第一篇：分析方法的驗證(精)

分析方法的驗證

分析方法的驗證，就是對藥品分析實驗所采用的分析方法是否完全達到了預(yù)期目的，或證明由分析方法誤差而導(dǎo)致試驗結(jié)果判斷錯誤的概率是否在允許范圍之內(nèi)，而進行的科學(xué)證明。

分析方法的驗證以驗證參數(shù)表示。在制定藥品質(zhì)量標準時，可通過這些參數(shù)證明所建立的分析方法是否適當。本文所述分析方法驗證是指下述情況：藥局方新收載品種質(zhì)量標準的建立；藥局方已收載品種質(zhì)量標準的修訂；根據(jù)藥局方的通則建立替代方法。

定量限界是指樣品中所含的被測物質(zhì)可被進行定量的最小量或最低濃度。定量限界所述樣品測定值的精度，以相對標準偏差表示，一般為10%。2.5.2 評價方法：通常定量限界可以通過空白樣品或被測物定量限界附近的樣品測定值的標準偏差以及定量限界附近的標準曲線的斜率算出。例如，根據(jù)定量限界附近的標準曲線的斜率以及空白樣品測定值的標準偏差，由下式求出定量限界。

DL=10σ/slope

DL：定量限界

σ：空白樣品測定值的標準偏差

slope：定量限界附近標準曲線的斜率

應(yīng)用色譜法時，測定值的標準偏差可以用信噪比代替。分析方法的定量限界應(yīng)比質(zhì)量標準中規(guī)定值要小。2.6 線性關(guān)系

2.6.1 定義：線性關(guān)系是指分析方法能夠得到與被測物質(zhì)的量或濃度具有直線關(guān)系的測定值的能力，必要時，被測物質(zhì)的量或濃度的測定值也可以是從數(shù)學(xué)公式中得到的變換值。

2.6.2 評價方法：準備一系列不同濃度(量)的被測樣品，按照分析方法的操作步驟進行測定，用測定值得到的回歸方程及相關(guān)系數(shù)對線性關(guān)系進行評價。必要時，將測定值由回歸方程算出的殘差對被測物質(zhì)的量(濃度)作圖，不應(yīng)具有某種特定的趨勢。通常，采用5個不同量(濃度)的樣品作線性關(guān)系的研究。2.7 范圍(Range)

2.7.1 定義：分析方法驗證中所述范圍是指具有一定精度和準確度的被測物質(zhì)上限及下限量(濃度)之間的領(lǐng)域。對于上述具有線性關(guān)系的分析方法則指：具有一定精度和準確度，并且使線性關(guān)系成立的被測物質(zhì)上下限量(濃度)之間的領(lǐng)域。

2.7.2 評價方法：分析方法驗證的范圍一般為標準中規(guī)定值的±20%左右，對范圍的上下限值及范圍中央值附近的樣品進行精度、真度及線性的研究討論。

驗證參數(shù)

類型Ⅰ

類型Ⅱ

類型Ⅲ

定量試驗 限度試驗 準確度+ 精密度 并行精度+ 室內(nèi)再現(xiàn)精度-* 室間再現(xiàn)精度+* 專屬性 + + + + 檢出限界定量限界-直線性+ 范圍

+

+

注：-：一般不需要；+：需要；*：視情況而定。室內(nèi)或室間再現(xiàn)精度選擇其一進行評價，日本藥局方通常選擇后者進行評價。

類型Ⅰ需做鑒別試驗，即對藥品中的主要成分及其特征進行鑒別。類型Ⅱ需做檢查試驗，即對藥品中的雜質(zhì)或不純物的量進行測定。類型Ⅲ需做含量測定和溶出度試驗，即對藥品中的成分進行測定(成分包括穩(wěn)定劑、添加劑等)和藥品有效性試驗。分析方法驗證用語

4.1 適應(yīng)性/牢固性(Robustness)指故意將分析條件在小范圍內(nèi)變化時，測定值不受影響的能力。例如，反應(yīng)的pH值、溫度、室間及試藥的量等分析條件在適當?shù)姆秶鷥?nèi)改變時，對測定值的穩(wěn)定性進行研究討論。測定值對于分析條件不穩(wěn)定時，應(yīng)對方法加以改進。適應(yīng)性的研究結(jié)果在分析方法中以表示分析條件的有效數(shù)字或注意事項的形式得以體現(xiàn)。

4.2 實驗室 指試驗進行的場所、設(shè)施。分析方法驗證中所述改變實驗室是指試驗者、裝置以及試藥的批號等試驗條件發(fā)生變化。

4.3 試驗法 指藥局方中的試驗方法，例如鑒別試驗、檢查試驗等。試驗方法應(yīng)包括樣品的制備、規(guī)定值、分析方法等。

4.4 生產(chǎn)者危險率 指合格的制品由于試驗原因而錯判為不合格制品的發(fā)生概率。一般以α表示，也叫第一過失率，也就是在限度試驗中所說的假陽性率。4.5 消費者危險率 指不合格的制品由于試驗原因而錯判為合格制品的發(fā)生概率。一般以β表示，也叫第二過失率，也就是在限度試驗中所說的假陰性率。4.6 測定次數(shù) 指分析方法操作程序中規(guī)定的次數(shù)，為了提高分析方法的精度，有些試驗明確規(guī)定試驗次數(shù)在2次以上，分析方法驗證是對包括分析方法所規(guī)定的測定次數(shù)在內(nèi)的分析方法的評價。它與為了提高分析方法的精度進行重復(fù)分析時的重復(fù)次數(shù)不同。

4.7 測定值 一次分析所得到的一個數(shù)值。

第二篇：藥品質(zhì)量標準分析方法驗證

藥品質(zhì)量標準分析方法驗證

一、目的：證明所采用的分析方法適合于相應(yīng)的檢測要求。

二、用途

（一）藥品質(zhì)量標準起草時，分析方法需經(jīng)驗證。

（二）藥物生產(chǎn)方法變更、制劑的組分變更、原分析方法進行修訂時，分析方法需經(jīng)驗證。

三、需驗證的分析項目

1.鑒別試驗；

2.雜質(zhì)定量或限度檢查；

3.原料或制劑中有效成分含量測定；

4.制劑中其它成分（降解產(chǎn)物、防腐劑等）的測定；

5.溶出度、釋放度等功能檢查中的溶出量等的測試方法

四、驗證內(nèi)容

準確度、精密度（重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性

（一）線性（Linearity）

在設(shè)計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。

?方法：應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測定線性關(guān)系。可用一貯備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列不同濃度標準溶液的方法進行測定（n≥5）。以測得的響應(yīng)信號作為被測物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進行線性回歸。

?數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖

UV法：吸光度A一般在0.2～0.8，濃度點n＝5。用濃度c對A作線性回歸處理，得一直線方程，r應(yīng)達到0.9999(n＝5)，方程的截距應(yīng)近于零。

HPLC法: 用精制品配制一系列標準溶液，濃度點n應(yīng)為5～7，用濃度c對峰高h或被測物的響應(yīng)值(峰面積A)之比進行回歸處理，建立回歸方程，r應(yīng)大于0.999，截距應(yīng)趨于零。

（二）準確度（accuracy）

準確度是指用該方法測定的結(jié)果與真實值接近的程度，用百分回收率表示。

測定回收率R（recovery）的具體方法可采用“回收試驗法”和“加樣回收試驗法”。回收試驗：空白+已知量的對照品（或標準品）測定，測定值為M

回收率R?測定平均值?空白?100% 加入量

加樣回收試驗 ： 已準確測定藥物含量P的真實樣品+已知量A的對照品（或標準品）測定，測定值為MR?M?P?100% A

數(shù)據(jù)要求：可向制劑中加入已知量的被測物對照品進行測定規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果評價，如制備高、中、低三個不同濃度樣品各測三次。

（三）精密度（precision）

精密度是指在規(guī)定條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。用偏差（d）、標準偏差(SD)、相對標準偏差(RSD)表示。

相對標準偏差（RSD），也稱變異系數(shù)（CV）

RSD?S?100%S?2??x??i

n?

11.重復(fù)性(repeatability):

在相同條件下，由同一個分析人員測定所得結(jié)果的精密度；在規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果評價，如制備三個不同濃度樣品各測三次或把被測物濃度當作100%，至少測6次進行評價。

2.中間精密度同一實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設(shè)備所得結(jié)果的精密度。

3.重現(xiàn)性(reproducibility)不同實驗室，不同分析人員測定結(jié)果的精密度。

數(shù)據(jù)要求：需報告RD，RSD和可信限。

（四）檢測限（LOD）

檢測限系指試樣在確定的實驗條件下，被測物能被檢測出的最低濃度或含量。是限度檢驗效能指標，無需定量測定，只要指出高于或低于該規(guī)定濃度即可。

1．非儀器分析目視法

用已知濃度的被測物，試驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。

2．信噪比法

用于能顯示基線噪音的分析方法（儀器分析方法），是把已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進行比較，算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。一般以信噪比（S/N）3∶1或2∶1時的相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測限。

（1）空白值＝0時；①測定背景10次以上，求出標準差S空。②將S空乘以三倍；③在工作曲線上求出3 S空相對應(yīng)的濃度X；即為方法的檢出值；

（2）空白值不等于0；①測定背景10次以上，求出標準差S空；②在工作曲線上求出3 S空 相對應(yīng)的濃度X； ③ 將求得的對應(yīng)濃度值加上空白值即得該方法的檢出限。

（五）定量限（LOQ）

指樣品中被測物能被定量測定的最低量，結(jié)果應(yīng)具有一定準確度和精密度要求。

常用信噪比法確定定量限，一般以信噪比（S/N）為10∶1時相應(yīng)的濃度或注入儀器的量進行確定，也可按1984年國際純粹和應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(IVPAC)規(guī)定：用儀器所測空白背景響應(yīng)標準差（SD）的10倍為估計值，再經(jīng)試驗確定方法的實際測定下限。

儀器分析：通過測定一組空的樣品的背景信號后計算標準差S。以1OS來估算定量限度。（以定量限度制備的樣品來驗證）

非儀器分析：通過分析己知被測物濃度的樣品并確定一個樣品中被測物可被準確和精密測定出的最低濃度（量）。

（六）耐用性

指測定條件稍有變動時，結(jié)果不受影響的承受程度，為常規(guī)檢驗提供依據(jù)。是衡量在正常情況下實驗結(jié)果重現(xiàn)性的尺度。

分析方法重現(xiàn)性的測定是通過在不同的實驗室內(nèi)不同的實驗者對同一樣品的分別測試而獲得的。（獲得的這種再與正常檢定下的精密度進行比較，從而確定該法的耐用性）

（七）專屬性

（八）范圍

?典型的變動因素有：被測溶液的穩(wěn)定性，樣品提取次數(shù)、時間等。

?液相色譜法中典型的變動因素有：流動相的組成和pH值，不同廠牌或不同批號的同類色譜柱，柱溫，流速等。

?氣相色譜法變動因素有：不同廠牌或批號的色譜柱、固定相，不同類型的擔體、柱溫，進樣口和檢測器溫度等。

經(jīng)試驗，應(yīng)說明小的變動能否通過設(shè)計的系統(tǒng)適用性試驗，以確保方法有效。

含量測定需進行的方法學(xué)驗證項目：準確度、精密度、專屬性、線性、范圍、耐用性

五、各種含量測定方法對效能指標的要求

1.容量分析法：用原料藥精制品(含量>99.5％)或?qū)φ掌房疾旆椒ǖ木芏?，相對標準差一般?yīng)不大于0.2％；進行回收率試驗?；厥章室话阍?9.7～100.3％之間。

2.UV法：用適當濃度的精制品進行測定，其RSD一般不大于應(yīng)在98％～102％之間。

3.HPLC法：要求

第三篇：JP13分析方法的驗證

JP13分析方法的驗證

JP13分析方法的驗證

分析方法的驗證，就是對藥品分析實驗所采用的分析方法是否完全達到了預(yù)期目的，或證明由分析方法誤差而導(dǎo)致試驗結(jié)果判斷錯誤的概率是否在允許范圍之內(nèi)，而進行的科學(xué)證明。

分析方法的驗證以驗證參數(shù)表示。在制定藥品質(zhì)量標準時，可通過這些參數(shù)證明所建立的分析方法是否適當。本文所述分析方法驗證是指下述情況：藥局方新收載品種質(zhì)量標準的建立；藥局方已收載品種質(zhì)量標準的修訂；根據(jù)藥局方的通則建立替代方法。

1、日本藥局方收載分析方法所需資料

1.1 概要 對分析方法作簡要說明，包括所采用分析方法的必要性，特點與優(yōu)點及有關(guān)驗證的要點。如系分析方法的修訂，則需闡明新方法與原方法的區(qū)別以及新方法的優(yōu)勢。

1.2 分析方法 本項記載的有關(guān)分析方法的內(nèi)容要足以能對分析方法進行評價，并且必要時可用復(fù)核試驗進行評價。分析方法主要記載內(nèi)容包括：分析的步驟、標準品及樣品的制備方法、試劑與試藥的調(diào)配、注意事項、分析系統(tǒng)是否正常運轉(zhuǎn)的檢驗證明方法(例如高效液相色譜法中的分離效率的研究)、分析結(jié)果的計算公式、測定次數(shù)等。并且，如果使用了藥局方以外的裝置，還需詳述有關(guān)內(nèi)容；如果使用了新的標準品，則必須提供其物理、化學(xué)及生物學(xué)特征數(shù)據(jù)，并提供其質(zhì)量標準。

1.3 有關(guān)分析方法驗證的資料 本項應(yīng)包括求導(dǎo)各驗證參數(shù)的試驗設(shè)計、試驗數(shù)據(jù)、計算結(jié)果及檢定結(jié)果等。

2、驗證參數(shù)(validationcharacterisitics)

分析方法適當與否可通過驗證參數(shù)進行評價，下面列舉了最典型的分析方法驗證參數(shù)的定義及其評價方法。

驗證參數(shù)的有關(guān)術(shù)語及定義因分析方法的應(yīng)用領(lǐng)域不同而不同，本文所使用的術(shù)語及定義僅限于日本藥局方。評價方法項下所述內(nèi)容也僅為簡要概述。確定驗證參數(shù)的方法很多，采用何種方法沒有具體限制。但是，驗證參數(shù)的限值常因確定方法的不同而發(fā)生變化。故此，確定驗證參數(shù)的實驗方法、實驗數(shù)據(jù)、計算方法等應(yīng)盡可能詳細地記述。

本文分析方法驗證中未包括驗證參數(shù)適應(yīng)性/牢固性(Robustness)的討論，這是由于牢固性的研究主要在分析方法的開發(fā)設(shè)計階段進行，其研究結(jié)果可以在方法的分析條件或注意事項中得到體現(xiàn)。

2.1 真度/準確度(Accuracy/Trueness)

2.1.1 定義：所謂準確度，指分析方法所得測定值的偏離程度，通常以測定值的總平均值與真值之間的差來表示。

2.1.2 評價方法：準確度一般以測定室內(nèi)重現(xiàn)精度或室間再現(xiàn)精度時所得總平均值與真值的差表示。真值一般使用理論值(如滴定法)，如果理論值不存在或即使存在但很難求出的情況下，可采用經(jīng)過確證或認可的數(shù)值來代替(如制劑分析常以原料藥的測定值作為真值)。分析方法的專屬性強，可以推斷其分析方法的誤差就小。由推出的真值與室內(nèi)(室間)再現(xiàn)精度的標準偏差即可計算出真值的95%置信區(qū)間，并可判斷這個區(qū)間是否包括0點，或區(qū)間的上下限值是否在分析方法

1所要求的精度范圍之內(nèi)。

2.2 精密度(Precision)

2.2.1 定義：精密度是指從均勻樣品中抽取的復(fù)數(shù)個供試品進行重復(fù)分析測定時，所得到的一系列測定數(shù)據(jù)彼此之間的一致程度。測定值的誤差以偏差、標準偏差、或相對標準偏差的形式表示。精度根據(jù)重復(fù)實驗的條件不同以三個水平表示，分別稱為：并行精度、室內(nèi)再現(xiàn)精度、室間再現(xiàn)精度。

并行精度(Repeatability/Intra-assayprecision)：指實驗室、實驗者、實驗日期、裝置、器具以及試藥的批號等實驗條件均未改變的情況下，從均勻樣品中抽取的復(fù)數(shù)個供試品短時間內(nèi)進行重復(fù)分析測定時(并行條件)的精度。

室內(nèi)再現(xiàn)精度(Intermediateprecision)：指同一實驗室內(nèi)，實驗者、實驗日期、裝置、器具以及試藥的批號等實驗條件一部分或全部改變的情況下，從均勻樣品中抽取的復(fù)數(shù)個供試品進行重復(fù)分析測定時(室內(nèi)再現(xiàn)條件)的精度。

室間再現(xiàn)精度(Reproducibility)：指在不同實驗室間，從均勻樣品中抽取的多個供試品進行重復(fù)分析測定時(室間再現(xiàn)條件)的精度。

2.2.2 評價方法：首先，要保證精度研究所用樣品的數(shù)量和均勻性。溶液應(yīng)為均勻性樣品，在得不到均勻性樣品時，通常將大量制劑粉碎混合至認為均勻或制劑的各組分混合至認為均勻的樣品作為均勻性樣品使用。如果同時做兩個水平以上的精度評價時，可以采用諸如單因素方差分析等實驗方法，但為了正確得出分析方法的精度，必須有足夠的實驗次數(shù)、分析條件的水平數(shù)及實驗室數(shù)。并且要對可預(yù)想到的致使分析發(fā)生變化的要因進行研究。各水平的精度以偏差、標準偏差、相對標準偏差、偏差的90%置信區(qū)間以及與其相對應(yīng)的標準偏差的區(qū)間來表示。將其與分析方法所要求精度的標準值進行對照，以確定分析方法是否可行。通常是以室內(nèi)(間)的再現(xiàn)精度作為方法取舍的依據(jù)。

2.3 專屬性/特異性(Specificity)

2.3.1 定義：專屬性指分析樣品中有共存物質(zhì)的情況下，對被測物質(zhì)進行正確測定的能力，即表示分析方法的識別能力。如果分析方法的專屬性有個別缺陷，可以用其他方法加以補充。

2.3.2 評價方法：確證分析方法是否達到試驗?zāi)康?，確實能夠?qū)Ρ粶y物質(zhì)進行鑒別或定量。例如，分析方法的專屬性可以通過比較A為僅含被測物質(zhì)樣品(陽性對照)；B為含有制劑的其他各組成成分及不純物或分解產(chǎn)物中添加被測物質(zhì)的樣品；C為不含被測物質(zhì)，僅含制劑的其他組分、不純物及分解產(chǎn)物的樣品(陰性對照)，根據(jù)A、B、C三種樣品的分析結(jié)果進行評價。如果不純物不易得到時，可以用含有不純物的樣品(如經(jīng)時發(fā)生變化的樣品)替代。

2.4 檢出限界(Detection Limit)

2.4.1 定義：檢出限界是指樣品中所含的被測物質(zhì)可被檢出的最低量或濃度。在檢出限界內(nèi)并不意味著一定就能夠進行定量。

2.4.2 評價方法：通常以消費者危險率及生產(chǎn)者危險率在5%以下來規(guī)定檢出限界。檢出限界可以通過空白樣品或檢出限界附近的樣品測定值的標準偏差以及檢出限界附近的標準曲線的斜率算出。例如，根據(jù)檢出限界附近的標準曲線的斜率以及空白樣品測定值的標準偏差，由下式求出檢出限界。

DL=3.3σ/slope

DL：檢出限界

σ：空白樣品測定值的標準偏差

slope：檢出限界附近標準曲線的斜率

應(yīng)用色譜法時，測定值的標準偏差可以用信噪比代替。分析方法的檢出限界應(yīng)比質(zhì)量標準中規(guī)定值要小。

2.5 定量限界(Quantitation Limit)

2.5.1 定義：定量限界是指樣品中所含的被測物質(zhì)可被進行定量的最小量或最低濃度。定量限界所述樣品測定值的精度，以相對標準偏差表示，一般為10%。

2.5.2 評價方法：通常定量限界可以通過空白樣品或被測物定量限界附近的樣品測定值的標準偏差以及定量限界附近的標準曲線的斜率算出。例如，根據(jù)定量限界附近的標準曲線的斜率以及空白樣品測定值的標準偏差，由下式求出定量限界。

DL=10σ/slope

DL：定量限界

σ：空白樣品測定值的標準偏差

slope：定量限界附近標準曲線的斜率

應(yīng)用色譜法時，測定值的標準偏差可以用信噪比代替。分析方法的定量限界應(yīng)比質(zhì)量標準中規(guī)定值要小。

2.6 線性關(guān)系

2.6.1 定義：線性關(guān)系是指分析方法能夠得到與被測物質(zhì)的量或濃度具有直線關(guān)系的測定值的能力，必要時，被測物質(zhì)的量或濃度的測定值也可以是從數(shù)學(xué)公式中得到的變換值。

2.6.2 評價方法：準備一系列不同濃度(量)的被測樣品，按照分析方法的操作步驟進行測定，用測定值得到的回歸方程及相關(guān)系數(shù)對線性關(guān)系進行評價。必要時，將測定值由回歸方程算出的殘差對被測物質(zhì)的量(濃度)作圖，不應(yīng)具有某種特定的趨勢。通常，采用5個不同量(濃度)的樣品作線性關(guān)系的研究。

2.7 范圍(Range)

2.7.1 定義：分析方法驗證中所述范圍是指具有一定精度和準確度的被測物質(zhì)上限及下限量(濃度)之間的領(lǐng)域。對于上述具有線性關(guān)系的分析方法則指：具有一定精度和準確度，并且使線性關(guān)系成立的被測物質(zhì)上下限量(濃度)之間的領(lǐng)域。

2.7.2 評價方法：分析方法驗證的范圍一般為標準中規(guī)定值的±20%左右，對范圍的上下限值及范圍中央值附近的樣品進行精度、真度及線性的研究討論。

3、試驗分析方法的分類

根據(jù)試驗?zāi)康?，試驗方法主要可以分為以?種類型，各類型分析試驗方法的驗證所要求的驗證參數(shù)見表1。應(yīng)該指出，這僅是一個原則，評價分析方法所必需的驗證參數(shù)將隨分析方法的特點及試驗?zāi)康亩淖儭?/p>

表1 試驗類型與所要求的驗證參數(shù)

其一進行評價，日本藥局方通常選擇后者進行評價。

類型Ⅰ需做鑒別試驗，即對藥品中的主要成分及其特征進行鑒別。類型Ⅱ需做檢查試驗，即對藥品中的雜質(zhì)或不純物的量進行測定。類型Ⅲ需做含量測定和溶出度試驗，即對藥品中的成分進行測定(成分包括穩(wěn)定劑、添加劑等)和藥品有效性試驗。

4、分析方法驗證用語

4.1 適應(yīng)性/牢固性(Robustness)指故意將分析條件在小范圍內(nèi)變化時，測定值不受影響的能力。例如，反應(yīng)的pH值、溫度、室間及試藥的量等分析條件在適當?shù)姆秶鷥?nèi)改變時，對測定值的穩(wěn)定性進行研究討論。測定值對于分析條件不穩(wěn)定時，應(yīng)對方法加以改進。適應(yīng)性的研究結(jié)果在分析方法中以表示分析條件的有效數(shù)字或注意事項的形式得以體現(xiàn)。

4.2 實驗室 指試驗進行的場所、設(shè)施。分析方法驗證中所述改變實驗室是指試驗者、裝置以及試藥的批號等試驗條件發(fā)生變化。

4.3 試驗法 指藥局方中的試驗方法，例如鑒別試驗、檢查試驗等。試驗方法應(yīng)包括樣品的制備、規(guī)定值、分析方法等。

4.4 生產(chǎn)者危險率 指合格的制品由于試驗原因而錯判為不合格制品的發(fā)生概率。一般以α表示，也叫第一過失率，也就是在限度試驗中所說的假陽性率。

4.5 消費者危險率 指不合格的制品由于試驗原因而錯判為合格制品的發(fā)生概率。一般以β表示，也叫第二過失率，也就是在限度試驗中所說的假陰性率。

4.6 測定次數(shù) 指分析方法操作程序中規(guī)定的次數(shù)，為了提高分析方法的精度，有些試驗明確規(guī)定試驗次數(shù)在2次以上，分析方法驗證是對包括分析方法所規(guī)定的測定次數(shù)在內(nèi)的分析方法的評價。它與為了提高分析方法的精度進行重復(fù)分析時的重復(fù)次數(shù)不同。

4.7 測定值 一次分析所得到的一個數(shù)值。

本文譯自第13版日本藥局方附錄參考資料3所載內(nèi)容。

第四篇：藥品質(zhì)量分析方法驗證CN

藥品質(zhì)量標準分析方法驗證

藥品質(zhì)量標準分析方法驗證

藥品質(zhì)量標準分析方法驗證的目的是證明采用的方法適合于相應(yīng)檢測要求。在起草藥品質(zhì)量標準時，分析方法需經(jīng)驗證；在藥物生產(chǎn)方法變更、制劑的組分變更、原分析方法進行修訂時、則質(zhì)量標準分析方法也需進行驗證。方法驗證過程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品標準起草或修訂說明中。需驗證的分析項目有：鑒別試驗，雜質(zhì)定量或限度檢查，原料藥或制劑中有效成分含量測定，以及制劑中其他成分(如降解產(chǎn)物、防腐劑等)的測定。藥品溶出度、釋放度等功能檢查中，其溶出量等測試方法也應(yīng)作必要驗證。驗證內(nèi)容有：準確度、精密度(包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性)、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性。視具體方法擬訂驗證的內(nèi)容。附表中列出的分析項目和相應(yīng)的驗證內(nèi)容可供參考。方法驗證內(nèi)容如下。

一、準確度

準確度系指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一般以回收率(％)表示。準確度應(yīng)在規(guī) 定的范圍內(nèi)建立。

1．含量測定方法的準確度

原料藥可用已知純度的對照品或樣品進行測定，或用本法所得結(jié)果與已建立準確度的另一方法測定的 結(jié)果進行比較。制劑可用含已知量被測物的各組分混合物進行測定。如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測物進行測定，或與另一個已建立準確度的方法比較結(jié)果。如該法已建立了精密度、線性和專屬性，準確度有時也能推算出來，不必再做。

2．雜質(zhì)定量測定的準確度

可向原料藥或制劑中加入已知量雜質(zhì)進行測定。如果不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法測定結(jié)果與另一成熟的方法進行比較，如藥典標準方法或經(jīng)過驗證的方法。如不能測得雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的相對響應(yīng)因子，則可用原料藥的響應(yīng)因子。應(yīng)明確證明單個雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當于主成分的重量比(％)，或是面積比(％)。

3．數(shù)據(jù)要求

在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果進行評價，例如制備3個不同濃度的樣品，各測定3次。應(yīng)報告已知加入量的回收率(％)，或測定結(jié)果平均值與真實值之差及其可信限。

二、精密度

精密度系指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標準偏差或相對標準偏差表示。在相同條件下，由一個分析人員測定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù)性；在同一個實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設(shè)備測定結(jié)果的精密度，稱為中間精密度；在不同實驗室由不同分析人員測定結(jié)果的精密度，稱為重現(xiàn)性。含量測定和雜質(zhì)定量測定應(yīng)考慮方法的精密度。

1．重復(fù)性在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果進行評價，如制備3個不同濃度的樣品，各測定3次，或把被測物濃度當作100％，用至少測定6次的結(jié)果進行評價。

2．中間精密度為考察隨機變動因素對精密度的影響，應(yīng)設(shè)計方案進行中間精密度試驗。變動因素為不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備。

3．重現(xiàn)性當分析方法將被法定標準采用時，應(yīng)進行重現(xiàn)性試驗。如建立藥典分析方法時通過協(xié)同檢驗得出重現(xiàn)性結(jié)果，協(xié)同檢驗的過程、重現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說明中。

4．數(shù)據(jù)要求均應(yīng)報告標準偏差、相對標準偏差和可信限。

三、專屬性

專屬性系指在其他成分(如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等)可能存在下，采用的方法能準確測定出被測物的特性。鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查、含量測定方法，均應(yīng)考察其專屬性。如方法不夠?qū)?，?yīng)采用多個方法予以補充。

1．鑒別反應(yīng)

應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分。不含被測成分的樣品，以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合 1

物，均應(yīng)呈負反應(yīng)。

2．含量測定和雜質(zhì)測定

色譜法和其他分離方法，應(yīng)附代表性圖譜，以說明專屬性。圖中應(yīng)標明諸成分的位置，色譜法中的分離度應(yīng)符合要求。在雜質(zhì)可獲得的情況下，對于含量測定，試樣中可加入雜質(zhì)或輔料，考察測定結(jié)果是否受干擾，并可與未加雜質(zhì)和輔料的試樣比較測定結(jié)果。對于雜質(zhì)測定，也可向試樣中加入一定量的雜質(zhì)，考察雜質(zhì)能否得到分離。在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣進行測定，與另一個經(jīng)驗證了的或藥典方法比較結(jié)果。用強光照射，高溫，高濕，酸、堿水解，或氧化的方法進行加速破壞，以研究降解產(chǎn)物。含量測定方法應(yīng)比對二法的結(jié)果，雜質(zhì)測定應(yīng)比對檢出的雜質(zhì)個數(shù)，必要時可采用光二極管陣列檢測和質(zhì)譜檢測，進行純度檢查。

四、檢測限

檢測限系指試樣中被測物能被檢測出的最低量。常用的方法如下。

1．非儀器分析目視法用已知濃度的被測物，試驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。

2．信噪比法

用于能顯示基線噪音的分析方法，即把已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進行比較，算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。一般以信噪比為3:1或2:1時相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測限。

3．數(shù)據(jù)要求應(yīng)附測試圖譜，說明測試過程和檢測限結(jié)果。

五、定量限

定量限系指樣品中被測物能被定量測定的最低量，其測定結(jié)果應(yīng)具一定準確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測定方法研究時，應(yīng)確定定量限。常用信噪比法確定定量限。一般以信噪比為10:1時相應(yīng)的濃度或注入儀器的量進行確定。

六、線性

線性系指在設(shè)計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測定線性關(guān)系?？捎靡毁A備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列供試樣品的方法進行測定，至少制備5份供試樣品。以測得的響應(yīng)信號作為被測物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進行線性回歸。必要時，響應(yīng)信號可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進行線性回歸計算。數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。

七、范圍

范圍系指能達到一定精密度、準確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準確度、精密度結(jié)果和要求確定。原料藥和制劑含量測定，范圍應(yīng)為測試濃度的80％～120％；制劑含量均勻度檢查，范圍應(yīng)為測試濃度的70％～130％，根據(jù)劑型特點，如氣霧劑、噴霧劑，范圍可適當放寬，溶出度或釋放度中的溶出量測定，范圍應(yīng)為限度的±20％；如規(guī)定限度范圍，則應(yīng)為下限的-20％至上限的+20％；雜質(zhì)測定，研究時，范圍應(yīng)根據(jù)初步實測，擬訂出規(guī)定限度的±20％。如果含量測定與雜質(zhì)檢查同時測定，用百分歸一化法，則線性范圍應(yīng)為雜質(zhì)規(guī)定限度的-20％至含量限度（或上限）的+20％。

附表 檢驗項目和驗證內(nèi)容

內(nèi)容 項目 鑒別 雜質(zhì)測定 含量測定及溶出量測定

定量 限度

準確度 － ＋ － ＋

精密度－ － － ＋

重復(fù)性 － ＋ － ＋

中間精密度 － ＋① － ＋①

專屬性② ＋ ＋ ＋ ＋

檢測限 － －③ ＋ －

定量限 － ＋ － －

線性 － ＋ － ＋

范圍 － ＋ － ＋

耐用性 ＋ ＋ ＋ ＋

①已有重現(xiàn)性驗證，不需驗證中間精密度。②如一種方法不夠?qū)?，可用其他分析方法予以補充。③視具體情況予以驗證。

八、耐用性

耐用性系指在測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度，為常規(guī)檢查提供依據(jù)。開始研究分析方法時，就應(yīng)考慮其耐用性。如果測試條件要求苛刻，則應(yīng)在方法中寫明。典型的變動`因素有：被測溶液的穩(wěn)定性，樣品提取次數(shù)、`時間等。液相色譜法中典型的變動因素有：流動相的組成和pH值，不同廠牌或不同批號的同類色譜柱，柱溫，流速等。氣相色譜法變動因素有：不同廠牌或批號的色譜柱、固定相，不同類型的擔體、柱溫，進樣口和檢測器溫度等。經(jīng)試驗，應(yīng)說明小的變動能否通過設(shè)計的系統(tǒng)適用性試驗，以確保方法有效。

第五篇：分析方法驗證或確認內(nèi)容

分析方法驗證內(nèi)容確定

（1）化學(xué)（儀器）分析方法驗證內(nèi)容可按下表確定

（2）化學(xué)（儀器）分析方法確認內(nèi)容可由兩名檢驗人員分別對同一批產(chǎn)品進

行檢驗（如可能，使用不同的儀器），比較兩人的檢測結(jié)果來證明方法在本實驗室（人員、分析儀器、試劑等）的適用性，也可根據(jù)確認目的和評估結(jié)果選擇相關(guān)內(nèi)容進行確認。

（1）生物分析方法驗證內(nèi)容可按下表確定

注：“是”代表該項內(nèi)容需要驗證，“否”代表該項內(nèi)容不需要驗證。（2）生物分析方法如需確認，則根據(jù)確認目的和評估結(jié)果選擇相關(guān)Ⅱ內(nèi)容進

行確認。

微生物分析方法驗證內(nèi)容確定

（1）若為藥典或其他法規(guī)的方法，驗證時按藥典的規(guī)定進行驗證（2）若為藥典或其他法規(guī)的替代方法，則需按下表進行驗證

注：“是”代表該項內(nèi)容需要驗證，“否”代表該項內(nèi)容不需要驗證。