第一篇:半保留復(fù)制實(shí)驗(yàn)證明
半保留復(fù)制實(shí)驗(yàn)證明 Watson和Crick在他們發(fā)表在1953年4月25日的Nature上的具有劃時(shí)代意義的題為“Molecular structure of Nucleic Acids”論文的最后一段這樣寫道:“It has not escaped our notice that the specific pairing we have postulated immediately suggests a possible copying mechanism for the genetic material.The structure itself suggested that each strand could separate and act as a template for a new strand,therefore doubling the amount of DNA, yet keeping the genetic information,in the form of the original sequence,intact.”翻譯成中文的意思是,“特定的堿基配對(duì)性質(zhì)讓我們立刻注意到遺傳物質(zhì)可能的復(fù)制機(jī)制。結(jié)構(gòu)(雙螺旋)的本身意味著每一條鏈可以分離開來,作為新鏈的模板,于是DNA的量加倍了,而且保證了遺傳物質(zhì)以原封不動(dòng)的序列形式存在?!痹谖闹?,他們雖然并沒有提及DNA復(fù)制的具體機(jī)制,但已經(jīng)就DNA復(fù)制的可能采取的是一種半保留方式做了大膽的預(yù)測。然而,細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制是不是就是以這種方式進(jìn)行的,光憑預(yù)測是不夠的,還必須用實(shí)驗(yàn)去驗(yàn)證。由Meselson和Stahl(圖32-50)設(shè)計(jì)的被譽(yù)為生物學(xué)最美麗的實(shí)驗(yàn)“the most beautiful experiment in biology”最終證明了Watson和Crick預(yù)測的正確性。
1953年,Meselson在加州理工學(xué)院(Caltech)開始了以化學(xué)為專業(yè)的研究生階段的學(xué)習(xí)。他進(jìn)了Pauling的實(shí)驗(yàn)室,最終完成了其博士論文第二個(gè)階段關(guān)于N,N-二甲基丙二酰胺(N,N-dimethyl malonamide,)晶體結(jié)構(gòu)的工作。這部分工作的重點(diǎn)是確定這個(gè)分子中含有的肽鍵是不是共平面的,即是否與Pauling的共振理論相符。與他的博士論文的第一個(gè)部分關(guān)于大分子的密度梯度平衡沉降技術(shù)在DNA研究上的應(yīng)用相比,這一部分鮮為人知。身為Pauling的弟子,在聽過Pauling開設(shè)的有關(guān)化學(xué)鍵的課程以后,他對(duì)當(dāng)H被其同位素氚(2H)取代以后氫鍵的相對(duì)強(qiáng)度產(chǎn)生了興趣。就在他對(duì)氚參入到生物分子以后,生物體如何能夠生存下來的問題發(fā)生興趣的時(shí)刻,Meselson正好去聽了Jacques Monod在Caltech做的有關(guān)細(xì)菌誘導(dǎo)酶合成的學(xué)術(shù)報(bào)告。Meselson推測,如果細(xì)菌能在重水里培養(yǎng),然后被轉(zhuǎn)移到一般的水里培養(yǎng)以后一旦加入誘導(dǎo)物,則任何新合成的蛋白質(zhì)就應(yīng)該具有正常的密度,與原來老的蛋白質(zhì)的密度是有差別的,利用密度差異可以將“老”的蛋白質(zhì)和新合成的蛋白質(zhì)分開。事實(shí)上,如果在一個(gè)具有中間密度的溶液中離心,“老”的蛋白質(zhì)可能沉降下來,而新合成的蛋白質(zhì)應(yīng)該懸浮在上面。
不久,他開始將注意力轉(zhuǎn)移到DNA復(fù)制的問題。在與Max Delbrück進(jìn)行了有關(guān)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和可能的復(fù)制方式的一番熱烈的討論以后,他突然想到相同的方法也許可以用來研究DNA復(fù)制。于是,他決定要投入精力去確定DNA復(fù)制是否就是按照Watson和Crick預(yù)測的半保留的方式進(jìn)行的。與此決定無關(guān)的一件事也許對(duì)其最后的成功帶來決定性的影響:1954年的夏天,Meselson去馬里蘭州位于Woods Hole的海洋生物實(shí)驗(yàn)室協(xié)助Watson進(jìn)行一些滴定實(shí)驗(yàn),以獲得RNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的證據(jù)。巧合的是,來自Rochester大學(xué)的Frank Stahl博士也在Woods Hole修生理學(xué)課程。一天正當(dāng)Stahl在樹下思考噬菌體遺傳性的一個(gè)問題的時(shí)候,他們相遇了,并從此成為了朋友和學(xué)術(shù)伙伴。就在Meselson對(duì)噬菌體遺傳學(xué)還似懂非懂的時(shí)候,他在微積分上的專長幫助Stahl解決了問題。于是,他們變得更加熟悉了,不久Meselson提出了利用Stahl在研究噬菌體DNA上的特長使用噬菌體DNA來合作研究DNA復(fù)制的可能性。他還提出了使用氚來重標(biāo)記DNA的設(shè)想,以此用密度梯度離心來分離重的DNA和輕的DNA。然而,他們很快就意識(shí)到使用噬菌體DNA進(jìn)行實(shí)驗(yàn)帶來的復(fù)雜性問題,因?yàn)槭删wDNA之間存在高頻的重組事件,由此引起親代和子代DNA片段的交換是可以預(yù)見的,這勢必會(huì)影響到結(jié)果的分析。幸運(yùn)的是,Stahl已經(jīng)打算去Caltech做博士后研究,以方便以后的討論和合作。既然噬菌體行不通,較為簡單的單細(xì)胞系統(tǒng)——E.coli也許是一個(gè)不錯(cuò)的選擇。后來Meselson想知道更多有關(guān)DNA合成前體分子性質(zhì)的知識(shí),在文獻(xiàn)調(diào)研中,得知胸腺嘧啶的類似物——5-溴尿嘧啶(5-bromouracil,5-BrU)能夠代替T參入到正在合成的DNA分子之中。5-BrU相當(dāng)于T,除了由Br原子代替嘧啶環(huán)C5上的甲基以外。Br與甲基具有幾乎相同的范德華半徑,但由于5-BrU與T的離子化程度不同,Meselson想到也許可以用5-BrU標(biāo)記DNA,然后利用電泳的方法將它與含有T的DNA分離開來。特別重要的是,他特別想到含有5-BrU的DNA要比含有T的DNA重得多!于是,他考慮使用5-BrU來重標(biāo)記DNA以驗(yàn)證DNA半保留復(fù)制的可能性。因?yàn)樾枰x心技術(shù)的關(guān)系,他認(rèn)識(shí)了Caltech的超離心技術(shù)奇才Jerry Vinograd,并學(xué)會(huì)了如何操作當(dāng)時(shí)最先進(jìn)的Beckman Spinco E型超離心機(jī)。在Vinograd悉心指導(dǎo)下,Meselson開始嘗試用7 mol/L的CsCl重鹽溶液來沉降DNA。使用CsCl的主意來自他認(rèn)為可以將重標(biāo)記的DNA與輕DNA分開來的設(shè)想——重標(biāo)記DNA沉降下來,輕DNA懸浮在表面。然而,令他們驚詫的是,在高速離心場下,一種鹽密度梯度很快就形成了,而且DNA遷移到與其等密度的區(qū)域,形成很窄的條帶。于是有關(guān)密度梯度離心的概念被Meselson提出來了,相關(guān)的論文后來發(fā)表在1957年5月份的Proceedings of National Academy Science上。論文中的圖和理論計(jì)算實(shí)際上是他博士論文第一部分的內(nèi)容。論文中還記錄了含有5-BrU的DNA(在含有5-BrU培養(yǎng)基中培養(yǎng)的受T4噬菌體感染E.coli中,得到被5-BrU標(biāo)記的T4噬菌體DNA)在密度梯度離心中的沉降情況。結(jié)果顯示,被5-BrU標(biāo)記的DNA條帶所處位置的密度是
1.8g/cm3,而含有T的DNA所在位置的密度是1.7g/cm3。盡管文中沒有提到使用這種方法研究DNA復(fù)制,但用于研究完整病毒和生物大分子的報(bào)道還是非常富有開創(chuàng)性的。
似乎幸運(yùn)之神正在一步一步地將Meselson和Stahl帶到研究DNA復(fù)制的里程碑的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路上去。他們本來想用5-BrU去重標(biāo)記DNA的,但后來擔(dān)心5-BrU能誘發(fā)DNA突變和因此細(xì)胞產(chǎn)生的毒性,以及能否獲得標(biāo)記的均一性的問題,他們決定使用15NH4Cl作為唯一N源的合成培養(yǎng)基去培養(yǎng)E.coli以獲得被15N標(biāo)記的重DNA。他們首先將E.coli放在15NN4Cl培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)十幾代,得到了幾乎都被15N標(biāo)記的E.coli DNA;然后,隨著細(xì)菌的指數(shù)生長,用10倍過量的14NH4Cl稀釋培養(yǎng)基。期間在不同的時(shí)段,將DNA從細(xì)菌中抽取出來,并使用CsCl密度梯度離心的方法進(jìn)行分析。
他們的結(jié)果是,起初完全被15N標(biāo)記的DNA具有單一的條帶,而在14NH4Cl培養(yǎng)基中培養(yǎng)的第一代細(xì)菌中的DNA的密度介于15N-DNA和14N-DNA之間,為雜交帶DNA(15N/14N-DNA)。隨著雜交帶的出現(xiàn),親代的條帶(15N-DNA)消失了。而在第二代細(xì)菌中,得到幾乎等量的14N-DNA和雜交帶DNA。隨著培養(yǎng)代數(shù)的增加,雜交帶始終存在,而且它的量維持不變,但14N-DNA的量越來越多。由此可以得出結(jié)論,DNA復(fù)制以半保留的方式進(jìn)行。為了進(jìn)一步確認(rèn)這一點(diǎn),Meselson和Stahl在密度梯度離心之前用熱變性處理CsCl溶液中DNA樣品(100℃下30 min),結(jié)果發(fā)現(xiàn),雜交DNA分成了15N-DNA和14N-DNA兩條帶。不久,他們將數(shù)據(jù)整理,投給了PNAS,并很快得以發(fā)表。
第二篇:實(shí)驗(yàn)半期總結(jié)
河溪小學(xué)實(shí)驗(yàn)室半期總結(jié)
---張福
這學(xué)期領(lǐng)導(dǎo)從上到下都非常重視實(shí)驗(yàn)教學(xué),對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)有了很多新的要求,自然而然對(duì)理化生實(shí)驗(yàn)室各個(gè)方面都加強(qiáng)了管理,引導(dǎo)我們?nèi)ス芾?、要求年?jí)上按照新的要求來做,同時(shí)做了任何一件事都要留下“痕跡”,要有表表冊(cè)冊(cè),各種數(shù)據(jù)來支撐,把我們做的事情記錄下來,加強(qiáng)痕跡管理。這些都是實(shí)驗(yàn)室在變化的地方,也是我們需要努力改進(jìn)的地方。
一、實(shí)驗(yàn)方面
1.演示實(shí)驗(yàn)
演示實(shí)驗(yàn)主要集中在物理和化學(xué)兩個(gè)學(xué)科上,按照要求理化演示實(shí)驗(yàn)開出率保證在99%以上,高標(biāo)準(zhǔn)高質(zhì)量的保證一線教學(xué)需要,這是我們的本職工作,再累再辛苦我們都不會(huì)抱怨一句,堅(jiān)決服務(wù)好老師和學(xué)生。
2.學(xué)生分組實(shí)驗(yàn)
開學(xué)初,就按照領(lǐng)導(dǎo)要求,和備課組積極溝通,要求備課組制定分組實(shí)驗(yàn)?zāi)夸洠淠康木褪嵌酱倌昙?jí)上,保證分組實(shí)驗(yàn)的開出率,凡是能做的學(xué)生分組實(shí)驗(yàn)都一定要按時(shí)開齊。到目前為止統(tǒng)計(jì)的情況來看,化學(xué)和生物學(xué)科都做了2輪,下一輪也在計(jì)劃當(dāng)中,物理也在準(zhǔn)備階段。
二、管理方面 1.領(lǐng)導(dǎo)重視實(shí)驗(yàn)教學(xué),對(duì)各方面都加強(qiáng)了管理,要把實(shí)驗(yàn)室打造出一個(gè)全新的面貌,為此我們也對(duì)各備課組也加強(qiáng)了管理,借還制度的完善,學(xué)生分組實(shí)驗(yàn)提高要求,新的實(shí)驗(yàn)?zāi)夸浿贫ā3=y(tǒng)計(jì)三個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)開設(shè)情況,及時(shí)匯報(bào),讓領(lǐng)導(dǎo)知道實(shí)驗(yàn)教學(xué)開展情況如何
三、問題和建議
在本期的實(shí)驗(yàn)教學(xué)中,雖然取得了一定的成績,但也存在著不少問題,主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:
1、儀器借用還不充分,還有待加強(qiáng)。
2、課外活動(dòng)開展的條件還有待改善,特別是相關(guān)器材還需要購進(jìn),保證課外實(shí)驗(yàn)順利開展。
3、實(shí)驗(yàn)教研還有待加強(qiáng),讓教研為教學(xué)服務(wù)的意識(shí)不足,存在著為研而研,實(shí)踐不足的弊病。
4、教師培訓(xùn)中的自我培訓(xùn)意識(shí)有待加強(qiáng)。
5、儀器維修作為實(shí)驗(yàn)室管理人員來說還需要加強(qiáng)學(xué)習(xí)。
6、實(shí)驗(yàn)教學(xué)就和其它學(xué)科進(jìn)行優(yōu)化整合,讓其它學(xué)科促進(jìn)實(shí)驗(yàn)教學(xué),也讓實(shí)驗(yàn)教學(xué)促進(jìn)其它學(xué)科的教學(xué)。
2017.11.8
第三篇:實(shí)驗(yàn)證明
實(shí)驗(yàn)證明
知識(shí)小結(jié):
1、為了證明某種結(jié)論或某種推斷,設(shè)計(jì)相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)方法,當(dāng)出現(xiàn)預(yù)料的某種實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象時(shí),就可以得到證明。選擇的實(shí)驗(yàn)方法力求簡單易行、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象明顯。
2、初中化學(xué)里的實(shí)驗(yàn)證明題,一般都是證明某種成分,或某種物質(zhì)含有的某種成分,以定性證明為主。
3、應(yīng)熟悉常見的檢驗(yàn)方法,如檢驗(yàn)水、二氧化碳、一氧化碳、氫氣和碳酸鹽及氯離子、硫酸根離子、銨根離子等等。檢驗(yàn)時(shí)要注意排除干擾,避免誤檢。
例題分析:
1、怎樣用實(shí)驗(yàn)證明下列事實(shí)或結(jié)論?寫出實(shí)驗(yàn)操作步驟、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象、實(shí)驗(yàn)結(jié)論及有關(guān)化學(xué)反應(yīng)方程式。
(1)酒精中含有少量水分。
(2)生石灰中含有未“燒透”的石灰石。
(3)氫氧化鈉溶液長期露置在空氣中,已部分變質(zhì)。
2、實(shí)驗(yàn)室用鋅粒跟稀硫酸反應(yīng)制取氫氣(其中含有水蒸氣),現(xiàn)要求證明氫氣具有還原性,及氫氣氧化后的產(chǎn)物是水,試從下圖中選出所需的裝置(各裝置可重復(fù)選用),并從左到右連成一套實(shí)驗(yàn)裝置,完成實(shí)驗(yàn)要求。回答:
(1)裝置連接順序(填序號(hào))→→→→。
(2)在C、D裝置中反應(yīng)的化學(xué)方程式:。
(3)證明氫氣具有還原性的和氧化產(chǎn)物是水的現(xiàn)象。
提高練習(xí):
1、為了證明鹽酸中是否含有少量的硫酸,可以:
A:加入少量氯化鋇溶液,觀察是否有白色沉淀;
B:加入少量硝酸銀溶液,觀察是否有白色沉淀;
C:加入少量鋅粒,觀察是否有氣泡產(chǎn)生;
D:加入少量碳酸鈉溶液,觀察是否有氣泡產(chǎn)生。
2、為了證明某氣體中含有水蒸氣和氫氣,選用下圖裝置連接成一套裝置的順序?yàn)椋?A:甲→乙→丙→?。籅:丁→丙→甲→丁→乙;
C:丁→乙→丁→甲→??;D:甲→丁→乙→丙。
3、某混合氣體由二氧化碳、氫氣、一氧化碳和水蒸氣組成。試胳膊下列A~E五種裝置(假設(shè)每步反應(yīng)都完全,每種裝置限用一次),設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)程序,用來證明該混合氣體中確實(shí)。
4、欲證明某硫酸鈉溶液中含有氯化鈉。試回答:
(1)取少量樣品,放在試管里,加入過量的溶液。
(2)檢驗(yàn)溶液中硫酸根離子已全部沉淀的方法。
(3)取上層清液于另一試管中,滴加溶液,看到,證明有氯離子。
6、為了證明某混合氣體是二氧化碳和一氧化碳的混合氣體,做以下實(shí)驗(yàn):
(1)使混合氣體通過盛的洗氣瓶,看到,證明混合氣體中含有二氧化碳。
(2)再使混合氣體通過盛溶液的洗氣瓶,使混合氣體中的二氧化碳全部吸收,反應(yīng)的化學(xué)方程式是。
(3)再將剩余氣體通過灼熱的,看到,反應(yīng)的化學(xué)方程式是。
(4)最后將剩余氣體通過,看到,說明一氧化碳的(填氧化或還原)產(chǎn)物是二氧化碳。
第四篇:戶檔保留證明
畢業(yè)生學(xué)號(hào):_________
用 人 單 位 接 收 證 明
(申請(qǐng)戶檔暫留畢業(yè)生用)
中國人民大學(xué):
茲證明,貴校_________學(xué)院_________專業(yè)_______屆畢業(yè)生_________(姓名),已被我單位錄用,落戶手續(xù)正在辦理中,請(qǐng)學(xué)校為其保留戶口、檔案。
單位名稱:_________
單位性質(zhì):黨政機(jī)關(guān)科研單位中初教育高等教育其他事業(yè)國有企業(yè)
三資企業(yè)其他企業(yè)部隊(duì)(請(qǐng)?jiān)趯?duì)應(yīng)項(xiàng)劃 √)
單位所在地:_____省_____市_____區(qū)
單位聯(lián)系人:_________
單位聯(lián)系電話:_________
畢業(yè)生本人聯(lián)系方式(手機(jī)):_________
單位公章
第五篇:重慶村社區(qū)證明事項(xiàng)保留清單
重慶市村(社區(qū))證明事項(xiàng)保留清單
(共10項(xiàng))
要求序事項(xiàng)名稱 號(hào)
單位 證明提供
證明用途
依據(jù)
備注
家庭經(jīng)濟(jì)狀況證1
明 司法行政部門 申請(qǐng)法律援助、認(rèn)定法律援助資格
《重慶市法律援助條例》第二十六條
村(居)民委員會(huì)提供證明
在辦理國內(nèi)公民收養(yǎng)登記中證明收養(yǎng)人有無子女、撫養(yǎng)國內(nèi)公民辦理收2
養(yǎng)證明
女情況等 民政部門 教育被收養(yǎng)人能力情況,送養(yǎng)人有特殊困難無力撫養(yǎng)子
1.《中國公民收養(yǎng)子女登記辦法》第五條
村(居)民委員會(huì)
2.《民政部關(guān)于規(guī)范生父母有特殊困難無力撫養(yǎng)的子
提供證明
女和社會(huì)散居孤兒收養(yǎng)工作的意見》第四條
村(居)民委員會(huì)城鄉(xiāng)低保申請(qǐng)人3
信息證明 民政部門 調(diào)查核實(shí)申請(qǐng)人員信息、經(jīng)濟(jì)情況等,辦理城鄉(xiāng)低保證
2.《重慶市城鄉(xiāng)居民最低生活保障條例》第五條
查核實(shí)
1.《社會(huì)救助暫行辦法》第十一條
社區(qū)專干協(xié)助調(diào)特困人員救助供調(diào)查核實(shí)申請(qǐng)人員信息、經(jīng)濟(jì)情況等,辦理特困人員救4 養(yǎng)申請(qǐng)人信息證明 民政部門
助供養(yǎng)資格證
《農(nóng)村五保供養(yǎng)工作條例》第七條
村(居)民委員會(huì)社區(qū)專干協(xié)助調(diào)查核實(shí)
對(duì)未成立業(yè)委會(huì)的居民小區(qū)住宅改為經(jīng)營性用房,依法住所(經(jīng)營場所)5
證明 部門
所用于從事經(jīng)營活動(dòng)提供證明,辦理工商登記 工商行政管理登記住所(經(jīng)營場所備案);對(duì)無法提供產(chǎn)權(quán)證明的場
《重慶市物業(yè)管理?xiàng)l例》第六十條
提供證明 村(居)民委員會(huì)
1.《中華人民共和國農(nóng)村土地承包經(jīng)營權(quán)證管理辦法》農(nóng)村土地承包經(jīng)用于農(nóng)村土地承包經(jīng)營權(quán)證變更;辦理農(nóng)村土地承包經(jīng)6 營權(quán)證辦理變更事項(xiàng)證明
辦法》第五十條 農(nóng)業(yè)部門
營權(quán)證
2.《重慶市實(shí)施〈中華人民共和國農(nóng)村土地承包法〉
簽署意見
第七條、第十四條
農(nóng)村土地發(fā)包人
1.《流動(dòng)人口計(jì)劃生育工作條例》第八條
村(居)民委員會(huì)證明已婚夫妻生育情況;城鎮(zhèn)職工計(jì)劃生育年老獎(jiǎng)勵(lì);衛(wèi)生計(jì)生行政7 婚育情況證明
部門
辦理再生育登記時(shí)核實(shí)生育情況并簽署意見
三條
3.《重慶市人口與計(jì)劃生育條例》第二十條、第二十
委員會(huì)提供證明 農(nóng)村計(jì)劃生育家庭獎(jiǎng)勵(lì)扶助;計(jì)劃生育家庭特別扶助;
第八條
意見;村(居)民
2.《全國計(jì)劃生育家庭特別扶助制度信息管理規(guī)范》
調(diào)查核實(shí)并簽署城鄉(xiāng)規(guī)劃主管鄉(xiāng)村建設(shè)規(guī)劃許部門、鄉(xiāng)(鎮(zhèn))8 可村民委員會(huì)書政府、街道辦事面意見
處 體經(jīng)濟(jì)組織用地范圍申請(qǐng)住宅建設(shè)
七條 證明申請(qǐng)人為本集體經(jīng)濟(jì)組織成員、同意申請(qǐng)人在本集
2.《重慶市農(nóng)村村民住宅規(guī)劃建設(shè)管理暫行辦法》第簽署意見
1.《重慶市城鄉(xiāng)規(guī)劃條例》第五十八條、五十九條
村(居)民委員會(huì)
1.《就業(yè)服務(wù)與就業(yè)管理規(guī)定》第四十一條、第六十
村(社區(qū))公共就就業(yè)創(chuàng)業(yè)登記申9
請(qǐng)人信息證明 人力社保部門 記載就業(yè)和失業(yè)狀況,申請(qǐng)就業(yè)援助,辦理就業(yè)創(chuàng)業(yè)證
2.《人力資源社會(huì)保障部關(guān)于進(jìn)一步完善就業(yè)失業(yè)登
核實(shí)或提供證明
記管理辦法的通知》第四條 二條、第六十三條
業(yè)服務(wù)機(jī)構(gòu)調(diào)查
村(居)民委員會(huì)
1.《征兵工作條例》第二十一條 政治考核證明 征兵辦公室 對(duì)體格檢查合格的應(yīng)征公民進(jìn)行政治審查
2.《征兵政治考核工作規(guī)定》第二十條
署意見 調(diào)查走訪人員簽