第一篇：霉菌毒素總結(jié)

霉菌毒素

蘇圣華

霉菌毒素是毒性很強(qiáng)的霉菌次生代謝產(chǎn)物，這些霉菌主要屬于曲菌屬，青霉菌屬以及鐮孢菌屬（Fusarium，Aspergillus，Penicillium及Alternaria species）。據(jù)估計(jì)，至少有300 種這類真菌代謝物對(duì)人類和動(dòng)物具有潛在毒性，但是為大眾熟知并被廣泛研究的只有黃曲霉毒素B1（AFB1），玉米赤霉烯酮（ZON），嘔吐毒素(DON)，T-2 毒素，赭曲霉毒素(OTA)以及伏馬毒素/煙曲霉毒素(FUM)。全球范圍內(nèi)動(dòng)物飼料、飼料原料和人類食品中都廣泛存在霉菌毒素，根據(jù)世界糧農(nóng)組織的調(diào)查，世界上每年有25%的糧食受到已確認(rèn)的霉菌毒素的污染。這些霉菌毒素可以通過被污染的谷物、飼料和由這些飼料喂養(yǎng)的動(dòng)物所提供的動(dòng)物性食品（奶、肉、蛋）進(jìn)入我們的食物鏈。

一、黃曲霉毒素 1．黃曲霉毒素特點(diǎn)

黃曲霉毒素(Aflatoxin 簡(jiǎn)稱AFT)是一類結(jié)構(gòu)相似的衍生物的總稱。目前已發(fā)現(xiàn)的AFT 及其衍生物有20 多種,除了AFT B1、B2、G1、G2 是天然產(chǎn)生的毒素外,其余的都為它們的衍生物。在上述4 種天然毒素中,以B1 的毒性最強(qiáng),在食品和動(dòng)物飼料的AFT 檢測(cè)中,一般以B1 作為主要檢測(cè)指標(biāo)。

黃曲霉毒素主要是在倉儲(chǔ)過程中感染感染產(chǎn)生的。黃曲霉生長繁殖需要一定溫度和濕度條件，溫度25 ℃ ~30 ℃、相對(duì)濕度80%~90% 是黃曲霉最適生長條件。一般南方地區(qū)黃曲霉發(fā)生率要高于北方，因南方氣溫和濕度更適于黃曲霉生長繁殖，特別在梅雨季節(jié)；因玉米、麥類、稻谷等谷物水分含量為17%~18% 時(shí)是黃曲霉生長繁殖最適條件。黃曲霉毒素耐熱，只有通過長時(shí)間高溫（100—120℃）作用，如高壓消毒和灼燒才能使其大部分失活；對(duì)強(qiáng)酸和強(qiáng)堿較敏感。在提煉油時(shí)，用氫氧化鈉萃取游離脂肪酸的工藝可以進(jìn)一步破壞毒素的活性。

黃曲霉毒素以肝臟含量最高,腎、脾、腎上腺亦可檢出,有極微量存在于血液中,肌肉中一般不能檢出。AFT如不連續(xù)攝入,一般不在體內(nèi)蓄積,一次攝入后約經(jīng)一周即可經(jīng)呼吸或由尿糞等將大部分排出。AFB1 在沒有經(jīng)過代謝活化之前的母體化合物是無致癌性的，因此AFB1 被稱為前致癌物，因?yàn)樗仨毻ㄟ^體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化即“代謝激活或生物激活” 形成活性中間體才具有致癌性。

2、黃曲霉毒素脫毒

AFT 污染糧食的防治原則是以防為主,污染嚴(yán)重的糧食和飼料應(yīng)該廢棄,對(duì)于輕度污染的糧食和飼料,則必須認(rèn)真地進(jìn)行脫毒處理。霉菌毒素的脫毒可有物理、化學(xué)以及生物降解等方法。2.1 化學(xué)方法

氨化法

此法是利用塑料薄膜密封被霉菌污染的飼料,然后加氨封閉一定時(shí)間,氨與AFTB1 結(jié)合后發(fā)生脫羥作用,致使AFTB1的內(nèi)酯環(huán)發(fā)生裂解,達(dá)到去毒效果。一般來說,，對(duì)于含毒量在0.2 mg/ kg 以下的飼料采用0.2 %～0.4 %的氨劑量,含毒量在0.2 ～0.5mg/ kg 含毒量的飼料采用0.5 %～0.7 %氨劑量,含毒量0.6 mg/ kg 以上的飼料常用0.7 %～1.0 %的氨劑量,如果密閉時(shí)間延長,劑量可相應(yīng)降低。氨化作用對(duì)黃曲霉毒素的降解作用比較顯著，但這種方法對(duì)其他霉菌毒素的作用效果較差，同時(shí)可能因氨在飼料中的殘留而影響動(dòng)物的健康。另外，堿煉法也對(duì)其脫毒有效果，但用于飼料脫毒不夠方便。2.2 機(jī)械脫毒

機(jī)械脫毒是指用人工或機(jī)械的方法，將谷物和飼料中的發(fā)霉顆粒剔除，或通過機(jī)械的碾軋除去毒素含量較高的外皮而降低毒素的含量。機(jī)械脫毒主要利用霉菌毒素在谷物和飼料中的分布特點(diǎn)而進(jìn)行，所以該方法能在一定程度上除掉因蟲鼠害、破損等霉粒。但由于該方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力，而且效力很低，在現(xiàn)代化大規(guī)模飼料生產(chǎn)中很少應(yīng)用。

2.3 物理脫毒

物理脫毒法主要有吸附法、水洗法、剔除法、脫胚去毒法、溶劑提取法、加熱去毒法、輻射法等。物理方法主要是通過在飼料或谷物中添加各種吸附劑，降低霉菌毒素在胃腸道的吸收，即在飼料中添加可以吸附霉菌毒素的物質(zhì)，使毒素在經(jīng)過動(dòng)物腸道時(shí)不被動(dòng)物所吸收，直接排出動(dòng)物體外。在這其中吸附法是現(xiàn)代飼料中霉菌毒素脫毒最為有效的方法。

2.3.1 活性炭

對(duì)毒素有一定的吸附作用，但沒有選擇性，對(duì)某些營養(yǎng)元素及藥物也有吸附作用，因此臨床效果不佳。

2.3.2 鋁硅酸鹽類

天然鋁硅酸鹽,如沸石、蒙脫石、硅藻土、高嶺土等,天然鋁硅酸鹽礦物吸附力小,效率低,占飼料容量大,對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)有一定吸附,因而直接用于飼料效果不好。對(duì)天然的鋁硅酸鹽進(jìn)行改性后可以改善它對(duì)霉菌毒素的選擇性吸附能力。鋁硅酸鹽類吸附劑對(duì)黃曲霉毒素有良好的吸附能力,并且有不少體內(nèi)(喂養(yǎng))試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了這類吸附劑的實(shí)際效,但它們存在對(duì)玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素、單端孢菌素等毒素吸附能力不足的問題。不過通過適當(dāng)?shù)母男杂锌赡苁顾哂懈鼜V泛的吸附能力。這類吸附劑的另一個(gè)缺點(diǎn)是,它們表現(xiàn)出了對(duì)維生素及礦物鹽的非選擇性吸附能力。2.3.3 酵母細(xì)胞壁提取物

從酵母培養(yǎng)物細(xì)胞壁中提取的甘露糖（MOS）,這類新型抗原活性物質(zhì),在調(diào)整動(dòng)物腸道微生態(tài)區(qū)系,在對(duì)抗有害微生物的過程中發(fā)揮重要作用。MOS 對(duì)AFT 的總結(jié)合率可達(dá)100 % ,具有添加量少,作用顯著以及結(jié)合的霉菌毒素種類范圍廣等特點(diǎn)。

酯化的葡甘露聚糖（EGM）是一種新型的霉菌毒素吸附劑，是從酵母細(xì)胞中提取出的功能性碳水化合物。EGM有很大的表面區(qū)域，1 kg的EGM有相當(dāng)于2.2萬 m2的表面區(qū)域。其表面富含不同孔徑的孔穴，用以大面積地?fù)渥讲煌N類的霉菌毒素。而且酯化葡配甘露聚糖與霉菌毒素結(jié)合后，霉菌毒素不易被解離。所以，酯化葡配甘露聚糖對(duì)多種霉菌毒素具有較強(qiáng)的吸附作用，而且對(duì)飼料中其他營養(yǎng)成分無顯著的負(fù)作用，同時(shí)還可能對(duì)動(dòng)物的其他生理功能有著積極的作用，是一種廣譜的，具有很大潛力的霉菌毒素吸附劑。

除上述方法，還有在飼料中添加營養(yǎng)元素，如蛋白質(zhì)、氨基酸以及硒可提高肝臟的解毒能力，以轉(zhuǎn)化毒素；酶制劑高效地催化、降解AFT 為無毒物質(zhì)。

二、玉米赤霉烯酮

1、玉米赤霉烯酮基本特性

一種鐮孢菌毒素,該毒素主要來源于玉米，濕度22%-25%為其產(chǎn)生適宜條件。熔點(diǎn)161 ℃～163 ℃,不溶于水,溶于堿性溶液、乙醚、苯及甲醇、乙醇等。

ZEN 可由胃腸道持續(xù)吸收, 肝腸循環(huán)可使ZEN在胃腸道滯留時(shí)間延長, ZEN主要隨糞便排出, 少量ZEN 可由乳汁排泄。豬攝入Z E A 后，其劑量的67% 在48h內(nèi)被排出，尿中含45%，糞中含22%。ZEN 在動(dòng)物體內(nèi)主要有兩條代謝途徑，一個(gè)是經(jīng)3α和3β羥基類固醇脫氫酶催化形成α和β-玉米赤霉烯醇(Zearaleno l, ZEL)；另一個(gè)途徑是與葡萄糖醛酸結(jié)合。研究表明，ZEN 在不同動(dòng)物肝臟轉(zhuǎn)化的主要代謝物不同，豬主要轉(zhuǎn)化為α-玉米赤霉烯醇，而奶牛主要代謝為β-玉米赤霉烯醇。α-玉米赤霉烯醇對(duì)大鼠的雌激素活性大約比ZEN 高400%，α-玉米赤霉烯醇對(duì)豬子宮內(nèi)膜的雌激素受體具有較高的親和力，通過和雌激素競(jìng)爭(zhēng)目標(biāo)組織細(xì)胞上的受體發(fā)揮作用。

2、玉米赤霉烯酮的脫毒

對(duì)于玉米赤霉烯酮等霉菌毒素的解脫毒研究主要集中在吸附法和生物降解法上。2.1 物理脫毒法

研究結(jié)果表明，消除ZEN 污染最實(shí)際、有效的方法是在飼料中添加霉菌毒素吸附劑，在腸道內(nèi)選擇性地吸附ZEN，使其經(jīng)過消化道排出體外。研究較多的吸附劑主要有硅鋁酸鹽類和甘露聚糖。其中以硅鋁酸鹽類吸附劑研究應(yīng)用最為廣泛。

未經(jīng)修飾的硅鋁酸鹽類對(duì)ZEN的吸附能力不佳，經(jīng)十六烷基吡啶鎓或十六烷基三甲基銨溴化物等對(duì)硅鋁酸鹽類吸附劑進(jìn)行化學(xué)改性，以增強(qiáng)硅鋁酸鹽表面的疏水性，從而增加對(duì)ZEN的吸附能力。

消膽胺具有顯著降低ZEN 腸吸收的作用，尤其是2% 組使ZEN的小腸吸收率由32% 顯著降低到16%。經(jīng)試驗(yàn)證實(shí)，消膽胺可以作為一種飼料添加劑防止母豬的雌激素過多癥。

研究表明,通過酶解的方法從酵母的細(xì)胞壁提取出的葡甘露聚糖可以結(jié)合飼料、谷物中大部分的ZEN。胞壁上的β葡聚糖等多糖是細(xì)胞壁吸附的主體,疏水作用在其中起著重要作用。熱處理或酸處理時(shí),細(xì)胞壁多聚糖和肽聚糖的糖苷鍵或者肽鍵斷裂,使肽聚糖結(jié)構(gòu)變薄而孔徑增大,菌體對(duì)真菌毒素的吸附能力增加。試驗(yàn)結(jié)果表明，酵母細(xì)胞壁可以吸附ZEN 2.7 mg/kg，并且這種吸附平衡可以在10 min 內(nèi)達(dá)到。甘露聚糖由酵母細(xì)胞內(nèi)壁提取而得，對(duì)ZEN 有一定的吸附作用。Swamy 等進(jìn)行的體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明，甘露聚糖可使豬避免ZEN 造成的生產(chǎn)性能下降。

2.2生物降解

應(yīng)用微生物生成的特殊酶來分解或使ZEN 變性。此類脫毒法條件溫和，可將毒素徹底分解而不會(huì)有毒性物質(zhì)殘留，只針對(duì)ZEN 起作用而不會(huì)破壞飼料和原料中的其他成分。

三、單端孢霉烯族毒素

1、單端孢霉烯族毒素含有特征性的12，13-環(huán)氧-單端孢霉-9-烯環(huán)結(jié)構(gòu)，根據(jù)它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)的不同，分成4 種類型：目前已經(jīng)鑒定了超過200 種單端孢霉烯族毒素，但是主要污染食品和飼料的單端孢霉烯族毒素是A（T-2 毒素、HT-2 毒素）、B（脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）、雪腐鐮刀菌烯醇（NIV））型單端孢霉烯族毒素。

潮濕、溫和多雨的氣候有利于DON生長。有研究認(rèn)為9天以上的陰雨天和21℃的平均氣溫為其生長最適條件。

2、單端孢霉烯族毒素的脫毒

對(duì)于DON、T-2等單端孢霉烯族毒素的脫毒研究，物理處理的效果常常不太理想，并且往往會(huì)改變營養(yǎng)成分。雖然許多化學(xué)處理能顯著降低單端孢霉烯族毒素的濃度，但可能會(huì)降低食物和飼料中的營養(yǎng)價(jià)值，也有可能殘留有害物質(zhì)，這些副作用限制了它們的應(yīng)用。目前，能有效轉(zhuǎn)化單端孢霉烯族毒素的微生物不多，它們主要來源于動(dòng)物腸道、土壤、植物等自然環(huán)境中。生物方法通過脫環(huán)氧化、羰基化、羥基化、水解及葡萄糖苷酸化等反應(yīng)，在溫和的條件下，將單端孢霉烯 族毒素轉(zhuǎn)化成低毒或無毒產(chǎn)物。

2.1 牛瘤胃液中分離得到菌株BBSH 797，主要的作用是在體內(nèi)和體外將DON 轉(zhuǎn)化成DOM-1。后來證明，菌株BBSH797 也能轉(zhuǎn)化A 型單端孢霉烯族毒素，脫環(huán)氧作用，例如將SCP 轉(zhuǎn)化成脫環(huán)氧SCP，或者脫乙酰作用，將T-2 毒素轉(zhuǎn)化成HT-2 毒素。后者毒性均明顯小于前者。

2.2 從雞腸道消化物中分離純化和鑒定了細(xì)菌菌株LS100（IDAC180507-1）和SS3，檢驗(yàn)了它們對(duì)12 種單端孢霉烯族毒素的轉(zhuǎn)化能力。轉(zhuǎn)化的類型與它們的分子結(jié)構(gòu)有關(guān)。對(duì)無乙?；膯味随呙瓜┳宥舅乩鏒ON、NIV 和疣孢霉素，脫環(huán)氧代謝物是主要的的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物。但是，單乙酰單端孢霉烯族毒素3-ADON，15-ADON 和鐮刀菌烯酮X 主要轉(zhuǎn)化成脫乙酰產(chǎn)物。二乙酰單端孢霉烯族毒DAS 和NEO僅表現(xiàn)出脫乙酰作用。T-2 毒素也僅有脫乙酰作用，而HT-2 毒素和T-2 三醇普遍的反應(yīng)是脫環(huán)氧作用。大鼠腸道微生物將T-2 毒素轉(zhuǎn)化成脫環(huán)氧產(chǎn)物，脫環(huán)氧HT-2，脫環(huán)氧T-2 三醇，進(jìn)一步轉(zhuǎn)化成T-2 四醇和SCP。

除此以外，單端孢霉烯族毒素是谷類農(nóng)作物中比較常見的真菌毒素，它們具有很強(qiáng)的物理化學(xué)穩(wěn)定性，但是它們?cè)谧匀画h(huán)境中并沒有蓄積，這表明自然環(huán)境中可能存在著DON 生物轉(zhuǎn)化降解作用。土壤、水體等自然環(huán)境被作為篩選單端孢霉烯族毒素轉(zhuǎn)化微生物的來源。植物病原物微生物也可通過脫環(huán)氧化以及脫乙?；瘉斫到舛舅?。

四、赭曲霉毒素

第二篇：食品毒素

臺(tái)灣塑化劑事件

鑒于臺(tái)灣有毒起云劑生產(chǎn)鏈已存在多年。有專家建議，大陸相關(guān)部門也應(yīng)對(duì)相關(guān)食品進(jìn)行排查，并對(duì)消費(fèi)者的血液進(jìn)行抽查調(diào)查，以確認(rèn)危害性及危害范圍

《國際先驅(qū)導(dǎo)報(bào)》記者傅雙琪、張勇 特約撰稿鄭雯發(fā)自臺(tái)北短短一周內(nèi)，一種化工業(yè)用劑“塑化劑”突然闖入臺(tái)灣食品業(yè)界，并打翻了全臺(tái)的飲料、保健品市場(chǎng)。

截止本報(bào)記者6月1日發(fā)稿時(shí)，臺(tái)灣已被發(fā)現(xiàn)受塑化劑污染的產(chǎn)品超過500項(xiàng)，其中更有“統(tǒng)一”、“白蘭氏”等知名品牌?！斑@是我30年來看過的最嚴(yán)重食品摻毒事件?！迸_(tái)灣大學(xué)食品研究所教授孫璐西說。

意外發(fā)現(xiàn)揭露“冰山一角”

最早發(fā)現(xiàn)“毒素”的，是一位在食品藥物管理局服務(wù)近26年的楊姓檢驗(yàn)員。她現(xiàn)年52歲，是兩個(gè)孩子的母親。今年3月中旬，在抽驗(yàn)益生菌是否違法摻雜減肥西藥時(shí)，她意外發(fā)現(xiàn)檢驗(yàn)儀器出現(xiàn)異常訊號(hào)。用臺(tái)衛(wèi)生署相關(guān)官員的話說，“她本來可以裝作沒看見”，但出于對(duì)食品安全的格外關(guān)注，這位檢驗(yàn)員認(rèn)真比對(duì)數(shù)據(jù)后，終于如抽絲剝繭般，赫然發(fā)現(xiàn)了不應(yīng)出現(xiàn)在食品當(dāng)中的塑化劑。這才使臺(tái)灣衛(wèi)生部門順藤摸瓜查出這起“有毒食品案”。

5月23日，臺(tái)衛(wèi)生部門通報(bào)，發(fā)現(xiàn)臺(tái)灣最大的食品添加劑供應(yīng)商昱伸香料有限公司在食品添加劑“起云劑”中非法添加可致癌的塑化劑“鄰苯二甲酸二酯”(DEHP)。另一家起云劑供應(yīng)商賓漢香料化學(xué)公司也被曝光非法添加另一種塑化劑“鄰苯二甲酸二異壬酯”(DINP)。目前，受這兩家供應(yīng)商波及的企業(yè)達(dá)200多家。

按照臺(tái)灣法規(guī)，“起云劑”為合法食品添加物，通常是由阿拉伯膠、乳化劑、棕櫚油及多種食品添加物混合制成，可幫助食品乳化。而不法商販用化工原料塑化劑替代了起云劑中的棕櫚油，以降低成本，提高效果。據(jù)孫璐西介紹，DEHP和DINP是普遍用于塑料材料的塑化劑，會(huì)危害男性生殖能力，促使女性性早熟。其中，DEHP的毒性比三聚氰胺高20倍。

隨著相關(guān)部門的調(diào)查進(jìn)展，有毒塑化劑的波及面之大，令島內(nèi)外震驚。

繼運(yùn)動(dòng)飲料、果汁、益生菌粉驗(yàn)出塑化劑后，連蜆錠、山藥薏仁谷粉、嬰幼兒營養(yǎng)補(bǔ)給品也相繼“淪陷”，塑化劑似乎無所不加。由于起云劑本身的功能可使食品油水變得黏稠，看起來更原汁原味，所以現(xiàn)階段只要是看起來混濁、呈霧狀食品，比如臺(tái)民眾鐘愛的珍珠奶茶等食品的錠狀劑都被合理懷疑添加了有毒的起云劑。

在對(duì)昱伸公司的調(diào)查中，臺(tái)方更發(fā)現(xiàn)其下游廠商“金果王公司”向臺(tái)北著名的士林夜市約50多家冰品、冷飲攤商供貨。至此，享譽(yù)海內(nèi)外的臺(tái)北夜市美食，也未能幸免于難。

“我執(zhí)教生物化學(xué)將近30年，自認(rèn)是此行業(yè)專家。我敢保證民眾目前看到的、聽到的，只是冰山之一角，說不定只是冰山之十分之一角。大家還是回家乖乖吃媽媽煮的東西吧?！迸_(tái)灣清華大學(xué)分子醫(yī)院研究所教授李寬容如是說。

第三篇：霉菌的基因工程技術(shù)

霉菌的基因工程技術(shù)

課程：食品生物技術(shù) 專業(yè)： 班級(jí)： 學(xué)號(hào)： 姓名：

完成時(shí)間：2011 年5月26日

霉菌的基因工程技術(shù)

摘要：霉菌在自然界中分布廣泛，與人們的日常生活極為密切。自從弗萊明發(fā)現(xiàn)青霉素以來，國內(nèi)外對(duì)霉菌的研究引起眾多學(xué)者的關(guān)注，本文對(duì)目前霉菌的應(yīng)用現(xiàn)狀作一綜述，并介紹了利用基因工程改良霉菌菌種常用的幾種方法。

關(guān)鍵詞：霉菌 基因工程 菌種改良 應(yīng)用

0前言

霉菌是能引起物種霉變的絲狀真菌的統(tǒng)稱，是真菌的一部分。凡是生長在培養(yǎng)基上呈絨毛狀、蜘蛛網(wǎng)狀或絮狀菌絲體的菌落，都稱之為霉菌。霉菌在自然界中分布非常廣泛，與人們的日常生活極為密切，用途很多，如用于傳統(tǒng)的釀酒、制醬和制作副食品及其他的發(fā)酵食品，并可從中提取藥物、色素等?？傊咕谵r(nóng)業(yè)、紡織、食品、醫(yī)藥、皮革及促進(jìn)自然界的物質(zhì)循環(huán)等方面都起著極為重要的作用。當(dāng)然它對(duì)人類也有有害的方面，如可使人、畜、農(nóng)作物患病，使食品、紡織品霉變等。1霉菌的應(yīng)用 1.1抗生素

抗生素是微生物在代謝過程中產(chǎn)生的能選擇性地抑制其它種微生物生長和活動(dòng)，甚至殺滅它種微生物的生物活性物質(zhì)。隨著青霉素的發(fā)現(xiàn)和由此研制而成的多種抗生素使人類得以治愈傳染病、有效地控制傳染病的流行。除了青霉素，還有許多抗生素來源于霉菌，例如灰黃霉素、頭孢霉素等。1.2 生物農(nóng)藥

自然界中有很多生物合成的天然物質(zhì)具有農(nóng)藥功能，提取其有效成分加工為農(nóng)藥應(yīng)用,這是制取生物農(nóng)藥的主要途徑。目前包括我國在內(nèi)的許多國家還大量應(yīng)用化學(xué)農(nóng)藥，已普遍導(dǎo)致了對(duì)環(huán)境的污染，致使農(nóng)產(chǎn)品安全衛(wèi)生問題嚴(yán)重，品種下降，并頻繁危及人類身體健康。生物農(nóng)藥有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn):能有效的控制害蟲，不殺傷天敵，不破壞生態(tài)平衡，不污染環(huán)境，因而有廣闊的開發(fā)前景。目前從霉菌著手尋找生物農(nóng)藥的研究也很深入廣泛，例如：木霉菌是一類具有廣譜性、拮抗性生物防治菌。1.3天然色素

食品及化妝品生產(chǎn)領(lǐng)域中都離不開色素，但多使用化學(xué)合成色素，其毒性問題已逐步引起人們的關(guān)注，國內(nèi)外在其用量及使用范圍方面均有限制。從生物中提取的天然食用色素?zé)o毒性，食用安全性好，但大多數(shù)因原料來源少，價(jià)格高限制了其廣泛應(yīng)

用。目前用霉菌生產(chǎn)色素的例子也很多，例如:紅曲霉菌，是用于提取色素最多的霉菌，中國利用紅曲已有上千年的歷史，用于紅腐乳、酒類和其他食品中。1.4抗腫瘤

在霉菌發(fā)酵產(chǎn)物中還發(fā)現(xiàn)有能抑制缺氧信號(hào)傳遞的小分子物質(zhì)，很多類型的人類腫瘤細(xì)胞都處在嚴(yán)重缺氧的狀態(tài)下，它們?yōu)榱松?，建立了一系列的?jí)聯(lián)反應(yīng)來緩解缺氧。Pladienolides是一類由普拉特鏈霉菌 Mer2 11107發(fā)酵產(chǎn)生的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，可抑制腫瘤細(xì)胞生長和缺氧信號(hào)傳遞，它在小鼠異種皮移植入腫瘤的模型中表現(xiàn)出了強(qiáng)大的抗腫瘤效果?？梢娝型蔀樾滦偷目鼓[瘤藥物。1.5具有特殊活性的酶

木霉菌能產(chǎn)生纖維素酶，它可直接作用于纖維素使其斷裂分解為低分子的化合物及葡萄糖等被動(dòng)物所利用，另一方面，纖維素酶可使粗纖維素分解從而可使更多的植物細(xì)胞內(nèi)容物分離出來，提高了這些營養(yǎng)物質(zhì)的消化率。此外，木霉菌還可產(chǎn)生半纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶、果膠酶，這些酶的共同作用可提高對(duì)碳水化合物、蛋白質(zhì)和礦物質(zhì)的消化吸收率，促進(jìn)吸收[1]。1.6食品發(fā)酵

腐乳是我國獨(dú)特的傳統(tǒng)發(fā)酵食品之一，系用豆腐坯經(jīng)毛霉菌培養(yǎng)釀制而成。毛霉菌種的質(zhì)量好壞關(guān)系到腐乳的形狀、色澤滋味及理化質(zhì)量，目前經(jīng)過菌種選育，已獲得一株生長快速、菌絲旺盛、蛋白酶活性強(qiáng)的毛霉菌株，用它制成的接種劑可用于腐乳和臘八生產(chǎn)，其產(chǎn)品質(zhì)量?jī)?yōu)良、穩(wěn)定[2]。此外，常用于腐乳的霉菌還有黑根霉、米曲霉、紅曲霉等[3]。2基因工程

2.1基因工程的涵義

用酶學(xué)方法，將異源基因與載體DNA在體外進(jìn)行重組，將形成的重組子DNA導(dǎo)入宿體細(xì)胞，使異源基因在宿體細(xì)胞中復(fù)制表達(dá)，從而達(dá)到改造生物品種或性狀，大量生產(chǎn)出人類所需要的生物品種和產(chǎn)物。[4]2.2基因工程操作的主要步驟：

（1）采用cDNA文庫人工合成或PCR擴(kuò)增，分離制取目的基因片段（2）采用核酸限制性內(nèi)切酶Ⅱ同時(shí)剪切目的基因和克隆載體

（3）在T1DNA連接酶的作用下將目的基因與基因載體連接而成重組DNA（4）把重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞，并在一起擴(kuò)增而成克隆子（5）標(biāo)記分析和篩選出獲得重組DNA分子的克隆受體細(xì)胞

（6）進(jìn)一步了擴(kuò)增、轉(zhuǎn)化、表達(dá)，最終生成新的優(yōu)良性狀的菌種或人類所需要的產(chǎn)品

2.3基因工程的工具酶

酶在基因工程操作中是不可缺少的工具，在基因工程中應(yīng)用的酶統(tǒng)稱為工具酶。要取得所需的目的基因DNA并與載體DNA連接在一起形成DNA重組體，首先要提供限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶。此外，還有其他工具酶，如T1多聚核苷酸激酶、堿性磷酸酯酶、核酸酶S1、反向轉(zhuǎn)錄酶和末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶等。到目前為止，常用的工具酶已有3000多種。2.4基因工程的載體

目前，在基因工程中應(yīng)用的基因載體主要是質(zhì)粒、病毒和噬菌體。載體的具備以下幾個(gè)性能：

（1）分子較小，可攜帶比較大的ＤＮＡ片段。

（2）能獨(dú)立于染色體而進(jìn)行自主復(fù)制并且是高效的復(fù)制。

（3）要有盡可能多種限制酶的切割位點(diǎn)，但每一種限制酶又要最少的切割位點(diǎn)。（4）有適合的標(biāo)記，易于選擇。

（5）有時(shí)還要求載體要能啟動(dòng)外源基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄及表達(dá)，并且盡可能是高效的表達(dá)。

（6）從安全角度考慮，要求載體不能隨便轉(zhuǎn)移，僅限于在某些實(shí)驗(yàn)室內(nèi)特殊菌種內(nèi)才可復(fù)制等等。3霉菌的基因工程改良 3.1目的基因的制備

3.1.1限制酶法 用限制性內(nèi)切酶消化含有目的基因的外源，使其獲得目的基因,并使之產(chǎn)生粘性或平頭末端 ,以與載體連接。限制酶有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三種類型,常用的為Ⅱ型酶 ,因?yàn)樗刑禺愋宰R(shí)別位點(diǎn) ,切口有規(guī)律 ,只要有鎂離子即可激活,且效率極高。

3.1.2cDNA法 由于真核生物的基因中含有非編碼間隔區(qū) ,在原核生物中無法正常表達(dá) ,必須除去內(nèi)含子。mRNA是經(jīng)轉(zhuǎn) 錄加工過 的RNA,無內(nèi)含子 ,在反轉(zhuǎn)錄酶下,以mRNA為模板合成出互補(bǔ)DNA再加上接頭,即可與載體連接。

3.1.3 PCR擴(kuò)增技術(shù)實(shí)際是體外DNA合成放大技術(shù)。其基本原理是依據(jù)細(xì)胞分裂中DNA合成半保留機(jī)制，及在體外DNA分子于同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉(zhuǎn)變的性質(zhì) ,人為控制體外合成系統(tǒng)的溫度,使雙鏈變成單鏈。單鏈DNA和人工引物退火。以

及在dNTP存在下 ,耐高溫的DNA 聚合酶使引物沿單鏈模板延升雙鏈DNA高溫變性,低溫退火,適溫延升等三步循環(huán)使DNA 擴(kuò)增。

3.1.4鳥槍法 鳥槍法實(shí)質(zhì)上是采用基因工程手段把染色體DNA用限制性內(nèi)切酶切割，將所有的片段都連接到某種載體上，轉(zhuǎn)入大腸桿菌中增值。再用適當(dāng)方法來篩選含該基因的重組體菌落，從重組體細(xì)菌提取DNA，經(jīng)酶切后即可制取該基因。對(duì)真核細(xì)胞基因，因酶切后形成大小不等的成千上萬DNA片段，若采用此法則難于篩選出所需要的基因。因此，可采用凝膠電泳、密度梯度離心法或液相層析等方法。先把DNA片段按大小分成幾個(gè)組，然后，在采用鳥槍法分離目的基因。

3.2選擇適當(dāng)?shù)妮d體 載體是用于傳遞外源DNA序列進(jìn)人宿主細(xì)胞,其本身也為DNA分子。

合適的載體有如下要求：必須能 自我復(fù)制。有可克隆位點(diǎn) ,供外源DNA插人。有可供選擇的遺傳標(biāo)記 ,如抗藥性基因、酶基因、營養(yǎng)缺陷型等。載體應(yīng)盡量小 ,抗剪切力。表達(dá)型載體應(yīng)具備與宿住基因相應(yīng)的啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、前導(dǎo)序列。常用的載體有：質(zhì)粒載體、入噬菌體、粘粒、絲狀噬菌體、病毒載體、酵母人工染色體卡粒載體。

3.3目的基因的體外重組

目的基因的體外重組即將帶有切口的載體與所獲得的目的基因連接起來，得到重新組合后的DNA分子。重組有如下方法：:粘粒末端法 ,且常用雙標(biāo)記法。平頭末端連接法 ,用T4DNA連接法。人工接頭法,其大小應(yīng)為8─12bp。用同聚物接尾法 ,常用cDNA法。

3.3.1粘性末端連接法：當(dāng)載體DNA和目的基因均用同一種限制酶進(jìn)行切斷時(shí)，二者即可帶有相同的粘性末端。如將載體與目的基因混合在一起，二者即可通過粘性末端進(jìn)行互補(bǔ)粘合，再加入DNA連接酶，即可封閉其缺口，得到重組體。較少的情況下，對(duì)產(chǎn)生的平端也可直接進(jìn)行連接。

3.3.2人工接尾法：即同聚物加尾連接法。當(dāng)載體和目的基因無法采用同一種限制酶進(jìn)行切斷，無法得到相同得粘性末端時(shí)，采用此方法。首先使用單鏈核酸酶將粘性末端切平，再在末端核苷酸轉(zhuǎn)移酶的催化下，將脫氧核糖核苷酸添加于載體或目的基因的3'-端，如載體上添加一段polyG，則可在目的基因上添加一段polyC，故二者即可通過堿基互補(bǔ)進(jìn)行粘合，再由DNA連接酶連接。

3.3.3人工接頭連接法：將人工連接器（即一段含有多種限制酶切點(diǎn)的DNA片段）連接到載體和目的基因上，即有可能使用同一種限制酶對(duì)載體和目的基因進(jìn)行切斷，得到可以互補(bǔ)的粘性末端。3.4重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞

重組子構(gòu)建后 ,必須送人宿主細(xì)胞使之發(fā)揮作用 ,常用物理方法、化學(xué)方法和生物方法。其一般過程為：

（1）將細(xì)菌用CaCl2處理，以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性。（2）使含有目的基因的重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞。

（3）目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)，隨其繁殖而復(fù)制，由于細(xì)菌繁殖的速度非?？欤诤芏痰臅r(shí)間內(nèi)就能獲得大量的目的基因。3.4.1物理方法

3.4.1.1基因槍法 該方法是利用一種物理儀器裝置，將鎢、金等金屬微粒加速?zèng)_擊細(xì)胞，把細(xì)胞擊孔，使目的基因進(jìn)入受體。

3.4.1.2電激法 是利用高壓電脈沖的作用對(duì)原生質(zhì)體或細(xì)胞擊出微孔而使基因轉(zhuǎn)移的一種新方法。

3.4.1.3激光微束法，此方法是利用直徑很小、能量很高的激光微束引起細(xì)胞膜可逆性穿孔的原理，在熒光顯微鏡下找出合適的細(xì)胞，然后用激光光源代替熒光光源，聚焦后發(fā)出激光微束脈沖，造成膜穿孔，處于細(xì)胞周圍的外源DNA分子隨之進(jìn)入細(xì)胞。

3.1.4.4超聲波法基本原理：是利用低聲強(qiáng)脈沖超聲波的物理作用，擊穿細(xì)胞膜造成通道，使外源DNA進(jìn)入細(xì)胞。3.4.2化學(xué)方法

3.4.2.1PEG法(聚乙二醇)PEG是細(xì)胞融合劑，它可以使細(xì)胞膜之間或DNA與膜之間形成分子橋，促使相互之間的接觸和粘連；還可以引起膜表面電荷的紊亂，干擾細(xì)胞間的識(shí)別，從而有利于細(xì)胞膜之間的融合和外源DNA進(jìn)入原生質(zhì)體。

3.4.2.2脂質(zhì)體法

脂質(zhì)體是由人工構(gòu)建的磷脂雙分子層組成的膜結(jié)構(gòu)，可將DNA包在其內(nèi)，并通過脂質(zhì)體與原生質(zhì)體的融合或由于原生質(zhì)體的吞噬過程，把外源DNA轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞內(nèi)。3.4.3生物方法

3.4.3.1轉(zhuǎn)化 以質(zhì)粒作載體構(gòu)建的重組體導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程 3.4.3.2轉(zhuǎn)染 以病毒作載體構(gòu)建的重組體導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程 3.4.3.3轉(zhuǎn)導(dǎo) 以噬菌體作載體構(gòu)建的重組體導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程 3.5重組DNA的篩選與鑒定

基因工程的最終目的是通過載體將外源基因?qū)牒线m的宿主細(xì)胞中高效表達(dá)，產(chǎn)生有重要價(jià)值的蛋白質(zhì)產(chǎn)品。

3.5.1克隆基因表達(dá)有三個(gè)條件： ⑴ 基因的編碼區(qū)不能被插入序列中斷

⑵ 基因轉(zhuǎn)錄要有啟動(dòng)子，而啟動(dòng)子必須能被宿主細(xì)胞的RNA聚合酶有效地識(shí)別 ⑶ mRNA必須相當(dāng)穩(wěn)定，并有效地被翻譯，產(chǎn)生的外源蛋白質(zhì)必須不為宿主細(xì)胞的蛋白酶所降解。

3.5.2篩選含重組體的陽性菌落的方法：平板篩選、限制酶切圖譜篩選、PCR篩選重組體、原位雜交技術(shù)。

3.5.2.1平板篩選

平板篩選是指利用載體的遺傳性標(biāo)記在平板上直接篩選的方法。具有抗藥性標(biāo)記的載體，轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞后，能在含抗生素的培養(yǎng)平板上生長；未轉(zhuǎn)化的則不能生長。

(1)插入失活 當(dāng)外源DNA序列插入質(zhì)粒中某一抗藥基因內(nèi)，使該基因失活，轉(zhuǎn)化細(xì)胞就不能生長在含相應(yīng)抗生素的培養(yǎng)平板上。

(2)藍(lán)-白篩選 利用藍(lán)色化合物的形成作為指示劑，篩選帶重組質(zhì)粒的細(xì)菌。當(dāng)外源片段插入到pBS質(zhì)粒的多克隆位點(diǎn)上后會(huì)導(dǎo)致讀碼框架改變,表達(dá)蛋白失活,產(chǎn)生的氨基酸片段失去α-互補(bǔ)能力,含重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化子在生色誘導(dǎo)培養(yǎng)基上只能形成白色菌落。而沒有重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化子產(chǎn)生α-互補(bǔ)，在生色底物X-gal(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)下存在下被IPTG(異丙基硫-β-D-半乳糖苷)誘導(dǎo)形成藍(lán)色菌落。

3.5.2.2原位雜交技術(shù)

原位雜交技術(shù)的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列，將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測(cè)DNA或RNA互補(bǔ)配對(duì)，結(jié)合成專一的核酸雜交分子，經(jīng)一定的檢測(cè)手段將待測(cè)核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來。

3.5.2.3限制酶切圖譜篩選

所謂的限制性酶切圖譜法就是對(duì)載體上插入的外源DNA片段進(jìn)行酶切圖譜分析，并以此與目的基因的已知圖譜對(duì)比，因此利用這種方法不僅能區(qū)分重組子與非重組子，而且還能鑒定目的重組子。但這種方法在用于數(shù)千規(guī)模的轉(zhuǎn)化子篩選時(shí)，工作量極大，實(shí)驗(yàn)成本也高。

4用基因工程獲得抗生素高產(chǎn)菌株的實(shí)例

青霉素G酞化酶活力的提高[5] 青霉素G酞化酶可把青霉素G轉(zhuǎn)化為 6一APA,它是新合成或半合成青霉素的有用原料 ,在抗生素工業(yè)中有著重要作用 ,因大腸桿 菌ATC-CL105菌株可產(chǎn)生青霉素G酞化酶,可將這種酶基因連接于一個(gè)多拷貝質(zhì)粒載體上 ,通過基因測(cè)量應(yīng)提高青霉素G酞化酶活力水平,用裝配型質(zhì)?？寺∠到y(tǒng)進(jìn)行青霉素G酞化酶基因的克隆,ATC-CL105菌株DNA用 ΗindⅢ切開并插人裝配型質(zhì)粒上 ,得到由3000個(gè)克隆組成的ATC-CL105的基因文庫,克隆帶有青霉素G酞化酶基因被生物測(cè)試系統(tǒng)選得 ,文庫的單菌落涂布于含有青霉素G和一株對(duì)6一APA敏感的粘質(zhì)少母氏菌菌株的軟瓊脂上,產(chǎn)生青霉G酞化酶的克隆通過對(duì)敏感性測(cè)試菌抑制 圈來識(shí)別 ,篩選文庫中的 10000個(gè)菌落,獲得一個(gè)陽性克隆,把亞克隆青霉素G酞化酶基因轉(zhuǎn)移于PBR322質(zhì)粒上,該質(zhì)粒在每個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增約50個(gè)拷貝,但酞化酶只增產(chǎn)6倍,大腸桿菌中PBR322質(zhì)粒上的克隆青霉素G酞化酶基因在發(fā)酵條件下使用相當(dāng)穩(wěn)定。

參考文獻(xiàn)：

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第四篇：毛霉菌感染控制措施

毛霉菌感染控制措施

1、做好人員管理

1.1 工作人員管理

醫(yī)院及科室高度重視毛霉菌感染管理工作，多次積極組織對(duì)醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行感染預(yù)防與控制知識(shí)教育及培訓(xùn)，以提高醫(yī)務(wù)人員對(duì)毛霉菌感染預(yù)防和控制的認(rèn)識(shí)，確保醫(yī)務(wù)人員掌握正確有效的預(yù)防和控制措施。同時(shí)組織科室內(nèi)護(hù)工及保潔人員進(jìn)行毛霉菌感染控制相關(guān)知識(shí)教育，以使每一名ICU內(nèi)工作人員認(rèn)識(shí)到毛霉菌的危害及應(yīng)對(duì)措施，更好地開展毛霉菌感染控制工作。對(duì)毛霉菌感染病人固定管床護(hù)士，非管床的工作人員盡量減少進(jìn)出隔離病室。入隔離病室工作人員要求戴口罩、帽子、手套，穿ICU專用鞋，做好消毒隔離工作。

1.2 病人管理

為了切斷傳播途徑，防止毛霉菌在病人、工作人員中擴(kuò)散，感染病人盡量入住單間病房，將其與非毛霉菌感染病人分開，做好隔離措施，在標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防基礎(chǔ)上實(shí)施嚴(yán)密的床旁接觸隔離，病人臨床癥狀好轉(zhuǎn)或治愈，連續(xù)2次培養(yǎng)結(jié)果陰性(每次間隔>24 h)方可解除隔離。對(duì)病人積極治療原發(fā)病，增強(qiáng)抵抗力，以減少感染毛霉菌的幾率。

1.3 探視人員的管理

探視人員每日在病室外專用探視通道隔玻璃窗探視病人，盡量減少不必要的室內(nèi)訪客探視。入室探視的訪客應(yīng)穿專用的清潔隔離衣，穿鞋套或ICU內(nèi)專用鞋，戴好口罩，探視時(shí)盡量避免接觸病人及周圍物品，入室探視前和結(jié)束探視離開病房時(shí)，應(yīng)洗手或用快速手消毒液擦拭消毒雙手。

2、加強(qiáng)環(huán)境管理

科室規(guī)范病房結(jié)構(gòu)，設(shè)立單間為毛霉菌感染病人的隔離病室，病室每日上下午至少各開窗通風(fēng)1次，病室內(nèi)使用動(dòng)態(tài)空氣消毒機(jī)，2 h～4 h定時(shí)對(duì)房間進(jìn)行換氣及空氣消毒，保證空氣質(zhì)量[10]。門窗、物體表面儀器設(shè)備表面每日用1 000 mg/L含氯消毒液濕式清潔，保持墻面和門窗無塵，有血跡或體液污染時(shí)應(yīng)立即用1 000 mg/L含氯消毒劑擦拭消毒。病室內(nèi)地面每日用含氯消毒劑拖地3次或4次，污染時(shí)及時(shí)清理。病床、床旁桌、床頭柜、治療車等每日用含氯消毒劑擦拭消毒兩遍，使用過的抹布、拖布用1 000 mg/L含氯消毒液浸泡2小時(shí)以上再清潔晾干。儀器設(shè)備專人專用，如呼吸機(jī)、血糖儀等固定。公用物品避免進(jìn)入隔離房間，物品一旦進(jìn)入此房間，需經(jīng)過消毒處理(1 000 mg/L含氯消毒劑)后方可拿出。呼吸機(jī)、監(jiān)護(hù)儀每日清洗過濾網(wǎng)，用75%乙醇擦拭按鈕及表面用含氯制劑擦拭外殼;微量泵、聽診器、血糖儀等每日用75%乙醇擦拭消毒。一次性物品嚴(yán)格一次性使用，用后按感染性醫(yī)療廢物分類處理。

3、加強(qiáng)醫(yī)療護(hù)理操作流程管理

3.1 加強(qiáng)接口流程管理

本組7例病人為ICU外帶入的毛霉菌感染，經(jīng)過積極的搶救治療后3例病人病情好轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)出ICU回普通病房。為了防止轉(zhuǎn)運(yùn)過程導(dǎo)致毛霉菌的傳播，制訂了特殊感染病人接口流程管理規(guī)程，要求收到病人即將轉(zhuǎn)入的通知，接聽電話者詢問清楚病人目前的基本狀況，有無特殊事項(xiàng)(如有無特殊感染，是否需要準(zhǔn)備搶救儀器設(shè)備等)。本組病人經(jīng)細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為毛霉菌感染后，立即選擇單間病房，備好用物，通知管床護(hù)士做好迎接準(zhǔn)備。病人到達(dá)ICU病房后以ICU專用對(duì)接車接病人入住隔離病房，對(duì)接車上鋪一次性床單，使用后取下床單，按感染性醫(yī)療廢物處理。與病房護(hù)士做好病人病情、治療、護(hù)理交接，床頭掛隔離標(biāo)識(shí)牌，病歷上貼“隔離”字樣。病人轉(zhuǎn)出ICU前通知病房做好迎接準(zhǔn)備，以ICU專用對(duì)接車護(hù)送病員回病房，并做好交接。

3.2 加強(qiáng)消毒隔離及無菌技術(shù)，嚴(yán)格手衛(wèi)生

對(duì)毛霉菌感染病人，在標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防的基礎(chǔ)上實(shí)施接觸隔離，同時(shí)，因空氣中的毛霉菌孢子也可經(jīng)過吸入導(dǎo)致感染，故應(yīng)注意呼吸道隔離。在診療護(hù)理操作過程中嚴(yán)格遵守?zé)o菌技術(shù)操作規(guī)程，特別是行中心靜脈置管、氣管插管、氣管切開、留置尿管等操作時(shí)，應(yīng)當(dāng)避免污染，減少感染的危險(xiǎn)，對(duì)留置深靜脈導(dǎo)管、留置尿管、氣管插管或機(jī)械輔助通氣者嚴(yán)格按三管感染控制要求處理。醫(yī)務(wù)人員的手衛(wèi)生是預(yù)防和控制醫(yī)院感染最簡(jiǎn)單和最有效的環(huán)節(jié)[11]。要求直接接觸病人前后，進(jìn)行清潔或侵入性操作前，接觸病人體液或分泌物后，接觸病人使用過的物品后，從病人的污染部位轉(zhuǎn)到清潔部位實(shí)施操作時(shí)，嚴(yán)格實(shí)施手衛(wèi)生。隔離病室內(nèi)設(shè)有獨(dú)立的洗手設(shè)施，床旁配備快速手消毒液，以增加醫(yī)務(wù)人員洗手的依從性。手上有明顯污染時(shí)應(yīng)洗手;無明顯污染時(shí)可使用快速手消毒液擦手或洗手。進(jìn)行操作時(shí)可戴一次性袖套及手套，以減少手臂及手的污染，完成診療護(hù)理操作，離開房間前必須及時(shí)脫去袖套及手套至黃色垃圾袋中，再洗手或用快速手消毒液進(jìn)行手消毒。

3.3 合理使用抗菌藥物

遵醫(yī)囑合理使用抗生素，減少耐藥菌的產(chǎn)生。掌握藥代動(dòng)力學(xué)知識(shí)，自覺按規(guī)定時(shí)間給藥，保證病人的有效血藥濃度，以最大限度提高抗生素的使用效果，防止耐藥菌的產(chǎn)生[12]。

3.4 加強(qiáng)醫(yī)療廢物管理

醫(yī)療廢物嚴(yán)格分類收集，日產(chǎn)日清。處理醫(yī)療廢物時(shí)做好個(gè)人防護(hù)，防止污液污染操作者和發(fā)生銳器傷。針頭、刀片等利器放入銳器盒內(nèi)，注明標(biāo)記，輸液管路、敷料分別放入室內(nèi)雙層醫(yī)用垃圾袋中，外貼“隔離”標(biāo)志，以感染性醫(yī)療廢物送焚燒或無害化處理。

3.5 加強(qiáng)終末處理

嚴(yán)格的終末消毒處理是防止毛霉菌傳播最有效的措施之一，有效的終末處理能去除及殺死殘留在儀器設(shè)備、物體表面、及空氣中的毛霉菌，防止毛霉菌的繼續(xù)傳播。實(shí)施終末處理人員做好個(gè)人防護(hù)，戴口罩、帽子、手套、穿隔離衣。拆除病室內(nèi)床單元布類及窗簾，用雙層塑料袋封裝，注明名稱、數(shù)量及“隔離”標(biāo)志，送洗漿房處理。一次性醫(yī)療廢物(吸氧管、吸痰管等)及醫(yī)用垃圾以雙層黃色塑料袋封裝，外貼“隔離”標(biāo)志，以感染性醫(yī)療廢物處理。監(jiān)護(hù)儀、呼吸機(jī)等醫(yī)療儀器嚴(yán)格消毒處理，呼吸機(jī)管道一次性使用，污染管道以感染性醫(yī)療廢物處理，濕化罐、螺紋管高壓滅菌。床單位周圍物體表面擦拭消毒，地面以1 000 mg/L含氯制劑清掃;床墊、被褥、枕芯以移動(dòng)式三氧消毒機(jī)消毒30 min以上;關(guān)閉門窗、空調(diào)及換氣扇，以三氧消毒機(jī)行病室空氣消毒2 h，后通知感染科行終末消毒后細(xì)菌學(xué)監(jiān)測(cè)，監(jiān)測(cè)內(nèi)容包括病室內(nèi)物體表面，醫(yī)療儀器表面。地面及空氣菌落數(shù)量等，監(jiān)測(cè)結(jié)果陰性才可收治其他病人。做好監(jiān)測(cè)登記工作

積極留取標(biāo)本開展毛霉菌監(jiān)測(cè)，以及時(shí)發(fā)現(xiàn)，早期診斷，采取有效的治療和感染控制措施。對(duì)隔離期間的病人定期進(jìn)行監(jiān)測(cè)，直至臨床癥狀好轉(zhuǎn)或治愈。建立毛霉菌感染病人登記本，做好記錄，內(nèi)容包括病人姓名、年齡、病案號(hào)、診斷、簡(jiǎn)要病史、臨床診治經(jīng)過、結(jié)果以及感染菌種、藥敏試驗(yàn)結(jié)果、感染控制措施及結(jié)果等

第五篇：食品加工廠霉菌污染及其控制措施

食品加工廠霉菌污染及其控制方法

在食品加工過程中“微污染源”很多，如何防止食品被污染乃是一重要課題。霉菌作為為微污染源中的一種，如果不加以控制勢(shì)必會(huì)影響到食品質(zhì)保期的長短，那又如何控制霉菌污染食品呢？

殺菌消毒專家周立法先生認(rèn)為：控制霉菌污染，首先要了解霉菌的生長環(huán)境、污染食品的條件。在此基礎(chǔ)上，方可以提出合理的防控措施，提高食品衛(wèi)生質(zhì)量。

一、霉菌的生長環(huán)境

1、生產(chǎn)車間的墻壁，比較潮濕部位容易生長霉菌。

2、加工設(shè)備存在冷凝水的管路、機(jī)殼等容易生長霉菌，3、空氣中所包含的水蒸氣，在冷凝、液化時(shí)最容易產(chǎn)生霉菌，如車間中溫度最低的 部位，含天花板、地面、設(shè)備表面、墻面等溫度低的部位，4、車間內(nèi)無法保證正常換氣，無法讓車間濕度保持在55%情況下時(shí)，容易生長霉菌。

5、車間忽冷忽熱，容易產(chǎn)生冷凝水的地方，容易遭到霉菌侵害。

6、離墻近的設(shè)備、制冷風(fēng)機(jī)容易產(chǎn)生冷凝水，容易產(chǎn)生霉菌。

7、溫度相對(duì)較低的車間速凍庫門，請(qǐng)一直保持關(guān)閉狀態(tài)。如果這些溫度較低車間的 門沒有關(guān)閉的話，那么旁邊車間傳過來的熱空氣涌進(jìn)行，就形成很高的濕度，從而在空 氣冷卻的時(shí)候形成液化，容易生長霉菌。

8、車間的空調(diào)系統(tǒng)、凈化管道系統(tǒng)等，其自身容易產(chǎn)生霉菌。

二、霉菌的生長習(xí)性

與霉菌的生長繁殖關(guān)系密切的有水份、溫度、基質(zhì)、通風(fēng)等條件，為此，只有充分的了解霉菌的生長習(xí)性，才能為下一步控制霉菌提供理論依據(jù)。

1、水份 霉菌生長繁殖主要條件之一是必須保持一定的水份，當(dāng)食品中的水分活性值為0.98時(shí)，霉菌最易生長繁殖；當(dāng)水分活性值降為0.93以下時(shí)，霉菌繁殖受到抑制，但依然仍能生長；當(dāng)水分活性值在0.7以下時(shí)，霉菌的繁殖受到真正的抑制，可以阻止產(chǎn)毒的霉菌繁殖。

2、溫度 溫度對(duì)霉菌的繁殖及產(chǎn)毒均有重要的影響，不同種類的霉菌其最適溫度是不一樣的，大多數(shù)霉菌繁殖最適宜的溫度為25～30℃，在0℃以下或30℃以上，不能產(chǎn)毒或產(chǎn)毒力減弱。如黃曲霉的最低繁殖溫度范圍是6-8℃，最高繁殖溫度是44～46℃，最適生長溫度37℃左右。但產(chǎn)毒溫度則不一樣，略低于生長最適溫度，如黃曲霉的最適產(chǎn)毒溫度為28-32℃。

3、食品基質(zhì) 與其它微生物生長繁殖的條件一樣，不同的食品基質(zhì)霉菌生長的情況是不同的，一般而言，營養(yǎng)豐富的食品其霉菌生長的可能性就大，天然基質(zhì)比人工培養(yǎng)基產(chǎn)毒為好。

三、霉菌污染食品的條件

1、通過包材的污染，如包裝或罐裝食品的包裝袋、包裝瓶、瓶蓋等，若殺菌不徹底，則其殘留的霉菌素則會(huì)直接污染食品。

2、空氣中霉菌的二次污染，如空氣中滋生的霉菌、人員走動(dòng)時(shí)地面揚(yáng)塵中含有的細(xì)菌、空調(diào)或新風(fēng)管道中吹出的細(xì)菌等。

3、操作人員自身的二次污染，如手部消毒不徹底、不潔凈衣物接觸食品等。

4、設(shè)備、容器，生產(chǎn)環(huán)境的交叉感染，如設(shè)備、容器清洗消毒不徹底，不按規(guī)定流程定期清洗等、消毒液選用不當(dāng)或使用劑量不夠，生產(chǎn)車間的墻壁天花板的本身的霉菌殘留等

四、霉菌的控制措施

1、首先要保持生產(chǎn)車間的內(nèi)部環(huán)境的清潔和衛(wèi)生，注意對(duì)一些衛(wèi)生死角進(jìn)行嚴(yán)格 的衛(wèi)生清理和保持（每半月實(shí)施一次深度清潔）：如操作案面的背面，天花板、墻壁、制冷風(fēng)機(jī)的衛(wèi)生清理，清理衛(wèi)生后所有的墻壁、天棚、設(shè)備、器具、案面表面要用酒精 擦兩遍以上，尤其注意清理制冷風(fēng)機(jī)的散熱片和冷氣的出風(fēng)口以及內(nèi)部電機(jī)葉片，這是 一個(gè)很容易忽視的角落。據(jù)泰日得涂料科技有限公司的外聘的專家工程師Mr.hanksen介 紹：若有條件的廠家，建議車間的天花板及墻壁采用泰日得防霉涂料，做好防霉的同時(shí)簡(jiǎn)單 易清洗（高壓水槍直接清洗）從環(huán)境上防霉抑霉，杜絕環(huán)境的霉菌二次污染。

2、對(duì)生產(chǎn)車間霉菌有控制，首先必須控制車間的溫度和濕度，溫度在24度以下，濕度在55％以下，因?yàn)檫^高的溫濕度會(huì)促進(jìn)霉菌的生長。

3、在生產(chǎn)時(shí)，采用NICOLER動(dòng)態(tài)空氣消毒設(shè)備對(duì)空氣消毒,此設(shè)備可以在有人的情 況下對(duì)生產(chǎn)車間進(jìn)行消毒，代表性企業(yè)為上?？稻铆h(huán)?？萍加邢薰荆袌?chǎng)占有率高達(dá) 80%。晚上工人下班后采用臭氧或紫外線對(duì)空氣消毒，防止空氣中滋生細(xì)菌累加到白天 造成對(duì)產(chǎn)品不利，因?yàn)橐粋€(gè)細(xì)菌在24小時(shí)內(nèi)會(huì)繁殖成百上千甚至上百萬細(xì)菌。

4、每天班前、班后對(duì)車間內(nèi)部墻壁、風(fēng)機(jī)、下水道、案面、手部、圍裙套袖、預(yù) 冷庫和庫門、速凍庫門、包裝室、工器具消毒間使用75%的酒精噴灑消毒，班中每2小 時(shí)對(duì)風(fēng)機(jī)、墻壁、下水道實(shí)施75%的酒精噴灑，殺滅霉菌。

5、人員的工作服、更衣室等，必須保持衛(wèi)生清潔，定期清洗和進(jìn)行紫外線或臭氧 殺菌30分鐘以上，防止人為造成霉菌的交叉污染（不可在有人情況下殺菌）。

6、保證車間風(fēng)機(jī)的正常運(yùn)轉(zhuǎn)，保證車間內(nèi)部空氣能夠達(dá)到要求指標(biāo)，空調(diào)的換氣 程度好壞直接影響到霉菌的產(chǎn)生。如果車間能保證及時(shí)將含有大量水份的空氣排出車 間，則極大程度縮小了可能存在霉菌的可能性。據(jù)上?？稻孟炯夹g(shù)有限公司安全工程 師Mr.hanksen介紹：若有條件的廠家，建議在新回風(fēng)管道內(nèi)安裝動(dòng)態(tài)殺菌裝置，防止 管道內(nèi)壁、過濾器及空調(diào)表冷器滋生細(xì)菌，給食品安全形成衛(wèi)生隱患。