第一篇：病理切片特點(diǎn)總結(jié)

病理切片特點(diǎn)總結(jié)

瘢痕組織：（1）大量平行或交錯(cuò)分布的膠原纖維束（2）纖維素往往呈均質(zhì)紅染的玻璃樣變（3）纖維細(xì)胞少，核細(xì)長深染，小血管稀少 1.肝水樣變性：（1）細(xì)胞體積變大，肝竇變窄（2）胞漿透明淡染，甚至出現(xiàn)空泡（3）空泡變性，嚴(yán)重時(shí)氣球樣變性（4）胞漿基質(zhì)疏松，電子密度降低 2.肝脂肪樣變性：（1）肝細(xì)胞胞漿內(nèi)可見大小不一的脂肪空泡，將核擠向一邊（2）肝竇變窄 3.肉芽組織：（1）有新生毛細(xì)血管平行排列（2）纖維母細(xì)胞分布于毛細(xì)血管之間（3）炎性細(xì)胞浸潤 4.腎濁腫：（1）細(xì)胞內(nèi)可見粉染的顆粒狀物（2）腎小管上皮細(xì)胞水樣變性（3）近端小管細(xì)胞腫脹，腔小甚至閉塞。5.肺出血性梗死：（1），梗死灶呈凝固性壞死，肺泡輪廓保存（2）肺泡腔、小支氣管腔、肺間質(zhì)充滿紅細(xì)胞（3）非梗死區(qū)呈淤血狀態(tài) 6.肺彌漫性出血：（1）肺泡腔內(nèi)有紅細(xì)胞散在分布（2）有炎細(xì)胞浸潤（3）間質(zhì)充血間質(zhì)有大量紅細(xì)胞 7.肝淤血：（1）血竇擴(kuò)張，充滿大量紅細(xì)胞（2）脂肪變（3）肝細(xì)胞受壓萎縮、壞死或崩解 8.慢性肺淤血：（1）肺泡壁增厚纖維化，大量巨噬細(xì)胞滲出（2）肺泡間隔擴(kuò)張，紅細(xì)胞充滿肺泡間質(zhì)（3）心力衰竭細(xì)胞 9.血栓機(jī)化：（1）肉芽組織取代血栓（2）新生毛細(xì)血管（2）纖維母細(xì)胞（4）炎性細(xì)胞 10.宮頸息肉：（1）粘膜上皮、腺體和間質(zhì)增生（2）炎性水腫伴慢性炎細(xì)胞浸潤（3）組織間毛細(xì)血管增生 11.漿細(xì)胞：（1）核染色質(zhì)呈輻輪狀（2）核在一側(cè)（3）核周暈 12.巨噬細(xì)胞：（1）體積大而不規(guī)則（2）胞漿嗜酸性（3）核偏位（4）胞內(nèi)有吞噬的其他細(xì)胞 13.闌尾炎：（1）病變深達(dá)肌層漿膜，大量中性粒細(xì)胞浸潤（2）肌層充血出血（3）平滑肌斷裂 14.嗜酸性粒細(xì)胞：（1）細(xì)胞質(zhì)紅染（2）細(xì)胞核呈分葉狀 15.鱗癌：（1）癌細(xì)胞呈團(tuán)狀分布形成癌巢（2）癌細(xì)胞間可見細(xì)胞間橋，炎細(xì)胞浸潤（3）癌巢中間有角化珠 16.乳頭狀瘤：（1）表面形成乳頭狀突起（2）乳頭表面覆蓋鱗狀上皮（3）基底細(xì)胞排列整齊，基底膜完整（4）纖維脈管束 17.乳腺纖維腺瘤：（1）腺體及結(jié)締組織增生（2）腺體被纖維結(jié)締組織擠壓呈裂隙狀（3）炎細(xì)胞浸潤（4）間質(zhì)通常較疏松，玻璃樣變或鈣化 18.腺癌：（1）癌細(xì)胞形成大小不等、形狀不

一、排列不規(guī)則的腺樣結(jié)構(gòu)、癌巢（2）與正常腺體有共壁現(xiàn)象*（3）癌細(xì)胞有病理性核分裂象 19.海綿狀血管瘤：（1）上皮細(xì)胞不連續(xù)（2）由擴(kuò)張的海綿狀血竇構(gòu)成，充滿紅細(xì)胞

20.淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌：（1）淋巴結(jié)內(nèi)有癌巢（2）淋巴結(jié)不同程度破壞（3）癌細(xì)胞有病理性核分裂象 21.髓樣癌：（1）低分化腺癌多位于乳腺（2）癌巢呈片狀，較多（3）間質(zhì)纖維結(jié)締組織相對較少（4）癌細(xì)胞異型性明顯，核分裂象多見 22.硬癌：（1）癌巢少（2）纖維組織多（3）有病理性分裂象（4）癌組織與正常

細(xì)胞分界清楚 23.宮頸原位癌：（1）異型增生的細(xì)胞累及上皮全層但不侵及基底膜（2）細(xì)胞異型性明顯，核大深染，排列紊亂 24.毛細(xì)血管瘤：（1）內(nèi)皮增生（2）由大量分化良好的增生毛細(xì)血管組成（3）血管內(nèi)大量充血 25.纖維瘤：（1）纖維結(jié)締組織增生，交叉紊亂（2）瘤細(xì)胞間有膠原纖維（3）瘤細(xì)胞呈編織狀排列 26.纖維肉瘤：（1）肉瘤細(xì)胞彌散分布與間質(zhì)分界不清楚（2）瘤細(xì)胞異型性明顯（3）多核瘤巨細(xì)胞（4）結(jié)締組織少 27.風(fēng)濕性心肌炎：（1）心肌間質(zhì)可見梭形風(fēng)濕小體（2）中央有纖維素壞死（3）周圍聚集風(fēng)濕細(xì)胞及少量淋巴細(xì)胞 28.風(fēng)濕性心內(nèi)膜炎：（1）贅生物形成（2）血小板纖維素形成白色血栓（3）間質(zhì)有粘液樣變和纖維素壞死 29.冠狀動脈粥樣硬化：（1）內(nèi)膜不規(guī)則增厚，管腔狹窄（2）有玻璃樣變，纖維帽深部有膽固醇結(jié)晶（4）周邊有少量泡沫細(xì)胞 30.脾中央動脈玻璃樣變：（1）脾小動脈呈均質(zhì)紅染（2）小動脈管腔狹窄（3）管壁增厚 31.大葉性肺炎：（1）分為四期：充血水腫期，紅色肝變期，灰色肝變期，溶解消散期（2）肺泡輪廓完整（3）肺泡腔內(nèi)有大量纖維素滲出物（4）有大量中性粒細(xì)胞 32.燕麥細(xì)胞癌：（1）癌細(xì)胞小，圓形卵圓形，呈燕麥狀（2）分化程度底，惡化程度高（3）較多病理性核分裂象 33.硅肺：（1）有硅結(jié)節(jié)生成（2）肺間質(zhì)彌漫性纖維化（3）結(jié)節(jié)中有內(nèi)膜增厚的血管

34.小葉性肺炎：（1）病變以支氣管為中心，周圍肺泡內(nèi)有中性粒細(xì)胞為主的膿性滲出物（2）部分支氣管粘膜脫落 35.肝細(xì)胞癌：（1）癌細(xì)胞排成條索狀，巢狀（2）癌巢之間有間隙（3）癌細(xì)胞多呈多角形，嗜酸核 36.門脈性肝硬化：（1）可見大小不等的假小葉（2）假小葉內(nèi)有中央靜脈缺如、偏位或兩個(gè)以上（3）肝細(xì)胞排列紊亂，有變性壞死增生現(xiàn)象 37.慢性肝炎：（1）肝細(xì)胞不同程度的變性壞死（2）門管區(qū)纖維組織增生（3）部分肝小葉被纖維組織分割，結(jié)構(gòu)紊亂（4）變性壞死，增生 38.胃癌：（1）癌細(xì)胞浸潤平滑肌層（2）癌細(xì)胞異形大（3）腺體排列紊亂 39.胃潰瘍：四層：滲出層、壞死層、肉芽組織層、瘢痕層，周圍黏膜皺襞呈輪輻狀向潰瘍處集中 40.甲狀腺單純性腺瘤：（1）腫瘤呈卵圓形，包膜完整（2）腫瘤組織大小較一致，排列緊密（3）內(nèi)含膠質(zhì)，與正常甲狀腺相似的濾泡 41.膠樣腺瘤：（1）濾泡內(nèi)有大量膠質(zhì)（2）包膜完整，上皮細(xì)胞成立方形（3）腫瘤間質(zhì)少 42.濾泡狀腺瘤：（1）可見不同分化程度的濾泡，有包膜和血管侵犯（2）瘤細(xì)胞異型性明顯

43.慢性硬化性腎小球腎炎：（1）腎小球纖維化（2）腎小管萎縮消失（3）周圍腎小球代償性肥大（4）間質(zhì)纖維組織增生并有大量的淋巴細(xì)胞，漿細(xì)胞浸潤 44.新月體腎小球腎炎：（1）腎小球壁層上皮細(xì)胞增生形成新月體，早期細(xì)胞性，中期細(xì)胞纖維性，晚期纖維性（2）腎小管萎縮間質(zhì)纖維化（3）炎細(xì)胞浸潤 45.傷寒：（1）傷寒細(xì)胞常聚集成團(tuán)，形成傷寒小結(jié)（2）小結(jié)內(nèi)可見巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞 46.乙腦：（1）灶性神經(jīng)組織壞死，液化形成篩網(wǎng)狀的軟化灶（2）炎細(xì)胞圍繞血管周圍間隙形成血管套袖現(xiàn)象（3）衛(wèi)星現(xiàn)象（4）嗜神經(jīng)現(xiàn)象 47.腸結(jié)核：（1）腸壁內(nèi)有結(jié)核結(jié)節(jié)形成（2）結(jié)節(jié)中心有干酪樣壞死（3）結(jié)節(jié)內(nèi)有朗格漢斯細(xì)胞（4）淋巴細(xì)胞浸潤，反應(yīng)性組織增生 48.肝膿腫：（1）膿腫小結(jié)與周圍正常肝小葉之間界限清楚（2）病灶部位有大量炎細(xì)胞浸潤

49.壞死后性肝硬化：（1結(jié)節(jié)大小不等（2）周圍的纖維間隔明顯增寬（3）肝細(xì)胞大量壞死（4）間隔中有大量的炎細(xì)胞 50.混合血栓：（1）粉染均勻的血小板梁（2）血小板梁之間為充滿紅細(xì)胞的纖維素網(wǎng)和中性粒細(xì)胞 51.霍奇金淋巴瘤：（1）病變組織背景以淋巴細(xì)胞為主的炎細(xì)胞（2）有不等量的R-S細(xì)胞及變異細(xì)胞（3）有病理性核分裂 52.絨癌：（1）可見合體滋養(yǎng)層和細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞（2）癌細(xì)胞異型（3）腫瘤內(nèi)無間質(zhì)和血管

53.慢性硬化性腎小球腎炎：大量腎小球纖維化，玻璃樣變，腎小管萎縮。54.肝細(xì)胞肝癌：（1）癌細(xì)胞組成團(tuán)塊狀細(xì)胞，核染色較深（2）癌巢呈條索樣，癌巢之間有裂隙

55.慢性肝炎：肝細(xì)胞體積增大，肝細(xì)胞氣球樣變，肝索斷裂。炎細(xì)胞浸潤，灶樣壞死

56.流行性腦脊髓膜炎：（1）蛛網(wǎng)膜血管高度擴(kuò)張充血（2）蛛網(wǎng)膜下腔增寬，其中可見大量的中性粒細(xì)胞，淋巴細(xì)胞，及纖維蛋白滲出。

57.子宮平滑肌瘤：瘤細(xì)胞束狀或漩渦狀排列。瘤細(xì)胞呈長梭形，與正常子宮平滑肌細(xì)胞相似。

58.子宮平滑肌肉瘤：瘤細(xì)胞密集。呈梭形或橢圓形，大小不一，形狀不一，多見病理性核分裂像 59.矽肺（硅肺）：硅結(jié)節(jié)的形成，硅結(jié)節(jié)由玻璃樣變的膠原纖維構(gòu)成，肺間質(zhì)彌漫性纖維化

60.腎梗死：梗死灶細(xì)胞漿呈均勻一致的紅色，細(xì)胞核呈核固縮，核碎裂，核溶解等壞死改變，組織結(jié)構(gòu)輪廓尚保存

61.增生性淋巴結(jié)結(jié)核：大量的淋巴小結(jié)被破壞，有

62.慢性腎炎：大量的腎小球纖維化，玻璃樣變，腎小管萎縮，間質(zhì)大量慢性炎細(xì)胞浸潤

第二篇：病理切片借條及存根

XXX醫(yī)院病理科切片借出存根

病理號：患者姓名：切片：張押金：元 借片日期借片人：聯(lián)系電話（手機(jī)）： 身份證號碼 ：

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XXX醫(yī)院病理科切片借條

病理號：患者姓名：切片：張押金：元借片日期經(jīng)手借片人：借片人需認(rèn)真閱讀以下借片須知

1、患者因轉(zhuǎn)診或外地會診需要借片者，須填寫借片條，由專人負(fù)責(zé)辦理借片手續(xù)，每張切片收押金100元。

2、借片期限：本地區(qū)7天，本地以外地區(qū)14天。超出借片期限每天每張切片加收罰金10元。

3、凡損壞或丟失切片者，概不退回押金并加倍賠償。

4、蠟塊為科室無法復(fù)制的重要檔案，一般不外借；會診單位確需借蠟塊時(shí)，在歸還所借切片后可以借出，每個(gè)蠟塊收押金200元，凡損壞或丟失蠟塊者，概不退回押金并加倍賠償，借蠟塊期限同借片期限。

5、為加強(qiáng)交流，請?jiān)跉w還切片（或蠟塊）時(shí)，將會診單位病理診斷（會診報(bào)告）復(fù)印一份交本科存檔，如會診單位未發(fā)會診報(bào)告，敬請會診者將會診結(jié)果填入下表并簽名蓋章。凡會診未告知結(jié)果者概不退回押金。

病理號 患者姓名本單位病理診斷會診單位病理診斷——————————————————————————————————

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第三篇：病理切片考試 診斷依據(jù)

扁桃體白喉 標(biāo)本來源于扁桃體。鏡下見部分鱗狀上皮消失，由厚層紅染膜狀物代替。假膜中可見大量紅染的纖維素，中性粒細(xì)胞及壞死上皮，假膜底部淋巴組織中毛細(xì)血管高度擴(kuò)張、充血。病毒性肝炎 標(biāo)本來源于肝臟。鏡下肝細(xì)胞普遍腫脹，肝竇受擠壓而消失。肝細(xì)胞體積增大呈多邊形，胞漿疏松呈網(wǎng)狀。個(gè)邊肝細(xì)胞出現(xiàn)氣球樣變，有的在肝細(xì)胞胞漿內(nèi)和肝竇內(nèi)可見嗜酸性小體。無明顯炎癥反應(yīng)，也無點(diǎn)狀壞死。

腸傷寒 標(biāo)本取自回腸。中央有一淋巴小結(jié)，鏡下淋巴組織中有大量增生的巨噬細(xì)胞，部分細(xì)胞漿內(nèi)吞噬有淋巴細(xì)胞，紅細(xì)胞、組織碎片及傷寒碎片。這種胞漿內(nèi)含有吞噬物得細(xì)胞稱為傷寒細(xì)胞。這些細(xì)胞聚集在一起形成境界不清楚的結(jié)節(jié)狀病灶，稱為傷寒肉芽腫或傷寒小結(jié)。

肺膿腫 標(biāo)本來源于肺。肉眼可見肺組織內(nèi)有空腔，腔內(nèi)有淡紅色物質(zhì)。鏡下見腔內(nèi)大量中性粒細(xì)胞和紅染無結(jié)構(gòu)物質(zhì)，空腔邊緣可見毛細(xì)血管擴(kuò)張充血。

肺淤血 標(biāo)本來源于肺。低倍鏡可見肺泡壁增寬，毛細(xì)血管擴(kuò)張，腔內(nèi)充滿紅細(xì)胞，少數(shù)肺泡腔正常，多數(shù)含有紅細(xì)胞及淡紅色均質(zhì)水腫液，有的肺泡腔內(nèi)可見棕黃色的巨噬細(xì)胞，也稱心衰細(xì)胞。

風(fēng)濕性心肌炎 標(biāo)本來源于左心室壁。鏡下可見心膜、心肌、心內(nèi)膜。在心肌間質(zhì)和心內(nèi)膜下可見結(jié)節(jié)狀病灶，為風(fēng)濕小體。病灶主要由風(fēng)濕細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞構(gòu)成。其間可見紅染無結(jié)構(gòu)碎片狀或顆粒狀的纖維素樣壞死。風(fēng)濕細(xì)胞體積大，圓形或卵圓形。胞漿豐富略嗜堿性。多為單核、核大，染色質(zhì)集中于和中心并呈細(xì)絲狀向外延伸，因此核橫切面呈梟眼狀，縱切面呈蜈蚣狀。肝細(xì)胞壞死 標(biāo)本來源于肝臟。低倍鏡可見肝組織內(nèi)有散在的大小不等的病灶，正常結(jié)構(gòu)喪失呈一片粉紅色，內(nèi)含大小不等形態(tài)不一的細(xì)胞核及核碎片。高倍鏡可見核固縮、核碎裂、核溶解，壞死細(xì)胞嗜酸性增強(qiáng)。

肝淤血 標(biāo)本來源于肝臟?？梢娭醒腱o脈擴(kuò)張充血，其周圍肝竇明顯擴(kuò)張，其內(nèi)充滿紅細(xì)胞，該處肝細(xì)胞有的體積變小以至消失，有的胞漿內(nèi)可見小空泡，小葉周邊肝竇和肝細(xì)胞上述改變較輕。肝脂肪變性 標(biāo)本來源于肝臟。低倍鏡下可見肝細(xì)胞胞漿內(nèi)有大小不等的圓形空泡，空泡大者，細(xì)胞核被擠到一側(cè)。

何杰金淋巴瘤 標(biāo)本來源于淋巴結(jié)。正常淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)被破壞，大量炎癥細(xì)胞彌漫性增生，其間有R-S細(xì)胞。R-S細(xì)胞體積大，核大，雙核或多核，有時(shí)可由兩核并列形成鏡影細(xì)胞。核膜厚，核內(nèi)有大的嗜酸性核仁。有不同程度的結(jié)締組織增生。急性蜂窩組織炎性闌尾炎

標(biāo)本來源于闌尾。鏡下可見闌尾腔內(nèi)充滿膿性滲出物。粘膜部分壞死脫落形成潰瘍，闌尾壁各層可見血管擴(kuò)張充血，組織間隙內(nèi)有大量中性粒細(xì)胞彌漫性浸潤，漿膜面又纖維素性膿性滲出物。結(jié)腸阿米巴痢疾 標(biāo)本來源于結(jié)腸。一側(cè)腸粘膜正常，一側(cè)脫落。潰瘍邊緣粘膜翹起，潰瘍于粘膜下層呈潛行擴(kuò)展形成特殊的口小底大的燒瓶樣潰瘍。潰瘍底部及邊緣為殘留的壞死組織、間質(zhì)炎癥反應(yīng)復(fù)合物，在潰瘍邊緣及肌層可見阿米巴滋養(yǎng)體。阿米巴滋養(yǎng)體體積大、圓形或卵圓形，胞漿豐富呈弱嗜堿性。胞漿內(nèi)可找到吞噬空泡，滋養(yǎng)體與周圍組織有一環(huán)狀空隙。結(jié)腸細(xì)菌性痢疾 標(biāo)本來源于結(jié)腸。腸粘膜全部壞死，以假膜代之。假膜由纖維素、炎細(xì)胞及壞死的腸粘膜共同構(gòu)成，粘膜下層組織疏松，其內(nèi)毛細(xì)血管擴(kuò)張充血，肌層及漿膜未見明顯炎癥反應(yīng)。

結(jié)核性腦膜炎 標(biāo)本來源于腦組織。腦膜增厚。鏡下蛛網(wǎng)膜下強(qiáng)增寬，內(nèi)含大量纖維素、單核細(xì)胞及淋巴細(xì)胞聚集，并可見干酪樣壞死。有的可見結(jié)核結(jié)節(jié)。

結(jié)節(jié)性肝硬化 標(biāo)本來源于肝臟。鏡下見肝內(nèi)結(jié)締組織廣泛增生，肝小葉結(jié)構(gòu)被破壞，增生的結(jié)締組織將肝小葉分割成大小不等，圓形或橢圓形的假小葉。假小葉內(nèi)肝細(xì)胞索排列紊亂，不呈放射狀。中央靜脈多偏位。增生的結(jié)締組織內(nèi)有程度不等的淋巴細(xì)胞浸潤和膽小管增生。

靜脈血栓 標(biāo)本來源于靜脈。管腔閉塞。鏡下可見管腔內(nèi)有紅色粗顆粒狀的梁，層狀或條紋狀排列。梁間充滿纖維素網(wǎng)，網(wǎng)眼中有大量紅細(xì)胞和少量白細(xì)胞，有的區(qū)域紅細(xì)胞已溶解。血栓與血管壁相連處可見新生毛細(xì)血管和纖維母細(xì)胞，期間含有少數(shù)含鐵血黃素細(xì)胞。淋巴結(jié)的干酪樣壞死 標(biāo)本來源于淋巴結(jié)?？梢娊M織邊緣有殘留的淋巴組織和被膜，但中央部分結(jié)構(gòu)完全消失，呈一片紅染顆粒，細(xì)胞核完全消失，壞死灶周圍可見一些結(jié)節(jié)狀病灶。

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性乳腺癌 標(biāo)本來源于乳腺癌患者的腋窩淋巴結(jié)。淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)大部分被破壞，癌巢和癌索代替之。癌細(xì)胞呈圓形或多邊形，核圓形位于細(xì)胞中，大小一致，染色質(zhì)粗，可見病理性核分裂。鱗狀細(xì)胞癌 切片一側(cè)表面可見正常復(fù)層扁平上皮，也可見到正常移行為癌變部分，癌變上皮細(xì)胞突破基底膜向皮下結(jié)締組織浸潤性生長，形成大小不一，形態(tài)不同的癌細(xì)胞。外層似基底細(xì)胞，內(nèi)層似棘細(xì)胞，中央為角化珠。細(xì)胞中度異型性，可見病理性核分裂。流腦 標(biāo)本取自大腦，鏡下蛛網(wǎng)膜下腔增寬，內(nèi)有大量炎癥細(xì)胞浸潤，以中性粒細(xì)胞為主，可見少量纖維素滲出。血管高度擴(kuò)張充血，腦膜下腦實(shí)質(zhì)水腫。慢性膽囊炎 標(biāo)本來源于膽囊。粘膜上皮大部分完整，固有膜內(nèi)有大量淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、單核細(xì)胞和少量白細(xì)胞浸潤。肌纖維之間和外膜有大量纖維結(jié)締組織增生和淋巴細(xì)胞，漿細(xì)胞及單核細(xì)胞浸潤。

腦膿腫 標(biāo)本來源于腦組織。鏡下可見腦組織中散在數(shù)個(gè)大小不等的病灶，原有腦組織已被破壞，內(nèi)有大量變性壞死的中性粒細(xì)胞和紅染無結(jié)構(gòu)物質(zhì)。病灶中尚可藍(lán)染，細(xì)顆粒狀的菌落。

脾貧血性梗死 標(biāo)本來源于脾臟。切片可見境界清晰的三角形病灶，該處組織有明顯壞死但不徹底，可見脾結(jié)構(gòu)遺跡。病灶周圍脾組織充血、出血、中性粒細(xì)胞浸潤。

肉瘤 鏡下見腫瘤細(xì)胞呈束狀，編織狀排列。癌細(xì)胞大小不等，呈梭形或卵圓形，胞漿豐富呈嗜酸性，核大深染，大小形態(tài)不一，有巨核、多核細(xì)胞，可見各種病理性分裂。

肉芽組織 標(biāo)本來源于皮膚潰瘍面肉芽組織?？梢娙庋拷M織由與表面垂直的毛細(xì)血管、纖維母細(xì)胞、炎癥細(xì)胞組成。新生毛細(xì)血管呈裂隙狀，增生的內(nèi)皮細(xì)胞以雙行隊(duì)列排列，腔內(nèi)大部分無血細(xì)胞；纖維母細(xì)胞呈卵圓形、星形或梭形，細(xì)胞境界清楚，胞漿弱嗜酸性，核卵圓；炎癥細(xì)胞以中性粒細(xì)胞為主。其下層肉芽組織出現(xiàn)纖維化。

乳頭狀瘤 標(biāo)本來源于皮膚。鏡下可見乳頭表面有增生的復(fù)層扁平上皮，增生的間質(zhì)性纖維呈樹枝狀插入乳頭，上皮的分化結(jié)構(gòu)與正常表皮非常相似，基底層為基底細(xì)胞，中間為棘細(xì)胞，表層為顆粒細(xì)胞和角化細(xì)胞，基底膜完好。

乳腺癌 標(biāo)本來源于乳腺。腫瘤由實(shí)質(zhì)性細(xì)胞巢和細(xì)胞索構(gòu)成，巢、索間有少數(shù)結(jié)締組織將其分隔，偶見腺樣結(jié)構(gòu)。癌細(xì)胞大小不一，呈圓形或多邊形，胞漿中等，細(xì)胞核大，染色質(zhì)粗，核仁清楚，可見病理性核分裂。周圍脂肪組織有癌細(xì)胞浸潤。部分切片一側(cè)有幾個(gè)乳腺小葉，但不少腺管由細(xì)胞增生將管腔填滿，增生的細(xì)胞有明顯異型性。腎細(xì)胞水腫 標(biāo)本來源于腎臟。低倍鏡可觀察到腎小球，其附近可見近曲小管，近曲小管上皮細(xì)胞腫脹向管內(nèi)突出。高倍鏡可見近曲小管上皮細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)紅染小顆粒，大小一致，分布均勻，細(xì)胞核正?；虻?。

胃潰瘍 標(biāo)本來源于胃。低倍鏡下可見非潰瘍的胃壁有正常的四層結(jié)構(gòu)：粘膜層、粘膜下層、粘膜肌層、外膜層。潰瘍底部可分為：壞四層、炎癥層、疤痕層。在最底層內(nèi)測還可找到厚壁血管、神經(jīng)纖維、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤。

纖維瘤 標(biāo)本來源于皮下腫瘤。由纖維細(xì)胞和膠原纖維構(gòu)成，呈束狀，編織狀排列。腫瘤細(xì)胞無明顯異型性。纖維肉瘤 腫瘤細(xì)胞豐富，呈束狀交錯(cuò)排列，膠原纖維較少。瘤細(xì)胞短梭形，核大卵圓，有異型性，可見核分裂

纖維腺瘤 標(biāo)本來源于乳腺組織。腫瘤一側(cè)可見部分纖維組織包膜。腫瘤由增生的腺管和結(jié)締組織構(gòu)成，腺管上皮為單層/多層的立方/柱狀細(xì)胞，增生結(jié)締組織有的環(huán)繞腺管，有的垂直方向穿插，將腺管擠壓成裂隙狀、分枝狀。腺上皮和結(jié)締組織無異型性。血吸蟲病的腸 標(biāo)本來源于腸。病變中央為蟲卵或鈣化蟲卵上皮樣細(xì)胞，纖維母細(xì)胞及淋巴細(xì)胞包繞并可見郎罕氏細(xì)胞。血吸蟲病的肝臟 標(biāo)本來源于肝臟。同上 異物肉芽腫 標(biāo)本來源于皮下。鏡下可見大小不等的結(jié)節(jié)狀病灶，病灶中有染色很淡的球星無結(jié)構(gòu)物質(zhì)，周圍有大量巨噬細(xì)胞及異物巨細(xì)胞，胞漿內(nèi)被吞噬的異物。病灶周圍有纖維結(jié)締組織增生。主動脈粥樣硬化 標(biāo)本來源于主動脈。鏡下可見內(nèi)膜、中膜、外膜。部分內(nèi)膜明顯增厚凸起，增厚的內(nèi)膜表面為大量淡紅色細(xì)顆粒狀壞死物。壞死物見可見菱形邊緣平直的空隙，壞死物周圍有少量的泡沫細(xì)胞。

第四篇：病理切片與免疫組化個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

免疫組織化學(xué)中對載波片和蓋波片的處理

（一）載波片的清潔

進(jìn)行免疫組化染色必須保證載波片的潔凈否則常導(dǎo)致非特異性染色和組織脫片現(xiàn)象的出現(xiàn)而新的載波片常有油污等可能影響免疫組化染色的異物。因此必須對載波片進(jìn)行清潔工作。常用的載波片清潔液是用重鉻酸鉀、濃硫酸和蒸餾水以不同比例混合配成不同強(qiáng)度的清潔液。

1． 常用清潔液的配制方法：

1．1重鉻酸鉀：濃硫酸：蒸餾水=1：1：10 重鉻酸鉀10g., 濃硫酸10ml, 蒸餾水100ml 1.2重鉻酸鉀：濃硫酸：蒸餾水=2：3：25 1.3重鉻酸鉀：濃硫酸：蒸餾水=2：5：25 2載波片的清潔方法

1。1先將載波片用清潔液浸泡12-24h 1．2流水沖洗后再用蒸餾水清洗3-5遍 1。3 95%的酒精中浸泡2h，用紗布擦干

1．4放入60℃烤箱中烤干或者自然晾干儲存在玻片盒內(nèi)備用

（二）載玻片的表面處理

在免疫組化試驗(yàn)中由于實(shí)驗(yàn)操作步驟的繁多常引起組織切片或者細(xì)胞涂片的脫落，影響檢測效果，因此常需要用粘附濟(jì)對切片進(jìn)行處理。

1APES黏附劑APES是一種新型玻片黏附劑它的黏附劑機(jī)制是通過對玻璃表面的化學(xué)修飾改變玻璃表面的化學(xué)物理特性使組織切片活細(xì)胞成分牢固的貼附于玻璃表面不易脫落并可長期保存。是目前應(yīng)用最多的組織黏附劑。

1．1APES工作液配制APES1ml丙酮50ml，混勻即可。

1．2切片處理方法1。1。1干警的切片放入盛有丙酮的染色缸中浸泡5min 1．1．2浸入APES工作液停留20-30s 1．1．3純丙酮洗2次1。1。4放入烤箱37℃過夜1。1。5用干凈玻片盒裝好室溫保存?zhèn)溆靡话憧纱娣虐肽暌陨?/p>

2多聚賴氨酸（poly-l-lycine.pll）多聚賴氨酸水溶液是一種良好的組織黏附劑使用濃度在0。005-0。01％但是由于價(jià)格較高在免疫組化中很少用。1．1多聚賴氨酸儲備液的配制，將0.5g多聚賴氨酸充分溶于100 ml蒸餾水中，4℃或者-20℃保存?zhèn)溆茫╬ll可反復(fù)水融）工作液可將pll原液稀釋10-50倍使用 1。2切片的處理方法

1。1。1干凈干燥切片浸入pll工作液，停留20-30s 1.1.3用干凈玻片盒裝好，室溫保存?zhèn)溆靡话憧纱娣虐肽暌陨?/p>

（三）蓋波片的處理

蓋波片的處理方法如上,處理時(shí)間可適當(dāng)縮短,清潔液浸泡2h即可（摘自常雙鎖主編醫(yī)學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)精編）

石蠟切片微波修復(fù)抗原染色程序

1載玻片防脫片劑處理：可選擇APES或poly-l-lycine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分鐘以上使切片緊密黏附 2． 切片常規(guī)脫蠟至水

3．30％H2O2+蒸餾水10份混合，室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶，蒸餾水洗3次 4．熱修復(fù)抗原：將切片浸入0.01M購船酸鹽緩沖液中（PH6。0），電路或微波爐加熱之沸騰后斷電間隔5-10分鐘后，反復(fù)1-2次。冷卻后PBS（PH7。2-7。6）洗1-2次。5滴加5％BSA封閉液室溫20分鐘，甩去多余液體不洗。6滴加適當(dāng)稀釋的抗（小鼠或兔IgG）.37℃1h左右或20℃時(shí)左右，也可4℃過夜，PBS（PH7。2-7。6）洗2分鐘×3次。（一抗的稀釋度孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說陽性染色強(qiáng)度不夠時(shí)可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時(shí)間背景過高時(shí)可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間）

7．滴加生物素化山羊抗小鼠IgG（或兔、人IgG），20-37℃20分鐘PBS（PH7。2-7。6）洗2分鐘×3次。

8滴加試劑SABC,20-37℃20分鐘.PBS（PH7。2-7。6）洗5分鐘×4次.9.DAB顯色：使用DAB顯色試劑盒（AR1022）。取蒸餾水1ml加試劑盒中A,B,C試劑各1滴,混勻后加至切片,室溫顯色,鏡下控制反應(yīng)時(shí)間,一般在5-30分鐘之間.也可自配顯色劑顯色。蒸餾水洗滌。

0．02M PBS（PH7。2-7。6）配法：

1000ml蒸餾水中加氯化鈉8.5g,Na2HPO42.8g, Na2H2PO40.4g.如果用的是含水磷酸鹽，應(yīng)加上分子式中水的含量。

0．02M枸椽酸鹽緩沖液：1000ml蒸餾水中加枸椽酸三鈉（C6H5Na3O7·2H2O）3g, 枸椽酸（C6H8O7·H2O）0.4g 注意事項(xiàng)：

如果染色背景較高，在SABC反應(yīng)之后，DAB顯色之前，用加水0。01-0。02％TWEEN20的PBS（PH7。2-7。6）洗滌切片4次，單純PBS洗2次，然后顯色。

以上摘自武漢博士德生物工程有限工程公司所產(chǎn)的即用型SABC免疫組化染色試劑和使用說明書。

HE染色方法

1二甲苯I脫蠟10-15min 2二甲苯II脫蠟10-15min 3無水乙醇脫二甲苯1min×2次 4.95％乙醇 5.90％乙醇 6.85％乙醇 7自來水洗2min 8蘇木蘇染色1-5 min 9自來水洗1 min 10.0.5％-1％鹽酸乙醇分化20S 11自來水洗1min 12稀氨水（1％）返藍(lán)數(shù)秒，自來水或蒸餾水洗1 min 13尹紅染色1-5 min 14自來水洗

15.85％乙醇脫水20S 16.90％乙醇30S 17.95％乙醇I 1 min 18.95％乙醇II 1 min 19.無水乙醇I 2min 20.無水乙醇II2min 21二甲苯I 2min 22二甲苯II2min 23二甲苯III2min 24中性樹膠或加拿大樹膠封固。結(jié)果：

細(xì)胞核呈藍(lán)色，鈣鹽和各種微生物呈藍(lán)染色或紫藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)，肌纖維，纖維結(jié)締組織，紅細(xì)胞和嗜尹紅顆粒呈不同程度的紅色。摘自梁曉俐主編病理學(xué)基礎(chǔ)與實(shí)驗(yàn)技術(shù)

第五篇：組織病理切片的制作流程

組織病理切片的制作流程

1． 取材

組織取材的方法是制作切片的一個(gè)重要程序，根據(jù)教學(xué)、科研及外檢的具體要求取自人體（外科手術(shù)切除標(biāo)本、活檢標(biāo)本、尸檢標(biāo)本）或動物，并確定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)的基本理論知識，還要掌握實(shí)際操作技術(shù)，每個(gè)組織器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取組織作為制片材料，不然，無法達(dá)到教學(xué)、科研和臨床診斷的目的，具體要求如下：

(1)材料新鮮：取材組織愈新鮮愈好，人體組織一般在離體后，動物組織在處死后迅速固定，以保證原有的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。

(2)組織塊的大?。核〗M織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內(nèi)部，但根據(jù)制片材料和目的不同，組織塊的較理想體積也不同，如制作病理外檢、科研切片，其組織塊可以薄取0.1～0.2cm即可，這樣可以縮短固定脫水透明的時(shí)間，若制作教學(xué)切片厚取0.3 ～0.5cm，這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學(xué)切片。

(3)勿擠壓組織塊: 切取組織塊用的刀剪要鋒利，切割時(shí)不可來回銼動。夾取組織時(shí)切勿過緊，以免因擠壓而使組織、細(xì)胞變形。

(4)規(guī)范取材部位: 要準(zhǔn)確地按解剖部位取材，病理標(biāo)本取材按照各病變部位、性質(zhì)的不同，根據(jù)要求規(guī)范化取材。

(5)選好組織塊的切面:根據(jù)各器官的組織結(jié)構(gòu)，決定其切面的走向?？v切或橫切往往是顯示組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵，如長管狀器官以橫切為好。

(6)保持材料的清潔:組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等，可用水沖洗干凈后再放入固定液中。

(7)保持組織的原有形態(tài):新鮮組織固定后，或多或少會產(chǎn)生收縮現(xiàn)象，有時(shí)甚至完全變形。為此可將組織展平，以盡可能維持原形。2．固定

(1)小塊組織固定法：這是最常用的方法，從人體或動物體取下的小塊組織，須立即置入液態(tài)固定劑中進(jìn)行固定，通常，標(biāo)本與固定液的比例為1:4～20，但組織塊不宜過大過厚，否則固定液不能迅速滲透。故取組織塊的大小一般為2.0cm×2.0cm×0.3cm。(2)注射、灌注固定法：某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內(nèi)部，或需要對整個(gè)臟器或整個(gè)動物體進(jìn)行固定。這時(shí)宜采用注射固定或灌注固定法。將固定液注入血管，經(jīng)血管分支到達(dá)整個(gè)組織和全身，從而得到充分的固定。

(3)蒸汽固定法：比較小而厚的標(biāo)本，可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，則應(yīng)在血片未干燥前采用鋨酸或甲醛蒸汽接觸固定。最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。

3．脫水透明標(biāo)本經(jīng)過固定和沖洗后，組織中含有較多的水分，必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來，這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片，還是用火棉膠切片，都必須除去組織中所含水分，因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容，常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。

脫水的步驟是：80%、90%、95%、100%各種濃度乙醇2小時(shí)，此過程可用脫水機(jī)自控完成。

丙酮也是一種脫水能力很強(qiáng)的脫水劑，但因其脫水能力很強(qiáng)，對組織有劇烈收縮作用，在制作科研、教學(xué)切片時(shí)一般不用該試劑。因乙醇、丙酮等不溶于石蠟，還要經(jīng)過一個(gè)能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。

4．浸蠟、包埋

(1)使石蠟浸入組織中，取代組織中含有的透明劑。

(2)包埋：將浸蠟后的組織置于融化的固體石蠟中，石蠟?zāi)毯?，組織即被包在其中，稱蠟塊，此過程稱為包埋。5．切片和貼片

(1)修整蠟塊：可視其組織的大小，在組織邊緣約0.1～0.2cm處，切去余蠟部分，否則易造成組織皺縮不平。

(2)準(zhǔn)備好切片用具：切片刀、毛筆、眼科鑷子（彎）、漂烘溫控儀(3)安裝蠟塊：將修好的蠟塊安裝在金屬或木制持蠟器上。

(4)安裝切片刀：將切片刀安裝在切片機(jī)的刀臺上，把刀臺上的緊固螺絲旋緊，使切片時(shí)不產(chǎn)生振動，能保持一定的切片厚度。

(5)切片的厚度：切片機(jī)的厚度調(diào)節(jié)器上刻有0～50μm或0～25μm，可任意選擇其厚度，石蠟切片的厚度一般在4～6μm。(6)切片(7)鋪片：用眼科鑷子鑷起蠟帶輕輕平鋪在40～45℃的水面上，借水的張力和水的溫度，將略皺的蠟帶自然展平。

(8)貼片、烘片：待切片在恒溫水面上充分展平后，將蠟片撈到載玻片的中段處傾去載玻片上的余水，置入60～65℃恒溫箱內(nèi)或切片漂烘溫控儀的烘箱內(nèi)烤片15～30分鐘，脫去溶化組織間隙的石蠟。

6．染色和封片常用的染色方法是蘇木素-伊紅（Hematoxylin-Eosin）染色法，簡稱H.E染色法。這種方法對任何固定液固定的組織和應(yīng)用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質(zhì)染成藍(lán)色，如細(xì)胞核中的染色質(zhì)等；伊紅是一種酸性染料，可使組織中的嗜酸性物質(zhì)染成紅色，如多數(shù)細(xì)胞的胞質(zhì)、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。

H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固

常規(guī)蘇木素染色中的對比染色是用伊紅,近年來在英、美國家的一些實(shí)驗(yàn)室則采用焰紅（phloxine）,此外也有用桔黃G（OrangeG）、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對比染色。伊紅為染胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。1.取材

取材的好壞，直接影響切片的質(zhì)量。醫(yī)生在取材時(shí)，首先要有一把鋒利的取材刀，在切割組織時(shí)要避免取材刀來回拖拉，切取的組織塊厚薄要均勻，一般厚度以0.2 ～0.3cm為適，較容易發(fā)脆的組織如甲狀腺、肝臟、血塊、淋巴結(jié)、大塊癌組織等可適當(dāng)厚一點(diǎn)，而脂肪組織、肺組織、纖維性腫瘤、平滑肌瘤等致密的或試劑不易滲入的組織應(yīng)取薄一些；淋巴結(jié)應(yīng)修掉兩側(cè)球冠，并盡量剔除周圍的脂肪組織。在取材中還應(yīng)十分注意組織內(nèi)是否有縫線或骨組織，如碰到不可避免的鈣化組織，應(yīng)與技術(shù)室講明，在切取纖維組織、肌肉、組織、胃腸道時(shí)，應(yīng)注意纖維及肌肉的走向，取材時(shí)盡可能按與纖維平行走向切取為佳。2.固定

固定是技術(shù)室工作的第一步，也是在整個(gè)制片過程中無法補(bǔ)救的一步。所謂“固定”，就是組織離體后，用各種辦法使其細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)盡量接近其生活狀態(tài)時(shí)的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置的過程。固定的目的是為了防止組織細(xì)胞自溶與腐敗，防止了細(xì)胞內(nèi)的酶對蛋白質(zhì)的分解作用，使細(xì)胞內(nèi)的各和成分如蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物或酶類轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì)，以保持原有的結(jié)構(gòu)與生活時(shí)相仿。另外，組織固定后，均呈一定的硬化狀態(tài)，增加組織 韌性，而且不易變形，有利于以后的組織處理。所以組織一旦離體必需及時(shí)固定，固定液的量應(yīng)為組織的5倍。固定的關(guān)鍵主要與固定的及時(shí)性、固定液的選擇、固定液的濃度、固定的溫度和時(shí)間有關(guān)。最常用的固定液為10％福爾馬林。筆者認(rèn)為，10％福爾馬林由于受到福爾馬林的質(zhì)量、使用時(shí)的揮發(fā)和取材時(shí)帶入的水分影響，濃度被降低致組織固定不足，而高濃度的福爾馬林，降低了對組織的穿透性，形成周圍固定好而中央固定不到的現(xiàn)象。通過實(shí)踐，本人認(rèn)為以酸性12～15％的福爾馬林最佳。大標(biāo)本（2cm厚）一般需要6～12個(gè)小時(shí)，小標(biāo)本一般需要3～6個(gè)小時(shí)；當(dāng)室溫低18℃時(shí)，可在37℃以下的溫箱內(nèi)加溫4～6個(gè)小時(shí)。由于HE染色最佳著色PH為3.5～4.5, 中性福爾馬林對蘇木素染色有一定影響,細(xì)胞核容易發(fā)灰,核染色質(zhì)不佳。所以, 盡管中性福爾馬林對抗原有很好的保存作用，但酸性福爾馬林對絕大多數(shù)抗原來說也有很好的保存作用，所以在沒有特別處理的情況下常規(guī)HE用12～15％酸性福爾馬林也可以（每100毫升12～15％福爾馬林液內(nèi)加5毫升冰醋酸）。骨髓、結(jié)締組織固定以Bouin液為佳，經(jīng)Bouin液固定后的組織必須流水沖洗4小時(shí)以上。有條件的單位可根據(jù)不同要求選用二種或二種以上的固定液；少數(shù)單位還可建立組織冷凍庫，以便適應(yīng)各種特殊的處理要求。3.水洗

固定后水洗（10～20分鐘），通常被很多人所忽視，而水洗不徹底，容易造成脫片和染色不鮮艷。對需做免疫組織化學(xué)的組織，更不應(yīng)當(dāng)忽視。福爾馬林不利于組織塊內(nèi)抗原的保存.脫水和透明

所謂脫水就是利用脫水劑將組織內(nèi)的水分置換出來，以利于有機(jī)溶劑的滲入，這一過程稱為脫水。脫水是否徹底，直接關(guān)系到組織是否能充分透明，而脫水過度（原因是組織在純酒精內(nèi)時(shí)間過久，發(fā)生組織質(zhì)地發(fā)生變化）容易造成組織發(fā)脆。造成組織發(fā)脆的原因還有加溫（溫度超過35℃）、脫水劑內(nèi)加有丙酮、浸蠟用的石蠟中二甲苯過多等等。一般我們總認(rèn)為組織發(fā)脆跟高濃度酒精有關(guān)，而忽視了與低濃度的酒精關(guān)系，其實(shí)低濃度的酒精具有強(qiáng)大的穿透力，比純酒精更容易滲透到組織塊內(nèi)部使之脫水，組織如果在低濃度酒精里充分脫水，在高濃度酒精里只需脫去從低濃度到高濃度之間的水份，因此，僅需短時(shí)間就可完成，如果這時(shí)不縮短純酒精的時(shí)間，便會引起組織發(fā)脆；如果脫水時(shí)加溫，使用丙酮，還可引起組織收縮，并影響免疫組織化學(xué)的標(biāo)記。為了使石蠟浸入到組織塊內(nèi)，必須經(jīng)過一種既能與脫水劑混合，又能與石蠟相溶的媒介物質(zhì)，這個(gè)過程稱透明。目前最好的透明劑是二甲苯。很多人認(rèn)為二甲苯極容易使組織發(fā)脆，這個(gè) 觀點(diǎn)很片面，在常溫下，如果不是時(shí)間過長（超過２4小時(shí)以上）二甲苯并不會引起組織過份發(fā)脆，相反會使某些組織結(jié)構(gòu)比較質(zhì)韌的組織：比如子宮肌瘤等相當(dāng)好切），但是當(dāng)二甲苯溫度超過35℃以后，極易引起組織發(fā)脆。所以本人認(rèn)為，大小標(biāo)本最好分開脫水，一般情況下，大標(biāo)本脫水時(shí)間（室溫18℃）以80％酒精2小時(shí)、95％酒精（2道）各1個(gè)半小時(shí)至2小時(shí)、純酒精（3道）各1個(gè)半小時(shí)至2小時(shí)，二甲苯（2道）各30-60分鐘為宜；小標(biāo)本脫水時(shí)間應(yīng)相應(yīng)縮短。脫水時(shí)間長短，與室溫高低有密切的相關(guān)。我們在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，室溫在12～15℃時(shí)，可作為一個(gè)臨界溫度范圍。當(dāng)室溫高于此溫度范圍時(shí)，組織容易脫水，可適當(dāng)縮短脫水時(shí)間；而室溫低于該溫度范圍時(shí)，應(yīng)適當(dāng)延長脫水時(shí)間（如能保證在一個(gè)恒定的溫度下最佳）。更換試劑，應(yīng)以量為基礎(chǔ)，定量更換，不能等到切片不好時(shí)再去更換。否則，至少會有2～3批組織切片不好。根據(jù)我科經(jīng)驗(yàn)，如試劑用量為500ml，每500個(gè)蠟塊更換一次為宜。5.浸蠟

組織透明后，在熔化的石蠟內(nèi)浸漬的過程稱為浸蠟。用其他浸透劑（如火棉膠、明膠等）滲入組織內(nèi)部的過程可稱為浸透或透入。浸蠟溫度過高（超過60℃），在蠟內(nèi)加入二甲苯蠟或由于透明時(shí)帶進(jìn)的二甲苯過多，都會導(dǎo)致組織發(fā)硬，還會使組織內(nèi)的抗原受到破壞；所以作者主張浸蠟用的石蠟熔點(diǎn)在56℃（三道），第一道：石蠟30分鐘；第二道：石蠟90分鐘；第三道：石蠟，90分鐘。浸蠟溫度控制在56～58℃左右。（第一道也可用硬脂酸石蠟1：3混合浸蠟，不僅可軟化組織，特別適用于比較韌、硬的組織，而且由于硬脂酸是弱酸性的，對細(xì)胞核有媒染作用，核漿比鮮明，但容易脫片；同時(shí)對疏松組織容易散片）。有條件的可以每天打開第一道石蠟的蓋子，讓二甲苯揮發(fā)。浸蠟所用的石蠟如有雜質(zhì)盡可能過濾，以防附在組織上，造成切片刀刀口受損，或切片破碎和劃痕增多。6.包埋

用包埋劑來支持組織的過程稱包埋。最常用的是石蠟包埋法。包埋的關(guān)鍵一是平整，二是方位。要求在包埋時(shí)，應(yīng)采用鑷子輕壓組織塊拱起部份，使之平貼于底部，通常采用組織的最大面包埋。囊壁、管腔組織應(yīng)豎直包埋。小塊多顆組織，應(yīng)盡量放在一起，并保證在一個(gè)平面上。修去兩邊的余蠟（所謂的兩邊，指切片時(shí)與切片刀垂直的兩側(cè)）。包埋時(shí)還應(yīng)注意有無縫線，紙絮，如有一定要去除。胃黏膜活檢標(biāo)本，不能按一般的規(guī)律取最大包埋面，應(yīng)采取窄面豎起包埋。包埋的蠟更應(yīng)過濾，留有雜質(zhì)的石蠟，容易造成污染或刀口受損。蠟的熔點(diǎn)應(yīng)在56～58℃之間選擇，不提倡在冬天使用軟蠟。因?yàn)橛?軟蠟包埋的蠟塊，到了夏天，會粘在一起，不利于資料的保存，而且即使在冬天，用硬蠟包埋的蠟塊也比用軟蠟包埋的蠟塊要好切。7.磨刀

要想切好一張切片，首先要有一把鋒利的切片刀。磨刀是從事切片技術(shù)人員的一項(xiàng)最基本技術(shù)，刀磨的好壞，直接關(guān)系到切片的質(zhì)量。磨刀的手法各人不同，但都要求用力均勻，使刀口和磨刀石全面接觸，兩手的用力點(diǎn)應(yīng)在刀口上，而不是在刀背上。切片刀應(yīng)用一次磨一次，每次僅需10～15分鐘，過長時(shí)間的磨刀，容易把已經(jīng)磨出的鋒刃磨掉，檢查切片刀是否鋒利，用手試摸刀口的方法并不十分科學(xué)，不僅不能證明切片刀是否真正鋒利，而且容易損害刀口，最簡單的辦法是每次磨好后拿一個(gè)蠟塊試切一下。每次磨好刀后，應(yīng)將磨刀石用蓋子蓋好，以防灰塵掉在磨刀石上，用有灰的磨刀石磨刀，會使切片刀產(chǎn)生許多細(xì)小的缺口?，F(xiàn)在很多單位都買了磨刀機(jī)，磨刀機(jī)用來開刀鋒和磨缺口的確不錯(cuò)，但由于磨刀的角度和時(shí)間不易精確掌握，故效果并不理想。根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn)，真正的鋒刃很難用機(jī)器磨出來。一次性刀片在很大程度上解決了這個(gè)問題。如用一次性刀片，必須及時(shí)更換刀口。一個(gè)刀口切小標(biāo)本不應(yīng)超過20～25只蠟塊，切大標(biāo)本不應(yīng)超過10～15只蠟塊。8.切片

切片的第一步必需粗切。粗切的厚度大約在５0～100微米左右，質(zhì)地較硬的組織或較小的組織應(yīng)再薄一些，粗切致組織全部暴露后，才進(jìn)行細(xì)切。細(xì)切至組織塊表面均勻一致，無白點(diǎn)后，再把切的蠟片放入溫水中。切片時(shí)要求用力均勻、柔和，搖速不易過快或過慢。過快會導(dǎo)致切片厚薄不均，機(jī)器磨損；過慢會使切片增厚。切片厚度一般為3～5微米。切片的要求是完整、薄、均勻。切下的片膜其大小形狀應(yīng)與組織塊一致，切片的不完整，常會將重要病變遺漏，導(dǎo)致誤診、漏診。在切片放蠟塊時(shí)，應(yīng)注意組織包埋的方向，組織的層次，纖維、肌肉等的走向應(yīng)與切片刀平行，較難切的部分應(yīng)放在上面，如皮膚的表皮，腫塊的包膜，胃腸道的漿膜等，這樣可以減少組織的斷裂現(xiàn)象。操作切片機(jī)時(shí)應(yīng)用力均勻，避免用力過重。對脫鈣組織、骨髓，以及已知的鈣化組織，應(yīng)選用固定的刀口，以減少其他部位出現(xiàn)缺口的可能性。在使用毛筆展片時(shí)要防止筆絲進(jìn)入刀口，因?yàn)槊壳械揭桓P絲，就會增加一個(gè)缺口。切片厚度一般為4～6微米，有人認(rèn)為：只要切片機(jī)刻度標(biāo)著幾個(gè)微米，切出來的片子就是幾個(gè)微米。其實(shí)不然，當(dāng)切片刀不鋒利，或切片時(shí)速度不勻，或切的較慢時(shí)，切的片子都會變厚，只有在切片刀十分鋒利、切片勻速的情況下，才能真正保證其厚度。下面是切片時(shí)碰到的問題的原因及可 能處理的方法：(1)組織發(fā)脆：一般是脫水、透明、浸蠟時(shí)間過長、溫度過高，并與組織本身質(zhì)地也有關(guān)，在切片時(shí)，邊切邊用嘴向蠟片吹氣，可能會好些。(2)切片卷起，可能是刀不鋒利，或刀鋒在另一面，或刀角度過大，切片太厚等等。(3)蠟片彎曲：可能是刀鋒不均，切片刀未磨直，切片刀與蠟塊不平行。(4)透明、浸蠟時(shí)間過長、溫度過高，并與組織本身質(zhì)地也有關(guān)(5)厚薄不均：可能是刀、刀座及蠟塊未夾緊，組織太硬，或切片機(jī)主軸太向前，或切片機(jī)已磨損。(6)切片出現(xiàn)裂痕：可能是刀有缺口，石蠟內(nèi)有雜質(zhì)，組織內(nèi)有鈣化、骨片或有線結(jié), 也可能會有棉紙纖維等。(7)切片不連片，切不下片，切片很厚，或者切片后蠟塊發(fā)白，內(nèi)陷：組織脫水不佳。補(bǔ)救辦法：可先將蠟塊溶解，取出組織，放入加熱水浴的丙酮內(nèi)（80℃），30～60分鐘，再進(jìn)行透明浸蠟包埋切片，也許會好一點(diǎn)。9.展片與撈片

展片水溫應(yīng)在42℃至47℃之間，這主要和包埋蠟的熔點(diǎn)有關(guān),水溫過高，會引起組織細(xì)胞散開，水溫過低，切片皺摺無法攤平。包埋蠟中如有二甲苯，也會造成石蠟溶解現(xiàn)象。而用一次性刀片切的片子，一碰到熱水，片子上的皺摺就無法再展開，這有二個(gè)方法可以解決：第一、可以在切片時(shí)邊切邊向蠟片吹氣，這樣的片子就會非常平整，放到熱水里就會自然展開，比較方便快捷，但這樣的片子會略微厚一點(diǎn)；第二、在切完片子后，先把切片放在30%酒精水溶液中，讓酒精的張力自動把皺摺展開，然后再將切片移到熱水，這樣的片子會較薄;如酒精濃度過高，容易引起切片破碎，出現(xiàn)裂隙，像脂肪之類細(xì)胞間粘附性較小的組織一碰到酒精就會散開，故不能用此法。最后撈片時(shí)玻片要干凈，要選擇那些完整、無皺摺的切片，粘貼于玻片中1/3和下1/3的中間。10.烤片和脫蠟

烤片，一般在60℃的溫箱內(nèi)烤片0.5～1小時(shí)左右，溫度過高，會引起切片細(xì)胞收縮；時(shí)間太短(少于20分鐘)，容易造成脫片。脫蠟也相當(dāng)重要，如果脫蠟不干凈，切片不易著色或著色不勻，所以，脫蠟用的二甲苯要經(jīng)常更換，一般用3道二甲苯，每500ml液體，處理500張切片后更換一次為宜。當(dāng)室溫低于18℃時(shí)，必須將切片從溫箱拿出后立即放入二甲苯中脫蠟，或?qū)⒍妆椒湃霚叵鋬?nèi)預(yù)熱（37℃左右）脫蠟，最高不得超過60℃。然后經(jīng)高濃度的酒精到低濃度的酒精洗去二甲苯，至水。11.染色

蘇木素染色時(shí)間要根據(jù)染料的新舊、溫度、切片的類型而定，一般為5－15分鐘。經(jīng)水略洗后，用鹽酸酒精分化，分化程度必須用顯微鏡控制。分化水洗后，可用溫水或 自來水藍(lán)化，并充分水洗（流水沖洗5分鐘以上），以防鹽酸殘留導(dǎo)致切片褪色。我們不提倡使用堿性溶液（釋氨水、肥皂水等）促藍(lán)，盡管藍(lán)化效果很好，但從實(shí)踐的結(jié)果來看，用堿性溶液促藍(lán)的切片不能長期保存，容易褪色。最后入伊紅復(fù)染（5－20秒）。HE染色的關(guān)鍵在于深淺適度，對比鮮明，一般有經(jīng)驗(yàn)的，肉眼就能判斷，但偶而也會出現(xiàn)失誤，所以用顯微鏡控制是最保險(xiǎn)的方法。其關(guān)鍵的步驟在于蘇木素染好后的分化及藍(lán)化過程，在藍(lán)化結(jié)束后，應(yīng)在顯微鏡下觀察細(xì)胞核著色是否合適，核結(jié)構(gòu)是否清晰，胞漿內(nèi)是否有殘留的蘇木素等等。染色理想的切片在顯微鏡下應(yīng)是：細(xì)胞核與細(xì)胞漿應(yīng)藍(lán)紅相映，鮮艷美麗；核漿對比明顯，核膜及核染色質(zhì)顆粒清晰可見。12.脫水和封片

切片脫水應(yīng)從低濃度的酒精到高濃度的酒精，80%酒精1道，95%酒精2道，純酒精2道，（正丁醇1道），二甲苯2道。濃度低的酒精比濃度高的酒精更容易脫水，但也容易使伊紅退色，故脫水時(shí)間可短一點(diǎn)，每道3－5分鐘，純酒精每道10分鐘。為增加酒精與二甲苯的相融性，可在二甲苯前面增加一道正丁醇；石碳酸－二甲苯液也有此效，但用石碳酸時(shí)如不洗凈，可引起切片退色，不利于切片久存，故不作推薦。切片經(jīng)二甲苯透明后，用中性樹膠封固。為增加切片的透明度，防止細(xì)胞收縮、龜裂或切片出現(xiàn)黑色結(jié)晶樣小點(diǎn)。所以我們規(guī)定切片必須濕封，不得用溫箱烤干或電吹風(fēng)吹干后干燥封片。在南方冬春、霉雨季節(jié)，封片時(shí)要防止口鼻呼出的氣體接觸到切片；在天氣較潮濕的日子里，不宜一次將多張切片取出待封，以免切片“還潮”，形成透明不佳,出現(xiàn)云霧狀水珠。脫水劑的更換也應(yīng)有一定的時(shí)間規(guī)定。一般是每500ml液體，處理500張切片后更換一次為宜。封片樹膠不能過稀，封片時(shí)樹膠要均勻充滿蓋玻片且樹膠不及外溢為佳。要將組織全部覆蓋，也不能有氣泡。最后，粘貼標(biāo)簽，標(biāo)簽必須貼于玻片左側(cè)，編號書寫清楚，最好能打印。