第一篇：微生物檢測培訓(xùn)問題總結(jié)范文

微生物檢測培訓(xùn)問題總結(jié)

1.“菌株的傳代次數(shù)不得超過5代”表示菌株傳代只能傳遞到第四代，使用第四代時(shí)意味著菌株已經(jīng)是第五代，因此，傳代記錄中不能顯示傳5代。

2.標(biāo)準(zhǔn)菌株確認(rèn)工作是否齊全：存活性確認(rèn)，純度確認(rèn)，菌落形態(tài)、染色鏡檢及生化反應(yīng)進(jìn)行確認(rèn)。3.菌種保藏所用的冰箱是否經(jīng)過確認(rèn)，是否容易結(jié)霜，且保存菌種（尤其是特異菌株）是否采用兩種以上的方式，防止意外流失。4.培養(yǎng)基的適用性檢查：

微生物限度檢查中培養(yǎng)基適用性檢查：在注重回收率達(dá)到70%時(shí)，是否確保檢查用培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)同對照培養(yǎng)基上一致。

控制菌檢查中培養(yǎng)基適用性檢查：促生長能力----最短培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)長出相應(yīng)的菌落；抑制能力-----最長培養(yǎng)時(shí)間下不得有菌生長；細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間：18-24-48小時(shí)；真菌培養(yǎng)時(shí)間：24-48-72小時(shí)，促生長取最短時(shí)間，抑制取最長時(shí)間。因此供試品在檢查時(shí)，培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)取最長時(shí)間。

環(huán)境監(jiān)測的培養(yǎng)基適用性檢查：“中國藥典附錄：藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則”中規(guī)定：用于環(huán)境監(jiān)測的培養(yǎng)基須特別防護(hù)，最好是雙層包裝和終端滅菌。如果不能采用終端滅菌的培養(yǎng)基，在使用前應(yīng)進(jìn)行100%的預(yù)培養(yǎng)避免假陽性出現(xiàn)。同時(shí)做促生長試驗(yàn)，防止假陰性出現(xiàn)。

沉降菌監(jiān)測所用培養(yǎng)基的適用性檢查：①培養(yǎng)基回收率確認(rèn)（同微生物限度檢查的培養(yǎng)基適用性檢查）；②確認(rèn)培養(yǎng)基放置最長時(shí)間，在標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)速下，一般不宜超過2小時(shí)；③同時(shí)確認(rèn)溫度、濕度及風(fēng)速對培養(yǎng)基放置的影響。

5.潔凈區(qū)微生物監(jiān)控標(biāo)準(zhǔn)的理解是否到位？如何計(jì)算平均值。

6.生產(chǎn)抗生素的潔凈區(qū)進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測，其培養(yǎng)基是否添加有中和劑，如亞硫酸氫鈉、聚山梨酯等。7.潔凈室是否使用消毒劑與殺孢子輪滑使用，殺孢子劑一般半月1次（建議）8.無菌檢查：

在結(jié)果進(jìn)行觀察時(shí)，最好將集菌器置于黑白背景下觀察，確保不能因燈檢原因而出現(xiàn)假陰性。無菌檢查結(jié)果判斷：

集菌器出現(xiàn)渾濁，但證明不是微生物，判供試品符合規(guī)定；

以下情況可證明無菌檢查結(jié)果無效：設(shè)備及環(huán)境微生物監(jiān)控結(jié)果不符合規(guī)定；回顧無菌試驗(yàn)過程，發(fā)現(xiàn)有可能引起微生物污染的因素（陰性對照失敗、培養(yǎng)基的靈敏度試驗(yàn)失敗等）；供試管中生長的微生物經(jīng)鑒定后確認(rèn)是物品或無菌操作技術(shù)所引起。此時(shí)可以提出復(fù)驗(yàn)申請，復(fù)驗(yàn)取樣條件：

①盡可能使用原樣品（全檢量的2-3倍）

②盡可能使用與第一份來源相同的另一份樣品（如理化檢驗(yàn)樣品）③盡可能在同一處重新取樣

9.超凈工作臺及生物安全柜中不能使用酒精燈：酒精燈的使用會導(dǎo)致局部溫度對流，在生物安全柜中則會造成潔凈氣流紊亂，從而將臺面污染的灰塵或者周圍污染的空氣帶入到無菌操作區(qū)，從而污染樣品；另外超凈工作臺中放置酒精燈，潔凈風(fēng)是超外吹的，對流空氣中污染的菌可能對操作人員造成傷害。10.實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行調(diào)查：一般將重分析、重檢驗(yàn)、重取樣同時(shí)進(jìn)行，可以節(jié)省調(diào)查時(shí)間，延緩車間庫存時(shí)間。11.制藥用水中生物膜（生物膜形成微生物生長的物理和化學(xué)屏障。不僅增加了微生物對熱、各種藥物、殺菌刺、去污劑和清潔劑的抗性；而且，有利于微生物捕獲營養(yǎng)物質(zhì)。加速生長繁殖。）出現(xiàn)的可能現(xiàn)象：①在同一或同幾個(gè)監(jiān)測點(diǎn)多次檢測均出現(xiàn)菌落；②菌落的種類多樣，形態(tài)多樣；

措施：采用大量沖洗、化學(xué)消毒如次氯酸鈉、二氧化氯等其他辦法

第二篇：2012微生物檢測室運(yùn)行情況總結(jié)

2012微生物檢測室運(yùn)行情況總結(jié)

2012年微生物實(shí)驗(yàn)室在工作中貫徹執(zhí)行監(jiān)測中心的質(zhì)量方針：公正、科學(xué)、誠信、高效，并在中心領(lǐng)導(dǎo)和有關(guān)部門的關(guān)心支持下、在計(jì)量管理人員及全體檢測人員的共同努力下，按照規(guī)定做好維護(hù)保養(yǎng)、測試、出具檢測報(bào)告、進(jìn)行質(zhì)量控制，圓滿完成2012制定的質(zhì)量目標(biāo)，現(xiàn)將情況總結(jié)如下：

一、質(zhì)量控制：

1.人員質(zhì)量控制：平時(shí)加強(qiáng)理論知識，實(shí)際操作和分析水平，平時(shí)如碰到問題同事間相互探討，或向其他同仁請教交流，積極參加上級部門組織的培訓(xùn)學(xué)習(xí)，不斷提高業(yè)務(wù)水平，認(rèn)真學(xué)習(xí)cnas-cl09檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則在微生物領(lǐng)域的應(yīng)用說明。

2.培養(yǎng)基質(zhì)量控制：關(guān)鍵培養(yǎng)基的評估，必須采取技術(shù)性驗(yàn)收。配制培養(yǎng)基首先檢查試劑是否在有效期內(nèi)，配制需及時(shí)做好配制記錄、并且對培養(yǎng)基做好物理質(zhì)量控制，ph、質(zhì)量、顏色、透明度、凝膠穩(wěn)定性、粘稠度、濕度是否在預(yù)期范圍內(nèi)以確保培養(yǎng)基質(zhì)量控制有效進(jìn)行以及無菌措施。包括實(shí)施的方式、時(shí)間和溫度都需要填寫記錄。

3.儀器設(shè)備質(zhì)量控制：

（1）、平時(shí)做好兩臺恒溫培養(yǎng)箱sb-xps04-024、sb-xps-01-021運(yùn)行記錄，每日兩次分別做好記錄溫度變化情況，確保設(shè)備正常運(yùn)行。

（2）、每月做好無菌室滅菌消毒工作，及時(shí)進(jìn)行紫外燈殺菌，并配制試劑進(jìn)行菌落總數(shù)培養(yǎng)，對凈化室做好質(zhì)量控制，確保試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確。

（3）、做好高壓滅菌鍋的強(qiáng)制性檢定，確保儀器安全運(yùn)行。

（4）、做好每個(gè)月的儀器維護(hù)保養(yǎng)，使儀器設(shè)備處于完好狀態(tài)，使檢測順利進(jìn)行。

（5）、對用于存放微生物用品的冰箱做好溫度控制記錄。

二、檢測情況

2012年微生物實(shí)驗(yàn)室未接受任何樣品的檢測活動(dòng)。

三、存在問題及改進(jìn)計(jì)劃

1、在崗檢測人員調(diào)離，微生物操作人員缺乏，項(xiàng)目開展次數(shù)也較少，實(shí)驗(yàn)室利用率不高、設(shè)備閑置、資源浪費(fèi)，建議增加人手并參加相關(guān)實(shí)驗(yàn)技能培訓(xùn)。

2、缺少標(biāo)準(zhǔn)菌株保存條件以及設(shè)備。

3、滅菌鍋以及滅菌室空調(diào)空調(diào)已壞，建議及時(shí)維修和更換。

4、建議參加相關(guān)試驗(yàn)室間的比對實(shí)驗(yàn)，提高人員檢測能力。

建議監(jiān)測中心進(jìn)一步加強(qiáng)對體系文件的學(xué)習(xí)，在工作中嚴(yán)格執(zhí)行程序文件，同時(shí)也應(yīng)多參加相關(guān)的培訓(xùn)，加強(qiáng)操作方面的技術(shù)培訓(xùn)，進(jìn)一步提高實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)熟練程度，使實(shí)驗(yàn)室的整體水平得到提高。

第三篇：微生物培訓(xùn)總結(jié)一

微生物培訓(xùn)總結(jié)一

2011年12月19-20日，我去杭州參加了關(guān)于微生物檢驗(yàn)的繼續(xù)培訓(xùn)。這次培訓(xùn)主要講了微生物的概念、重要性、以及微生物的一些相關(guān)專業(yè)基礎(chǔ)知識。

藥品微生物檢驗(yàn)作為一門應(yīng)用微生物技術(shù)、是對藥品研制、生產(chǎn)、銷售和使用過程中進(jìn)行質(zhì)量檢測和安全評價(jià)的基礎(chǔ)專業(yè)技術(shù)。隨著制藥工業(yè)的迅速發(fā)展和科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，藥品微生物檢驗(yàn)經(jīng)多年時(shí)間的不斷積累，在理論上不斷充實(shí)，逐步發(fā)展形成藥品領(lǐng)域的一門重要分支學(xué)科，專業(yè)技術(shù)檢驗(yàn)已廣泛應(yīng)用藥品領(lǐng)域的各項(xiàng)專業(yè)和部門。國家藥典收藏的微生物學(xué)檢測項(xiàng)目逐版增加，藥品微生物檢驗(yàn)已成為執(zhí)行國家藥典、藥品標(biāo)準(zhǔn)和對藥品進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)督的法定依據(jù)。

本次培訓(xùn)是為了隨著醫(yī)藥工業(yè)的發(fā)展，藥品生產(chǎn)企業(yè)，廣泛推行GMP認(rèn)證，微生物學(xué)檢測手段是基本內(nèi)容。這讓我更加適應(yīng)當(dāng)前藥品的微生物檢驗(yàn)技術(shù)工作，將理論與實(shí)踐的想結(jié)合，為成為長期從事藥品微生物檢驗(yàn)的專業(yè)人員做準(zhǔn)備。

2011年12月21日

第四篇：微生物培訓(xùn)總結(jié)二

微生物培訓(xùn)總結(jié)

2011年12月19-20日，我去杭州參加了關(guān)于微生物檢驗(yàn)的繼續(xù)培訓(xùn)。這次培訓(xùn)主要講了微生物的概念、重要性、以及微生物的一些相關(guān)專業(yè)基礎(chǔ)知識。

本次培訓(xùn)對微生物的有關(guān)檢驗(yàn)技術(shù)的實(shí)際操作、理論的提高，起到了很好的輔助、參考作用，對我很有啟發(fā)。培訓(xùn)中強(qiáng)調(diào)了藥品微生物試驗(yàn)的質(zhì)量管理和質(zhì)量保證，檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證，微生物耐藥性檢測等。還對藥品微生物檢驗(yàn)的有關(guān)問題進(jìn)一步擴(kuò)展、神話、開闊視野，并力求簡明實(shí)用，涉及藥品微生物藥物開發(fā)、研制和檢驗(yàn)的整個(gè)過程。

最后，理論還是要和實(shí)際相結(jié)合，把本次培訓(xùn)的內(nèi)容更好的運(yùn)功到工作的實(shí)際操作中去，增強(qiáng)自己的質(zhì)量控制的理念，才是本次學(xué)習(xí)最重要的核心。

第五篇：表面微生物檢測方法

空氣、食品接觸面微生物檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn) 目的：

檢測生產(chǎn)車間空氣、操作人員手部、與食品有直接接觸面的機(jī)械設(shè)備的微生物指標(biāo)，生產(chǎn)區(qū)域環(huán)境當(dāng)中病原微生物的監(jiān)控，達(dá)到規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，以控制食品成品的質(zhì)量。參照標(biāo)準(zhǔn)：

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB15979－1995、《HACCP原理與實(shí)施》、中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《公共場所空氣微生物檢驗(yàn)方法細(xì)菌總數(shù)測定》GB/T 18204.1－2000、中華人民共和國進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN 0169-92/SN 0172-92/ SN 0170-92、出入境檢驗(yàn)檢疫局二000四年《出入食品微生物檢驗(yàn)培訓(xùn)教材》中《出入食品生產(chǎn)廠衛(wèi)生細(xì)菌檢驗(yàn)方法》、日本東京冷凍食品檢驗(yàn)方法。采樣與檢測方法：

3.1空氣的采樣與測試方法 3.1.1樣品采集：(1)取樣頻率：

a)車間轉(zhuǎn)換不同衛(wèi)生要求的產(chǎn)品時(shí)，在加工前進(jìn)行采樣，以便了解車間衛(wèi)生清掃消毒情況。b)全廠統(tǒng)一放長假后，車間生產(chǎn)前，進(jìn)行采樣。

c)產(chǎn)品檢驗(yàn)結(jié)果超內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)及時(shí)對車間進(jìn)行采樣，如有檢驗(yàn)不合格點(diǎn)，整改后再進(jìn)行采樣檢驗(yàn)。

d)實(shí)驗(yàn)性新產(chǎn)品，按客戶規(guī)定頻率采樣檢驗(yàn)。e)正常生產(chǎn)狀態(tài)的采樣，每周一次。（2）采樣方法

在動(dòng)態(tài)下進(jìn)行，室內(nèi)面積不超過30 m2，在對角線上設(shè)里、中、外三點(diǎn)，里、外點(diǎn)位置距墻1 m；室內(nèi)面積超過30 m2，設(shè)東、西、南、北、中五點(diǎn)，周圍4點(diǎn)距墻1 m。采樣時(shí)，將含平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基的平板(直徑9 cm)置采樣點(diǎn)(約桌面高度)，并避開空調(diào)、門窗等空氣流通處，打開平皿蓋，使平板在空氣中暴露5 min。采樣后必須盡快對樣品進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)的檢測，送檢時(shí)間不得超過6h，若樣品保存于0～4℃條件時(shí)，送檢時(shí)間不得超過24h。3.1.2菌落培養(yǎng)：

（1）在采樣前將準(zhǔn)備好的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基平板置37℃±1℃培養(yǎng)24 h，取出檢查有無污染，將污染培養(yǎng)基剔除。（2）將已采集樣品的培養(yǎng)基在6 h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室，細(xì)菌總數(shù)于37℃±1℃培養(yǎng)48h觀察結(jié)果，計(jì)數(shù)平板上細(xì)菌菌落數(shù)。（3）菌落計(jì)算：

a)記錄平均菌落數(shù)，用“個(gè)/皿”來報(bào)告結(jié)果。用肉眼直接計(jì)數(shù)，標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用5～10倍放大鏡檢查，不可遺漏。

b)若培養(yǎng)皿上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2 個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。3.2工作臺（機(jī)械器具）表面與工人手表面采樣與測試方法： 3.2.1樣品采集：(1)取樣頻率：

a)車間轉(zhuǎn)換不同衛(wèi)生要求的產(chǎn)品時(shí)，在加工前進(jìn)行擦拭檢驗(yàn)，以便了解車間衛(wèi)生清掃消毒情況。

b)全廠統(tǒng)一放長假后，車間生產(chǎn)前，進(jìn)行全面擦拭檢驗(yàn)。

c)產(chǎn)品檢驗(yàn)結(jié)果超內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)及時(shí)對車間可疑處進(jìn)行擦拭，如有檢驗(yàn)不合格點(diǎn)，整改后再進(jìn)行擦拭檢驗(yàn)。

d)實(shí)驗(yàn)新產(chǎn)品，按客戶規(guī)定擦拭頻率擦拭檢驗(yàn)。e)對工作表面消毒產(chǎn)生懷疑時(shí)，進(jìn)行擦拭檢驗(yàn)。f)正常生產(chǎn)狀態(tài)的擦拭，每周一次。（2）采樣方法：

a)工作臺（機(jī)械器具）：用浸有滅菌生理鹽水的棉簽在被檢物體表面（取與食品直接接觸或有一定影響的表面）取25cm2 的面積，在其內(nèi)涂抹10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。

b)工人手：被檢人五指并攏，用浸濕生理鹽水的棉簽在右手指曲面，從指尖到指端來回涂擦10次，然后剪去手接觸部分棉棒，將棉簽放入含10mL滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)送檢。（3）采樣注意事項(xiàng)： 擦拭時(shí)棉簽要隨時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)，保證擦拭的準(zhǔn)確性。對每個(gè)擦拭點(diǎn)應(yīng)詳細(xì)記錄所在分場的具體位置、擦拭時(shí)間及所擦拭環(huán)節(jié)的消毒時(shí)間 3.2.2 細(xì)菌·大腸菌群的檢測培養(yǎng): 樣液稀釋：將放有棉棒的試管充分振搖。此液為1：10稀釋液。如污染嚴(yán)重，可十倍遞增稀釋，吸取1ml 1：10樣液加9ml無菌生理鹽水中，混勻，此液為1：100稀釋液。3.2.2.1 細(xì)菌總數(shù)：

（1）以無菌操作，選擇1～2個(gè)稀釋度各取1ml樣液分別注入到無菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿（平行樣），將已融化冷至45℃左右的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基傾入平皿，每皿約15ml，充分混合。

（2）待瓊脂凝固后，將平皿翻轉(zhuǎn)，置36℃±1℃培養(yǎng)48 h后計(jì)數(shù)。（3）結(jié)果報(bào)告：報(bào)告每25cm2食品接觸面中或每只手的菌落數(shù) 3.2.2.2大腸菌群：（1）平板法: a)以無菌操作，選擇1～2個(gè)稀釋度各取1ml樣液分別注入到無菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿（平行樣），將已融化冷至45℃左右的去氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基傾入平皿，每皿約15ml，充分混合。待瓊脂凝固后,再覆蓋一層培養(yǎng)基，約3-5 ml。

b)待瓊脂凝固后，將平皿翻轉(zhuǎn)，置36℃±1℃培養(yǎng)24h后計(jì)數(shù)。c)結(jié)果計(jì)算：以平板上出現(xiàn)紫紅色菌落的個(gè)數(shù)乘以稀釋倍數(shù)得出。d)結(jié)果報(bào)告：報(bào)告每25cm2食品接觸面中或每只手的菌落數(shù)（2）試管法: a)以無菌操作，選擇3個(gè)稀釋度各取1ml樣液分別接種到BGLB肉湯培養(yǎng)基中，每個(gè)稀釋度接種三管。

b)置BGLB肉湯管于36℃±1℃培養(yǎng)48±2h。記錄所有BGLB肉湯管的產(chǎn)氣管數(shù)。

c)結(jié)果報(bào)告：按BGLB肉湯管產(chǎn)氣管數(shù)，查MPN表報(bào)告每25cm2食品接觸面中或每只手的大腸菌群值。

3.2.3 金黃色葡萄球菌檢測（1）定性檢測

a)取1ml 稀釋液注入滅菌的平皿內(nèi)，傾注15-20ml的B-P培養(yǎng)基，（或是吸取0.1稀釋液，用L棒涂布于表面干燥的B-P瓊脂平板），放進(jìn)36±1℃的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48±2小時(shí)。b)從每個(gè)平板上至少挑取1個(gè)可疑金黃色葡萄球菌的菌落作血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)。

c)結(jié)果報(bào)告：B-P瓊脂平板的可疑菌落作血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)為陽性，即報(bào)告手（工器具）上有金黃色葡萄球菌存在。（2）定量檢測 a)以無菌操作，選擇3個(gè)稀釋度各取1ml樣液分別接種到含10﹪氯化鈉胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基中，每個(gè)稀釋度接種三管。

b)置肉湯管于36±1℃的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48小時(shí)。劃線接種于表面干燥的B-P瓊脂平板，置36℃±1℃培養(yǎng)45～48小時(shí)。

c)從B-P瓊脂平板上，挑取典型或可疑金黃色葡萄球菌菌落接種肉湯培養(yǎng)基，36℃±1℃培養(yǎng)20～24小時(shí)。

d)取肉湯培養(yǎng)物做血漿凝固酶試驗(yàn)，記錄試驗(yàn)結(jié)果。

e)報(bào)告結(jié)果：根據(jù)凝固酶試驗(yàn)結(jié)果，查MPN表報(bào)告每25 cm2食品接觸面中或每只手的金黃色葡萄球菌值。

3.3工廠環(huán)境中病原體的檢測計(jì)劃與方法

檢測計(jì)劃：為了保證食品安全，工廠應(yīng)該對生產(chǎn)環(huán)境中的病原微生物進(jìn)行檢測和評估，檢測項(xiàng)目包括李斯特菌，沙門氏菌等病原體微生物，化驗(yàn)室應(yīng)該按照一定的計(jì)劃對生產(chǎn)場所環(huán)境中的病原體進(jìn)行檢測，其中包括地面、下水道、排水溝、墻壁、天花板、設(shè)備框架、運(yùn)輸?shù)闹Ъ?，冷藏裝置、速凍機(jī)、傳送帶、設(shè)備的螺絲、維修工具等部位。當(dāng)某個(gè)點(diǎn)檢測到病員微生物時(shí)，應(yīng)該對環(huán)境中的相似點(diǎn)加大檢測頻率；在把所有的預(yù)定點(diǎn)檢測完后，應(yīng)該對環(huán)境中的病原微生物的存在狀況進(jìn)行全面評估，在下一次環(huán)境檢測循環(huán)過程中加強(qiáng)檢測容易出現(xiàn)病原體的環(huán)境點(diǎn)，達(dá)到持續(xù)改進(jìn)的目的。

檢測頻率: 每月兩次,每次每個(gè)區(qū)域至少選取5個(gè)檢測點(diǎn),分別進(jìn)行檢測。

3.3.1 環(huán)境李斯特菌的檢測方法（3MTM PetrifilmTM 環(huán)境李斯特菌的測試片）3.3.1.1 用涂抹棒，海綿或者其他采樣設(shè)備收集環(huán)境樣本。

3.3.1.2 將收集的樣本添加10毫升滅菌的緩沖蛋白胨水，將樣本與緩沖蛋白胨混合1分鐘，將樣品置于室溫（20-30℃）1小時(shí)，最久不超過1.5小時(shí)，以修復(fù)損傷的李斯特菌。3.3.1.3 將測試片放在平坦處，掀起上層膜。

3.3.1.4 用移液器垂直滴加3毫升樣品到下層膜中央，將上層膜緩慢蓋下，以免產(chǎn)生氣泡。3.3.1.5 輕輕將塑料壓板放在位于接種區(qū)上層膜上，不要壓，扭轉(zhuǎn)或者滑動(dòng)壓板。提起壓板等至少十分鐘，以使膠體凝固。

3.3.1.6 將測試片透明面朝上，可疊放至十片，在37℃±1℃培養(yǎng)26-30小時(shí)，可以用標(biāo)準(zhǔn)菌落記數(shù)器或者其他光學(xué)放大器判讀，不要記數(shù)圓形輪廓上的菌落，因?yàn)樗麄儾皇苓x擇性培養(yǎng)基的影響。

3.3.1.7 對于定性檢測，根據(jù)紫紅色菌落是否存在，結(jié)果記為檢出或者未檢出。3.3.2 環(huán)境中沙門氏菌的檢測方法

3.3.2.1采樣地點(diǎn): 選取采樣點(diǎn)時(shí)因盡量選取微生物容易滋生的地方 冷凍車間

FD車間

東區(qū)初加工

傳遞窗口表面、排水溝、排水溝出口、墻壁、地面

卸料間 墻壁、墻角、地面、天花板、物料車表面

東區(qū)精加工

地面、墻壁、墻角、排水溝、排水溝出口、速動(dòng)機(jī)鏈條、天花板

暫存間

墻壁、地面、天花板、墻角、墻縫

西區(qū)初加工

傳遞窗口表面、地面、墻壁、排水溝、排水溝出口

挑選間

墻壁、地面、天花板、墻角、墊板

西區(qū)精加工

地面、墻壁、墻角、排水溝、排水溝出口、速動(dòng)機(jī)鏈條、天花板

包裝室

墻壁、地面、天花板、金探傳送帶表面、落地料存放處

3.3.2.2 操作步驟

3.3.2.2.1采樣應(yīng)在生產(chǎn)開始后進(jìn)行，用已浸潤過的棉拭在選定的被測表面旋轉(zhuǎn)涂抹約100cm2的面積，然后將棉拭放回涂抹試管并蓋緊。3.3.2.2.2將樣品帶回實(shí)驗(yàn)室，每5個(gè)點(diǎn)混合成一個(gè)樣品, 登記編號,按照SN0170-92標(biāo)準(zhǔn)及時(shí)檢測，若有陽性結(jié)果出現(xiàn)，應(yīng)逐步對所混合的每個(gè)點(diǎn)分別檢測。

物體表面涂抹菌落總數(shù)計(jì)算方式：物體表面細(xì)菌總數(shù)（cfu/c㎡）=平皿上菌落的平均數(shù)*采樣液稀釋倍數(shù)/采樣面積（cm2）

根椐GB15979－2002《一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》的標(biāo)準(zhǔn),生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生指標(biāo) 1 裝配與包裝車間空氣中細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤2 500 cfu/m3。2 工作臺表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤20 cfu/cm2。

3.工人手表面細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤300 cfu/只手，并不得檢出致病菌。人員和環(huán)境衛(wèi)生檢測方法

一、空氣采樣及檢驗(yàn)方法

1培養(yǎng)基：普通營養(yǎng)瓊脂平板，按GB4789.28中3.7條配制 2采樣（空氣沉降法）

2.1布點(diǎn)：面積小于30平方米的車間，設(shè)一對角線，在線上取3點(diǎn)，即中心一點(diǎn)，兩端在距墻1米處各取一點(diǎn)；面積大于30平方米的車間，設(shè)東、西、南、北、中5個(gè)點(diǎn)，其中東、西、南、北點(diǎn)均距墻1米。

2.2采樣高度：與地面垂直高度80-150厘米。

2.3采樣方法；用直徑為9厘米的普通營養(yǎng)瓊脂平板在采樣點(diǎn)上暴露20分鐘蓋上送檢培養(yǎng)。3培養(yǎng)：于37℃培養(yǎng)24小時(shí)。4檢測頻率：每周 空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：

生車間、熟車間、成品車間：低于100個(gè) 半成品庫、成品庫：低于10個(gè)

二、設(shè)備的采樣與檢驗(yàn)方法

根據(jù)生產(chǎn)過程所要求的重點(diǎn)衛(wèi)生部位，實(shí)驗(yàn)室對其進(jìn)行涂抹采樣，進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)檢驗(yàn)。1采樣方法

1.1涂抹法（適用于表面平坦的設(shè)備和工器具產(chǎn)品接觸面）

取經(jīng)過滅菌的鋁片框（框內(nèi)面積為50平方厘米）放在需檢查的部位上，用無菌棉球蘸上無菌生理鹽水擦拭鋁片中間方框部分，擦完后立即將棉球投入盛有10毫升無菌生理鹽水的試管中，此液每毫升代表5平方厘米。

1.2貼紙法（適用于表面不平坦的設(shè)備和工器具接處面）

將無菌規(guī)格紙（5×5厘米，紙質(zhì)要薄而軟）用無菌生理鹽水泡濕后，于需測部分分別貼上兩張，兩張紙面積共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升無菌生理鹽水的試管中，此液每毫升代表5平方厘米。2檢驗(yàn)方法

2.1細(xì)菌總數(shù)的檢驗(yàn)

將上述樣液充分振搖，根據(jù)衛(wèi)生情況，相應(yīng)地做10倍遞增稀釋，選擇其中2-3個(gè)合適的稀釋度作平皿傾注培養(yǎng)，培養(yǎng)基用普通營養(yǎng)瓊脂，每個(gè)稀釋度作2個(gè)平皿，每個(gè)平皿注入1毫升樣液，于37℃培養(yǎng)24小時(shí)后計(jì)菌落數(shù)。結(jié)果計(jì)算

表面細(xì)菌總數(shù)（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均數(shù)×樣液稀釋倍數(shù)/30×2 2.2致病菌的檢驗(yàn)

沙門氏菌，參照GB4789.4進(jìn)行 金黃色葡球菌，參照GB7918.5進(jìn)行

4.檢驗(yàn)合格標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌總數(shù)10－100個(gè)∕cm2，5.關(guān)鍵點(diǎn)：細(xì)菌總數(shù)≤10個(gè)∕cm2 一般區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)≤100個(gè)∕cm2

三、人員手表面細(xì)菌污染情況的檢驗(yàn)

1.采樣方法：用一支蘸有無菌生理鹽水的棉拭子涂擦被檢對象手的全部，反復(fù)兩次，涂擦的時(shí)候棉拭子要相應(yīng)地轉(zhuǎn)動(dòng)，擦完后，將手接觸部分剪去，將棉拭子放入裝有10毫升無菌生理鹽水的試管內(nèi)送檢培養(yǎng)。

2.檢驗(yàn)方法：同工器具表面細(xì)菌總數(shù)檢驗(yàn)方法。

3.結(jié)果計(jì)算：每只手表面的細(xì)菌總數(shù)（cfu/只手）=平皿上菌落的平均數(shù)×樣液稀釋倍數(shù)

四、消毒液藥效的微生物學(xué)鑒定法

1采樣對象：正常使用的消毒液，和已知配制好備用的消毒液 2采樣及檢驗(yàn)方法

在無菌條件下，用無菌吸管吸取1毫升樣液，加入9毫升稀釋液中混勻，對于醇類與酚類消毒劑，稀釋液用普通營養(yǎng)肉湯即可；對于含氯消毒劑、含碘消毒劑，需在肉湯中加入0.1%硫代硫酸鈉，對洗必泰、季銨鹽類消毒劑，需在肉湯中加入3%（W/V）土溫80和0.3%卵磷脂；對醛類消毒劑，需在肉湯中加入0.3%甘氨酸；對于含有表面活性劑的各種復(fù)方消毒劑，需在肉湯中加入（W/V）土溫80，以中和被檢樣液中的殘效作用，將注入了樣液的稀釋液充分搖勻，取1毫升注入平皿，隨之倒入普通營養(yǎng)瓊脂，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，將平皿于37℃條件下培養(yǎng)24小時(shí)后計(jì)平板上生長的菌落數(shù)。3結(jié)果分析

平板上有菌生長，表明被檢樣液中有殘存活菌，若每個(gè)平板菌落數(shù)在10個(gè)以下，仍可用于消毒，若每個(gè)平板菌落數(shù)超過10個(gè)，說明每毫升被檢樣液含菌量已超過100個(gè)，即不宜在用于消毒。

該公式是一個(gè)經(jīng)驗(yàn)公式.它的理論模式依據(jù)是:100CM2的面積上10MIN降落的菌落數(shù), 等于1升空氣中所含的細(xì)菌總數(shù).系數(shù)50000基于上述假說和單位換算而來.細(xì)菌總數(shù)(CFU/M3)=5/10T*100/A*1000*N=50000*N/AT

5/10T:實(shí)際放置了5MIN;

100/A:A單一培養(yǎng)皿面積;

1000:1M3=1000L啊,換算成m3

1、空氣細(xì)菌落菌數(shù)單位既然是cfu/m3，那采樣時(shí)應(yīng)該還要記錄放置平皿的高度。

2、食品安全管理體系中罐頭行業(yè)有個(gè)標(biāo)準(zhǔn)如下：

落下菌數(shù)

空氣污染程度

評價(jià)

30以下

清潔

安全

30～50

中等清潔

50～70

低等清潔

應(yīng)加注意

70～100

高度污染

對空氣要進(jìn)行消毒

100以上

嚴(yán)重污染

禁止加工

3、是否可根據(jù)企業(yè)相應(yīng)的加工產(chǎn)品微生物指標(biāo)進(jìn)行自行制定？