第一篇：制藥質(zhì)量總結(jié)樣板（定稿）

第一部分 2017工作總結(jié)

一、成績

1、QA團隊管理

2017年QA團隊由年初4人增加到6人。

2、體系管理

2017年結(jié)合公司ISO9001由2008升級到2015，重新修訂和完善公司質(zhì)量管理體系文件。

3、審計管理

2017年接受管理評審、內(nèi)部審核、認證審核、監(jiān)督審核和客戶審核56次。

4、產(chǎn)品質(zhì)量改進/產(chǎn)品質(zhì)量回顧 2017年完成公司36種產(chǎn)品質(zhì)量回顧。

5、放行管理

2017年完成50種物料，30000批次放行；36種中間產(chǎn)品1800批次產(chǎn)品放行；36種產(chǎn)品3600批次放行。

6、驗證管理

2017年完成年初既定的20項驗證項目。

7、生產(chǎn)過程監(jiān)控

2017年按照公司要求完成所有的監(jiān)控項目。

8、偏差/投訴管理

2017年共完成偏差調(diào)查報告20份，其中設備管理方面4份、生產(chǎn)過程5份，其他11份。

9、供應商管理

2017年按照年初計劃完成供應商審計42家。

10、召回/追溯管理

2017年完成模擬召回和追溯演練20批次。

11、變更管理

2017年完成變更16項，其中物料變更2項、設備設施變更7項，其他7項。

12、培訓

2017年按照年初計劃，完成42項培訓。

13、法規(guī)/標準管理

2017年收集和識別法律法規(guī)12項目，并將其轉(zhuǎn)化為公司相關文件并實施。

14、計量管理

2017年新成立計量室后，按照國家相關計量法規(guī)對公司計量器具進行管理，其中送外檢62次，內(nèi)部校驗260次。

15、其他

配合公司其他部門完成相關工作。

二、不足

1、QA團隊成員知識和能力略顯不足

2、計量管理與技能不足

3、驗證管理知識欠缺

4、偏差管理不足

三、改進

1、針對QA人員職責和知識水平，制定和實施相關知識培訓。

2、加外部計量管理知識和技能培訓

3、參加外部驗證和偏差管理培訓

第二部分 2018工作計劃 1、2018年管理評審、內(nèi)部審核（自檢）計劃 2、2018年體系轉(zhuǎn)版計劃 3、2018年驗證計劃 4、2018年供應商審計計劃 5、2018年項目變更計劃 6、2018年質(zhì)量培訓計劃 7、2018年檢定/校驗計劃 8、2018年產(chǎn)品質(zhì)量改進計劃

第二篇：仿制藥質(zhì)量一致性評價專題培訓總結(jié)

仿制藥質(zhì)量一致性評價專題培訓總結(jié)

鄭鵬博

二〇一六年一月二十五日

參加2016年1月23日至24日由陜西藥學會及藥檢所組織的《仿制藥質(zhì)量一致性評價專題》聘請國內(nèi)專家謝沐風、陳悅、涂家生等就當下最熱門仿制藥一致性評價內(nèi)容進行講讀，兩天的培訓隊仿制藥一致性工作開展及政策要求有了一定認識，為下一步藥廠與科研對產(chǎn)品工作開展有了較好的前期接入基礎?，F(xiàn)對培訓內(nèi)容總結(jié)如下：

仿制藥評價工作內(nèi)容：

仿制藥按與原研藥質(zhì)量和療效一致的原則受理和審評審批。

全面提高仿制藥質(zhì)量，對2007年注冊管理辦法前批準的仿制藥，國家基本藥物目錄（2012年版）化學藥品仿制藥口服固體制劑，應在2018年底之前完成一致性評價，屆時沒有通過評價的，注銷藥品批準文號。對2007年以前批準上市的其他仿制藥品和2007年以后批準上市的仿制藥品，自首家品種通過一致性評價后，其他生產(chǎn)企業(yè)相同品種在3年內(nèi)仍未通過評價的，注銷藥品批準文號。

仿制藥一致性評價下一步工作：國家提倡體內(nèi)，更鼓勵體外，因為體外簡單，節(jié)約，采用分步走，先體外，溶出曲線、雜質(zhì)特征、API晶形、輔料等；后體內(nèi)：BE和大臨床。強調(diào)企業(yè)為主體，按照仿制藥的技術標準和質(zhì)量控制，實行最嚴謹?shù)臉藴剩顕栏竦谋O(jiān)管，最嚴厲的處罰，最嚴肅的問責。

目前國家尚無具體詳細的分步實施細則，有望下一步推出。

（1）紡織藥品的BSC分類,確定一致性評價實施要求包括BE豁免；（2）參比制劑目錄的確定

來源進口原研且上市；原研不生產(chǎn)，遴選歐盟或日本等上市產(chǎn)品或國際公認品牌；地產(chǎn)化知名品牌；從國內(nèi)企業(yè)中樹立標桿。

國家指定；行業(yè)協(xié)會組織同品種企業(yè)提出選擇參比制劑意見；企業(yè)自行選擇并備案等方式尚無明確。

參比制劑的購買是統(tǒng)一一次性進口，還是企業(yè)自行購置。（3）組織實施參比制劑體外溶出曲線的研究，避免各藥廠（4）各品種分布實施的安排

（5）對改劑型、換酸根、改劑量等仿制藥無參比制劑，如何做，有待實施細則出臺。允許企業(yè)采用體外溶出度試驗的方法進行評價，以后還應當采取體內(nèi)生物等效性試驗的方法進行后續(xù)評價。

制藥企業(yè)目前的應對：

國家出臺政策，再尚無具體細則，組織研討時，企業(yè)如何能走在前列按期通過一致性評價，尚需要盡快組織實施。

1、按照品種目錄確定自身開展評價的品種；

2、明確評價品種的分類及國家分階段實施的時限；

3、確定產(chǎn)品的參比制劑，開展前期參比制劑研究；

4、進行對比研究，5、如需調(diào)整工藝處方，展開藥劑工作，按照補充申請準備申報。

6、完成一致性體外評價工作

7、按期申報資料

8、迎接檢查

9、進行BE備案

10、通過評價，嚴格規(guī)范生產(chǎn)。其他

1、應展開對原料的研究，對于難溶性藥物的口服固體制劑，晶形不同導致的溶解度差異，對溶出特性產(chǎn)生影響；不同粒度對溶出曲線的區(qū)分；對其引濕性、松密度、振實密度、真密度、粒徑、粒度、熔點、水溶性等應做詳細的研究。關注主成分，晶形、晶格、粒徑、粒度分布、固有溶出速率

對輔料影響溶出曲線也應進行分析研究。

2、確保仿制藥再任何體內(nèi)環(huán)境下即PH值寬范圍下都有一定的崩解，溶出，即對任何人均有較高的生物利用度，應前期評估（濾膜、溶解度和穩(wěn)定性研究、介質(zhì)、體積、設備、方法、脫氣、轉(zhuǎn)速、取樣時間點、取樣、樣品處理等）、方法開發(fā)、分析整理、自動化、驗證確定溶出度試驗方法。

3、區(qū)分原研制劑的溶出曲線有區(qū)分力和體內(nèi)外相關性是最大的難題。應進行仿制藥與原研制劑體外多介質(zhì)中溶出行為比較，確保生物利用度等效。原研制劑應進行三批，考察其批波動等。

在最具區(qū)分力的溶出介質(zhì)中，增加200轉(zhuǎn)比較研究，防止劑量傾斜，美國增加有機溶劑測定對比，4、BE不是金標準

因BE試驗的是年輕男性，是人體最佳狀態(tài)，有其局限性，通過BE試驗部分仿制藥與原研制劑臨床療效仍然有差距，原研制劑經(jīng)臨床大量患者驗證。體外溶出試驗均能夠具有相似的溶出曲線，大多數(shù)藥物生物等效，因BE試驗昂貴，不可能試驗一個處方，就進行一次生物等效性試驗，因此應進行體外多條溶出曲線的相同研究，確保BE的成功率。

緩釋制劑的機理與原研藥品不同，則無需強求體外溶出行為一致，只能通過動物實驗或人體預BE試驗驗證處方工藝的合理性。日本不允許仿制藥緩釋制劑機理不同。

5、溶出儀應能夠通過機械驗證及性能驗證，每6個月應進行校準。

6、關于藥品的不良反應：

WHO很早就指出“能吃藥不打針，能打針不輸液”的用藥原則，蓋因“是藥三分毒”，藥物是把雙刃劍，即有七分優(yōu)點，三分缺點，口服因由屏障保護，安全性較高；輸液直接進入血液循環(huán)，人體內(nèi)千變?nèi)f化，其發(fā)生概率很小，但在國民普及輸液下，概率提高；給藥不良事件與劑量、給藥方案、療程、總劑量、其他基礎特征如腎功能狀態(tài)、人口統(tǒng)計學特征如年齡性別種族等、伴隨用藥、藥物濃度，基本與主成分和個體體質(zhì)差異相關，與雜質(zhì)無關。

第三篇：生物技術制藥總結(jié)

生物技術：人們以現(xiàn)代生命科學為基礎，結(jié)合先進的工程技術手段和其他基礎科學的科學原理，按照預先的設計改造生物體或加工生物原料，為人類生產(chǎn)出所需產(chǎn)品或達到某種目的的技術

1基因工程制藥：利用基因重組技術將外援基因?qū)胨拗骶蚣毎M行大規(guī)模培養(yǎng)，以獲得蛋白質(zhì)藥物的過程。

2.載體：是攜帶外源目的基因或DNA進入宿主細胞，實現(xiàn)外援基因或DNA的無性繁殖或表達有意義的蛋白質(zhì)所采用的一些DNA分子。

細胞傳代passage：將細胞從一個培養(yǎng)器皿中消化、分散并接種至另一個培養(yǎng)器皿中的操作。細胞克隆培養(yǎng)（clonal culture）：即單細胞分離培養(yǎng)，是將動物組織分散后，將一個細胞從群體細胞中分離出來，由單個細胞培養(yǎng)成純系細胞集群。

動物細胞的復蘇：其原則是快速融化，必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。

細胞融合（cell fusion）：是指在外力（誘導劑或促融劑）作用下，兩個或兩個以上的異源（種、屬間）細胞或原生質(zhì)體相互接觸，從而發(fā)生膜融合、胞質(zhì)融合和核融合并形成雜種細胞的現(xiàn)象，或稱細胞雜交。

轉(zhuǎn)基因動物（transgenic animal）：采用基因工程技術將外源目的基因?qū)雱游锷臣毎⑴咛ジ杉毎驮缙谂咛?，并在受體動物的染色體上穩(wěn)定整合，在經(jīng)過發(fā)育途徑將外源目的基因穩(wěn)定地傳給子代，通過這項技術所獲得的動物即為轉(zhuǎn)基因動物。

胚胎干細胞（embryo stem cell）：簡稱ES細胞，是從早期胚胎細胞團分離出來并能在體外培養(yǎng)的一種高度未分化的、具有形成所有成年細胞類型能力的全能干細胞。它是正常二倍體型，像早期胚胎細胞一樣具有發(fā)育上的全能性。

抗體工程制藥（antibody engineering pharmaceutics）：利用基因工程、細胞工程（包括動物細胞工程和植物細胞工程）和轉(zhuǎn)基因動物及轉(zhuǎn)基因植物技術生產(chǎn)抗體藥物的過程。

單克隆抗體（monoclonal antibody，mAb）：簡稱單抗，將能大量擴增和永生的骨髓瘤細胞和能合成分泌特異性抗體的B細胞（僅識別一種抗原表位）進行融合得到雜交瘤細胞，經(jīng)篩選和克隆化的雜交瘤細胞僅能合成及分泌抗單一抗原表位的特異性抗體。

雜交瘤細胞克隆化（cloning）：是指將陽性孔中分泌抗體的單個細胞分離出來。融合后的雜交瘤細胞一般要經(jīng)過3次克隆化才能達到100%的陽性克隆。

雙特異性抗體（bispecific antibody，bsAb）：亦稱雙功能抗體，是含有兩個不同配體結(jié)合位點的抗體分子，它有兩個不同的抗原結(jié)合部位（兩個臂），可分別結(jié)合兩種不同的抗原表位。嵌合抗體（chimeric antibody）：是利用DNA重組技術，將異源單抗的輕、重鏈可變區(qū)基因插入含有人抗體恒定區(qū)的表達載體中，轉(zhuǎn)化哺乳動物細胞表達的抗體，表達的抗體分子中輕、重鏈的V區(qū)是異源的，而C區(qū)是人源的，即整個抗體分子的60%~70%是人源的。

人源化抗體（humanized antibody，hAb）：通過CDR移植即把鼠抗體的CDR（互補決定區(qū)）序列移植到人抗體的可變區(qū)內(nèi)所得到的抗體，也稱CDR移植抗體或改型抗體。該抗體既具有鼠源性單抗的特異性又保持了人抗體的功能（C區(qū)的功能）。

免疫原性（immunogenicity）：抗原能刺激機體特異性免疫細胞，使其活化、增值、分化，最終產(chǎn)生免疫效應物質(zhì)（抗體或致敏淋巴細胞）的特性。

免疫反應性（immunoreactivity）：抗原與相應免疫效應物質(zhì)在體內(nèi)或體外相遇時，可發(fā)生

特異性結(jié)合而產(chǎn)生免疫反應的特性。

減毒活疫苗（live attenuated vaccine）：是通過不同的方式手段使病原體的毒性即致病

性減弱或喪失后獲得的一種由完整的微生物組成的疫苗制品。

滅活疫苗（inactivated）：是將病原體經(jīng)培養(yǎng)增殖、滅活純化處理，使其完全喪失感染性，但保留了病原體的幾乎全部組分因此滅活疫苗具有較好的免疫原性和安全性。

亞單位疫苗（subunit vaccine）：利用微生物的某種表面結(jié)構(gòu)成分（抗原）制成、能誘發(fā)

機體產(chǎn)生抗體的疫苗。

分解代謝阻遏（catabolite repression）：在菌體的生長階段被菌體快速利用的碳源會產(chǎn)

生大量的分解產(chǎn)物，這些代謝產(chǎn)物阻遏次級代謝酶系的合成，只有當這類碳源被消耗完后，阻遏作用被消除，菌體才由生長階段轉(zhuǎn)入次級代謝產(chǎn)物合成階段，這種發(fā)酵過程中的次級代

謝產(chǎn)物在碳源被消耗盡時才產(chǎn)生和積累的現(xiàn)象稱為分解代謝阻遏。

生物技術：人們以現(xiàn)代生命科學為基礎，結(jié)合先進的工程技術手段和其他基礎科學的科學原

理，按照預先的設計改造生物體或加工生物原料，為人類生產(chǎn)出所需產(chǎn)品或達到某種目的的技術。

種齡（inoculumage）：種子罐中培養(yǎng)的菌絲轉(zhuǎn)入下一級種子罐或發(fā)酵罐時得培養(yǎng)時間

生物技術藥物的特性？

（1）理化性質(zhì)特性（1）相對分子量大（2）結(jié)構(gòu)復雜：蛋白質(zhì)和核酸均為生物大分子，蛋

白質(zhì)含有四級結(jié)構(gòu)（3）穩(wěn)定性差（2）藥理學作用特性（1）活性與作用機制明確：活性物

質(zhì)對生理功能的調(diào)節(jié)機制比較清楚（2）作用針對性強：有特定的靶分子、靶細胞或靶器官

（3）毒性低：生物技術藥物本身是體內(nèi)天然存在的物質(zhì)或它們的衍生物（4）體內(nèi)半衰期短

（5）有種屬特異性（6）可產(chǎn)生免疫原抑制（3）生產(chǎn)制備特性（1）藥物分子在原料中的含量低（2）原料液中常存在降解目標產(chǎn)物的雜質(zhì)：應采取快速分離純化的方法以除去影響

目標產(chǎn)物穩(wěn)定性的物質(zhì)（3）制備工藝條件溫和：目的產(chǎn)物不穩(wěn)定（4）分離純化困難：需要

多種不同原理的層析單元操作才能達到要用的純度（5）產(chǎn)品易受有害物質(zhì)（4）質(zhì)量控制特

性

質(zhì)粒的特點：（1）是指獨立于原核生物染色體之外具有自主復制能力的遺傳物質(zhì)。（2）質(zhì)粒

具有遺傳傳遞和遺傳交換的能力（3）質(zhì)粒具有不相容性：兩種親緣關系密切的不同質(zhì)粒不

能在同一宿主細胞中穩(wěn)定共存。4..共價閉合環(huán)狀DNA(ccDNA)，開環(huán)DNA(ocDNA)，線狀

DNA(lDNA)在瓊脂糖凝膠電泳中

5.復制子松弛型復制子的復制和宿主蛋白的合成功能

無關，宿主染色體DNA復制受阻時，質(zhì)粒仍可復制；嚴謹型復制子的復制與宿主蛋白質(zhì)的合成相關，因此在每個宿主細胞中為低拷貝數(shù)，僅1~3個。

6.克隆表達的質(zhì)粒載體涉及三個要素：

（1）復制子（2）選擇標記：由質(zhì)粒攜帶的賦予宿主細胞新的表型的基因，用于鑒定和篩選

轉(zhuǎn)化有質(zhì)粒的宿主細胞。常見的標記：氨芐西林（Amp），卡那霉素（Kan）（3）多克隆位點

（MCS）：質(zhì)粒載體中由多個限制性內(nèi)切酶識別序列密集排列形成的序列。

7.目的基因常用制備方法

(1)化學合成法（2）PCR法：在含有DNA模板、引物、DNA聚合酶、dNTP的緩沖溶液中通

過下列步驟擴增DNA：a）變性：雙鏈DNA模板加熱變性，解離成單鏈模板；b）退火：降

低溫度，引物與單鏈模板結(jié)合；c）延伸：溫度調(diào)整至DNA聚合酶最適宜溫度，最終與單鏈

模板形成雙鏈，并開始下一個變性、退火、延伸循環(huán)。（3）基因文庫法（4）cDNA文庫法

8.影響目的基因與載體之間連接效率的主要因素：

9.（1）DNA片段之間的連接方式：粘性末端的連接效率高于平頭末端。（2）目的基因與載

體的濃度和比例：增加DNA濃度可以提高連接效率，目的基因與載體DNA的摩爾數(shù)比應大

于1.（3）連接溫度、時間、連接酶的活性及緩沖液。

9.重組DNA導入大腸桿菌，常用的感受態(tài)細胞制備方法：氯化鈣法

10.重組子的篩選與鑒定：

（1）載體遺傳標記法：a)抗生素抗性篩選法

b)互補篩選法：重組子轉(zhuǎn)化成宿主細胞，載體的表達產(chǎn)物與宿主細胞中營養(yǎng)缺陷性突變發(fā)生

互補作用，從而實現(xiàn)重組子的篩選。藍白斑篩選：lacZα基因可編碼β—半乳糖苷酶α氨基

端的α互補肽段，與宿主細胞編碼的缺陷型β—半乳糖苷酶α實現(xiàn)互補，可分解底物5-溴-4-

氫-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，形成藍色菌落。由于lacAα基因的插入失活而成白色，空載體的宿主細胞呈藍色。c)營養(yǎng)缺陷篩選法d噬菌斑篩選法(2)核酸分子雜交法

(3)限制性內(nèi)切酶圖譜法(4)DNA序列測定法：雙脫氧終止法(5)目的基因表達產(chǎn)物測定法

12.外源基因在大腸桿菌中的表達形式：

(1)胞內(nèi)表達：(a)非融合蛋白的胞內(nèi)表達：形成包涵體（B）融合蛋白的胞內(nèi)表達：在大腸桿

菌內(nèi)較穩(wěn)定（2）分泌表達：（a)分泌至周質(zhì)（b）分泌至胞外

11.外源基因在原核生物中表達的重要調(diào)控元件

(1)啟動子：是DNA鏈上能與RNA聚合酶結(jié)合并起始mRNA合成的一段序列，是決定外源基

因在原核生物中表達效率的關鍵因素。(2)核糖體結(jié)合位點：SD序列(3)終止子

13.大腸桿菌中外源蛋白表達效率的影響因素：(1)外源基因密碼子：偏好密碼子（蛋白質(zhì)合成迅速，錯配率低）和稀有密碼子(2)mRNA結(jié)構(gòu)：減少G、C含量，增加A、T含量(3)表達

載體：高拷貝數(shù)、適用范圍廣、穩(wěn)定性高、表達產(chǎn)物容易純化(4)外源蛋白穩(wěn)定性

14.分離純化技術應滿足下列要求：(1)技術條件要溫和，能保持目的產(chǎn)物的生物活性；(2)選

擇性要好(3)回收率要高(4)兩個技術之間要能直接銜接(5)整個分離純化過程要快

15.基因重組蛋白的主要分離技術

(1)離心(2)沉淀(3)膜分離(4)雙水相萃取

16基因重組蛋白的主要純化技術:

(1)離子交換層析(2)親和層析(3)凝膠過濾層析(4)反相層析和疏水層析

17.選擇分離純化方法的依據(jù)：

（元，層析分離次序的選擇也同樣重要。(3)根據(jù)分離純化工藝的要求來選擇(a)具有良好的穩(wěn)

定性、重復性和較高的安全性(b)盡可能減少組成工藝的步驟(c)分離純化工藝所用的時間要

盡可能的短(d)工藝和技術必須高效

18．基因工程藥物的質(zhì)量控制要點

(1)蛋白質(zhì)含量的測定(2)蛋白質(zhì)純度檢測(3)蛋白質(zhì)分子質(zhì)量測定(4)蛋白質(zhì)等電點測定(5)蛋

白質(zhì)序列分析(6)內(nèi)毒素分析、宿主蛋白與核酸殘留分析

19.蛋白質(zhì)含量的測定

(1)紫外吸收法(2)BCA法(3)Lowry法(4)考馬斯亮藍法(5)SDS-PAGE掃描分析法

20.蛋白質(zhì)純度的檢測：電泳法、層析法、質(zhì)譜法、末端氨基酸殘基分析法

21.蛋白質(zhì)Mr測定有SDS-PAGE法、凝膠層析法、質(zhì)譜法

22.蛋白質(zhì)等電點測定的常用方法：等電聚焦法。

23.蛋白質(zhì)序列的分析:N-端氨基酸序列分析，C-端氨基酸序列分析

根據(jù)體外培養(yǎng)時動物細胞對生長基質(zhì)的依賴性，可將動物細胞分為

(1)貼壁依賴性細胞(2)非貼壁依賴性細胞(3)兼性貼壁細胞

1.動物細胞培養(yǎng)的環(huán)境條件

(1)培養(yǎng)溫度（哺乳類37℃，昆蟲25~28℃）(2)pH值（大多數(shù)7.2~7.4）(3)通氧量（一定量的CO2）(4)防止污染(5)基本營養(yǎng)物質(zhì)(6)滲透壓

3.動物細胞的培養(yǎng)特性

(1)比微生物細胞大得多，無細胞壁，抗機械強度低，對剪切力敏感，適應環(huán)境能力差；(2)

倍增時間長，生長緩慢，正常二倍體細胞的生長壽命是有限的；(3)對培養(yǎng)基要求高，易受

微生物污染，培養(yǎng)時需要添加抗生素；(4)生長大多需貼附于基質(zhì)，相互粘連以集群形式存

在，并有接觸抑制現(xiàn)象；(5)多半將產(chǎn)物分泌在細胞外，便于收集和純化；(6)對蛋白質(zhì)的合成條件和修飾功能與細菌不同，動物細胞可對蛋白質(zhì)進行完善的翻譯后修飾，特別是糖基化，與天然產(chǎn)品更一致，更適合于臨床應用。

4.原代培養(yǎng)的主要步驟

(1)從健康動物體內(nèi)無菌條件下取出適量組織，剪切成小薄片；(2)加入適宜濃度的胰蛋白酶

或膠原酶和EDTA等進行消化作用使細胞分散；(3)將分散的細胞進行洗滌并純化后，以2×

10^6~7×10^6 /ml的濃度加到培養(yǎng)基中，37℃下進行原代培養(yǎng)，并適時進行傳代培養(yǎng)。分為

組織塊培養(yǎng)和單層細胞培養(yǎng)兩種方法。

5.動物細胞深低溫保存的基本原理

在-70℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均已停止，即代謝處于完全停滯狀態(tài)，故可以長期保存。

在不加任何條件下直接凍存細胞時，細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，能導致細胞內(nèi)發(fā)

生機械損傷、電解質(zhì)濃度升高、滲透壓改變、脫水、pH改變、蛋白質(zhì)變性等，能引起細胞

死亡。目前為了保存細胞，都采用液氮低溫（-196℃）凍存的方法。

6.動物細胞的復蘇

其原則是快速融化，必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍

存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。

7.動物細胞營養(yǎng)要求特點

(1)碳源不能為無機物，大多為葡萄糖；(2)氮源不能為無機物，主要為各種氨基酸；(3)在很

多情況下尚需添加5%~20%的小牛血清或適量的動物胚胎浸出液。

8.動物細胞的大規(guī)模培養(yǎng)方法

(1)懸浮培養(yǎng)法(2)微載體培養(yǎng)法(3)多孔載體培養(yǎng)法(4)微囊化培養(yǎng)法(5)中空纖維培養(yǎng)法

9.誘導動物細胞融合的方法主要有:(1)病毒法(2)PEG法(3)電擊法(4)激光法

10.轉(zhuǎn)基因動物生物反應器（整體掌握？）

(1)轉(zhuǎn)基因動物乳腺生物反應器（藥用蛋白，如抗凝血Ⅲ、抗胰蛋白酶、葡萄糖苷酶、C蛋白）

(2)轉(zhuǎn)基因動物血液生物反應器（人血紅蛋白、抗體或非活性狀態(tài)的融合蛋白）(3)轉(zhuǎn)基因動

物尿液生物反應器（促性腺激素）(4)轉(zhuǎn)基因雞（蛋）生物反應器（人干擾素）

1.單克隆抗體技術的基本原理

基于動物細胞融合技術得以實現(xiàn)的，即骨髓瘤細胞和B細胞的融合。骨髓瘤細胞在體外

培養(yǎng)能大量無限增殖，但不能分泌特異性抗體；抗原免疫的B細胞能產(chǎn)生特異性抗體，但在體外不能無限增殖。將免疫B細胞和骨髓瘤細胞融合后形成的雜交瘤細胞，繼承了兩個親代

細胞的特性，既具有骨髓瘤細胞能無限增殖的特性，又具有免疫B細胞合成和分泌特異性抗

體的能力。通常使用HAT（H為次黃嘌呤、A為氨基蝶呤、T為胸腺嘧啶核苷）選擇培養(yǎng)基

對雜交瘤細胞進行篩選。未融合的脾細胞因不能在體外長期存活而死亡，未融合的骨髓瘤細

胞合成DNA的從頭合成途徑被培養(yǎng)基中的A阻斷，又因缺乏HGPRT（次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸

核糖轉(zhuǎn)移酶）和TK（胸腺嘧啶核苷激酶），不能利用培養(yǎng)基中的H和T完成DNA的合成過

程而死亡。只有融合的雜交瘤細胞由于從脾細胞獲得了HGPRT和TK，因此能在HAT培養(yǎng)基

中長期存活與繁殖并分泌抗體。

2.單克隆抗體的大量制備主要方法:（1）體內(nèi)培養(yǎng)法（2）體外培養(yǎng)法

6.重組ScFv的應用:(1)用于構(gòu)建和生產(chǎn)免疫毒素(2)用于腫瘤的影像分析和治療

7.噬菌體抗體庫技術的基本原理:用PCR技術從人免疫細胞中擴增出整套的VH和VL基因，克隆到噬菌體載體上并以融合蛋白的形式表達在其外殼表面。這樣一來噬菌體DNA中有抗

體基因的存在，同時在其表面又有抗體分子的表達，可以方便地利用抗原-抗體特異性結(jié)合而篩選出所需要的抗體，并進行克隆擴增。

7.噬菌體抗體庫構(gòu)建過程

(1)從外周血或脾、淋巴結(jié)等組織中分離B細胞，提取mRNA并反轉(zhuǎn)錄為cDNA；

(2)應用抗體輕鏈和重鏈引物，根據(jù)建庫的需要通過PCR技術擴增不同的抗體基因片段；

(3)構(gòu)建噬菌體載體；(4)用表達載體轉(zhuǎn)化細菌，構(gòu)建全套抗體庫。

通過多輪的抗原親和吸附（結(jié)合）-洗脫-擴增，最終篩選出抗原特異的抗體克隆。其中，噬

菌體抗體庫的篩選是關鍵環(huán)節(jié)和步驟。

減毒活疫苗的優(yōu)缺點：

優(yōu)點：

（1）通過自然感染途徑接種，可以誘導包括體液免疫、細胞免疫和粘膜免疫在內(nèi)的更全面的免疫應答，使機體獲得更廣泛的免疫保護；（2）由于使用的是活的微生物他們可以在體內(nèi)

長時間起作用而誘導較強的免疫反應，且由于活的微生物有增殖的特性，理論上只需要接

種一次，即可達到滿意的免疫效果；（3）可能引起水平傳播擴大免疫效果，增強群體免疫屏

障；(4)一般不需要再疫苗中添加佐劑，生產(chǎn)工藝一般不需要濃縮純化，價格低廉。

缺點：

(1)一般減毒活疫苗均保留一定殘余毒力，對一些個體如免疫缺陷者可能誘發(fā)嚴重疾病，并

且由于種種原因如基因修飾等，減毒活疫苗可能出現(xiàn)毒力回復即“返祖”現(xiàn)象；(2)減毒活

疫苗是活的微生物制劑，可能造成環(huán)境污染而引發(fā)交叉感染等，并可能滯留在環(huán)境中形成傳

染源；(3)缺損顆?？赡芨蓴_免疫效果，因此產(chǎn)品分析評估較為困難；(4)保存運輸?shù)葪l件要

求較高，如需冷藏等。

1.滅活疫苗的特點：(1)滅活疫苗常需多次接種；(2)接種滅活疫苗產(chǎn)生的抗體滴度隨著時

間而下降；(3)滅活疫苗需要量大。

第七章 發(fā)酵工程制藥

1.發(fā)酵類型：(1)微生物菌體發(fā)酵(2)微生物的酶(3)微生物的代謝產(chǎn)物發(fā)酵(4)微生物轉(zhuǎn)化發(fā)

酵(5)生物工程菌發(fā)酵

2.微生物發(fā)酵生產(chǎn)藥物的分類：(1)抗生素類(2)氨基酸類(3)核苷酸類(4)維生素類(5)甾體類

激素(6)多糖類(6)治療酶及酶抑制劑

3.菌種保藏方法：(1)斜面低溫保藏法(2)石蠟油封存法(3)沙土管保藏法(4)麩皮保藏法(5)甘

油懸液保藏法(6)冷東真空干燥保藏法(7)液氮超低溫保藏法(8)宿主保藏法

4.種子液具備的條件：(1)菌種的生長活力強，轉(zhuǎn)種至發(fā)酵罐后能迅速生長，延遲期短；(2)

生理狀態(tài)穩(wěn)定；(3)菌體總量及濃度能滿足大容量發(fā)酵罐的要求；(4)無雜菌污染，保證純種培養(yǎng)；()保持穩(wěn)定的生產(chǎn)能力

5.微生物的發(fā)酵方式：（1）分批發(fā)酵（2）補料—分批發(fā)酵（3）半連續(xù)發(fā)酵（4）連續(xù)發(fā)酵

5.發(fā)酵過程的中間分析項目：（1）產(chǎn)物產(chǎn)量（2）PH值（3）糖（4）氨基氮（5）菌絲形

態(tài)

6.發(fā)酵過程的影響因素及控制：（1）菌體濃度的影響及控制（2）營養(yǎng)物質(zhì)對發(fā)酵的影響

及控制（3）溫度的影響及控制（4）PH的影響及控制（5）溶氧的影響及控制（6）二氧化碳的影響及控制（7）泡沫的影響及控制（8）染菌對發(fā)酵的影響

第四篇：制藥實驗總結(jié)

1、溶液1，2，3，的作用？

溶液Ⅰ的作用：懸浮大腸桿菌菌體，而且加溶液I后，必須要將菌體懸浮徹底，不得有塊狀大顆粒狀呈現(xiàn)，是質(zhì)粒DNA提取的首要關鍵。且其中含有的溶霉菌可以水解菌體細胞壁的主要化學成分肽聚糖中的β-1,4糖苷鍵，因而具有溶菌作用。

溶液

2、提供堿性條件，在NaOH與SDS的共同作用下使大腸桿菌瞬間裂解，并變性核DNA。當細胞懸浮于NaOH和十二烷基酸鈉（SDS）溶液中使，在高pH（堿性環(huán)境）的作用下細胞發(fā)生裂解，此外蛋白質(zhì)和染色體DNA發(fā)生變性與細胞碎片一起沉淀下來。溶液3：（醋酸鉀和醋酸），該溶液所含有的高濃度鉀離子與溶液體系中的十二烷基硫酸鈉（即SDS與NaOH所形成的可溶性物質(zhì)）發(fā)生反應形成十二烷基硫酸鉀（potassium dodecylsulfate,PDS），從而將與之結(jié)合的絕大部分大腸桿菌蛋白質(zhì)以及很長的基因組DNA一起沉淀沉淀，與質(zhì)粒分離開來；中和氫氧化鈉使質(zhì)粒DNA復性。

因為基因組DNA太長了，長長的DNA自然容易被PDS給共沉淀了，盡管SDS并不與DNA分子結(jié)合。

2、各試劑的作用？ 溶液

1、葡萄糖的作用是使懸浮后的大腸桿菌不會很快沉積到管子的底部，增加溶液的粘度，維持滲透壓及防止DNA受機械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+ 和Mg2+等二價金屬離的螯合劑，在溶液I中加入EDTA，是要把大腸桿菌細胞中的二價金屬離子都螯合掉，從而起到抑制 DNase對DNA的降解和抑制微生物生長的作用。另外也可保證溶菌酶活性。任何生物化學反應，首先要控制好溶液的pH，因此用適當濃度的和適當pH值的Tris-Cl溶液，是再自然不過的了

溶液

2、提供堿性條件，在NaOH與SDS的共同作用下使大腸桿菌瞬間裂解，并變性核DNA。當細胞懸浮于NaOH和十二烷基酸鈉（SDS）溶液中使，在高pH（堿性環(huán)境）的作用下細胞發(fā)生裂解，此外蛋白質(zhì)和染色體DNA發(fā)生變性與細胞碎片一起沉淀下來。溶液

3、醋酸中和堿。

25/24/1的酚/氯仿/異戊醇：

A．水飽和酚的比重略比水重，碰到高濃度的鹽溶液，離心后酚相會跑到上層，不利于含質(zhì)粒的水相的回收；加入氯仿后可以增加比重，使得酚/氯仿始終在下層，方便水相的回收；

B．酚與水有很大的互溶性，如果單獨用酚抽提后會有大量的酚溶解到水相中，而酚會抑制很多酶反應。而且含質(zhì)粒DNA的水相會部分進入到酚中，造成損失！C．添加異戊醇，主要是為了讓離心后上下層的界面更加清晰，方便了水相的回收。

無水乙醇：回收后的水相含有足夠多的鹽，DNA在無水乙醇中的溶解度小，因此只要加入2倍體積的乙醇，在室溫放置幾分鐘后離心就可以將質(zhì)粒DNA沉淀出來。70%乙醇：如果感覺發(fā)生了鹽的沉淀，就用70％的乙醇多洗幾次。（除鹽），3、注意事項

（2）用不新鮮的0.4 M NaOH，即便有SDS也無法有效溶解大腸桿菌。因此必須使用新鮮的0.4 M NaOH試劑進行配制。

（3）SDS易產(chǎn)生氣泡，不要劇烈攪拌。（4）變性時間不宜過長。

（5）用移液器操作時一定要小心，特別是加入溶液二、三后一定不要劇烈震蕩，以免切碎DNA。

質(zhì)粒DNA的酶切鑒定及瓊脂糖凝膠電泳

1、限制性核酸內(nèi)切酶的特性，在基因工程中的作用？ 特性（基因工程）、定義。

作用基因工程的重要工具，能切割DNA獲得目的基因，切割質(zhì)粒留下連接位點。此外，雙切酶能保證基因的定向插入，提高重組率。產(chǎn)生粘性末端惑平末端。

目前, 基因工程上, 限制酶主要應用于以下兩方面

（1）目的基因與載體的重組

細菌細胞中的限制酶能水解外源DNA , 因此必須通過適當?shù)妮d體(質(zhì)?；蚴删w)的幫助才能將外源DNA引人受體細胞并在其中增殖和表達。將供體DNA與載體用同樣的限制酶處理, 使載體帶上各種各樣的外源DNA片斷, 然后引人受體細菌細胞增殖, 菌細胞增殖, 再篩選出所需的菌株, 便獲得帶有某一目的基因的繁殖系.用這種方法, 已成功地將酵母菌的咪哇甘油磷酸脫水酶基因、夕一異丙基蘋果酸脫氫酶基因和色氨酸合成酶基因通過幾噬菌體轉(zhuǎn)人大腸桿菌。2）建造新的基因載體作為基因載體,在引人受體細胞后, 必須有較高的復制率, 以求獲得大量的基因產(chǎn)物；必須具備一個選擇性標志, 以便篩選；還要有一至多種限制酶的作用位點（每種酶只有一個切口）；

2、瓊脂糖凝膠電泳的注意事項?

一、配膠：

1、電子稱的使用，要時刻保持電子稱的精確性，清潔性，根據(jù)不同濃度的膠配置瓊脂糖。

2、加TAE的量要適當，以免配出的膠太薄導致膠孔太淺或濃度太低。

3倒膠前，膠托要洗干凈，并擦干，倒膠時要待膠冷到一定溫度搖勻，盡量不要產(chǎn)生氣泡。若膠的溫度過高要頂著膠托，防止膠變形。

二、點樣電泳

1孔板要干凈，loading點樣要均勻，控制1~2ul的量，并做好對應標記。2點樣后及時蓋上膠墊注意不要蓋反。

5加樣時槍頭要上緊，吸樣均勻準確，排液時槍頭不要有殘留

3點電泳前要檢查膠是否合格，點樣要對準膠孔，盡量點完所有的樣。4不要忘記點marker并擺正膠位，正負極不要接反。

三、EB染色

1切膠要準，取膠要穩(wěn)，泡膠要慎以免EB濺起。2碰到EB的手套要及時丟棄 3 EB要適時更換，盤子及時清洗 4抹布要分清，不可交叉使用。

四、圖像分析儀的使用

1使用前要清潔，避免影響膠圖清新度。2 照膠時應經(jīng)量減少開紫外燈的時間。

5觀察時要帶防護眼鏡，避免眼睛被紫外損傷。

3拍照時先關攝像頭再關紫外燈，嚴格按照照膠流程操作。4照好的膠要及時丟棄。

3、膠回收試劑盒在回收DNA時各試劑的作用？ PCR

一、降低退火溫度對反映有何影響？

1在理想狀態(tài)下，退火溫度足夠低，以保證引物同目的序列有效退火，同時還要足夠高，以減少非特異性結(jié)合。

2如果溫度過低，擴增特異性差，雜帶較多，背景深。PCR擴增在變性階段吸熱,在退火和延伸階段放熱,每一個PCR循環(huán)呈現(xiàn)放熱效應,同時退火溫度高導致平臺期的前移和焓值的降低，4、退火溫度與時間，取決于引物的長度、堿基組成及其濃度，還有靶基序列的長度。

二、延長變性時間對反映有何影響？

變性時間延長會導致酶活性的降低。

GC含量過高的片段，可以適當延長變性時間。

三、循環(huán)次數(shù)是不是越多越好？

不是的，隨著反應的進行，酶會逐漸失活、dNTP等原料會逐漸消耗掉。

PCR敏感性太高,循環(huán)過多容易產(chǎn)生假陽性結(jié)果，比方說把試劑中原本極其微量的雜質(zhì)序列片段放大擴增，影響對正常結(jié)果的判斷。

因此在一定范圍內(nèi)，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，產(chǎn)物會增多；但超過了就不好了。一般設置30-35個循環(huán)就很夠了

四、PCR的五大元素？

參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物：

引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C 含量，G+C太少擴增效果不佳，G+C 過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布，避免核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點，被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點，這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。引物量：引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

(2)酶及其濃度 目前有兩種Taq DNA聚合酶供應，一種是從棲熱水生桿菌中提純的天然酶，另一種為大腸菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反應約需酶量2。5U(指總反應體積為100ul時)，濃度過高可引起非特異性擴增，濃度過低則合成產(chǎn)物量減少。

(3)dNTP的質(zhì)量與濃度 dNTP的質(zhì)量與濃度和PCR擴增效率有密切關系，dNTP粉呈顆粒狀，如保存不當易變性失去生物學活性。dNTP溶液呈酸性，將其PH調(diào)節(jié)到7.0～7.5，小量分裝，-20℃冰凍保存。多次凍融會使dNTP降解。尤其是注意4種dNTP的濃度要相等(等摩爾配制)，如其中任何一種濃度不同于其它幾種時(偏高或偏低)，就會引起錯配。濃度過低又會降低PCR產(chǎn)物的產(chǎn)量。dNTP能與Mg2+結(jié)合，使游離的Mg2+濃度降低。(4)模板(靶基因)核酸 模板核酸的量與純化程度，是PCR成敗與否的關鍵環(huán)節(jié)之一，傳統(tǒng)的DNA純化方法通常采用SDS和蛋白酶K 來消化處理標本。SDS的主要功能是： 溶解細胞膜上的脂類與蛋白質(zhì)，因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜，并解離細胞中的核蛋白，SDS還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀； 蛋白酶K 能水解消化蛋白質(zhì)，特別是與DNA結(jié)合的組蛋白，再用有機溶劑酚與氯仿抽提掉蛋白質(zhì)和其它細胞組份，用乙醇或異丙醇沉淀核酸。提取的核酸即可作為模板用于PCR反應。一般臨床檢測標本，可采用快速簡便的方法溶解細胞，裂解病原體，消化除去染色體的蛋白質(zhì)使靶基因游離，直接用于PCR擴增。RNA模板提取一般采用異硫氰酸胍或蛋白酶K 法，要防止RNase降解RNA。

(5)Mg2+濃度 Mg2+對PCR擴增的特異性和產(chǎn)量有顯著的影響，Mg2+濃度過高，反應特異性降低，出現(xiàn)非特異擴增，濃度過低會降低Taq DNA聚合酶的活性，使反應產(chǎn)物減少。酵母菌原生質(zhì)體的分離與再生

高壓蒸汽滅菌的注意事項？（微生物實驗）

第一，無菌包不宜過大(小于50cm×30cm×30cm)，不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對流易滲透到包裹中央。消毒前，打開貯槽或盒的通氣孔，有利于蒸汽流通。而且排氣時使蒸汽能迅速排出，以保持物品干燥。消毒滅菌完畢，關閉貯槽或盒的通氣孔，以保持物品的無菌狀態(tài)。

第二，布類物品應放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻礙蒸汽進入包裹中央，嚴重影響滅菌效果。

⑥瓶裝液體滅菌時，要用玻璃紙和紗布包扎瓶口；如有橡皮塞時，應插入針頭排氣；⑦應有專人負責，每次滅菌前，應檢查安全閥的性能，以防壓力過高發(fā)生爆炸，保證安全使用；

第五篇：制藥企業(yè)質(zhì)量風險管理淺論 吳軍

風險管理，就是一個美麗的謊言

吳軍

各位好！

關于風險分析，我還是有要對其他網(wǎng)友交流一下: 在2010版GMP實施之前，我對國內(nèi)合資企業(yè)進行風險管理實施情況進行了調(diào)查，基本上都是我們國內(nèi)合資企業(yè)排名在前十位的企業(yè)，調(diào)查的結(jié)果讓我大吃一驚，這些企業(yè)并沒用像ICH Q9那樣進行廣泛的風險管理應用，也只是在個別管理環(huán)節(jié)上應用了風險管理結(jié)果，這是為什么？他們是真正的將風險管理的理念濃縮到日常的工作分析和思維工作中，并不是簡單的形式主義。首先我聲明是曾多次說過《風險管理，就是一個美麗的謊言》，但版主不知道我說的話的前后背景，以及我所表達的真實含義，認為我的話有些偏激，個別人還認為我是謬論，感覺網(wǎng)友對我講的話還是有些誤解，還是我做些解釋：

1）GMP本身就是以風險控制為目標的法規(guī)，它是將藥品制造過程，過程存在的風險的控制手段，規(guī)定了最基本的要求，并不能說2010版GMP提出了風險管理的概念和要求，就認為2010版GMP里面把風險管理作為主要的實施要求，并不能將風險管理作為實施GMP一個玄學的手段，大講特講風險管理，認為新版GMP的一切就是風險管理，這跟2010版GMP起草增加風險管理的初衷不符。將風險管理作為混淆GMP的內(nèi)涵，其本身就是一個美麗的謊言。

2）從風險管理理論的發(fā)展歷史來看，它是系統(tǒng)工程中一個重要的理論分支，其主要是研究目標、約束條件不確定時，進行分析與評價危害、資源與目標如何平衡而進行決策的重要思維方法和手段。但在藥品生產(chǎn)過程中，其大部分的風險是顯而易見。開展風險分析之前首先要明確的風險評估目標，不能盲目的為風險分析而風險分析，并不需要事事都需要風險評估，更不能將風險分析的結(jié)果作為借口，將不合理、不科學的方法變成合情合理的實施方法。這風險運用在結(jié)果，也將風險管理變成了一個美麗的幌子。3）一個有效的風險分析，并不是為風險分析而風險分析，但現(xiàn)在的現(xiàn)狀是什么，2010版GMP的實施，一切好像都是為了風險管理而進行，給人一個感覺，好像搞了風險管理就好像水平上升的一個層次，好像做了風險管理就視乎一切產(chǎn)品缺陷、體系缺陷的問題都解決了。GMP的核心是什么？藥品生產(chǎn)的關鍵環(huán)節(jié)，如工藝、清潔與質(zhì)量標準與方法的控制這些最最關鍵的內(nèi)容，沒有人去關心和改進，都沉迷于無效的風險評估報告中，讓人迷失了我們實施GMP的目的是什么，用風險管理代替了GMP的一切，這本身就是一個美麗的幌子。

4）一個好的風險分析是基于科學與經(jīng)驗的專業(yè)人員來進行有效的識別、分析與評價，但大部分的企業(yè)、人員都是只看分析文件的格式，并沒有體會到風險分析的內(nèi)涵：樹立風險的意思、建立系統(tǒng)的風險管理的思維和工作方法。風險管理的背后，是通過風險的識別與分析，找出管理的缺陷，建立系統(tǒng)的解決問題的手段，其核心GMP技術基礎的建立，并不是為風險分析而進行一切的空對空的文件?，F(xiàn)在所做的風險評估文件也僅僅是表明文章，其評估的結(jié)果也是美麗的謊言。上述的解釋，也是針對制藥企業(yè)在實施GMP時“教條主義”和“機會主義”的批評而談的一些個人看法，如有不妥之處，歡迎各位多指正！

吳軍 2011-11-20 附原文：

首先個人覺得有必要澄清幾個概念：

1、風險分析不等于風險管理，這個本人在很多帖子都在澄清。風險分析或風險評估，可以理解為一種純粹的工具或是技術，風險管理則不同，不僅僅是工具或者技術，而是一種管理方式或管理理念。

2、GMP體系和質(zhì)量體系的概念，很多時候也是容易誤解的。很多人都會把GMP當做一種體系，甚至認為只要搞了GMP，質(zhì)量管理就能做好了。這點新版GMP指南已經(jīng)有了澄清，就是那幾個大圈小圈的關系。個人認為GMP只能稱之為規(guī)范，離體系還有一定的距離，如果大家能夠理解這點，就明白為什么ICH 要出臺個ICH Q10了。

3、GMP和風險管理的關系，一定不要去應扯上太多關系，個人的理解是，GMP那些條款，可以理解成是對現(xiàn)有制藥質(zhì)量各系統(tǒng)風險評估后的風險控制措施的匯總。GMP主要還是針對生產(chǎn)相關的過程的，強調(diào)的是一種規(guī)范，那么有規(guī)范就要建立規(guī)范，這個規(guī)范的建立以前是基于經(jīng)驗或者懵懂中應用的風險管理?，F(xiàn)在隨著行業(yè)的發(fā)展，可以基于科學和風險管理來建立這種規(guī)范了。本人在以前的帖子中也提出過GMP建設的觀點，正是基于此種想法。如何建立GMP規(guī)范，其中有兩個管理工具：風險管理和知識管理，再結(jié)合現(xiàn)在已有的驗證。

4、風險管理在新版GMP中的作用。新版GMP開始強調(diào)質(zhì)量體系了。在建立基于新版GMP思想的質(zhì)量體系的過程中，個人認為風險管理可以起到優(yōu)化原有質(zhì)量體系的作用。舉個很簡單的例子：如果優(yōu)化現(xiàn)有的文件體系？就可以采用基于風險的方法，對現(xiàn)有的文件進行分析，看看那些文件是必要的，考慮一下，這個文件如果增刪，會帶來什么風險？如果刪除有很高的風險，再分析文件內(nèi)容，那些內(nèi)容的增刪會帶來什么風險，這樣看似比較復雜的分析，可以很大程度上優(yōu)化咱們的文件結(jié)構(gòu)。附原提問：

吳軍老師說“風險分析，就是美麗的謊言！”（不知前后語境，也許有斷章取義之嫌）首先，風險管理的理念是科學的，而且廣泛地應用于其它行業(yè)

事實上，我們在過去的工作期間，都在自覺不自覺地進行風險分析，只不過是沒有形成系統(tǒng)地、科學的分析體系

對于國內(nèi)制藥行業(yè)來說，風險分析是一個新的名詞，由于對它熟悉的不多，在某些場合上，成了偽專家的萬能公式，因此也引起許多人的反感（包括本人）。

一個好的風險分析需要有一批有高度責任心，具豐富理論知識與實踐經(jīng)驗的人來進行，更重要的時需要歷史數(shù)據(jù)及經(jīng)驗的支持。

由于辦內(nèi)大部分制藥行業(yè)管理相對落后，尤其是在設備管理方面人員稀缺，而且對歷史數(shù)據(jù)沒有很好的總結(jié)，這給風險分析帶來很大的困難。

所以，就目前來說，大部分藥企的風險分析確實是意義不大的，但這并不意味著做這項工作沒有必要，正如GMP在實施之前，基本都是照葫蘆畫瓢，與真正的GMP相差十萬八千里，但經(jīng)過多年的努力，現(xiàn)在應該說GMP對制藥管理起到了相當大的促進作用。所以我相信眼前的沒有意義的風險分析，將為今后的科學的風險分析體系奠定堅實的基礎。