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      dna粗提取與鑒定 (五篇材料)

      時間:2019-05-14 03:19:59下載本文作者:會員上傳
      簡介:寫寫幫文庫小編為你整理了多篇相關(guān)的《dna粗提取與鑒定 》,但愿對你工作學(xué)習(xí)有幫助,當(dāng)然你在寫寫幫文庫還可以找到更多《dna粗提取與鑒定 》。

      第一篇:dna粗提取與鑒定

      dna粗提取與鑒定

      實驗原理

      DNA在氯化鈉溶液中的溶解度,是隨著氧化鈉的濃度的變化而改變的,dna粗提取與鑒定。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為 2 mol/L時,DNA的溶解度最大,濃度為 0.14 mol/L時,DNA的溶解度最低。利用這一原理,可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。

      DNA不溶于95%的酒精溶液,但是細胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理,可以進一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。

      DNA中含有脫氧核糖,能與二苯胺(沸水浴)反應(yīng)生成藍色物質(zhì),因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

      目的要求

      1.學(xué)會DNA的粗提取和鑒定的方法。

      2.觀察提取出來的DNA物質(zhì)的顏色和形狀。

      材料用具

      材料:活雞或鮮血雞血。

      儀器:離心機、恒溫水裕鍋、載玻片,玻璃棒,濾紙,滴管,量簡(100 mL,l個),燒杯(100 mL,l個,50 mL、500 mL各 2個),試管(20 mL,2個),漏斗,試管夾,紗布。

      試劑:酒精的體積分數(shù)為95%的溶液(實驗前置于冰箱內(nèi)冷卻24 h),蒸餾水,檸檬酸鈉的質(zhì)量濃度為 0.1g/mL的溶液,氯化鈉的物質(zhì)的量濃度分別為 2 mol/L和0.015 mol/L的溶液,二苯胺試劑。

      方法步驟

      實驗前需要制備雞血細胞液(由教師完成),制備的方法是:取檸檬酸鈉的質(zhì)量濃度為 0.1 g/mL的溶液(抗凝劑)100 mL,置于500 mL燒杯中。將宰殺活雞流出的雞血(約180 mL)注入燒杯中,同時用玻璃棒攪拌,使血液與檸檬酸鈉溶液充分混合,以免凝血。然后,將血液倒入離心管內(nèi),用 1000 r/min的離心機離,鑒定材料《dna粗提取與鑒定》。2min,此時血細胞沉淀于離心管底部。實驗時,用吸管除去離。心管上部的澄清液,就可以得到雞血細胞液。

      1.提取雞血細胞的細胞核物質(zhì)

      將制備好的雞血細胞液5 mL~10mL,注入到50 mL燒杯中。向燒杯中加入蒸餾水20 mL,同時用玻璃棒充分攪拌5 min,使血細胞加速破裂。然后,用放有紗布的漏斗將血細胞液過濾至500mL。取其濾液。

      2.溶解細胞核內(nèi)的DNA

      將氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為 2 mol的溶液40mL加入到濾液中,并搖動燒杯,使其混合均勻,這時DNA在溶液中呈溶解狀態(tài)。

      3.析出含DNA的粘稠物

      沿?zé)瓋?nèi)壁緩緩加入蒸餾水,同時用玻璃棒不停地輕輕攪拌,這時燒杯中有絲狀物出現(xiàn),注意觀察絲狀物呈什么顏色。繼續(xù)加入蒸餾水,溶液中出現(xiàn)的粘稠物會越來越多。當(dāng)粘稠物不再增加時停止加入蒸餾水(這時溶液中氯化鈉的物質(zhì)的量濃度相當(dāng)于0.14 mol/L)。

      4.濾取含DNA的粘稠物

      用放有多層紗布的漏斗,過濾步驟3中的溶液至 500mL的燒杯中,含 DNA的粘稠物被留在紗布上。

      5.將DNA的粘稠物再溶解

      取 1個 50 mL燒杯,向燒杯內(nèi)注入氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為 2 mol/L的溶液 20mL。用鈍頭鑷子將紗布上的粘稠物夾至氯化鈉溶液中,用玻璃擇不停地攪拌,使粘稠物盡可能多地溶解于溶液中。

      6.過濾含有DNA的氯化鈉溶液

      取1個100 mL燒杯,用放有兩層紗布的漏斗過濾步驟5中的溶液。取其濾液,DNA溶于濾液中。

      7.提取含雜質(zhì)較少的DNA

      在上述濾過的溶液中,加入冷卻的、酒精的體積分數(shù)為 95%的溶液 50mL(使用冷卻的酒精,對DNA的凝集效果較佳),并用玻璃棒攪拌,溶液中會出現(xiàn)含雜質(zhì)較少的絲狀物。用玻璃棒將絲狀物卷起,并用濾紙吸取上面的水分。這種絲狀物的主要成分就是DNA。注意觀察絲狀物是什么顏色的。

      8.DNA的鑒定

      取兩支20 mL的試管,各加入氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.015 mol/L的溶液5 mL,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各加入4mlL的二苯胺試劑?;旌暇鶆蚝?,將試管置于沸水中加熱 5 min,待試管冷卻后,觀察并且比較兩支試管中溶液顏色的變化。將觀察的結(jié)果填寫在《實驗報告冊》上。

      結(jié)論

      步驟8的2支試管中溶液顏色的變化說明了什么?將得出的結(jié)論填寫在《實驗報告冊》上。

      討論

      1.提取雞血中的DNA時,為什么要除去血液中的上清液?

      2.步驟回和步驟3中都需要加入蒸餾水,兩次加入的作用相同嗎?為什么?

      3.DNA的直徑約為20×10-10 m,實驗中出現(xiàn)的絲狀物的粗細是否表示1個DNA分子直徑的大小?

      第二篇:dna粗提取和鑒定

      dna粗提取和鑒定

      實驗用具

      洋蔥或其他植物、洗潔精、食鹽、攪拌機或研缽(我們采用的是家用豆?jié){機)、紗布、漏斗、燒杯、玻璃棒、量筒(10mL一支)、滴管、試管(20mL兩支)、天平,dna粗提取和鑒定。95%酒精、蒸餾水、0.015mol/L的NaCl溶液、二苯胺試劑。

      實驗材料的選取

      凡是含有DNA的生物材料都可以考慮,但是使用DNA含量相對較高的生物組織,成功的可能性更大。

      原理

      ①加入蒸餾水能使雞血細胞破裂

      蒸餾水對于雞血細胞來說是一種低滲液體,水分可以大量進入血細胞內(nèi),使血細胞脹裂,再加上攪拌的機械作用,就加速了雞血細胞的破裂(細胞膜和核膜的破裂),從而釋放出DNA。

      ②加入洗滌劑和食鹽的作用

      洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細胞膜,有利于DNA的釋放;食鹽的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。

      ③研磨不充分,對實驗結(jié)果產(chǎn)生的影響

      研磨不充分會使細胞核內(nèi)的DNA釋放不完全,提取的DNA量變少,影響實驗結(jié)果,導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍色等。

      ④此步驟獲得的濾液中可能含有的細胞成分?

      可能含有核蛋白、多糖和RNA等雜質(zhì)。

      實驗步驟

      1.破碎細胞,獲取含DNA的濾液

      動物細胞的破碎比較容易,以雞血細胞為例,在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可。如果實驗材料是植物細胞,需要先用洗滌劑溶解細胞膜。例如,提取洋

      .蔥的DNA時,在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽,進行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。

      2.去除濾液中的雜質(zhì)

      方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì),不分解DNA;方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同。

      注意事項

      ①用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過反復(fù)溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。

      ②方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性,與DNA分離。

      DNA的析出與鑒定

      將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的DNA,鑒定材料《dna粗提取和鑒定》。用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分。

      取兩支20ml的試管,各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑。混合均勻后,將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變藍。

      實驗步驟

      1.稱取30克已切碎的洋蔥,放入研缽中,加入少量石英砂助研,倒入10mL 2mol/L的氯化鈉溶液,充分研磨。

      洋蔥含有揮發(fā)性刺激物,有效減少刺激,才能使實驗順利進行。上課前,教師可先將洋蔥放入冰箱冷凍一會兒,使其涼透但又不能結(jié)冰;或?qū)⒀笫[切成幾大塊,放入清水泡一會兒,讓其揮發(fā)性刺激物溶于水,可以減輕刺激。然后將洋蔥切碎備用。研磨的目的主要是使洋蔥細胞破裂,使DNA溶于2mol/L的氯化鈉溶液,沒必要將洋蔥研成粥糊狀,后者既浪費時間又影響實驗效果。研磨時,切忌使用攪拌器(榨汁機)。使用攪拌器雖可以提高研磨效率,但攪拌器將洋蔥切成極細小的顆粒,無法通過過濾將洋蔥顆粒剔除。只能將酒精直接倒入濾液中,許多洋蔥小顆粒因為輕會漂浮起來,DNA藏在其中,無法分辨。學(xué)生看不到白色纖維狀粘稠物的DNA。

      2.研磨后,用漏斗和紗布將汁液過濾到小燒杯中,得到濾液。

      3.向濾液中加入95%的酒精溶液20mL,沿?zé)诰従彽谷?,不要震動或攪拌?/p>

      此時,燒杯中的液體分為上、下兩層,下層較渾濁,上層澄清,很快上層溶液中就會有白色纖維狀粘稠物析出,用玻璃棒可將其輕輕卷起。這就是記錄生命遺傳信息的重要物質(zhì)——DNA。DNA析出的過程中,切忌震動和攪拌(不震動易于分層,我們就能很容易觀察到上清液中的絲狀物;攪拌會使非常柔軟的DNA斷裂成小段,不易取出)。如果用玻璃棒DNA不易卷起,可改用表面打毛的牙簽,DNA提取物就纏繞在牙簽上了。

      4.鑒定:取兩支試管,編為1、2號,各加入2mol/L的氯化鈉溶液2mL,向1號試管中加入一些白色纖維狀物,振蕩使其溶解,然后向兩支試管中各加入2mL二苯胺試劑,沸水浴加熱5分鐘。

      注意事項

      1.以血液為實驗材料時,每100ml血液中需要加入3g檸檬酸鈉防止血液凝固。

      2.加入洗滌劑后,動作要輕緩、柔和,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩,以免DNA分子的斷裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。

      3.二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則會影響鑒定的效果。

      4.DNA的溶解度與NaCl溶液濃度的關(guān)系:

      當(dāng)NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時,隨濃度的升高,DNA的溶解度降低;當(dāng)NaCl溶液濃度高于0.14mol/L時,隨濃度升高,DNA的溶解度升高。

      5.盛放雞血細胞液的容器,最好是塑料容器。

      雞血細胞破碎以后釋放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于細胞內(nèi)DNA的含量本來就比較少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就會更少。因此,實驗過程中最好使用塑料的燒杯和試管,這樣可以減少提取過程的DNA的損失。

      第三篇:dna的粗提取與鑒定

      dna的粗提取與鑒定

      實驗十一 DNA的粗提取與鑒定

      教學(xué)目的1、初步掌握DNA的粗提取和鑒定的方法

      2、觀察提取出來的DNA物質(zhì)

      實驗原理

      1、DNA在NaCl溶液中的溶解度,是隨著NaCl的濃度的變化而改變的,dna的粗提取與鑒定。當(dāng)NaCl的物質(zhì)的量濃度為0.14mOl/L時,DNA的溶解度最低。利用這一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。

      2、DNA不溶于酒精溶液,但是細胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理,可以進一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。

      3、DNA遇二苯胺(沸水浴)會染成藍色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

      注意事項

      1、步驟3析出含DNA的黏稠物中,蒸餾水要沿?zé)瓋?nèi)壁緩緩加入,不能一次快速倒入。

      2、實驗中有多個步驟都要用玻璃棒進行攪拌,但是在不同的步驟中玻璃棒的用法不同。

      實驗用具

      雞血細胞液(5~10mL);體積分數(shù)為95%的冷酒精,蒸餾水,質(zhì)量濃度為0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液,物質(zhì)的量濃度分別為2mol/L和0.015mol/L的NaCl溶液,二苯胺試劑;燒杯(100mL,1個,50mL,500mL,各2個),漏斗,試管(20mL,2個),玻璃棒,滴管,量筒(100mL,1個),紗布,鑷子,濾紙,鐵架臺,鐵環(huán),三角架,酒精燈,石棉網(wǎng),載玻片,試管夾。

      課時安排

      一課時

      課前準備

      制備雞血細胞液,方法是:將質(zhì)量濃度為0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液100mL,置于500mL燒懷中,注入新鮮的雞血(約180mL),用玻璃棒攪拌,使其充分混合,以免凝血。靜置于冰箱內(nèi)一天,使血細胞自行沉淀。也可以用離心機離心2 min(轉(zhuǎn)速1000轉(zhuǎn)/分)。用吸管吸去上清液。

      板書

      實驗十一 DNA的粗提取與鑒定

      實驗原理

      1、析出溶解在NaC1溶液中的DNA。

      2、用冷酒精提取出含雜質(zhì)較少的DNA。

      3、DNA在沸水浴時被二苯胺染成藍色。

      方法步驟:

      1、提取雞血細胞的細胞核物質(zhì):順時針方向攪拌,稍快,稍重。5 min2、溶解細胞核內(nèi)的DNA3、析出含DNA的黏稠物:蒸餾水300mL,逆時針方向攪拌,緩慢

      4、過濾:取黏稠物

      5、再溶解:順時針方向攪拌,較慢。3 min6、過濾:取濾液。

      7、提取出含雜質(zhì)較少的DNA,逆時針方向攪拌,稍慢。5 min8、DNA的鑒定:沸水浴5min((1)無變化(2)藍色)

      上節(jié)課我們通過幾個驗證性實驗,證明了DNA是主要的遺傳物質(zhì),自我鑒定《dna的粗提取與鑒定》。那么DNA是什么樣的物質(zhì)呢?今天我們就通過實驗將它提取出來,進行觀察和鑒定。

      通過預(yù)習(xí),我們知道選用雞血細胞液作為實驗材料。在制備雞血細胞液時,所用的檸檬酸鈉有防止血液凝固的作用。

      制備過程中,一定要用剛宰殺的雞的新鮮血,并且要與抗凝劑充分混合,防止凝血。我們采用靜置一天的方法,獲得雞血細胞液。

      大家在動手做實驗之前先要明確幾個需要注意的問題。

      1、要嚴格按照實驗指導(dǎo)的方法步驟去操作。

      2、實驗中有多個步驟都要用玻璃棒進行攪拌,使用時玻璃棒不要碰到燒杯底,在不同的步驟中玻璃棒的用法不同,每一步的用法參照黑板上的指導(dǎo)去操作。

      3、在DNA的鑒定中,所用的二苯胺是一種有毒性的試劑,大家在使用時注意不要讓藥液接觸到皮膚或身體的其他部位,也不要近距離觀察。

      下面在實驗進行過程中,要思考每一操作步驟要達到什么目的。

      在進行步驟1時,利用攪拌的5分鐘,做如下提問:

      為什么要加蒸餾水?加入蒸餾水后細胞將會怎樣?

      (讓細胞內(nèi)溶液的濃度大于周圍溶液的濃度,細胞會吸水以至脹破)

      為什么要用力攪拌?

      (可以加速血細胞和細胞核的破裂)

      所以下一步驟過濾將濾去的是細胞膜和核膜等物質(zhì)。

      在進行步驟3時,要向全班明確:這一步驟是這個實驗成敗的關(guān)鍵,注意加蒸餾水的方法和使用玻璃棒的方法,千萬不能太快太猛,防止打碎DNA。

      觀察濾取出來的黏稠物的顏色。

      有的同學(xué)提取的黏稠物較少,原因可能是在溶解DNA時不充分,也可能是析出黏稠物時攪拌的快了。

      將黏稠物再溶解時一定要充分,多攪拌。以免有DNA損失。

      加入冷酒精時動作要慢。

      當(dāng)玻璃棒上出現(xiàn)絲狀物纏繞時,繼續(xù)慢慢攪拌。至不再增加時,取出吸干上面的水分。仔細觀察絲狀物呈什么顏色?(黃色)

      這些絲狀物要用二苯胺鑒定。使用二苯胺時要注意不要接觸到藥液。進行沸水浴時,在實驗室較為通風(fēng)的地方集體進行。

      利用沸水浴的5 min。

      步驟3中加入蒸餾水的目的?與步驟1有什么區(qū)別?

      (步驟3中加蒸餾水是使NaCl溶液的濃度逐漸降至0.14mol/L,使DNA的黏稠物析出。而步驟1加蒸餾水是為了讓細胞吸水脹破)

      步驟7為什么要加50mL的冷酒精?

      (因為DNA不溶于冷酒精,而其他物質(zhì)可以溶解在酒精中,使含雜質(zhì)較少的DNA絲狀物可以析出。懸浮于溶液中)

      現(xiàn)在大家從水浴鍋中拿出試管,比較兩個試管中溶液的顏色有什么不同?

      (有絲狀物的試管變成藍色,另一試管還是原來顏色)

      這一鑒定結(jié)果說明什么問題?

      (提取出的絲狀物是DNA)

      那么你看到的絲狀物的粗細是不是DNA分子的直徑呢?

      (不是。DNA分子直徑只有2nm。絲狀物是多個DNA分子聚在一起形成的)

      下面請同學(xué)們將實驗用具,按原樣擺放整齊,實驗桌要保持清潔。

      今天我們通過實驗將DNA提取出來進行了觀察和鑒定,那么DNA的化學(xué)組成,分子結(jié)構(gòu)和復(fù)制是怎樣的?我們下節(jié)課再繼續(xù)研究。

      第四篇:dna的粗提取和鑒定

      dna的粗提取和鑒定

      在溶液中,DNA鏈略帶負電荷,而鹽離子可被吸引到DNA的負電荷上,中和這些負電荷,只要控制鹽的濃度,就能夠使DNA片段或者散開,或者聚合在一起,因此,食鹽能保持溶液中的濃度與細胞液相當(dāng),dna的粗提取和鑒定。DNA不溶于酒精,但細胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精。利用這一原理,就可以用酒精萃取DNA。DNA與二苯胺作用生成藍色沉淀,即可觀察到。

      提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。對于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取DNA,去除其他成分。

      DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,利用這一特點,選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達到分離目的。

      此外,DNA不溶

      .于酒精溶液,但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步的分離。

      DNA對酶 高溫和洗滌劑的耐受性

      蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60—80oC的高溫,而DNA在80oC以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解細胞膜,但對DNA沒有影響。

      DNA的鑒定

      在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

      實驗用具

      洋蔥或其他植物、洗潔精、食鹽、攪拌機或研缽(我們采用的是家用豆?jié){機)、紗布、漏斗、燒杯、玻璃棒、量筒(10mL一支)、滴管、試管(20mL兩支)、天平。95%酒精、蒸餾水、0.015mol/L的NaCl溶液、二苯胺試劑。

      實驗材料的選取

      凡是含有DNA的生物材料都可以考慮,但是使用DNA含量相對較高的生物組織,成功的可能性更大,鑒定材料《dna的粗提取和鑒定》。

      原理

      ①加入蒸餾水能使雞血細胞破裂

      蒸餾水對于雞血細胞來說是一種低滲液體,水分可以大量進入血細胞內(nèi),使血細胞脹裂,再加上攪拌的機械作用,就加速了雞血細胞的破裂(細胞膜和核膜的破裂),從而釋放出DNA。

      ②加入洗滌劑和食鹽的作用

      洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細胞膜,有利于DNA的釋放;食鹽的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。

      ③研磨不充分,對實驗結(jié)果產(chǎn)生的影響

      研磨不充分會使細胞核內(nèi)的DNA釋放不完全,提取的DNA量變少,影響實驗結(jié)果,導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍色等。

      ④此步驟獲得的濾液中可能含有的細胞成分?

      可能含有核蛋白、多糖和RNA等雜質(zhì)。

      實驗步驟

      1.破碎細胞,獲取含DNA的濾液

      動物細胞的破碎比較容易,以雞血細胞為例,在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可。如果實驗材料是植物細胞,需要先用洗滌劑溶解細胞膜。例如,提取洋

      .蔥的DNA時,在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽,進行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。

      2.去除濾液中的雜質(zhì)

      方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì),不分解DNA;方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同。

      注意事項

      ①用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過反復(fù)溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。

      ②方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性,與DNA分離。

      DNA的析出與鑒定

      將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分。

      取兩支20ml的試管,各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑。混合均勻后,將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變藍。

      第五篇:DNA粗提取及鑒定教案

      《DNA粗提取及鑒定》

      一、學(xué)習(xí)目標:

      學(xué)生通過對本節(jié)內(nèi)容的探究學(xué)習(xí):能

      ⑴了解DNA的物理化學(xué)性質(zhì)。⑵理解DNA粗提取與鑒定的原理。⑶掌握DNA粗提取及鑒定方法,⑷利用DNA的性質(zhì)進行實驗分析和實驗設(shè)計。

      二、本節(jié)內(nèi)容學(xué)習(xí)的重點:DNA的粗提取和鑒定原理、方法。

      難點:DNA的粗提取和鑒定原理、方法。

      三、自主探究

      (一)(閱讀教材、學(xué)案;探究下列問題)

      1、提取生物大分子的基本思路?

      2、提取DNA的基本思路?

      3、用文字和坐標曲線描述DNA的溶解性;并思考該問題在DNA粗提取中將有何應(yīng)用?

      4、DNA在酒精溶液中的溶解性

      5、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性

      6、如何來進行DNA鑒定

      自主探究

      (二)(閱讀教材、學(xué)案;探究下列問題)

      1、進行DNA粗提取應(yīng)選擇什么樣的材料;你的選擇的理由?

      2、為什么加入蒸餾水能使雞血細胞破裂?

      3、如何破碎植物細胞,并獲取含DNA的濾液;請舉例說明,并告訴自己應(yīng)注意什么?

      自主探究

      (三)(閱讀教材、學(xué)案;探究下列問題)

      去除濾液中的雜質(zhì)

      1、此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細胞成分?

      2、方案一中為什么反復(fù)地溶解與析出DNA,能夠去除雜質(zhì)?

      3、方案二與方案三的原理有什么不同?

      自主探究

      (四)(閱讀教材、學(xué)案;探究下列問題)

      1、DNA析出的原理,DNA析出物是什么顏色?

      2、DNA鑒定需要設(shè)置對照嗎?要注意什么問題? 四:

      討論

      (一)你幫助、我改正;我質(zhì)疑,共提升

      小組內(nèi)討論自主探究內(nèi)容并自行改正

      討論

      (二)你我同思考,細總結(jié),共同突破難點

      小組內(nèi)討論:總結(jié)

      1、本實驗的實驗原理

      2、DNA粗提取與鑒定過程

      3、此實驗過程中有幾次使用蒸餾水?幾次過濾,幾次析出?分別在哪一步?

      五:

      小組間質(zhì)疑,完善 六:課堂小結(jié)

      七:達標檢測;當(dāng)堂掌握 知識拓展:課下思考總結(jié):

      1、在我們的高中生物學(xué)習(xí)中有顏色反應(yīng)的實驗有那些?

      2、DNA在不同濃度氯化鈉溶液中溶解度的變化曲線還能表示那些量的關(guān)系?

      3、還有那些實驗中用到了酒精,他們的作用是?

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