第一篇：微生物思考題總結(jié)

0一 緒論

1、什么是微生物？

微生物（microorganism，microbe）:是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱。通常指直徑小于或等于0.1毫米的生物。

2、包括那些類群？

首先分為非細胞結(jié)構(gòu)生物（即病毒界）和具有細胞結(jié)構(gòu)生物。后者又細分為原核細胞生物和真核細胞生物。后者分為真核原生和真菌（霉菌，酵母菌）。

3、微生物具有哪些生物學(xué)特性？

（一）個體小、比表面積大

（二）吸收多、代謝快

（三）易生長、繁殖快

（四）適應(yīng)性強、易變異

（五）種類多、分布廣、代謝類型多樣

4、微生物五大生物學(xué)特性對人類的活動存在哪些利弊？

利：（1）、有利于生產(chǎn)，對原料、生產(chǎn)條件等要求不高。不需要復(fù)雜昂貴的設(shè)備，不受季節(jié)氣候的影響。

（2）、可在短時內(nèi)培育出某種性能優(yōu)良的生產(chǎn)菌種。（3）.微生物學(xué)促進了農(nóng)業(yè)的進步

弊：（1）、難消毒、滅菌，難以控制。

（2）、產(chǎn)量下降、質(zhì)量改變、抗菌素藥性增強。

二 微生物的營養(yǎng)

1、微生物的六大營養(yǎng)要素指是什么？

碳源、氮源、能源、生長因子、無機鹽和水。

2、碳源有什么功能，常用的碳源有哪些？

1.C素構(gòu)成細胞及代謝產(chǎn)物的骨架 ；C素是多數(shù)微生物代謝所需的能源 物質(zhì)。2.有機C源：各種糖類，其次是有機酸、醇類、脂類和烴類化合物。

無機C源：CO2、碳酸鹽，只能被自養(yǎng)微生物利用。

3、氮源什么功能，常用的氮源有哪些？

1.為微生物合成細胞物質(zhì)和含氮代謝產(chǎn)物提供原料。2.分子態(tài)氮：氮氣，固氮微生物以分子氮為唯一氮源。

無機態(tài)氮：硝酸鹽、銨鹽，幾乎所有微生物能利用。

有機態(tài)氮：蛋白質(zhì)及其降解產(chǎn)物：

4、無機鹽具有什么功能？（1）構(gòu)成微生物細胞的組成成分。

（2）調(diào)節(jié)微生物細胞的滲透壓、PH值和氧化還原電 位。（3）做為自養(yǎng)微生物的能源，有些無機鹽如S、Fe。

（4）構(gòu)成酶活性基團的組成成分，維持E活性。Mg、Ca、K是多種E的激活劑。

5、生長因子什么功能？

（1）構(gòu)成細胞的組成成分，如嘌呤、嘧啶構(gòu)成核酸；

（2）調(diào)節(jié)微生物的代謝。許多維生素是各種酶的輔基成分。

6水什么功能？

（1）是細胞中生化反應(yīng)的良好介質(zhì)；營養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物都必須溶解在水里，才能被吸收或排出體（細胞）外。

（2）調(diào)節(jié)生物體內(nèi)和生物環(huán)境的溫度。水的比熱高，能有效的吸收代謝過程中放出的熱量，不致使細胞的溫度驟然上升。（3）維持細胞的膨脹壓。

（4）維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，并參與某些重要的生物化學(xué)反應(yīng)。

8、什么是碳氮比（C／N）？

碳素與氮素的比例，適當?shù)奶嫉壤兄谖⑸锇l(fā)酵分解。

9、微生物吸收營養(yǎng)物質(zhì)的方式有哪些？各有什么特點。

單純擴散(自由擴散)：1.物質(zhì)進入細胞的動力是細胞內(nèi)外的濃度差。

2.物質(zhì)由高濃度區(qū)向低濃度區(qū)擴散 3.不需要載體和能量。4.沒有特異性。

5.被運輸物質(zhì)不與膜上物質(zhì)發(fā)生任何反應(yīng)，物質(zhì)不發(fā)生化 學(xué)變化 6.速度慢。

促進擴散(協(xié)助擴散)：1.物質(zhì)運輸動力是細胞外的濃度差。

2.物質(zhì)由高濃度區(qū)向低濃度區(qū)擴散。3.運輸過程不消耗能量。4.有膜載體參加。

主動運輸：1.被運送的物質(zhì)逆濃度梯度進入細胞內(nèi)。

2.有膜載體參加，膜載體發(fā)生構(gòu)型變化。3.要消耗能量，必需有能量參加。4.被運送物質(zhì)不發(fā)生任何變。

基團轉(zhuǎn)位(移位)：1.需要磷酸酶系統(tǒng)進行催化 ；

2.被運輸?shù)奈镔|(zhì)在運送前后分子結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，被磷酸化 ； 3.需要特異性載體和能量 ； 4.逆濃度梯度運送物質(zhì)、溶質(zhì)。

10、培養(yǎng)基？寫出配制培養(yǎng)基的過程步驟及注意事項？ 1.由人工配制供微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物所用的營養(yǎng)物質(zhì)叫營養(yǎng)基?？蒲猩a(chǎn)中培養(yǎng)微生物都需要配制培養(yǎng)

2.配制培養(yǎng)基的步驟：①計算稱量；②加水溶解；③調(diào)節(jié)pH；④過濾分裝；⑤加塞包扎；⑥加壓滅菌。

四 病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能

1、什么是病毒？

是一類比細菌更小，無細胞結(jié)構(gòu)的，僅含一種核酸并且只能在活細胞內(nèi)生長繁殖的微生物。

2、病毒具有哪些基本特點？

個體小，無細胞結(jié)構(gòu)，專性活物寄生，抵抗力弱

3.病毒的大小如何？

測量單位：nm直徑：10~300 nm，3、病毒由哪些化學(xué)物質(zhì)組成？ 主要是：蛋白質(zhì)、核酸，病毒糖蛋白、病毒脂類

4、病毒的主要類群有哪些？

微生物病毒，植物病毒，動物病毒，昆蟲病毒。第一種又分為細菌（噬菌體）和真菌病毒。

5、寫出噬菌體的增殖過程？

吸附→侵入→增殖（復(fù)制與生物合成）→成熟（裝配）→裂解（釋放）。烈性噬菌體、溫和性噬菌體

6、在發(fā)酵工業(yè)上，預(yù)防噬菌體的污染有哪些措施？

（1）決不使用可疑菌種（2）嚴格保持環(huán)境衛(wèi)生（3）決不排放或隨便丟棄活菌液（4）保證通氣質(zhì)量（5）加強管道及發(fā)酵罐的滅菌（6）不斷篩選抗性菌種，并經(jīng)常輪換生產(chǎn)菌種。（7）嚴格執(zhí)行會客制度。

六 食品的細菌衛(wèi)生檢驗

1、什么是菌落總數(shù)？

是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后(如培基成分、培養(yǎng)溫度和時間、pH、需氧性質(zhì)等)，所得1g(mL)或1cm2面積檢樣中所形成微生物菌落總數(shù)。

2、測定食品的菌落總數(shù)有什么意義？

1.判定食品被細菌污染的程度及食品的衛(wèi)生質(zhì)量。2.預(yù)測食品存用的期限長短。3.了解細菌在食品中的繁殖動態(tài)

4、在測定菌落總數(shù)時，如何選擇平板進行菌落計數(shù)？

（1）單個菌落以一個菌落計；

（2）選取菌落數(shù)在 30 CFU～300 CFU 之間、無蔓延菌落生長的平板計數(shù)菌落總數(shù)。低于30 CFU 的平板記錄具體菌落數(shù)，大于 300 CFU 的可記錄為多不可計。每個稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個平板的平均數(shù)。

（3）其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘以 2，代表一個平板菌落數(shù)。

（4）當平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長時，則將每條單鏈作為一個菌落計數(shù)。

5、在菌落總數(shù)的檢驗中，要注意哪些事項？

（1）到達規(guī)定培養(yǎng)時間，應(yīng)立即計數(shù)。

（2）如果不能立即計數(shù)，應(yīng)將平板放置于0－4℃，但不得超過24h。（3）記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。

6、在菌落總數(shù)的檢驗中，如何根據(jù)樣品的特性選擇培養(yǎng)溫度和時間？

普通食品:36 ±1℃

48±2h 清涼飲料、調(diào)味品、糕點、酒類： 37 ℃

24h 水產(chǎn)品: 30℃ 72±3h

七 微生物的代謝和發(fā)酵

1.何謂新陳代謝？試圖示分解代謝和合成代謝間的差別與聯(lián)系。

是指發(fā)生在活細胞中的各種分解代謝和合成代謝的總和。

2.什么叫生物氧化？生物氧化的類型有哪些？

就是發(fā)生在活細胞內(nèi)的一系列產(chǎn)能性氧化反應(yīng)的總稱。

3.試述EMP途徑及在微生物生命活動中的重要性。

（1）提供多種中間代謝產(chǎn)物，為合成代謝提供原料（2）同時起著連接許多有關(guān)代謝途徑的作用；

（3）與乙醛、乳酸、甘油、丙酮酸等大量發(fā)酵產(chǎn)物的生產(chǎn)密切相關(guān)。

4.試述HMP途徑在微生物生命活動中的重要性。

（1）為核苷酸、核酸的生物合成提供磷酸戊糖；

（2）提供還原力，為合成脂肪酸、固醇類物質(zhì)提供動力，并產(chǎn)生大量能量；（4）利用HMP途徑可產(chǎn)生核苷酸，若干種氨基酸、輔酶、乳酸等重要發(fā)酵產(chǎn)物；（5）不用借助線粒體酶系統(tǒng)，可完全分解葡萄糖產(chǎn)生能量。

5.試述TCA循環(huán)及在微生物產(chǎn)能和發(fā)酵生產(chǎn)中的重要性。

（1）產(chǎn)生大量能量ATP；

（2）為合成代謝提供小分子物；

（3）是糖、蛋白質(zhì)、脂肪三大物質(zhì)代謝的中心樞紐；（4）為發(fā)酵工業(yè)提供重要產(chǎn)品。

八 霉菌和酵母菌

1、什么是酵母菌？

一類以單細胞為主的，以出芽或分裂為主要繁殖方式的真菌。

2、酵母菌的具有哪些形態(tài)？大小如何？

形態(tài)：有球形、卵圓形、臘腸形、橢圓形、檸檬形等。大?。?1~5微米×5~30微米

3、酵母菌的細胞壁和細胞膜具有哪些功能？

細胞壁：1.保持著細胞的形態(tài)、韌性；

2.細胞壁上存在著許多種酶及雌、雄兩性的識別物質(zhì)。

細胞膜：1.調(diào)節(jié)滲透壓。2.調(diào)節(jié)養(yǎng)分吸收和代謝產(chǎn)物分泌。3.是合成、裝配細胞壁、部分酶等大分子的基地。4.是部分酶起生化作用的場所

4、酵母菌的線粒體具有哪些功能？

參與呼吸作用和氧化磷酸化

5、酵母菌有哪些繁殖方式？酵母菌以什么繁殖方式為主？

1.無性和有性（產(chǎn)子囊孢子）。前者又分芽殖，裂殖，產(chǎn)無性孢子。2.以芽殖為主。

6、酵母菌的菌落具有哪些特征？

1較大、較厚。

2菌落表面濕潤光滑，粘稠，易被挑起，培養(yǎng)時間長則顯皺縮狀，并較干燥。3質(zhì)地均勻，顏色均一。

4菌落多為乳白色，少數(shù)為紅色，個別為黑色。

7、什么是霉菌？

通常指那些菌絲體比較發(fā)達而又不產(chǎn)生大型子實體的真菌。

8、霉菌的形態(tài)、大小如何 ？ 形態(tài)：管狀的細絲

大?。褐睆綖?~10微米

九 原核生物形態(tài)與結(jié)構(gòu)

1、微生物分為哪三大類？

原核細胞型微生物 真核細胞型微生物 非細胞型微生物

2、什么是原核細胞型微生物？

指具有細胞結(jié)構(gòu)，但只有原始的核區(qū)，無核膜、核仁，細胞器不完整的微生物

3、什么是真核細胞型微生物？

指具有細胞結(jié)構(gòu)，有明顯的核區(qū)，有核膜、核仁，細胞器完整的微生物

4、什么是非細胞型微生物？

指沒有典型的細胞結(jié)構(gòu)，只有裸露的核酸和蛋白質(zhì)的微生物

5、原核微生物主要包括哪些微生物？

細菌、放線菌、藍細菌、支原體、立克次氏體、衣原體

6、細菌具有哪些個體形態(tài)？細菌的大??？細菌的細胞結(jié)構(gòu)及其功能？

1基本形態(tài)有三大類型:

球狀（型）

桿狀（型）

螺旋狀（型）

2（細胞直徑約0.5μm，長度約0.5～5μm）

7、細菌細胞的一般結(jié)構(gòu)包括哪些？

1細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、細胞核（共性）；

2細菌細胞的特殊結(jié)構(gòu)：鞭毛、莢膜、芽孢、菌毛等（個性）

8、鞭毛具有什么功能？

①是細菌的運動器官：

有鞭毛：呈擴散形生長。無鞭毛：呈直線形生長（在半固體培養(yǎng)基）②與致病有關(guān) ③鑒定分類細菌

9、菌毛具有什么功能？ 使細菌牢固地粘附在物體的表面上。

10、莢膜主要的化學(xué)成分、莢膜的功能、莢膜細菌的危害？主要的化學(xué)1成分：多糖、多肽、蛋白質(zhì)。

2功能：保護細菌。可加強耐旱性、免受白細胞吞噬

貯藏養(yǎng)料。如水、營養(yǎng)物

堆積某些代謝產(chǎn)物

可使菌體附著于物體的表面。

11、芽孢 ⑴芽孢的概念；⑵芽孢具有什么特點；⑶細菌芽孢具有什么實踐意義。

1含義：指某些細菌在它的生長發(fā)育后期，在細胞內(nèi)形成的一個圓形或橢圓形的抗逆性休眠體。

2特點：抗熱、抗輻射、抗化學(xué)藥物和抗高靜水壓等的能力極強。3功能：用于菌種的分類鑒定

利于菌種的保藏和篩選

作為各種滅菌的指標

12、細菌的繁殖是什么？什么是菌落？什么是菌苔？ 二分分裂繁殖是細菌最普遍、最主要的繁殖方式。在分裂前先延長菌體，染色體復(fù)制為二，然后垂直于長軸分裂，細胞赤道附近的細胞質(zhì)膜凹陷生長，直至形成橫隔膜，同時形成橫隔壁，這樣便產(chǎn)生兩個子細胞。將單個微生物細胞或一小堆同種細胞接種在固體培養(yǎng)基的表面（有時為內(nèi)部），在適宜的培養(yǎng)條件下，細胞迅速生長繁殖，形成以母細胞為中心的一堆肉眼可見的、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細胞群體，這就是菌落。將某一純種微生物的大量細胞密集地接種到固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后，在培養(yǎng)基表面生成的微生物群體，這就是菌苔。

第二篇：微生物思考題及參考答案

微生物思考題及參考答案

1.用油鏡觀察時應(yīng)注意哪些問題？在載玻片和鏡頭之間加滴什么油?起什么作用？

答：應(yīng)該先用擦鏡紙將鏡頭擦干凈,以防上次實驗的污染.操作時,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加香柏油,作用是增加折光率,也就是增加了顯微鏡的分辨率.油的折光率和分辨率成反比(有公式),同時與波長成正比.2.什么是物鏡的同焦現(xiàn)象？它在顯微鏡觀察中有什么意義？

答：在一般情況下，當物像在一種物鏡中已清晰聚焦后，轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器將其他物鏡轉(zhuǎn)到工作位置進行觀察時，物像將保持基本準焦的狀態(tài)，這種現(xiàn)象稱為物鏡的同焦。利用這種同焦現(xiàn)象，可以保證在使用高倍鏡或油鏡等放大倍數(shù)高、工作距離短的物鏡時僅用細調(diào)節(jié)器即可對物像清晰聚焦，從而避免由于使用粗調(diào)節(jié)器時可能的誤操作而損壞鏡頭或載玻片。

3.影響顯微鏡分辨率的因素有哪些？

答：物鏡的NA值（物鏡的數(shù)值孔徑）與照明光源的波長.4.美藍染色液作用時間的不同,對酵母菌死細胞數(shù)量有何影響,試分析原因

答：會造成更多的死細胞，在顯微鏡下觀察，活的是透明無色，衰老的是淡藍色，死亡的是藍色，如果美藍染色液作用時間過長，會造成細胞脫水死亡并滲透染液，影響實驗結(jié)果。

5.鏡檢時如何區(qū)分放線菌基內(nèi)菌絲，氣生菌絲以及孢子絲

一般氣生菌絲顏色較深，直生或分枝絲狀，比基內(nèi)菌絲粗；而基內(nèi)菌絲色淺、發(fā)亮，可看到橫隔膜，繼而斷裂成球狀或桿狀小體。

6.在進行細菌涂片時應(yīng)注意哪些環(huán)節(jié)

1、載玻片應(yīng)該冷卻后再涂片。

2、如果是涂布液體，可以用毛細管或接種環(huán)滴一小滴，然后輕輕抹開，一圈足夠。

3、如果是涂布菌落或菌苔，應(yīng)該在載玻片上先滴一滴水，再將菌落或菌苔涂布上去，接種環(huán)的尖蘸一點點即可。

4、為了節(jié)省時間，可以將干燥和熱固定合并成一步。但是應(yīng)該避免高溫，因為溫度一高，細菌會變形。

5、染色時間視染色液種類而定。如結(jié)晶紫只需幾十秒，亞甲基藍則需一到兩分鐘。

6、沖洗時，水流不能太大，而且盡量避免水流直接沖在涂片上。

7、沖洗后干燥，可以用酒精燈加熱以節(jié)省時間，同樣的，應(yīng)該避免高溫，因為溫度一高，細菌會變形。

7.進行細菌制片時為什么要進行加熱固定?在加熱固定時應(yīng)注意什么? 固定的目的有三個：

1）殺死微生物，固定細胞結(jié)構(gòu)。

2）保證菌體能更牢的粘附在載玻片上，防止標本被水沖洗掉。

3）改變?nèi)玖蠈毎耐ㄍ感?，因為死的原生質(zhì)比活的原生質(zhì)易于染色。

固定時應(yīng)注意：手持玻片，菌膜朝上，在微火過3次（手指觸摸玻片反面，不燙手為宜），固定時應(yīng)盡可能維持細胞原有形態(tài)，防止細胞膨脹或收縮。8.為什么要求制片完全干燥后才能用油鏡觀察

1.因為用油鏡觀察時,鏡頭離玻片會很近.如果未完全干燥,載玻片上的液體會污染油鏡鏡頭.鏡頭非常精密,被污染后不利于下次觀察.2、若未完全干燥，水滴會影響油與玻璃之間折光率，造成視野不夠清晰。

9.哪些環(huán)節(jié)會影響革蘭色染色結(jié)果的正確性？其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是什么？

答：涂片環(huán)節(jié)、加熱固定環(huán)節(jié)、脫色環(huán)節(jié)；其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是脫色環(huán)節(jié)。

10.進行革蘭氏染色時，為什么特別強調(diào)菌齡不能太老，用老齡細菌染色會出現(xiàn)什么問題?

答：菌齡太老，細胞壁通透性改變。著色不均，染色效果不好。陰性陽性不明顯分不太清楚,問題是：不便于顯微鏡下觀察是陽性菌還是陰性菌。

11.革蘭氏染色中那一步是關(guān)鍵?為什么？你是如何操作的？

革蘭氏染色的關(guān)鍵步驟是：乙醇脫色（是脫色時間）。如果脫色過度，革蘭氏陽性菌也可被脫色而被誤認為是革蘭氏陰性菌；如脫色時間過短，革蘭氏陰性菌也可被脫色而被誤認為是革蘭氏陽性菌。脫色時間的長短還受涂片的厚薄，脫色是玻片晃動的快慢及乙醇用量的多少等因素的影響，難以嚴格規(guī)定（脫色是應(yīng)當控制速度，脫色時間一般為20—30s）。

12.革蘭氏染色中,哪個步驟可以省略?在什么情況下采用

媒染目的是在所有的細胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。脫色后使革蘭氏陰性菌變?yōu)闊o色。復(fù)染使革蘭氏陰性菌染成紅色。所以鑒別細菌的革蘭氏陰陽性只須媒染，復(fù)染的目的是為了看清革蘭氏陰性菌。

13.你主要根據(jù)哪些形態(tài)特征來區(qū)分四種不同的霉菌

曲霉:具有分隔；氣生菌絲的一部分形成長而粗糙的分生孢子梗，頂端膨大成球狀頂囊，表面輻射出一層或兩層小梗，小梗上著生成串的球形分生孢子。分生孢子梗生于足細胞上，并通過足細胞與營養(yǎng)菌絲相連。

根霉:菌絲無隔、多核、分枝狀，有匍匐菌絲和假根。在假根的上方直立地生長出一至數(shù)根孢囊梗，其頂端膨大成球形孢子囊。囊的基部有囊托，中間有球形或半球形囊軸。

毛霉:菌絲無隔、多核、分枝狀，無假根或匍匐菌絲。菌絲體上直接生出單生、總狀分枝或假軸狀分枝的孢囊梗。各分枝頂端著生球形孢子囊，無囊托。

青霉:菌絲有橫隔，分生孢子梗亦有橫隔，光滑或粗糙。基部無足細胞，頂端不形成膨大的頂囊，其分生孢子梗經(jīng)過多次分枝，產(chǎn)生幾輪對稱或不對稱的小梗，形如掃帚，稱為帚狀體。

孢子顏色：黑曲霉是黑色，青霉是青色，根霉是白菌絲黑孢子，毛霉則是淡黃色。以上為實驗室觀察

1）菌絲特征：青菌與曲霉菌絲與膈；毛霉與根霉則無；

2）菌絲的特化結(jié)構(gòu)：曲霉有足細胞，其它霉菌無；根霉有假根與匍匐枝，其它霉菌無；

3）孢子頭特征：青霉的孢子頭為掃帚狀；根霉與毛霉的孢子頭為囊狀；曲霉為菊花狀孢子頭。14.為什么更換不同放大倍數(shù)的目鏡或物鏡時，必須用鏡臺測微尺重新對目鏡測微尺進行校正? 目鏡測微尺中每小格代表的實際長度是不固定的，它是隨所使用目鏡和物鏡的放大率的不同而改變的，故在測量前必須先用鏡臺測微尺重新對目鏡測微尺進行校正，以得出在顯微鏡的特定放大倍率下，目鏡測微尺每小格所代表的相對長度。

15.在不改變目鏡和目鏡測微尺，而改用不同放大倍數(shù)的物鏡來測定同一細菌的大小時，其測定結(jié)果是否相同？為什么？

答:相同;目鏡測微尺是一塊圓形玻片，其中央刻有精確等分的刻度，有把 毫米刻成為50 等分或把10 毫米長度刻成100 等分。測量時，將其放在接目鏡中的隔板上來測量經(jīng)顯微 鏡放大后的細胞物象。由于在不改變目鏡和目鏡測微尺，而改用不同放大倍數(shù)的物鏡來測定 同一細菌的大小時，物象的放大倍數(shù)與每小格目鏡測微尺所代表的長度在變化比例上是同步的，故而測定結(jié)果相同。

16.哪些因素會造成血細胞計數(shù)板的計數(shù)誤差，應(yīng)如何避免? 操作時沒有先蓋蓋玻片再滴加懸液，導(dǎo)致體積不準確。避免：先蓋蓋玻片再滴加懸液。細胞密度太高。避免：稀釋溶液。

溶液不均勻。避免：滴加溶液前混勻懸液。

1、儀器誤差：所用器材均應(yīng)清潔干凈，并且計數(shù)板計數(shù)區(qū)不應(yīng)該有擦痕。

2、計數(shù)室內(nèi)可能有氣泡。因為酵母細胞并沒有染色，看起來是透明的，有氣泡很容易被計入，使數(shù)值偏高；并且，氣泡會影響菌懸液的隨機分布。改進：若產(chǎn)生氣泡，則用吸水紙吸出。

3、菌體在計數(shù)板上分布不均，當用選取5格計數(shù)時，會造成很大誤差。改進：應(yīng)使菌液自然流入并混勻，進行觀察時盡可能多數(shù)幾個格子。

4、配制稀釋液時吸取的濃度過高或過低，導(dǎo)致稀釋液濃度和原液不成正確比例，計算時產(chǎn)生誤差。應(yīng)將原液搖晃均勻后取中部的液體進行稀釋。

5、由于數(shù)菌體數(shù)目時視覺疲勞而導(dǎo)致的視覺誤差。應(yīng)多人觀察，取記錄平均數(shù)。

6、計數(shù)時可能將格四周的菌都計算在內(nèi)了，使數(shù)值偏高。改進：謹遵一個規(guī)則，計上不計下，計左不計右，不可以重復(fù)計數(shù)。

7、可能出現(xiàn)有出芽的酵母菌，將出芽的酵母菌按兩個計數(shù)了，使數(shù)值偏高。改進：計數(shù)時，只有當芽體于母細胞一樣大的時候，才能計為兩個。

17.培養(yǎng)基配好后，為什么必須立即滅菌?如何檢查滅菌后的培養(yǎng)基是否無菌？為什么要倒置培養(yǎng)？

答：由于配制培養(yǎng)基的各類營養(yǎng)物質(zhì)和容器等含有各種微生物，因此，已配制好的培養(yǎng)基必須立即滅菌，如果來不及滅菌，應(yīng)暫存冰箱內(nèi)，以防止其中的微生物生長系列而消耗養(yǎng)分和改變培養(yǎng)基的酸堿度所帶來的不利影響。

將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃溫箱中培養(yǎng)24～48h，無菌生長即可證明滅菌后的培養(yǎng)基無菌。

倒置培養(yǎng)的主要目的：1）由于重力的作用使培養(yǎng)基表面及次層能富集微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)，利于微生物生長；2）防止空氣中微生物的污染培養(yǎng)基及培養(yǎng)物：倒置時平板內(nèi)的空氣是不流動的,雜菌不會沉降到培養(yǎng)基表面,如果不倒置,很快平板周邊會長起雜菌。3）倒置培養(yǎng)使瓊脂里水分不易蒸發(fā)出去，而充分的保持瓊脂的彈性與細菌容易繁殖和生存的環(huán)境。如果不倒置，大概3天左右培養(yǎng)基就會出現(xiàn)龜裂等水分散失的情況。而一些落菌等試驗，需驗證培養(yǎng)基無菌，就要先倒置培養(yǎng)48小時才可作為模板做落菌，水分散失是很重要的。

19.在配制培養(yǎng)基的操作過程中應(yīng)注意些什么問題？為什么？

答：一般而言，培養(yǎng)基的配置要注意如下幾點原則：

1）營養(yǎng)成分的配比：碳源和氮源的比例（C/N）要適當；

2）適宜的酸堿度（pH值）：配制培養(yǎng)基時pH的調(diào)節(jié)；

3）滲透壓：營養(yǎng)物質(zhì)要有適合的濃度；

4）培養(yǎng)基不能反復(fù)高溫滅菌。

5)稱不溶性固形物時，應(yīng)單獨稱，若量少的可以與無機鹽一起稱，但一定要混勻再分 裝；

6）一般情況下培養(yǎng)基用自來水配制。操作細節(jié)上則要注意：

1）稱藥品用的牛角匙不要混用，稱完藥品應(yīng)及時蓋緊瓶蓋

2）調(diào)pH值不要調(diào)過頭，以免回調(diào)而影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度

3）分裝時注意不要污染棉塞、試管口，以免染菌。

4）及時滅菌，以免培養(yǎng)基及容器里的微生物生長繁殖消耗養(yǎng)分、改變酸堿度。

1、當然是注意濃度配比不要搞錯

2、很多培養(yǎng)基的加料順序有講究,否則會有沉淀產(chǎn)生

3、有些培養(yǎng)基會有不溶物質(zhì),分裝前應(yīng)搖勻

4、不要忘了調(diào)節(jié)pH值（一般細菌都需要,酵母可能自然pH就行,不過不一定）

5、加熱溶解時盡量不要煮沸,會損失營養(yǎng)物質(zhì)

20.高壓蒸氣滅菌開始之前，為什么要將鍋內(nèi)冷空氣排盡？滅菌完畢后，為什么待壓力降低“0”時才能打開排氣閥，開蓋取物。

答：1）在使用高壓蒸汽滅菌時，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否完全極為重要，因為空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹壓，所以，當水蒸氣中含有空氣時，在同一壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。

2）壓力未降至“0”便開蓋取物的可能后果：壓力鍋內(nèi)壓力驟然降低，引起容器中的溶液噴出容器口導(dǎo)致污染或?qū)е氯藛T的燙傷。

21.干熱滅菌操作過程中應(yīng)注意哪些問題為什么

1、物品不要擺放太擠,以免妨礙空氣流通

2、滅菌物品不要接觸干燥箱內(nèi)壁的鐵板,以防包裝紙烤焦起火

3、滅菌時人不能離開

4、滅菌結(jié)束后不能忘記關(guān)掉電源

5、待溫度降到70度以下再打開,否則冷熱空氣交替,玻璃器皿容易炸裂或發(fā)生燙傷事故

22.為什么干熱滅菌比濕熱滅菌所需溫度高 時間長？

在濕熱條件下，有水蒸汽的作用：

a高溫水蒸汽導(dǎo)熱比干空氣要快；

b高溫水蒸汽冷凝變水時有放熱過程；

c高溫水蒸汽能穿透細菌的細胞膜，直接進入細胞內(nèi)破壞細胞；

d高溫水蒸汽能水解一部分細胞結(jié)構(gòu)，加速導(dǎo)熱。（濕熱中細菌菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較易凝固，因蛋白質(zhì)含水量增加，所需凝固溫度降低；濕熱的穿透力比干熱大；濕熱的蒸汽有潛熱存在，每1克水在100℃時，由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時可放出2．26kJ（千焦）的熱量。這種潛熱，能迅速提高被滅菌物體的溫度，從而增加滅菌效力。）

23.設(shè)計實驗方案，比較干熱滅菌和濕熱滅菌的效果。以下試驗方案有關(guān)操作均遵循無菌操作條件和等量原則。

（一）實驗材料

試管 鑷子 酒精燈 嗜熱脂肪芽孢桿菌 ATCC 7053 菌片 紙片（與菌片同大小 同材料）溴甲酚紫蛋白凍水培養(yǎng)基（已滅菌）等實驗材料（材料有余）。

（二）對照組

取9支潔凈試管，分為A1 B1 C1 三組（每3支一組），將A1 組中放入菌片，B1 組中放入紙片，C1組中什么也不加；不經(jīng)滅菌，直接加入溴甲酚紫蛋白凍水培養(yǎng)基（等量）。

（三）恒為培養(yǎng)

將上述所有試管按分組在56℃恒溫條件下培養(yǎng)48小時。

24.如何確定平板上某單個菌落是否為純培養(yǎng)請寫出實驗的主要步驟

純培養(yǎng)的確定除觀察其菌落特征外，還要結(jié)合顯微鏡檢測個體形態(tài)特征后才能確定，有些微生物的純培養(yǎng)要經(jīng)過一系列分離與純化過程和多種特征鑒定才能得到。

25.配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，有哪些操作步驟？那幾步易出錯，如何防止？

稱取藥品—加熱溶化—分裝—加棉塞—包扎—滅菌—擱置斜面

易出錯的步驟有：

a 稱取藥品 稱取時鑰匙專用，瓶蓋不要錯蓋，易吸水的藥品要快速稱??；

b 加熱溶化 加入藥品后要用玻璃棒不停攪拌，以免糊底（在瓊脂熔化過程中，應(yīng)控制火力，以免培養(yǎng)基因沸騰而溢出容器，同時，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底燒焦。）；

c 分裝 分裝時培養(yǎng)基不能粘在三角瓶（或試管）口，以免接種時染菌；

d 擱置斜面斜面長度約試管長度一半為宜。

26.平板菌落計數(shù)法的原理是什么? 它適用于那些微生物的計數(shù)？

平板菌落計數(shù)法是將等測樣品經(jīng)適當稀釋后，其中的微生物充分分散為單個細胞，取一定量的稀釋液接種到平板上，經(jīng)過培養(yǎng)，由每個單細胞生長繁殖而形成的肉眼可見的菌落，即一個單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個單細胞。統(tǒng)計菌落數(shù)，根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。（但是，由于待測樣品往往不易完全分散成單個細胞，所以，長成的一個單菌落也可能來自樣品中的2~3或更多個細胞。因此平板菌落計數(shù)的結(jié)果往往偏低。現(xiàn)在常使用菌落形成單位）。

平板計數(shù)法是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的一個菌落是由一個微生物繁殖而形成的現(xiàn)象進行的，也就是一個菌落可代表一種微生物（并不絕對)。通常用來測定樣品中所含細菌、孢子、酵母菌等單細胞微生物的數(shù)量。

8、微量移液器的最小量程太大，在加樣時，容易加多，使蓋玻片鼓起，血球計數(shù)板所技術(shù)的體積變大，最終結(jié)果偏大。改進：用量程的小的微量移液器并少加一些。

27.如果一項科學(xué)研究內(nèi)容需從自然界中篩選到能產(chǎn)生高溫蛋白酶的菌株，你將如何完成？寫出實驗方案（產(chǎn)蛋白酶菌株在酪素平板上能形成降解酪素透明圈）。

以下試驗方案有關(guān)操作均遵循無菌操作條件

一 材料準備 1 土壤【有機質(zhì)（特別是蛋白質(zhì)）含量豐富的土壤】 2 滅菌生理鹽水（0.85%NaCl）3 滅菌移液管 添加酪素的B—4（牛肉膏蛋白胨完全培養(yǎng)基）經(jīng)滅菌 5 B—4斜面（經(jīng)滅菌）其他材料：接種環(huán) 酒精燈等 二 操作方法

1在盛有10ml滅菌生理鹽水的燒杯中添加1g土壤，配成懸浮液； 稍靜止后，用滅菌移液管移取部分上清液，將其制成10^4—10^6倍的稀釋液； 3 用滅菌移液管吸取各稀釋液用稀釋倒平板法（或涂布平板法）將其接入添加酪素的B—4平板上； 在55—65℃下培養(yǎng)1—2天； 挑取形成降解酪素透明圈的菌落（透明圈直徑D與菌落直徑d之比較大者），轉(zhuǎn)接入B—4斜面上培養(yǎng)；（若無特定菌落形成，則需另取土樣從開始重復(fù)試驗）6 將B—4斜面上的菌落再用平板純培養(yǎng)，依次重復(fù)2—3次后即可得到純培養(yǎng)（鏡檢）； 7 純培養(yǎng)細菌中蛋白酶的提取及活性鑒定【搖瓶培養(yǎng)（若提取蛋白酶及其活性正常，則純培養(yǎng)成功，否則，重取土樣重復(fù)以上實驗）】。

28.為什么熔化后的培養(yǎng)基要冷卻至45℃左右才能倒平板？

低于這個溫度瓊脂會凝固，溫度過高，如果是做傾倒瓊脂做菌落計數(shù)，會殺死一部分細菌，如果只是只是制備瓊脂平板，那么溫度太高就進行傾倒會導(dǎo)致瓊脂凝固后偏軟，水汽過多。

29.要使平板菌落計數(shù)準確，需要掌握哪幾個關(guān)鍵？為什么？ 無菌操作 2 稀釋良好，不會太濃或太稀。3 菌落生長時間控制好，不會長的太大不便區(qū)分，也不至于太小影響計數(shù)。

30.當你的平板上長出的菌落不是均勻分散的而是集中在一起時，你認為問題出在哪里？

1.太濃 2.沒涂勻

31.用傾注法和涂布法計數(shù)，其平板上長出的菌落有何不同？為什么要培養(yǎng)較長時間（48h）后觀察結(jié)果？

傾注法是在培養(yǎng)皿中接種好樣品之后，傾注瓊脂并培養(yǎng)；而涂布法則是在瓊脂表面接種并使用L型棒涂布。

因此，傾注法的菌落將出現(xiàn)在瓊脂的各個部位，包括底層和中層，但涂布法培養(yǎng)后形成的菌落只出現(xiàn)在瓊脂表面。

32.你如何解釋淀粉酶是胞外酶而非胞內(nèi)酶？

答：①淀粉是大分子物質(zhì)，進入細胞十分困難，甚至需要高耗能的胞吞作用。因而通過胞外酶的作用，將淀粉水解為葡萄糖后運入細胞，較方便高效。②試驗中出現(xiàn)透明圈，說明培養(yǎng)基內(nèi)淀粉被水解，可推測是細菌產(chǎn)生的胞外的淀粉酶起的作用。

33.不利用碘液，你能否證明淀粉水解的存在?

答：由于淀粉水解生成葡萄糖，即多羥基醛，因此可利用醛的性質(zhì)進行檢驗，如銀鏡試驗，斐林試驗等。呈陽性者，說明產(chǎn)生了葡萄糖，淀粉被水解；陰性者說明淀粉未被水解。

34.假如某些微生物可以有氧代謝葡萄糖，發(fā)酵試驗應(yīng)該出現(xiàn)什么結(jié)果？

答微生物有氧代謝葡萄糖產(chǎn)氣不產(chǎn)酸，因此發(fā)酵結(jié)果是小管中生氣泡但是溶液不變黃。

35.解釋在細菌培養(yǎng)中吲哚檢測的化學(xué)原理，為什么在這個試驗中用吲哚的存在作為色氨酸酶活性的指示劑，而不用丙酮酸？

答：化學(xué)原理：有些細菌產(chǎn)生色氨酸酶，分解蛋白胨中的色氨酸，產(chǎn)生吲哚和丙酮酸。吲哚與對二甲基氨基甲醛結(jié)合，形成紅色的玫瑰吲哚。但并非所有的微生物都具有分解色氨酸產(chǎn)生吲哚的能力，因此吲哚試驗可以作為一個生物化學(xué)檢測的指標。

因為丙酮酸是生物體呼吸作用的產(chǎn)物，無論是有氧還是無氧，都會產(chǎn)生丙酮酸，因而無法作為色氨酸酶活性的指示劑進行區(qū)分。

同時吲哚能通過有明顯顏色變化的化學(xué)反應(yīng)觀測到，而丙酮酸不能，所以試驗中用吲哚的存在作為色氨酸酶活性的指示劑，而不用丙酮酸。

36.為什么大腸桿菌是甲基紅反應(yīng)陽性，而產(chǎn)氣桿菌為陰性？

答：當細菌代謝糖產(chǎn)生酸時，培養(yǎng)基就會變酸，使加入培養(yǎng)基中的甲基紅指示劑由橙黃色（PH6.3）轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色（PH4.2），即甲基紅反應(yīng)。而大腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌在培養(yǎng)的早期均產(chǎn)生有機酸，但大腸桿菌在培養(yǎng)的后期仍能維持酸性PH4，而產(chǎn)氣腸桿菌則轉(zhuǎn)化有機酸為非酸性末端產(chǎn)物，如乙醇、丙酮酸等，使PH升至大約6。因此，大腸桿菌為陽性，產(chǎn)氣腸桿菌為陰性。

37.用紫外線進行誘變時,為什么要打開皿蓋?為什么要在紅光燈下操作

紫外線不容易穿透玻璃，所以打開蓋，自然光下容易光復(fù)活，紅光下不會所以在紅光下操作

第三篇：微生物總結(jié)

微生物：一類分布廣泛、體積微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼直接看不到，微小生物的總稱。

細菌L型：細菌細胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制，這種細胞壁受損的細菌在高滲環(huán)境下仍可存活，稱細菌細胞壁缺陷型或L型。

質(zhì)粒：是染色體外的遺傳物質(zhì)，控制某些特定的生物學(xué)性狀，不是細菌生長所必需。

莢膜：是細菌合成分泌的包繞于細胞壁外的一層粘液性物質(zhì)。界限清晰性質(zhì)穩(wěn)定結(jié)合牢固。培養(yǎng)基：由人工方法經(jīng)滅菌后制成，專供微生物生長使用的混合營養(yǎng)制品。一般pH為7.2-7.6。

兼性厭氧菌：兼有需氧呼吸和無氧發(fā)酵兩種功能，無論在有氧或無氧環(huán)境中都能生長，但以有氧時生長較好，大多數(shù)病原菌屬于此。菌落：在固體培養(yǎng)基中，經(jīng)過十八到24小時培養(yǎng)后，單個細菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細紅細胞吸附：流感病毒等感染細胞后，由于細胞膜上出現(xiàn)了血凝素（HA），具有吸附脊椎動物紅細胞的能力，這一現(xiàn)象稱為紅細胞吸附。抗毒素：通常是用細菌類毒素給馬多次注射后，取其免疫血清提取免疫球蛋白精制而成抗生素：微生物來源的抗菌藥物，以及人工化學(xué)修飾或半合成的衍生物

無菌：就是指沒有活菌的意思。

1：細胞壁結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及功能？答：化學(xué)組成：G+①肽聚糖：聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋②磷壁酸：粘附功能，與致病性有關(guān)；抗原性很強③其他成分：如A群鏈球菌的M蛋白G-①肽聚糖：聚糖骨架；四肽側(cè)鏈②外膜：脂蛋白；脂質(zhì)雙層；脂多糖：脂類A（毒性成分，無種屬特異性）；核心多糖；特異多糖。功能：①維持細菌固有形態(tài)②保護細菌抵抗低滲環(huán)境③物質(zhì)交換④決定菌體的抗原性。2：G-菌與G+菌細胞壁的異同點及其意義？答：兼性厭氧菌、專性厭氧菌。

11：與醫(yī)學(xué)有關(guān)的合成代謝產(chǎn)物？答：① 毒素與侵襲性酶：外毒素和內(nèi)毒素②熱原質(zhì)：G-菌細胞壁的脂多糖，耐高溫，250℃干烤破壞。③抗生素：某些微生物代謝中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死其他微生物或腫瘤細胞的物質(zhì)。④維生素：如VitK、B族維生素。⑤色素：脂溶性和水溶性色素。⑥細菌素：無治療應(yīng)用價值。13：病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成。答：多數(shù)病毒呈球形或近似球形，少數(shù)呈桿狀（植物病毒）、絲狀（初分離的流感病毒）、彈狀（狂犬病毒）、磚塊狀（如痘類病毒）和蝌蚪狀（噬菌體）。病毒的核心和衣殼，二者構(gòu)成核衣殼，病毒包膜和其他輔助結(jié)構(gòu)?；瘜W(xué)組成：核心：主要為核酸，化學(xué)組成為DNA或RNA。衣殼：包繞在核心外面的一層蛋白質(zhì)，由許多蛋白質(zhì)亞單位（殼粒）組成。包膜：化學(xué)組成： 脂質(zhì)蛋白質(zhì)糖類。

答：單細胞真菌呈圓形或卵圓形。多細胞真菌

結(jié)構(gòu)：菌絲和孢子，菌絲：分為營養(yǎng)菌絲、氣中菌絲、生殖菌絲；孢子：是真菌的繁殖體。結(jié)構(gòu)：細胞壁外成分；細胞壁；隔膜；其他結(jié)構(gòu)。

25：真菌培養(yǎng)特性。答：最常用的培養(yǎng):沙保弱培養(yǎng)基。溫度:多數(shù)都在22 ~ 28oC，但深部感染真菌最適溫度為37oC，pH4.0 ~ 6.0病原菌通常生長緩慢，1~4周。

26：真菌繁殖方式。答：①無性生殖：①由菌絲斷裂形成新個體②細胞直接分裂產(chǎn)生子細胞③產(chǎn)生芽生孢子④產(chǎn)生孢子囊孢子和分生孢子②有性生殖：指經(jīng)過兩性細胞配合產(chǎn)生新個體的繁殖方式。

27：真菌抵抗力答：①對干燥、陽光、紫外線及常用消毒劑有強抵抗力②不耐熱，菌絲與孢子60℃ 1小時均可殺死③2﹪石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞、2.5%碘酊敏感④抗真菌藥物：菌集團。

純培養(yǎng)基：挑取一個菌落，移種到另一培養(yǎng)基中，生長出來的細菌均為純種。

毒性噬菌體：在宿主菌細胞內(nèi)噬菌體增殖產(chǎn)生子代噬菌體，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。溫和噬菌體：噬菌體基因與宿主菌染色體整合，成為前噬菌體，噬菌體DNA能隨細菌DNA復(fù)制而復(fù)制，并隨細菌的分裂而傳到子代細菌的基因組中，變成溶原性細菌，形成溶原性周期。前噬菌體：整合在細菌染色體上的噬菌體基因。轉(zhuǎn)座子：細菌基因組中的一段DNA序列，可以在染色體、質(zhì)粒或噬菌體之間自行移動的遺傳成分，伴隨轉(zhuǎn)座子的移動，會出現(xiàn)插入突變?；蜣D(zhuǎn)移：遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入受體菌的過程為基因轉(zhuǎn)移。

重組：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組，重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。轉(zhuǎn)化：細菌通過性菌毛相互連接溝通，將質(zhì)粒或染色體等遺傳物質(zhì)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌的過程。

接合：是受體菌直接攝取供體菌DNA片段，從而獲得新的遺傳性狀的過程。

轉(zhuǎn)導(dǎo)：以噬菌體為載體將供菌的DNA片段轉(zhuǎn)移到受菌體內(nèi)使受菌獲得供菌的部分遺傳性狀。溶原性轉(zhuǎn)換：某些前噬菌體可導(dǎo)致細菌基因型和性狀發(fā)生改變，例如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素的機理，溫和噬菌體感染細菌時，其基因可整合于宿主菌染色體中，使宿主菌獲得噬菌體基因賦予的新的性狀，稱溶原性轉(zhuǎn)換。原生質(zhì)體融合：將兩種不同的細菌經(jīng)溶菌酶或青霉素等處理，失去細胞壁成為原生質(zhì)體后進行融合的過程。融合后的染色體之間發(fā)生重組。病毒的自我復(fù)制：以病毒核酸為模板，經(jīng)過復(fù)雜的生化過程，復(fù)制子代病毒的核酸并通過轉(zhuǎn)錄翻譯產(chǎn)生病毒蛋白質(zhì)，裝配成熟后釋放到細胞外，這種增殖方式稱為病毒的自我復(fù)制。頓挫感染：被病毒侵入的細胞如不能為病毒增殖提供必需成分，則病毒不能合成本身成分，或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細胞與容納細胞

缺陷病毒：病毒基因組不完整或某一基因位點改變，不能正常增殖，不能復(fù)制出完整有感染性的病毒顆粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒?完成復(fù)制

干擾現(xiàn)象：當兩種病毒感染同一宿主細胞時，發(fā)生一種病毒的增殖抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象。某些病毒感染細胞時不出現(xiàn)CPE或其他易于測出的變化（如HAd），但能干擾其后感染的另一病毒的增殖，從而阻抑后者所特有的CPE 芽孢：某些細菌在一定環(huán)境條件下，胞質(zhì)脫水濃縮，在菌體內(nèi)部形成的一個圓形或卵圓形小體。

正常菌群：正常人的體表和與外界相通的眼結(jié)膜，口腔、鼻腔、腸道、泌尿生殖道等腔道粘膜中的不同種類和數(shù)量及對人體無害而有益的微生物。正常微生物群通稱為正常菌群

細菌群體：細菌附著在有生命或無生命的材料表面后，由細菌及其所分泌的胞外多聚物共同組成的呈膜狀的細菌群體。機會性感染：由正常菌群在機體免疫功能低下、寄居部位改變、菌群失調(diào)等特定條件下引起的感染。

毒力：致病性的強弱程度。

侵襲素：某些細菌的基因編碼一些具有侵襲功能的蛋白多肽，促進該病原菌向鄰近組織擴散甚至介導(dǎo)進入鄰近黏膜上皮細胞內(nèi)。

包涵體：細胞漿或細胞核內(nèi)出現(xiàn)光鏡下可見的斑塊狀結(jié)構(gòu)

G+ 菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,五肽交聯(lián)橋,三維立體②磷壁酸:重要表面抗原，與粘附致病有關(guān)，加強穩(wěn)定細胞壁G－菌:①肽聚糖：聚糖骨架,四肽側(cè)鏈組成二維結(jié)構(gòu), ②外膜（脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成）功能:屏障結(jié)構(gòu)LPS是G－菌的內(nèi)毒素。細胞壁結(jié)構(gòu)異同:G+菌/G－菌--強度:較堅韌/較疏松--厚度:厚20-80nm/薄10-15nm--肽聚糖層數(shù):多可達50層/少，1-2層--肽聚糖結(jié)構(gòu):聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,五肽交聯(lián)橋,三維立體/聚糖骨架,四肽側(cè)鏈,二維平面--脂類含量/少/多--磷壁酸:有/無--外膜:無/有,由脂蛋白、脂質(zhì)雙層、脂多糖組成3：細菌L型，特殊結(jié)構(gòu)種類、化學(xué)組成、抗原性及意義？答：定義：細菌細胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受理化或生物因素直接破壞或合成被抑制，這種細胞壁受損的細菌在高滲環(huán)境下仍可存活，稱細菌細胞壁缺陷型或L型。種類：G+菌細胞壁缺失后，僅有胞膜，稱原生質(zhì)體，G--菌肽聚糖層受損，尚有外膜，稱原生質(zhì)球。抗原性及意義：高度多形性，大小不一；大多染成G－；高滲低瓊脂含血清培養(yǎng)基—油煎蛋樣菌落；去除誘因后，有些可回復(fù)為原菌；某些L型仍有致病性,引起慢性感染。作用于胞壁的抗菌性藥對L型感染治療無效

4：細菌的特殊結(jié)構(gòu)？答：①莢膜：多糖或多肽的多聚體。功能a抗吞噬b黏附作用c抗有害物質(zhì)的損傷d有抗原性，用于細菌的鑒定和分型②鞭毛：蛋白質(zhì)，由基礎(chǔ)小體絲狀體鉤狀體組成，高度抗原性。功能a是細菌的運動器官b某些細菌的鞭毛與致病性有關(guān)c根據(jù)鞭毛的動力和鞭毛的抗原性可用以細菌的鑒別和分類③菌毛：由亞單位菌毛蛋白構(gòu)成。功能a黏附作用b傳遞遺傳物質(zhì)④芽孢：生產(chǎn)芽孢的細菌都是革陽菌。功能：a增強抵抗力b不直接致病c鑒定。

5：細菌的遺傳物質(zhì)？答：細菌染色體，質(zhì)粒，噬菌體：

6：基因轉(zhuǎn)移與重組方式的種類及定義？答：定義：基因轉(zhuǎn)移：遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入受體菌的過程為基因轉(zhuǎn)移。重組：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起稱為重組，重組使受體菌獲得供體菌的某些性狀。分類：轉(zhuǎn)化,接合,轉(zhuǎn)導(dǎo),融合,轉(zhuǎn)換.【表格】類型：基因來源/轉(zhuǎn)移方式--轉(zhuǎn)化：供菌游離的DNA片段/直接攝入--接合：供菌質(zhì)粒DNA/ 性菌毛--轉(zhuǎn)導(dǎo)：供菌任意DNA或噬菌體與供菌特定DNA/噬菌體--融合：兩菌原生質(zhì)體的DNA/融合--轉(zhuǎn)換：溫和噬菌體/吸附穿入

7：噬菌體及其相關(guān)概念。答：1）毒性噬菌體：在宿主菌細胞內(nèi)噬菌體增殖產(chǎn)生子代噬菌體，宿主菌被裂解，形成溶菌性周期。2）溫和噬菌體：噬菌體基因與宿主菌染色體整合，成為前噬菌體，噬菌體DNA能隨細菌DNA復(fù)制而復(fù)制，并隨細菌的分裂而傳到子代細菌的基因組中，變成溶原性細菌，形成溶原性周期。

8：細菌生長繁殖的條件？答:營養(yǎng)物質(zhì)/酸堿度 多數(shù)病原菌最適pH為7.2~7.6/溫度 多數(shù)病原菌生長最適溫度為37℃/氣體 據(jù)代謝時對分子氧的需要與否，專性需氧菌、微需氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌/滲透壓。

9：細菌群體的生長繁殖？答：生長曲線：一定數(shù)量的細菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中，連續(xù)定時取樣測定活菌數(shù)量，以培養(yǎng)時間為橫坐標，以活菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標作圖，得到的一條曲線。遲緩期：適應(yīng)階段。對數(shù)期：對抗生素敏感，細菌鑒定選此期。穩(wěn)定期：代謝產(chǎn)物形成（如外毒素、抗生素、芽胞等）。衰亡期：菌體細胞呈現(xiàn)多種形態(tài)。

10：按細菌對氧需要的分類？答：據(jù)代謝時對分子氧的需要與否，專性需氧菌、微需氧菌、14：雙鏈DNA病毒的復(fù)制周期？答：vDNA（RNA聚合酶）→早期mRNA（翻譯）→早期蛋白（酶）→ vDNA（酶）子代DNA →? mRNA?→結(jié)構(gòu)蛋白.→子代DNA+結(jié)構(gòu)蛋白→子代病毒。簡要過程：吸附，穿入，脫殼，生物合成，組裝、成熟與釋放。

15：頓挫病毒，缺陷病毒的概念？答：頓挫病毒：被病毒侵入的細胞如不能為病毒增殖提供必需成分，則病毒不能合成本身成分，或能合成但不能組裝和釋出有感染性的病毒顆粒。非容納細胞與容納細胞。缺陷病毒：病毒基因組不完整或某一基因位點改變，不能正常增殖，不能復(fù)制出完整有感染性的病毒顆粒，此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+輔助病毒=完成復(fù)制 16：細菌的感染與致病。答：感染：在一定條件下，微生物與機體相互作用并導(dǎo)致機體產(chǎn)生不同程度的病理過程?！?/p>

17：細菌的毒力比較，外毒素與內(nèi)毒素生物學(xué)特性。答：【表格】種類：內(nèi)毒素★外毒素。來源：G-菌★G+菌部分G-菌。編碼基因：染色體基因★質(zhì)?；蚯笆删w或染色體基因。存在部位：細胞壁成分、細菌裂解后釋出★活菌分泌或細菌溶解后散出?；瘜W(xué)成分：脂多糖★蛋白質(zhì)。穩(wěn)定性：好(160℃2~4h才破壞）★差（60~80 ℃30m可破壞）。毒性作用：弱、各種內(nèi)毒素作用大致相同★強、對機體組織器官有選擇性?？乖裕喝?，甲醛處理后不能形成類毒素★強，能刺激機體形成抗毒素，經(jīng)甲醛脫毒后能形成類毒素。

18：細菌感染的類型答：①不感染②隱性感染③潛伏感染④顯性感染：急慢性感染；局部、全身感染⑤帶菌狀態(tài)。

19：病毒感染類型。答：①隱性感染②顯性感染：急性病毒感染：潛伏期短，發(fā)病急，數(shù)日或數(shù)周回復(fù)，病原消滅型感染。持續(xù)性病毒感染：慢性病毒感染；潛伏性病毒感染；慢發(fā)病毒感染。

20：細菌的致病機制。答：細菌的致病性強弱取決于毒力，細菌的毒力因子：①侵襲力：致病菌突破宿主生理屏障，進入機體并在體內(nèi)定植、繁殖和擴散的能力包括黏附素、莢膜和微莢膜、侵襲性物質(zhì)②毒素：細菌產(chǎn)生的損傷宿主引起生理功能紊亂的毒性物質(zhì)，包括內(nèi)毒素和外毒素。

21：正常菌群的生理作用。答：①生物拮抗：競爭粘附（占位性保護）作用；產(chǎn)生有害代謝物質(zhì)；營養(yǎng)競爭②營養(yǎng)作用③免疫作用④抑癌作用⑤抗衰老作用。

22：病毒分離鑒定方法及病毒在培養(yǎng)細胞中的增殖的指標。答：病毒的分離：①動物接種②雞胚培養(yǎng)；流感病毒初次分離接種于羊膜腔；流感病毒的再培養(yǎng)接種于尿囊腔③組織培養(yǎng)④細胞培養(yǎng) — 病毒分離鑒定中最常用的方法單層細胞培養(yǎng)；原代細胞培養(yǎng)；二倍體細胞培養(yǎng)；傳代細胞培養(yǎng)。指標：1）細胞的變化①細胞病變效應(yīng)：有些病毒在細胞內(nèi)增殖時引起的特有的細胞病變，如細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落②多核巨細胞形成：有些病毒如麻疹病毒、巨細胞病毒等作用于細胞膜，使鄰近的細胞融合，形成多核巨細胞③胞質(zhì)或核內(nèi)包涵體的形成狂犬病病毒、巨細胞病毒。2）紅細胞吸附流感病毒等感染細胞后，由于細胞膜上出現(xiàn)了血凝素，具有吸附脊椎動物紅細胞的能力，這一現(xiàn)象稱為紅細胞吸附。常用來鑒定具有血凝素的黏病毒或副黏病毒的增殖3）.紅細胞凝集檢測含血凝素病毒的方法4）干擾現(xiàn)象5）空斑形成試驗。

23：病毒成份的檢測（抗原、核酸檢測）答：1.病毒抗原的檢測2.病毒核酸的檢測

24：真菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)（單細胞和多細胞真菌）。

灰黃霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑；對抗生素不敏感。

28：抗菌藥物的種類與作用機制。答：殺菌藥和抑菌藥。機制：①抑制細菌細胞壁的合成②抑制細菌

細胞膜功③抑制細菌蛋白質(zhì)合成④抑制細菌核酸合成。29：細菌耐藥的機制。答：產(chǎn)生鈍化酶；細胞通透性的改變；靶位結(jié)構(gòu)的改變；建立代謝旁路；代謝酶分子的改變

30：醫(yī)院感染的定義。答：由醫(yī)院的病原生物或其毒素導(dǎo)致的局部或全身感染性疾病。

31：細菌分離培養(yǎng)和鑒定、生化試驗、血清學(xué)試驗？答：細菌分離培養(yǎng)和鑒定：原則上應(yīng)對所有送檢標本做分離培養(yǎng)，以便獲得單個菌落后進行純培養(yǎng)，從而對細菌做進一步的生物學(xué)、免疫學(xué)、致病性或細菌的藥物敏感性等方面的檢查，最終獲得確切的報告。生化試驗：得到細菌的純培養(yǎng)物后，用糖發(fā)酵試驗，吲哚試驗，硝酸鹽還原實驗等對細菌的酶系統(tǒng)和其代謝產(chǎn)物的檢查，是鑒別細菌的重要方法之一。血清學(xué)實驗：利用含已知的特異性抗體的免疫血清，對細菌進行群和型的鑒別。

微生物種類名稱★生物學(xué)性狀★致病物質(zhì)、致病機理及所致疾病

破傷風(fēng)梭菌：菌體細長，芽胞正圓比菌體粗，位于菌體頂端菌體鼓槌狀★不發(fā)酵糖類，不分解蛋白質(zhì)。條件：局部傷口需形成厭氧微環(huán)境，傷口窄而深，有泥土或異物污染，大面積創(chuàng)傷，壞死組織多，局部組織缺血，同時有需氧菌或兼性厭氧菌混合感染的傷口。防治原則：特異性預(yù)防：注射破傷風(fēng)類毒素主動免疫；迅速對傷口清創(chuàng)擴創(chuàng)，防止形成厭氧微環(huán)境；緊急預(yù)防：TAT（精制破傷風(fēng)抗毒素）；治療： 早期足量使用TAT，抗生素。產(chǎn)氣莢膜梭菌：G+粗大桿菌，芽胞位于次極端，橢圓形，直徑小于菌體形成明顯莢膜★血平板：雙層溶血環(huán)，代謝十分活躍，牛奶培養(yǎng)基：“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象。增加血管通透性，組織壞死，氣性壞疽，食物中毒，壞死性腸炎。

肉毒梭菌：G+粗短桿菌，芽胞位于次極端，橢圓形，菌體呈網(wǎng)球拍狀，嚴格厭氧，分型多，生化反應(yīng)復(fù)雜★肉毒毒素，抑制乙酰膽堿釋放，引起運動神經(jīng)末梢失調(diào)→肌肉麻痹；食物中毒，嬰兒肉毒中毒。

支原體：菌落油煎蛋型，高度多形態(tài)型，細胞膜含高度固醇，無細胞壁，對青霉素有抵抗作用★支原體肺炎，病變?yōu)殚g質(zhì)性肺炎，可合并支氣管肺炎。稱為原發(fā)性非典型性肺炎。不規(guī)則發(fā)熱，刺激性咳嗽，頭痛。嬰幼兒病情嚴重，發(fā)病急，病程長，以呼吸困難為主。有些合并其他系統(tǒng)病變，如循環(huán)系統(tǒng)等。飛沫傳播。立克次體：是一類體積微小，絕大多數(shù)為自身代謝不完善，嚴格細胞內(nèi)寄生的原核細胞型微生物★流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、恙蟲病、Q熱

衣原體：嚴格細胞內(nèi)寄生，有獨特發(fā)育周期，能通過細菌濾器，原核細胞型微生物★ 沙眼:感染眼結(jié)膜上皮細胞→增殖，包涵體→局部炎癥→早期流淚、有粘液膿性分泌物、結(jié)膜充血及濾泡增生→后期結(jié)膜瘢痕、眼瞼內(nèi)翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜損害→影響視力或致盲包涵體結(jié)膜炎、泌尿生殖道感染、沙眼衣原體肺炎、性病淋巴肉芽腫

螺旋體：是一類細長、柔軟、彎曲、運動活潑的原核細胞型微生物基本結(jié)構(gòu)及生物學(xué)形狀與細菌相似★梅毒，人是唯一傳染源，致病物質(zhì)為莢膜樣物質(zhì)，透明質(zhì)酸酶；后天通過性接觸傳播或者先天經(jīng)過母體傳播。

第四篇：微生物總結(jié)

第一章、緒論

巴斯得的貢獻：

1、徹底否定了“自生說”

2、免疫學(xué)—預(yù)防接種

3、證實發(fā)酵是由微生物引起的3、巴斯德消毒法

柯赫貢獻：

1、證實炭疽病菌是炭疽病的病原菌

2、發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌

3、提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的病原菌——柯赫原則

4、固體培養(yǎng)基分離純化微生物的技術(shù)

5、配制培養(yǎng)基

微生物的5大共性：

1、體積小、面積大

2、吸收多、轉(zhuǎn)化快

3生長旺、繁殖快

4、分布廣、種類多

5、適應(yīng)性強、易變異 第二章、微生物的純培養(yǎng)和顯微技術(shù)

一、涂布平板法作用：用于純種分離、篩選菌落、得到單菌落，對一些細菌進行計數(shù) 五區(qū)劃線發(fā)作用：純化菌種、得到單菌落

搖瓶實驗作用：菌種篩選、發(fā)酵實驗、種子培養(yǎng)等 穿刺法的作用：保藏厭氧菌種、研究微生物的動力 之字劃線法的作用：保藏菌種、單菌落的獲取

二、斜面菌種保藏法：保藏期限3個月以內(nèi)，沙土管保藏法：保藏期限1~10年主要適用于產(chǎn)孢子的，如芽孢桿菌、放線菌 石蠟油封藏法：保藏期限1~2年

真空冷凍干燥法：保藏期限5~10年，液氮超低溫病結(jié)法：保藏期限5~10年 第三章

一、細胞壁：根據(jù)細胞壁將原核生物分為革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌兩種。

1、革蘭氏陽性菌細胞壁的特點：厚度大（20~80nm）和化學(xué)組分簡單，一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。

革蘭氏陽性菌的機械阻攔與保護作用有肽聚糖完成。磷壁酸：是結(jié)合在革蘭氏陽性菌細胞壁上的一種酸性多糖，主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。

磷壁酸為革蘭氏陽性菌所特有。對于革蘭氏陽性菌而言，抗原性由磷壁酸完成。磷壁酸的主要生理功能：1）、其磷酸分子上較多的負電荷可提高細胞周圍鎂離子的濃度進入細胞后就可以保證細胞膜上一些需鎂離子的合成提高活性 2）儲藏磷元素 3）、增強某些致病菌如A族鏈球菌對宿主細胞的黏連、避免被白細胞吞噬以及補抗體的作用 4）賦予革蘭氏陽性菌以特異的表面抗原 5）可作為噬菌體的特異性吸附受體

6）調(diào)節(jié)細胞自溶素的活力，借以防止細胞自溶而死亡

2、革蘭氏陰性菌：由肽聚糖和外膜組成，外膜中的脂多糖是革蘭氏陰性菌所特有的 外壁層可分為3層：外層為脂多糖層，中層為磷脂層，內(nèi)層為脂蛋白 革蘭氏陰性菌外膜的作用：1）控制細胞透性

2）提高鎂離子濃度 3）決定細胞的抗原性

4）類脂A是類毒素的主要成分

脂多糖：是位于革蘭氏陰性菌細胞壁最外層的一層較厚的類脂多糖物質(zhì)，由類脂A、核心多糖和O-特異側(cè)鏈

脂多糖的功能：1）其中類脂A是革蘭氏陰性菌致病物質(zhì)——內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ) 2）因其負電荷較強，有吸附鎂離子、鈣離子等陽離子以提高其在細胞表面的濃度作用 3)由于LPS結(jié)構(gòu)多變，決定了革蘭氏陰性菌細胞表面抗原決定族 4）是許多噬菌體在在細胞表面的吸附受體 5）具有控制某些物質(zhì)進出細胞的部分選擇性屏障功能

3、革蘭氏染色機制：通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細胞膜內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚，肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密，故與乙醇與丙酮作脫色處理時因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會溶出縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其任呈紫色。反之革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層的類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差，遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物的溶出，因此，通過乙醇脫色后細胞退成無色。這時，再經(jīng)沙黃等紅色染料進行復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈現(xiàn)紅色，而革蘭氏陽性則保留紫色。

二、芽孢

芽孢：某些細胞在生長發(fā)育后期，在細胞內(nèi)形成一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強的休眠體

芽孢的特點：1）芽孢內(nèi)新陳代謝幾乎停止，處于休眠狀態(tài)，但保持潛在萌發(fā)力

2）芽孢不具生殖能力，僅只是一種休眠體 3）抗逆性最強的生命體之一，有抗熱、抗化學(xué)藥物、抗輻射和抗靜水壓能力 4）含水量低，壁厚而致密，通透性差，不易著色，折光性強

5）一個孢子萌發(fā)只產(chǎn)生一個營養(yǎng)狀態(tài)的細胞 芽孢的耐熱機制：芽孢的耐熱性在于芽孢衣對多價陽離子和水分的透性很差和皮層的離子強度很高，從而是皮層產(chǎn)生極高的滲透壓去奪取芽孢核心中的水分，其結(jié)果造成皮層的充分膨脹，而核心部分的細胞質(zhì)卻變得高度失水，因此，導(dǎo)致核心具極強的耐熱性。第四章微生物的營養(yǎng)要求

一、營養(yǎng)物質(zhì)：能夠滿足微生物機體生長、繁殖和完成各種生理條件所需的物質(zhì) 營養(yǎng)：微生物獲得U和利用營養(yǎng)物質(zhì)的過程

二、1、碳源：是在微生物生長過程中為微生物提供碳素來源的物質(zhì)。為微生物提供碳元素與能量

2、氮源：為微生物提供氮元素來源，只有少數(shù)自養(yǎng)微生物能利用銨鹽、硝酸鹽同時作為氮源與能源（是構(gòu)成細胞中核酸和蛋白質(zhì)的重要元素）氮源的類型：無機氮、有機氮、氣體氮

3、無機鹽：作用：作為酶活性中心的組成部分、維持生物大分子和細胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、調(diào)節(jié)并維持細胞的滲透壓、控制細胞的氧化還原電位和作為某些微生物生長的能源物質(zhì)。

4、生長因子：通常是指那些微生物生長所必需的的且需量很少，但微生物自身不能合成或合成量不足以滿足機體生長需要的有機化合物

5、水：生理功能：1)起到溶劑與運輸介質(zhì)的作用

2）參與細胞內(nèi)一系列的化學(xué)反應(yīng)

3）維持蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子穩(wěn)定的天然構(gòu)象

4）是良好的導(dǎo)熱體，調(diào)節(jié)細胞溫度 微生物的營養(yǎng)類型分類（P84表格）

三、1、培養(yǎng)基的配制原則：1）目標明確

2）營養(yǎng)協(xié)調(diào)

3）物理化學(xué)條件適宜

4）原料來源的選擇

2、C多有助于次生物質(zhì)分泌，N多有助于個體生長發(fā)育

3、PH：細菌：7.0~8.0

酵母菌：4.0~6.0

放線菌：8.0~9.0

霉菌：4.0~5.8

4、維持培養(yǎng)基PH的方法：1）加緩沖劑一氫和二氫磷酸鹽的混合物

2）備用堿：CaCO3、CaHCO3 3）弱酸鹽：檸檬酸鹽、乳酸鹽

4）液氨或鹽酸

5、原料來源：1）經(jīng)濟節(jié)約原則：以粗代精、以廢代好、以簡代繁

2）原料來源要廣泛

3）原料藥易處理、處理成本要低

4）原料處理后廢物、廢液、廢氣要少

6、選擇和配制培養(yǎng)基的方法四種：生態(tài)模擬、查閱文獻、精心設(shè)計、實驗比較

四、培養(yǎng)基的分類

1、按成分不同劃分：天然培養(yǎng)基：優(yōu)點為取材方便，營養(yǎng)豐富，種了多樣，配制方便合成培養(yǎng)基：優(yōu)點：組分精確，重復(fù)性好確定：較昂貴，一般用于研究

2、根據(jù)物料狀態(tài)劃分：固體培養(yǎng)基：一般用于進行微生物的分離、鑒定、活菌計數(shù)及菌種保藏半固體培養(yǎng)基：用于觀察微生物的運動特征、分類鑒定及噬菌體效價滴定液體培養(yǎng)基：用于大量培養(yǎng)微生物，研究生理代謝

3、按用途劃分：基礎(chǔ)培養(yǎng)基：用于培養(yǎng)野生型微生物和原養(yǎng)型微生物 加富培養(yǎng)基（營養(yǎng)培養(yǎng)基）：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)制成的一類營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基作用一般為分離某種微生物而專門設(shè)計或培養(yǎng)營養(yǎng)要求嚴謹?shù)漠悩游⑸?鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)可中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì) 選擇培養(yǎng)基：根據(jù)不同種類微生物的特殊營養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需要微生物的生長，有利于所需微生物的生長 第五章、微生物代謝

微生物發(fā)酵過程的三個階段：脫氫（電子）、遞氫（或電子）和受氫（或電子）發(fā)酵：是指微生物細胞將有機物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某些中間產(chǎn)物，同時釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物

代謝：生命存在的基本特征，是微生物體內(nèi)所進行的全部生化反應(yīng)的總稱。主要由分解代謝和合成代謝兩個過程組成。分解代謝：是指將大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì)，并在這個過程中產(chǎn)生能量（都是氧化反應(yīng)）合成代謝：是指細胞利用簡單的小分子物質(zhì)合成復(fù)雜大分子，在這個過程要消耗能量（都是還原反應(yīng)）

代謝途徑都是有一系列連續(xù)的酶促反應(yīng)構(gòu)成的

P102~P105EMP HM ED途徑的特點功能以及途徑路線

根據(jù)氧化還原反應(yīng)電子受體的不同可將發(fā)酵和呼吸分為有氧和無氧呼吸兩種 P108 TCA途徑圖

TCA循環(huán)特點：1）氧雖然不直接參與其中反應(yīng)，但必需在有氧條件下運行

2）每個丙酮酸產(chǎn)生15個ATP 3）位于一切分解代謝與合成代謝的樞紐地位，可為生物合成提供各種碳價原料

TCA的生理意義：1）為細胞提供能量

2）各種能源物質(zhì)徹底氧化的共同代謝途徑（對于微生物來說）3）物質(zhì)轉(zhuǎn)化樞紐

無氧呼吸：電子受體不是氧氣而是外源無機物與部分簡單小分子有機物

發(fā)酵作用：沒有外源電子受體，底物具有的能量只釋放一小部分，合成少量ATP 三種磷酸化：底物水平磷酸化，高能磷酸化，氧化磷酸化

光合磷酸化的特點：1）光驅(qū)使下電子自菌綠素上逐出后經(jīng)類似呼吸鏈又回到菌綠素

2）產(chǎn)還原力[H]和產(chǎn)ATP分別進行，還原力來自于H2O等無機物

3）不產(chǎn)生氧氣 合成代謝：微生物利用能量代謝所產(chǎn)生的能量、中間代謝產(chǎn)物以及從外界吸收的小分子合成復(fù)雜細胞物質(zhì)的過程

P118~P119 CO2固定路線圖

藍細菌孤單的抗氧化保護機制：1）分化出特殊的還原性異形胞

2）非異形胞藍細菌固氮酶的保護將固氮與光合進行時間上分隔

微生物固氮反應(yīng)6要素：1）ATP的供應(yīng)

2)還原力[H]及傳遞氫載體

3）固氮酶

4）還原底物——氮氣

5）鎂離子

6）嚴格厭氧微環(huán)境

聯(lián)合固氮菌：指必需生活在植物根莖葉，動物腸道等處才能進行固氮的微生物，不形成類似根瘤的共生結(jié)構(gòu) 微生物的代謝調(diào)節(jié)主要有兩種類型：一是酶活性的調(diào)節(jié)，即調(diào)節(jié)已經(jīng)存在的酶分子的活性，是酶在化學(xué)水平的變化。另一類是酶合成的調(diào)節(jié)，即調(diào)節(jié)酶分子的合成量，是遺傳水平發(fā)生的變化 第六章

一、生長曲線延滯期

特點：1）生長速率常數(shù)為零，細胞數(shù)目不增加或增加很小

2）細胞形態(tài)變大或 增長許多桿菌可長成絲狀

3）合成代謝十分活躍，核糖體、酶類和ATP 的合成加速產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶

4）對外界不良條件如NaCl溶液，溫度和抗 生素等理化因素反應(yīng)敏感

出現(xiàn)原因：1）微生物接種到一個新的環(huán)境，暫缺乏足夠的能量和必需的生長因子

2）“種子”老化即處于未對數(shù)期或種子未活化

3）接種時損傷

影響其長短的因素與實踐意義：1）接種齡：對數(shù)期種子延滯期短，延滯期或衰亡期的種子延滯期較長

2）接種量：接種量大，延滯期較短，接種量小，延滯期較長

3）培養(yǎng)基成分：培養(yǎng)基成分豐富的延滯期較短，培養(yǎng)基成分與種子培養(yǎng)基一致的延滯期較短

二、生長曲線指數(shù)期

特點：1）生長速率最快，細胞呈指數(shù)增長

2）生長速率恒定

3）代謝旺盛，細胞組分平衡發(fā)展

4）群體的生理特性一致

影響指數(shù)期的意義：1）菌種：不同菌種代時差異極大

2）營養(yǎng)成分：營養(yǎng)越豐富代時越短

3）營養(yǎng)物濃度：影響微生物的生長速率和生長總量

4）培養(yǎng)溫度：影響微生物的生長速率和生長總量

指數(shù)期的實踐意義：1）是代謝、生理研究的良好材料

2)是增殖噬菌體的最適宿主菌齡

4）革蘭氏染色是采用此期微生物

生長曲線穩(wěn)定期特點：1）活細胞總數(shù)維持不變即新增殖的細胞數(shù)與衰亡的細胞數(shù)相等，菌體總數(shù)達到最高點

2）細胞生長速率為零

3）細胞生理上處于衰老，代謝活力鈍化，細胞成分合成緩慢，革蘭氏染色發(fā)生變化

三、生長曲線衰亡期

特點：細胞以指數(shù)速率死亡，有時細胞速率的降低是由于抗性細胞的積累，細胞變形退化，有的發(fā)生自溶，革蘭氏染色發(fā)生變化

影響衰亡期的因素及實踐意義：1）與菌種的遺傳特性有關(guān)：有些細菌的培養(yǎng)經(jīng)歷所有的各個生長時期，幾天以后死亡，有細菌培養(yǎng)基個月乃至幾年以后任然有一些貨細胞

2）與是否產(chǎn)芽孢有關(guān)：產(chǎn)芽孢的細菌更易幸存下來

3）與營養(yǎng)物質(zhì)和有毒物質(zhì)有關(guān)：補充營養(yǎng)和能源，以及中和環(huán)境毒性，可以減緩死亡細胞的死亡速率，延長細菌培養(yǎng)物的存貨時間

四、分批培養(yǎng)：是指將微生物置于一定容積的的培養(yǎng)基中，經(jīng)過生長培養(yǎng)，最后一次收獲培養(yǎng)方式 連續(xù)培養(yǎng)：在一個恒定容積的的流動系統(tǒng)中培養(yǎng)微生物，一方面以一定速率加入新的培養(yǎng)基，另一方面又以相同的速率流出培養(yǎng)物（菌體和代謝產(chǎn)物）

連續(xù)發(fā)酵的優(yōu)點：1）高效

2）產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定

3）節(jié)約了大量動力、人力、水和蒸汽，且使水、汽、電的負荷均衡合理

連續(xù)發(fā)酵的缺點：1）菌種易退化

2）易污染雜菌 3）營養(yǎng)物質(zhì)的利用率一般 同步生長：就是指在培養(yǎng)物中所有微生物細胞都同一生長階段，并都能同時分裂的生長方式 同步培養(yǎng)法包括誘導(dǎo)法與選擇法

誘導(dǎo)法：是采用物理、化學(xué)一男子使微生物生長到某一階段而停下來，使所有細菌都達到這個階段時再使其生長 恒濁器：根據(jù)培養(yǎng)器內(nèi)微生物的生長密度并借光電控制系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液流速，以取得菌體密度高，生長速度恒定的微生物細胞的連續(xù)培養(yǎng)

恒化器：與恒濁器相反，是一種設(shè)法使培養(yǎng)液流速保持不變 最高生長速率條件下進行生長繁殖的一種連續(xù)培養(yǎng)裝置 裝置

控制對象

培養(yǎng)基

培養(yǎng)基流速

生長速率

產(chǎn)物

應(yīng)用范圍

恒濁器

菌體密度(內(nèi)控制)

無限制生長因子

不恒定

最高速率

大量菌體或與菌體平行的代謝產(chǎn)物

生產(chǎn)為主

恒化器

培養(yǎng)基流速（外控制）

有限制生長因子

恒定

低于最高速率

不同生長速率的菌體、并使微生物始終在低于其

實驗室為主

五、防腐：是在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下防止或抑制微生物生長的一種措施，它能防止食物腐敗或防止其他物質(zhì)霉變 消毒：利用某種殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有微生物的一種措施，它可以起到防止感染或傳播的作用

滅菌：利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物的一種措施 第七章

1、病毒的特點:1)形態(tài)及其微小，一般能通過細菌濾器必須自電鏡下才能觀察

2）沒有細胞構(gòu)造，主要成分僅為核酸與蛋白質(zhì)

3）每一種病毒致含有一種核酸

DNA和RNA 4）依靠自身的核酸進行復(fù)制，一病毒的核酸和蛋白質(zhì)等原件實現(xiàn)裝配，實現(xiàn)繁殖

5）嚴格細胞內(nèi)寄生，缺乏完整的酶和產(chǎn)能系統(tǒng)，只能利用宿主細胞的現(xiàn)成的代謝系統(tǒng)合成病毒自身的核酸和蛋白質(zhì)

6）在離體條件下，能以無生命力的大分子狀態(tài)存在，并可長期保持器侵染力

7）對一般抗生素不敏感，但對干擾素敏感

8）有些病毒的基因可以整合到宿主的基因中去

2、病毒與活細胞的區(qū)別：1）結(jié)構(gòu)簡單，沒有細胞結(jié)構(gòu)

2）幾乎所有的毒粒中只有DNA或RNA一種類型的核酸

3）在細胞外不能增殖

3、得到一步生長曲線的實驗：二院培養(yǎng)系統(tǒng)：1）低濃度病毒宿主細胞(給幾分鐘時間侵染)2）高倍稀釋病毒與細胞的培養(yǎng)物

3）保濕培養(yǎng)

4）不同時間取樣，涂布平板，得到效價

5）以時間為橫坐標，病毒濃度為縱坐標繪圖

4、烈性噬菌體：感染宿主后增殖裂解宿主 溶原性噬菌體（溫和性細菌）：感染后大多數(shù)可整合到宿主基因中少數(shù)以染色體外獨立存在

5、病毒分為真病毒和亞病毒，亞病毒又分為類病毒、衛(wèi)星病毒、衛(wèi)星RNA、朊病毒 類病毒：是一種只包含RNA的病毒，只在植物中出現(xiàn)，分質(zhì)量極小，不能編碼蛋白質(zhì) 衛(wèi)星病毒：寄生于與之無關(guān)的輔助病毒的基因產(chǎn)物的病毒 衛(wèi)星RNA：是指必需依賴一些輔助病毒進行復(fù)制的小分子單鏈RNA，他們被包藏在輔助病毒的殼體中

朊病毒：是一類能引起哺乳動物亞急性海綿樣腦病的病原因子 第八章

P204頁Griffith轉(zhuǎn)化實驗等3個實驗

基因組：是指位于細菌或細胞中的所有基因 大腸桿菌基因組的特點：1）遺傳信息的連續(xù)性

2）功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因組成操縱子結(jié)構(gòu)

3）結(jié)構(gòu)基因的單拷貝及rRNA基因的多拷貝

4）基因組重復(fù)序列少而短

質(zhì)粒：是一種獨立于染色體外，能進行自主復(fù)制的細胞質(zhì)遺傳因子，主要存在于各種微生物中

轉(zhuǎn)座子：是位于染色體或質(zhì)粒上的一種能改變自身位置的DNA序列，廣泛分布于原核和真核細胞中

質(zhì)粒的主要類型：致育因子、抗性因子、Col質(zhì)粒、毒性質(zhì)粒、代謝質(zhì)粒、隱秘質(zhì)粒

致育因子：又稱F質(zhì)粒，其大小約100kb，這是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象（結(jié)合作用）有關(guān)的質(zhì)粒

抗性因子：是另一類普遍而重要的質(zhì)粒，主要包括抗藥性和抗重金屬兩大類，簡稱R質(zhì)粒 Col質(zhì)粒：該質(zhì)粒含有編碼大腸菌素的基因，大腸菌素是一種細菌蛋白，只殺死近緣且不含Col質(zhì)粒的菌株，而宿主不受其產(chǎn)生的細菌素的影響

毒性質(zhì)粒：致病菌中攜帶的能引起致病性的質(zhì)粒，這些質(zhì)粒具有編碼毒素的基因 代謝質(zhì)粒：攜帶有能降解某些基質(zhì)的酶的基因的質(zhì)粒

隱秘質(zhì)粒：不顯示任何表型效應(yīng)，它們的存在只有通過物理方法檢測出來 原核生物中對的轉(zhuǎn)座因子有3種類型：插入順序（IS）、轉(zhuǎn)座子（Tn）、病毒（Mu）轉(zhuǎn)座的遺傳學(xué)效應(yīng)：插入突變、產(chǎn)生染色體畸變、基因的移動和重排

基因突變：一個基因內(nèi)部遺傳結(jié)構(gòu)或DNA序列的任何改變包括一對或幾對堿基的缺失、插入或置換，而導(dǎo)致的遺傳變化

堿基變化對遺傳信息改變的四種類型：同義突變，錯義突變，無義突變，移碼突變 同義突變：是指某個堿基的變化沒有改變產(chǎn)物氨基酸序列的密碼子變化

錯義突變：是指堿基序列的改變引起了產(chǎn)物氨基酸的改變（可能為致死突變）無義突變：是指某個堿基的改變，使代表某種氨基酸的密碼子變?yōu)榈鞍踪|(zhì)的合成的終止密碼子，蛋白質(zhì)的合成提前終止，產(chǎn)生短截的蛋白質(zhì)

移碼突變：由于DNA序列中發(fā)生1~2個核苷酸的缺失或插入，使翻譯的閱讀框發(fā)生改變，從而導(dǎo)致改變位置以后的氨基酸序列的完全變化（一般為致死突變）

表型變化的突變型：營養(yǎng)缺陷型，抗藥性突變型，條件致死突變型，形態(tài)突變型 營養(yǎng)缺陷型：缺乏合成其生存所必需的營養(yǎng)物的突變型，只有從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營養(yǎng)或前體物才能生長 影印平板P218 抗藥性突變型：是由于基因突變使菌株對某種或某幾種藥物，特別是抗生素產(chǎn)生抗性的一種突變型

條件致死突變型：是指在某一條件下具有致死效應(yīng)，而在另一條件下沒有致死效應(yīng)的突變型 形態(tài)突變型：是指造成形態(tài)改變的突變型（包括菌落形態(tài)、顏色一件噬菌斑形態(tài)）

自發(fā)突變的緣由：1）NDA復(fù)制過程產(chǎn)生的錯誤

2）堿基互變異構(gòu)體的相互轉(zhuǎn)變

3）轉(zhuǎn)座子的隨機插入基因

自發(fā)突變的特性：1）非對應(yīng)性

2）稀有性

3）規(guī)律性

4）獨立性

5）遺傳和回復(fù)

6）可誘變性

誘發(fā)突變：堿基類似物、插入染料、直接與DNA其化學(xué)反應(yīng)的誘變劑、輻射和熱、生物誘變因子

DNA損傷修復(fù)：光復(fù)活作用、切除修復(fù)、重組修復(fù)、SOS修復(fù) 光復(fù)活：由phr基因編碼的光解酶進行

切除修復(fù)：又稱暗修復(fù)，該修復(fù)系統(tǒng)除了堿基錯誤配對和單核苷酸插入不能修復(fù)外，幾乎其他DNA損傷均可修復(fù)，是細胞內(nèi)主要修復(fù)系統(tǒng)

重組修復(fù)：是一種越過損傷而進行的修復(fù)，這種修復(fù)不將損傷堿基除去

SOS修復(fù)：是DNA分子受到較大范圍的重大損傷時誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種應(yīng)急反應(yīng) P226~227 高頻重組菌等

轉(zhuǎn)導(dǎo)：是由病毒介導(dǎo)的細胞間進行遺傳交換的一種方式

供體DNA進入受體的命運：1）發(fā)生穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子

2）流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)：即不被降解，又不被整合，也不被復(fù)制

3）外源DNA被降解，轉(zhuǎn)導(dǎo)失敗

遺傳轉(zhuǎn)化：是指同源或異源的游離DNA分子被自然或人工感受態(tài)細胞攝取，并得到表達的水平方向的基因轉(zhuǎn)移過程

4個影響供體DNA與受體細胞間的最初相互作用：1）轉(zhuǎn)化片段的大小

2）形態(tài)：雙鏈DNA 3）濃度：在在臨界值出現(xiàn)之前成正比

4）生理狀態(tài)：感受器——剛停止DNA合成 微生物育種：誘變育種、代謝育種、體內(nèi)基因組育種 代謝育種：改變代謝途徑、擴展代謝途徑、構(gòu)建新的代謝途徑 體內(nèi)基因組育種：原生質(zhì)體融合，雜交育種

融合子的判別：1）親本遺傳標記的互補的2）親本滅活后性狀的恢復(fù)

3）具有雙親本的熒光標記 第九章

順式作用元件：位于基因的旁側(cè)，可以調(diào)控影響基因表達的核酸序列。其本身并不編碼蛋白質(zhì)

反式作用因子：通常為蛋白質(zhì)或RNA，其特征是可以合成并擴散到目標場所發(fā)揮作用 正調(diào)控：控制因子通過與啟動子原件結(jié)合來激活基因的表達 負調(diào)控：抑制物與操縱基因結(jié)合起來阻止基因表達 P248 操縱子的結(jié)構(gòu)

P249圖

P250 圖

啟動子：是RNA聚合酶和CAP的結(jié)合位點，控制著轉(zhuǎn)錄的起始，一個啟動子可以啟動多個基因的表達

操縱基因：DNA上的一個結(jié)合位點，阻抑物能與之結(jié)合抑制相鄰啟動子的起始轉(zhuǎn)錄，操縱基因不表達任何東西 終止子：控制轉(zhuǎn)錄結(jié)束

轉(zhuǎn)錄因子：轉(zhuǎn)錄起始過程中RNA聚合酶所需要的輔助因子

轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控:1）DNA的結(jié)構(gòu)

2）RNA聚合酶的功能

3）蛋白質(zhì)因子及其他小分子配基的相互作用

第五篇：微生物復(fù)習(xí)總結(jié)

11級食品質(zhì)量與安全班復(fù)習(xí)總結(jié)

一、名詞解釋：

莢膜芽胞細菌外膜Ames試驗溶原性噬菌體/溫和噬菌體毒性噬菌體

L-型細菌Vi抗原血漿凝固酶內(nèi)毒素卡介苗二相性真菌

肥達反應(yīng)外裴反應(yīng)抗-O試驗S9Ascoli熱沉淀反應(yīng)菌落總數(shù)

病毒病毒包膜

二、重點復(fù)習(xí)：

1、簡述食品衛(wèi)生細菌學(xué)樣品采樣的原則、種類及特點。

2、菌種保存的方法、特點及菌種保管的規(guī)章制度。防止菌種退化的主要措施有哪些？

3、細菌外毒素的特點。

4、大腸菌群的定義，食品中大腸菌群數(shù)是指什么？

5、致病性葡萄球菌有哪些重要特點？

6、簡述腸桿菌科細菌共同的生物學(xué)特性，如何初步區(qū)分腸道致病菌與非致病菌？

7、鑒定A群、B群鏈球菌的特征性生化試驗。

8、如何區(qū)別肺炎鏈球菌與草綠色鏈球菌？

9、小結(jié)KIA、MIU、O/F、枸櫞酸鹽利用試驗及SS、MaCC平板的指示劑.10、小結(jié)微生物學(xué)生化試驗中常用酸堿指示劑（如酚紅、甲基紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚

藍、中性紅）的顯色特點。

11、比較大腸埃希菌、沙門菌、志賀菌、變形桿菌在KIA、MIU上的表現(xiàn)及腸道選擇性培養(yǎng)

基（SS、麥康凱）上的菌落特點。

12、沙門菌細菌學(xué)檢查標本采集的原則。

13、變形桿菌的鑒定依據(jù)。

14、結(jié)腸炎耶爾森菌的重要特征。

15、如何對疑為霍亂的病人標本進行細菌學(xué)檢驗？

16、試述銅綠假單胞菌的主要生物學(xué)特性。

17、蠟樣芽胞桿菌的形態(tài)與培養(yǎng)特性、選擇性培養(yǎng)基，所致疾病。

18、軍團菌的形態(tài)與培養(yǎng)特性、培養(yǎng)基，所致疾病、傳播方式

19、肉毒桿菌的形態(tài)特征、肉毒外毒素的特點及致病機制、所致疾病、傳播方式。

20、試述炭疽桿菌的主要生物學(xué)性狀、致病物質(zhì)及所致疾病類型。

21、結(jié)核分枝桿菌的形態(tài)培養(yǎng)特點（培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、生長表現(xiàn)）及抵抗力。

22、試述Ames試驗的原理、試驗菌株、主要方法及結(jié)果判定。

23、細菌的分類標記有哪些？簡述細菌的分類方法及特點。

24、測定DNA堿基組成的方法及意義，判定同屬不同種及同一種內(nèi)不同菌株的標準分別是什

么？（注：同一個種內(nèi)的不同菌株的G+C mol %差別應(yīng)在4%～5%以下。同屬不同種的G+C mol %

差別應(yīng)在10%～15%以下，通常低于10%。）

25、常見的微生物突變類型有哪些？各有何特點？（營養(yǎng)缺陷型、抗藥性突變型、條件致

死突變型、形態(tài)突變型）

注：抗藥性突變型的特點是正選擇標記（即突變株可直接從抗性平板上獲得，在加有相

應(yīng)抗生素的平板上，只有抗性突變能生長。）

營養(yǎng)缺陷突變型的特點是在選擇培養(yǎng)基（一般為基本培養(yǎng)基）上不生長，即負選擇標記。

26、數(shù)值分類法與傳統(tǒng)方法的區(qū)別。

27、什么是真菌，病原性真菌的培養(yǎng)條件與細菌有何不同？