第一篇：微生物ppt總結(jié)

第一章 概論微生物藥物

微生物藥物的定義（microbial medicines)是指微生物在其生命活動(dòng)過程中產(chǎn)生的，在低微濃度下，能選擇性地影響他種生物機(jī)能的一類特異的天然有機(jī)化合物。

現(xiàn)代生物技術(shù)：以基因工程為主導(dǎo)，發(fā)酵工程為中心，加上酶工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)工程等的一個(gè)綜合體系。主要包括：重組DNA 技術(shù)、原生質(zhì)體技術(shù)、突變生物合成、組合生物合成、單克隆抗體、組織培養(yǎng)技術(shù)。

具體：開發(fā)新產(chǎn)品、改造現(xiàn)有生產(chǎn)菌種、代謝途徑工程、生物轉(zhuǎn)化、診斷藥物的研制及治療藥物的研制、基因治療、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和轉(zhuǎn)基因植物等。

1.應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)提高微生物藥物的生產(chǎn)能力。

重組DNA 技術(shù)、原生質(zhì)體技術(shù)、突變生物合成、組合生物合成 2.采用現(xiàn)代生物技術(shù)設(shè)計(jì)新抗生素

（1）基因克隆產(chǎn)生雜合抗生素（2）沉默基因的激活（3）基因重組獲得新抗生素 3.生物技術(shù)產(chǎn)品（1）酶工程產(chǎn)品（2）發(fā)酵工程產(chǎn)品（3）微生物合成藥物

微生物藥物篩選研究進(jìn)展

微生物藥物篩選的一般特點(diǎn)： ①植物藥篩選可以中草藥臨床應(yīng)用作參考．合成藥物篩選可以先導(dǎo)化合物的活性及定向設(shè)計(jì)為依據(jù)，而微生物藥物的篩選機(jī)遇性較大。②微生物藥物初篩樣品為發(fā)酵液或粗提品，成分復(fù)雜，活性組分含量低，波動(dòng)大，因而對(duì)篩選模型與方法的要求更高。③微生物藥物篩選是“產(chǎn)生菌”與“代謝產(chǎn)物”結(jié)合的篩選，要提高篩選質(zhì)量，必須兼顧產(chǎn)生菌的發(fā)現(xiàn)與保存、代謝產(chǎn)物的穩(wěn)定性與活性產(chǎn)物的分離與鑒別。④微生物藥物篩選流程長(zhǎng)，從分離菌株到臨床前藥理形成一條龍的篩選，需要多學(xué)科的協(xié)調(diào)配合。

二、篩選重點(diǎn)

1、抗生素①繼續(xù)致力于篩選對(duì)耐藥細(xì)菌如結(jié)核桿菌等危害大的病原微生物有效的、具有新抗菌譜、新作用靶位的新抗生素②過去的抗生素都是直接作用于病原微生物，近年來人們致力于篩選能提高抗生素性能、增強(qiáng)宿主防御機(jī)能和衰減微生物病原性的物質(zhì)。③通過對(duì)微生物耐藥機(jī)制的研究，建立針對(duì)臨床耐藥茵和條件致病菌建立篩選模型，并通過高通量篩選的方法篩選出有效藥物。

兩大難題：第一，細(xì)菌耐藥性的逐年增強(qiáng)，致使一些抗菌素療效降低，甚至無效。備受人們關(guān)注的焦點(diǎn)之一是細(xì)菌同時(shí)對(duì)多種結(jié)構(gòu)完全各異的抗生素產(chǎn)生多重耐藥性。

如：

1、耐甲氧西林的金葡球菌(MRSA)，80年代初成為臨床主要致病菌。MRSA不僅對(duì)所有的β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥，而且對(duì)大多數(shù)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素、四環(huán)素類抗生素、林可霉素耐藥，安全有效的藥物較缺乏。②耐萬古霉素的腸球菌(VRE)，在歐美國(guó)家檢出率很高。對(duì)多重耐藥的VRE目前尚無有效的治療方法；

③耐青霉素肺炎球菌(PRSP)，進(jìn)人九十年代后，PRSP感染率在一些發(fā)達(dá)國(guó)家高達(dá)20％~60％。而且，對(duì)頭孢菌素的耐藥性正在迅速增加，PRSP的高度耐藥株常常對(duì)非β-內(nèi)酰胺抗生素也產(chǎn)生耐藥性。一些條件致病菌(如綠膿桿菌)的固有耐藥性和獲得性多重耐藥性也是臨床治療的難題。

第二，近二十多年來又發(fā)現(xiàn)了30余種新病原體，而且，16種已被控制的傳染性疾病如結(jié)核、霍亂等，出現(xiàn)了程度不同的再流行。因此，臨床上迫切需要盡快提供更有效的抗菌新藥。

三、篩選模型

1、抗病毒藥物

組織培養(yǎng)篩選模型：根據(jù)靶病毒的特性，選擇合適的細(xì)胞。

病毒酶的無細(xì)胞系統(tǒng)篩選模型：以病毒酶為目的靶，建立無細(xì)胞反應(yīng)系統(tǒng)，直接篩選病毒酶抑制劑。

2、抗腫瘤藥物：血管生成抑制劑、細(xì)胞周期抑制劑等

四、篩選樣品

1、直接利用微生物發(fā)酵液

早期來自土壤中鏈霉菌，隨著新抗生素篩選工作的大量開展，從鏈霉菌屬放線菌中，利用經(jīng)典的篩選方法所能篩選到的新活性化合物越來越少。可從稀有放線菌中尋找：所謂稀有放線菌是指除鏈霉菌以外的其它屬的放線菌。近幾十年來隨著對(duì)生理活性物質(zhì)的篩選，人們已經(jīng)更多地從鏈霉菌屬放線菌擴(kuò)大到稀有放線菌(鏈霉菌以外的放線菌)、真菌、細(xì)菌、極端環(huán)境下生長(zhǎng)的微生物及海洋微生物。大部分的微生物還屬于難培養(yǎng)微生物。因此，開展難培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)對(duì)于發(fā)掘微生物資源至關(guān)重要。

2、利用組合生物合成：將微生物酶催化體系進(jìn)行排列組合以產(chǎn)生新的化學(xué)庫(kù)，是組合化學(xué)的有益補(bǔ)充。當(dāng)前應(yīng)用最多的是聚酮類化合物的組合生物合成。聚酮類抗生素涵蓋了大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)類、蒽環(huán)類和聚醚類抗生素，其生物活性包括抗感染，抗腫瘤和抗寄生蟲等。聚酮類化合物的組合生物合成可以通過鏈延長(zhǎng)，酮基還原等五種生物合成單元進(jìn)行不同組合，獲得多樣化的新化合物。

3、利用微生物代謝物數(shù)據(jù)庫(kù)虛擬篩選

具有生物活性的微生物及海洋生物次生代謝產(chǎn)物已報(bào)道有20000多種。由于是在世界范圍內(nèi)花費(fèi)了半個(gè)世紀(jì)的時(shí)間才得到的，而且往往每個(gè)化合物得量不多，所以難以建成大規(guī)模的樣品庫(kù)。但隨著計(jì)算機(jī)化學(xué)、化學(xué)信息學(xué)與生物信息學(xué)的發(fā)展，計(jì)算機(jī)模擬篩選成為可能。因此，有必要建立微生物及海洋生物次生代謝產(chǎn)物數(shù)據(jù)庫(kù)與藥用信息庫(kù)，開展微生物及海洋生物次生代謝產(chǎn)物的計(jì)算機(jī)模擬篩選。

抗菌藥研究的新進(jìn)展

一、頭孢菌素

頭孢菌素已由第一代發(fā)展到第三代,抗菌譜陸續(xù)擴(kuò)展,對(duì)β-內(nèi)酰胺酶的穩(wěn)定性明顯增強(qiáng)。頭孢匹羅、頭孢吡肟、頭孢唑蘭與頭孢瑟利4種為第四代頭孢菌素, 對(duì)染色體介導(dǎo)的和部分質(zhì)粒介導(dǎo)的β-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定,因而對(duì)革蘭氏陽性菌、陰性菌、厭氧菌顯示廣譜抗菌活性。與以往的第三代品種相比,增強(qiáng)了抗革蘭氏陽性菌活性,特別對(duì)鏈球菌、肺炎鏈球菌等有很強(qiáng)的活性,頭孢匹羅和頭孢唑蘭對(duì)一般頭孢菌素不敏感的糞鏈球菌亦有較強(qiáng)作用,頭孢瑟利還有較強(qiáng)的抗MRSA活性。頭孢替安酯性能屬第二代,在體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)轭^孢替安而發(fā)揮作用。頭孢丙烯屬第一代,結(jié)構(gòu)與頭孢羥氨芐相似,其3位不連甲基而代之以丙烯基,改進(jìn)了抗革蘭氏陽性菌活性,口服吸收優(yōu)于頭孢克洛,且不受進(jìn)食影響。氯碳頭孢是用碳取代頭孢克洛主核中的硫原子,為第一個(gè)臨床應(yīng)用的碳頭孢烯,性能屬第一代,抗菌譜與抗菌活性與頭孢克洛基本相同,但抗嗜血桿菌與消化鏈球菌屬的活性優(yōu)于頭孢克洛,血藥濃度與尿中排泄率亦高于頭孢克洛。

主要研究動(dòng)向：

1、提高抗革蘭氏陽性菌、銅綠假單胞菌與厭氧菌活性,尋找新一代頭孢菌素: 1）、對(duì)革蘭氏陽性與陰性菌都有良好活性的新頭孢菌素有:cefolidin(E-1040)抗銅綠假單胞菌活性比頭孢他啶強(qiáng)4倍,對(duì)其他革蘭氏陽性與陰性菌活性與頭孢他啶相似。還有若干在3位上帶有季銨鹽部分結(jié)構(gòu)的頭孢菌素如ceflurenam(E-1077), CP-6679, DQ-2556, FK-041, FK-518, Ro25-6833,YM-0221,YM-40220等;2）、抗革蘭氏陽性菌：包括對(duì)耐甲氧西林金葡球菌與腸球菌的活性有所增強(qiáng)的有MC-2306、MC-2331、RWJ-54428(MC-02479)、OPC-20000、TOC-39等;3）、抗銅綠假單胞菌活性有所增強(qiáng)的有BRL-41897A、GR-69153與AM-1732、MT-0703-S等10余種在側(cè)鏈上帶有兒茶酚和羥基吡啶酮結(jié)構(gòu)的化合物可經(jīng)由鐵傳導(dǎo)體系介導(dǎo),通過銅綠假單胞菌外膜,對(duì)鮑林蛋白變異的耐亞胺培南銅綠假單胞菌也有作用。

2、大力發(fā)展口服頭孢菌素:E-1101、LB-10827、S-1090和前藥型的HR-916、KY-020、SC-004、SPD-135、Ro41-3399等不僅口服吸收好,半衰期也有延長(zhǎng)。

3、探索具有雙重作用的頭孢菌素：連接頭孢菌素與作用機(jī)制不同的喹諾酮類抗菌藥，以期擴(kuò)展抗菌譜，增強(qiáng)抗菌活性和改善藥代動(dòng)力學(xué)性能，報(bào)告的化臺(tái)物有10余種。

二、碳青霉烯類抗生素：抗菌譜最廣的一類β-內(nèi)酰胺,抗菌活性強(qiáng),對(duì)革蘭氏陰性菌的作用點(diǎn)為PBP2與3,對(duì)革蘭氏陽性菌為PBP1與2,對(duì)銅綠假單胞菌外膜的透過性大,最低抑菌濃度(MIC)與最低殺菌濃度(MBC)非常接近,對(duì)革蘭氏陰性菌有一定抗生素后效應(yīng)(PAE),與第三代頭孢菌素?zé)o交叉耐藥性,對(duì)多數(shù)β-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定。

現(xiàn)存問題主要有:(1)有的品種對(duì)腎脫氫肽酶I(DHP-1)不穩(wěn)定,如亞胺培南需與酶抑制劑合用;(2)有的品種有中樞神經(jīng)毒性(3)排泄速度快,半衰期短,都在1h以內(nèi),重癥需1日給藥3或4次,不方便;(4)可被碳青霉烯酶(屬B型β內(nèi)酰胺酶)分解,銅綠假單胞菌、沙雷氏菌、脆弱擬桿菌等產(chǎn)生的金屬內(nèi)酰胺酶亦可形成耐藥性。

研究方向:(1)增強(qiáng)抗銅綠假單胞菌活性:(2)增強(qiáng)抗MRSA活性:(3)改善體內(nèi)動(dòng)態(tài),延長(zhǎng)半衰期:(4)發(fā)展口服品種:(5)探索具有雙重作用的碳青霍烯：如Ro—25—0993等。

三、青霉烯類抗生素：青霉烯與碳青霉烯相似,抗菌譜廣、抗菌活性強(qiáng)。對(duì)β-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定,對(duì)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)生菌、檸檬酸桿菌、腸球菌與厭氧菌等也有良好作用,但可被嗜麥芽黃單胞菌的金屬頭孢菌素酶L1分解。青霉烯對(duì)β-內(nèi)酰胺酶有抑制作用。化學(xué)性質(zhì)不如碳青霉烯穩(wěn)定,且在體內(nèi)易代謝產(chǎn)生低分子硫化物,有惡臭。當(dāng)前研究主要?jiǎng)酉蚴?1)繼續(xù)探索穩(wěn)定的化合物(2)探索注射用青霉烯(3)探索具有雙重作用的青霉烯

四、β-內(nèi)酰胺酶抑制劑與其制劑： 克拉維酸、舒巴坦、他唑巴坦

五、β-內(nèi)酰胺增強(qiáng)劑

六、具有其他藥理活性的β-內(nèi)酰胺

近年發(fā)現(xiàn):若干氧青霉烷類化合物如抗生素Ｇ-0069、芐基棒絲氨酸等具有強(qiáng)力抗癌作用;單環(huán)內(nèi)酰胺ＹＭ-14673等具有促甲狀腺素釋放激素作用。故亦可望在β 內(nèi)酰胺化合物中,探索出抗菌以外的新用途。

七、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素：阿齊霉素、羅紅霉素；克拉霉素、地紅霉素

抗菌活性均與紅霉素基本相同，但對(duì)酸穩(wěn)定，改善了藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，增強(qiáng)了療效。研究動(dòng)向是改善耐藥性。值得注意的品種：

1、酮內(nèi)酯(Ketolides)：

酮內(nèi)酯類3位為酮基的新十四元大環(huán)內(nèi)酯,對(duì)過去的大環(huán)內(nèi)酯耐藥菌有較好的作用,且擴(kuò)大了抗菌譜,如ＨＭＲ3004、ＨＭＲ3647和ＡＢＴ-773等,這類化合物尤其對(duì)呼吸道致病菌有效。其抗菌譜包括革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、非典型菌(軍團(tuán)菌、支原體、衣原體)等,其中ＡＢＴ-773對(duì)外排型的和質(zhì)粒介導(dǎo)型的大環(huán)內(nèi)酯耐藥菌亦有高度抗菌活性

2、酰內(nèi)酯（acylides）：3位脫去糖后羥基被?；拇蟓h(huán)內(nèi)酯,ＴＥＡ-0769抗金葡菌活性比克拉霉素強(qiáng)2倍,抗糞球菌比克拉霉素強(qiáng)16倍,體內(nèi)動(dòng)態(tài)也優(yōu)于克拉霉素。ＦＭＡ-199與ＦＭＡ-481對(duì)紅霉素耐藥的肺炎鏈球菌具有優(yōu)異的抗菌活性,與ＨＭＲ-3647相似。

3、氮內(nèi)酯(azilides)Ｌ-701103與阿齊霉素結(jié)構(gòu)相似,對(duì)酸比阿齊霉素穩(wěn)定,抗克雷伯氏肺炎桿菌菌作用亦有增強(qiáng);

4、氨基甲酸酯類： 14與15元大環(huán)內(nèi)酯4′氨基甲酸酯對(duì)呼吸道革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌有較強(qiáng)的活性,包括大環(huán)內(nèi)酯耐藥性肺炎球菌。ＣＰ-544372對(duì)各種革蘭氏陽性耐藥菌體外活性與ＨＭＲ-3647相同,動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果優(yōu)于ＨＭＲ-3647,血藥濃度高,半衰期長(zhǎng)(6.5ｈ),一天給藥1次,可維持與酮內(nèi)酯相同的血藥濃度。

5、脫水內(nèi)酯類：在Ｃ2-Ｃ3間引入雙鍵的Ａ-179461活性低于RＵ004,但Ａ-185685和Ａ-197800活性高于ＲＵ004,且對(duì)ＭＬＳ-Ｃ型耐藥菌有效。八、四環(huán)素類抗生素：四環(huán)素類抗生素應(yīng)用廣泛,存在的主要問題是耐藥性?？朔退幮缘难芯块L(zhǎng)期未見進(jìn)展，進(jìn)入90年代之后,出現(xiàn)2個(gè)值得注意的新苗頭:

1、放線菌Dactylosporangium 產(chǎn)生的大器環(huán)素(dactycyclin)在6 位上連有糖,抗菌譜、抗菌活性與四環(huán)素相似,但對(duì)大部分四環(huán)素耐藥菌有效。

2、甘氨四環(huán)素(glycylcyclin)是向四環(huán)素類的9 位導(dǎo)人二甲基甘氨酰基氨基的一系列化合物，如二甲基甘氨酰氨基去甲去氧四環(huán)素(ＤＭＧ-ＤＭＤＯＣ)與二甲基甘氨酰氨基米諾環(huán)素(ＤＭＧ-ＭＩＮＯ)可以完全解除使四環(huán)素耐藥的3種基因的作用,與四環(huán)素?zé)o交叉耐藥性,對(duì)耐甲氧西林金葡菌(ＭＲＳＡ)亦有效。

九、其他抗生素

1、糖肽類抗生素

2、鏈陽菌素類抗生素

3、惡唑啉酮類（oxazolidinanes）抗菌藥研究

4、新氨基糖苷抗生素

抗癌微生物藥物的研究與開發(fā)

惡性腫瘤是人體組織和細(xì)胞發(fā)生異常的增生，這些細(xì)胞的盲目迅速生長(zhǎng)，損耗人體大量營(yíng)養(yǎng)，同時(shí)還破壞正常組織結(jié)構(gòu)，使器官功能失調(diào)，最后導(dǎo)致宿主死亡。

惡性腫瘤的致病因素比較復(fù)雜，除機(jī)體本身免疫、內(nèi)分泌、神經(jīng)功能紊亂和外界化學(xué)、物理的致病因素外，已闡明細(xì)胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)DNA發(fā)生了結(jié)構(gòu)和功能上的變化，就可形成惡性腫瘤。

從豐富的微生物代謝產(chǎn)物中尋找具有抗腫瘤作用的生物活性物質(zhì)的工作已有多年的歷史，為了尋找高效低毒的抗癌微生物藥物，很多微生物如鏈霉菌、真菌、細(xì)菌及海洋微生物等作為對(duì)象，進(jìn)行了大量篩選工作，所獲臨床有效的微生物藥物除個(gè)別外，幾乎都是從鏈霉菌產(chǎn)生的。這類藥物的獨(dú)特之處在于它們具有極其多樣性的化學(xué)結(jié)構(gòu)．對(duì)這類藥物的抗腫瘤活性的評(píng)價(jià)，將有助于進(jìn)一步設(shè)計(jì)出更好的抗癌藥物。

放線菌素類(actinomycins，ActD)是一類含有環(huán)肽的抗生素，結(jié)構(gòu)中含有兩條對(duì)稱的五肽內(nèi)酯環(huán),連接于一個(gè)吩惡嗪酮發(fā)色團(tuán)。它也是最早用于臨床的抗腫瘤抗生素。臨床上應(yīng)用的僅為放線菌素C和D。

博來霉素（Bleomycin,BLM,USP)博來霉素是由日本微生物化學(xué)研究所的梅澤濱夫首先從一株輪支鏈霉菌（Streptomyces vertillus）中分離出來的糖肽類抗生素。療效顯著，毒性，尤其是對(duì)白細(xì)胞的毒性較低。爭(zhēng)光霉素：輪支鏈霉菌平陽變種產(chǎn)生，它的2個(gè)組分與BLM A2 B2 完全一致，但是國(guó)內(nèi)的主要組分是BLM A5，所以被命名為平陽霉素。

培羅霉素（pepleomycin,PEP）：是在BLM基礎(chǔ)上發(fā)展起來的第二代BLM 產(chǎn)品，是在BLM 的發(fā)酵過程中添加苯乙丙雙胺前體定向合成的。

泰萊霉素（talisomycin）被稱為第三代博萊霉素，其療效比博萊霉素好，而毒副作用較小。

新制癌菌素（Neocarzinostatin)：含有肽或非肽發(fā)色團(tuán)，由S.carzinostaticus F41產(chǎn)生的一個(gè)抗腫瘤蛋白質(zhì)，由109個(gè)氨基酸組成（分子量為10700）。對(duì)Hela細(xì)胞、Flow2000、NS-3細(xì)胞等有抗腫瘤活性?？勺饔糜诩?xì)胞膜引起DNA合成和細(xì)胞分裂障礙。

柔紅霉素（Daunorubicin)、阿霉素（Adriamycin, Doxorubicin)、洋紅霉素、正定霉素（zhengdingmycin)阿克拉霉素A(Aclarubicin, AclacinomycinA,阿柔比星）、諾加霉素（Nogalamycin, Ruticulomycin)絲裂霉素（Mitomycin C)：一類強(qiáng)效抗生素。由于絲裂霉素C對(duì)實(shí)體瘤具有廣譜的抗腫瘤活性，MC是乳房、肺、前列腺癌癥聯(lián)合化療的一種重要藥物，也是少數(shù)幾種有效的抗結(jié)腸癌藥物之一，并且是治療表皮膀胱癌所選擇的藥物之一和單一治療非小細(xì)胞型肺癌的最具活性的藥物。

鏈黑菌素（又名鏈黑霉素）Streptonigrin Rufocromomycin：鏈黑菌素（SN）是從Strptomyces flocculus培養(yǎng)物中分離到的一種氨基苯醌類抗腫瘤抗生素。分子結(jié)構(gòu)中A、B和C環(huán)幾乎共平面，而D環(huán)與它們完全垂直。鏈黑菌素表現(xiàn)出多種對(duì)DNA的不可逆性的金屬絡(luò)合位和絡(luò)合鍵，通過特定的金屬離子如鋅、銅、鐵、錳、鎘、金形成鏈黑菌素-金屬-DNA絡(luò)合物。金屬離子的出現(xiàn)阻止了SN-DNA的締合。色霉素類抗生素：色霉素（chromomycin）也叫阿布拉霉素、光神霉素（mithramycin）也叫普卡霉素，與橄欖霉素（olivomycin）屬于金霉酸類抗腫瘤抗生素，其分子中都具有一個(gè)甙元發(fā)色基團(tuán)，和五個(gè)附著在甙元上的糖環(huán)，A-B兩個(gè)糖環(huán)與C-D-E三個(gè)糖環(huán)相對(duì)附著，在Mg 2＋的介導(dǎo)下形成一個(gè)二聚體，然后嵌入到一個(gè)富含G/C序列的被拓寬的DNA小溝中。

氨茴霉素類（Anthramycins)抗生素、苯駢蒽醌類三類： 第一類：A環(huán)飽和的；第二類：A環(huán)不飽和的；第三類：B環(huán)不飽和的

2.作用機(jī)理： 抗癌微生物藥物可能有各種不同的作用靶位，如有的作用于細(xì)胞的生物合成酶，有的作用于細(xì)菌質(zhì)膜上的某種成分，有的作用于DNA或RNA的信息轉(zhuǎn)移系統(tǒng)，還有的作用于蛋白質(zhì)合成過程中的某一環(huán)節(jié) 蒽環(huán)類抗生素的作用機(jī)理：蒽環(huán)類抗生素的生物學(xué)效應(yīng)復(fù)雜多樣，包括致DNA；斷裂；染色體交換率增高；染色體畸變；抑制DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄及蛋白質(zhì)合成；影響質(zhì)膜的結(jié)構(gòu)和功能等等．歸納起來，從細(xì)胞及分于水平來分析其機(jī)制，大致有3點(diǎn)：1.插入DNA：蒽環(huán)類對(duì)DNA的作用的基本方式是以其B和C環(huán)為主垂直插入雙鏈DNA長(zhǎng)軸的堿基對(duì)之間，A和D環(huán)伸出DNA雙鏈的兩側(cè)，氨基糖部分的氨基則與DNA的磷酸基成離子鍵結(jié)合，從而形成相對(duì)穩(wěn)定的蒽環(huán)類-DNA結(jié)合物，改變DNA的模板性質(zhì)，抑制依賴DNA和RNA聚合酶，插入引起部分雙鏈解鏈。此外，還損傷DNA，引起DNA單鏈雙鏈斷裂，使染色體變換增高及烷化DNA。2 自由基形成：具有未配對(duì)電子的化合物被稱為自由基。藥物代謝產(chǎn)生的自由基能和體內(nèi)重要的生物大分子如DNA，膜相結(jié)構(gòu)等發(fā)生強(qiáng)烈反應(yīng)，現(xiàn)已證明心臟線粒體自由基形成是ADM和 DR心臟毒性的主要原因，ADM和DNA在心臟細(xì)胞中被還原成半醌自由基，繼而與氧發(fā)生反應(yīng)生成超氧負(fù)離子，后者轉(zhuǎn)變?yōu)檫^氧化氫后再形成性質(zhì)極為活潑的羥基自由基。羥基自由基能與多種生物分于如脫氧核糖，線粒體等發(fā)生反應(yīng)，造成對(duì)細(xì)胞的損傷。

由于心臟組織中基本不存在具有解毒作用的酶類，因此，其毒性往往比其他組織要大。另外，蒽環(huán)的氧化還原循環(huán)抑制了谷光苷肽超氧酶的活性。對(duì)細(xì)胞膜的作用：蒽環(huán)類抗生素能與紅細(xì)胞膜結(jié)合；引起細(xì)胞膜形態(tài)學(xué)改變，最終導(dǎo)致膜被溶解。膜結(jié)合的ADM也能產(chǎn)生自由基，自由基誘導(dǎo)的脂過氧化物通過損傷細(xì)胞膜磷脂的未飽和脂肪酸而改變膜通透牲。脂過氧化物也改變多種膜結(jié)合蛋白的功能。新氨茴霉素的作用機(jī)理：具有識(shí)別或結(jié)合雙股螺旋DNA的某些特殊結(jié)構(gòu)的特性，它在與生物系統(tǒng)DNA的化學(xué)受體之間相互作用時(shí)，大致開始于新氨茴霉素的C-11位與生物系統(tǒng)DNA鳥嘌呤（或胞嘧啶）堿基的N-2位處發(fā)生反應(yīng)，然后形成共價(jià)鍵。環(huán)孢菌素的作用機(jī)理：環(huán)孢菌素主要作用于T細(xì)胞，對(duì)淋巴細(xì)胞的影響，說的更恰當(dāng)一點(diǎn)是發(fā)生在誘導(dǎo)期，它主要表現(xiàn)為抑制一系列淋巴激活素，諸如白細(xì)胞間質(zhì)2（IL-2），r-干擾素和OAF，在轉(zhuǎn)錄水平或在激活作用的初期，能有選擇地引導(dǎo)這些的轉(zhuǎn)錄作用，有人報(bào)道環(huán)孢菌素可干擾OKT3單克隆抗體的結(jié)合，提示環(huán)孢菌素是結(jié)合在抗原和有絲分裂原受體的附近。抑制DNA模板功能的一類微生物藥物的作用機(jī)制其它抗癌微生物藥物的作用機(jī)理

L-門冬酰胺酶通過分解L-門冬酰胺而抑制其增殖。OK-432具有活化巨噬細(xì)胞，增強(qiáng)T細(xì)胞活性，誘導(dǎo)干擾素的產(chǎn)生以及激發(fā)其它抗腫瘤免疫功能。

Bestatin降低細(xì)胞膜負(fù)電性，在有細(xì)胞增殖抑制劑存在時(shí)強(qiáng)化對(duì)細(xì)胞DNA合成的抑制。4.毒副作用：可采用聯(lián)合化療減少毒副作用： 5 研究動(dòng)向：1.發(fā)現(xiàn)了5種殺傷癌細(xì)胞作用非常強(qiáng)的烯二炔類抗生素，如：esperamicin、calichemicin、dynemicin、kedarmicin和C-1027。它們的作用機(jī)制是分子中的環(huán)狀烯二炔部分發(fā)生環(huán)芳香化，形成二自由基切斷DNA 鏈所致。2.不僅繼續(xù)注意尋找癌細(xì)胞殺傷劑，也篩選癌細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑、生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑以及抗致突變、抗促癌變、抗致癌等癌化學(xué)預(yù)防藥物。3.利用癌化學(xué)療法的新靶點(diǎn)，如DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶、微管蛋白、鈣調(diào)蛋白、蛋白激酶C等，建立篩選模型，探索作用于各靶點(diǎn)的抗生素。4.研究開發(fā)可用于定向治療的單克隆抗體-抗生素偶聯(lián)物等。

烯二炔類抗腫瘤抗生素的研究進(jìn)展

目前已發(fā)現(xiàn)并確定為烯二炔結(jié)構(gòu)的抗生素有C1027，Esperamicin（EPM），Calicheamicin（CLM），Dynemicin（DNM），Neocarzinostatin（NCS），Kedarcidin（KDC），F(xiàn)eractamicin（FTM）等及它們的衍生物。

烯二炔類抗生素的最大特點(diǎn)是其發(fā)色團(tuán)中存在雙烯雙炔的共軛大環(huán)。由于此特異結(jié)構(gòu)的存在，以一種全新的機(jī)制對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生作用。它一改傳統(tǒng)抗腫瘤藥物多以插入DNA分子序列的方式破壞腫瘤細(xì)胞，而是生成特有的苯環(huán)自由基直接氧化斷裂DNA分子鏈，從而顯現(xiàn)出強(qiáng)大的殺滅腫瘤細(xì)胞能力。通過對(duì)這一獨(dú)特構(gòu)效關(guān)系的研究，不僅有利于了解本類抗生素的性質(zhì)，還有利于開闊思路，得以廣泛利用物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息開展新藥的篩選研究。

結(jié)構(gòu)特點(diǎn)上是共同具有一個(gè)10元或12元的大環(huán)結(jié)構(gòu)母核。此結(jié)構(gòu)包含兩個(gè)烯鍵和兩個(gè)炔鍵并彼此共軛。這個(gè)大環(huán)結(jié)構(gòu)具有對(duì)稱性和不穩(wěn)定性，決定了本類抗生素對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇毒性。烯二炔類抗生素切斷DNA的作用涉及到這類抗生素與DNA雙螺旋小溝的結(jié)合，其活化形式必須先經(jīng)過Bergman重排反應(yīng)形成芳香雙自由基活性物質(zhì)。在DNA小溝中的雙自由基接近兩根鏈的糖-磷酸骨架。通過雙自由基，同時(shí)從相對(duì)鏈的糖上奪取氫原子從而導(dǎo)致雙鏈的斷裂。烯二炔類抗生素還有一個(gè)顯著的特點(diǎn)，即對(duì)白血病表現(xiàn)出特殊的抗性，是極有希望的白血病治療藥物。此外這類抗生素還具有一定的抗菌活性，對(duì)革蘭氏陰性菌的MIC較革蘭氏陰性菌高。

抗真菌藥物的作用機(jī)制及耐藥性

真菌耐藥性與細(xì)菌耐藥性的異同點(diǎn)：

主要不同點(diǎn)：一是真菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和生活史與細(xì)菌的具有較大的差別，如大多數(shù)真菌具有二倍體性質(zhì)和其生活周期較長(zhǎng)；二是藥物的作用靶位不同，如大多數(shù)抗細(xì)菌藥物的作用靶位是抑制細(xì)菌細(xì)胞壁重要組分肽聚糖的合成，而大多數(shù)抗真菌藥物的作用靶位是抑制真菌細(xì)胞膜重要組分麥角甾醇的合成或抑制其功能的發(fā)揮。

不同抗菌藥物的協(xié)同作用：?jiǎn)为?dú)使用抗細(xì)菌藥物RNA聚合酶抑制劑利福平時(shí)無抗真菌活性，但當(dāng)與兩性霉素B合并用藥時(shí)，對(duì)多種真菌具有活性。產(chǎn)生這一協(xié)同作用的原因是由于兩性霉素B對(duì)真菌細(xì)胞膜的作用而增加了細(xì)胞對(duì)利福霉素的吸收。合并使用兩性霉素B和核苷類抗真菌藥物5-氟胞嘧啶（5FC）于念珠菌感染的老鼠模型，同樣能夠產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。產(chǎn)生這一協(xié)同效應(yīng)的原因推測(cè)為由于兩性霉素B與細(xì)胞膜上麥角甾醇的交互作用導(dǎo)致細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的改變，從而促進(jìn)了5FC的吸收。細(xì)菌細(xì)胞壁抑制劑?-內(nèi)酰胺類抗生素和蛋白質(zhì)抑制劑氨基糖苷類抗生素的協(xié)同作用是相繼發(fā)揮的而不是同時(shí)發(fā)揮的。

耐藥機(jī)制的不同點(diǎn)：細(xì)菌通過改變抗菌藥物的分子結(jié)構(gòu)，以使藥物難以到達(dá)作用靶位并與之結(jié)合而發(fā)揮抗菌作用的耐藥性機(jī)制（這是細(xì)菌對(duì)?-內(nèi)酰胺類抗生素、氨基糖苷類抗生素和糖肽類抗生素等藥物產(chǎn)生耐藥性的主要作用機(jī)制），以及改變抗菌藥物作用靶位的作用機(jī)制等，對(duì)于真菌耐藥性來說，還沒有被確證。抗真菌藥物的作用靶位的改變，降低藥物與作用靶位的接觸是真菌產(chǎn)生耐藥性的主要機(jī)制。再則，從基因水平的研究來看，細(xì)菌產(chǎn)生高度耐藥的一個(gè)主要原因是由于帶有耐藥性基因的載體的相互傳遞所致，如質(zhì)粒、轉(zhuǎn)座子和噬菌體等； 而對(duì)真菌耐藥性的研究，目前只發(fā)現(xiàn)是由于廣泛與藥物接觸而產(chǎn)生的選擇壓力所致。

抗真菌藥物的作用機(jī)制與真菌耐藥性機(jī)制

抗真菌藥物的作用機(jī)制：不同抗真菌藥物的作用靶位，目前在臨床上廣泛使用的這類抗真菌藥物有三種結(jié)構(gòu)類型：唑類；多烯類；烯丙胺硫代氨基甲酸酯類（allylaminethiocarbamates）。這類藥物的作用靶位為真菌細(xì)胞膜的主要組成——麥角甾醇。

1、作用于真菌細(xì)胞膜的抗真菌抗生素和合成藥物

（一）、作用于真菌細(xì)胞膜中甾醇合成的抗真菌合成藥物 1）、唑類抗真菌藥物的作用機(jī)制：麥角甾醇作為構(gòu)成真菌細(xì)胞膜的重要成分，對(duì)于維持細(xì)胞膜的流動(dòng)性、生物調(diào)節(jié)以及立體結(jié)構(gòu)等起著重要的作用，而構(gòu)成細(xì)胞膜的甾醇應(yīng)該是C-14位去甲基的。唑類抗真菌藥物的主要作用靶位是血紅素蛋白，該蛋白共催化抑制依賴于細(xì)胞色素P450的羊毛甾醇（lanosterol）的14α-去甲基；而當(dāng)14α-去甲基酶的活性受到抑制，則不能合成麥角甾醇而只能累積14α-甲基化的甾醇前體，由這樣的甾醇構(gòu)成的真菌細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能都發(fā)生了變化。這類藥物的作用機(jī)制與作用對(duì)象有關(guān)。2）、真菌對(duì)唑類抗真菌藥物的耐藥性機(jī)制：1：靶酶過量產(chǎn)生；2：藥物作用靶位被改變；3：藥物被外排蛋白泵出；4：藥物在細(xì)胞壁水平/細(xì)胞膜水平被阻止；5：細(xì)胞由于藥物的作用而產(chǎn)生的補(bǔ)償途徑以使細(xì)胞保持活性；6：某些能夠?qū)⑩g化的藥物轉(zhuǎn)化為活性藥物的酶被抑制；7：細(xì)胞產(chǎn)生某些能夠降解藥物的酶并分泌至胞外。真菌對(duì)唑類抗菌藥物產(chǎn)生耐藥性的生物化學(xué)機(jī)制

2、烯丙胺類抗真菌藥物：烯丙胺類的特比萘芬和萘替芬的作用機(jī)制也是抑制麥角甾醇的生物合成。

特比萘芬在體內(nèi)外對(duì)皮膚真菌具有很強(qiáng)的抗菌活性，并對(duì)某些唑類抗菌藥物產(chǎn)生耐藥性的菌株也有效。

（二）、作用于真菌細(xì)胞膜中甾醇合成的多烯類抗真菌抗生素

1、多烯類抗真菌抗生素的作用機(jī)制：抗生素發(fā)揮作用時(shí)首先與膜結(jié)合,其結(jié)合程度與膜內(nèi)甾醇含量成正比。結(jié)合后生成的膜——抗生素復(fù)合物,使細(xì)胞質(zhì)膜結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,在膜脂質(zhì)雙層中形成由多烯大環(huán)內(nèi)酯抗生素與膽固醇結(jié)合的環(huán)狀化合物,構(gòu)成親水通道,致使細(xì)胞內(nèi)容物向胞外泄漏。所泄漏的物質(zhì)種類與抗生素的性質(zhì)、濃度及作用時(shí)間有關(guān),如鉀離子、無機(jī)磷、有機(jī)磷、氨基酸、磷酸酯直至核酸、蛋白等,從而產(chǎn)生殺菌作用。利用這一特性,結(jié)合使用一些原先不能通過真菌胞膜的藥物,使其發(fā)揮作用,菲律賓菌素與甾體結(jié)合后形成的復(fù)合物在膜內(nèi)發(fā)生重排,以至膜結(jié)構(gòu)破壞成為碎片,從而使真菌被殺死。這類抗生素的毒副作用是由于其對(duì)細(xì)胞質(zhì)膜脂質(zhì)雙層中的固醇類結(jié)合專一性不強(qiáng)而損傷正常人體細(xì)胞所引起的。

兩性霉素B與細(xì)胞膜上的膽甾醇以氫鍵的形式結(jié)合，從而破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生孔道 兩性霉素B(AMB)的應(yīng)用：制霉菌素(NYS)能結(jié)合麥角甾醇,降低細(xì)胞膜穩(wěn)定性,對(duì)多種真菌有活性,但由于其較窄的治療指數(shù)（therapeutic index），在胃腸道不易吸收,且其毒性嚴(yán)重,臨床應(yīng)用受到很大限制。

2、真菌對(duì)多烯類抗真菌抗生素產(chǎn)生耐藥性的作用機(jī)制：耐藥性的產(chǎn)生是由于麥角甾醇的生物合成途徑受阻，而耐藥性的高低與細(xì)胞膜中累積的麥角甾醇中間體的種類有關(guān)。細(xì)胞膜中的麥角甾醇結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，致使細(xì)胞膜的流動(dòng)性發(fā)生了變化以及減低了藥物對(duì)細(xì)胞膜的親和力。

（三）、作用于真菌細(xì)胞膜中鞘磷脂的抗真菌抗生素

鞘磷脂是真菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜必要的組成成分，借其信號(hào)傳導(dǎo)來控制細(xì)胞的分裂、增殖和凋亡。

（四）、作用于真菌細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)的其他抗真菌抗生素

芽孢菌霉素F、L（Bacillomycin F、L）和伊枯草菌素A(iturin A)等的作用機(jī)制為影響細(xì)胞膜表面張力，形成膜表面小孔，從而導(dǎo)致胞內(nèi)鉀離子和其他有用離子的泄露；丁香霉素E（Syringomycin E，SE）、丁香假單孢菌素A、B（syringostantin A、B）等的作用機(jī)制為增加鉀、氫和鈣等離子的轉(zhuǎn)膜流出，以及增加植物和酵母質(zhì)膜的膜電位。SE形成電位敏感的離子通道，改變蛋白磷酸化和H+-ATP酶活性。Syringomycins對(duì)酵母的結(jié)合位點(diǎn)為麥角甾醇。

很多細(xì)菌和真菌能夠產(chǎn)生許多具有抗真菌活性的肽類化合物。這些肽類抗真菌抗生素的主要作用機(jī)制是干擾真菌細(xì)胞的表面結(jié)構(gòu)。一些哺乳類的細(xì)胞中和昆蟲的細(xì)胞中存有被稱為抗菌肽的一類物質(zhì)，其具有很強(qiáng)的抗細(xì)菌和抗真菌活性。有些已經(jīng)能夠通過基因工程技術(shù)在微生物系統(tǒng)中制備。這些抗菌肽對(duì)真菌的主要作用機(jī)制是溶解細(xì)胞壁，從而達(dá)到抗菌作用。

二、作用于真菌細(xì)胞壁合成的抗真菌抗生素

真菌細(xì)胞壁中含有特殊的甘露聚糖、幾丁質(zhì)、α-和β-葡聚糖成分，這就為尋找具有毒性差異抗真菌藥物提供了基本思路和方法。

（一）作用于真菌細(xì)胞壁中葡聚糖合成的抗真菌抗生素 1）Echinocandin：主要有三種類型：B、C以及D，其中echinocandin B是最主要的類型，它是由構(gòu)巢曲霉（Aspergilus nidulans）和細(xì)皺曲霉(A.rugulosus)產(chǎn)生的。主要是對(duì)卡氏肺囊蟲和白假絲酵母具有較強(qiáng)的抗菌活性，但是由于其?；鶄?cè)鏈的存在，因此具有一定的溶血毒性，故而這一類抗生素還未被應(yīng)用于臨床。

Echinocandins類抗生素的作用機(jī)制：其主要作用機(jī)理是能夠非競(jìng)爭(zhēng)性的抑制真菌細(xì)胞壁中β-1,3-葡聚糖合成酶的活性，進(jìn)而引起真菌細(xì)胞壁的裂解以及細(xì)胞內(nèi)外滲透壓的改變從而將真菌細(xì)胞徹底殺死。真菌細(xì)胞膜上β-（1,3）-D-葡聚糖合成酶復(fù)合物

此類藥物能夠快速地不可逆地抑制真菌細(xì)胞壁中葡聚糖的合成，這明顯不同于傳統(tǒng)的抗真菌藥物的作用機(jī)制，因此這類藥物可以有效的用于殺滅對(duì)氮唑類和兩性霉素B產(chǎn)生抗性的真菌。沒有溶血毒性以及較少的藥物相互作用也使得這類藥物比傳統(tǒng)的抗真菌藥物具有更大的優(yōu)勢(shì)。到目前為止，這類藥物的主要缺點(diǎn)是：由于分子量太大因而不能口服使用，只能通過靜脈注射使用；其抗菌譜沒有得到深入的研究，在臨床實(shí)驗(yàn)中這兩類藥物的首要作用菌為假絲酵母菌和曲霉菌，但是從其作用機(jī)制來看此類藥物應(yīng)該具有更廣泛的抗菌譜。

真菌對(duì)echinocandins類及pneumocandins類產(chǎn)生耐藥性的作用機(jī)制：FKS1基因發(fā)生突變的菌株，其對(duì)脂肽類抗菌藥物的耐受性非常高（比敏感菌高十倍以上）;FKS2基因發(fā)生突變的菌株，其不影響對(duì)藥物的敏感性;推測(cè)釀酒酵母對(duì)脂肽類抗真菌藥物的耐藥機(jī)制主要是FKS1基因的改變所致，這一基因編碼的蛋白是真菌細(xì)胞壁葡聚糖合成酶的主要成分，也是藥物作用的主要靶位。

（二）作用于真菌細(xì)胞壁中幾丁質(zhì)合成的抗真菌抗生素

多氧霉素D是真菌細(xì)胞壁幾丁質(zhì)合成酶最有效的抑制劑,它的化學(xué)結(jié)構(gòu)與合成幾丁質(zhì)的二磷酸尿嘧啶核苷-N-乙酰葡萄糖胺(UDP-NAG)相類似,是一個(gè)極強(qiáng)的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。

日光霉素是由唐德鏈霉菌（S.tendae）產(chǎn)生的、結(jié)構(gòu)類似于多氧霉素的核苷類抗生素。它通過二肽滲透酶進(jìn)入靶細(xì)胞，能抑制真菌幾丁質(zhì)的合成,是一個(gè)很有前途的殺蟲殺菌農(nóng)用抗生素,近期研究表明其有可能作為抗真菌藥用于臨床。

Nikkomycin Z(SP 920704)系基因工程菌Streptomycestendae TU901發(fā)酵代謝所得的10個(gè)產(chǎn)物之一?本品對(duì)Streptomyces Cerevisiae的Chs1和Chs3的活性較高，單獨(dú)使用抗菌譜較窄?現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，與唑類藥物如氟康唑/伊曲康唑聯(lián)用,則對(duì)多種真菌有活性?由于哺乳動(dòng)物細(xì)胞中不合成聚乙酰氨基葡糖，因此本品幾乎沒有毒性?現(xiàn)已進(jìn)入I期臨床?

（三）、以細(xì)胞壁中甘露聚糖為作用靶位的抗真菌抗生素

貝那霉素（benanomycins）和普那米星（pradimicins）的作用機(jī)制是，這類抗生素首先在鈣離子存在時(shí)，其游離的羧基與細(xì)胞表面甘露聚糖蛋白的糖部分形成復(fù)合物，接著對(duì)細(xì)胞壁產(chǎn)生作用，引起胞內(nèi)鉀離子的流失，最終使真菌細(xì)胞溶解。

三、抑制蛋白質(zhì)合成的抗真菌抗生素 在蛋白合成過程中，真菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞需要2種延長(zhǎng)因子，即延長(zhǎng)因子1(EF-1)和延長(zhǎng)因子2(EF-2)參與多肽鏈的延伸。然而,真菌需要一種哺乳動(dòng)物中不存在的延長(zhǎng)因子3(EF-3)?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn),它廣泛存在于真菌細(xì)胞中，是一種相對(duì)分子質(zhì)量約(120～125)×103的蛋白。至今尚無EF-3抑制劑用于抗真菌的研究報(bào)道。Merck研究室發(fā)現(xiàn)，盡管哺乳動(dòng)物中含有EF-2，但它可以作為抗真菌藥的靶標(biāo)。

GR135402(葛蘭素,英國(guó))由Graphi mumputredinisF13302菌株液中分離而得?它能抑制白色念珠菌的蛋白合成,但不能作用于兔網(wǎng)狀細(xì)胞?它是第1個(gè)報(bào)道具有抗真菌活性，但不抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞的抗生素。

BE 31405(萬有,日本)由Penicillium minioluteum F31405菌株的培養(yǎng)液中分離而得的又一種不抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞的抗真菌抗生素。它對(duì)白色念珠菌、新型隱性球菌均具有抑制活性，對(duì)哺乳動(dòng)物不會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒。其作用機(jī)制研究表明，它能抑制白色念珠菌的蛋白合成。

此外,有從紫紅球菌變種Rhodococcus Mer N1033中獲得五組分的環(huán)狀四肽類抗生素，分別稱為紫紅肽(Rhodopeptins)Cl，C2，C3，C4和C5?其分子結(jié)構(gòu)中含親脂性β 氨基酸的長(zhǎng)烷烴基，這在微生物代謝產(chǎn)物中從未發(fā)現(xiàn)過?它對(duì)白色念珠菌?假絲酵母和新型隱球酵母菌均有很強(qiáng)的抗菌活性?

四、抑制電子傳遞的抗真菌抗生素 五、五、作用于核酸合成的抗真菌藥物

5-氟胞嘧啶（flucytosine，5FC）在滲透酶的幫助下進(jìn)入真菌細(xì)胞，一旦進(jìn)入胞內(nèi)，則通過胞嘧啶脫氨酶轉(zhuǎn)化成為5-氟鳥嘧啶（5FU），隨后，通過UMP-焦磷酸酶轉(zhuǎn)化為5-氟鳥苷酸（FUMP），其進(jìn)一步被磷酸化后摻入到RNA，最終破壞蛋白質(zhì)的合成。5FU也能夠被轉(zhuǎn)化為5-氟脫氧鳥嘧啶單磷酸，其能夠抑制參與DNA合成和細(xì)胞核分裂的胸苷酸合成酶。因此，5FU的抗菌作用機(jī)制涉及到干擾嘧啶的代謝、RNA和DNA的合成以及蛋白質(zhì)的合成等。

耐藥性：真菌對(duì)5FC產(chǎn)生耐藥性的主要作用機(jī)制是由于降低了藥物的吸收（即失去了滲透酶的活性），或是失去了將該藥物轉(zhuǎn)化為FUMP的能力。有較多的研究表明：當(dāng)真菌由于缺少胞嘧啶脫氨酶或鳥苷磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶，使5FC不能轉(zhuǎn)化為FUMP時(shí)，則足以對(duì)該藥物產(chǎn)生耐藥性。

2、抗真菌抗生素灰黃霉素

作用機(jī)制：其作用機(jī)制可能是具有鳥嘌呤相似結(jié)構(gòu)的灰黃霉素以競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用干擾真菌細(xì)胞的DNA合成,從而抑制其生長(zhǎng)。它作用于敏感真菌后可致菌絲腫脹成球形,細(xì)胞壁喪失完整性,胞漿膜則近乎消失,僅遺留少量皺縮的殘余物和巨大的脂類貯存顆粒。它對(duì)生長(zhǎng)期的真菌菌絲作用更強(qiáng)。

抗真菌抗生素研究展望：盡管對(duì)于如何預(yù)防和控制真菌耐藥性發(fā)展的問題還沒有建立有效的方法，但可以參照預(yù)防和控制細(xì)菌耐藥性發(fā)展的策略，即1）謹(jǐn)慎地使用各種抗真菌藥物；2）使用合適的劑量進(jìn)行治療，避免長(zhǎng)期使用低劑量治療；3）盡可能結(jié)合多種已有的藥物進(jìn)行治療；4）對(duì)病因?qū)W比較清楚的疾病，要選擇某種合適的藥物治療；5）建立真菌耐藥性檢測(cè)系統(tǒng)，了解和掌握真菌耐藥性的發(fā)展趨勢(shì)和頻率。由于對(duì)真菌疾病的用藥規(guī)律以及感染真菌的快速診斷都還沒有確立，因此，從某種程度上還沒有有效的預(yù)防和控制的方法。

新藥篩選靶位包括：1）針對(duì)胞內(nèi)代謝的中間產(chǎn)物如核酸、氨基酸和多胺代謝；2）針對(duì)微管功能如影響微管聚集或干擾微管結(jié)構(gòu)完整性；3）針對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)如影響蛋白激酶和磷酸酶系統(tǒng)；4）針對(duì)真菌繁殖周期如影響細(xì)胞分裂等；5）針對(duì)真菌毒力如改變毒力基因調(diào)節(jié)等。

β-內(nèi)酰胺類及大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的市場(chǎng)分析

對(duì)于β-內(nèi)酰胺類抗生素的發(fā)展，就要發(fā)揮我國(guó)青霉素類、頭孢類、碳青霉烯類和酶抑制劑的優(yōu)勢(shì)，利用世界原料藥的生產(chǎn)中心已轉(zhuǎn)向亞洲、國(guó)家實(shí)施調(diào)整產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的產(chǎn)業(yè)政策等機(jī)會(huì)，實(shí)施“請(qǐng)進(jìn)來”與“走出去”的市場(chǎng)戰(zhàn)略，同時(shí)要加強(qiáng)行業(yè)自律，加大企業(yè)重組力度，實(shí)現(xiàn)規(guī)模經(jīng)營(yíng)、集約化經(jīng)營(yíng)，從而確保我國(guó)β-內(nèi)酰胺類抗生素的市場(chǎng)地位。企業(yè)在投資此類抗生素時(shí)，也要據(jù)此選擇產(chǎn)品等戰(zhàn)略。而對(duì)于我國(guó)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的發(fā)展，要解決幾個(gè)關(guān)鍵問題：①引進(jìn)國(guó)外優(yōu)良菌種，加強(qiáng)技術(shù)創(chuàng)新；②開發(fā)品種應(yīng)盡量避開國(guó)外專利產(chǎn)品，或采用到期專利、引進(jìn)專利或合資合作，開發(fā)國(guó)內(nèi)尚缺或尚無生產(chǎn)的新品種如泰利霉素、氟紅霉素、地紅霉素等；③研制開發(fā)更新?lián)Q代的大環(huán)內(nèi)酯抗生素產(chǎn)品，如泰利霉素，氟紅霉素的衍生物和復(fù)方制劑，紅霉素A環(huán)式11、12碳酸天門冬氨酸鹽類，大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的一些復(fù)合劑型，新劑型產(chǎn)品等。

氨基糖苷類抗生素的6大優(yōu)點(diǎn)即：1對(duì)革蘭氏陰性桿菌的抗菌活性最強(qiáng)。2其抑菌作用不易受細(xì)菌接種量的影響。3殺菌作用快速，完全（起效較快）。4療效與使用劑量成比例。5除個(gè)別品種外，大部分氨基糖苷類抗生素價(jià)格低廉，病人容易承受。6可與包括頭孢菌素在內(nèi)的其他抗生素制劑配伍使用，并能強(qiáng)化用藥效果。

當(dāng)然，與其他抗生素一樣，氨基糖苷類抗生素也存在某些缺點(diǎn)，其中最突出的是其耳腎毒性（如雙氫鏈霉素即具有強(qiáng)烈的耳毒性），對(duì)于腎功能不全者來說發(fā)，反復(fù)使用氨基糖苷類抗生素尤其危險(xiǎn)。上述缺點(diǎn)嚴(yán)重限制了氨基糖苷類抗生素的臨床用途及其產(chǎn)銷量。這也是其走向衰落的一主要原因。

第二篇：微生物總結(jié)

微生物：一類分布廣泛、體積微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼直接看不到，微小生物的總稱。

細(xì)菌L型：細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制，這種細(xì)胞壁受損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活，稱細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型或L型。

質(zhì)粒：是染色體外的遺傳物質(zhì)，控制某些特定的生物學(xué)性狀，不是細(xì)菌生長(zhǎng)所必需。

莢膜：是細(xì)菌合成分泌的包繞于細(xì)胞壁外的一層粘液性物質(zhì)。界限清晰性質(zhì)穩(wěn)定結(jié)合牢固。培養(yǎng)基：由人工方法經(jīng)滅菌后制成，專供微生物生長(zhǎng)使用的混合營(yíng)養(yǎng)制品。一般pH為7.2-7.6。

兼性厭氧菌：兼有需氧呼吸和無氧發(fā)酵兩種功能，無論在有氧或無氧環(huán)境中都能生長(zhǎng)，但以有氧時(shí)生長(zhǎng)較好，大多數(shù)病原菌屬于此。菌落：在固體培養(yǎng)基中，經(jīng)過十八到24小時(shí)培養(yǎng)后，單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細(xì)紅細(xì)胞吸附：流感病毒等感染細(xì)胞后，由于細(xì)胞膜上出現(xiàn)了血凝素（HA），具有吸附脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的能力，這一現(xiàn)象稱為紅細(xì)胞吸附。抗毒素：通常是用細(xì)菌類毒素給馬多次注射后，取其免疫血清提取免疫球蛋白精制而成抗生素：微生物來源的抗菌藥物，以及人工化學(xué)修飾或半合成的衍生物

無菌：就是指沒有活菌的意思。

1：細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及功能？答：化學(xué)組成：G+①肽聚糖：聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋②磷壁酸：粘附功能，與致病性有關(guān)；抗原性很強(qiáng)③其他成分：如A群鏈球菌的M蛋白G-①肽聚糖：聚糖骨架；四肽側(cè)鏈②外膜：脂蛋白；脂質(zhì)雙層；脂多糖：脂類A（毒性成分，無種屬特異性）；核心多糖；特異多糖。功能：①維持細(xì)菌固有形態(tài)②保護(hù)細(xì)菌抵抗低滲環(huán)境③物質(zhì)交換④決定菌體的抗原性。2：G-菌與G+菌細(xì)胞壁的異同點(diǎn)及其意義？答：兼性厭氧菌、專性厭氧菌。

11：與醫(yī)學(xué)有關(guān)的合成代謝產(chǎn)物？答：① 毒素與侵襲性酶：外毒素和內(nèi)毒素②熱原質(zhì)：G-菌細(xì)胞壁的脂多糖，耐高溫，250℃干烤破壞。③抗生素：某些微生物代謝中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死其他微生物或腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)。④維生素：如VitK、B族維生素。⑤色素：脂溶性和水溶性色素。⑥細(xì)菌素：無治療應(yīng)用價(jià)值。13：病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成。答：多數(shù)病毒呈球形或近似球形，少數(shù)呈桿狀（植物病毒）、絲狀（初分離的流感病毒）、彈狀（狂犬病毒）、磚塊狀（如痘類病毒）和蝌蚪狀（噬菌體）。病毒的核心和衣殼，二者構(gòu)成核衣殼，病毒包膜和其他輔助結(jié)構(gòu)?；瘜W(xué)組成：核心：主要為核酸，化學(xué)組成為DNA或RNA。衣殼：包繞在核心外面的一層蛋白質(zhì)，由許多蛋白質(zhì)亞單位（殼粒）組成。包膜：化學(xué)組成： 脂質(zhì)蛋白質(zhì)糖類。

答：?jiǎn)渭?xì)胞真菌呈圓形或卵圓形。多細(xì)胞真菌

結(jié)構(gòu)：菌絲和孢子，菌絲：分為營(yíng)養(yǎng)菌絲、氣中菌絲、生殖菌絲；孢子：是真菌的繁殖體。結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁外成分；細(xì)胞壁；隔膜；其他結(jié)構(gòu)。

25：真菌培養(yǎng)特性。答：最常用的培養(yǎng):沙保弱培養(yǎng)基。溫度:多數(shù)都在22 ~ 28oC，但深部感染真菌最適溫度為37oC，pH4.0 ~ 6.0病原菌通常生長(zhǎng)緩慢，1~4周。

26：真菌繁殖方式。答：①無性生殖：①由菌絲斷裂形成新個(gè)體②細(xì)胞直接分裂產(chǎn)生子細(xì)胞③產(chǎn)生芽生孢子④產(chǎn)生孢子囊孢子和分生孢子②有性生殖：指經(jīng)過兩性細(xì)胞配合產(chǎn)生新個(gè)體的繁殖方式。

27：真菌抵抗力答：①對(duì)干燥、陽光、紫外線及常用消毒劑有強(qiáng)抵抗力②不耐熱，菌絲與孢子60℃ 1小時(shí)均可殺死③2﹪石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞、2.5%碘酊敏感④抗真菌藥物：菌集團(tuán)。

純培養(yǎng)基：挑取一個(gè)菌落，移種到另一培養(yǎng)基中，生長(zhǎng)出來的細(xì)菌均為純種。

毒性噬菌體：在宿主菌細(xì)胞內(nèi)噬菌體增殖產(chǎn)生子代噬菌體，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。溫和噬菌體：噬菌體基因與宿主菌染色體整合，成為前噬菌體，噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制而復(fù)制，并隨細(xì)菌的分裂而傳到子代細(xì)菌的基因組中，變成溶原性細(xì)菌，形成溶原性周期。前噬菌體：整合在細(xì)菌染色體上的噬菌體基因。轉(zhuǎn)座子：細(xì)菌基因組中的一段DNA序列，可以在染色體、質(zhì)粒或噬菌體之間自行移動(dòng)的遺傳成分，伴隨轉(zhuǎn)座子的移動(dòng)，會(huì)出現(xiàn)插入突變。基因轉(zhuǎn)移：遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入受體菌的過程為基因轉(zhuǎn)移。

重組：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組，重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。轉(zhuǎn)化：細(xì)菌通過性菌毛相互連接溝通，將質(zhì)粒或染色體等遺傳物質(zhì)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌的過程。

接合：是受體菌直接攝取供體菌DNA片段，從而獲得新的遺傳性狀的過程。

轉(zhuǎn)導(dǎo)：以噬菌體為載體將供菌的DNA片段轉(zhuǎn)移到受菌體內(nèi)使受菌獲得供菌的部分遺傳性狀。溶原性轉(zhuǎn)換：某些前噬菌體可導(dǎo)致細(xì)菌基因型和性狀發(fā)生改變，例如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素的機(jī)理，溫和噬菌體感染細(xì)菌時(shí)，其基因可整合于宿主菌染色體中，使宿主菌獲得噬菌體基因賦予的新的性狀，稱溶原性轉(zhuǎn)換。原生質(zhì)體融合：將兩種不同的細(xì)菌經(jīng)溶菌酶或青霉素等處理，失去細(xì)胞壁成為原生質(zhì)體后進(jìn)行融合的過程。融合后的染色體之間發(fā)生重組。病毒的自我復(fù)制：以病毒核酸為模板，經(jīng)過復(fù)雜的生化過程，復(fù)制子代病毒的核酸并通過轉(zhuǎn)錄翻譯產(chǎn)生病毒蛋白質(zhì)，裝配成熟后釋放到細(xì)胞外，這種增殖方式稱為病毒的自我復(fù)制。頓挫感染：被病毒侵入的細(xì)胞如不能為病毒增殖提供必需成分，則病毒不能合成本身成分，或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細(xì)胞與容納細(xì)胞

缺陷病毒：病毒基因組不完整或某一基因位點(diǎn)改變，不能正常增殖，不能復(fù)制出完整有感染性的病毒顆粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒?完成復(fù)制

干擾現(xiàn)象：當(dāng)兩種病毒感染同一宿主細(xì)胞時(shí)，發(fā)生一種病毒的增殖抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象。某些病毒感染細(xì)胞時(shí)不出現(xiàn)CPE或其他易于測(cè)出的變化（如HAd），但能干擾其后感染的另一病毒的增殖，從而阻抑后者所特有的CPE 芽孢：某些細(xì)菌在一定環(huán)境條件下，胞質(zhì)脫水濃縮，在菌體內(nèi)部形成的一個(gè)圓形或卵圓形小體。

正常菌群：正常人的體表和與外界相通的眼結(jié)膜，口腔、鼻腔、腸道、泌尿生殖道等腔道粘膜中的不同種類和數(shù)量及對(duì)人體無害而有益的微生物。正常微生物群通稱為正常菌群

細(xì)菌群體：細(xì)菌附著在有生命或無生命的材料表面后，由細(xì)菌及其所分泌的胞外多聚物共同組成的呈膜狀的細(xì)菌群體。機(jī)會(huì)性感染：由正常菌群在機(jī)體免疫功能低下、寄居部位改變、菌群失調(diào)等特定條件下引起的感染。

毒力：致病性的強(qiáng)弱程度。

侵襲素：某些細(xì)菌的基因編碼一些具有侵襲功能的蛋白多肽，促進(jìn)該病原菌向鄰近組織擴(kuò)散甚至介導(dǎo)進(jìn)入鄰近黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)。

包涵體：細(xì)胞漿或細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)光鏡下可見的斑塊狀結(jié)構(gòu)

G+ 菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,五肽交聯(lián)橋,三維立體②磷壁酸:重要表面抗原，與粘附致病有關(guān)，加強(qiáng)穩(wěn)定細(xì)胞壁G－菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽側(cè)鏈組成二維結(jié)構(gòu), ②外膜（脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成）功能:屏障結(jié)構(gòu)LPS是G－菌的內(nèi)毒素。細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)異同:G+菌/G－菌--強(qiáng)度:較堅(jiān)韌/較疏松--厚度:厚20-80nm/薄10-15nm--肽聚糖層數(shù):多可達(dá)50層/少，1-2層--肽聚糖結(jié)構(gòu):聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,五肽交聯(lián)橋,三維立體/聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,二維平面--脂類含量/少/多--磷壁酸:有/無--外膜:無/有,由脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成3：細(xì)菌L型，特殊結(jié)構(gòu)種類、化學(xué)組成、抗原性及意義？答：定義：細(xì)菌細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制，這種細(xì)胞壁受損的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活，稱細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型或L型。種類：G+菌細(xì)胞壁缺失后，僅有胞膜，稱原生質(zhì)體，G--菌肽聚糖層受損，尚有外膜，稱原生質(zhì)球。抗原性及意義：高度多形性，大小不一；大多染成G－；高滲低瓊脂含血清培養(yǎng)基—油煎蛋樣菌落；去除誘因后，有些可回復(fù)為原菌；某些L型仍有致病性,引起慢性感染。作用于胞壁的抗菌性藥對(duì)L型感染治療無效

4：細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)？答：①莢膜：多糖或多肽的多聚體。功能a抗吞噬b黏附作用c抗有害物質(zhì)的損傷d有抗原性，用于細(xì)菌的鑒定和分型②鞭毛：蛋白質(zhì)，由基礎(chǔ)小體絲狀體鉤狀體組成，高度抗原性。功能a是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官b某些細(xì)菌的鞭毛與致病性有關(guān)c根據(jù)鞭毛的動(dòng)力和鞭毛的抗原性可用以細(xì)菌的鑒別和分類③菌毛：由亞單位菌毛蛋白構(gòu)成。功能a黏附作用b傳遞遺傳物質(zhì)④芽孢：生產(chǎn)芽孢的細(xì)菌都是革陽菌。功能：a增強(qiáng)抵抗力b不直接致病c鑒定。

5：細(xì)菌的遺傳物質(zhì)？答：細(xì)菌染色體，質(zhì)粒，噬菌體：

6：基因轉(zhuǎn)移與重組方式的種類及定義？答：定義：基因轉(zhuǎn)移：遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入受體菌的過程為基因轉(zhuǎn)移。重組：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組，重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。分類：轉(zhuǎn)化,接合,轉(zhuǎn)導(dǎo),融合,轉(zhuǎn)換.【表格】類型：基因來源/轉(zhuǎn)移方式--轉(zhuǎn)化：供菌游離的DNA片段/直接攝入--接合：供菌質(zhì)粒DNA/ 性菌毛--轉(zhuǎn)導(dǎo)：供菌任意DNA或噬菌體與供菌特定DNA/噬菌體--融合：兩菌原生質(zhì)體的DNA/融合--轉(zhuǎn)換：溫和噬菌體/吸附穿入

7：噬菌體及其相關(guān)概念。答：1）毒性噬菌體：在宿主菌細(xì)胞內(nèi)噬菌體增殖產(chǎn)生子代噬菌體，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。2）溫和噬菌體：噬菌體基因與宿主菌染色體整合，成為前噬菌體，噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制而復(fù)制，并隨細(xì)菌的分裂而傳到子代細(xì)菌的基因組中，變成溶原性細(xì)菌，形成溶原性周期。

8：細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件？答:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)/酸堿度 多數(shù)病原菌最適pH為7.2~7.6/溫度 多數(shù)病原菌生長(zhǎng)最適溫度為37℃/氣體 據(jù)代謝時(shí)對(duì)分子氧的需要與否，專性需氧菌、微需氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌/滲透壓。

9：細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖？答：生長(zhǎng)曲線：一定數(shù)量的細(xì)菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中，連續(xù)定時(shí)取樣測(cè)定活菌數(shù)量，以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，以活菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)作圖，得到的一條曲線。遲緩期：適應(yīng)階段。對(duì)數(shù)期：對(duì)抗生素敏感，細(xì)菌鑒定選此期。穩(wěn)定期：代謝產(chǎn)物形成（如外毒素、抗生素、芽胞等）。衰亡期：菌體細(xì)胞呈現(xiàn)多種形態(tài)。

10：按細(xì)菌對(duì)氧需要的分類？答：據(jù)代謝時(shí)對(duì)分子氧的需要與否，專性需氧菌、微需氧菌、14：雙鏈DNA病毒的復(fù)制周期？答：vDNA（RNA聚合酶）→早期mRNA（翻譯）→早期蛋白（酶）→ vDNA（酶）子代DNA →? mRNA?→結(jié)構(gòu)蛋白.→子代DNA+結(jié)構(gòu)蛋白→子代病毒。簡(jiǎn)要過程：吸附，穿入，脫殼，生物合成，組裝、成熟與釋放。

15：頓挫病毒，缺陷病毒的概念？答：頓挫病毒：被病毒侵入的細(xì)胞如不能為病毒增殖提供必需成分，則病毒不能合成本身成分，或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細(xì)胞與容納細(xì)胞。缺陷病毒：病毒基因組不完整或某一基因位點(diǎn)改變，不能正常增殖，不能復(fù)制出完整有感染性的病毒顆粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒=完成復(fù)制 16：細(xì)菌的感染與致病。答：感染：在一定條件下，微生物與機(jī)體相互作用并導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生不同程度的病理過程。★

17：細(xì)菌的毒力比較，外毒素與內(nèi)毒素生物學(xué)特性。答：【表格】種類：內(nèi)毒素★外毒素。來源：G-菌★G+菌部分G-菌。編碼基因：染色體基因★質(zhì)?；蚯笆删w或染色體基因。存在部位：細(xì)胞壁成分、細(xì)菌裂解后釋出★活菌分泌或細(xì)菌溶解后散出?；瘜W(xué)成分：脂多糖★蛋白質(zhì)。穩(wěn)定性：好(160℃2~4h才破壞）★差（60~80 ℃30m可破壞）。毒性作用：弱、各種內(nèi)毒素作用大致相同★強(qiáng)、對(duì)機(jī)體組織器官有選擇性?？乖裕喝酰兹┨幚砗蟛荒苄纬深惗舅亍飶?qiáng)，能刺激機(jī)體形成抗毒素，經(jīng)甲醛脫毒后能形成類毒素。

18：細(xì)菌感染的類型答：①不感染②隱性感染③潛伏感染④顯性感染：急慢性感染；局部、全身感染⑤帶菌狀態(tài)。

19：病毒感染類型。答：①隱性感染②顯性感染：急性病毒感染：潛伏期短，發(fā)病急，數(shù)日或數(shù)周回復(fù)，病原消滅型感染。持續(xù)性病毒感染：慢性病毒感染；潛伏性病毒感染；慢發(fā)病毒感染。

20：細(xì)菌的致病機(jī)制。答：細(xì)菌的致病性強(qiáng)弱取決于毒力，細(xì)菌的毒力因子：①侵襲力：致病菌突破宿主生理屏障，進(jìn)入機(jī)體并在體內(nèi)定植、繁殖和擴(kuò)散的能力包括黏附素、莢膜和微莢膜、侵襲性物質(zhì)②毒素：細(xì)菌產(chǎn)生的損傷宿主引起生理功能紊亂的毒性物質(zhì)，包括內(nèi)毒素和外毒素。

21：正常菌群的生理作用。答：①生物拮抗：競(jìng)爭(zhēng)粘附（占位性保護(hù)）作用；產(chǎn)生有害代謝物質(zhì)；營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)②營(yíng)養(yǎng)作用③免疫作用④抑癌作用⑤抗衰老作用。

22：病毒分離鑒定方法及病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中的增殖的指標(biāo)。答：病毒的分離：①動(dòng)物接種②雞胚培養(yǎng)；流感病毒初次分離接種于羊膜腔；流感病毒的再培養(yǎng)接種于尿囊腔③組織培養(yǎng)④細(xì)胞培養(yǎng) — 病毒分離鑒定中最常用的方法單層細(xì)胞培養(yǎng)；原代細(xì)胞培養(yǎng)；二倍體細(xì)胞培養(yǎng)；傳代細(xì)胞培養(yǎng)。指標(biāo)：1）細(xì)胞的變化①細(xì)胞病變效應(yīng)：有些病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖時(shí)引起的特有的細(xì)胞病變，如細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落②多核巨細(xì)胞形成：有些病毒如麻疹病毒、巨細(xì)胞病毒等作用于細(xì)胞膜，使鄰近的細(xì)胞融合，形成多核巨細(xì)胞③胞質(zhì)或核內(nèi)包涵體的形成狂犬病病毒、巨細(xì)胞病毒。2）紅細(xì)胞吸附流感病毒等感染細(xì)胞后，由于細(xì)胞膜上出現(xiàn)了血凝素，具有吸附脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的能力，這一現(xiàn)象稱為紅細(xì)胞吸附。常用來鑒定具有血凝素的黏病毒或副黏病毒的增殖3）.紅細(xì)胞凝集檢測(cè)含血凝素病毒的方法4）干擾現(xiàn)象5）空斑形成試驗(yàn)。

23：病毒成份的檢測(cè)（抗原、核酸檢測(cè)）答：1.病毒抗原的檢測(cè)2.病毒核酸的檢測(cè)

24：真菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)（單細(xì)胞和多細(xì)胞真菌）。

灰黃霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑；對(duì)抗生素不敏感。

28：抗菌藥物的種類與作用機(jī)制。答：殺菌藥和抑菌藥。機(jī)制：①抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成②抑制細(xì)菌

細(xì)胞膜功③抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成④抑制細(xì)菌核酸合成。29：細(xì)菌耐藥的機(jī)制。答：產(chǎn)生鈍化酶；細(xì)胞通透性的改變；靶位結(jié)構(gòu)的改變；建立代謝旁路；代謝酶分子的改變

30：醫(yī)院感染的定義。答：由醫(yī)院的病原生物或其毒素導(dǎo)致的局部或全身感染性疾病。

31：細(xì)菌分離培養(yǎng)和鑒定、生化試驗(yàn)、血清學(xué)試驗(yàn)？答：細(xì)菌分離培養(yǎng)和鑒定：原則上應(yīng)對(duì)所有送檢標(biāo)本做分離培養(yǎng)，以便獲得單個(gè)菌落后進(jìn)行純培養(yǎng)，從而對(duì)細(xì)菌做進(jìn)一步的生物學(xué)、免疫學(xué)、致病性或細(xì)菌的藥物敏感性等方面的檢查，最終獲得確切的報(bào)告。生化試驗(yàn)：得到細(xì)菌的純培養(yǎng)物后，用糖發(fā)酵試驗(yàn)，吲哚試驗(yàn)，硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)等對(duì)細(xì)菌的酶系統(tǒng)和其代謝產(chǎn)物的檢查，是鑒別細(xì)菌的重要方法之一。血清學(xué)實(shí)驗(yàn)：利用含已知的特異性抗體的免疫血清，對(duì)細(xì)菌進(jìn)行群和型的鑒別。

微生物種類名稱★生物學(xué)性狀★致病物質(zhì)、致病機(jī)理及所致疾病

破傷風(fēng)梭菌：菌體細(xì)長(zhǎng)，芽胞正圓比菌體粗，位于菌體頂端菌體鼓槌狀★不發(fā)酵糖類，不分解蛋白質(zhì)。條件：局部傷口需形成厭氧微環(huán)境，傷口窄而深，有泥土或異物污染，大面積創(chuàng)傷，壞死組織多，局部組織缺血，同時(shí)有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染的傷口。防治原則：特異性預(yù)防：注射破傷風(fēng)類毒素主動(dòng)免疫；迅速對(duì)傷口清創(chuàng)擴(kuò)創(chuàng)，防止形成厭氧微環(huán)境；緊急預(yù)防：TAT（精制破傷風(fēng)抗毒素）；治療： 早期足量使用TAT，抗生素。產(chǎn)氣莢膜梭菌：G+粗大桿菌，芽胞位于次極端，橢圓形，直徑小于菌體形成明顯莢膜★血平板：雙層溶血環(huán)，代謝十分活躍，牛奶培養(yǎng)基：“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象。增加血管通透性，組織壞死，氣性壞疽，食物中毒，壞死性腸炎。

肉毒梭菌：G+粗短桿菌，芽胞位于次極端，橢圓形，菌體呈網(wǎng)球拍狀，嚴(yán)格厭氧，分型多，生化反應(yīng)復(fù)雜★肉毒毒素，抑制乙酰膽堿釋放，引起運(yùn)動(dòng)神經(jīng)末梢失調(diào)→肌肉麻痹；食物中毒，嬰兒肉毒中毒。

支原體：菌落油煎蛋型，高度多形態(tài)型，細(xì)胞膜含高度固醇，無細(xì)胞壁，對(duì)青霉素有抵抗作用★支原體肺炎，病變?yōu)殚g質(zhì)性肺炎，可合并支氣管肺炎。稱為原發(fā)性非典型性肺炎。不規(guī)則發(fā)熱，刺激性咳嗽，頭痛。嬰幼兒病情嚴(yán)重，發(fā)病急，病程長(zhǎng)，以呼吸困難為主。有些合并其他系統(tǒng)病變，如循環(huán)系統(tǒng)等。飛沫傳播。立克次體：是一類體積微小，絕大多數(shù)為自身代謝不完善，嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生的原核細(xì)胞型微生物★流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、恙蟲病、Q熱

衣原體：嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，有獨(dú)特發(fā)育周期，能通過細(xì)菌濾器，原核細(xì)胞型微生物★ 沙眼:感染眼結(jié)膜上皮細(xì)胞→增殖，包涵體→局部炎癥→早期流淚、有粘液膿性分泌物、結(jié)膜充血及濾泡增生→后期結(jié)膜瘢痕、眼瞼內(nèi)翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜損害→影響視力或致盲包涵體結(jié)膜炎、泌尿生殖道感染、沙眼衣原體肺炎、性病淋巴肉芽腫

螺旋體：是一類細(xì)長(zhǎng)、柔軟、彎曲、運(yùn)動(dòng)活潑的原核細(xì)胞型微生物基本結(jié)構(gòu)及生物學(xué)形狀與細(xì)菌相似★梅毒，人是唯一傳染源，致病物質(zhì)為莢膜樣物質(zhì)，透明質(zhì)酸酶；后天通過性接觸傳播或者先天經(jīng)過母體傳播。

第三篇：微生物總結(jié)

第一章、緒論

巴斯得的貢獻(xiàn)：

1、徹底否定了“自生說”

2、免疫學(xué)—預(yù)防接種

3、證實(shí)發(fā)酵是由微生物引起的3、巴斯德消毒法

柯赫貢獻(xiàn)：

1、證實(shí)炭疽病菌是炭疽病的病原菌

2、發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌

3、提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的病原菌——柯赫原則

4、固體培養(yǎng)基分離純化微生物的技術(shù)

5、配制培養(yǎng)基

微生物的5大共性：

1、體積小、面積大

2、吸收多、轉(zhuǎn)化快

3生長(zhǎng)旺、繁殖快

4、分布廣、種類多

5、適應(yīng)性強(qiáng)、易變異 第二章、微生物的純培養(yǎng)和顯微技術(shù)

一、涂布平板法作用：用于純種分離、篩選菌落、得到單菌落，對(duì)一些細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù) 五區(qū)劃線發(fā)作用：純化菌種、得到單菌落

搖瓶實(shí)驗(yàn)作用：菌種篩選、發(fā)酵實(shí)驗(yàn)、種子培養(yǎng)等 穿刺法的作用：保藏厭氧菌種、研究微生物的動(dòng)力 之字劃線法的作用：保藏菌種、單菌落的獲取

二、斜面菌種保藏法：保藏期限3個(gè)月以內(nèi)，沙土管保藏法：保藏期限1~10年主要適用于產(chǎn)孢子的，如芽孢桿菌、放線菌 石蠟油封藏法：保藏期限1~2年

真空冷凍干燥法：保藏期限5~10年，液氮超低溫病結(jié)法：保藏期限5~10年 第三章

一、細(xì)胞壁：根據(jù)細(xì)胞壁將原核生物分為革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌兩種。

1、革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁的特點(diǎn)：厚度大（20~80nm）和化學(xué)組分簡(jiǎn)單，一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。

革蘭氏陽性菌的機(jī)械阻攔與保護(hù)作用有肽聚糖完成。磷壁酸：是結(jié)合在革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁上的一種酸性多糖，主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。

磷壁酸為革蘭氏陽性菌所特有。對(duì)于革蘭氏陽性菌而言，抗原性由磷壁酸完成。磷壁酸的主要生理功能：1）、其磷酸分子上較多的負(fù)電荷可提高細(xì)胞周圍鎂離子的濃度進(jìn)入細(xì)胞后就可以保證細(xì)胞膜上一些需鎂離子的合成提高活性 2）儲(chǔ)藏磷元素 3）、增強(qiáng)某些致病菌如A族鏈球菌對(duì)宿主細(xì)胞的黏連、避免被白細(xì)胞吞噬以及補(bǔ)抗體的作用 4）賦予革蘭氏陽性菌以特異的表面抗原 5）可作為噬菌體的特異性吸附受體

6）調(diào)節(jié)細(xì)胞自溶素的活力，借以防止細(xì)胞自溶而死亡

2、革蘭氏陰性菌：由肽聚糖和外膜組成，外膜中的脂多糖是革蘭氏陰性菌所特有的 外壁層可分為3層：外層為脂多糖層，中層為磷脂層，內(nèi)層為脂蛋白 革蘭氏陰性菌外膜的作用：1）控制細(xì)胞透性

2）提高鎂離子濃度 3）決定細(xì)胞的抗原性

4）類脂A是類毒素的主要成分

脂多糖：是位于革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁最外層的一層較厚的類脂多糖物質(zhì)，由類脂A、核心多糖和O-特異側(cè)鏈

脂多糖的功能：1）其中類脂A是革蘭氏陰性菌致病物質(zhì)——內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ) 2）因其負(fù)電荷較強(qiáng)，有吸附鎂離子、鈣離子等陽離子以提高其在細(xì)胞表面的濃度作用 3)由于LPS結(jié)構(gòu)多變，決定了革蘭氏陰性菌細(xì)胞表面抗原決定族 4）是許多噬菌體在在細(xì)胞表面的吸附受體 5）具有控制某些物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的部分選擇性屏障功能

3、革蘭氏染色機(jī)制：通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞膜內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚，肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密，故與乙醇與丙酮作脫色處理時(shí)因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會(huì)溶出縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其任呈紫色。反之革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層的類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差，遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物的溶出，因此，通過乙醇脫色后細(xì)胞退成無色。這時(shí)，再經(jīng)沙黃等紅色染料進(jìn)行復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈現(xiàn)紅色，而革蘭氏陽性則保留紫色。

二、芽孢

芽孢：某些細(xì)胞在生長(zhǎng)發(fā)育后期，在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強(qiáng)的休眠體

芽孢的特點(diǎn)：1）芽孢內(nèi)新陳代謝幾乎停止，處于休眠狀態(tài)，但保持潛在萌發(fā)力

2）芽孢不具生殖能力，僅只是一種休眠體 3）抗逆性最強(qiáng)的生命體之一，有抗熱、抗化學(xué)藥物、抗輻射和抗靜水壓能力 4）含水量低，壁厚而致密，通透性差，不易著色，折光性強(qiáng)

5）一個(gè)孢子萌發(fā)只產(chǎn)生一個(gè)營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的細(xì)胞 芽孢的耐熱機(jī)制：芽孢的耐熱性在于芽孢衣對(duì)多價(jià)陽離子和水分的透性很差和皮層的離子強(qiáng)度很高，從而是皮層產(chǎn)生極高的滲透壓去奪取芽孢核心中的水分，其結(jié)果造成皮層的充分膨脹，而核心部分的細(xì)胞質(zhì)卻變得高度失水，因此，導(dǎo)致核心具極強(qiáng)的耐熱性。第四章微生物的營(yíng)養(yǎng)要求

一、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：能夠滿足微生物機(jī)體生長(zhǎng)、繁殖和完成各種生理?xiàng)l件所需的物質(zhì) 營(yíng)養(yǎng)：微生物獲得U和利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的過程

二、1、碳源：是在微生物生長(zhǎng)過程中為微生物提供碳素來源的物質(zhì)。為微生物提供碳元素與能量

2、氮源：為微生物提供氮元素來源，只有少數(shù)自養(yǎng)微生物能利用銨鹽、硝酸鹽同時(shí)作為氮源與能源（是構(gòu)成細(xì)胞中核酸和蛋白質(zhì)的重要元素）氮源的類型：無機(jī)氮、有機(jī)氮、氣體氮

3、無機(jī)鹽：作用：作為酶活性中心的組成部分、維持生物大分子和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、調(diào)節(jié)并維持細(xì)胞的滲透壓、控制細(xì)胞的氧化還原電位和作為某些微生物生長(zhǎng)的能源物質(zhì)。

4、生長(zhǎng)因子：通常是指那些微生物生長(zhǎng)所必需的的且需量很少，但微生物自身不能合成或合成量不足以滿足機(jī)體生長(zhǎng)需要的有機(jī)化合物

5、水：生理功能：1)起到溶劑與運(yùn)輸介質(zhì)的作用

2）參與細(xì)胞內(nèi)一系列的化學(xué)反應(yīng)

3）維持蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子穩(wěn)定的天然構(gòu)象

4）是良好的導(dǎo)熱體，調(diào)節(jié)細(xì)胞溫度 微生物的營(yíng)養(yǎng)類型分類（P84表格）

三、1、培養(yǎng)基的配制原則：1）目標(biāo)明確

2）營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)

3）物理化學(xué)條件適宜

4）原料來源的選擇

2、C多有助于次生物質(zhì)分泌，N多有助于個(gè)體生長(zhǎng)發(fā)育

3、PH：細(xì)菌：7.0~8.0

酵母菌：4.0~6.0

放線菌：8.0~9.0

霉菌：4.0~5.8

4、維持培養(yǎng)基PH的方法：1）加緩沖劑一氫和二氫磷酸鹽的混合物

2）備用堿：CaCO3、CaHCO3 3）弱酸鹽：檸檬酸鹽、乳酸鹽

4）液氨或鹽酸

5、原料來源：1）經(jīng)濟(jì)節(jié)約原則：以粗代精、以廢代好、以簡(jiǎn)代繁

2）原料來源要廣泛

3）原料藥易處理、處理成本要低

4）原料處理后廢物、廢液、廢氣要少

6、選擇和配制培養(yǎng)基的方法四種：生態(tài)模擬、查閱文獻(xiàn)、精心設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)比較

四、培養(yǎng)基的分類

1、按成分不同劃分：天然培養(yǎng)基：優(yōu)點(diǎn)為取材方便，營(yíng)養(yǎng)豐富，種了多樣，配制方便合成培養(yǎng)基：優(yōu)點(diǎn)：組分精確，重復(fù)性好確定：較昂貴，一般用于研究

2、根據(jù)物料狀態(tài)劃分：固體培養(yǎng)基：一般用于進(jìn)行微生物的分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)及菌種保藏半固體培養(yǎng)基：用于觀察微生物的運(yùn)動(dòng)特征、分類鑒定及噬菌體效價(jià)滴定液體培養(yǎng)基：用于大量培養(yǎng)微生物，研究生理代謝

3、按用途劃分：基礎(chǔ)培養(yǎng)基：用于培養(yǎng)野生型微生物和原養(yǎng)型微生物 加富培養(yǎng)基（營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基）：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制成的一類營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基作用一般為分離某種微生物而專門設(shè)計(jì)或培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求嚴(yán)謹(jǐn)?shù)漠悩游⑸?鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)可中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì) 選擇培養(yǎng)基：根據(jù)不同種類微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，有利于所需要微生物的生長(zhǎng)，有利于所需微生物的生長(zhǎng) 第五章、微生物代謝

微生物發(fā)酵過程的三個(gè)階段：脫氫（電子）、遞氫（或電子）和受氫（或電子）發(fā)酵：是指微生物細(xì)胞將有機(jī)物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某些中間產(chǎn)物，同時(shí)釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物

代謝：生命存在的基本特征，是微生物體內(nèi)所進(jìn)行的全部生化反應(yīng)的總稱。主要由分解代謝和合成代謝兩個(gè)過程組成。分解代謝：是指將大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì)，并在這個(gè)過程中產(chǎn)生能量（都是氧化反應(yīng)）合成代謝：是指細(xì)胞利用簡(jiǎn)單的小分子物質(zhì)合成復(fù)雜大分子，在這個(gè)過程要消耗能量（都是還原反應(yīng)）

代謝途徑都是有一系列連續(xù)的酶促反應(yīng)構(gòu)成的

P102~P105EMP HM ED途徑的特點(diǎn)功能以及途徑路線

根據(jù)氧化還原反應(yīng)電子受體的不同可將發(fā)酵和呼吸分為有氧和無氧呼吸兩種 P108 TCA途徑圖

TCA循環(huán)特點(diǎn)：1）氧雖然不直接參與其中反應(yīng)，但必需在有氧條件下運(yùn)行

2）每個(gè)丙酮酸產(chǎn)生15個(gè)ATP 3）位于一切分解代謝與合成代謝的樞紐地位，可為生物合成提供各種碳價(jià)原料

TCA的生理意義：1）為細(xì)胞提供能量

2）各種能源物質(zhì)徹底氧化的共同代謝途徑（對(duì)于微生物來說）3）物質(zhì)轉(zhuǎn)化樞紐

無氧呼吸：電子受體不是氧氣而是外源無機(jī)物與部分簡(jiǎn)單小分子有機(jī)物

發(fā)酵作用：沒有外源電子受體，底物具有的能量只釋放一小部分，合成少量ATP 三種磷酸化：底物水平磷酸化，高能磷酸化，氧化磷酸化

光合磷酸化的特點(diǎn)：1）光驅(qū)使下電子自菌綠素上逐出后經(jīng)類似呼吸鏈又回到菌綠素

2）產(chǎn)還原力[H]和產(chǎn)ATP分別進(jìn)行，還原力來自于H2O等無機(jī)物

3）不產(chǎn)生氧氣 合成代謝：微生物利用能量代謝所產(chǎn)生的能量、中間代謝產(chǎn)物以及從外界吸收的小分子合成復(fù)雜細(xì)胞物質(zhì)的過程

P118~P119 CO2固定路線圖

藍(lán)細(xì)菌孤單的抗氧化保護(hù)機(jī)制：1）分化出特殊的還原性異形胞

2）非異形胞藍(lán)細(xì)菌固氮酶的保護(hù)將固氮與光合進(jìn)行時(shí)間上分隔

微生物固氮反應(yīng)6要素：1）ATP的供應(yīng)

2)還原力[H]及傳遞氫載體

3）固氮酶

4）還原底物——氮?dú)?/p>

5）鎂離子

6）嚴(yán)格厭氧微環(huán)境

聯(lián)合固氮菌：指必需生活在植物根莖葉，動(dòng)物腸道等處才能進(jìn)行固氮的微生物，不形成類似根瘤的共生結(jié)構(gòu) 微生物的代謝調(diào)節(jié)主要有兩種類型：一是酶活性的調(diào)節(jié)，即調(diào)節(jié)已經(jīng)存在的酶分子的活性，是酶在化學(xué)水平的變化。另一類是酶合成的調(diào)節(jié)，即調(diào)節(jié)酶分子的合成量，是遺傳水平發(fā)生的變化 第六章

一、生長(zhǎng)曲線延滯期

特點(diǎn)：1）生長(zhǎng)速率常數(shù)為零，細(xì)胞數(shù)目不增加或增加很小

2）細(xì)胞形態(tài)變大或 增長(zhǎng)許多桿菌可長(zhǎng)成絲狀

3）合成代謝十分活躍，核糖體、酶類和ATP 的合成加速產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶

4）對(duì)外界不良條件如NaCl溶液，溫度和抗 生素等理化因素反應(yīng)敏感

出現(xiàn)原因：1）微生物接種到一個(gè)新的環(huán)境，暫缺乏足夠的能量和必需的生長(zhǎng)因子

2）“種子”老化即處于未對(duì)數(shù)期或種子未活化

3）接種時(shí)損傷

影響其長(zhǎng)短的因素與實(shí)踐意義：1）接種齡：對(duì)數(shù)期種子延滯期短，延滯期或衰亡期的種子延滯期較長(zhǎng)

2）接種量：接種量大，延滯期較短，接種量小，延滯期較長(zhǎng)

3）培養(yǎng)基成分：培養(yǎng)基成分豐富的延滯期較短，培養(yǎng)基成分與種子培養(yǎng)基一致的延滯期較短

二、生長(zhǎng)曲線指數(shù)期

特點(diǎn)：1）生長(zhǎng)速率最快，細(xì)胞呈指數(shù)增長(zhǎng)

2）生長(zhǎng)速率恒定

3）代謝旺盛，細(xì)胞組分平衡發(fā)展

4）群體的生理特性一致

影響指數(shù)期的意義：1）菌種：不同菌種代時(shí)差異極大

2）營(yíng)養(yǎng)成分：營(yíng)養(yǎng)越豐富代時(shí)越短

3）營(yíng)養(yǎng)物濃度：影響微生物的生長(zhǎng)速率和生長(zhǎng)總量

4）培養(yǎng)溫度：影響微生物的生長(zhǎng)速率和生長(zhǎng)總量

指數(shù)期的實(shí)踐意義：1）是代謝、生理研究的良好材料

2)是增殖噬菌體的最適宿主菌齡

4）革蘭氏染色是采用此期微生物

生長(zhǎng)曲線穩(wěn)定期特點(diǎn)：1）活細(xì)胞總數(shù)維持不變即新增殖的細(xì)胞數(shù)與衰亡的細(xì)胞數(shù)相等，菌體總數(shù)達(dá)到最高點(diǎn)

2）細(xì)胞生長(zhǎng)速率為零

3）細(xì)胞生理上處于衰老，代謝活力鈍化，細(xì)胞成分合成緩慢，革蘭氏染色發(fā)生變化

三、生長(zhǎng)曲線衰亡期

特點(diǎn)：細(xì)胞以指數(shù)速率死亡，有時(shí)細(xì)胞速率的降低是由于抗性細(xì)胞的積累，細(xì)胞變形退化，有的發(fā)生自溶，革蘭氏染色發(fā)生變化

影響衰亡期的因素及實(shí)踐意義：1）與菌種的遺傳特性有關(guān)：有些細(xì)菌的培養(yǎng)經(jīng)歷所有的各個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期，幾天以后死亡，有細(xì)菌培養(yǎng)基個(gè)月乃至幾年以后任然有一些貨細(xì)胞

2）與是否產(chǎn)芽孢有關(guān)：產(chǎn)芽孢的細(xì)菌更易幸存下來

3）與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和有毒物質(zhì)有關(guān)：補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)和能源，以及中和環(huán)境毒性，可以減緩死亡細(xì)胞的死亡速率，延長(zhǎng)細(xì)菌培養(yǎng)物的存貨時(shí)間

四、分批培養(yǎng)：是指將微生物置于一定容積的的培養(yǎng)基中，經(jīng)過生長(zhǎng)培養(yǎng)，最后一次收獲培養(yǎng)方式 連續(xù)培養(yǎng)：在一個(gè)恒定容積的的流動(dòng)系統(tǒng)中培養(yǎng)微生物，一方面以一定速率加入新的培養(yǎng)基，另一方面又以相同的速率流出培養(yǎng)物（菌體和代謝產(chǎn)物）

連續(xù)發(fā)酵的優(yōu)點(diǎn)：1）高效

2）產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定

3）節(jié)約了大量動(dòng)力、人力、水和蒸汽，且使水、汽、電的負(fù)荷均衡合理

連續(xù)發(fā)酵的缺點(diǎn)：1）菌種易退化

2）易污染雜菌 3）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率一般 同步生長(zhǎng)：就是指在培養(yǎng)物中所有微生物細(xì)胞都同一生長(zhǎng)階段，并都能同時(shí)分裂的生長(zhǎng)方式 同步培養(yǎng)法包括誘導(dǎo)法與選擇法

誘導(dǎo)法：是采用物理、化學(xué)一男子使微生物生長(zhǎng)到某一階段而停下來，使所有細(xì)菌都達(dá)到這個(gè)階段時(shí)再使其生長(zhǎng) 恒濁器：根據(jù)培養(yǎng)器內(nèi)微生物的生長(zhǎng)密度并借光電控制系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液流速，以取得菌體密度高，生長(zhǎng)速度恒定的微生物細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)

恒化器：與恒濁器相反，是一種設(shè)法使培養(yǎng)液流速保持不變 最高生長(zhǎng)速率條件下進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖的一種連續(xù)培養(yǎng)裝置 裝置

控制對(duì)象

培養(yǎng)基

培養(yǎng)基流速

生長(zhǎng)速率

產(chǎn)物

應(yīng)用范圍

恒濁器

菌體密度(內(nèi)控制)

無限制生長(zhǎng)因子

不恒定

最高速率

大量菌體或與菌體平行的代謝產(chǎn)物

生產(chǎn)為主

恒化器

培養(yǎng)基流速（外控制）

有限制生長(zhǎng)因子

恒定

低于最高速率

不同生長(zhǎng)速率的菌體、并使微生物始終在低于其

實(shí)驗(yàn)室為主

五、防腐：是在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下防止或抑制微生物生長(zhǎng)的一種措施，它能防止食物腐敗或防止其他物質(zhì)霉變 消毒：利用某種殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有微生物的一種措施，它可以起到防止感染或傳播的作用

滅菌：利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物的一種措施 第七章

1、病毒的特點(diǎn):1)形態(tài)及其微小，一般能通過細(xì)菌濾器必須自電鏡下才能觀察

2）沒有細(xì)胞構(gòu)造，主要成分僅為核酸與蛋白質(zhì)

3）每一種病毒致含有一種核酸

DNA和RNA 4）依靠自身的核酸進(jìn)行復(fù)制，一病毒的核酸和蛋白質(zhì)等原件實(shí)現(xiàn)裝配，實(shí)現(xiàn)繁殖

5）嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，缺乏完整的酶和產(chǎn)能系統(tǒng)，只能利用宿主細(xì)胞的現(xiàn)成的代謝系統(tǒng)合成病毒自身的核酸和蛋白質(zhì)

6）在離體條件下，能以無生命力的大分子狀態(tài)存在，并可長(zhǎng)期保持器侵染力

7）對(duì)一般抗生素不敏感，但對(duì)干擾素敏感

8）有些病毒的基因可以整合到宿主的基因中去

2、病毒與活細(xì)胞的區(qū)別：1）結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)

2）幾乎所有的毒粒中只有DNA或RNA一種類型的核酸

3）在細(xì)胞外不能增殖

3、得到一步生長(zhǎng)曲線的實(shí)驗(yàn)：二院培養(yǎng)系統(tǒng)：1）低濃度病毒宿主細(xì)胞(給幾分鐘時(shí)間侵染)2）高倍稀釋病毒與細(xì)胞的培養(yǎng)物

3）保濕培養(yǎng)

4）不同時(shí)間取樣，涂布平板，得到效價(jià)

5）以時(shí)間為橫坐標(biāo)，病毒濃度為縱坐標(biāo)繪圖

4、烈性噬菌體：感染宿主后增殖裂解宿主 溶原性噬菌體（溫和性細(xì)菌）：感染后大多數(shù)可整合到宿主基因中少數(shù)以染色體外獨(dú)立存在

5、病毒分為真病毒和亞病毒，亞病毒又分為類病毒、衛(wèi)星病毒、衛(wèi)星RNA、朊病毒 類病毒：是一種只包含RNA的病毒，只在植物中出現(xiàn)，分質(zhì)量極小，不能編碼蛋白質(zhì) 衛(wèi)星病毒：寄生于與之無關(guān)的輔助病毒的基因產(chǎn)物的病毒 衛(wèi)星RNA：是指必需依賴一些輔助病毒進(jìn)行復(fù)制的小分子單鏈RNA，他們被包藏在輔助病毒的殼體中

朊病毒：是一類能引起哺乳動(dòng)物亞急性海綿樣腦病的病原因子 第八章

P204頁Griffith轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)等3個(gè)實(shí)驗(yàn)

基因組：是指位于細(xì)菌或細(xì)胞中的所有基因 大腸桿菌基因組的特點(diǎn)：1）遺傳信息的連續(xù)性

2）功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu)

3）結(jié)構(gòu)基因的單拷貝及rRNA基因的多拷貝

4）基因組重復(fù)序列少而短

質(zhì)粒：是一種獨(dú)立于染色體外，能進(jìn)行自主復(fù)制的細(xì)胞質(zhì)遺傳因子，主要存在于各種微生物中

轉(zhuǎn)座子：是位于染色體或質(zhì)粒上的一種能改變自身位置的DNA序列，廣泛分布于原核和真核細(xì)胞中

質(zhì)粒的主要類型：致育因子、抗性因子、Col質(zhì)粒、毒性質(zhì)粒、代謝質(zhì)粒、隱秘質(zhì)粒

致育因子：又稱F質(zhì)粒，其大小約100kb，這是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象（結(jié)合作用）有關(guān)的質(zhì)粒

抗性因子：是另一類普遍而重要的質(zhì)粒，主要包括抗藥性和抗重金屬兩大類，簡(jiǎn)稱R質(zhì)粒 Col質(zhì)粒：該質(zhì)粒含有編碼大腸菌素的基因，大腸菌素是一種細(xì)菌蛋白，只殺死近緣且不含Col質(zhì)粒的菌株，而宿主不受其產(chǎn)生的細(xì)菌素的影響

毒性質(zhì)粒：致病菌中攜帶的能引起致病性的質(zhì)粒，這些質(zhì)粒具有編碼毒素的基因 代謝質(zhì)粒：攜帶有能降解某些基質(zhì)的酶的基因的質(zhì)粒

隱秘質(zhì)粒：不顯示任何表型效應(yīng)，它們的存在只有通過物理方法檢測(cè)出來 原核生物中對(duì)的轉(zhuǎn)座因子有3種類型：插入順序（IS）、轉(zhuǎn)座子（Tn）、病毒（Mu）轉(zhuǎn)座的遺傳學(xué)效應(yīng)：插入突變、產(chǎn)生染色體畸變、基因的移動(dòng)和重排

基因突變：一個(gè)基因內(nèi)部遺傳結(jié)構(gòu)或DNA序列的任何改變包括一對(duì)或幾對(duì)堿基的缺失、插入或置換，而導(dǎo)致的遺傳變化

堿基變化對(duì)遺傳信息改變的四種類型：同義突變，錯(cuò)義突變，無義突變，移碼突變 同義突變：是指某個(gè)堿基的變化沒有改變產(chǎn)物氨基酸序列的密碼子變化

錯(cuò)義突變：是指堿基序列的改變引起了產(chǎn)物氨基酸的改變（可能為致死突變）無義突變：是指某個(gè)堿基的改變，使代表某種氨基酸的密碼子變?yōu)榈鞍踪|(zhì)的合成的終止密碼子，蛋白質(zhì)的合成提前終止，產(chǎn)生短截的蛋白質(zhì)

移碼突變：由于DNA序列中發(fā)生1~2個(gè)核苷酸的缺失或插入，使翻譯的閱讀框發(fā)生改變，從而導(dǎo)致改變位置以后的氨基酸序列的完全變化（一般為致死突變）

表型變化的突變型：營(yíng)養(yǎng)缺陷型，抗藥性突變型，條件致死突變型，形態(tài)突變型 營(yíng)養(yǎng)缺陷型：缺乏合成其生存所必需的營(yíng)養(yǎng)物的突變型，只有從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營(yíng)養(yǎng)或前體物才能生長(zhǎng) 影印平板P218 抗藥性突變型：是由于基因突變使菌株對(duì)某種或某幾種藥物，特別是抗生素產(chǎn)生抗性的一種突變型

條件致死突變型：是指在某一條件下具有致死效應(yīng)，而在另一條件下沒有致死效應(yīng)的突變型 形態(tài)突變型：是指造成形態(tài)改變的突變型（包括菌落形態(tài)、顏色一件噬菌斑形態(tài)）

自發(fā)突變的緣由：1）NDA復(fù)制過程產(chǎn)生的錯(cuò)誤

2）堿基互變異構(gòu)體的相互轉(zhuǎn)變

3）轉(zhuǎn)座子的隨機(jī)插入基因

自發(fā)突變的特性：1）非對(duì)應(yīng)性

2）稀有性

3）規(guī)律性

4）獨(dú)立性

5）遺傳和回復(fù)

6）可誘變性

誘發(fā)突變：堿基類似物、插入染料、直接與DNA其化學(xué)反應(yīng)的誘變劑、輻射和熱、生物誘變因子

DNA損傷修復(fù)：光復(fù)活作用、切除修復(fù)、重組修復(fù)、SOS修復(fù) 光復(fù)活：由phr基因編碼的光解酶進(jìn)行

切除修復(fù)：又稱暗修復(fù)，該修復(fù)系統(tǒng)除了堿基錯(cuò)誤配對(duì)和單核苷酸插入不能修復(fù)外，幾乎其他DNA損傷均可修復(fù)，是細(xì)胞內(nèi)主要修復(fù)系統(tǒng)

重組修復(fù)：是一種越過損傷而進(jìn)行的修復(fù)，這種修復(fù)不將損傷堿基除去

SOS修復(fù)：是DNA分子受到較大范圍的重大損傷時(shí)誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種應(yīng)急反應(yīng) P226~227 高頻重組菌等

轉(zhuǎn)導(dǎo)：是由病毒介導(dǎo)的細(xì)胞間進(jìn)行遺傳交換的一種方式

供體DNA進(jìn)入受體的命運(yùn)：1）發(fā)生穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子

2）流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)：即不被降解，又不被整合，也不被復(fù)制

3）外源DNA被降解，轉(zhuǎn)導(dǎo)失敗

遺傳轉(zhuǎn)化：是指同源或異源的游離DNA分子被自然或人工感受態(tài)細(xì)胞攝取，并得到表達(dá)的水平方向的基因轉(zhuǎn)移過程

4個(gè)影響供體DNA與受體細(xì)胞間的最初相互作用：1）轉(zhuǎn)化片段的大小

2）形態(tài)：雙鏈DNA 3）濃度：在在臨界值出現(xiàn)之前成正比

4）生理狀態(tài)：感受器——?jiǎng)偼Ｖ笵NA合成 微生物育種：誘變育種、代謝育種、體內(nèi)基因組育種 代謝育種：改變代謝途徑、擴(kuò)展代謝途徑、構(gòu)建新的代謝途徑 體內(nèi)基因組育種：原生質(zhì)體融合，雜交育種

融合子的判別：1）親本遺傳標(biāo)記的互補(bǔ)的2）親本滅活后性狀的恢復(fù)

3）具有雙親本的熒光標(biāo)記 第九章

順式作用元件：位于基因的旁側(cè)，可以調(diào)控影響基因表達(dá)的核酸序列。其本身并不編碼蛋白質(zhì)

反式作用因子：通常為蛋白質(zhì)或RNA，其特征是可以合成并擴(kuò)散到目標(biāo)場(chǎng)所發(fā)揮作用 正調(diào)控：控制因子通過與啟動(dòng)子原件結(jié)合來激活基因的表達(dá) 負(fù)調(diào)控：抑制物與操縱基因結(jié)合起來阻止基因表達(dá) P248 操縱子的結(jié)構(gòu)

P249圖

P250 圖

啟動(dòng)子：是RNA聚合酶和CAP的結(jié)合位點(diǎn)，控制著轉(zhuǎn)錄的起始，一個(gè)啟動(dòng)子可以啟動(dòng)多個(gè)基因的表達(dá)

操縱基因：DNA上的一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，阻抑物能與之結(jié)合抑制相鄰啟動(dòng)子的起始轉(zhuǎn)錄，操縱基因不表達(dá)任何東西 終止子：控制轉(zhuǎn)錄結(jié)束

轉(zhuǎn)錄因子：轉(zhuǎn)錄起始過程中RNA聚合酶所需要的輔助因子

轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控:1）DNA的結(jié)構(gòu)

2）RNA聚合酶的功能

3）蛋白質(zhì)因子及其他小分子配基的相互作用

第四篇：微生物復(fù)習(xí)總結(jié)

11級(jí)食品質(zhì)量與安全班復(fù)習(xí)總結(jié)

一、名詞解釋：

莢膜芽胞細(xì)菌外膜Ames試驗(yàn)溶原性噬菌體/溫和噬菌體毒性噬菌體

L-型細(xì)菌Vi抗原血漿凝固酶內(nèi)毒素卡介苗二相性真菌

肥達(dá)反應(yīng)外裴反應(yīng)抗-O試驗(yàn)S9Ascoli熱沉淀反應(yīng)菌落總數(shù)

病毒病毒包膜

二、重點(diǎn)復(fù)習(xí)：

1、簡(jiǎn)述食品衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)樣品采樣的原則、種類及特點(diǎn)。

2、菌種保存的方法、特點(diǎn)及菌種保管的規(guī)章制度。防止菌種退化的主要措施有哪些？

3、細(xì)菌外毒素的特點(diǎn)。

4、大腸菌群的定義，食品中大腸菌群數(shù)是指什么？

5、致病性葡萄球菌有哪些重要特點(diǎn)？

6、簡(jiǎn)述腸桿菌科細(xì)菌共同的生物學(xué)特性，如何初步區(qū)分腸道致病菌與非致病菌？

7、鑒定A群、B群鏈球菌的特征性生化試驗(yàn)。

8、如何區(qū)別肺炎鏈球菌與草綠色鏈球菌？

9、小結(jié)KIA、MIU、O/F、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)及SS、MaCC平板的指示劑.10、小結(jié)微生物學(xué)生化試驗(yàn)中常用酸堿指示劑（如酚紅、甲基紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚

藍(lán)、中性紅）的顯色特點(diǎn)。

11、比較大腸埃希菌、沙門菌、志賀菌、變形桿菌在KIA、MIU上的表現(xiàn)及腸道選擇性培養(yǎng)

基（SS、麥康凱）上的菌落特點(diǎn)。

12、沙門菌細(xì)菌學(xué)檢查標(biāo)本采集的原則。

13、變形桿菌的鑒定依據(jù)。

14、結(jié)腸炎耶爾森菌的重要特征。

15、如何對(duì)疑為霍亂的病人標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)？

16、試述銅綠假單胞菌的主要生物學(xué)特性。

17、蠟樣芽胞桿菌的形態(tài)與培養(yǎng)特性、選擇性培養(yǎng)基，所致疾病。

18、軍團(tuán)菌的形態(tài)與培養(yǎng)特性、培養(yǎng)基，所致疾病、傳播方式

19、肉毒桿菌的形態(tài)特征、肉毒外毒素的特點(diǎn)及致病機(jī)制、所致疾病、傳播方式。

20、試述炭疽桿菌的主要生物學(xué)性狀、致病物質(zhì)及所致疾病類型。

21、結(jié)核分枝桿菌的形態(tài)培養(yǎng)特點(diǎn)（培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、生長(zhǎng)表現(xiàn)）及抵抗力。

22、試述Ames試驗(yàn)的原理、試驗(yàn)菌株、主要方法及結(jié)果判定。

23、細(xì)菌的分類標(biāo)記有哪些？簡(jiǎn)述細(xì)菌的分類方法及特點(diǎn)。

24、測(cè)定DNA堿基組成的方法及意義，判定同屬不同種及同一種內(nèi)不同菌株的標(biāo)準(zhǔn)分別是什

么？（注：同一個(gè)種內(nèi)的不同菌株的G+C mol %差別應(yīng)在4%～5%以下。同屬不同種的G+C mol %

差別應(yīng)在10%～15%以下，通常低于10%。）

25、常見的微生物突變類型有哪些？各有何特點(diǎn)？（營(yíng)養(yǎng)缺陷型、抗藥性突變型、條件致

死突變型、形態(tài)突變型）

注：抗藥性突變型的特點(diǎn)是正選擇標(biāo)記（即突變株可直接從抗性平板上獲得，在加有相

應(yīng)抗生素的平板上，只有抗性突變能生長(zhǎng)。）

營(yíng)養(yǎng)缺陷突變型的特點(diǎn)是在選擇培養(yǎng)基（一般為基本培養(yǎng)基）上不生長(zhǎng)，即負(fù)選擇標(biāo)記。

26、數(shù)值分類法與傳統(tǒng)方法的區(qū)別。

27、什么是真菌，病原性真菌的培養(yǎng)條件與細(xì)菌有何不同？

第五篇：微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)

微生物實(shí)驗(yàn)總結(jié)

姓名:趙葉鋒班級(jí)：食品科學(xué)113學(xué)號(hào)：2011013522

大三的第二學(xué)期塊結(jié)束了，這個(gè)學(xué)期操作了四個(gè)微生物實(shí)驗(yàn)，以及一個(gè)自主設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)。通過前階段對(duì)四個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作和認(rèn)知的基礎(chǔ)上，展開第五個(gè)實(shí)驗(yàn)的自主設(shè)計(jì)。實(shí)驗(yàn)分別是菌落總數(shù)測(cè)定，霉菌和酵母的檢查和計(jì)數(shù)，乳酸菌的檢驗(yàn)，微生物藥敏試驗(yàn)以及探討環(huán)境因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響。

這學(xué)期的微生物實(shí)驗(yàn)是在上學(xué)期微生物實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上的累積和擴(kuò)展延伸：以培養(yǎng)基的制備與滅菌，玻璃器皿的洗滌、包扎和滅菌，微生物接種技術(shù)和細(xì)菌的革蘭氏染色為技術(shù)基礎(chǔ)進(jìn)行的，以加強(qiáng)學(xué)生基礎(chǔ)理論知識(shí)和基本技能的培養(yǎng)為目的。

下面我來談?wù)勎以趯?shí)驗(yàn)中的心得體會(huì)。

第一個(gè)實(shí)驗(yàn)是菌落總數(shù)測(cè)定。讓我重新認(rèn)識(shí)了一下這個(gè)名詞：菌落形成單位，我現(xiàn)在的理解就是：1ml或者1g待測(cè)樣品中菌落的個(gè)數(shù)，一定要注意的是單位是CFU/ml或CFU/g。還有就是要掌握好對(duì)高壓蒸汽滅菌鍋的操作。實(shí)驗(yàn)之前要充分做好預(yù)習(xí)工作，以便實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。由于是測(cè)定微生物實(shí)驗(yàn)，就要尤其小心其他雜菌的混入影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此要做好實(shí)驗(yàn)儀器和各種試劑的滅菌，有培養(yǎng)皿，試管，移液槍頭（裝在盒子中），按要求配置好的瓊脂培養(yǎng)基和生理鹽水，按各自要求用紗布和報(bào)紙包扎好，送入高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌。玻璃儀器在包扎前要進(jìn)行清洗，并烘干，以免水分沾濕報(bào)紙。滅完菌后取出物品進(jìn)入超凈工作臺(tái)，超近工作臺(tái)的紫外燈在進(jìn)入20分鐘前開啟，并在進(jìn)入時(shí)關(guān)閉，以免影響人體。要對(duì)臺(tái)面進(jìn)行消毒處理，用酒精擦拭?？梢栽诘却傊囵B(yǎng)基冷卻到50攝氏度左右前對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行10倍系列稀釋至需要的濃度。要注意的是一定要標(biāo)記好濃度或者按順序排列在試管架上以免弄混，同一個(gè)試管里吸取樣品才能用同一個(gè)槍頭進(jìn)行移液。再進(jìn)行平板接種。待瓊脂培養(yǎng)基冷卻好后，用右手打開紗布并將錐形瓶拿住，將瓶口靠近酒精燈再進(jìn)行滅菌，左手拿培養(yǎng)皿用大拇指和食指稍微打開培養(yǎng)皿蓋，將瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中心內(nèi)，不用倒很多，使瓊脂培養(yǎng)基沒過培養(yǎng)皿表面即可。培養(yǎng)皿一定是平拿在手上的，倒好后輕輕蓋上培養(yǎng)皿蓋，緩慢地平方在超凈工作臺(tái)臺(tái)面邊緣處，再推至中間。再用移液槍取1ml樣品快速打入培養(yǎng)皿中央，蓋上培養(yǎng)皿蓋，然后用手輕輕搖晃，千外不要太大力。然后貼上標(biāo)簽記號(hào)，靜置。如此依次操作下去。靜置一段時(shí)間待培養(yǎng)基凝固后倒置放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)一段時(shí)間再取出進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。

我們組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不甚理想，培養(yǎng)皿中的微生物都是連成一片的，或者是培養(yǎng)皿壁上也都長(zhǎng)著，主要是由于待測(cè)樣品打入培養(yǎng)皿后，搖晃不均勻或者太大力了，以至于菌液沒分散開來或是跑到培養(yǎng)皿壁上去了。

第五個(gè)實(shí)驗(yàn)是自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響。選取3個(gè)環(huán)境因素物理、化學(xué)和生物因素均可進(jìn)行設(shè)計(jì)。根據(jù)前四個(gè)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)，通過小組探討和交流設(shè)計(jì)出實(shí)驗(yàn)方案。并加以驗(yàn)證。通過自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)可以結(jié)合小組的智慧，加強(qiáng)團(tuán)隊(duì)協(xié)作精神和創(chuàng)新思維，通過實(shí)驗(yàn)可以驗(yàn)證理論，增加感性認(rèn)識(shí)，培養(yǎng)獨(dú)立工作能力和思考能力，并使具有過硬的專業(yè)技術(shù)水平。

通過這次的實(shí)驗(yàn)，我明白了任何事情丟不是一蹴而就的，而是一個(gè)慢慢積累的過程。雖然實(shí)驗(yàn)結(jié)果不是很理想，但是我參與了過程，通過小組討論我們也分析了失敗的原因，找到了解決的方法，避免了下一次失誤。并且從中理解了團(tuán)隊(duì)討論和合作的重要性。以上即是我的全部感想。