yīng)的因素：（1）溫度（多數(shù)情況下反應(yīng)適宜溫度為37℃）、（2）PH值（一般反應(yīng)適宜PH值6～8）、（3）電解質(zhì)（多用0.85%鹽水）。

當(dāng)溫度升高反應(yīng)加快，電解質(zhì)濃度加大時(shí)反應(yīng)敏感性升高，無(wú)電解質(zhì)時(shí)Ag與Ab基本上不反應(yīng)。

參加反應(yīng)的Ag也有影響，Ag濃度超出適宜量使反應(yīng)的敏感性下降，過(guò)量的Ab會(huì)使反應(yīng)出現(xiàn)前滯現(xiàn)象。（4）血清交叉反應(yīng)：出現(xiàn)血清交叉反應(yīng)是說(shuō)明有共同抗原存在。

1、血清凝集反應(yīng)：采用顆粒狀A(yù)g（死菌或活菌，多用死菌）進(jìn)行的血清反應(yīng)。

①玻片凝集是其中一種，有許多優(yōu)點(diǎn)，最重要的優(yōu)點(diǎn)是報(bào)告結(jié)果快，多用于快速診斷。

②試管凝集是最多用的一種方法，從溫箱中放24小時(shí)后取出反應(yīng)管在室溫放2個(gè)少時(shí)再判定為宜，判定凝集滴度以凝集程度為（+ +）而定。

③協(xié)同凝集用SPA（葡萄球菌A蛋白）與IgG的Fc結(jié)合后進(jìn)行的凝集反應(yīng)。SPA與IgG結(jié)合具有種屬性，（容）易與兔血清中的IgG結(jié)合。用此試驗(yàn)主要查Ag。、抗球蛋白試驗(yàn)：是用檢查不完全Ab（半Ab），在試驗(yàn)中所用第二Ab是雙價(jià)抗體。基本方法是以試管凝集試驗(yàn)為基礎(chǔ)。

3、沉淀反應(yīng)：其中包括①環(huán)狀反應(yīng)、②絮狀反應(yīng)、③瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)等。沉淀反應(yīng)是用可溶性Ag。Ag-Ab沉淀反應(yīng)用的電泳是瓊脂電泳和對(duì)流電泳。環(huán)狀沉淀反應(yīng)的沉淀環(huán)是在Ag與Ab兩液面交界處形成，判定時(shí)間是3～7分鐘（環(huán)狀沉淀反應(yīng)）。用瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)做Ag分析時(shí)，其反應(yīng)溫度在4℃～6℃下進(jìn)行為宜，一般是72小時(shí)后判定結(jié)果。（瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)）

用其進(jìn)行診斷時(shí)多在18℃～22℃下進(jìn)行，瓊脂濃度多在1%～2%。

4、電泳： 用電泳做診斷多為瓊脂電泳和對(duì)流電泳。這類電泳反應(yīng)本質(zhì)屬于Ag-Ab沉淀反應(yīng)。

5、CFT（補(bǔ)體）： 參與CFT有兩個(gè)反應(yīng)系統(tǒng) 5種成分參加。其中補(bǔ)體（CFT用的補(bǔ)體是豚tun鼠血清中補(bǔ)體）是此反應(yīng)的紐帶。

它（CFT）與兩個(gè)系統(tǒng)的結(jié)合是非特異性的。在CFT中用豚鼠血清中補(bǔ)體，常用滅活溫度是56℃ 30分鐘，不同動(dòng)物的血清補(bǔ)體滅活溫度是不同的。CFT又分為①溫CFT、②冷CFT。

溫CFT：是指反應(yīng)溫度37℃ 30分鐘，主要是查IgG類Ab。反應(yīng)管出現(xiàn)不溶血現(xiàn)象是陽(yáng)性反應(yīng)。補(bǔ)體是多為1：15-1：20稀釋度。

冷CFT：是在4℃～6℃（瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)做Ag分析時(shí)溫度也是4℃～6℃）進(jìn)行此反應(yīng)多用于查Ag。此外，補(bǔ)體（CFT）還參與溶血反應(yīng)和溶菌反應(yīng)。

Ag是指能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答（產(chǎn)生Ab、細(xì)胞免疫等）物質(zhì)。

完全Ag是指既有免疫原性又有反應(yīng)原性的物質(zhì)，而只有反應(yīng)原性無(wú)免疫原性的物質(zhì)稱為半抗原。決定Ag特異性的最小化學(xué)亞單位稱為決定基（蔟cu），又稱為表位。依其與胸腺的關(guān)系又分Ti抗原和TD抗原。

Ti抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM抗體，TD抗原產(chǎn)生需有T細(xì)胞輔助。

蛋白質(zhì)是抗原性最強(qiáng)的物質(zhì)，其次是多糖、核酸、類脂是抗原性最弱物質(zhì)。人類血型抗原有A和B抗原，它們（A抗原和B抗原）刺激機(jī)體產(chǎn)生抗A和抗B抗體。人類血型抗原是同種異型抗原（同一種屬不同個(gè)體間的遺傳標(biāo)記不同）。器官移植所產(chǎn)生的排異反應(yīng)。也是因同種異型抗原所致。

佐劑在免疫中常常采用，它主要的機(jī)制是增強(qiáng)機(jī)體對(duì)Ag的免疫應(yīng)答。

Ag物質(zhì)刺激機(jī)體產(chǎn)生Ab，Ab本質(zhì)是Ig（免疫球蛋白）。Ig（免疫球蛋白）分為五大類：IgG、IgM、IgA、IgE、IgD。

Ig（免疫球蛋白）的基本結(jié)構(gòu)是：四條肽鏈（2條輕鏈-L鏈，2條重鏈-H鏈），由雙流鍵連接。L鏈（輕鏈）：可分為 可變部分（V）和恒定部分（C），即 V（可變部分）L（輕鏈）+ C（恒定部分）L（輕鏈）即VL + CL。

H鏈（重鏈）：也分可變部分（V）和恒定部分（C），即VH + CH，但CH（恒定部分、重鏈）部分又分為CH1、CH2、CH3。

IgM和IgE還有CH4部分。CH1與CH2區(qū) 之間為絞鏈區(qū)。

如果用木瓜酶水解后，將IgG水解2Fab和Fc。Fab是Ig與Ag結(jié)合部位，F(xiàn)c是可結(jié)晶部分。用胃蛋白酶水解IgG，可分為F(ab,)2和Fc部分，F(xiàn)(ab,)2是2個(gè)Fab連在一起的部分。

Ig（免疫球蛋白）的分類是根據(jù)H鏈（重鏈）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，主要依Fc部分（CH）。Ig同種型是指H鏈所具有的特性。

Ig（免疫球蛋白）分型是依據(jù)L鏈（輕鏈）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，可分為旰碗型。Ig的Fc段部分可與某些細(xì)胞的Fc受體結(jié)合，如巨噬細(xì)胞。

F(ab,)2部分是與Ag結(jié)合部，VH（重鏈）+ VL（V可變部分L輕鏈）是F(ab,)2中的高變區(qū)，直接與Ag能結(jié)合的部位。

人類5種Ig（免疫球蛋白）各具特色：IgG-血清中含量最高；IgM-分子量最大；

IgG：①在血清中含量最高；②它還是唯一能通過(guò)人類胎盤的；③IgG是抗感染的主要Ig(IgG抗病毒抗體)；④結(jié)合補(bǔ)體；

⑤起到條理作用；⑥結(jié)合SPA（葡萄球菌A蛋白）；⑦起到沉淀反應(yīng)；⑧中和反應(yīng)；⑨溶解細(xì)菌。(10)H抗原主要刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG類抗體；(11)肥達(dá)試驗(yàn)IgG類H抗體出現(xiàn)較晚；(12)IgG是人血清中的主要抗體(13)IgG是固定補(bǔ)體

IgM:①分子量最大；②早期多為IgM（IgM早期診斷）；③IgM是種屬發(fā)育過(guò)程中最原始的Ig（早期出現(xiàn)抗體的是IgM）；

④IgM有很高的結(jié)合價(jià)和凝集能力。⑤IgM是動(dòng)物機(jī)體在受到初次抗原刺激后最早產(chǎn)生的一種抗體球蛋白。

⑥抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM類抗體。⑦肥達(dá)試驗(yàn)IgM類()抗體出現(xiàn)較早。⑧IgM是感染早期出現(xiàn)的抗體 IgA：①有分泌型存在；②局部Ab；③IgA抗蛋白酶的水解作用。④IgA對(duì)大腸桿菌有一定抑制作用；⑤其含量?jī)H次于IgG。

⑥呼吸系統(tǒng)的非特異性防御機(jī)制機(jī)械物理性防御富含IgA IgE：①與肥大細(xì)胞膜上Fc受體結(jié)合（結(jié)合肥大細(xì)胞）；②是血清中含量最少的一類Ig； IgD：①在血清中含量很少；②因其性質(zhì)很不穩(wěn)定、半衰期很短，所以對(duì)其了解尚少。

補(bǔ)體是存在于人和動(dòng)物血清中，即可參加特異免疫又可參與非特異免疫 作用的大分子物質(zhì)。它有9種成分，11種蛋白組成。

9種成分是：C1（q.r.s）、C2 C3 C4 C5 C6 C7 C8 C9。它們對(duì)溫度很敏感，易破壞。補(bǔ)體系統(tǒng)包括補(bǔ)體及D、P、B等因子組成，約有20種成分。

補(bǔ)體的激活有兩個(gè)途徑：（1）傳統(tǒng)途徑（第一途徑）和旁路（第二途徑）。

傳統(tǒng)途徑（第一途徑）：可被Ag-Ab免疫復(fù)合物（IC）活化?；罨樞蚴牵篊1、C4、C2、C3、C5 C6 C7 C8 C9。

1、免疫組織器官：

（1）中樞：骨髓、胸腺、法氏囊（禽類）；

（2）周圍器官：脾臟、淋巴結(jié)、皮膚免疫系統(tǒng)、黏膜免疫系統(tǒng)。

2、免疫細(xì)胞：干細(xì)胞系、淋巴細(xì)胞系（TH、TC、TS、TDH、BC、漿細(xì)胞等）、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞、NK細(xì)胞等。

單核細(xì)胞及巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL-l。

3、免疫分子：TCR、BCR、CD、MHC、Ig、補(bǔ)體、細(xì)胞因子（IL-l、IL-2）

1、T細(xì)胞：是由一群細(xì)胞組成。T細(xì)胞定位于淋巴結(jié)副皮質(zhì)區(qū)?？煞謳兹?，其中TH細(xì)胞是很重要的免疫細(xì)胞，CD+4可被PHA、ConA、PWM、花生凝集素刺激活化進(jìn)行有絲分裂，幫助產(chǎn)生Ab，司管細(xì)胞免疫。TS細(xì)胞是抑制細(xì)胞，CD+8參加免疫調(diào)節(jié)。TC是細(xì)胞毒細(xì)胞。TH是成熟需要胸腺加工處理。

2、B細(xì)胞：B淋巴細(xì)胞主管體液免疫細(xì)胞。表面有抗原抗體受體（SmIg）。B細(xì)胞成熟骨髓中（相當(dāng)于禽類法氏囊）。

未成熟的B細(xì)胞最初可查到Ig的u鏈，活化B細(xì)胞可衍（yan）變成漿細(xì)胞，漿細(xì)胞能產(chǎn)生Ab和分泌Ab。PWM是可以刺激B細(xì)胞有絲分裂。人類外周血中T細(xì)胞和B細(xì)胞之比為2：1。

3、單核類細(xì)胞：無(wú)Ag受體，但能處理Ag，加工Ag，并向T細(xì)胞遞呈Ag。國(guó)際公認(rèn)的過(guò)敏反應(yīng)（變態(tài)反應(yīng)）是四個(gè)型：

Ⅰ型（速發(fā)型）、Ⅱ型（溶細(xì)胞型）、Ⅲ型（免疫復(fù)合物或血管炎型）Ⅳ型（遲發(fā)型）。

Ⅰ型（速發(fā)型）：是由IgE抗體所致，IgE與肥大細(xì)胞的IgE的Fc受體結(jié)合產(chǎn)生一系列變化，出現(xiàn)Ⅰ型過(guò)敏。

如青霉素過(guò)敏（皮內(nèi)注射過(guò)敏原），患有慢性寄生蟲(chóng)感染患者。IgE抗體升高顯著。

Ⅱ型（溶細(xì)胞型）、Ⅲ型（免疫復(fù)合物或血管炎型）：過(guò)敏系由IgM、IgG抗體及補(bǔ)體等參與介導(dǎo)。Ⅳ型（遲發(fā)型）：過(guò)敏反應(yīng)是由T細(xì)胞中TDTH細(xì)胞釋放淋巴因子所致。如結(jié)核菌素過(guò)敏試驗(yàn)（皮內(nèi)注射過(guò)敏原）

使毒素的毒力減弱，病理作用減弱，但免疫原性仍保留。

Ag是指能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答（產(chǎn)生Ab、細(xì)胞免疫等）物質(zhì)。

完全Ag是指既有免疫原性又有反應(yīng)原性的物質(zhì)，而只有反應(yīng)原性無(wú)免疫原性的物質(zhì)稱為半抗原。決定Ag特異性的最小化學(xué)亞單位稱為決定基（蔟cu），又稱為表位。依其與胸腺的關(guān)系又分Ti抗原和TD抗原。

Ti抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM抗體，TD抗原產(chǎn)生需有T細(xì)胞輔助。

蛋白質(zhì)是抗原性最強(qiáng)的物質(zhì)，其次是多糖、核酸、類脂是抗原性最弱物質(zhì)。人類血型抗原有A和B抗原，它們（A抗原和B抗原）刺激機(jī)體產(chǎn)生抗A和抗B抗體。人類血型抗原是同種異型抗原（同一種屬不同個(gè)體間的遺傳標(biāo)記不同）。器官移植所產(chǎn)生的排異反應(yīng)。也是因同種異型抗原所致。

佐劑在免疫中常常采用，它主要的機(jī)制是增強(qiáng)機(jī)體對(duì)Ag的免疫應(yīng)答。

Ag物質(zhì)刺激機(jī)體產(chǎn)生Ab，Ab本質(zhì)是Ig（免疫球蛋白）。Ig（免疫球蛋白）分為五大類：IgG、IgM、IgA、IgE、IgD。

Ig（免疫球蛋白）的基本結(jié)構(gòu)是：四條肽鏈（2條輕鏈-L鏈，2條重鏈-H鏈），由雙流鍵連接。L鏈（輕鏈）：可分為 可變部分（V）和恒定部分（C），即 V（可變部分）L（輕鏈）+ C（恒定部分）L（輕鏈）即VL + CL。

H鏈（重鏈）：也分可變部分（V）和恒定部分（C），即VH + CH，但CH（恒定部分、重鏈）部分又分為CH1、CH2、CH3。

IgM和IgE還有CH4部分。CH1與CH2區(qū) 之間為絞鏈區(qū)。

如果用木瓜酶水解后，將IgG水解2Fab和Fc。Fab是Ig與Ag結(jié)合部位，F(xiàn)c是可結(jié)晶部分。用胃蛋白酶水解IgG，可分為F(ab,)2和Fc部分，F(xiàn)(ab,)2是2個(gè)Fab連在一起的部分。

Ig（免疫球蛋白）的分類是根據(jù)H鏈（重鏈）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，主要依Fc部分（CH）。Ig同種型是指H鏈所具有的特性。

Ig（免疫球蛋白）分型是依據(jù)L鏈（輕鏈）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，可分為旰碗型。Ig的Fc段部分可與某些細(xì)胞的Fc受體結(jié)合，如巨噬細(xì)胞。

F(ab,)2部分是與Ag結(jié)合部，VH（重鏈）+ VL（V可變部分L輕鏈）是F(ab,)2中的高變區(qū)，直接與Ag能結(jié)合的部位。

人類5種Ig（免疫球蛋白）各具特色：IgG-血清中含量最高；IgM-分子量最大；

IgG：①在血清中含量最高；②它還是唯一能通過(guò)人類胎盤的；③IgG是抗感染的主要Ig(IgG抗病毒抗體)；④結(jié)合補(bǔ)體；

⑤起到條理作用；⑥結(jié)合SPA（葡萄球菌A蛋白）；⑦起到沉淀反應(yīng)；⑧中和反應(yīng)；⑨溶解細(xì)菌。(10)H抗原主要刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG類抗體；(11)肥達(dá)試驗(yàn)IgG類H抗體出現(xiàn)較晚；(12)IgG是人血清中的主要抗體(13)IgG是固定補(bǔ)體

IgM:①分子量最大；②早期多為IgM（IgM早期診斷）；③IgM是種屬發(fā)育過(guò)程中最原始的Ig（早期出現(xiàn)抗體的是IgM）；

④IgM有很高的結(jié)合價(jià)和凝集能力。⑤IgM是動(dòng)物機(jī)體在受到初次抗原刺激后最早產(chǎn)生的一種抗體球蛋白。

⑥抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM類抗體。⑦肥達(dá)試驗(yàn)IgM類()抗體出現(xiàn)較早。⑧IgM是感染早期出現(xiàn)的抗體 IgA：①有分泌型存在；②局部Ab；③IgA抗蛋白酶的水解作用。④IgA對(duì)大腸桿菌有一定抑制作用；⑤其含量?jī)H次于IgG。

⑥呼吸系統(tǒng)的非特異性防御機(jī)制機(jī)械物理性防御富含IgA IgE：①與肥大細(xì)胞膜上Fc受體結(jié)合（結(jié)合肥大細(xì)胞）；②是血清中含量最少的一類Ig； IgD：①在血清中含量很少；②因其性質(zhì)很不穩(wěn)定、半衰期很短，所以對(duì)其了解尚少。

補(bǔ)體是存在于人和動(dòng)物血清中，即可參加特異免疫又可參與非特異免疫 作用的大分子物質(zhì)。它有9種成分，11種蛋白組成。

9種成分是：C1（q.r.s）、C2 C3 C4 C5 C6 C7 C8 C9。它們對(duì)溫度很敏感，易破壞。補(bǔ)體系統(tǒng)包括補(bǔ)體及D、P、B等因子組成，約有20種成分。

補(bǔ)體的激活有兩個(gè)途徑：（1）傳統(tǒng)途徑（第一途徑）和旁路（第二途徑）。

傳統(tǒng)途徑（第一途徑）：可被Ag-Ab免疫復(fù)合物（IC）活化?；罨樞蚴牵篊1、C4、C2、C3、C5 C6 C7 C8 C9。

1、T細(xì)胞：是由一群細(xì)胞組成。T細(xì)胞定位于淋巴結(jié)副皮質(zhì)區(qū)?？煞謳兹?，其中TH細(xì)胞是很重要的免疫細(xì)胞，CD+4可被PHA、ConA、PWM、花生凝集素刺激活化進(jìn)行有絲分裂，幫助產(chǎn)生Ab，司管細(xì)胞免疫。TS細(xì)胞是抑制細(xì)胞，CD+8參加免疫調(diào)節(jié)。TC是細(xì)胞毒細(xì)胞。TH是成熟需要胸腺加工處理。

2、B細(xì)胞：B淋巴細(xì)胞主管體液免疫細(xì)胞。表面有抗原抗體受體（SmIg）。B細(xì)胞成熟骨髓中（相當(dāng)于禽類法氏囊）。

未成熟的B細(xì)胞最初可查到Ig的u鏈，活化B細(xì)胞可衍（yan）變成漿細(xì)胞，漿細(xì)胞能產(chǎn)生Ab和分泌Ab。PWM是可以刺激B細(xì)胞有絲分裂。人類外周血中T細(xì)胞和B細(xì)胞之比為2：1。

3、單核類細(xì)胞：無(wú)Ag受體，但能處理Ag，加工Ag，并向T細(xì)胞遞呈Ag。國(guó)際公認(rèn)的過(guò)敏反應(yīng)（變態(tài)反應(yīng)）是四個(gè)型：

Ⅰ型（速發(fā)型）、Ⅱ型（溶細(xì)胞型）、Ⅲ型（免疫復(fù)合物或血管炎型）Ⅳ型（遲發(fā)型）。

Ⅰ型（速發(fā)型）：是由IgE抗體所致，IgE與肥大細(xì)胞的IgE的Fc受體結(jié)合產(chǎn)生一系列變化，出現(xiàn)Ⅰ型過(guò)敏。

如青霉素過(guò)敏（皮內(nèi)注射過(guò)敏原），患有慢性寄生蟲(chóng)感染患者。IgE抗體升高顯著。

Ⅱ型（溶細(xì)胞型）、Ⅲ型（免疫復(fù)合物或血管炎型）：過(guò)敏系由IgM、IgG抗體及補(bǔ)體等參與介導(dǎo)。Ⅳ型（遲發(fā)型）：過(guò)敏反應(yīng)是由T細(xì)胞中TDTH細(xì)胞釋放淋巴因子所致。如結(jié)核菌素過(guò)敏試驗(yàn)（皮內(nèi)注射過(guò)敏原）

使毒素的毒力減弱，病理作用減弱，但免疫原性仍保留。病毒屬于微生物界，其不同于其他微生物的特性如下：

1、病毒一般只含有一種核酸DNA或RNA，而其它微生物，包括細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體，則都同時(shí)含有兩種核酸。

2、病毒通過(guò)基因組復(fù)制和表達(dá)產(chǎn)生子代病毒的核酸和蛋白質(zhì)，隨后裝配完整的病毒粒子。

3、病毒缺乏完整的酶系統(tǒng)，不具備其他生物“產(chǎn)能”所需的遺傳信息，因此必須利用宿主細(xì)胞的酶類和產(chǎn)能機(jī)構(gòu)，并借助宿主細(xì)胞的生物合成機(jī)構(gòu)復(fù)制其核酸以及合成由其核酸編碼的蛋白質(zhì)，乃至直接利用細(xì)胞成分。

4、某些RNA病毒的RNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成互補(bǔ)DNA（cDNA），與細(xì)胞基因組整合，并隨細(xì)胞DNA復(fù)制而增殖，即所謂的DNA前病毒。

5、病毒沒(méi)有細(xì)胞壁，也不進(jìn)行蛋白質(zhì)、糖和脂類的代謝活動(dòng)，因此對(duì)于干擾微生物的這些代謝過(guò)程而影響微生物結(jié)構(gòu)和功能的抗生素，具有明顯的抵抗力。

一個(gè)簡(jiǎn)單的病毒粒子，實(shí)質(zhì)上只是一團(tuán)遺傳物質(zhì)（DNA或RNA）和它外圍的一層蛋白外殼。這層蛋白外殼就是衣殼，衣殼和核酸一起總稱為核衣殼。病毒不含氨基酸，這是病毒與其他微生物，包括細(xì)菌、衣原體、立克次體等又一明顯區(qū)別。

病毒的分類系統(tǒng)采用 目、科、亞科、屬和種的等級(jí)制度。

屬名應(yīng)是一個(gè)以“virus”結(jié)尾的單詞；亞科“virinae”； 科“viridae”；目“virales” 結(jié)尾的單詞。動(dòng)物病毒“種”的名稱大多引用其所引起疾病的名稱，后加“病毒”，獸醫(yī)學(xué)上則常再加上宿主（動(dòng)物的名稱）種類，也有的在病名前再加最初發(fā)現(xiàn)該病毒的地名。毒珠名稱至少應(yīng)能反映該毒珠的分離地點(diǎn)和時(shí)間以及該毒珠的類別。根據(jù)其病毒核酸組成還可以將病毒分成DNA病毒和RNA病毒。RNA病毒可分為（1）正鏈RNA病毒；（2）負(fù)鏈RNA病毒，正鏈RNA病毒可以直接呈現(xiàn)mRNA的作用，同時(shí)又是合成互補(bǔ)鏈的模板； 一般情況下，正鏈RNA病毒的基因組RNA具有感染性。

負(fù)鏈RNA病毒不能直接呈現(xiàn)mRNA的作用，即不能直接指導(dǎo)合成互補(bǔ)鏈。

病毒缺乏自身增殖所需的完整酶系統(tǒng)，增殖時(shí)必須依靠宿主細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)，甚至直接利用宿主細(xì)胞的某些成分，這就決定了病毒在細(xì)胞內(nèi)專性寄生的特性。

病毒的增殖過(guò)程大致可以分為：（1）吸附與侵入、（2）脫殼、（3）病毒成分的合成及裝配、（4）釋放等4個(gè)主要階段。

病毒屬于微生物界，其不同于其他微生物的特性如下：

1、病毒一般只含有一種核酸DNA或RNA，而其它微生物，包括細(xì)菌、支原體、衣原體、立克次體，則都同時(shí)含有兩種核酸。

2、病毒通過(guò)基因組復(fù)制和表達(dá)產(chǎn)生子代病毒的核酸和蛋白質(zhì)，隨后裝配完整的病毒粒子。

3、病毒缺乏完整的酶系統(tǒng)，不具備其他生物“產(chǎn)能”所需的遺傳信息，因此必須利用宿主細(xì)胞的酶類和產(chǎn)能機(jī)構(gòu)，并借助宿主細(xì)胞的生物合成機(jī)構(gòu)復(fù)制其核酸以及合成由其核酸編碼的蛋白質(zhì)，乃至直接利用細(xì)胞成分。

4、某些RNA病毒的RNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成互補(bǔ)DNA（cDNA），與細(xì)胞基因組整合，并隨細(xì)胞DNA復(fù)制而增殖，即所謂的DNA前病毒。

5、病毒沒(méi)有細(xì)胞壁，也不進(jìn)行蛋白質(zhì)、糖和脂類的代謝活動(dòng)，因此對(duì)于干擾微生物的這些代謝過(guò)程而影響微生物結(jié)構(gòu)和功能的抗生素，具有明顯的抵抗力。

一個(gè)簡(jiǎn)單的病毒粒子，實(shí)質(zhì)上只是一團(tuán)遺傳物質(zhì)（DNA或RNA）和它外圍的一層蛋白外殼。這層蛋白外殼就是衣殼，衣殼和核酸一起總稱為核衣殼。病毒不含氨基酸，這是病毒與其他微生物，包括細(xì)菌、衣原體、立克次體等又一明顯區(qū)別。

（1）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、（2）雞胚、（3）體外培養(yǎng)的器官、（4）細(xì)胞，這4種都可以作為人工增殖病毒的基本工具。

而大量病毒的，又是病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)研究以及制備疫苗和特異性診斷試劑的先決條件。

1、組織培養(yǎng)：病毒在細(xì)胞內(nèi)的增殖及其對(duì)細(xì)胞的作用，可以根據(jù)細(xì)胞病變、細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)出現(xiàn)血凝素或其他病毒抗原、紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象以及通過(guò)“指示病毒”的干擾等方法加以識(shí)別。組織培養(yǎng)用的玻璃器皿要用（硫酸、重鉻酸鉀）。

常用于組織培養(yǎng)的人工綜合營(yíng)養(yǎng)液的主要成分有：氨基酸、糖類、無(wú)機(jī)鹽、維生素、輔助生長(zhǎng)因子等。常用的人工綜合營(yíng)養(yǎng)液為：MEM和RPM1640。

用人工綜合營(yíng)養(yǎng)液配制細(xì)胞生長(zhǎng)液時(shí)需要加入①適量血清和谷氨酰胺溶液，②還需要加入規(guī)定量的抗生素溶液防止細(xì)菌污染，③加入碳酸氫鈉溶液修正PH，④根據(jù)情況還可加入HEPES溶液可使生長(zhǎng)液具有較強(qiáng)的PH緩沖能力。能使組織和成片細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞的化學(xué)制劑為胰蛋白酶和EDTA，EDTA使用液又可稱之為Versen溶液，其分散細(xì)胞的作用原理是EDTA可以結(jié)合鈣、鎂離子，使組織細(xì)胞分散。

動(dòng)物血清中具有細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的各種營(yíng)養(yǎng)因子，它能促進(jìn)細(xì)胞的貼壁和生長(zhǎng)，且有很強(qiáng)的酸堿緩沖能力。

細(xì)胞培養(yǎng)液在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中可分為（1）細(xì)胞生長(zhǎng)液（2）細(xì)胞維持液兩種。細(xì)胞生長(zhǎng)液：是使細(xì)胞發(fā)育增殖的液體，因此要求營(yíng)養(yǎng)條件豐厚； 細(xì)胞維持液：用于延緩細(xì)胞代謝，從而延長(zhǎng)細(xì)胞的存活時(shí)間，以利于實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。這兩種液體成分的主要區(qū)別是血清含量不同。

細(xì)胞生長(zhǎng)適宜的PH范圍是 PH 7.2～7.6。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)全過(guò)程的關(guān)鍵是防止污染。

2、細(xì)胞株的保存是組織培養(yǎng)中一個(gè)十分重要的工作，二甲基亞砜是細(xì)胞低溫保存的良好的保護(hù)劑，含10%二甲基亞砜的血清可以作為懸浮細(xì)胞的液體在液氮中保存細(xì)胞。

3、病毒學(xué)上常用的細(xì)胞類型可分為（1）原代細(xì)胞、（2）二倍體細(xì)胞、（3）傳代細(xì)胞，三大類，原代細(xì)胞培養(yǎng)和傳代細(xì)胞培養(yǎng)的根本區(qū)別在于細(xì)胞是否能在體外無(wú)限傳代。

4、細(xì)胞的純化：細(xì)胞的純化可以用細(xì)胞克隆技術(shù)。

克隆是指用無(wú)性繁殖方法產(chǎn)生的一組遺傳上相同的細(xì)胞和生物群體的過(guò)程。

1、病毒的分離和鑒定：（P219）病毒對(duì)細(xì)胞的感染性具有嚴(yán)格的選擇性和特異性，因此用組織培養(yǎng)細(xì)胞接種病毒必須首先選擇敏感細(xì)胞。（1）病毒增殖的判定：（略）

（2）細(xì)胞病變（CPE）：大部分病毒在敏感細(xì)胞系均可出現(xiàn)CPE（細(xì)胞病變），CPE（細(xì)胞病變）可以表現(xiàn)為嚴(yán)重的細(xì)胞破壞、細(xì)胞腫大、顆粒增多、細(xì)胞融合成合胞體或無(wú)明顯的細(xì)胞變化等。CPE（細(xì)胞病變）經(jīng)常具有病毒“種”的特性，因此常常作為病毒堅(jiān)定依據(jù)。

（3）病毒蝕(shi)斑技術(shù)（又稱空斑）：病毒蝕(shi)斑是指病毒在已長(zhǎng)成的單層細(xì)胞上形成的局限性病灶，主要用于病毒的純化或病毒懸液中感染病毒含量的測(cè)定。（用病毒蝕斑技術(shù)測(cè)定含量-病毒純化或病毒懸液中感染的病毒）

（4）病毒感染力的滴定：有兩種，一種方法是用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物測(cè)定LD50(半數(shù)致死量)；另一種方法是在組織細(xì)胞上測(cè)定TCID50（半數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)物感染量。

（5）病毒的保存：分離或鑒定后的病毒經(jīng)過(guò)冷凍干燥后可以長(zhǎng)期保存。

2、免疫-血清學(xué)實(shí)驗(yàn)：免疫-血清學(xué)實(shí)驗(yàn)是利用抗原和抗體的特異性結(jié)合的原理進(jìn)行的，主要用于兩個(gè)目的：

①?gòu)牟×汐@得病毒株后，應(yīng)用已知的抗病毒血清或單克隆抗體進(jìn)行免疫-血清學(xué)試驗(yàn)，鑒定病毒的種類乃至型別；

②由發(fā)病動(dòng)物采集血清標(biāo)本，應(yīng)用全病毒或特異性病毒抗原，測(cè)定發(fā)病動(dòng)物體液中的特異性抗體，或進(jìn)一步比較發(fā)病動(dòng)物的急性發(fā)病期和恢復(fù)期血清中的抗體效價(jià)，了解病毒性抗體是否有明顯的增長(zhǎng)，從而判定病毒感染的存在。

（1）中和試驗(yàn)：動(dòng)物在受到病毒感染后，在體內(nèi)產(chǎn)生抗體，如果該抗體能與相應(yīng)的病毒粒子特異性地結(jié)合，使后者喪失感染力，這種抗體就成為中和抗體。

應(yīng)用已知的病毒或病毒抗原，可以測(cè)知患者體內(nèi)中和抗體的存在及其效價(jià)；

用已知的抗病毒血清或中和性單克隆抗體，也可以進(jìn)行病毒的鑒定，因此中和試驗(yàn)也常用于新分離病毒株的鑒定。

（2）血凝和血凝抑制試驗(yàn)：許多病毒能夠凝集某些種類動(dòng)物的紅細(xì)胞，病毒凝集的紅細(xì)胞種類隨病毒種類的不同而不同。

血凝反應(yīng)可被特異性抗體所抑制，因此血凝抑制試驗(yàn)可以應(yīng)用于：

①應(yīng)用于標(biāo)準(zhǔn)病毒懸液測(cè)定血清中的相應(yīng)抗體；②應(yīng)用于特異性抗體鑒定新分離的病毒。

用枸櫞酸鈉配置的阿氏液具有抗紅細(xì)胞凝集作用，用于血凝和血凝抑制試驗(yàn)中配置紅細(xì)胞懸掖。同一患者急性發(fā)病期和恢復(fù)期雙份血清（相距2～3周）的抗體效價(jià)增高4倍以上者，說(shuō)明本次發(fā)病是由所測(cè)抗體相應(yīng)病毒引起的。

（3）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)：一個(gè)抗體分子與抗原結(jié)合后，可以導(dǎo)致數(shù)百個(gè)補(bǔ)體分子的激活，呈現(xiàn)一定程度的放大作用，所以補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)是一個(gè)比較敏感的方法，一般用于人及動(dòng)物血清中特異性抗體的定量檢測(cè)（補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)），也常用于新分離病毒的鑒定。（4）免疫熒光技術(shù)：將抗原或抗體標(biāo)記上熒光素，再進(jìn)行抗原-抗體反應(yīng)，出現(xiàn)熒光就說(shuō)明標(biāo)記物的存在，同時(shí)也反映了抗原或抗體的存在。

免疫熒光技術(shù)具有抗原-抗體反應(yīng)的特異性和染色技術(shù)的快速性，并可在細(xì)胞水平上進(jìn)行抗原定位，故在病毒學(xué)研究和病毒病的診斷中都是一種應(yīng)用很廣的方法。熒光抗體染色技術(shù)包括（1）直接法、（2）間接法、（3）補(bǔ)體法、（4）SPA(葡萄球菌A蛋白)免疫熒光法。

（5）酶免疫技術(shù)：以酶作為標(biāo)記物，通過(guò)化學(xué)方法將其與抗原或抗體共價(jià)結(jié)合，形成酶標(biāo)記物，可與被檢的抗原或抗體起反應(yīng)，形成酶標(biāo)記免疫復(fù)合物。制備酶結(jié)合物的方法很多，目前應(yīng)用最廣泛的有過(guò)碘酸鹽法和戊二醛法。

酶免疫測(cè)定試驗(yàn)包括：①間接法（測(cè)抗體）、②雙抗體夾心法（測(cè)抗原）、③IgM捕獲ELISA（酶鏈免疫吸附實(shí)驗(yàn)）、④競(jìng)爭(zhēng)法。IgM是動(dòng)物機(jī)體在受到初次抗原刺激后最早產(chǎn)生的一種抗體球蛋白，因此IgM捕獲ELISA常應(yīng)用于多

種病毒病的早期診斷?？箄鏈抗體特異性結(jié)合IgM，可以應(yīng)用于IgM捕獲ELISA。

IgG是主要的抗病毒抗體，在第二次抗原刺激時(shí)，由于免疫回憶，發(fā)生迅速的加強(qiáng)反應(yīng)IgG量顯著增高（分子量大）。在病毒病的診斷中，也常將這一原理用于判斷病毒病的感染狀況，但常常需要采集恢復(fù)期和急性期雙份血清

進(jìn)行抗體效價(jià)的比較如IgG水平4倍或4倍以上增加具有血清學(xué)診斷意義。

（6）膠體金免疫檢測(cè)技術(shù)：膠體金免疫檢測(cè)技術(shù)是以膠體金為載體吸附抗體和抗原，完成檢測(cè)特異性抗原或抗體的。膠體金免疫檢測(cè)技術(shù)優(yōu)于ELISA（酶鏈免疫吸附實(shí)驗(yàn)）法和免疫熒光法的最主要一點(diǎn)是肉眼直接判定結(jié)果。

（總結(jié)：膠體金免疫檢測(cè)技術(shù)就是直接用肉眼可以觀察結(jié)果）。

3、病毒病的分子生物學(xué)診斷：分子生物學(xué)診斷的特異性取決于核酸序列的特異性，病毒病的分子生物學(xué)診斷，包括對(duì)病毒核酸和蛋白質(zhì)的測(cè)定。

PCR（全稱是聚合酶鏈反應(yīng)），是在引物、摸板DNA和4種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)。

由于引物是按照與擴(kuò)增區(qū)段兩端序列彼此互補(bǔ)的原則設(shè)計(jì)的，因此每一條新生鏈的合成都是從引物的退火結(jié)合位點(diǎn)開(kāi)始，并沿著相反鏈延伸。

因此，PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）的特異性是由人工合成的一對(duì)寡核苷酸引物所決定的。PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）可以在數(shù)小時(shí)內(nèi)對(duì)僅有的幾個(gè)拷貝的基因放大數(shù)百萬(wàn)倍，使PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）擴(kuò)增結(jié)果在瓊脂糖凝膠電泳后形成明顯可見(jiàn)的DNA帶。

溴化乙錠（EB）可以插入核酸分子之間并在紫外線下放射熒光，因此可以作為核酸分子電泳的指示劑。（核酸分子電泳的指示劑用溴化乙錠-EB）。

（1）RT-PCR(聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)：由于DNA聚合酶不能以RNA為摸板合成cDNA，所以不能對(duì)RNA病毒核酸進(jìn)行直接PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）。

首先必須提取病毒RNA。提取病毒RNA時(shí)，要注意避免RNA酶對(duì)病毒RNA的降解作用。為此，所用的試劑和用品均需要進(jìn)行無(wú)Rnase處理，（Rnas必須使用無(wú)熱原質(zhì)水制備）如加入RNA酶抑制劑或高壓滅菌。加入反轉(zhuǎn)錄酶經(jīng)過(guò)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成與病毒RNA互補(bǔ)的DNA(cDNA)，然后才能進(jìn)行PCR（聚合酶鏈反應(yīng)），這就是所謂的RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）。

目前常用的逆轉(zhuǎn)錄酶（RT-PCR）包括MMV和AMV。RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）反應(yīng)的特異性取決于模板和引物，引物序列必須是被檢病毒特異的，原則上要求引物3'端堿基與模板一定要配對(duì)，對(duì)引物5'末端的堿基并沒(méi)有嚴(yán)格的限制，只要與模板DNA結(jié)合的引物長(zhǎng)度足夠，其5'末端堿基可以不與模板DNA匹配而呈游離狀態(tài)，因此對(duì)引物5'末端可以進(jìn)行自由修飾。

PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）反應(yīng)中，引物1又稱Watson引物，是與模板正鏈互補(bǔ)的寡核苷酸鏈。

（2）核酸雜交檢測(cè)技術(shù)：雜交的基本原理是帶互補(bǔ)序列的單鏈核苷酸相遇時(shí)，會(huì)退火形成雙鏈?！坝糜谠\斷目的”雜交雙方是已知序列的病毒探針和待測(cè)樣品中的病毒核酸，如果是陽(yáng)性結(jié)果說(shuō)明病毒感染的存在。在核酸分子雜交技術(shù)基礎(chǔ)之上又發(fā)展了一系列檢測(cè)DNA和RNA的技術(shù)，如Southrn blotting、Western blotting、Dit blotting和菌落雜交。

聚丙烯酰胺凝膠電泳也可簡(jiǎn)稱為PAGE（PAGE聚丙烯酰胺凝膠電泳-測(cè)雜交）DNA限制性內(nèi)切酶可以識(shí)別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列。

利用不同的內(nèi)切酶切割病毒DNA，依據(jù)切割后的片段在凝膠電泳中泳動(dòng)速率不同所形成的電泳帶型做出診斷。

（3）病毒病的免疫預(yù)防：決定疫苗免疫效果的關(guān)鍵因素是疫苗本身的質(zhì)量。

目前普遍應(yīng)用的病毒疫苗主要分為弱毒（活）疫苗和滅活疫苗兩類。弱毒（活）疫苗分解成（弱毒疫苗、弱活疫苗）。

近年來(lái)隨著分子病毒學(xué)研究的不斷深入，相繼研究出了（1）亞單位疫苗、（2）基因工程疫苗、（3）活載體疫苗、（4）分子疫苗。

蟲(chóng)媒病毒是由媒介昆蟲(chóng)作為病毒的傳遞者的一類病毒，由蟲(chóng)媒病毒引起的疾病即為蟲(chóng)媒病毒，如乙型腦炎、新疆出血熱、登革熱、黑熱病等。

類病毒沒(méi)有外殼蛋白，對(duì)各種有機(jī)溶劑有抵抗力，說(shuō)明也沒(méi)有脂質(zhì)外膜，只是一個(gè)裸露的RNA分子，類病毒只出現(xiàn)于植物。

在人和動(dòng)物中存在著一類被稱為亞急性海綿樣腦病的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如瘋牛病。瘋牛病能夠通過(guò)食物鏈傳染給人。

研究證明，這種奇特疾病的病原，即不是病毒，也不是類病毒，大體上是由蛋白質(zhì)組成，目前稱之為阮病毒。（總結(jié)：病毒-亞急性海綿樣腦病的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如瘋牛?。?/p>

1、病原學(xué)：流行性乙型腦炎病毒屬于黃病毒科。黃病毒科能夠致人疾病的病毒有登革熱病毒、丙型肝炎病毒和乙型腦炎病毒。

由于1924年乙型腦炎病毒首先證實(shí)于日本，故也稱其為日本乙型腦炎。C6/36細(xì)胞適合于乙型腦炎病毒的分離和培養(yǎng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動(dòng)物與傳染原：由蚊為媒介而傳播，引起人畜感染的主要媒介可能是三帶啄庫(kù)蚊，其他庫(kù)蚊也有可能。

（2）傳染途徑：流行性乙型腦炎是一種自然疫源性疾病，豬是傳播乙型腦炎病毒（乙腦病毒）的主要?jiǎng)游锼拗鳌?/p>

乙型腦炎病毒通過(guò)蚊-豬-蚊的循環(huán)維持自身的存在。（3）人群易感性：除人、馬和豬外，通常不呈現(xiàn)臨床癥狀。

3、臨床表現(xiàn)：流行性乙型腦炎是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)的急性傳染病，以高熱和狂暴或沉郁等神經(jīng)癥狀為特征。

4、預(yù)防：疫苗預(yù)防注射。

1、病原學(xué)：登革病毒屬于黃病毒科黃病毒屬含單股正鏈RNA。登革熱（DH）和登革出血熱（DHF）是由4個(gè)血清型病毒引起的兩種不同臨床類型的急性傳染病。C6/36細(xì)胞可用于登革病毒分離和培養(yǎng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動(dòng)物與傳染原：中國(guó)DH/DHF的傳播媒介主要為埃及伊蚊和白紋wen伊蚊，這些蚊種主要生活在家庭儲(chǔ)水容器中。

（2）傳染途徑：登革熱存在城市型（人-蚊-人循環(huán)）、叢林型（猴-蚊-猴循環(huán)）兩種疫源地。中國(guó)主要為人-蚊-人循環(huán)。

（3）人群易感性：DH/DHF主要發(fā)生于熱帶和亞熱帶地區(qū)。中國(guó)從嬰兒到老人均可發(fā)病，以兒童和青壯年患病率較高。

3.臨床表現(xiàn)：潛伏期：一般為5～8天。

登革熱主要以高熱、頭痛、肌肉和關(guān)節(jié)痛為主，與登革熱的主要區(qū)別是有無(wú)嚴(yán)重出血。

DSS（登革休克綜合征）是DH/DHF的嚴(yán)重形式，其含義是登革休克綜合征。主要診斷依據(jù)為出血、休克、口唇發(fā)紺和血壓低或測(cè)不到。

（這些癥狀是登革休克綜合征臨床表現(xiàn)）世界衛(wèi)生組織(WHO)對(duì)DHF/ DSS的診斷限定了嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。有四種主要的臨床表現(xiàn)：高熱、出血、肝腫大和循環(huán)衰竭。WHO根據(jù)疾病的嚴(yán)重程度把DHF/ DSS（登革出血熱/登革休克綜合征）

分為四個(gè)等級(jí)：Ⅰ級(jí)和Ⅱ級(jí)表現(xiàn)為DHF（登革出血熱）輕型，Ⅲ級(jí)和Ⅳ級(jí)表現(xiàn)為更嚴(yán)重的形式—DSS的（登革休克綜合征）

4、預(yù)防：防蚊滅蚊。傳染源的管理。

1、病原學(xué)：流行性出血熱病毒屬于布尼亞病毒科漢坦病毒屬，基因?yàn)樨?fù)鏈分節(jié)段RNA。中國(guó)目前發(fā)現(xiàn)的流行性出血熱主要有2種類型：

HTNV型（野鼠型）和SEOV型（家鼠型）。Vero-E6細(xì)胞適合于流行性出血熱病毒的分離和培養(yǎng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動(dòng)物與傳染原：在我國(guó)流行性出血熱主要傳染源和病毒宿主為嚙nie齒動(dòng)物（黑線姬鼠和褐家鼠）。嚙nie-咬如蟲(chóng)咬嚙。

（2）傳染途徑：接觸帶病毒的宿主動(dòng)物及其排泄物可以造成感染。（3）人群易感性：普遍易感。

3、臨床表現(xiàn)：潛伏期：一般為7～14天。

典型的臨床表現(xiàn)有三大特征：發(fā)熱、出血和腎損害。流行性出血熱主要以腎臟損害為特征，故又稱之為腎綜合征出血熱。

4、預(yù)防：

（1）防鼠滅鼠。

（2）接種疫苗：目前我國(guó)所使用的流行性出血熱的疫苗是細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗，可以分為3種類型（家鼠型、野鼠型、家鼠、野鼠雙價(jià)混合苗）經(jīng)過(guò)近幾年的應(yīng)用已證明在預(yù)防流行性出血熱方面有效。（3）講究衛(wèi)生。

5、診斷：流行性出血熱對(duì)于明確疫源地類型、選擇所用疫苗的種類、指導(dǎo)防治策略等都非常重要。目前流行性出血熱的分型診斷方法有多種，包括（1）免疫熒光法（2）單抗分型

（3）RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）

（4）ELISA（酶鏈免疫吸附實(shí)驗(yàn)）法。鼠帶毒率調(diào)查是常用的監(jiān)測(cè)手段之一，用于流行性出血熱鼠帶毒率調(diào)查標(biāo)本制備的主要方法為鼠肺冰凍切片，鼠帶毒率調(diào)查的常用方法為免疫熒光法。、病原學(xué)：克里米亞—?jiǎng)偣鲅獰崾遣寄醽啿《究啤?nèi)羅病毒屬的病毒，故又稱為新疆出血熱。病毒基因組為負(fù)鏈分節(jié)段RNA。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動(dòng)物與傳染原：30多種蜱，特別璃眼蜱屬既是該病毒的儲(chǔ)存宿主又是傳播媒介；多種不同的脊椎動(dòng)物既是蜱的宿主，也可能是病毒的儲(chǔ)存宿主。

（2）傳染途徑：人的感染是因?yàn)轵绲亩ＲЩ蛎芮薪佑|感染動(dòng)物或患者。（3）人群易感性：普遍易感。

3、臨床表現(xiàn)：潛伏期：蜱叮咬至疾病發(fā)作之間的時(shí)間為潛伏期，一般為3～6天。

臨床表現(xiàn)：克里米亞—?jiǎng)偣鲅獰崾且环N神經(jīng)系統(tǒng)的疾病，神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀出現(xiàn)于血管異常造成的顯著的出血綜合征之前。

常常為突發(fā)和急性，發(fā)熱（39℃～41℃）、寒戰(zhàn)、頭痛、風(fēng)濕痛、腰痛和上腹部痛等。隨后迅速發(fā)展到短暫的、最嚴(yán)重的出血期，一般4天后在疾病高峰期導(dǎo)致死亡。

4、預(yù)防：目前尚無(wú)特異性疫苗進(jìn)行接觸前的主動(dòng)預(yù)防。有效的預(yù)防首先應(yīng)避免與傳染源及媒介的接觸。

1、甲型肝炎病毒：甲型肝炎病毒（HAV）可以引起甲型肝炎。在病毒分類上甲肝病毒屬于小RNA病毒科。

甲型肝炎實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要依賴于檢測(cè)患者血清中的抗HAV（甲型肝炎病毒）的IgM。

2、乙型肝炎病毒：（HBV）

（1）病原學(xué)：乙型肝炎病毒（HBV）屬于嗜肝DNA病毒科、正嗜肝DNA病毒屬，是傳染性肝炎的一個(gè)重要病因。

（2）流行病學(xué)：HBV（乙型肝炎病毒）的唯一宿主是人。嗜肝DNA病毒可以存活于那些與感染者粘膜或皮膚創(chuàng)口接觸的物品表面。

（3）診斷：HBV（乙型肝炎病毒）侵入機(jī)體后進(jìn)入血液循環(huán)，主要在白細(xì)胞中進(jìn)行繁殖。HBV（乙型肝炎病毒）主要有3種抗原，分別為HBsAg（乙型肝炎表面抗原）、HBcAg（乙型肝炎核心抗原）、HBeAg（乙肝e抗原）。

HBsAg（乙型肝炎表面抗原）：

①HBsAg可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生乙型肝炎表面抗體（抗—HBs）,具有抗HBV（乙型肝炎病毒）感染的作用 ②HBsAg與病毒的中和性作用有關(guān)。

HBcAg（乙型肝炎核心抗原）：為病毒核心的主要抗原，是急性乙型肝炎病毒感染的重要診斷指標(biāo)之一，是檢測(cè)到抗HbcAgM。

HBeAg（乙肝e抗原）：在乙型肝炎潛伏期的后期出現(xiàn)并且HBeAg的存在表示HBV（乙型肝炎病毒）的存在。

HBeAg是在病毒復(fù)制活躍時(shí)的宿主血清中檢測(cè)到的一種可溶性抗原，HBeAg成分的消失和出現(xiàn)相應(yīng)的抗體，預(yù)示著乙型肝炎病毒的繁殖減弱和疾病有可能向好的方面轉(zhuǎn)化。

血清中HBV（乙型肝炎病毒）DNA聚合酶的存在，表明HBV的感染處于病毒活動(dòng)復(fù)制期。

（4）預(yù)防：疫苗接種：目前用于預(yù)防接種的乙型肝炎疫苗主要有基因工程乙肝疫苗和乙型肝炎表面抗原佐劑疫苗。防止血源性污染和傳播。

3、丙型肝炎病毒：（HCV）——非甲非乙型肝炎病毒（1）病原學(xué)：

丙型肝炎病毒（HCV）屬于黃病毒科、類丙型肝炎病毒屬。病毒粒子含有一單股正鏈RNA。丙型肝炎又可稱為非甲非乙型肝炎，根據(jù)其流行病學(xué)特征、臨床表現(xiàn)和傳播方式，可以將其分為 ①腸道傳播的非甲非乙型肝炎 ②輸血后非甲非乙型肝炎。（2）流行病學(xué)：

①宿主動(dòng)物與傳染源：人是丙型肝炎的自然宿主和貯zhu存者。尚未確認(rèn)別的自然宿主和非脊椎動(dòng)物傳播媒介。

②傳染途徑：約60%的丙型肝炎病例都是由血液接觸引起的，而非腸道感染。③人群易感性：普遍易感。

4、丁型肝炎病毒（HDV）：丁型肝炎病毒（HDV）為缺陷型RNA病毒，必須借助乙型肝炎表面抗原（HBsAg）包裹才能成為感染性病毒顆粒，常與HBV（乙型肝炎）同時(shí)或重疊感染。HDV（丁型肝炎病毒）主要通過(guò)非腸道傳播途徑傳播。HDV感染的指標(biāo)是血液和體液中可測(cè)得HDV抗原。抗HDV抗體檢測(cè)可以反映HDV感染狀況。慢性HDV感染與多種肝臟疾病密切相關(guān)，包括重癥肝炎、肝硬化、丁型肝炎和慢性活動(dòng)性肝炎。

1、病原學(xué)：流感病毒屬于正粘病毒科。按流感病毒核蛋白與基質(zhì)蛋白抗原性的不同，流感病毒又可分為甲、乙、丙3型。

流感病毒基因組為單股RNA，由8個(gè)階段組成。流感病毒基因組片段具有共同的特點(diǎn)：所有的RNA階段具有相同的5’端。

1980年WHO公布的流感病毒命名方法，一株流感病毒名稱中包括下面幾項(xiàng)內(nèi)容：型別/宿主/分離地點(diǎn)/毒株序號(hào)/分離年代（亞型）。

流感病毒血凝素變異性很強(qiáng)是造成流感病毒易發(fā)生抗原變異的主要原因。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動(dòng)物與傳染源：

人的絕大多數(shù)甲型流感病毒能自然感染家禽、家畜，并進(jìn)一步支持人甲型流感病毒新亞型可能來(lái)源于動(dòng)物的觀點(diǎn)。

乙型流感病毒能引起人的呼吸道感染，丙型流感病毒也是感染人的病毒。（2）傳播途徑：流感病毒的主要傳播途徑是空氣飛沫。

（3）人群易感性：3個(gè)型流感病毒沒(méi)有共同抗原，都能感染人；但甲型流感病毒的感染范圍很廣，容易引起大規(guī)模流行。

3、免疫預(yù)防：由于流感病毒變異頻繁，因此疫苗注射必須有針對(duì)性，即必須針對(duì)當(dāng)前的流行株，才能取得良好的免疫效果。

4、診斷：用于流感病毒分離與鑒定的標(biāo)本應(yīng)取自患者鼻咽分必物。流感病毒的快速診斷主要依賴于檢查抗病毒血凝素抗體。

1、病原學(xué)：絲狀病毒科、絲狀病毒屬包括兩種病毒，即①埃博拉病毒和②馬爾堡病毒。研究絲狀病毒的重要意義在于：

（1）這兩種病毒均具極高的傳染性，對(duì)人類的危害極大；（2）室溫下非常穩(wěn)定；（3）埃博拉病毒

60℃1小時(shí)仍不能被完全滅火，由于特有的生物學(xué)性質(zhì)和致病力，WHO將其列為潛在的生物戰(zhàn)劑之一。（4）埃博拉病毒最初流行于扎伊爾北部的埃博拉河流域而命名為埃博拉病毒。

2、流行病學(xué)：埃博拉病毒的自然宿主尚末確定。自然條件下，人和猴都能發(fā)生嚴(yán)重感染并死亡。埃博拉病毒感染后可以引起出血的臨床表現(xiàn)，因此常將其歸為出血熱病毒。

根據(jù)埃博拉病毒的抗原性的差異，又可將埃博拉病毒分為3個(gè)血清型，不同血清型的埃博拉病毒其致病型有很大的差異。

目前認(rèn)為，埃博拉病毒的疫源地主要在非洲大陸，但1989年自菲律賓運(yùn)往美國(guó)的獼猴發(fā)生了感染，泰國(guó)也有埃博拉病毒感染的血清學(xué)證據(jù)，提示東南亞地區(qū)也可能是疫源地之一。馬爾堡病毒也可引起人的嚴(yán)重出血熱，在人-人或猴-人之間傳播。

鼻病毒屬于小核糖核酸病毒科、鼻病毒屬，是與人類普遍感冒有關(guān)的病毒。流行性腮腺炎是由副粘病毒科、副粘病毒屬的腮腺炎病毒引起。流行性腮腺炎最具有流行病學(xué)意義的傳染源是亞臨床型者。

天花是痘病毒科、正痘病毒屬的天花病毒引起的一種傳播迅速的烈性傳染病。由于使用痘苗病毒疫苗預(yù)防，1977年天花在全世界流行終止。

1、病原學(xué)：狂犬病毒屬于彈狀病毒科、狂犬病毒屬。因其特有的臨床表現(xiàn)，狂犬病又可稱為“恐水病”。

從感染動(dòng)物或患者中發(fā)現(xiàn)的狂犬病毒又可稱之為野毒株或街毒；狂犬病毒街毒經(jīng)過(guò)系列傳代適應(yīng)特定宿主后即為固定毒。根據(jù)對(duì)不同毒株的血清反應(yīng)和單克隆抗體分析，將狂犬病毒分成5個(gè)血清型：血清1型、血清2型、血清3型、血清4型、血清5型。

血清2、3、4、5型又稱為狂犬病相關(guān)病毒，野外分布的主要為血清2、3、4型。

在血清分型的基礎(chǔ)上，利用分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)狂犬病毒也進(jìn)行了遺傳學(xué)分型，即將狂犬病毒屬分為6種基因型：

基因型1（血清1型）、基因型2（血清2型）、基因型3（血清3型）、基因型4（血清4型）、基因型5和基因型6（血清5型）相對(duì)應(yīng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動(dòng)物與傳染源：狂犬病毒幾乎可以感染所有溫血?jiǎng)游?，但造成人類感染的主要傳染源是帶病毒犬?/p>

（2）傳播途徑：因感染狂犬病毒的動(dòng)物咬傷，感染性唾液污染傷口發(fā)生感染。（3）人群易感性：人及所有溫血?jiǎng)游锝阅芨腥尽?/p>

3、預(yù)防：狂犬病的預(yù)防主要包括兩個(gè)方面：（1）即控制傳染源（2）暴露后應(yīng)用免疫制劑?？刂苽魅驹粗饕羌茵B(yǎng)犬的免疫。

狂犬病免疫制劑包括被動(dòng)免疫與主動(dòng)免疫兩種。

狂犬病的被動(dòng)免疫制劑有動(dòng)物源抗狂犬病病毒的精制血清和人源狂犬病免疫球蛋白。

主動(dòng)免疫即注射狂犬疫苗。我國(guó)于1981年開(kāi)始用地鼠腎細(xì)胞疫苗，近幾年又開(kāi)始應(yīng)用Vero（非洲綠猴腎）細(xì)胞狂犬病疫苗。

4、診斷：狂犬病病毒或病毒抗原可以在患者身體多個(gè)部位，如角膜壓片、腦脊髓液、唾液和咬傷處皮膚組織檢測(cè)到。

實(shí)驗(yàn)室診斷狂犬病最具特性的診斷依據(jù)是—感染神經(jīng)原內(nèi)的Negri小體（內(nèi)基氏小體），最常見(jiàn)于海馬及小腦普爾金耶組織的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)，是狂犬病病毒的集落。

WHO推薦快速熒光灶抑制試驗(yàn)取代了傳統(tǒng)的小鼠中和實(shí)驗(yàn)檢測(cè)狂犬疫苗免疫后中和抗體水平。

1、病原學(xué)：輪狀病毒屬于呼腸孤病毒科、輪狀病毒屬，是各種幼齡動(dòng)物非細(xì)胞性腹瀉的主要病原之一。

病毒由11個(gè)節(jié)段的雙鏈RNA組成。根據(jù)輪狀病毒RNA11個(gè)節(jié)段的聚丙烯酰胺電泳圖形不同，可以將輪狀病毒進(jìn)行分型和鑒定。

絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物輪狀病毒，具有一種相同的群抗原，這些輪狀病毒被命名為A群輪狀病毒，是研究的主要對(duì)象。

2、流行病學(xué)：輪狀病毒宿主范圍甚廣，已知的有人及多種動(dòng)物。據(jù)初步統(tǒng)計(jì)，全世界幼兒發(fā)生的腸炎至少有50%是由輪狀病毒引起的。（腸道病毒）。

3、預(yù)防：人用口服輪狀病毒活疫苗可是兒童獲得保護(hù)。

4、診斷：輪狀病毒感染的可靠的實(shí)驗(yàn)室診斷依賴于檢出輪狀病毒或抗原，進(jìn)行該項(xiàng)診斷應(yīng)收集糞便。培養(yǎng)輪狀病毒使用最普遍的是MA-104傳代細(xì)胞系。

輪狀病毒復(fù)制方式不同于其他呼腸孤病毒，它不是通過(guò)吞飲作用進(jìn)入細(xì)胞，而是通過(guò)胞漿膜直接進(jìn)入胞漿，胰蛋白酶對(duì)病毒進(jìn)行處理可以使病毒變?yōu)橛懈腥拘浴?/p>

因此為了在細(xì)胞培養(yǎng)中復(fù)制輪狀病毒和連續(xù)傳代通常需要用胰蛋白酶對(duì)病毒進(jìn)行處理，從而促進(jìn)輪狀病毒的感染性。

皰疹病毒是一群較大的有囊膜的雙鏈DNA病毒。

根據(jù)進(jìn)行該項(xiàng)診斷皰疹病毒的感染性質(zhì)，又可將皰疹病毒分為A群和B群兩個(gè)亞群。

A群：凡在體外培養(yǎng)時(shí)，容易從細(xì)胞內(nèi)釋放到營(yíng)養(yǎng)液中的病毒為A群；B群：病毒同細(xì)胞緊密結(jié)合很難釋放到營(yíng)養(yǎng)液中為B群，又名細(xì)胞結(jié)合性病毒。

皰疹病毒基因組結(jié)構(gòu)由末端重復(fù)序列和內(nèi)部重復(fù)序列所組成，重復(fù)序列的數(shù)量和長(zhǎng)度在不同的皰疹病毒有較大的差異。

皰疹病毒的基因可以整合于細(xì)胞的基因組內(nèi)，成為細(xì)胞DNA的一部分，長(zhǎng)遠(yuǎn)地復(fù)制下去，形成長(zhǎng)期潛伏感染狀態(tài)。

皰疹病毒與腫瘤發(fā)生關(guān)系的機(jī)制目前已經(jīng)證明與皰疹病毒隱性感染有關(guān)。

人皰疹病毒共有5型，皰疹病毒4型，即EB病毒（EBV），EBV除引起人類皮膚和黏膜的皰疹樣病變外，還與人類鼻咽癌有密切關(guān)系。

逆轉(zhuǎn)錄病毒科最基本的特征是在其生命活動(dòng)過(guò)程中有RNA到DNA的復(fù)制過(guò)程。

逆轉(zhuǎn)錄病毒病毒的基因組是單股、正鏈、線性RNA的二聚體，病毒粒子中的RNA不具備感染性。逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA反轉(zhuǎn)錄成為DNA后，病毒DNA可以整合在宿主染色體中，這是逆轉(zhuǎn)錄病毒生命存在的一種形式，這種形式稱之為前病毒。能夠引起腫瘤的逆轉(zhuǎn)錄病毒在文獻(xiàn)中被稱之為RNA腫瘤病毒。

致瘤性逆轉(zhuǎn)錄病毒中可以引起惡性疾患，潛伏期長(zhǎng)，并且不引起靶細(xì)胞培養(yǎng)物產(chǎn)生明顯的變化的病毒為白血病病毒。

逆轉(zhuǎn)錄病毒獨(dú)特的基因組結(jié)構(gòu)和生命周期使逆轉(zhuǎn)錄病毒在分子生物學(xué)研究和基因治療中其到了基因轉(zhuǎn)移載體的重要作用。人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV-1）和人Ⅱ型免疫缺陷病毒（HIV-2）引起人的獲得性免疫缺陷綜合征。（AIDS）

1、、病原學(xué)：人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV-1）和人Ⅱ型免疫缺陷病毒（HIV-2）引起人的獲得性免疫缺陷綜合征，簡(jiǎn)稱艾滋?。ˋIDS）。

艾滋病病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科、慢病毒屬。

2、致病機(jī)制：HIV對(duì)CD+4細(xì)胞有選擇性的親嗜性。病毒侵入細(xì)胞后，借助反轉(zhuǎn)錄酶合成DNA，與細(xì)胞DNA整合，并利用宿主細(xì)胞的酶系統(tǒng)進(jìn)行生物合成，產(chǎn)生病毒產(chǎn)物，致使宿主細(xì)胞死亡，釋放出大量新病毒，攻擊新的靶細(xì)胞，從而使T4淋巴細(xì)胞數(shù)量不斷減少；

正常的T4細(xì)胞，通過(guò)CD+4細(xì)胞結(jié)合病毒與病毒表面蛋白，而被細(xì)胞毒作用T細(xì)胞（T8）識(shí)別，進(jìn)而被殺傷。

T4淋巴細(xì)胞在免疫應(yīng)答過(guò)程中起調(diào)節(jié)作用，與①單核-巨噬細(xì)胞、②細(xì)胞毒性T細(xì)胞③NK細(xì)胞、④B細(xì)胞等均有密切關(guān)系，所以T4細(xì)胞耗竭、功能下降，必將使免疫系統(tǒng)的多種功能發(fā)生缺陷。

3、傳播途徑：性接觸為最主要的傳播途徑；經(jīng)注射途徑、孕婦胎盤以及破損皮膚等均可造成感染。

4、診斷：測(cè)定HIV感染的最簡(jiǎn)便方法是測(cè)定HIV抗體。

5、預(yù)防：切斷各種傳播途徑。

脊髓灰質(zhì)炎病毒屬于小核糖核酸病毒科，腸道病毒屬的病毒，主要經(jīng)過(guò)糞-口途徑傳播。脊髓灰質(zhì)炎病毒進(jìn)入機(jī)體后，主要侵犯脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元。目前脊髓灰質(zhì)炎在世界上許多國(guó)家，包括中國(guó)，已經(jīng)消失。

口蹄疫病毒屬于小核糖核酸病毒科、口蹄疫病毒屬，是一種主要感染偶蹄動(dòng)物的烈性傳染病，人和非偶蹄動(dòng)物也可感染，但癥狀相對(duì)較輕。

口蹄疫一旦發(fā)生則呈暴發(fā)性流行，可以跳躍式傳播，在適合的氣候條件下還可通過(guò)風(fēng)媒的途徑傳播。人感染口蹄疫病毒后只在口腔黏膜、手、足處皮膚出現(xiàn)水皰，可自愈，個(gè)別嚴(yán)重病例見(jiàn)于兒童。動(dòng)物患口蹄疫后其生產(chǎn)性能急劇下降；對(duì)疫區(qū)要進(jìn)行封鎖，封鎖期間疫區(qū)內(nèi)正常的畜產(chǎn)品交易和生產(chǎn)活動(dòng)都不能進(jìn)行；

對(duì)確診為口蹄疫的動(dòng)物要立即捕殺、銷毀。所以口蹄疫暴發(fā)后對(duì)畜、牧、業(yè)生產(chǎn)乃至整個(gè)國(guó)民經(jīng)濟(jì)都會(huì)造成巨大的損失。

呼吸道合胞病毒屬于副粘病毒科、肺病毒屬。因在組織培養(yǎng)繁殖時(shí)能引起細(xì)胞融合而定為現(xiàn)在的名稱。呼吸道合胞病毒可以引起嬰幼兒產(chǎn)生嚴(yán)重的下呼吸道感染。

1、病毒的分離和鑒定：（P219）病毒對(duì)細(xì)胞的感染性具有嚴(yán)格的選擇性和特異性，因此用組織培養(yǎng)細(xì)胞接種病毒必須首先選擇敏感細(xì)胞。（1）病毒增殖的判定：（略）

（2）細(xì)胞病變（CPE）：大部分病毒在敏感細(xì)胞系均可出現(xiàn)CPE（細(xì)胞病變），CPE（細(xì)胞病變）可以表現(xiàn)為嚴(yán)重的細(xì)胞破壞、細(xì)胞腫大、顆粒增多、細(xì)胞融合成合胞體或無(wú)明顯的細(xì)胞變化等。CPE（細(xì)胞病變）經(jīng)常具有病毒“種”的特性，因此常常作為病毒堅(jiān)定依據(jù)。

（3）病毒蝕(shi)斑技術(shù)（又稱空斑）：病毒蝕(shi)斑是指病毒在已長(zhǎng)成的單層細(xì)胞上形成的局限性病灶，主要用于病毒的純化或病毒懸液中感染病毒含量的測(cè)定。（用病毒蝕斑技術(shù)測(cè)定含量-病毒純化或病毒懸液中感染的病毒）

（4）病毒感染力的滴定：有兩種，一種方法是用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物測(cè)定LD50(半數(shù)致死量)；另一種方法是在組織細(xì)胞上測(cè)定TCID50（半數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)物感染量。

（5）病毒的保存：分離或鑒定后的病毒經(jīng)過(guò)冷凍干燥后可以長(zhǎng)期保存。

2、免疫-血清學(xué)實(shí)驗(yàn)：免疫-血清學(xué)實(shí)驗(yàn)是利用抗原和抗體的特異性結(jié)合的原理進(jìn)行的，主要用于兩個(gè)目的：

①?gòu)牟×汐@得病毒株后，應(yīng)用已知的抗病毒血清或單克隆抗體進(jìn)行免疫-血清學(xué)試驗(yàn)，鑒定病毒的種類乃至型別；

②由發(fā)病動(dòng)物采集血清標(biāo)本，應(yīng)用全病毒或特異性病毒抗原，測(cè)定發(fā)病動(dòng)物體液中的特異性抗體，或進(jìn)一步比較發(fā)病動(dòng)物的急性發(fā)病期和恢復(fù)期血清中的抗體效價(jià)，了解病毒性抗體是否有明顯的增長(zhǎng)，從而判定病毒感染的存在。

（1）中和試驗(yàn)：動(dòng)物在受到病毒感染后，在體內(nèi)產(chǎn)生抗體，如果該抗體能與相應(yīng)的病毒粒子特異性地結(jié)合，使后者喪失感染力，這種抗體就成為中和抗體。

應(yīng)用已知的病毒或病毒抗原，可以測(cè)知患者體內(nèi)中和抗體的存在及其效價(jià)；

用已知的抗病毒血清或中和性單克隆抗體，也可以進(jìn)行病毒的鑒定，因此中和試驗(yàn)也常用于新分離病毒株的鑒定。

（2）血凝和血凝抑制試驗(yàn)：許多病毒能夠凝集某些種類動(dòng)物的紅細(xì)胞，病毒凝集的紅細(xì)胞種類隨病毒種類的不同而不同。

血凝反應(yīng)可被特異性抗體所抑制，因此血凝抑制試驗(yàn)可以應(yīng)用于：

①應(yīng)用于標(biāo)準(zhǔn)病毒懸液測(cè)定血清中的相應(yīng)抗體；②應(yīng)用于特異性抗體鑒定新分離的病毒。

用枸櫞酸鈉配置的阿氏液具有抗紅細(xì)胞凝集作用，用于血凝和血凝抑制試驗(yàn)中配置紅細(xì)胞懸掖。同一患者急性發(fā)病期和恢復(fù)期雙份血清（相距2～3周）的抗體效價(jià)增高4倍以上者，說(shuō)明本次發(fā)病是由所測(cè)抗體相應(yīng)病毒引起的。

（3）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)：一個(gè)抗體分子與抗原結(jié)合后，可以導(dǎo)致數(shù)百個(gè)補(bǔ)體分子的激活，呈現(xiàn)一定程度的放大作用，所以補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)是一個(gè)比較敏感的方法，一般用于人及動(dòng)物血清中特異性抗體的定量檢測(cè)（補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)），也常用于新分離病毒的鑒定。

（4）免疫熒光技術(shù)：將抗原或抗體標(biāo)記上熒光素，再進(jìn)行抗原-抗體反應(yīng)，出現(xiàn)熒光就說(shuō)明標(biāo)記物的存在，同時(shí)也反映了抗原或抗體的存在。

免疫熒光技術(shù)具有抗原-抗體反應(yīng)的特異性和染色技術(shù)的快速性，并可在細(xì)胞水平上進(jìn)行抗原定位，故在病毒學(xué)研究和病毒病的診斷中都是一種應(yīng)用很廣的方法。熒光抗體染色技術(shù)包括（1）直接法、（2）間接法、（3）補(bǔ)體法、（4）SPA(葡萄球菌A蛋白)免疫熒光法。

（5）酶免疫技術(shù)：以酶作為標(biāo)記物，通過(guò)化學(xué)方法將其與抗原或抗體共價(jià)結(jié)合，形成酶標(biāo)記物，可與被檢的抗原或抗體起反應(yīng)，形成酶標(biāo)記免疫復(fù)合物。制備酶結(jié)合物的方法很多，目前應(yīng)用最廣泛的有過(guò)碘酸鹽法和戊二醛法。

酶免疫測(cè)定試驗(yàn)包括：①間接法（測(cè)抗體）、②雙抗體夾心法（測(cè)抗原）、③IgM捕獲ELISA（酶鏈免疫吸附實(shí)驗(yàn)）、④競(jìng)爭(zhēng)法。IgM是動(dòng)物機(jī)體在受到初次抗原刺激后最早產(chǎn)生的一種抗體球蛋白，因此IgM捕獲ELISA常應(yīng)用于多

種病毒病的早期診斷。抗u鏈抗體特異性結(jié)合IgM，可以應(yīng)用于IgM捕獲ELISA。

IgG是主要的抗病毒抗體，在第二次抗原刺激時(shí)，由于免疫回憶，發(fā)生迅速的加強(qiáng)反應(yīng)IgG量顯著增高（分子量大）。在病毒病的診斷中，也常將這一原理用于判斷病毒病的感染狀況，但常常需要采集恢復(fù)期和急性期雙份血清

進(jìn)行抗體效價(jià)的比較如IgG水平4倍或4倍以上增加具有血清學(xué)診斷意義。

（6）膠體金免疫檢測(cè)技術(shù)：膠體金免疫檢測(cè)技術(shù)是以膠體金為載體吸附抗體和抗原，完成檢測(cè)特異性抗原或抗體的。膠體金免疫檢測(cè)技術(shù)優(yōu)于ELISA（酶鏈免疫吸附實(shí)驗(yàn)）法和免疫熒光法的最主要一點(diǎn)是肉眼直接判定結(jié)果。

（總結(jié)：膠體金免疫檢測(cè)技術(shù)就是直接用肉眼可以觀察結(jié)果）。

3、病毒病的分子生物學(xué)診斷：分子生物學(xué)診斷的特異性取決于核酸序列的特異性，病毒病的分子生物學(xué)診斷，包括對(duì)病毒核酸和蛋白質(zhì)的測(cè)定。

PCR（全稱是聚合酶鏈反應(yīng)），是在引物、摸板DNA和4種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)。

由于引物是按照與擴(kuò)增區(qū)段兩端序列彼此互補(bǔ)的原則設(shè)計(jì)的，因此每一條新生鏈的合成都是從引物的退火結(jié)合位點(diǎn)開(kāi)始，并沿著相反鏈延伸。

因此，PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）的特異性是由人工合成的一對(duì)寡核苷酸引物所決定的。PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）可以在數(shù)小時(shí)內(nèi)對(duì)僅有的幾個(gè)拷貝的基因放大數(shù)百萬(wàn)倍，使PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）擴(kuò)增結(jié)果在瓊脂糖凝膠電泳后形成明顯可見(jiàn)的DNA帶。

溴化乙錠（EB）可以插入核酸分子之間并在紫外線下放射熒光，因此可以作為核酸分子電泳的指示劑。（核酸分子電泳的指示劑用溴化乙錠-EB）。

（1）RT-PCR(聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)：由于DNA聚合酶不能以RNA為摸板合成cDNA，所以不能對(duì)RNA病毒核酸進(jìn)行直接PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）。

首先必須提取病毒RNA。提取病毒RNA時(shí)，要注意避免RNA酶對(duì)病毒RNA的降解作用。為此，所用的試劑和用品均需要進(jìn)行無(wú)Rnase處理，（Rnas必須使用無(wú)熱原質(zhì)水制備）如加入RNA酶抑制劑或高壓滅菌。加入反轉(zhuǎn)錄酶經(jīng)過(guò)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成與病毒RNA互補(bǔ)的DNA(cDNA)，然后才能進(jìn)行PCR（聚合酶鏈反應(yīng)），這就是所謂的RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）。

目前常用的逆轉(zhuǎn)錄酶（RT-PCR）包括MMV和AMV。RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）反應(yīng)的特異性取決于模板和引物，引物序列必須是被檢病毒特異的，原則上要求引物3'端堿基與模板一定要配對(duì)，對(duì)引物5'末端的堿基并沒(méi)有嚴(yán)格的限制，只要與模板DNA結(jié)合的引物長(zhǎng)度足夠，其5'末端堿基可以不與模板DNA匹配而呈游離狀態(tài)，因此對(duì)引物5'末端可以進(jìn)行自由修飾。

PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）反應(yīng)中，引物1又稱Watson引物，是與模板正鏈互補(bǔ)的寡核苷酸鏈。

（2）核酸雜交檢測(cè)技術(shù)：雜交的基本原理是帶互補(bǔ)序列的單鏈核苷酸相遇時(shí)，會(huì)退火形成雙鏈。

“用于診斷目的”雜交雙方是已知序列的病毒探針和待測(cè)樣品中的病毒核酸，如果是陽(yáng)性結(jié)果說(shuō)明病毒感染的存在。在核酸分子雜交技術(shù)基礎(chǔ)之上又發(fā)展了一系列檢測(cè)DNA和RNA的技術(shù)，如Southrn blotting、Western blotting、Dit blotting和菌落雜交。

聚丙烯酰胺凝膠電泳也可簡(jiǎn)稱為PAGE（PAGE聚丙烯酰胺凝膠電泳-測(cè)雜交）DNA限制性內(nèi)切酶可以識(shí)別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列。

利用不同的內(nèi)切酶切割病毒DNA，依據(jù)切割后的片段在凝膠電泳中泳動(dòng)速率不同所形成的電泳帶型做出診斷。

（3）病毒病的免疫預(yù)防：決定疫苗免疫效果的關(guān)鍵因素是疫苗本身的質(zhì)量。

目前普遍應(yīng)用的病毒疫苗主要分為弱毒（活）疫苗和滅活疫苗兩類。弱毒（活）疫苗分解成（弱毒疫苗、弱活疫苗）。近年來(lái)隨著分子病毒學(xué)研究的不斷深入，相繼研究出了（1）亞單位疫苗、（2）基因工程疫苗、（3）活載體疫苗、（4）分子疫苗。

蟲(chóng)媒病毒是由媒介昆蟲(chóng)作為病毒的傳遞者的一類病毒，由蟲(chóng)媒病毒引起的疾病即為蟲(chóng)媒病毒，如乙型腦炎、新疆出血熱、登革熱、黑熱病等。

類病毒沒(méi)有外殼蛋白，對(duì)各種有機(jī)溶劑有抵抗力，說(shuō)明也沒(méi)有脂質(zhì)外膜，只是一個(gè)裸露的RNA分子，類病毒只出現(xiàn)于植物。

在人和動(dòng)物中存在著一類被稱為亞急性海綿樣腦病的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如瘋牛病。瘋牛病能夠通過(guò)食物鏈傳染給人。

研究證明，這種奇特疾病的病原，即不是病毒，也不是類病毒，大體上是由蛋白質(zhì)組成，目前稱之為阮病毒。（總結(jié)：病毒-亞急性海綿樣腦病的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如瘋牛?。?/p>

1、病原學(xué)：流行性乙型腦炎病毒屬于黃病毒科。黃病毒科能夠致人疾病的病毒有登革熱病毒、丙型肝炎病毒和乙型腦炎病毒。

由于1924年乙型腦炎病毒首先證實(shí)于日本，故也稱其為日本乙型腦炎。C6/36細(xì)胞適合于乙型腦炎病毒的分離和培養(yǎng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動(dòng)物與傳染原：由蚊為媒介而傳播，引起人畜感染的主要媒介可能是三帶啄庫(kù)蚊，其他庫(kù)蚊也有可能。

（2）傳染途徑：流行性乙型腦炎是一種自然疫源性疾病，豬是傳播乙型腦炎病毒（乙腦病毒）的主要?jiǎng)游锼拗鳌?/p>

乙型腦炎病毒通過(guò)蚊-豬-蚊的循環(huán)維持自身的存在。（3）人群易感性：除人、馬和豬外，通常不呈現(xiàn)臨床癥狀。

3、臨床表現(xiàn)：流行性乙型腦炎是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)的急性傳染病，以高熱和狂暴或沉郁等神經(jīng)癥狀為特征。

4、預(yù)防：疫苗預(yù)防注射。

1、病原學(xué)：登革病毒屬于黃病毒科黃病毒屬含單股正鏈RNA。登革熱（DH）和登革出血熱（DHF）是由4個(gè)血清型病毒引起的兩種不同臨床類型的急性傳染病。C6/36細(xì)胞可用于登革病毒分離和培養(yǎng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動(dòng)物與傳染原：中國(guó)DH/DHF的傳播媒介主要為埃及伊蚊和白紋wen伊蚊，這些蚊種主要生活在家庭儲(chǔ)水容器中。

（2）傳染途徑：登革熱存在城市型（人-蚊-人循環(huán)）、叢林型（猴-蚊-猴循環(huán)）兩種疫源地。中國(guó)主要為人-蚊-人循環(huán)。

（3）人群易感性：DH/DHF主要發(fā)生于熱帶和亞熱帶地區(qū)。中國(guó)從嬰兒到老人均可發(fā)病，以兒童和青壯年患病率較高。

3、臨床表現(xiàn)：潛伏期：一般為5～8天。

登革熱主要以高熱、頭痛、肌肉和關(guān)節(jié)痛為主，與登革熱的主要區(qū)別是有無(wú)嚴(yán)重出血。

DSS（登革休克綜合征）是DH/DHF的嚴(yán)重形式，其含義是登革休克綜合征。主要診斷依據(jù)為出血、休克、口唇發(fā)紺和血壓低或測(cè)不到。

（這些癥狀是登革休克綜合征臨床表現(xiàn)）世界衛(wèi)生組織(WHO)對(duì)DHF/ DSS的診斷限定了嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)。有四種主要的臨床表現(xiàn)：高熱、出血、肝腫大和循環(huán)衰竭。WHO根據(jù)疾病的嚴(yán)重程度把DHF/ DSS（登革出血熱/登革休克綜合征）

分為四個(gè)等級(jí)：Ⅰ級(jí)和Ⅱ級(jí)表現(xiàn)為DHF（登革出血熱）輕型，Ⅲ級(jí)和Ⅳ級(jí)表現(xiàn)為更嚴(yán)重的形式—DSS的（登革休克綜合征）

4、預(yù)防：防蚊滅蚊。傳染源的管理。

1、病原學(xué)：流行性出血熱病毒屬于布尼亞病毒科漢坦病毒屬，基因?yàn)樨?fù)鏈分節(jié)段RNA。中國(guó)目前發(fā)現(xiàn)的流行性出血熱主要有2種類型：

HTNV型（野鼠型）和SEOV型（家鼠型）。Vero-E6細(xì)胞適合于流行性出血熱病毒的分離和培養(yǎng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動(dòng)物與傳染原：在我國(guó)流行性出血熱主要傳染源和病毒宿主為嚙nie齒動(dòng)物（黑線姬鼠和褐家鼠）。嚙nie-咬如蟲(chóng)咬嚙。

（2）傳染途徑：接觸帶病毒的宿主動(dòng)物及其排泄物可以造成感染。（3）人群易感性：普遍易感。

3、臨床表現(xiàn)：潛伏期：一般為7～14天。

典型的臨床表現(xiàn)有三大特征：發(fā)熱、出血和腎損害。流行性出血熱主要以腎臟損害為特征，故又稱之為腎綜合征出血熱。

4、預(yù)防：

（1）防鼠滅鼠。

（2）接種疫苗：目前我國(guó)所使用的流行性出血熱的疫苗是細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗，可以分為3種類型（家鼠型、野鼠型、家鼠、野鼠雙價(jià)混合苗）經(jīng)過(guò)近幾年的應(yīng)用已證明在預(yù)防流行性出血熱方面有效。（3）講究衛(wèi)生。

5、診斷：流行性出血熱對(duì)于明確疫源地類型、選擇所用疫苗的種類、指導(dǎo)防治策略等都非常重要。目前流行性出血熱的分型診斷方法有多種，包括（1）免疫熒光法（2）單抗分型

（3）RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）

（4）ELISA（酶鏈免疫吸附實(shí)驗(yàn)）法。鼠帶毒率調(diào)查是常用的監(jiān)測(cè)手段之一，用于流行性出血熱鼠帶毒率調(diào)查標(biāo)本制備的主要方法為鼠肺冰凍切片，鼠帶毒率調(diào)查的常用方法為免疫熒光法。、病原學(xué)：克里米亞—?jiǎng)偣鲅獰崾遣寄醽啿《究?、?nèi)羅病毒屬的病毒，故又稱為新疆出血熱。病毒基因組為負(fù)鏈分節(jié)段RNA。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動(dòng)物與傳染原：30多種蜱，特別璃眼蜱屬既是該病毒的儲(chǔ)存宿主又是傳播媒介；多種不同的脊椎動(dòng)物既是蜱的宿主，也可能是病毒的儲(chǔ)存宿主。

（2）傳染途徑：人的感染是因?yàn)轵绲亩ＲЩ蛎芮薪佑|感染動(dòng)物或患者。（3）人群易感性：普遍易感。

3、臨床表現(xiàn)：潛伏期：蜱叮咬至疾病發(fā)作之間的時(shí)間為潛伏期，一般為3～6天。

臨床表現(xiàn)：克里米亞—?jiǎng)偣鲅獰崾且环N神經(jīng)系統(tǒng)的疾病，神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀出現(xiàn)于血管異常造成的顯著的出血綜合征之前。

常常為突發(fā)和急性，發(fā)熱（39℃～41℃）、寒戰(zhàn)、頭痛、風(fēng)濕痛、腰痛和上腹部痛等。隨后迅速發(fā)展到短暫的、最嚴(yán)重的出血期，一般4天后在疾病高峰期導(dǎo)致死亡。

4、預(yù)防：目前尚無(wú)特異性疫苗進(jìn)行接觸前的主動(dòng)預(yù)防。有效的預(yù)防首先應(yīng)避免與傳染源及媒介的接觸。

1、甲型肝炎病毒：甲型肝炎病毒（HAV）可以引起甲型肝炎。在病毒分類上甲肝病毒屬于小RNA病毒科。

甲型肝炎實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要依賴于檢測(cè)患者血清中的抗HAV（甲型肝炎病毒）的IgM。

2、乙型肝炎病毒：（HBV）

（1）病原學(xué)：乙型肝炎病毒（HBV）屬于嗜肝DNA病毒科、正嗜肝DNA病毒屬，是傳染性肝炎的一個(gè)重要病因。

（2）流行病學(xué)：HBV（乙型肝炎病毒）的唯一宿主是人。嗜肝DNA病毒可以存活于那些與感染者粘膜或皮膚創(chuàng)口接觸的物品表面。

（3）診斷：HBV（乙型肝炎病毒）侵入機(jī)體后進(jìn)入血液循環(huán)，主要在白細(xì)胞中進(jìn)行繁殖。HBV（乙型肝炎病毒）主要有3種抗原，分別為HBsAg（乙型肝炎表面抗原）、HBcAg（乙型肝炎核心抗原）、HBeAg（乙肝e抗原）。

HBsAg（乙型肝炎表面抗原）：

①HBsAg可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生乙型肝炎表面抗體（抗—HBs）,具有抗HBV（乙型肝炎病毒）感染的作用 ②HBsAg與病毒的中和性作用有關(guān)。

HBcAg（乙型肝炎核心抗原）：為病毒核心的主要抗原，是急性乙型肝炎病毒感染的重要診斷指標(biāo)之一，是檢測(cè)到抗HbcAgM。

HBeAg（乙肝e抗原）：在乙型肝炎潛伏期的后期出現(xiàn)并且HBeAg的存在表示HBV（乙型肝炎病毒）的存在。

HBeAg是在病毒復(fù)制活躍時(shí)的宿主血清中檢測(cè)到的一種可溶性抗原，HBeAg成分的消失和出現(xiàn)相應(yīng)的抗體，預(yù)示著乙型肝炎病毒的繁殖減弱和疾病有可能向好的方面轉(zhuǎn)化。

血清中HBV（乙型肝炎病毒）DNA聚合酶的存在，表明HBV的感染處于病毒活動(dòng)復(fù)制期。

（4）預(yù)防：疫苗接種：目前用于預(yù)防接種的乙型肝炎疫苗主要有基因工程乙肝疫苗和乙型肝炎表面抗原佐劑疫苗。防止血源性污染和傳播。

3、丙型肝炎病毒：（HCV）——非甲非乙型肝炎病毒（1）病原學(xué)：

丙型肝炎病毒（HCV）屬于黃病毒科、類丙型肝炎病毒屬。病毒粒子含有一單股正鏈RNA。丙型肝炎又可稱為非甲非乙型肝炎，根據(jù)其流行病學(xué)特征、臨床表現(xiàn)和傳播方式，可以將其分為 ①腸道傳播的非甲非乙型肝炎 ②輸血后非甲非乙型肝炎。（2）流行病學(xué)：

①宿主動(dòng)物與傳染源：人是丙型肝炎的自然宿主和貯zhu存者。尚未確認(rèn)別的自然宿主和非脊椎動(dòng)物傳播媒介。

②傳染途徑：約60%的丙型肝炎病例都是由血液接觸引起的，而非腸道感染。③人群易感性：普遍易感。

4、丁型肝炎病毒（HDV）：丁型肝炎病毒（HDV）為缺陷型RNA病毒，必須借助乙型肝炎表面抗原（HBsAg）包裹才能成為感染性病毒顆粒，常與HBV（乙型肝炎）同時(shí)或重疊感染。HDV（丁型肝炎病毒）主要通過(guò)非腸道傳播途徑傳播。HDV感染的指標(biāo)是血液和體液中可測(cè)得HDV抗原。抗HDV抗體檢測(cè)可以反映HDV感染狀況。

慢性HDV感染與多種肝臟疾病密切相關(guān)，包括重癥肝炎、肝硬化、丁型肝炎和慢性活動(dòng)性肝炎。

1、病原學(xué)：流感病毒屬于正粘病毒科。按流感病毒核蛋白與基質(zhì)蛋白抗原性的不同，流感病毒又可分為甲、乙、丙3型。

流感病毒基因組為單股RNA，由8個(gè)階段組成。流感病毒基因組片段具有共同的特點(diǎn)：所有的RNA階段具有相同的5’端。

1980年WHO公布的流感病毒命名方法，一株流感病毒名稱中包括下面幾項(xiàng)內(nèi)容：型別/宿主/分離地點(diǎn)/毒株序號(hào)/分離年代（亞型）。

流感病毒血凝素變異性很強(qiáng)是造成流感病毒易發(fā)生抗原變異的主要原因。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動(dòng)物與傳染源： 人的絕大多數(shù)甲型流感病毒能自然感染家禽、家畜，并進(jìn)一步支持人甲型流感病毒新亞型可能來(lái)源于動(dòng)物的觀點(diǎn)。

乙型流感病毒能引起人的呼吸道感染，丙型流感病毒也是感染人的病毒。（2）傳播途徑：流感病毒的主要傳播途徑是空氣飛沫。

（3）人群易感性：3個(gè)型流感病毒沒(méi)有共同抗原，都能感染人；但甲型流感病毒的感染范圍很廣，容易引起大規(guī)模流行。

3、免疫預(yù)防：由于流感病毒變異頻繁，因此疫苗注射必須有針對(duì)性，即必須針對(duì)當(dāng)前的流行株，才能取得良好的免疫效果。

4、診斷：用于流感病毒分離與鑒定的標(biāo)本應(yīng)取自患者鼻咽分必物。流感病毒的快速診斷主要依賴于檢查抗病毒血凝素抗體。

1、病原學(xué)：絲狀病毒科、絲狀病毒屬包括兩種病毒，即①埃博拉病毒和②馬爾堡病毒。研究絲狀病毒的重要意義在于：

（1）這兩種病毒均具極高的傳染性，對(duì)人類的危害極大；（2）室溫下非常穩(wěn)定；（3）埃博拉病毒

60℃1小時(shí)仍不能被完全滅火，由于特有的生物學(xué)性質(zhì)和致病力，WHO將其列為潛在的生物戰(zhàn)劑之一。（4）埃博拉病毒最初流行于扎伊爾北部的埃博拉河流域而命名為埃博拉病毒。

2、流行病學(xué)：埃博拉病毒的自然宿主尚末確定。自然條件下，人和猴都能發(fā)生嚴(yán)重感染并死亡。埃博拉病毒感染后可以引起出血的臨床表現(xiàn)，因此常將其歸為出血熱病毒。

根據(jù)埃博拉病毒的抗原性的差異，又可將埃博拉病毒分為3個(gè)血清型，不同血清型的埃博拉病毒其致病型有很大的差異。

目前認(rèn)為，埃博拉病毒的疫源地主要在非洲大陸，但1989年自菲律賓運(yùn)往美國(guó)的獼猴發(fā)生了感染，泰國(guó)也有埃博拉病毒感染的血清學(xué)證據(jù)，提示東南亞地區(qū)也可能是疫源地之一。馬爾堡病毒也可引起人的嚴(yán)重出血熱，在人-人或猴-人之間傳播。

鼻病毒屬于小核糖核酸病毒科、鼻病毒屬，是與人類普遍感冒有關(guān)的病毒。流行性腮腺炎是由副粘病毒科、副粘病毒屬的腮腺炎病毒引起。流行性腮腺炎最具有流行病學(xué)意義的傳染源是亞臨床型者。

天花是痘病毒科、正痘病毒屬的天花病毒引起的一種傳播迅速的烈性傳染病。由于使用痘苗病毒疫苗預(yù)防，1977年天花在全世界流行終止。

1、病原學(xué)：狂犬病毒屬于彈狀病毒科、狂犬病毒屬。因其特有的臨床表現(xiàn)，狂犬病又可稱為“恐水病”。

從感染動(dòng)物或患者中發(fā)現(xiàn)的狂犬病毒又可稱之為野毒株或街毒；狂犬病毒街毒經(jīng)過(guò)系列傳代適應(yīng)特定宿主后即為固定毒。

根據(jù)對(duì)不同毒株的血清反應(yīng)和單克隆抗體分析，將狂犬病毒分成5個(gè)血清型：血清1型、血清2型、血清3型、血清4型、血清5型。

血清2、3、4、5型又稱為狂犬病相關(guān)病毒，野外分布的主要為血清2、3、4型。

在血清分型的基礎(chǔ)上，利用分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)狂犬病毒也進(jìn)行了遺傳學(xué)分型，即將狂犬病毒屬分為6種基因型：

基因型1（血清1型）、基因型2（血清2型）、基因型3（血清3型）、基因型4（血清4型）、基因型5和基因型6（血清5型）相對(duì)應(yīng)。

2、流行病學(xué)：

（1）宿主動(dòng)物與傳染源：狂犬病毒幾乎可以感染所有溫血?jiǎng)游?，但造成人類感染的主要傳染源是帶病毒犬。?）傳播途徑：因感染狂犬病毒的動(dòng)物咬傷，感染性唾液污染傷口發(fā)生感染。（3）人群易感性：人及所有溫血?jiǎng)游锝阅芨腥尽?/p>

3、預(yù)防：狂犬病的預(yù)防主要包括兩個(gè)方面：（1）即控制傳染源（2）暴露后應(yīng)用免疫制劑?？刂苽魅驹粗饕羌茵B(yǎng)犬的免疫。

狂犬病免疫制劑包括被動(dòng)免疫與主動(dòng)免疫兩種。

狂犬病的被動(dòng)免疫制劑有動(dòng)物源抗狂犬病病毒的精制血清和人源狂犬病免疫球蛋白。

主動(dòng)免疫即注射狂犬疫苗。我國(guó)于1981年開(kāi)始用地鼠腎細(xì)胞疫苗，近幾年又開(kāi)始應(yīng)用Vero（非洲綠猴腎）細(xì)胞狂犬病疫苗。

4、診斷：狂犬病病毒或病毒抗原可以在患者身體多個(gè)部位，如角膜壓片、腦脊髓液、唾液和咬傷處皮膚組織檢測(cè)到。

實(shí)驗(yàn)室診斷狂犬病最具特性的診斷依據(jù)是—感染神經(jīng)原內(nèi)的Negri小體（內(nèi)基氏小體），最常見(jiàn)于海馬及小腦普爾金耶組織的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)，是狂犬病病毒的集落。

WHO推薦快速熒光灶抑制試驗(yàn)取代了傳統(tǒng)的小鼠中和實(shí)驗(yàn)檢測(cè)狂犬疫苗免疫后中和抗體水平。

1、病原學(xué)：輪狀病毒屬于呼腸孤病毒科、輪狀病毒屬，是各種幼齡動(dòng)物非細(xì)胞性腹瀉的主要病原之一。

病毒由11個(gè)節(jié)段的雙鏈RNA組成。根據(jù)輪狀病毒RNA11個(gè)節(jié)段的聚丙烯酰胺電泳圖形不同，可以將輪狀病毒進(jìn)行分型和鑒定。

絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物輪狀病毒，具有一種相同的群抗原，這些輪狀病毒被命名為A群輪狀病毒，是研究的主要對(duì)象。

2、流行病學(xué)：輪狀病毒宿主范圍甚廣，已知的有人及多種動(dòng)物。據(jù)初步統(tǒng)計(jì)，全世界幼兒發(fā)生的腸炎至少有50%是由輪狀病毒引起的。（腸道病毒）。

3、預(yù)防：人用口服輪狀病毒活疫苗可是兒童獲得保護(hù)。

4、診斷：輪狀病毒感染的可靠的實(shí)驗(yàn)室診斷依賴于檢出輪狀病毒或抗原，進(jìn)行該項(xiàng)診斷應(yīng)收集糞便。培養(yǎng)輪狀病毒使用最普遍的是MA-104傳代細(xì)胞系。

輪狀病毒復(fù)制方式不同于其他呼腸孤病毒，它不是通過(guò)吞飲作用進(jìn)入細(xì)胞，而是通過(guò)胞漿膜直接進(jìn)入胞漿，胰蛋白酶對(duì)病毒進(jìn)行處理可以使病毒變?yōu)橛懈腥拘浴?/p>

因此為了在細(xì)胞培養(yǎng)中復(fù)制輪狀病毒和連續(xù)傳代通常需要用胰蛋白酶對(duì)病毒進(jìn)行處理，從而促進(jìn)輪狀病毒的感染性。

皰疹病毒是一群較大的有囊膜的雙鏈DNA病毒。

根據(jù)進(jìn)行該項(xiàng)診斷皰疹病毒的感染性質(zhì)，又可將皰疹病毒分為A群和B群兩個(gè)亞群。

A群：凡在體外培養(yǎng)時(shí)，容易從細(xì)胞內(nèi)釋放到營(yíng)養(yǎng)液中的病毒為A群；B群：病毒同細(xì)胞緊密結(jié)合很難釋放到營(yíng)養(yǎng)液中為B群，又名細(xì)胞結(jié)合性病毒。

皰疹病毒基因組結(jié)構(gòu)由末端重復(fù)序列和內(nèi)部重復(fù)序列所組成，重復(fù)序列的數(shù)量和長(zhǎng)度在不同的皰疹病毒有較大的差異。

皰疹病毒的基因可以整合于細(xì)胞的基因組內(nèi)，成為細(xì)胞DNA的一部分，長(zhǎng)遠(yuǎn)地復(fù)制下去，形成長(zhǎng)期潛伏感染狀態(tài)。

皰疹病毒與腫瘤發(fā)生關(guān)系的機(jī)制目前已經(jīng)證明與皰疹病毒隱性感染有關(guān)。

人皰疹病毒共有5型，皰疹病毒4型，即EB病毒（EBV），EBV除引起人類皮膚和黏膜的皰疹樣病變外，還與人類鼻咽癌有密切關(guān)系。

逆轉(zhuǎn)錄病毒科最基本的特征是在其生命活動(dòng)過(guò)程中有RNA到DNA的復(fù)制過(guò)程。

逆轉(zhuǎn)錄病毒病毒的基因組是單股、正鏈、線性RNA的二聚體，病毒粒子中的RNA不具備感染性。逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA反轉(zhuǎn)錄成為DNA后，病毒DNA可以整合在宿主染色體中，這是逆轉(zhuǎn)錄病毒生命存在的一種形式，這種形式稱之為前病毒。能夠引起腫瘤的逆轉(zhuǎn)錄病毒在文獻(xiàn)中被稱之為RNA腫瘤病毒。

致瘤性逆轉(zhuǎn)錄病毒中可以引起惡性疾患，潛伏期長(zhǎng)，并且不引起靶細(xì)胞培養(yǎng)物產(chǎn)生明顯的變化的病毒為白血病病毒。

逆轉(zhuǎn)錄病毒獨(dú)特的基因組結(jié)構(gòu)和生命周期使逆轉(zhuǎn)錄病毒在分子生物學(xué)研究和基因治療中其到了基因轉(zhuǎn)移載體的重要作用。人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV-1）和人Ⅱ型免疫缺陷病毒（HIV-2）引起人的獲得性免疫缺陷綜合征。（AIDS）

1、、病原學(xué)：人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV-1）和人Ⅱ型免疫缺陷病毒（HIV-2）引起人的獲得性免疫缺陷綜合征，簡(jiǎn)稱艾滋?。ˋIDS）。

艾滋病病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科、慢病毒屬。

2、致病機(jī)制：HIV對(duì)CD+4細(xì)胞有選擇性的親嗜性。病毒侵入細(xì)胞后，借助反轉(zhuǎn)錄酶合成DNA，與細(xì)胞DNA整合，并利用宿主細(xì)胞的酶系統(tǒng)進(jìn)行生物合成，產(chǎn)生病毒產(chǎn)物，致使宿主細(xì)胞死亡，釋放出大量新病毒，攻擊新的靶細(xì)胞，從而使T4淋巴細(xì)胞數(shù)量不斷減少；

正常的T4細(xì)胞，通過(guò)CD+4細(xì)胞結(jié)合病毒與病毒表面蛋白，而被細(xì)胞毒作用T細(xì)胞（T8）識(shí)別，進(jìn)而被殺傷。

T4淋巴細(xì)胞在免疫應(yīng)答過(guò)程中起調(diào)節(jié)作用，與①單核-巨噬細(xì)胞、②細(xì)胞毒性T細(xì)胞③NK細(xì)胞、④B細(xì)胞等均有密切關(guān)系，所以T4細(xì)胞耗竭、功能下降，必將使免疫系統(tǒng)的多種功能發(fā)生缺陷。

3、傳播途徑：性接觸為最主要的傳播途徑；經(jīng)注射途徑、孕婦胎盤以及破損皮膚等均可造成感染。

4、診斷：測(cè)定HIV感染的最簡(jiǎn)便方法是測(cè)定HIV抗體。

5、預(yù)防：切斷各種傳播途徑。

脊髓灰質(zhì)炎病毒屬于小核糖核酸病毒科，腸道病毒屬的病毒，主要經(jīng)過(guò)糞-口途徑傳播。脊髓灰質(zhì)炎病毒進(jìn)入機(jī)體后，主要侵犯脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元。目前脊髓灰質(zhì)炎在世界上許多國(guó)家，包括中國(guó)，已經(jīng)消失。

口蹄疫病毒屬于小核糖核酸病毒科、口蹄疫病毒屬，是一種主要感染偶蹄動(dòng)物的烈性傳染病，人和非偶蹄動(dòng)物也可感染，但癥狀相對(duì)較輕。

口蹄疫一旦發(fā)生則呈暴發(fā)性流行，可以跳躍式傳播，在適合的氣候條件下還可通過(guò)風(fēng)媒的途徑傳播。人感染口蹄疫病毒后只在口腔黏膜、手、足處皮膚出現(xiàn)水皰，可自愈，個(gè)別嚴(yán)重病例見(jiàn)于兒童。動(dòng)物患口蹄疫后其生產(chǎn)性能急劇下降；對(duì)疫區(qū)要進(jìn)行封鎖，封鎖期間疫區(qū)內(nèi)正常的畜產(chǎn)品交易和生產(chǎn)活動(dòng)都不能進(jìn)行；

對(duì)確診為口蹄疫的動(dòng)物要立即捕殺、銷毀。所以口蹄疫暴發(fā)后對(duì)畜、牧、業(yè)生產(chǎn)乃至整個(gè)國(guó)民經(jīng)濟(jì)都會(huì)造成巨大的損失。

呼吸道合胞病毒屬于副粘病毒科、肺病毒屬。因在組織培養(yǎng)繁殖時(shí)能引起細(xì)胞融合而定為現(xiàn)在的名稱。呼吸道合胞病毒可以引起嬰幼兒產(chǎn)生嚴(yán)重的下呼吸道感染。1． 非細(xì)胞型微生物（病毒）：

（1）是最小的一類微生物，能通過(guò)除菌濾器。

（2）沒(méi)有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無(wú)產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)增殖。（病毒屬之）2． 原核細(xì)胞型微生物（細(xì)菌、支原體、立克次氏體衣原體、螺旋體、放線菌）：（1）僅有原始核質(zhì)，系呈裸(luo)露(lou)的環(huán)狀DNA團(tuán)塊(kuai)無(wú)核膜或核仁。（2）細(xì)胞器不很完善，只有核蛋白體。

細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)包括：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)、核蛋白體等； 細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)包括：菌毛、鞭毛、莢膜等；細(xì)菌可分為自養(yǎng)菌和異養(yǎng)菌； 細(xì)菌按形態(tài)不同可分為：球菌、桿菌、螺形菌（螺菌和弧菌）。

在細(xì)菌的組成中，水為主要成分，而蛋白質(zhì)類在固體成分中的比例最高。3． 核細(xì)胞型微生物（真菌）：（1）細(xì)胞核分化程度高，有核膜和核仁；（2）細(xì)胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器完整。（真菌屬之）（3）不能在活細(xì)胞內(nèi)內(nèi)生長(zhǎng)增殖。

機(jī)體的屏障作用包括：皮膚與粘膜、血腦屏障和胎盤屏障。毒力主要由侵襲力和毒素所決定。

毒素包括：外毒素（如金黃色葡萄球菌腸毒素、產(chǎn)毒性大腸桿菌腸毒素、白喉毒素、痙攣毒素、肉毒毒素、表皮剝脫毒素、霍亂腸毒素）和內(nèi)毒素 外毒素包括：神經(jīng)毒素、細(xì)胞毒素、和腸毒素；

細(xì)菌的內(nèi)毒素為脂多糖成分，均由革蘭陰性菌產(chǎn)生、160℃，2-4小時(shí)才被破壞，其毒害效應(yīng)不具有組織器官選擇性。（毒性作用包括DIC、Shwartzman現(xiàn)象、發(fā)熱反應(yīng)、白細(xì)胞反應(yīng)、內(nèi)毒素血癥與內(nèi)毒素休克）雖毒性作用較弱，但不能像外毒素那樣經(jīng)甲醛脫毒而成為類毒素鱟（hou）。

試驗(yàn)可以用對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素的測(cè)定。致病性螺形菌有弧菌如霍亂弧菌，和螺菌如鼠咬熱螺菌。幼齡細(xì)菌菌體較長(zhǎng)，老齡細(xì)菌往往呈多形態(tài)性。

細(xì)菌的結(jié)構(gòu)：有些細(xì)菌在一定條件下可以發(fā)生轉(zhuǎn)化而進(jìn)入休眠狀態(tài)，稱為芽孢。

其結(jié)構(gòu)和性狀與其繁殖狀態(tài)有明顯不同；還有的細(xì)菌在環(huán)境因素的用下，還可以形成L型。細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖，又稱為粘肽、胞壁質(zhì)。肽聚糖原核型生物細(xì)胞的特有成分。肽聚糖（1）是細(xì)胞壁抗胞內(nèi)高滲透壓

（2）保護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能完整的主體成分

（3）凡能破壞肽聚糖分子結(jié)構(gòu)或抑制其合成的物質(zhì)，都有抑菌或殺菌作用。革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的細(xì)胞壁：由肽聚糖及穿插于其內(nèi)磷壁酸組成。其中（1）肽聚糖不僅曾數(shù)多、含量高，占細(xì)胞壁干重50%-80%；

（2）而且質(zhì)地致密，是具有高機(jī)械強(qiáng)度的三維空間結(jié)構(gòu)。磷壁酸分為壁磷壁酸和膜磷壁酸兩種。磷壁酸有很強(qiáng)的抗原性，是G+細(xì)菌的重要表面抗原，可用以對(duì)細(xì)菌進(jìn)行血清學(xué)分型。

革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁：依次包括肽聚糖、脂蛋白、外膜、類脂A、多糖等成分。還有胞質(zhì)周圍間隙。

肽聚糖：陰性細(xì)菌的肽聚糖僅1-2層，占細(xì)胞壁干重的10%左右。是疏松薄弱的二維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。

脂蛋白：由蛋白和脂質(zhì)組成，連接于外膜與肽聚糖之間。脂蛋白是陰性細(xì)菌含量最高的蛋白質(zhì)，其功能是穩(wěn)定外膜并將之固定于肽聚糖層。

外膜：外膜是陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁特有成分，約占細(xì)胞壁干重80%。外膜由平行排列的脂質(zhì)雙層構(gòu)成，其內(nèi)鑲嵌以具有不同功能的多種特異性蛋白；外膜還有性菌毛、噬菌體的受體。

脂多糖（LPS）:（稱為內(nèi)毒素）：是細(xì)胞壁外膜伸出于細(xì)胞表面的特殊結(jié)構(gòu)，由類脂A、核心多糖和特異性多糖組成。LPS對(duì)動(dòng)物具有強(qiáng)烈毒性作用。LPS牢固地結(jié)合在細(xì)菌細(xì)胞表面，只在菌體溶解時(shí)才釋放，故稱為細(xì)菌內(nèi)毒素。

類脂A：類脂A耐熱，是內(nèi)毒素的主要成分和毒性部位類脂A無(wú)種屬特異性，各種細(xì)菌的類脂A都相同，故不同細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素的毒性作用均相似。

核心多糖：位于類脂A的外層，具有屬特異性，同一屬的細(xì)菌其核心多糖的組成是相同的。特異性多糖：具有抗原性，G?細(xì)菌的菌體抗原（O抗原）

細(xì)胞膜：細(xì)胞膜由平行排列的脂質(zhì)雙層組成，其內(nèi)鑲嵌以多種蛋白和少量多糖； 細(xì)胞膜的主要功能：

（1）物質(zhì)納泄：細(xì)胞膜具有選擇性通透作用，可選擇性地?cái)z取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，排出代謝產(chǎn)物。物質(zhì)納泄是細(xì)胞膜的主動(dòng)運(yùn)轉(zhuǎn)過(guò)程，其中載體蛋白和酶類物質(zhì)起重要作用。

（2）生物合成：細(xì)胞膜上有多種合成酶，是細(xì)菌細(xì)胞生物合成重要場(chǎng)所。肽聚糖、磷壁酸、磷脂、脂多糖、莢膜、鞭毛等多種菌體成分，都是在細(xì)胞膜上合成的。（3）呼吸作用：細(xì)胞膜上有多種呼吸酶，包括細(xì)胞色素和一些脫氫酶，可以運(yùn)轉(zhuǎn)電子完成氧化磷酸化，參與細(xì)胞呼吸過(guò)程，與能量的產(chǎn)生、貯（zhu）存和利用有密切關(guān)系。

（4）形成中介體：中介體是細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)陷、折疊、卷曲形成的囊狀結(jié)構(gòu)。多見(jiàn)于G+細(xì)菌。

細(xì)胞質(zhì)：是由細(xì)胞膜包裹著的溶膠性物質(zhì)，其基本成分是水、蛋白質(zhì)、核酸、脂類、少量糖和無(wú)機(jī)鹽等。用光鏡和電鏡觀察細(xì)胞質(zhì)，大小不等的顆粒。

（1）核糖體：核糖體是游離于細(xì)胞質(zhì)中的微小顆粒，當(dāng)mPNA連成多聚核糖體時(shí)，就成為蛋白質(zhì)的合成場(chǎng)所。

（2）核質(zhì)：細(xì)菌的遺傳物質(zhì)是由裸露的雙股DNA回旋、盤繞、卷曲而成的松散網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，無(wú)組蛋白包饒、無(wú)核膜、無(wú)核仁，故稱為核質(zhì)或擬核。

核質(zhì)具有細(xì)胞核功能，決定細(xì)菌性狀和遺傳特征。

（3）質(zhì)粒：質(zhì)粒是核質(zhì)之外的雙股環(huán)狀DNA，攜有遺傳信息，控制非細(xì)菌存活所必須的某些特定性質(zhì)，細(xì)菌的質(zhì)粒具有自我復(fù)制、傳給子代、可幾個(gè)質(zhì)粒共存于一個(gè)菌體、可自然丟失，以及可通過(guò)結(jié)合或轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)移至受體菌等特性。

醫(yī)學(xué)上重要的質(zhì)粒有決定細(xì)菌性菌毛的F因子，決定細(xì)菌耐藥性的R因子，決定大腸桿菌產(chǎn)生大腸菌素的col因子等。

（4）胞質(zhì)顆粒：細(xì)胞質(zhì)中的顆粒多為暫時(shí)貯存的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。較為常見(jiàn)的是異染顆粒多見(jiàn)于白喉?xiàng)U菌、鼠疫桿菌、結(jié)核桿菌等

白喉?xiàng)U菌的異染顆粒多在菌體的一端或兩端，故稱為極體，有助于鑒別細(xì)菌。特殊結(jié)構(gòu)：莢膜（粘稠性物質(zhì)）：細(xì)菌的莢膜有多種功能

（1）其中最重要的是抗吞噬作用。莢膜抗吞噬作用是構(gòu)成細(xì)菌毒力的因素之一。（2）莢膜還有抗溶菌酶，抗補(bǔ)體、抗干燥作用

（3）在營(yíng)養(yǎng)缺乏時(shí)莢膜還可作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)而被吸收。莢膜具有抗原性，可以鑒別細(xì)菌和進(jìn)行細(xì)菌分型。

鞭毛是由細(xì)胞質(zhì)伸出的蛋白性絲狀物。一般認(rèn)為鞭毛是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官，有鞭毛的細(xì)菌能活潑運(yùn)動(dòng)；鞭毛具有抗原性，稱“H”抗原。

菌毛許多G-細(xì)菌各別的G+細(xì)菌，細(xì)胞表面有極其纖細(xì)的蛋白性絲狀物，稱為菌毛。菌毛與細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)無(wú)關(guān)，須用電鏡進(jìn)行觀察。

細(xì)菌的芽孢：某些細(xì)菌在一定條件下變成為圓形或卵圓形的小體，稱為。由于芽孢在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)形成。故常稱為內(nèi)芽孢。

（1）芽孢攜有成套的核質(zhì)、酶及合成菌體成分的各種機(jī)構(gòu)，保存有細(xì)菌的全部生命活性；（2）在適宜條件下可以發(fā)芽而形成新的繁殖體。

因此，芽孢是細(xì)菌適應(yīng)環(huán)境變化的特殊存活形式，亦即細(xì)菌的休眠狀態(tài)。

芽孢本身并不直接引起疾病，擔(dān)當(dāng)其發(fā)芽轉(zhuǎn)化成繁殖后，則可迅速大量繁殖，引起疾病。在人類，有四種常見(jiàn)的嚴(yán)重疾病是由能形成芽孢的細(xì)菌引起。（1）炭疽(ju)桿菌引起炭疽(ju)菌?。?）肉毒桿菌引起肉毒毒素食物中毒（3）氣性壞疽病原菌引起氣性壞疽（4）破傷風(fēng)桿菌引起破傷風(fēng)（常見(jiàn)）。

細(xì)菌L型：細(xì)胞壁有維持細(xì)菌形態(tài)和保護(hù)菌體內(nèi)部的重要作用。在某些因素影響下細(xì)菌可以失去細(xì)胞壁，形成細(xì)菌的細(xì)胞壁缺陷型，亦即細(xì)菌L型。

細(xì)菌L型需要高滲透壓培養(yǎng)基培養(yǎng)。細(xì)菌L型兼有多種繁殖方式，能以（1）二分裂方式（2）出芽方式（3）巨形體釋放顆粒方式進(jìn)行增殖。L型菌落有三種類型：

（1）L型，呈油煎蛋樣，中心致密，透光性差，周邊透明呈顆粒狀；（2）G型，顆粒狀，整個(gè)菌落由透明顆粒組成，無(wú)核心部分；（3）F型，呈絲狀，菌落似L型，但周邊為透明性絲狀。

L型以引起慢性和反復(fù)發(fā)作性感染為其致病特點(diǎn)，主要致病物質(zhì)是毒素。細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（無(wú)機(jī)鹽）：各類無(wú)機(jī)鹽的作用為：（1）構(gòu)成菌體成分；

（2）調(diào)節(jié)菌體內(nèi)外滲透壓；

（3）促進(jìn)酶的活性或作為某些輔酶組分；

（4）某些元素與細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖及致病作用密切相關(guān)。

生長(zhǎng)因子：很多細(xì)菌在其生長(zhǎng)過(guò)程中還必需一些自身不能合成的有機(jī)物質(zhì)，成為生長(zhǎng)因子。生長(zhǎng)因子必須從外界得以補(bǔ)充，其中包括維生素、某些氨基酸、脂類、嘌呤、嘧啶等。根據(jù)細(xì)菌在代謝過(guò)程中對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要，可將細(xì)菌分為自養(yǎng)菌和異養(yǎng)菌兩種營(yíng)養(yǎng)類型。

自養(yǎng)菌：該類菌能以簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物為原料合成復(fù)雜的菌體成分。根據(jù)能量的來(lái)源，自養(yǎng)菌又分為（1）光能營(yíng)養(yǎng)菌（2）化能營(yíng)養(yǎng)菌。

異養(yǎng)菌：該類菌必須以多種有機(jī)物為原料，合成菌體原生質(zhì)及獲得能量。異養(yǎng)菌又分為（1）腐生菌（2）寄生菌。

腐生菌：以死亡生物或腐敗食物等有機(jī)物作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；寄生菌：在活體的生物體內(nèi)寄生，從宿主的有機(jī)物中取得營(yíng)養(yǎng)。大部分病原菌是寄生菌。

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入菌體的方式有：（1）易化擴(kuò)散（2）主動(dòng)運(yùn)轉(zhuǎn)（3）基因移位。細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件：（1）充足的營(yíng)養(yǎng)

（2）適宜的溫度：細(xì)菌生長(zhǎng)的溫度極限為-7℃～90℃。各類細(xì)菌對(duì)溫度的要求不同，可分為嗜冷菌，最適生長(zhǎng)溫度為（10℃～20℃）；嗜溫菌（20℃～40℃）；嗜熱菌（56℃～60℃）生長(zhǎng)最好。病原菌均為嗜溫菌，最適溫度為人的溫度，即37℃，故實(shí)驗(yàn)室一般采用37℃培養(yǎng)細(xì)菌。

（3）合適的酸堿度：多數(shù)病原菌最適pH為中性或弱堿性（pH7.2～7.6）（4）必須的氣體環(huán)境：根據(jù)細(xì)菌對(duì)氧的需要情況，可將其分為三類：

① 專性需氧菌，該類細(xì)菌僅能在有氧條件下生長(zhǎng)； ②專性厭氧菌，只能在無(wú)氧環(huán)境下生長(zhǎng)；

③兼性厭氧菌，大多數(shù)病原菌在有氧及無(wú)氧的條件下均能生長(zhǎng)，稱之兼性厭氧菌。一般細(xì)菌代謝中都需要CO2，但多數(shù)細(xì)菌自身代謝所產(chǎn)生的CO2即可滿足需要。

有些細(xì)菌，如腦膜炎雙球菌、布魯氏菌，在初次分離時(shí)需要較高濃度的CO2（5%～10%）。細(xì)菌以簡(jiǎn)單的二分裂方式無(wú)性繁殖，其突出的特點(diǎn)為繁殖速度快。

細(xì)菌分裂倍增的必須時(shí)間，成為代時(shí)，細(xì)菌代時(shí)決定于細(xì)菌種類又受環(huán)境條件影響，細(xì)菌代時(shí)一般為20′（分）～30′（分）。

細(xì)菌的生化反應(yīng)：吲哚（I）、甲基紅（M）、VP(V)、枸櫞酸鹽（C）四種試驗(yàn)，常用于鑒定腸道桿菌，合稱之為IMViC。

大腸桿菌呈“++--”，產(chǎn)氣桿菌為“--++”。細(xì)菌通過(guò)新陳代謝能合成很多在醫(yī)學(xué)上具有重要意義的代謝產(chǎn)物。

1熱原質(zhì)：熱原質(zhì)即菌體中的脂多糖，大多是G-菌產(chǎn)生的。注入人或動(dòng)物體內(nèi)能引起發(fā)熱反應(yīng)，故名熱原質(zhì)。熱原質(zhì)耐高熱，高壓蒸汽滅菌121℃20′。

不能使其破壞，除去熱原質(zhì)最好的方法是蒸餾。生物制品或注射液制成后除去熱原質(zhì)比較困難，所以，必須使用無(wú)熱原質(zhì)水制備。

2毒素與酶：細(xì)菌可產(chǎn)生內(nèi)、外毒素及侵襲性酶，與細(xì)菌的致病性密切相關(guān)。內(nèi)毒素即G-菌細(xì)胞壁的脂多糖，其毒性成分為脂質(zhì)A。菌體死亡崩解后釋放出來(lái)。

外毒素是有G+菌及少數(shù)G-菌在生長(zhǎng)代謝過(guò)程中釋放至菌體外的蛋白質(zhì)。具有抗原性強(qiáng)、毒性強(qiáng)、作用特異性強(qiáng)的突出特點(diǎn)。

某些細(xì)菌可產(chǎn)生具有侵襲性的酶，能損傷機(jī)體組織，促使細(xì)菌的侵襲、擴(kuò)散，是細(xì)菌重要的致病因素，如鏈球菌的透明質(zhì)酸酶。等

3色素：有些細(xì)菌能產(chǎn)生色素，對(duì)細(xì)菌的鑒別有一定意義。細(xì)菌色素有兩類： ① 水溶性色素，能彌（mi）散至培養(yǎng)基或周圍組織。如綠膿桿菌產(chǎn)生的綠膿色素使培養(yǎng)基或膿汁（zhi）呈綠色。

② 脂溶性色素，不溶于水，僅保持在菌落內(nèi)使之呈色而培養(yǎng)基顏色不變，如金黃色葡萄球菌色素。4抗生素：某些微生物代謝過(guò)程中可產(chǎn)生一種能抑制或殺死某些其他微生物或癌細(xì)胞的物質(zhì)，稱抗生素。

稱抗生多由放線菌和真菌產(chǎn)生，細(xì)菌僅產(chǎn)生少數(shù)幾種，如多粘菌素、桿菌肽等。

5細(xì)菌素：某些細(xì)菌能產(chǎn)生一種僅作用于有近緣關(guān)系的細(xì)菌的抗菌物質(zhì)，稱細(xì)菌素。細(xì)菌素為蛋白類物質(zhì)，抗菌范圍很窄。

實(shí)驗(yàn)室中細(xì)菌的常規(guī)培養(yǎng)應(yīng)掌握以下幾點(diǎn)（細(xì)菌的人工培養(yǎng)）：（1）選用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基；

（2）必需的氣體環(huán)境，一般需氧及兼性厭氧置空氣中即可，專性厭氧則必須在嚴(yán)格無(wú)氧條件中培養(yǎng)。另外少數(shù)細(xì)菌在初次分離培養(yǎng)時(shí)，必須額外補(bǔ)充適量比例的CO2，如腦膜炎雙球菌、布魯氏菌等CO2的濃度在（5%～10%）時(shí)才生長(zhǎng)；（3）溫度一般為37℃；

（4）培養(yǎng)時(shí)間多數(shù)為18～24小時(shí)，但根據(jù)菌種及培養(yǎng)目的應(yīng)酌情處理，如培養(yǎng)細(xì)菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)時(shí)，最好選取其對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，即6～12小時(shí)培養(yǎng)較適宜。結(jié)核菌生長(zhǎng)緩慢，需延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間數(shù)天至數(shù)周；

（5）為獲取大量細(xì)菌或其代謝產(chǎn)物，可采用連續(xù)培養(yǎng)法。培養(yǎng)過(guò)程中不斷通入適當(dāng)氣體、更換培養(yǎng)液并校正pH值以維持細(xì)菌較長(zhǎng)的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)狀態(tài)。

噬菌體：噬菌體是侵襲細(xì)菌或其他特殊微生物的病毒，它具有病毒的共同特性，噬菌體多數(shù)呈蝌蚪狀，由頭部和尾部組成，在電子顯微鏡下可見(jiàn)。

噬菌體中心為核酸，有尾噬菌體的核酸為雙股線狀DNA，蛋白質(zhì)組成包繞核酸的頭部外殼和尾部。噬菌體通過(guò)吸附、穿入易感細(xì)胞，毒性噬菌體在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)生物合成、裝配，最后裂解宿主細(xì)胞，放出大量成熟子代噬菌體，渾濁菌液可變清，固體培養(yǎng)物上出現(xiàn)空斑。

溫和噬菌體感染敏感菌后并不增殖，其基因整合于宿主菌基因組中，這種帶有噬菌體基因組的細(xì)菌即溶原性細(xì)菌。

噬菌體基因可隨細(xì)菌分裂而傳到子代細(xì)菌，在一定條件下，帶噬菌體的溶原狀態(tài)可自發(fā)停止，細(xì)菌被裂解。

噬菌體的種類多，分布廣，幾乎凡是有細(xì)菌的場(chǎng)所，就可能有相應(yīng)噬菌體存在。

噬菌體有嚴(yán)格的宿主特異性，只寄居在易感宿主內(nèi)，故可用于未知細(xì)菌的鑒定和分型。細(xì)菌的突變：生物體表型突然發(fā)生可遺傳的變化，成為突變。突變包括兩類：

（1）基因突變：亦稱點(diǎn)突變，是基因內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生微細(xì)變化，如DNA分子上排列的堿基對(duì)的變化。有堿基置換和錯(cuò)碼兩種類型。

（2）染色體畸(ji)變：是指染色體的一大段發(fā)生了變化，有易位、倒位、重復(fù)或缺失等數(shù)種。

在細(xì)菌中，這些變化常是致死性的，以基因突變較常見(jiàn)。按其發(fā)生原因，分自發(fā)突變和誘發(fā)突變兩類。自發(fā)突變和誘發(fā)突變可能不存有質(zhì)的差別，僅是量的不同。

細(xì)菌的結(jié)構(gòu)：有些細(xì)菌在一定條件下可以發(fā)生轉(zhuǎn)化而進(jìn)入休眠狀態(tài)，稱為芽孢。

其結(jié)構(gòu)和性狀與其繁殖狀態(tài)有明顯不同；還有的細(xì)菌在環(huán)境因素的用下，還可以形成L型。細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖，又稱為粘肽、胞壁質(zhì)。肽聚糖原核型生物細(xì)胞的特有成分。肽聚糖（1）是細(xì)胞壁抗胞內(nèi)高滲透壓

（2）保護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能完整的主體成分

（3）凡能破壞肽聚糖分子結(jié)構(gòu)或抑制其合成的物質(zhì)，都有抑菌或殺菌作用。革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的細(xì)胞壁：由肽聚糖及穿插于其內(nèi)磷壁酸組成。其中（1）肽聚糖不僅曾數(shù)多、含量高，占細(xì)胞壁干重50%-80%；

（2）而且質(zhì)地致密，是具有高機(jī)械強(qiáng)度的三維空間結(jié)構(gòu)。磷壁酸分為壁磷壁酸和膜磷壁酸兩種。磷壁酸有很強(qiáng)的抗原性，是G+細(xì)菌的重要表面抗原，可用以對(duì)細(xì)菌進(jìn)行血清學(xué)分型。

革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁：依次包括肽聚糖、脂蛋白、外膜、類脂A、多糖等成分。還有胞質(zhì)周圍間隙。

肽聚糖：陰性細(xì)菌的肽聚糖僅1-2層，占細(xì)胞壁干重的10%左右。是疏松薄弱的二維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。

脂蛋白：由蛋白和脂質(zhì)組成，連接于外膜與肽聚糖之間。脂蛋白是陰性細(xì)菌含量最高的蛋白質(zhì)，其功能是穩(wěn)定外膜并將之固定于肽聚糖層。

外膜：外膜是陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁特有成分，約占細(xì)胞壁干重80%。外膜由平行排列的脂質(zhì)雙層構(gòu)成，其內(nèi)鑲嵌以具有不同功能的多種特異性蛋白；外膜還有性菌毛、噬菌體的受體。

脂多糖（LPS）:（稱為內(nèi)毒素）：是細(xì)胞壁外膜伸出于細(xì)胞表面的特殊結(jié)構(gòu)，由類脂A、核心多糖和特異性多糖組成。LPS對(duì)動(dòng)物具有強(qiáng)烈毒性作用。LPS牢固地結(jié)合在細(xì)菌細(xì)胞表面，只在菌體溶解時(shí)才釋放，故稱為細(xì)菌內(nèi)毒素。

類脂A：類脂A耐熱，是內(nèi)毒素的主要成分和毒性部位類脂A無(wú)種屬特異性，各種細(xì)菌的類脂A都相同，故不同細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素的毒性作用均相似。

核心多糖：位于類脂A的外層，具有屬特異性，同一屬的細(xì)菌其核心多糖的組成是相同的。特異性多糖：具有抗原性，G?細(xì)菌的菌體抗原（O抗原）

細(xì)胞膜：細(xì)胞膜由平行排列的脂質(zhì)雙層組成，其內(nèi)鑲嵌以多種蛋白和少量多糖； 細(xì)胞膜的主要功能：

（1）物質(zhì)納泄：細(xì)胞膜具有選擇性通透作用，可選擇性地?cái)z取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，排出代謝產(chǎn)物。物質(zhì)納泄是細(xì)胞膜的主動(dòng)運(yùn)轉(zhuǎn)過(guò)程，其中載體蛋白和酶類物質(zhì)起重要作用。

（2）生物合成：細(xì)胞膜上有多種合成酶，是細(xì)菌細(xì)胞生物合成重要場(chǎng)所。肽聚糖、磷壁酸、磷脂、脂多糖、莢膜、鞭毛等多種菌體成分，都是在細(xì)胞膜上合成的。

（3）呼吸作用：細(xì)胞膜上有多種呼吸酶，包括細(xì)胞色素和一些脫氫酶，可以運(yùn)轉(zhuǎn)電子完成氧化磷酸化，參與細(xì)胞呼吸過(guò)程，與能量的產(chǎn)生、貯（zhu）存和利用有密切關(guān)系。

（4）形成中介體：中介體是細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)陷、折疊、卷曲形成的囊狀結(jié)構(gòu)。多見(jiàn)于G+細(xì)菌。

細(xì)胞質(zhì)：是由細(xì)胞膜包裹著的溶膠性物質(zhì)，其基本成分是水、蛋白質(zhì)、核酸、脂類、少量糖和無(wú)機(jī)鹽等。用光鏡和電鏡觀察細(xì)胞質(zhì)，大小不等的顆粒。

（1）核糖體：核糖體是游離于細(xì)胞質(zhì)中的微小顆粒，當(dāng)mPNA連成多聚核糖體時(shí)，就成為蛋白質(zhì)的合成場(chǎng)所。

（2）核質(zhì)：細(xì)菌的遺傳物質(zhì)是由裸露的雙股DNA回旋、盤繞、卷曲而成的松散網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，無(wú)組蛋白包饒、無(wú)核膜、無(wú)核仁，故稱為核質(zhì)或擬核。

核質(zhì)具有細(xì)胞核功能，決定細(xì)菌性狀和遺傳特征。

（3）質(zhì)粒：質(zhì)粒是核質(zhì)之外的雙股環(huán)狀DNA，攜有遺傳信息，控制非細(xì)菌存活所必須的某些特定性質(zhì)，細(xì)菌的質(zhì)粒具有自我復(fù)制、傳給子代、可幾個(gè)質(zhì)粒共存于一個(gè)菌體、可自然丟失，以及可通過(guò)結(jié)合或轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)移至受體菌等特性。

醫(yī)學(xué)上重要的質(zhì)粒有決定細(xì)菌性菌毛的F因子，決定細(xì)菌耐藥性的R因子，決定大腸桿菌產(chǎn)生大腸菌素的col因子等。

（4）胞質(zhì)顆粒：細(xì)胞質(zhì)中的顆粒多為暫時(shí)貯存的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。較為常見(jiàn)的是異染顆粒多見(jiàn)于白喉?xiàng)U菌、鼠疫桿菌、結(jié)核桿菌等

白喉?xiàng)U菌的異染顆粒多在菌體的一端或兩端，故稱為極體，有助于鑒別細(xì)菌。特殊結(jié)構(gòu)：莢膜（粘稠性物質(zhì)）：細(xì)菌的莢膜有多種功能

（1）其中最重要的是抗吞噬作用。莢膜抗吞噬作用是構(gòu)成細(xì)菌毒力的因素之一。（2）莢膜還有抗溶菌酶，抗補(bǔ)體、抗干燥作用

（3）在營(yíng)養(yǎng)缺乏時(shí)莢膜還可作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)而被吸收。莢膜具有抗原性，可以鑒別細(xì)菌和進(jìn)行細(xì)菌分型。

鞭毛是由細(xì)胞質(zhì)伸出的蛋白性絲狀物。一般認(rèn)為鞭毛是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官，有鞭毛的細(xì)菌能活潑運(yùn)動(dòng)；鞭毛具有抗原性，稱“H”抗原。

菌毛許多G-細(xì)菌各別的G+細(xì)菌，細(xì)胞表面有極其纖細(xì)的蛋白性絲狀物，稱為菌毛。菌毛與細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)無(wú)關(guān)，須用電鏡進(jìn)行觀察。

細(xì)菌的芽孢：某些細(xì)菌在一定條件下變成為圓形或卵圓形的小體，稱為。由于芽孢在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)形成。故常稱為內(nèi)芽孢。

（1）芽孢攜有成套的核質(zhì)、酶及合成菌體成分的各種機(jī)構(gòu)，保存有細(xì)菌的全部生命活性；（2）在適宜條件下可以發(fā)芽而形成新的繁殖體。

因此，芽孢是細(xì)菌適應(yīng)環(huán)境變化的特殊存活形式，亦即細(xì)菌的休眠狀態(tài)。

芽孢本身并不直接引起疾病，擔(dān)當(dāng)其發(fā)芽轉(zhuǎn)化成繁殖后，則可迅速大量繁殖，引起疾病。在人類，有四種常見(jiàn)的嚴(yán)重疾病是由能形成芽孢的細(xì)菌引起。（1）炭疽(ju)桿菌引起炭疽(ju)菌病（2）肉毒桿菌引起肉毒毒素食物中毒（3）氣性壞疽病原菌引起氣性壞疽（4）破傷風(fēng)桿菌引起破傷風(fēng)（常見(jiàn)）。

細(xì)菌L型：細(xì)胞壁有維持細(xì)菌形態(tài)和保護(hù)菌體內(nèi)部的重要作用。在某些因素影響下細(xì)菌可以失去細(xì)胞壁，形成細(xì)菌的細(xì)胞壁缺陷型，亦即細(xì)菌L型。

細(xì)菌L型需要高滲透壓培養(yǎng)基培養(yǎng)。細(xì)菌L型兼有多種繁殖方式，能以（1）二分裂方式（2）出芽方式

（3）巨形體釋放顆粒方式進(jìn)行增殖。L型菌落有三種類型：

（1）L型，呈油煎蛋樣，中心致密，透光性差，周邊透明呈顆粒狀；（2）G型，顆粒狀，整個(gè)菌落由透明顆粒組成，無(wú)核心部分；（3）F型，呈絲狀，菌落似L型，但周邊為透明性絲狀。

L型以引起慢性和反復(fù)發(fā)作性感染為其致病特點(diǎn)，主要致病物質(zhì)是毒素。

噬菌體：噬菌體是侵襲細(xì)菌或其他特殊微生物的病毒，它具有病毒的共同特性，噬菌體多數(shù)呈蝌蚪狀，由頭部和尾部組成，在電子顯微鏡下可見(jiàn)。

噬菌體中心為核酸，有尾噬菌體的核酸為雙股線狀DNA，蛋白質(zhì)組成包繞核酸的頭部外殼和尾部。噬菌體通過(guò)吸附、穿入易感細(xì)胞，毒性噬菌體在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)生物合成、裝配，最后裂解宿主細(xì)胞，放出大量成熟子代噬菌體，渾濁菌液可變清，固體培養(yǎng)物上出現(xiàn)空斑。溫和噬菌體感染敏感菌后并不增殖，其基因整合于宿主菌基因組中，這種帶有噬菌體基因組的細(xì)菌即溶原性細(xì)菌。

噬菌體基因可隨細(xì)菌分裂而傳到子代細(xì)菌，在一定條件下，帶噬菌體的溶原狀態(tài)可自發(fā)停止，細(xì)菌被裂解。

噬菌體的種類多，分布廣，幾乎凡是有細(xì)菌的場(chǎng)所，就可能有相應(yīng)噬菌體存在。

噬菌體有嚴(yán)格的宿主特異性，只寄居在易感宿主內(nèi)，故可用于未知細(xì)菌的鑒定和分型。細(xì)菌的突變：生物體表型突然發(fā)生可遺傳的變化，成為突變。突變包括兩類：

（1）基因突變：亦稱點(diǎn)突變，是基因內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生微細(xì)變化，如DNA分子上排列的堿基對(duì)的變化。有堿基置換和錯(cuò)碼兩種類型。

（2）染色體畸(ji)變：是指染色體的一大段發(fā)生了變化，有易位、倒位、重復(fù)或缺失等數(shù)種。

在細(xì)菌中，這些變化常是致死性的，以基因突變較常見(jiàn)。按其發(fā)生原因，分自發(fā)突變和誘發(fā)突變兩類。自發(fā)突變和誘發(fā)突變可能不存有質(zhì)的差別，僅是量的不同。

1、腸桿菌科的共同生物學(xué)特性為直桿狀，革蘭染色陰性，大多數(shù)有菌毛，多數(shù)有鞭毛，以周鞭毛運(yùn)動(dòng)，或無(wú)鞭毛不能運(yùn)動(dòng)(塔特姆菌屬以極毛或側(cè)毛運(yùn)動(dòng))。少數(shù)有莢膜或包膜。

2、腸桿菌的共同抗原為氨基糖聚合物，其菌體抗原(()抗原)為細(xì)胞壁的脂多糖層，鞭毛抗原(H抗原)存在于鞭毛蛋白，H抗原的特異性決定于氨基酸的排列順序和空間結(jié)構(gòu)，不耐熱，60~C 30分鐘被破壞，細(xì)菌失去鞭毛后，運(yùn)動(dòng)隨之消失，菌體抗原外露，發(fā)生H—()變異。

3、腸桿菌科細(xì)菌兼性厭氧，有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型，兼具呼吸型(氧化型)和發(fā)酵型代謝。不需特殊營(yíng)養(yǎng)，普通培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)。

大多數(shù)種在37℃生長(zhǎng)良好，某些種于25℃~30℃生長(zhǎng)較好并更具活力。在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上形成大而濕潤(rùn)灰白或黃色的粘液狀菌落，液體培養(yǎng)基中均勻渾濁，有菌 膜。分解葡萄糖和其他糖類產(chǎn)酸，許多種同時(shí)產(chǎn)氣。

4、氧化酶陰性（痢疾志賀菌1型和發(fā)光致病桿菌氧化酶陽(yáng)性其它的腸桿菌科氧化酶陰性）。除痢疾志賀菌1型和發(fā)光致病桿菌以外的其他致病桿菌外，觸酶陽(yáng)性。

除許多歐文菌、大多數(shù)致病桿菌及肺炎克雷伯菌臭鼻亞種、多源桿菌屬和耶爾森菌屬的某些株外，能還原硝酸鹽（除這5種菌以外腸桿菌科能還原硝酸鹽）。

5、腸桿菌科的關(guān)鍵特征是：

①氧化酶陰性和觸酶陽(yáng)性(個(gè)別除外)； ②硝酸鹽還原(個(gè)別除外)和葡萄糖發(fā)酵；

③有動(dòng)力者為周身鞭毛，而弧菌屬(除麥?zhǔn)匣【彤a(chǎn)氣弧菌外)、氣單胞菌屬和鄰單胞菌屬均為氧化酶陽(yáng)性和端極單鞭毛或叢毛。

6、鑒定腸桿菌科的基本條件是：

發(fā)酵葡萄糖、氧化酶陰性、還原硝酸鹽。

分離腸道致病菌常用麥康凱瓊脂，其他還可用中國(guó)藍(lán)瓊脂、伊紅—美藍(lán)瓊脂、HE瓊脂。

概述 ：（1）霍亂是由霍亂弧菌引起的急性腸道傳染病，以劇烈的無(wú)痛性水樣腹瀉為特點(diǎn)，偶有嘔吐，未經(jīng)治療的病例很快出現(xiàn)脫水、酸中毒、循環(huán)衰竭和腎衰。僅有輕刮腹瀉的病例較多見(jiàn)。（2）霍亂主要由01群的古典型和El Tor型以及0139群菌株引起。

（3）01群的霍亂弧菌又稱為凝集弧菌，非01群的霍亂弧菌又稱為不凝集弧菌，一般不引起腹瀉。01群霍亂弧菌依菌體中主要抗原成分A、B、C組分的不同分為不同亞群。各稱為小川型(含A、B抗原)、稻葉型（含A、C抗原）和彥島型(含A、B、C抗原)。

（4）0139群霍亂弧菌是第一個(gè)引起大范圍霍亂暴發(fā)流行的非0l群霍亂弧菌，其暴發(fā)最早出現(xiàn)于1992年在東南亞暴發(fā)和流行，并波及東南亞其他國(guó)家。0139群的一般生物學(xué)特征與01群El Tor型是比較相似的，有鞭毛，有與01群相同的霍亂毒素基因，兩者0抗原不同（①0139群和01群El To0抗原不同、②有相同的霍亂毒素基因），對(duì)0抗原的免疫血清兩者無(wú)交叉凝集.0139群霍亂弧菌的一個(gè)獨(dú)特特點(diǎn)是：有莢膜多糖，而01群菌株沒(méi)有。目前應(yīng)用的0139群霍亂弧菌的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株為M045。

霍亂通過(guò)受到感染者糞便或嘔吐物污染的食物或水傳播，感染霍亂后的潛伏期一般為l～2天，短至數(shù)小時(shí)，長(zhǎng)可達(dá)5天。

在高鹽、高糖食品中，霍亂弧菌存活時(shí)間短，在堿性條件下要比其他腸道菌更容易存活，對(duì)酸類極為敏感，水中的弧菌l00℃煮沸一般短至l～2分鐘后即可被殺死?；魜y弧菌可在河水及底泥中越冬?；魜y弧菌不侵入上皮細(xì)胞，其在人的小腸內(nèi)定居、增殖，并釋放霍亂毒素，從而引起霍亂病癥?；魜y毒素為A、B兩種亞基組成，每個(gè)毒素分子的A：B亞基數(shù)量之比為1：5，其中A亞單位又分為A1和A2兩部分，霍亂毒素的毒素酶活性部分在A1亞單位。

近年研究發(fā)現(xiàn)霍亂毒素基因位于溶原噬菌體基因組上，可在產(chǎn)毒與非產(chǎn)毒菌株之間轉(zhuǎn)移，而不像以前認(rèn)為的穩(wěn)定于染色體上。

霍亂毒素通過(guò)其B亞單位與人小腸上皮細(xì)胞上的GMl受體結(jié)合，因此用GMl—ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)）的方法可檢測(cè)霍亂毒素的存在。

兔小腸段結(jié)扎試驗(yàn)也可用來(lái)檢測(cè)霍亂弧菌是否產(chǎn)生霍亂毒素?；魜y弧菌引起的腸道局部黏膜免疫是霍亂保護(hù)性免疫的基礎(chǔ)。

針對(duì)菌體產(chǎn)生的抗菌免疫以及針對(duì)霍亂毒素的抗毒免疫是對(duì)霍亂免疫的因素。2．分離培養(yǎng)與鑒定

自患者新分離出的霍亂弧菌，在顯微鏡下觀察呈逗點(diǎn)狀或弧形，而經(jīng)人工培養(yǎng)傳代后，顯微鏡下觀察呈類似大腸桿菌的桿狀。

對(duì)霍亂弧菌有選擇性培養(yǎng)基可應(yīng)用自標(biāo)本中進(jìn)行霍亂弧菌的選擇培養(yǎng)。

慶大霉素瓊脂、4號(hào)瓊脂等培養(yǎng)基可用于霍亂弧菌的選擇性培養(yǎng)，為強(qiáng)選擇性的培養(yǎng)基，堿性瓊脂、堿性膽鹽瓊脂等為弱選擇性培養(yǎng)基。

霍亂弧菌在慶大霉素瓊脂選擇培養(yǎng)基平皿上的菌落形態(tài)為帶灰色、半透明、圓形扁平稍隆起、菌落邊緣濕潤(rùn)。

在處理標(biāo)本時(shí)可先進(jìn)行增菌處理，增菌培養(yǎng)基一般用堿性蛋白胨水。

對(duì)于可疑霍亂感染者，取糞便進(jìn)行堿胨水增菌時(shí)，在37~C培養(yǎng)至少培養(yǎng)6一8小時(shí)。

自河水、池塘水等外環(huán)境水中采水樣進(jìn)行霍亂弧菌分離時(shí)，一般采集33．3cm以內(nèi)的表層水，采集的水樣分離霍亂弧菌前，先用lmol/L 的Na0H將水樣pH值調(diào)整到8.4—9.2。在用堿性蛋白胨水增菌6—8小時(shí)后，霍亂弧菌主要在培養(yǎng)液的上層增殖最多。堿性蛋白胨水可用作霍亂弧菌的運(yùn)輸保存培養(yǎng)基。

霍亂弧菌檢驗(yàn)中的V—P試驗(yàn)和第Ⅳ組霍亂噬菌體裂解試驗(yàn)可作為區(qū)分01群古典型與El Tor型菌株的參考指標(biāo)。

對(duì)0139群霍亂弧菌，則可用特異的診斷血清。

3．霍亂弧菌的①流行株與②非流行株（噬菌體型為1～6且生物型為a至f的為流行株）在中國(guó)利用噬菌體—生物分型方案，可將01群E1 Tor型霍亂弧菌區(qū)分為流行株與非流行株。噬菌體分型方案中共有5個(gè)分型噬菌體，命名為VPl、VP2、VP3、VP4和VP5。噬菌體型共有32個(gè)型，屬于流行株范疇的噬菌體型為l～6型。

分型方案中的生物分型包括：溶原性測(cè)定、對(duì)溶原性噬菌體的敏感性、山梨醇發(fā)酵試驗(yàn)和溶血試驗(yàn)，根據(jù)不同反應(yīng)結(jié)果將生物型分成從a至l共12個(gè)型，其中a至f屬于流行株的范疇。

由此，噬菌體型為1～6且生物型為a至f的為流行株。對(duì)于霍亂弧菌兩類菌株(流行株與非流行株)的噬菌體—生物分型試驗(yàn)，最少可用兩平皿兩試管來(lái)完成。區(qū)分流行株與非流行株的溶血試驗(yàn)中所用的紅細(xì)胞為綿羊紅細(xì)胞。

溶原性測(cè)定試驗(yàn)中用雙層瓊脂法，其中上層半固體瓊脂的濃度為0.7％。

進(jìn)行山梨醇發(fā)酵實(shí)驗(yàn)時(shí)，待檢霍亂弧菌接種pH8．0的山梨醇發(fā)酵管后37℃培養(yǎng)3小時(shí)觀察結(jié)果?；魜y弧菌流行株對(duì)山梨醇為慢發(fā)酵。

4、生化反應(yīng)：兩個(gè)生物型（流行株與非流行株）的霍亂弧菌均能分解 葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、甘露醇、產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

遲緩發(fā)酵乳糖，不分解阿拉伯糖。

氧化酶、明膠酶試驗(yàn)和ONA酶試驗(yàn)均陽(yáng)性。

能產(chǎn)生靛基質(zhì)，霍亂紅反應(yīng)（即亞硝基靛基質(zhì)試驗(yàn)）陽(yáng)性。(二)其他弧菌（腸道菌疾病檢驗(yàn)—腸道屬）

1．副溶血弧菌檢驗(yàn)（腸道菌疾病檢驗(yàn)—腸道屬）

副溶血弧菌是一種嗜鹽性弧菌。常存在于近海岸海水、海產(chǎn)品及鹽漬（zi）食品中。它是我國(guó)沿海地區(qū)最常見(jiàn)的食物中毒病原菌。

副溶血弧菌是一種腸道傳染病，主要癥狀有腹痛，腹瀉、脫水、畏寒、嘔吐、發(fā)熱和頭痛，糞便多呈水樣或湖狀，少數(shù)為粘液血便。病程持續(xù)1～7天，一般恢復(fù)較快。病后免疫力不強(qiáng)，可重復(fù)感染。副溶血弧菌已確定有12種不同的0抗原和約60種不同的K抗原。副溶血弧菌所致細(xì)菌性食物中毒的主要污染食品來(lái)自于海產(chǎn)晶。副溶血弧菌為一種噬鹽菌，可在含8％NaCl胨水中生長(zhǎng)。

副溶血性弧菌食物中毒是由于食入未煮熟的海產(chǎn)品或污染本菌的鹽腌食物而引起。潛伏期1~26小時(shí)，一般6~10小時(shí)。

大部分致病菌能產(chǎn)生一種特征性的溶血反應(yīng)(稱為神奈川現(xiàn)象)。

致病菌株能產(chǎn)生的耐熱直接溶血素和不耐熱溶血素是副溶血弧菌的主要致病物質(zhì)。檢驗(yàn)方法：（1）標(biāo)本采集：主要是患者的糞便、可疑食物。

（2）分離培養(yǎng)：首先稱取樣品25g，加225ml 3.5％滅菌鹽水，用均質(zhì)器打碎或用乳缽磨碎，接種氯化鈉瓊脂平板和嗜鹽再菌選擇性瓊脂平板各1個(gè)，同時(shí)取10ml，加入100 ml增菌液中（40g/LNaCl），放37℃8～16小時(shí)培養(yǎng)后，進(jìn)行平板分離，于37 ℃18—24小時(shí)培養(yǎng)后取出觀察。（3）挑取上述可疑菌落，轉(zhuǎn)種3.5％氯化鈉三糖鐵斜面，37℃、24小時(shí)觀察結(jié)果。

（4）涂片鏡檢：將三糖鐵培養(yǎng)基反應(yīng)可疑者(底層變黃，葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，斜面不變，乳糖蔗糖不分解，有動(dòng)力，不產(chǎn)生硫化氫)進(jìn)行涂片革蘭染色鏡檢形態(tài)。革蘭染色鏡檢形態(tài)。

①形態(tài)染色：革蘭陰性桿菌，隨培養(yǎng)基不同菌體形態(tài)差異較大，有卵圓形、棒狀、球桿狀、梨狀、弧形等多種形態(tài)。兩極濃染。

菌體一端有單鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑。無(wú)芽孢、無(wú)莢膜。

②培養(yǎng)特性：營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基中加入適量NaCl即能生長(zhǎng)。NaCl最適濃度為35g/LNaCl，在無(wú)鹽培養(yǎng)基中不生長(zhǎng)。

生長(zhǎng)所需 PH 7.0～9.5，最適 PH 7.7。需氧，在液體培養(yǎng)基表面形成菌膜。在厭氧環(huán)境下生長(zhǎng)較慢。①在35g/LNaCl瓊qiong脂平板上呈蔓延生長(zhǎng)，菌落邊緣不整齊，凸起、光滑濕潤(rùn)，不透明； ②在副溶血弧菌專用選擇培養(yǎng)基上形成1~2.5mm，稍隆起、渾濁、無(wú)粘性、綠色菌落； ③在SS平板上不生長(zhǎng)或長(zhǎng)出1~2mm扁平無(wú)色半透明的菌落，不易挑起，挑起時(shí)呈粘絲狀。

④在羊血瓊脂平板上，形成2~3mm、圓形、隆起、濕潤(rùn)、灰白色菌落，某些菌株可形成餿苧蜥溶血 ⑤在TCBS瓊脂（副溶血弧菌專用選擇培養(yǎng)基）上不發(fā)酵蔗糖，菌落綠色。

⑥生化反應(yīng)：所有用于該菌的生化反應(yīng)（副溶血弧菌）培養(yǎng)基需加入30g/LNaCl。本菌（副溶血弧菌）在70g/LNaCl培養(yǎng)基生長(zhǎng)，在無(wú)鹽或10%NaCl以上培養(yǎng)基不生長(zhǎng)。能分解葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、淀粉產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖、蔗糖；靛基質(zhì)，甲基紅試驗(yàn)陽(yáng)，V-P、H2S、尿素酶試驗(yàn)陰性；

神奈川試驗(yàn)是致病菌株能使人或兔紅細(xì)胞發(fā)生溶血，對(duì)馬紅細(xì)胞不溶血，稱神奈川試驗(yàn)陽(yáng)性。

（5）、嗜鹽性試驗(yàn) 將上述可疑培養(yǎng)物分別接種于不同濃度的鹽胨水中，37℃ 24小時(shí)培養(yǎng)后觀察生長(zhǎng)情況，在無(wú)鹽和l0％以上鹽的胨水中不生長(zhǎng)，在7％鹽的胨水中生長(zhǎng)良好者進(jìn)行下列有關(guān)試驗(yàn)。（6）生化試驗(yàn)（總結(jié)）：分別接種各類生化培養(yǎng)基，放37℃，除V-P、靛基質(zhì)、甲基紅試驗(yàn)培養(yǎng)48小時(shí)后加試劑觀察外，其他均可在24小時(shí)觀察。動(dòng)物試驗(yàn)

將上述各類反應(yīng)的副溶血性弧菌接種3.5％氯化鈉胨水，經(jīng)37℃16～18小時(shí)培養(yǎng)后，小鼠腹腔注射0.3ml，觀察2～3天，將死亡小鼠進(jìn)行解剖并做分離培養(yǎng)。預(yù)防原則

預(yù)防與其他細(xì)菌性食物中毒相似。如對(duì)水產(chǎn)品及鹽漬zi（漬是臟的意思）品等應(yīng)煮熟后食用?？捎脧?fù)方新若明、慶大霉素、氟哌酸等抗菌藥物治療。

2、擬態(tài)弧菌（腸道菌疾病檢驗(yàn)—腸道屬）“擬態(tài)弧菌與霍亂弧菌相似——形態(tài)學(xué)、培養(yǎng)特性、抗原結(jié)構(gòu)”是引起胃腸炎和某些腸外感染的病原菌。

該菌形態(tài)學(xué)和培養(yǎng)特性及抗原結(jié)構(gòu)與霍亂弧菌相似，但對(duì)01群霍亂弧菌標(biāo)準(zhǔn)診斷血清不凝集，可與霍亂弧菌相鑒別。

另外擬態(tài)弧菌與霍亂弧菌生化特性上最重要的區(qū)別在于擬態(tài)弧菌不發(fā)酵蔗糖（霍亂弧菌發(fā)酵蔗糖）。V-P試驗(yàn)、酒石酸鹽及對(duì)多粘菌素B的耐藥性等也可作為區(qū)別這兩種弧菌（擬態(tài)弧菌和霍亂弧菌）的參考試驗(yàn)。

3．其他（腸道菌疾病檢驗(yàn)—腸道屬）①河弧菌 ②霍利斯弧菌

③弗尼斯弧菌等可引起急性胃腸炎

④創(chuàng)傷弧菌可引起重癥創(chuàng)傷性感染和原發(fā)性敗血癥，⑤海魚(yú)弧菌可引起創(chuàng)傷性及耳部感染，⑥有跡象表明溶藻弧菌與胃腸炎有關(guān)系，但還需進(jìn)一步確定。大腸桿菌是人和動(dòng)物腸道中的正常菌群，一般對(duì)人無(wú)害。

本菌為革蘭陰性的短桿菌，其抗原結(jié)構(gòu)有3種，即菌體抗原(O抗原)、包膜抗原(K抗原)和鞭毛抗原(H抗原)。

（1）0抗原是血清分型的基礎(chǔ)，目前已發(fā)現(xiàn)有170多種，其中一些特殊的血清型具有病原性，能引起人類腹瀉，故稱為致腹瀉性大腸桿菌，而由其引起之腸炎稱致腹瀉性大腸桿菌腸炎。世界各地廣泛存在本菌感染，嬰兒腹瀉中檢出率較高，在成人中亦可呈散在或暴發(fā)流行。臨床表現(xiàn)為：旅游者腹瀉或食物中毒。新生兒病房及托幼機(jī)構(gòu)可引起交叉感染而發(fā)生流行。

根據(jù)發(fā)病機(jī)制、臨床表現(xiàn)、流行病學(xué)特征、0抗原血清型及細(xì)菌的毒力測(cè)定可將致腹瀉性大腸桿菌分為5類：

①致病性大腸桿菌(EPEC)②腸產(chǎn)毒素性大腸桿菌(ETEC)③侵襲性大腸桿菌(EIEC)④出血性大腸桿菌(EHEC)⑤腸集聚粘附性大腸桿菌(EAggEC)。(一)病原學(xué)

①腸致病性大腸桿菌(EPEC)的主要毒力因子有菌毛、志賀樣毒素(SLTs)和LEE毒力島。②腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)的主要毒力因子為熱不穩(wěn)定毒素、熱穩(wěn)定毒素及與致病性相關(guān)的定居因子。

③腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)在毒力因子和致病機(jī)制上與志賀菌基本一致。

④腸出血性大腸桿菌(EHEC)的主要毒力因子有志賀樣毒素(SLTs)、溶血素、LEE毒力島及其他未知的毒力因素。

⑤腸集聚性粘附大腸桿菌(EAggEC)是一類新發(fā)現(xiàn)的致瀉性大腸桿菌，目前已知的毒力因子有菌毛和熱穩(wěn)定腸毒素。(二)臨床表現(xiàn)

ETEC（腸產(chǎn)毒性大腸桿菌）感染的主要臨床癥狀是水樣腹瀉、腹痛、惡心和低熱；日腹瀉可達(dá)8一12次，可持續(xù)4～5天。

EPEC（腸致病性大腸桿菌）的主要臨床癥狀是發(fā)熱、不適、嘔吐、腹瀉，糞便中含有大量粘液而無(wú)血，癥狀可持續(xù)2周以上，多引起社區(qū)的小型暴發(fā)。

EIEC（腸侵襲性大腸桿菌）引起的腹瀉在臨床癥狀上與細(xì)菌性痢疾不可區(qū)分，主要是發(fā)熱、腹部劇烈疼痛與不適、毒血癥、水樣腹瀉，糞便中有少量粘液和血。

EHEC（腸出血性大腸桿菌）感染的主要臨床癥狀為突發(fā)腹部痙攣性疼痛、不適、初期水樣便，進(jìn)而轉(zhuǎn)為鮮血樣糞便、不發(fā)熱或低熱，可伴有上呼吸道癥狀，白細(xì)胞計(jì)數(shù)稍高或正常。

EAggEC（腸集聚性粘附大腸桿菌）感染主要與小兒頑固性腹瀉有關(guān)，癥狀可持續(xù)2周或2周以上。(三)診斷標(biāo)準(zhǔn)

1、流行病學(xué)資料 致瀉性大腸桿菌（腸致瀉性大腸埃希菌）引起的腹瀉一年四季均可發(fā)病，夏秋季多發(fā)，有不潔飲食(水)和(或)與腹瀉患者、腹瀉動(dòng)物、帶菌者接觸史。如為食物源性則常為集體發(fā)病及有共進(jìn)可疑食物史。

2、臨床表現(xiàn)

腹瀉：大便每日≥3次，糞便的性狀異常，可為稀便、水樣便、粘液便、膿血便，可伴有惡心、嘔吐、食欲不振、發(fā)熱、腹痛及全身不適等。病情嚴(yán)重者會(huì)引起脫水、電解質(zhì)紊亂甚至休克。（已除外霍亂、痢疾、傷寒、副傷寒）。

3、實(shí)驗(yàn)室檢查

(1)糞便常規(guī)檢查：糞便可為稀便、水樣便、粘液便、血便或膿血便，鏡檢可見(jiàn)多量紅白細(xì)胞，亦可有少量或無(wú)細(xì)胞。

(2)病原學(xué)檢查：糞便中可檢出腸致瀉性大腸桿菌（EPEC）或檢出特異性抗原、核酸或從血清中檢出特異性抗體。

臨床診斷：ETEC（腸產(chǎn)毒性大腸桿菌）感染的主要臨床癥狀是水樣腹瀉、腹痛、惡心和低熱；日腹瀉可達(dá)8一12次，可持續(xù)4～5天。致瀉性大腸桿菌（腸致瀉性大腸埃希菌）引起的腹瀉一年四季均可發(fā)病，夏秋季多發(fā)，有不潔飲食(水)和(或)與腹瀉患者、腹瀉動(dòng)物、帶菌者接觸史。如為食物源性則常為集體發(fā)病及有共進(jìn)可疑食物史。病原診斷：臨床診斷腹瀉：大便每日≥3次，糞便的性狀異常，可為稀便、水樣便、粘液便、膿血便，可伴有惡心、嘔吐、食欲不振、發(fā)熱、腹痛及全身不適等。

病情嚴(yán)重者會(huì)引起脫水、電解質(zhì)紊亂甚至休克。（已除外霍亂、痢疾、傷寒、副傷寒）。4．鑒別診斷

由腸致病性大腸桿菌（EPEC）引起的腸炎需要與下列疾病進(jìn)行鑒別診斷： ①痢疾、②沙門菌腸炎、③空腸彎曲菌腸炎、④病毒性腸炎、⑤幼兒急疹等。由腸產(chǎn)毒性大腸桿菌引（ETEC）起的腸炎需要與下列疾病進(jìn)行鑒別診斷 主要與①霍亂鑒別，其次需要與②病毒性腸炎以及③沙門菌腸炎鑒別。由腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）引起的腸炎需要與下列疾病進(jìn)行鑒別診斷 與細(xì)菌性痢疾非常相似（腸侵襲性大腸桿菌與細(xì)菌性痢疾非常相似），很難鑒別，確定診斷需要有EIEC（腸侵襲性大腸桿菌）血清凝集試驗(yàn)陽(yáng)性，同時(shí)大便培養(yǎng)所得的大腸桿菌作豚鼠角膜試驗(yàn)陽(yáng)性。（總結(jié)：EIEC血清凝集試驗(yàn)陽(yáng)性與大便培養(yǎng)所得的大腸桿菌作豚鼠角膜試驗(yàn)陽(yáng)性才能診斷）(四)、治療

1．腸致病性大腸桿菌（EPEC）引起的腸炎的治療采取抗菌消炎、控制腹瀉、糾正脫水酸中毒等綜合措施。

(1)飲食療法：基本同輪狀病毒腸炎。目前對(duì)腹瀉病兒多主張繼續(xù)喂養(yǎng)，在脫水較重時(shí)，可暫不喂養(yǎng)。用靜脈輸液或口服補(bǔ)液療法(()RS)糾正脫水及電解質(zhì)紊亂。待脫水基本糾正，病兒有食欲時(shí)即可開(kāi)始母乳喂養(yǎng)，母乳中IgA對(duì)大腸桿菌有一定抑制作用。

人工喂養(yǎng)患兒可用l／2牛奶，或脫脂奶與米湯混合，定時(shí)定量喂養(yǎng)，2個(gè)月以上嬰兒，每4小時(shí)喂1次，夜間可免喂1次。

逐步提高牛奶濃度及增加總量，經(jīng)5天左右恢復(fù)至病前飲食。

病情越重、年齡越小者，腸道功能恢復(fù)越慢，計(jì)劃飲食時(shí)間需要適當(dāng)延長(zhǎng)。

(2)液體療法：按患兒脫水程度，脫水性質(zhì)(多為等滲，少數(shù)為低滲，高滲罕見(jiàn))及代謝性酸中毒輕重，制定輸液計(jì)劃，初6～8小時(shí)補(bǔ)充累計(jì)損失量，可分批靜脈滴人，等滲脫水的補(bǔ)液，總張力為1／2～2／3張，低滲脫水為2／3張至等張。

有尿后，注意鉀的補(bǔ)充。有佝僂病時(shí)可適當(dāng)補(bǔ)鈣。輕、中度脫水，也可采用()RS（口服補(bǔ)液療法）補(bǔ)液。

脫水糾正，繼之以l／3～1／4張的液體補(bǔ)充生理需要。

(3)抗菌藥物：成人輕型病例可不用抗生素。通過(guò)調(diào)整腸道正常菌群而白愈。嬰幼兒一般均需用敏感抗生素。既往用新霉素口服治療，療效極佳，現(xiàn)多已產(chǎn)生耐藥?？诜c大霉素或多粘菌素E有一定效果，但遠(yuǎn)不如當(dāng)初的新霉素。

目前臨床上試用①諾氟沙星、②環(huán)丙沙星或③鹽酸黃連素，另加④甲氧芐啶(TMP)等治療；療效有待進(jìn)一步證實(shí)。

(4)對(duì)癥治療及支持療法：有人報(bào)道用山莨菪堿足三衛(wèi)八位封閉可減少便次。胃蛋白酶、胰酶、鞣酸蛋白、中藥肥兒散等，可促進(jìn)大便性狀好轉(zhuǎn)并加強(qiáng)消化功能，但尚需臨床實(shí)踐證實(shí)。對(duì)于重癥及營(yíng)養(yǎng)不良患兒，可少量多次輸血或白蛋白，以改善傘身狀況。

(5)護(hù)理：保持肛周皮膚清潔于燥，防止臀紅及肛周膿腫。臀紅外線局部烤干，肛周花粉、鞣酸軟膏等。

2．腸產(chǎn)毒性大腸桿菌（ETEC）引起的腸炎的治療。

ETEC為有自限性傾向的疾病，輕者可不用抗生素治療，重者使用抗生素可縮短病程及排菌時(shí)間。主要選用①環(huán)丙沙星或②諾氟沙星，合并用思密達(dá)或鹽酸黃連素。劑量同EPEC（腸致病性大腸桿菌）腸炎的治療。

本病治療重點(diǎn)是糾上脫水、酸中毒和低血鉀癥。輕癥可用0RS液（口服補(bǔ)液療法），重者需要靜脈補(bǔ)液．首選“5：4：1”液，即每1000ml液體加氯化鈉5g、碳酸氫鈉4g、氯化鉀1g。

3、腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）引起的腸炎的治療，同細(xì)菌性痢疾的治療，重癥者應(yīng)用抗生素。

4、腸出血性大腸桿菌（EHEC）引起的腸炎的治療，是否應(yīng)該使用抗菌藥，學(xué)術(shù)上尚無(wú)定論。有學(xué)者提出，抗菌藥對(duì)本病不能縮短病程，不能減少并發(fā)癥的發(fā)生，甚至有可能促進(jìn)釋放Vero毒素，導(dǎo)致合并溶血性尿毒癥綜合征(HUS)的發(fā)生，因此提出要避免使用抗牛素。

但也有學(xué)者提出，原則上可按其他感染性腹瀉來(lái)處理。重癥應(yīng)使用抗生素，如①環(huán)丙沙星、②鹽酸黃連素等；

輕癥，可采用腸黏膜保護(hù)劑①思密達(dá)或②微生態(tài)凋節(jié)劑。同時(shí)，注意，糾正脫水，加強(qiáng)支持療法。合并溶血性尿毒癥綜合征(HUS)者，按HUS（溶血性尿毒癥綜合征）搶救。HUS的治療：

(1)治療腎衰：按急性腎衰處理，保證足夠熱量，嚴(yán)格限制人量，每日液體總量為前一天的丟失量加300—500mi，兒童加400ml／m2體表面積。必要時(shí)血液透析。無(wú)尿24小時(shí)以內(nèi)者。透析效果好。(2)輸血：血紅蛋白50g/L以下者靜脈輸新鮮紅細(xì)胞，以次2.5～5ml/kg每6～12小時(shí)1次，維持血紅蛋白在7()～80g/L。必要時(shí)輸血小板。

(3)其他：肝素與激素的應(yīng)用，學(xué)術(shù)上有不同看法，應(yīng)慎用。

5．腸集聚粘附性大腸桿菌（EaggEC）引起的腸炎的治療，同腸致病性大腸桿菌（EPEC）引起的腸炎的治療。

(五)監(jiān)測(cè)：感染性腹瀉屬于中國(guó)丙類傳染病，在各省沒(méi)有監(jiān)測(cè)點(diǎn)，負(fù)責(zé)對(duì)包括腸致瀉性大腸桿菌性腹瀉在內(nèi)的感染性腹瀉的監(jiān)測(cè)工作。

腸致瀉性大腸桿菌（EPEC）的監(jiān)測(cè)工作主要是對(duì)腹瀉患者、重點(diǎn)人群、食品、糞便、蒼蠅等進(jìn)行監(jiān)測(cè)。在監(jiān)測(cè)點(diǎn)內(nèi)對(duì)改水、糞管等措施的落實(shí)情況及其他防疫措施作出科學(xué)評(píng)價(jià)。(六)控制措施 1．預(yù)防措施

(1)健康教育：利用多種形式深入開(kāi)展健康教育，宣傳講究衛(wèi)生，減少疾病發(fā)生。(2)預(yù)防接種：目前尚沒(méi)有成熟的、可供大范圍使用的疫苗。

(3)預(yù)防原則：應(yīng)以改善公共衛(wèi)生條件、切斷傳播途徑為主，同時(shí)加強(qiáng)對(duì)傳染源的管理，采取綜合性預(yù)防措施，對(duì)重點(diǎn)人群、集體單位應(yīng)特別注意預(yù)防暴發(fā)和流行。

2．患者、接觸者及其直接接觸環(huán)境的管理，發(fā)現(xiàn)患者及時(shí)報(bào)告；立即隔離及治療患者；采樣做病原學(xué)或血清學(xué)檢查，盡快查明病原；

對(duì)患者的嘔吐物、排泄物隨時(shí)消毒；對(duì)患者直接接觸的環(huán)境進(jìn)行消毒；對(duì)接觸者進(jìn)行管理，必要時(shí)給予預(yù)防服藥。

3、流行期措施：流行期應(yīng)采取緊急措施，加大宣傳教育的力度和范圍。

醫(yī)療機(jī)構(gòu)做到早診斷，早報(bào)告。對(duì)患者做好隔離、消毒知識(shí)的宣傳，落實(shí)各項(xiàng)消毒措施，防止交叉感染。

加強(qiáng)衛(wèi)生監(jiān)督，管好食品和集市貿(mào)易，進(jìn)行飲水消毒。對(duì)暴發(fā)疫情應(yīng)立即作出疫情報(bào)告，衛(wèi)生防疫部門應(yīng)盡快查明暴發(fā)原因，采取果斷措施切斷傳播途徑，防止疫情蔓延。

一、增 菌

樣品采集后應(yīng)盡快檢驗(yàn)。除了易腐食品在檢驗(yàn)之前應(yīng)預(yù)冷藏外，一般不冷藏。

以無(wú)菌手續(xù)稱取檢樣25g，加在225ml營(yíng)養(yǎng)肉湯中，以均質(zhì)器打碎1分鐘或用乳缽加滅菌砂磨碎。取出適量，接種乳糖膽鹽培養(yǎng)基（測(cè)大腸菌群的培養(yǎng)基），以測(cè)定大腸菌群MPN，其余的移人500ml廣口瓶?jī)?nèi)，于36℃土1℃培養(yǎng)6小時(shí)。

挑取l環(huán)，接種于1管30ml腸道菌增菌肉湯內(nèi)，于42℃培養(yǎng)18小時(shí)。

二、分 離

將乳糖發(fā)酵陽(yáng)性的乳糖膽鹽發(fā)酵管和增菌液分別劃線接種麥康凱或伊紅美藍(lán)瓊脂平板；

污染嚴(yán)重的檢樣，可將檢樣勻液直接劃線接種麥康凱或伊紅美藍(lán)平板，于36℃±1℃培養(yǎng)18～24小時(shí)，觀察菌落。

不但要注意乳糖發(fā)酵的菌落，同時(shí)也要注意乳糖不發(fā)酵和遲緩發(fā)酵的菌落。

三、生化試驗(yàn)

1、自鑒別平板上直接挑取數(shù)個(gè)菌落分別接種三糖鐵瓊脂(TSI)或克氏雙糖鐵瓊脂(KI)。

同時(shí)將這些培養(yǎng)物分別接種蛋白胨水、半固體、pH7．2尿素瓊脂、KCN肉湯和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基。以上培養(yǎng)物均在36℃培養(yǎng)過(guò)夜。2．TSI（三糖鐵瓊脂）斜面產(chǎn)酸或不產(chǎn)酸，底層產(chǎn)酸，H2S陰性，KCN陰性和尿素陰性的培養(yǎng)物為大腸埃希菌。

TSI（三糖鐵瓊脂）底層不產(chǎn)酸，或H2S、KCN、尿素有任意一項(xiàng)為陽(yáng)性的培養(yǎng)物，均非大腸埃希菌。必要時(shí)做氧化酶試驗(yàn)和革蘭染色。

四、血清學(xué)試驗(yàn)

1、假定試驗(yàn) 挑取經(jīng)生化試驗(yàn)證實(shí)為大腸埃希菌的瓊脂培養(yǎng)物，用①致病性大腸埃希菌、②侵襲性大腸埃希菌和③產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌多價(jià)O血清和④出血性大腸埃希菌O157血清做玻片凝集試驗(yàn)。

當(dāng)與某一種多價(jià)O血清凝集時(shí)，再與該多價(jià)血清所包含的單價(jià)O血清作試驗(yàn)。如與某一個(gè)單價(jià)O血清呈現(xiàn)強(qiáng)凝集反應(yīng)，即為假定試驗(yàn)陽(yáng)性。

2、證實(shí)試驗(yàn) 制備O抗原懸液，稀釋至與Mac Farland3號(hào)比濁管相當(dāng)?shù)臐舛?。原效價(jià)為1：160～1：320的O血清，用0.5％鹽水稀釋至1：40。稀釋血清與抗 原懸液在10mm×75mm試管內(nèi)等量混合，作單管凝集試驗(yàn)。

混勻后放于50℃水浴箱內(nèi)，經(jīng)16小時(shí)后觀察結(jié)果。如出現(xiàn)凝集，可證實(shí)為該O抗原。(一)病原學(xué)：

沙門菌屬是一大群寄生于人類和動(dòng)物腸道中，生化反應(yīng)和抗原構(gòu)造相似的革蘭陰性桿菌。目前至少有67種O抗原和2000個(gè)以上的血清型，但對(duì)人致病的僅少數(shù)，如引起①腸熱癥的傷寒、②副傷寒甲和③乙沙門菌，以這類菌的感染最多見(jiàn)（①腸熱癥的傷寒、②副傷寒甲和③乙沙門菌）

其他對(duì)動(dòng)物致病，有些菌種偶兒可傳染給人，引起食物中毒或敗血癥，如①鼠傷寒沙門菌（最常見(jiàn)）、②腸炎沙門菌、③鴨沙門菌、④豬沙門菌等，其中以鼠傷寒沙門菌最常見(jiàn)。

沙門菌屬除雞沙門菌和雛沙門菌，都有周身鞭毛。一般無(wú)莢膜。營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通平板上形成中等大小、五色半透明的S型菌落。

沙門菌屬不發(fā)酵乳糖或蔗糖。大多產(chǎn)生硫化氫。對(duì)葡萄糖、麥芽糖和甘露醇發(fā)酵，除傷寒沙門菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣外，其他沙門菌均產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

傷寒沙門菌(一十一一)、甲型副傷寒沙門菌(一十一一)、乙型副傷寒沙門菌(一十一V)和鼠傷寒沙門菌(一十一V)的IMViC(吲哚形成、甲基紅反應(yīng)、VP反應(yīng)和枸櫞酸鹽利用試驗(yàn))的結(jié)果分別為一十一一、一十一一、一十一V、一+一V。沙門菌的生化檢驗(yàn)主要用于菌屬鑒別。

傷寒沙門菌與大腸埃希菌在糖發(fā)酵方面的主要差別之一在于傷寒沙門菌不分解乳糖。(大腸埃希菌分解乳糖)對(duì)沙門菌的選擇分離培養(yǎng)可用SS瓊脂，在SS瓊脂上其菌落呈現(xiàn)微黃色或無(wú)色。在發(fā)病早期(一般l周內(nèi))可從血液中分離到該菌，且此時(shí)從血液中的分離率最高；

l周后可從糞便或尿中分離到，發(fā)病第3周時(shí)采取糞便標(biāo)本進(jìn)行病原分離率最高；骨髓培養(yǎng)是細(xì)菌學(xué)確診的最好方法，在發(fā)病第1周時(shí)也較高，檢出率可達(dá)到90％以上。膽汁標(biāo)本也可以進(jìn)行分離。

沙門菌屬抗原非常復(fù)雜，其分類也很復(fù)雜。完整的血清學(xué)分類僅包括具有分類診斷意義的3類抗原：即O抗原、H抗原和K抗原，另外K抗原又有兩種，即Vi抗原和M抗原（Vi抗原和M抗原屬于K抗原）。O抗原系耐熱性菌體抗原，由多糖—磷脂復(fù)合物組成； H抗原系不耐熱抗原，存在于鞭毛中，由鞭毛素組成；

K抗原存在于莢膜或被膜中，其中Vi抗原是覆蓋在細(xì)菌細(xì)胞壁LPS（脂多糖）外的莢膜多糖抗原。傷寒沙門菌和丙型副傷寒沙門菌具有Vi抗原。

O抗原由多個(gè)成分組成，引起人類疾病的沙門菌大多數(shù)屬A—E組，O抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM類抗體。H抗原分第1相和第2相，第l相特異性高，第2相特異性低，每組內(nèi)根據(jù)H抗原不同可再分為種或型，H抗原主要刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG類抗體。傷寒沙門菌、丙型副傷寒沙門菌等少數(shù)菌新從患者標(biāo)本中分離時(shí)有Vi抗原，存在于菌表面，可阻止O抗原與相應(yīng)抗體的凝集反應(yīng)，抗原性弱，刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體效價(jià)低，當(dāng)體內(nèi)有菌存在時(shí)有一定量抗體，細(xì)菌清除后，抗體隨之消失，故測(cè)定（Vi抗原屬于K抗原分類）有助于檢出傷寒帶菌者。

同一種或同一血清型的沙門菌，有時(shí)可用噬菌體進(jìn)一步分為若干噬菌體型，在流行病學(xué)上可用于追蹤傳染源和調(diào)查傳播途徑。

沙門菌的抗原有時(shí)發(fā)生變異，這對(duì)菌型診斷及在制備菌苗上有重要意義，變異的類型包括○1H—O、○2S-R、○3V-W變異和位相變異。

肥達(dá)試驗(yàn)為用已知的傷寒沙門菌O、H和甲、乙型副傷寒沙門菌H抗原與不同稀釋度的待檢血清作定量凝集試驗(yàn)，根據(jù)抗體的含量和動(dòng)態(tài)變化

以輔助臨床診斷傷寒病原菌的一種血清學(xué)試驗(yàn)。在病起的第2周，血清中抗體就可有較明顯增多，恢復(fù)期達(dá)到高峰。

一般O凝集價(jià)≥l：80，H凝集價(jià)≥l：160時(shí)才有診斷價(jià)值，有時(shí)單次效價(jià)增高不能定論，病程中應(yīng)逐周復(fù)查，若效價(jià)依次遞增或恢復(fù)期效價(jià)增加≥4才有意義。IgM類O抗體出現(xiàn)較早，持續(xù)約半年，消失后不易受傷寒等病原菌的非特異性抗原刺激而重新出現(xiàn)。IgG類H抗體出現(xiàn)較晚，維持時(shí)間長(zhǎng)達(dá)數(shù)年，消失后易受非特異性抗原刺激而能短暫重現(xiàn)。因此若O、H凝集效價(jià)均超過(guò)正常值，則傷寒或副傷寒感染的可能性大；如兩者均低，則患傷寒的可能性甚小；若O不高H高，有可能是預(yù)防接種或是非特異性回憶反應(yīng)；如O高H不高，則可能是感染早期或與傷寒沙門菌O抗原有交叉反應(yīng)的其他沙門菌(如腸炎沙門菌)。少數(shù)病例，在整個(gè)病程中，肥達(dá)試驗(yàn)始終在正常范圍內(nèi)，可能是早期使用大量抗生素，或患者免疫功能低下等因素。(二)流行病學(xué)

人是傷寒副傷寒的貯主，少數(shù)情況下，家畜家禽也可能是副傷寒的貯主。該病潛伏期一般為1—3周，由患者、帶菌者的糞便或尿污染食物和水而傳播。傳播因素還包括生活用品、蒼蠅等，還可經(jīng)接觸動(dòng)物傳播。

未感染過(guò)或未接種過(guò)菌苗的人或動(dòng)物均易感，傷寒沙門菌為胞內(nèi)寄生菌，病愈后有較牢固免疫力。(三)臨床表現(xiàn)

1、傷寒和副傷寒沙門菌：由傷寒沙門菌，副傷寒甲、乙、丙沙門菌引起。前驅(qū)期癥狀有 發(fā)熱、不適、全身疼痛等。

主要臨床表現(xiàn)為持續(xù)高熱，出現(xiàn)相對(duì)緩脈，肝脾腫大，全身中毒癥狀顯著，皮膚出現(xiàn)玫瑰疹，外周血白細(xì)胞明顯下降。嚴(yán)重的有出血或腸穿孔并發(fā)癥。腎中的細(xì)菌可隨尿排出。以上病變?cè)诩膊〉牡?～3周出現(xiàn)。若無(wú)并發(fā)癥，自第2周以后病情開(kāi)始好轉(zhuǎn)。

2、炎型(食物中毒)沙門菌：是最常見(jiàn)的沙門菌感染，由攝人大量鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌等污染的食物引起。

潛伏期6—24小時(shí)。主要癥狀為發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉，一般在3～5天內(nèi)較快恢復(fù)。偶爾低熱持續(xù)，腹瀉不停，可長(zhǎng)達(dá)10一14天。病后很少有慢性帶菌者。常為集體性食物中毒。

3、敗血癥沙門菌：多見(jiàn)于兒童或免疫力低下的成人。病菌以豬霍亂沙門菌、丙型副傷寒沙門菌、鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌等常見(jiàn)。

癥狀嚴(yán)重，有高熱、寒戰(zhàn)、厭食和貧血等。腸道中的病菌人血，轉(zhuǎn)移至多個(gè)組織、器官導(dǎo)致感染，例如腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、心內(nèi)膜炎等，但胃腸炎很少見(jiàn)。(四)預(yù)防

應(yīng)切實(shí)采取以切斷傳播途徑為主導(dǎo)的綜合性措施，開(kāi)展群眾性健康教育，認(rèn)真開(kāi)展以“三管一滅??(管水、管食物、管糞便和消滅蒼蠅)為中心的群眾性衛(wèi)生活動(dòng)，防止水源和食品污染。對(duì)傷寒的預(yù)防，疫苗的接種也是措施之一。目前我國(guó)普遍使用的（傷寒疫苗的接種）傷寒疫苗為Vi疫苗。

（五）實(shí)驗(yàn)室：沙門菌檢驗(yàn)

1、前增菌和增菌

凍肉、蛋品、乳品及其他加工食品均應(yīng)經(jīng)過(guò)前增菌。鮮肉、鮮蛋、鮮乳或其他未經(jīng)加工的食品不必經(jīng)過(guò)前增菌。

2、分離

取增菌液1環(huán)，劃線接種于一個(gè)亞硫酸鉍瓊脂平板和一個(gè)DHL瓊脂平板(或HE瓊脂平板、WS或LS瓊脂平板)。兩種增菌液可同時(shí)劃線接種在同一個(gè)平板上。于36℃±1分別培養(yǎng)18～24小時(shí)(DHL、HE、WS、SS)或40—48小時(shí)(BS)，觀察各個(gè)平板上生長(zhǎng)的菌落特征。

3、生化試驗(yàn)

（1）．自選擇性瓊脂平板上直接挑取數(shù)個(gè)可疑菌落，分別接種三糖鐵瓊脂。在三糖鐵瓊脂內(nèi)，腸桿菌科常見(jiàn)屬種的反應(yīng)結(jié)果不同。

在三糖鐵瓊脂內(nèi)只有斜面產(chǎn)酸并同時(shí)硫化氫(H2S)陰性的菌株可以排除，其他的反應(yīng)結(jié)果均有沙門菌的可能，同時(shí)也均有不是沙門菌的可能。（2）、在接種三糖鐵瓊脂的同時(shí)，再接種蛋白胨水(供作靛基質(zhì)試驗(yàn))、尿素瓊脂(pH7.2)、氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基及對(duì)照培養(yǎng)基各1管，于361℃±1培養(yǎng)18～24小時(shí)，必要時(shí)可延長(zhǎng)至48小時(shí)，按表7—3判定結(jié)果。（看結(jié)果在后面）

4、血清學(xué)分型鑒定（1）抗原的準(zhǔn)備

一般采用1.5％瓊脂斜面培養(yǎng)物作為玻片凝集試驗(yàn)用的抗原。

O血清不凝集時(shí)，將菌株接種在瓊脂量較高的(如2.5％～3％)培養(yǎng)基上再檢查；如果是由于Vi抗原的存在而阻止了O凝集反應(yīng)時(shí)，可挑取菌苔于1ml生理鹽水中做成濃菌液，于酒精燈火焰上煮沸后再檢查。H抗原發(fā)育不良時(shí)，將菌株種在0.7％～8％半固體瓊脂平板的中央，俟菌落蔓延生長(zhǎng)時(shí)，在其邊緣部分取菌檢查；

或?qū)⒕晖ㄟ^(guò)裝有0.3％～0.4％半固體瓊脂的小玻管l一2次，自遠(yuǎn)端取菌培養(yǎng)后再檢查。（2）O抗原的鑒定

用A—F多價(jià)O血清做玻片凝集試驗(yàn)，同時(shí)用生理鹽水做對(duì)照。在生理鹽水中自凝者為粗糙形菌株，不能分型。

被A—F多價(jià)O血清凝集者，依次是O4；O3、10；O7；O8；O9；O2 和O11因子血清做凝集試驗(yàn)。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，判定O群。

被O3、10血清凝集的菌株，再用O10、O15、O34、O19單因子血清做凝集試驗(yàn)，判定E1、E2、E3、E4各亞群，每一個(gè)O抗原成分的最后確定均應(yīng)根據(jù)O單因子血清的檢查結(jié)果，沒(méi)有O單因子血清的要用兩個(gè)O復(fù)合因子血清進(jìn)行核對(duì)。

不被A～F多價(jià)O血清凝集者，先用57種或163種沙門菌因子血清中的9種多價(jià)O血清檢查，如有其中一種血清凝集，則用這種血清所包括的O群血清逐一檢查，以確定O群。（3）H抗原的鑒定

屬于A～F各O群的常見(jiàn)菌型，依次用H因子血清檢查第1相和第2相的H抗原。

不常見(jiàn)的菌型，先用163種沙門菌因子血清中的8種多價(jià)H血清檢查，如有其中一種或兩種血清凝集，則再用這一種或兩種血清所包括的各種H因子血清逐一檢查，以確定第l相和第2相的H抗原。

每一個(gè)H抗原成分的最后確定均應(yīng)根據(jù)H單因子血清的檢查結(jié)果，沒(méi)有H單因子血清的要用兩個(gè)H復(fù)合因子血清進(jìn)行核對(duì)。

檢出第1相H抗原而末檢出第2相H抗原的或檢出第2相H抗原而未檢出第1相H抗原的，可在瓊脂斜面上移種1～2代后再檢查。如仍只檢出一個(gè)相的H抗原，要用位相變異的方法檢查其另一個(gè)相。單相菌不必作位相變異檢查。

位相變異試驗(yàn)方法如下：(1)小玻管法：將半固體管(每管約1～2m1)在酒精燈上溶化并冷至50℃，取已知相的H因子血清0.05～0.1ml，加入溶化的半固體內(nèi)，混勻后，用毛細(xì)吸管吸取分裝于供位相變異試驗(yàn)的小玻管內(nèi)，俟凝固后，用接種針挑取待檢菌，接種于一端。將小玻管平放在平皿內(nèi)，并在其旁放一團(tuán)濕棉花，以防瓊脂中水分蒸發(fā)而于縮，每天檢查結(jié)果，待另一相細(xì)菌解離后，可以從另一端挑取細(xì)菌進(jìn)行檢查。培養(yǎng)基內(nèi)血清的濃度應(yīng)有適當(dāng)?shù)谋壤?，過(guò)高時(shí)細(xì)菌不能生長(zhǎng)，過(guò)低時(shí)同一相細(xì)菌的動(dòng)力不能抑制。一般按原血清l：200～1：800的量加入。

(2)小倒管法：將兩端開(kāi)口的小玻管(下端開(kāi)口要留一個(gè)缺口，不要平齊)放在半固體管內(nèi)，小玻管的上端應(yīng)高出于培養(yǎng)基的表面，滅菌后備用。

臨用時(shí)在酒精燈上加熱溶化，冷至50℃，挑取因子血清1環(huán)，加入小套管中的半固體內(nèi)，略加攪動(dòng)，使其混勻；

俟凝固后，將待檢菌株接種于小套管中的半固體表層內(nèi)，每天檢查結(jié)果，待另一相細(xì)菌解離后，可從套管外的半固體表面取菌檢查，或轉(zhuǎn)種1％軟瓊脂斜面，于37℃培養(yǎng)后再做凝集試驗(yàn)。

簡(jiǎn)易平板法：將0.7％～0.8％半固體瓊脂平板烘干表面水分，挑取因子血清l環(huán)，滴在半因體平板表面，放置片刻，待血清吸收到瓊脂內(nèi)，在血清部位的中央點(diǎn)種待檢菌株，培養(yǎng)后，在形成蔓延生長(zhǎng)的菌苔邊緣取菌檢查。

(4)、Vi抗原的鑒定：用Vi因子血清檢查。已知具有Vi抗原的菌型有：①傷寒沙門菌，②丙型副傷寒沙門菌，③都柏林沙門菌。

5、菌型的判定和結(jié)果報(bào)告：綜合上述生化試驗(yàn)和血清學(xué)分型鑒定的結(jié)果，按照常用沙門菌抗原表或有關(guān)沙門菌屬抗原表判定菌型，并報(bào)告結(jié)果。(一)病原學(xué)

志賀菌為腸桿菌科志賀菌屬，革蘭陰性，需氧，無(wú)鞭毛、不能運(yùn)動(dòng)，引起細(xì)菌性痢疾。

根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同，分為A、B、C、D四群，其中A群為痢疾志賀菌，B群為福氏志賀菌，C群為鮑氏志賀菌，D群為宋內(nèi)志賀菌。

志賀菌的主要毒力因素包括：○1其表面結(jié)構(gòu)脂多糖、○2細(xì)菌侵襲性以及○3分泌的志賀毒素。

志賀毒素由A和B亞單位組成，A亞單位是毒素的活性部位，能抑制蛋白合成。

志賀菌A群Ⅰ型產(chǎn)生的志賀毒素具有○1神經(jīng)毒、○2細(xì)胞毒和○3腸毒性。目前已知各群志賀菌的侵襲相關(guān)基因都位于質(zhì)粒上。

志賀菌在普通瓊脂平板上生長(zhǎng)形成中等大小、半透明的光滑型菌落(D群的宋內(nèi)志賀菌：培養(yǎng)中常出現(xiàn)扁平的粗糙型菌落)。

其O抗原為群特異性抗原，K抗原為型特異型抗原，分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖。

（總結(jié) 志賀菌：革蘭陰性，需氧，無(wú)鞭毛、不能運(yùn)動(dòng)、分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖，在普通瓊脂平板上生長(zhǎng)形成中等大小、半透明的光滑型菌落，D群的宋內(nèi)志賀菌：培養(yǎng)中常出現(xiàn)扁平的粗糙型菌落）(二)流行病學(xué)

志賀菌菌型較多，菌群分布隨國(guó)家、地區(qū)、年份的不同而有不同，基本上發(fā)展中國(guó)家以A、B、C群多見(jiàn)，而發(fā)達(dá)國(guó)家以D群感染為主。

目前在我國(guó)以B群福氏志賀菌為多，其次是D群?；颊吆蛶Ь呤莻魅驹?，病菌隨患者或帶菌者糞便排出，通過(guò)污染食物、水、生活接觸或借蒼蠅傳播等，使易感的接觸者發(fā)病。

人對(duì)志賀菌較易感，10～200個(gè)細(xì)菌就可使10％～50％志愿者致病。志賀菌痢疾（A群為痢疾志賀菌）在中國(guó)全年均有發(fā)生，以夏秋兩季多見(jiàn)。

志賀菌感染的一些特點(diǎn)包括：（A群）痢疾志賀菌感染患者病情較重，（D群的）宋內(nèi)志賀菌多引起輕型感染，（B群）福氏志賀菌感染易轉(zhuǎn)變?yōu)槁?；急性中毒性菌痢以小兒多?jiàn)；感染后免疫期短。(三)病原分離

取新鮮糞便粘液或膿血部分接種于SS瓊脂選擇培養(yǎng)基上，并按常規(guī)鑒定菌群與菌型。注意在三糖鐵培養(yǎng)基上，痢疾志賀菌與傷寒沙門菌的表現(xiàn)相似。需要增菌時(shí)，如自可疑食品中進(jìn)行分離，可先用GN增菌液增菌，提高檢出率。(四)診斷標(biāo)準(zhǔn)

細(xì)菌性痢疾的（志賀菌）診斷原則為依據(jù)流行病學(xué)史、癥狀、體征及實(shí)驗(yàn)室檢查進(jìn)行綜合診斷，確診則需依賴于病原學(xué)檢查。

志賀菌根據(jù)癥狀體征可診斷為○1急性非典型菌痢、○2急性典型菌痢、○3急性中毒型菌痢和○4慢性菌痢。

志賀菌感染病程在2個(gè)月以上屬慢性。(五)防治原則

1．預(yù)防：應(yīng)以切斷傳播途徑為主，同時(shí)加強(qiáng)對(duì)傳染源管理的綜合性防治措施。對(duì)重點(diǎn)人群、集體單位應(yīng)特別注意預(yù)防暴發(fā)或流行。

2．治療：一般對(duì)癥治療中注意進(jìn)易消化飲食，注意水電解質(zhì)平衡，可給口服補(bǔ)液鹽(ORS)，必要時(shí)ORS（口服補(bǔ)液鹽）和靜脈輸液同時(shí)應(yīng)用。

病原治療中，細(xì)菌性痢疾可以是自限性的，一般情況下可以不使用抗生素。對(duì)癥狀比較嚴(yán)重的患者，抗生素治療可縮短病程、減輕病情和縮短排菌期。

對(duì)休克型菌痢進(jìn)行抗感染、抗休克處理。對(duì)腦型菌痢需抗感染、防治腦水腫和呼吸衰竭。

（六）實(shí)驗(yàn)室志賀菌檢驗(yàn)

1、增菌

稱取檢樣25g，加入裝有225mLGN增菌液的500ml廣口瓶?jī)?nèi)，固體食品用均質(zhì)器以8000～10000轉(zhuǎn)／分打碎1分鐘，或用乳缽加滅菌砂磨碎，粉狀食品用金屬匙或玻璃棒研磨使其乳化，于36℃培養(yǎng)6～8小時(shí)。培養(yǎng)時(shí)間視細(xì)菌生長(zhǎng)情況而定，當(dāng)培養(yǎng)液出現(xiàn)輕微混濁時(shí)即應(yīng)中止培養(yǎng)。

2、分離和初步生化試驗(yàn)

（1）、取增菌液1環(huán)，劃線接種于HE瓊脂平板或SS瓊脂平板1個(gè)；另取l環(huán)劃線接種子麥康凱瓊脂平板或伊紅美藍(lán)瓊脂平板1個(gè)，于36℃培養(yǎng)18～24小時(shí)，志賀菌在這些培養(yǎng)基上呈現(xiàn)無(wú)色透明不發(fā)酵乳糖的菌落。

（總結(jié)：志賀菌在HE瓊脂平板或SS瓊脂平板：麥康凱瓊脂平板或伊紅美藍(lán)瓊脂平板（志賀菌）在這些培養(yǎng)基上呈現(xiàn)無(wú)色透明不發(fā)酵乳糖的菌落）。

（2）、挑取平板上的可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂和葡萄糖半固體各1管。一般應(yīng)多挑幾個(gè)菌落，以防遺漏，經(jīng)36℃培養(yǎng)18～24小時(shí)，分別觀察結(jié)果。（3）、下述培養(yǎng)物可以棄去。

①在三糖鐵瓊脂斜面上呈蔓延生長(zhǎng)的培養(yǎng)物。

②在18～24小時(shí)內(nèi)發(fā)酵乳糖、蔗糖的培養(yǎng)物。（因?yàn)橹举R菌不發(fā)酵乳糖、蔗糖的培養(yǎng)物）

③不分解葡萄糖和只生長(zhǎng)在半固體表面的培養(yǎng)物。（因?yàn)橹举R菌分解葡萄糖和不能只生長(zhǎng)在半固體表面的培養(yǎng)物）

④產(chǎn)氣的培養(yǎng)物。（因?yàn)橹举R菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣）

⑤有動(dòng)力的培養(yǎng)物。（因?yàn)橹举R菌無(wú)鞭毛、不能運(yùn)動(dòng)所以無(wú)動(dòng)力的培養(yǎng)物）⑥產(chǎn)生硫化氫的培養(yǎng)物。（因?yàn)橹举R菌不產(chǎn)生硫化氫的培養(yǎng)物）

（4）凡是乳糖、蔗糖不發(fā)酵，葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(福氏志賀菌6型可產(chǎn)生少量氣體)，無(wú)動(dòng)力的菌株，可做血清學(xué)分型和進(jìn)一步的生化試驗(yàn)。

3、血清學(xué)分型和進(jìn)一步的生化試驗(yàn)（1）、血清學(xué)分型 挑取三糖鐵瓊脂上的培養(yǎng)物，做玻片凝集試驗(yàn)。先用4種志賀菌多價(jià)血清檢查，如果由于K抗原的存在而不出現(xiàn)凝集，應(yīng)將菌液煮沸后再檢查；如果呈現(xiàn)凝集，則用A1、A2、B群多價(jià)和D群血清分別試驗(yàn)。如系B群福氏志賀菌，則用群和型因子血清分別檢查。可先用群因子血清檢查，再根據(jù)群因子血清出現(xiàn)凝集的結(jié)果，依次選用型因子血清檢查。

4、種志賀菌多價(jià)血清不凝集的菌株，可用鮑氏多價(jià)1、2、3分別檢查，并進(jìn)一步用1～15各型因子血清檢查。

如果鮑氏多價(jià)血清不凝集，可用痢疾志賀菌3～12型多價(jià)血清及各型因子血清檢查。（2）進(jìn)一步的生化試驗(yàn)

在作血清學(xué)分型的同時(shí)，應(yīng)作進(jìn)一步的生化試驗(yàn)，即：○1葡萄糖銨，○2西蒙檸檬酸鹽，○3賴氨酸和○4鳥(niǎo)氨酸脫羧酶，○5pH7.2尿素，○6KCN生長(zhǎng)，以及○7水楊苷的分解。除宋內(nèi)菌和鮑氏13型為鳥(niǎo)氨酸陽(yáng)性外，志賀菌屬的培養(yǎng)物均為陰性結(jié)果。必要時(shí)還應(yīng)做革蘭染色檢查和氧化酶試驗(yàn)，應(yīng)為氧化酶陰性的革蘭陰性桿菌。生化反應(yīng)不符合的菌株，即使能與某種志賀菌分型血清發(fā)生凝集，仍不得判定為志賀菌屬的培養(yǎng)物。

已判定志賀菌屬的培養(yǎng)物，應(yīng)進(jìn)一步作5％乳糖發(fā)酵，甘露醇、棉子糖和甘油的發(fā)酵和靛基質(zhì)試驗(yàn)。志賀菌屬4個(gè)生化群的培養(yǎng)物，應(yīng)符合該群的生化特性。但福氏6型的生化特性與A群或C群相似。

3、結(jié)果報(bào)告：綜合生化和血清學(xué)的試驗(yàn)結(jié)果判定菌型并作出報(bào)告。一)病原學(xué)

小腸結(jié)腸炎耶爾森菌病，是由小腸結(jié)腸炎耶爾森菌感染引起的，與鼠疫耶爾森菌和假結(jié)核耶爾森菌構(gòu)成了這個(gè)屬的3個(gè)主要致病種（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌病、鼠疫耶爾森菌、假結(jié)核耶爾森菌），為革蘭陰性小桿菌，對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不嚴(yán)格，在0℃～42℃時(shí)均可生長(zhǎng)，是腸道致病菌中能在4℃生長(zhǎng)的少數(shù)細(xì)菌之一（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌病、鼠疫耶爾森菌、假結(jié)核耶爾森菌）。

小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的鑒定主要依靠27種生化反應(yīng)和動(dòng)力試驗(yàn)，本病原體在37℃生長(zhǎng)時(shí)無(wú)動(dòng)力，而在25℃~28℃生長(zhǎng)時(shí)有動(dòng)力形成。該病原體常污染多種食品和水源。

（總結(jié)：小腸結(jié)腸炎耶爾森菌是由小腸結(jié)腸炎耶爾森菌感染引起的，該菌屬于腸桿菌科，耶爾森菌屬。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌是 腸道致病菌中能在4℃生長(zhǎng)的少數(shù)細(xì)菌之一，37℃生長(zhǎng)時(shí)無(wú)動(dòng)力，而在25℃~28℃生長(zhǎng)時(shí)有動(dòng)力形成。腹瀉病種之—）小腸結(jié)腸炎耶爾森菌有如下特征：

1、抗原：這種病原體有革蘭陰性腸桿菌特異性的多糖抗原和腸道菌的共同抗原，小腸結(jié)腸炎耶爾森菌血清型是根據(jù)脂多糖O抗原確定的。

現(xiàn)在國(guó)際上常報(bào)告的有57個(gè)抗原因子，將小腸結(jié)腸炎耶爾森菌分成50多個(gè)血清型。

2、V、W因子：由質(zhì)粒編碼的抗原，是—種毒力決定因子，也是毒力的標(biāo)記。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌在37℃生長(zhǎng)時(shí)需要鈣離子（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌），而在25℃～28℃生長(zhǎng)時(shí)不需要鈣離子（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌）。

3、自凝性：小腸結(jié)腸炎耶爾森菌在含有10％小牛血清的組織培養(yǎng)液內(nèi)37℃培養(yǎng)1天，發(fā)生自凝，而在25℃則不發(fā)生自凝。

目前的研究已證實(shí)這種自凝作用是由質(zhì)粒編碼的外膜蛋白A(YOPA)引起的。（YOPA—外膜蛋白A）

4、侵襲性：小腸結(jié)腸炎耶爾森菌能侵入腸上皮細(xì)胞，并且能侵入到人工培養(yǎng)的Hep-2及Hela細(xì)胞內(nèi)，這種侵入性是由染色體編碼的侵襲素所決定的。

目前還發(fā)現(xiàn)染色體上有另一基因位點(diǎn)，稱作粘附侵襲位點(diǎn)(ail)，編碼的—種蛋白質(zhì)，是介導(dǎo)低水平的粘附侵襲作用。

5、外膜蛋白：小腸結(jié)腸炎耶爾森菌都具有一個(gè)約60kb的占力質(zhì)檢，編碼10多種外膜蛋白(YOPs)，現(xiàn)已證實(shí)這些外膜蛋白中的—些與致病密切相關(guān)。

有關(guān)小腸結(jié)腸炎耶爾森菌病原體的研究還在不斷深入。(二)臨床表現(xiàn)：

1、急性腸炎和急性胃腸炎：是小腸結(jié)腸炎耶爾森菌病最常見(jiàn)的臨床類別，表現(xiàn)為腹瀉和發(fā)熱，病情輕重不一，部分患者伴有腹痛和嘔吐。

2．有類似于闌尾炎的癥狀：有報(bào)道在外科手術(shù)后的闌尾內(nèi)容物中分離別小腸結(jié)腸炎耶爾森菌。

3、慢性反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎及結(jié)節(jié)性紅斑：這兩種癥狀（慢性反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎及結(jié)節(jié)性紅斑）引起的機(jī)制可能相似，很有可能都是該菌腸道感染后的遲發(fā)型免疫后遺癥。

目前的研究發(fā)現(xiàn)，小腸結(jié)腸炎耶爾森菌質(zhì)粒編碼的外膜蛋白A(YopA)是引起關(guān)節(jié)炎的關(guān)鍵因素，有學(xué)者推測(cè)該菌產(chǎn)生的超抗原也是引起這兩種癥狀（慢性反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎及結(jié)節(jié)性紅斑）另一個(gè)原因。

4、耶氏肝炎：前蘇聯(lián)和我國(guó)學(xué)者都發(fā)現(xiàn)該菌感染可引起肝炎，稱“耶氏肝炎”。這種病原體引起的與②病毒性肝炎癥狀相似。區(qū)別是前者（①肝炎）高熱、抗生素治療效果顯著，然后根據(jù)血清學(xué)和病原體檢測(cè)作出進(jìn)一步診斷。

5、其他：還有一些少見(jiàn)癥狀，如敗血癥等全身性癥狀。這些癥狀雖然少見(jiàn)，但死亡率較高。(三)診斷標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)小腸結(jié)腸炎耶爾森菌病的確診主要依靠病原體分離及血清學(xué)診斷。

在未分離到病原體之前，應(yīng)根據(jù)臨床癥狀(先有發(fā)熱、腹瀉，不久發(fā)生咽喉炎、扁桃體炎、頸部淋巴結(jié)腫大、關(guān)節(jié)炎以及結(jié)節(jié)性紅斑等)作出初步診斷。

目前還發(fā)展了一些分子生物學(xué)方法，以利于對(duì)該菌的感染作出快速診斷，如PCR技術(shù)(聚合酶鏈反應(yīng))，針對(duì)于外膜蛋白的單克隆抗體檢查技術(shù)等。但這些方法推廣卻受到一定限制。

(四)治療原則： 一般說(shuō)來(lái)小腸結(jié)腸炎耶爾森菌感染癥狀較輕，主要采取支持療法，癥狀很快消失。對(duì)于一些嚴(yán)重病例，特別是一些腸外型的感染應(yīng)及時(shí)采用抗生素治療。鏈霉素和慶大霉素是臨床上常用的藥物。（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌常用的藥物是鏈霉素和慶大霉素）

(五)監(jiān)測(cè)：小腸結(jié)腸炎耶爾森菌常存在于一些冷藏食品中，這類感染通常稱作“冰箱病”因此食品檢驗(yàn)是對(duì)該菌最好的監(jiān)測(cè)方法。(六)控制措施：

1．控制傳染源：(1)發(fā)現(xiàn)和治療患者，執(zhí)行隔離制度，以免病菌擴(kuò)散。(2)在我國(guó)，牛、豬等家畜是主要的傳染源，加強(qiáng)管理，防止排泄物污染水源和食物。(3)有一些鼠類和昆蟲(chóng)也是攜帶有對(duì)人類致病性的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌，因此消滅也是防治該病的主要環(huán)節(jié)。2． 切斷傳播途徑：(1)加強(qiáng)環(huán)境衛(wèi)生管理。(2)保護(hù)水源。

3． 個(gè)人防護(hù)：(1)講究個(gè)人衛(wèi)生，不食不潔食物，防止病從口入。(2)不喝牛水(水源極易被該菌污染)和未消毒的牛奶。(一)病原學(xué)：

彎曲菌為革蘭陰性菌，為嚴(yán)格的微需氧菌。鏡下觀察菌細(xì)胞末端是尖的，且形態(tài)細(xì)長(zhǎng)，呈弧形、螺旋形或“海鷗展翅”狀，一端或兩端各有一根鞭毛。(二)流行病學(xué)：

彎曲菌為人獸共患病，與人類感染有關(guān)的主要是家禽和家畜，也是主要的傳染源，患者和帶菌者也可以成為傳染源。

最常見(jiàn)的傳播途徑是進(jìn)食污染的食物和水。人群普遍易感。本?。漳c彎曲菌）的胃腸炎癥狀表現(xiàn)不一，可由無(wú)癥狀的帶菌、輕型腹瀉以至嚴(yán)重腹瀉，潛伏期為l一10天，多數(shù)為3～5天。主要癥狀有發(fā)熱、腹瀉和腹痛，少數(shù)有嘔吐等。與細(xì)菌性痢疾相似，但病情較輕。

空腸彎曲菌是彎曲菌中最常見(jiàn)的病原菌，感染后可表現(xiàn)為輕微的胃腸炎或重型的小腸結(jié)腸炎。近年報(bào)道該菌（空腸彎曲菌）感染與格林巴利綜合征的發(fā)生密切相關(guān)。(三)病原分離 取新鮮糞便標(biāo)本或肛拭子插入C—B運(yùn)送培養(yǎng)基，在24小時(shí)內(nèi)或經(jīng)增菌后接種于相應(yīng)抗生素的硫乙醇酸鈉培養(yǎng)基（空腸彎曲菌），置42℃、微氧(濃度5％～10％)、高二氧化碳(3％～4％)的條件下培養(yǎng)約48小時(shí)。作生化試驗(yàn)和藥敏試驗(yàn)以進(jìn)一步確定細(xì)菌種。(一)克雷伯菌屬（腸道菌疾病檢驗(yàn)—腸道屬）

克雷伯菌屬細(xì)菌一般不致病，當(dāng)機(jī)體免疫力低下時(shí)，能引起多種感染。對(duì)人類關(guān)系密切的有①肺炎克氏菌和②臭鼻克氏菌和③鼻硬結(jié)克氏菌。

肺炎克氏菌是形態(tài)較短粗的革蘭陰性桿菌，常見(jiàn)端端排列，無(wú)鞭毛，多數(shù)有菌毛，有較厚的莢膜。營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落大，呈粘液狀，相互融合，以接種環(huán)挑之易拉成絲。

肺炎克氏菌是除大腸桿菌外的最重要條件致病菌，已成為醫(yī)源性感染的重要細(xì)菌。

存在于人類腸道、呼吸道及水和谷物中，當(dāng)機(jī)體免疫力降低或應(yīng)用免疫抑制劑，也可因長(zhǎng)期大量使用抗生素導(dǎo)致菌群失調(diào)而引起感染。

常見(jiàn)有支氣管炎、肺炎、泌尿道和創(chuàng)傷感染，有時(shí)導(dǎo)致嚴(yán)重的敗血癥、腦膜炎、腹膜炎等。(二)變形桿菌屬（腸道菌疾病檢驗(yàn)—腸道屬）

變形桿菌屬中與醫(yī)學(xué)關(guān)系密切的包括①普通變形桿菌和②奇異變形桿菌，為多形性的革蘭陰性桿菌，可為球形或絲狀，無(wú)莢膜，幼齡培養(yǎng)物中有周身鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑。有菌毛，可粘附至植物和真菌細(xì)胞表面，但不與動(dòng)物組織細(xì)胞或紅細(xì)胞表面吸附。需氧或兼性厭氧。

營(yíng)養(yǎng)要求不高。在固體培養(yǎng)基上常呈擴(kuò)散生長(zhǎng)，形成以菌接種部位為中心的厚薄交替、同心圓形的層層波狀菌苔，稱為遷徙xi(遷移的意思)生長(zhǎng)現(xiàn)象。

在血瓊脂平板上有溶血現(xiàn)象。能迅速分解尿素，是本屬的一個(gè)重要特征。個(gè)別菌株發(fā)酵乳糖。變形桿菌根據(jù)菌種抗原分群，再以鞭毛抗原分型，現(xiàn)至少分為100多個(gè)血清型。

X19、X2、和XK菌株含有特殊菌體O抗原，可與某些立克次體的部分抗原發(fā)生交叉反應(yīng)，故可替代立克次體作為抗原與患者血清進(jìn)行凝集反應(yīng)，此稱為外斐試驗(yàn)，以輔助診斷斑疹傷寒、恙蟲(chóng)病等立克次體病。

變形桿菌屬在自然界分布廣泛，人和動(dòng)物腸道也經(jīng)常存在。對(duì)人類一般不致病，在特定條件下可單獨(dú)或與其他細(xì)菌混合感染。

變形桿菌是尿道感染最常見(jiàn)菌之一，其尿素酶可分解尿素產(chǎn)氨，使尿液pH增高，堿性環(huán)境有利于變形桿菌的生長(zhǎng)。

腎結(jié)石和膀胱結(jié)石的形成與變形桿菌屬可能也有關(guān)，因該菌屬可使尿堿化促進(jìn)磷酸銨鎂結(jié)石的形成。變形桿菌還能引起皮膚、耳、乳突小房、眼等局部感染，以及腹膜炎、敗血癥等，有的菌株可引起食物中毒。

(三)腸桿菌屬（腸道菌疾病檢驗(yàn)—腸道屬）

為革蘭陰性的桿菌或球桿菌，具周鞭毛，能運(yùn)動(dòng)，有些菌株有莢膜，無(wú)芽胞。兼性厭氧，無(wú)特殊營(yíng)養(yǎng)要求，最適生長(zhǎng)溫度為30℃。

在營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中均勻渾濁，有菌膜。對(duì)大多數(shù)對(duì)糖類產(chǎn)酸產(chǎn)氣，但44.5℃只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，IMViC(吲哚形成、甲基紅反應(yīng)、VP反應(yīng)和枸櫞酸鹽利用試驗(yàn))反應(yīng)大多為+ +--。

是腸桿菌科中最常見(jiàn)的環(huán)境菌群，但不是腸道的常居菌群。在水和日常食品中比埃希菌屬更常見(jiàn)，常自尿道感染和敗血癥時(shí)分離出，為機(jī)會(huì)病原菌（腸桿菌）。（腸桿菌比大腸埃希菌感染更常見(jiàn)）(四)沙雷菌屬（腸道菌疾病檢驗(yàn)—腸道屬）

與醫(yī)學(xué)有關(guān)的是①粘質(zhì)沙雷菌和②液化沙雷菌，革蘭陰性菌，具周鞭毛、能運(yùn)動(dòng)，一般無(wú)莢膜，不產(chǎn)芽胞。

兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，菌落不透明，常呈白色、粉紅色或紅色。

液體培養(yǎng)物形成菌膜。觸酶強(qiáng)陽(yáng)性，氧化酶陰性，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣，VP陽(yáng)性，DNA酶陽(yáng)性，少數(shù)菌株可產(chǎn)生非水溶性紅色色素，臨床分離的粘質(zhì)沙雷菌35℃大多不產(chǎn)色，轉(zhuǎn)種22℃培養(yǎng)數(shù)天后可恢復(fù)產(chǎn)色。為環(huán)境常居菌群，常導(dǎo)致醫(yī)院內(nèi)感染，為機(jī)會(huì)病原菌。(五)哈夫尼菌屬（腸道菌疾病檢驗(yàn)—腸道屬）

只有1個(gè)種，即蜂房哈夫尼菌。革蘭陰性桿菌，具周鞭毛，無(wú)莢膜，不產(chǎn)芽胞。兼性厭氧菌，菌落光滑、濕潤(rùn)、半透明，呈灰色帶亮的表面和完整的邊緣，最適生長(zhǎng)溫度為25℃～30℃，本菌的動(dòng)力和許多生化反應(yīng)在35℃時(shí)為陰性。觸酶陽(yáng)性，氧化酶陰性，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

為周圍環(huán)境常居菌，常導(dǎo)致醫(yī)院內(nèi)感染，為機(jī)會(huì)性病原菌。(六)普城菌屬（腸道菌疾病檢驗(yàn)—腸道屬）

革蘭陰性菌，兩端鈍圓，有多形性，有周鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑，無(wú)芽胞，無(wú)莢膜。

兼性厭氧菌，在25℃時(shí)動(dòng)力比35℃時(shí)好。菌落小而透明，在含①膽鹽培養(yǎng)基上較扁平和透明，在②SS瓊脂上產(chǎn)硫化氫，中心黑色（普城菌培養(yǎng)基的生長(zhǎng)特點(diǎn)SS）。

液體培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基均勻渾濁生長(zhǎng)，表面有菌膜，管底有沉淀。尿素和苯丙氨酸酶陽(yáng)性，乳糖陰性，枸櫞酸鹽和阿東醇陽(yáng)性，而鳥(niǎo)氨酸陰性。

為常見(jiàn)的環(huán)境和腸道寄居的正常菌群，也是醫(yī)院內(nèi)感染常見(jiàn)的機(jī)會(huì)菌，常分離自腹瀉和尿道感染。(七)摩根菌屬（腸道菌疾病檢驗(yàn)—腸道屬）

革蘭陰性菌，在固體和液體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特性與普城菌屬的一致。

某些株30℃以上不形成鞭毛和不能運(yùn)動(dòng)。尿素和苯丙氨酸酶陽(yáng)性，乳糖陰性，枸櫞酸鹽和阿東醇陰性，而鳥(niǎo)氨酸陽(yáng)性。

為常見(jiàn)的環(huán)境和腸道寄居的正常菌群，也是醫(yī)院內(nèi)感染常見(jiàn)的機(jī)會(huì)菌，常分離自腹瀉和尿道感染。(一概述人體感染某些寄生蟲(chóng)后，會(huì)引起急性腹瀉和慢性腹瀉，多為慢性腹瀉，或在急性發(fā)作后經(jīng)常再發(fā)如艾滋病相關(guān)性腹瀉中，以原蟲(chóng)尤其是最常見(jiàn)的隱孢子蟲(chóng)引起的感染性腹瀉，往往病程遷延，治療困難，已成為艾滋病死亡原因之一（寄生蟲(chóng)性腹瀉）。

去某些地區(qū)旅游會(huì)導(dǎo)致較高的藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)感染性腹瀉?，F(xiàn)已知能引起寄生蟲(chóng)性腹瀉的寄生蟲(chóng)有50多種。

寄生蟲(chóng)性腹瀉的發(fā)病機(jī)制主要為①滲出型、②滲透型、③分泌型、④脂肪瀉及腸外致病等。寄生蟲(chóng)性腹瀉與其他腸道病原體引起的腹瀉往往難以鑒別，但有些流行病學(xué)和臨床體征方面還是有差別的，主要表現(xiàn)在（寄生蟲(chóng)性腹瀉）：潛伏期長(zhǎng)，起病緩慢；呈地方性分布特征；發(fā)熱少見(jiàn)；在艾滋病相關(guān)腹瀉中常見(jiàn)；蠕蟲(chóng)性腹瀉患者外周血嗜酸性粒細(xì)胞增多；確診須依據(jù)病原學(xué)檢查；針對(duì)病原治療有效。(二)阿米巴痢疾（寄生蟲(chóng)性腹瀉—腸道菌疾病檢驗(yàn)）

其病原體為溶組織內(nèi)阿米巴，感染者中有90％為無(wú)癥狀的攜帶者，約10％的感染者由于阿米巴滋養(yǎng)體侵襲腸壁組織引起腹痛、腹瀉、粘液血便等癥狀。本病易復(fù)發(fā)、遷延成慢性。如病原體由腸道借血流或直接蔓延而侵入腸外組織，則產(chǎn)生相應(yīng)臟器的阿米巴病等腸外并發(fā)癥。

最常見(jiàn)為①阿米巴肝膿腫，其次還有②阿米巴肺膿腫、③腦膿腫及其他部位的膿腫。溶組織內(nèi)阿米巴有①滋養(yǎng)體和②包囊二期。滋養(yǎng)體又分為大小兩型

①寄生于結(jié)腸腸腔或腸壁內(nèi)，以二分裂法繁殖。主要傳染源為無(wú)癥狀帶包囊者、慢性患者和恢復(fù)期患者其糞便中不斷排出包囊。

②急性期患者主要排出包囊，故不成為主要傳染源。該病的傳播主要通過(guò)包囊污染飲水、食物等而感染。污染的手、蒼蠅、蟑螂等可攜帶包囊而傳播。糞便中檢出阿米巴滋養(yǎng)體或包囊是確診的重要依據(jù)。(三)藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)（寄生蟲(chóng)性腹瀉—腸道菌疾病檢驗(yàn)）

藍(lán)氏賈第鞭毛蟲(chóng)屬于寄生于腸道的一種鞭毛蟲(chóng)，營(yíng)二分裂繁殖。其生活史分①滋養(yǎng)體和②包囊兩個(gè)時(shí)期，與之相應(yīng)，其形態(tài)也有這兩種。