第一篇：冰海活性菌護(hù)膚功效分析

冰?；钚跃o(hù)膚功效分析

海洋是生命之源，是人類物質(zhì)資源的天然寶庫，海洋生物量約占地球生物總量的80%，生物種類在20萬種以上，蘊(yùn)藏著讓人意想不到的護(hù)膚力量。其中海洋活性菌是海洋微生物中的優(yōu)勢類群，具有產(chǎn)生生物活性物質(zhì)的巨大潛力。

科學(xué)家在萬年冰封的南極洲沃斯托克(Vostok)冰海發(fā)現(xiàn)了一種極其活躍的特殊活性菌，我們叫它冰海活性菌。它在冰海的極度低溫下幾萬年來極其緩慢的生長，持續(xù)生活在冰海最原始、最純凈的環(huán)境中，進(jìn)化出一種強(qiáng)大的免疫防御功能，能根據(jù)環(huán)境變化自然分泌含有大量蛋白質(zhì)和生物糖類的體外聚合物，來防御寒冷和環(huán)境的刺激，防止細(xì)胞和DNA損傷。冰海活性菌具有強(qiáng)大的修復(fù)和保護(hù)功能，能夠顯著促進(jìn)膠原蛋白和彈性蛋白的生成?？茖W(xué)家們充分利用這種活性菌的特性，經(jīng)過多年精心研制，最終研制出了強(qiáng)大的彈力塑顏成分——冰海活性菌酵素。經(jīng)過反復(fù)實(shí)驗(yàn)和驗(yàn)證，冰海活性菌酵素含有豐富的蛋白質(zhì)、糖類和多重微量元素，能夠促進(jìn)膠原蛋白和彈性蛋白的形成，在保濕的同時有效愈合皮膚損傷，對皮膚的彈力塑顏有明顯的作用。

因?yàn)樗煞值奶烊恍?、稀缺性和高功效性，如今冰?；钚跃退匾驯贿\(yùn)用到護(hù)膚品中，例如國內(nèi)海洋護(hù)膚品牌珀萊雅，推出的海能量塑顏潤護(hù)霜，就蘊(yùn)含這種成分，再配合海洋膠原、海洋深層水等多重護(hù)膚精華，可以幫助肌膚建立防御屏障，隔絕紫外線、環(huán)境污染和生活壓力等因素帶來的各種肌膚傷害，增加肌膚抵抗力。同時深層滋養(yǎng)每寸肌膚，促進(jìn)肌膚中隨著歲月流逝的膠原蛋白和彈性膠原蛋白快速再生，在不知不覺中更加彈潤、緊致，強(qiáng)大的彈力修復(fù)機(jī)制幫助臉部重塑。

第二篇：大葉山楝拮抗內(nèi)生真菌DYSJ3的鑒定及抑菌活性產(chǎn)物分析

大葉山楝拮抗內(nèi)生真菌DYSJ3的鑒定及抑菌活性產(chǎn)物分析

摘要：從大葉山楝體內(nèi)分離得到1株內(nèi)生真菌DYSJ3，發(fā)現(xiàn)其對香蕉炭疽病菌、橡膠炭疽病菌、香蕉枯萎病菌和芒果炭疽病菌具有較強(qiáng)的拮抗作用，皿內(nèi)抑制率分別為61.9%、57.9%、55.3%和65.9%。通過形態(tài)學(xué)觀察結(jié)合ITS序列分析，初步將菌株DYSJ3鑒定為雜色曲霉（Aspergillus versicolor）。對菌株DYSJ3產(chǎn)生的抑菌活性物質(zhì)進(jìn)行了初步分析，發(fā)現(xiàn)菌株DYSJ3的抑菌活性物質(zhì)集中于菌絲體中，其菌絲體乙酸乙酯浸提物對多種植物病原真菌具有較強(qiáng)的抑菌活性，且熱穩(wěn)定性較好，100 μg/mL浸提物對香蕉炭疽病菌及蘋果輪紋病菌具有明顯抑制活性，抑制率分別為 72.7% 和62.0%。當(dāng)濃度為1 000 μg/mL時，浸提物對香蕉炭疽病菌、蘋果輪紋病菌、黃瓜枯萎病菌、橡膠炭疽病菌、小麥赤霉病菌的抑制率均大于90%。

關(guān)鍵詞：大葉山楝；內(nèi)生真菌；雜色曲霉；抑菌活性

中圖分類號： S182文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號：1002-1302（2016）05-0181-03

大葉山楝（Aphanamixis grandifolia）為楝科（Meliaceae）山楝屬（Aphanamixis）植物，主要分布于廣東、廣西、云南、海南等低海拔至中海拔山地溝谷密林或疏林地區(qū)，是一種傳統(tǒng)的中藥?！缎氯A本草綱要》記載大葉山楝的根及葉具有祛風(fēng)除濕、舒筋活絡(luò)及通痹等功效，為祛風(fēng)止痛藥。據(jù)文獻(xiàn)報道，大葉山楝中主要含有倍半萜、二萜、三萜等萜類成分和甾體等，具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤等活性[1-3]。Zeng等從大葉山楝中分離到四環(huán)三萜、倍半萜、木脂素、苯丙素、二肽類等化合物，并選出多個具有腫瘤細(xì)胞抑制活性的單體化合物[4]；黃淼等從大葉山楝根分離得到9 個化合物，發(fā)現(xiàn)多個化合物對慢性髓原白血病細(xì)胞K562和人胃癌細(xì)胞SGC-7901有生長抑制活性[5]。然而，目前關(guān)于大葉山楝內(nèi)生真菌的研究鮮有報道。本研究從大葉山楝體內(nèi)分離出1株內(nèi)生真菌DYSJ3，發(fā)現(xiàn)其對多種植物病原菌具有較好的拮抗活性，通過形態(tài)觀察結(jié)合ITS序列分析對該菌株進(jìn)行鑒定，并對其產(chǎn)生的抗菌活性物質(zhì)進(jìn)行初步分析。

1材料與方法

1.1菌株

內(nèi)生真菌DYSJ3從大葉山楝中經(jīng)組織表面消毒分離獲得。

供試真菌：香蕉枯萎病菌（Fusarium oxysporum sp.cubense）、黃瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum sp.cucumerinum）、小麥赤霉病菌（Fusarium graminearum）、香蕉炭疽病菌（Colletotrichum musae）、橡膠炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、芒果炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、蘋果輪紋病菌（Botryosphaeria berengriana sp.piricola）由海南大學(xué)環(huán)境與植物保護(hù)學(xué)院提供。

1.2培養(yǎng)基

PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，蒸餾水 1 000 mL。

LB培養(yǎng)基：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，氯化鈉10 g，蒸餾水1 000 mL。

CM培養(yǎng)基：胰化蛋白胨6 g，酵母提取物6 g，蔗糖10 g，蒸餾水1 000 mL。

1.3菌種活化及平板拮抗試驗(yàn)

將內(nèi)生真菌DYSJ3及植物病原真菌接種于PDA平板上，28 ℃培養(yǎng)5～7 d活化待用。用5 mm打孔器在培養(yǎng)5～7 d的供試內(nèi)生真菌、病原真菌平板的菌落邊緣取菌餅，將病原真菌置于PDA平板中央，菌株DYSJ3置于平板邊緣，以只接種病原真菌的PDA平板為對照，每個處理3個重復(fù)，28 ℃培養(yǎng)5～7 d，測量菌落半徑（mm），計算抑菌率。抑菌率=（對照組菌落半徑-處理組菌落半徑）/對照組菌落半徑×100%。

1.4菌株DYSJ3鑒定

將菌株DYSJ3接種于PDA培養(yǎng)基上，28 ℃培養(yǎng)3～7 d，從第3天開始每天挑取少量菌絲于載玻片上，在顯微鏡下觀察氣生菌絲、分生孢子等，拍照并描述特征。

菌株基因組DNA提取采用CTAB法[6]，利用ITS通用引物（ITS 1：5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′，ITS 4：5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′）進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR反應(yīng)體系為：10×buffer 2.5 μL，Taq酶0.25 μL，dNTPs 2 μL，ITS 1 0.5 μL，ITS 4 0.5 μL，dH2O 18.25 μL，模板1 μL，總體積 25 μL。PCR反應(yīng)條件為：95 ℃預(yù)變性5 min；95 ℃變性30 s，60 ℃退火30 s，72 ℃ 延伸1 min，30個循環(huán)；72 ℃延伸 30 min。將所得產(chǎn)物用純化試劑盒回收，連接到pMD18-T Vector，由上海英駿生物技術(shù)有限公司進(jìn)行序列測定，將所測序列在GenBank 中（http：//004km.cnpounds and their influence on the susceptibility towards antibiotics of two clinically relevant bacterial strains[J].Mutation Research-Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis，2011，723（1）：18-25.[4]Zeng Q，Guan B，Qin J J，et al.2，3-Seco-and 3，4-seco-tirucallane triterpenoid derivatives from the stems of Aphanamixis grandifolia Blume[J].Phytochemistry，2012，80：148-155.[5]黃淼，梅文莉，蔡彩虹，等.大葉山楝根化學(xué)成分與細(xì)胞毒活性的研究[J].熱帶亞熱帶植物學(xué)報，2015，23（3）：329-333.[6]易潤華，朱西儒，周而勛.簡化CTAB法快速微量提取絲狀真菌DNA[J].湛江海洋大學(xué)學(xué)報，2003，23（6）：72-73.[7]劉冬梅，李理，楊曉泉，等.用牛津杯法測定益生菌的抑菌活力[J].食品研究與開發(fā)，2006，27（3）：110-111.[8]檀根甲，祝建平.殺菌劑生物測定計算方法及應(yīng)用[J].安徽農(nóng)學(xué)通報，1998，4（1）：28-29.[9]董世豪，鞏婷，朱平.相似蜂海綿相關(guān)真菌雜色曲霉F62活性代謝產(chǎn)物研究[J].菌物學(xué)報，2011，30（4）：636-643.[10]鞏婷，董世豪，朱平.海洋真菌雜色曲霉F62丁內(nèi)酯類化合物研究[J].菌物學(xué)報，2014，33（3）：706-712.[11]趙彩桂.山楝、棒孢擬盤多毛孢和雜色曲霉化學(xué)成分研究[D].蘭州：蘭州大學(xué)，2014：65-79.[12]王香粉.五花血藤和海洋真菌雜色曲霉化學(xué)成分的研究[D].保定：河北大學(xué)，2014：55-56.劉健，張德詠，張松柏，等.湖南和福建辣椒上辣椒脈斑駁病毒的檢測及系統(tǒng)發(fā)育分析[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，44（5）：184-185.

第三篇：關(guān)于菌菇種植可行性分析報告

安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)

經(jīng)濟(jì)管理學(xué)院

《市場營銷》實(shí)習(xí)報告

年級專業(yè)：11級財管-2

學(xué) 號：11103216 姓 名：張九

2013年2 月 26 日

目錄

項(xiàng)目投資

一、項(xiàng)目概括..........................................3

（一）項(xiàng)目名稱................................................3

（二）項(xiàng)目背景................................................3

（三）項(xiàng)目具備的條件..........................................4

二、項(xiàng)目論證..........................................4

（一）經(jīng)營現(xiàn)狀................................................5

（二）市場現(xiàn)狀................................................4 1.目前市場和潛在市場..........................................4 2.競爭對手...................................................5 3.競爭優(yōu)勢和劣勢..............................................5

三、項(xiàng)目資金運(yùn)用..............................................5

四、可行性分析結(jié)論............................................6

品牌標(biāo)志設(shè)計

一、圖標(biāo)圖像..................................................6

二、文字說明..................................................7

三、顏色說明..................................................7

價值豐富的食用蘑菇

一：項(xiàng)目概括

1、項(xiàng)目名稱：價值豐富的食用蘑菇

2、項(xiàng)目背景：，食用蘑菇是理想的天然食品或多功能食品。迄今為止在全世界食用最多的食用蘑菇，學(xué)名為雙孢蘑菇，通稱為蘑菇。從野生種類中進(jìn)一步篩選馴化優(yōu)質(zhì)生產(chǎn)菌種大有潛力。中國曾在世界上首次馴化并人工栽培成功了香菇、木耳、金耳、銀耳、草菇、金針菇、猴頭菌、竹蓀等，現(xiàn)已馴化了蒙古口蘑，而野生食用菌美味牛肝菌、羊肚菌、香杏麗蘑、鉚釘菇、粘蓋牛肝菌、正紅菇等也可以大量采集，供銷于國內(nèi)外市場

3、項(xiàng)目所具備條件：隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們生活的水平愈發(fā)上升，對飲食方面更注重營養(yǎng)價值，國內(nèi)的蘑菇市場愈發(fā)繁榮。興起許多以蘑菇為主的企業(yè)，且市場升值快，穩(wěn)定。國家在政策方面也大力扶持。

二、項(xiàng)目論證

1、經(jīng)營現(xiàn)狀：食用蘑菇有其是一些珍貴的蘑菇無論在作為醫(yī)用，觀賞或?qū)嵱梅矫娑季哂泻艽髢?yōu)勢，無論在國際市場還是在國內(nèi)市場上的需求也是明顯的供不應(yīng)求，特別是其藥用價值，當(dāng)今社會高速發(fā)展，人民生活水平的提高，然而太多人群居于身體亞健康狀態(tài)，導(dǎo)致他們對健康越來越重視。所以對于食用菇的種植和經(jīng)營是一項(xiàng)良好的投資。

2、市場現(xiàn)狀：正如上所講，由于食用菇本身渾身都是具有非常高利用價值的寶貝，所以當(dāng)前市場上對于各種菌菇種植以及深加工產(chǎn)業(yè)在近十幾年發(fā)展十分迅速，種植和加工菌菇產(chǎn)品，和在果林中套種菌菇，對發(fā)展山區(qū)經(jīng)濟(jì)，幫助山區(qū)農(nóng)民脫貧致富，幫助農(nóng)民提高果林種植地的經(jīng)濟(jì)效益有十分重要意義。而且國家林業(yè)局曾作出批示： “兼有很好的生態(tài)效益，和極高的經(jīng)濟(jì)效益，國家支持在適當(dāng)范圍大力營造菌菇種植場，社會各界以承包、租賃、拍賣、股份制合作等多種經(jīng)營形式參與營造綠化事業(yè)，應(yīng)予以提倡和鼓勵?！倍揖椒N植與加工純在許多的潛在市場。菌菇可以加工成工藝品出售，作為青年男女互相送給長輩的物品，其銷售前景也是不容小覷的。其次由于其有一定的藥用價值與獨(dú)特的香味，吸引來的競爭者也是不容忽視的。由于菌菇的種植習(xí)性，種植主要地區(qū)一般分布在吉林長白山和黑龍江一帶，云南西北部、西藏南部、和西南部，南方滇東、滇西南、滇東純林等森林落葉林地帶。

3、項(xiàng)目的功能：上面說到菌菇具有很高的利用價值，從這里開始說明其具體

價值.一、藥用價值

從菌菇中提煉出來的一些成份對多種晚期癌癥療效突出，被稱為“治療癌癥的最后一道防線”。高純度提取物價格昂貴，菌菇生產(chǎn)周期短，天然更新能力強(qiáng)，人工種植效益高。

由于其具有獨(dú)特的抗癌機(jī)理，美國國立腫瘤研究所所長BRODER博士稱之是繼阿霉素、順鉑以后，十五年來被認(rèn)為是對多種癌癥療效較好、副作用小的新型抗癌藥物。二十世紀(jì)八十年代開始，美國、英國、俄羅斯、韓國、中國都相繼開展了深入的研究。美國率先把研究成果應(yīng)用于醫(yī)學(xué)臨床并在治療各種癌癥方面取得了顯著的臨床效果。從此人類在抗癌領(lǐng)域中又取得了新的突破。所以到目前為止以至在今后相當(dāng)長的時間內(nèi)，人類同癌癥做抗?fàn)幍牡淖钣欣奈淦髦弧＞街刑崛〉囊恍┧幬锍煞郑哂歇?dú)特的抗癌機(jī)制和較高的抗癌活性，能阻止癌細(xì)胞的繁殖、抑制腫瘤細(xì)胞的遷移，被公認(rèn)是當(dāng)今天然藥物領(lǐng)域中最重要的抗癌活性物質(zhì)。據(jù)專家介紹，其不溶于水或酒精之類溶解物，它的淬取技術(shù)非常復(fù)雜、加工程序十分嚴(yán)密，直接使用菌菇是不能治病的。

全球每年大約死于癌癥的病人在630萬人左右，僅美國、歐洲、日本每年就在400萬人左右。治療這些病人每年大約消耗150000～250000千克原料。一位研究紫杉醇的美國專家說，即使將世界上現(xiàn)有的紅豆杉全部砍伐，所提取的紫杉醇也只能挽救12.50萬名癌癥患者的生命。

特效：利尿消腫、治療腎臟病、糖尿病、腎炎浮腫、小便不利、淋病等。溫腎通經(jīng)、治療月經(jīng)不調(diào)、產(chǎn)后瘀血、痛經(jīng)等到有效的功效。根椐方唯碩博士（方唯碩——1997年畢業(yè)于中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)、藥物化學(xué)博士曾師從于梁曉天教授）的研究結(jié)果，其最早是從短葉紅豆杉的樹皮中分離出來的抗腫瘤活性成份。是治療轉(zhuǎn)移性卵巢癌和乳腺癌的最好藥物之一，同時對肺癌、食道癌也有顯著療效，對腎炎及細(xì)小病毒炎癥有明顯抑制。它的抗癌機(jī)理是：能與微量蛋白結(jié)合，并促進(jìn)其聚合，抑制癌細(xì)胞的有絲分裂，有效阻止癌細(xì)胞的增殖。

二、園林綠化價值：

房前屋后，荒坡空地，道路兩旁也適宜種植，一次種植，多年受益，效益顯著。專家發(fā)現(xiàn)：

1、四畝左右的菌菇，其凈化空氣的功效相當(dāng)于100多棵冬青樹，等于每天置身于60多平方米的天然森林中。

2、當(dāng)室內(nèi)紅豆杉盆景達(dá)到每平方米400個葉片時，能對心絞痛、乳腺炎及乳腺增生引起的疼痛起到明顯緩解作用，還能防止心腦血管疾病的突發(fā)。

4、投資的劣勢和優(yōu)勢

菌菇投資的優(yōu)勢：1：市場前景廣闊，需求大。無論是在藥用方面還是在凈化空氣方面，由于人們對健康的重視越來越高，所以，對于菌菇市場的需求在以后的市場中只會增加而不會減少。2：收益良好。野生的菌菇自然生長速度十分緩慢，但是人工種植可以達(dá)到以數(shù)量彌補(bǔ)生長緩慢的缺陷，且人工種植可以加快其生長 4

速度。3：用途多，可以發(fā)展?jié)撛谑袌?，吸引潛在顧客，從而達(dá)到使成本充分利用而達(dá)到最大效益的結(jié)果。

菌菇種植的劣勢：1:菌菇根據(jù)種類不同，價格成本也不同。如果要是選擇小的成本較低的菌菇但是收回成本的時間就比較長。如果要是選擇好的菌菇，那么成本就相對比較高，但是收回成本的時間也就縮短了。所以，要選擇適合自己投資能力的菌菇種類。2：菌菇種植在近幾年是投資熱點(diǎn)，所以市場競爭比較激烈，要做好風(fēng)險防范措施，同時也要有過硬的種植培養(yǎng)技術(shù)，確保自己的菌菇能夠最少的減少損失，并能以自己的優(yōu)勢打敗其他的競爭者。3：菌菇的成長速度快，要細(xì)心護(hù)理，栽培。所以需要種植者有足夠的資金和人員來維持菌菇成長中所需要的養(yǎng)料等的供應(yīng)。

三、項(xiàng)目資金運(yùn)用

種植業(yè)最重要的就是土地、陽光、水分、適當(dāng)?shù)墓芾砗妥銐虻酿B(yǎng)料。所以，菌菇的種植也是一樣，菌菇是一種喜陰，潮，濕，耐寒又喜陽的植物，根系發(fā)達(dá)，成活率高，不擇“土壤”，但受天氣氣候影響。所以要避免氣象災(zāi)害的影響。首先就是租地。可以在農(nóng)村或郊區(qū)租一塊平坦，寬闊的土地，要有適于菌菇生長的環(huán)境。租地當(dāng)然是越便宜越好，但是又要交通比較便利，那這樣的話，大概800一畝。租10畝，租十年。租金8萬。然后是菌種。春秋2季種植，小苗一畝地2000—3000棵，長個2、3周再移栽刪稀。分批種植，4畝種小苗，其他六畝種大一點(diǎn)的菌菇。4畝樹苗10000棵，每株八塊左右，一共八萬。其他每畝種800棵左右大的菌菇，每株100元左右，一共成本48萬。工人雇傭，除草施肥等一年2萬，十年20萬。肥料等每年5萬，10年50萬（按照現(xiàn)在工資水平和物價來算）。再加上其他一些必要不可預(yù)知的支出10萬。等到半月后，把六畝大一點(diǎn)的菌菇先出出售一部分以回籠資金，然后把4畝種存活下來的菌苗移植到其他空地上。這里工人挖樹苗跟樹苗運(yùn)輸成本要視當(dāng)年勞動報酬標(biāo)準(zhǔn)預(yù)計2萬元左右。所以一共成本為136萬元。

四、可行性分析結(jié)論

人工栽培種植菌菇，是一個前景相當(dāng)廣闊，近二十年不會落伍的種植產(chǎn)業(yè)，作為傳統(tǒng)種植業(yè)，技術(shù)簡單，種植要求不復(fù)雜，無病蟲害，成活率高，市場需求相當(dāng)巨大。

菌菇將來作為一個綠色環(huán)保、健康的種植物，將是高檔植物消費(fèi)的新潮流。這個物種四季常青,秋果鮮艷，給人以健康飽滿的外觀感，耐修剪，好造型，二十年以后將是種植業(yè)的新寵，是藥用、綠化兼用品種，既有生態(tài)效益社會效益，又有經(jīng)濟(jì)效益。當(dāng)前種植菌菇是傳統(tǒng)種植業(yè)和現(xiàn)代生物制藥工程完美結(jié)合的絕佳項(xiàng)目.防治病蟲害也是菌菇種植需要注意的問題，正確的使用化學(xué)藥物以及可園林管理可以給菌菇帶來很好的保護(hù)效益。

品牌標(biāo)志設(shè)計

文字說明：這個圖標(biāo)的外表像一棵正在茁壯成長的大樹，這正是我們公司所追求的目標(biāo)，也是我們公司主營業(yè)務(wù)的代表——菌菇。底下的方塊代表著菌菇種植需要的“土壤”，也代表整個公司團(tuán)結(jié)一致共同致力于菌菇的種植。左上角的圓圈代表紅豆杉種植所需要的陽光因素，表示了公司對自然的尊重與友善。同時也代表公司要向太陽一樣蒸蒸日上。

顏色說明：本圖標(biāo)主要使用的綠色系色調(diào)，既符合了菌菇種植是一項(xiàng)綠色工程，也體現(xiàn)了公司綠色經(jīng)營，誠信經(jīng)營的宗旨；三片葉子采用不同的顏色，說明一個

公司的經(jīng)營需要大家的共同努力；紅色的太陽說明公司正朝著越來越好的趨勢發(fā)展，表達(dá)了公司員工及領(lǐng)導(dǎo)者的信心與決心。

第四篇：染菌的檢查、分析和防止措施

染菌的檢查、原因分析和防止措施

1.染菌的檢查與判斷

在發(fā)酵過程中對雜菌污染的及早發(fā)現(xiàn)，及時處理，是免除染菌造成嚴(yán)重?fù)p失的重要問題。因此，要求有確切、迅速的方法來檢出雜菌的污染，目前常用方法主要有以下幾種：

（1）顯微鏡檢查

通常用革蘭氏染色法，染色后在高倍顯微鏡下觀察。對霉菌、酵母發(fā)酵，先用低倍顯微鏡觀察生產(chǎn)菌的特征，然后再用高倍顯微鏡觀察有否染菌存在，根據(jù)生產(chǎn)菌與雜菌的特征區(qū)別，判斷是否染菌。必要時，可進(jìn)行芽孢和鞭毛染色。

（2）平板劃線培養(yǎng)或斜面培養(yǎng)檢查法

先將經(jīng)滅菌的固體培養(yǎng)基倒入滅菌的平板中置培養(yǎng)箱攝氏37度，保溫24h檢查無菌即可使用。將需要檢查的樣品，在無菌平板上劃線，分別置攝氏37度、攝氏27度培養(yǎng)，以適應(yīng)嗜中菌和低溫菌的生長，一般在8h后即可觀察。

噬菌體檢查可采用雙層平板培養(yǎng)法，底層同為肉汁瓊脂培養(yǎng)基，上層減少瓊脂用量。先將滅菌的底層培養(yǎng)基熔后倒平板，凝固后，將上層培養(yǎng)基熔解并保持?jǐn)z氏40度，加生產(chǎn)菌作為指示菌和待檢樣品混合后迅速倒在底層平板上，置培養(yǎng)箱保溫培養(yǎng)，經(jīng)12~20h培養(yǎng)，觀察有無噬菌斑。

培養(yǎng)基（PH7.0）

葡萄糖（%）牛肉膏（%）蛋白胨（%）氯化鈉（%）瓊脂（%）上層 0.5 1.0 1.0 0.5 1.0 下層 0.5 1.0 1.0 0.5 2.0（3）肉湯培養(yǎng)檢查法

將需要檢查樣品接入經(jīng)滅菌并經(jīng)過檢查無菌的肉湯培養(yǎng)基中，放置攝氏37度和攝氏27度分別培養(yǎng)24h，進(jìn)行觀察，并取樣鏡檢。此法常用于檢查培養(yǎng)基和無菌空氣是否帶菌，也可用于噬菌體檢查，此時使用生產(chǎn)菌作為指示菌。

葡萄糖酚紅肉湯培養(yǎng)基：牛肉膏0.3%，葡萄糖0.5%，氯化鈉0.5%，蛋白胨0.8%，1%酚紅溶液0.4%，PH7.2。

用以上的檢查方法檢查未發(fā)現(xiàn)污染，還不能肯定未被污染。除以上方法外，還可以從發(fā)酵過程的異?，F(xiàn)象來判斷是否染菌，如溶解氧、PH值、排氣中CO2含量和菌體酶活力等變化來判斷。

2.發(fā)酵染菌率和染菌原因分析（1）發(fā)酵染菌率

發(fā)酵的總?cè)揪适侵敢荒陜?nèi)發(fā)酵染菌的批數(shù)與總投料發(fā)酵批數(shù)之比。

發(fā)酵染菌是在發(fā)酵罐中發(fā)生的染菌率，包括染菌后被挽救不了導(dǎo)致倒罐的批數(shù)，但種子罐培養(yǎng)的染菌不接入發(fā)酵罐，不導(dǎo)致發(fā)酵染菌的另行計算。

（2）染菌原因分析

在發(fā)酵染菌之后，必須分析染菌原因，總結(jié)發(fā)酵染菌的經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，把發(fā)酵染菌消滅在發(fā)生之前，防患于未然，是積極制服發(fā)酵染菌的最重要措施。

造成發(fā)酵染菌的原因很多，但總結(jié)歸納起來，其主要原因有：無菌空氣帶菌、設(shè)備滲漏、滅菌不徹底、操作失誤和技術(shù)管理不善。在發(fā)生染菌后，根據(jù)無菌試驗(yàn)結(jié)果，參考以下方法進(jìn)行分析，找出原因，杜絕污染。

（A）

從染菌時間來看，發(fā)酵早期染菌，可能原因有：種子帶菌，培養(yǎng)基和設(shè)備滅菌不徹底，接種操作不當(dāng)，無菌空氣帶菌；發(fā)酵后期染菌，可能原因有：中間補(bǔ)料污染，設(shè)備滲漏，操作問題。

（B）

從污染的雜菌種類來看，污染耐熱的芽孢桿菌，可能是培養(yǎng)基或設(shè)備滅菌不徹底；污染球菌、無芽孢桿菌等不耐熱雜菌可能是種子帶菌，設(shè)備滲漏；污染霉菌，一般是無菌室滅菌不徹底或操作問題。

（C）

從染菌的幅度來看，如果各個發(fā)酵罐或多個發(fā)酵罐染菌，而且所污染的是同一種雜菌，一般是空氣系統(tǒng)問題；如果各別罐連續(xù)染菌，一般是設(shè)備問題。

以上僅僅是在分析問題時作為考慮問題的入門，應(yīng)根據(jù)具體情況綜合分析，且通過進(jìn)一步的無菌檢查來驗(yàn)證。

3.雜菌污染途徑及預(yù)防（1）種子帶菌及防止

種子帶菌的原因主要有以下幾方面（A）培養(yǎng)基及用具滅菌不徹底

菌種培養(yǎng)基及用具滅菌均在滅菌鍋中進(jìn)行，造成滅菌不徹底主要是滅菌時鍋內(nèi)空氣排放不完全，造成假壓，使滅菌時溫度還達(dá)不到要求。

（B）菌種在移種過程中受污染

菌種的移接工作是在無菌室中，按無菌操作進(jìn)行。當(dāng)菌種移接操作不當(dāng)，或無菌室管理不嚴(yán)，就可能引起污染。因此，要嚴(yán)格無菌室管理制度和嚴(yán)格按無菌操作接種，合理設(shè)計無菌室。

（C）菌種在培養(yǎng)過程或保藏過程中受污染

菌種在培養(yǎng)過程和保藏過程中，由于外界空氣進(jìn)入，也使雜菌進(jìn)入而受污染。為了防止污染，試管的棉花塞應(yīng)有一定的緊密度，不宜太松，且有一定長度，培養(yǎng)和保藏溫度不宜變化太大。每一級種子培養(yǎng)物均應(yīng)經(jīng)過嚴(yán)格檢查，確認(rèn)未受污染才能使用。

（2）無菌空氣帶菌及防止

無菌空氣帶菌是發(fā)酵染菌的主要原因之一。杜絕無菌空氣帶菌，必須從空氣凈化流程和設(shè)備的設(shè)計，過濾介質(zhì)的選用和裝填，過濾介質(zhì)的滅菌和管理等方面完善空氣凈化系統(tǒng)。

（3）培養(yǎng)基和設(shè)備滅菌不徹底導(dǎo)致染菌及防止

培養(yǎng)基和設(shè)備滅菌不徹底的原因，主要與以下幾個方面有關(guān)（A）原料形狀

一般稀薄的培養(yǎng)基容易滅菌徹底，而淀粉質(zhì)原料，特別是有顆粒時，容易由于滅菌不徹底，造成染菌。淀粉質(zhì)培養(yǎng)基滅菌以采用實(shí)罐滅菌為好，在升溫時先攪拌混合均勻，并加一定量的淀粉酶邊加邊液化。

（B）實(shí)罐滅菌時未充分排除罐內(nèi)空氣

實(shí)罐滅菌時，罐內(nèi)空氣未完全排除，造成“假壓”，使罐頂空間局部溫度達(dá)不到滅菌要求，導(dǎo)致滅菌不徹底而污染。為此，在實(shí)罐滅菌升溫時，應(yīng)打開排氣閥門及有關(guān)聯(lián)接管的邊閥、壓力表接管邊閥，使蒸汽通過達(dá)到徹底滅菌。（C）培養(yǎng)基連續(xù)滅菌時，蒸汽壓力波動大，培養(yǎng)基未達(dá)到滅菌溫度，導(dǎo)致滅菌不徹底而污染。培養(yǎng)基連續(xù)滅菌應(yīng)嚴(yán)格控制滅菌溫度，最好采用自動控制裝置。

（D）設(shè)備、管道存在“死角” 由于操作、設(shè)備結(jié)構(gòu)、安裝或人為造成的屏障等原因，引起蒸汽不能有效到達(dá)或不能充分到達(dá)預(yù)定應(yīng)該到達(dá)的局部滅菌部位，從而不能到達(dá)徹底滅菌的要求。這些不能徹底滅菌的部位稱為“死角”，“死角”可以是設(shè)備、管道的某一部位，也可以是培養(yǎng)基或其他物料的某一部分。管道多指法蘭連接處等。

（4）設(shè)備滲漏引起染菌及防止

發(fā)酵設(shè)備、管道、閥門的長期使用，由于腐蝕、摩擦和振動等原因，往往造成滲漏。例如：設(shè)備的表面或焊縫處有砂眼，由于腐蝕逐漸加深，最終導(dǎo)致穿孔；冷卻管受攪拌器作用，長期磨損，焊縫處受冷熱和振動產(chǎn)生裂縫而滲漏。為了避免設(shè)備、管道、閥門滲漏，應(yīng)選用優(yōu)質(zhì)的材料，并經(jīng)常進(jìn)行檢查。冷卻蛇管的微小滲漏不易被發(fā)現(xiàn)，可以壓入堿性水，在罐內(nèi)可疑地方，用浸濕酚酞指示劑的白布擦，如有滲漏時白布顯紅色。

（5）操作問題

上面已指出，在菌種培養(yǎng)過程中，如操作不當(dāng)會引起染菌。在發(fā)酵過程如操作不當(dāng)也引起染菌，如移種時或發(fā)酵過程罐內(nèi)壓力跌零，使外界空氣進(jìn)入而染菌；泡沫頂蓋而造成污染；壓縮空氣壓力突然下降，使發(fā)酵液倒流入空氣過濾器而造成污染；等等。防止操作失誤引起染菌，要加強(qiáng)對技術(shù)工人的技術(shù)培訓(xùn)和責(zé)任教育，提高工人素質(zhì)，加強(qiáng)管理措施。

第五篇：醫(yī)院多重耐藥菌監(jiān)測總結(jié)分析范文

常州市XX醫(yī)院多重耐藥菌監(jiān)測總結(jié)分析

2012年1----6月住院患者中發(fā)生金黃色葡萄球菌、腸球菌屬、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌感染 195例次，其中多重耐藥菌感染72例次，占比為37%。醫(yī)院感染為134例次，屬于多重耐藥菌醫(yī)院感染為21例次，占比為15.7 %。

醫(yī)院病原菌情況

多重耐藥菌感染與多重耐藥菌醫(yī)院感染分析 2012年1月-6月住院患者中發(fā)生金黃色葡萄球菌、腸球菌屬、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌感染195例次。其中多藥耐藥菌感染72例次。其中產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶（或耐第三、第四代頭孢類）腸桿菌科細(xì)菌38株，占比52.8%。其次為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌26株，占比為36.1%。檢出多重耐藥的鮑曼不動桿菌3例，其中1例耐碳青酶烯類，檢出多重耐藥的銅綠假單胞菌4例。未檢出耐萬古霉素腸球菌和泛耐藥鮑曼、銅綠假單胞菌。1---6月共發(fā)生耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、腸球菌屬、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌醫(yī)院感染21例次。分布在外科、內(nèi)科、腫瘤科等。

多重耐藥菌感染科室：以五病區(qū)（外科）最高為33.3%，其次內(nèi)科為22.2%。腫瘤內(nèi)科15.3%，放療科等科室。

多重耐藥菌感染部位：以呼吸系統(tǒng)最高，這與我國醫(yī)院感染構(gòu)成主要部位一致。其次為手術(shù)部位，這些部位的標(biāo)本主要來自引流液、傷口分泌物，這與外科近半年收治患者大多為晚期腫瘤病人，均曾經(jīng)或正在接受化療、放療免疫抑制劑等治療，為其采取了姑息性手術(shù)方案，以延緩生命的方法有關(guān)。尚有數(shù)例化膿性、壞疽性闌尾炎在手術(shù)過程中留取膿性分泌物培養(yǎng)等。鑒于此在平時工作中，這些病房的環(huán)境衛(wèi)生、手衛(wèi)生、規(guī)范使用抗菌藥物、建立抗菌藥物預(yù)警機(jī)制、對多藥耐藥菌預(yù)防控制措施的落實(shí)等是我們必須多加關(guān)注。

院感科 2012--07-10