第一篇：無菌檢查方法的驗(yàn)證

無菌檢查方法的驗(yàn)證

無菌檢查方法是為了檢查藥典要求無菌的制劑及其他制品是否無菌而建立的試驗(yàn)方法，是作為無菌產(chǎn)品批放行的重要依據(jù)及藥監(jiān)部門對(duì)無菌產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)管的一個(gè)重要項(xiàng)目。因此如何確保無菌檢查方法的準(zhǔn)確可靠至關(guān)重要，而檢查方法的驗(yàn)證是保證檢查結(jié)果的公正、科學(xué)和準(zhǔn)確的基礎(chǔ)，因此各個(gè)主要國(guó)家的GMP或藥典都對(duì)無菌檢查方法的驗(yàn)證提出了嚴(yán)格的要求，2010版中國(guó)藥典對(duì)分析方法驗(yàn)證和檢查的要求也有大幅度的提高，同時(shí)也是GMP檢查中檢查的重點(diǎn)和容易發(fā)現(xiàn)問題的區(qū)域。

驗(yàn)證要求與方法

無菌檢查方法驗(yàn)證一般分為前驗(yàn)證和再驗(yàn)證兩種。

前驗(yàn)證，也稱預(yù)驗(yàn)證，指在無菌分析方法正式使用前，按照預(yù)定驗(yàn)證方案進(jìn)行的驗(yàn)證。如果沒有充分的理由，任何檢查方法必須進(jìn)行前驗(yàn)證。

再驗(yàn)證，指某一檢查方法經(jīng)過驗(yàn)證并在使用一段時(shí)間后進(jìn)行的，旨在證實(shí)已驗(yàn)證狀態(tài)沒有發(fā)生飄移而進(jìn)行的重新驗(yàn)證及對(duì)檢查方法進(jìn)行修訂、改變時(shí)進(jìn)行的驗(yàn)證。

通常一個(gè)無菌產(chǎn)品的檢查流程為：首先基于產(chǎn)品的劑型、溶解度等性質(zhì)，按照藥典的要求確定是否需要進(jìn)行前處理;然后根據(jù)產(chǎn)品的特性是否有抑菌性，確定是否需要增加去除產(chǎn)品抑菌性的方法;最后驗(yàn)證整個(gè)檢查方法中用到的一切及試驗(yàn)過程中的每一個(gè)環(huán)節(jié)包括樣品的預(yù)處理方式、檢查過程、培養(yǎng)條件等均不影響樣品中微生物的生長(zhǎng)。

這里，驗(yàn)證的重點(diǎn)環(huán)節(jié)包括：

前處理方法直接影響后續(xù)步驟的效果和重現(xiàn)性，應(yīng)是驗(yàn)證的重點(diǎn)。

供試品中抑菌活性的去除是當(dāng)前驗(yàn)證工作的重點(diǎn)，尤其強(qiáng)調(diào)應(yīng)充分驗(yàn)證供試品本身對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響。

具體的驗(yàn)證方法如下：

菌種的選擇

無菌檢查方法驗(yàn)證中通常選擇以下6種試驗(yàn)中常用的控制菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，它們分別代表不同類型的菌種：枯草芽孢桿菌 [CMCC(B)63 501]代表藥品中常見的污染菌——芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌 [CMCC(B)26 003]代表革蘭陽性菌、生孢梭菌 [CMCC(B)64 941]代表厭氧菌、大腸埃希菌 [CMCC(B)44 102]代表革蘭陰性菌、白色念珠菌 [CMCC(F)98 001]代表酵母菌、黑曲霉菌 [CMCC(F)98 003]代表霉菌。

菌液的制備

接種金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中或營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，接種生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中，30~35 ℃培養(yǎng)18~24h;接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中或改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基上，23~28℃培養(yǎng)24~48h，上述培養(yǎng)物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)小于100cfu的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，23~28 ℃培養(yǎng)5~7天，加入3~5ml含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，采用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數(shù)小于100cfu的孢子懸液。

樣品的前處理

無菌產(chǎn)品中每個(gè)成分應(yīng)該是均勻的，因此只要確定在驗(yàn)證的方法中，按所需的總接種量即可，而不必像樣品日常檢測(cè)中按規(guī)定的容器數(shù)取樣。

如果制備樣品時(shí)需要使用溶解劑、稀釋劑、助溶劑、破乳劑等溶劑，需要確保這些溶劑是有效的，并且其使用對(duì)微生物生長(zhǎng)無影響;或者制備過程中需要對(duì)樣品進(jìn)行加熱助溶、離心等操作時(shí)，需要確保加熱的溫度、離心速度和離心時(shí)間等對(duì)微生物生長(zhǎng)或分布無影響。不需前處理的樣品免做。

消除樣品抑菌性的方法

無抑菌性樣品的驗(yàn)證方法：依據(jù)產(chǎn)品溶解性和微生物限度選擇合適的中性稀釋劑溶解和稀釋，用直接接種法驗(yàn)證，常用中性稀釋液或淋洗液。

對(duì)于具有抑菌性樣品的驗(yàn)證方法，首先確定樣品的抑菌作用(抑細(xì)菌、真菌試驗(yàn)驗(yàn)證)，選擇敏感標(biāo)準(zhǔn)菌株對(duì)供試品抑菌活性去除效果檢查(陽性菌回收試驗(yàn))。常用的消除樣品抑菌活性的方法如下：

稀釋法：利用降低供試品的相對(duì)濃度，將樣品稀釋至最低抑菌濃度下進(jìn)行。如：取規(guī)定量的樣品溶液至較大量的培養(yǎng)基中，使單位體積內(nèi)的樣品含量減少，至不含抑菌作用。

薄膜過濾法：利用體積差異分離，通過薄膜過濾，微生物被截于濾膜，培養(yǎng)薄膜觀察有無微生物生長(zhǎng)。通常薄膜孔徑應(yīng)不大于0.45μm，直徑一般為50?mm，若采用其他直徑的濾膜，沖洗量應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整。濾器和濾膜在使用前采用適宜的方法進(jìn)行滅菌。使用時(shí)應(yīng)保證濾膜在過濾前后的完整性。水溶性供試液過濾前先將少量的沖洗液過濾以潤(rùn)濕濾膜。油類供試液其濾膜和濾器在使用前應(yīng)充分干燥。

供試液經(jīng)過濾膜過濾后，若需要用沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為100?ml?？倹_洗量不得超過1000ml。

化學(xué)中和法：利用化學(xué)(生物)專屬性滅活，常用中和劑或滅活方法有：對(duì)氨基苯甲酸、卵磷脂、聚山梨酯-80等。對(duì)化學(xué)中和劑不敏感的樣品，用酶中和，如β-內(nèi)酰胺酶。

聯(lián)合使用：將以上兩種或幾種方法組合運(yùn)用，以消除樣品的抑菌性。適用于抑菌作用較強(qiáng)的中西藥制劑。

其次按照以下要求制備3組樣品：

樣品組：選擇以上適當(dāng)?shù)姆椒ㄖ泻蜆悠罚尤肷倭框?yàn)證微生物(接種量少于100?cfu)。

對(duì)照組：0.1%蛋白胨或pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液,加少量微生物(接種量少于100?cfu)。

陽性對(duì)照組：將試驗(yàn)菌株直接接種于培養(yǎng)基中(接種量少于100cfu)。

最后結(jié)果分析如下：

樣品組與對(duì)照組微生物生長(zhǎng)數(shù)量相似，表明中和劑的中和方式有效消除了樣品的抑菌性(即有效性)，如果對(duì)照組與陽性對(duì)照組的微生物數(shù)量相似，表明樣品預(yù)處理、消除樣品抑菌性的方法、檢測(cè)程序和培養(yǎng)條件等均不影響微生物生長(zhǎng)(即無毒性)。樣品如無抑菌性，省去對(duì)照組試驗(yàn)，樣品組與陽性對(duì)照組直接比較。樣品組微生物生長(zhǎng)數(shù)量不及陽性對(duì)照組微生物生長(zhǎng)數(shù)量，表明樣品的預(yù)處理、試驗(yàn)用器具材料、培養(yǎng)條件等方面存在對(duì)微生物生長(zhǎng)不利的因素。

為考查驗(yàn)證方法的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性，驗(yàn)證至少需3個(gè)不同批次的同類樣品，分別進(jìn)行3次驗(yàn)證試驗(yàn)。

無菌檢查方法驗(yàn)證試驗(yàn)設(shè)計(jì)

薄膜過濾法：按照藥典的要求取每種培養(yǎng)基規(guī)定接種的樣品總量按薄膜過濾法過濾、沖洗，在最后一次的沖洗液中加入小于100cfu的試驗(yàn)菌，過濾。取出濾膜接種至硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)或改良馬丁培養(yǎng)基中，或?qū)⑴囵B(yǎng)基加至濾桶內(nèi)。另取一裝有同體積培養(yǎng)基的容器，加入等量試驗(yàn)菌，作為對(duì)照。按照藥典的要求的溫度和時(shí)間進(jìn)行培養(yǎng)。

直接接種法：取符合直接接種法培養(yǎng)基用量要求的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基8管，分別接入小于100cfu的金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各2管;取符合直接接種法培養(yǎng)基用量要求的改良馬丁培養(yǎng)基4管，分別接入小于100?cfu的白色念珠菌、黑曲霉各2管。其中1管接入每支培養(yǎng)基規(guī)定的供試品接種量，另1管作為對(duì)照，按照藥典的要求的溫度和時(shí)間進(jìn)行培養(yǎng)。

結(jié)果判斷

同對(duì)照管比較，如含供試品各容器中的試驗(yàn)菌均生長(zhǎng)良好，則說明驗(yàn)證通過;如含供試品的任一容器中的試驗(yàn)菌生長(zhǎng)微弱、緩慢或不生長(zhǎng)，驗(yàn)證失敗，應(yīng)采用增加沖洗量、增加培養(yǎng)基的用量、使用中和劑和滅活劑、更換濾膜等方法，消除供試品的抑菌作用，重新進(jìn)行驗(yàn)證。

新GMP檢查重點(diǎn)

首先要檢查方法驗(yàn)證方案設(shè)計(jì)的科學(xué)性和完整性，是否有與藥典方法相悖的地方，尤其是產(chǎn)品本身的抑菌性，檢查方法的選擇，是直接接種法還是薄膜過濾法等。

無菌檢查方法驗(yàn)證的硬件是否具備及是否已經(jīng)進(jìn)行了相關(guān)的確認(rèn)。如使用黑曲霉菌是否具有生物安全柜并進(jìn)行確認(rèn)，無菌室的確認(rèn)及日常監(jiān)測(cè)，培養(yǎng)箱的型號(hào)及數(shù)量和進(jìn)行確認(rèn)的情況等，智能集菌器、全封閉無菌試驗(yàn)過濾培養(yǎng)器的型號(hào)、性能，濾膜是否符合規(guī)定等。

驗(yàn)證中各個(gè)環(huán)節(jié)有關(guān)數(shù)據(jù)的真實(shí)性，如產(chǎn)品本身抑菌性試驗(yàn)數(shù)據(jù)，菌種回收率和培養(yǎng)基適用性和靈敏度檢查數(shù)據(jù)，菌種的傳代、銷毀和使用記錄，無菌檢查操作記錄、培養(yǎng)記錄等。

無菌檢查中偏差的處理是否真的找到了根本原因，是否在沒有確切的原因前就對(duì)樣品重新檢查并依據(jù)新的檢查結(jié)果放行產(chǎn)品。

驗(yàn)證的方法與無菌檢查操作規(guī)程和無菌檢查記錄是否完全一致，如操作步驟、檢查方法、檢查環(huán)境、試驗(yàn)耗材均需與實(shí)際檢查操作規(guī)程及驗(yàn)證過程完全相符。

為了考查驗(yàn)證方法的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性，驗(yàn)證時(shí)是否至少采用了3個(gè)不同批次的同類樣品，分別進(jìn)行了3次驗(yàn)證試驗(yàn)。

使用新的濾膜或過濾器(不同廠家或批號(hào)、型號(hào))是否重新進(jìn)行樣品試驗(yàn)組、蛋白胨對(duì)照組和陽性對(duì)照組的驗(yàn)證確認(rèn)。

除非樣品不能采用過濾的方法(難溶解)，企業(yè)是否采用全封閉的薄膜過濾法。

菌液的保存條件和保存期限是否符合藥典的要求，對(duì)于黑曲霉孢子懸液是否有驗(yàn)證的資料。

無菌檢查的注意事項(xiàng)

培養(yǎng)基的適用性檢查包括培養(yǎng)基的無菌性檢查和培養(yǎng)基的靈敏度檢查。

中國(guó)藥典附錄中規(guī)定的檢驗(yàn)數(shù)量不包括陽性對(duì)照用樣品量，雖然附錄另處有專門說明，仍然容易忽略。

無菌檢查時(shí)應(yīng)強(qiáng)調(diào)“檢驗(yàn)數(shù)量”，主要是保證試驗(yàn)結(jié)果的代表性，而陽性對(duì)照試驗(yàn)和驗(yàn)證時(shí)僅須滿足“檢驗(yàn)量”總量要求即可，以保證試驗(yàn)結(jié)果的可靠性，驗(yàn)證試驗(yàn)可以由此減少大量的樣品;

工作菌株的傳代次數(shù)不得超過5代，以防止過度的傳代增加菌種變異的風(fēng)險(xiǎn)。這里“代”的定義是指，活的培養(yǎng)物接種到微生物生長(zhǎng)的新鮮培養(yǎng)基中培養(yǎng)，任何亞培養(yǎng)的形式均被認(rèn)為是轉(zhuǎn)種或傳代一次。

菌液加入，按規(guī)定應(yīng)在最后一次沖洗液中加入陽性菌液，主要是考慮過濾器的有效性。過濾器的有效性應(yīng)由提供企業(yè)控制，用戶可采用適當(dāng)方法抽查(如檢查陽性菌液通過濾筒的流出液)。

實(shí)驗(yàn)室菌種的處理和保存的程序應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化，以盡可能減少菌種污染和變異。

試驗(yàn)時(shí)菌懸液并不是只要活的菌體就行，而是要保持旺盛的生命力，所以菌懸液存放時(shí)間不能太長(zhǎng)。

菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在2?h內(nèi)使用，若保存在2～8℃，可在24?h內(nèi)使用。黑曲霉孢子懸液可保存在2～8℃，在驗(yàn)證過的貯存期內(nèi)使用。

薄膜過濾法采用大樣品量集菌的方法，具有代表性，不易漏檢，儀器操作相對(duì)簡(jiǎn)單。該系統(tǒng)是全封閉過濾系統(tǒng)，避免了操作過程中外源性微生物的污染，對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的可信性影響較小。因此無菌試驗(yàn)采用薄膜過濾法還是直接接種法并不依賴于驗(yàn)證結(jié)果，而是取決于樣品的特性，如能采用過濾的方法均應(yīng)采用薄膜過濾法檢查。

若樣品含有抑菌成分，當(dāng)采用薄膜過濾法時(shí)，應(yīng)先將供試液稀釋后在過濾，這樣可以減少濾膜對(duì)樣品的吸附，減少?zèng)_洗量，進(jìn)而減少微生物的損失或傷害。

無菌檢查應(yīng)作為穩(wěn)定性考察的項(xiàng)目進(jìn)行，以便對(duì)產(chǎn)品有效期的制定和合理的確定儲(chǔ)存條件提供重要的依據(jù)。

陽性結(jié)果的調(diào)查：在無菌檢查中必須小心防止任何可能污染樣品的行為。一旦發(fā)現(xiàn)微生物生長(zhǎng)，該批產(chǎn)品就被判斷非無菌，必須進(jìn)行調(diào)查。只有可以造成微生物生長(zhǎng)的明確原因被找出，方可認(rèn)為最初的陽性測(cè)試結(jié)果無效。只有確定且書面記載的證據(jù)清楚地證明污染發(fā)生在測(cè)試過程中，方可進(jìn)行重新測(cè)試。如果已有證據(jù)不明確，產(chǎn)品也必須按照不符合無菌需求的產(chǎn)品那樣拒絕放行并報(bào)廢。在綜合考慮所有與產(chǎn)品制造和樣品測(cè)試相關(guān)的因素后，必須匯總成為書面的調(diào)查報(bào)告，涵蓋確切的結(jié)論和整改措施。

試驗(yàn)操作流程及數(shù)據(jù)的關(guān)聯(lián)性、銜接及可追溯性。如儀器使用記錄和試驗(yàn)記錄的一致，智能集菌器型號(hào)數(shù)量與試驗(yàn)記錄一致，菌種收、存、使用記錄與試驗(yàn)記錄的一致。

第二篇：控制菌檢查方法驗(yàn)證操作規(guī)程

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題

目

控制菌檢查方法驗(yàn)證操作規(guī)程

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制

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審

核

批

準(zhǔn)

制訂日期

審核日期

批準(zhǔn)日期

頒發(fā)部門

質(zhì)量部

生效日期

分發(fā)部門

化驗(yàn)室

一、目的：為使控制菌檢查的操作規(guī)范化、制度化，故建立此規(guī)程

二、適用范圍：控制菌檢查必須按本規(guī)程執(zhí)行。

三、責(zé)任者：微生物限度檢查化驗(yàn)員，質(zhì)量檢測(cè)中心主任。

四、正文：

1、控制菌檢查方法適應(yīng)性試驗(yàn)1、1

供試液的制備

取樣品10g，用胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB），作為稀釋液制成1：10供試液，混勻，在20～25℃培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)使供試品中的細(xì)菌充分恢復(fù)但不增殖（約2小時(shí)）。

1.2

試驗(yàn)菌

大腸埃希菌和銅綠假單胞菌

1.3適用性試驗(yàn)

取相當(dāng)于1mL供試品的上述預(yù)培養(yǎng)物及不大于100cfu的大腸埃希菌和銅綠假單胞菌分別接種至適宜體積腸道菌增菌液體培養(yǎng)基中，30～35℃培養(yǎng)24小時(shí)后，劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上，30～35℃培養(yǎng)18小時(shí)。應(yīng)能分別檢出所加大腸埃希菌和銅綠假單胞菌相應(yīng)的反應(yīng)特征.1.4結(jié)果判斷

上述試驗(yàn)若檢出試驗(yàn)菌，按此供試液制備法和控制菌檢查方法進(jìn)行供試品檢查；若未檢出試驗(yàn)菌，應(yīng)消除供試品的抑菌活性，并重新進(jìn)行

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目

控制菌檢查方法驗(yàn)證操作規(guī)程

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方法適用性試驗(yàn)。

1.5耐膽鹽革蘭氏陰性菌的檢查

供試液的制備和預(yù)培養(yǎng)：取樣品10g，用胰酪大豆胨肉湯瓊培養(yǎng)基（TSB），作為稀釋液制成1：10供試液，混勻，在20～25℃培養(yǎng),培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)使供試品中的細(xì)菌充分恢復(fù)但不增殖（約2小時(shí)）

1.5.1定性試驗(yàn)：

除另有規(guī)定外，取相當(dāng)于1g或ml供試品的預(yù)培養(yǎng)物接種至適應(yīng)體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）腸道增菌液培養(yǎng)基中，30～35℃培養(yǎng)24～48小時(shí)后，劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的平板上，30～35℃

培養(yǎng)18～24小時(shí)。

判斷結(jié)果：如果平板上無菌生長(zhǎng)，判供試品未檢出耐膽鹽革蘭氏陰性菌。

1.5.2定量檢查：

選擇和分離培養(yǎng)：取相當(dāng)于0.1g、0.01g和0.001g（或0.1ml、0.01、0.001ml）供試品的預(yù)培養(yǎng)物或其稀釋劑分別接種至適應(yīng)體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）腸道增菌液體培養(yǎng)基中，30～35℃培養(yǎng)24～48小時(shí)后，上述每一培養(yǎng)物分別劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的平板上，30～35℃

培養(yǎng)18～24小時(shí)。

判斷結(jié)果：若紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上有菌落生長(zhǎng)，則對(duì)應(yīng)培養(yǎng)管為陽性，否則為陰性。

第三篇：實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證方法

實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證方法

第一條 為建立規(guī)范的安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)能力驗(yàn)證工作機(jī)制，根據(jù)國(guó)家安全生產(chǎn)監(jiān)督管理總局（以下簡(jiǎn)稱國(guó)家總局）賦予省級(jí)煤礦安全生產(chǎn)監(jiān)察局的職責(zé)，制定本辦法。

第二條 本辦法所稱的能力驗(yàn)證，是指利用實(shí)驗(yàn)室間指定檢測(cè)數(shù)據(jù)的比對(duì)，確定實(shí)驗(yàn)室從事特定測(cè)試活動(dòng)的技術(shù)能力。

第三條 能力驗(yàn)證活動(dòng)應(yīng)當(dāng)遵循科學(xué)合理、操作可行、非營(yíng)利性和避免不必要的重復(fù)驗(yàn)證的原則。

第四條 安徽煤礦安全生產(chǎn)監(jiān)察局依照有關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、國(guó)際準(zhǔn)則制定有關(guān)實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證工作的基本規(guī)范和實(shí)施規(guī)則，統(tǒng)一監(jiān)管和綜合協(xié)調(diào)能力驗(yàn)證活動(dòng)。

第五條 能力驗(yàn)證的組織者應(yīng)當(dāng)建立并保存能力驗(yàn)證檔案及相關(guān)記錄，包括：

（一）實(shí)施能力驗(yàn)證的有關(guān)文件；

（二）能力驗(yàn)證的提供者的資質(zhì)證明；

（三）能力驗(yàn)證的組織者對(duì)能力驗(yàn)證的提供者的確認(rèn)記錄；

（四）能力驗(yàn)證的參加者名單；

（五）能力驗(yàn)證的技術(shù)報(bào)告；

（六）能力驗(yàn)證結(jié)果和后續(xù)處理文件。

第六條 能力驗(yàn)證的組織者應(yīng)當(dāng)于每年年底向國(guó)家總局報(bào)告下一的能力驗(yàn)證計(jì)劃，包括：名稱、目的、能力驗(yàn)證的內(nèi)容和關(guān)鍵技術(shù)要素設(shè)計(jì)、組織單位、實(shí)施時(shí)間、擬參加實(shí)驗(yàn)室的范圍和數(shù)量、能力驗(yàn)證提供者的資質(zhì)證明和審核材料等。

第七條 能力驗(yàn)證的提供者應(yīng)當(dāng)符合相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或者技術(shù)規(guī)范的要求，其技術(shù)能力在相應(yīng)領(lǐng)域和關(guān)鍵技術(shù)要素方面領(lǐng)先，并具備可持續(xù)性。

第八條 安徽煤礦安全生產(chǎn)監(jiān)察局組織有關(guān)方面專家，對(duì)能力驗(yàn)證的提供者是否符合相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或者技術(shù)規(guī)范的要求進(jìn)行評(píng)價(jià)。符合要求的，省局確定其作為能力驗(yàn)證的提供者。

省局鼓勵(lì)能力驗(yàn)證的組織者利用經(jīng)過國(guó)家認(rèn)監(jiān)委確定的能力驗(yàn)證的提供者。

第九條 能力驗(yàn)證的參加者應(yīng)當(dāng)向能力驗(yàn)證的組織者及時(shí)反饋相關(guān)信息，并保存相關(guān)記錄。

能力驗(yàn)證結(jié)果離群的，應(yīng)當(dāng)采取相應(yīng)的糾正措施。

第十條 能力驗(yàn)證的組織者應(yīng)當(dāng)及時(shí)向國(guó)家總局通報(bào)能力驗(yàn)證計(jì)劃的完成情況、能力驗(yàn)證結(jié)果、后續(xù)處理措施等有關(guān)事項(xiàng)。

第十一條

第十二條 省局在能力驗(yàn)證活動(dòng)完成后向有關(guān)方面通報(bào)能力驗(yàn)證活動(dòng)的結(jié)果。同時(shí)向社會(huì)報(bào)告能力驗(yàn)證結(jié)果，定期公布能力驗(yàn)證滿意結(jié)果的實(shí)驗(yàn)室名單。

第十三條 達(dá)到滿意結(jié)果的安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)和能力驗(yàn)證的提供者，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)接受安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審時(shí)，可以免于該項(xiàng)目的現(xiàn)場(chǎng)試驗(yàn)。

鼓勵(lì)各有關(guān)方面利用能力驗(yàn)證的結(jié)果，優(yōu)先推薦或者選擇達(dá)到滿意結(jié)果的安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)承擔(dān)省局委托、授權(quán)或者指定的檢驗(yàn)檢測(cè)任務(wù)。

第十四條 能力驗(yàn)證的組織者應(yīng)當(dāng)對(duì)能力驗(yàn)證的提供者和能力驗(yàn)證的實(shí)施過程實(shí)施有效管理。

第十五條 對(duì)于能力驗(yàn)證的結(jié)果可疑或者離群的安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)機(jī)構(gòu)，能力驗(yàn)證的組織者應(yīng)當(dāng)要求其在規(guī)定期限內(nèi)進(jìn)行整改并驗(yàn)證整改效果，也可視情況暫?；蛘叱蜂N其相關(guān)項(xiàng)目的資質(zhì)認(rèn)定或者認(rèn)可，暫停其承擔(dān)省局授權(quán)、委托或者指定的檢驗(yàn)檢測(cè)任務(wù)的資格，直到完成糾正活動(dòng)并經(jīng)能力驗(yàn)證的組織者確認(rèn)后，方可恢復(fù)或者重新獲得認(rèn)可以及承擔(dān)省局授權(quán)、委托或者指定的檢驗(yàn)檢測(cè)任務(wù)的資格。

第十六條 能力驗(yàn)證的提供者違反職業(yè)道德，弄虛作假或者泄露機(jī)密的，省局應(yīng)當(dāng)取消其承擔(dān)能力驗(yàn)證的提供者的資格。

能力驗(yàn)證的參加者弄虛作假、進(jìn)行串通，經(jīng)查屬實(shí)的，能力驗(yàn)證組織者視其結(jié)果為不滿意。情節(jié)惡劣的，省局應(yīng)當(dāng)取消其相應(yīng)項(xiàng)目的檢測(cè)資質(zhì)資格，并報(bào)告國(guó)家總局備案。

第十七條 省局可以采取組織專家評(píng)議、向?qū)嶒?yàn)室征求意見、抽查檔案、要求能力驗(yàn)證的組織者和提供者報(bào)告能力驗(yàn)證的實(shí)施情況等方式，對(duì)實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證活動(dòng)進(jìn)行監(jiān)督。

第十八條 能力驗(yàn)證的參加者對(duì)能力驗(yàn)證的結(jié)果有異議的，可以向能力驗(yàn)證組織者進(jìn)行申訴；對(duì)違規(guī)行為可以向能力驗(yàn)證組織者或者國(guó)家總局進(jìn)行投訴。

第十九條 下列用語的含義：

本辦法所稱能力驗(yàn)證的提供者，是指從事能力驗(yàn)證的設(shè)計(jì)和實(shí)施的安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)。

本辦法所稱能力驗(yàn)證的參加者，是指參加實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)，以確定校準(zhǔn)或者檢測(cè)能力的安全生產(chǎn)檢測(cè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)。

本辦法所稱的結(jié)果可疑，是指按照有關(guān)的技術(shù)統(tǒng)計(jì)方法確定的能力驗(yàn)證結(jié)果界于標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)可值（或者中位值）之間的結(jié)果。

本辦法所稱的離群（即結(jié)果離群），是指按照有關(guān)的技術(shù)統(tǒng)計(jì)方法確定的明顯偏離標(biāo)準(zhǔn)值（或者中位值）的結(jié)果。

第二十一條 本辦法由安徽煤礦安全生產(chǎn)監(jiān)察局負(fù)責(zé)解釋。

第二十二條 本辦法自二0一三年十二月一日起施行。

第四篇：方法驗(yàn)證專屬性驗(yàn)證試驗(yàn)（本站推薦）

鹽霉素專屬性驗(yàn)證（強(qiáng)制降解試驗(yàn)）

1、酸降解試驗(yàn)

稱取樣品3.2g,加0.1N的鹽酸40ml溶解，再每隔4小時(shí)吸取2ml，加稀釋劑定容，檢測(cè)含量?？疾焓欠窠到?，連續(xù)測(cè)定直到降解。

2、堿降解試驗(yàn)

稱取樣品3.2g,加0.1N的氫氧化鈉40ml溶解，再每隔4小時(shí)吸取2ml，加稀釋劑定容，檢測(cè)含量?？疾焓欠窠到猓B續(xù)測(cè)定直到降解。

3、高溫降價(jià)

將考察樣品存放在80℃烘箱中考察5-10天，每天取出檢測(cè)1次。

4、高濕降價(jià)

將考察樣品存放在相對(duì)濕度92.5%，25℃（取干燥器，放入硝酸鉀飽和溶液），考察5-10天，每天取出檢測(cè)1次。

5、光降解試驗(yàn)

將考察樣品存放一百二十萬勒克斯（Lx）×小時(shí)的冷白熒光燈照射，再經(jīng)200瓦小時(shí)/平方米的紫外熒光燈照射。

6、氧化降解試驗(yàn)

將考察樣品3.2g，加入不同濃度的雙氧水40ml溶解，再每隔4小時(shí)吸取2ml，加稀釋劑定容，檢測(cè)含量?？疾焓欠窠到?，連續(xù)測(cè)定直到降解。

第五篇：實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法的驗(yàn)證

檢測(cè)限是指試樣中的被分析物能夠被檢測(cè)到的最低量，但不一定要準(zhǔn)確定量。該驗(yàn)證指標(biāo)的意義在于考察方法是否具備靈敏的檢測(cè)能力。判斷方法有非儀器分析目視法（直觀法）與信噪比法

定量限系指樣品中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具一定準(zhǔn)確度和精密度。定量限體現(xiàn)了分析方法是否具備靈敏的定量檢測(cè)能力。雜質(zhì)定量試驗(yàn)，需考察方法的定量限，以保證含量很少的雜質(zhì)能夠被準(zhǔn)確測(cè)出。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測(cè)定方法研究時(shí)，應(yīng)確定方法的定量限。判斷方法有信噪比法。

線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)劑型和分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要求確定。

故檢測(cè)限、定量限、線性常用對(duì)照品試驗(yàn)。

準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或認(rèn)可的參考值接近的程度。對(duì)于制劑一般以回收率試驗(yàn)來進(jìn)行驗(yàn)證。中藥制劑及生物藥物分析中，常采用加樣回收率法（在已知含量的樣品A中加入一定量的對(duì)照品B），化藥制劑常采用回收率法（在空白輔料中加入原料藥對(duì)照品C，還應(yīng)作單獨(dú)輔料的空白測(cè)定D），要求至少測(cè)定高、中、低三個(gè)濃度，每個(gè)濃度測(cè)定三次，共提供9個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。加樣回收率=（測(cè)定值M –樣品中含量A）/加入標(biāo)準(zhǔn)品值B×100%

回收率＝（測(cè)定值M-空白值D）/ 加入量C×100%

回收率的RSD一般應(yīng)為2%以內(nèi)。

精密度系指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻樣品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。精密度包括：重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。

故準(zhǔn)確度及精密度則需用供試品及對(duì)照品試驗(yàn)。

一、準(zhǔn)確度(回收率)

準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般以回收率(%)表示。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)建立。

1．含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度

原料藥可用已知純度的對(duì)照品或樣品進(jìn)行測(cè)定，或用本法所得結(jié)果與已建立準(zhǔn)確度的另一方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較。制劑可用含已知量被測(cè)物的各組分混合物進(jìn)行測(cè)定。

如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定，或與另一個(gè)已建立準(zhǔn)確度的方法比較結(jié)果。

如該法已建立了精密度、線性和專屬性，準(zhǔn)確度有時(shí)也能推算出來，不必再做。

2．雜質(zhì)定量測(cè)定的準(zhǔn)確度

可向原料藥或制劑中加入已知量雜質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。

假如不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法測(cè)定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較，如藥典標(biāo)準(zhǔn)方法或經(jīng)過驗(yàn)證的方法。如不能測(cè)得雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的相對(duì)響應(yīng)因子，則可用原料藥的響應(yīng)因子。

應(yīng)明確證實(shí)單個(gè)雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)於主成分的重量比(%)，或是面積比(%)。

3．?dāng)?shù)據(jù)要求

在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9次測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，例如制備3個(gè)不同濃度的樣品，各測(cè)定3次。

應(yīng)報(bào)告已知加入量的回收率(%)，或測(cè)定結(jié)果平均值與真實(shí)值之差及其可信限。

所以加樣回收率反映的是方法的準(zhǔn)確度，是評(píng)價(jià)方法好壞的指標(biāo)這一，是誤差理論在藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的具體應(yīng)用。準(zhǔn)確度=(測(cè)量值-真實(shí)值)/真實(shí)值*100%。

實(shí)際工作中，其實(shí)不存在藥物的真實(shí)值的(我們所有的數(shù)據(jù)都是測(cè)量值，都是人們用一定的方法測(cè)出來的)。其他領(lǐng)域也一樣。

於是人們找一種比較可靠的得到的值規(guī)定為真實(shí)值。這就是加樣回收率的方法。

比如，為了評(píng)價(jià)阿司匹林片劑的含量測(cè)定方法，用天平稱一定量(如：100mg)的對(duì)照品，加入到阿司匹林的片劑輔料中，這一定量的對(duì)照品就是真實(shí)值。用建立的方法測(cè)出來是99mg，這個(gè)方法的準(zhǔn)確度就是99%，或加樣回收率是99%，根據(jù)藥品的具體情況，當(dāng)這個(gè)回收率達(dá)到一定范圍時(shí)(比如99%-101%)就認(rèn)為方法是準(zhǔn)確的。

在你標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)的高中低，一般是中間濃度一個(gè)，然后低于中間濃度20%一個(gè)，高于中間濃度20%一個(gè)

不論是擬采用什么方法，就是加樣回收測(cè)定，高中低三個(gè)劑量，在你的線性范圍內(nèi)，每個(gè)樣品測(cè)定三次，最好和試驗(yàn)一起，沒有系統(tǒng)誤差