第一篇：中醫(yī)大實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)重點(diǎn)要點(diǎn)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:是經(jīng)人工飼育、對(duì)其攜帶的微生物實(shí)行控制、遺傳背景明確或者來(lái)源清楚的，用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定以及其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的三大特點(diǎn):遺傳背景明確,來(lái)源清楚;對(duì)其攜帶的微生物、寄生蟲進(jìn)行人工控制;用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物:一切用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物。(野生動(dòng)物；經(jīng)濟(jì)動(dòng)物；觀賞動(dòng)物;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物的區(qū)別：實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物是指所有用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物，包括實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。而實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是為研究的需要而培育的。確定是否是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，要經(jīng)過(guò)一系列檢測(cè)，如微生物和遺傳基因等，經(jīng)專家鑒定才能稱其為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是為科研、教學(xué)、藥品檢定等目的，對(duì)動(dòng)物進(jìn)行物理、化學(xué)和生物因素處理，觀察其反應(yīng)，獲得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，解決科研中的問(wèn)題。即如何使動(dòng)物實(shí)驗(yàn)合理化、規(guī)范化。簡(jiǎn)而言之，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)就是關(guān)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)規(guī)范化的科學(xué)。3R 原則：減少；替代；優(yōu)化

研究熱點(diǎn):基因治療;異種器官移植;基因工程動(dòng)物研究;3R研究 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究的重要支撐條件

AEIR要素：在生命科學(xué)領(lǐng)域里進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究有四個(gè)支撐條件，即AEIR要素。即A：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；E：儀器設(shè)備；I：情報(bào)信息；R：化學(xué)試劑

自然分類的方法：即根據(jù)動(dòng)物的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理機(jī)能、生態(tài)和地理分布等方面作為分類的標(biāo)準(zhǔn)。

種是分類的基本單位，它不是單獨(dú)的個(gè)體，而是一群特性相似的個(gè)體總稱。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物現(xiàn)在一般按下列兩種方法進(jìn)行分類：按遺傳學(xué)控制分類;按微生物學(xué)控制分類 品種：是人們根據(jù)不同需要而對(duì)動(dòng)物進(jìn)行改良、選擇，即定向培育，并具有某種特定外形和生物學(xué)特性的動(dòng)物群體，其特性能較穩(wěn)定地遺傳。

品系： 指來(lái)源明確，并采用某種交配方法繁殖，而具有相似的外貌、獨(dú)特的生物學(xué)特征和穩(wěn)定的遺傳特性，可用于不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡膭?dòng)物群體。

按遺傳學(xué)控制分類，實(shí)際上是根據(jù)基因的純合程度來(lái)分，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可分為:近交系;封閉群;雜交群

近交：血統(tǒng)和親緣關(guān)系相近兩個(gè)體間的交配，針對(duì)某一性狀來(lái)說(shuō)指基因型相同或相近的兩個(gè)體之間的交配。

近交效應(yīng)：使基因純合；產(chǎn)生近交衰退

在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的育種中，多采用全同胞兄妹交配的形式。

近交系：經(jīng)至少連續(xù)20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系內(nèi)所有個(gè)體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對(duì)共同祖先。亞系：殘余雜合性；突變；遺傳污染

3、近交系的特征：①基因純合性 ②同基因性③表現(xiàn)型的均一性 ④遺傳穩(wěn)定性⑤可辨識(shí)性⑥個(gè)體性⑦國(guó)際分布⑧背景資料的可查性

近交系小鼠（除地鼠以外）國(guó)際命名法是近交系動(dòng)物命名的基本參照法。

封閉群動(dòng)物：以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群，在不從其外部引入新個(gè)體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上。

雜交群：兩個(gè)近交品系動(dòng)物之間進(jìn)行有計(jì)劃交配所獲得的第一代動(dòng)物。系統(tǒng)雜交動(dòng)物（F1動(dòng)物）雜種F1代動(dòng)物不是一個(gè)品系或品種

命名：其雜交動(dòng)物的雌性親代名稱在前，雄性親代名稱居后，二者間以大寫英文字母“X”相連表示雜交。

鼠痘病毒：鼠痘是由鼠痘病毒引起的傳染病。急性引起大批動(dòng)物死亡。亞急性或慢性使患鼠肢尾腫脹，發(fā)炎和壞疽脫落，呈“缺肢”畸形。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常見(jiàn)細(xì)菌感染對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾：引起人獸共患病的細(xì)菌;動(dòng)物致病菌;條件致病菌 按對(duì)微生物控制的凈化程度,國(guó)際上把實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為：無(wú)菌動(dòng)物；悉生動(dòng)物；無(wú)特殊病原體動(dòng)物（SPF動(dòng)物）；普通動(dòng)物

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在我國(guó)分四級(jí)：無(wú)菌動(dòng)物;無(wú)特定病原體動(dòng)物(SPF動(dòng)物);清潔動(dòng)物;普通動(dòng)物 無(wú)菌動(dòng)物：以無(wú)菌技術(shù)獲得，用現(xiàn)有的科學(xué)知識(shí)和檢測(cè)技術(shù)，不能從動(dòng)物體表及體內(nèi)檢出任何活的微生物和寄生蟲的動(dòng)物。

無(wú)”: 不是絕對(duì)的，而是相對(duì)的，是以現(xiàn)有的科學(xué)知識(shí)和檢測(cè)技術(shù)不能檢測(cè)出活的微生物和寄生蟲。“菌”：細(xì)菌、病毒、支原體、衣原體、立克次氏體、螺旋體、真菌、寄生蟲 “非一過(guò)性無(wú)菌”：不是用抗生素來(lái)得到的一過(guò)性的無(wú)菌，而是以無(wú)菌技術(shù)獲得的。

在1895年Nuttall等人經(jīng)剖腹產(chǎn)，用牛奶飼喂獲得了無(wú)菌豚鼠，無(wú)菌動(dòng)物的培育和使用是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的第二次重大進(jìn)展。

廣義的悉生動(dòng)物包括無(wú)菌動(dòng)物，悉生動(dòng)物、SPF動(dòng)物。狹義的僅指悉生動(dòng)物。

悉生動(dòng)物：通常是指在無(wú)菌動(dòng)物的基礎(chǔ)上，經(jīng)人工植入已知菌的動(dòng)物，又稱為已知菌動(dòng)物或已知菌從動(dòng)物。

無(wú)特定病原體動(dòng)物：指不攜帶人獸共患病原體，而且不攜帶主要潛在感染或條件致病和對(duì)科研實(shí)驗(yàn)干擾大的病原體的動(dòng)物?；蛑竸?dòng)物體內(nèi)無(wú)特定的微生物和寄生蟲存在，但帶有非特定的微生物和寄生蟲的動(dòng)物。悉生動(dòng)物與ＳＰＦ動(dòng)物的異同：

相同點(diǎn)：體內(nèi)都無(wú)病原微生物，但都帶有非致病的其它微生物種類。

不同點(diǎn)：悉生：帶哪些微生物是清楚明了的。SPF：只清楚體內(nèi)排除了哪些微生物，真正體內(nèi)帶有微生物的情況是不清楚的。

普通動(dòng)物：是微生物控制標(biāo)準(zhǔn)最低的動(dòng)物。對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的反應(yīng)性較差

按微生物學(xué)控制標(biāo)準(zhǔn),即根據(jù)微生物的凈化程度及攜帶的寄生蟲狀況,將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四級(jí): 一級(jí),普通級(jí)動(dòng)物；二級(jí),清潔級(jí)動(dòng)物；三級(jí),無(wú)特定病原體動(dòng)物（SPF）；四級(jí),無(wú)菌動(dòng)物。衛(wèi)生部級(jí)課題及研究生畢業(yè)論文等科學(xué)實(shí)驗(yàn)必須應(yīng)用清潔級(jí)以上的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物”。

環(huán)境控制： 是研究飼養(yǎng)條件對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康和質(zhì)量所產(chǎn)生的影響，以及研究改善飼養(yǎng)條件的措施。

飼養(yǎng)條件：飼養(yǎng)過(guò)程、飼養(yǎng)管理、飼養(yǎng)環(huán)境

環(huán)境因素的分類：

1、氣候因素：溫度、濕度、氣流、風(fēng)速等

2、物理因素：照明、噪音、粉塵等。

3、化學(xué)因素：空氣（O2和CO2）、臭氣（NH3、H2S）和各種有害氣體（SO2、NO2）

4、居住因素：房舍、飼養(yǎng)籠具、墊料、喂食器和飲水器，內(nèi)環(huán)境等。

5、生物因素：微生物、動(dòng)物密度、人、動(dòng)物之間

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的基地選擇要求如下： 應(yīng)避開(kāi)自然疫源地； 宜環(huán)境安靜；宜環(huán)境空氣質(zhì)量較好;應(yīng)遠(yuǎn)離易燃、易爆物品的生產(chǎn)和儲(chǔ)存區(qū)，并遠(yuǎn)離高壓線路及其設(shè)施； 距離公共場(chǎng)所和居住建筑應(yīng)間距應(yīng)不少于 20m。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物控制程度和空氣凈化程度分為：隔離系統(tǒng)；屏障系統(tǒng)；開(kāi)放系統(tǒng)

1、動(dòng)物飼育室的建筑：

（1）墻壁：要求光潔平滑、無(wú)裂口、耐腐蝕、耐洗滌劑的洗刷，不宜將水管、風(fēng)管或其他線路裸露在墻上，不易清理。

（2）地板：地面宜采用水磨石，平整而不滑，耐水，耐磨，耐腐蝕，防潮。地面最好不設(shè)門檻。

（3）天花板：耐水耐腐蝕，其結(jié)構(gòu)應(yīng)力求簡(jiǎn)潔平滑。如同墻面，不應(yīng)在天花板下出現(xiàn)明管。（4）窗：除了采用自然通風(fēng)的開(kāi)放系統(tǒng)外，最好不設(shè)可開(kāi)啟的窗戶，可采用雙層玻璃作窗戶

（5）門： 飼養(yǎng)室的開(kāi)門方向與室內(nèi)通風(fēng)情況相適應(yīng)，室內(nèi)為正壓的門要往里開(kāi)，室內(nèi)為負(fù)壓的門要向外開(kāi)，門邊上要有密封條，門上方應(yīng)有玻璃做窺視窗，下方設(shè)有金屬板。門要有防野鼠進(jìn)入裝置，門的規(guī)格大小應(yīng)考慮室內(nèi)最大物品的進(jìn)出方便，最小不能低于0.9米寬、2米高，普通動(dòng)物房應(yīng)設(shè)有紗門。

（6）走廊：在清潔級(jí)以上的動(dòng)物室最好設(shè)雙走廊，即清潔走廊和污染走廊。

1、動(dòng)物設(shè)施中建筑物的布局應(yīng)根據(jù)以下幾個(gè)原則而定：a、有利于防治疾病的傳播和相互的感染b、便于工作、實(shí)驗(yàn)人員的操作c、清潔物品、污染物品運(yùn)送的路線應(yīng)分開(kāi)，人員、物品、動(dòng)物空氣要單向移動(dòng)。

1.營(yíng)養(yǎng)：指的是一個(gè)過(guò)程，是指動(dòng)物攝取、消化、吸收和利用食物中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以維持生命、生產(chǎn)產(chǎn)品的整個(gè)過(guò)程。

2.營(yíng)養(yǎng)控制：通過(guò)研究營(yíng)養(yǎng)素對(duì)動(dòng)物生命活動(dòng)的影響，揭示養(yǎng)分與生命間定性、定量規(guī)律。3.營(yíng)養(yǎng)素： 即營(yíng)養(yǎng)成分，凡能被動(dòng)物用以維持生命活動(dòng)、生產(chǎn)產(chǎn)品的物質(zhì)。

4.飼料：指在正常情況下，凡能被動(dòng)物采食，無(wú)毒、無(wú)害且能提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝的所有物質(zhì)。營(yíng)養(yǎng)素的功能：

結(jié)構(gòu)物質(zhì)：脂肪、蛋白質(zhì)、碳水化合物、粗纖維。能源：脂肪、蛋白質(zhì)

代謝調(diào)節(jié)物：礦物質(zhì)、脂肪酸 附屬功能：形成產(chǎn)品（蛋、奶）

蛋白質(zhì)：是由氨基酸（機(jī)體所需的氨基酸有20種）組成的一類數(shù)量龐大的物質(zhì)的總稱。蛋白質(zhì)是動(dòng)物生命活動(dòng)最基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

蛋白質(zhì)生理作用 ：1.是構(gòu)成機(jī)體器官、組織、細(xì)胞的基本材料2.是組織更新、修補(bǔ)的主要原料3.是機(jī)體生理功能的物質(zhì)基礎(chǔ)4.可供能和轉(zhuǎn)化為糖和脂肪

必需氨基酸：動(dòng)物體內(nèi)不能合成或合成的量和速度不能滿足動(dòng)物的需要，必須從外界食物（飼料）中攝取的氨基酸。有10種：纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、賴氨酸、組氨酸、精氨酸。

非必需氨基酸：指人體可以自身合成或由其它氨基酸轉(zhuǎn)化而得到，不一定非從食物直接攝取不可。包括：谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天門冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、絲氨酸和酪氨酸等

脂肪生理作用 ：1.是組成機(jī)體組織的重要成分2.是體內(nèi)能量的重要來(lái)源，也是儲(chǔ)能的最好形式3.是脂溶性維生素的溶劑4.具有保溫、保護(hù)臟器的作用

碳水化合物生理作用 ：1.無(wú)氮浸出物（1）供能與儲(chǔ)能（2）機(jī)體某些細(xì)胞的重要成分（3）形成產(chǎn)品：奶、蛋 2.粗纖維（1）填充胃腸道，使動(dòng)物有飽食感。（2）促進(jìn)胃腸發(fā)育、蠕動(dòng)和糞便排泄。（3）供給能量（指草食動(dòng)物－盲腸）

礦物質(zhì)生理作用 ：1.構(gòu)成動(dòng)物組織的重要成分：2.維持正常的滲透壓、酸堿平衡、神經(jīng)肌肉的興奮性3.構(gòu)成酶的輔基、激素、維生素、蛋白質(zhì)和核酸的成分和參與酶的激活 維生素生理作用 ：1.是人體不可缺少的物質(zhì) 2.營(yíng)養(yǎng)作用

水的生理作用 ：1.是動(dòng)物體內(nèi)最重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)2.具有保持體溫恒定的作用3.具有潤(rùn)滑作用4.有助于保持細(xì)胞和動(dòng)物體格的形狀

小鼠：耳聳立呈半圓形，有平衡、散熱等功能 ；食道內(nèi)壁有一層厚的角質(zhì)化鱗狀上皮。不耐饑餓。腸道短小。盲腸不發(fā)達(dá)；有膽囊；胰腺分散在十二指腸、胃底及脾門處。下頜骨形態(tài)不同品系有差異，可以進(jìn)行遺傳學(xué)檢測(cè)。脾臟有明顯的造血功能。大動(dòng)物（如狗、猴）則無(wú)造血功能，只有貯血功能。骨髓為紅骨髓,無(wú)黃骨髓，終生造血。腭或咽部無(wú)扁桃體。雌：無(wú)宮外孕，乳腺癌可發(fā)生在頸、背部。雄：睪丸大，共2個(gè)。不適宜做慢支炎模型及去痰平喘藥的療效實(shí)驗(yàn)。

生理功能及行為習(xí)性：1.體型小、易于飼養(yǎng)管理和實(shí)驗(yàn)操作 2．性成熟早、繁殖力強(qiáng)（18個(gè)月以上屬于老年小鼠）3．晝伏夜動(dòng)、喜黑暗（采食、交配均在夜晚進(jìn)行，鎮(zhèn)靜試驗(yàn)、壯陽(yáng)試驗(yàn)在晚上進(jìn)行。）4．喜群居、雄鼠好斗，體臭傳情（“理發(fā)師”。雄鼠具有分泌醋酸氨臭氣的特性）5.性情溫順、膽小怕驚6．適應(yīng)性差7.多種毛色，便于遺傳學(xué)研究8.對(duì)外界刺激極為敏感，對(duì)多種病原體和毒素具有易感性，對(duì)致癌物敏感，自發(fā)腫瘤多。

BALB／c小鼠主要特性：①乳腺腫瘤自然發(fā)生率低，但對(duì)乳腺腫瘤病毒敏感；②易患慢性肺炎。③對(duì)放射線甚為敏感。⑤有自發(fā)高血壓癥，老年鼠心臟有病變，雌雄性小鼠均有動(dòng)脈硬化。⑥對(duì)鼠傷寒沙門菌補(bǔ)體敏感，對(duì)麻疹病毒中度敏感。

C57BL 主要特性：①乳腺腫瘤自然發(fā)生率低，化學(xué)物質(zhì)難以誘發(fā)乳腺和卵巢腫瘤。②對(duì)放射物質(zhì)耐受力強(qiáng)。③對(duì)結(jié)核桿菌敏感。氨基甲乙酯處理后尾靜脈注射引起肺部結(jié)核 C3H主要特性： ①乳腺癌發(fā)病率高，6～10月齡雌性小鼠乳腺癌自然發(fā)生率達(dá)85％～100％，乳腺癌通過(guò)乳汁而不是胎盤途徑傳播。14月齡雌性小鼠肝癌發(fā)生率為85％。③仔鼠下痢癥感染率高。④對(duì)狂犬病病毒敏感。⑤雄性小鼠對(duì)氨氣、氯仿、松節(jié)油等甚為敏感，病死率高。

DBA/2：①雌性小鼠乳腺腫瘤發(fā)生率，繁殖鼠(經(jīng)產(chǎn)母鼠)為66％，處女鼠為3％。②聽(tīng)源性癲癇發(fā)作，35日齡小鼠為100％，55日齡后為5％。③雄性小鼠接觸氯仿和乙二醇的氧化物，以及維生素K缺乏時(shí)，病死率高。

大鼠：在口腔充滿食物時(shí)，仍可進(jìn)行呼吸。大鼠不會(huì)嘔吐，不能做催吐實(shí)驗(yàn)（狗、貓、猴等動(dòng)物嘔吐反應(yīng)敏感，則宜選用）。適于肝外科實(shí)驗(yàn)研究。無(wú)膽囊（鴿、鹿、馬、驢、象等動(dòng)物沒(méi)有膽囊）不能做膽功能觀察。不具備膽囊濃縮膽汁和儲(chǔ)存膽汁的功能，適宜作膽管插管模型，不耐饑餓。胰腺與脂肪組織的區(qū)別 是：胰腺顏色較暗，質(zhì)地較堅(jiān)硬。適宜作支氣管肺泡灌洗。易做去垂體模型。無(wú)扁桃體。

生理功能與行為習(xí)性：

1、繁殖快，全年多發(fā)情動(dòng)物。

2、喜啃咬、晝伏夜動(dòng)。

3、垂體-腎上腺系統(tǒng)功能發(fā)達(dá)，應(yīng)激反應(yīng)靈敏，行為表現(xiàn)多樣，情緒敏感，對(duì)炎癥敏感，眼角膜無(wú)血管。（適于作去腎上腺模型和炎癥模型，適宜于制作去垂體模型。）

4、視覺(jué)、嗅覺(jué)較靈敏，適宜做條件反射實(shí)驗(yàn)，對(duì)許多藥物易產(chǎn)生耐藥性。（一般開(kāi)放飼養(yǎng)的大鼠主要死因?yàn)楹粑兰膊?。?/p>

5、營(yíng)養(yǎng)缺乏敏感，易產(chǎn)生營(yíng)養(yǎng)缺乏癥。

6、汗腺極不發(fā)達(dá)，心電圖中無(wú)S-T段，但其他部分穩(wěn)定，重復(fù)性好。（適宜于直接描記血壓，進(jìn)行降壓藥及心血管疾病研究，汗腺僅僅分布在爪墊上，尾是散熱器官，室溫過(guò)高時(shí)常借助分泌大量唾液調(diào)節(jié)體溫）

7、大鼠血壓和血管阻力對(duì)藥物反應(yīng)敏感，但對(duì)強(qiáng)心甙的作用較貓敏感性低671倍。

8、性情較兇猛，抗病力強(qiáng)，門齒較長(zhǎng)，激怒、襲擊捕捉時(shí)易咬手，對(duì)環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)。大鼠的常用品種、品系：

近交系：F344/N、Lou/CN(大鼠回盲部免疫細(xì)胞瘤)

突變系：SHR/oal、癲癇大鼠(可用于癲癇病的實(shí)驗(yàn)研究)、裸大鼠

封閉群：Wistar大鼠、SD大鼠(多用于營(yíng)養(yǎng)實(shí)驗(yàn);可作為更年期實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?以研究更年期綜合征)

大鼠在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用：

（一）藥理毒理研究1．藥效學(xué)研究：新藥篩選：抗高血壓藥物的篩選等。雌激素能終止大鼠和小鼠的早期妊娠但不能終止人的妊娠。(2)心血管系統(tǒng)藥物的評(píng)價(jià)：常用作研究心血管藥物的藥理和調(diào)壓作用的動(dòng)物模型。(3)抗炎藥物的篩選和評(píng)價(jià) ：常用以篩選抗關(guān)節(jié)炎藥和中醫(yī)痹證的評(píng)價(jià)。足跖浮腫法 2．藥物安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)

（二）腫瘤研究：大鼠可用于自發(fā)性和誘發(fā)性腫瘤模型的研究。

（三）微生物、寄生蟲的研究

（四）營(yíng)養(yǎng)代謝研究中的應(yīng)用

（五）行為學(xué)研究的應(yīng)用：

1、學(xué)習(xí)、記憶能力的研究

2、藥物依賴性研究

3、條件反射和非條件反射的研究

（六）老年病學(xué)研究

豚鼠生理功能與行為習(xí)性：

1、生殖慢、發(fā)育快（豚鼠屬于晚成性動(dòng)物：母鼠懷孕期較長(zhǎng)平均68天（60-75天），腦的發(fā)育在胚胎期42—45d就已經(jīng)成熟，出生后就發(fā)育完善，（這一點(diǎn)有利于部腹取胎后無(wú)菌豚鼠和SPF豚鼠的人工哺育）。出生后就能活動(dòng)，有牙齒，有被毛，眼可張開(kāi)，4小時(shí)后就能行走和吃軟料，2-3天豚鼠就可以一邊吃乳，一邊吃青飼料，生長(zhǎng)發(fā)育快。）

2、草食動(dòng)物：不能合成維生素C3、喜群居，膽小易驚：容易出現(xiàn)脫毛、皮膚損傷和皮炎。

4、豚鼠對(duì)青霉素、四環(huán)素族、土霉素等藥物敏感，易引起變態(tài)反應(yīng)。豚鼠在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用

（一）藥物研究

1、藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)：用豚鼠來(lái)研究鎮(zhèn)咳藥物。是研究抗生素如青霉素的專門動(dòng)物；作過(guò)敏反應(yīng)的研究，豚鼠是首選動(dòng)物，最好用白色豚鼠。

（二）、微生物研究中的應(yīng)用： 豚鼠對(duì)結(jié)核桿菌具有高度感受性

（三）免疫研究中的應(yīng)用（速發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)，遲發(fā)型超敏反應(yīng)）

（四）、耳科研究中的應(yīng)用：聽(tīng)覺(jué)耳動(dòng)反射

（五）、營(yíng)養(yǎng)研究中的應(yīng)用

家兔的生物學(xué)特征：回盲部膨大形成一圓小囊，盲腸末端有較長(zhǎng)的蚓突，為一免疫器官.對(duì)兒茶酚胺類和其它藥物反應(yīng)敏感，頸部有減壓神經(jīng)獨(dú)立分支，電刺激減壓神經(jīng)對(duì)心臟的影響首選家兔。家兔屬于刺激性排卵類型動(dòng)物，兔無(wú)明顯發(fā)情期，雌兔卵巢內(nèi)一次能成熟許多卵子，但這些卵子并不排出，只有經(jīng)雄兔的交配刺激后隔10～12小時(shí)才能排出。這種現(xiàn)象叫刺激性排卵。哺乳動(dòng)物中家兔和貓都屬于這種類型

能夠準(zhǔn)確掌握其排卵懷孕的時(shí)間，可預(yù)測(cè)胚胎發(fā)育，用于計(jì)劃生育研究。家兔常用品種品系：日本大耳白兔，新西蘭白兔，青紫蘭兔，中國(guó)白免

家兔在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用：發(fā)熱動(dòng)物模型（首選家兔）以及解熱和檢查熱原的實(shí)驗(yàn)研究，（大鼠、小鼠體溫調(diào)節(jié)不穩(wěn)定，不宜選用。）兔是研究膽固醇代謝及冠心病最早使用的動(dòng)物，是復(fù)制高膽固醇血癥、動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型的首選動(dòng)物。生命科學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇要求：

一、動(dòng)物個(gè)體間的均一性

二、動(dòng)物遺傳的穩(wěn)定性

三、動(dòng)物的易獲得性： 果蠅、小鼠易得 選擇的原則：?

一、選擇與人的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理機(jī)能、代謝特點(diǎn)、疾病特點(diǎn)相似的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選用小型豬作燒燙傷實(shí)驗(yàn)研究是較理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物；犬、猴適合建立齲齒模型。小型豬是制作中醫(yī)病理舌苔動(dòng)物模型最理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。金魚被用來(lái)研究視覺(jué)器官的結(jié)構(gòu)與功能；藥物依賴性試驗(yàn)常選猴（最適宜），婦科方面可用猴做實(shí)驗(yàn)。神經(jīng)反射弧實(shí)驗(yàn)蛙為首選的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物?？衫眉彝眠M(jìn)行針灸穴位實(shí)質(zhì)的探討。犬適合做藥理學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、外科學(xué)、毒理學(xué)、生理學(xué)和行為學(xué)等研究。小型豬常用于動(dòng)脈粥樣硬化、皮膚病、營(yíng)養(yǎng)代謝等方面的研究。大鼠適于做應(yīng)激性胃潰瘍等實(shí)驗(yàn)。藥物代謝的研究最適宜的動(dòng)物為猴，其次為犬、大鼠。獼猴、豚鼠適宜于做Vc合成代謝的研究。仔豬適宜做營(yíng)養(yǎng)學(xué)和嬰兒食譜的研究。SHR大鼠是篩選抗高血壓藥物的良好動(dòng)物模型。肥胖癥小鼠常用于肥胖癥的研究。糖尿病小鼠常用于糖尿病的研究。TA2小鼠常用于乳腺癌的研究。家豬是一種很好的子宮囊腫模型。貓是研究弓形蟲的一個(gè)很好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

二、選擇解剖特點(diǎn)、生理特點(diǎn)符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊蟮膶?shí)驗(yàn)動(dòng)物

觀察電刺激減壓神經(jīng)對(duì)心臟的作用時(shí)應(yīng)選用家兔。家兔不需要人工呼吸；青紫藍(lán)兔適用于淋巴結(jié)內(nèi)注射藥物或通電進(jìn)行免疫功能的研究。兔不適于做甲狀旁腺摘除實(shí)驗(yàn)，但宜做甲狀腺摘除后研究甲狀旁腺功能的實(shí)驗(yàn)。而犬的甲狀旁腺位置比較固定，常選用犬作甲狀旁腺摘除實(shí)驗(yàn)。家兔常用于角膜瘢痕和角膜移植的研究。新西蘭兔是很好的青光眼模型；雄雞適宜做雄性激素的研究。地鼠適于作免疫學(xué)、腫瘤學(xué)和微循環(huán)功能等方面的實(shí)驗(yàn)研究。小鼠沒(méi)有扁桃體，因此不能做扁桃體炎的模型。大鼠沒(méi)有膽囊，因而不能做膽囊功能的實(shí)驗(yàn)研究。大鼠的肝臟再生能力很強(qiáng)，切除60%-70%肝葉仍可再生，很適合做肝外科實(shí)驗(yàn)的研究。貓的循環(huán)系統(tǒng)發(fā)達(dá)，故循環(huán)系統(tǒng)藥物研究首選貓。家犬的汗腺不發(fā)達(dá)，不宜作發(fā)汗實(shí)驗(yàn)；其胰腺小，適宜作胰腺摘除術(shù)。家犬胃小容易作胃導(dǎo)管手術(shù)，便于進(jìn)行胃腸道生理學(xué)的研究。獼猴氣管腺數(shù)量較多，選用它作慢性支氣管炎或祛痰平喘藥的研究較合適。不宜選用大鼠、小鼠和豚鼠。可選用成年雌兔或雌貓來(lái)誘發(fā)排卵進(jìn)行避孕藥和胚胎發(fā)育的研究。大、小鼠適宜做卵巢功能的測(cè)定，是計(jì)劃生育、避孕、抗生育、抗著床研究的合適動(dòng)物。大鼠對(duì)營(yíng)養(yǎng)缺乏比較敏感，是研究營(yíng)養(yǎng)學(xué)的首選動(dòng)物。家犬是紅綠色盲，因此不能以紅綠色作為條件刺激物來(lái)進(jìn)行條件反射實(shí)驗(yàn)。某些研究高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)可選擇家犬作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。Beagle犬最適用于毒理學(xué)、藥理學(xué)和生理學(xué)研究用，比如用于長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)。大鼠和小鼠的心電圖沒(méi)有S-T段，這在給大鼠作心電圖時(shí)應(yīng)加以注意。

三、選擇某些品種、品系對(duì)實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)特殊反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

家兔常用于解熱實(shí)驗(yàn)和致熱源檢查的研究。相反，大、小鼠體溫調(diào)節(jié)不穩(wěn)定，就不宜選用。鴿子、家犬、猴和貓適于作嘔吐實(shí)驗(yàn)。家兔、豚鼠等草食動(dòng)物嘔吐反應(yīng)不敏感，小鼠和大鼠無(wú)嘔吐反射，鎮(zhèn)吐實(shí)驗(yàn)就不宜選用。大鼠適于做應(yīng)激反應(yīng)和內(nèi)分泌實(shí)驗(yàn)。大鼠可用于降壓藥的研究。大鼠適合于各種關(guān)節(jié)炎和中醫(yī)痹證的研究。家兔、雞、鴿和猴適于進(jìn)行動(dòng)脈粥樣硬化實(shí)驗(yàn)研究。小鼠、大鼠和犬就不容易形成動(dòng)脈粥樣硬化病變，因此不宜選用。金黃地鼠和豚鼠對(duì)各型鉤端螺旋體都很敏感，小鼠、大鼠等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)鉤端螺旋體一般不大敏感。豚鼠適于作平喘實(shí)驗(yàn)、過(guò)敏試驗(yàn)和抗組胺藥物的研究。豚鼠適于做聽(tīng)覺(jué)方面的實(shí)驗(yàn)研究。豚鼠對(duì)青霉素很敏感。嗎啡對(duì)大鼠、犬、兔、猴和人主要表現(xiàn)為中樞抑制，對(duì)貓表現(xiàn)為中樞興奮。5-羥色胺對(duì)人主要是升壓作用，對(duì)貓和大鼠則主要是降壓作用。普魯卡因局部注射時(shí)，對(duì)于人產(chǎn)生局部麻醉作用，對(duì)馬產(chǎn)生中樞興奮作用。雌激素能終止大鼠和小鼠的早期妊娠，但不能終止人的妊娠。

四、選擇人獸共患病實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或人類疾病模型的動(dòng)物

1、選擇人獸共患病實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

猴是人類痢疾和結(jié)核理想的模型。?豚鼠、C57BL小鼠可用作結(jié)核病的動(dòng)物模型。淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎的研究可選用大鼠和小鼠。流行性出血熱的研究宜選用大鼠。沙門氏菌病宜選用豚鼠、大鼠、小鼠、兔、猴。

2、選擇人類疾病模型的動(dòng)物

選擇人類疾病模型的動(dòng)物；中醫(yī)證候動(dòng)物模型及病證結(jié)合動(dòng)物模型

五、選擇遺傳穩(wěn)定、背景明確、標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

六、選擇與實(shí)驗(yàn)要求一致的動(dòng)物規(guī)格

1、年齡、體重

2、性別

3、生理狀態(tài)

第二篇：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)重點(diǎn)匯總

一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、近交系動(dòng)物、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、屏障環(huán)境

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(Laboratory Animal): 是指經(jīng)人工飼養(yǎng)、繁育，對(duì)其攜帶的微生物及寄生蟲實(shí)行控制，遺傳背景明確或者來(lái)源清楚的，應(yīng)用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)和檢定以及其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物。包括四個(gè)基本內(nèi)涵：

1.遺傳背景明確（近交系、封閉群、雜交群）

2.對(duì)攜帶微生物和寄生蟲實(shí)施控制（普通動(dòng)物、清潔動(dòng)物、無(wú)特定病原體動(dòng)物、無(wú)菌動(dòng)物）3.在特定的環(huán)境條件下，人工培育而成的動(dòng)物 4.應(yīng)用范圍明確

近交系(Inbred Strain)是指至少連續(xù)經(jīng)過(guò)20代以上全同胞兄妹或親子交配，品系內(nèi)所有個(gè)體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對(duì)共同祖先。近交系動(dòng)物的近交系數(shù)（Inbreeding Coefficient）應(yīng)大于99%。近交系動(dòng)物的特點(diǎn)：

1．基因純合性和同基因性 2．各品系均具有獨(dú)特的特性

3．研究結(jié)果的一致性

4．可作為有價(jià)值的動(dòng)物模型

5．具有標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)材料特性

6.遺傳背景清楚

通過(guò)實(shí)驗(yàn)手段將新的遺傳物質(zhì)(外源性的基因片段)導(dǎo)入到動(dòng)物的胚細(xì)胞中，并能穩(wěn)定的遺傳，由此獲得的動(dòng)物稱為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。常用的方法有顯微注射法、逆轉(zhuǎn)錄病毒載體法、胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)法、精子載體法、電轉(zhuǎn)移法、基因直接導(dǎo)入法等。

屏障環(huán)境：與外界隔離，是飼養(yǎng)清潔級(jí)動(dòng)物和SPF級(jí)動(dòng)物的設(shè)施。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生存環(huán)境的空氣須經(jīng)過(guò)濾凈化處理，其潔凈度相對(duì)于10000級(jí)，進(jìn)入屏障內(nèi)的人、動(dòng)物和物品如飼料、水、墊料及實(shí)驗(yàn)用品等均需有嚴(yán)格的微生物控制。

二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施分類

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施的總和。一個(gè)設(shè)施可以大到動(dòng)物中心或生產(chǎn)繁殖機(jī)構(gòu)，小至某一實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室。總體的原則是提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物最適宜的環(huán)境，保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量和為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性提供可靠保障。

（一）、按其功能分類

1．動(dòng)物生產(chǎn)設(shè)施（Animal Production Facility）指用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼育繁殖、生產(chǎn)的建筑物、設(shè)備以及運(yùn)營(yíng)管理在內(nèi)的總和。

2．動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施（Animal Experimental Facility）指用于研究、試驗(yàn)、教學(xué)、生物制品、藥品生產(chǎn)、檢定等為目的進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼育、試驗(yàn)的建筑物、設(shè)備以及運(yùn)營(yíng)管理在內(nèi)的總和。

3．特殊動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施（Special Animal Experimental Facility）指用于感染、毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、病原微生物和細(xì)胞培養(yǎng)、重組DNA、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、克隆和胚胎干細(xì)胞、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和應(yīng)用特殊化學(xué)物質(zhì)等進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的建筑物、設(shè)備以及包括運(yùn)營(yíng)管理在內(nèi)的總和。

（二）按微生物控制程度分類

1．普通環(huán)境（Open System）

直接與外界大氣相通，是飼養(yǎng)普通級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的場(chǎng)所。飼料、飲水要符合衛(wèi)生要求，墊料要消毒，飼養(yǎng)室內(nèi)要有防鼠、防昆蟲等措施。

2．屏障環(huán)境（Barrier System）

與外界隔離，是飼養(yǎng)清潔級(jí)動(dòng)物和SPF級(jí)動(dòng)物的設(shè)施。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生存環(huán)境的空氣須經(jīng)過(guò)濾凈化處理，其潔凈度相對(duì)于10000級(jí)，進(jìn)入屏障內(nèi)的人、動(dòng)物和物品如飼料、水、墊料及實(shí)驗(yàn)用品等均需有嚴(yán)格的微生物控制。3．隔離環(huán)境(Isolation System)

與外界環(huán)境完全隔離的環(huán)境內(nèi)。工作人員通過(guò)隔離器上組裝的無(wú)菌手套進(jìn)行操作，不直接接觸動(dòng)物。飼料、飲水，墊料，籠具等都應(yīng)高壓、高溫滅菌。進(jìn)入隔離器內(nèi)的一切物品均需通過(guò)傳遞艙滅菌。適合飼養(yǎng)SPF、無(wú)菌動(dòng)物、動(dòng)物的保種育種或同等級(jí)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。

（三）按設(shè)施的平面布局分類

1．無(wú)走廊式(No Corridors)

用于飼養(yǎng)品種單一或以實(shí)驗(yàn)為主的設(shè)施。一般飼養(yǎng)普通級(jí)動(dòng)物

2．單走廊式（Single Corridors）

一般的研究機(jī)構(gòu)在進(jìn)行中、短期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。相對(duì)于雙走廊其優(yōu)點(diǎn)是占用空間小，設(shè)施利用率較高，維護(hù)費(fèi)用低。缺點(diǎn)為清潔籠具和污染材料之間常常存在污染的危險(xiǎn)，走廊相對(duì)擁擠。

3．雙走廊式（Double Corridors）

常用的一種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障設(shè)施類型。可以有效分割為清潔區(qū)和污染區(qū)。作為屏障設(shè)施使用，比較容易控制微生物污染。缺點(diǎn)是有效利用面積減少。

4．三走廊式（Three Corridors）

三走廊式壓力梯度從中間的潔凈走廊、前室、動(dòng)物飼養(yǎng)室、污物走廊逐漸降低，是目前常用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施。

三、地鼠的習(xí)性、特點(diǎn)（頰囊、冬眠）地鼠的習(xí)性： 1．生活習(xí)性

中國(guó)地鼠，灰色，個(gè)體小，體長(zhǎng)約10cm，背部中心有黑色條紋。白天基本上睡眠，行動(dòng)笨拙。晝伏夜行動(dòng)物，一般在夜晚8～11點(diǎn)最為活躍，運(yùn)動(dòng)時(shí)腹部著地，行動(dòng)不敏捷，巧手營(yíng)巢，牙齒十分堅(jiān)硬，可咬斷細(xì)鐵絲，興奮時(shí)發(fā)出強(qiáng)烈的金屬性音響。地鼠好斗，雌性比雄性大而且兇猛，受驚時(shí)會(huì)咬人。除發(fā)情期外，雌鼠不易與雄鼠同居，且雄鼠易被雌鼠咬傷。

2．采食性

有很強(qiáng)的貯食習(xí)性，可將食物存貯于頰囊內(nèi)。其頰囊可充分?jǐn)U張，貯藏能力極大，便于冬眠時(shí)食用。地鼠口腔內(nèi)兩側(cè)各有一個(gè)很深的頰囊，一般深度為3.5～4.5厘米，直徑為2～3厘米，一直延續(xù)到耳后頸部。通過(guò)頰囊將大量食物搬于巢中。

3．嗜睡性

睡眠很深時(shí)，全身肌肉松弛，且不易弄醒，有時(shí)誤認(rèn)為死亡。室溫低時(shí)出現(xiàn)冬眠，一般于8～9℃時(shí)可出現(xiàn)冬眠，此時(shí)體溫、心跳、呼吸頻率、基礎(chǔ)代謝率均降低。室溫低于13℃則幼仔易于凍死，室溫最好保持20～25℃，相對(duì)濕度40～70%。

地鼠的特點(diǎn)：

（一）解剖學(xué)特點(diǎn)：

1．頭骨較長(zhǎng)，門齒孔小，臼齒呈三棱形，齒式為2（門1/1，犬0/0，前臼0/0，臼齒3/3）=16，門齒能終生生長(zhǎng)。

2．口腔內(nèi)兩側(cè)各有一個(gè)頰囊。頰囊缺少腺體和完整的淋巴通路，因此對(duì)外來(lái)組織不產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，可用于異體移植。中國(guó)地鼠頰囊容易翻脫。

3．在臀髖部有一種腺體，當(dāng)?shù)厥筇幱谛耘d奮狀態(tài)時(shí)，分泌物會(huì)使局部皮膚濕潤(rùn)。雌性地鼠不如雄性發(fā)育完全，腺體外露也不明顯。

（二）生理學(xué)特點(diǎn)：（略看）1．地鼠生殖周期短。

金黃地鼠性周期開(kāi)始出現(xiàn)年齡為30～32日齡，妊娠為16（14～17）d，為嚙齒類動(dòng)物中妊娠期最短者。哺乳期20～25d，離乳后雄鼠2月齡，雌鼠 1.5月齡可配種。成熟期時(shí)除發(fā)情期以外雌鼠不許雄鼠靠近。年產(chǎn)5～7胎，每胎產(chǎn)仔約7只。平均壽命2～3年。

2．出生仔鼠體重2～3.3g，離乳時(shí)體重可達(dá)25～28g，成年體重約為150g，雌鼠體重比雄鼠稍大。成年中國(guó)地鼠體重約為35g，雄鼠則比雌鼠大。

3．地鼠對(duì)皮膚移植的反應(yīng)特別，封閉群內(nèi)個(gè)體間皮膚移植?？纱婊睿⒛荛L(zhǎng)期生存下來(lái)，但不同群體間移植則100%被排斥。這一現(xiàn)象正吸引著許多免疫工作者進(jìn)行深入的研究。4．中國(guó)地鼠（黑線倉(cāng)鼠）與金黃地鼠解剖生理特點(diǎn)基本相似，但也存在一些差異，如中國(guó)地鼠的染色體少而大，二倍體細(xì)胞 2n=22，大多數(shù)能相互簽別，定位明確，尤其Y染色體在形態(tài)上是獨(dú)特的，極易識(shí)別。無(wú)膽囊，大腸長(zhǎng)度比金地鼠短1倍，但腦重、睪丸大均比金地鼠重近1倍。

三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物人性化及3R 至少要滿足動(dòng)物五種基礎(chǔ)需要:1.足夠飲水和營(yíng)養(yǎng)良好的食物；2.任何時(shí)間不受飲水的限制3.免受痛苦和疾病的折磨；4.免受焦慮和害怕的折磨；5.能夠表達(dá)正常生理學(xué)行為，如躲藏、犢和互相關(guān)照等。3R的基本內(nèi)涵：

減少 Reduction）是指在科學(xué)研究中，使用較少量的動(dòng)物獲取同樣多的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)或使用一定數(shù)量的動(dòng)物能獲得更多實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的科學(xué)方法。

替代(Replacement)是指使用其它方法而不用動(dòng)物所進(jìn)行的試驗(yàn)，或者說(shuō)是使用沒(méi)有知覺(jué)的試驗(yàn)材料代替以往使用神志清醒的活的脊椎動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)的一種科學(xué)方法。

優(yōu)化（Refinement）是指在符合科學(xué)原則的基礎(chǔ)上，通過(guò)改進(jìn)條件，善待動(dòng)物，提高動(dòng)物福利或完善實(shí)驗(yàn)程序和改進(jìn)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，避免或減輕給動(dòng)物造成的與實(shí)驗(yàn)?zāi)康臒o(wú)關(guān)的疼痛和緊張不安的科學(xué)方法。

3R研究的意義：

（一）3R作為提升突破技術(shù)壁壘能力的載體和具體體現(xiàn)“標(biāo)尺”，在經(jīng)濟(jì)發(fā)展和國(guó)際貿(mào)易中發(fā)揮不可替代的重要作用

（二）為科學(xué)發(fā)展提供了新思路和新方法

（三）開(kāi)展“3R”研究，從保護(hù)動(dòng)物，或是關(guān)注動(dòng)物福利的角度出發(fā)，這也是時(shí)代發(fā)展、社會(huì)進(jìn)步在科技上的一種體現(xiàn)。

五、小鼠的行為和生理學(xué)特點(diǎn)

（一）行為學(xué)特點(diǎn)

1.性情溫順，膽小怕驚，對(duì)環(huán)境反應(yīng)敏感。

2.喜居于光線暗的安靜環(huán)境，晝伏夜動(dòng)，喜歡啃咬。3.社會(huì)群居性。

（二）生理學(xué)特點(diǎn)

1．小鼠體型小

2．體溫與能量代謝。對(duì)小鼠需要供給充足的飲水。小鼠飲水量為4～7ml/d。

3．泌尿 小鼠尿量較小，一次排尿僅1～2滴。與其他哺乳動(dòng)物不同的是，小鼠尿液中含有蛋白質(zhì)和肌酸酐。

4．生殖 生長(zhǎng)期短、成熟早、繁殖力強(qiáng)。小鼠6～7周齡時(shí)性成熟，性周期為4～5d，妊娠期為19～21d；哺乳期為20～22d；有產(chǎn)后發(fā)情特點(diǎn)，每胎產(chǎn)仔數(shù)為8～15頭，一年產(chǎn)仔胎數(shù)6～10胎，繁殖率很高，生育期為1年。小鼠為全年多發(fā)情動(dòng)物，發(fā)情周期可分為前期、發(fā)情期、后期和間情期四個(gè)階段，每個(gè)階段陰道粘膜均發(fā)生典型變化，通過(guò)陰道涂片可判斷處于哪個(gè)階段。交配后10～12h，雌鼠在陰道口形成一個(gè)白色的陰道栓，這是受孕的標(biāo)志。

六、近交系繁殖生產(chǎn)

近交系動(dòng)物繁殖方法的選擇原則：保持近交系動(dòng)物的同基因性及其基因的純合性。

（一）引種：繁殖用原種的近交系動(dòng)物必須遺傳背景明確、來(lái)源清楚、有較完整的資料（包括品系名稱、近交代數(shù)、遺傳基因特點(diǎn)及主要生物學(xué)特征等）。引種動(dòng)物必須來(lái)自近交系的基礎(chǔ)群。

（二）繁殖：近交系動(dòng)物的繁殖可分為：基礎(chǔ)群（Foundation Stock）血緣擴(kuò)大群（Pedigree Expansion Stock）生產(chǎn)群(Production Stock),當(dāng)近交系動(dòng)物生產(chǎn)供應(yīng)數(shù)量不是很大時(shí)，一般不設(shè)血緣擴(kuò)大群，僅設(shè)基礎(chǔ)群和生產(chǎn)群。

1.基礎(chǔ)群：嚴(yán)格以全同胞兄妹交配方式進(jìn)行繁殖；對(duì)動(dòng)物個(gè)體記錄要詳細(xì)，包括品系名稱、近交代數(shù)、動(dòng)物編號(hào)、出生日期、雙親編號(hào)、離乳日期、交配日期、生育記錄和繁殖系譜等?；A(chǔ)群（包括血緣擴(kuò)大群）的動(dòng)物不超過(guò)5～7代都應(yīng)能追溯到一對(duì)共同祖先。基礎(chǔ)群應(yīng)定期對(duì)遺傳特性和均一性、病原微生物和寄生蟲、環(huán)境等檢查和監(jiān)測(cè)。基礎(chǔ)群動(dòng)物保種方式：1.平行線式2.單線式3.綜合式。也可用于近交系動(dòng)物的培育（1）平行線式：基礎(chǔ)群中的每對(duì)全同胞作為一個(gè)家系，每個(gè)家系繁殖一代后選留一對(duì)動(dòng)物進(jìn)行全同胞交配，以此類推，以保持基礎(chǔ)群。（2）單線式：基礎(chǔ)群每對(duì)同胞交配繁殖一代后，選留其中一個(gè)家系，淘汰其他家系，選中的家系再留數(shù)對(duì)進(jìn)行同胞交配繁殖，下一世代仍保留其中一對(duì)的后代，淘汰其他后代，如此一代一代繁殖保種。（3）綜合式：基礎(chǔ)群中每個(gè)家系作全同胞交配，每個(gè)世代每個(gè)家系留一對(duì)繼續(xù)繁殖，若其中某一家系不能繼續(xù)繁殖下去，則由繁殖力高的一個(gè)家系補(bǔ)足，以維持?jǐn)?shù)個(gè)家系同步延續(xù)，以保證種群和延續(xù)。

2.血緣擴(kuò)大群：種用動(dòng)物應(yīng)該來(lái)自基礎(chǔ)群,，以全同胞兄妹交配方式進(jìn)行繁殖，設(shè)個(gè)體繁殖記錄卡，血緣擴(kuò)大群動(dòng)物不超過(guò)5～7代都應(yīng)能追溯到其在基礎(chǔ)群的一對(duì)共同祖先。

3.生產(chǎn)群：種動(dòng)物來(lái)自基礎(chǔ)群或血緣擴(kuò)大群。生產(chǎn)群動(dòng)物一般以隨機(jī)交配方式進(jìn)行繁殖。應(yīng)設(shè)繁殖記錄卡，生產(chǎn)群動(dòng)物隨機(jī)交配繁殖代數(shù)一般不應(yīng)超過(guò)4代。

七、封閉群引種

以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群，在不從其外部引入新個(gè)體的條件下，至少連續(xù)繁殖 4 代以上，稱為封閉群，亦稱遠(yuǎn)交群（Outbred Stock）。

引種：繁殖用原種的封閉群動(dòng)物必須遺傳背景明確，來(lái)源清楚，有較完整的資料（包括種群名稱、來(lái)源、遺傳基因特點(diǎn)及主要生物學(xué)特性等）。一般小型嚙齒類封閉群動(dòng)物引種數(shù)目不能少于25對(duì)。

哈迪-溫伯格Hardy-Weinberg定律，也稱基因平衡定律。等位基因頻率:群體中，一條染色體上某種等位基因數(shù)與該染色體上全部等位基因數(shù)之比?；蛐皖l率:群體中，某基因型個(gè)體數(shù)與該群體全部個(gè)體數(shù)之比。

八、大鼠解剖學(xué)特點(diǎn)、肝臟再生、無(wú)膽囊、環(huán)尾病、裸大鼠的免疫學(xué)特點(diǎn)

解剖學(xué)特點(diǎn)：

1.門齒終生不斷生長(zhǎng)，需磨損維持其定。

2.食道與十二指腸相距很近，胃中有一條皺折，收縮時(shí)會(huì)堵住噴門口，這是大鼠不會(huì)嘔吐的原因。3.肝臟再生能力強(qiáng)，無(wú)膽囊，來(lái)自各葉的膽管形成總膽管，開(kāi)口于十二指腸的乳突上。4.肺結(jié)構(gòu)特別，左肺為1個(gè)大葉，右肺分成4葉。5.心臟和外周循環(huán)與其他哺乳動(dòng)物不同。心臟的血液供給既來(lái)自冠狀動(dòng)脈，也來(lái)自冠狀外動(dòng)脈。6.右腎比左腎靠近頭側(cè)，腎為蠶豆形，右側(cè)比左側(cè)稍高。單乳頭腎，腎臟前端有一米粒大的腎上腺。7.雌性生殖器呈圓形，有凹溝，子宮為丫型雙角子宮，左右子宮角的腔是完全分開(kāi)的。兩個(gè)子宮頸獨(dú)立地開(kāi)口于陰道。胸部和腹部各有3對(duì)乳頭。

大鼠無(wú)膽囊，肝臟再生能力強(qiáng)，不能嘔吐，因此不能用于做催吐實(shí)驗(yàn)。

當(dāng)環(huán)境濕度低于40％時(shí)，大鼠易患環(huán)尾?。ōh(huán)狀壞死癥）。

裸大鼠的免疫缺陷特征：①免疫器官的組織學(xué)與裸小鼠相似，幼齡裸大鼠的解剖發(fā)現(xiàn)，有胸腺殘跡，內(nèi)有未分化的上皮細(xì)胞，但未見(jiàn)淋巴細(xì)胞；②先天性無(wú)胸腺，無(wú)T細(xì)胞，T細(xì)胞功能缺失，但B細(xì)胞功能正常，NK細(xì)胞的活力較正常鼠高。

附：裸大鼠的一般特征：

①體毛稀少，裸大鼠并不像裸小鼠一樣完全無(wú)毛，而是體毛稀少，尾根往往多毛； ②發(fā)育遲緩與裸小鼠一樣發(fā)育相對(duì)較緩慢，體重為正常大鼠的70％左右；

③繁育能力差，由于裸大鼠與裸小鼠一樣在妊娠期間乳腺發(fā)育缺損，故其繁殖方式同裸小鼠相同，即用純合子的雄鼠與雜合子的雌鼠交配方式進(jìn)行繁育；

④易患呼吸道疾病，由于其無(wú)胸腺，免疫力低下，因此易感各種疾病，特別是在環(huán)境較差時(shí)，易感潰瘍性氣管炎和化膿性支氣管炎等，生存時(shí)間約6～7個(gè)月。

九、豚鼠的補(bǔ)體、常用犬品種

豚鼠特別是老齡雌鼠的血清中含有豐富的補(bǔ)體，是所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中補(bǔ)體含量最多的一種動(dòng)物，易引起變態(tài)反應(yīng)。其補(bǔ)體非常穩(wěn)定，免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中所用的補(bǔ)體多來(lái)源于豚鼠血清。豚鼠是速發(fā)型過(guò)敏性呼吸道疾病的動(dòng)物模型，是過(guò)敏性休克和變態(tài)反應(yīng)的首選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接受致敏物質(zhì)的反應(yīng)程度不同，其順序?yàn)椋弘嗍螅炯彝茫救拘∈螅矩垼就?。（注：變態(tài)反應(yīng)也叫超敏反應(yīng)，指機(jī)體對(duì)某些抗原初次應(yīng)答后，再次接受相同抗原刺激時(shí)發(fā)生的一種以機(jī)體生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷為主的特異性免疫應(yīng)答。）

國(guó)際上用于醫(yī)學(xué)科學(xué)研究的常用犬主要有小獵兔犬、墨西哥無(wú)毛犬、四系雜交犬、Boxer黑白斑點(diǎn)短毛犬等。

十、兔解剖特點(diǎn)

1．口腔小，上唇分開(kāi) 齒式為2（門2/1，犬0/0，前臼3/2，臼齒3/3）=28。唾液腺有4對(duì)，即腮腺、頜下腺、舌下腺和眶下腺。

2．家兔為單胃。盲腸非常大，占腹腔的1/3。在回盲處有特有的圓小囊。

3．雄兔睪丸可以自由地下降到陰囊或縮回腹腔。雌兔為雙子宮，有乳頭3～6對(duì)。兔為單乳頭腎。

4．兔的胸腔構(gòu)造:縱隔將胸腔分左右兩室，互不相通。頸神經(jīng)血管束中減壓神經(jīng)易于分離。

5．幼兔的消化道發(fā)生炎癥時(shí)，消化道壁即成為可滲透的，這樣消化道中的有害物質(zhì)易被吸收，這就是幼兔腹瀉時(shí)容易自身中毒而死亡的原因。

十一、動(dòng)物飼養(yǎng)室有害氣體

主要有害氣體：氨、甲基硫醇、硫化氫、硫化甲基、甲基丁烷、三甲胺、苯乙烯、乙醛和硫化二甲基。

附：信息素（pheromone）或叫引物信息素（primer pheromone）

①Lee-Boot效應(yīng)，是指小鼠群養(yǎng)時(shí)常常發(fā)生假性妊娠和發(fā)情周期混亂的現(xiàn)象。

②Whitten效應(yīng)，是指由于雄性動(dòng)物分泌的信息素促使雌性動(dòng)物的發(fā)情周期出現(xiàn)有規(guī)律的現(xiàn)象。③Bruce效應(yīng)，是指懷孕初期的雌性小鼠與交配對(duì)象以外的雄性接近或同居時(shí)產(chǎn)生的中止妊娠反應(yīng)。

十二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

準(zhǔn)備工作的內(nèi)容有： 1.飼養(yǎng)室和飼養(yǎng)器具的準(zhǔn)備 2.動(dòng)物數(shù)目的確定 3.動(dòng)物的購(gòu)入 4.動(dòng)物的稱重

5.動(dòng)物的分組標(biāo)記及動(dòng)物的管理等。

動(dòng)物的購(gòu)入時(shí)注意事項(xiàng) ：

1．各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作是否已落實(shí)，如動(dòng)物籠具數(shù)量、清潔衛(wèi)生情況、動(dòng)物觀察室內(nèi)是否已消毒。

2．購(gòu)入動(dòng)物時(shí)應(yīng)向供應(yīng)部門索取動(dòng)物的遺傳背景資料、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有效的質(zhì)量合格證、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物控制的檢查資料以及動(dòng)物的年齡和健康等方面的資料。

3．如若是清潔級(jí)以上級(jí)別的動(dòng)物，其運(yùn)輸工具應(yīng)嚴(yán)格檢查密封狀況。購(gòu)入動(dòng)物回到實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。如若是長(zhǎng)途運(yùn)輸，還應(yīng)考慮到途中各種因素對(duì)動(dòng)物的影響，如運(yùn)輸環(huán)境的溫度、濕度、飲食等等。尤其要注意動(dòng)物在途中不能被污染和引起窒息死亡。

4．動(dòng)物健康檢查：應(yīng)對(duì)購(gòu)入動(dòng)物的健康情況進(jìn)行詳細(xì)檢查，檢查包括：（1）外觀。一般常發(fā)生異常的部位及其外觀檢查內(nèi)容有：

皮毛：有無(wú)光澤和脫毛變化。

口腔：流涎、出血、粘膜湯瘍、口臭等。

鼻腔：鼻汁、出血、干燥（有些動(dòng)物鼻鏡干燥）。

眼：眼屎、流淚、白內(nèi)障、角膜損傷等。

耳：外傷、耳殼曲折、貧血、中耳炎等。

尾：彎曲、斷折等。

四肢：彎曲、脫臼、外傷、關(guān)節(jié)炎等。

肛門：下痢、血便、脫肛等。

（2）營(yíng)養(yǎng)狀況。被毛逆立、精神倦怠、瘦弱或過(guò)肥等屬于營(yíng)養(yǎng)不良。（3）飼料、水?dāng)z入量。有無(wú)采食減少、食欲低下、過(guò)食等。

（4）動(dòng)物狀態(tài)。不活動(dòng)、轉(zhuǎn)圈運(yùn)動(dòng)、臥地不起、跛行、痙攣等屬不正常。

十三、動(dòng)物分組標(biāo)記

1．染色法

染色法是用化學(xué)試劑在動(dòng)物身體明顯部位如被毛、四肢等處進(jìn)行涂染，或用不同顏色等來(lái)區(qū)別各組動(dòng)物，是實(shí)驗(yàn)室最常用、最容易掌握的方法。常用的標(biāo)記液有：①3％～5％苦味酸溶液（黃色）。②0.5％中性紅或品紅浴液（紅色）。③2％硝酸銀溶液（咖啡色，涂后需光照10分鐘）。④煤焦油酒精溶液（黑色）。

標(biāo)記時(shí)用標(biāo)記筆蘸取上述溶液，在動(dòng)物體表不同部位涂上斑點(diǎn)，以示不同號(hào)碼。編號(hào)的原則是：先左后右，從前到后。2．烙印法 3．掛牌法

4．耳孔法

一般來(lái)說(shuō)，小型動(dòng)物適宜用耳孔法和染色法，中型動(dòng)物適用掛牌法和烙印法。

十四、影響動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)的因素

? 氣候因素（溫度、濕度、氣流速度等）? 理化因素（照明、聲音、氣味等）? 居住因素（房屋、籠具、墊料等）

? 同種動(dòng)物間因素（飼養(yǎng)密度、社會(huì)地位、勢(shì)力范圍等）

附：

1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)的定義：是研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的一門新興學(xué)科。

2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:略。動(dòng)物實(shí)驗(yàn):以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為材料，采用各種手段和方法在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，研究實(shí)驗(yàn)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的反應(yīng)、表現(xiàn)及其發(fā)生機(jī)制、發(fā)展規(guī)律，以探討生命科學(xué)的疑難問(wèn)題。

3、種（Species）：是生物學(xué)分類系統(tǒng)中最基本單位。同種間可相互交配且后代有繁殖能力的同一類的動(dòng)物。

品種（Stock，Breed）：是研究者根據(jù)不同需要而對(duì)同一“種”的動(dòng)物進(jìn)行改良和選擇（即定向培育），并具有某種特定外形和生物學(xué)特征，并能較穩(wěn)定地遺傳的動(dòng)物群體。

品系（Strain）：指動(dòng)物群體來(lái)源明確，在其內(nèi)部采用某種交配方法繁殖，個(gè)體間具有相似的外貌、群體內(nèi)都有獨(dú)特的生物學(xué)特征和基本穩(wěn)定的遺傳特性，可用于不同實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡膭?dòng)物群體。

亞系（Substrain）：是由同一個(gè)近交系分離出來(lái)的具有各不相同特性的品系。殘余雜合性和突變而導(dǎo)致部分遺傳組成的改變。

支系(Subline)：是指品系或亞系經(jīng)過(guò)人工技術(shù)處理后稱為支系。

4、普通動(dòng)物（conventional animal，CV；一級(jí)動(dòng)物）：指不攜帶主要人獸共患病病原和動(dòng)物烈性傳染病病原的動(dòng)物。僅可用于示教、科研的探索方法、預(yù)試之用。清潔動(dòng)物（clean animal，CL；二級(jí)動(dòng)物）：指除普通級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，不攜帶對(duì)動(dòng)物危害大和對(duì)科學(xué)研究干擾大的病原的動(dòng)物。

無(wú)特定病原體動(dòng)物（specific pathogen free animal，SPF；三級(jí)動(dòng)物）：指除普通、清潔級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，還不攜帶主要潛在感染或條件致病和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原的動(dòng)物。

無(wú)菌動(dòng)物（germ free animal，GF；四級(jí)動(dòng)物）：指無(wú)可檢出一切生命體的動(dòng)物。

悉生動(dòng)物（gnotobiotic animal，GN；四級(jí)動(dòng)物）：又稱已知菌（叢）動(dòng)物，飼養(yǎng)于隔離系統(tǒng)。具有更強(qiáng)的生活力和抵抗力，更易于飼養(yǎng)管理。

第三篇：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠

二、操作流程：抓取，固定，編號(hào)，給藥，取血，麻醉，絕育，解剖。

三、具體操作

1、抓?。鹤ト⌒∈髸r(shí)，右手抓住小鼠尾巴，不要過(guò)于用力，以免驚嚇小鼠。左手從小鼠身體后部向前抓（以免小鼠向后縮咬傷自己），抓住小鼠頸部。固定住小鼠后，將小鼠皮膚往上抓，盡量將小鼠背部皮膚抓住。左手將小鼠腹部朝向自己，把小鼠尾巴用左手無(wú)名指和小指夾住，這時(shí)小鼠腹部皮膚緊繃，不能動(dòng)彈。

2、固定： 通常使用固定器進(jìn)行固定。將固定器擰開(kāi)后，抓住小鼠尾巴，使其鉆入固定器中，再將擰下的固定器部分裝好，使小鼠尾部露出，再將可旋轉(zhuǎn)的鐵片固定住即可進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

3、編號(hào)：編號(hào)方式有兩種：①剪腳趾編號(hào)：把小鼠腹面朝上，在下的腳趾從左至右依次編為1~10號(hào)，剪10號(hào)腳趾加1~9號(hào)腳趾依次編為11~19號(hào)，在上的腳趾依次編為20,30,40,50,60,70,80,90號(hào)，其余編號(hào)與11~19號(hào)類似。②打耳釘編號(hào)：耳釘上均有唯一編號(hào)，通過(guò)使用耳釘鉗將耳釘打在小鼠耳朵上即可。實(shí)驗(yàn)時(shí)通常使用的是第一種方式進(jìn)行編號(hào)，第二種編號(hào)通常用于需要長(zhǎng)距離運(yùn)輸?shù)膭?dòng)物。

4、給藥：常用的給藥方式有：

①口服給藥：即灌胃。將注射器裝入藥物溶液，裝上灌胃針（灌胃針有直頭和彎頭兩種，區(qū)別不大）。如上所述，抓取小鼠后，使其頭部朝上，盡量呈一直線，取灌胃針，從小鼠嘴角一側(cè)緩緩插入（保持刻度在自己能看到的位置），順著小鼠口腔食道的弧度讓小鼠將針咽入，灌胃過(guò)程中如果遇到阻礙一定要及時(shí)拔出灌胃針，不可強(qiáng)行灌胃以免傷及小鼠食道以及肺部。灌胃針順利進(jìn)入后基本與小鼠身體呈一條直線，注入適量體積后再順著食道緩緩取出灌胃針。

②靜脈注射：小鼠尾部有3條靜脈和1條動(dòng)脈，3條靜脈非別位于背部，及兩側(cè)。靜脈注射時(shí)一般選取兩側(cè)靜脈，因?yàn)槠湎鄬?duì)于背部靜脈更為清晰飽滿。將小鼠固定后，用酒精擦拭其尾部靜脈，使其充血，以便注射。之后使注射器針孔處朝上，針與尾部呈約30°扎入尾部后向上輕挑，再向內(nèi)扎入部分，此過(guò)程應(yīng)該比較順暢，沒(méi)有阻礙，若阻礙較大則有可能扎入到了皮膚中。扎入后將活塞向后回抽一點(diǎn)可見(jiàn)到有血回流，則說(shuō)明成功扎入靜脈當(dāng)中，注射適當(dāng)體積后迅速拔針，用酒精進(jìn)行消毒。

5、取血：有斷尾取血法和眼眶取血法兩種。本次實(shí)驗(yàn)使用的是眼眶取血法。抓取小鼠，固定其頭部用手指將其上下眼瞼分開(kāi)，露出其眼球并且不能閉上。用玻璃毛細(xì)管從其上眼角處扎入眼球后方毛細(xì)血管從，使血液順著毛細(xì)管留下，取血完成后快速將毛細(xì)管取下。

6、麻醉：抓取老鼠，使其頭部朝下，使其腹部臟器向胸腔靠攏，露出腹部空腔，以免刺傷臟器。將注射器豎直扎入靠近后腿部腹腔，刺入之后稍微向前傾斜但不要向前刺入，一般注入0.5mL麻醉劑即可。隨后拔出針，方向小鼠，等待幾分鐘后即可麻醉。

7、絕育：絕育手術(shù)是通過(guò)剪除雌鼠卵巢或雄鼠輸精管來(lái)實(shí)現(xiàn)的。將麻醉的雌鼠背面朝上，從其胸腔和尾部之間向下三分之一處剪開(kāi)一個(gè)小口，用鑷子將其卵巢取出，上面呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)的部分即為卵巢，用剪刀將這一部分剪除，然后用縫合針線將其縫合，縫合方法為將針穿過(guò)后，將線纏繞鑷子兩圈再逆時(shí)針纏繞兩圈，再重復(fù)纏繞一遍，將鑷子夾住線頭把纏繞的線移至線頭系緊即可（縫合過(guò)程全程用鑷子和剪刀操作），里面肌肉層以及外面皮層均需縫合。雄鼠則從外生殖器向上1-2cm處剪開(kāi)小口，用鑷子在其中找出輸精管（較細(xì)長(zhǎng)的乳白色小管），盡量多減掉一些，以免其長(zhǎng)長(zhǎng)愈合，以上述方法縫合傷口即可。

9、解剖：以頸椎脫臼法處死小鼠，使其腹面朝上。用鑷子將其腹部皮膚夾起，然后用剪刀剪開(kāi)，觀察各個(gè)器官所在位置和形態(tài)，解剖完的小鼠放入尸體袋中。

第四篇：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)一 常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)介紹

目的

了解并熟悉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作的基本方法和技術(shù)。內(nèi)容

注射方法；麻醉方法；動(dòng)物編號(hào)的方法；采血；動(dòng)物性別鑒定；動(dòng)物的致死。學(xué)習(xí)打結(jié)、縫合、固定動(dòng)物等。播放錄像《太行山獼猴》、《動(dòng)物的捉拿和給藥途徑》。用品

大白鼠、小白鼠、蟾蜍、家兔，常用手術(shù)器械、注射器、小木錘、大小鼠固定器，戊巴比妥鈉，乙醚、士的寧、乙醚、氯仿、氯化鉀、一氧化碳、二氧化碳

常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別鑒定

1、大、小鼠的性別鑒定

離乳仔鼠性別鑒定主要以生殖器與肛門之間的距離長(zhǎng)短及肛門與生殖器有無(wú)被毛為標(biāo)志。識(shí)別要點(diǎn)是：① 雄性的生殖器與肛門之間的距離較遠(yuǎn)，雌鼠較近；② 雄性的生殖器與肛門之間有毛；③ 雄性的生殖器突起較雌鼠大；④ 雌鼠乳頭較雄鼠明顯。成熟后，雄性可見(jiàn)陰囊,雌性乳頭明顯而易于區(qū)分。

2、豚鼠的性別鑒定

豚鼠的性別鑒定主要是通過(guò)生殖器形態(tài)來(lái)判斷。雌性外生殖器陰蒂突起比較小，用拇指按住陰蒂突起，余指撥開(kāi)大陰唇的皺褶，可見(jiàn)陰道口呈”V”形（注意發(fā)情間期的閉鎖現(xiàn)象，即一種除了發(fā)情和分娩時(shí)外，關(guān)閉陰道口的細(xì)胞結(jié)構(gòu)）；雄性外生殖器有包皮覆蓋的陰莖小隆起，用拇指按住其基部包皮，可見(jiàn)龜頭向外突出。

3、兔子的性別鑒定

幼兔的性別鑒定主要以尿道開(kāi)口部與肛門之間的距離及尿道開(kāi)口部的形狀來(lái)判別。哺乳期仔兔，雄性尿道開(kāi)口部與肛門之間的距離較遠(yuǎn)，為雌性的1.5－2倍，雌性較近。雌性尿道開(kāi)口扁形，大小與肛門同；雄性圓形，略小于肛門。1月齡仔兔，雄性生殖孔呈圓形，翻出可見(jiàn)呈圓柱體的突起；雌性生殖孔呈Y形，翻出僅見(jiàn)有裂縫，裂縫及于肛門。3月齡以上成年兔，雄性陰囊明顯而雌性無(wú)陰囊；雄性頭大短而圓而雌性頭小略呈長(zhǎng)形。

4、貓的性別鑒定

幼貓的性別是根據(jù)生殖器與肛門的距離來(lái)判斷。距離遠(yuǎn)者為雄性，距離近者為雌性。

5、猴類的性別鑒定

猴類性別的區(qū)分較為困難。首先檢查尿道開(kāi)口，許多雌性動(dòng)物有較大的陰蒂，其腹側(cè)形成溝狀通向尿道口，而雄性動(dòng)物的尿道開(kāi)口在陰莖頭上。觸摸陰囊內(nèi)是否有睪丸是確定其雌雄的最可靠辦法。

常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死

大鼠和小鼠的處死方法

1、脊椎脫臼法

右手抓住鼠尾用力向后拉，同時(shí)左手拇指與食指用力向下按住鼠頭，將脊髓 與腦髓拉斷，鼠便立即死亡。

2、斷頭法

實(shí)驗(yàn)者戴上棉紗手套，用右手握住大鼠頭部，左手握住背部，露出頸部，助手用剪刀在鼠頸部將鼠頭剪掉。小鼠處死法相同。

3、擊打法

右手抓住鼠尾，提起，用力摔擊其頭部，鼠痙攣后立即死亡。用小木錘用力擊打鼠頭部也可致死。

4、急性大失血法

可采用鼠眼眶動(dòng)脈和靜脈急性大量失血方法使大小鼠立即死亡。

5、化學(xué)致死法

吸入一氧化碳，大、小鼠在一氧化碳濃度為0.2-0.5%環(huán)境中即可致死。皮下注射士的寧，吸入乙醚、氯仿，均可致死。士的寧注射量，小鼠為0.76～2.0mg/kg體重，大鼠3.0-3.5ml/kg體重。氯化鉀處死大鼠劑量：25%溶液0.6ml/只靜脈注入。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法很多，應(yīng)根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)動(dòng)物品種（品系）、以及需要采集標(biāo)本的部位等因素，選擇不同的處死方法。無(wú)論采用哪一種方法，都應(yīng)遵循安樂(lè)死的原則。安樂(lè)死是指在不影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的前提下，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物短時(shí)間無(wú)痛苦地死亡。處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)應(yīng)注意，首先要保證實(shí)驗(yàn)人員的安全；其次要確認(rèn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物已經(jīng)死亡，通過(guò)對(duì)呼吸、心跳、瞳孔、神經(jīng)反射等指征的觀察，對(duì)死亡作出綜合判斷；再者要注意環(huán)保，避免污染環(huán)境，還要妥善處理好尸體。

一、頸椎脫臼處死法

此法是將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的頸椎脫臼，斷離脊髓致死，為大、小鼠最常用的處死方法。操作時(shí)實(shí)驗(yàn)人員用右手抓住鼠尾根部并將其提起，放在鼠籠蓋或其他粗糙面上，用左手拇指、食指用力向下按壓鼠頭及頸部，右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方，造成頸椎脫臼，脊髓與腦干斷離，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物立即死亡。

二、斷頭處死法

此法適用于鼠類等較小的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。操作時(shí)，實(shí)驗(yàn)人員用左手按住實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的背部，拇指夾住實(shí)驗(yàn)動(dòng)物右腋窩，食指和中指夾住左前肢，右手用剪刀在鼠頸部垂直將鼠頭剪斷，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物因腦脊髓斷離且大量出血死亡。

三、擊打頭蓋骨處死法

主要用于豚鼠和兔的處死。操作時(shí)抓住實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尾部并提起，用木錘等硬物猛烈打擊實(shí)驗(yàn)動(dòng)物頭部，使大腦中樞遭到破壞，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物痙攣并死亡。

四、放血處死法

此法適用于各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。具體做法是將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的股動(dòng)脈、頸動(dòng)脈、腹主動(dòng)脈剪斷或剪破、刺穿實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的心臟放血，導(dǎo)致急性大出血、休克、死亡。

犬、猴等大動(dòng)物應(yīng)在輕度麻醉狀態(tài)下，在股三角做橫切口，將股動(dòng)脈、股靜脈全部暴露并切斷，讓血液流出。操作時(shí)用自來(lái)水不斷沖洗切口及血液，既可保持血液暢流無(wú)阻，又可保持操作臺(tái)清潔，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物急性大出血死亡。

五、空氣栓塞處死法

處死兔、貓、犬常用此法。向?qū)嶒?yàn)動(dòng)物靜脈內(nèi)注入一定量的空氣，形成肺動(dòng)脈或冠狀動(dòng)脈空氣栓塞，或?qū)е滦那粌?nèi)充滿氣泡，心臟收縮時(shí)氣泡變小，心臟舒張時(shí)氣泡變大，從而影響回心血液量和心輸出量，引起循環(huán)障礙、休克、死亡。空氣栓塞處死法注入的空氣量，貓和兔為20~50ml，犬為90~160ml。

六、過(guò)量麻醉處死法

此法多用于處死豚鼠和家兔。快速過(guò)量注射非揮發(fā)性麻醉藥（投藥量為深麻醉時(shí)的30倍），或讓動(dòng)物吸入過(guò)量的乙醚，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中樞神經(jīng)經(jīng)過(guò)過(guò)度抑制，導(dǎo)致死亡。應(yīng)用戊巴比妥鈉注射麻醉致死。豚鼠可用其麻醉劑量3倍以上劑量腹腔注射。貓可采用本藥麻醉量的2～3倍藥量靜脈注射或腹腔內(nèi)注射。兔可用本藥80～100ml／kg的劑量急速注入耳緣靜脈內(nèi)。狗可用本藥100mg／kg靜脈注射。

七、毒氣處死法

讓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物吸入大量CO2等氣體而中毒死亡。吸入二氧化碳，此法安全、人道、迅速，被認(rèn)為是處理嚙齒類的理想方法，國(guó)外現(xiàn)多采用此法。可將多只動(dòng)物同時(shí)置入一個(gè)大箱或塑料袋內(nèi)，然后充入CO2，動(dòng)物在充滿CO2的容器內(nèi)l～3min內(nèi)死去。

人類為什么總拿小白鼠做實(shí)驗(yàn)？

原因一：

老鼠中的小白鼠的基因序列和人類的差不多，一些醫(yī)學(xué)的科研和臨床實(shí)驗(yàn)都是有小白鼠來(lái)完成的。當(dāng)中以小白鼠做遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)很好，因?yàn)樗娜蚪M和人類的相似度極高，很多人類難以治愈的疾病可以在小白鼠身上找到相似性狀，從而加以實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)治病基因。

原因二：

實(shí)驗(yàn)專用白鼠的生物學(xué)意義較大，純系小鼠的培育方法經(jīng)過(guò)百年探索已經(jīng)形成固定流程，培育出的小鼠幾乎完全沒(méi)有個(gè)體差異(生理上)，而在一般的自然種群中,同種動(dòng)物間的個(gè)體差異是很大的(盡管外表相同)，主要表現(xiàn)在先天的身體素質(zhì)上。生理上沒(méi)有個(gè)體差異是否意味著氣質(zhì)上沒(méi)有差異尚不明了，不過(guò)選擇純系實(shí)驗(yàn)白鼠主要還是為了盡可能的減少先天的個(gè)體差異。

原因三：

數(shù)量充足，許多實(shí)驗(yàn)需要統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，這就要求一定的數(shù)量，大白鼠和小白鼠，特別是小白鼠，在人工繁殖條件下，能滿足這一要求。種系純，好的實(shí)驗(yàn)要對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的品種嚴(yán)格控制，這用小白鼠就容易解決。

還有動(dòng)物等級(jí)，小白鼠好歹也是哺乳動(dòng)物，除了體形小，與其它哺乳動(dòng)物的進(jìn)化水平相比并不差。體形小反而成為人工繁殖喂養(yǎng)的有利條件。

原因四：

其實(shí)很多實(shí)驗(yàn)用猩猩等與人更近似的動(dòng)物做最好，但使用猩猩太昂貴了。許多實(shí)驗(yàn)，比如認(rèn)知類的，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后時(shí)需要將動(dòng)物殺死，來(lái)檢查其內(nèi)部變化的。這樣，大量的實(shí)驗(yàn)肯定就不能用比較“貴重”的猩猩了。

實(shí)驗(yàn)

二、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血、血細(xì)胞計(jì)數(shù)

1、小白鼠的采血 目的：

了解并熟悉小白鼠的采血方法； 掌握小白鼠眼眶后靜脈叢采血。

用品: 二甲苯棉球、1%肝素溶液、1%可卡因、乙醚、刀片、無(wú)鉤彎鑷子、彎止血鉗、微量采血針、剪刀、剪毛剪、鋒利刀片、注射器。內(nèi)容：

1、剪尾采血：需血量少時(shí)可用此方法。將動(dòng)物固定，顯露尾部，將尾尖剪去約5mm，從尾根部向尾端部按摩，血即從斷端流出。若用二甲苯棉球涂擦尾部或事先將鼠尾浸在45℃水中數(shù)分鐘，使尾部血管充盈，可采到較多的血，但注意二甲苯可致溶血。也可用鋒利刀片割破尾動(dòng)脈或尾靜脈，讓血液自行流出，采血后，消毒，止血。如將動(dòng)物麻醉取血量可更多些。小鼠每次采血約0.1ml，大鼠約0.4 ml。為了多次反復(fù)取血應(yīng)盡量從鼠尾末端開(kāi)始。

2、摘眼球采血：此法常用于鼠類大量采血。用左手固定動(dòng)物，壓迫眼球，盡量使眼球突出，右手用無(wú)鉤彎鑷子或彎止血鉗迅速摘除眼球，立即將鼠倒置，頭朝下，眼眶內(nèi)很快流出血液。一般只適用于一次采血。大部動(dòng)物采血后可以存活，可采另一側(cè)眼球取血。

3、眼眶后靜脈叢采血：用7—10cm長(zhǎng)的微量采血針。將取血管浸入1%肝素溶液，干燥后使用。采血時(shí)，左手拇指和食指抓住鼠兩耳之間的皮膚使鼠固定，并用中指配合，輕輕壓迫頸部?jī)蓚?cè)，阻礙靜脈回流，使眼球充分外突，提示眼眶后靜脈叢充血?？捎蒙倭?%可卡因滴入動(dòng)物眼內(nèi)，使眼部局部麻醉。右手持取血管，將其尖端插入內(nèi)眼角與眼球之間，輕輕向眼底方向刺入，小鼠刺入約2—3mm，大鼠刺入約4—5 mm，當(dāng)感到有阻力時(shí)即停止刺入，旋轉(zhuǎn)取血管以切開(kāi)靜脈叢，血液即流入取血管中，采血結(jié)束后，拔出取血管，放松左手，出血即停止。用本法短期內(nèi)可重復(fù)采血。小鼠一次可采血0.2—0.3 ml，大鼠一次可采0.5—0.1ml。

4、頸靜脈或頸動(dòng)脈采血：將鼠麻醉，剪去一側(cè)頸部外側(cè)被毛，作頸靜脈或頸動(dòng)脈分離手術(shù)，用注射器即可抽出所需血量。也可插入導(dǎo)管，反復(fù)采血。

5、斷頭采血：操作者左手拇指和食指握住鼠頸部，頭朝下，用利剪在頭頸間1/2處迅速剪動(dòng)物頭部，提起動(dòng)物，血液即可流入準(zhǔn)備好的容器中。

6、心臟采血：將動(dòng)物麻醉，使其仰位固定，剪去胸前區(qū)毛，消毒皮膚，在左側(cè)第3—4肋間選擇心博最強(qiáng)處穿刺，血液借心臟跳動(dòng)的力量進(jìn)入注射器。亦可在動(dòng)物麻醉后，切開(kāi)動(dòng)物胸腔，直視心臟內(nèi)抽血或剪破心臟，直接用注射器、吸管等吸血。

2、豚鼠的采血 目的

了解并熟悉豚鼠的采血方法； 用品

刀片、注射器、消毒干棉球、75%酒精棉球、20%的檸檬酸鈉溶液、紗布、脫脂棉。

方法與步驟：

1、耳緣切口采血：先將豚鼠耳消毒，用刀片割破耳緣，在切口邊緣涂上20%的檸檬酸鈉溶液，防止血凝，則血可自切口處流出。此法采血每次可采0.5ml左右。

2、背中足靜脈采血：固定豚鼠，將其右或左后肢膝關(guān)節(jié)伸直，腳背消毒，找出背中足靜脈，左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手將注射針刺入靜脈，拔針后立即出血。采血后用紗布或脫脂棉壓迫止血。

3、心臟采血：選心跳最明顯的部位把注射針刺入心臟，血液即流入針管。心臟采血時(shí)所用的針頭應(yīng)細(xì)長(zhǎng)些，以免發(fā)生采血后穿刺孔出血。

3、家兔的采血 目的 了解并熟悉家兔的采血方法； 掌握家兔的耳緣靜脈采血方法。用品

常用手術(shù)器械、玻璃取血管、計(jì)數(shù)板、注射器、顯微鏡。內(nèi)容

1、耳緣靜脈采血：將兔固定，拔去耳緣靜脈局部的被毛，消毒，用手指輕彈兔耳，使靜脈擴(kuò)張，用針頭刺耳緣靜脈末端，血液即流出。本法為兔最常用的采血方法，可多次重復(fù)使用。

2、耳中央動(dòng)脈采血：在兔耳中央有一條較粗的、顏色較鮮紅的中央動(dòng)脈。用左手固定兔耳，右手持注射器，在中央動(dòng)脈的末端，沿著與動(dòng)脈平行的向心方向刺入動(dòng)脈，即可見(jiàn)血液進(jìn)入針管。由于兔耳中央動(dòng)脈容易痙攣，故抽血前必須讓兔耳充分充血，采血時(shí)動(dòng)作要迅速。采血所用針頭不要太細(xì)，一般用6號(hào)針頭，針刺部位從中央動(dòng)脈末端開(kāi)始，不要在近耳根部采血。

3、頸靜脈采血：將家兔麻醉，剪去一側(cè)頸部外側(cè)被毛，作頸靜脈或頸動(dòng)脈分離手術(shù)，用注射器即可抽出所需血量。也可插入導(dǎo)管，反復(fù)采血。

4、心臟采血：穿刺部位在第三肋間胸骨左緣1mm處，選心跳最明顯的部位把注射針刺入心臟，血液即流入針管。心臟采血時(shí)所用的針頭應(yīng)細(xì)長(zhǎng)些，以免發(fā)生采血后穿刺孔出血。

4、小白鼠RBC、WBC計(jì)數(shù) 目的

1、復(fù)習(xí)小白鼠眼眶后靜脈叢采血；

2、學(xué)習(xí)微量采血法和紅、白細(xì)胞計(jì)數(shù)法。原理

用加有抗凝劑的溶液將定量的血液稀釋，滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)室內(nèi)，于顯微鏡下計(jì)數(shù)，求出一定容積的稀釋血液中的RBC、WBC數(shù)，再將其換算成1L血液中的RBC、WBC個(gè)數(shù)。用品

血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、計(jì)數(shù)器、顯微鏡、微量吸血管、酒精棉球、消毒脫脂棉球、RBC稀釋液（0.9%NaCl溶液）或RBC稀釋液：NaCl（維持滲透壓）0.5g，Na2SO4（使溶液比重增加，紅細(xì)胞均勻分布不易下沉）2.5g，HgCl2（固定紅細(xì)胞并防腐）0.25g，蒸餾水加至100ml。

WBC稀釋液，其成分為：冰醋酸1ml（破壞紅細(xì)胞），1%龍膽紫1ml（染白細(xì)胞核，便于計(jì)數(shù)），加蒸餾水至100ml。方法與步驟

1、熟悉血細(xì)胞計(jì)數(shù)板和微量吸血管的構(gòu)造

（1）計(jì)數(shù)板是一塊厚厚的長(zhǎng)方形玻璃板，板的中部有四條直槽，內(nèi)側(cè)兩槽中間有一條橫槽，把中部隔成兩個(gè)長(zhǎng)方型的平臺(tái)。此平臺(tái)比整個(gè)玻璃板的平臺(tái)低0.1mm，當(dāng)放上蓋玻片后，平臺(tái)與蓋玻片之間的高度為0.1mm,平臺(tái)中部有3mm×3mm精確劃分的9個(gè)大方格，稱為計(jì)數(shù)室,每個(gè)大方格的面積為1mm×1mm=1mm2, 體積為0.1mm3。中央的大方格則由雙線精確劃分為25個(gè)中方格，每個(gè)中方格的面積為0.2mm×0.2mm=0.04mm2,體積為0.004mm3,每個(gè)中方格又用單線精確劃分成16個(gè)小方格。適用于RBC計(jì)數(shù)。

（2）微量吸血管 一次性玻璃細(xì)管，以防交叉感染。該管長(zhǎng)12cm，在4.5cm處和9cm處各有一定量標(biāo)記，分別10μl和20μl。在11cm處有一色標(biāo)，為連 結(jié)橡膠吸頭的標(biāo)記。

2、微量采血和稀釋

（1）先準(zhǔn)確吸取3.98mlRBC稀釋液于一潔凈的試管內(nèi)。

（2）手持微量吸血管，將其管口浸入血滴，緩緩吸入血液至20μl處，如吸入血液稍過(guò)量，可用手指或干棉球輕觸管口，緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)，可使血液吸出，至恰好與刻度相符。用干棉球?qū)⒐芸谕饷娴难翰潦酶蓛?。將血液加入到?zhǔn)備好的RBC稀釋液中。注意，應(yīng)將采血管垂直插入稀釋液底部，緩緩擠出血液使之不擴(kuò)散，輕吸上清液再擠出，使血液完全轉(zhuǎn)入到試管中。

（3）將血液和稀釋液混勻。

3、充液

取潔凈計(jì)數(shù)板及蓋玻片，將蓋玻片平放在計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上。用干凈吸血管或小吸管吸少量混勻的RBC稀釋液，然后將管口斜置于蓋玻片邊緣的計(jì)數(shù)板毛玻璃斜面上，擠出少量稀釋液，此時(shí)液體即由于毛細(xì)管作用而進(jìn)入計(jì)數(shù)室內(nèi)。但須注意，如果計(jì)數(shù)室內(nèi)留有氣泡或稀釋液過(guò)多以致溢出室外的凹溝中，都應(yīng)該洗去，再重新充液。

4、計(jì)數(shù)

充液后應(yīng)讓計(jì)數(shù)板靜置8min，待RBC充分下沉后方可進(jìn)行計(jì)數(shù)。先在低倍顯微鏡下觀察RBC分布是否均勻，如果分布很不均勻，應(yīng)洗去重做。在低倍鏡下找到中央大方格，看清其橫、豎線后即可用高倍鏡來(lái)計(jì)數(shù)。顯微鏡的光圈應(yīng)縮小并降低聚光器使得視野較暗，這樣RBC的輪廓可更清楚些。通常選擇中央大方格四角的4個(gè)中格和中央的1個(gè)中格來(lái)計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)為了防止遺漏，應(yīng)按一定的順序：即第一行先從左向右數(shù)到最后一格，下一行則從右向左數(shù)，以此類推。對(duì)于分布在雙線上的RBC，則可計(jì)數(shù)左側(cè)和上方線上的RBC，即按照“數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右”的原則。計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)將每個(gè)中格的RBC數(shù)記錄下來(lái)，若發(fā)現(xiàn)各中格之間的RBC數(shù)相差超過(guò)15個(gè)時(shí)，表示其分布不均勻，應(yīng)將計(jì)數(shù)室洗凈，重新?lián)u勻吸管中的稀釋血液，再充液進(jìn)行計(jì)數(shù)。

5、計(jì)算

RBC的稀釋倍數(shù)為200倍：（0.02ml+3.98ml）/0.02ml=200 計(jì)數(shù)室5個(gè)中格的總?cè)莘e為0.02mm3，設(shè)5個(gè)中格RBC總數(shù)為X，則1mm3稀釋液RBC總數(shù)為X×50個(gè)。由此可知，每毫升血液中實(shí)際RBC數(shù)目：X×50×200個(gè)，即10000X，再乘以106得出每升血液中的RBC數(shù)。WBC基本與RBC相同，不同之處：

1、WBC稀釋液，其成分為：冰醋酸1ml（破壞紅細(xì)胞），1%龍膽紫1ml（染白細(xì)胞核，便于計(jì)數(shù)），加蒸餾水至100ml。

2、計(jì)數(shù)板四角的四個(gè)大方格又各分為16個(gè)中方格，適用于WBC計(jì)數(shù)。

3、吸取WBC稀釋液為0.38ml，血液稀釋了20倍。

4、在計(jì)數(shù)WBC時(shí)，計(jì)數(shù)四角的4個(gè)大方格中的WBC總數(shù)。其總?cè)莘e為0.4mm3,換算成每升血液中的WBC數(shù)時(shí)，4個(gè)大方格內(nèi)WBC數(shù)×2.5×20×106=WBC數(shù)/L。

5、計(jì)數(shù)時(shí)，如發(fā)現(xiàn)大方格之間的WBC數(shù)相差超過(guò)10個(gè)時(shí)，表示W(wǎng)BC分布不均勻，應(yīng)重新充液計(jì)數(shù)。思考題：

1、在實(shí)際操作中，你認(rèn)為哪種采血方法效果好？為什么？

2、小結(jié)在操作過(guò)程中，哪些因素可能影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性？ 實(shí)驗(yàn)

三、常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥、胰島素驚厥

1、小白鼠的給藥 目的：

1、了解并熟悉小白鼠、豚鼠、家兔的給藥方法；

2、掌握小白鼠的皮下注射、腹腔注射。

3、了解胰島素調(diào)節(jié)血糖水平的機(jī)能。

用品：小鼠專用灌胃針、注射器、75%酒精棉球。

內(nèi)容：

1．灌胃給藥

小鼠專用灌胃針由注射器和喂管組成，喂管長(zhǎng)約1nm，喂管尖端焊有一金屬小圓球，金屬球中空，用途是防止喂管插入時(shí)造成損傷。金屬球彎成20度角，以適應(yīng)口腔與食道之間彎曲。將喂管插頭緊緊連接在注射器的接口上，吸入定量的藥液；左手捉住小鼠，右手拿起準(zhǔn)備好的注射器。將喂管針頭尖端防放進(jìn)小鼠口咽部，順咽后壁輕輕往下推，喂管會(huì)順著食管滑入小鼠的胃，插入深度約3cm。用中指與拇指捏住針筒，食指按著針竿的頭慢慢往下壓，即可將注射器忠的藥液灌入小鼠的胃中。在插入過(guò)程中如遇到阻力或可看見(jiàn)1/3的針管，則江喂管取出重新插入，因?yàn)檫@時(shí)灌胃并沒(méi)有插入胃中。

2．注射給藥

（1）皮下注射給藥

皮下注射給藥是將藥液推入皮下結(jié)締組織，經(jīng)毛細(xì)血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)的過(guò)程。作皮下注射常選項(xiàng)背或大腿內(nèi)側(cè)的皮膚。操作時(shí)，常規(guī)消毒注射部位皮膚，然后將皮膚提起，注射針頭取一鈍角角度刺入皮下，把針頭輕輕向左右擺動(dòng)，易擺動(dòng)則表示已刺入皮下，再輕輕抽吸，如無(wú)回血，可緩慢地將藥物注入皮下。拔針時(shí)左手拇、食指捏住進(jìn)針部位片刻，以防止藥物外漏。注射量約為0.1-0.3ml/10g體重。

（2）皮內(nèi)注射給藥

是將藥液注入皮膚的表皮和真皮之間，觀察皮膚血管的通透性變化或皮內(nèi)反應(yīng)，接種、過(guò)敏實(shí)驗(yàn)等一般作皮內(nèi)注射。先將注射部位的被毛剪掉，局部常規(guī)消毒，左手拇指和食指按住皮膚使之繃緊，在兩指之間，用結(jié)核菌素注射器連接4.5針頭穿刺，針頭進(jìn)入皮膚淺層，再向上挑起并梢刺入，將藥液注入皮內(nèi)。注射后皮膚出現(xiàn)一白色小皮丘，而皮膚上的毛孔極為明顯。注射量為0.1ml/次。

（3）肌肉注射給藥

小鼠體積小，肌肉少，很少采用肌肉注射。當(dāng)給小鼠注射不溶于水而混懸于油或其他溶劑中的藥物時(shí)，采用肌肉注射。操作時(shí)1人保定小鼠，另一人用左手抓住小鼠的1條后肢，右手拿注射器。將注射器與半腱肌呈60°角迅速插入1/4，注入藥液。用藥量：不超過(guò)0.1ml/10g體重。

(4)靜脈注射給藥

將小鼠放在金屬籠或鼠夾中，通過(guò)金屬籠或鼠夾的孔拉出尾巴，用左手抓住小鼠尾巴中部，小鼠的尾部有2條動(dòng)脈和3條靜脈，2條動(dòng)脈分別在尾部的背側(cè)面和腹側(cè)面，3條靜脈呈品字型分布，一般采用左右兩側(cè)的靜脈。拔去沿尾部靜脈走向的毛，置尾巴于45-50℃溫水中浸泡幾分鐘或用75%酒精棉球反復(fù)擦拭尾部，以達(dá)到消毒和使尾部血管擴(kuò)張及軟化表皮角質(zhì)的目的。當(dāng)尾部靜脈注射時(shí),以左手拇指和食指捏住鼠尾兩惻，使靜脈更為充盈，用中指從下面托起尾巴，以無(wú)名指夾住尾巴的末梢，右手持4號(hào)針頭注射器，使針頭與靜脈平行(小于30° 角)，從尾巴的下1/4處進(jìn)針，開(kāi)始注入藥物時(shí)應(yīng)緩慢，仔細(xì)觀察，如果無(wú)阻力，無(wú)白色皮丘出現(xiàn)，說(shuō)明已刺入血管，可正式注入藥物。有的實(shí)驗(yàn)需連日反復(fù)尾靜脈注射給藥，注射部位應(yīng)盡可能從尾端開(kāi)始，按次序向尾根部移動(dòng)，更換血管位置注射給藥。注射量為0.05-0.1ml/10g體重。拔出針頭后，用拇指按住注射部位輕壓1-2min，防止出血。

（5）腹腔注射

左手提起并固定小鼠，使鼠腹部朝上，鼠頭略低于尾部，右手持注射器將針頭在下腹部近腹白線的兩側(cè)進(jìn)行穿刺，針頭刺入皮膚后進(jìn)針3nm左右，接著使注射針頭與皮膚呈45°角刺入腹肌，穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹膜腔，當(dāng)針尖穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹膜腔后抵抗感消失。固定針頭，保持針尖不動(dòng)，回抽針?biāo)?，如無(wú)回血、腸液和尿液后即可注射藥液。注射量為0.1-0.2ml/10g體重。

2、豚鼠的給藥

1）皮下注射給藥

皮下注射部位取頸背、腋下、側(cè)腹或豚鼠后大腿的內(nèi)側(cè)，注射時(shí)以左手拇指和食指提起豚鼠皮膚，將連有5（1/2）號(hào)針頭的注射器刺入皮下。

2）肌肉注射給藥

選用大腿外側(cè)肌肉進(jìn)行注射。操作時(shí)1人保定豚鼠，另一人用左手抓住豚鼠的1條后肢，右手拿注射器。將注射器與半腱肌呈60°角迅速插入1/4，注入藥液。用藥量：不超過(guò)0.1ml/10g體重。

3、家兔的給藥

1）靜脈注射 兔耳部血管分布清晰。兔耳中央為動(dòng)脈，耳外緣為靜脈。內(nèi)緣靜脈深不易固定，故不用。外緣靜脈表淺易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指彈動(dòng)或輕揉兔耳，使靜脈充盈，左手食指和中指夾住靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠(yuǎn)端，無(wú)名指及小指墊在下面，右手持注射器連6號(hào)針頭盡量從靜脈的遠(yuǎn)端刺入，移動(dòng)拇指于針頭上以固定針頭，放開(kāi)食指和中指，將藥液注入，然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。

2）皮下注射 注射時(shí)以左手拇指和食指提起皮膚，將連有5（1/2）號(hào)針頭的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、貓多在大腿外側(cè)，豚鼠在后大腿的內(nèi)側(cè)或小腹部；大白鼠可在側(cè)下腹部。兔在背部或耳根部注射。

3）肌肉注射

肌肉注射應(yīng)選肌肉發(fā)達(dá)，無(wú)大血管通過(guò)的部位，一般多選臀部。注射時(shí)垂直迅速刺入肌肉，回抽針?biāo)ㄈ鐭o(wú)回血，即可進(jìn)行注射。

4）腹腔注射

用家兔做實(shí)驗(yàn)時(shí)，進(jìn)針部位為下腹部的腹白線離開(kāi)1cm處。

小白鼠胰島素驚厥

基本原理

胰島素是調(diào)節(jié)機(jī)體血糖的激素之一，當(dāng)體內(nèi)胰島素含量增高時(shí)，便引起血糖下降，動(dòng)物出現(xiàn)驚厥現(xiàn)象。動(dòng)物與器材

小白鼠數(shù)只、1ml注射器、鼠籠、胰島素溶液（2μ/ml）、50%葡萄糖溶液、酸性生理鹽水。方法與步驟

1．取4只小白鼠稱重后，分實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組2只。2．給實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物腹腔注射胰島素溶液（0.1ml/10g體重）。3．給對(duì)照組動(dòng)物腹腔注射等量的酸性生理鹽水。4．將兩組動(dòng)物都放在30—37℃的環(huán)境中，并記下時(shí)間，注意觀察并比較兩組動(dòng)物的神態(tài)、姿勢(shì)及活動(dòng)情況。

5．當(dāng)動(dòng)物出現(xiàn)角弓反張、亂滾等驚厥反應(yīng)時(shí)，記下時(shí)間，并立即皮下注射葡萄糖溶液（0.1ml/10g體重）。

6．比較對(duì)照組動(dòng)物、注射葡萄糖的動(dòng)物、以及出現(xiàn)驚厥而未經(jīng)搶救的動(dòng)物的活動(dòng)情況，并分析所得的結(jié)果。注意事項(xiàng)

1．動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)前必須饑餓18—24h。2．一定要用pH2.5—3.5的酸性生理鹽水配制胰島素溶液。因?yàn)橐葝u素在酸性環(huán)境中才有效應(yīng)。

3．酸性生理鹽水的配制將10ml0.1mol/LHCl加入300ml生理鹽水中，調(diào)整其pH值在2.5—3.5，如果偏堿，可加入同樣濃度的鹽酸調(diào)整。

4．注射了胰島素的動(dòng)物最好放在30—37℃環(huán)境中保溫，夏天可為室溫，冬天則應(yīng)高些，可到36—37℃。因溫度過(guò)低，反應(yīng)出現(xiàn)較慢。思考題

試分析糖尿病產(chǎn)生的原因及治療方法。

實(shí)驗(yàn)

四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的全身麻醉、損毀小白鼠小腦的效應(yīng)

1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的全身麻醉 目的：

了解影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉的因素； 了解并熟悉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法； 掌握大、小白鼠的吸入麻醉法。原理：

麻醉(anesthesia)的基本任務(wù)是消除實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所至的疼痛和不適感覺(jué)，保障實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的安全，使動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)中服從操作，確保實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。

全身麻醉方法：麻醉藥經(jīng)呼吸道吸入或靜脈、肌肉注射，產(chǎn)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制，呈現(xiàn)神志消失，全身不感疼痛，肌肉松弛和反射抑制等現(xiàn)象，這種方法稱全身麻醉。其特點(diǎn)為抑制深淺與藥物在血液內(nèi)的濃度有關(guān)，當(dāng)麻醉藥從體內(nèi)排出或在體內(nèi)代謝破壞后，動(dòng)物逐漸清醒，不留后遺癥。

用品：注射器、乙醚、戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉、氨基甲酸乙酯、內(nèi)容：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉是一項(xiàng)復(fù)雜系統(tǒng)的工作。正確的麻醉處理，是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)成功的有力保障。而麻醉處理不當(dāng)，會(huì)給實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)難以分析的誤差。要想獲得良好的麻醉效果，除掌握實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉的基本知識(shí)和技術(shù)、遵循科學(xué)的麻醉程序外，還應(yīng)了解影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉的各種因素，如動(dòng)物因素、環(huán)境因素等。

1、動(dòng)物因素

1、年齡和體重

動(dòng)物對(duì)藥物的反應(yīng)隨年齡的不同而有差異。有人將大鼠、小鼠按年齡分成幼年、成年和老年3組，觀察年齡對(duì)乙醇、戊烷和二氯乙烷等急性毒性的影響。按LD50及麻醉濃度觀察，敏感性顯示為幼年>成年>老年。

體重小的動(dòng)物每單位體重的基礎(chǔ)代謝率較大動(dòng)物高，因此，動(dòng)物越小，每單位體重所需的麻醉藥劑量越大。一些慢性實(shí)驗(yàn)，觀察時(shí)間較長(zhǎng)，可選擇年幼、體重較小的動(dòng)物做實(shí)驗(yàn)。

2、性別 實(shí)驗(yàn)證明，不同性別的動(dòng)物對(duì)同一藥物的敏感性不同，對(duì)各種刺激的反應(yīng)也不盡一致，雌性動(dòng)物性周期不同階段和懷孕、授乳時(shí)的機(jī)體反應(yīng)性有較大的改變，因此，一般情況優(yōu)先選雄性動(dòng)物或雌雄各半做實(shí)驗(yàn)。

3、生理和健康狀況 體瘦、肌肉發(fā)達(dá)的動(dòng)物較脂肪多的動(dòng)物所需麻醉藥量大，這是因?yàn)橄鄬?duì)非代謝組織，其基礎(chǔ)代謝率較低。活動(dòng)可增加代謝率，因此，好動(dòng)的動(dòng)物所需的麻醉量大。身體狀況差的動(dòng)物，所需麻醉藥量小耐受性降低。易發(fā)生中毒現(xiàn)象。

4、動(dòng)物飼養(yǎng)

保證足夠的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)是維持動(dòng)物健康的重要因素，其中飼料對(duì)動(dòng)物的關(guān)系更為密切。動(dòng)物的生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖、抵御疾病的能力及一切生命活動(dòng)都依賴于營(yíng)養(yǎng)豐富的飼料。動(dòng)物在麻醉之前一周應(yīng)提前到位，給于精心的飼養(yǎng)管理，使其處于良好的健康狀態(tài)。

2、環(huán)境因素

1、溫度

在一定范圍內(nèi)，溫度緩慢的變化，機(jī)體可以進(jìn)行自動(dòng)調(diào)節(jié)與之相適應(yīng)。但變化莫測(cè)過(guò)大或過(guò)急，對(duì)機(jī)體將產(chǎn)生行為和生理等不良影響。因此，實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度過(guò)高或過(guò)低都能導(dǎo)致機(jī)體抵抗力下降，對(duì)麻醉藥物的敏感性升高，易發(fā)生中毒現(xiàn)象。因此影響麻醉效果。

2、濕度；

3、空氣的流速和清潔度 方法：

1.吸入麻醉法 麻醉藥以蒸氣或氣體狀態(tài)經(jīng)呼吸道吸入而產(chǎn)生麻醉者，稱吸入麻醉，常用乙醚作麻醉藥。吸入法對(duì)多數(shù)動(dòng)物有良好的麻醉效果，其優(yōu)點(diǎn)是易于調(diào)節(jié)麻醉的深度和較快的終止麻醉，缺點(diǎn)是中、小型動(dòng)物較適用，對(duì)大型動(dòng)物如狗的吸入麻醉操作復(fù)雜，通常不用。

具體方法是：使用乙醚麻醉兔及大小鼠時(shí)，可將動(dòng)物放入玻璃麻醉箱內(nèi)，把裝有浸潤(rùn)乙醚棉球的小燒杯放入麻醉箱，然后觀察動(dòng)物。開(kāi)始動(dòng)物自主活動(dòng)，不久動(dòng)物出現(xiàn)異常興奮，不停地掙扎，隨后排出大小便。漸漸地動(dòng)物由興奮轉(zhuǎn)為抑制，倒下不動(dòng)，呼吸變慢。如動(dòng)物四肢緊張度明顯減低，角膜反射遲鈍，皮膚痛覺(jué)消失，則表示動(dòng)物已進(jìn)入麻醉，可行手術(shù)和操作。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)隨時(shí)觀察動(dòng)物的變化，必要時(shí)把乙醚燒杯放在動(dòng)物鼻部，以維持麻醉的時(shí)間與深度。2.注射麻醉法 常用的麻醉藥有戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉、氨基甲酸乙酯等。大、小鼠和豚鼠常采用腹腔注射法進(jìn)行全身麻醉。狗、兔等動(dòng)物既可腹腔注射給藥，也可靜脈注射給藥。在麻醉興奮期出現(xiàn)時(shí)，動(dòng)物掙扎不安，為防止注射針滑脫，常用吸入麻醉法進(jìn)行誘導(dǎo)，待動(dòng)物安靜后再行腹腔或靜脈穿刺給藥麻醉。在注射麻醉藥物時(shí)，先用麻醉藥總量的三分之二，密切觀察動(dòng)物生命體征的變化，如已達(dá)到所需麻醉的程度，余下的麻醉藥則不用，避免麻醉過(guò)深抑制延腦呼吸中樞導(dǎo)致動(dòng)物死亡。注意事項(xiàng)

1、麻醉劑的用量，除參照一般標(biāo)準(zhǔn)外，還應(yīng)考慮個(gè)體對(duì)藥物的耐受性不同，而且體重與所需劑量的關(guān)系也并不是絕對(duì)成正比的。一般說(shuō)，衰弱和過(guò)胖的動(dòng)物，其單位體重所需劑量較小，在使用麻醉劑過(guò)程中，隨時(shí)檢查動(dòng)物的反應(yīng)情況，尤其是采用靜脈注射，絕不可將按體重計(jì)算出的用量匆忙進(jìn)行注射。

2、動(dòng)物在麻醉期體溫容易下降，要采取保溫措施。

3、靜脈注射必須緩慢，同時(shí)觀察肌肉緊張、角膜反射和對(duì)皮膚夾捏的反應(yīng)，當(dāng)這些活動(dòng)明顯減弱或消失時(shí)，應(yīng)立即停止注射。配制的藥液濃度要適中不可過(guò)高，以免麻醉過(guò)急；但也不能過(guò)低，以減少注入溶液的體積。

4、作慢性實(shí)驗(yàn)時(shí)，在寒冷冬季，麻醉劑在注射前應(yīng)加熱至動(dòng)物體溫水平。思考題

小結(jié)在操作過(guò)程中，哪些因素可能影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉效果？

常用的麻醉劑

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的麻醉劑分為三類，即揮發(fā)性麻醉劑、非揮發(fā)性麻醉劑和中藥麻醉劑。1.揮發(fā)性麻醉劑 這類麻藥包括乙醚、氯仿等。乙醚是常用的吸入麻醉劑，乙醚揮發(fā)性很強(qiáng)，有特殊的氣味，為易燃品，適用于各種動(dòng)物（雞除外），乙醚的作用是抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)。其特點(diǎn)是安全范圍大，肌肉能完全松弛，對(duì)肝和腎的毒性較小，麻醉的誘導(dǎo)期和蘇醒較短，動(dòng)物麻醉深度容易掌握，而且麻醉后蘇醒較快。其副作用是對(duì)呼吸道和結(jié)膜刺激性強(qiáng)，胃腸道反應(yīng)增高，局部刺激作用大，可引起上呼吸道黏膜液體分泌增多，易發(fā)生呼吸道阻塞，使用時(shí)應(yīng)小心。2.非揮發(fā)性麻醉劑 這類麻醉劑種類較多，包括苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉等巴比妥類的衍生物，氨基酸乙脂和水合氯醛。這些麻醉劑使用方便，一次給藥可維持較長(zhǎng)的麻醉時(shí)間，麻醉過(guò)程較平穩(wěn)，動(dòng)物無(wú)明顯掙扎現(xiàn)象。但缺點(diǎn)是蘇醒較慢。（1）戊巴比妥鈉：為中效巴比妥類藥物。戊巴比妥鈉，是常用的麻醉劑，有獸用、人獸共用的產(chǎn)品，使用時(shí)應(yīng)注意藥品質(zhì)量。（2）硫噴妥鈉：硫噴妥鈉為超速效巴比妥類藥物，為淡黃色粉末，有硫臭，易吸水，裝在安瓶中保存。其水溶液不穩(wěn)定，故必須臨時(shí)配制，常配濃度為1%~5%，在0～4℃冰箱中保存，置7天之內(nèi)，其分解甚微；在室溫中則只能保存24h。如見(jiàn)溶液色呈深黃、混濁，即表示已分解，不能使用。該藥麻醉誘導(dǎo)和蘇醒時(shí)間短，一次用藥僅可維持?jǐn)?shù)分鐘。因此，一般用作為誘導(dǎo)麻醉或基礎(chǔ)麻醉。其副作用：對(duì)呼吸系統(tǒng)有明顯的抑制作用，不宜與嗎啡合用。（3）氯胺酮：為中效巴比妥藥物，常用其鹽酸鹽。靜脈或肌肉給藥后，很快起到麻醉作用，但維持時(shí)間較短，一般僅10～20min。為了延長(zhǎng)時(shí)間，可重復(fù)給藥。其副作用是心率加快，血壓升高，有時(shí)還可引起動(dòng)物嘔吐等。（4）水合氯 11 醛：此藥為無(wú)色透明棱狀結(jié)晶，有穿透性的臭氣及腐蝕性苦味。其溶解度較小，常配濃度為5％～10％。配制后的溶液易沉淀，用時(shí)先在水浴鍋中適量加熱，促其融解。作用特點(diǎn)與巴比妥類藥物相似，似一種安全有效的鎮(zhèn)靜催眠藥，能起到全身麻醉作用，其麻醉量與中毒量很接近，故安全范圍小，使用時(shí)應(yīng)注意。其副作用為對(duì)皮膚和粘膜有較強(qiáng)的刺激作用。（5）氨基甲酸乙酯（烏拉坦）：此藥是比較溫和的麻醉藥，安全度大。多數(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物都可使用，更使用于小動(dòng)物。一般用作基礎(chǔ)麻醉，如實(shí)驗(yàn)全部過(guò)程都用此藥麻醉時(shí)，動(dòng)物保溫尤為重要。使用時(shí)常配成20%～25%水溶液，犬、貓、兔直腸灌注1.5g/kg體重；皮下、靜脈、腹腔注射0.75～1g/kg體重。當(dāng)與水合氯醛按1：1比例合并麻醉時(shí)，效果更好。但在作靜脈注射時(shí)必須溶在生理鹽水中，配成5%或10%的溶液，即每千克體重注射10～20ml。蛙類：2g/kg體重，由背部淋巴囊注射。鳥類：1.25g/kg體重，由肌肉注入。鼠：1.5～2g/kg體重，由腹腔注射。（6）異戊巴比妥鈉：常配成5％～10％的水溶液，作用和戊巴比妥鈉相似。使用劑量和方法：犬、貓、兔腹腔和肌肉注射80～100mg/kg體重；靜脈注射40～50mg/kg體重；直腸灌注100mg/kg體重。鼠：腹腔注射100mg/kg體重。3.中藥麻醉劑 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)有時(shí)也用到象洋金花和氫溴酸東莨菪菅堿等中藥麻醉劑，但由于其作用不夠穩(wěn)定，而且常需加佐劑麻醉效果才能理想，故在使用過(guò)程中不能得及普及，因而，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室不選用這類麻醉劑進(jìn)行麻醉。

2、豚鼠的局部麻醉 目的

1、了解并熟悉豚鼠的局部麻醉方法

2、掌握局部浸潤(rùn)麻醉方法。用品

刀片、注射器、消毒干棉球、75%酒精棉球、普魯卡因、利多卡因。原理

用局部麻醉藥阻滯周圍神經(jīng)末梢或神經(jīng)干、神經(jīng)節(jié)、神經(jīng)叢的沖動(dòng)傳導(dǎo)，產(chǎn)生局部性的麻醉區(qū)，稱為局部麻醉。其特點(diǎn)是動(dòng)物保持清醒，對(duì)重要器官功能干擾輕微，麻醉并發(fā)癥少，是一種比較安全的麻醉方法。適用于大中型動(dòng)物各種短時(shí)間內(nèi)的實(shí)驗(yàn)。豚鼠對(duì)麻醉藥物很敏感。內(nèi)容

1.表面麻醉 利用局部麻醉藥的組織穿透作用，透過(guò)粘膜，阻滯表面的神經(jīng)末梢，稱表面麻醉。在口腔及鼻腔粘膜、眼結(jié)膜、尿道等部位手術(shù)時(shí)，常把麻醉藥涂敷、滴入、噴于表面上，或尿道灌注給藥，使之麻醉。

2.局部浸潤(rùn)麻醉：沿手術(shù)切口逐層注射麻醉藥，靠藥液的張力彌散，浸入組織,麻醉感覺(jué)神經(jīng)末梢，稱局部浸潤(rùn)麻醉。常用藥為普魯卡因。在施行局部浸 潤(rùn)麻醉時(shí)，先固定好動(dòng)物，用0.5～1％鹽酸普魯卡因皮內(nèi)注射，使局部皮膚表面呈現(xiàn)一桔皮樣隆起，稱皮丘，然后從皮丘進(jìn)針，向皮下分層注射，在擴(kuò)大浸潤(rùn)范圍時(shí)，針尖應(yīng)從已浸潤(rùn)過(guò)的部位刺入，直至要求麻醉區(qū)域的皮膚都浸潤(rùn)為止。每次注射時(shí)，必須先抽注射器，以免將麻醉藥注入血管內(nèi)引起中毒反應(yīng)。3.區(qū)域阻滯麻醉：在手術(shù)區(qū)四周和底部注射麻醉藥阻斷疼痛的向心傳導(dǎo),稱區(qū)域阻斷麻醉。常用藥為普魯卡因。

4.神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉：在神經(jīng)干(叢)的周圍注射麻醉藥，阻滯其傳導(dǎo),使其所支配的區(qū)域無(wú)疼痛，稱神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉。常用藥為利多卡因。

3、損毀小白鼠小腦的效應(yīng) 目的：

1、掌握小白鼠的麻醉方法；

2、了解小腦的機(jī)能?；驹?/p>

小腦具有維持身體平衡，調(diào)節(jié)肌緊張和協(xié)調(diào)肌肉運(yùn)動(dòng)等機(jī)能。當(dāng)小腦損傷后，隨著破壞程度的不同，可表現(xiàn)出不同程度的肌緊張失調(diào)及平衡失調(diào)。動(dòng)物與器材

小白鼠、常用手術(shù)器械、大頭針、麻醉口罩、乙醚、棉花。方法與步驟

1．用乙醚麻醉小鼠（注意仔細(xì)觀察呼吸，若呼吸變慢時(shí)則表示動(dòng)物已麻醉）。2．自頭頂部至耳后沿正中線剪開(kāi)皮膚，將頸肌向下剝離。透過(guò)透明的顱骨即可看清小腦的位置（圖9-6）用大頭針刺穿顱骨，直達(dá)小腦（2—3mm），攪毀該側(cè)小腦（注意不可深刺，以免損傷腦干）。

3．待小鼠清醒后，可見(jiàn)其向一側(cè)旋轉(zhuǎn)或翻滾。如損傷較輕，小鼠向健側(cè)旋轉(zhuǎn)；當(dāng)損傷重時(shí)，則向損傷側(cè)翻滾。

4．將實(shí)驗(yàn)用完的小鼠拉斷頸椎處死后棄之。思考題

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明小腦的生理機(jī)能。

實(shí)驗(yàn)

五、家兔的熱原實(shí)驗(yàn)

目的

1、練習(xí)家兔的各種注射方法；

2、了解家兔熱源反應(yīng)的基本原理。原理

家兔體溫變化十分靈敏，最易產(chǎn)生發(fā)熱反應(yīng)，發(fā)熱反應(yīng)典型、恒定，因此常選用家兔進(jìn)行這方面的研究。方法與步驟

1、用體溫計(jì)測(cè)量實(shí)驗(yàn)前家兔的正常體溫。

2、采用以下方法進(jìn)行熱源實(shí)驗(yàn)：給家兔靜脈注射傷寒一副傷寒四聯(lián)菌苗0.5～2.0ml/kg，菌苗含量應(yīng)不低于100億/ml；皮下注射2%二硝基酚溶液（30毫克）15～20分鐘后開(kāi)始發(fā)熱；肌注10%蛋白胨1.0g/Kg；皮下注射消毒脫脂牛奶3～5ml。

3、一至兩小時(shí)后，用體溫計(jì)再次測(cè)量家兔的體溫，看其有何變化。思考題

在熱源實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，你認(rèn)為應(yīng)注意哪些方面？

實(shí)驗(yàn)

六、動(dòng)物體內(nèi)常見(jiàn)寄生蟲卵檢查

目的

1、學(xué)習(xí)常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物蟲卵標(biāo)本的采集和檢查方法。

2、學(xué)會(huì)對(duì)不同蟲卵進(jìn)行鑒定。用品

大鼠、小鼠、獼猴的糞便、示范片、蓋玻片、載玻片、目鏡測(cè)微尺、物鏡測(cè)微尺 方法

1、直接涂片法

包括糞便、血液、腸內(nèi)容物等直接涂片檢查。取一載玻片,在其上加一滴生理鹽水,取少許糞便或腸內(nèi)容物與生理鹽水混勻后于顯微鏡下觀察。血液可直接滴于載玻片上，制成涂片，加蓋玻片觀察。

2、蟲卵收集法

a.沉淀集卵法:取糞便加適量清水,混勻后過(guò)濾,重復(fù)數(shù)次至液體清亮為止,靜止沉淀十分鐘后,取底部沉淀物作鏡檢。此法適于檢查血吸蟲卵。

b.飽和鹽水漂浮法:利用蟲卵的比重小于飽和鹽水的原理,使線蟲卵和幾種絳蟲卵或包囊漂浮于液面上,提高檢查效果。實(shí)驗(yàn)步驟和內(nèi)容：

1、自然感染蠕蟲的調(diào)查

取獼猴糞便在盛有生理鹽水的培養(yǎng)皿中漂洗,直接查找寄生蟲蟲體和蟲卵,根據(jù)蟲體和蟲卵的形態(tài),簽別蟲種。

2、直接涂片法或沉淀集卵法檢查寄生蟲卵。

3、觀察蛔蟲、蟯蟲、絳蟲和血吸蟲卵標(biāo)本裝片。

注意:觀察各種蟲卵的大小、形狀、顏色、卵膜結(jié)構(gòu)等以及各種蟲卵的特征

A、蛔蟲卵(線蟲綱一蟲體線形或長(zhǎng)圓柱形,雌雄異體)受精卵為橢圓形,大小約40-60微米(35-50×45-76),卵殼的表面有一層凸凹不平的蛋白質(zhì)膜,被膽汁染成棕黃色,整個(gè)蟲卵呈棕黃色。卵殼厚而透明。卵內(nèi)有一近圓形的卵細(xì)胞。

未受精卵多為長(zhǎng)橢圓形,大小約40一60微米(39-40×88-94),卵殼與蛋白質(zhì)膜較薄,卵內(nèi)充滿大小不等的屈光顆粒。

無(wú)論受精卵和未受精卵其蛋白質(zhì)膜有時(shí)缺失,無(wú)蛋白質(zhì)膜的受精卵是無(wú)色透明,請(qǐng)注意與其它蟲卵的區(qū)別。

B、蟯蟲(線蟲綱：蟲體細(xì)小,乳白色,似一白色線頭。)蟲卵為橢圓形,兩側(cè)不對(duì)稱,一側(cè)扁平,一側(cè)稍凸。大小約25-55微米(20-30×50-60),卵殼較厚,無(wú)色透明,內(nèi)含幼蟲。

C、絳蟲(絳蟲綱：腹背扁平、帶狀、分節(jié),雌雄同體,常見(jiàn)的有鏈狀帶絳蟲。)蟲卵近球形,較小,大小約45-70微米,蟲卵自孕節(jié)排出時(shí)卵殼己脫落,鏡下所見(jiàn)是具胚膜的六鉤蚴,胚膜較厚,棕黃色有放射狀的條紋。

D、血吸蟲(吸蟲綱一多有腹背扁平,舌狀或葉狀,有吸盤,雌雄異體,常見(jiàn)的有日本血吸蟲等。)蟲卵為橢圓形,淡黃色。大小約74-106×55-80微米,卵殼較薄無(wú)蓋,殼 的一側(cè)有小棘,一般在鏡下不易見(jiàn)到。成熟的卵內(nèi)含有一個(gè)毛蚴。注意事項(xiàng)

1.高倍鏡下觀察必須加蓋玻片；

2.采用直接涂片法時(shí)，不要涂得太多，必須分散開(kāi)，均勻； 3.觀察寄生蟲卵前，需在高倍鏡下校對(duì)目鏡每格的長(zhǎng)度，才能算出蟲卵大小； 4.先在低倍鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)后換為高倍鏡。實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容

1、繪出鏡下觀察到的蛔蟲、蟯蟲、絳蟲和血吸蟲卵。

2、概括總結(jié)蛔蟲、蟯蟲、絳蟲和血吸蟲卵的形態(tài)區(qū)別要點(diǎn)。

3、在整過(guò)操作過(guò)程中的注意事項(xiàng)。

實(shí)驗(yàn)

七、雌性小鼠動(dòng)情周期的檢查

目的

1、學(xué)習(xí)小鼠陰道內(nèi)液體的采集方法；

2、了解在動(dòng)情周期的不同階段，小鼠陰道涂片的組織學(xué)變化。原理

哺乳類的雌性動(dòng)物在性成熟后，出現(xiàn)動(dòng)情周期變化，其中嚙齒類動(dòng)物在動(dòng)情周期不同階段，陰道粘膜發(fā)生比較典型的變化。因此，根椐陰道涂片的細(xì)胞學(xué)改變，可以推斷卵巢功能的周期性變化。

未成熟的大、小白鼠尚無(wú)自然的動(dòng)情周期，但當(dāng)注射絨毛膜促性腺激素后，則可使其提前出現(xiàn)。用品

顯微鏡、棉簽、載玻片、生理鹽水、堿性美藍(lán)溶液（配制：美藍(lán)0.3g，溶于95%的乙醇30ml中，再加蒸餾水至100ml及10%NaOH溶液0.1ml）等。動(dòng)物

性成熟的雌性小白鼠。方法與步驟

1、小鼠陰道內(nèi)液體取法

取陰道內(nèi)液體有下列三種方法：

（1）沖洗法 將裝有消毒生理鹽水的滴管輕輕插入動(dòng)物陰道內(nèi)，按壓滴管橡皮頭，將生理鹽水打入陰道，然后吸出，如此2-3次。最后將滴管中的陰道沖洗液滴在載玻片上。

（2）沾取法 將消毒的細(xì)棉簽用生理鹽水潤(rùn)濕，輕輕插入動(dòng)物陰道內(nèi)0.5cm，慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)一下取出。

（3）刮取法 用光滑的玻璃小勺或牛角制 小刮片慢慢插入陰道內(nèi)，在陰道壁輕輕刮取一點(diǎn)陰道內(nèi)含物。

2、涂片

將帶有陰道內(nèi)含物的細(xì)棉簽等在載玻片上均勻的轉(zhuǎn)動(dòng)做成涂片，然后將涂片在空氣中自然干燥。

3、染色

用堿性美藍(lán)溶液染色5min左右，用蒸餾水沖洗剩余的美藍(lán)溶液（注意：應(yīng)從涂片邊緣慢慢沖洗，切不要把細(xì)胞沖洗掉），并使之干燥。

4、觀察結(jié)果

在顯微鏡下觀察陰道分泌物涂片的組織學(xué)變化，確定動(dòng)情周期變化的不同階 段。

階段

表 小白鼠性周期陰道分泌物涂片變化 持續(xù)時(shí)卵巢變化 涂片可見(jiàn) 間/h 卵泡加速大量有核上皮細(xì)胞，少量角化

生長(zhǎng) 細(xì)胞

卵泡成熟、滿視野角化上皮細(xì)胞，少量有

排卵 核上皮細(xì)胞

黃體生成 角化上皮細(xì)胞及白細(xì)胞 動(dòng)情前期

動(dòng)情期

動(dòng)情后期

動(dòng)情 黃體退化 大量白細(xì)胞及少量黏液 間期

注意事項(xiàng)：

1.采取陰道（下口）內(nèi)分泌物，不是腸道內(nèi)容物（上口）； 2.制作涂片要均勻；

3.自然干燥后，再染色8-10min；

4.用蒸餾水沖洗剩余的美藍(lán)溶液時(shí)，應(yīng)從涂片邊緣慢慢沖洗； 5.在鏡下鏡檢（如用高倍鏡，必須加蓋玻片）。

實(shí)驗(yàn)

八、小鼠下頜骨形態(tài)分析

目的與原理

小鼠的下頜骨形態(tài)有高度的遺傳穩(wěn)定性，不同品種或品系小鼠下頜骨的形態(tài)、大小不同，因此該項(xiàng)技術(shù)可以作為純系小鼠、純系大鼠遺傳質(zhì)量的檢測(cè)方法之一。下頜骨形態(tài)分析是一種定量技術(shù)?？申U明許多遺傳學(xué)差異。主要是對(duì)小鼠或大鼠右側(cè)下頜骨形態(tài)做對(duì)比分析，通過(guò)多變量分析，建立判別函數(shù)進(jìn)行性別判別。

常規(guī)標(biāo)本制備方法

1.隨機(jī)抽取小鼠數(shù)只（60日齡，體重相當(dāng)）處死，取下頭顱。

2.投入沸水中煮約10分鐘，冷卻后把頭顱上的組織仔細(xì)剔除，放在含有木瓜蛋白酶的自來(lái)水中（下頜骨帶的殘肉與酶的比例為1:25)，水的PH為4.5，消化溫度為40—60℃，最適溫度為52 ℃，保溫過(guò)夜，取出下頜骨，用小鑷子去掉殘肉和門齒，再用水洗凈。

3.自然干燥，存放于塑料袋中。

4.制作坐標(biāo)底片，用于測(cè)量下頜骨有關(guān)變量。

5.在坐標(biāo)底片上用兩個(gè)平直的玻璃細(xì)條粘成直角，成L型，與坐標(biāo)的縱軸和橫軸相吻合，壓平待用。動(dòng)物

小白鼠 方法與步驟

1.下頜骨的11個(gè)測(cè)量點(diǎn)參見(jiàn)下圖。

2.將待測(cè)標(biāo)本平放在解剖鏡載物臺(tái)的標(biāo)尺上，下頜骨前端和下部邊緣與標(biāo)尺上的L型玻璃條的X及Y軸分別貼緊放平，將每個(gè)標(biāo)本11個(gè)變量的結(jié)果記錄下來(lái)，交給老師，統(tǒng)一處理。

3、打開(kāi)SPSS，輸入數(shù)據(jù)；定義變量；

4、操作步驟：Analyze→Classify →Discriminant →open discriminant analyze;Gender →grouping variables(define range);all variables →independent;Method →enter independent together;open statistics →function coefficients →Fisher’s,unstandardized →continue;open classify →display→summary table,casewise results;prior probabilities →All groups equal → continue →OK。結(jié)果分析：求出判別系數(shù)和判別函數(shù)；

2、得到判別代結(jié)果和判別率；

3、驗(yàn)證回代和新標(biāo)本判別。注意事項(xiàng)

1、標(biāo)本要保證完整性；

2、小白鼠雌雄的體重要分別相近；

3、突變性的標(biāo)本要舍去；

4、測(cè)量要注意準(zhǔn)確；

5、每組標(biāo)本的性別，不要混淆。

實(shí)驗(yàn)

九、家兔的神經(jīng)分離、氣管插管

目的

1、學(xué)習(xí)氣管插管術(shù)；

2、學(xué)習(xí)分離及識(shí)別有關(guān)的血管和神經(jīng)；

3、學(xué)習(xí)測(cè)定家兔呼吸運(yùn)動(dòng)的方法。用品

常用手術(shù)器械、氣體插管、玻璃分針、刺激器、張力換能器、鐵夾臺(tái)、25%氨基甲酸乙酯、3%乳酸。動(dòng)物

家兔 方法與步驟

1、麻醉并固定動(dòng)物

每組取家兔一只,稱重,按40mg/kg體重的劑量由耳緣靜脈緩慢注射戊巴比妥鈉溶液，將動(dòng)物麻醉。當(dāng)動(dòng)物四肢松軟,呼吸變深變慢,角膜反射遲鈍時(shí),表明動(dòng)物己被麻醉，即可停止注射。將麻醉動(dòng)物仰臥于兔體手術(shù)臺(tái)上,固定好頭部和四肢，將兔舌拉出以免阻塞呼吸道。注意：緩慢注射；兔舌拉出；頸部必須放正拉直。

2、頸部手術(shù)

用剪毛剪剪去頸部被毛,用手術(shù)刀切開(kāi)頸部皮膚(5-7cm)長(zhǎng),分離皮下結(jié)締組織和肌肉,暴露氣管,分離氣管和食管,在氣管下穿一棉線備用。

3、頸部神經(jīng)及血管分離術(shù)

3.1 頸總動(dòng)脈的分離 在頸部,神經(jīng)與頸總動(dòng)脈被結(jié)締組織膜束在一起,形成血管神經(jīng)束,位于氣管的外側(cè),其腹面被胸骨舌骨肌和胸骨甲狀肌所覆蓋。用玻璃分針將氣管兩側(cè)上述肌肉分離后,用左手拇指和食指輕輕捏住分離的左側(cè)肌肉和皮膚,稍向外翻,即可將血管神經(jīng)束翻于食指之上。然后用玻璃分針?lè)蛛x頸總動(dòng)脈外的結(jié)締組織膜,將動(dòng)脈分離約4cm長(zhǎng),并向頭端追索到甲狀軟骨上緣,暴露頸動(dòng)脈竇,在頸動(dòng)脈下穿一棉線。用同樣的方法可分離右側(cè)頸總動(dòng)脈。3.2 頸部神 經(jīng)的分離 輕輕提起左側(cè)頸總動(dòng)脈下的線,即可清楚看到三條粗細(xì)不同的神經(jīng)。其中迷走神經(jīng)最粗,呈白色，一般位于外側(cè),易于識(shí)別；交感神經(jīng)較細(xì),略呈灰色，一般位于內(nèi)側(cè)；減壓神經(jīng)最細(xì)，呈白色,一般位于迷走神經(jīng)和交感神經(jīng)之間。

由于家兔品種不同及個(gè)體間的差異,三條神經(jīng)的位置有較大的變異,應(yīng)注意識(shí)別。識(shí)別準(zhǔn)確后,用玻璃分針順著神經(jīng)的方向,小心分離其外的結(jié)締組織膜,-般先分離減壓神經(jīng),然后再分離交感神經(jīng)和迷走神經(jīng),并分別在各神經(jīng)下穿不同顏色的線（雙線）備用。

4、氣管切開(kāi)術(shù)

在喉頭下2-3cm處的氣管上作一“T”型切口,將與氣管口徑相近的氣管插管向心方向插入氣管中，用線結(jié)扎,并將余線固定于氣管插管的分叉處,以防氣管插管脫落。

5、腹部手術(shù)

剪去劍突部位腹部被毛,切開(kāi)胸骨下端劍突部位的皮膚,并沿腹白線再切開(kāi)長(zhǎng)約2cm的切口。細(xì)心分離劍突軟骨并結(jié)扎,線的另一端連于張力換能器上,張力換能器連接于計(jì)算機(jī)BL-410的 1 通道上。

6、開(kāi)機(jī)→BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)→實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目→呼吸實(shí)驗(yàn)→呼吸運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié) 這時(shí)可看到在屏幕上顯示4個(gè)波形窗口,鼠標(biāo)左雙擊1通道窗口,即只顯示出1通道波形窗口,在屏幕右下角選實(shí)驗(yàn)標(biāo)記。鼠標(biāo)點(diǎn)開(kāi)始即可描記呼吸運(yùn)動(dòng)曲線。

7、觀察項(xiàng)目

7.1 慢速記錄正常的呼吸運(yùn)動(dòng)曲線,注意分清吸氣與呼氣時(shí)的曲線方向； 7.2 增加無(wú)效腔對(duì)呼吸運(yùn)動(dòng)的影響 將橡皮管(長(zhǎng)約lm,內(nèi)徑0.7cm)連于氣管插管的一個(gè)側(cè)管上,用止血鉗夾閉另一側(cè)管,使無(wú)效腔增加,觀察并記錄呼吸運(yùn)動(dòng)的變化。當(dāng)呼吸運(yùn)動(dòng)出現(xiàn)明顯改變后立即去掉橡皮管使呼吸運(yùn)動(dòng)恢復(fù)正常；

7.3 窒息對(duì)呼吸運(yùn)動(dòng)的影響 將氣管插管的兩個(gè)側(cè)管同時(shí)夾閉,觀察并記錄呼吸運(yùn)動(dòng)的變化；

7.4 血中酸性物質(zhì)增多的效應(yīng) 取5ml注射器,由耳緣靜脈較快地注入3%乳酸溶液2m1,觀察呼吸運(yùn)動(dòng)的變化；

7.5 分別刺激迷走神經(jīng)中樞端和外周端,觀察并記錄呼吸運(yùn)動(dòng)。注意事項(xiàng)

1、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，要防止動(dòng)脈套管刺破頸總動(dòng)脈和發(fā)生凝血現(xiàn)象；

2、剪去一段劍突軟骨時(shí)，不能剪得過(guò)深，以免傷及其下附著的膈肌，并要保證劍突軟骨與胸骨完全分離；

3、在分離神經(jīng)及穿線時(shí),切勿損傷與其伴行的神經(jīng)；

4、在頸總動(dòng)脈近甲狀腺處有甲狀腺前動(dòng)脈,分離時(shí)應(yīng)稍靠下方,以免損傷；

5、注射要緩慢，兔舌要拉出，頸部必須放正拉直。

實(shí)驗(yàn)

十、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境因子檢測(cè)

目的

1、正確使用環(huán)境因子檢測(cè)儀器；

2、了解噪音計(jì)、光度計(jì)、溫度計(jì)、濕度計(jì)的測(cè)定原理；

3、學(xué)習(xí)測(cè)定方法。內(nèi)容

測(cè)定各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境的照度、噪音、溫度和濕度。

實(shí)驗(yàn)

十一、小白鼠走迷宮

目的

1.通過(guò)觀察、分析小白鼠學(xué)習(xí)和記憶過(guò)程，理解大腦在動(dòng)物行為機(jī)制建立中的作用。

2.通過(guò)實(shí)驗(yàn)，了解影響動(dòng)物學(xué)習(xí)和記憶能力的因素。

3.通過(guò)實(shí)驗(yàn)，了解數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析在科學(xué)研究中的重要作用。實(shí)驗(yàn)原理

老鼠接近人類，通過(guò)老鼠的實(shí)驗(yàn)可以間接地了解人腦的功能。學(xué)習(xí)和記憶是神經(jīng)系統(tǒng)高級(jí)中樞的重要機(jī)能之一。學(xué)習(xí)是神經(jīng)系統(tǒng)不斷接受環(huán)境刺激而獲得的行為習(xí)慣或經(jīng)驗(yàn)；獲得的行為習(xí)慣或經(jīng)驗(yàn)維持一定時(shí)間的能力就是記憶。動(dòng)物的學(xué)習(xí)和記憶能力對(duì)其生存具有重要意義。

在人為設(shè)置的迷宮里，動(dòng)物通過(guò)不斷感受復(fù)雜通道的結(jié)構(gòu)，調(diào)整和改進(jìn)自己的行為。隨著訓(xùn)練次數(shù)的增加，條件反射逐漸建立，以至在大腦皮層形成記憶。通過(guò)記錄動(dòng)物搜尋食物的時(shí)間長(zhǎng)短可以對(duì)此加以評(píng)價(jià)。同時(shí)也可以考察一些刺激（如饑餓和化學(xué)藥劑）對(duì)記憶力的影響。

實(shí)驗(yàn)材料

小白鼠。用品

由學(xué)生根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要自行準(zhǔn)備。實(shí)驗(yàn)步驟

（一）實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

1.用硬紙板或木板構(gòu)建迷宮。高度以小白鼠不能爬上為宜，上面也可以蓋上一玻璃板。

1、選擇健康活潑的小白鼠5只，要求年齡和體重一致，實(shí)驗(yàn)前饑餓一天，但提供水。另選擇一只未經(jīng)饑餓處理的小白鼠備用。在迷宮內(nèi)特定位置放置一塊面包。

（二）實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

1.饑餓處理的小白鼠1只，放置在迷宮入口，記錄其找到食物所需時(shí)間。5分鐘后，重復(fù)上述步驟，同樣的間隔時(shí)間對(duì)其進(jìn)行四次實(shí)驗(yàn)，每只小白鼠共計(jì)進(jìn) 行5次實(shí)驗(yàn)。

2.對(duì)其余四只饑餓處理的小白鼠進(jìn)行5次實(shí)驗(yàn)，記錄每只小白鼠找到食物所需時(shí)間。

3.數(shù)據(jù)處理 根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，求出5只小白鼠每次實(shí)驗(yàn)找到食物所需時(shí)間的平均值。以實(shí)驗(yàn)次數(shù)為橫坐標(biāo)，找到食物的時(shí)間為縱坐標(biāo)，建立直角坐標(biāo)系，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。把上述平均值標(biāo)在坐標(biāo)紙上并連接各點(diǎn)，從而得到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與尋找時(shí)間的關(guān)系曲線。觀察圖形的變化趨勢(shì)。

4.取未經(jīng)饑餓處理的小白鼠進(jìn)行步驟1，把記錄的時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)比，分析小白鼠記憶力的變化。

5.取1只饑餓處理的小白鼠稱重，皮下注射120mg/kgNaNO2，然后讓其走迷宮，重復(fù)步驟1，將所記錄的時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比，分析小白鼠記憶力的變化。

6.另取1只饑餓處理的小白鼠稱重，測(cè)試前半小時(shí)將小白鼠灌服20%-40%酒精100ml/kg。將所記錄的時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)比，分析小白鼠記憶力的變化。

7.再取1只饑餓處理的小白鼠靜脈注射乙酰膽堿，重復(fù)步驟1，將所記錄的時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比，分析小白鼠記憶力的變化

實(shí)驗(yàn)改進(jìn)點(diǎn)

1、實(shí)驗(yàn)用年老的小鼠與小白鼠進(jìn)行對(duì)比考察年齡對(duì)學(xué)習(xí)和記憶力的影響。

2、實(shí)驗(yàn)考察乙酰膽堿和NaNO2對(duì)小白鼠學(xué)習(xí)和記憶力的影響。

3、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

1、選材為活潑健康的小白鼠，不能選運(yùn)動(dòng)機(jī)能和記憶力差的小白鼠。

2、為了避免嗅覺(jué)對(duì)測(cè)試的影響，做每一個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目前都應(yīng)對(duì)迷宮進(jìn)行清潔。實(shí)驗(yàn)分工

和 負(fù)責(zé)找資料，負(fù)責(zé)整理和制作，實(shí)驗(yàn)改進(jìn)點(diǎn)由這幾人討論。

實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果

1、隨著小白鼠學(xué)習(xí)和記憶過(guò)程的進(jìn)行，小白鼠找到食物的時(shí)間會(huì)越來(lái)越短。

2、未經(jīng)饑餓處理的小白鼠由于沒(méi)有饑餓的刺激，找到食物的時(shí)間會(huì)更長(zhǎng)。

3、由于NaNO2是缺氧劑，會(huì)造成腦部缺氧，從而破壞記憶的保持，因此小白鼠找到食物的時(shí)間會(huì)變長(zhǎng)。

4、測(cè)試前半小時(shí)將小白鼠灌服20%-40%酒精可以明顯干擾記憶的再現(xiàn)，因此小白鼠找到食物的時(shí)間會(huì)變長(zhǎng)。

5、小白鼠腦部乙酰膽堿的增加會(huì)增強(qiáng)記憶力，因此小白鼠找到食物的時(shí)間會(huì)變短。思考

1.小白鼠的年齡對(duì)學(xué)習(xí)和記憶有沒(méi)有影響？ 2.人的大腦也和小白鼠有類似的結(jié)果嗎？ 3.乙酰膽堿在該實(shí)驗(yàn)中的作用機(jī)理是什么？

實(shí)驗(yàn)參考資料

《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)》苗明三主編中國(guó)醫(yī)藥出版社.北京.1997.6 《動(dòng)物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》黃詩(shī)箋主編高等教育出版社 施普林出版社2001.8：109，131，132 《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》羅滿林、顧為望主編中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社 2002.8P127-143.實(shí)驗(yàn)十二 消化系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型建立及驗(yàn)證（設(shè)計(jì)）

（一）病毒性肝炎模型

常用方法是注射乙型肝炎病人血清復(fù)制乙型肝炎模型。但大部分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)甲型肝炎病毒不易感。我國(guó)已有報(bào)導(dǎo)紅面獼猴、恒河猴、人及野生樹(shù)鼩種毒后出現(xiàn)人甲型肝炎現(xiàn)象。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)某些鴨肝炎病毒的特征與人肝炎病毒十分相似，故用鴨作為人肝炎模型也開(kāi)始增多。

（二）免疫性肝炎模型

慢性或遷延性肝炎患者體內(nèi)存在著抗肝細(xì)胞成分抗體。1959年國(guó)外有人用肝組織懸液加弗氏佐劑免疫豚鼠，成功地誘發(fā)了肝細(xì)胞變性及壞死病變。也有人報(bào)導(dǎo)肝膜蛋白（LSP）加佐劑分次注射產(chǎn)生動(dòng)物免疫性肝炎模型。

（三）胃、腸道潰瘍模型

在動(dòng)物身上復(fù)制胃、腸道潰瘍的方法較多，但所用的方法不同，引起的潰瘍病變也各有特點(diǎn)。常用的方法有：

1．應(yīng)激法 以各種強(qiáng)烈的傷害性刺激（如強(qiáng)迫制動(dòng)、饑餓、寒冷等），引起動(dòng)物發(fā)生應(yīng)激性潰瘍。如把動(dòng)物浸入冷水中或放在應(yīng)激箱中不斷地遭受電刺激，使之劇烈不安，一晝夜即能引起胃粘膜出血及潰瘍。這種方法簡(jiǎn)單，成功率達(dá)99%以上。

2．藥物法 給動(dòng)物投服或注射一定量的組織胺、胃泌素、腎上腺類固醇、水楊酸鹽、血清素、利血平、保泰松等可造成動(dòng)物胃腸潰瘍。如給豚鼠小劑量的組織胺，連續(xù)數(shù)天，可引起胃、十二指腸、食道等發(fā)生潰瘍。又如可用利血平、血清緊張素、阿斯匹林等誘發(fā)大白鼠或小白鼠的胃潰瘍。

3．燒灼法 用電極燒灼胃底部的胃壁，可造成象人的胃潰瘍病變；用濃醋酸給大鼠胃壁內(nèi)注射或涂抹于胃壁漿膜面上可造成慢性潰瘍。燒灼法復(fù)制胃、腸道潰瘍模型的優(yōu)點(diǎn)是方法簡(jiǎn)便，潰瘍部位可由作者自己選擇。

4．結(jié)扎幽門法 選用大鼠、小鼠或豚鼠，麻醉后，無(wú)菌技術(shù)下在劍突下由腹正中切開(kāi)腹壁皮膚及肌層，切口長(zhǎng)約3cm，暴露胃，沿胃向右，辯清幽門和十二指腸的聯(lián)結(jié)處，避開(kāi)血管，于其下穿線，將幽門完全結(jié)扎。術(shù)后絕對(duì)禁食禁水。幽門結(jié)扎后，可刺激胃液分泌并使高酸度胃液在胃中潴留，造成胃潰瘍。這類潰瘍復(fù)制方法簡(jiǎn)單，發(fā)生快，成功率高，但病變較表淺，嚴(yán)格地說(shuō)仍然屬于胃粘膜急性出血性糜爛，與人類胃潰瘍的典型病變差距較大，適于作探索抗?jié)儾∷幬镅芯亢臀笣儼l(fā)病學(xué)方面的研究。

其他還可用外科手術(shù)方法從腸道上部排除可中和胃酸的堿性膽汁、胰 液或十二指腸液造成潰瘍。還可用刺激、損傷或毀損腦組織等方法造成潰瘍。

（四）胰腺炎模型

復(fù)制胰腺炎模型可采用使胰液外分泌發(fā)生潴留；使各種胰酶在胰管系統(tǒng)內(nèi)活化；感染或某些微生物毒素的作用，影響胰腺的營(yíng)養(yǎng)、代謝等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用狗、兔和大鼠。將狗自身膽注按0.5ml/kg體重緩慢注入狗胰腺體尾交界處的胰腺實(shí)質(zhì)內(nèi)，則可引起胰腺局部組織壞死及炎性浸潤(rùn)，與人類急性胰腺炎和病變相似。用大腸桿菌懸液9億/ml，按1ml/kg體重，向兔胰管內(nèi)逆進(jìn)注射可誘發(fā)急性胰腺炎。另外也可采用大鼠腹腔內(nèi)連續(xù)注射乙硫胺酸誘發(fā)成功胰腺炎模型。隨著乙硫胺酸注射時(shí)間的延長(zhǎng)，胰腺組織可以出現(xiàn)廣泛進(jìn)行性破壞和退化及胰酶水平的持續(xù)下降。

（五）糖尿病模型

糖尿病模型的復(fù)制方法采用注射致高血糖因子；手術(shù)切除胰腺的全部或大部；用四氧嘧啶（Alloxan）破壞胰島β細(xì)胞，造成胰性糖尿??；注射根皮苷使腎小管對(duì)糖的再吸收發(fā)生障礙并破壞酯酶致使葡萄糖磷酸化過(guò)程和脫磷酸過(guò)程障礙，引起根皮苷糖皮。

四氧嘧啶復(fù)制的糖尿病動(dòng)物模型是目前研究人類糖尿病較好的方法，其實(shí)驗(yàn)性糖尿病近似人類糖尿病，體內(nèi)代謝障礙時(shí)有可能產(chǎn)生此種衍生物，胰島外分泌部不受損傷，幾乎所有常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物都可用來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。模型胰島的β細(xì)胞不是功能消失，而是功能不同程度的降低，有利于研究胰島組織再生和功能恢復(fù)，動(dòng)物不必注射胰島素即可存活很久。大鼠造型劑量為12mg/100g體重，家兔為150～200mg/kg體重，狗約為50～60mg/kg體重。家兔根皮苷皮糖尿病造型劑量為0.5%根皮苷按15m/kg體重，皮下注射。注意所用四氧嘧啶和根皮苷溶液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。

實(shí)驗(yàn)

十三、骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型建立和驗(yàn)證（設(shè)計(jì)）

第五篇：中醫(yī)大討論

7月3日下午，南京中醫(yī)藥大學(xué)會(huì)議室，一場(chǎng)關(guān)于中醫(yī)未來(lái)之路的大討論正在如火如荼的展開(kāi)。來(lái)自這所素有“高等中醫(yī)教育搖籃”之稱的中醫(yī)名校的各個(gè)院系的“頂尖高手”們，就中醫(yī)現(xiàn)代化及中醫(yī)人才培養(yǎng)中存在的問(wèn)題各抒己見(jiàn)、激昂陳詞，有關(guān)中醫(yī)危機(jī)的深刻討論，讓校園中彌漫的暑假臨近的輕松氣氛變得異

常沉重。

中醫(yī)發(fā)展 墻內(nèi)開(kāi)花墻外香的尷尬

帶著剛剛從瑞士歸來(lái)的風(fēng)塵仆仆，南京中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院的王旭東教授首先發(fā)言。作為1995年首屆“中國(guó)百名杰出青年中醫(yī)”的金獎(jiǎng)得主，他近兩年一直在國(guó)外從事中醫(yī)醫(yī)療、教學(xué)工作，并對(duì)

歐洲的中醫(yī)藥市場(chǎng)進(jìn)行了深入調(diào)查。海外游歷的親身體驗(yàn)使他對(duì)中醫(yī)的發(fā)展有著與眾不同的看法。王說(shuō)，其實(shí)目前有關(guān)中醫(yī)危機(jī)的問(wèn)題只有國(guó)內(nèi)才會(huì)討論，在國(guó)外，是沒(méi)有人考慮這個(gè)問(wèn)題的，因?yàn)橹嗅t(yī)在國(guó)外的上升速度之快另人瞠目結(jié)舌。以瑞士為例，2003年，瑞士的中醫(yī)從業(yè)人員不到300人，可不到一年間就翻了一番，增加到700人。至于中醫(yī)診所，更是如雨后春筍，開(kāi)得人眼花繚亂。而且目前

瑞士的每一家醫(yī)院都在積極籌辦中醫(yī)科室。

同時(shí)，歐洲人對(duì)中醫(yī)理論的接受程度也大大超出人們的想象。在他行醫(yī)的州，每當(dāng)他和病人講氣血陰陽(yáng)，病人都會(huì)表示很理解，認(rèn)為這是東方醫(yī)學(xué)對(duì)人體和生命的獨(dú)特認(rèn)識(shí)。在他為當(dāng)?shù)氐奈麽t(yī)學(xué)生講授中醫(yī)時(shí)，談到心肝脾肺腎這些中醫(yī)特有的、與西醫(yī)完全不同的臟腑概念時(shí)，西醫(yī)們也表示出了超乎尋常的認(rèn)同?！拔矣X(jué)得在歐洲對(duì)中醫(yī)的認(rèn)同度和熱情甚至比國(guó)內(nèi)還要多一些?！彼f(shuō)?！拔抑v課時(shí)發(fā)現(xiàn)，那些西醫(yī)學(xué)生們很喜歡聽(tīng)氣血、陰陽(yáng)、五行這些東西，因?yàn)樗麄冋J(rèn)為這是中醫(yī)的精髓。而且他們很排斥用西醫(yī)的理

論解讀中醫(yī)的東西，對(duì)神經(jīng)、細(xì)胞、分子這些現(xiàn)代中醫(yī)的研究成果全不感興趣。”

“所以我認(rèn)為，中醫(yī)的價(jià)值和生命力不是討論出來(lái)的，也不是誰(shuí)給她的。中醫(yī)的價(jià)值和生命力源于她本身內(nèi)在的東西，她深厚的文化底蘊(yùn)，她那種深層次的、對(duì)人、對(duì)生命和自然的尊重，這種頑強(qiáng)的生命力是任何勢(shì)力都?jí)褐撇蛔〉摹Ｖ嗅t(yī)用她卓越的療效贏得了全世界人民的青睞，甚至在西方的醫(yī)生心中，中醫(yī)也有她獨(dú)特的地位，因?yàn)樗_實(shí)能夠解決西醫(yī)所不能解決的問(wèn)題。所以如何將中醫(yī)推廣、弘揚(yáng)、光大，讓她更健康地成長(zhǎng)，才是我們這一代中醫(yī)學(xué)者最重要的職責(zé)。”

但是在海外中醫(yī)繁榮的背后，王旭東也透露出了深深的憂慮?！澳壳爸嗅t(yī)高級(jí)人才向海外流失的非常嚴(yán)重”，他說(shuō)，“在歐洲各地的中醫(yī)院，都有來(lái)自國(guó)內(nèi)各大中醫(yī)學(xué)院和中醫(yī)醫(yī)院的教師、醫(yī)生的身影。他們都有著副教授以上的職稱，都是很優(yōu)秀的中醫(yī)人才?！比欢嬲屗箲]的還不止于此。最讓他揪心的是，作為中醫(yī)的發(fā)源地，中國(guó)的中醫(yī)有可能被其他國(guó)家的標(biāo)準(zhǔn)取代、超越，“教會(huì)徒弟餓死師傅”的一幕很有可能在中醫(yī)上演。一次上課時(shí)被學(xué)生反詰的經(jīng)歷讓他至今久久難忘。那是一次講針灸治療憂郁癥，他講了很多不同證型的取穴、用藥?？煜抡n時(shí)，下邊的學(xué)生突然反駁，老師你講得不對(duì)，少海也可治憂郁癥。他當(dāng)時(shí)一愣，反問(wèn)道，少海可以治憂郁癥嗎？沒(méi)想到學(xué)生們理直氣壯，當(dāng)然，因?yàn)槲覀兊聡?guó)針灸學(xué)會(huì)制訂的標(biāo)準(zhǔn)中就講了少?？梢灾委煈n郁癥。

“西方人是非常善于制訂標(biāo)準(zhǔn)的?！蓖跽f(shuō)?！爸灰麄冇X(jué)得你好，他們就會(huì)進(jìn)行研究，制訂出自己的標(biāo)準(zhǔn)，然后將這些標(biāo)準(zhǔn)向全世界推廣。目前德國(guó)的針灸學(xué)會(huì)正在用他們制訂的標(biāo)準(zhǔn)與我們抗衡，而法國(guó)耳針學(xué)會(huì)也宣稱他們制訂的耳針標(biāo)準(zhǔn)要比中國(guó)的耳針標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)100倍。我們教會(huì)了西方人中醫(yī)，可是如果一個(gè)中國(guó)中醫(yī)要在國(guó)外給人看病，卻要經(jīng)過(guò)那些紅頭發(fā)、藍(lán)眼睛的、學(xué)問(wèn)遠(yuǎn)不如你的徒子、徒孫的層層審核，怎么能不生氣、窩火？我們的中醫(yī)行業(yè)到目前為止都沒(méi)有在世界上為自己樹(shù)立起良好的形象，結(jié)果是人家只承認(rèn)中醫(yī)是好東西，卻不買中國(guó)中醫(yī)的賬。中醫(yī)是中華文化的瑰寶，為什么我們的有關(guān)機(jī)構(gòu)不能在全世界樹(shù)立起中國(guó)中醫(yī)的強(qiáng)勢(shì)品牌呢？為什么我們不能把中醫(yī)作為最強(qiáng)有力的一種政治文化工具，在全世界推

廣，就像美國(guó)大片一樣呢？為什么我們總拿不出中醫(yī)發(fā)源地老祖宗國(guó)的氣勢(shì)和權(quán)威呢？”

中醫(yī)現(xiàn)代化 讓大象鉆針眼的無(wú)奈

關(guān)于中醫(yī)現(xiàn)代化的反思是最近一段時(shí)期中醫(yī)界的焦點(diǎn)話題。從五四運(yùn)動(dòng)至今的近一百年來(lái)，“科學(xué)”一詞就總?cè)鐟矣谥嗅t(yī)頭上的達(dá)摩克利斯之劍，讓中醫(yī)屢屢面臨危境。對(duì)中醫(yī)的改造取代了應(yīng)有的尊重，中醫(yī)的精神被別有用心者借“現(xiàn)代”之名肆意扭曲、蹂躪，中醫(yī)的發(fā)展，難道注定是一個(gè)充滿矛盾的悖論？

“科學(xué)這個(gè)詞在現(xiàn)代被濫用了。科學(xué)的本義是分科的學(xué)問(wèn)，后來(lái)被演變?yōu)槿祟愔R(shí)的總和，最后又成為真理的代名詞。不科學(xué)就是不正確，就是偽科學(xué)，就是迷信、愚昧、落后，就應(yīng)該掃蕩，這種觀念在我們國(guó)家已經(jīng)存在了近一個(gè)世紀(jì)。用現(xiàn)代科學(xué)研究中醫(yī)是大勢(shì)所趨，但研究者不等于被研究者，不能說(shuō)我們用白話文翻譯了唐詩(shī)之后，就說(shuō)李白的水平提高了。同時(shí)，傳統(tǒng)又豈是我們能用現(xiàn)在所謂的科學(xué)思想來(lái)束縛的呢？中醫(yī)的思想已經(jīng)歷經(jīng)了幾千年的考驗(yàn)，而現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展不過(guò)才幾百年，用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的理論來(lái)剪裁中醫(yī)學(xué)，那不是等于讓大象穿針眼嗎？”南京中醫(yī)藥大學(xué)圖書館館長(zhǎng)、博士生導(dǎo)師吉文輝教授用特有風(fēng)趣表達(dá)著自己的觀點(diǎn)，而他的“一只茶杯的故事”也為中醫(yī)獨(dú)特、深?yuàn)W的思維方式加了一個(gè)通俗生動(dòng)的注腳?！爸嗅t(yī)學(xué)強(qiáng)調(diào)的就是取類比象，比如一只茶杯，書本上只能寫他是喝茶的工具?？墒窃诂F(xiàn)實(shí)生活中，茶杯可不可以用來(lái)裝水、裝酒，甚至裝醬油呢？只要體積比它小的，茶杯都可以來(lái)裝嘛。那一陣風(fēng)過(guò)來(lái)，茶杯可不可以用來(lái)壓壓紙？茶杯造得精致美觀，可不可以作為工藝品來(lái)欣賞？生氣時(shí)，我又可不可以順手拿起一只茶杯來(lái)打人呢？可茶杯這些變化是書本所不能盡言的，這種變化也是無(wú)窮的，需要在實(shí)際中去悟、去用的。這種推理的變化才是中醫(yī)思維的精髓，沒(méi)有這種腦袋，是不能來(lái)學(xué)中醫(yī)的。其中的意境，也是現(xiàn)

代醫(yī)學(xué)所不能體會(huì)的?！?/p>

南京中醫(yī)藥大學(xué)教授、天水堂中醫(yī)藥研究所所長(zhǎng)李鐵君也認(rèn)為中醫(yī)現(xiàn)代化確實(shí)有陷入科學(xué)崇拜誤區(qū)。他說(shuō)，“過(guò)去人們總用是否科學(xué)作為判斷是非的唯一的依據(jù)?？墒请S著后科學(xué)時(shí)代的來(lái)臨，人們發(fā)現(xiàn)，對(duì)事物合理與否的判斷不再是簡(jiǎn)單的是與非，人們開(kāi)始認(rèn)識(shí)到真理是多元的?！?/p>

基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院的沈澍農(nóng)教授則通過(guò)中西醫(yī)學(xué)體系的比較對(duì)中醫(yī)現(xiàn)代化提出了異議。“中醫(yī)是不能以西醫(yī)先驗(yàn)的觀點(diǎn)，先入為主的來(lái)研究的。中醫(yī)是宏觀的，她的文化的內(nèi)容多于技術(shù)的內(nèi)容；而西醫(yī)則是微觀的，其中技術(shù)的內(nèi)容大于文化的內(nèi)容?？涩F(xiàn)在我們的研究恰恰是用西醫(yī)微觀的技術(shù)的視角來(lái)尋找中醫(yī)的合理內(nèi)涵，如果找到了，就是科學(xué)，反之，就是不科學(xué)。在目前我們對(duì)人體認(rèn)識(shí)還很膚淺的情況下，這種

用西醫(yī)的尺度判斷中醫(yī)的方式無(wú)疑是不適合的，也是不公平的?！?/p>

對(duì)此，金鑫教授也表示了贊同，并通過(guò)知識(shí)與智慧的不同辯證地闡釋了中醫(yī)堅(jiān)持自我的重要性。“中醫(yī)現(xiàn)代化過(guò)程中最可怕的就是簡(jiǎn)單拿來(lái)和西化，失去中醫(yī)的特色。中醫(yī)特點(diǎn)與她的傳統(tǒng)有關(guān)，中醫(yī)的傳統(tǒng)就是她很宏觀，很模糊。在人們?cè)噲D改造中醫(yī)時(shí)，總希望把她宏觀的優(yōu)勢(shì)保存下來(lái)，而拋棄她的模糊的弱點(diǎn)?？芍嗅t(yī)的優(yōu)勢(shì)和弱點(diǎn)就像一枚硬幣的兩面，是共生共亡的，如果我們把她的弱點(diǎn)丟掉，她的優(yōu)勢(shì)也就蕩然無(wú)存。長(zhǎng)期以來(lái)，我們希望通過(guò)現(xiàn)代化，簡(jiǎn)單地用現(xiàn)代的知識(shí)來(lái)取代中醫(yī)，其實(shí)我們沒(méi)有看到，中醫(yī)既是傳統(tǒng)知識(shí)的表達(dá)，更是我們傳統(tǒng)智慧的結(jié)晶。中醫(yī)與古代的哲學(xué)的關(guān)系很密切，所以用簡(jiǎn)單的現(xiàn)代知識(shí)來(lái)代替中醫(yī)，無(wú)疑是徒勞的，因?yàn)橹R(shí)代替不了智慧。智慧除了書本的學(xué)習(xí)外，還需要在實(shí)踐中悟。這也是智慧是比知識(shí)層次更高，是知識(shí)所不能取代的重要原因。我們現(xiàn)在所做的一切其實(shí)是從現(xiàn)代知識(shí)中找到與中醫(yī)相近的東西，但還不是相應(yīng)的東西。中醫(yī)現(xiàn)代化應(yīng)該是傳統(tǒng)的知識(shí)轉(zhuǎn)化為現(xiàn)代的知識(shí)、傳統(tǒng)的智慧上升為現(xiàn)代智慧的過(guò)程，這是一個(gè)漫長(zhǎng)的過(guò)程，但我們決不能放棄自己的智慧來(lái)簡(jiǎn)單套用別人的知識(shí)。”

可是任何人不能否認(rèn)，現(xiàn)代化是中醫(yī)發(fā)展的必然趨勢(shì)。如何在實(shí)現(xiàn)現(xiàn)代化與保持中醫(yī)特色間取

得平衡是中醫(yī)目前迫切需要解決的問(wèn)題之一。

張宗明副教授認(rèn)為，中醫(yī)學(xué)的發(fā)展不能游離于現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)之外。但是否這種研究會(huì)導(dǎo)致中醫(yī)失去本體和特色，則應(yīng)該有所區(qū)分。近代科學(xué)與中醫(yī)學(xué)確有很多難以通約性的東西，用它來(lái)肢解中醫(yī)是不合理的。但現(xiàn)代科學(xué)與近代科學(xué)又有很大的區(qū)別，關(guān)鍵之一就是近代科學(xué)追求簡(jiǎn)單性、還原性和線性，而現(xiàn)代科學(xué)是建立在還原論知識(shí)基礎(chǔ)上的一種更高級(jí)的融合，她追求復(fù)雜性，這在很多方面正與中醫(yī)學(xué)的思維方式一致。所以研究中醫(yī)，兩種科學(xué)我們都不應(yīng)拒絕，在學(xué)習(xí)了近代科學(xué)知識(shí)的基礎(chǔ)上，用中醫(yī)學(xué)的思維

方式，或現(xiàn)在復(fù)雜性科學(xué)的思維方式來(lái)整合這些知識(shí)，保持中醫(yī)思維方式的優(yōu)勢(shì)，這樣既可以使中醫(yī)走向現(xiàn)代化，也可以保持中醫(yī)的特色。張說(shuō)，中醫(yī)的特色應(yīng)該并不簡(jiǎn)單地保存在陰陽(yáng)氣血這些具體的概念中，中醫(yī)更重要的特色是她看待人體的思維方式，而這種思維方式與現(xiàn)代科學(xué)的發(fā)展趨勢(shì)是相吻合的。第一臨床醫(yī)學(xué)院的潘立群教授則提出采用只了解“輸入－輸出”的黑箱式的方式來(lái)研究中醫(yī)?！爸嗅t(yī)是宏觀的、非定性定量的，如果要把中醫(yī)定性定量，肯定會(huì)出問(wèn)題。研究中醫(yī)應(yīng)該采用一種輸入－輸出的方式，即用藥之前，所反映出的表象是什么，用藥之后，發(fā)生什么變化，癥狀如何改善，結(jié)果如何就可以了，完全沒(méi)有必要把藥中的每一個(gè)成分都搞清，也不可能把每個(gè)東西都搞清。就像研究飛機(jī)的飛行，我們不需要知道這架飛機(jī)長(zhǎng)得如何，都裝了什么東西，只要通過(guò)它運(yùn)行時(shí)的光點(diǎn)判斷它的軌跡最終可以到達(dá)

目的地就足夠了。中醫(yī)研究的方式也應(yīng)如此。”

美國(guó)中醫(yī)學(xué)體系研究院首席顧問(wèn)吳云波教授也對(duì)兩種中醫(yī)研究的方式提出了自己的看法?！爱?dāng)代中醫(yī)學(xué)的發(fā)展過(guò)程中，實(shí)際上存在兩種趨向，一種是以西醫(yī)學(xué)為標(biāo)準(zhǔn)來(lái)整理、吸收、改造中醫(yī)，半個(gè)多世紀(jì)以來(lái)，學(xué)術(shù)界提出的中醫(yī)現(xiàn)代化、中西醫(yī)結(jié)合、中醫(yī)客觀化，就是這一趨勢(shì)的體現(xiàn)；另一種趨勢(shì)就是中醫(yī)學(xué)的獨(dú)立發(fā)展，并以傳統(tǒng)中醫(yī)的思維、理論、方法為主體，堅(jiān)持自身的獨(dú)立發(fā)展，其中也不排斥西醫(yī)的生理解剖、儀器和實(shí)驗(yàn)的方法，進(jìn)行信息轉(zhuǎn)換為我所用。對(duì)于這兩種取向，我的觀點(diǎn)是不要互相攻擊，兩者的發(fā)展可以相輔相承，西醫(yī)對(duì)中醫(yī)的解讀對(duì)中醫(yī)的發(fā)展也不是沒(méi)有好處，針灸是因?yàn)獒槾搪樽淼纳衿嫘Ч抛呦蚴澜绲?，而針刺麻醉就是中西醫(yī)結(jié)合的成果。所以在堅(jiān)持自身科學(xué)原理的同時(shí)，中醫(yī)完全可以大

量吸收西醫(yī)的技術(shù)成果，為我所用?！?/p>

中醫(yī)教育 傳統(tǒng)文化斷層的危機(jī)

比起現(xiàn)代化之路的不甚明朗，與自己賴以生存的傳統(tǒng)文化土壤的割裂讓中醫(yī)顯得更加無(wú)所適從。這種與自己生命之源的斷層不僅讓中醫(yī)經(jīng)受著前所未有的信仰危機(jī)，也使中醫(yī)深受各種問(wèn)題困擾，而

其最直接的表現(xiàn)就是備受爭(zhēng)議中醫(yī)教育。

“中醫(yī)教育五年是中醫(yī)兩年，西醫(yī)兩年，外語(yǔ)一年，結(jié)果培養(yǎng)出來(lái)的學(xué)生中醫(yī)不像中醫(yī)，西醫(yī)不像西醫(yī)，只不過(guò)是兩個(gè)中專生而矣?！笔⒘冀淌谶@樣評(píng)價(jià)中醫(yī)本科畢業(yè)生。王旭東教授也認(rèn)為，現(xiàn)在很多的中醫(yī)學(xué)生“很糟”，“談起陰陽(yáng)五行，滿臉的不屑一顧；談起現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，又只是一知半解。如果說(shuō)臨床是現(xiàn)代中醫(yī)教育缺憾之一的話，至少這種缺憾還可以通過(guò)學(xué)生畢業(yè)后的積累彌補(bǔ)、再造?？扇绻麄冞B中醫(yī)的科學(xué)精神都沒(méi)有掌握，那就連再造的可能性都沒(méi)有了。能成為大師是需要有大師的思維方式的，可現(xiàn)在很多

畢業(yè)生的世界觀、方法論、思維特點(diǎn)都與中醫(yī)方式格格不入，又怎么能成為大師？”

對(duì)于造成這種現(xiàn)象的原因，薛公忱教授和張宗明教授的話一針見(jiàn)血。薛認(rèn)為，“目前中醫(yī)理論面臨的最大的危害就是民族虛無(wú)主義。因?yàn)橹嗅t(yī)屬于傳統(tǒng)文化，但從五四運(yùn)動(dòng)以來(lái)，我們的傳統(tǒng)文化就一直在遭受批判。中國(guó)人對(duì)自己的文化失去了信心和信仰，而結(jié)果是我們民族的根、民族的自信心沒(méi)有了。中醫(yī)現(xiàn)在也在拼命割斷自己和傳統(tǒng)文化的關(guān)系，可是失去了傳統(tǒng)文化依托的中醫(yī)，就如同離開(kāi)土壤的大樹(shù)，只有枯萎和死亡?！睆垊t更加直接地指出了中醫(yī)目前正遭遇的危機(jī)，“我記得一個(gè)哲學(xué)家講過(guò)，當(dāng)一門學(xué)科的學(xué)者們關(guān)注到這門學(xué)科的基礎(chǔ)問(wèn)題的時(shí)候，當(dāng)他們關(guān)注到這門學(xué)科的發(fā)展模式和方向的問(wèn)題的時(shí)候，這門學(xué)科就遭遇到了危機(jī)。而這正是目前中醫(yī)學(xué)所處的狀態(tài)。中醫(yī)的危機(jī)就在于她生存的社會(huì)和文化土壤的破壞，我們已經(jīng)失去了傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)賴以生存的社會(huì)土壤和文化土壤，使人們對(duì)中醫(yī)學(xué)產(chǎn)生信仰危機(jī)。更為可怕的是，中醫(yī)的本科生、碩士生、甚至連博士生都不相信自己所學(xué)的東西，中醫(yī)教育很可能培養(yǎng)的不是

自己的繼承人，而是掘墓人?！?/p>

可是究竟該怎樣才能重塑中醫(yī)的自信心，讓中醫(yī)薪火相傳、生生不息呢？加強(qiáng)傳統(tǒng)教育，讓學(xué)生在傳統(tǒng)中學(xué)習(xí)中醫(yī)以克服文化蒼白癥；提高學(xué)生的醫(yī)古文基礎(chǔ)，讓他們掌握與經(jīng)典心靈相通的工具；增加臨床實(shí)踐，早臨床，多臨床，反復(fù)臨床，讓學(xué)生在實(shí)踐中體會(huì)中醫(yī)的樂(lè)趣都是教授們提出的解決良策。

而在這些觀點(diǎn)之中，基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院的黃煌教授的觀點(diǎn)更加獨(dú)樹(shù)一幟，他的中醫(yī)發(fā)展公式引起了與會(huì)者的共鳴。“在中醫(yī)現(xiàn)代化的內(nèi)涵目前還不甚明朗的情況下，我們不妨把中醫(yī)現(xiàn)代化理解為發(fā)展中醫(yī)。而發(fā)展中醫(yī)最終的目標(biāo)是什么，那就是給老百姓實(shí)惠。給老百姓實(shí)惠＝有效＋安全＋經(jīng)濟(jì)，這個(gè)公式就是中

醫(yī)一切發(fā)展的準(zhǔn)繩。那么有效＋安全＋經(jīng)濟(jì)的核心是什么，就是中醫(yī)的規(guī)范。”

而要加強(qiáng)對(duì)中醫(yī)的規(guī)范，黃認(rèn)為，首先應(yīng)該盡快為中醫(yī)立法，實(shí)現(xiàn)中醫(yī)和西醫(yī)管理上的兩元制?！艾F(xiàn)在很多中醫(yī)看病都是西藥、成藥加湯藥，不少中醫(yī)師甚至首選的是西藥，這很成問(wèn)題?？春昧瞬?，到底是中藥的作用還是西藥的作用？這樣一來(lái)，中醫(yī)的經(jīng)驗(yàn)沒(méi)法總結(jié)，學(xué)術(shù)不能傳承，中醫(yī)生和學(xué)習(xí)者失去了對(duì)中醫(yī)的信心，長(zhǎng)此以往，怎么談發(fā)展？因此加快中醫(yī)立法，實(shí)現(xiàn)中醫(yī)和西醫(yī)管理上兩元制刻不容緩。長(zhǎng)期以來(lái)，我們的機(jī)療衛(wèi)生體制表面上是中醫(yī)、西醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合三駕馬車，但實(shí)際上還是西醫(yī)一主天下。因此必須通過(guò)法律明確中醫(yī)的責(zé)權(quán)利，中醫(yī)才能真正開(kāi)好業(yè)。否則再這么?眉毛胡子一把抓?，中醫(yī)的陣地還

要萎縮，因?yàn)橹嗅t(yī)生存的土壤已經(jīng)沒(méi)有了?！?/p>

黃教授關(guān)于中醫(yī)師管理的思路是這樣的：?jiǎn)渭冎嗅t(yī)師應(yīng)該必須以中為主，其中根據(jù)他們專業(yè)的不同特點(diǎn)，又有具體的細(xì)分，比如以湯方為主的就是中醫(yī)師；以針灸為主的就是針灸師；還有推拿師、食療師等等。分類后，就要對(duì)各種中醫(yī)師的資格進(jìn)行嚴(yán)格認(rèn)證，并明確規(guī)定他們不能用西醫(yī)的處方藥，只能用非處方藥，否則就是就違法。而如果是中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)師，應(yīng)該有中醫(yī)、西醫(yī)兩個(gè)執(zhí)照。同時(shí)，法律還應(yīng)規(guī)定許多中醫(yī)應(yīng)遵循的條款，對(duì)中醫(yī)的法律職能加以明確和規(guī)范。比如肝陽(yáng)上亢的診斷有沒(méi)有法律價(jià)值，能不能作為法律依據(jù)；哪些病中醫(yī)治療有效，哪些病西醫(yī)治療有效，哪些病適宜中西醫(yī)結(jié)合治療等。只有給了中醫(yī)獨(dú)立生存的空間，中醫(yī)的臨床和教育才能得上去，學(xué)生們才能真正喜愛(ài)、認(rèn)可、信仰中醫(yī)，中醫(yī)

最終才能發(fā)展。

對(duì)傳統(tǒng)文化的反思在最近一段時(shí)間成為一種熱潮，作為中國(guó)傳統(tǒng)文化的代表，對(duì)中醫(yī)的反思更是首當(dāng)其沖。這也許反映了人們?cè)谖镔|(zhì)生活逐漸富足之后，開(kāi)始尋找自身精神家園的一種回歸。中醫(yī)與中國(guó)傳統(tǒng)文化一脈相承，在中醫(yī)里，記錄著我們祖先艱難探索的足跡、包涵著我們民族鍥而不舍的精神。如果失去了與傳統(tǒng)的交連，孤軍奮戰(zhàn)的中醫(yī)，在現(xiàn)代化的滾滾紅塵中，注定只能節(jié)節(jié)敗退，遍體鱗傷。可是如果失去了傳統(tǒng)支撐，貌似現(xiàn)代的我們?cè)谕ㄍ澜绲拿袑⒁院巫跃?？中華民族又

憑什么自立于世界民族之林？

西方醫(yī)學(xué)的技術(shù)是先進(jìn)的，但這并不能掩飾它在思想上的蒼白。這么說(shuō)，并不代表中醫(yī)的思想有多完美，正如潘立群教授所言，那是我們祖先在“五千年前不得已而為之的智慧”。所以中醫(yī)需要發(fā)展，需要現(xiàn)代，需要吸收一切她可以吸收的東西完善自己。但關(guān)鍵在于，在這個(gè)過(guò)程中，如何判斷什么是應(yīng)該堅(jiān)持的，又有什么是可以放棄的？這不僅需要一個(gè)清醒冷凈的頭腦，更需要一顆堅(jiān)定自信的心?？墒聦?shí)卻是，在現(xiàn)代科研繁花似錦的表面下，我們看到了中醫(yī)靈動(dòng)的身影日益僵化，中醫(yī)自由的精神正在窒息，這

就是所謂的現(xiàn)代化？這樣的現(xiàn)代化，又怎能不值得反思？

也許回顧漢字走過(guò)的曲折迂回的歷史，可以讓我們把中醫(yī)的困擾看得更清楚。從五四運(yùn)動(dòng)開(kāi)始，漢字也曾慘遭口誅筆伐，人們想當(dāng)然地認(rèn)為，中國(guó)之所以落后的原因是中國(guó)的文字太難，用拼音甚至英文取代漢字是那個(gè)時(shí)代學(xué)者的理想。可如今，在經(jīng)歷了近一個(gè)世紀(jì)之后，猛然回首，人們卻驚訝地發(fā)現(xiàn)，漢字竟然是這個(gè)世界上最完美的文字，她音形義俱全，便于制造新字，甚至打字的速度也快于英文。幾十年，歷史轉(zhuǎn)了一個(gè)圈又回到了原地，還好，為時(shí)尚不太晚。那么中醫(yī)呢？在現(xiàn)代車輪的傾軋下，我們又該怎樣

保存中醫(yī)的風(fēng)骨？

也許路只有一條，中醫(yī)當(dāng)自強(qiáng)！