第一篇:HIV抗體快速檢測程序
HIV抗體快速檢測程序
目的:用于人對血清HIV抗體檢測,用于HIV感染的輔助診斷。監(jiān)測血液篩查。同時規(guī)范本檢測點抗體快速檢測的方法。保證檢測質(zhì)量和工作有序進行。
適用范圍
適用于本艾滋病檢測點篩查實驗室、檢測方法
8.1撕開HIV1+2檢測板包裝袋,取出檢測板水平放置于實驗臺。8.2在S加樣孔中滴2——3滴血清或血漿,不再加稀釋液。8.3在15——30分鐘內(nèi)觀察結(jié)果,超時需重新檢測。
9、檢測結(jié)果判斷
9.1陽性:出現(xiàn)質(zhì)控線和任意一條或兩反應(yīng)線均為陽性。9.2陰性:僅在質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)一條紅線,則實驗結(jié)果為陰性。9.3無效:無質(zhì)控紅線,或只有反應(yīng)線,檢測無效。須重新檢測。樣品同時標記編號及姓名保存,準確記錄信息。質(zhì)量控制
13.3檢測樣品不得溶血、混濁、污染。不符合優(yōu)良標本應(yīng)重新采樣。13.4試劑如帶質(zhì)控品,起用前按要求做陽性、陰性質(zhì)控對照,并做質(zhì)控記錄。
13.5每批試劑盒的購進、廠家、批號、效期及使用、保存數(shù)據(jù)均應(yīng)有詳細原始記錄。
第二篇:2009HIV抗體檢測工作總結(jié)
2009HIV抗體檢測工作總結(jié)
一年來,我們一如既往的認真貫徹和落實《中國預(yù)防和控制艾滋病中長期規(guī)劃(1998-2010)》。HIV抗體檢測工作嚴格遵照《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》(2004年版)和《江蘇省艾滋病檢測工作管理辦法》認真執(zhí)行。3月份對臨床醫(yī)生進行了醫(yī)療安全教育和個人防護培訓,對護理人員進行標本采集和個人防護講座,保證了分析前質(zhì)量控制,確保了HIV篩查實驗室的檢驗質(zhì)量,防范了醫(yī)療糾紛。應(yīng)臨床需要,HIV抗體檢測工作從每周1次增加為每周2次,為患者和臨床提供了更及時的服務(wù)。
今年,我院共檢測HIV抗體標本1381份,比去年增加了50%。門診免費檢測168人,檢出1例HIV抗體待復(fù)查標本,均按程序上報市疾控中心。參加了省臨檢中心傳染病質(zhì)控,成績合格。著重強調(diào)個人防護,全年無職業(yè)暴露事件發(fā)生。
艾滋病問題是全世界面臨的重大公共衛(wèi)生問題和社會問題,在下一個工作階斷,我們要繼續(xù)做好HIV抗體的質(zhì)量控制,防止漏檢漏報;加強宣傳教育,提高檢測覆蓋面,防止艾滋的漫延。
泗洪縣人民醫(yī)院HIV篩查實驗室
2009-9-25
第三篇:HIV抗體初篩檢測程序
梅縣區(qū)慢性病防治院作業(yè)指導書
文件編號:MXMBY/W66-001 標題:HIV實驗室各項規(guī)章制度及標準操作規(guī)程
版號:第 1 版
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HIV抗體初篩檢測程序
1.實驗準備:試驗開始前將試劑和樣品放置在室溫,按實驗室SOP或者試劑說明書做好試劑準備。
2.實驗操作(以華大吉比愛生物技術(shù)公司的Anti-HIV 1+2 Antibody ELISA Kit 為例):
a 取出HIV抗原包被板。每次試驗設(shè)空白對照1孔,陰、陽性對照2孔。除空白對照外,分別加入HIV陰、陽性對照各50微升,其余孔加入待檢血清各50微升。貼上封口膠,置37℃溫育30分鐘
b 將50倍濃縮液用純化水50倍稀釋后備用
c 棄去各孔中樣品、拍干。每孔加滿洗液,靜置數(shù)秒后棄去,如此重復(fù)洗5次,拍干。
D 除空白孔外,每孔加入酶標抗原工作液50微升,貼上封口膠。37℃溫育20分鐘。
e 棄去各孔中酶液,用洗液反復(fù)洗滌5次(操作同步驟3)f 每孔加入底物液A 50微升,再加入底物液B 50微升,輕拍混勻,置37℃避光顯色10分鐘
g 顯色完畢后,每孔加入終止液50微升,輕拍混勻,立即以空白孔調(diào)零,置酶標儀450nm波長處測定OD值(參考波長為630nm)3.結(jié)果報告:對呈陰性反應(yīng)的樣品,可由初篩實驗室出具HIV抗體陰性報告;對呈陽性反應(yīng)的樣品,須進行復(fù)查,不能出陽性報告,可出具“HIV抗體待復(fù)查”報告。梅縣區(qū)慢性病防治院作業(yè)指導書
文件編號:MXMBY/W66-001 標題:HIV實驗室各項規(guī)章制度及標準操作規(guī)程
版號:第 1 版
1/2 4.復(fù)檢試驗:對初篩呈陽性反應(yīng)的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復(fù)檢測。
5.復(fù)檢報告:兩種試劑復(fù)測均呈陰性反應(yīng)的,則出具HIV抗體陰性;均呈陽性反應(yīng)或者一陰一陽的,需送艾滋病確認實驗室進行確認。
第四篇:HIV抗體檢測質(zhì)量控制技術(shù)培訓班小結(jié)
泰州市疾病預(yù)防控制中心
HIV抗體檢測質(zhì)量控制技術(shù)培訓班小結(jié)
為進一步加強我市艾滋病篩查實驗室的質(zhì)量管理,提高各艾滋病篩查實驗室的檢測工作能力,經(jīng)報請市衛(wèi)生局同意,市疾病預(yù)防控制中心于2011年9月16日至17日在泰州市丁山酒店舉辦了HIV抗體檢測質(zhì)量控制技術(shù)培訓班。
參加會議的人員包括:各艾滋病篩查實驗室及擬申請建立艾滋病篩查實驗室的實驗室負責人及具體負責艾滋病檢測的專業(yè)人員各一人、泰州市疾病預(yù)防控制中心相關(guān)專業(yè)技術(shù)人員共計90名。其中高級職稱人員12人、中級職稱人員67名,初級職稱人員11人;研究生學歷6人、本科學歷65人、大專及以下學歷19人。
培訓班由市疾控中心副主任熊國華主持,市衛(wèi)生局疾控處許春林處長就舉辦本次培訓班的意義和重要性做了講話,熊國華副主任對全市的艾滋病篩查實驗室在過去的一年中的基本運行情況進行了簡要的總結(jié)。對新批準的4家篩查實驗室頒發(fā)了艾滋病篩查實驗室檢測質(zhì)資證書。
培訓班的主要課程為省疾控中心艾滋病檢測確證中心實驗室徐曉琴主任、微檢科副科長(主管技師)張俊嶺、性艾科副科長(主管醫(yī)師)朱中奎、微檢科(主管技師)魏愛旺、市疾控中心微檢科科長(副主任技師)馬智龍分別做了擴大檢測,預(yù)防艾滋;2011全市艾滋病篩查實驗室督導情況通報及艾滋病篩查實驗室檢測工作質(zhì)量考核情況通報;江蘇省艾滋病疫情及流行趨勢;艾滋病檢測實驗室SOP文件的編制及管理;梅毒實驗室建設(shè)等內(nèi)容的講課。
全體參加培訓的人員最后進行了統(tǒng)一考試,考試結(jié)果均合格。
第五篇:HIV快速檢測實驗室
HIV初篩實驗室操作規(guī)范
(一)一、抽 血 標 準 操 作 規(guī) 程
1、適 用 范 圍
需做血液檢測的對象。
2、試 劑 與 材 料
碘酒、酒精棉、棉簽、橡皮止血帶、注射器(一次性采血器)、試管、止血棉。
3、操 作 步 驟
3.1 核對被檢者姓名并標價試管;
3.2 請被檢者入座,伸出手臂放在采血墊上;
3.3 用橡皮止血帶扎緊并請被檢者握緊拳頭;
3.4 選擇靜脈,用碘酒棉在采血部位由里向外擦拭(直徑約6cm左右)消毒;
3.5 用酒精棉脫碘;
3.6 把一次性注射器(一次性采血器)打開,在采血部位穿刺靜脈,抽取血液;
3.7 放松橡皮止血帶,拔出針頭,同時請被檢者用止血棉壓迫止血。
二、酒 精 棉 球 的 制 備 1.試劑與材料
無水乙醇(分析純)、消毒蒸餾水若干、消毒量筒(1000ml)、消毒盛器 2.操作步驟
2.1 把消毒棉放入消毒盛器中待用。
2.2 取165ml消毒蒸餾水到入消毒好的量筒中,再加入一瓶500ml無水乙醇充分 混勻。2.3 把配好的75%酒精到入放有消毒棉的盛器中
三、樣品的采集和處理.范圍
本章規(guī)定了用于艾滋病病毒(HIV)檢測的血清、漿和全血樣品的采集和處理方法,適用于HIV抗體檢測、抗原檢測、核酸檢測、CD4+/CD8+T淋巴細胞測定和HIV分離培養(yǎng)。.操作步驟.1 樣品的采集和處理
艾滋病檢測最常用的樣品是血液,包括血清、血漿和全血。唾液或尿液有時也可作為測試樣品。常用的血液樣品的采集和處理方法如下: 2.1.1血清樣品采集和處理
2.1.1.1 用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量靜脈血,室溫下自然放置1~2小時,待血液凝固、血塊收縮后再用3、000r/min離心15min,吸出血請備用。
2.1.1.2如用濾紙片采樣,則手指或耳垂局部嚴格按常規(guī)進行消毒,在刺破皮膚,迅速把濾紙片沾上,切勿讓血液滴落在其它物體表面造成污染。采血后要待血樣干燥后再包裝送檢。
2.1.2 抗凝血樣品采集和處理
2.1.2.1用加有抗凝劑的真空采血管(或一次性注射器抽去靜脈血,轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管),反復(fù)輕搖,分離血漿和血細胞備用。
2.1.2.2應(yīng)根據(jù)實驗要求選用適當?shù)目鼓齽?,如CD4+/CD8+T淋巴細胞測定可選用K3EDTA或肝素或檸檬酸鈉,HIV病毒分離、核酸定性/定量檢測可選用K3EDTA或枸櫞酸鈉。
2.1.2.3用于核酸定性檢測時,采集的抗凝全血應(yīng)在4~8h內(nèi)分離PBMC和血漿,否則應(yīng)在24~48h內(nèi)分離血漿和血細胞。(病毒載量測定不同方法對樣品的要求見第四章4.1中表2;CD4+/CD8+T淋巴細胞測定樣品采集要求見第五章4.1。)2.1.3 采集樣品注意事項
2.1.3.1采集樣品原則上應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范操作(試劑盒有特殊要求)。
2.1.3.2采集樣品時應(yīng)注意安全,建議采用真空采血管及蝶形針具,以避免直接接觸血液;直接接觸HIV感染者/艾滋?。ˋIDS)病人血液/體液的操作,應(yīng)帶雙層手套。2.2 樣品的保存
2.2.1 用于抗體檢測的血清或血漿樣品,應(yīng)存放于-20度以下,短期(1周)內(nèi)進行檢測的樣品可存放于2-8度。
2.2.2用于抗原和核酸檢測的血漿和血細胞樣品應(yīng)凍存于-20以下,進行病毒RNA檢測的樣品如需保存3個月以上應(yīng)置于-80度。
2.2.3 用于CD4+/CD8+T淋巴細胞測定的樣品不能長期保存,樣品采集時間超過48h則不可檢測。2.3 樣品的運送
2.3.1 實驗室間傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿,除特殊情況外一般不運送全血。2.3.2應(yīng)采用WHO提出的三級包裝系統(tǒng)
2.3.2.1 第一層容器:裝樣品,要求防滲漏。樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi),試管上應(yīng)有明顯的標記,標明樣品的編號或受檢者姓名、種類和采集時間。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料,以免碰碎。隨樣品應(yīng)附有送檢單,送檢單應(yīng)與樣品分開放置。
2.3.2.2 第二層容器:要求耐受性好、防滲漏、容納并保護第一層容器,可以裝若干個第一層容器。將試管裝入專用帶蓋的容器內(nèi),容器的材料要易于消毒處理。
2.3.2.3 第三層容器:放在一個運輸用外層包裝內(nèi),應(yīng)易于消毒。在第三層容器外面要貼標簽(數(shù)量,收、發(fā)件人)。
2.3.3 血清和血漿樣品應(yīng)在2~8度條件下由專人運送。用于CD4+/CD8+T淋巴細胞測定的樣品應(yīng)在室溫下18~23度運送。每一包裝的體積以不超過50ml為宜。2.3.4 運送感染性材料必須有記錄。
2.3.5 如分離血漿仍有困難,可直接將抗凝血-20度以下凍存,采用冰壺冷藏運輸,避免凍融。
2.3.6 特殊情況下如需對個別樣品進行復(fù)測,可以用特快專遞形式投寄,但必須按三級包裝系統(tǒng)將盛樣品的試管包扎好,避免使用玻璃容器,以保證不會破碎和溢漏。2.4 樣品的接收
2.4.1 含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實驗室內(nèi)由經(jīng)過培訓的、穿戴防護衣的工作人員打開,用后的包裹應(yīng)進行消毒。
2.4.2 核對樣品與送檢單,檢查樣品管有無破損和溢漏。如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出,對樣品管和盛器消毒,同時報告有關(guān)領(lǐng)導和專家。
2.4.3 檢查樣品的狀況,記錄有無嚴重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況。如果污染過重或者認為樣品不能被接受,則應(yīng)將樣品安全廢棄。并要將樣品情況立即通知送樣人。
2.4.4 打開標本容器時要小心,以防內(nèi)容物潑濺。樣品處理時若內(nèi)容物有可能濺出,則應(yīng)在生物安全柜中戴手套進行。同時應(yīng)戴口罩、防護眼鏡,以防皮膚或粘膜污染。2.4.5 因特殊臨床治療導致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測試。2.4.6 接受樣品時應(yīng)填寫樣品接受單。
四、電 熱 恒 溫 水 浴 箱 操 作 規(guī) 程 1.概 述:
本電熱恒溫水浴箱主要用于科研單位、醫(yī)療單位及化驗所檢查化驗病理血清等用。2.技術(shù)性能:
工作環(huán)境:常溫常壓條件下正常工作。
技術(shù)指標:溫度調(diào)節(jié)范圍:37℃~65℃
溫度波動: ±
1℃
溫度均勻性: ± 1℃ 3.使用方法:
3.1使用是必須加入溫水,可縮短加熱時間和節(jié)約用電。3.2打開電源開關(guān),電源指示燈亮表示電源接通。
3.3旋轉(zhuǎn)恒溫控制器旋鈕,加熱指示燈亮表示電源接通,當溫度表上的溫度達到所需使用的溫度時,將恒溫控制器的旋鈕調(diào)整在恒溫指示燈忽亮忽熄點,待數(shù)分鐘后即能自動恒溫控制。
3.4恒溫控制器的刻度,僅可作溫度對照指示,并非溫度指示刻度。4.點檢程序:
4.1 為保證水浴箱溫度的 準確性必須每日使用溫度計測量水浴箱內(nèi)水溫,并做好日溫度記錄。
4.2每半年由設(shè)備科檢測校正一次,且附有原始記錄。5.注意事項:
5.1箱外殼必須有效接地。
5.2在未加水前,切勿開電源,以防止電熱管內(nèi)的電熱絲燒壞。5.3非必要時,請勿拆開右冊蓋板,以利安全。
文縣婦幼保健站