第一篇：微生物質(zhì)量控制盲樣結(jié)果分析（共）

微生物質(zhì)量控制盲樣結(jié)果分析

提高微生物檢驗(yàn)人員的技術(shù)水平，使檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。方法 參加省一級質(zhì)量控制盲樣考核，從10g奶粉中檢出1～3種致病菌，并對結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果從樣品中檢出沙門菌、單核細(xì)胞增生李斯特菌、阪崎腸桿菌各1株，通過比對，正確率100%。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)水平進(jìn)一步得到了提高。

為提高微生物室檢驗(yàn)質(zhì)量，在做好實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制的同時(shí)，每年都積極參加全省衛(wèi)生檢測檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室間的質(zhì)量控制?，F(xiàn)將2010年本實(shí)驗(yàn)室參加河南省疾控中心對地市級實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行室間質(zhì)量控制考核的結(jié)果分析如下。

1、材料與方法

1.1 質(zhì)控樣品塑料管包裝10g奶粉，本底清楚，不含有目標(biāo)微生物，混合一定量的1～3種致病性細(xì)菌純培養(yǎng)物。

1.2 檢驗(yàn)要求鑒定到種或?qū)佟?/p>

1.3 檢測標(biāo)準(zhǔn)按GB 4789-2010.4、GB 4789-2010.10、GB 4789-2010.30、GB 4789-2010.40中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)方法[1]。

1.4 檢驗(yàn)試劑營養(yǎng)瓊脂、營養(yǎng)肉湯、增菌培養(yǎng)基、分離培養(yǎng)基、TSI等生化試劑由環(huán)凱科技有限公司提供，VITEK32鑒定卡由法國梅里埃生物有限公司提供，顯色培養(yǎng)基由博賽生物技術(shù)股份有限公司提供。

1.5 方法：

1.5..1 樣品處理、增菌將10g奶粉以無菌方式倒入100ml無菌生理鹽水中，充分混勻。各吸取25ml分別加入225 ml7.5%NaCl肉湯、LB1、BPW、BPW中。LB1經(jīng)300C24h培養(yǎng)后吸取0.1ml轉(zhuǎn)入10ml LB2中培養(yǎng)，其中1份BPW經(jīng)360C、12h培養(yǎng)后吸取1ml轉(zhuǎn)入10ml TTB中增菌，另1份BPW經(jīng)360C、18h培養(yǎng)后吸取1ml轉(zhuǎn)入10ml mLST-Vm中增菌。

1.5.2 劃線分離7.5%NaCl肉湯增菌液經(jīng)360C、24h培養(yǎng)后劃線于金黃色葡萄球菌顯色平板，LB2增菌液經(jīng)360C、24h培養(yǎng)后劃線于單核細(xì)胞增生李斯特菌顯色平板，TTB增菌液經(jīng)360C、24hr培養(yǎng)后劃線于沙門菌顯色平板，mLST-Vm增菌液經(jīng)440C、24h培養(yǎng)后劃線于阪崎腸桿菌顯色平板。結(jié)果

2.1菌落生長情況顯色平板經(jīng)360C、24h培養(yǎng)后觀察結(jié)果，沙門菌顯色平板上有紅色可疑菌落生長，阪崎腸桿菌顯色平板上有藍(lán)綠色可疑菌落生長，單核細(xì)胞增生李斯特菌顯色平板上有藍(lán)色可疑菌落生長，周圍有白色暈環(huán)，金黃色葡萄球菌顯色平板上沒有紅色可疑菌落生長。挑取顯色培養(yǎng)平板上單個(gè)可疑阪崎腸桿菌和單核細(xì)胞增生李斯特菌菌落轉(zhuǎn)種營養(yǎng)瓊脂經(jīng)360C、24h培養(yǎng)上VITEK32細(xì)菌鑒定儀進(jìn)行菌種鑒定。

2.2初步生化試驗(yàn) 挑取紅色可疑沙門菌轉(zhuǎn)種TSI瓊脂斜面，經(jīng)360C、24h培養(yǎng)后，斜面顯紅色，底層黃色，產(chǎn)H2S，將菌株轉(zhuǎn)種營養(yǎng)瓊脂經(jīng)360C、24h培養(yǎng)上VITEK32細(xì)菌鑒定儀進(jìn)行菌種鑒定。

2.2染色鏡檢挑取營養(yǎng)瓊脂上可疑沙門菌和阪崎腸桿菌革蘭染色鏡檢，為G-桿菌，挑取營養(yǎng)瓊脂上可疑單核細(xì)胞增生李斯特菌革蘭染色鏡檢，為G +桿菌。

2.3 外加實(shí)驗(yàn)營養(yǎng)瓊脂上可疑沙門菌和阪崎腸桿菌氧化酶試驗(yàn)為陰性。

營養(yǎng)瓊脂上可疑單核細(xì)胞增生李斯特菌做觸酶試驗(yàn)為陽性，血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)陰性。

2.4 菌種鑒定經(jīng)VITEK32細(xì)菌鑒定儀鑒定，檢出沙門菌、阪崎腸桿菌和單核細(xì)胞增生李斯特菌。

2.5 血清學(xué)凝集試驗(yàn)沙門菌多價(jià)血清凝集陽性，菌體抗原O9、O12、O1、鞭毛抗原Hg、Hm凝集，為D群腸炎沙門菌。

2.6進(jìn)一步生化實(shí)驗(yàn)將單核細(xì)胞增生李斯特菌做進(jìn)一步生化反應(yīng)，結(jié)果見表1。證實(shí)該菌株為單核細(xì)胞增生李斯特菌。

表1單核細(xì)胞增生李斯特菌進(jìn)一步生化反應(yīng)結(jié)果

溶血反應(yīng) 葡萄糖 麥芽糖 MR-VP 甘露醇 鼠李糖 木糖 七葉苷

3討論

定期對實(shí)驗(yàn)室開展質(zhì)量控制考核是實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證計(jì)劃的類型之一，也是計(jì)量認(rèn)證和國家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的特定要求[2]。通過這次質(zhì)控考核，使本實(shí)驗(yàn)室基本掌握了沙門菌、阪崎腸桿菌和單核細(xì)胞增生李斯特菌的檢驗(yàn)方法，進(jìn)一步熟悉了3種致病菌的菌落形態(tài)、染色特征和生化特性，為日后的檢驗(yàn)工作打下了良好的基礎(chǔ)。

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控盲樣考核是衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)工作質(zhì)量管理、提高檢測檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的有效手段。目前衛(wèi)生微生物盲樣一般為純菌種，經(jīng)過多年的考核鍛煉，檢驗(yàn)人員基本能夠正確檢出。但在實(shí)際工作比如遇到食物中毒發(fā)生時(shí)，由于各種雜菌的干擾，致病菌檢出的難度會大大增加。怎樣提高實(shí)際工作中致病菌的檢出能力是基層微生物實(shí)驗(yàn)室急待解決的問題。本次混合質(zhì)控盲樣的鑒定結(jié)果為3種細(xì)菌。要求檢驗(yàn)人員要有豐富的檢驗(yàn)技術(shù)能力和強(qiáng)烈的工作責(zé)任感，應(yīng)選擇多種增菌液和選擇性培養(yǎng)平板進(jìn)行分離，并多挑一些可疑菌落進(jìn)行鑒定，避免漏檢。[3]

質(zhì)控試劑與培養(yǎng)基的質(zhì)量控制是保證檢驗(yàn)質(zhì)量的基礎(chǔ)。①要嚴(yán)把進(jìn)貨關(guān)，要購買質(zhì)量合格、質(zhì)保期內(nèi)、品質(zhì)好的培養(yǎng)基；②配制要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)操作手冊與GB4789的規(guī)定進(jìn)行操作。記錄配制量、操作者和日期，并于包裝上標(biāo)明使用期限，定期做質(zhì)量檢查，以保證其有效性；③注意培養(yǎng)基和試劑的保存，一般貯存于陰涼干燥處，避免強(qiáng)光直射[4]。參考文獻(xiàn)

[1] GB4789-2010 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物檢驗(yàn)[S].［2］昃向君，編, 實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可準(zhǔn)備與審核工作指南［M］, 北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2002.89

[3]陸娟，張勃.一份混合菌種質(zhì)控盲樣的鑒定分析[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2008,18（9）：1920-1921.[4] 王潤勝，遲秀玲，張妍麗.食品微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制 [J].預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào)雜志,2008, 24

(10)：819-820.

第二篇：結(jié)果質(zhì)量控制計(jì)劃9

長治市九天機(jī)動(dòng)車檢測有限公司附件9

結(jié)果質(zhì)量控制計(jì)劃

一、目的為有效控制機(jī)動(dòng)車安全性能檢測結(jié)果的有效性，特編制2009年檢測結(jié)果控制計(jì)劃。

二、方法

采用相同方法進(jìn)行重復(fù)性檢測分析測量過程的不確定度，進(jìn)行A類評定。和對留存樣品開展再檢測。UA= ∑（Xi--X）

n(n﹣1)

三、時(shí)間：2009年12月上旬

四、質(zhì)量主管負(fù)責(zé)制訂計(jì)劃，選定操作技能熟練的專業(yè)檢測

人員，技術(shù)管理者白宏亮實(shí)施核查檢測。

五、專業(yè)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人對核查結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)簽字，質(zhì)控

辦負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)核查監(jiān)督。

六、技術(shù)管理者對核查結(jié)論進(jìn)行評價(jià)確認(rèn)，并對核查發(fā)

現(xiàn)的問題進(jìn)行糾正、改進(jìn)以及采取的糾正、預(yù)防措施進(jìn)行跟蹤監(jiān)督。

七、分析繪制檢測參數(shù)的質(zhì)量控制圖（參數(shù)變化比較圖）

九、分析評價(jià)：對兩次重復(fù)性檢測測量不確定度A類評定，對結(jié)果變化分析比較評價(jià)，并采用相應(yīng)的改進(jìn)措施。

長治市九天機(jī)動(dòng)車檢測有限公司

二00九年十二月一日 2n:取5次

第三篇：調(diào)味品微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制

調(diào)味品微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制

近年來隨著人們生活的提高，調(diào)味類產(chǎn)品出現(xiàn)品種多元化、產(chǎn)品系列化的發(fā)展趨勢，很多調(diào)味類產(chǎn)品都制定了菌落總數(shù)、大腸菌群、致病菌等微生物指標(biāo)來控制產(chǎn)品質(zhì)量。控制不當(dāng)，滅菌處理不徹底很容易造成微生物的殘留和繁殖，影響產(chǎn)品的品質(zhì)甚至危及人體的身體健康。

雖然國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T4789.22—2003中對調(diào)味品的微生物學(xué)檢驗(yàn)方法、步驟作了具體規(guī)定，但在實(shí)際工作中還存在著許多復(fù)雜因素，忽視這些因素很可能給檢驗(yàn)結(jié)果帶來偏差，甚至錯(cuò)誤，從而無法正確評價(jià)產(chǎn)品的衛(wèi)生狀況，無法正確指導(dǎo)與監(jiān)督產(chǎn)品生產(chǎn)。

結(jié)合調(diào)味品科研、檢驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)，從微生物學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量控制角度對影響檢驗(yàn)結(jié)果科學(xué)性、準(zhǔn)確性、有效性因素，談一些觀點(diǎn)和看法。

一、檢驗(yàn)人員的素質(zhì)

微生物學(xué)檢驗(yàn)人員，首先必須具有嚴(yán)肅、認(rèn)真的工作態(tài)度，具有較強(qiáng)的工作責(zé)任感，觀察事物要細(xì)致，有發(fā)現(xiàn)問題、解決問題的能力，身體健康、無不良的衛(wèi)生習(xí)慣。

1、微生物學(xué)檢驗(yàn)人員應(yīng)具有多方面的專業(yè)技術(shù)知識。

（1）要掌握微生物學(xué)的有關(guān)基礎(chǔ)知識,包括微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理特點(diǎn)、微生物的種類、微生物生長繁殖的條件、1

分離、培養(yǎng)微生物的基本方法、無菌操作的有關(guān)知識等等。

（2）要掌握并正確理解國家食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)方法GB/T4789—2003、調(diào)味品的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及本企業(yè)的企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，熟悉標(biāo)準(zhǔn)化法的相關(guān)知識。

（3）熟悉計(jì)量學(xué)的基本知識，計(jì)量法令和法規(guī)及質(zhì)量保證體系知識。熟悉計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)，檢驗(yàn)儀器設(shè)備的驗(yàn)收、使用、保管、報(bào)廢制度等。

（4）要熟悉調(diào)味品的生產(chǎn)工藝，檢驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)的問題往往反映的是生產(chǎn)工藝中的不合理性，只有熟悉產(chǎn)品生產(chǎn)工藝才能具備較強(qiáng)的解決問題的能力。

（5）檢驗(yàn)人員應(yīng)通過技監(jiān)或防疫部門的專業(yè)技能培訓(xùn)，取得合法的上崗資質(zhì)。

二、微生物檢驗(yàn)室的環(huán)境條件

微生物檢驗(yàn)室是進(jìn)行食品微生物學(xué)檢驗(yàn)的地方，應(yīng)單獨(dú)設(shè)置，操作區(qū)與辦公區(qū)應(yīng)分開，避免污染。

一般應(yīng)設(shè)有準(zhǔn)備室、培養(yǎng)室、無菌室、洗滌室、消毒室。試驗(yàn)室要有足夠的光線，通風(fēng)良好，最好有腳踩式洗手池和固定的消毒設(shè)施。

無菌室要設(shè)有套間或緩沖間，最好設(shè)有推拉門，以防止空氣振蕩。

無菌室一般要求如下：

1、高度不超過3m，室內(nèi)墻壁光滑，應(yīng)盡量避免死角，便于洗刷和消毒。

2、應(yīng)保持密封、防塵、清潔、干燥、進(jìn)行操作時(shí)不得進(jìn)出無菌室。

3、室內(nèi)設(shè)備簡單，禁止放置雜物。

4、工作臺、地面和墻壁可用0.1%新潔而滅或0.05%過氧乙酸溶液擦洗消毒.5、無菌室可用紫外線進(jìn)行空氣及工作臺面消毒，一般采用30W殺菌燈,距離工作臺1.5～2m，在操作前，開燈0.5h滅菌，隔0.5h后，可進(jìn)入無菌室內(nèi)工作。

6、根據(jù)無菌室的凈化情況，可酌情用2mL/m甲醛溶液熏蒸消毒。

7、根據(jù)條件可配備無菌化工作臺或凈化工作間。

8、微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有合理完善的衛(wèi)生管理制度，每天堅(jiān)持做好環(huán)境衛(wèi)生工作，定期對環(huán)境進(jìn)行消毒，經(jīng)過培養(yǎng)后的培養(yǎng)物應(yīng)經(jīng)無害化處理后方可排放、洗刷。

三、儀器設(shè)備及材料

微生物檢驗(yàn)室應(yīng)配備足夠檢驗(yàn)工作需要的儀器、設(shè)備及器材，主要有恒溫培養(yǎng)箱、電熱干燥箱、高壓蒸汽滅菌器、天平、恒溫水浴、生物顯微鏡、凈化工作臺及移液管、試管、平皿、廣口瓶等玻璃器皿。

1、儀器設(shè)備計(jì)量器具使用前應(yīng)經(jīng)計(jì)量檢定部門檢定合格后方可使用。

2、儀器設(shè)備量具的量程，精確度等要符合檢測項(xiàng)目的相應(yīng)要求。

3、應(yīng)編制儀器設(shè)備的操作規(guī)程，并嚴(yán)格按操作規(guī)程要求使用。

4、應(yīng)認(rèn)真填寫儀器設(shè)備的使用記錄，貴重儀器設(shè)備應(yīng)有專人管理。

5、儀器設(shè)備應(yīng)定期檢修，做好設(shè)備的期間核查工作，保證儀器設(shè)備處于良好的工作狀態(tài)。3.6微生物檢驗(yàn)所需的各種器皿（如吸管、培養(yǎng)器等）必須洗刷干凈不得有洗衣粉等表面活性劑的殘留，否則會抑制微生物的生長繁殖。

6、實(shí)驗(yàn)前玻璃器皿應(yīng)采取可靠的方法滅菌處理，一般采用干熱滅菌法在160℃電熱干燥箱中維持2h左右達(dá)到滅菌目的。

四、藥品及培養(yǎng)基

1、微生物檢驗(yàn)用的各種藥品、試劑和干粉培養(yǎng)基必須是專業(yè)廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品，質(zhì)量必須符合有關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

2、培養(yǎng)基應(yīng)在玻璃容器內(nèi)配制，一般不得與銅、鐵制器皿接觸，否則會影響培養(yǎng)基質(zhì)量。

3、培養(yǎng)基、染色液和試劑配制應(yīng)嚴(yán)格按GB/T4789.28—2003標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定進(jìn)行操作，配制時(shí)按規(guī)定的配方和順序添加，不得隨意更改。

4、培養(yǎng)基及試劑用水應(yīng)采用蒸餾水，避免使用自來水，因自來水中的漂白粉、氯氣等對微生物生長有抑制作用。

5、配制好的培養(yǎng)基必須進(jìn)pH值的調(diào)節(jié)，適宜的pH值是微生物生長、繁殖的基本條件，一般用1mol/L的NaOH和HCl溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。

6、培養(yǎng)基配制好以后，應(yīng)立即進(jìn)行必要的滅菌處理，一般采用濕熱滅菌法，即高壓蒸汽滅菌器，121℃滅菌20—30min，某些含糖及特殊成份不耐熱的培養(yǎng)基采用115℃滅菌15—20min.7、配制好的培養(yǎng)基應(yīng)及時(shí)使用，不宜放置過久，可置4℃冰箱存放，在2周內(nèi)用完，己開封用過的培養(yǎng)基不得再次使用。

8、配制好的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行空白無菌試驗(yàn)和利用質(zhì)控菌株進(jìn)行效果試驗(yàn)，當(dāng)更換藥品的生產(chǎn)廠家、批號時(shí)應(yīng)對其質(zhì)量進(jìn)行檢查，合格后方可使用。

9、按要求應(yīng)做好藥品配制的原始記錄工作、保證檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的可朔源性。

五、微生物檢驗(yàn)過程的質(zhì)量控制

調(diào)味品微生物檢驗(yàn)還應(yīng)注意以下幾個(gè)方面，否則會影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和有效性。

1、微生物檢驗(yàn)樣品的采集必須具有代表性，根據(jù)具體情況制定相應(yīng)的抽樣方案，樣品的數(shù)量應(yīng)滿足檢驗(yàn)、復(fù)驗(yàn)、備查的需要。

2、一般應(yīng)采取完整未開封的樣品，如是散裝樣品，采樣必須在無菌操作下進(jìn)行，采樣的用具，應(yīng)預(yù)先經(jīng)滅菌處理。

3、樣品送到食品微生物檢驗(yàn)室應(yīng)越快越好，一般不應(yīng)超過3h，散裝樣品如不能即時(shí)檢驗(yàn)樣品應(yīng)置于1—5C環(huán)境中待檢。

4、微生物檢驗(yàn)必須按無菌操作要求進(jìn)行。必須穿專用的工作服、帽、口罩、拖鞋并應(yīng)放在無菌室緩沖間，工作前經(jīng)紫外線消毒后使用；進(jìn)無菌室前用肥皂洗手，然后用75%酒精棉球消毒后進(jìn)行微生物檢驗(yàn)工作；實(shí)驗(yàn)應(yīng)在酒精燈前操作，吸管及試管塞要通過火焰消毒，防止吸管尖部觸及物體造成污染。

5、瓶裝檢樣處理時(shí)可用點(diǎn)燃的酒精棉球燒灼瓶口滅菌，用石碳酸紗布蓋好，再用滅菌開瓶器將蓋啟開。袋裝樣品應(yīng)用75%酒精棉球消毒袋口后進(jìn)行檢驗(yàn)。食醋由于酸度較高，應(yīng)將樣品用20%—30%滅菌碳酸鈉溶液調(diào)pH到中性后，進(jìn)行檢驗(yàn)，否則由于pH較低不利于微生物的生長繁殖，也易使乳糖膽鹽發(fā)酵管產(chǎn)酸變色，影響檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。

6、檢驗(yàn)原始記錄應(yīng)及時(shí)記載，原始記錄格式要求有足夠的信息量，并具有可朔源性。

7、檢測結(jié)果應(yīng)準(zhǔn)確、清晰、明確、客觀的在檢驗(yàn)報(bào)告中表述，經(jīng)有資格的審核人員核查簽字并加蓋印章后生效。

第四篇：微生物檢驗(yàn)標(biāo)本不合格原因分析及質(zhì)量控制對策

微生物檢驗(yàn)標(biāo)本不合格原因分析及質(zhì)量控制對策

【摘要】 目的 總結(jié)不合格微生物標(biāo)本的原因，對標(biāo)本的質(zhì)量控制對策進(jìn)行探討。方法 回顧性分析378例不合格微生物標(biāo)本資料，總結(jié)不合格微生物標(biāo)本分布情況和原因。結(jié)果 378例不合格標(biāo)本，其中痰液標(biāo)本不合格最高，占38.1%，其次為尿液標(biāo)本，占29.6%，再次為血液標(biāo)本，占20.1%。痰液、血液標(biāo)本不合格的原因主要是取樣操作不?范，尿液、糞便標(biāo)本的原因主要是標(biāo)本污染。378例不合格標(biāo)本不合格的原因主要有4種：取樣操作不規(guī)范174例（46.0%），標(biāo)本污染160例（42.3%），送檢不及時(shí)32例（8.5%）以及條碼錯(cuò)誤12例（3.2%）。結(jié)論 不合格微生物標(biāo)本的主要原因是取樣操作不規(guī)范，因此臨床應(yīng)加強(qiáng)醫(yī)護(hù)人員微生物標(biāo)本采集運(yùn)送規(guī)范的培訓(xùn)和考核，以提高微生物標(biāo)本的送檢質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】 微生物標(biāo)本；不合格原因 ；質(zhì)量控制

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.32.087

【Abstract】 Objective To summarize unqualified causes in microbial specimens，and to investigate countermeasures in quality control.Methods A retrospective analysis was made on 378 unqualified microbial specimens to summarize their distribution and causes.Results Among 378 unqualified cases，unqualified sputum specimens had the highest proportion as 38.1%，followed by unqualified blood specimens accounting for 20.1%.Main unqualified cause of sputum and blood specimens was irregular sampling operation，and cause of unqualified urine and faeces specimens was specimen pollution.Main unqualified causes in 378 cases included 174 irregular sampling operation cases（46.0%），160 specimen pollution cases（42.3%），32 delayed inspection cases（8.5%）and 12 barcode mistake cases（3.2%）.Conclusion Main unqualified cause of microbial specimens is irregular sampling operation，therefore enhancement of training and examination of sampling and transporting operation in medical staff is necessary to improve quality of microbial specimens.【Key words】 Microbial specimens； Unqualified causes； Quality control

微生物實(shí)驗(yàn)室的工作目標(biāo)是為臨床醫(yī)師提供及時(shí)、有效、準(zhǔn)確的檢驗(yàn)信息，使其能夠?qū)颊叩募膊∽龀鰷?zhǔn)確的判斷，并采取有效的治療措施[1]。而標(biāo)本采集質(zhì)量的高低直接關(guān)系到培養(yǎng)物病原菌的檢出率，影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性[2]。所以，對臨床上研究微生物送檢標(biāo)本不合理因素及其質(zhì)控方法進(jìn)行研究具有重要意義。本研究分析了本院2014年1月～

2016年3月發(fā)現(xiàn)的378例不合格微生物標(biāo)本的原因，并對標(biāo)本的質(zhì)量控制進(jìn)行了探討，現(xiàn)報(bào)告如下。材料與方法

1.1 材料 回顧性分析2014年1月～2016年3月本院門診送檢的4800例微生物標(biāo)本的資料，發(fā)現(xiàn)不合格378例，占7.88%。

1.2 標(biāo)本采集不合格標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)臨床微生物標(biāo)本的采集和運(yùn)送規(guī)范[3]，將不合格標(biāo)本的種類分為：①采集量不足。采集量過少會明顯降低陽性率。通常采血量為培養(yǎng)基的1/10～1/5，40 kg成人每次每培養(yǎng)瓶應(yīng)采血8～10 ml，新生兒及1歲以下體重2 h送檢，4℃冷藏>24 h，導(dǎo)致標(biāo)本因送檢不及時(shí)、已干燥等。結(jié)果

2.1 不合格標(biāo)本的類型 378例不合格標(biāo)本，其中痰液標(biāo)本不合格最高，占38.1%，其次為尿液標(biāo)本，占29.6%，再次為血液標(biāo)本，占20.1%。見表1。

2.2 不合格標(biāo)本的原因 痰液、血液標(biāo)本不合格的原因主要是取樣操作不規(guī)范，尿液、糞便標(biāo)本的原因主要是標(biāo)本污染。378例不合格標(biāo)本不合格的原因主要有4種：取樣操作不規(guī)范174例（46.0%），標(biāo)本污染160例（42.3%），送檢不及時(shí)32例（8.5%）以及條碼錯(cuò)誤12例（3.2%）。見表2。討論

近年來隨著臨床抗菌藥物的廣泛使用及耐藥菌株的大量出現(xiàn)，人們越來越意識到臨床標(biāo)本微生物學(xué)檢驗(yàn)工作的重要性。本研究對378例不合格標(biāo)本的原因進(jìn)行分析顯示，痰液標(biāo)本不合格最高，占38.1%，其次為尿液標(biāo)本，占29.6%，再次為血液標(biāo)本，占20.1%。痰液標(biāo)本不合格的原因中最主要是取樣操作不規(guī)范導(dǎo)致，其次是送檢不及時(shí)。痰培養(yǎng)時(shí)要求相對較高，采集痰液標(biāo)本時(shí)如果醫(yī)師解釋或者囑咐不清楚，患者沒有正確理解留取方法，比如患者自行留取標(biāo)本時(shí)未用力咳出肺深部的膿痰，尤其是老年患者分不清唾液和痰液，這樣就很容易造成取樣的不合格[4]。采集痰液標(biāo)本的最佳時(shí)間應(yīng)在使用抗菌藥物之前，宜采集清晨第二口痰液。運(yùn)送不及時(shí)的原因分析為標(biāo)本采集后一般是由護(hù)工運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室，但由于護(hù)工常常要兼顧多項(xiàng)工作，不能隨叫隨到，或醫(yī)院對護(hù)工的培訓(xùn)不到位，往往導(dǎo)致標(biāo)本送檢至實(shí)驗(yàn)室時(shí)已經(jīng)干燥，檢測結(jié)果大打折扣。尿液標(biāo)本的不合格原因主要是因?yàn)闃?biāo)本污染和取樣操作不規(guī)范，分別占55.4%和44.6%。與杜鵑[5]報(bào)道（尿液標(biāo)本因取樣操作不規(guī)范導(dǎo)致不合格比率占60.0%和標(biāo)本污染導(dǎo)致不合格比率占40.0%的）結(jié)果基本一致。臨床仍有部分醫(yī)護(hù)人員不認(rèn)真執(zhí)行無菌操作，從導(dǎo)尿患者的集尿袋收集尿液標(biāo)本不規(guī)范，還有部分門診或急診患者留取中段尿時(shí)未仔細(xì)清洗尿道口和外陰部，導(dǎo)致尿液標(biāo)本污染。早就有相關(guān)條例規(guī)定，在采集尿液培養(yǎng)標(biāo)本前，應(yīng)按規(guī)定要求患者清洗外陰部位，留取中段尿，并在1 h內(nèi)將樣品送檢以保證2 h內(nèi)實(shí)驗(yàn)室可完成接種[6]。對于不能及時(shí)送檢或接種的尿液培養(yǎng)液置于4℃冰箱內(nèi)冷藏保存，但保存時(shí)間也不應(yīng)>8 h[7]。然而，由于臨床上的各種原因，導(dǎo)致尿液標(biāo)本接種、送檢不流暢，以致導(dǎo)致尿液標(biāo)本污染[8]。血液標(biāo)本的不合格原因主要也是因?yàn)椴僮鞑灰?guī)范和標(biāo)本污染，分別占比57.9%和42.1%。采集時(shí)間不正確、標(biāo)本污染是導(dǎo)致血標(biāo)本污染的主要原因。采集血液標(biāo)本時(shí)，不在患者發(fā)熱前30～60 min采集，不在患者使用抗菌藥物時(shí)留取血液標(biāo)本[9]。另外醫(yī)護(hù)人員在采集血培養(yǎng)標(biāo)本時(shí)，皮膚消毒未按照3步消毒法嚴(yán)格消毒，存在無菌操作不嚴(yán)格的問題，導(dǎo)致樣本污染。糞便和分泌物主要都是因?yàn)椴杉蟛患皶r(shí)送檢致使標(biāo)本干燥，病原菌的檢出率大大降低。這些與臨床上個(gè)別醫(yī)護(hù)人員對微生物標(biāo)本送檢的重要性認(rèn)識不足、缺少必要的微生物標(biāo)本采集和運(yùn)送的知識等有關(guān)，也往往造成實(shí)驗(yàn)室的微生物檢驗(yàn)結(jié)果不能為臨床診斷和治療提供很好的支持[10]。另外，由于少數(shù)醫(yī)護(hù)人員的責(zé)任心不強(qiáng)、醫(yī)院的培訓(xùn)不及時(shí)等原因，臨床上也會發(fā)生留取標(biāo)本時(shí)不使用無菌容器、條形碼任意手工涂改、條碼錯(cuò)誤的現(xiàn)象。這些因素在一定程度上對提高微生物檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確以及縮短報(bào)告時(shí)間都產(chǎn)生了負(fù)面影響[11]。

采集標(biāo)本是臨床微生物標(biāo)本檢驗(yàn)過程中的第一道工作程序，標(biāo)本采集操作是否規(guī)范與最終檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性有著直接的影響[12，13]，為臨床醫(yī)師的診療工作提供真實(shí)可靠的依據(jù)，便于及時(shí)、有效、合理對患者使用抗菌藥物。針對以上標(biāo)本不合格的原因，本院采取了以下微生物標(biāo)本質(zhì)控舉措：①應(yīng)加強(qiáng)檢驗(yàn)科室檢驗(yàn)人員的業(yè)務(wù)方面的培訓(xùn)，將無菌操作技術(shù)納入到醫(yī)護(hù)人員的崗前培訓(xùn)中，并定期組織相關(guān)醫(yī)護(hù)人員進(jìn)行采集樣本操作技能、采集樣本的流程等考核來檢驗(yàn)培訓(xùn)成效[14，15]。②加強(qiáng)檢驗(yàn)科和臨床科室間的交流和指導(dǎo)工作，加強(qiáng)對護(hù)工等標(biāo)本運(yùn)送人員的培訓(xùn)，增強(qiáng)其標(biāo)本運(yùn)送及時(shí)的緊迫意識，并認(rèn)真監(jiān)督和檢查[16，17]。訓(xùn)練時(shí)著重微生物檢驗(yàn)標(biāo)本要及時(shí)送達(dá)的重要性，確保微生物的采集時(shí)間、方式得到更有效的檢驗(yàn)。③把協(xié)助患者收集標(biāo)本作為日常護(hù)理的一項(xiàng)內(nèi)容，從注意事項(xiàng)的交代到協(xié)助患者收集，要一一落實(shí)到位。建立分析前的質(zhì)量把控系統(tǒng)，處理好每一個(gè)環(huán)節(jié)，保證檢驗(yàn)標(biāo)本的合格率[18]。④檢驗(yàn)科室應(yīng)建立嚴(yán)格的標(biāo)本接收制度，對不合格標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)及時(shí)的記錄。如果檢驗(yàn)人員在檢驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)了問題標(biāo)本，必須及時(shí)記錄不合格詳細(xì)原因以及標(biāo)本來源等，對其不合格原因有針對性地開展標(biāo)本采集知識的培訓(xùn)，強(qiáng)化環(huán)節(jié)管理[19]。在完成所有檢驗(yàn)后轉(zhuǎn)移到有關(guān)部門依照程序進(jìn)行處理，防止在以后的檢驗(yàn)中再次出現(xiàn)同樣的問題。督促廣大醫(yī)護(hù)人員從思想上重視標(biāo)本采集工作，從而降低標(biāo)本的不合格率，促進(jìn)微生物檢驗(yàn)質(zhì)量的提高。

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第五篇：檢驗(yàn)科微生物室室內(nèi)質(zhì)量控制流程

檢驗(yàn)科微生物室室內(nèi)質(zhì)量控制流程

一、實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的性能維護(hù)

微生物室常用儀器設(shè)備主要包括：細(xì)菌培養(yǎng)箱、細(xì)菌鑒定及藥敏測試儀、顯微鏡、高壓滅菌器、冰箱、水浴箱等。這些儀器設(shè)備的質(zhì)量維護(hù)對于檢驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量保證至關(guān)重要。性能維護(hù)方法及維護(hù)頻率參照制造商提供的使用手冊進(jìn)行。如使用手冊中未詳細(xì)注明或?qū)嶒?yàn)室自身無法完成，由生產(chǎn)廠家協(xié)助解決，每年至少一次。

二、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

要求對培養(yǎng)基進(jìn)行兩方面的質(zhì)量控制：無菌試驗(yàn)以及已知菌生長試驗(yàn)。無菌試驗(yàn)一般為隨機(jī)抽樣3-5%，在35℃條件下培養(yǎng)48h，每批培養(yǎng)基至少進(jìn)行一次無菌試驗(yàn)；已知菌生長試驗(yàn)的前提條件是實(shí)驗(yàn)室有足夠的已知菌儲備，其中包括標(biāo)準(zhǔn)菌株(如ATCC或NCTC標(biāo)準(zhǔn)菌株)及經(jīng)過準(zhǔn)確鑒定的臨床分離菌。如果條件允許，提倡使用標(biāo)準(zhǔn)菌株。已知菌生長試驗(yàn)應(yīng)明確預(yù)期結(jié)果。每批培養(yǎng)基至少進(jìn)行一次已知菌生長試驗(yàn)。

三、細(xì)菌染色的質(zhì)量控制

在臨床細(xì)菌學(xué)檢查過程中，革蘭染色和抗酸染色使用頻率最高。1．革蘭染色I(xiàn)QC要求：利用標(biāo)準(zhǔn)菌株(金黃色葡萄球菌ATCC25923及大腸埃希菌ATCC25922)或其他已知的革蘭陽性菌及革蘭陰性菌至少每周進(jìn)行一次質(zhì)量驗(yàn)證。

2．抗酸染色：利用已知的抗酸桿菌(AFB)陽性涂片每周或在更新炭酸復(fù)紅染液時(shí)至少進(jìn)行一次質(zhì)量驗(yàn)證。

四、細(xì)菌鑒定或鑒別常用試驗(yàn)的質(zhì)量控制

細(xì)菌鑒定或鑒別試驗(yàn)的IQC就是利用已知菌或標(biāo)準(zhǔn)菌株(如ATCC或NCTC標(biāo)準(zhǔn)菌株)進(jìn)行鑒定或鑒別試驗(yàn)相關(guān)影響因素的質(zhì)量監(jiān)控。應(yīng)用頻率較高的試驗(yàn)IQC每周至少一次，頻率較低的試驗(yàn)IQC隨標(biāo)本一同進(jìn)行。

五、微生物藥物敏感試驗(yàn)的質(zhì)量控制

臨床常用抗微生物藥物敏感試驗(yàn)包括一般β-內(nèi)酰胺酶測試、超廣

譜β-內(nèi)酰胺酶(ELBLs)測試、紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)以及定量藥敏試驗(yàn)(即MICs測定法)。1．一般β-內(nèi)酰胺酶測試的質(zhì)量控制：至少每周一次。質(zhì)控菌株可使用臨床分離的已知菌株，但最好使用標(biāo)準(zhǔn)菌株，如淋病奈瑟菌ATCC31426(β-內(nèi)酰胺酶陽性綠膿桿菌ATCC27853)和淋病奈瑟菌ATCC43069(β-內(nèi)酰胺酶陰性或金黃色葡萄球菌ATCC25923)。

2．ESBLs測試的質(zhì)量控制：美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI：原NCCLS)目前僅提供了肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希菌和奇異變形桿菌ESBLs的測試標(biāo)準(zhǔn)。其測試標(biāo)準(zhǔn)參照最新的CLSI文件。質(zhì)量控制隨臨床測試菌株一同進(jìn)行。

3．紙片擴(kuò)散法及MIC測定法藥敏試驗(yàn)的質(zhì)量控制：質(zhì)控試驗(yàn)條件、質(zhì)控菌株選擇及質(zhì)控允許范圍參照最新的CLSI規(guī)定。頻率為每周至少一次。

4．某些耐藥菌檢測的質(zhì)量控制：一些耐藥菌株如高水平氨基糖苷類耐藥的腸球菌、苯唑西林耐藥的金黃色葡萄球菌以及萬古霉素耐藥的腸球菌等的IQC具體方法、質(zhì)控菌株及質(zhì)控預(yù)期結(jié)果參見最新的CLSI規(guī)定。質(zhì)量控制隨臨床測試菌株一同進(jìn)行。