第一篇：百色市2011年開展瘦肉精檢測工作匯報

百色市2011年開展“瘦肉精”整治情況

匯 報

為保證畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全，讓消費者能吃上“放心肉”，今年以來，特別是“3.15”河南瘦肉精事件曝光后，根據(jù)農(nóng)業(yè)部、自治區(qū)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)局和自治區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所的有關(guān)文件精神和部署，我市高度重視，落實責任，制定方案，在全市范圍內(nèi)統(tǒng)一開展整治行動，取得一定成績，現(xiàn)將整治工作總結(jié)匯報如下：

一、整治工作基本情況

今年我市在養(yǎng)殖環(huán)節(jié)檢測規(guī)模養(yǎng)豬場236個，檢測豬尿1232份，全部陰性。在27個家畜定點屠宰場開展瘦肉精檢測，檢測豬尿樣品3565份，檢測結(jié)果全部陰性。市疫控中心實驗室完成肉豬 “瘦肉精”等違禁添加物監(jiān)測294份尿樣，其中鹽酸克倫特羅監(jiān)測294份（酶聯(lián)免疫吸附法103份）、萊克多巴胺監(jiān)測192份、沙丁胺醇192份，檢測結(jié)果全部陰性。養(yǎng)殖環(huán)節(jié)送檢自治區(qū)豬尿5份，牛尿13份，全部陰性?，F(xiàn)場開展檢測牛尿樣品21份，現(xiàn)場試紙監(jiān)測豬尿72份。其中，現(xiàn)場檢測尿樣都根據(jù)要求開展3種試紙檢測，即開展鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇進行尿液檢測，現(xiàn)場檢測全部呈陰性，全市沒有發(fā)現(xiàn)1例陽性樣品。

二、采取主要措施

1、制定工作方案，落實責任。

接到上級通知后，我市高度重視，成立百色市水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)局“瘦肉精”整治工作領(lǐng)導小組，組長由分管動物防疫的譚副局長擔任，組員分別有獸醫(yī)藥政科、畜牧與飼料科、飼料辦、動物衛(wèi)生監(jiān)督所、疫控中心等單位領(lǐng)導組成，制定了《百色市水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)系統(tǒng)“瘦肉精” 專項整治實施方案》，并下發(fā)《關(guān)于進一步加強生豬“瘦肉精”監(jiān)管工作的通知》（百漁牧發(fā)［2011］40號）等文件，要求各縣（區(qū)）開展生豬“瘦肉精”監(jiān)管工作?？h區(qū)也分別制定具體整治工作方案，強化責任，層層落實，具體把監(jiān)管任務(wù)落實到位。

2、加強宣傳，營造輿論氛圍。

各縣（區(qū)）利用電視媒體、廣播、板報、橫幅、傳單等多種形式，廣泛宣傳相關(guān)法律、法規(guī),宣傳“瘦肉精”的危害性和監(jiān)管“瘦肉精”的政策措施，積極營造監(jiān)管“瘦肉精”的良好氛圍和強大聲勢，爭取監(jiān)管對象的大力支持與配合。據(jù)統(tǒng)計，今年我市共發(fā)放宣傳材料12.5萬多份。

3、加強監(jiān)管，做好排查工作。

（1）加大對散養(yǎng)戶的監(jiān)管力度。各縣（區(qū)）水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)局局充分發(fā)揮基層動物防疫檢疫人員的作用，對生豬散養(yǎng)戶開展大宣傳，不能亂用違禁品。做好生豬養(yǎng)殖場戶生產(chǎn)情況的日常登記管理，對生豬養(yǎng)殖場戶用藥、用料等各種記錄落實情況開展經(jīng)常性檢查，整治期間累計檢查10萬多個散養(yǎng)戶。

（2）加強對規(guī)模養(yǎng)殖場的監(jiān)管。對規(guī)模養(yǎng)殖場實行“一對一”監(jiān)管制度。各縣（區(qū)）根據(jù)動物防疫聯(lián)系點制度，對規(guī)模養(yǎng)殖場也執(zhí)行一對一掛點聯(lián)系，把轄區(qū)內(nèi)的規(guī)模養(yǎng)殖場養(yǎng)殖行為監(jiān)管落實到每個鄉(xiāng)鎮(zhèn)站干部職工，負責指導養(yǎng)殖、監(jiān)督防疫、投入品使用監(jiān)管等，要求掛場責任人做好日常監(jiān)管日志工作；二是開展安全養(yǎng)殖承諾，各縣（區(qū)）與養(yǎng)殖場戶簽訂畜產(chǎn)品安質(zhì)量安全承諾書、動物防疫承諾書1500多份；三是督促做好養(yǎng)殖檔案，縣（區(qū)）局統(tǒng)一印制養(yǎng)殖檔案下發(fā)規(guī)模養(yǎng)殖場戶，規(guī)范養(yǎng)殖戶填寫?zhàn)B殖檔案行為。四是認真做好排查工作，各縣區(qū)組織人員開展對下去規(guī)模養(yǎng)豬場進行拉網(wǎng)式排查，排查養(yǎng)殖場 的獸醫(yī)室、飼料倉庫、養(yǎng)殖檔案記錄情況，嚴防在生豬養(yǎng)殖環(huán)節(jié)添加使用“瘦肉精”等違禁藥物行為。

（3）加強獸藥經(jīng)營環(huán)節(jié)監(jiān)管工作。對全市獸藥經(jīng)營店進行檢查，落實業(yè)主簽訂飼料獸藥經(jīng)營承諾書，督促業(yè)主建立經(jīng)營臺賬。今年以來共出動執(zhí)法人員8170人次，整頓獸藥市場193個，檢查獸藥經(jīng)營企業(yè)694個（次），查獲假劣獸藥476公斤（件），總價值37535元。

（4）加強屠宰環(huán)節(jié)監(jiān)管工作。各級動物衛(wèi)生監(jiān)督所加強屠宰環(huán)節(jié)的監(jiān)管工作，組織執(zhí)法人員深入屠宰場檢查動物防疫落實情況、動物檢疫報檢情況，嚴格查驗屠宰場檢疫申報和準宰落實情況，進入屠宰場動物的檢疫證明、耳標佩戴等情況，屠宰動物同步檢疫情況，屠宰場生豬檢疫與鹽酸克倫特羅抽樣快速檢測同步進行情況等，并監(jiān)管屠宰場及檢疫人員做好各種臺賬記錄，規(guī)范操作行為，嚴防屠宰環(huán)節(jié)出現(xiàn)漏洞。

4、落實經(jīng)費，加大監(jiān)測檢驗力度。

一是落實經(jīng)費。各縣區(qū)分別落實經(jīng)費，積極爭取財政的支持，購買檢測試劑，加大檢測力度。如田陽縣為了提高監(jiān)測質(zhì)量，3月22日爭取財政資金6萬元購買1000條鹽酸克倫特羅快速檢測卡，對全縣規(guī)模養(yǎng)豬場、牲畜屠宰場散養(yǎng)戶生豬和境外調(diào)進生豬進行鹽酸克倫特羅快速檢測。二是加大抽檢力度。各縣（區(qū)）按照市里要求積極開展抽檢工作，全部超額完成下達的抽檢工作任務(wù)。全市共檢測豬尿樣3565份，結(jié)果全部陰性。三是積極完成自治區(qū)交給的抽檢任務(wù)。根據(jù)區(qū)局《關(guān)于印發(fā)2011年廣西養(yǎng)殖戶“瘦肉精”監(jiān)測方案的通知》（桂漁牧發(fā)?2011?62號）文件精神，我市在規(guī)定時間內(nèi)開展樣品監(jiān)測及送檢工作。7月下旬共在全市10個牛場，31個豬場完成了尿樣瘦肉精監(jiān)測和18份尿樣送檢工作，檢測結(jié)果全部陰性。

三、存在主要問題

1、工作經(jīng)費不足。目前我市的整治監(jiān)測任務(wù)都是由自治區(qū)下達的，而我市各級財政在獸藥和畜產(chǎn)品檢測沒有安排經(jīng)費預(yù)算，上級給的經(jīng)費也有限，導致經(jīng)費缺乏，違禁藥品整治工作無法形成常態(tài)化。

2、設(shè)備落后。目前，動物產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管責任重大，工作任務(wù)越來越多，開展瘦肉精整治需要車輛等執(zhí)法設(shè)備，但我市市本級及各縣（區(qū)）都缺少交通工具等執(zhí)法設(shè)備，導致工作很被動。

3、抽檢工作任務(wù)比較繁重。特別是在屠宰環(huán)節(jié)，由于檢疫人員人力有限，要求開展瘦肉精檢測與屠宰同步進行比較困難，檢測工作也很難持續(xù)開展。

四、建 議

1、建立瘦肉精監(jiān)管長效機制。自治區(qū)、市、縣三級應(yīng)堅持不定期開展監(jiān)督抽樣檢查，嚴厲打擊違規(guī)違法經(jīng)營使用違禁獸藥行為。

2、上級應(yīng)加大經(jīng)費投入，解決監(jiān)管工作經(jīng)費和采樣設(shè)備等問題。特別需要上級給予大力支持縣（區(qū)）動物衛(wèi)生監(jiān)督所下鄉(xiāng)檢查需要的配備執(zhí)法車輛和采樣工具設(shè)備。

3、加強培訓工作。建議上級多開展獸藥監(jiān)督執(zhí)法等培訓，培訓到縣一級獸藥監(jiān)管人員，提高基層人員素質(zhì)。

4、進一步抓好源頭管理。加大對獸藥生產(chǎn)企業(yè)的監(jiān)管力度，堵住源頭，對制售違禁和假劣獸藥行為進行嚴厲打擊，確保源頭安全。

百色市動物衛(wèi)生監(jiān)督所

二〇一二年一月九日

第二篇：開展“瘦肉精”專項整治工作匯報

連山區(qū)畜牧獸醫(yī)局

開展“瘦肉精”專項整治活動

為貫徹落實全省“迎全運、保安全”瘦肉精專項整治電話會議精神，進一步加強“瘦肉精”專項整治工作，確保畜產(chǎn)品消費安全。結(jié)合我區(qū)實際，切實開展了以打擊非法制售使用“瘦肉精”為重點的畜產(chǎn)品安全專項整治“百日會戰(zhàn)”行動，在相關(guān)部門及基層單位的密切配合下，整頓和規(guī)范了我區(qū)農(nóng)產(chǎn)品市場，有力地打擊了損害消費者利益的違法行為，保障了農(nóng)產(chǎn)品食用的安全，維護了廣大農(nóng)民和消費者的合法權(quán)益。

一、緊急行動，周密部署。

為了有效開展“百日整治”工作，根據(jù)市畜牧獸醫(yī)局要求，我局成立了生豬“瘦肉精”專項整治工作領(lǐng)導小組，由局長谷振峰任組長，副局長齊玉林任副組長，成員由才文旭、徐永海、任興、穆森組成。領(lǐng)導小組下設(shè)辦公室，主任由才文旭兼任，主要負責專項整治活動的工作安排、人員調(diào)度、信息上報等工作。因此，我局專門召開了會議，進行總動員、總部署，要求行政執(zhí)法人員以科學發(fā)展觀重要思想為指導，站在保護人民群眾根本利益的高度，充分認識我區(qū)生豬“瘦肉精”專項整治“百日會戰(zhàn)”活動的目的和重要意義，進一步提高認識，強化責任，堅決打好生豬“瘦肉精”百日整治活動戰(zhàn)役。

二、明確職責，齊抓共管。

為開展好生豬“瘦肉精”百日整治工作，我局制定下發(fā)了《連山區(qū)“瘦肉精”專項整治百日會戰(zhàn)實施方案》和《連山區(qū)瘦肉精等違禁藥物監(jiān)測方案》，與各單位簽定工作責任狀，設(shè)立舉報電話，制定了24小時值班制度和周報告制度，加大工作落實的保障力度。在檢疫、檢測業(yè)務(wù)工作的落實上，我局加大對鄉(xiāng)鎮(zhèn)動監(jiān)所、區(qū)動物防疫監(jiān)督所、動物疾病控制中心工作的監(jiān)督，保證檢疫、防疫業(yè)務(wù)工作的完成，保證我局各項工作全面開展。在畜產(chǎn)品質(zhì)量安全日常監(jiān)管工作中，兩個站共派出11名工作人員，分別入駐我區(qū)畜產(chǎn)品經(jīng)營單位、門點，對所售肉品不間斷開展查證驗質(zhì)工作，確保監(jiān)管工作不缺位，有效地保障了全區(qū)市場畜產(chǎn)品質(zhì)量安全。

三、專項整治，重點排查。

根據(jù)我區(qū)“瘦肉精”監(jiān)管對象的分布情況，我局制定了“百日行動”實施方案和專項整治工作計劃，采取分組檢查、拉網(wǎng)排查的方式開展工作。一是我局主要領(lǐng)導、分管領(lǐng)導分別帶隊，對全區(qū)生豬養(yǎng)殖環(huán)節(jié)、獸藥飼料銷售門點、飼料生產(chǎn)企業(yè)、生豬肉品經(jīng)營場所進行了全面檢查，同時，加大市場銷售肉品的“瘦肉精”抽樣檢測批次。二是開展讓市民吃上“放心肉”執(zhí)法工作?！鞍偃照巍被顒悠陂g，我局5次采取突擊檢查的方式，在凌晨市場經(jīng)營高峰期，對生豬肉品批發(fā)市場進行檢查，重點進行肉品的查證驗質(zhì)工作，打擊“白

條肉”現(xiàn)象。三是抽調(diào)專人，對全區(qū)生豬規(guī)模養(yǎng)殖戶的存欄生豬開展拉網(wǎng)式抽樣檢測。我局各鄉(xiāng)鎮(zhèn)監(jiān)督所對所轄鄉(xiāng)鎮(zhèn)豬50頭以上、牛10頭以上、羊30頭以上特別是收購、販運業(yè)戶進行了詳細的排查，我區(qū)豬存欄50頭以上402戶，存欄49033頭；牛10頭以上170戶，存欄3772頭；羊30只以上459戶，存欄28081只。

加大檢測頻次。我局要求對每次出欄豬羊10頭（只）以上的（不足10的按10計）按10%抽檢，牛頭頭進行檢測；未出欄的豬羊每百頭（不足百頭以百頭計）按2%抽檢，牛按2%抽檢（不足10的按10計），每月抽檢兩次。截至目前全區(qū)瘦肉精尿樣檢測1097戶，檢測樣品2712例。其中豬561戶，檢測樣品1702例；牛227戶，檢測樣品461例；羊309戶，檢測樣品549例，檢測結(jié)果全部合格。全面掌握了養(yǎng)殖環(huán)節(jié)“瘦肉精”監(jiān)管情況，防患于未然。同時通過口頭宣講、發(fā)放張貼《嚴禁使用“瘦肉精”等違禁物告知書》的方式，向養(yǎng)殖戶主開展宣傳教育工作。我局共下發(fā)《告知書》等宣傳資料650份，做到了戶戶張貼，人人知曉。同時我局行政執(zhí)法人員還到飼養(yǎng)場、奶站、飼料生產(chǎn)企業(yè)、屠宰加工企業(yè)對相對人員進行了畜產(chǎn)品質(zhì)量安全生產(chǎn)的相關(guān)知識培訓，共培訓140人。

四、完善制度，強化監(jiān)管

為確保瘦肉精專項整治行動見實效，連山區(qū)瘦肉精專項

整治百日會戰(zhàn)行動督查領(lǐng)導小組進行了全方位的督查，并有相應(yīng)的督查記錄。

檢查區(qū)域所瘦肉精專項整治工作落實情況、三書”簽訂情況、檢測記錄、屠宰場瘦肉精檢驗報告保存情況等。

檢查轄區(qū)內(nèi)屠宰企業(yè)的各項記錄、瘦肉精自檢與檢疫同步制度落實情況。

檢查規(guī)模飼養(yǎng)場飼料、獸藥等投入品使用記錄是否完善，是否有添加違禁物質(zhì)的不法行為。

檢查飼料生產(chǎn)企業(yè)原料購進、使用等記錄是否齊全、原料庫是否有違禁藥品等，并對存在問題提出整改建議。

五、建立機構(gòu)，完善體系。

成立連山區(qū)畜產(chǎn)品安全管理站，編制3人，為全額撥款的事業(yè)單位，現(xiàn)有工作人員2人；積極籌建畜產(chǎn)品安全實驗室，實驗室設(shè)在區(qū)疫控中心院內(nèi)，籌建實驗室所需經(jīng)費331690元，請示報告已報連山區(qū)人民政府，資金到位后馬上建設(shè)，預(yù)計六月份能夠建成并開展工作。

這次開展生豬“瘦肉精”整治活動涉及面廣，持續(xù)時間長，共出動執(zhí)法人員460人次，檢查畜禽養(yǎng)殖戶242戶次，區(qū)域所16個次，屠宰企業(yè)40個次，飼料生產(chǎn)企業(yè)37家次，均無使用瘦肉精等違禁物質(zhì)的行為。有效整頓和規(guī)范了農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)經(jīng)營秩序，打擊了各種損害消費者利益違法行為，切實保障了畜產(chǎn)品質(zhì)量安全，使百姓吃上放心肉，安全動物食

品。

2012年3月11日

第三篇：瘦肉精檢測

通許縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所關(guān)于

外銷生豬“瘦肉精”檢測的報告

開封市動物衛(wèi)生監(jiān)督所：

為了保證畜產(chǎn)品質(zhì)量安全，保障人民身體健康，全面推進和諧社會的創(chuàng)建，2010年6月21日，通許縣畜牧局下發(fā)文件開展世博會期間整頓生豬經(jīng)營處等檢疫秩序活動，特別是重點開展 “瘦肉精”的檢測工作，堅決杜絕在飼料中使用萊克多巴胺及克倫特羅等違禁藥物，整頓和規(guī)范飼料、獸藥市場，嚴厲打擊假冒偽劣產(chǎn)品，實現(xiàn)全縣生豬生產(chǎn)的安全無污染，確保外銷到市場的是“放心豬”。

通許縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所認真學習貫徹了縣局文件精神，開展以“瘦肉精”和重大動物疫病為主的檢測檢驗；加大對使用“瘦肉精”的打擊力度，建立生豬疫病防治體系，確保生豬及其加工產(chǎn)品的質(zhì)量安全。對檢測出“瘦肉精”的生豬產(chǎn)地在3個月內(nèi)禁止外銷，經(jīng)檢測合格后重新申請進入市場。逐步推行生豬產(chǎn)品市場準入制度、“一豬一標一碼”標識管理制度。對生豬“瘦肉精”進行重點抽檢，檢驗中凡發(fā)現(xiàn)有“瘦肉精”的生豬均進行銷毀，并向產(chǎn)地通報和封停該地生豬進入市場。

據(jù)匯總統(tǒng)計，2010年6月至8月份我縣共外銷生豬8603頭。分批次發(fā)往浙江省慈溪市、江蘇省無錫市、安徽省和縣、浙江省寧波市、江蘇省常州市、廣東省湛江市、安徽省合肥市、安徽省淮南市、安徽蒙城縣等九個城市和地區(qū)?！笆萑饩睓z測全部呈現(xiàn)陰性。其中6月份外銷生豬2053頭，抽檢生豬尿樣110多個，檢測結(jié)果全部呈現(xiàn)陰性，合格率達到100%。7月份外銷生豬3190頭，抽檢生豬尿樣160多個，檢測結(jié)果全部呈現(xiàn)陰性，合格率達到100%。8月份外銷生豬3360頭，抽檢生豬尿樣170多個，檢測結(jié)果全部呈現(xiàn)陰性，合格率達到100%。

二○一○年九月八日

主題詞：瘦肉精 抽檢 報告

通許縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所二○一○年九月八日印

第四篇：(瘦肉精)檢測制度

第十節(jié)

屠宰企業(yè)違禁藥物（瘦肉精）檢測制度

（適用實行瘦肉精企業(yè)自檢的地區(qū)）

一、為規(guī)范生豬定點屠宰廠（場）待宰生豬尿樣違禁藥物“瘦肉精”的日常檢驗工作，制定本制度。

二、定點屠宰廠（場）必須有滿足日常檢測需要的工作場所及實驗室，并應(yīng)保持光線充足，通風良好，室內(nèi)環(huán)境整潔，基本設(shè)施齊全。

實驗室必須配備能滿足檢測工作需要的檢測人員和審核人員。

三、檢測人員必須經(jīng)過有關(guān)單位的培訓，能獨立操作，包括樣本的采取和檢測。

四、定點屠宰廠（場）必須建立瘦肉精檢測臺帳，并建立人員崗位責任制，所有檢測設(shè)施、器材、記錄等都要專人妥善保管。

五、嚴格執(zhí)行省政府的有關(guān)要求，生豬宰前必須進行瘦肉精檢測，并實行每批必檢制度（一個檢疫證號為一批）。

六、檢測結(jié)果應(yīng)在屠宰廠（場）內(nèi)固定場所以醒目方式對外公示。

七、若檢測出現(xiàn)陽性結(jié)果，屠宰廠（場）必須將檢測結(jié)果立即報送當?shù)貏游锓酪弑O(jiān)督機構(gòu)處理。

八、檢測方法按照《動物組織中鹽酸克倫特羅的測定 氣相色譜/質(zhì)譜法》NY/T 468-2006的規(guī)定執(zhí)行。

九、屠宰廠（場）應(yīng)自覺接受屠宰管理機構(gòu)和動物防疫監(jiān)督機構(gòu)對檢測工作開展監(jiān)督檢查、指導。

第五篇：瘦肉精檢測方法

目前，檢測瘦肉精的方法主要有四種，即高效液相色譜法（HPLC）、氣相色譜一質(zhì)譜法（GC－MS）、毛細管區(qū)帶電泳法（CE）和免疫分析技術(shù)（IA）。而我國結(jié)合自己的實際情況，2001年農(nóng)業(yè)部首先組織制定了飼料中鹽酸克倫特羅的測定標淮。該標準選擇確定了兩種：即高效液相色譜法（HPLC）、氣相色譜一質(zhì)譜法（GC－MS）。其中將HPLC法作為檢測瘦肉精的半確證性方法，其最低檢測限為 0．05μg/kg，優(yōu)點是檢測精確度高，而且假陽性率低；缺點是檢測過程煩瑣、檢測時間長，需貴重儀器、難于操作、價格昂貴。而GC一MS法優(yōu)點是能在多種殘留物同時存在的情況下對某種特定的殘留物進行定性、定量分析。GC－MS法與HPLC法相比，檢測靈敏度更高，假陽性率更低，已將GC－MS法定為檢測瘦肉精的確證性方法。GC－MS法的缺點同HPLC相似。

(1)試劑和材料 以下所有試劑，除特別注明外，均為分析純試劑；水為符合GB／T6682規(guī)定的二級水。

①鹽酸克倫特羅對照品：含鹽酸克倫特羅不得少于98．5％

②鹽酸

③無水甲醇

④氫氧化鈉

⑤磷酸二氫鉀

⑥磷酸

⑦鹽酸溶液 取鹽酸4．2ml，加水至1000ml，即得。

⑧o．5mol／L磷酸二氫鉀溶液 取磷酸二氫鉀68g，加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3．O，用水稀釋至1000ml，即得。

⑨0．05mol幾磷酸二氫鉀溶液 取磷酸二氫鉀6．88，加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3．0，用水稀釋至1000mi，即得。

a．氫氧化鈉溶液 取氫氧化鈉48，加水使溶解成100mi，即得。

b．鹽酸克倫特羅對照品儲備液(1mg／mi)準確稱取28．3mg鹽酸克倫特羅對照晶至25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至25ml，一20~C以下保存，有效期1年。

⑩鹽酸克倫特羅對照品工作液(10ttg／mi)取lmg／mi儲備液o．5ml到50mi量瓶中，加水至50mi，2～8~C保存，有效期1個月。

⑾鹽酸克倫特羅對照溶液(100ng／m1)取1(ug／m1工作液o．5ml到：50mi量瓶中水至50mi，2～8~C保存，有效期1個月。

⑿鹽酸克倫特羅檢測試劑盒(2～8~C冰箱中保存)

⒀固相萃取柱C，s：100mglml含碳量≥17％

(2)儀器和設(shè)備

①酶聯(lián)免疫反應(yīng)讀數(shù)儀

②分析天平精度0．00001g

③天平精度0．01g

④冷凍離心機

⑤50mi具塞離心管

⑥勻漿機

⑦微型振蕩器

⑧回旋振蕩器

⑨微量移液器 單道20uL，50ul，100uL；多道50～250uL，⑩干熱濃縮器

①空氣壓縮機

(3)測定步驟

①試料的制備(尿)

取供試尿lml，于3000r／min離心l0min，上清液作為供試試料，直接供酶聯(lián)免疫測定法測定。

取空白尿lml，于3000r／min離心l0min，上清液作為空白試料，直接供酶聯(lián)免疫測定法測定。

取空白尿2ml，于3000r／min離心l0min，上清液1.0ml添加l00ug／L的克倫特羅對照溶液20／H。作為2ug/l空白添加試料，直接供酶聯(lián)免疫測定法測定。

②試料的制備(肝)

取約l00g新鮮或冷凍后融化的空白或供試豬肝,用勻漿機以10000r／rain勻漿1-2min，使均勻呈糊狀，一20~C以下冰箱中貯存?zhèn)溆谩?/p>

取均漿后的供試肝樣，作為供試試料。

取均漿后的空白肝樣，作為空白試料。

取均漿后的空白肝樣(1土0．05)e添加l00ng／m1的克倫特羅對照溶液20tzL作為2ng／g空白添加試料。

a：提取(肝)取(1士o．05)z試料，置50ml離心管中；加鹽酸溶液5.0mi，旋渦混勻，中速振蕩1．5h；在10—15~C下以4000r／mill以上速度離心15min；上清液移人另一50ml離心管中，加入氫氧化鈉溶液300gL，混勻，振蕩15min；加0.5mol／l磷酸二氫鉀溶液4。0ml，混勻，2—8~C放置過夜；取上述溶液于10～15~C以4000r／111113以上的速度離心15min，上清液備用。

b．凈化(肝)C，固相萃取柱依次用無水甲醇3mi、0.05mol／L磷酸二氫鉀溶液2mi預(yù)洗，不使柱床干涸；將備用上清液全部過柱；用0.05mol／L磷酸二氫鉀溶液2ml淋洗，擠干，棄去所有淋洗液；用無水甲醇2mi洗脫，流速控制在0.5ml／mm以下，擠干，收集洗脫液；于50～60~C下用氮氣或空氣緩緩吹干洗脫液；殘余物用水1.0ml溶解，以4000r／mill以上的速度離心15rain，清液作為試樣溶液供酶聯(lián)免疫測定法測定。

③測定

a．室溫應(yīng)控制在19～30~C。

b．取在19—30~C放置1—2h的試劑盒，按每個標準溶液和試樣溶液至少兩孔計算所需酶聯(lián)板條的數(shù)量，插入框架。每個微孔加入用緩沖溶液100倍稀釋的抗體100~tL，封口膜封板，室溫孵育30min。

c倒出孔內(nèi)液體，將酶聯(lián)板倒置在吸水紙上拍打，使孔內(nèi)沒有殘余液體。用多道移液器加水250pL到酶聯(lián)板的微?L內(nèi)，稍后倒出孔內(nèi)液體，再將酶聯(lián)板倒置在吸水紙上拍打，如此重復(fù)操作洗板3次。

d．分別吸取標準溶液、空白試料、空白添加試料和供試試料各20uL，分別放入不同微孔底中央，并在每孔內(nèi)加入用緩沖溶液100倍稀釋的酶結(jié)合物100~I。，在微型振蕩器上混勻，用封口膜封好，室溫孵育30min。

e．倒出孔內(nèi)液體，將酶聯(lián)板倒置在吸水紙上拍打，使孔內(nèi)沒有殘余液體，重復(fù)洗板3次。

f．用多道移液器加入用底物緩沖溶液10倍稀釋的底物100uL，室溫避光孵育15min。

g．用多道移液器每孔加終止液100uL。

h．在1h內(nèi)將酶聯(lián)板放于酶標儀內(nèi)，于450nm波長處測定吸光度值。

(4)計算 用數(shù)據(jù)分析軟件對結(jié)果進行分析，繪出標準曲線，并得出試料中克倫特羅的含量。

(5)靈敏度和回收率

本方法的平均檢測下限為0.1mg／Kg。

本方法在1ug／kg添加濃度水平上豬尿回收率范圍為60％一120％，豬肝回收率范圍為40％～120％。